RU2819659C1

RU2819659C1 - Method of producing a lyophilized product from hydrolysates of bivalve molluscs

Info

Publication number: RU2819659C1
Application number: RU2024101158A
Authority: RU
Inventors: Николай Алексеевич Голубь; Виталий Иванович Рябушко; Лариса Леонидовна Капранова; Юлия Дмитриевна Дикарева; Юлия Васильевна Баландина
Filing date: 2024-01-17
Publication date: 2024-05-22

Abstract

FIELD: biotechnology.

SUBSTANCE: invention relates to biotechnology and can be used to produce biologically active additives and products for therapeutic purposes. Method involves preparation of raw materials, milling of molluscs, filtration, evaporation and freeze drying. Method includes hydrolysis of raw material from bivalve molluscs, using as raw material anadara, scallops or mussels, with further evaporation of the obtained hydrolysate under vacuum at from minus 800 to minus 900 mbar at temperature of 80 °C to content of dry dissolved substances in hydrolysate of not more than 15 %. After that, the obtained hydrolysate samples are frozen in the ice maker chamber of the freeze dryer at minus 60 °C for 3–4 hours in trays for lyophilization with layer of 4–8 mm, maintained at temperature not higher than minus 45 °C for 12 hours. Annealing is carried out at a temperature of minus 20 °C for 3 hours, then cooled again to minus 45 °C for 2 hours and ice is sublimated with heated shelf from minus 35 to 20 °C for 14–16 hours at vacuum of 1–5 Pa. Then, a desorption step is carried out at a shelf temperature of 30–40 °C and vacuum of 10–15 Pa for 6–10 hours to obtain a preparation with residual moisture content of not more than 10 %.

EFFECT: invention enables to obtain a lyophilisate of protein hydrolysates from bivalve molluscs and increase its storage life.

3 cl, 3 tbl, 3 ex

Description

Изобретение относится к области биотехнологии, а точнее к способам получения лиофилизированных белковых гидролизатов из морских двустворчатых моллюсков, которые могут быть использованы в качестве биологически активных добавок и продуктов лечебно-профилактического назначения или для изготовления функциональных продуктов в пищевой промышленности.The invention relates to the field of biotechnology, and more precisely to methods for producing lyophilized protein hydrolysates from marine bivalve mollusks, which can be used as biologically active additives and products for therapeutic and prophylactic purposes or for the manufacture of functional products in the food industry.

Большинство продуктов в их естественном состоянии плохо поддаются длительному хранению. Посредством лиофилизации биологические субстанции, лекарственные средства и пищевые продукты можно сохранять на длительный срок. Особенно это относится к таким термически нестабильным органическим веществам, как белки и пептиды. [1].Most products in their natural state do not lend themselves well to long-term storage. Through lyophilization, biological substances, medicines and food products can be preserved for a long time. This especially applies to thermally unstable organic substances such as proteins and peptides. [1].

Оптимизация процесса лиофилизации требует решения наиболее частых технологических проблем, таких как разрушение первичной структуры лиофилизата (коллапс) и возникновение обратного плавления, и рационализации подходов к совершенствованию каждого этапа цикла лиофилизации (замораживанию, первичной и вторичной сушки, иногда перед первичной сушкой проводится дополнительный этап - отжиг, или термоциклирование) [2].Optimization of the lyophilization process requires solving the most common technological problems, such as destruction of the primary structure of the lyophilisate (collapse) and the occurrence of reverse melting, and rationalizing approaches to improving each stage of the lyophilization cycle (freezing, primary and secondary drying, sometimes an additional stage is carried out before primary drying - annealing , or thermal cycling) [2].

Известен способ получения лиофилизированного препарата кровь гемолизированная [Пат. 2455014, РФ, МПК A61K 35/14, G01N 33/48, 2012], где в дефибринированную кровь добавляют дистиллированную воду в соотношении 1:9 (одна часть крови + восемь частей дистиллированной воды) с последующим введением в качестве вещества-наполнителя раствора натрия хлорида в объеме, равном объему дефибринированной крови, до конечной концентрации 0,15 моль/л. Полученный полуфабрикат крови гемолизированной центрифугируют при 4000 g в центрифуге с бакет-ротором с охлаждением до 4-8°С в течение 30 мин и стерилизуют фильтрацией через мембранные или керамические фильтры с размером пор 0,2 мкм. Полученный фильтрат крови гемолизированной разливают по 2 мл в стерильные ампулы, охлаждают до температуры -(45±5)°С и промораживают. Затем препарат подвергают лиофилизации в течение 24 часов до конечной температуры материала 25°С, при этом стадия сублимации в среднем составляет - 14 часов, десорбции - 10 часов. Охлаждение возможно осуществлять в быстром или медленном режиме. При быстром режиме препарат охлаждают до -(45±5)°С в течение 3-4 часов, при медленном режиме - в течение 12 часов. Общее время криостабилизации крови гемолизированной, включающее охлаждение и промораживание, для обоих режимов составляет 18-20 часов. Недостатком способа является то, что он разработан для белков крови и содержания низкой концентрации натрия хлорида, которая не препятствуют стеклованию биопрепарата на этапе охлаждения и криостабилизации, а также не сталкивается с проблемой фазового расслоения препарата.There is a known method for producing a lyophilized drug, hemolyzed blood [Pat. 2455014, RF, IPC A61K 35/14, G01N 33/48, 2012], where distilled water is added to defibrinated blood in a ratio of 1:9 (one part of blood + eight parts of distilled water), followed by the introduction of sodium solution as a filler substance chloride in a volume equal to the volume of defibrinated blood, to a final concentration of 0.15 mol/l. The resulting semi-finished hemolyzed blood product is centrifuged at 4000 g in a centrifuge with a bucket rotor, cooled to 4-8°C for 30 minutes and sterilized by filtration through membrane or ceramic filters with a pore size of 0.2 microns. The resulting hemolyzed blood filtrate is poured into 2 ml ampoules, cooled to a temperature of -(45±5)°C and frozen. Then the preparation is subjected to lyophilization for 24 hours to a final material temperature of 25°C, while the sublimation stage averages 14 hours, desorption - 10 hours. Cooling can be carried out in fast or slow mode. In fast mode, the drug is cooled to -(45±5)°C for 3-4 hours, in slow mode - for 12 hours. The total cryostabilization time for hemolyzed blood, including cooling and freezing, for both modes is 18-20 hours. The disadvantage of this method is that it is designed for blood proteins and a low concentration of sodium chloride, which does not interfere with the glass transition of the biological product at the stage of cooling and cryostabilization, and also does not face the problem of phase separation of the drug.

Известен способ лиофильной сушки биопрепаратов [Пат. 2111426 С1, РФ, МПК F26B 5/06, 1998]. Способ позволяет проводить лиофилизацию материалов с низкой температурой коллапса (-30°С и ниже) при более высоких температурах лиофильной сушки. Способ включает введение в раствор биопрепарата перед сушкой защитной среды с последующим замораживанием полученной смеси и вакуумной сушкой. В состав защитной среды дополнительно вводят вещество-наполнитель, кристаллизующееся при замораживании его разбавленного водного раствора, в концентрации, достаточной для формирования аморфно- кристаллической структуры в объеме жидкой фазы биопрепарата, остающейся после кристаллизации воды. Предварительно перед сушкой приготавливают пробные образцы биопрепарата с защитной средой или одну защитную среду с разной концентрацией вещества-наполнителя, с последующим проведением термического или рентгенофазового анализа, или пробной лиофилизации при температуре сушки, равной или выше температуры коллапса исходного биопрепарата, а концентрацию вещества-наполнителя выбирают равной или более концентрации вещества-наполнителя в пробном образце биопрепарата, кривая термического или рентгенофазового анализа которого содержит дополнительный пик по сравнению с аналогичной кривой термического или рентгенофазового анализа образца исходного биопрепарата, или равной или более концентрации вещества-наполнителя в пробном образце биопрепарата, показывающем наличие таблетки после лиофилизации. В качестве вещества-наполнителя используют хлорид натрия или хлорид калия, или глицин. Недостатком данного способа является необходимость введения дополнительных количеств солей или других стабилизирующих веществ в конечный продукт, а также использование сложных методов контроля структуры лиофилизата и процесса сушки.There is a known method of freeze-drying biological products [Pat. 2111426 C1, RF, IPC F26B 5/06, 1998]. The method allows for lyophilization of materials with a low collapse temperature (-30°C and below) at higher freeze-drying temperatures. The method involves introducing a protective medium into a solution of a biological product before drying, followed by freezing the resulting mixture and vacuum drying. A filler substance is additionally introduced into the protective medium, which crystallizes when its dilute aqueous solution is frozen, in a concentration sufficient to form an amorphous-crystalline structure in the volume of the liquid phase of the biological product remaining after water crystallization. Before drying, test samples of the biological product with a protective medium or one protective medium with different concentrations of the filler substance are prepared, followed by thermal or X-ray phase analysis, or test lyophilization at a drying temperature equal to or higher than the collapse temperature of the original biological product, and the concentration of the filler substance is selected equal to or greater than the concentration of an excipient in a test sample of a biological product, the thermal or x-ray phase analysis curve of which contains an additional peak compared to a similar thermal or x-ray phase analysis curve of a sample of the original biological product, or equal to or more than the concentration of an excipient in a test sample of a biological product indicating the presence of a tablet after lyophilization. Sodium chloride or potassium chloride, or glycine are used as filler substances. The disadvantage of this method is the need to introduce additional amounts of salts or other stabilizing substances into the final product, as well as the use of complex methods for controlling the structure of the lyophilisate and the drying process.

Известен способ лиофильной сушки биопрепарата (см. пат. 2261623, Российская Федерация, МПК A23L 1/03, 2004 г.), предусматривающий введение в раствор гидролизата наполнителя для эффективного промерзания всего продукта в процессе замораживания. В качестве растворов биопрепаратов используют гидролизат из мидий «МИГИ-К ЛП», гидролизат из мяса рапаны «Рапанин», гидролизат из морского гребешка и другие. В качестве наполнителя используют нейтральные полисахариды - крахмал, метилцеллюлозу или пектины в количестве от 5-40% к массе гидролизатов из морских гидробионтов. Смесь перемешивают и разливают в емкости высотой слоя 8-10 мм, замораживание проводят при температуре -40-45°С и выдерживают при этих температурах в течение 4-10 ч. Сушку ведут до содержания сухих веществ 90-94%, а после сушки препарат измельчают.There is a known method for freeze-drying a biological product (see patent 2261623, Russian Federation, IPC A23L 1/03, 2004), which involves introducing a filler into the hydrolyzate solution for effective freezing of the entire product during the freezing process. Hydrolyzate from mussels “MIGI-K LP”, hydrolyzate from rapana meat “Rapanin”, hydrolyzate from scallop and others are used as solutions of biological products. Neutral polysaccharides - starch, methylcellulose or pectins are used as a filler in an amount of 5-40% by weight of hydrolysates from marine aquatic organisms. The mixture is stirred and poured into containers with a layer height of 8-10 mm, freezing is carried out at a temperature of -40-45 ° C and maintained at these temperatures for 4-10 hours. Drying is carried out until the dry matter content is 90-94%, and after drying the preparation crushed.

Гидролизаты из морских гидробионтов содержат от 10-15% соли, это обстоятельство сдерживает процесс замораживания. При минус 40°С происходит фазовое расслоение, что затрудняет лиофильную сушку. Ведение в гидролизат нейтрального полисахарида повышает температуру замерзания раствора, продукт промерзает по всему объему. Нейтральные полисахариды являются сорбентом для солей хлористого натрия и хлористого калия. Недостатком способа является то, что в процессе получения требуется введение полисахаридов для криостабилизации гидролизатов гидробионтов, а также использованием кислотного и кислотно-ферментативного гидролиза, что приводит к высокому содержанию поваренной соли в конечном продукте.Hydrolysates from marine hydrobionts contain 10-15% salt; this circumstance inhibits the freezing process. At minus 40°C, phase separation occurs, which makes freeze drying difficult. Adding a neutral polysaccharide to the hydrolyzate increases the freezing point of the solution, and the product freezes throughout the entire volume. Neutral polysaccharides are a sorbent for sodium chloride and potassium chloride salts. The disadvantage of this method is that the production process requires the introduction of polysaccharides for cryostabilization of hydrolysates of hydrobionts, as well as the use of acid and acid-enzymatic hydrolysis, which leads to a high content of sodium chloride in the final product.

Наиболее близким по технической сущности является способ получения биопрепаратов в сухой форме из гидролизатов гидробионтов [Пат. 2704829 С1, РФ, МПК A61K 35/618, 2019], включающей подготовку препарата, замораживание смеси при температуре минус 40°С и выдерживание полученной смеси, а также сушку и последующие таблетирование и капсулирование сухого препарата, предусматривающий получение композиций различных гидролизатов. Так, например, используют композицию гидролизатов, состоящую из мидийного щелочного гидролизата и кислотного гидролизата из рапаны. Указанную композицию разбавляют дистиллированной водой до содержания сухих веществ 5-10% и автоклавируют при температуре +114°С в течение 30 минут. Затем в камере сублимационной сушилки замораживают смесь в течение 2-3 часов и выдерживают, повышая температуру до минус 30°С в течение 16-20 часов. Для сушки продукта повышают температуру до +40°С при вакууме 9-11 мм рт.ст. в течение 20-24 часов, после чего досушивают продукт при указанной температуре в течение 8-12 ч. до содержания сухих веществ 92-94%. Недостатком способа является длительность процесса, как замораживания, так и отжига при достаточно низкой температуре - минус 30°С, а для преодоления фазового расслоения препарата используется дополнительно стадия разведения целевого продукта и его дополнительная термическая обработка для предотвращения бактериальной контаминации.The closest in technical essence is the method of obtaining biological products in dry form from hydrolysates of hydrobionts [Pat. 2704829 C1, RF, IPC A61K 35/618, 2019], including preparing the drug, freezing the mixture at a temperature of minus 40 ° C and keeping the resulting mixture, as well as drying and subsequent tableting and encapsulation of the dry drug, providing for the preparation of compositions of various hydrolysates. For example, a composition of hydrolysates is used, consisting of alkaline mussel hydrolyzate and acid hydrolyzate from rapana. The specified composition is diluted with distilled water to a dry matter content of 5-10% and autoclaved at a temperature of +114°C for 30 minutes. Then the mixture is frozen in the freeze dryer chamber for 2-3 hours and kept, raising the temperature to minus 30°C for 16-20 hours. To dry the product, raise the temperature to +40°C at a vacuum of 9-11 mm Hg. for 20-24 hours, after which the product is dried at the specified temperature for 8-12 hours until the dry matter content is 92-94%. The disadvantage of this method is the duration of the process, both freezing and annealing at a fairly low temperature - minus 30°C, and to overcome the phase separation of the drug, an additional stage of dilution of the target product and its additional heat treatment are used to prevent bacterial contamination.

Задачей изобретения является разработка технологии получения лиофилизатов из белковых гидролизатов двустворчатых моллюсков, получаемых щелочным/кислотным гидролизом, без введения дополнительных веществ, с заменой на стадии гидролиза/нейтрализации реагента соляной кислоты на лимонную кислоту, и общим снижением концентрации солей в препарате до 4-12%.The objective of the invention is to develop a technology for producing lyophilisates from protein hydrolysates of bivalve mollusks obtained by alkaline/acid hydrolysis, without introducing additional substances, with the replacement of the hydrochloric acid reagent at the stage of hydrolysis/neutralization with citric acid, and a general reduction in the concentration of salts in the preparation to 4-12% .

Техническим результатом от решения поставленной задачи является то, что разработанная технология позволяет получить лиофилизат белковых гидролизатов из двустворчатых моллюсков без использования дополнительных компонентов, с содержанием соли в виде цитрата натрия не более 4-12%. Техническим результатом также является ускорение процесса сушки и увеличение срока хранения белковых гидролизатов из двустворчатых моллюсков с низким содержанием поваренной соли.The technical result of solving the problem is that the developed technology makes it possible to obtain a lyophilisate of protein hydrolysates from bivalve mollusks without the use of additional components, with a salt content in the form of sodium citrate of no more than 4-12%. The technical result also is to accelerate the drying process and increase the shelf life of protein hydrolysates from bivalves with low sodium content.

Для решения поставленной технической задачи изобретения предложен Способ получения лиофилизированного продукта из гидролизатов двустворчатых моллюсков, включающий подготовку сырья, измельчение моллюсков, фильтрование, упаривание, лиофильную сушку. В способе проводят гидролиз сырья из двустворчатых моллюсков, используя в качестве сырья анадар, гребешков или мидий, с дальнейшим упариванием полученного гидролизата под вакуумом при от минус 800 мбар до минус 900 мбар при температуре 80°С до содержания в гидролизате сухих растворенных веществ не более 15%. После этого полученные образцы гидролизатов замораживают в камере ледогенератора лиофильной сушилки при минус 60°С в течение 3-4 часов в поддонах для лиофилизации слоем 4-8 мм, выдерживают при температуре не выше минус 45°С в течение 12 часов. Отжиг проводят при температуре минус 20°С течение 3 часов, после чего снова охлаждают до минус 45°С в течение 2 часов и проводят сублимацию льда с подогревом полки от минус 35°С до 20°С в течение 14-16 часов при вакууме 1-5 Па. Затем проводят стадию десорбции при температуре полок от 30-40°С и вакууме 10-15 Па в течение 6-10 часов до получения препарата с остаточной влажностью не более 10%. Кроме того, в способе для получения гидролизата из мидий и анадар, взятых вместе с раковинами и интерстициальной жидкостью, применяют щелочной гидролиз путем добавления 40%-ного раствора NaOH при постоянном перемешивании в течение 180 мин с постепенным повышением температуры от 80°С до 95°С, после чего в отфильтрованный гидролизат добавляют 25%-ный раствор лимонной кислоты до рН 5,69 и содержания сухих растворенных веществ 5,2-5,9%. И наконец, что для получения гидролизата мягких тканей гребешка, отделенных от створки, применяют кислотный гидролиз путем добавления к массе мягких тканей в соотношении 1:1, нагретого до 60°С, 24%-ного раствора лимонной кислоты, который ведут в течение 16 часов при постепенном повышении температуры от 60°С до 95°С, затем полученный гидролизат отфильтровывают и охлаждают до комнатной температуры с последующей нейтрализацией 40%-ным раствором NaOH до рН 5,89 и содержания сухих веществ 4,8%.To solve the technical problem of the invention, a method for obtaining a lyophilized product from hydrolysates of bivalve mollusks is proposed, including preparation of raw materials, grinding of mollusks, filtering, evaporation, and freeze-drying. The method involves hydrolysis of raw materials from bivalve mollusks, using anadara, scallops or mussels as raw materials, with further evaporation of the resulting hydrolyzate under vacuum at from minus 800 mbar to minus 900 mbar at a temperature of 80°C until the content of dry dissolved substances in the hydrolyzate is no more than 15 %. After this, the resulting samples of hydrolysates are frozen in the ice maker chamber of a freeze dryer at minus 60°C for 3-4 hours in lyophilization trays in a layer of 4-8 mm, and kept at a temperature not higher than minus 45°C for 12 hours. Annealing is carried out at a temperature of minus 20°C for 3 hours, after which it is again cooled to minus 45°C for 2 hours and ice is sublimated with heating of the shelf from minus 35°C to 20°C for 14-16 hours at vacuum 1 -5 Pa. Then the desorption stage is carried out at a shelf temperature of 30-40°C and a vacuum of 10-15 Pa for 6-10 hours until a preparation with a residual moisture content of no more than 10% is obtained. In addition, in the method for obtaining hydrolyzate from mussels and anadara, taken together with shells and interstitial fluid, alkaline hydrolysis is used by adding a 40% NaOH solution with constant stirring for 180 minutes with a gradual increase in temperature from 80°C to 95°C C, after which a 25% solution of citric acid is added to the filtered hydrolyzate until the pH is 5.69 and the content of dry dissolved substances is 5.2-5.9%. And finally, to obtain a hydrolyzate of scallop soft tissues separated from the valve, acid hydrolysis is used by adding a 24% solution of citric acid to the mass of soft tissues in a 1:1 ratio, heated to 60°C, which is carried out for 16 hours with a gradual increase in temperature from 60°C to 95°C, then the resulting hydrolyzate is filtered and cooled to room temperature, followed by neutralization with a 40% NaOH solution to a pH of 5.89 and a solids content of 4.8%.

Общим с прототипом является использование гидролизатов гидробионтов, упаривание, замораживание и сушка под вакуумом.Common to the prototype is the use of hydrolysates of hydrobionts, evaporation, freezing and drying under vacuum.

Новым является то, что лиофилизации подвергают гидролизаты из мидий и анадар, взятых вместе с раковинами и интерстициальной жидкостью, а также гидролизат из мягких тканей гребешка. Новым является то, что гидролизаты из мидий, анадар выполняют, применяя щелочной гидролиз, а для получения гидролизата из мягких тканей гребешка применяют кислотный гидролиз. Новым в заявляемом способе является упаривание гидролизатов до содержания сухих веществ 13-15% и содержания соли в пересчете на цитрат натрия не более 4-12%, замораживание проводят при температуре камеры минус 60°С до достижения образцом температуры не менее минус 45°С течение 3-4 часов выдерживании при этой температуре в течение 10-12 часов, проведении отжига в течение 3 часов при температуре минус 20°С и последующем охлаждении до минус 45°С в течение 2 часов, проведении сублимационной стадии сушки в течение 12-14 часов при вакууме 1-5 Па и температуре полки от минус 35°С до 20°С и стадии десорбции в течение 6-12 часов при повышении температуры полки от 30 до 40°С, что позволяет достичь остаточной влажности не более 10%.What is new is that hydrolysates from mussels and anadars, taken together with shells and interstitial fluid, as well as hydrolysates from scallop soft tissues are subjected to lyophilization. What is new is that hydrolysates from mussels and anadar are performed using alkaline hydrolysis, and acid hydrolysis is used to obtain hydrolysates from soft tissues of scallops. What is new in the proposed method is the evaporation of hydrolysates to a dry matter content of 13-15% and a salt content in terms of sodium citrate of no more than 4-12%; freezing is carried out at a chamber temperature of minus 60°C until the sample reaches a temperature of at least minus 45°C. 3-4 hours of maintaining at this temperature for 10-12 hours, annealing for 3 hours at a temperature of minus 20°C and subsequent cooling to minus 45°C for 2 hours, carrying out the sublimation drying stage for 12-14 hours at a vacuum of 1-5 Pa and a shelf temperature from minus 35°C to 20°C and a desorption stage for 6-12 hours with an increase in shelf temperature from 30 to 40°C, which allows achieving a residual humidity of no more than 10%.

В заявляемом способе авторами экспериментальным путем установлены последовательность операций, конкретные условия проведения каждой операции и средства, с помощью которых технология реализуется. Количественные значения являются оптимальными, позволяющими достигнуть заявленный технический результат.In the proposed method, the authors experimentally established the sequence of operations, the specific conditions for carrying out each operation and the means by which the technology is implemented. Quantitative values are optimal, allowing to achieve the stated technical result.

Существенные признаки, характеризующие изобретение, включая отличительные от прототипа и совокупность признаков, обеспечивающих получение заявляемого технического результата, следующие:The essential features characterizing the invention, including those that are distinctive from the prototype and the set of features that ensure the achievement of the claimed technical result, are as follows:

- использование сырья из анадар, гребешков или мидий, добытых промысловым способом и/или при переборке мидийных или устричных коллекторов морских ферм из Черного и/или Азовского морей. Выбранное сырье широко распространено в указанных районах и не имеет количественных ограничений, препятствующих промышленному применению;- the use of raw materials from anadars, scallops or mussels obtained commercially and/or during the overhaul of mussel or oyster collectors of sea farms from the Black and/or Azov Seas. The selected raw materials are widely distributed in the indicated areas and have no quantitative restrictions that prevent industrial use;

- проведение щелочного гидролиза моллюсков вместе со створкой способствует более полному использованию исходного сырья и упрощению отделения мягких тканей, а также снижению энерго-/трудо-/затрат на получение конечного продукта;- carrying out alkaline hydrolysis of mollusks together with the shell contributes to a more complete use of raw materials and simplifies the separation of soft tissues, as well as reducing energy/labor/costs for obtaining the final product;

- применение лимонной кислоты для нейтрализации или гидролиза с целью замены минеральной кислоты, например, соляной кислоты, и снижения содержания в целевом продукте поваренной соли и образования в процессе нейтрализации цитрата натрия позволяет применить в технологии более экономичные режимы. Так как цитрат натрия имеет температуру стеклования минус 41°С, а криогидратная точка полученных гидролизатов лежит в пределах минус 35°С-минус 40°С, что позволяет проводить отжиг при температурах от минус 20 до минус 30°С, а сушку препарата при температуре сушки, равной или выше температуры коллапса исходного биопрепарата.- the use of citric acid for neutralization or hydrolysis in order to replace mineral acid, for example, hydrochloric acid, and reduce the content of table salt in the target product and the formation of sodium citrate during the neutralization process allows the use of more economical modes in the technology. Since sodium citrate has a glass transition temperature of minus 41°C, and the cryohydrate point of the resulting hydrolysates lies within the range of minus 35°C - minus 40°C, which allows annealing at temperatures from minus 20 to minus 30°C, and drying of the drug at drying equal to or higher than the collapse temperature of the original biological product.

- проведение замораживания гидролизатов при температуре минус 60°С в течение 3-4 часов;- freezing hydrolysates at a temperature of minus 60°C for 3-4 hours;

- снижение температуры отжига до минус 20°С, что выше температуры коллапса исходного препарата, с последующим охлаждением до минус 45°С, для увеличения размера кристаллов льда;- reducing the annealing temperature to minus 20°C, which is higher than the collapse temperature of the original preparation, followed by cooling to minus 45°C to increase the size of ice crystals;

- проведение сублимационной стадии сушки при температурах равных или выше температуры коллапса исходного препарата при вакууме 1-5 Па;- carrying out the sublimation drying stage at temperatures equal to or higher than the collapse temperature of the original drug in a vacuum of 1-5 Pa;

- проведение стадии десорбции при температуре 30÷40°С.- carrying out the desorption stage at a temperature of 30÷40°C.

Проведенный анализ уровня техники позволил установить, что по совокупности отличительных признаков описываемого способа не обнаружен источник, характеризующийся признаками, тождественными всем существенным признакам заявленного изобретения, что позволяет сделать вывод о соответствии изобретения критерию «новизна».The analysis of the level of technology allowed us to establish that, based on the totality of the distinctive features of the described method, a source was not found that is characterized by features identical to all the essential features of the claimed invention, which allows us to conclude that the invention complies with the “novelty” criterion.

Патентные исследования и изучение научных публикаций по теме изобретения не обнаружили решений, имеющих сходства с заявляемым способом, что позволило сделать вывод о соответствии критерию «изобретательский уровень». Критерий патентоспособности «промышленная применимость» подтверждается тем, что изобретение может быть осуществлено с помощью средств и методов, приведенных в примерах реализации способа.Patent research and the study of scientific publications on the topic of the invention did not reveal solutions that are similar to the claimed method, which allowed us to conclude that it meets the “inventive step” criterion. The patentability criterion of “industrial applicability” is confirmed by the fact that the invention can be implemented using the means and methods given in the examples of method implementation.

Сущность изобретения поясняется описанием.The essence of the invention is illustrated by the description.

Особенности химического состава двустворчатых моллюсков позволяют использовать их в качестве сырья для получения биологически активных добавок к пище на основе лиофилизатов из гидролизатов и/или их композиций и добавок лечебно-профилактического действия в пищевой промышленности. Переработка со створкой значительно сокращает время переработки исходного сырья, без потери таких компонентов, как гемолимфа и свободные аминокислоты в ней, особенно, у анадары с прочной створкой. В дополнение, в качестве сырья могут быть использованы мягкие ткани после отделения товарной части - ноги, т.е. будут утилизироваться отходы товарного производства. Аналогично и для гребешка, только у него более тонкая и легко отделяемая раковина, а поскольку мягкие ткани будут отделены от створки, то кислотный гидролиз даст более приятный по органолептическим показателям продукт. Содержание свободных аминокислот в двустворчатых моллюсках колеблется от наименьших значений у анадары - 818 до максимальных у гребешка - 1810,58 мг/100 г сырой ткани (Табл. 1.) [3, 4]. Содержание таурина колеблется от минимальных значений у мидии - 135 мг до максимальных у анадары - 405 мг/100 г сырой ткани. В состав свободных аминокислот двустворчатых моллюсков входят все заменимые и незаменимые аминокислоты.The peculiarities of the chemical composition of bivalve mollusks make it possible to use them as raw materials for the production of biologically active food additives based on lyophilisates from hydrolysates and/or their compositions and additives with therapeutic and prophylactic effects in the food industry. Processing with a valve significantly reduces the processing time of raw materials, without losing components such as hemolymph and free amino acids in it, especially in anadara with a strong valve. In addition, soft tissues can be used as raw materials after separation of the marketable part - the legs, i.e. waste from commercial production will be disposed of. The same is true for the scallop, only it has a thinner and more easily separated shell, and since the soft tissues will be separated from the shell, acid hydrolysis will give a product that is more pleasant in terms of organoleptic characteristics. The content of free amino acids in bivalves varies from the lowest values in anadara - 818 to the maximum in scallop - 1810.58 mg/100 g of raw tissue (Table 1.) [3, 4]. The taurine content ranges from a minimum in mussels - 135 mg to a maximum in anadara - 405 mg/100 g of raw tissue. The composition of free amino acids in bivalves includes all nonessential and essential amino acids.

Из свободных аминокислот особый интерес представляет производное аминокислоты метионина - таурин, которые не входит в состав белков. Он участвует в обмене холестерина, способствует детоксикационной функции печени, регуляции кровяного давления и улучшению светочувствительности сетчатки глаза [5]. Таурин обладает нейротропной активностью, кардиопротекторным действием, оказывает тонизирующее действие на сердечную мышцу [6]. Также установлено, что таурин способствует улучшению памяти и умственной работоспособности, повышению концентрации внимания, положительно влияет на высшие корковые функции головного мозга [7].Of the free amino acids, the derivative of the amino acid methionine, taurine, which is not part of proteins, is of particular interest. It is involved in cholesterol metabolism, promotes the detoxification function of the liver, regulates blood pressure and improves the photosensitivity of the retina [5]. Taurine has neurotropic activity, a cardioprotective effect, and has a tonic effect on the heart muscle [6]. It has also been found that taurine improves memory and mental performance, increases concentration, and has a positive effect on higher cortical functions of the brain [7].

Гидролизаты, полученные из моллюсков, также способны корректировать различные патологические состояния у людей, вырабатывать адаптивный иммунитет у пожилых людей, обладают антиоксидантными и регенеративными свойствами [8]. Гидролизаты из мяса моллюсков благотворно влияют на функционально-биохимические и иммунологические показатели у пациентов с атеросклеротической дисциркуляторной энцефалопатией I ст.[9]Hydrolysates obtained from shellfish are also capable of correcting various pathological conditions in humans, developing adaptive immunity in older people, and have antioxidant and regenerative properties [8]. Hydrolysates from shellfish meat have a beneficial effect on functional, biochemical and immunological parameters in patients with stage I atherosclerotic discirculatory encephalopathy [9]

Примеры реализации способа.Examples of method implementation.

Пример 1. 1,0 кг мидий вместе с раковинами и интерстициальной жидкостью, свежевыловленных промысловым способом в Черном или Азовском морях, или добытых при переборке мидийно-устричных коллекторов морских ферм, промытых водопроводной водой, измельчали на молотковой мельнице и помещали в химический реактор с мешалкой и 1 л предварительно нагретой до 60°С воды. Затем добавляли 26 мл 40%-го раствора NaOH. Нагретую массу гидролизовали при постоянном перемешивании в течение 180 мин при повышении температуры от 80°С до 95°С для отделения мяса от створок и растворения мягких тканей. К 0,95 л отфильтрованного через нутч-фильтр гидролизата добавляли 36,5 мл 25%-ного раствора лимонной кислоты до рН 5,65 и содержания сухих веществ 5,9%. Полученный гидролизат упаривали на роторном испарителе под вакуумом при от минус 800 мбар до минус 900 мбар при температуре 80°С до содержания сухих растворенных веществ 14,8% в объеме 384 мл.Example 1. 1.0 kg of mussels, together with shells and interstitial fluid, freshly caught commercially in the Black or Azov Seas, or obtained during the overhaul of mussel-oyster collectors of sea farms, washed with tap water, were crushed in a hammer mill and placed in a chemical reactor with a stirrer and 1 liter of water preheated to 60°C. Then 26 ml of 40% NaOH solution was added. The heated mass was hydrolyzed with constant stirring for 180 minutes while raising the temperature from 80°C to 95°C to separate the meat from the flaps and dissolve the soft tissues. To 0.95 l of hydrolyzate filtered through a suction filter, 36.5 ml of a 25% citric acid solution was added to pH 5.65 and a solids content of 5.9%. The resulting hydrolyzate was evaporated on a rotary evaporator under vacuum at from minus 800 mbar to minus 900 mbar at a temperature of 80°C to a dry solutes content of 14.8% in a volume of 384 ml.

Упаренный гидролизат разливали в металлические поддоны слоем до 8 мм (объем 120-130 мл) и замораживали при минус 60°С в камере ледогенератора лиофильной сушилки SCIENZ 12-ND/D (ЦКП «Спектрометрия и хроматография», ФИЦ ИнБЮМ), до температуры образца минус 45°С в течение 4 часов и выдерживали при этой температуре 12 часов. Затем поддоны с замороженными образцами помещали в морозильную камеру при минус 20°С на 3 часа. Потом поддоны вновь помещали в камеру ледогенератора лиофильной сушилки и в течение 2 часов охлаждали до минус 45°С. Затем поддоны размещали на полках лиофильной сушилки SCIENZ 12-ND/D и фаза сублимации протекала при температуре полки от минус 35°С до заданного значения 20°С при вакууме 1-5 Па в течение 14 часов. Затем температура полки повышалась до 30°С и десорбционная стадия протекала при вакууме 10-15 Па в течение 6 часов. По окончании сушки проводили определение остаточной влажности препарата, которое составляло - 6,60%.The evaporated hydrolyzate was poured into metal trays in a layer of up to 8 mm (volume 120-130 ml) and frozen at minus 60°C in the ice maker chamber of a SCIENZ 12-ND/D freeze dryer (TsKP "Spectrometry and Chromatography", FRC InYUM), to the sample temperature minus 45°C for 4 hours and kept at this temperature for 12 hours. The trays with frozen samples were then placed in a freezer at minus 20°C for 3 hours. The trays were then placed back into the ice maker chamber of the freeze dryer and cooled to minus 45°C over 2 hours. The trays were then placed on the shelves of a SCIENZ 12-ND/D freeze dryer and the sublimation phase occurred at a shelf temperature from minus 35°C to a set value of 20°C under a vacuum of 1-5 Pa for 14 hours. Then the shelf temperature was increased to 30°C and the desorption stage took place at a vacuum of 10-15 Pa for 6 hours. At the end of drying, the residual moisture content of the preparation was determined, which was 6.60%.

Лиофилизат обладал приятным запахом морепродуктов и слабосоленым вкусом. Содержание соли составило 4% в пересчете на цитрат натрия. Полученный препарат весом 32 г в виде таблетки лиофилизации (далее ТЛ), показывающей что лиофилизат при высыхании, сохраняет первоначальную структуру, то есть не подвергся коллапсу, измельчали на шаровой мельнице и фасовали в твердые желатиновые капсулы размера 00.The lyophilisate had a pleasant seafood smell and slightly salted taste. The salt content was 4% in terms of sodium citrate. The resulting drug weighing 32 g in the form of a lyophilization tablet (hereinafter referred to as TL), showing that the lyophilisate, when dried, retains its original structure, that is, did not collapse, was crushed in a ball mill and packaged in hard gelatin capsules of size 00.

Общее время собственно лиофилизации - составило 20 часов (сублимация - 14 ч; десорбция 6 ч). Стадия замораживания и криостабилизации с отжигом и приведением к исходной температуре для лиофилизации составило 21 ч. Срок хранения для лиофилизированных капсулированных препаратов устанавливают не менее трех лет.The total time of lyophilization itself was 20 hours (sublimation - 14 hours; desorption - 6 hours). The stage of freezing and cryostabilization with annealing and bringing to the original temperature for lyophilization was 21 hours. The shelf life for lyophilized encapsulated drugs is set at least three years.

Лиофилизированный продукт, полученный в соответствии с примером 1, может использоваться при изготовлении БАД, или получении смесей лиофилизатов из различных гидролизатов гидробионтов для получения БАД, сбалансированных по аминокислотному скору.The lyophilized product obtained in accordance with example 1 can be used in the manufacture of dietary supplements, or in the preparation of mixtures of lyophilisates from various hydrolysates of hydrobionts to obtain dietary supplements balanced in amino acid score.

Пример 2. 0,6 кг анадар вместе с раковинами и интерстициальной жидкостью, свежевыловленных промысловым способом в Черном или Азовском морях, или добытых при переборке мидийно-устричных коллекторов морских ферм, промывали водопроводной водой, измельчали на молотковой мельнице и помещали в химический реактор с мешалкой и 0,6 л предварительно нагретой до 60°С воды. Затем добавляли 16 мл 40%-го раствора NaOH. Нагретую массу при постоянном перемешивании гидролизовали 180 минут при постепенном повышении температуры от 80°С до 95°С. Полученные 0,76 л гидролизата отфильтровывали через полипропиленовый фильтр с диаметром пор 100 мкм и охлаждали до комнатной температуры до 25°С. Затем добавляли 26 мл 25%-ного раствора лимонной кислоты до рН 5,69 и содержания сухих веществ 5,2%. Упаривали на роторном испарителе под вакуумом при от минус 800 мбар до минус 860 мбар при температуре 80°С до содержания сухих растворенных веществ 14,6% в объеме 370 мл.Example 2. 0.6 kg of anadara together with shells and interstitial fluid, freshly caught commercially in the Black or Azov Seas, or obtained during the overhaul of mussel-oyster collectors of sea farms, were washed with tap water, crushed in a hammer mill and placed in a chemical reactor with a stirrer and 0.6 liters of water preheated to 60°C. Then 16 ml of 40% NaOH solution was added. The heated mass was hydrolyzed with constant stirring for 180 minutes with a gradual increase in temperature from 80°C to 95°C. The resulting 0.76 L of hydrolyzate was filtered through a polypropylene filter with a pore diameter of 100 μm and cooled to room temperature to 25°C. Then 26 ml of 25% citric acid solution was added until the pH was 5.69 and the solids content was 5.2%. It was evaporated on a rotary evaporator under vacuum at from minus 800 mbar to minus 860 mbar at a temperature of 80°C until the content of dry dissolved substances was 14.6% in a volume of 370 ml.

Упаренный гидролизат разливали в металлические поддоны слоем до 8 мм (объем 120-130 мл) и замораживали при минус 60°С в камере ледогенератора лиофильной сушилки SCIENZ 12-ND/D (ЦКП «Спектрометрия и хроматография», ФИЦ ИнБЮМ), до температуры образца минус 45°С в течение 4 часов и выдерживали при этой температуре 12 часов. Затем поддоны с замороженными образцами помещали в морозильную камеру при минус 20°С на 3 часа. Потом поддоны вновь помещали в камеру ледогенератора лиофильной сушилки и в течение 2 часов охлаждали до минус 45°С. Затем поддоны размещали на полках лиофильной сушилки SCIENZ 12-ND/D и фаза сублимации протекала при температуре полки от минус 35°С до заданного значения 20°С при вакууме 1-5 Па в течение 14 часов. Затем температура полки повышалась до 30°С и десорбционная стадия протекала при вакууме 10-15 Па в течение 8 часов. По окончании сушки проводили определение остаточной влажности препарата, которое составляло - 6,82%.The evaporated hydrolyzate was poured into metal trays in a layer of up to 8 mm (volume 120-130 ml) and frozen at minus 60°C in the ice maker chamber of a SCIENZ 12-ND/D freeze dryer (TsKP "Spectrometry and Chromatography", FRC InYUM), to the sample temperature minus 45°C for 4 hours and kept at this temperature for 12 hours. The trays with frozen samples were then placed in a freezer at minus 20°C for 3 hours. The trays were then placed back into the ice maker chamber of the freeze dryer and cooled to minus 45°C over 2 hours. The trays were then placed on the shelves of a SCIENZ 12-ND/D freeze dryer and the sublimation phase occurred at a shelf temperature from minus 35°C to a set value of 20°C under a vacuum of 1-5 Pa for 14 hours. Then the shelf temperature was increased to 30°C and the desorption stage took place at a vacuum of 10-15 Pa for 8 hours. At the end of drying, the residual moisture content of the preparation was determined, which was 6.82%.

Лиофилизат обладал приятным запахом морепродуктов и слабосоленым вкусом. Содержание соли составило 4% в пересчете на цитрат натрия. Полученный препарат весом 20,0 г в виде ТЛ измельчали на шаровой мельнице и фасовали в твердые желатиновые капсулы размера 00.The lyophilisate had a pleasant seafood smell and slightly salted taste. The salt content was 4% in terms of sodium citrate. The resulting drug weighing 20.0 g in the form of TL was ground in a ball mill and packaged in hard gelatin capsules of size 00.

Общее время собственно лиофилизации - составило 22 часа (сублимация - 14 ч; десорбция 8 ч). Стадия замораживания и криостабилизации с отжигом и приведением к исходной температуре для лиофилизации составили 21 ч. Срок хранения для лиофилизированных капсулированных препаратов устанавливают не менее трех лет.The total time of lyophilization itself was 22 hours (sublimation - 14 hours; desorption - 8 hours). The stage of freezing and cryostabilization with annealing and bringing to the original temperature for lyophilization was 21 hours. The shelf life for lyophilized encapsulated drugs is set at least three years.

Лиофилизированный продукт, полученный в соответствии с примером 2, может использоваться при изготовлении БАД, или получении смесей лиофилизатов из различных гидролизатов гидробионтов для получения БАД, сбалансированных по аминокислотному скору.The lyophilized product obtained in accordance with example 2 can be used in the manufacture of dietary supplements, or in the preparation of mixtures of lyophilisates from various hydrolysates of hydrobionts to obtain dietary supplements balanced in amino acid score.

Пример 3. 83 г отделенных от створки мягких тканей гребешка, свежевыловленного промысловым способом в Черном море, помещали в химический реактор с мешалкой и добавляли (в соотношении 1:1) 85 мл, предварительно нагретого до 60°С, 24%-ного раствора лимонной кислоты. Нагретую массу при постоянном перемешивании гидролизовали 16 часов при постепенном повышении температуры от 60°С до 95°С. Полученные 146 мл гидролизата отфильтровывали через полипропиленовый фильтр с диаметром пор 100 мкм и охлаждали до комнатной температуры. Затем нейтрализовали добавлением 21 мл 40%-ного раствора NaOH до рН 5,89 и содержания сухих веществ 4,8%. Упаривали на роторном испарителе под вакуумом при от минус 800 мбар до минус 840 мбар при температуре 80°С до содержания сухих растворенных веществ 13,7% в объеме 70 мл.Example 3. 83 g of soft tissues of a scallop, freshly caught commercially in the Black Sea, separated from the valve, were placed in a chemical reactor with a stirrer and 85 ml, preheated to 60°C, of a 24% solution of citric acid were added (in a 1:1 ratio). acids. The heated mass was hydrolyzed with constant stirring for 16 hours with a gradual increase in temperature from 60°C to 95°C. The resulting 146 ml of hydrolyzate was filtered through a polypropylene filter with a pore diameter of 100 μm and cooled to room temperature. Then it was neutralized by adding 21 ml of 40% NaOH solution to a pH of 5.89 and a solids content of 4.8%. It was evaporated on a rotary evaporator under vacuum at from minus 800 mbar to minus 840 mbar at a temperature of 80°C until the content of dry dissolved substances was 13.7% in a volume of 70 ml.

Упаренный гидролизат разливали в металлический поддон слоем до 4 мм и замораживали при минус 60°С в камере ледогенератора лиофильной сушилки SCIENZ 12-ND/D (ЦКП «Спектрометрия и хроматография», ФИЦ ИнБЮМ), до температуры образца минус 45°С в течение 3 часов и выдерживали при этой температуре 12 часов. Затем поддон с замороженным образцом помещали в морозилку при минус 20°С на 3 часа. Потом вновь помещались в камеру ледогенератора лиофильной сушилки и в течение 2 часов охлаждали до минус 45°С. Затем поддон размещали на полке лиофильной сушилки SCIENZ 12-ND/D и фаза сублимации протекала при температуре полки от минус 35°С до заданного значения 30°С при вакууме 1-5 Па в течение 16 часов. Затем температура полки повышалась до 40°С и десорбционная стадия протекала при вакууме 10-15 Па в течение 10 часов. По окончании сушки проводили определение остаточной влажности препарата, которое составляло - 9,71%.The evaporated hydrolyzate was poured into a metal tray in a layer of up to 4 mm and frozen at minus 60°C in the ice maker chamber of a SCIENZ 12-ND/D freeze dryer (Center for Shared Use "Spectrometry and Chromatography", FRC InYUM), to a sample temperature of minus 45°C for 3 hours and kept at this temperature for 12 hours. Then the tray with the frozen sample was placed in a freezer at minus 20°C for 3 hours. Then they were again placed in the ice maker chamber of the freeze dryer and cooled to minus 45°C for 2 hours. The tray was then placed on the shelf of a SCIENZ 12-ND/D freeze dryer and the sublimation phase occurred at a shelf temperature from minus 35°C to a set value of 30°C under a vacuum of 1-5 Pa for 16 hours. Then the shelf temperature was increased to 40°C and the desorption stage took place at a vacuum of 10-15 Pa for 10 hours. At the end of drying, the residual moisture content of the preparation was determined, which was 9.71%.

Лиофилизат обладал приятным запахом морепродуктов и слабосоленым вкусом. Содержание соли составило 12% в пересчете на цитрат натрия. Полученный препарат весом 16,8 г в виде ТЛ измельчали на шаровой мельнице и фасовали в твердые желатиновые капсулы размера 00.The lyophilisate had a pleasant seafood smell and slightly salted taste. The salt content was 12% in terms of sodium citrate. The resulting drug weighing 16.8 g in the form of TL was ground in a ball mill and packaged in hard gelatin capsules of size 00.

Общее время собственно лиофилизации - составило 26 часов (сублимация - 16 ч; десорбция - 10 ч). Стадия замораживания и криостабилизации с отжигом и приведением к исходной температуре для лиофилизации составила 20 ч. Срок хранения для лиофилизированных капсулированных препаратов устанавливают не менее трех лет.The total time of lyophilization itself was 26 hours (sublimation - 16 hours; desorption - 10 hours). The stage of freezing and cryostabilization with annealing and bringing to the original temperature for lyophilization was 20 hours. The shelf life for lyophilized encapsulated drugs is set at least three years.

Лиофилизированный продукт, полученный в соответствии с примером 3, может использоваться при изготовлении БАД, или получении смесей лиофилизатов из различных гидролизатов гидробионтов для получения БАД, сбалансированных по аминокислотному скору.The lyophilized product obtained in accordance with example 3 can be used in the manufacture of dietary supplements, or in the preparation of mixtures of lyophilisates from various hydrolysates of hydrobionts to obtain dietary supplements balanced in amino acid score.

Примечание: содержание растворенных сухих веществ определяли по адаптированной методике, приведенной в ГОСТ ISO 2173-2013 Продукты переработки фруктов и овощей. Рефрактометрический метод определения растворимых сухих веществ.Note: the content of dissolved solids was determined using an adapted method given in GOST ISO 2173-2013 Processed products of fruits and vegetables. Refractometric method for determining soluble dry substances.

Таблица 3. Параметры процесса лиофилизации и их влияние на характеристики ТЛTable 3. Parameters of the lyophilization process and their influence on the characteristics of TL

Примечание: Содержание влаги в образцах определяли по адаптированной методике, приведенной в ГОСТ 7636-85 Рыба, морские млекопитающие, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Методы анализа.Note: The moisture content in the samples was determined using an adapted method given in GOST 7636-85 Fish, marine mammals, marine invertebrates and their processed products. Methods of analysis.

Таким образом, изобретение позволяет получить лиофилизаты из гидролизатов двустворчатых моллюсков с увеличенным сроком хранения, и низким содержанием поваренной соли, которые можно использовать в пищевой промышленности, а также производстве БАД и/или композиций лиофилизатов, сбалансированных по аминокислотному скору.Thus, the invention makes it possible to obtain lyophilisates from hydrolysates of bivalve mollusks with an increased shelf life and low sodium content, which can be used in the food industry, as well as in the production of dietary supplements and/or compositions of lyophilisates balanced by amino acid score.

Список источников информации, принятых во внимание:List of information sources taken into account:

1. Блынская Е.В. Тишков СВ., Алексеев К.В. Технологические подходы к совершенствованию процесса лиофилизации белковых и пептидных лекарственных препаратов // Российский биотерапевтический журнал. 2017. 16(1). С. 6-11. https://DOI:10.17650/1726-9784-2017-16-1-6-111. Blynskaya E.V. Tishkov S.V., Alekseev K.V. Technological approaches to improving the process of lyophilization of protein and peptide drugs // Russian Biotherapeutic Journal. 2017. 16(1). pp. 6-11. https://DOI:10.17650/1726-9784-2017-16-1-6-11

2. Блынская Е.В. Тишков С.В., Алексеев К.В., Минаев С.В. Стадия термоциклирования в оптимизации процессов замораживания в технологии получения лиофилизированного препарата // Российский биотерапевтический журнал. 2019. 18(1). С. 87-94. https://DOI:10.17650/1726-9784-2019-18-1-87-942. Blynskaya E.V. Tishkov S.V., Alekseev K.V., Minaev S.V. Thermal cycling stage in optimizing freezing processes in the technology of obtaining a lyophilized drug // Russian Biotherapeutic Journal. 2019. 18(1). pp. 87-94. https://DOI:10.17650/1726-9784-2019-18-1-87-94

3. Табакаева О.В. Кислотные гидролизаты из отходов переработки двухстворчатых моллюсков дальневосточного региона. Техника и технология пищевых производств. 2009. 13(2). С. 1-4.3. Tabakaeva O.V. Acid hydrolysates from waste from processing bivalve mollusks in the Far Eastern region. Equipment and technology of food production. 2009. 13(2). pp. 1-4.

4. Масленникова Е.В., Черевач Е.И., Юдина Т.П., Бабин Ю.В., Цыбулько Е.И. (2009). Технология белкового гидролизата из мантии гребешка. Пищевая промышленность, (5), 18-19.4. Maslennikova E.V., Cherevach E.I., Yudina T.P., Babin Yu.V., Tsybulko E.I. (2009). Technology of protein hydrolyzate from scallop mantle. Food Industry, (5), 18-19.

5. Машковский М.Д. Лекарственные средства. 16-е изд. М.: Новая волна. 2012. 1216 с.5. Mashkovsky M.D. Medicines. 16th ed. M.: New wave. 2012. 1216 p.

6. Торкунов П.А. Кардиопротекторное действие таурина / А.П. Торкунов, Н.С Сапронов // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1997. 60(5). С. 72-77.6. Torkunov P.A. Cardioprotective effect of taurine / A.P. Torkunov, N.S Sapronov // Experimental and clinical pharmacology. 1997. 60(5). pp. 72-77.

7. Оруджев Я.С Применение медиаторных аминокислот (таурин) во внебольничной геронтологической практике / Я.С.Оруджев, В.В. Ростовщиков // Социальная и клиническая психиатрия. 1998. 3. С. 78-81.7. Orudzhev Ya.S. The use of mediator amino acids (taurine) in out-of-hospital gerontological practice / Ya.S. Orudzhev, V.V. Moneylenders // Social and clinical psychiatry. 1998. 3. pp. 78-81.

8. Пивненко Т.Н. Ферментативные гидролизаты из гидробионтов Тихого океана как основа для создания биологически активных добавок к пище и продуктов функционального питания: монография / Т.Н. Пивненко, Н.Н. Ковалев, Т.С.Запорожец, Н.Н. Беседнова, Т.А. Кузнецова. Владивосток: Дальнаука, 2015. 160 с.8. Pivnenko T.N. Enzymatic hydrolysates from hydrobionts of the Pacific Ocean as a basis for the creation of biologically active food additives and functional nutrition products: monograph / T.N. Pivnenko, N.N. Kovalev, T.S. Zaporozhets, N.N. Besednova, T.A. Kuznetsova. Vladivostok: Dalnauka, 2015. 160 p.

9. Кузнецов В.В., Лисяный Н.И., Рябушко В.И., Ерохин В.Е., Скрипченко А.Г. Влияние гидролизата из морских моллюсков Рапамид® на функциональное состояние мозга и иммунную систему у пациентов с начальными проявлениями атеросклеротической дисциркуляторной энцефалопатии. Журнал неврологии им. Б.М. Маньковського. 2014. 2(1). С. 76-85.9. Kuznetsov V.V., Lisyanyi N.I., Ryabushko V.I., Erokhin V.E., Skripchenko A.G. The effect of Rapamide® hydrolyzate from marine mollusks on the functional state of the brain and the immune system in patients with initial manifestations of atherosclerotic dyscirculatory encephalopathy. Journal of Neurology named after. B.M. Mankovsky. 2014. 2(1). pp. 76-85.

10. ГОСТ ISO 2173-2013 Продукты переработки фруктов и овощей. Рефрактометрический метод определения растворимых сухих веществ. Введ. 2015.07.01. М.: Стандартинформ, 2019. 8 с.10. GOST ISO 2173-2013 Processed products of fruits and vegetables. Refractometric method for determining soluble dry substances. Enter 2015.07.01. M.: Standartinform, 2019. 8 p.

11. ГОСТ 7636-85 Рыба, морские млекопитающие, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Методы анализа (см. Переиздание (ноябрь 1990 г.) и сборник «Рыба и рыбные продукты. Методы анализа. Маркировка. Упаковка». Издание 1998 г., 2004 г.). М.: ИПК Издательство стандартов, 2004. 31 с.11. GOST 7636-85 Fish, marine mammals, marine invertebrates and their processed products. Methods of analysis (see Reissue (November 1990) and the collection “Fish and fish products. Methods of analysis. Labeling. Packaging.” Edition 1998, 2004). M.: IPK Publishing House of Standards, 2004. 31 p.

Claims

1. A method for producing a lyophilized product from hydrolysates of bivalve mollusks, including the preparation of raw materials, grinding the mollusks, filtering, evaporation, freeze drying, characterized in that the hydrolysis of raw materials from bivalve mollusks is carried out, using mussels, anadara or scallops as raw materials, with further evaporation of the resulting hydrolyzate under vacuum at from minus 800 to minus 900 mbar at a temperature of 80°C until the content of dry dissolved substances in the hydrolyzate is no more than 15%, after which the resulting samples of hydrolysates are frozen at minus 60°C for 3-4 hours in trays for lyophilization in a layer 4-8 mm, kept at a temperature not exceeding minus 45°C for 12 hours, and annealing is carried out at a temperature of minus 20°C for 3 hours, after which it is again cooled to minus 45°C for 2 hours and ice sublimation is carried out with shelf heating from minus 35 to plus 20°C for 14-16 hours at a vacuum of 1-5 Pa, then a desorption stage at a shelf temperature of plus 30-plus 40°C and a vacuum of 10-15 Pa for 6-10 hours until obtaining a product with a residual moisture content of no more than 10%.

2. The method according to claim 1, characterized in that to obtain a hydrolyzate from mussels and anadar, taken together with shells and interstitial fluid, alkaline hydrolysis is used by adding a 40% NaOH solution with constant stirring for 180 minutes with a gradual increase in temperature from 80 to 95°C, after which a 25% solution of citric acid is added to the filtered hydrolyzate until the pH is 5.69 and the content of dry dissolved substances is 5.2-5.9%.

3. The method according to claim 1, characterized in that to obtain a hydrolyzate of scallop soft tissues, acid hydrolysis is used by adding a 24% solution of citric acid heated to 60°C to the soft tissues in a 1:1 ratio, which is carried out for 16 h with a gradual increase in temperature from 60 to 95°C, then the resulting hydrolyzate is filtered and cooled to room temperature, followed by neutralization with a 40% NaOH solution to a pH of 5.89 and a dry matter content of 4.8%.