RU2766249C1 - Способ профилактики эшерихиоза у телят - Google Patents
Способ профилактики эшерихиоза у телят Download PDFInfo
- Publication number
- RU2766249C1 RU2766249C1 RU2021106438A RU2021106438A RU2766249C1 RU 2766249 C1 RU2766249 C1 RU 2766249C1 RU 2021106438 A RU2021106438 A RU 2021106438A RU 2021106438 A RU2021106438 A RU 2021106438A RU 2766249 C1 RU2766249 C1 RU 2766249C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- calves
- escherichiosis
- days
- time
- escherichia coli
- Prior art date
Links
- 244000309466 calf Species 0.000 title claims abstract description 65
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims abstract description 37
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims abstract description 33
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 claims abstract description 25
- 239000004584 polyacrylic acid Substances 0.000 claims abstract description 25
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 claims abstract description 24
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims abstract description 22
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 21
- 239000003053 toxin Substances 0.000 claims abstract description 21
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 claims abstract description 21
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 claims abstract description 21
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 19
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 16
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 14
- 238000002649 immunization Methods 0.000 claims abstract description 11
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims abstract description 7
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 13
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 10
- 230000003053 immunization Effects 0.000 claims description 10
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 9
- 108010017898 Shiga Toxins Proteins 0.000 claims description 7
- 229940031572 toxoid vaccine Drugs 0.000 claims description 3
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 abstract description 42
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 5
- 239000003948 anatoxin Substances 0.000 abstract description 4
- SGNXVBOIDPPRJJ-PSASIEDQSA-N 1-[(1r,6r)-9-azabicyclo[4.2.1]non-4-en-5-yl]ethanone Chemical compound CC(=O)C1=CCC[C@@H]2CC[C@H]1N2 SGNXVBOIDPPRJJ-PSASIEDQSA-N 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 16
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 12
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 10
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 241000223782 Ciliophora Species 0.000 description 5
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 5
- 206010061126 Escherichia infection Diseases 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 5
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 5
- 210000003022 colostrum Anatomy 0.000 description 4
- 235000021277 colostrum Nutrition 0.000 description 4
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 4
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 3
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 3
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 3
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000293871 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhi Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 231100000776 exotoxin Toxicity 0.000 description 2
- 239000002095 exotoxin Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 2
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 2
- 102220240796 rs553605556 Human genes 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- GFRHEOMWAJJZSF-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(2-chloroethyl)amino]-2-[4-[4-[1-[bis(2-chloroethyl)amino]-2-oxoethyl]phenyl]phenyl]acetaldehyde Chemical compound C1=CC(C(C=O)N(CCCl)CCCl)=CC=C1C1=CC=C(C(C=O)N(CCCl)CCCl)C=C1 GFRHEOMWAJJZSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009631 Broth culture Methods 0.000 description 1
- 208000031968 Cadaver Diseases 0.000 description 1
- 101000693940 Centruroides noxius Beta-toxin Cn7 Proteins 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 206010022678 Intestinal infections Diseases 0.000 description 1
- 206010024769 Local reaction Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 101001049890 Pandinus imperator Potassium channel toxin alpha-KTx 6.5 Proteins 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000001147 anti-toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 1
- 229920000867 polyelectrolyte Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 230000009800 post vaccination immunity Effects 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 229940043517 specific immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical class [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/739—Lipopolysaccharides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/74—Synthetic polymeric materials
- A61K31/765—Polymers containing oxygen
- A61K31/78—Polymers containing oxygen of acrylic acid or derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области ветеринарии, касается способа профилактики эшерихиоза телят. Способ профилактики эшерихиоза включает двукратную иммунизацию анатоксин-вакциной против эшерихиоза стельных коров с интервалом 15 дней и двукратное введение препарата телятам, рожденным от иммунизированных стельных коров. При этом стельных коров и рожденных от них телят иммунизируют анатоксин-вакциной, которая в качестве адъювантов содержит раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества, и 3% водный раствор полиакриловой кислоты, внесенные поочередно с последующим перемешиванием в бесклеточную культуральную среду, содержащую инактивированные формалином до его конечной концентрации 0,4% термолабильные, термостабильные и шигаподобные токсины Escherichia coli, при следующем соотношении компонентов, мас. %: раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества 9-11; 3% водный раствор полиакриловой кислоты 9-11; бесклеточная культуральная среда, содержащая инактивированные термолабильные, термостабильные и шигаподобные токсины Escherichia coli до 100. При этом стельных коров иммунизируют первый раз за 30 дней, а второй раз за 15 дней до отела в дозе 5 и 10 мл соответственно, а телят прививают дважды, первый раз в возрасте 15-20 дней, а второй через 10-14 дней в дозе 1 и 2 мл соответственно. 2 табл., 5 пр.
Description
Изобретение относится к области ветеринарии, касается способа профилактики эшерихиоза у телят.
Известен способ профилактики колибактериоза, включающий иммунизацию телят вакциной против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987Р, F41, ТЛ и ТС-анатоксины) внутримышечно перед отъемом с интервалом 10-15 дней; при этом первая доза составляет 1 см3, вторая - 1,5 см3 [Наставление по применению вакцины против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987Р, F41, ТЛ- и ТС-анатоксины)/Утверждено Департаментом ветеринарии Минсельхоза России 20.06.1997 г.].
Установлено, что эффективными средствами специфической профилактики эшерихиоза у животных являются вакцины, содержащие в своем составе инактивированные экзотоксины патогенных Escherichia coli (Биологические препараты для специфической профилактики и терапии эшерихиоза животных/М.К. Пирожков//Дисс. док. вет. наук. - Москва, 2002. - 298 с). В настоящее время есть исследования по использованию биопрепаратов, которые включают сразу три вида токсинов патогенных эшерихий: термолабильный (LT) и термостабильный (ST) и шигагюдобный (STX) токсины, как в чистом виде, так и в сочетании с адъювантами (Караев Я.М. Иммуногенные и протективные свойства эшерихиозного анатоксина: дис. … канд. вет. наук/Я.М. Караев. - Краснодар: КубГАУ, 2009. - 132 с; Тищенко А.С. Влияние адъювантов на иммуногенные свойства эшерихиозного анатоксина: дис. … канд. вет. наук/А.С. Тищенко. - Краснодар: КубГАУ, 2011. - 124 с). Однако, этими исследованиями было установлено, что эшерихиозный анатоксин стимулирует клеточные и гуморальные звенья иммунитета в первые сутки после введения препаратов, а использование адъювантов хоть и усиливает иммунный ответ, но на непродолжительное время. Учитывая данные обстоятельства, необходимо искать новые способы повышения иммуногенной активности вакцинных препаратов на основе инактивированных токсинов кишечной палочки.
Известно применение пирогенала и полиакриловой кислоты по-отдельности в качестве адъювантов для усиления иммуногенности эшерихиозного анатоксина, содержащим инактивированные токсины (TL, TS, STX) Е. coli (Терехов, В.И. Влияние различных адъювантов на иммуногенные свойства эшерихиозного анатоксина/В.И. Терехов, Я.М. Караев, А.С.Тищенко, А.В. Иванов//Тр./КубГАУ. - 2009. - Вып.№1 (ч. 1) Серия: Ветеринарные науки. - С. 100-102.; Тищенко А.С.и др. Влияние бактериального полисахарида и полиэлектролита на иммуногенные свойства эшерихиозного анатоксина//Молодой ученый. - 2016. - №20 (124). - С. 113-115.; Тищенко А.С, Терехов В.И., Сердюченко И.В. Иммуногенность эшерихиозного анатоксина при использовании с пирогеналом и полиакриловой кислотой//Научное обеспечение агропромышленного комплекса: сб. ст.по материалам X Всерос. конф. молодых ученых. - Краснодар: КубГАУ, 2017 - С. 287-288.).
Недостатком известных исследований является то, что эшерихиозный анатоксин с использованием в качестве адъюванта пирогенала и эшерихиозный анатоксин с использованием в качестве адъюванта полиакриловой кислоты обладали низкими иммуногенными свойствами, что негативно сказывалось на формировании и продолжительности поствакцинальной защиты у животных против токсинов кишечной палочки. Кроме того, биологической моделью в этих исследованиях выступали белые крысы и кролики и неизвестно, как будут проявлять себя компоненты вакцины на телятах.
Известно применение адъювантов, в том числе полиакриловой кислоты и пирогенала, в сочетании с эшерихиозным анатоксином в опытах на стельных коровах и супоросных свиноматках (Тищенко А.С. Влияние адъювантов на иммуногенные свойства эшерихиозного анатоксина: дис. … канд. вет. наук/А.С.Тищенко. - Краснодар: КубГАУ, 2011. - 124 с; Тищенко, А.С. Оценка гуморального иммунного ответа у супоросных свиноматок, иммунизированных эшерихиозным анатоксином в сочетании с адъювантами/А.С.Тищенко, В.И. Терехов//Тр./КубГЛУ. - 2011. - Вып. №2 (29). - С. 144-147; Терехов, В.И. Влияние адъювантов на иммуногенные свойства эшерихиозного анатоксина при вакцинации стельных коров/В.И. Терехов, А.С. Тищенко//Ветеринария Кубани. - 2011. - №3. - С. 19-21; а также определена профилактическая эффективность данных препаратов (Тищенко, А.С. Профилактическая эффективность эшерихиозного анатоксина при эшерихиозе телят/А.С. Тищенко, В.И. Терехов//Опыт международного сотрудничества в области экологии, лесного хозяйства, ветеринарной медицины и охотоведения: материалы II-й Междунар. науч. - практ. конф./КубГАУ. - Краснодар, 2010. - С. 380-381).
Недостатком известных исследований является то, что эшерихиозный анатоксин с использованием по отдельности в качестве адъювантов пирогенала и полиакриловой кислоты обладали непродолжительным иммунным ответом, что отражалось на эффективности специфической профилактики эшерихиоза. Кроме того, адъювантные компоненты, применяемые с эшерихиозным анатоксином по-отделыюсти, в целом обладают слабой иммуногенностью и могут проявлять ректогенность.
Известен способ получения эшерихиозного анатоксина (патент №2432174 от 27.10.2011, МПК А61К 39/108, C12N 1/20, А61Р 1/00), в котором, отбирают и раздельно культивируют эпизоотические штаммы Escherichia coli, обладающие генами термолабильного, термостабильного и шигаподобного токсинов, на питательном бульоне при температуре 37°С в течение 6-7 дней с ежедневным двукратным перемешиванием. Инактивацию культур проводят путем добавления формалина до концентрации не более 0,4%, при температуре 37°С в течение 14 суток с ежедневным двукратным перемешиванием. После чего отбирают и смешивают культуры в равных соотношениях, отделяют бактериальную массу с помощью стерилизующей фильтрации и получают комплексный препарат.
Недостатком данного способа является отсутствие адъювантов, и как следствие низкая иммуногенная активность препарата, что недостаточно обеспечивает эффективность профилактики эшерихиоза у животных.
Известно использование высокоактивного неспецифического иммуномодулирующего препарата широкого спектра действия «Пирогенал», который вводят внутримышечно до родов в дозе 0,1 мкг/кг массы тела беременных животных, а именно в первую половину беременности выполнение в количестве 10 инъекций с интервалом 1 день, а во вторую половину беременности 5 инъекций с интервалом 2 дня, общим курсом 15 инъекций (патент РФ №2654563, кл. А01К 67/02, 2018 г.).
Наиболее близким по технической сущности является техническое решение (патент РФ №2612081, кл. А61К 39/02, 2017 г.), включающее двукратную иммунизацию вакциной против эшерихиоза стельных коров с интервалом 15 дней и двукратное введение препарата телятам рожденных от иммунизированных стельных коров.
Недостатком известного способа является недостаточная эффективность специфической профилактики эшерихиоза у теля т.
Техническим результатом изобретения является повышение эффективности специфической профилактики эшерихиоза у телят.
Технический результат достигается тем, что в способе профилактики эшерихиоза у телят, включающем двукратную иммунизацию анатоксин-вакциной против эшерихиоза стельных коров с интервалом 15 дней и двукратное введение препарата телятам рожденных от иммунизированных стельных коров, согласно изобретению, стельных коров и рожденных от них телят иммунизируют вакциной, которая в качестве адъювантов содержит раствор пирогенала содержащий 100 мкг/мл действующего вещества и 3% водный раствор полиакриловой кислоты, внесенные поочередно с последующим перемешиванием в бесклеточную культуральную среду, содержащую инактивированные формалином до его конечной концентрации 0,4% термобильные, термостабильные и шигаподобные токсины Escherichia coli, при следующем соотношении компонентов, мас. %:
раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества | 9-11 |
3% водный раствор полиакриловой кислоты | 9-11 |
бесклеточная культуральная среда, содержащая инактивированные | |
термолабильные, термостабильные и шигаподобные | |
токсины Escherichia coli | до 100, |
при этом стельных коров иммунизируют первый раз за 30 дней, а второй раз за 15 дней до отела в дозе 5 и 10 мл соответственно, а телят прививают дважды, первый раз в возрасте 15-20 дней, а второй через 10-14 дней в дозе 1 и 2 мл соответственно.
Новизна технического решения состоит в том, что за счет использования бесклеточных культур эпизоотических штаммов Escherichia coli, продуцирующих термолабильный, термостабильный и шигаподобный токсины, инактивированных формалином, при совместном использовании растворы пирогенала и полиакриловой кислоты обеспечивается повышение иммуногенных свойств вакцины и эффективности профилактики эшерихиоза у телят, а также безвредность биопрепарата за счет отсутствия после применения, поствакцинальных реакций.
В патентной и научно-технической литературе не обнаружена аналогичная заявляемой совокупность признаков, что позволяет судить об изобретательском уровне заявляемого предложения.
Предложенный способ профилактики эшерихиоза у телят соответствует критерию «промышленная применимость», поскольку может быть широко использован в животноводческих комплексах.
Способ профилактики эшерихиоза у телят осуществляется следующим образом.
Эффективность использования вакцины против эшерихиоза зависит от свойств подобранных эпизоотических штаммов Escherichia coli, последовательности приготовления и процентного соотношения компонентов входящий в ее состав, таких как: - пирогенал (фармацевтический препарат, выпускается в ампулах, в виде раствора для внутримышечного введения в дозе 1 мл которого, содержится 100 мкг действующего вещества - липополисахарид (ЛПС), выделенный из клеток Salmonella typhi) (EAN: 4602379000047) - 8 мл (8 ампул по 1 мл) - (8%); 9 мл (9 ампул по 1 мл) - (9%); 10 мл (10 ампул по 1 мл) - (10%); 11 мл (11 ампул по 1 мл) - (11%) и 12 мл (12 ампул по 1 мл) - (12%);
- 3% водный раствор полиакриловой кислоты - 8 мл (8%); 9 мл (9%); 10 мл (10%); 11 мл (11%) и 12 мл (12%).
Для иммунизации стельных коров и телят полученных от этих стельных коров используют вакцину, которая в качестве адъювантов содержит раствор пирогенала содержащий 100 мкг действующего вещества и 3% водный раствор полиакриловой кислоты, внесенные поочередно с последующим перемешиванием в бесклеточную культуральную среду, содержащую инактивированные формалином до его конечной концентрации 0,4% термолабильные, термостабильные и шигаподобные токсины Escherichia coli, при следующем соотношении компонентов, мас. %:
раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества | 9-11 |
3% водный раствор полиакриловой кислоты | 9-11 |
бесклеточная культуральная среда, содержащая инактивированные | |
термолабильные, термостабильные и шигаподобные | |
токсины Escherichia coli | до 100 |
Стельных коров иммунизируют первый раз за 30 дней, а второй раз за 15 дней до отела в дозе не более 5 и 10 мл соответственно, а телят прививают дважды, первый раз в возрасте 15-20 дней, а второй через 10-14 дней в дозе не более 1 и 2 мл соответственно.
Периоды двукратной иммунизации стельных коров обусловлены тем, что на последней стадии беременности начинает происходить образование молозива, которое необходимо наполнить антителами, путем иммунизации, поэтому первое введение препарата за 30 дней до отела. Проводить иммунизацию раньше 30 дней до отела не целесообразно, поскольку защитные антитела не накопятся в молозиве в достаточных титрах. Вторая иммунизация за 15 дней - проводится с целью увеличения молозивных антител, для повышения иммунного статуса организма стельной коровы перед отелом, что положительно влияет на плод, также, повышая его иммунитет перед эшерихиозной инфекцией. Кроме того, установлено, что защитные антитела против возбудителей эшерихиоза не передаются внутриутробно от коров-матерей к плоду. Это объясняется тем, что плацента коров является непроницаемой для передачи материнских антител к плоду. Поэтому единственным фактором защиты новорожденных телят от эшерихиозной инфекции является колостральный иммунитет за счет специфических иммуноглобулинов, содержащихся в молозиве.
Что касается доз 5 и 10 мл для стельных коров, то они были подобраны экспериментальным путем, увеличенная доза на втором введении обладает потенцирующим действием, что положительно сказывается на выработке антител. При введении меньших доз, не вырабатывается достаточное количество антител, при больших дозах выработка антител угнетается, кроме того, возможны местные поствакцинальные реакции.
Двукратное введение вакцины телятам и рекомендованные дозы подобраны экспериментальным путем, вакцинацию проводят в соответствии со следующими периодами:
- в возрасте 15-20 дней, так как в этот период содержание пассивно полученных молозивных антител у теленка уменьшается, и для поддержания иммунного статуса животного, необходимо ввести в их организм анатоксин-вакцину в количестве 1 мл;
- повторно через 10-14 дней в дозе 2 мл, что достаточно для стимулирования собственного активного иммунитета и накопления необходимого уровня антител против эшерихиозной инфекции. Если взять меньшее количество вакцины, то не будет обеспечиваться требуемый уровень защитных антител, а при большем - выработка антител угнетается и возможны местные реакции в виде припухлостей и раздражений.
Пример конкретного осуществления способа профилактики эшерихиоза у телят.
Результаты исследований использования вакцины для профилактики эшерихиоза у телят.
В хозяйстве Краснодарского края, неблагополучном по эшерихиозу телят, провели производственное испытание заявляемой вакцины. По данным ветеринарной лаборатории диарею у молодняка крупного рогатого скота в данном хозяйстве вызывают патогенные штаммы кишечной палочки. Эффективность вакцины, изготовленной по заявляемому способу, сравнивали с эффективностью прототипа, для этого было сформировано 3 группы стельных коров по 25 голов в каждой.
Первую группу коров иммунизировали заявляемой вакциной 1-й раз за 30 дней до отела в дозе 5 мл, 2-й раз за 15 дней до отела в дозе 10 мл. Полученных от этих коров телят, также иммунизировали заявляемой вакциной 1-й раз в возрасте 15-20 дней в дозе 1 мл, а 2-й - через 10-15 дней в дозе 2 мл. Вакцину вводили подкожно в область верхней трети шеи.
Вторую группу коров и полученных от них телят иммунизировали эшерихиозным вакциной с раствором пирогенала содержащий 100 мкг действующего вещества по схеме и в дозах аналогичных в первой группе.
Третью группу коров и полученных от них телят иммунизировали эшерихиозным вакциной с с водным раствором полиакриловой кислоты по схеме и в дозах аналогичных в первой группе.
Четвертую группу коров и полученных от них телят иммунизировали эшерихиозным вакциной без адъювантов по схеме и в дозах аналогичных в первой группе.
Пятая группа коров была контрольной, они и полученные от них телята не иммунизировались.
Эффективность вакцин оценивали по достижении телятами 3-месячного возраста и перевода их другой корпус на групповое содержание. Критериями оценки служили показатели заболеваемости и летальности.
Результаты опыта отражены в таблице 1, из материалов которой, видно, что в первой группе эшерихиозная инфекция была зарегистрирована у 2 телят, при этом диарею у них удалось купировать в течение 3 дней, а на 5 день телята полностью выздоровели. Таким образом, профилактическая эффективность заявляемой вакцины составила 92%.
Во 2-ой группе эшерихиозная инфекция была зарегистрирована у 5 телят, причем у одного теленка она протекала очень тяжело и закончилась гибелью животного. Профилактическая эффективность аналога составила 80%.
В третьей группе эшерихиозная инфекция была зарегистрирована у 6 телят, у двоих телят она протекала очень тяжело и закончилась гибелью животных. Профилактическая эффективность аналога составила 76%.
В четвертой группе эшерихиозная инфекция была зарегистрирована у 8 телят, из них у троих телят она протекала очень тяжело и закончилась гибелью животных. Профилактическая эффективность прототипа составила 68%.
В пятой группе из 25 телят заболело 18 животных, из которых 5 пали. Таким образом, в 3 группе заболеваемость составила 72%, а летальность - 27,8%, что свидетельствует о значительной тяжести болезни.
Следовательно, применение вакцины против эшерихиоза, используемой в заявляемом способе позволило более эффективно профилактировать заболевание телят эшерихиозной инфекцией. Заболеваемость телят привитых заявляемой вакциной составила 8%, а сохранность 100%, тогда как при использовании аналога 1 заболеваемость телят составила 20%, а сохранность 96%, аналога 2 - заболеваемость 24%, сохранность 92%, аналога 3 - заболеваемость 32%, сохранность 88%. В контрольной группе заболеваемость телят острой кишечной инфекцией составила 72%, а сохранность 80%.
Иммуногенные свойства эшерихиозной вакцины изучали у телят, полученных от вакцинированных стельных коров. Сыворотку крови для определения наличия антитоксических антител в реакции диффузной преципитации отбирали через 7, 14, 28 и 56 дней после последней их вакцинации.
Влияние применения вакцин на титр антител у телят представлены в таблице 2, из данных которой видно, что иммунизация коров и телят заявляемым способом обеспечивает более напряженный и продолжительный специфический иммунитет против эшерихиозной инфекции. Об этом свидетельствуют количество антител к токсинам кишечной палочки у телят, которых у животных первой группы в 2-16 раз больше, чем у животных из второй и третьей группы, и 8-32 раза больше, чем у животных четвертой и пятой групп.
Эффективность использования вакцины в способе профилактики эше-рехиоза у телят зависит от свойств подобранных эпизоотических штаммов Escherichia coli, последовательности приготовления и процентного соотношения компонентов входящий в ее состав.
Количественные значения ввода адъювантов подобраны экспериментальным путем, при этом учитывалась иммуногенная активность вакцины. При вводе растворов пирогенала и полиакриловой кислоты в объеме 8% иммуногенная активность повышалась, но все же была не достаточной для длительного сохранения поствакцинального иммунитета. При вводе адъювантов в объеме 12%, увеличения продукции специфических антител более значения, чем при их вводе в объеме 9-11% не происходило, а экономические затраты возрастали. Кроме того, вслед за повышением ввода раствора полиакриловой кислоты возрастала опасность развития местной воспалительной реакции из-за раздражения тканей.
Приведено пять примеров (1-5) зависимости эффективности вакцины против эшерихиоза телят от соотношения заявленных компонентов из расчета на 100 мл вакцины.
Для примеров 1-5 использовали эпизоотические штаммы Escherichia coli, обладающие генами термолабильного, термостабильного и шигаподобного токсинов, проводили их культивирование на питательном бульоне при температуре 37°С в течение 6-7 дней с ежедневным двукратным перемешиванием, затем их инактивировали формалином до его конечной концентрации 0,4% в течение 14 суток с ежедневным двукратным перемешиванием, после чего отбирали и смешивали культуры в равных соотношениях, отделяли бактериальную массу с помощью стерилизующей фильтрации, для получения бесклеточной культуральной среды, в которую поочередно с последующим перемешиванием вносили адъюванты со следующими объемными количествами и процентным соотношением:
Пример 1 - при следующем соотношении компонентов, масс. %:
раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества | 8 |
3% водный раствор полиакриловой кислоты | 8 |
бесклеточная культуральная среда, содержащая | |
токсины Escherichia coli | до 100 |
При данном соотношении компонентов вакцина обладает слабой протективной активностью и защищает от эшерихиозной инфекции, обусловленной патогенными Escherichia coli телят в 75%.
Пример 2. При следующем соотношении компонентов, масс. %:
раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества | 9 |
3% водный раствор полиакриловой кислоты | 9 |
бесклеточная культуральная среда, содержащая | |
токсины Escherichia coli | до 100 |
При данном соотношении компонентов вакцина защищает от эшерихиозной инфекции, обусловленной патогенными Escherichia coli, телят в 86% случаев.
Пример 3. При следующем соотношении компонентов, масс. %:
раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества | 10 |
3% водный раствор полиакриловой кислоты | 10 |
бесклеточная культуральная среда, содержащая | |
токсины Escherichia coli | до 100 |
При данном соотношении компонентов анатоксин-вакцина защищает от эшерихиозной инфекции, обусловленной патогенными Escherichia coli, телят в 92% случаев.
Пример 4. При следующем соотношении компонентов, масс. %:
раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества | 11 |
3% водный раствор полиакриловой кислоты | 11 |
бесклеточная культуральная среда, содержащая | |
токсины Escherichia coli | до 100 |
При данном соотношении компонентов вакцина защищает от эшерихиозной инфекции, обусловленной патогенными Escherichia coli, телят в 94% случаев.
Пример 5. При следующем соотношении компонентов, масс. %:
раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества | 12 |
3% водный раствор полиакриловой кислоты | 12 |
бесклеточная культуральная среда, содержащая | |
токсины Escherichia coli | до 100 |
При данном соотношении компонентов вакцина защищает от эшерихиозной инфекции, обусловленной патогенными Escherichia coli, телят в 84%, случаев. На месте введения у отдельных животных, особенно из числа телят развились плотные болезненные припухлости и повышение температуры тела.
Вакцину для использования в способе профилактики эшерихиоза телят производят следующим образом.
Первоначальные этапы получения эшерихиозной вакцины осуществляли по патенту РФ на изобретение №2432174 от 27.10.2011, МПК А61К 39/108, C12N 1/20, А61Р 1/00.
Предварительно из эпизоотических штаммов Escherichia coli отобрали штаммы, обладающие генами термолабильного, термостабильного и шигаподобного токсинов. Для этого использовали тест-системы «АмплиСенс E.coli-tox» (Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии МЗ РФ, г. Москва). Подтверждение токсипообразования на искусственной питательной среде осуществляли с помощью биотеста на инфузориях-стилонихиях (патент РФ на изобретение 2262529 от 20.10.2005, МПК C12N 1/10, C12Q 1/10). По известному патенту, для испытания по выживаемости инфузорий использовали культуру кишечной палочки, выращенную на бульоне Хоттингера со сроком инкубации 1-3 суток, затем среду с инфузориями смешивали с бульонной культурой кишечной палочки в соотношении 3:1.При наличии в культуральной среде экзотоксинов, количество погибших инфузорий должно быть не менее 70-80%, в то время как количество погибших инфузорий в контрольной пробе, не содержащей токсин, не должно превышать 5%.
Отобранные штаммы по отдельности засевали в пробирки с 10 мл питательного бульона для накопления токсинов кишечной палочки, в состав которой входят кислотный гидролизат крови (9-11%), аутолизат пекарских дрожжей (9-11%), пептон (0,9-1,1%), натрия хлорид (0,4-0,6%), двузамещенный фосфорнокислый натрий (0,05-0,15%) и калия хлорид (0,01-0,03%) (патент РФ на изобретение 2342425 от 27.12.2008, МПК C12N 1/20, C12Q 1/04). Затем их помещали в термостат и культивировали при 37°С в течение 6-8 ч до появления легкой мути, свидетельствующей о росте микроорганизмов. Далее полученные культуры переносили в колбы с 200-300 мл аналогичного питательного бульона и инкубировали при 37°С в течение: продуцирующие термолабильный и термостабильный - 6 суток, а продуцирующие шигаподобный токсин - 7 суток. Ежедневно 2 раза в сутки колбы встряхивали. Перед окончанием инкубирования из каждой колбы отобрали по 10 мл культуральной жидкости, центрифугировали при 10 тыс.об/мин в течение 30 мин и определяли методом биотестирования на инфузориях наличия токсинов.
При наличии токсинов в оставшиеся культуры добавили формалин до концентрации 0,3-0,4%. Инактивацию культур проводили в течение 14 суток при температуре 37°С с ежедневным двукратным перемешиванием. После завершения инактивации равные объемы культур объединяли, получив, таким образом, комплексный препарат, содержащий 3 вида антигенов. С помощью стерилизующей фильтрации отделили микробную массу от среды культивирования, получая, таким образом, бесклеточную культуральную среду Escherichia coli (эшерихиозный антигенный токсоидный компонент). Далее в бесклеточную культуральную среду Escherichia coli: вносили адъюванты: препарат пирогенал (липополисахарид, выделенный из микробных клеток Salmonella typhi, производитель ФГБУ ПИЦЭМ им Н.Ф. Гамалеи Минздрава России) в 0,01% концентрации и 3% раствор полиакриловой кислоты (производства ООО Химдирект сервис, Москва) при следующем соотношении компонентов, мас. %:
раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества | 9-11 |
3% водный раствор полиакриловой кислоты | 9-11 |
бесклеточная культуральная среда, содержащая ииактивированные термолабильные, | |
термостабильные и шигаподобные токсины | |
Escherichia coli | до 100 |
Использование вакцины в заявляемом способе позволяет обеспечить защиту телят от эшерихиозной инфекции продолжительностью не менее 6 месяцев (срок наблюдения).
Claims (3)
- Способ профилактики эшерихиоза у телят, включающий двукратную иммунизацию анатоксин-вакциной против эшерихиоза стельных коров с интервалом 15 дней и двукратное введение препарата телятам, рожденным от иммунизированных стельных коров, отличающийся тем, что стельных коров и рожденных от них телят иммунизируют анатоксин-вакциной, которая в качестве адъювантов содержит раствор пирогенала, содержащий 100 мкг/мл действующего вещества, и 3% водный раствор полиакриловой кислоты, внесенные поочередно с последующим перемешиванием в бесклеточную культуральную среду, содержащую инактивированные формалином до его конечной концентрации 0,4% термолабильные, термостабильные и шигаподобные токсины Escherichia coli, при следующем соотношении компонентов, мас. %:
-
раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества 9-11 3% водный раствор полиакриловой кислоты 9-11 бесклеточная культуральиая среда, содержащая инактивированные термолабильные, термостабильные и шигаподобные токсины Escherichia coli до 100, - при этом стельных коров иммунизируют первый раз за 30 дней, а второй раз за 15 дней до отела в дозе 5 и 10 мл соответственно, а телят прививают дважды, первый раз в возрасте 15-20 дней, а второй через 10-14 дней в дозе 1 и 2 мл соответственно.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2021106438A RU2766249C1 (ru) | 2021-03-11 | 2021-03-11 | Способ профилактики эшерихиоза у телят |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2021106438A RU2766249C1 (ru) | 2021-03-11 | 2021-03-11 | Способ профилактики эшерихиоза у телят |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2766249C1 true RU2766249C1 (ru) | 2022-02-10 |
Family
ID=80214970
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2021106438A RU2766249C1 (ru) | 2021-03-11 | 2021-03-11 | Способ профилактики эшерихиоза у телят |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2766249C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2800827C1 (ru) * | 2022-11-17 | 2023-07-28 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ лечения эшерихиоза у телят |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2070819C1 (ru) * | 1993-04-20 | 1996-12-27 | Дмитрий Драгиутинович Новак | Способ получения вакцины против эшерихиоза телят |
RU2723709C1 (ru) * | 2019-05-20 | 2020-06-17 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный научный центр - Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени К.И. Скрябина и Я.Р. Коваленко Российской академии наук" (ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН) | Способ профилактики рота-, коронавирусной инфекции и эшерихиоза крупного рогатого скота |
-
2021
- 2021-03-11 RU RU2021106438A patent/RU2766249C1/ru active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2070819C1 (ru) * | 1993-04-20 | 1996-12-27 | Дмитрий Драгиутинович Новак | Способ получения вакцины против эшерихиоза телят |
RU2723709C1 (ru) * | 2019-05-20 | 2020-06-17 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный научный центр - Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени К.И. Скрябина и Я.Р. Коваленко Российской академии наук" (ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН) | Способ профилактики рота-, коронавирусной инфекции и эшерихиоза крупного рогатого скота |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
WIELER L.H. et al. Characterization of Shiga-like Toxin Producing Escherichia coli (SL TEe) Isolated from Calves with and without Diarrhoea / Zbl. Bakt., 1992, 276, pages 243-253. * |
ТИЩЕНКО А.С. Влияние адъювантов на иммуногенные свойства эшерихиозного анатоксина / Авто диссерт. на соиск. уч. степен. к.в.н., Краснодар, 2011. * |
ТИЩЕНКО А.С. Влияние адъювантов на иммуногенные свойства эшерихиозного анатоксина / Автореферат диссерт. на соиск. уч. степен. к.в.н., Краснодар, 2011. ТИЩЕНКО А.С. и др. Влияние бактериального полисахарида и полиэлектролита на иммуногенные свойства эшерихиозного анатоксина / Молодой ученый, 2016, N 20 (124), стр. 113-115. WIELER L.H. et al. Characterization of Shiga-like Toxin Producing Escherichia coli (SL TEe) Isolated from Calves with and without Diarrhoea / Zbl. Bakt., 1992, 276, pages 243-253. * |
ТИЩЕНКО А.С. и др. Влияние бактериального полисахарида и полиэлектролита на иммуногенные свойства эшерихиозного анатоксина / Молодой ученый, 2016, N 20 (124), стр. 113-115. * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2800827C1 (ru) * | 2022-11-17 | 2023-07-28 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ лечения эшерихиоза у телят |
RU2813771C1 (ru) * | 2022-11-17 | 2024-02-16 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ профилактики эшерихиоза у телят |
RU2825226C1 (ru) * | 2023-08-07 | 2024-08-22 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ повышения иммуногенности бактериальной вакцины у телят |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2766249C1 (ru) | Способ профилактики эшерихиоза у телят | |
RU2428202C1 (ru) | Вакцина ассоциированная против анаэробной энтеротоксемии и эшерихиозной диареи телят | |
RU2766549C1 (ru) | Способ профилактики эшерихиоза у поросят | |
RU2649831C1 (ru) | Способ профилактики острых кишечных заболеваний у поросят | |
RU2764600C1 (ru) | Вакцина против эшерихиоза телят и поросят | |
PILEHCHIAN et al. | Large scale production of Blackleg vaccine by fermenter and enriched culture medium in Iran | |
RU2813771C1 (ru) | Способ профилактики эшерихиоза у телят | |
RU2806810C1 (ru) | Вакцина гидроокись алюминиевая масляная против эшерихиоза телят и поросят | |
RU2753410C2 (ru) | Способ получения анатоксин-вакцины против эшерихиоза животных | |
RU2814593C1 (ru) | Способ профилактики эшерихиоза у поросят | |
RU2432174C1 (ru) | Способ получения эшерихиозного анатоксина | |
RU2813752C1 (ru) | Способ получения гидроокись алюминиевой масляной вакцины против эшерихиоза телят и поросят | |
RU2650628C1 (ru) | Способ получения вакцины ассоциированной против колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции телят и поросят | |
RU2065749C1 (ru) | Способ профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота | |
RU2777479C1 (ru) | Способ специфической профилактики ринопневмонии и мыта лошадей ассоциированной вакциной в условиях табунного содержания | |
RU2291709C1 (ru) | Способ иммунопрофилактики вирусных респираторных болезней телят | |
RU2316344C1 (ru) | Вакцина ассоциированная против колибактериоза, сальмонеллеза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции нутрий | |
CN103721254A (zh) | 猪a型产气荚膜梭菌氢氧化铝灭活疫苗的制备方法 | |
RU2699035C2 (ru) | Поливалентная вакцина против анаэробной энтеротоксемии молодняка крупного рогатого скота и способ ее применения | |
RU2129441C1 (ru) | Вакцина, ассоциированная против анаэробной энтеротоксемии и эшерихиоза поросят | |
Spiridonov et al. | Clinical trial results of an associated vaccine against cattle clostridiosis and escherichiosis | |
RU2406531C1 (ru) | Вакцина ассоциированная против стрептококкоза, псевдомоноза и энтерококковой инфекции нутрий | |
RU2421240C1 (ru) | Способ получения стафилококковой вакцины | |
RU2406533C1 (ru) | Вакцина ассоциированная против стрептококкоза и стафилококкоза крупного рогатого скота | |
RU2147892C1 (ru) | Способ получения препарата на основе вирусно-бактериальных штаммов из местного очага для приготовления ассоциированной вакцины или поливалентной гипериммунной сыворотки против заболеваний крупного рогатого скота |