Claims (40)
1. Способ нацеливания клеточного иммунного ответа у млекопитающего, причем, указанный способ, включает в себя введение указанному млекопитающему эффективного количества терапевтических клеток, при этом каждая из указанных терапевтических клеток экспрессирует мембранно-связанный, белковоподобный химерный рецептор, включающий в себя (а) внутриклеточную часть тирозин-специфической протеинкиназы, которая обладает способностью передавать сигнал указанной терапевтической клетке на уничтожение клетки-мишени, связанной с рецептором, или инфекционного агента-мишени, связанного с рецептором, и (b) внеклеточную часть, которая обладает способностью специфически распознавать и связывать указанную клетку-мишень или указанный инфекционный агент-мишень, причем, каждая из указанных терапевтических клеток обладает способностью специфически распознавать и уничтожать указанную клетку-мишень или инфекционный агент-мишень.1. A method for targeting a cellular immune response in a mammal, said method comprising administering to said mammal an effective amount of therapeutic cells, each of said therapeutic cells expressing a membrane-bound, protein-like chimeric receptor comprising (a) an intracellular portion a tyrosine-specific protein kinase that has the ability to transmit a signal to the indicated therapeutic cell to destroy the target cell associated with the receptor, or an infectious target agent associated with a receptor, and (b) an extracellular portion that has the ability to specifically recognize and bind said target cell or said infectious target agent, each of which therapeutic cells has the ability to specifically recognize and destroy said cell target or target infectious agent.
2. Способ по п. 1, в которым указанная клетка-мишень представляет собой хозяйскую клетку, зараженную инфекционным агентом, опухолевую или злокачественную клетку, или аутоиммунно-образованную клетку. 2. The method according to claim 1, wherein said target cell is a host cell infected with an infectious agent, a tumor or malignant cell, or an autoimmune-formed cell.
3. Способ по п. 1, в котором указанная тирозин-специфическая протеинкиназа является членом семейства Syk-киназ. 3. The method of claim 1, wherein said tyrosine-specific protein kinase is a member of the Syk kinase family.
4. Способ по п. 3, в котором указанная тирозин-специфическая протеинкиназа представляет собой Syk. 4. The method of claim 3, wherein said tyrosine-specific protein kinase is Syk.
5. Способ по п. 4, в котором указанная внутриклеточная часть включает в себя аминокислоты 336-628 человеческой Syk или аминокислоты 338-630 свиной Syk. 5. The method of claim 4, wherein said intracellular portion comprises amino acids 336-628 of human Syk or amino acids 338-630 of pork Syk.
6. Способ по п. 1, в котором каждая из указанных терапевтических клеток экспрессирует второй мембранно-связанный, белковоподобный химерный рецептор, причем, указанный второй химерный рецептор включает в себя (а) внутриклеточную часть второй тирозин-специфической протеинкиназы, которая обладает способностью передавать сигнал указанной терапевтической клетке на уничтожение связанной с рецептором клетки-мишени или связанного с рецептором инфекционного агента-мишени и (b) внеклеточную часть, которая обладает способностью специфически распознавать и связывать указанную клетку-мишень или указанный инфекционный агент-мишень, причем, каждая из указанных терапевтических клеток обладает способностью специфически распознавать и уничтожать указанную клетку-мишень или инфекционный агент-мишень. 6. The method of claim 1, wherein each of said therapeutic cells expresses a second membrane-bound, protein-like chimeric receptor, said second chimeric receptor comprising (a) an intracellular portion of a second tyrosine-specific protein kinase that is capable of signal transduction said therapeutic cell to kill a target cell associated with a receptor or a target infectious target agent and (b) an extracellular portion that has the ability to specifically oznavat and binding said target cell or said target infective agent, wherein each of said therapeutic cells is capable of specifically recognizing and destroying said target cell or target infective agent.
7. Способ по п. 6, в котором одна из указанных тирозин-специфических протеинкиназ является членом семейства Src-киназ, а другая указанная тирозин-специфическая протеинкиназа является членом семейства Src-киназ. 7. The method of claim 6, wherein one of said tyrosine-specific protein kinases is a member of the Src kinase family, and the other said tyrosine-specific protein kinase is a member of the Src kinase family.
8. Способ по п. 6, в котором одна из указанных тирозин-специфических протеинкиназ представляет собой ZAP-70, а другая из указанных тирозин-специфических протеинкиназ представляет собой Fyn. 8. The method of claim 6, wherein one of said tyrosine-specific protein kinases is ZAP-70 and the other of said tyrosine-specific protein kinases is Fyn.
9. Способ по п. 6, в котором одна из указанных тирозин-специфических протеинкиназ представляет собой ZAP-70, а другая из указанных тирозин-специфических протеинкиназ представляет собой Lck. 9. The method of claim 6, wherein one of said tyrosine-specific protein kinases is ZAP-70 and the other of said tyrosine-specific protein kinases is Lck.
10. Способ по п. 8 или 9, в которых указанная ZAP-70-часть включает в себя Тир 369 ZAP-70 человека. 10. The method according to p. 8 or 9, in which the specified ZAP-70 part includes Tier 369 ZAP-70 person.
11. Способ по п. 1 или 6, в которых указанный клеточный ответ является МНС-независимым. 11. The method of claim 1 or 6, wherein said cell response is MHC-independent.
12. Способ по п. 1 или 6, в которых указанные терапевтические клетки выбраны из группы, состоящей из: (а) Т-лимфоцитов; (b) цитотоксических Т-лимфоцитов; (с) естественных клеток-киллеров; (d) нейтрофилов; (е) гранулоцитов; (f) макрофагов; (g) тучных клеток; (h) HeLa-клеток и (i) эмбриональных стволовых клеток (ЭС). 12. The method of claim 1 or 6, wherein said therapeutic cells are selected from the group consisting of: (a) T lymphocytes; (b) cytotoxic T lymphocytes; (c) natural killer cells; (d) neutrophils; (e) granulocytes; (f) macrophages; (g) mast cells; (h) HeLa cells; and (i) embryonic stem cells (ES).
13. Способ по п. 1, в котором указанный инфекционный агент-мишень представляет собой вирус иммунодефицита. 13. The method of claim 1, wherein said target infectious agent is an immunodeficiency virus.
14. Способ по п. 13, в котором указанная внеклеточная часть включает в себя участок CD4, связанный с оболочкой ВИЧ. 14. The method of claim 13, wherein said extracellular portion includes a CD4 region associated with an HIV envelope.
15. Способ по п. 1 или 6, в которых указанные терапевтические клетки дополнительно экспрессируют мембранно-связанный, белковоподобный химерный рецептор, включающий в себя (а) внеклеточную часть, которая обладает способностью специфически распознавать и связывать указанную клетку-мишень или указанный инфекционный агент-мишень, и (b) внутриклеточную часть, которая произведена из CD28. 15. The method of claim 1 or 6, wherein said therapeutic cells further express a membrane-bound, protein-like chimeric receptor comprising (a) an extracellular portion that has the ability to specifically recognize and bind said target cell or said infectious agent target; and (b) the intracellular portion that is produced from CD28.
16. Способ по п. 1, в котором указанные терапевтические клетки уничтожают, в результате цитолиза, указанную клетку-мишень, связанную с рецептором, или инфекционный агент-мишень. 16. The method of claim 1, wherein said therapeutic cells destroy, by cytolysis, said target cell associated with a receptor, or an infectious target agent.
17. Клетка, которая экспрессирует мембранно-связанный, белковоподобный химерный рецептор, включающий в себя (а) внутриклеточную часть тирозин-специфической протеинкиназы, которая обладает способностью передавать сигнал указанной терапевтической клетке на уничтожение клетки-мишени, связанной с рецептором, или инфекционного агента-мишени, связанного с рецептором, и (b) внеклеточную часть, которая обладает способностью специфически распознавать и связывать указанную клетку-мишень или указанный инфекционный агент-мишень, причем, каждая из указанных терапевтических клеток обладает способностью специфически распознавать и уничтожать указанную клетку-мишень или инфекционный агент-мишень. 17. A cell that expresses a membrane-bound, protein-like chimeric receptor comprising (a) an intracellular portion of a tyrosine-specific protein kinase that is capable of transmitting a signal to said therapeutic cell to destroy a target cell associated with a receptor or an infectious target agent associated with the receptor, and (b) the extracellular part, which has the ability to specifically recognize and bind the specified target cell or the specified infectious target agent, and, each of these therapeutic cells has the ability to specifically recognize and destroy the specified target cell or target infectious agent.
18. Клетка по п. 17, в котором указанная тирозин-специфическая протеинкиназа является членом семейства Syk-киназ. 18. The cell of claim 17, wherein said tyrosine-specific protein kinase is a member of the Syk kinase family.
19. Клетка по п. 18, в котором указанная тирозин-специфическая протеинкиназа представляет собой Syk. 19. The cell of claim 18, wherein said tyrosine-specific protein kinase is Syk.
20. Клетка по п. 19, в котором указанная внутриклеточная часть включает в себя аминокислоты 336-628 человеческой Syk или аминокислоты 338-630 свиной Syk. 20. The cell of claim 19, wherein said intracellular portion includes amino acids 336-628 of human Syk or amino acids 338-630 of pork Syk.
21. Клетка по п. 17, в котором каждая из указанных терапевтических клеток экспрессирует второй мембранно-связанный, белковоподобный химерный рецептор, указанный второй химерный рецептор включает в себя (а) внутриклеточную часть второй тирозин-специфической протеинкиназы, которая обладает способностью передавать сигнал указанной терапевтической клетке на уничтожение клетки-мишени, связанной с рецептором, или инфекционного агента-мишени, связанного с рецептором, и (b) внеклеточную часть, которая обладает способностью специфически распознавать и связывать указанную клетку-мишень или указанный инфекционный агент-мишень, причем, каждая из указанных терапевтических клеток обладает способностью специфически распознавать и уничтожать клетку-мишень или инфекционный агент-мишень. 21. The cell of claim 17, wherein each of said therapeutic cells expresses a second membrane-bound, protein-like chimeric receptor, said second chimeric receptor includes (a) an intracellular portion of a second tyrosine-specific protein kinase that is capable of signaling said therapeutic a cell to destroy a target cell associated with a receptor or an infectious target agent associated with a receptor, and (b) an extracellular portion that has the ability to specifically recognize Vat and binding said target cell or said target infective agent, wherein each of said therapeutic cells is capable of specifically recognizing and destroying a target cell or target infective agent.
22. Клетка по п. 21, в котором одна из указанных тирозин-специфических протеинкиназ является членом семейства Syk-киназ, а другая из указанных тирозин-специфических протеинкиназ является членом семейства Src-киназ. 22. The cell of claim 21, wherein one of said tyrosine-specific protein kinases is a member of the Syk kinase family and the other of said tyrosine-specific protein kinases is a member of the Src kinase family.
23. Клетка по п. 21, в котором одна из указанных тирозин-специфических протеинкиназ представляет собой ZAP-70, а другая из указанных тирозин-специфических протеинкиназ представляет собой Fyn. 23. The cell of claim 21, wherein one of said tyrosine-specific protein kinases is ZAP-70 and the other of said tyrosine-specific protein kinases is Fyn.
24. Клетка по п. 21, в котором одна из указанных тирозин-специфических протеинкиназ представляет ZAP-70, а другая из указанных тирозин-специфических протеинкиназ представляет собой Lck. 24. The cell of claim 21, wherein one of said tyrosine-specific protein kinases is ZAP-70 and the other of said tyrosine-specific protein kinases is Lck.
25. Клетка по п. 23 или 24, в которых указанная ZAP-70-часть включает в себя Тир 369 человеческой ZAP-70. 25. The cell of claim 23 or 24, wherein said ZAP-70 moiety includes Tyr 369 of human ZAP-70.
26. Клетка по п. 17 или 21, в которых указанные терапевтические клетки выбраны из группы, состоящей из: (а) Т-лимфоцитов; (b) цитотоксических Т-лимфоцитов; (с) естественных клеток-киллеров; (d) нейтрофилов; (е) гранулоцитов; (f) макрофагов; (g) тучных клеток; (h) HeLa-клеток; и (i) эмбриональных стволовых клеток (ЭС). 26. The cell of claim 17 or 21, wherein said therapeutic cells are selected from the group consisting of: (a) T lymphocytes; (b) cytotoxic T lymphocytes; (c) natural killer cells; (d) neutrophils; (e) granulocytes; (f) macrophages; (g) mast cells; (h) HeLa cells; and (i) embryonic stem cells (ES).
27. Клетка по п. 17, в котором указанный инфекционный агент-мишень представляет вирус иммунодефицита. 27. The cell of claim 17, wherein said target infectious agent is an immunodeficiency virus.
28. Клетка по п. 27, в котором внеклеточная часть включает в себя участок CD4, связанный с оболочкой ВИЧ. 28. The cell of claim 27, wherein the extracellular portion includes a CD4 region associated with an HIV envelope.
29. Клетка по п. 17 или 21, в которых указанные терапевтические клетки дополнительно экспрессируют мембранно-связанный, белковоподобный химерный рецептор, включающий в себя (а) внеклеточную часть, которая обладает способностью специфически распознавать и связывать указанную клетку-мишень или указанный инфекционный агент-мишень, и (b) и внутриклеточную часть, которая произведена из CD28. 29. The cell of claim 17 or 21, wherein said therapeutic cells further express a membrane-bound, protein-like chimeric receptor comprising (a) an extracellular portion that has the ability to specifically recognize and bind said target cell or said infectious agent target, and (b) and the intracellular portion that is produced from CD28.
30. Клетка по п. 17, в котором указанные терапевтические клетки уничтожают указанную клетку-мишень, связанную с рецептором, или инфекционный агент-мишень путем цитолиза. 30. The cell of claim 17, wherein said therapeutic cells kill said target cell associated with a receptor or an infectious target agent by cytolysis.
31. Клетка по п. 17 или 21, в которых указанное связывание является МНС-независимым. 31. The cell of claim 17 or 21, wherein said binding is MHC independent.
32. Клетка по п. 17 или 21, в которых указанная внеклеточная часть включает в себя лиганд-связывающий участок рецептора, рецептор-связывающую часть лиганда, антигенсвязывающий участок антитела или его функциональное производное. 32. The cell of claim 17 or 21, wherein said extracellular portion includes a ligand-binding portion of a receptor, a receptor-binding portion of a ligand, an antigen-binding portion of an antibody, or a functional derivative thereof.
33. Клетка, которая экспрессирует мембранно-связанный, белковоподобный химерный рецептор, включающий в себя (а) внутриклеточную часть тирозин-специфической протеинкиназы и (b) внеклеточную часть, которая обладает способностью специфически распознавать и связывать клетку-мишень или инфекционный агент-мишень. 33. A cell that expresses a membrane-bound, protein-like chimeric receptor comprising (a) an intracellular portion of a tyrosine-specific protein kinase and (b) an extracellular portion that has the ability to specifically recognize and bind a target cell or target infectious agent.
34. Клетка по п. 33, в котором указанная тирозин-специфическая протеинкиназа выбрана из числа членов Syk-семейства. 34. The cell of claim 33, wherein said tyrosine-specific protein kinase is selected from among members of the Syk family.
35. Клетка по п. 33, в котором указанная тирозин-специфическая протеинкиназа выбрана из числа членов Src-семейства. 35. The cell of claim 33, wherein said tyrosine-specific protein kinase is selected from among members of the Src family.
36. Клетка по п. 33, в котором указанная тирозин-специфическая протеинкиназа выбрана из Syk, ZAP-70, Fyn и Lck. 36. The cell of claim 33, wherein said tyrosine-specific protein kinase is selected from Syk, ZAP-70, Fyn, and Lck.
37. ДНК, кодирующая химерный рецептор, кодирующая мембранно-связанный, белковоподобный химерный рецептор, включающий в себя (а) внутриклеточную часть тирозин-специфической протеинкиназы, которая обладает способностью передавать сигнал указанной терапевтической клетке на уничтожение клетки-мишени, связанной с рецептором, или инфекционному агенту-мишени, связанному с рецептором, и (b) внеклеточную часть, которая обладает способностью специфически распознавать и связывать указанную клетку-мишень или указанный инфекционный агент-мишень, причем, каждая из указанных терапевтических клеток обладает способностью специфически распознавать и уничтожать указанную клетку-мишень или инфекционный агент-мишень. 37. DNA encoding a chimeric receptor encoding a membrane-bound, protein-like chimeric receptor comprising (a) an intracellular portion of a tyrosine-specific protein kinase that is capable of transmitting a signal to said therapeutic cell to destroy a target cell associated with the receptor or an infectious a target agent associated with a receptor, and (b) an extracellular portion that has the ability to specifically recognize and bind said target cell or a specified infectious target agent, moreover, each of said therapeutic cells has the ability to specifically recognize and destroy said target cell or target infectious agent.
38. ДНК, кодирующая мембранно-связанный, белковоподобный химерный рецептор, включающий в себя (а) внутриклеточную часть тирозин-специфической протеинкиназы и (b) внеклеточную часть, которая обладает способностью специфически распознавать и связывать клетку-мишень или инфекционный агент-мишень. 38. DNA encoding a membrane-bound, protein-like chimeric receptor comprising (a) an intracellular portion of a tyrosine-specific protein kinase and (b) an extracellular portion that has the ability to specifically recognize and bind a target cell or target infectious agent.
39. Вектор, включающий в себя ДНК химерного рецептора по п. 37. 39. A vector comprising the DNA of a chimeric receptor according to claim 37.
40. Вектор, включающий в себя ДНК химерного рецептора по п. 38. 40. A vector comprising the DNA of a chimeric receptor according to claim 38.