SA00200919B1 - عملية لقياس الفعالية الأنزيمية enzymatic activity بشكل سريع في عينة علف صلب - Google Patents
عملية لقياس الفعالية الأنزيمية enzymatic activity بشكل سريع في عينة علف صلب Download PDFInfo
- Publication number
- SA00200919B1 SA00200919B1 SA00200919A SA00200919A SA00200919B1 SA 00200919 B1 SA00200919 B1 SA 00200919B1 SA 00200919 A SA00200919 A SA 00200919A SA 00200919 A SA00200919 A SA 00200919A SA 00200919 B1 SA00200919 B1 SA 00200919B1
- Authority
- SA
- Saudi Arabia
- Prior art keywords
- enzyme
- container
- solid
- feed sample
- solid feed
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- 239000007787 solid Substances 0.000 title claims abstract description 14
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 title claims abstract description 12
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 26
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 26
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 9
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000006174 pH buffer Substances 0.000 claims abstract 2
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 9
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N formic acid Substances OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 5
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- 239000004280 Sodium formate Substances 0.000 claims description 4
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 4
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims description 4
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000019254 sodium formate Nutrition 0.000 claims description 4
- HLBBKKJFGFRGMU-UHFFFAOYSA-M sodium formate Chemical compound [Na+].[O-]C=O HLBBKKJFGFRGMU-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 4
- IVLXQGJVBGMLRR-UHFFFAOYSA-N 2-aminoacetic acid;hydron;chloride Chemical compound Cl.NCC(O)=O IVLXQGJVBGMLRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 3
- 229960002449 glycine Drugs 0.000 claims description 3
- 229960001269 glycine hydrochloride Drugs 0.000 claims description 3
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims description 3
- 239000011324 bead Substances 0.000 claims description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 2
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 claims description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 claims description 2
- BHZOKUMUHVTPBX-UHFFFAOYSA-M sodium acetic acid acetate Chemical class [Na+].CC(O)=O.CC([O-])=O BHZOKUMUHVTPBX-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims 1
- 101710121765 Endo-1,4-beta-xylanase Proteins 0.000 description 21
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 18
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 9
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 3
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 3
- KUIXZSYWBHSYCN-UHFFFAOYSA-L remazol brilliant blue r Chemical compound [Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C(N)=C2C(=O)C3=CC=CC=C3C(=O)C2=C1NC1=CC=CC(S(=O)(=O)CCOS([O-])(=O)=O)=C1 KUIXZSYWBHSYCN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 3
- 229920001221 xylan Polymers 0.000 description 3
- 150000004823 xylans Chemical class 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000209761 Avena Species 0.000 description 2
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N (2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(2r,4r,5r,6s)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,4r,5r,6s)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1[C@@H](CO)O[C@@H](OC2[C@H](O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N 0.000 description 1
- 239000001124 (E)-prop-1-ene-1,2,3-tricarboxylic acid Substances 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 1
- 101710130006 Beta-glucanase Proteins 0.000 description 1
- YCSMVPSDJIOXGN-UHFFFAOYSA-N CCCCCCCCCCCC[Na] Chemical compound CCCCCCCCCCCC[Na] YCSMVPSDJIOXGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 description 1
- SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N Dodecane Natural products CCCCCCCCCCCC SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710101933 Endo-1,4-beta-xylanase 6 Proteins 0.000 description 1
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 239000004141 Sodium laurylsulphate Substances 0.000 description 1
- 241001136494 Talaromyces funiculosus Species 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 235000004240 Triticum spelta Nutrition 0.000 description 1
- 229920002000 Xyloglucan Polymers 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 229940091181 aconitic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- GTZCVFVGUGFEME-IWQZZHSRSA-N cis-aconitic acid Chemical compound OC(=O)C\C(C(O)=O)=C\C(O)=O GTZCVFVGUGFEME-IWQZZHSRSA-N 0.000 description 1
- 235000019621 digestibility Nutrition 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000004459 forage Substances 0.000 description 1
- 238000005469 granulation Methods 0.000 description 1
- 230000003179 granulation Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920002994 synthetic fiber Polymers 0.000 description 1
- GTZCVFVGUGFEME-UHFFFAOYSA-N trans-aconitic acid Natural products OC(=O)CC(C(O)=O)=CC(O)=O GTZCVFVGUGFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Abstract
الملخص: يتعلق الاختراع بعملية لقياس الفعالية الأنزيمية enzymatic activity لعينة علف صلب solid feed sample حيث تضمن العملية ملامسة عينة العلف الصلب، مادة مفاعلة reagent للأنزيم الذي يرغب قياس فعاليته تشتمل على مادة أساس Substrate متخصصة بالأنزيم المرتبط بحامل لون Chromophore، ومحلول منظم لدرجة الحموضة buffer لإذابة الأنزيم، في وعاء Container مزود بفتحة مانعة للتسرب leak proof opening ونظام إغلاق closing System؛ رج الوعاء لتوزيع حامل اللون في المحلول السائل المنظم لدرجة الحموضة؛ ثم ملاحظة التلون coloration في الطور السائل liquid phase، حيث يكون التلون متناسبا مع فعالية الأنزيم الموجود في العينة.
Description
. عملية لقياس الفعالية الأنزيمية enzymatic activity بشكل سريع في عينة علف صلب الوصف الكامل خلفية الاختراع يتعلق الاختراع الراهن بجهاز لقياس الفعالية الأتزيمية enzymatic activity بشكل سريع في علف صلب csolid feed يشتمل على container sles (i) مصمم لاحتواء Ate الاختبار sample 1652 0 مادة مفاعلة reagent متخصصة بالأنزيم الذي يرغب قياس فعاليته؛ (ii) so محلول منظم لدرجة الحموضة buffer لإذابة الأنزيم 021016. ويفضل أن يكون العلف Gla lle feed لم يعالج قبل القياس. sale تزود الأعلاف المعدة للحيوانات المزرعية husbandry animals بأنزيمات يكون دورها بشكلٍ رئيسي تحسين سهولة هضم das digestibility العلف feed ration وترش هذه الأنزيمات عادةً في صورة سائل على الأعلاف؛ وبصفةٍ خاصة كما هو موصوف في البراءة ٠ - الأوروبية رقم VARY ,0 ويمكن أن تضاف الأنزيمات كذلك في صورة مسحوق للعلف. وهكذا تظهر مشكلتان؛ تتعلق الأولى بالتحقق من انتظام uniformity توزيع الأنزيمات المضافة للعلف؛ وتتعلق الثانية بتقدير فعالية الأنزيم (الأنزيمات) المضاف للأعلاف بشكل سريع وسهل. وأثيرت هاتان المشكلتان بصفةٍ خاصة من قبل مصنعي العلف ومربي الحيوانات الذين يرغبون في فحص نوعية الأعلاف التي يريدون إعطاءها لحيواناتهم. وحتى ve الآن؛ يمكن قياس الفعالية الأنزيمية في المختبرء مما يستلزم قيودآ بدلالة السوقيات orally وتعتبر هذه القيود (le حقيقياً عندما يحتاج إلى نتيجةٍ فورية. م
الوصف العام للاختراع يحل الاختراع الراهن هاتين المشكلتين بتزويد جهاز لقياس الفعالية الأنزيمية لأي علف غني بالأنزيم enzyme-enriched feed معد لعلف الحيوان. ويتيح هذا الجهازء الذي يعتمد 5 قياسه على تفاعل القياس اللوني colorimetric reaction كل من القياس النوعي للفعالية الأنزيمية لعينة الاختبار والقياس شبه الكمي لهذه العينة. شرح مختصر للرسوم الشكل ١ : يبين column 13 see لقياس الفعالية الأنزيمية. الشكل ؟ : يبين أنبوباً يستخدم مرة واحدة -single use tube Ve الوصف التفصيلى يمثل الشكل ١ أحد تجسيدات الاختراع في صورة جهاز لقياس الفعالية الأنزيمية؛ حيث يكون في صورة عمود. ويمكن قراءة الوصف أدناه Lad يتعلق بالأشكال المذكورة أعلاه. ويشتمل الجهاز موضوع الاختراع الراهن على وعاء مصمم لاحتواء عينة الاختبار؛ vo مادة مفاعلة متخصصة بالأنزيم الذي يرغب قياس فعاليته ومحلول منظم لدرجة الحموضة لإذابة الأنزيم المذكور. ويمكن أن يكون وعاء هذا الجهاز؛ بدون قصد التحديد؛ عبارة عن عمود (انظر الشكل )١ مكون من جزء سفلي ضيق مدرج (VY) graduated bottom part وجزء علوي على شكل قمع واسع (YY) wide funnel-shaped top part لإدخال مواد مفاعلة مختلفة إلى العمود Y. ولخلطها أثناء التقليب stirring ويمكن أن يزود العمود كذلك بفتحة Amilo للتسرب ونظام إغلاق (Jia )١١( سدادة stopper مرتبطة بجسم العمود عن طريق .)١١١( tabs soe وقد يتكون الوعاء كذلك من أنبوب يستخدم مرة واحدة (انظر الشكل (YF وقد يصنع الوعاء من مادة تخليقية synthetic material مثل بلاستيك يستخدم مرة واحدة .single-use plastic A414
¢ ويفضل أن يشتمل الوعاء على بروز قابل للشق )٠( cleavable protuberance عند قاعدته؛ يتيح تدفق الجزء السائل من محتوياته إلى الخارج. ومن المستحسن تثبيت جزء ضيق ٠6١ ) constriction ( يحتجز الأجزاء الصلبة الصغيرة جداً morsels 501:1 من العلف على البروز. ويعتمد قياس الفعالية الأنزيمية على تفاع ل القهياس اللوني Lay لطريقة آزو 0 «#عم. ويعتمد fase تفاعل القياس اللوني Gay لطريقة آزو على الحلمةة الأنزيمية 50W enzymatic hydrolysis أساس مميزة لأنزيم مرتبط بحامل لون chromophore وينتج التفاعل أوليغمرات oligomers قابلة للذوبان تعمل على تغيير لون الوسط إلى أزرق. ويمكن قياس درجة امتصاص absorbence الوسط عند 8960 .nanometer(nm) ye is ١ وتكون المواد المفاعلة المستخدمة في الجهاز عبارة عن مادة الأساس للتفاعل المحفز بالأنزيم المرتبط بحامل اللون. وهكذاء يطلق تفاعل الحلمأة الأنزيمية مادة الأساس التي تحتوي على حامل اللون. ويشتمل الجهاز كذلك على محلول منظم لدرجة الحموضة لإذابة الأنزيمات التي رشت على العلف؛ وللمحافظة على الأنزيمات عند درجة حموضتها المثلى. E ويمكن الإشارة؛ على سبيل المثال لا الحصر؛ إلى جهاز لتوضيح فعالية أنزيمات الزيلآناز -xylanases ولقياس فعالية أنزيمات الزيلاناز xylanases تكون المادة المفاعلة المستخدمة عبارة عن " زيلان يستخلص من الشوفان مع ريمازول بريليانت بلو © "Oat spelt Xylan Remazol Brilliant Blue R أو " زيلازيم "Xylazyme AX (يباع من شركة © ميغازيم Megazyme ويتكون من أرابوزيلان araboxylane يستخلص من الشوفان أو القصمح المرتبط بالصباغ (dye ويختار المحلول المنظم لدرجة الحموضة من المحاليل المنظمة لدرجة الحموضة المكونة من حمض الأسيتيك/أسيتات الصوديوم tacetic acid/sodium acetate هيد ركلوريد الغليسين/الغليسين tolycine hydrochloride/glycine حمض الأكونيتيك/هيدروكسيد كم
الصوديوم taconitic acid/sodium hydroxide حمض الفورميك/فورمات الصوديوم .formic acid/sodium formate ويمكن الإشارة كذلك إلى الجهاز لتوضيح فعالية أنزيمات بيتا-غلوكاناز «B-glucanases والتي تعتمد كذلك على تفاعل القياس اللوني Tay لطريقة أزو. > ومن بين مواد الأساس التي يمكن استخدامها؛ يمكن ذكر مزيج من OY 4 -بيتا- 0--غلوكان 4-B-D-glucan ,3:1 ,1 مع ريمازول بريليانت Remazol Brilliant Blue R R sb وبيتا-غلوكازيم beta-glucazyme مباع من شركة ميغازيم Megazyme ويتكون من بيتا-غلوكان beta-glucan متحد مع أزورين .azurine ويختار المحلول المنظم لدرجة الحموضة من المحاليل المنظمة لدرجة الحموضة ve المكونة من حمض الأسيتيك/أسيتات الصوديوم acid/sodium acetate 50606؛ هيد ركلوريد الغليسين/ الغليسين (glycine hydrochloride/glycine حمض الأكونيتيك/هيدروكسيد الصوديوم taconitic acid/sodium hydroxide حمض الفورميك/فورمات الصوديوم -formic acid/sodium formate ولقياس فعالية السليلو لاز ©1018اه»؛ تكون مادة الأساس المستخدمة في صورة أقراص \o معينة الشكل من سيلازيم Cellazyme lozenges (تباع من شركة ميغازيم -(Megazyme وتتكون هذه الأقراص معينة الشكل من مواد أساس أساسها سليلوز cellulose و/أو سليلوز cellulose ومركبات زيلوغلوكان xyloglucans مبلمرة بصباغ أزورين .azurine Gy, لأحد تجسيدات الاختراع الراهن المفضلة؛ تكون المادة المفاعلة في صورة Y. وعلى نحو مستحسن؛ لتسهيل ذوبان a iY) يمكن إضافة مادة خافضة للتوتر السطحي J surfactant مادة الأساس التي تحتوي على عامل حامل اللون. وبصفة خاصة؛ تختار المادة الخافضة للتوتر السطحي من كبريتات لوريل الصوديوم sodium lauryl sulphate وكبريتات دوديسيل الصوديوم -sodium dodecyl sulphate Ga لتجسيد أفضل للاختراع؛ يجرى القياس على أربع خطوات: قحم
+ إضافة ٠١ مل من عينة يرغب قياس فعاليتها الأنزيمية إلى الوعاء -)١( وبالنسبة لعينة صلبة؛ ينبغي ملء الوعاء بالمادة الصلبة حتى علامة التدريج ٠ مل؛ إضافة المادة المفاعلة في صورة خرزة 5880 صلبة؛ إضافة محلول منظم لدرجة الحموضة متخصص حتى علامة التدريج ٠١ مل؛ وبعد إغلاق العمود بالسدادة؛ يتم رج العمود بشدة عدة مرات. ويمكن إضافة خطوة إضافية لفصل الطور السائل والطور الصلب اختيارياً (عن طريق الطرد المركزي centrifugation أو الترشيح ٠ (filtration لاستخلاص الطور السائل وقياس شدة اللون عن طريق قياس الطيف الضوئي spectrophotometry أو ببساطة عن طريق - المقارنة مع مقياس لوني. ويؤكد ظهور لون أزرق بعد فترة تفاعل تتراوح من 4 إلى A ساعات على وجود أنزيمات (AIL RE وتكون شدة اللون متناسبة مع فعالية الأنزيمات الموجودة في العينة. وتتمثل ميزة أخرى للاختراع الراهن في المقدرة على إجراء قياس شبه كمي للفعالية الأنزيمية. ويمكن استخلاص الطور السائل الملون في العمود عن طريق قطع البروز القابل vo للشق من العمود. ومن ثم ٠ يمكن مقارنة شدة لونه مع منحنى معايرة كثافة ظاهرية (00). وبالإضافة إلى كون طريقة القياس سريعة فإنها بسيطة جدآء ويمكن استخدام الجهاز في أي مكان بدون الحاجة إلى معدات خاصة. فعلى سبيل المثال؛ يمكن للمصتع أو مربي الحيوانات إجراء قياس ضبط حالما يصتّع العلف. وسيوصف الاختراع الراهن على أكمل وجه بمساعدة الأمثلة التالية التي لا ينبغي أن Y. تعتبر محدّدة للاختراع. الأمثلة أجريت سلسلتان من الاختبارت على روفابيو زيلان إل سي Rovabio xylan LC (مزيج من زيلاناز xylanase و بيتا-غلوكاناز B-glucanase من بنسليوم فونيكولوسوم (Penicillium funiculosum وعلى روفابيو زيلاناز تي آر إلى سي Rovabio xylanase TRLC Ye (زيلاناز 6 من تر ايكوديرما ربيسسي (Irichoderma reesei حيث تتشراوح A494
Vv ومن -uAXC/ml Jaf و50 يو إيه إكس YOu op uixylanase فعالية الزيلاناز إلى Vo المعتقد أن تؤدي معالجة رش تركيب السائل على الأعلاف إلى مستوى يتراوح من من العلف. Uaxc/kg يو إيه إكس سي/كغم ١٠٠ acetate ويكون المحلول المنظم لدرجة الحموضة المستخدم عبارة عن محلول الأسيتات عِ الرش للعلف فى J al ع ويكن y المنظم لدرجة الحموضة للحفاظط على درجة حموضة تبلغ ل 0 -granulated form أو في صورة حبيبية pulverulent صورة سهلة الانسحاق ا ااا اا يسيس عند 540 نانومتر الملاحظة عند OD. نانومتر od. عند OD. العينة الفعالية الملاحظة عند ساعات A ساعات A (قبل الضبط) ¥ ساعات عند ؛ ساعات ونصف عند ال ل اااي +++ أزرق: ve > Ye < +++ أزرق: 77 xylanase TRLC إل سي J زيلاناز تي على حبيبات ++ لارتغة أزرق: + ب مت أزرق: xylanase TRLC إل سي Ji زيلاناز تي على حبيبات ++ د أزرق: + 7174 متا أزرق: xylanase TRLC إل سي Jf زيلاناز تي على حبيبات ٍ + أزرق: G1 LY قبل التحبب أ لا يوجد لون xylanase مسحوق زيلاناز +++ على 4<" أزرق: +++ 1,73 171 أزرق: Xylanase LC زيلاناز إل سي حبيبات +++ أزرق: 1 PAY + أزرق: VAY على xylanase LC زيلاناز إل سي حبيبات +++ عم أزرق: Y,AVY +++ على ا أزرق: xylanase LC زيلاناز إل سي حبيبات +++ على 8 أزرق: ++ ا ,1 أزرق: xylanase LC زيلاناز إل سي حبيبات ا | | > معي اا 4م
Claims (1)
- A عناصر الحماية-١ \ عملية لقياس الفعالية الأنزيمية enzymatic activity لعينة علف صلب solid feed sample Y بشكل منفصل مباشرة؛ حيث تتضمن الخطوات التالية: (i v ملامسة عينة العلف الصلب solid feed sample مادة مفاعلة reagent لأنزيم enzyme $ يرغب قياس فعاليته تشتمل على مادة أساس substrate متخصصة ° بالأنزيم enzyme المرتبط بحامل لون chromophore ومحلول منظم لدرجة \ الحموضة cbuffer في صورة سائل؛ لإذابة الأنزيم 60217106 في ele container 7 مزود بفتحة مائعة للتسرب leak proof opening ونظام إغلاق ‘closing system A9 ب رج shaking الوعاء container بحيث يتم توزيع حامل اللون chromophore ye في المحلول Jal المنظم لدرجة الحموضة liquid buffer لتشكيل طور ١١ سائل liquid phase وVY ج) ملاحظة تلون coloration الطور السائل dliquid phase حيث يكون التلون ل «ونتة«هاه»_متناسباً مع فعالية الأنزيم الموجود منذ البداية في عينة العلف Ve الصلب feed sample 50110.—Y ١ عملية lay لعنصر الحماية ١ حيث تكون عينة العلف الصلب solid feed sample غير Y معالجة .untreated-Y \ عملية (ad لعنصر الحماية 0 حيث تكون المادة المفاعلة reagent في صورة ala solid Y أو سائلة Jiquid١ - عملية وفقاً لعنصر الحماية 3 حيث تكون المادة المفاعلة reagent في صورة خرزة Y صلبة bead 501:1.A414—o ١ عملية dy لعنصر الحماية ١ حيث تكون المادة المفاعلة reagent عبارة عن مادة أساس substrate 7 متخصصة بالأنزيم enzyme المرتبط بحامل لون .chromophore \ 7- عملية Ga لعنصر الحماية 3 حيث يختار المحلول المنظم لدرجة الحموضة buffer 1 المستخدم لقياس الفعالية من المحاليل المنظمة لدرجة الحموضة المكونة من حمض v الأسيتيك/أسيتات الصوديوم cacetic acid/sodium acetate هيدركلوريد الغليسين/الغليسين «glycine hydrochloride/glycine ¢ حمض الأكونيتيك/هيدروكسيد الصوديوم caconitic acid/sodium hydroxide ° حمض الفورميك/فورمات الصوديوم -formic acid/sodium formate 1 -V ١ عملية وفقاً لعنصر الحماية Cua ١ يثم مقارنة sk اللون الناتج مع منحنى معايرة.standard curve 7 Gig dle —A لعنصر الحماية ١ حيث أنه عند الخطوة ج) يتم فصل الطور السائل liquid phase Y من طور صلب ¢solid phase ويثم استخلاص recovering الطور السائل liquid phase v ويتم قياس التلون coloration عن طريق المقارنة مع مقياس لوني -color scale ¢ Gall LB على بروز container ¢le ll يشتمل Cus (A لعنصر الحماية Gy عملية —9 ١ إلى liquid phase مما يتيح تدفق الطور السائل «base عند قاعدته cleavable protuberance Y cleavage عند الانشقاق «container cle ll خارج Y -٠ ١ عملية Gy لعنصر الحماية )¢ حيث يكون الوعاء container عبارة عن عمود أو أنبوب Y مدرج يستخدم ya 5 واحدة single use graduated column or tube : A494
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR9810533A FR2782523B1 (fr) | 1998-08-19 | 1998-08-19 | Dispositif de mesure rapide de l'activite enzymatique |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SA00200919B1 true SA00200919B1 (ar) | 2006-06-10 |
Family
ID=9529765
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SA00200919A SA00200919B1 (ar) | 1998-08-19 | 2000-02-01 | عملية لقياس الفعالية الأنزيمية enzymatic activity بشكل سريع في عينة علف صلب |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6821722B1 (ar) |
| EP (1) | EP1105456B1 (ar) |
| JP (1) | JP4531258B2 (ar) |
| KR (1) | KR20010072751A (ar) |
| CN (1) | CN1181182C (ar) |
| AT (1) | ATE254169T1 (ar) |
| AU (1) | AU752174B2 (ar) |
| BR (1) | BR9914294B1 (ar) |
| CA (1) | CA2341581C (ar) |
| DE (1) | DE69912806T2 (ar) |
| DK (1) | DK1105456T3 (ar) |
| EA (1) | EA002734B1 (ar) |
| ES (1) | ES2209474T3 (ar) |
| FR (1) | FR2782523B1 (ar) |
| ID (1) | ID28921A (ar) |
| MX (1) | MXPA01001628A (ar) |
| PT (1) | PT1105456E (ar) |
| SA (1) | SA00200919B1 (ar) |
| WO (1) | WO2000011136A1 (ar) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU2004263844A1 (en) * | 2003-07-07 | 2005-02-17 | Syngenta Participations Ag | Reagents, methods and kits for detecting feed enzymes |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2341865A1 (fr) * | 1976-02-19 | 1977-09-16 | Api Labor | Support pour le dosage d'activites enzymatiques et procede de dosage a l'aide de ce support |
| IT8505253A0 (it) * | 1985-11-15 | 1985-11-15 | Copan Srl | Tampone con serbatoio di terreno di trasporto per il prelievo e il trasferimento in provetta di campioni di sostenze da analizzare. |
| ATE97450T1 (de) * | 1989-02-02 | 1993-12-15 | Abbott Lab | Verfahren und vorrichtung zur quantitativen chromatographierung. |
| JPH04229168A (ja) * | 1990-12-26 | 1992-08-18 | Hoechst Japan Ltd | 酵素の活性と酵素反応阻害物質の活性を測定するための器具及び方法 |
| GB2301103B (en) * | 1995-05-23 | 1999-12-22 | Danisco | An enzyme system comprising ferulic acid esterase |
| US6001587A (en) * | 1997-04-08 | 1999-12-14 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy | Chemically specific patterning on solid surfaces using surface immobilized enzymes |
-
1998
- 1998-08-19 FR FR9810533A patent/FR2782523B1/fr not_active Expired - Fee Related
-
1999
- 1999-08-16 CA CA2341581A patent/CA2341581C/fr not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-16 DK DK99936736T patent/DK1105456T3/da active
- 1999-08-16 AU AU51727/99A patent/AU752174B2/en not_active Expired
- 1999-08-16 ES ES99936736T patent/ES2209474T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-16 KR KR1020017002077A patent/KR20010072751A/ko not_active Application Discontinuation
- 1999-08-16 AT AT99936736T patent/ATE254169T1/de active
- 1999-08-16 JP JP2000566393A patent/JP4531258B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1999-08-16 EP EP99936736A patent/EP1105456B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-16 EA EA200100247A patent/EA002734B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1999-08-16 MX MXPA01001628A patent/MXPA01001628A/es active IP Right Grant
- 1999-08-16 US US09/763,018 patent/US6821722B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-16 WO PCT/FR1999/001990 patent/WO2000011136A1/fr not_active Application Discontinuation
- 1999-08-16 CN CNB998097853A patent/CN1181182C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-16 BR BRPI9914294-5A patent/BR9914294B1/pt not_active IP Right Cessation
- 1999-08-16 DE DE69912806T patent/DE69912806T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-16 PT PT99936736T patent/PT1105456E/pt unknown
- 1999-10-16 ID IDW20010613A patent/ID28921A/id unknown
-
2000
- 2000-02-01 SA SA00200919A patent/SA00200919B1/ar unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FR2782523B1 (fr) | 2000-10-06 |
| KR20010072751A (ko) | 2001-07-31 |
| EA200100247A1 (ru) | 2001-08-27 |
| JP4531258B2 (ja) | 2010-08-25 |
| US6821722B1 (en) | 2004-11-23 |
| ATE254169T1 (de) | 2003-11-15 |
| MXPA01001628A (es) | 2002-04-08 |
| DE69912806T2 (de) | 2004-09-23 |
| FR2782523A1 (fr) | 2000-02-25 |
| EA002734B1 (ru) | 2002-08-29 |
| EP1105456A1 (fr) | 2001-06-13 |
| BR9914294B1 (pt) | 2011-01-25 |
| WO2000011136A1 (fr) | 2000-03-02 |
| AU5172799A (en) | 2000-03-14 |
| CN1181182C (zh) | 2004-12-22 |
| JP2002523038A (ja) | 2002-07-30 |
| BR9914294A (pt) | 2001-11-06 |
| CA2341581C (fr) | 2010-10-12 |
| CN1312854A (zh) | 2001-09-12 |
| PT1105456E (pt) | 2004-04-30 |
| CA2341581A1 (fr) | 2000-03-02 |
| DE69912806D1 (de) | 2003-12-18 |
| ID28921A (id) | 2001-07-12 |
| EP1105456B1 (fr) | 2003-11-12 |
| AU752174B2 (en) | 2002-09-05 |
| ES2209474T3 (es) | 2004-06-16 |
| DK1105456T3 (da) | 2004-02-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Mohler et al. | Gene expression and cell fusion analyzed by lacZ complementation in mammalian cells. | |
| US2799660A (en) | Blood test composition and method | |
| AU595570B2 (en) | Substrate formulation in 2-amino-2-methyl-1-propanol buffer for alkaline phosphatase assays | |
| CN108037285A (zh) | 一种磁微粒化学发光定量检测uchl-1的试剂盒及其制备方法 | |
| CA1260371A (en) | Free flowing granular indicator material for peroxidase-like activity | |
| SA00200919B1 (ar) | عملية لقياس الفعالية الأنزيمية enzymatic activity بشكل سريع في عينة علف صلب | |
| US7045312B2 (en) | Method of monitoring a biological system by labeling with an apo metal binding protein | |
| Zhou et al. | A fluorogenic substrate for β-glucuronidase: applications in fluorometric, polyacrylamide gel and histochemical assays | |
| US8476484B2 (en) | Transgenic clawed frog embryos and use thereof as detectors of endocrine disrupters in the environment | |
| CN101889095A (zh) | 荧光素酶分析方法、试剂和试剂盒 | |
| US6750033B2 (en) | Positive response biosensors and other sensors | |
| Lapierre et al. | Developing a fluorometric urease activity microplate assay suitable for automated microbioreactor experiments | |
| AU618004B2 (en) | Method for determination of nagase and reagent therefor | |
| CA1289443C (en) | Test aids and method for the preparation thereof | |
| EP1282813B1 (en) | Use of blue copper proteins | |
| CN109576343A (zh) | 一种连续法测定酸性磷酸酶活性试剂盒的配方 | |
| US20100143937A1 (en) | ASSAY METHODS FOR IDENTIFYING AGENTS THAT MODIFY THE ACTIVITY OF NAPE-PLD OR Abh4 | |
| SU1353809A1 (ru) | Способ определени ферментов, обладающих амидазной активностью | |
| Manual | H2A. X (Ser139) Dual Detect CELISA Assay Kit (Fluorogenic Detection) | |
| JPS5675099A (en) | Measurement of enzyme activity using p-nitoraniline derivative as substrate | |
| Pharmingen | Alexa Fluor® 488 Mouse Anti-Human Lin-28 | |
| JP2002522099A (ja) | 哺乳類細胞ベースレポーター検定のアガロース・フォーマット | |
| Lenhoff | Colorimetric Analysis for Protein of Hydra | |
| CN107709572A (zh) | 促进从动物饲料中提取酶的方法及酶活性的测定方法 |