RU2816983C1 - Способ лечения эндометриоза в эксперименте у крыс - Google Patents
Способ лечения эндометриоза в эксперименте у крыс Download PDFInfo
- Publication number
- RU2816983C1 RU2816983C1 RU2023115803A RU2023115803A RU2816983C1 RU 2816983 C1 RU2816983 C1 RU 2816983C1 RU 2023115803 A RU2023115803 A RU 2023115803A RU 2023115803 A RU2023115803 A RU 2023115803A RU 2816983 C1 RU2816983 C1 RU 2816983C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- endometriosis
- rats
- endometrioid
- heterotopias
- experiment
- Prior art date
Links
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 title claims abstract description 38
- 241000700159 Rattus Species 0.000 title claims abstract description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 title claims description 13
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 claims abstract description 20
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 229960003471 retinol Drugs 0.000 claims abstract description 10
- 235000020944 retinol Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- 239000011607 retinol Substances 0.000 claims abstract description 10
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 claims abstract description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 abstract description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 6
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 14
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 12
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 6
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 208000031513 cyst Diseases 0.000 description 4
- AZFLJNIPTRTECV-FUMNGEBKSA-N dienogest Chemical compound C1CC(=O)C=C2CC[C@@H]([C@H]3[C@@](C)([C@](CC3)(O)CC#N)CC3)C3=C21 AZFLJNIPTRTECV-FUMNGEBKSA-N 0.000 description 4
- 229960003309 dienogest Drugs 0.000 description 4
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 4
- 238000009806 oophorectomy Methods 0.000 description 4
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 4
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 4
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 3
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 3
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 3
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 3
- 239000003356 suture material Substances 0.000 description 3
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 3
- WWYNJERNGUHSAO-XUDSTZEESA-N (+)-Norgestrel Chemical compound O=C1CC[C@@H]2[C@H]3CC[C@](CC)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 WWYNJERNGUHSAO-XUDSTZEESA-N 0.000 description 2
- BFPYWIDHMRZLRN-UHFFFAOYSA-N 17alpha-ethynyl estradiol Natural products OC1=CC=C2C3CCC(C)(C(CC4)(O)C#C)C4C3CCC2=C1 BFPYWIDHMRZLRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- 206010011732 Cyst Diseases 0.000 description 2
- BFPYWIDHMRZLRN-SLHNCBLASA-N Ethinyl estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 BFPYWIDHMRZLRN-SLHNCBLASA-N 0.000 description 2
- 239000000579 Gonadotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 2
- VYGQUTWHTHXGQB-FFHKNEKCSA-N Retinol Palmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C VYGQUTWHTHXGQB-FFHKNEKCSA-N 0.000 description 2
- 101000857870 Squalus acanthias Gonadoliberin Proteins 0.000 description 2
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 2
- 210000003815 abdominal wall Anatomy 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 2
- VAAUVRVFOQPIGI-SPQHTLEESA-N ceftriaxone Chemical compound S([C@@H]1[C@@H](C(N1C=1C(O)=O)=O)NC(=O)\C(=N/OC)C=2N=C(N)SC=2)CC=1CSC1=NC(=O)C(=O)NN1C VAAUVRVFOQPIGI-SPQHTLEESA-N 0.000 description 2
- 229960004755 ceftriaxone Drugs 0.000 description 2
- 210000004696 endometrium Anatomy 0.000 description 2
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 2
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 2
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 2
- 230000012173 estrus Effects 0.000 description 2
- 229960002568 ethinylestradiol Drugs 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 210000004392 genitalia Anatomy 0.000 description 2
- XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N gonadorelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N 0.000 description 2
- 229940035638 gonadotropin-releasing hormone Drugs 0.000 description 2
- 229940125697 hormonal agent Drugs 0.000 description 2
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 2
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 2
- 238000002357 laparoscopic surgery Methods 0.000 description 2
- 238000002350 laparotomy Methods 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 210000000713 mesentery Anatomy 0.000 description 2
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 2
- 210000000754 myometrium Anatomy 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 2
- 210000000505 parietal peritoneum Anatomy 0.000 description 2
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 2
- 239000000583 progesterone congener Substances 0.000 description 2
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 3,7-bis(dimethylamino)phenothiazin-5-ium Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NJERAXSSDSHLGE-UHFFFAOYSA-N 4-(2-fluorophenyl)-1,3,8-trimethyl-6h-pyrazolo[3,4-e][1,4]diazepin-7-one;hydrochloride Chemical compound Cl.N=1CC(=O)N(C)C(N(N=C2C)C)=C2C=1C1=CC=CC=C1F NJERAXSSDSHLGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 208000005171 Dysmenorrhea Diseases 0.000 description 1
- 206010013935 Dysmenorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 208000004483 Dyspareunia Diseases 0.000 description 1
- 102000006587 Glutathione peroxidase Human genes 0.000 description 1
- 108700016172 Glutathione peroxidases Proteins 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N Malondialdehyde Chemical compound O=CCC=O WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 208000031816 Pathologic Dilatation Diseases 0.000 description 1
- 208000000450 Pelvic Pain Diseases 0.000 description 1
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical class C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 1
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N all-trans-retinoic acid Chemical compound OC(=O)\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- -1 antigestogens Substances 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003886 aromatase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940046844 aromatase inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 210000003567 ascitic fluid Anatomy 0.000 description 1
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 229960000766 danazol Drugs 0.000 description 1
- POZRVZJJTULAOH-LHZXLZLDSA-N danazol Chemical compound C1[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=CC2=C1C=NO2 POZRVZJJTULAOH-LHZXLZLDSA-N 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002941 etonogestrel Drugs 0.000 description 1
- GCKFUYQCUCGESZ-BPIQYHPVSA-N etonogestrel Chemical compound O=C1CC[C@@H]2[C@H]3C(=C)C[C@](CC)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 GCKFUYQCUCGESZ-BPIQYHPVSA-N 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 229940121381 gonadotrophin releasing hormone (gnrh) antagonists Drugs 0.000 description 1
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 1
- 238000012735 histological processing Methods 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 208000021267 infertility disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 229960003881 letrozole Drugs 0.000 description 1
- HPJKCIUCZWXJDR-UHFFFAOYSA-N letrozole Chemical compound C1=CC(C#N)=CC=C1C(N1N=CN=C1)C1=CC=C(C#N)C=C1 HPJKCIUCZWXJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004400 levonorgestrel Drugs 0.000 description 1
- 229940118019 malondialdehyde Drugs 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000000968 medical method and process Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229960000907 methylthioninium chloride Drugs 0.000 description 1
- 210000005088 multinucleated cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004493 neutrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003217 oral combined contraceptive Substances 0.000 description 1
- 208000025661 ovarian cyst Diseases 0.000 description 1
- 230000027758 ovulation cycle Effects 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000008756 pathogenetic mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- 208000004342 progesterone resistance Diseases 0.000 description 1
- 229940095055 progestogen systemic hormonal contraceptives Drugs 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 238000011867 re-evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 229930002330 retinoic acid Natural products 0.000 description 1
- 229940108325 retinyl palmitate Drugs 0.000 description 1
- 235000019172 retinyl palmitate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011769 retinyl palmitate Substances 0.000 description 1
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000036299 sexual function Effects 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 235000000891 standard diet Nutrition 0.000 description 1
- 210000003699 striated muscle Anatomy 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229960001727 tretinoin Drugs 0.000 description 1
- 238000011121 vaginal smear Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для лечения эндометриоза в эксперименте у крыс. На основании экспериментальной модели хирургически индуцированного эндометриоза у крыс линии Wistar выполняют пероральное введение ретинола в дозировке 10 мг/кг ежедневно в течение 21 дня. Способ расширяет арсенал средств лечения эндометриоза, обеспечивает полную резорбцию очагов эндометриоза, позволяет избежать применения гормональных препаратов и ассоциированных с их приемом побочных эффектов, проводить исследования по выявлению наиболее эффективных минимальных доз, длительности терапии у больных эндометриозом. 2 ил., 1 пр.
Description
Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для лечения эндометриоза в эксперименте у крыс.
Распространенность эндометриоза среди пациенток репродуктивного возраста варьирует от 2 до 10%, у инфертильных женщин эндометриоз подтверждается в 50% случаев. В настоящее время более 190 миллионов женщин репродуктивного возраста и девочек-подростков во всем мире страдают эндометриозом [Becker С.М., Bokor A., Heikinheimo О. et al., ESHRE Endometriosis Guideline Group.ESHRE guideline: endometriosis. Hum Reprod Open. 2022 Feb 26; 2022(2): hoac009. doi: 10.1093/hropen/hoac009]. Многогранность патогенетических механизмов развития заболевания, вариабельность клинической симптоматики, а также отсутствие единой концепции терапии эндометриоза, диктуют необходимость поиска новых направлений коррекции данной патологии.
Таким образом, необходимо дальнейшее изучение патогенеза заболевания и разработка альтернативных методов патогенетически обоснованного медикаментозного лечения.
Техническим результатом изобретения является расширение арсенала средств лечения эндометриоза, возможность избежать использования гормональных средств и побочных эффектов, ассоциированных с их применением.
Указанный технический результат достигается в способе лечения эндометриоза в эксперименте у крыс, в котором на основании экспериментальной модели хирургически индуцированного эндометриоза у крыс линии Wistar выполняют пероральное введение ретинола в дозировке 10 мг/кг ежедневно в течение 21 дня.
Среди групп лекарственных препаратов, применяемых в качестве медикаментозной терапии наружного генитального эндометриоза (НГЭ), наиболее эффективной для купирования эндометриоз-ассоциированного болевого синдрома является гормономодулирующая терапия. Согласно гайдлайну ESHRE «Эндометриоз», 2022 год, [Becker C.M, Bokor А, Heikinheimo О, et al. ESHRE Endometriosis Guideline Group.ESHRE guideline: endometriosis. Hum Reprod Open. 2022 Feb 26;2022(2): hoac009. doi: 10.1093/hropen/hoac009], рекомендуется назначение следующих групп препаратов - прогестагенов, антигестагенов, комбинированных оральных контрацептивов, агонистов гонадотропин-рилизинг гормона (аГнРГ), антагонистов ГнРГ, внутриматочной системы с левоноргестрелом (LNG-IUS), подкожного имплантата с этоногестрелом, даназола и ингибиторов ароматазы (например, летрозола). Все вышеперечисленные гормональные методы лечения приводят к клинически значимому уменьшению болевого синдрома по сравнению с плацебо (при использовании визуальных аналоговых шкал для оценки дисменореи и хронической тазовой боли), однако имеют ряд побочных эффектов, а также ограничены по длительности применения метода. Хирургический способ лечения эндометриоза долгие годы рассматривался в качестве «золотого стандарта» терапии заболевания, однако, за последние годы взгляд на проблему несколько изменился. Хирургический и медикаментозный методы не противопоставляются, а лишь дополняют друг друга [Vercellini P., Frattaruolo М.Р., Somigliana Е., Jones G.L, Consonni D., Alberico D., Fedele L. Surgical versus low-dose progestin treatment for endometriosis-associated severe deep dyspareunia II: effect on sexual functioning, psychological status and health-related quality of life. Hum Reprod 2013; 28: 1221-1230], однако частота рецидивов заболевания эндометриоза даже при комбинированном лечении по-прежнему остается высокой. Вышесказанное обосновывает необходимость более углубленное изучение механизмов патогенеза заболевания с целью разработки альтернативных методов терапии эндометриоза.
Известно, что в развитии эндометриоза принимают участие неэффективная эстрогензависимая воспалительная реакция, «прогестеронорезистентность», ангиогенез, гиперпролиферация, сниженный апоптоз и оксидативный стресс [Ярмолинская, М.И. Генитальный эндометриоз. Различные грани проблемы / М.И. Ярмолинская, Э.К. Айламазян. - Санкт-Петербург: Эко-Вектор, 2017. - 615 с.]. Согласно литературным данным [Pierzchalski K., Taylor R.N., Nezhat С. et al. Retinoic acid biosynthesis is impaired in human and murine endometriosis // Biol. Reprod. 2014. Vol.91. No. 4. P. 84. DOI: 10.1095/biolreprod.l 14.119677], роль ретинола в патогенезе эндометриоза заключается в ингибировании пролиферации эндометриоидных кист яичников, модулировании синтеза провоспалительных цитокинов, способности уменьшать размеры эндометриоидных гетеротопий.
Доказана роль ретинола как антиоксиданта в подавлении прогрессирования оксидативного стресса. Он способствует повышению активности супероксиддисмутазы и глутатионпероксидазы, инактивирующих свободные радикалы, и снижению уровня малонового диальдегида, участвующего в метаболизме арахидоновой кислоты и индуцирующего оксидативный стресс. Вышеупомянутые маркеры оксидативного стресса наблюдаются как в сыворотке крови, так и в перитонеальной жидкости у пациенток с НГЭ [Mier-Cabrera J, Aburto-Soto Т, Burrola-Mendez S, et al. Women with endometriosis improved their peripheral antioxidant markers after the application of a high antioxidant diet. Reprod Biol Endocrinol. 2009 May 28; 7:54. doi: 10.1186/1477-7827-7-54].
Использование лабораторных животных, а именно крыс, рассматривается в качестве наиболее целесообразного способа разработки новых методов диагностики и терапии заболевания. Все изменения, происходящие в организме лабораторных животных, как физиологические, так и при наличии эндометриоза, сходны с таковыми у человека, что позволяет рационально использовать полученные результаты и обоснованно внедрять их в клиническую практику.
Заявляемый способ основан на экспериментальных исследованиях на 21 половозрелой самке крыс линии Wistar в возрасте от 10 до 12 недель, массой 220±50 г. При реализации эксперимента соблюдены все общие требования «Правил лабораторной практики в Российской Федерации», утвержденные приказом Министерства здравоохранения РФ No 199н от 01.04.2016 г. и положения «Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей», положениями Guide for the Care and Use of Laboratory Animals (Washington D.C., 2011). Все лабораторные животные были выведены из ФГУП «Питомник лабораторных животных "Рапполово" и содержались в одинаковых условиях вивария ФГБНУ «НИИ АГиР им. Д.О. Отта» с соблюдением всех правил (маркировка всех особей, постоянный санитарный контроль, стандартный рацион питания, свободный доступ к воде и пище, автоматический режим освещения «день-ночь»). За 2 недели до начала эксперимента все животные подвергались карантинизации.
До начала проведения эксперимента, после окончания сроков карантинизации, в течение 14 дней проводилась оценка эстрального цикла у крыс путем забора влагалищных мазков с последующим микроскопическим исследованием после фиксации материала и окраски метиленовым синим. Все особи, включенные в эксперимент, находились в фазе эструса.
Создание экспериментальной модели проводилось в 3 этапа.
Первый этап - моделирование,
Анестезиологическое пособие осуществлялось с применением золазепама гидрохлорида 100 в дозировке 30 мг/кг внутримышечно. Антибактериальная профилактика инфекционных осложнений проводилась с помощью внутримышечного введения цефтриаксона 50 мг/кг с последующим пролонгированием курса терапии в послеоперационном периоде на 3 дня.
В ходе хирургического вмешательства после обработки операционного поля проводилась срединная лапаротомия протяженностью 2 см. После осуществления оперативного доступа, осмотра органов брюшной полости, выполнялось выделение правого рога матки и правого яичника. Чуть выше места бифуркации (+3 мм) проводилась перевязка правого маточного рога. После перевязки брыжейки яичника произведено иссечение правого рога матки и правого яичника соответственно. Маточный рог погружали в теплый физиологический раствор. Слева после проведения перевязки брыжейки яичника выполнялась овариоэктомия. Далее из иссеченного маточного рога после продольного разреза выполнялось формирование имплантатов размером 3×3 мм. Фиксация имплантатов проводилась справа и слева на париетальную брюшину передней брюшной стенки в области бифуркации сосудов, эндометрием к сосудам, миометрием - в брюшную полость. После выполнения тщательного гемостаза и ревизии брюшной полости, выполнялось послойное ушивание послеоперационной раны.
После оперативного вмешательства эстрогенный фон создавался с помощью внутримышечных инъекций масляного раствора этинилэстрадиола в дозе 50 мкг/кг на следующий день после овариоэктомии и далее дважды в неделю до момента окончания эксперимента.
На втором этапе, через 14±2 дня после первого оперативного вмешательства, проводилась лапароскопия для подтверждения формирования модели и оценки стартовых размеров эндометриоидных гетеротопий. Площадь эндометриоидных гетеротопий оценивалась по формуле площади эллипса: S=A*B*π, где S - площадь гетеротопий (мм2), А - продольный размер (мм), В -поперечный размер (мм), π - 3,14.
После рандомизации было сформировано 3 группы:
Первая группа животных А (основная) (n=5) получала ежедневно перорально ретинола пальмитат, Ретиноиды АО (Россия), в дозировке 10 мг/кг/день.
Вторая группа В - контрольная (n=4), лечение не получала.
Третья группа С - группа сравнения (n=5), ежедневно перорально получала диеногест в дозе 1 мг/кг.
На 21-е сутки лечения лабораторных животных выводили из эксперимента. После вскрытия проводили визуальную оценку формирования эндометриоидных гетеротопий в местах имплантации. Имплантированные ткани замеряли в двух плоскостях, иссекали из окружающих тканей и фиксировали в нейтральном 10% формалине для последующего гистологического исследования.
Размеры эндометриоидных гетеротопий до начала терапии заболевания варьировали в пределах от 16 мм2 до 40 мм2. Средняя площадь гетеротопий в группе А до начала терапии составила 33,3 мм2±6,78 мм2. Спустя 3 недели после ежедневного перорального применения ретинола отмечалась полная резорбция очагов эндометриоза, что подтверждается результатами гистологического исследования. В группе животных С, получавших диеногест, средняя площадь эндометриоидных гетеротопий до начала терапии составила 41,16 мм2±12,1 мм2. После завершения лечения полная резорбция наблюдалась в 70% случаях, в 30% отмечалось уменьшение размеров эндометриоидных гетеротопий до 12,14 мм2±4,18 мм2. В контрольной группе В исходная средняя площадь эндометриоидных гетеротопий составила 28,14±6,11 мм2 через 3 недели площадь эндометриоидных гетеротопий увеличилась до 45,78 мм2±11,5 мм2.
Полученный после выведения животных из эксперимента материал подвергался фиксации в течение 24 часов в 10% нейтральном забуференном формалине. Гистологическую проводку материала осуществляли с использованием автоматической станции Histo-Tek VP1, далее образцы заливали в парафиновые блоки и готовили гистологические срезы толщиной 4 мкм, полученные микросрезы окрашивали гематоксилином и эозином. При световой микроскопии выявляли наличие эндометриоидной гетеротопий в инфильтратах, определяли реактивные и патологические воспалительные изменения. Световую микроскопию проводили на микроскопе Olympus СХ3 (Olympus, Япония) при увеличении ×100200, ×400.
Выполнено гистологическое исследования образцов эндометриоидных гетеротопий в трех группах.
Способ иллюстрируется фиг. 1-2, где:
на фиг. 1 - эндометриоидная киста с десквамированным эпителием, клеточным детритом и нейтрофильными лейкоцитами в просвете в контрольной группе животных В. Г-Э, ×100.
на фиг. 2 - Эндометриоидная киста с эктазией просвета и перифокальным продуктивным воспалением в группе С после лечения. Г-Э, ×100
В основной группе А (после лечения ретинолом) отмечена полная резорбция очагов эндометриоза, гетеротопий не выявлены. Визуализировались фрагменты шовного материала с умеренным перифокальным продуктивным воспалением. В 30% случаев фрагменты имплантированной матки со вторичными изменениями, представленные соединительнотканным рубцом с перифокальными кровоизлияниями.
Во всех образцах контрольной группы В присутствовали поперечно -полосатые мышцы с шовным материалом, в 89% выявлены сформированные эндометриоидные гетеротопий в виде "кист" (фиг. ), выстланные эндометриодноподобным эпителием, в 11% случаев - участками шовного материала со скоплением гигантских многоядерных клеток, местами с перифокальным воспалением. В 50% случаев отмечена гиперваскуляризация эндометриоидных гетеротопий. В 25% случаев определялась экссудативная инфильтрация и плазмоцитарная инфильтрация.
В группе сравнения С, получавших диеногест, в 30% выявлена эндометриоидная гетеротопия с единичными кистами (фиг. 2), однако визуально размеры очагов на фоне лечения имели достоверную тенденцию к уменьшению, в 70% произошла резорбция эндометриоидных гетеротопий.
Полученные результаты продемонстрировали высокую эффективность ретинола в терапии хирургически индуцированного эндометриоза у крыс (полная резорбция эндометриоидных гетеротопий по результатам гистологического исследования) и являются основанием для дальнейшего продолжения экспериментальных исследований с целью оценки наиболее эффективных минимальных доз, длительности терапии и возможности применения ретинола в клинической практике у больных эндометриозом. Пример осуществления способа.
При заборе мазков у крыс №4, №8 и №11 весом 220, 218 и 222 грамма была подтверждена фаза эструса. После выполнения анестезии и подготовки операционного поля, осуществлялась лапаротомия с помощью срединного вертикального разреза. Далее произведен осмотр органов брюшной полости, яичников и маточных рогов, выполнена правосторонняя овариоэктомия с резекцией правого маточного рога и левосторонняя овариоэктомия. Из иссеченного правого маточного рога созданы имплантаты размерами 3×3 мм. Фиксация имплантатов проводилась справа и слева на париетальную брюшину передней брюшной стенки в области бифуркации сосудов, эндометрием к сосудам, миометрием - в брюшную полость. В течение 3-х дней проводилась а/б терапия цефтриаксоном 50 мг/кг. На следующий день после оперативного вмешательство вводился масляный раствор этинилэстрадиола в дозировке 50 мкг/кг, далее дважды в неделю до окончания эксперимента. Через 14 дней после оперативного вмешательства выполнена лапароскопия с оценкой площади эндометриоидных гетеротопий до начала терапии. У крысы №4 площадь эндометриоидного очага составила 22,1 мм2, у крысы №8 - 30,6 мм2, №11 - 36,4 мм2. Далее в течение 21 дня крыса №4 получала ретинол в дозировке 10 мг/кг, крыса №8 - терапию не получала, крысе №11 осуществлялось введение диеногеста в дозировке 1 мг/кг. Через 3 недели производилось выведение животных из эксперимента, с повторной оценкой площади эндометриоидных гетеротопий после терапии и гистологическим исследованием полученных образцов. У крысы №4 отмечалась полная резорбция эндометриоидных имплантатов, у крысы №8 площадь гетеротопий составила 38,3 мм2 (отмечен достоверный рост), у крысы №11 - 15,8 мм2 (уменьшение размеров гетеротопий в 2,3 раза).
Способ позволяет расширить арсенал средств лечения эндометриоза, дает возможность избежать использования гормональных средств и побочных эффектов, ассоциированных с их применением, имеет высокую эффективность, подтвержденную полной резорбцией эндометриоидных гетеротопий.
Claims (1)
- Способ лечения эндометриоза в эксперименте у крыс, заключающийся в том, что на основании экспериментальной модели хирургически индуцированного эндометриоза у крыс линии Wistar выполняют пероральное введение ретинола в дозировке 10 мг/кг ежедневно в течение 21 дня.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2816983C1 true RU2816983C1 (ru) | 2024-04-08 |
Family
ID=
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20070287676A1 (en) * | 2006-05-16 | 2007-12-13 | Sun-Wei Guo | Diagnosis and treatment of endometriosis |
| RU2336884C1 (ru) * | 2007-07-11 | 2008-10-27 | Институт биомедицинских исследований Владикавказского научного центра РАН и Правительства РСО-Алания (ИБМИ ВНЦ РАН) | Способ оптимизации лечения эндометриоза матки в клиническом эксперименте |
| RU2711615C1 (ru) * | 2019-09-12 | 2020-01-17 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта" | Способ лечения эндометриоза на основании экспериментальной модели у крыс |
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20070287676A1 (en) * | 2006-05-16 | 2007-12-13 | Sun-Wei Guo | Diagnosis and treatment of endometriosis |
| RU2336884C1 (ru) * | 2007-07-11 | 2008-10-27 | Институт биомедицинских исследований Владикавказского научного центра РАН и Правительства РСО-Алания (ИБМИ ВНЦ РАН) | Способ оптимизации лечения эндометриоза матки в клиническом эксперименте |
| RU2711615C1 (ru) * | 2019-09-12 | 2020-01-17 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта" | Способ лечения эндометриоза на основании экспериментальной модели у крыс |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| OZER H. et al. The efficacy of bevacizumab, sorafenib, and retinoic acid on rat endometriosis model. Reprod Sci. 2013;20(1):с.26-32. * |
| СЕЙИДОВА Ч. И. и др. Витамин А и беременность - мифы и реальность, перспективы применения при эндометриозе (обзор литературы) / Журнал акушерства и женских болезней. - 2021. - Т. 70, no. 6. - С. 139-146. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Conrad et al. | Effects of relaxin on arterial dilation, remodeling, and mechanical properties | |
| Dolapcioglu et al. | Theranekron for treatment of endometriosis in a rat model compared with medroxyprogesterone acetate and leuprolide acetate | |
| Herington et al. | Development and prevention of postsurgical adhesions in a chimeric mouse model of experimental endometriosis | |
| CN1679939A (zh) | 用于节育的药物组合物及其用途 | |
| EA028780B1 (ru) | Применение эстетрола в качестве экстренного контрацептива | |
| Harada et al. | SR-16234, a novel selective estrogen receptor modulator for pain symptoms with endometriosis: an open-label clinical trial | |
| JP5211073B2 (ja) | 子宮内膜症の治療用の薬剤 | |
| KR100985449B1 (ko) | 옥시톡신 및/또는 바소프레신 길항제의 용도 | |
| RU2711615C1 (ru) | Способ лечения эндометриоза на основании экспериментальной модели у крыс | |
| Mitan et al. | Adolescent menstrual disorders: Update | |
| RU2816983C1 (ru) | Способ лечения эндометриоза в эксперименте у крыс | |
| RU2533739C2 (ru) | Способ моделирования хронических воспалительных заболеваний женских половых органов в эксперименте | |
| JP5968781B2 (ja) | 子宮内膜症の治療 | |
| Ferrell et al. | Endometriosis and Infertility. | |
| EA007854B1 (ru) | Мезопрогестины (модуляторы рецептора прогестерона) в качестве средств лечения и предупреждения доброкачественных зависящих от гормонов гинекологических нарушений | |
| RU2541089C1 (ru) | Способ комплексного лечения наружного генитального эндометриоза | |
| Ugwu | UTERINE FIBROIDS-A COMPREHENSIVE REVIEW | |
| RU2755250C1 (ru) | Препарат на основе стероидных эстрогенов для лечения эндометриоза | |
| Goericke-Pesch | Termination of Pregnancy | |
| Gunardi et al. | Non-contraceptive Effects of Subdermal Levonogestrel Implant on Endometriosis Patient: A Case Report | |
| Narin et al. | Effects of natural progesterone on endometriosis in an experimental rat model: is it effective? | |
| RU2732251C1 (ru) | Способ лечения наружного генитального эндометриоза | |
| Khalifa et al. | Comparison of Ovariohysterectomy, Ovarian Electrocautery, and Ovarian Blood Supply Ligation for Elective Sterilization of Bitches. | |
| Beyth et al. | Ovarian implantation into the Uterus (Estes Operation): Clinical and experimental evaluation | |
| Laurent et al. | Oral Endometriosis: An Unexpected Presentation of An Exceptional Pathology |