RU2813866C1 - Способ количественного определения фурана и метилфурана в крови методом газохроматографического анализа с масс-селективным детектированием - Google Patents
Способ количественного определения фурана и метилфурана в крови методом газохроматографического анализа с масс-селективным детектированием Download PDFInfo
- Publication number
- RU2813866C1 RU2813866C1 RU2023115334A RU2023115334A RU2813866C1 RU 2813866 C1 RU2813866 C1 RU 2813866C1 RU 2023115334 A RU2023115334 A RU 2023115334A RU 2023115334 A RU2023115334 A RU 2023115334A RU 2813866 C1 RU2813866 C1 RU 2813866C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- furan
- methylfuran
- blood
- extraction
- minutes
- Prior art date
Links
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N Furan Chemical compound C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 176
- VQKFNUFAXTZWDK-UHFFFAOYSA-N 2-Methylfuran Chemical compound CC1=CC=CO1 VQKFNUFAXTZWDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 141
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 title claims abstract description 81
- 239000008280 blood Substances 0.000 title claims abstract description 81
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 48
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 50
- 239000007789 gas Substances 0.000 claims description 32
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 27
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 15
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 claims description 13
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 6
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 claims description 5
- 230000003113 alkalizing effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000016507 interphase Effects 0.000 claims description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 9
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 abstract description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 abstract 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 39
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 14
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 9
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 9
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 8
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 6
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 5
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 230000005264 electron capture Effects 0.000 description 4
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 4
- 238000002098 selective ion monitoring Methods 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 3
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 3
- -1 cyanopropyl Chemical group 0.000 description 3
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 3
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 3
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 3
- 238000002470 solid-phase micro-extraction Methods 0.000 description 3
- QQZOPKMRPOGIEB-UHFFFAOYSA-N 2-Oxohexane Chemical compound CCCCC(C)=O QQZOPKMRPOGIEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KJRRQXYWFQKJIP-UHFFFAOYSA-N 3-methylfuran Chemical compound CC=1C=COC=1 KJRRQXYWFQKJIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RHLVCLIPMVJYKS-UHFFFAOYSA-N 3-octanone Chemical compound CCCCCC(=O)CC RHLVCLIPMVJYKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 2
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 2
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- DUEPRVBVGDRKAG-UHFFFAOYSA-N carbofuran Chemical compound CNC(=O)OC1=CC=CC2=C1OC(C)(C)C2 DUEPRVBVGDRKAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 239000004205 dimethyl polysiloxane Substances 0.000 description 2
- 235000013870 dimethyl polysiloxane Nutrition 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- CATSNJVOTSVZJV-UHFFFAOYSA-N heptan-2-one Chemical compound CCCCCC(C)=O CATSNJVOTSVZJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- VSMOENVRRABVKN-UHFFFAOYSA-N oct-1-en-3-ol Chemical compound CCCCCC(O)C=C VSMOENVRRABVKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000021962 pH elevation Effects 0.000 description 2
- 229920000435 poly(dimethylsiloxane) Polymers 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000012855 volatile organic compound Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JLPUXFOGCDVKGO-TUAOUCFPSA-N (-)-geosmin Chemical compound C1CCC[C@]2(O)[C@@H](C)CCC[C@]21C JLPUXFOGCDVKGO-TUAOUCFPSA-N 0.000 description 1
- NMRPBPVERJPACX-UHFFFAOYSA-N (3S)-octan-3-ol Natural products CCCCCC(O)CC NMRPBPVERJPACX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001075 (4R,4aR,8aS)-4,8a-dimethyl-1,2,3,4,5,6,7,8-octahydronaphthalen-4a-ol Substances 0.000 description 1
- VSMOENVRRABVKN-MRVPVSSYSA-N 1-Octen-3-ol Natural products CCCCC[C@H](O)C=C VSMOENVRRABVKN-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- WOFPPJOZXUTRAU-UHFFFAOYSA-N 2-Ethyl-1-hexanol Natural products CCCCC(O)CCC WOFPPJOZXUTRAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YIWUKEYIRIRTPP-UHFFFAOYSA-N 2-ethylhexan-1-ol Chemical compound CCCCC(CC)CO YIWUKEYIRIRTPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YDXQPTHHAPCTPP-UHFFFAOYSA-N 3-Octen-1-ol Natural products CCCCC=CCCO YDXQPTHHAPCTPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010006784 Burning sensation Diseases 0.000 description 1
- 108020005124 DNA Adducts Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000028571 Occupational disease Diseases 0.000 description 1
- 206010037423 Pulmonary oedema Diseases 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 206010043994 Tonic convulsion Diseases 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 125000006615 aromatic heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003965 capillary gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 1
- 238000012754 cardiac puncture Methods 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000007797 corrosion Effects 0.000 description 1
- 238000005260 corrosion Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000000994 depressogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- JLPUXFOGCDVKGO-UHFFFAOYSA-N dl-geosmin Natural products C1CCCC2(O)C(C)CCCC21C JLPUXFOGCDVKGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005672 electromagnetic field Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 229930001467 geosmin Natural products 0.000 description 1
- 238000003988 headspace gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JQOAQUXIUNVRQW-UHFFFAOYSA-N hexane Chemical compound CCCCCC.CCCCCC JQOAQUXIUNVRQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000086 high toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 231100000003 human carcinogen Toxicity 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229960004592 isopropanol Drugs 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000000622 liquid--liquid extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- QUMITRDILMWWBC-UHFFFAOYSA-N nitroterephthalic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(C(O)=O)C([N+]([O-])=O)=C1 QUMITRDILMWWBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CXQXSVUQTKDNFP-UHFFFAOYSA-N octamethyltrisiloxane Chemical compound C[Si](C)(C)O[Si](C)(C)O[Si](C)(C)C CXQXSVUQTKDNFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 238000004987 plasma desorption mass spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 208000005333 pulmonary edema Diseases 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000607 toxicokinetics Toxicity 0.000 description 1
- 230000002110 toxicologic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000041 toxicology testing Toxicity 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к области токсикологии. Описан способ количественного определения фурана и метилфурана в крови методом газохроматографического анализа с масс-селективным детектированием. Концентрацию фурана и метилфурана, согласно способу, определяют с использованием градуировочного графика, характеризующего зависимость площади пика от содержания исследуемого компонента на хроматограмме. Технический результат, достигаемый предлагаемым способом, заключается в разработке достоверного и селективного способа количественного определения фурана и метилфурана в крови методом газохроматографического анализа с масс-селективным детектированием. 1 з.п. ф-лы, 1 ил., 8 табл., 1 пр.
Description
Изобретение относится к медицинским токсикологическим исследованиям, в частности, к санитарной токсикологии, и может быть использовано для количественного определения фурана и метилфурана в крови.
Фуран и метилфуран - это ароматические гетероциклические соединения, которые отличаются высокой летучестью.
В окружающей среде присутствуют сотни различных химических соединений, для которых характерны высокая токсичность, способность к накоплению в трофических цепях, устойчивость в окружающей среде. К их числу следует отнести фуран и его производные, которые являются опасными загрязнителями объектов окружающей среды. Международное агентство по исследованию рака классифицирует фуран как «возможный канцероген для человека (группа 2B)». Известно, что фуран может вызывать раздражение глаз, кожи и слизистых оболочек, ощущение жжения и в тяжелых случаях коррозию. При вдыхании фуран может вызвать отек легких и некроз бронхов. При всасывании фуран происходит угнетение центральной нервной системы вплоть до наркоза и тонических судорог.
Для оценки уровня неблагоприятных экологических воздействий, решения современных гигиенических проблем, формирования интегральных оценок состояния окружающей среды и здоровья населения, основанных на показателях риска поступления химических соединений в организм человека в условиях многокомпонентной комплексной нагрузки, необходимо располагать высокочувствительными, селективными, информативными и метрологически аттестованными методиками определения содержания химических соединений в биологических средах человека. Установлено, что в РФ контроль содержания фурана и его производных не проводится, так как в РФ не существует действующей системы биомониторинга человека ни на федеральном, ни на региональном уровне. Обзор отечественных и зарубежных научно-методических документов по физико-химическим методам контроля определения фурана и метилфурана в биологических жидкостях показал, что задача оценки токсичных гетероциклов остается весьма актуальной в РФ.
Из уровня техники известен способ определения фурадана и его метаболитов в биосредах методом хроматографии в тонком слое (статья В.Н.Оськина «Определение фурадана и его метаболитов в биосредах методом хроматографии в тонком слое», Киевский НИИ гигиена труда и профзаболеваний, 1981, https://cyberleninka.ru/article/n/opredelenie-furadana-i-ego-metabolitov-v-biosredah-metodom-hromatografii-v-tonkom-sloe), согласно которому пробу крови помещают в пробирку, смоченную раствором лимоннокислого натрия. Далее к 1 мл этой крови приливают 2 мл дистиллированной воды. Смесь экстрагируют дважды смесью хлороформа и диэтилового эфира в течение 15 мин. Полученный экстрак пропускают через слой безводного сернокислого натрия и производят отгонку растворителя. Количественное опроеделение проводили путем сопоставления окраски и размеров пятен проб и стандартных растворов. Чувствительность метода для крови составляла 0,5 мкг.
Также известен метод анализа пробы крови на наличие фурана SPME-GC/MS [IARC Classifies Radiofrequency Electromagnetic Fields as Possibly Carcinogenic to Humans [Электронный ресурс]. – URL: https://www.iarc.who.int/wpcontent/uploads/2018/07/pr208_E.pdf (дата обращения: 15.02.2023)]. Согласно известному методу образцы крови объемом 10 мл собирали в пробирки с этилендиаминтетраминовой кислотой (ЭДТА) и немедленно помещали в морозильную камеру, чтобы предотвратить потерю фурана при испарении. Плазму выделяли центрифугированием (630×g, 10 мин, 4 ºC). Клинические образцы хранились при температуре −80 ºC до тех пор, пока не было проведено измерение содержания фурана. Подготовка образцов крови к химическому анализу проводилась с использованием волокна карбоксен/полидиметилсилоксан (CAR/PDMS) толщиной 75 мкм. Волокно выдерживали при 60 ºC в течение 20 мин при постоянном перемешивании (200 об/мин) во флаконе для образца объемом 20 мл. Перед использованием волокно выдерживали в инжекционном отверстии газового хроматографа при 250 ºC в течение 1 ч. Инъекцию осуществляли путем десорбции волокна в течение 5 мин при 250 ºC. Волокно высушивали в течение 5 мин при 250 ºC перед следующей экстракцией, чтобы удалить остатки анализируемого вещества. Для анализа GC/MS использовали газовую систему GC Agilent 6890N, с массселективным детектором Agilent 5975. Хроматографическое разделение проводили на колонке HP-PLOT Q (15 м×0,32 мм, пленка 20 мкм. В качестве газа-носителя использовали гелий со скоростью потока 44 см/с. Масс-спектрометр работал в режиме селективного ионного мониторинга (SIM) путем регистрации токов следующих ионов: m/z 68 и 39 для фурана и m/z 72 и 42 для d4-фурана. Соответствующие соотношения ионов для фурана и d4-фурана определяли для каждого измерения. В режиме SIM данные полной сканирующей электронной ионизации (EI) были получены одновременно для определения подходящих масс для режима SIM.
Авторами M.I. Churchwell, R.C. Scheri, L.S. et al. [Evaluation of serum and liver toxicokinetics for furan and liver DNA adduct formation in male Fischer 344 rats / M.I. Churchwell, R.C. Scheri, L.S. Von Tungeln [et al.] // Food and Chemical Toxicology. – 2015. – Vol. 86. – P. 1–8. DOI: 10.1016/j.fct.2015.08.029] предложена методика определения фурана в крови. В данном методе цельную кровь собирали путем пункции сердца в вакуумные пробирки с ЭДТА объемом 3 мл. Пробирки были заполнены полностью, хорошо перемешаны и немедленно охлаждены. Образцы крови были проанализированы в тот же день, когда осуществлен забор крови. Аликвоту цельной крови объемом 1 мл добавляли во флакон объемом 10 мл и добавляли 100 п/моль внутреннего стандарта d4 фурана. Внутренний стандарт хранился на льду во время подготовки образца. Затем флакон закрывали обжимной крышкой с тефлоновой подкладкой и анализировали образец методом анализа равновесной паровой фазы (headspace GC/MS). Пределы обнаружения варьировались в диапазоне 0,4–1,5 пмоль/мл.
Из источника информации: Quantification of seven microbial volatile organic compounds in human serum by solid-phase microextraction gas chromatography-tandem mass spectrometry / I.J. Wazeerud-Din, L.K. Silva, M.M. Smith [et al.] // Chemosphere – 2021. – Vol. 266. DOI: 10.1016/j.chemosphere.2020.128970, известен высокопроизводительный автоматизированный метод количественного определения семи МЛОС (3-метилфуран, 2-гексанон, 2-гептанон, 3-октанон, 1-октен-3-ол, 2-этил1-гексанол и геосмин) в сыворотке крови человека. Методика пробоподготовки образцов крови заключается в том, что взятый биоматериал центрифугировали при 3000 об/мин в течение 10 мин, тем cамым отделяя эритроциты от сыворотки. Образцы крови до анализа хранятся при температуре минус 70 °C. Перед анализом образцы сыворотки размораживали и смешивали на гематологическом смесителе. Аликвота 0,5 мл была удалена из крови и перенесена во флакон SPME объемом 10 мл. Впоследствии образец сыворотки добавляли 40 мкл стандартного раствора, закрывали и смешивали в течение 5 мин. После пробоподготовки флаконы помещали в лоток для образцов кулера Пельтье (15 °C) на автопробоотборнике PAL. Для анализа образцов использовался газовый хроматограф Agilent Technologies 7000C в сочетании с трехквадрупольным масс-спектрометром (GC-MS/MS). Автопробоотборник Leap Technologies Inc. установлен на системе GC-MS/MS; эта двухрельсовая система выполняла автоматический нагрев образцов, извлечение и вкол. Целевые аналиты разделяли на капиллярной колонке Restek Rxi-5Sil MS (30 м; 0,25 мм; пленка 0,25 мкм). Метод позволяет количественно определить целевые аналиты с использованием твердофазной микроэкстракционной газовой хроматографии и тандемной масс-спектрометрии при низких уровнях содержания частиц на миллиард. Пределы обнаружения варьировались от 0,076 до 2,77 мкг/л.
Недостатками указанных известных способов является сложность исполнения, необходимость в применении нестандартного оборудования, а также сложность подготовки биологических образцов (кровь) к химическому анализу фурана и метилфурана.
При этом из уровня техники не были выявлены известные способы количественного определения фурана и метилфурана в крови методом газохроматографического анализа с масс-селективным детектированием, поэтому сделать выбор ближайшего аналога к заявляемому изобретению не представляется возможным.
Технический результат, достигаемый предлагаемым способом, заключается в разработке достоверного и селективного способа количественного определения фурана и метилфурана в крови методом газохроматографического анализа с масс-селективным детектированием.
Указанный технический результат достигается предлагаемым способом количественного определения фурана и метилфурана в крови методом газохроматографического анализа с масс-селективным детектированием, характеризующийся тем, что производят отбор пробы крови, выполняют подготовку ее к анализу путем подщелачивания 10%-ным водным раствором гидроокиси натрия до рН 8-9, далее осуществляют экстракцию гептаном, объем которого соотносится с объемом пробы крови как 1:2,5 соответственно, причем экстракцию ведут в течение 5 минут до установления межфазного равновесия, затем выполняют центрифугирование экстракта при 5000 об/мин в течение 10 мин, далее осуществляют отбор шприцем 1 мм3 образующегося экстракта и вводят его в инжектор испарителя газового хроматографа, снимают при этом хроматограмму, определяя площадь пика, причем время удерживания для фурана составляет 4,1 мин, а для метилфурана – 5,7 мин, а концентрацию фурана и метилфурана определяют с использованием градуировочного графика, характеризующего зависимость площади пика от содержания исследуемого компонента на хроматограмме, при этом газохроматографический анализ проводят на капиллярной колонке DB-5MS- 60м*0,25 мм*0,25мкм при температурном режиме: колонка - 40-200 °С; испаритель – 230°С; температура источника ионов – детектора, – 200 °С; расход газа-носителя азота – 20 см3/мин.
Подщелачивание пробы 10%-ным водным раствором гидроокиси натрия производят в объемном соотношении как 2,5:1 соответственно.
Поставленный технический результат достигается за счет следующего.
Измерение массовой концентраций фурана и метилфурана в биосреде (кровь) в предлагаемом способе основана на экстракционном концентрировании из крови объемом 2,5 см3 органическим растворителем (гептан) объемом 1 см3 (время контакта фаз 5 мин) с добавлением 1 см3 10 % NaOH, центрифугировании при 5000 об/мин в течении 10 мин для денатурации белка крови, газохроматографическом разделении на капиллярной колонке, идентификации веществ по масс-спектрам и количественному определению по извлеченным ионам методом ГХ/МС.
Экспериментальным путем обнаружено, что указанный технический результат обеспечивается именно совокупностью предложенных признаков, при реализации которых и достигается высокая чувствительность определения фурана и метилфурана в пробе крови, а также упрощается способ по сравнению с известными методами.
Высокая эффективность предлагаемого способа определения фурана и метилфурана в крови достигнута путем подбора оптимальных условий газохроматографического анализа: капиллярной колонки серии DB-5MS- 60м*0,25 мм*0,25мкм длиной 60 метров, внутренним диаметром 0,250 мм и толщиной пленки неподвижной фазы 0,250 мкм при оптимальном температурном режиме: колонка – 40-200 °С; испаритель –230°С; температура источника ионов (детектор) –200 °С; расход газа-носителя (азот) – 20 см3/мин.
Кроме того, полнота извлечения предлагаемым способом фурана из крови составляет 98 % и метилфурана 98,5 %.
В процессе валидации заявляемого способа установлены пределы обнаружения (LOD) изучаемых соединений в крови, которые составили: для фурана до 0,00011 мкг/см3 и до 0,000021 мкг/см3 для метилфурана.
Благодаря совокупности существенных признаков предлагаемого способа обеспечено снижение пределов количественного определения (LOQ) до 0,0011 мкг/см3 для фурана и до 0,00021 мкг/см3 для метилфурана. Предел количественного определения LOQ для фурана в крови составил = 0,0011 мкг/см3 и установлен больше предела обнаружения >. Для метилфурана предел количественного определения LOQ в крови составил = 0,00021 мкг/см3.
Предлагаемый способ реализуется следующим образом.
- производят отбор пробы крови в объеме 2,5 мл;
- выполняют подготовку ее к анализу путем подщелачивания ее 10%-ным водным раствором гидроокиси натрия до рН 8-9, ориентировочно, используют 1 мл указанного раствора;
- далее осуществляют экстракцию гептаном объемом 1 мл, объем которого соотносится с объемом пробы крови как 1:2,5 соответственно,
- причем экстракцию ведут в течение 5 минут до установления межфазного равновесия,
- выполняют центрифугирование экстракта при 5000 об/мин в течение 10 мин,
- далее осуществляют отбор шприцем 1 мм3 образующегося экстракта и введение его в инжектор испарителя газового хроматографа, снимают при этом хроматограмму, определяя площадь пика, причем время удерживания для фурана составляет 4,1 мин, для метилфурана – 5,7 мин,
- а концентрацию фурана и метилфурана определяют с использованием градуировочного графика (Рис.1), характеризующего зависимость площади пика от содержания исследуемого компонента на хроматограмме, при этом газохроматографический анализ проводят на капиллярной колонке DB-5MS- 60м*0,25 мм*0,25мкм при температурном режиме: колонка– 40-200 °С; испаритель – 230°С; температура источника ионов – детектора, – 200 °С; расход газа-носителя (азот)– 20 см3/мин.
Чувствительность и точность способа лимитируется, прежде всего, процессом газовой экстракции. Константа распределения вещества между конденсированной и газовой фазами очень чувствительна к температуре. Это накладывает довольно жесткие ограничения на стабильность температуры в процессе распределения вещества между фазами при количественных измерениях, что значительно влияет на точность анализа.
При разработке газохроматографических методик определения органических соединений в биологических средах важным этапом является отработка параметров газохроматографического определения. Для установления высокой степени селективности и высокой чувствительности определения используются специфические детекторы (детектор электронного захвата, термоионный детектор, масс-селективный детектор и т.д.), капиллярные колонки различной длины (от 20 до 100 м) заполненные неподвижными жидкими фазами различной полярности.
Отработка оптимальных хромато-масс-спектрометрических параметров определения фурана и метилфурана при использовании стандартного образца осуществлялась с использованием газовой хроматографии и масс-спектрометрии (ГХ/МС): газовый хроматограф (Хроматэк-Кристалл) и при анализе биологических образцов для того, чтобы свести к минимуму влияние основного компонента пробы крови,
использовали масс-селективный детектор (Хроматэк-Кристалл) и квадрупольный масс-анализатор. Режим ионизации электронным ударом при 70 эВ.
использовали масс-селективный детектор (Хроматэк-Кристалл) и квадрупольный масс-анализатор. Режим ионизации электронным ударом при 70 эВ.
Одним из основных факторов, определяющих эффективность хроматографического разделения, является правильный выбор неподвижной жидкой фазы (НЖФ), которая должна быть наиболее селективной по отношению к разделяемым соединениям. Используя капиллярные колонки с различными по полярности НЖФ, можно варьировать селективность и достигать высокой эффективности разделения. Поэтому были изучены условия разделения на капиллярных колонках с различными характеристиками неподвижных жидких фаз: DB-624-25m⋅0,32mm⋅5,0µm (полярная цианопропильная фаза; температурный предел от 60°С до 260/300°С), HP-FFAP-50m•0,32mm•0,5µm (полярная фаза с покрытием нитротерефталевой кислотой; температурный предел от 60°С до 240/250°С) и DB-5MS- 60м*0,25 мм*0,25мкм длиной 60 метров, внутренним диаметром 0,250 мм и толщиной пленки неподвижной фазы 0,250 мкм. Качественное разделение в пробе крови фурана и метилфурана с близкими физико-химическими свойствами было достигнуто на капиллярной колонке серии DB-5MS- 60м*0,25 мм*0,25мкм.
В процессе исследования определяли влияние температуры на параметры процесса разделения фурана и метилфурана. Под эффективностью хроматографической системы понимается ее способность препятствовать размыванию хроматографических пиков хроматограмм. На селективность оказывает влияние температура, а на эффективность влияет скорость потока газа-носителя. В процессе разделения фурана и метилфурана во времени применяли нелинейный закон, т.е. температуру капиллярной колонки повышали от 40 ºС до 200 ºС со скоростью 40 ºС/мин, что позволило разделить и выделить все компоненты биологического образца. В условиях эксперимента были отработаны расходы газа-носителя, деление потока азот : воздух и без деления потока азот : воздух. Температуру источника ионов установили на 200 ºС. Сканирование масс анализируемых соединений образца крови выполняли в диапазоне от 37 до 150 а.е.м. Оптимальные газохроматографические параметры представлены в таблице 1.
Таблица 1 - Оптимальные условия хроматографирования образца крови предлагаемым способом
Режим | Температура, ºС | Скорость потока газа-носителя, мл/мин | Температура испарителя, ºС |
Деление потока азот: воздух/ без деления потока азот: воздух (коэффициент деления) |
|
колонки | Скорость нагрева, ºС/мин | ||||
1 | 40–200 | 40 | 1,6 | 230 | без деления потока азот: воздух с экономией газа |
2 | 40–200 | 40 | 1,6 | 230 | с делением потока азот: воздух 12,5 |
3 | 40–160–200 | 15 | 30 | 180 | с делением потока азот: воздух 15,6 |
В режимах 1 и 3 не наблюдалось достаточно эффективного разделения фурана и метилфурана. Эффективное разделение следовых количеств легколетучих органических соединений (фуран и метилфуран) основано на экспериментально отработанных оптимальных газохроматографических параметрах и вводе пробы в поток газа-носителя с делением потока с коэффициентом деления 12,5 (режим 2 таблица 1).
Хроматограмма стандартного раствора фурана и метилфурана при оптимально отработанных условиях хромато-масс-спектрометрического анализа, зарегистрированная по полному ионному току, представлена на рисунке 1.
При этом на хроматограмме пик 1 относится к фурану, пик 2 – к метилфурану.
Температурные режимы, использованные при выборе оптимальных условий разделения фурана и метилфурана, в предлагаемом способе, представлены в таблице 2.
Таблица 2 - Температурные режимы, использованные при выборе оптимальных условий разделения фурана и метилфурана в пробе крови
Режим | Температура, 0С | ||
колонка | Температура источника ионов (детектор) | Испаритель | |
1 | 40-200 | 220 | 230 |
2 | 40–200 | 200 | 230 |
3 | 70-230 о С | 250 | 230 |
Данные, приведенные в таблице 2, показывают, что оптимальные условия хроматографирования фурана и метилфурана из пробы крови предлагаемым способом достигнуты в режиме 2 при температурном режиме: колонка – 40-200 °С; испаритель – 230°С; температура источника ионов (детектор) – 200 °С; расход газа-носителя (азот) – 20 см3/мин.
Для обнаружения гетероциклов в биологических средах (кровь) использовали высокочувствительный масс-селективный детектор (МСД). Характеристики газохроматографического анализа гетероциклов (фурана и метилфурана) представлены в таблице 3.
Таблица 3 - Характеристики газохроматографического анализа гетероцикла (фуран) и сильвана (метилфуран) в крови
Вещество | НЖФ, носитель, фракция | Длина колонки, м | Объем пробы для анализа, мм3 |
Время удерживания, мин |
Фуран | DB-5MS- 60м*0,25 мм*0,25мкм | 60 | 1 | 4,1 мин |
Метилфуран | 5,7 мин |
В современном химико-токсикологическом анализе одним из перспективных методов разделения и концентрирования органических соединений является гетерогенная жидкостная экстракция. Задача экстракции состоит в том, чтобы полно и селективно перевести аналит из биологической среды в органическую фазу.
Для обеспечения полноты извлечения фурана и метилфурана из биосреды (кровь) были подобраны условия экстракции: выбор органического растворителя, объем экстрагента, рН среды, число экстракций и время достижения равновесия.
В ходе экспериментальных работ по выбору экстрагента и для эффективного извлечения фурана и метилфурана из крови применена жидкостная экстракция различными органическими растворителями, изучены экстракционные характеристики. Данные приведены в таблице 4.
Таблица 4 - Зависимость полноты экстракции фурана и метилфурана из крови от полярности органических растворителей (n=5, р=0,95)
Органический растворитель | Фуран | Степень экстракции, % | Метилфуран | Степень экстракции, % | ||
Введено, мкг/мл | Получено, мкг/мл | Введено, мкг/мл | Получено, мкг/мл | |||
1. Метанол (среднеполярный) | 0,18±0,05 | 0,09±0,0035 | 50 | 0,18±0,05 | 0,176±0,043 | 97,7 |
2. Изо-пропанол (малополярный) | н/о | 0 | н/о | 0 | ||
3. Этилацетат (среднеполярный) | 0,033±0,0045 | 18,3 | 0,128±0,035 | 71 | ||
4. Гептан (полярный) | 0,112±0,056 | 62 | 0,155±0,047 | 86 | ||
5. Гексан (гексан) | 0,105±0,024 | 58,4 | н/о | 0 |
н/о – не определялся; р – вероятность.
Данные, приведенные в таблице 4, показывают, что с учетом максимальной степени экстракции фурана и метилфурана (62-86 %) из крови и оптимальных условий разделения в качестве растворителя-экстрагента был выбран гептан.
В таблице 5 приведена зависимость степени экстракции фурана и метилфурана из крови от объема растворителя.
Таблица 5 - Зависимость степени экстракции фурана и метилфурана из крови от объема органического растворителя
Объем введенного в пробу крови гептана |
Фуран (мкг/мл) | Полнота экстракции, % | Метилфуран (мкг/мл) | Полнота экстракции, % | ||
Введено | Найдено | Введено | Найдено | |||
2,5 мл | 0,18 | 0,059±0,0036 | 33,3 | 0,18 | 0,079±0.0048 | 44,4 |
2,0 мл | 0,058±0,0043 | 32,2 | 0,091±0,0075 | 50,6 | ||
1,5 мл | 0,102±0,058 | 56,7 | 0,146±0,038 | 81,1 | ||
1,0 мл | 0,113±0,053 | 62,8 | 0,174±0,056 | 86,7 |
Данные, приведенные в таблице 5, показывают, что при использовании органического растворителя гептана в объеме 1,0 мл для экстракции (соотношение объема гептана к объему пробы крови составляет 1:2,5 соответственно) степень извлечения из крови составила для фурана 62,8 % и для метилфурана 86,7 %.
Далее осуществляли изучение зависимости степени экстракции фурана и метилфурана из цельной крови и плазмы от объема биоматериала и органических растворителей. Изолирование токсичных соединений методом экстракции может
проводится из цельной крови, плазмы или сыворотки. Прецизионность анализа и эффективность извлечения фурана и метилфурана из крови и из плазмы крови устанавливали экспериментально способом «введено–найдено» с применением стандартных растворов. Данные приведены в таблице 6.
проводится из цельной крови, плазмы или сыворотки. Прецизионность анализа и эффективность извлечения фурана и метилфурана из крови и из плазмы крови устанавливали экспериментально способом «введено–найдено» с применением стандартных растворов. Данные приведены в таблице 6.
Таблица 6 - Зависимость степени экстракции фурана и метилфурана из крови и из плазмы крови от объема органического растворителя и объема крови для анализа
Этапы пробоподготовки | Фуран (мкг/мл) | Полнота экстракции, % | Метилфуран (мкг/мл) |
Полнота экстракции, % | ||
Введено | Найдено | Введено | Найдено | |||
Кровь 1,0 мл | 0,18 | 0,125±0,035 | 69,4 | 0,18 | 0,158±0,054 | 87,7 |
Гептан 2,5 мл | ||||||
Ручная экстракция (5 минут) | ||||||
Центрифугирование (10 минут 5000 оборотов) | ||||||
Кровь 2,5 см3 | 0,18 | 0,139±0,028 | 77,22 | 0,18 | 0,163±0,045 | 90,56 |
Гептан 1 см3 | ||||||
Ручная экстракция (5 минут) | ||||||
Центрифугирование (10 минут 5000 оборотов) | ||||||
Кровь 2,5 см3 | 0,18 | 0,00265±0,0003 | 14,72 | 0,18 | 0,0287±0,0048 | 15,95 |
Центрифугирование (10 минут 5000 оборотов) | ||||||
Плазма крови | ||||||
Гептан 2,5 см3 | ||||||
Ручная экстракция (5 минут) | ||||||
Центрифугирование (10 минут 5000 оборотов) |
Анализ полученных результатов (таблица 6) показал, что при использовании 1 см3 экстрагента (гептан) и 2,5 см3 крови, экстракции в течение 5 минут и центрифугирования экстракта в течение 10 минут при 5000 об/мин позволило достичь степени экстракции для фурана 77 % и метилфурана 91 %.
Кроме того, было установлено, что предлагаемый способ не подходит для исследования плазмы крови, т.к. полнота извлечения фурана и метилфурана из плазмы составила для фурана 15 % и для метилфурана 16 %.
Было проведено изучение зависимости степени экстракции фурана и метилфурана из крови от рН. Экстракция органических соединений из биосреды зависит от ряда факторов, в том числе и от рН среды. С целью максимального извлечения фурана и метилфурана из крови и установления параметров экстракции в экспериментальных исследованиях применяли и подкисление неорганической кислотой, и подщелачивание щелочью щелочноземельных металлов биопробы, т.к. фуран и его производные находятся в виде комплексов с белками. Результаты представлены в таблице 7.
Таблица 7 - Зависимость степени экстракции фурана и метилфурана из крови от рН среды (n=2, р=0,95)
рН среды | Фуран (мкг/мл) | Полнота экстракции, % | Метилфуран (мкг/мл) | Полнота экстракции, % | ||
Введено | Найдено | Введено | Найдено | |||
Подкисление пробы крови 10%-ным р-ром H2SO4 (до рН 4-5) | 0,18 | 0,1395±0,045 | 77,5 | 0,18 | 0,155±0,029 | 86 |
Подщелачивание пробы крови 10%-ным р-ром NaOH (до рН 8-9) | 0,176±0,038 | 98,0 | 0,177±0,049 | 98,5 |
Полученные результаты (таблица 7) позволили заключить, что фуран и метилфуран с высокой степенью извлечения 98 и 98,5 % из пробы крови изолируются именно из щелочной среды.
Экспериментальным путем установлено, что применение в качестве экстрагента гептана объемом 1 см3 позволяет более полно извлечь фуран и метилфуран из крови, и только при использовании 10%-ного р-ра NaOH (подщелачивание до рН 8-9) обеспечивается повышение степени экстракции до 98 % и 98,5 % соответственно.
Это, по-видимому, объясняется тем, что при подкислении происходит денатурация молекул белка и разрушение водородных связей, солевых и иных мостиков, поддерживающих вторичную и третичную структуру молекулы белка. Вследствие этого молекула белка теряет специфическую пространственную форму, утрачивает свое биологическое действие и происходит ее разложение с выделением летучих продуктов. Вместе с тем, при взаимодействии фурана и его производных с сильными кислотами уменьшается стабильность кольца – фурановое кольцо расщепляется и полимеризуется. Неустойчивость фурана в кислой среде сопровождается сильным осмолением и промежуточным образованием диеновых соединений.
Вместе с тем, фуран устойчив к действию щелочей щелочноземельных металлов и поэтому фурановое кольцо не разрушается, а потому повышается полнота извлечения фурана и метилфурана из пробы крови.
Исходя из вышеизложенного, оптимальные условия процесса определения фурана и метилфурана в пробе крови предлагаемым способом следующие:
- максимальная полнота извлечения фурана и метилфурана из крови – 98% и 98,5% соответственно, достигнута при подобранных оптимальных условиях подготовки пробы для газохроматографического анализа путем подщелачивания пробы крови до рН 8-9 10%-ным водным раствором гидроокиси натрия, концентрирования из крови (время контакта 5 мин) органическим растворителем-экстрагентом - гептан, (соотношение его объема к объему крови 1:2,5 соответственно), денатурации белка центрифугированием биосреды при 5000 об/мин в течение 10 мин, и последующем определении на газовом хроматографе с детектором электронного захвата (ДЭЗ).
Опыты показали, что полнота разделения фурана и метилфурана в пробе крови достигнута на капиллярной колонке DB-5MS- 60м*0,25 мм*0,25мкм при температурном режиме: колонка– 40-200 °С; испаритель – 230°С; температура источника ионов – детектора, – 200 °С; расход газа-носителя (азот)– 20 см3/мин.
Для обнаружения фурана и метилфурана в пробе крови в биологической среде (кровь) использовали высокоспецифичный электронно-захватный детектор (ДЭЗ). Ниже в таблице 8 приведены параметры и условия режима работы хромато-масс-спектрометра при реализации предлагаемого способа.
Таблица 8 - Параметры и условия режима работы хромато-масс-спектрометра
Параметры | Условия |
температура термостата колонки: | 40оС-100 оС-200 ºС |
температура ионного источника | 200 0С |
температура переходной линии | 230 0С |
режим Split с делением потока (Split ratio) | 12,5:1 |
cкорость газа-носителя – гелия | 20 см3/мин |
скорость газа-носителя – гелия через колонку | 1,0 см3/мин |
температура квадрупольного масс-анализатора | 150 ºС |
ток эмиссии режим сканирования: |
70 эВ |
фуран | по масс-селективным ионам – 39, 68, 53 |
метилфуран | по масс-селективным ионам – 39, 68, 53 |
время до начала сканирования | 0 мин |
объем пробы | 1 мкл |
время удерживания: | |
фуран | (4,1 ± 0,05) мин |
метилфуран | (5,7 ± 0,02) мин |
Благодаря тому что образующийся при пробоподготовке экстракт анализируют методом газовой хроматографии с детектором электронного захвата, обеспечивает максимально возможное по чувствительности газохроматографическое определение. Определение количества фурана и метилфурана в крови методом газохроматографического анализа проводят с использованием градуировочного графика. Для его построения выполняют традиционные действия.
Предлагаемый способ устанавливает порядок применения метода капиллярной газовой хроматографии для измерения массовых концентраций фурана и метилфурана в пробах крови в диапазоне концентраций от 0,0019 до 0,09 мг/дм3 при стандартном отклонении не более 10 % и погрешности не более 20 %.
Длительность анализа, включая экстракцию биопробы, составляет не более 60 мин.
Claims (2)
1. Способ количественного определения фурана и метилфурана в крови методом газохроматографического анализа с масс-селективным детектированием, характеризующийся тем, что производят отбор пробы крови, выполняют подготовку ее к анализу путем подщелачивания 10%-ным водным раствором гидроокиси натрия до рН 8-9, далее осуществляют экстракцию гептаном, объем которого соотносится с объемом пробы крови как 1:2,5 соответственно, причем экстракцию ведут в течение 5 минут до установления межфазного равновесия, затем выполняют центрифугирование экстракта при 5000 об/мин в течение 10 мин, далее осуществляют отбор шприцем 1 мм3 образующегося экстракта и вводят его в инжектор испарителя газового хроматографа, снимают при этом хроматограмму, определяя площадь пика, причем время удерживания для фурана составляет 4,1 мин, а для метилфурана - 5,7 мин, а концентрацию фурана и метилфурана определяют с использованием градуировочного графика, характеризующего зависимость площади пика от содержания исследуемого компонента на хроматограмме, при этом газохроматографический анализ проводят на капиллярной колонке DB-5MS-60 м*0,25 мм*0,25 мкм при температурном режиме: колонка - 40-200°С; испаритель - 230°С; температура источника ионов - детектора, - 200°С; расход газа-носителя азота - 20 см3/мин.
2. Способ по п.1, характеризующийся тем, что подщелачивание пробы 10%-ным водным раствором гидроокиси натрия производят в объемном соотношении 2,5:1 соответственно.
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2813866C1 true RU2813866C1 (ru) | 2024-02-19 |
Family
ID=
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2269780C1 (ru) * | 2004-06-08 | 2006-02-10 | Владимир Камбулатович Шорманов | Способ определения o-(2,3-дигидро-2,2-диметил-7-бензофуранил)-n-метилкарбамата в биологическом материале |
WO2016126923A1 (en) * | 2015-02-06 | 2016-08-11 | Metabolon, Inc. | Diagnostic methods, therapeutic agents and uses thereof |
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2269780C1 (ru) * | 2004-06-08 | 2006-02-10 | Владимир Камбулатович Шорманов | Способ определения o-(2,3-дигидро-2,2-диметил-7-бензофуранил)-n-метилкарбамата в биологическом материале |
WO2016126923A1 (en) * | 2015-02-06 | 2016-08-11 | Metabolon, Inc. | Diagnostic methods, therapeutic agents and uses thereof |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Субботина Д. Ю. Экспериментальные исследования по выбору метода пробоподготовки к химическому анализу фурана и метилфурана в пищевых продуктах на примере детских каш методом хромато-масс-спектрометрии / Д. Ю. Субботина, Т. В. Нурисламова // Анализ риска здоровью - 2022. Фундаментальные и прикладные аспекты обеспечения санитарно-эпидемиологического благополучия населения: Материалы международной встречи по окружающей среде и здоровью RISE-2022. Материалы XII Всероссийской научно-практической конференции с международным участием. В двух томах, Пермь, 18-20 мая 2022 года. Том 2. - Пермь: Пермский национальный исследовательский политехнический университет, 2022. - С. 328-333. - EDN HQQNYY. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Majchrzak et al. | PTR-MS and GC-MS as complementary techniques for analysis of volatiles: A tutorial review | |
Vatinno et al. | Automated high-throughput method using solid-phase microextraction–liquid chromatography–tandem mass spectrometry for the determination of ochratoxin A in human urine | |
Sana et al. | A sample extraction and chromatographic strategy for increasing LC/MS detection coverage of the erythrocyte metabolome | |
US20240159771A1 (en) | Simplified biosample processing for lc-ms/ms | |
Thomas et al. | Dried blood spots (DBS) for doping control analysis | |
Sriboonvorakul et al. | Liquid chromatographic–mass spectrometric method for simultaneous determination of small organic acids potentially contributing to acidosis in severe malaria | |
Wei et al. | Simultaneous determination of seven endogenous aldehydes in human blood by headspace gas chromatography–mass spectrometry | |
Shiea et al. | Rapid quantification of acetaminophen in plasma using solid‐phase microextraction coupled with thermal desorption electrospray ionization mass spectrometry | |
CN113533549B (zh) | 白酒口味物质鉴定分析系统 | |
WO2013103841A1 (en) | METHODS FOR QUANTITATIVE CHIRAL DETERMINATION OF THE d- AND l- ENANTIOMERS OF AMPHETAMINE AND METHAMPHETAMINE | |
CN113295797A (zh) | 一种基于超高效液相色谱联用高分辨质谱快速检测白酒中氨基甲酸乙酯的方法 | |
JP2022528979A (ja) | Lc-ms/msによる11-オキソアンドロゲンの検出のための方法およびシステム | |
RU2813866C1 (ru) | Способ количественного определения фурана и метилфурана в крови методом газохроматографического анализа с масс-селективным детектированием | |
Mauriala et al. | Determination of long-chain fatty acid acyl-coenzyme A compounds using liquid chromatography–electrospray ionization tandem mass spectrometry | |
Szpot et al. | Fragmentation patterns involving ammonium adduct fragment ions: A comparison of the determination of metaldehyde in human blood by HPLC-QqQ-MS/MS and UHPLC-Q-TOF-MS | |
Chen et al. | Determination of fragrance ingredients in fish by ultrasound-assisted extraction followed by purge & trap | |
RU2419788C2 (ru) | Способ выявления неизвестных веществ в биологических жидкостях пациентов, принимавших наркотические или психоактивные вещества | |
Van Peteghem et al. | Quantification of diethylstilbestrol residues in meat samples by gas chromatography-isotope-dilution mass spectrometry | |
Mehdinia et al. | Analysis of cantharidin in false blister beetles (Coleoptera: Oedemeridae) by headspace solid-phase microextraction and gas chromatography–mass spectrometry | |
RU2705932C1 (ru) | Способ идентификации наркотических и психоактивных веществ в сложных биологических матрицах организма человека | |
RU2687887C1 (ru) | Способ определения 1-гидроксипирена в моче методом хромато-масс-спектрометрического анализа | |
RU2390771C1 (ru) | Способ идентификации наркотических и психоактивных веществ в биологических жидкостях | |
JP7378469B2 (ja) | アスコルビン酸を測定するための方法およびシステム | |
RU2392616C1 (ru) | Способ выявления и определения происхождения неизвестных веществ в спиртных напитках | |
Mahugija et al. | Comparison of centrifugation and solid phase extraction (SPE) methods of sample preparations in determination of residues of drugs of abuse in urine |