RU97121580A - Способ получения гемагглютининовых поливалентных вакцин против гриппа - Google Patents

Способ получения гемагглютининовых поливалентных вакцин против гриппа

Info

Publication number
RU97121580A
RU97121580A RU97121580/13A RU97121580A RU97121580A RU 97121580 A RU97121580 A RU 97121580A RU 97121580/13 A RU97121580/13 A RU 97121580/13A RU 97121580 A RU97121580 A RU 97121580A RU 97121580 A RU97121580 A RU 97121580A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
hemagglutinin
influenza
protein
virus
strains
Prior art date
Application number
RU97121580/13A
Other languages
English (en)
Inventor
Юджин Смит Гейл
Волвовиц Франклин
Е.Вилкинсон Бетани
И.Вознесенский Андрей
Стенвей Хакетт Крэйг
Original Assignee
Эм Джи-Пи эм Си, Л.Л.Си.
Filing date
Publication date
Application filed by Эм Джи-Пи эм Си, Л.Л.Си. filed Critical Эм Джи-Пи эм Си, Л.Л.Си.
Publication of RU97121580A publication Critical patent/RU97121580A/ru

Links

Claims (26)

1. Рекомбинатный НАО протеин гемагглютинина вируса гриппа, экспрессированный в бакуловирусной системе экспрессии в культивируемых клетках насекомых.
2. Протеин по п. 1, отличающийся тем, что включает далее бакуловирусный сигнальный пептид, соединенный непосредственно с НАО протеином без прерывания аминокислотами.
3. Протеин по п. 1, отличающийся тем, что дополнительно содержит фармацевтически приемлемый носитель для введения в виде вакцины.
4. Протеин по п. 1, отличающийся тем, что дополнительно содержит адьювант и фармацевтически приемлемый носитель для введения в виде вакцины.
5. Протеин по п. 3, отличающийся тем, что фармацевтически приемлемым носителем является полимерная система доставки.
6. Протеин по п. 1, отличающийся тем, что вирус гриппа выбирают из группы, состоящей из штаммов вируса гриппа А и штаммов вируса гриппа В.
7. Протеин по п. 6, отличающийся тем, что вирус гриппа инфицирует людей.
8. Протеин по п. 1, отличающийся тем, что включает второй протеин, который слит с гемагглютинином.
9. Протеин по п. 8, отличающийся тем, что выбран из группы, состоящей из протеинов вируса гепатита В, HIV протеинов, карциноэмбрионного антигена и нейроаминидазы.
10. Вектор для создания рекомбинантного НАO протеина гемагглютинина вируса гриппа, включающий следующие 5' -> 3' последовательности: полиэдриновый промотор из бакуловируса, ATG кодон начала трансляции, сигнальный пептид, последовательность, кодирующую зрелый гемагглютинин из штамма вируса гриппа, кодон терминации трансляции и сигнал полиаденилирования полиэдриновой РНК.
11. Вектор по п. 10, отличающийся тем, что сигнальный пептид представляет бакуловирусный протеин с молекулярным весом примерно 61К, с аминокислотной последовательностью, представленной первыми 18 аминокислотами последовательности ID 7.
12. Вектор по п. 10, отличающийся тем, что сигнальный пептид представляет промотор протеина гемагглютинина вируса гриппа.
13. Вектор по п. 10, отличающийся тем, что последовательность, кодирующая сигнальный пептид и гемагглютинин, не кодирует никаких прерывающих аминокислот.
14. Вектор по п. 10, отличающийся тем, что включает далее последовательность, кодирующую второй протеин, который экспрессируется как протеин слияния с гемагглютинином.
15. Вектор по п. 10, отличающийся тем, что трансфицирован в культивируемые клетки насекомых.
16. Способ получения рекомбинантного протеина гемагглютинина вируса гриппа, включающий инфицирование культивируемых клеток насекомого вектором, содержащим 5' - 3' последовательности: промотор полиэдрина из бакуловируса, ATG кодон начала трансляции, сигнальный пептид, последовательность, кодирующую гемагглютинин из штамма гриппа, выбранного из группы, состоящей из штаммов вируса гриппа А и штаммов вируса гриппа В, кодона терминации трансляции, сигнала полиаденилирования РНК полиэдрина, и культивирование клеток в питательной среде.
17. Способ по п.16, отличающийся тем, что включает далее выделение НAO протеина гемагглютинина вируса гриппа из клеток до степени чистоты, по крайней мере, 95%.
18. Способ по п. 17, отличающийся тем, что протеин выделяют путем отделения гемагглютинина от немембранных протеинов при щелочных значениях рН, промывания связанных с мембраной протеинов для элюирования гемагглютинина, отделения гемагглютинина от других протеинов путем связывания с анионообменной смолой за счет изменения рН, и отделения гемагглютинина от остальных протеинов путем связывания с катионообменной смолой за счет изменения концентрации соли.
19. Способ получения вектора, содержащего следующие 5' - 3' последовательности: полиэдриновый промотор из бакуловируса, ATG кодон начала трансляции, сигнальный пептид, последовательности, кодирующие гемагглютинин из штамма вируса, выбранного из группы, состоящей из штаммов вируса гриппа А и штаммов вируса гриппа В, кодона терминации трансляции, сигнала полиаденилирования РНК полиэдрина, включающий: сбор вируса из клеточной среды, и выделение либо вирусной РНК для штаммов вируса гриппа А, или мРНК для штаммов вируса гриппа В; синтез кДНК, с использованием либо универсального праймера (5'-AGCAAAAGCAGG-3' (последовательность ID 1)) для вирусной РНК из штаммов вируса гриппа А, либо случайного праймера для мРНК из штаммов вируса гриппа В, где 5' и 3' праймеры содержат сайты рестрикции на концах, которых нет в генах гемагглютинина; амплификацию праймеров для вирусов гриппа А или В и кДНК вируса гриппа, смешанных с сегментами гена гемагглютинина для получения фрагментов двухцепочечных ДНК, содержащих полные последовательности, кодирующие зрелый гемагглютинин; идентификацию сигнального пептида генов гемагглютинина, и последующую амплификацию генов гемагглютинина минус сигнальный пептид; и клонирование генов гемагглютинина минус сигнальный пептид в вектор, содержащий AcNPV полиэдриновый промотор.
20. Способ по п. 19, отличающийся тем, что указанные гены гемагглютинина клонируют в вектор, используя PCR таким образом, чтобы вектор кодировал сигнальный пептид, соединенный непосредственно с гемагглютинином, без каких-либо прерывающих аминокислот.
21. Способ по п. 19, отличающийся тем, что включает далее трансфекцию вектора в клетки насекомого, и отбор клеток по экспрессии гемагглютинина.
22. Способ вакцинации животных против гриппа, включающий введение животному эффективного количества рекомбинантного НАO протеина гемагглютинина вируса гриппа, экспрессированного в бакуловирусной системе экспрессии в культивируемых клетках насекомого.
23. Способ по п. 22, отличающийся тем, что протеин вводят в полимерной системе доставки.
24. Способ по п. 22, отличающийся тем, что вирус гриппа выбирают из группы, состоящей из штаммов вируса гриппа А и штаммов вируса гриппа В.
25. Способ по п. 22, отличающийся тем, что животное выбирают из группы, состоящей из видов млекопитающих и птиц.
26. Способ по п. 22, отличающийся тем, что животным является человек.
RU97121580/13A 1995-05-26 Способ получения гемагглютининовых поливалентных вакцин против гриппа RU97121580A (ru)

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU97121580A true RU97121580A (ru) 1999-10-27

Family

ID=

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2480480C2 (ru) * 2005-08-04 2013-04-27 Ст. Джуд Чилдрен'С Рисёч Хоспитал Способы применения модифицированного вируса гриппа
RU2565546C2 (ru) * 2010-08-16 2015-10-20 Севек Фармасьютикалз Гмбх Постоянные линии клеток человека для получения вирусов гриппа
RU2639551C2 (ru) * 2012-03-30 2017-12-21 Юниверсити Оф Питтсбург - Оф Зе Коммонвэлс Систем Оф Хайе Эдьюкейшн Оптимизированные с помощью вычислительных средств антигены с широким спектром реактивности для вирусов гриппа h5n1 и h1n1
RU2653756C2 (ru) * 2012-02-07 2018-05-14 Юниверсити Оф Питтсбург - Оф Зе Коммонвэлс Систем Оф Хайе Эдьюкейшн Оптимизированные с помощью компьютера антигены с широким спектром реактивности для вирусов гриппа h3n2
RU2811752C2 (ru) * 2005-04-21 2024-01-16 Юниверсити Оф Флорида Рисерч Фаундейшн, Инк. Материалы и методы, используемые для лечения респираторных заболеваний у собак

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2811752C2 (ru) * 2005-04-21 2024-01-16 Юниверсити Оф Флорида Рисерч Фаундейшн, Инк. Материалы и методы, используемые для лечения респираторных заболеваний у собак
RU2480480C2 (ru) * 2005-08-04 2013-04-27 Ст. Джуд Чилдрен'С Рисёч Хоспитал Способы применения модифицированного вируса гриппа
RU2552213C2 (ru) * 2005-08-04 2015-06-10 Ст. Джуд Чилдрен`С Рисёч Хоспитал Вакцины на основе модифицированного вируса гриппа
US9499850B2 (en) 2005-08-04 2016-11-22 St. Jude Children's Research Hospital Modified influenza virus for monitoring and improving vaccine efficiency
RU2565546C2 (ru) * 2010-08-16 2015-10-20 Севек Фармасьютикалз Гмбх Постоянные линии клеток человека для получения вирусов гриппа
RU2653756C2 (ru) * 2012-02-07 2018-05-14 Юниверсити Оф Питтсбург - Оф Зе Коммонвэлс Систем Оф Хайе Эдьюкейшн Оптимизированные с помощью компьютера антигены с широким спектром реактивности для вирусов гриппа h3n2
RU2639551C2 (ru) * 2012-03-30 2017-12-21 Юниверсити Оф Питтсбург - Оф Зе Коммонвэлс Систем Оф Хайе Эдьюкейшн Оптимизированные с помощью вычислительных средств антигены с широким спектром реактивности для вирусов гриппа h5n1 и h1n1

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA2222129A1 (en) A method for producing influenza hemagglutinin multivalent vaccines
CA2660355C (en) Polynucleotide vaccine formulation against pathologies of the horse
RU2312676C2 (ru) Формула кошачьей вакцины
EP0405867B1 (en) Novel compounds
CN110279855B (zh) 猪塞内卡病毒新型基因工程疫苗,其制备方法与应用
US5041385A (en) Vector expressing fusion proteins and particles
KR20000065258A (ko) 조류 폴리뉴클레오티드 백신 제제
CA2406100A1 (en) Dna transfection system for the generation of infectious influenza virus
AU4314489A (en) Fusion protein of paramyxovirus, method of production using recombinant baculovirus expression vector, vaccine comprising such protein and use thereof
CN113461788B (zh) 猫冠状病毒重组抗原、其基因工程亚单位疫苗及应用
CA2054069A1 (en) Expression system
EP0538341B1 (en) Ehv-4 glycoprotein vaccine
KR950001993B1 (ko) B형 간염 표면항원의 제조방법
CN111607615B (zh) 一种猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎病毒病二联亚单位疫苗的制备方法
Hinrichs et al. Induction of antibodies to plant viral proteins by DNA-based immunization
JP2852395B2 (ja) ネコ白血病ウイルスワクチン
Liu et al. Preparation of ChIL-2 and IBDV VP2 fusion protein by baculovirus expression system
RU97121580A (ru) Способ получения гемагглютининовых поливалентных вакцин против гриппа
EP1365799B1 (en) A novel vaccine formulation consisting of dna vaccine inactivated virus
WO2007104979A1 (en) Virus-like particles of rift valley fever virus
Paolazzi et al. Rabies vaccine: Developments employing molecular biology methods
US5674735A (en) DNA encoding the EHV-4 gH or gC glycoprotein
AU660528B2 (en) Process for the expression of herpes simplex virus type 1 glycoprotein E and methods of use
AU773266B2 (en) Feline polynucleotide vaccine formula
AU2004205140B2 (en) Feline polynucleotide vaccine formula