RU2813771C1 - Способ профилактики эшерихиоза у телят - Google Patents
Способ профилактики эшерихиоза у телят Download PDFInfo
- Publication number
- RU2813771C1 RU2813771C1 RU2022129934A RU2022129934A RU2813771C1 RU 2813771 C1 RU2813771 C1 RU 2813771C1 RU 2022129934 A RU2022129934 A RU 2022129934A RU 2022129934 A RU2022129934 A RU 2022129934A RU 2813771 C1 RU2813771 C1 RU 2813771C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- calves
- vaccine
- days
- escherichiosis
- escherichia coli
- Prior art date
Links
- 244000309466 calf Species 0.000 title claims abstract description 55
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims abstract description 44
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims abstract description 29
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims abstract description 26
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims abstract description 23
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims abstract description 20
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 17
- 230000003053 immunization Effects 0.000 claims abstract description 17
- 238000002649 immunization Methods 0.000 claims abstract description 15
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000003053 toxin Substances 0.000 claims abstract description 14
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 claims abstract description 14
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 claims abstract description 14
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 10
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 8
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 6
- 229940008099 dimethicone Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 239000004205 dimethyl polysiloxane Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 claims abstract description 5
- 150000003961 organosilicon compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 229920000435 poly(dimethylsiloxane) Polymers 0.000 claims abstract description 5
- 229910018626 Al(OH) Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 108010017898 Shiga Toxins Proteins 0.000 claims description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 abstract description 4
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 2
- 229910021502 aluminium hydroxide Inorganic materials 0.000 abstract 2
- 229910001679 gibbsite Inorganic materials 0.000 abstract 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 10
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 8
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 7
- 206010061126 Escherichia infection Diseases 0.000 description 5
- 210000003022 colostrum Anatomy 0.000 description 5
- 235000021277 colostrum Nutrition 0.000 description 5
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 5
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 5
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 206010024769 Local reaction Diseases 0.000 description 3
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000003948 anatoxin Substances 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 2
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- GFRHEOMWAJJZSF-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(2-chloroethyl)amino]-2-[4-[4-[1-[bis(2-chloroethyl)amino]-2-oxoethyl]phenyl]phenyl]acetaldehyde Chemical compound C1=CC(C(C=O)N(CCCl)CCCl)=CC=C1C1=CC=C(C(C=O)N(CCCl)CCCl)C=C1 GFRHEOMWAJJZSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000693940 Centruroides noxius Beta-toxin Cn7 Proteins 0.000 description 1
- 241000223782 Ciliophora Species 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 206010022678 Intestinal infections Diseases 0.000 description 1
- 101001049890 Pandinus imperator Potassium channel toxin alpha-KTx 6.5 Proteins 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000001147 anti-toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000000151 deposition Methods 0.000 description 1
- WMWXXXSCZVGQAR-UHFFFAOYSA-N dialuminum;oxygen(2-);hydrate Chemical compound O.[O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] WMWXXXSCZVGQAR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 231100000776 exotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 239000002095 exotoxin Substances 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 239000000413 hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 230000009800 post vaccination immunity Effects 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 102220240796 rs553605556 Human genes 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000003206 sterilizing agent Substances 0.000 description 1
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical class [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к области ветеринарии, касается способа профилактики колибактериоза телят. Способ профилактики эшерихиоза у телят включает использование вакцины против эшерихиоза, содержащей бесклеточную культуральную среду, состоящую из инактивированных формалином до его конечной концентрации 0,4% термолабильных, термостабильных и шигаподобных токсинов Escherichia coli, полученных путем смешивания в равных соотношениях эпизоотических штаммов Escherichia coli с последующим отделением бактериальной массы с помощью стерилизующей фильтрации и внесенные поочередно с последующим перемешиванием в бесклеточную культуральную среду адъюванты. Проводят двукратную иммунизацию телят этой вакциной подкожно в область верхней трети шеи - в первый и во второй разы в дозе 2 мл и двукратную иммунизацию этой же вакциной стельных коров, от которых получены телята: первый и второй разы - в дозе 10 мл подкожно в область верхней трети шеи. Причем в качестве адъювантов используют 2%-ную суспензию Al(ОН)3 и масляный адъювант, состоящий из эмульгатора - биологически инертного кремнийорганического соединения цетил-ПЭГ/ППГ-10/1-диметикона в количестве 1,5% и масляной основы - вакцинного масла "М" в количестве 98,5%. Компоненты вакцины берут при следующем соотношении компонентов, мас. %: 2%-ная суспензия Al(ОН)3 - 19-21, масляный адъювант - 49-51, бесклеточная культуральная среда, состоящая из инактивированных формалином до его конечной концентрации 0,4% термолабильных, термостабильных и шигаподобных токсинов Escherichia coli - до 100. При этом первую иммунизацию телят проводят в возрасте 13-15 дней и вторую - в возрасте 19-21 день. А стельным коровам первую иммунизацию проводят за 45 дней до отела, а вторую - за 15 дней до отела. Изобретение направлено на повышение эффективности специфической профилактики эшерихиоза у телят и расширение ассортимента препаратов для профилактики этого заболевания. 2 табл.
Description
Изобретение относится к области ветеринарии, касается способа профилактики колибактериоза телят.
Известен способ профилактики колибактериоза, включающий иммунизацию телят вакциной против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987Р, F41, ТЛ и ТС-анатоксины) внутримышечно перед отъемом с интервалом 10-15 дней; при этом первая доза составляет 1 см3, вторая - 1,5 см3 [Наставление по применению вакцины против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987Р, F41, ТЛ- и ТС-анатоксины)/Утверждено Департаментом ветеринарии Минсельхоза России 20.06.1997 г.].
Установлено, что эффективными средствами специфической профилактики эшерихиоза у животных являются вакцины, содержащие в своем составе инактивированные экзотоксины патогенных Escherichia coli (Биологические препараты для специфической профилактики и терапии эшерихиоза животных/М.К. Пирожков//Дисс.док. вет.наук. - Москва, 2002. - 298 с).
В настоящее время есть исследования по использованию биопрепаратов, которые включают сразу три вида токсинов патогенных эшерихий: термолабильный (LT) и термостабильный (ST) и шигагюдобный (STX) токсины, как в чистом виде, так и в сочетании с адъювантами (Караев Я.М. Иммуно-генные и протективные свойства эшерихиозного анатоксина: дис.… канд. вет.наук/Я.М. Караев. - Краснодар: КубГАУ, 2009. - 132 с.; Тищенко А.С. Влияние адъювантов на иммуногенные свойства эшерихиозного анатоксина: дис.канд. вет. наук/А.С. Тищенко. - Краснодар: КубГАУ, 2011. - 124 с).
Однако этими исследованиями было установлено, что эшерихиозный анатоксин стимулирует клеточные и гуморальные звенья иммунитета в первые сутки после введения препаратов, а использование адъювантов хоть и усиливает иммунный ответ, но на непродолжительное время. Учитывая данные обстоятельства, необходимо искать новые способы повышения иммуногенной активности вакцинных препаратов на основе инактивированных токсинов кишечной палочки.
Известно техническое решение (патент №2432174 от 27.10.2011, МПК А61К 39/108, C12N 1/20, А61Р 1/00), в котором, отбирают и раздельно культивируют эпизоотические штаммы Escherichia coli, обладающие генами термолабильного, термостабильного и шигаподобного токсинов, на питательном бульоне при температуре 37°С в течение 6-7 дней с ежедневным двукратным перемешиванием. Инактивацию культур проводят путем добавления формалина до концентрации не более 0,4%, при температуре 37°С в течение 14 суток с ежедневным двукратным перемешиванием. После чего отбирают и смешивают культуры в равных соотношениях, отделяют бактериальную массу с помощью стерилизующей фильтрации и получают комплексный препарат.
Известен способ профилактики эшерихиоза у телят, включающий использование вакцины против эшерихиоза содержащую бесклеточную культуральную среду, состоящую из инактивированных формалином до его конечной концентрации 0,4% термолабильные, термостабильные и шигаподобные токсины Escherichia coli, полученные путем смешивания в равных соотношениях эпизоотических штаммов Escherichia coli с последующим отделением бактериальной массы с помощью стерилизующей фильтрации и внесенные поочередно с последующим перемешиванием в бесклеточную культуральную среду адъюванты, двукратную иммунизацию телят этой вакциной подкожно в область верхней трети шеи в дозе не более 2 мл и двукратную иммунизацию этой же вакциной стельным коровам, от которых получены телята в дозе не более 10 мл также подкожно в область верхней трети шеи (патент РФ №2766249, кл. А61К 39/00, 2022 г. - прототип).
Недостатком известного технического решения является недостаточная эффективность специфической профилактики эшерихиоза у телят.
Техническим результатом изобретения является повышение эффективности специфической профилактики эшерихиоза у телят и расширение ассортимента препаратов для профилактики этого заболевания. Технический результат достигается тем, что в способе профилактики эшерихиоза у телят, включающем использование вакцины против эшерихиоза, содержащую бесклеточную культуральную среду, состоящую из инактивированных формалином до его конечной концентрации 0,4% термолабильных, термостабильных и шигаподобных токсинов Escherichia coli, полученных путем смешивания в равных соотношениях эпизоотических штаммов Escherichia coli с последующим отделением бактериальной массы с помощью стерилизующей фильтрации и внесенные поочередно с последующим перемешиванием в бесклеточную культуральную среду адъюванты, двукратную иммунизацию телят этой вакциной подкожно в область верхней трети шеи - в первый и во второй разы в дозе 2 мл и двукратную иммунизацию этой же вакциной стельных коров, от которых получены телята: первый и второй разы - в дозе 10 мл подкожно в область верхней трети шеи, причем в качестве адъювантов используют 2%-ную суспензию Al(ОН)3 и масляный адъювант, состоящий из эмульгатора - биологически инертного кремнийорганического соединения цетил-ПЭГ/ППГ-10/1-диметикона в количестве 1,5% и масляной основы - вакцинного масла "М" в количестве 98,5%, при следующем соотношении компонентов, мас. %:
| 2%-ная суспензия Al(ОН)3 | 19-21 |
| масляный адъювант | 49-51 |
| бесклеточная культуральная среда, | |
| состоящая из инактивированных формалином | |
| до его конечной концентрации 0,4% | |
| термолабильные, термостабильные и | |
| шигаподобные токсины Escherichia coli | до 100, |
при этом первую иммунизацию телят проводят в возрасте 13-15 дней и вторую - в возрасте 19-21 день, а стельным коровам первую иммунизацию проводили за 45 дней до отела, а вторую - за 15 дней до отела.
Новизна технического решения состоит в том, что за счет совместного использования бесклеточных культур эпизоотических штаммов Escherichia coli, продуцирующих термолабильный, термостабильный и шигаподобный токсины, инактивированных формалином полученные путем смешивания в равных соотношениях эпизоотических штаммов Escherichia coli с последующим отделением бактериальной массы с помощью стерилизующей фильтрации и адъювантов, в качестве которых используют 2%-ную суспензию Al(ОН)3 и масляный адъювант, обеспечивается повышение иммуногенных свойств вакцины и эффективности профилактики эшерихиоза у телят, а также безвредность биопрепарата за счет отсутствия после применения, поствакцинальных реакций.
В патентной и научно-технической литературе не обнаружена аналогичная заявляемой совокупность признаков, что позволяет судить об изобретательском уровне заявляемого предложения.
Предложенный способ профилактики эшерихиоза у телят соответствует критерию «промышленная применимость», поскольку может быть широко использован в животноводческих комплексах.
Способ профилактики эшерихиоза у телят осуществляют следующим образом
Для профилактики используют вакцину против эшерихиоза содержащую бесклеточную культуральную среду, состоящую из инактивированных формалином до его конечной концентрации 0,4% термолабильные, термостабильные и шигаподобные токсины Escherichia coli, полученные путем смешивания в равных соотношениях эпизоотических штаммов Escherichia coli с последующим отделением бактериальной массы с помощью стерилизующей фильтрации и внесенных поочередно с последующим перемешиванием в бесклеточную культуральную среду адъювантов. В качестве последних используют 2%-ную суспензию Al(ОН)3 и масляный адъювант, состоящий из эмульгатора (биологически инертное кремнийорганическое соединение цетил-ПЭГ/ППГ-10/1-диметикон) - 1,5% и масляной основы - вакцинное масло "М" по ТУ 381011224 - 98,5%), при следующем соотношении компонентов, мас. %:
| 2%-ная суспензия Al(ОН)3 | 19-21 |
| масляный адъювант | 49-51 |
| бесклеточная культуральная среда, содержащая | |
| инактивированные термолабильные, термостабильные и | |
| шигаподобные токсины Escherichia coli | до 100 |
Стельных коров иммунизируют первый раз за 45 дней, а второй раз за 15 дней до отела в дозе не более 10 мл соответственно, телят полученных от этих коров также прививают дважды, первый раз в возрасте 13-15 дней, а второй через 19-21 день в дозе не более 2 мл соответственно.
Периоды двукратной иммунизации стельных коров обусловлены тем, что на последней стадии беременности за 45 дней до отела происходит образование молозива, которое необходимо наполнить антителами, путем вакцинации, а проводить иммунизацию раньше 45 дней до отела нет смысла, т.к. еще не образовалось молозиво. Вторая иммунизация за 15 дней - проводится с целью дополнения молозива антителами для повышения иммунного статуса организма стельной коровы перед отелом, что положительно влияет на плод, также, повышая его иммунитет.
Что касается дозы 10 мл для стельных коров, то они были подобраны опытным путем, если эти дозы будут меньше, то не будет вырабатываться достаточное количество антител, если больше, то будет вызывать местную реакцию и экономически нецелесообразно.
Двукратное введение вакцины телятам проводят в соответствии со следующими периодами:
- в возрасте 13-15 дней, так как в этот период содержание антител в молозиве заканчивается и для поддержания иммунитета телят, необходимо ввести в их организм вакцину в количестве 2 мл, которое достаточно для выработки необходимого уровня антител, если взять меньшее количество вакцины, то не будет обеспечиваться требуемый уровень антител, а при большем - наблюдается местная реакция в виде припухлостей и раздражений;
- введение телятам через 19-21 день обусловлено тем, что антитела, которые были получены телятами с молозивом - израсходованы и необходимо формировать собственные антитела, для поддержания иммунитета. Введение в организм вакцины в количестве 2 мл, определено опытным путем и является достаточным для выработки необходимого уровня собственных антител, если взять меньшее количество вакцины, то не будет обеспечиваться требуемый уровень антител, а при большем - наблюдается местная реакция в виде припухлостей и раздражений.
Сроки и дозы вакцинации обусловлены тем, что вакцина с гидроокисью алюминия и масляным адъювантом обладает депонирующим действием, антитела накапливаются постепенно, поэтому первая вакцинация стельных коров проводится за 45 дней до отела, т.к. этого времени достаточно для накопления антител, с целью обеспечения профилактики инфекционного заболевания.
Пример конкретного осуществления способа профилактики эшерихиоза у телят.
В хозяйстве Краснодарского края, неблагополучном по эшерихиозу телят, по данным ветеринарной лаборатории этого хозяйства, диарею у молодняка крупного рогатого скота в данном хозяйстве вызывают патогенные штаммы кишечной палочки. Для подтверждения эффективности заявляемого способа профилактики было сформировано 3 группы стельных коров по 25 голов в каждой.
Первую группу коров иммунизировали заявляемой вакциной первый раз за 45 дней до отела в дозе 10 мл, второй раз за 15 дней до отела в дозе 10 мл. Полученных от этих коров телят также иммунизировали заявляемой вакциной первый раз в возрасте 13-15 дней в дозе 2 мл, а второй через 19-21 день в дозе 2 мл соответственно. Вакцину вводили подкожно в область верхней трети шеи.
Вторую группу коров и полученных от них телят иммунизировали эшерихиозной вакциной с гидратом окиси алюминия по схеме и в дозах аналогичных в первой группе.
Третью группу коров и полученных от них телят иммунизировали эшерихиозной вакциной с масляным адъювантом по схеме и в дозах аналогичных в первой группе.
Четвертую группу коров и полученных от них телят иммунизировали эшерихиозной вакциной без адъювантов по схеме и в дозах аналогичных в первой группе.
Пятая группа коров была контрольной, их и полученных от них телята не иммунизировались.
Эффективность заявляемого способа оценивали по достижению телятами 3-месячного возраста и перевода их другой корпус на групповое содержание. Критериями оценки являлись заболеваемость и летальность. Результаты опыта отражены в таблице 1.
По данным таблицы видно, что в первой группе эшерихиозная инфекция была зарегистрирована у 3 телят, при этом диарею у них удалось купировать в течение 3 дней, а на 5 день телята полностью выздоровели. Таким образом, профилактическая эффективность вакцины, используемая в заявляемом способе составила 88%, сохранность 100%.
Во 2-ой группе эшерихиозная инфекция была зарегистрирована у 4 телят, причем у одного теленка она протекала очень тяжело и закончилась гибелью животного. Профилактическая эффективность аналога составила 74%, сохранность 96%.
В третьей группе эшерихиозная инфекция была зарегистрирована у 5 телят, у 1 теленка она протекала очень тяжело и закончилась гибелью животных. Эффективность аналога составила 80%, сохранность 96%.
В четвертой группе эшерихиозная инфекция была зарегистрирована у 9 телят, из них у троих телят она протекала очень тяжело и закончилась гибелью животных. Профилактическая эффективность прототипа составила 65%, сохранность 88%.
В контрольной группе заболеваемость телят острой кишечной инфекцией составила 68%, а сохранность 72%.
Иммуногенные свойства используемой эшерихиозной вакцины в заявляемом способе профилактики эшерихиоза у телят изучали по телятам, полученных от вакцинированных стельных коров. Сыворотку крови для определения наличия антитоксических антител в реакции диффузной преципитации отбирали через 7, 14, 28 и 56 дней после последней их вакцинации.
Влияние применения вакцин на титр антител у телят представлены в таблице 2.
По данным таблицы 2 видно, что иммунизация коров и телят заявляемым способом обеспечивает более напряженный и продолжительный специфический иммунитет против эшерихиозной инфекции.
Об этом свидетельствуют количество антител к токсинам кишечной палочки у телят, которых у животных первой группы в 1,1-1,8 раз больше, чем у животных из второй и третьей группы, и 1,5-7,3 раза больше, чем у животных четвертой и пятой групп.
Эффективность использования вакцины в способе профилактики эшерехиоза у телят зависит от свойств подобранных эпизоотических штаммов Escherichia coli, последовательности приготовления и процентного соотношения компонентов входящий в ее состав.
Количественные значения ввода адъювантов подобраны экспериментальным путем, при этом учитывалась иммуногенная активность вакцины. При вводе в объеме 2%-ной суспензии Al(ОН)3 19% и масляного адъюванта 49% иммуногенная активность повышалась, но все же была не достаточной для длительного сохранения поствакцинального иммунитета. При вводе адъювантов в объеме 20% и 50% соответственно, увеличения продукции специфических антител более значения, чем при их вводе в объеме 2%-ной суспензии Al(ОН)3 21% и масляного адъюванта 50% не происходило, а экономические затраты возрастали.
Вакцину для использования в способе профилактики эшерихиоза телят производят следующим образом.
Предварительно эпизоотические штаммы Е. coli изучались на наличие у них генов термолабильного, термостабильного и шигаподобного токсинов. Для этого использовали тест-системы «АмплиСенс E.coli-tox» (Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии М3 РФ, г. Москва). Подтверждение токсинообразования на искусственной питательной среде осуществляли с помощью биотеста на инфузориях-стилонихиях по патенту РФ на изобретение №2262529 от 20.10.2005. Отобранные штаммы по отдельности засевали в пробирки с 10 мл питательного бульона для накопления токсинов кишечной палочки, в состав которого входят кислотный гидролизат крови (9-11%), аутолизат пекарских дрожжей (9-11%), пептон (0,9-1,1%)), нария хлорид (0,4-0,6%)), двузамещенный фосфорнокислый натрий (0,05-0,15%) и калия хлорид (0,01-0,03%) (патент РФ на изобретение №2342425 от 27.12.2008). После чего пробирки помещали в термостат и культивировали при 37°С в течение 6-8 ч до появления легкой мути, свидетельствующей о росте микроорганизмов. Затем полученные культуры переносили в колбы с 200-300 мл аналогичного питательного бульона и инкубировали при 37°С. Культуры продуцирующие термолабильный и термостабильный инкубировали 6 суток, а продуцирующие шигаподобный токсин - 7 суток. Ежедневно 2 раза в сутки колбы встряхивали. Перед окончанием инкубирования из каждой колбы отобрали по 10 мл культуральной жидкости, центрифугировали при 10 тыс.об/мин в течение 30 мин и определяли методом биотестирования на инфузориях наличие токсинов.
При наличии токсинов в культуры добавляли формалин до концентрации 0,3-0,4% и инактивировали в течение 14 суток при температуре 37°С с ежедневным двукратным перемешиванием. После завершения инактивации, равные объемы культур объединяли и с помощью стерилизующей фильтрации отделили микробную массу от среды культивирования, получая, таким образом, бесклеточную культуральную среду Е. coli (эшерихиозный токсоидный компонент). Далее в нее поочередно вносили 2%-ную суспензию Al(ОН)3 и масляный адъювант, состоящий из эмульгатора (биологически инертное кремнийорганическое соединение цетил-ПЭГ/ППГ-10/1-диметикон) - 1,5% и масляной основы - вакцинное масло "М" по ТУ 381011224 -98,5% (патент РФ №2510845)) при следующем соотношении компонентов, об%:
| 2%-ная суспензия Al(ОН)3 | 19-21 |
| масляный адъювант | 49-51 |
| бесклеточная культуральная среда, содержащая | |
| инактивированные термолабильные, термостабильные | |
| и шигаподобные токсины Escherichia coli | до 100 |
Полученную вакцину фасуют по 100 мл в стерильные флаконы, укупоривают и проверяют на стерильность и безвредность. По внешнему виду готовый препарат представляет собой прозрачную опалесцирующую жидкость соломенного цвета с выпадающим беловато-сероватым осадком на дне, который при встряхивании флакона легко разбивается, образуя равномерную взвесь. Срок хранения в сухом и темном помещении при температуре 4-10°С - 1 год.
Использование вакцины в заявляемом способе профилактики позволяет обеспечить защиту телят от эшерихиозной инфекции продолжительностью не менее 6 месяцев (срок наблюдения).
Claims (3)
- Способ профилактики эшерихиоза у телят, включающий использование вакцины против эшерихиоза, содержащую бесклеточную культуральную среду, состоящую из инактивированных формалином до его конечной концентрации 0,4% термолабильных, термостабильных и шигаподобных токсинов Escherichia coli, полученных путем смешивания в равных соотношениях эпизоотических штаммов Escherichia coli с последующим отделением бактериальной массы с помощью стерилизующей фильтрации и внесенные поочередно с последующим перемешиванием в бесклеточную культуральную среду адъюванты, двукратную иммунизацию телят этой вакциной подкожно в область верхней трети шеи - в первый и во второй разы в дозе 2 мл и двукратную иммунизацию этой же вакциной стельных коров, от которых получены телята: первый и второй разы - в дозе 10 мл подкожно в область верхней трети шеи, причем в качестве адъювантов используют 2%-ную суспензию Al(ОН)3 и масляный адъювант, состоящий из эмульгатора - биологически инертного кремнийорганического соединения цетил-ПЭГ/ППГ-10/1-диметикона в количестве 1,5% и масляной основы - вакцинного масла "М" в количестве 98,5%, при следующем соотношении компонентов, мас. %:
-
2%-ная суспензия Al(ОН)3 19-21 масляный адъювант 49-51 бесклеточная культуральная среда, состоящая из инактивированных формалином до его конечной концентрации 0,4% термолабильные, термостабильные и шигаподобные токсины Escherichia coli до 100, - при этом первую иммунизацию телят проводят в возрасте 13-15 дней и вторую - в возрасте 19-21 день, а стельным коровам первую иммунизацию проводили за 45 дней до отела, а вторую - за 15 дней до отела.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2813771C1 true RU2813771C1 (ru) | 2024-02-16 |
Family
ID=
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2070819C1 (ru) * | 1993-04-20 | 1996-12-27 | Дмитрий Драгиутинович Новак | Способ получения вакцины против эшерихиоза телят |
| WO2000037106A1 (en) * | 1998-12-18 | 2000-06-29 | Sbl Vaccin Ab | Oral vaccine against diarrhea |
| RU2340357C2 (ru) * | 2007-01-19 | 2008-12-10 | Открытое Акционерное Общество "Институт Биотехнологий Ветеринарной Медицины" | Вакцина против эшерихиоза животных |
| RU2510845C1 (ru) * | 2012-09-14 | 2014-04-10 | Эдуард Джавадович Джавадов | Адъювант |
| RU2723709C1 (ru) * | 2019-05-20 | 2020-06-17 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный научный центр - Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени К.И. Скрябина и Я.Р. Коваленко Российской академии наук" (ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН) | Способ профилактики рота-, коронавирусной инфекции и эшерихиоза крупного рогатого скота |
| RU2753410C2 (ru) * | 2020-01-14 | 2021-08-16 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ получения анатоксин-вакцины против эшерихиоза животных |
| RU2764600C1 (ru) * | 2021-03-15 | 2022-01-18 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Вакцина против эшерихиоза телят и поросят |
| RU2766249C1 (ru) * | 2021-03-11 | 2022-02-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ профилактики эшерихиоза у телят |
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2070819C1 (ru) * | 1993-04-20 | 1996-12-27 | Дмитрий Драгиутинович Новак | Способ получения вакцины против эшерихиоза телят |
| WO2000037106A1 (en) * | 1998-12-18 | 2000-06-29 | Sbl Vaccin Ab | Oral vaccine against diarrhea |
| RU2340357C2 (ru) * | 2007-01-19 | 2008-12-10 | Открытое Акционерное Общество "Институт Биотехнологий Ветеринарной Медицины" | Вакцина против эшерихиоза животных |
| RU2510845C1 (ru) * | 2012-09-14 | 2014-04-10 | Эдуард Джавадович Джавадов | Адъювант |
| RU2723709C1 (ru) * | 2019-05-20 | 2020-06-17 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный научный центр - Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени К.И. Скрябина и Я.Р. Коваленко Российской академии наук" (ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН) | Способ профилактики рота-, коронавирусной инфекции и эшерихиоза крупного рогатого скота |
| RU2753410C2 (ru) * | 2020-01-14 | 2021-08-16 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ получения анатоксин-вакцины против эшерихиоза животных |
| RU2766249C1 (ru) * | 2021-03-11 | 2022-02-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ профилактики эшерихиоза у телят |
| RU2764600C1 (ru) * | 2021-03-15 | 2022-01-18 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Вакцина против эшерихиоза телят и поросят |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2428202C1 (ru) | Вакцина ассоциированная против анаэробной энтеротоксемии и эшерихиозной диареи телят | |
| RU2813771C1 (ru) | Способ профилактики эшерихиоза у телят | |
| RU2649831C1 (ru) | Способ профилактики острых кишечных заболеваний у поросят | |
| RU2814593C1 (ru) | Способ профилактики эшерихиоза у поросят | |
| RU2650604C1 (ru) | Способ профилактики острых кишечных заболеваний у телят | |
| RU2432174C1 (ru) | Способ получения эшерихиозного анатоксина | |
| RU2766249C1 (ru) | Способ профилактики эшерихиоза у телят | |
| RU2806810C1 (ru) | Вакцина гидроокись алюминиевая масляная против эшерихиоза телят и поросят | |
| RU2650628C1 (ru) | Способ получения вакцины ассоциированной против колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции телят и поросят | |
| RU2813752C1 (ru) | Способ получения гидроокись алюминиевой масляной вакцины против эшерихиоза телят и поросят | |
| RU2764600C1 (ru) | Вакцина против эшерихиоза телят и поросят | |
| RU2766549C1 (ru) | Способ профилактики эшерихиоза у поросят | |
| RU2753410C2 (ru) | Способ получения анатоксин-вакцины против эшерихиоза животных | |
| Dorner et al. | Immunity to Escherichia coli in piglets: the role of colostral antibodies directed against heat labile enterotoxin in experimental neonatal diarrhoea | |
| RU2316344C1 (ru) | Вакцина ассоциированная против колибактериоза, сальмонеллеза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции нутрий | |
| RU2129441C1 (ru) | Вакцина, ассоциированная против анаэробной энтеротоксемии и эшерихиоза поросят | |
| RU2708891C1 (ru) | Вакцина против рота-, коронавирусной инфекции и эшерихиоза крупного рогатого скота | |
| RU2777479C1 (ru) | Способ специфической профилактики ринопневмонии и мыта лошадей ассоциированной вакциной в условиях табунного содержания | |
| RU2761379C1 (ru) | Поливалентная инактивированная вакцина против стрептококкозов свиней, способ ее получения и применения | |
| RU2065749C1 (ru) | Способ профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота | |
| RU2699035C2 (ru) | Поливалентная вакцина против анаэробной энтеротоксемии молодняка крупного рогатого скота и способ ее применения | |
| RU2406531C1 (ru) | Вакцина ассоциированная против стрептококкоза, псевдомоноза и энтерококковой инфекции нутрий | |
| RU2504400C1 (ru) | Вакцина ассоциированная против парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота эмульсионная инактивированная | |
| RU2406533C1 (ru) | Вакцина ассоциированная против стрептококкоза и стафилококкоза крупного рогатого скота | |
| RU2226106C2 (ru) | Способ специфической профилактики радиационных поражений организма и способ получения препарата для профилактики радиационных поражений организма |