RU2819918C1 - ШТАММ ГРИБА PENICILLIUM VERRUCULOSUM ПРОДУЦЕНТ КОМПЛЕКСА ФИТАЗЫ А И ЭНДО-1,4-β-КСИЛАНАЗЫ Е И ФЕРМЕНТНЫЙ ПРЕПАРАТ НА ЕГО ОСНОВЕ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В КАЧЕСТВЕ ДОБАВКИ В КОРМАХ - Google Patents
ШТАММ ГРИБА PENICILLIUM VERRUCULOSUM ПРОДУЦЕНТ КОМПЛЕКСА ФИТАЗЫ А И ЭНДО-1,4-β-КСИЛАНАЗЫ Е И ФЕРМЕНТНЫЙ ПРЕПАРАТ НА ЕГО ОСНОВЕ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В КАЧЕСТВЕ ДОБАВКИ В КОРМАХ Download PDFInfo
- Publication number
- RU2819918C1 RU2819918C1 RU2023107126A RU2023107126A RU2819918C1 RU 2819918 C1 RU2819918 C1 RU 2819918C1 RU 2023107126 A RU2023107126 A RU 2023107126A RU 2023107126 A RU2023107126 A RU 2023107126A RU 2819918 C1 RU2819918 C1 RU 2819918C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- phyxyl
- xylanase
- phytase
- verruculosum
- feed
- Prior art date
Links
- 108010011619 6-Phytase Proteins 0.000 title claims abstract description 34
- 229940085127 phytase Drugs 0.000 title claims abstract description 32
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 title claims abstract description 24
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 title claims abstract description 24
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 title claims abstract description 24
- 241001516650 Talaromyces verruculosus Species 0.000 title claims abstract description 23
- 108010001817 Endo-1,4-beta Xylanases Proteins 0.000 title claims abstract description 11
- YERABYSOHUZTPQ-UHFFFAOYSA-P endo-1,4-beta-Xylanase Chemical compound C=1C=CC=CC=1C[N+](CC)(CC)CCCNC(C(C=1)=O)=CC(=O)C=1NCCC[N+](CC)(CC)CC1=CC=CC=C1 YERABYSOHUZTPQ-UHFFFAOYSA-P 0.000 title claims abstract description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 7
- 239000000654 additive Substances 0.000 title description 3
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 title description 3
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 claims abstract description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 9
- 241000228172 Penicillium canescens Species 0.000 claims abstract description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract 2
- 108010008885 Cellulose 1,4-beta-Cellobiosidase Proteins 0.000 claims description 5
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims description 5
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims description 5
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 5
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 5
- 235000015099 wheat brans Nutrition 0.000 claims description 5
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 3
- 108010047754 beta-Glucosidase Proteins 0.000 claims description 3
- 102000006995 beta-Glucosidase Human genes 0.000 claims description 3
- 108010089934 carbohydrase Proteins 0.000 claims description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 2
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 claims description 2
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 claims 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims 1
- WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L magnesium sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[O-]S([O-])(=O)=O WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 229940061634 magnesium sulfate heptahydrate Drugs 0.000 claims 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 claims 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 claims 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 24
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 16
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 abstract description 16
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 abstract description 10
- 244000144977 poultry Species 0.000 abstract description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 7
- 235000019621 digestibility Nutrition 0.000 abstract description 5
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 abstract description 5
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 abstract description 5
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 abstract description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 abstract description 3
- 239000008107 starch Substances 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 abstract 1
- 101710121765 Endo-1,4-beta-xylanase Proteins 0.000 description 12
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical group [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 10
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 10
- 235000002949 phytic acid Nutrition 0.000 description 10
- IMQLKJBTEOYOSI-GPIVLXJGSA-N Inositol-hexakisphosphate Chemical class OP(O)(=O)O[C@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H]1OP(O)(O)=O IMQLKJBTEOYOSI-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 9
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 9
- 229940079919 digestives enzyme preparation Drugs 0.000 description 8
- 244000010916 Prunus canescens Species 0.000 description 7
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 7
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 7
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 229920001221 xylan Polymers 0.000 description 6
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 5
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 5
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 150000004823 xylans Chemical class 0.000 description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 4
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 4
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 3
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 description 3
- 235000004977 Brassica sinapistrum Nutrition 0.000 description 3
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 3
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 3
- 229920002488 Hemicellulose Polymers 0.000 description 3
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 3
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 3
- IMQLKJBTEOYOSI-UHFFFAOYSA-N Phytic acid Natural products OP(O)(=O)OC1C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C1OP(O)(O)=O IMQLKJBTEOYOSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000007238 Secale cereale Nutrition 0.000 description 3
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 3
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 3
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 3
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 3
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 3
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 3
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 3
- 238000009374 poultry farming Methods 0.000 description 3
- 229940121649 protein inhibitor Drugs 0.000 description 3
- 239000012268 protein inhibitor Substances 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 2
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 description 2
- 108010031186 Glycoside Hydrolases Proteins 0.000 description 2
- 102000005744 Glycoside Hydrolases Human genes 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 2
- 229920000617 arabinoxylan Polymers 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 244000309464 bull Species 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 2
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N sodium nitrate Chemical compound [Na+].[O-][N+]([O-])=O VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 1-prop-2-ynoxypropan-2-ol Chemical compound CC(O)COCC#C GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- INAPMGSXUVUWAF-QWBQGLJISA-N 1D-myo-inositol 2-phosphate Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O INAPMGSXUVUWAF-QWBQGLJISA-N 0.000 description 1
- 108010080981 3-phytase Proteins 0.000 description 1
- 108010051457 Acid Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 102000013563 Acid Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 101100148259 Actinobacillus pleuropneumoniae apxIIA gene Proteins 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 1
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 1
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- INAPMGSXUVUWAF-UHFFFAOYSA-N D-myo-inositol 2-monophosphate Natural products OC1C(O)C(O)C(OP(O)(O)=O)C(O)C1O INAPMGSXUVUWAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000214 D-xylosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO1)* 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 101000688187 Escherichia coli (strain K12) Phytase AppA Proteins 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 240000000731 Fagus sylvatica Species 0.000 description 1
- 235000010099 Fagus sylvatica Nutrition 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 description 1
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 description 1
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VSOYJNRFGMJBAV-UHFFFAOYSA-N N.[Mo+4] Chemical compound N.[Mo+4] VSOYJNRFGMJBAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000913 Nitrate Reductases Proteins 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 240000004713 Pisum sativum Species 0.000 description 1
- 235000010582 Pisum sativum Nutrition 0.000 description 1
- 241000282849 Ruminantia Species 0.000 description 1
- 241000209056 Secale Species 0.000 description 1
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 1
- 235000019772 Sunflower meal Nutrition 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UGXQOOQUZRUVSS-ZZXKWVIFSA-N [5-[3,5-dihydroxy-2-(1,3,4-trihydroxy-5-oxopentan-2-yl)oxyoxan-4-yl]oxy-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl (e)-3-(4-hydroxyphenyl)prop-2-enoate Chemical compound OC1C(OC(CO)C(O)C(O)C=O)OCC(O)C1OC1C(O)C(O)C(COC(=O)\C=C\C=2C=CC(O)=CC=2)O1 UGXQOOQUZRUVSS-ZZXKWVIFSA-N 0.000 description 1
- FENRSEGZMITUEF-ATTCVCFYSA-E [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].OP(=O)([O-])O[C@@H]1[C@@H](OP(=O)([O-])[O-])[C@H](OP(=O)(O)[O-])[C@H](OP(=O)([O-])[O-])[C@H](OP(=O)(O)[O-])[C@H]1OP(=O)([O-])[O-] Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].OP(=O)([O-])O[C@@H]1[C@@H](OP(=O)([O-])[O-])[C@H](OP(=O)(O)[O-])[C@H](OP(=O)([O-])[O-])[C@H](OP(=O)(O)[O-])[C@H]1OP(=O)([O-])[O-] FENRSEGZMITUEF-ATTCVCFYSA-E 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000002730 additional effect Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N aldehydo-D-glucose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000433 anti-nutritional effect Effects 0.000 description 1
- 101150050411 appA gene Proteins 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 150000004783 arabinoxylans Chemical class 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 230000014461 bone development Effects 0.000 description 1
- 235000012970 cakes Nutrition 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000004464 cereal grain Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 1
- 210000004913 chyme Anatomy 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 235000021255 galacto-oligosaccharides Nutrition 0.000 description 1
- 150000003271 galactooligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 244000005709 gut microbiome Species 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 210000003405 ileum Anatomy 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 1
- 239000012978 lignocellulosic material Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000003050 macronutrient Effects 0.000 description 1
- 235000021073 macronutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 150000002903 organophosphorus compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000012261 overproduction Methods 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 229940068041 phytic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000000467 phytic acid Substances 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940083982 sodium phytate Drugs 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии. Предложен рекомбинантный штамм Penicillium verruculosum PhyXyl-41, депонированный во Всероссийской коллекции микроорганизмов под номером ВКМ F-4896D, предназначенный для продукции гетерологичных высокоактивной фитазы А Aspergillus niger и неингибируемой эндо-1,4-β-ксиланазы E Penicillium canescens. Также предложен способ получения ферментного препарата PhyXyl-41, полученного на основе рекомбинантного штамма Penicillium verruculosum PhyXyl-4. Изобретение обеспечивает улучшение усвояемости питательных веществ кормов, снижение вязкости кормов, содержащих некрахмальные полисахариды злаков, и повышение кормовой ценности рационов для моногастричных животных и птицы. 2 н.п. ф-лы, 1 табл., 2 пр.
Description
Изобретение относится к области сельскохозяйственной биотехнологии, а именно к созданию и производству комплексных высокоэффективных ферментных препаратов (ФП), содержащих высокоактивные термостабильные ферменты. Изобретение может быть использовано в кормовой отрасли в качестве добавки к кормам сельскохозяйственных животных и птицы, например, поросят или кур-бройлеров, ведущей к уменьшению негативного воздействия некрахмальных полисахаридов (НПС) и фитатов кормов на основе зерновых и бобовых.
В состав полисахаридов клеточной стенки растений входят целлюлоза, гемицеллюлозы и пектиновые вещества. Гемицеллюлозы составляют около 20% (по сухой массе) клеточной стенки растений, а содержание пектиновых веществ может достигать 5-12%. Функциональная роль гемицеллюлоз заключается в том, чтобы обеспечивать взаимосвязь основных компонентов клеточной стенки.
Их соотношение и содержание различно в зависимости от вида корма. Арабиноксиланы в большом количестве находятся в пшенице, рапсе, ячмене, кукурузе (около 7%), β-глюканы - в ячмене и овсе (около 4%). Много пектинов содержится в подсолнечнике, рапсе, горохе и сое (около 6%), галактоолигосахаридов - в сое (4%), а также рапсе (3%). Большое количество НПС также содержит рожь. В отдельных растительных продуктах переработки (например, отрубях) содержание НПС может превышать 20%, а в злаковых их содержание колеблется от 5 до 13%.
Попадая в пищеварительный тракт моногастричных животных (поросят и птицы), НПС затрудняют переваривание и всасывание питательных веществ. В итоге образуется застой желеобразной кормовой массы, которая служит субстратом для развития условно-патогенной микрофлоры. НПС, в большом количестве присутствующие во многих кормах, травмируют слизистые кишечника, могут увеличивать вязкость кормовой массы в кишечнике, затрудняя тем самым процессы всасывания питательных веществ. Большое количество сырой клетчатки в корме сроки прохождения пищи в пищеварительном тракте, препятствуя ферментативным процессам, эвакуируя из кишечника полезную микрофлору.
Моногастричные животные, в силу особенностей пищеварения, отличающиеся от жвачных, практически не могут разрушать межклеточные стенки зерновых компонентов, содержащие в своем составе различные НПС, в связи с этим особую актуальность приобретают использование комплексных ферментных добавок в рационах этих видов животных.
Продукты расщепления НПС могут служить пребиотиком и стимулировать развитие и рост полезной микрофлоры. Применение ферментных препаратов снижает вязкость кормовых масс (химуса) в подвздошной кишке, что позволяет животным лучше переваривать жиры, аминокислоты и минеральные компоненты [Jacob J.P., Pescatore A.J. // Annals of Translational Medicine, 2014, Vol.2, No.2. doi: 10.3978/j.issn.2305-5839.2014.01.02.].
Одним из необходимых минеральных веществ для развития здорового организма является фосфор, составляющий основу костной ткани, нуклеиновых кислот, фосфолипидов, молекул-энергоносителей. В зерновых и бобовых растениях около 60-80% общего фосфора находится в форме фитатов - недоступной для питания высших эукариот формой фосфорорганических соединений. Поэтому фосфор является необходимым компонентом комбикормов. Для поддержания здоровья, продуктивности и нормального функционирования организма животных и птицы этот макроэлемент должен поступать с кормом в достаточных количествах. Особенно остро нуждается в фосфоре молодняк, в частности бройлеры. Селекция мясной птицы по скорости роста привела к тому, что развитие костяка отстаёт от формирования мышечной ткани. В связи с этим у цыплят часто отмечаются аномалии ног незаразной этиологии. Однако, фосфор, в виде фитиновой кислоты и ее солей - фитатов, усваивается взрослой птицей на 50, молодняком - на 30 процентов. Кроме того, фитаты связывают положительно заряженные ионы металлов, относящиеся к макро- и микроэлементам (ионы кальция, цинка, железа, марганца, магния), а также белки, аминокислоты и крахмал, снижая их биодоступность. Фитаза не вырабатывается животными организмами, а в растениях её содержится мало, вследствие чего фосфор практически не доступен птице и другим животным [В.Р. Каиров, Н.Ш. Дзигоева // Известия Горского государственного аграрного университета. Т.49, ч.3, Владикавказ, 2012. - С. 119-121.].
Поэтому для удовлетворения потребностей в фосфоре в комбикорма приходится включать дорогостоящие препараты неорганического фосфора [Ленкова Т.Н., Егорова Т.А., Сысоева И.Г., Кривопишина Л.В. Отечественная фитаза // Птицеводство. 2015. №10. С.2-6]. [Синицын, А. Ферментные препараты на основе фитазы [Текст] / А. Синицын, О. Синицына // Птицеводство. - 2005. - №9. - С.35.].
Таким образом, основным способом уменьшения негативного влияния НПС и фитатов кормов является использование экзогенных ферментов, которые будучи включёнными в состав корма дополняют ферментную систему птицы, обеспечивают переваривание и в результате способствуют улучшению использования питательных веществ рациона, а также улучшают здоровье сельскохозяйственных животных и птицы.
Фитаза переводит связанный, неусвояемый фосфор зерна в доступную для усвоения форму, увеличивает доступность энергии, протеина, макро- и микроэлементов из зерновых, жмыхов и шротов.
В условиях рыночной экономики главной задачей сельскохозяйственных предприятий становиться увеличение экономической эффективности производства, повышение продуктивности сельскохозяйственных животных и птицы и снижение ее себестоимости. Успехи, достигнутые в области изучения роли микрофлоры кишечника в гидролизе сложных органических соединений кормов и всасывания их метаболитов через слизистую оболочку кишечника, в формировании и развитии ферментативного звена пищеварительной системы, явились предпосылкой разработки и использования кормовых ферментных препаратов. Поэтому проблема обеспечения промышленного птицеводства высококачественными ферментными препаратами, подходящими для различного состава рациона, является важной прикладной задачей.
Мицелиальный гриб Penicillium verruculosum PV2007 (ВКМ F-3972D) обладает гидролитическим комплексом внеклеточных ферментов, способным к эффективной биоконверсии полисахаридов растительной биомассы, в том числе антипитательной составляющей кормов в виде НПС. В этот комплекс входят целлобиогидролазы, эндоглюканазы и β-глюкозидаза. На основе реципиентного штамма P.verruculosum 537 (ΔniaD) создана экспрессионная система [Патент RU 2378372 С2, опубликовано 10.01.2010, Бюл. №1], что позволяет использовать данный гриб как основу для получения рекомбинантных штаммов - продуцентов ферментов для практического применения в различных областях промышленности и сельского хозяйства [Skomarovsky, A.A., Gusakov, A.V., Okunev, O.N., Solov’eva, I.V., Bubnova, T.V., Kondrat’eva, E.G., Synitsyn, A.P. // Applied Biochemistry and Microbiology. 2005. Vol. 41. P. 182-184; Martins, L.F., Kolling, D., Camassola, M., Dillon, A.J., Ramos, L.P. // Bioresource Technology. 2008. Vol. 99. P. 1417-1424; Gusakov A.V., Sinitsyn A.P. // Biofuels. 2012. Vol. 3(4). P.463-477].
Для кормовой отрасли наиболее востребованы ферменты, действующие при низких значениях рН. К ним относятся фитазы, синтезируемые представителями рода Aspergillus, которые являются промышленными продуцентами многочисленного ряда пищевых микроингредиентов.
Фитаза А А.niger является высокоактивным ферментом, способным осуществлять деструкцию фитата до мио-инозит-2-монофосфата и устойчивым к протеолитической деградации пепсином [Golovan S., Wang G., Zhang J., Forsberg C.W. Characterization and overproduction of the Escherichia coli appA encoded bifunctional enzyme that exhibits both phytase and acid phosphatase activities // Can. J. Microbiol. 2000. V. 46. P. 59-71; Wyss, M., Brugger, R., Kroneneberger, A., Remy, R.,Fimbel, R., Oesterhelt, G., Lehmann, M., and van Loon, A.P.G.M. Biochemical Characterization of Fungal Phytases (myo-Inositol Hexakisphosphate Phosphohydrolases): Catalytic Properties // Appl. Environ. Microbiol. 1999. 65. Р. 367-373.].
Таким образом, наличие фитазы А в комплексе ферментов, секретируемых штаммом P.verruculosum, позволит значительно увеличить биодоступность фосфора и минеральных веществ кормов на основе зерновых культур.
Известно, что эндо-β-1,4-ксиланазы, катализирующие неупорядоченный гидролиз ксилозидных связей между остатками D-ксилозы в основной цепи ксиланов, широко применяются в кормовой промышленности для разрушения НПС злаковых культур, используемых в кормлении моногастричных животных и птицы.
Стоит, однако, отметить, что применяемые на практике ФП ксиланаз не обладают необходимыми свойствами: достаточной термостабильностью, высокой удельной активностью, а также устойчивостью по отношению к белковым ингибиторам злаков (последние оказывают негативное действие на ксиланазы при гидролизе ксиланов, содержащихся в зерне злаков [Гусаков А.В. // Биохимия. 2010. Т. 75. № 10. С. 1331.]).
Обнаружено, что эндо-1,4-β-ксиланаза E P.canescens, принадлежащая 10-й семье гликозид-гидролаз, является весьма перспективным ферментом для использования в качестве добавки к комбикормам на основе злаков, поскольку она устойчива к действию белковых ингибиторов, присутствующих в злаках, таких как рожь, пшеница, ячмень, а также обеспечивает глубокую степень гидролиза арабиноксилана [Ю.А. Денисенко, Д.А. Мерзлов, А.В. Гусаков, А.В. Чекушина, А.П. Синицын. // Сравнительная характеристика ксиланаз XylA И XylE из гриба Penicillium canescens. // Вестн. Моск. Ун-та. Сер. 2. Химия. 2015. Т. 56. № 6. С.348-353, Патент РФ №2653429 С1 от 08.05.2018, Бюл. №13].
В связи с этим, наличие в составе нового ФП термостабильной, неингибируемой ксиланазы, позволит значительно уменьшить вязкость НПС кормов за счёт гидролиза высоковязких растворимых в водной среде ксиланов и уменьшения их степени полимеризации, что приведет к улучшению усвояемости животными питательных веществ кормов на основе пшеницы и ржи, а совместно с фитазой А А.niger позволит эффективно использовать в рационе животных соевые и подсолнечные шроты.
Таким образом, создание нового рекомбинантного штамма P.verruculosum с высоким уровнем экспрессии гетерологичных фитазы А А.niger и эндо-1,4-β-ксиланазы E P.canescens увеличит выход целевых ферментов, способных значительно снизить вязкость НПС и увеличить усвояемость питательных веществ корма, снизив тем самым стоимость конечного продукта.
Техническая задача, на решение которой направлено данное изобретение, состоит в получении комплексных ФП на основе новых штаммов P.verruculosum серии PhyXyl, содержащих гетерологичные гены с увеличенной экспрессией:
Штамм P.verruculosum PhyXyl-41 - (ВКМ-4896D) - продуцент гетерологичных фитазы А A.niger, относящейся к мио-инозит-гексакисфосфат-3(6)фосфогидролазам, (КФ 3.1.3.8, мол. масса 63 кДа) и эндо-1,4-β-ксиланазы Е P.canescens, относящаяся к 10-й семье гликозид-гидролаз (КФ 3.2.1.8, мол. масса 40 кДа) для применения в кормопроизводстве в качестве кормовой добавки для улучшения усвояемости питательных веществ кормов, содержащих зерновые и зернобобовые культуры, пшеничные отруби и шроты за счёт снижения вязкости кормов за счёт деструкции ксиланов и разложения фитатов.
Технический результат от предлагаемого изобретения состоит улучшении усвояемости питательных веществ кормов, снижении вязкости кормов, содержащих НПС злаков и повышении кормовой ценности рационов для сельскохозяйственных моногастричных животных и птицы при обработке корма новым комплексным ФП, содержащим сочетание высокоактивных ферментов как фитазу А A.niger, эндо-1,4-β-ксиланазы Е P.canescens и комплекс сопутствующих карбогидраз P.verruculosum.
Методы определения активности ферментов. В предлагаемом изобретении метод определения фитазной активности основан на скорости образования свободного фосфата при гидролизе фитата Na (из риса). Для определения фитазной активности используют 1,4 мМ раствор фитата Na в 0,1 M Na-ацетатном буфере, рН 5,0. Раствор субстрата (300 мкл) смешивают с 33 мкл раствора фермента и инкубируют 30 мин при 37°С. Реакцию останавливают добавлением 335 мкл 10%-ного раствора ТХУ (трихлоруксусной кислоты). Концентрацию свободного фосфата (Pi) определяют с помощью аммоний-молибденового реагента (13 мМ FeSO4*7H2O/ 8,1 мМ (NH4)6Mo2O24*4H2O/0,533 М H2SO4). Реакционную смесь инкубируют с 665 мкл свежеприготовленного реагента в течение 30 мин при комнатной температуре. Светопоглощение измеряют при 750 нм. Концентрацию Pi определяют исходя из калибровочного графика, полученного с помощью KH2PO4 (0-0,2 г/л). За единицу активности принимают количество фермента, способного высвободить 1 мкмоль Pi в 1 мин [Engelen, A.J., van der Heeft, F., Randsdorp, P.H., and Smit, E.L. (1994) J. AOAC Int., 77, 760-764.].
Для определения ксиланазной активности используют метод, основанный на измерении скорости образования восстанавливающих сахаров (ВС) методом Шомоди-Нельсона при гидролизе полисахаридного субстрата - ксилана из древесины бука. За единицу активности принимают такое количество фермента, которое приводит к образованию 1 мкмоль ВС в минуту при рН 5,0 и 50°C [Синицын А.П., Гусаков А.В., Черноглазов В.А. Биоконверсия лигноцеллюлозных материалов. - М.: МГУ, 1995. - 144 с].
Сущность изобретения заключается в получении нового штамма-продуцента P.verruculosum:
Изобретение заключается в получении нового штамма-продуцента P.verruculosum PhyXyl-41 - (ВКМ-4896D), который обеспечивает получение ФП комплексного действия, включающего высокоактивную гетерологичную фитазу А A.niger и эндо-1,4-β-ксиланазу Е P.canescens и комплекс сопутствующих карбогидраз P.verruculosum. Активность фитазы в КЖ после окончания ферментации в лабораторных ферментёрах составляет 1900 ед/мл по фитату натрия (рН 5,0, 40°С) и 900 ед/мл по ксилану (рН 5,0, 50°С). Комплекс сопутствующих карбогидраз представлен целлобиогидролазой I, целлобиогидролазой II и β-глюкозидазой.
Способ получения ФП предусматривает глубинное культивирование штамма - продуцента P.verruculosum PhyXyl-41 - (ВКМ-4896D) на питательной среде, содержащей МКЦ, пшеничные отруби и кукурузный экстракт, глюкозу и соли с последующей распылительной сушкой КЖ и получении сухого ФП со стандартизованными до 5000 ед/г фитазной и до 3000 ед/г ксиланазной активностями. Применение нового комплексного ФП позволит повысить кормовую ценность рационов на основе зерновых и зернобобовых культур.
Изобретение реализуется следующим образом.
Штамм P.verruculosum PhyXyl-41 - (ВКМ-4896D) получают из исходного штамма P.verruculosum PV2007 (ВКМ F-3972D) путем котрансформации плазмидами pCBHI-PhyAsp, pCBHI-XylE и pSTA10 с последующей селекцией на агаризованной среде с 10 мМ NaNO3. Получение плазмиды pCBHI-XylE описано в патенте RU 2653429.
Штамм P.verruculosum PhyXyl-41 - (ВКМ-4896D) характеризуется теми же культурально-морфологическими признаками, что и описанные выше для штамма P.verruculosum PhyEG-76 - (ВКМ-4895D).
Штамм P.verruculosum PhyXyl-41 - (ВКМ-4896D) отличается от исходного штамма повышенной продукцией фитазы А A.niger и неингибируемой белковыми ингибиторами злаков эндо-1,4-β-ксиланазы Е P.canescens
Новый комплексный ФП, полученный с помощью штамма P.verruculosum PhyXyl-41 - (ВКМ-4896D) обладает улучшенными эксплуатационными характеристиками, что обусловлено наличием в его составе фитазы А A.niger, эндо-1,4-β-ксиланазы Е P.canescens и сопутствующих ферментов целлюлазного комплекса P.verruculosum, что является отличием данного ФП в сравнении с имеющимися на рынке коммерческими аналогами.
Возможность использования изобретения иллюстрируется примерами, которые не ограничивают объем и сущность притязаний, связанных с ними.
Пример 1 . Получение рекомбинантного штамма P.verruculosum PhyXyl-41 - (ВКМ-4896D).
Реципиентный штамм P.verruculosum PV2007 одновременно трансформируют плазмидами pCBHI-PhyAsp и pCBHI-XylE, совместно с плазмидой pSTA10 в соотношении 3:1 (мкг каждой ДНК) по стандартной методике [Sambrook, J., and Russell, D.W. (2001) Molecular cloning:a laboratory manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, N.Y.; A.Y. Aleksenko, N.A. Makarova, I.V. Nikolaev, A.J. Clutterbuck, Integrative and replicative transformation of Penicillium canescens with a heterologous nitrate-reductase gene, Curr. Genet. 28 (1995) 474-478]. В результате трансформации получают более 100 рекомбинантных штаммов (клонов) серии P.verruculosum PhyXyl, из которых в результате первичного скрининга при культивировании в качалочных колбах на стандартной питательной среде отобрано 10 клонов, обладающих высокой фитазной и ксиланазной активностями. Стандартная среда культивирования имела следующий состав (г/л): МКЦ- 40, пшеничные отруби-10, дрожжевой экстракт- 10, KH2PO4- 15, (NH4)2SO4- 5, MgSO4×7H2O- 0,3, CaCl2×2H2O- 0,3.
Фитазная активность в КЖ отобранных при культивировании в качалочных колбах клонов серии PhyXyl варьирует от 100 до 400 ед/мл, а ксиланазная - от 30 до 450 ед/мл. Для дальнейших испытаний отобран клон PhyXyl-41, отличающийся наибольшими целевыми активностями по сравнению с исходным штаммом и другими рекомбинантными штаммами.
Пример 2. Культивирование штамма P.verruculosum PhyXyl-41 - (ВКМ-4896D) в ферментёре, получение сухого ФП PhyXyl-41 и его in vitro кормовые испытания.
Культивирование штамма P.verruculosum PhyXyl-41 - (ВКМ-4896D) проводят в ферментере объемом 3 л, оснащенном барботером для подачи воздуха в аппарат и турбинной мешалкой на среде 1 следующего состава:
Среда 1 (г/л):
Глюкоза - 40
МКЦ - 40
Кукурузный экстракт - 25
Пшеничные отруби - 10
KH2PO4 - 7
(NH4)2SO4 - 5
CaCl2 - 0,3
MgSO4*7H2O - 0,3
Культивирование проводят 144 ч, при рН 4,5-5,0 и 32°С. Образцы КЖ отбирают каждые сутки, начиная с 72 ч культивирования, центрифугируют и измеряют фитазную и ксиланазную активности. В конце ферментации в КЖ активность фитазы составляет 1900 ед/мл, ксиланазы - 900 ед/мл.
По окончании ферментации грибную биомассу удаляют путём центрифугирования (4000 об/мин в течение 20 мин на центрифуге Avanti JXN-26, «Beckman coulter», США), свободную от клеток КЖ концентрируют с помощью ультрафильтрации (с пределом отсечения 10 кДа), ультраконцентрат сушат на распылительной сушилке (Buchi MiniSpray Dryer B-290, «BUCHI Labortechnik», Швейцария, Твх=135°С, Твых=55-65°С, степень аспирации=70%, скорость потока 0,5 л КЖ в час) с получением сухого ФП, который представляет собой светло-бежевый легко растворимый в водной среде порошок.
Таким образом, получают сухой ФП PhyXyl-41 c фитазной активностью 31200 ед/г и ксиланазной активностью 19000 ед/г.
Сухой ФП PhyXyl-41 разбавляют (стандартизуют) кукурузной мукой до 5000 ед/г по фитазной и до 3044 ед/г ксиланазной активности. Разбавленная форма сухого ФП PhyXyl-41 является его конечной формой, которую далее подвергают кормовым испытаниям in vitro. Фитазный ФП Natuphos E 10000, не имеющий никаких дополнительных, кроме фитазной, активностей, используют в роли внутреннего стандарта.
Данные результатов in vitro испытаний ФП PhyXyl-41 и Natuphos E 10000 приведены в таблице 1. Очевидно, что PhyXyl-41 превосходит ФП Natuphos E 10000 по способности гидролизовать фитин, входящий в состав соевой муки в широком диапазоне значений рН. Так, PhyXyl-41 при равной дозировке по фитазной активности при обработке соевой муки обеспечивает при рН 3 в 1,4-2 раза, при рН 5 - в 1,3 раза, при рН 7 - 1,2-2 раза более высокий выход Pi, чем ФП Natuphos E 10000. Таким образом, можно утверждать, что ФП PhyXyl-41 может быть использован в качестве эффективной кормовой добавки.
| Таблица 1. Результаты in vitro кормовых испытаний ферментного препарата PhyXyl-41. | ||||
| Ферментный препарат | Дозировка, ед. фитазной активности на 1 г соевой муки | Выход фосфат-ионов (Pi), % | ||
| pH 3 | рН 5 | рН 7 | ||
| PhyXyl-41 | 75 | 32 | 40 | 12 |
| 100 | 40 | 46 | 14 | |
| 150 | 58 | 65 | 18 | |
| Natuphos E 10000 | 75 | 23 | 31 | 6 |
| 100 | 27 | 35 | 8 | |
| 150 | 29 | 49 | 15 | |
Claims (2)
1. Рекомбинантный штамм Penicillium verruculosum PhyXyl-41, депонированный во Всероссийской коллекции микроорганизмов под номером ВКМ F-4896D, предназначенный для продукции гетерологичных высокоактивной фитазы А Aspergillus niger и неингибируемой эндо-1,4-β-ксиланазы E Penicillium canescens.
2. Способ получения ферментного препарата PhyXyl-41, полученного на основе рекомбинантного штамма Penicillium verruculosum PhyXyl-41 по п.1, при выращивании на ферментационной среде, обеспечивающий получение ферментного препарата комплексного действия, включающего гетерологичные высокоактивную фитазу А Aspergillus niger и неингибируемую эндо-1,4-β-ксиланазу E Penicillium canescens, а также комплекс сопутствующих карбогидраз Penicillium verruculosum, представленный целлобиогидролазой I, целлобиогидролазой II и β-глюкозидазой, и состоящий в культивировании рекомбинантного штамма по п.1, на ферментационной среде, состоящей из (г/л): глюкоза - 40, микрокристаллическая целлюлоза - 40, кукурузный экстракт - 25, пшеничные отруби - 10, дигидрофосфат калия - 7, сульфат аммония - 5, хлорид кальция - 0,3, семиводный сульфат магния - 0,3.
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2022115892A Division RU2810538C2 (ru) | 2022-06-13 | ШТАММ ГРИБА PENICILLIUM VERRUCULOSUM ПРОДУЦЕНТ КОМПЛЕКСА ФИТАЗЫ А И ЭНДО-1,4-β-ГЛЮКАНАЗЫ II И ФЕРМЕНТНЫЙ ПРЕПАРАТ НА ЕГО ОСНОВЕ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В КАЧЕСТВЕ ДОБАВКИ В КОРМАХ |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2819918C1 true RU2819918C1 (ru) | 2024-05-28 |
Family
ID=
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2288267C2 (ru) * | 2004-09-09 | 2006-11-27 | ООО НПК "Фермтек" | Способ получения кормового комплексного ферментного препарата (варианты) и штамм penicillium canescens (варианты) |
| RU2361918C1 (ru) * | 2008-02-26 | 2009-07-20 | Общество с ограниченной ответственностью Научно-производственная компания "Фермтек" | Штамм мицелиального гриба penicillium verruculosum - продуцент комплекса целлюлаз, ксиланазы и ксилоглюканазы и способ получения ферментного препарата комплекса целлюлаз, ксиланазы и ксилоглюканазы для гидролиза целлюлозы и гемицеллюлозы |
| RU2653429C1 (ru) * | 2017-05-10 | 2018-05-08 | Федеральное государственное учреждение "Федеральный исследовательский центр "Фундаментальные основы биотехнологии" Российской академии наук (ФИЦ Биотехнологии РАН) | Генетическая конструкция для обеспечения экспрессии комплекса ферментов эндоглюканаз и ксиланаз в клетках гриба penicillium verruculosum и способ получения комплексных ферментных препаратов на его основе, предназначенных для кормопроизводства |
| RU2711578C1 (ru) * | 2018-08-22 | 2020-01-17 | Федеральное государственное учреждение "Федеральный исследовательский центр "Фундаментальные основы биотехнологии" Российской академии наук (ФИЦ Биотехнологии РАН) | Штамм гриба penicillium verruculosum mx-73 продуцент модифицированной ксиланазы е с повышенной термостабильностью, ферментный препарат на его основе для использования в пищевой и кормовой промышленности и способ его получения |
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2288267C2 (ru) * | 2004-09-09 | 2006-11-27 | ООО НПК "Фермтек" | Способ получения кормового комплексного ферментного препарата (варианты) и штамм penicillium canescens (варианты) |
| RU2361918C1 (ru) * | 2008-02-26 | 2009-07-20 | Общество с ограниченной ответственностью Научно-производственная компания "Фермтек" | Штамм мицелиального гриба penicillium verruculosum - продуцент комплекса целлюлаз, ксиланазы и ксилоглюканазы и способ получения ферментного препарата комплекса целлюлаз, ксиланазы и ксилоглюканазы для гидролиза целлюлозы и гемицеллюлозы |
| RU2653429C1 (ru) * | 2017-05-10 | 2018-05-08 | Федеральное государственное учреждение "Федеральный исследовательский центр "Фундаментальные основы биотехнологии" Российской академии наук (ФИЦ Биотехнологии РАН) | Генетическая конструкция для обеспечения экспрессии комплекса ферментов эндоглюканаз и ксиланаз в клетках гриба penicillium verruculosum и способ получения комплексных ферментных препаратов на его основе, предназначенных для кормопроизводства |
| RU2711578C1 (ru) * | 2018-08-22 | 2020-01-17 | Федеральное государственное учреждение "Федеральный исследовательский центр "Фундаментальные основы биотехнологии" Российской академии наук (ФИЦ Биотехнологии РАН) | Штамм гриба penicillium verruculosum mx-73 продуцент модифицированной ксиланазы е с повышенной термостабильностью, ферментный препарат на его основе для использования в пищевой и кормовой промышленности и способ его получения |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| DOTSENKO A. ET AL. Enhancement of activity and thermostability of Aspergillus niger ATCC 10864 phytase A through rational design. Biochemical and Biophysical Research Communications, Volume 634, 2022, Pages 55-61, doi.org/10.1016/j.bbrc.2022.10.010. Найдено онлайн: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0006291X2201395X Дата обращения 15.09.2023. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Godoy et al. | Agricultural residues as animal feed: protein enrichment and detoxification using solid-state fermentation | |
| RU2261910C2 (ru) | ШТАММ Penicillium funiculosum, ПРОДУЦИРУЮЩИИЙ КОМПЛЕКС ФЕРМЕНТОВ - ЦЕЛЛЮЛАЗУ, ЭНДО-1,4-β-КСИЛАНАЗУ, ЦЕЛЛОБИОГИДРОЛАЗУ, β-ГЛЮКОЗИДАЗУ, ЭНДО-1,3(4)- β-ГЛЮКАНАЗУ, ФЕРУЛОИЛ-ЭСТЕРАЗУ, ЖИДКАЯ КОРМОВАЯ ДОБАВКА И СУХОЙ КОРМ ДЛЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ | |
| AU2015208030A1 (en) | Use of an enzymatic composition in the feed of ruminants | |
| CN111372464B (zh) | 用于产生瘤胃微生物区系的倍增剂和调节剂添加剂的程序 | |
| US20160158326A1 (en) | Methods and feed supplements for improving nutrition intake of meat-type poultries | |
| Imran et al. | Role of enzymes in animal nutrition: a review | |
| Chen et al. | Optimization of multi-enzyme production by fungi isolated from palm kernel expeller using response surface methodology. | |
| Dahiya et al. | Enhanced endoxylanase production by Myceliophthora thermophila using rice straw and its synergism with phytase in improving nutrition | |
| US6558693B1 (en) | Animal feed additives | |
| de Oliveira Simas et al. | Production of Phytase, Protease and Xylanase by Aspergillus niveus with Rice Husk as a Carbon Source and Application of the Enzymes in Animal Feed | |
| RU2819918C1 (ru) | ШТАММ ГРИБА PENICILLIUM VERRUCULOSUM ПРОДУЦЕНТ КОМПЛЕКСА ФИТАЗЫ А И ЭНДО-1,4-β-КСИЛАНАЗЫ Е И ФЕРМЕНТНЫЙ ПРЕПАРАТ НА ЕГО ОСНОВЕ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В КАЧЕСТВЕ ДОБАВКИ В КОРМАХ | |
| Singh et al. | Feed enzymes: source and applications | |
| KR101288314B1 (ko) | 셀룰라아제를 생산하는 페니실리움 종 ｇｄｘ01 균주 및 이의 용도 | |
| RU2810538C2 (ru) | ШТАММ ГРИБА PENICILLIUM VERRUCULOSUM ПРОДУЦЕНТ КОМПЛЕКСА ФИТАЗЫ А И ЭНДО-1,4-β-ГЛЮКАНАЗЫ II И ФЕРМЕНТНЫЙ ПРЕПАРАТ НА ЕГО ОСНОВЕ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В КАЧЕСТВЕ ДОБАВКИ В КОРМАХ | |
| Sinitsyn et al. | Construction of recombinant producers of enzyme preparations for feed production with an expression system based on Penicillium verruculosum fungus | |
| RU2696036C1 (ru) | Штамм гриба penicillium verruculosum ее-105 продуцент комплекса высокоэффективных эндоглюканаз и ферментный препарат на его основе для использования в качестве кормовой добавки в зерновых кормах | |
| RU2170253C1 (ru) | Мультиэнзимная композиция для животноводства | |
| RU2117703C1 (ru) | Мультиэнзимная композиция для животноводства | |
| KR101337406B1 (ko) | 반추위 내용물을 포함하는 배지조성물 및 그 용도 | |
| Nava-Reyna et al. | Potential of Agro-Food Residues to Produce Enzymes for Animal Nutrition | |
| Pierce et al. | Nutrition and gut microbiology: redirecting nutrients from the microbes to the host animal with SSF | |
| WO2020261164A1 (en) | Xylanase additives for food or feeds | |
| Cho et al. | Effective conditions of moisture content, inoculum rate, and medium composition for the production of cellulase, amylase, and xylanase by fermentation of slaughterhouse rumen contents. | |
| Vardan | Role of Enzymes in Animal Nutrition: A Review | |
| MXPA98003507A (en) | Food additives for anima |