RU97121580A - Способ получения гемагглютининовых поливалентных вакцин против гриппа - Google Patents
Способ получения гемагглютининовых поливалентных вакцин против гриппаInfo
- Publication number
- RU97121580A RU97121580A RU97121580/13A RU97121580A RU97121580A RU 97121580 A RU97121580 A RU 97121580A RU 97121580/13 A RU97121580/13 A RU 97121580/13A RU 97121580 A RU97121580 A RU 97121580A RU 97121580 A RU97121580 A RU 97121580A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hemagglutinin
- influenza
- protein
- virus
- strains
- Prior art date
Links
- 206010022000 Influenza Diseases 0.000 title claims 7
- 208000006572 Human Influenza Diseases 0.000 title claims 6
- 229960005486 vaccines Drugs 0.000 title claims 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title 1
- 101710043164 Segment-4 Proteins 0.000 claims 25
- 101700038759 VP1 Proteins 0.000 claims 25
- 101700005460 hemA Proteins 0.000 claims 25
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 claims 20
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims 19
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims 19
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 claims 8
- 101700040790 PH Proteins 0.000 claims 7
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 claims 7
- 241000712431 Influenza A virus Species 0.000 claims 6
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 claims 5
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 claims 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims 4
- 229920000160 (ribonucleotides)n+m Polymers 0.000 claims 3
- 241000713196 Influenza B virus Species 0.000 claims 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims 3
- 200000000004 influenza B Diseases 0.000 claims 3
- 230000001402 polyadenylating Effects 0.000 claims 3
- 108020004999 Messenger RNA Proteins 0.000 claims 2
- 229920000978 Start codon Polymers 0.000 claims 2
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 claims 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 claims 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims 2
- 229920002106 messenger RNA Polymers 0.000 claims 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 claims 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims 2
- 241000271566 Aves Species 0.000 claims 1
- 108010022366 Carcinoembryonic Antigen Proteins 0.000 claims 1
- 102000012406 Carcinoembryonic Antigen Human genes 0.000 claims 1
- 229920002676 Complementary DNA Polymers 0.000 claims 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 claims 1
- 102000009085 Human Immunodeficiency Virus Proteins Human genes 0.000 claims 1
- 108010048209 Human Immunodeficiency Virus Proteins Proteins 0.000 claims 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims 1
- 230000000240 adjuvant Effects 0.000 claims 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims 1
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 1
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 claims 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 claims 1
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 claims 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 claims 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 claims 1
- 229920003013 deoxyribonucleic acid Polymers 0.000 claims 1
- 201000009910 diseases by infectious agent Diseases 0.000 claims 1
- 102000037240 fusion proteins Human genes 0.000 claims 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 claims 1
- 239000001963 growth media Substances 0.000 claims 1
- 200000000003 influenza A Diseases 0.000 claims 1
- 239000002609 media Substances 0.000 claims 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims 1
- 241000894007 species Species 0.000 claims 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 claims 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims 1
Claims (26)
1. Рекомбинатный НАО протеин гемагглютинина вируса гриппа, экспрессированный в бакуловирусной системе экспрессии в культивируемых клетках насекомых.
2. Протеин по п. 1, отличающийся тем, что включает далее бакуловирусный сигнальный пептид, соединенный непосредственно с НАО протеином без прерывания аминокислотами.
3. Протеин по п. 1, отличающийся тем, что дополнительно содержит фармацевтически приемлемый носитель для введения в виде вакцины.
4. Протеин по п. 1, отличающийся тем, что дополнительно содержит адьювант и фармацевтически приемлемый носитель для введения в виде вакцины.
5. Протеин по п. 3, отличающийся тем, что фармацевтически приемлемым носителем является полимерная система доставки.
6. Протеин по п. 1, отличающийся тем, что вирус гриппа выбирают из группы, состоящей из штаммов вируса гриппа А и штаммов вируса гриппа В.
7. Протеин по п. 6, отличающийся тем, что вирус гриппа инфицирует людей.
8. Протеин по п. 1, отличающийся тем, что включает второй протеин, который слит с гемагглютинином.
9. Протеин по п. 8, отличающийся тем, что выбран из группы, состоящей из протеинов вируса гепатита В, HIV протеинов, карциноэмбрионного антигена и нейроаминидазы.
10. Вектор для создания рекомбинантного НАO протеина гемагглютинина вируса гриппа, включающий следующие 5' -> 3' последовательности: полиэдриновый промотор из бакуловируса, ATG кодон начала трансляции, сигнальный пептид, последовательность, кодирующую зрелый гемагглютинин из штамма вируса гриппа, кодон терминации трансляции и сигнал полиаденилирования полиэдриновой РНК.
11. Вектор по п. 10, отличающийся тем, что сигнальный пептид представляет бакуловирусный протеин с молекулярным весом примерно 61К, с аминокислотной последовательностью, представленной первыми 18 аминокислотами последовательности ID 7.
12. Вектор по п. 10, отличающийся тем, что сигнальный пептид представляет промотор протеина гемагглютинина вируса гриппа.
13. Вектор по п. 10, отличающийся тем, что последовательность, кодирующая сигнальный пептид и гемагглютинин, не кодирует никаких прерывающих аминокислот.
14. Вектор по п. 10, отличающийся тем, что включает далее последовательность, кодирующую второй протеин, который экспрессируется как протеин слияния с гемагглютинином.
15. Вектор по п. 10, отличающийся тем, что трансфицирован в культивируемые клетки насекомых.
16. Способ получения рекомбинантного протеина гемагглютинина вируса гриппа, включающий инфицирование культивируемых клеток насекомого вектором, содержащим 5' - 3' последовательности: промотор полиэдрина из бакуловируса, ATG кодон начала трансляции, сигнальный пептид, последовательность, кодирующую гемагглютинин из штамма гриппа, выбранного из группы, состоящей из штаммов вируса гриппа А и штаммов вируса гриппа В, кодона терминации трансляции, сигнала полиаденилирования РНК полиэдрина, и культивирование клеток в питательной среде.
17. Способ по п.16, отличающийся тем, что включает далее выделение НAO протеина гемагглютинина вируса гриппа из клеток до степени чистоты, по крайней мере, 95%.
18. Способ по п. 17, отличающийся тем, что протеин выделяют путем отделения гемагглютинина от немембранных протеинов при щелочных значениях рН, промывания связанных с мембраной протеинов для элюирования гемагглютинина, отделения гемагглютинина от других протеинов путем связывания с анионообменной смолой за счет изменения рН, и отделения гемагглютинина от остальных протеинов путем связывания с катионообменной смолой за счет изменения концентрации соли.
19. Способ получения вектора, содержащего следующие 5' - 3' последовательности: полиэдриновый промотор из бакуловируса, ATG кодон начала трансляции, сигнальный пептид, последовательности, кодирующие гемагглютинин из штамма вируса, выбранного из группы, состоящей из штаммов вируса гриппа А и штаммов вируса гриппа В, кодона терминации трансляции, сигнала полиаденилирования РНК полиэдрина, включающий: сбор вируса из клеточной среды, и выделение либо вирусной РНК для штаммов вируса гриппа А, или мРНК для штаммов вируса гриппа В; синтез кДНК, с использованием либо универсального праймера (5'-AGCAAAAGCAGG-3' (последовательность ID 1)) для вирусной РНК из штаммов вируса гриппа А, либо случайного праймера для мРНК из штаммов вируса гриппа В, где 5' и 3' праймеры содержат сайты рестрикции на концах, которых нет в генах гемагглютинина; амплификацию праймеров для вирусов гриппа А или В и кДНК вируса гриппа, смешанных с сегментами гена гемагглютинина для получения фрагментов двухцепочечных ДНК, содержащих полные последовательности, кодирующие зрелый гемагглютинин; идентификацию сигнального пептида генов гемагглютинина, и последующую амплификацию генов гемагглютинина минус сигнальный пептид; и клонирование генов гемагглютинина минус сигнальный пептид в вектор, содержащий AcNPV полиэдриновый промотор.
20. Способ по п. 19, отличающийся тем, что указанные гены гемагглютинина клонируют в вектор, используя PCR таким образом, чтобы вектор кодировал сигнальный пептид, соединенный непосредственно с гемагглютинином, без каких-либо прерывающих аминокислот.
21. Способ по п. 19, отличающийся тем, что включает далее трансфекцию вектора в клетки насекомого, и отбор клеток по экспрессии гемагглютинина.
22. Способ вакцинации животных против гриппа, включающий введение животному эффективного количества рекомбинантного НАO протеина гемагглютинина вируса гриппа, экспрессированного в бакуловирусной системе экспрессии в культивируемых клетках насекомого.
23. Способ по п. 22, отличающийся тем, что протеин вводят в полимерной системе доставки.
24. Способ по п. 22, отличающийся тем, что вирус гриппа выбирают из группы, состоящей из штаммов вируса гриппа А и штаммов вируса гриппа В.
25. Способ по п. 22, отличающийся тем, что животное выбирают из группы, состоящей из видов млекопитающих и птиц.
26. Способ по п. 22, отличающийся тем, что животным является человек.
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU97121580A true RU97121580A (ru) | 1999-10-27 |
Family
ID=
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2480480C2 (ru) * | 2005-08-04 | 2013-04-27 | Ст. Джуд Чилдрен'С Рисёч Хоспитал | Способы применения модифицированного вируса гриппа |
RU2565546C2 (ru) * | 2010-08-16 | 2015-10-20 | Севек Фармасьютикалз Гмбх | Постоянные линии клеток человека для получения вирусов гриппа |
RU2639551C2 (ru) * | 2012-03-30 | 2017-12-21 | Юниверсити Оф Питтсбург - Оф Зе Коммонвэлс Систем Оф Хайе Эдьюкейшн | Оптимизированные с помощью вычислительных средств антигены с широким спектром реактивности для вирусов гриппа h5n1 и h1n1 |
RU2653756C2 (ru) * | 2012-02-07 | 2018-05-14 | Юниверсити Оф Питтсбург - Оф Зе Коммонвэлс Систем Оф Хайе Эдьюкейшн | Оптимизированные с помощью компьютера антигены с широким спектром реактивности для вирусов гриппа h3n2 |
RU2811752C2 (ru) * | 2005-04-21 | 2024-01-16 | Юниверсити Оф Флорида Рисерч Фаундейшн, Инк. | Материалы и методы, используемые для лечения респираторных заболеваний у собак |
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2811752C2 (ru) * | 2005-04-21 | 2024-01-16 | Юниверсити Оф Флорида Рисерч Фаундейшн, Инк. | Материалы и методы, используемые для лечения респираторных заболеваний у собак |
RU2480480C2 (ru) * | 2005-08-04 | 2013-04-27 | Ст. Джуд Чилдрен'С Рисёч Хоспитал | Способы применения модифицированного вируса гриппа |
RU2552213C2 (ru) * | 2005-08-04 | 2015-06-10 | Ст. Джуд Чилдрен`С Рисёч Хоспитал | Вакцины на основе модифицированного вируса гриппа |
US9499850B2 (en) | 2005-08-04 | 2016-11-22 | St. Jude Children's Research Hospital | Modified influenza virus for monitoring and improving vaccine efficiency |
RU2565546C2 (ru) * | 2010-08-16 | 2015-10-20 | Севек Фармасьютикалз Гмбх | Постоянные линии клеток человека для получения вирусов гриппа |
RU2653756C2 (ru) * | 2012-02-07 | 2018-05-14 | Юниверсити Оф Питтсбург - Оф Зе Коммонвэлс Систем Оф Хайе Эдьюкейшн | Оптимизированные с помощью компьютера антигены с широким спектром реактивности для вирусов гриппа h3n2 |
RU2639551C2 (ru) * | 2012-03-30 | 2017-12-21 | Юниверсити Оф Питтсбург - Оф Зе Коммонвэлс Систем Оф Хайе Эдьюкейшн | Оптимизированные с помощью вычислительных средств антигены с широким спектром реактивности для вирусов гриппа h5n1 и h1n1 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CA2222129A1 (en) | A method for producing influenza hemagglutinin multivalent vaccines | |
CA2660355C (en) | Polynucleotide vaccine formulation against pathologies of the horse | |
RU2312676C2 (ru) | Формула кошачьей вакцины | |
EP0405867B1 (en) | Novel compounds | |
CN110279855B (zh) | 猪塞内卡病毒新型基因工程疫苗,其制备方法与应用 | |
US5041385A (en) | Vector expressing fusion proteins and particles | |
KR20000065258A (ko) | 조류 폴리뉴클레오티드 백신 제제 | |
CA2406100A1 (en) | Dna transfection system for the generation of infectious influenza virus | |
AU4314489A (en) | Fusion protein of paramyxovirus, method of production using recombinant baculovirus expression vector, vaccine comprising such protein and use thereof | |
CN113461788B (zh) | 猫冠状病毒重组抗原、其基因工程亚单位疫苗及应用 | |
CA2054069A1 (en) | Expression system | |
EP0538341B1 (en) | Ehv-4 glycoprotein vaccine | |
KR950001993B1 (ko) | B형 간염 표면항원의 제조방법 | |
CN111607615B (zh) | 一种猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎病毒病二联亚单位疫苗的制备方法 | |
Hinrichs et al. | Induction of antibodies to plant viral proteins by DNA-based immunization | |
JP2852395B2 (ja) | ネコ白血病ウイルスワクチン | |
Liu et al. | Preparation of ChIL-2 and IBDV VP2 fusion protein by baculovirus expression system | |
RU97121580A (ru) | Способ получения гемагглютининовых поливалентных вакцин против гриппа | |
EP1365799B1 (en) | A novel vaccine formulation consisting of dna vaccine inactivated virus | |
WO2007104979A1 (en) | Virus-like particles of rift valley fever virus | |
Paolazzi et al. | Rabies vaccine: Developments employing molecular biology methods | |
US5674735A (en) | DNA encoding the EHV-4 gH or gC glycoprotein | |
AU660528B2 (en) | Process for the expression of herpes simplex virus type 1 glycoprotein E and methods of use | |
AU773266B2 (en) | Feline polynucleotide vaccine formula | |
AU2004205140B2 (en) | Feline polynucleotide vaccine formula |