RU2812737C1 - Method of quantitative determination of hydroxycinman acids in shoots of hawtown - Google Patents
Method of quantitative determination of hydroxycinman acids in shoots of hawtown Download PDFInfo
- Publication number
- RU2812737C1 RU2812737C1 RU2023129754A RU2023129754A RU2812737C1 RU 2812737 C1 RU2812737 C1 RU 2812737C1 RU 2023129754 A RU2023129754 A RU 2023129754A RU 2023129754 A RU2023129754 A RU 2023129754A RU 2812737 C1 RU2812737 C1 RU 2812737C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- shoots
- chlorogenic acid
- hawthorn
- hydroxycinnamic acids
- optical density
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 13
- 239000002253 acid Substances 0.000 title description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 title 1
- CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 3-O-Caffeoylquinic acid Natural products O[C@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 0.000 claims abstract description 32
- PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N Caffeoylquinic acid Natural products CC(CCC(=O)C(C)C1C(=O)CC2C3CC(O)C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(=O)O PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 32
- CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N Neochlorogenin-saeure Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N 0.000 claims abstract description 32
- 235000001368 chlorogenic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 32
- 229940074393 chlorogenic acid Drugs 0.000 claims abstract description 32
- FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N chlorogenic acid Natural products O[C@@H]1C[C@](O)(C[C@@H](CC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N 0.000 claims abstract description 32
- BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N cis-3-O-p-coumaroylquinic acid Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)cc2)[C@@H]1O)C(=O)O BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N 0.000 claims abstract description 32
- CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N chlorogenic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N 0.000 claims abstract description 31
- 229930005346 hydroxycinnamic acid Natural products 0.000 claims abstract description 31
- DEDGUGJNLNLJSR-UHFFFAOYSA-N hydroxycinnamic acid group Chemical class OC(C(=O)O)=CC1=CC=CC=C1 DEDGUGJNLNLJSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 31
- 235000010359 hydroxycinnamic acids Nutrition 0.000 claims abstract description 31
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 29
- 241001092040 Crataegus Species 0.000 claims abstract description 24
- 235000009917 Crataegus X brevipes Nutrition 0.000 claims abstract description 23
- 235000013204 Crataegus X haemacarpa Nutrition 0.000 claims abstract description 23
- 235000009685 Crataegus X maligna Nutrition 0.000 claims abstract description 23
- 235000009444 Crataegus X rubrocarnea Nutrition 0.000 claims abstract description 23
- 235000009486 Crataegus bullatus Nutrition 0.000 claims abstract description 23
- 235000017181 Crataegus chrysocarpa Nutrition 0.000 claims abstract description 23
- 235000009682 Crataegus limnophila Nutrition 0.000 claims abstract description 23
- 235000004423 Crataegus monogyna Nutrition 0.000 claims abstract description 23
- 235000002313 Crataegus paludosa Nutrition 0.000 claims abstract description 23
- 235000009840 Crataegus x incaedua Nutrition 0.000 claims abstract description 23
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 17
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims abstract description 14
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims abstract description 14
- 239000012085 test solution Substances 0.000 claims abstract description 14
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 12
- 235000017147 Crataegus macracantha Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 241000657468 Crataegus macracantha Species 0.000 claims abstract description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 5
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 claims abstract 2
- 239000012675 alcoholic extract Substances 0.000 claims description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 abstract description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 8
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 8
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 6
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 5
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 4
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 3
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 239000000538 analytical sample Substances 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N gallic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 2
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 2
- FZMVSJSKZADZJS-UHFFFAOYSA-N 2-hydroperoxy-3-phenylprop-2-enoic acid Chemical class OOC(C(O)=O)=CC1=CC=CC=C1 FZMVSJSKZADZJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001550224 Apha Species 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 235000014493 Crataegus Nutrition 0.000 description 1
- 206010019708 Hepatic steatosis Diseases 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 240000000103 Potentilla erecta Species 0.000 description 1
- 235000016551 Potentilla erecta Nutrition 0.000 description 1
- 244000038697 Potentilla palustris Species 0.000 description 1
- 235000016553 Potentilla palustris Nutrition 0.000 description 1
- 235000004789 Rosa xanthina Nutrition 0.000 description 1
- 241000220222 Rosaceae Species 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002790 anti-mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- -1 antioxidant Chemical compound 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 229940074391 gallic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000004515 gallic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000004153 glucose metabolism Effects 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 230000000055 hyoplipidemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 229940127554 medical product Drugs 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 238000012503 pharmacopoeial method Methods 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000028503 regulation of lipid metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 235000018553 tannin Nutrition 0.000 description 1
- 229920001864 tannin Polymers 0.000 description 1
- 239000001648 tannin Substances 0.000 description 1
- 239000013076 target substance Substances 0.000 description 1
Abstract
Description
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, и может быть использовано в центрах контроля качества лекарственных средств и контрольно-аналитических лабораториях при проведении количественного определения суммы гидроксикоричных кислот в побегах боярышника крупноколючкового (Crataegus macracantha).The invention relates to the chemical and pharmaceutical industry, and can be used in drug quality control centers and control and analytical laboratories when conducting a quantitative determination of the amount of hydroxycinnamic acids in the shoots of large-thorn hawthorn (Crataegus macracantha).
В настоящее время система контроля качества лекарственных препаратов требует постоянного совершенствования подходов к стандартизации биологически активные веществ с использованием современных методов анализа и актуальных данных об их физико-химических, спектральных и фармакологических свойствах, позволяющих объективно и селективно определять содержание целевых веществ [Современные подходы к вопросу стандартизации лекарственного растительного сырья / А.Н. Миронов, И.В. Сакаева, Е.И. Саканян и [др.] // Ведомости Научного центра экспертизы средств медицинского применения. - 2013, №2. - С. 52-55.]Currently, the quality control system for medicinal products requires constant improvement of approaches to standardization of biologically active substances using modern methods of analysis and current data on their physicochemical, spectral and pharmacological properties, allowing objective and selective determination of the content of target substances [Modern approaches to the issue of standardization medicinal plant raw materials / A.N. Mironov, I.V. Sakaeva, E.I. Sakanyan et al. // Bulletin of the Scientific Center for Expertise of Medical Products. - 2013, No. 2. - P. 52-55.]
В настоящее время большой интерес проявляется к североамериканским видам рода Crataegus L. (Rosaceae), которые широко интродуцируются в России. К данному виду относится боярышник крупноколючковый, который, по нашему мнению, является перспективным источником биологически активных веществ (БАВ). Одной из целевых групп биологически активных веществ, содержащихся в боярышнике крупноколючковом и представляющих практический интерес, является группа гидроксикоричных кислот. Важнейший представитель данной группы - хлорогеновая кислота. Стоит отметить широкий спектр фармакологических свойств хлорогеновой кислоты, таких как антиоксидантное, противовоспалительное, антибактериальное, противовирусное, гипогликемическое, гиполипидемическое, антикардиоваскулярное, антимутагенное, противораковое, иммуномодулирующее [Miao М, Xiang L. Pharmacological action and potential targets of chlorogenic acid. Adv Pharmacol. 2020;87:71-88. doi: 10.1016/bs.apha.2019.12.002. Epub 2020 Feb 7. PMID: 32089239.] Имеются данные о том, что хлорогеновая кислота участвует в регуляции метаболизма липидов и глюкозы и, таким образом, может использоваться для лечения многих заболеваний, таких как сердечно-сосудистые заболевания, диабет, стеатоз печени и ожирение [Naveed М, Hejazi V, Abbas М, Kamboh АА, Khan GJ, Shumzaid M, Ahmad F, Babazadeh D, FangFang X, Modarresi-Ghazani F, WenHua L, XiaoHui Z. Chlorogenic acid (CGA): A pharmacological review and call for further research. Biomed Pharmacother. 2018 Jan97:67-74. doi: 10.1016/j.biopha.2017.10.064. Epub 2017 Nov 6. PMID: 29080460.] Все это подтверждает целесообразность выделения, идентификации и дальнейших исследований хлорогеновой кислоты, содержащейся в побегах боярышника крупноколючкового с целью расширения ассортимента лекарственных средств растительного происхождения.Currently, there is great interest in the North American species of the genus Crataegus L. (Rosaceae), which are widely introduced into Russia. This species includes large-thorned hawthorn, which, in our opinion, is a promising source of biologically active substances (BAS). One of the target groups of biologically active substances contained in hawthorn and of practical interest is the group of hydroxycinnamic acids. The most important representative of this group is chlorogenic acid. It is worth noting a wide range of pharmacological properties of chlorogenic acid, such as antioxidant, anti-inflammatory, antibacterial, antiviral, hypoglycemic, hypolipidemic, anticardiovascular, antimutagenic, anticancer, immunomodulatory [Miao M, Xiang L. Pharmacological action and potential targets of chlorogenic acid. Adv Pharmacol. 2020;87:71-88. doi: 10.1016/bs.apha.2019.12.002. Epub 2020 Feb 7. PMID: 32089239.] There is evidence that chlorogenic acid is involved in the regulation of lipid and glucose metabolism and thus can be used to treat many diseases such as cardiovascular diseases, diabetes, hepatic steatosis and obesity [Naveed M, Hejazi V, Abbas M, Kamboh AA, Khan GJ, Shumzaid M, Ahmad F, Babazadeh D, FangFang X, Modarresi-Ghazani F, WenHua L, XiaoHui Z. Chlorogenic acid (CGA): A pharmacological review and call for further research. Biomed Pharmacother. 2018 Jan97:67-74. doi: 10.1016/j.biopha.2017.10.064. Epub 2017 Nov 6. PMID: 29080460.] All this confirms the feasibility of isolating, identifying and further researching chlorogenic acid contained in the shoots of hawthorn to expand the range of herbal medicines.
На данный момент отсутствуют единые методики количественного определения суммы гидроксикоричных кислот в лекарственном растительном сырье [Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Москва, 2018 г.].At the moment, there are no uniform methods for quantitative determination of the amount of hydroxycinnamic acids in medicinal plant materials [State Pharmacopoeia of the Russian Federation. XIV edition. Moscow, 2018].
Однако, опираясь на имеющиеся данные фармакопейных методик анализа БАВ в плодах, а также цветках боярышника, и исходя из данных о химическом составе побегов боярышника крупноколючкового, предполагается, что будет рациональным использовать спектрофотометрический метод для определения концентрации гидроксикоричных кислот в побегах боярышника крупноколючкового в пересчете на хлорогеновую кислоту, как на представителя гидроксикоричных кислот.However, based on the available data from pharmacopoeial methods for analyzing biologically active substances in fruits and flowers of hawthorn, and based on data on the chemical composition of hawthorn shoots, it is assumed that it would be rational to use the spectrophotometric method to determine the concentration of hydroxycinnamic acids in the shoots of hawthorn in terms of chlorogenic acid acid, as a representative of hydroxycinnamic acids.
Наиболее близким аналогом изобретения является способ количественного определения суммы гидроксикоричных кислот в подземных органах сабельника болотного, включающий экстракцию измельченного сырья этиловым спиртом 70%, получение извлечения после фильтрования через бумажный фильтр и измерение оптической плотности испытуемого раствора при аналитической волне 280 нм. Концентрацию суммы гидроксикоричных кислот в пересчете на хлорогеновую кислоту определяют по формулеThe closest analogue of the invention is a method for quantitative determination of the amount of hydroxycinnamic acids in the underground organs of cinquefoil, including extraction of crushed raw materials with ethyl alcohol 70%, obtaining the extract after filtering through a paper filter and measuring the optical density of the test solution at an analytical wave of 280 nm. The concentration of the sum of hydroxycinnamic acids in terms of chlorogenic acid is determined by the formula
где А - оптическая плотность исследуемого раствора, А. - оптическая плотность раствора стандартного образца хлорогеновой кислоты, m - масса навески сырья (г), m. - масса навески стандартного образца хлорогеновой кислоты (г), W - потеря в массе при высушивании (%) [Жукова О.Л., Абрамов А.А., Даргаева Т.Д., Маркарян А.А. Изучение фенольного состава подземных органов сабельника болотного / Вестник Московского университета. Серия 2. Химия. - 2006 - Т. 47, №5. - С. 342-345.].where A is the optical density of the test solution, A is the optical density of the solution of a standard sample of chlorogenic acid, m is the mass of the raw material sample (g), m. - weight of a sample of a standard sample of chlorogenic acid (g), W - loss in weight upon drying (%) [Zhukova O.L., Abramov A.A., Dargaeva T.D., Markaryan A.A. Study of the phenolic composition of underground organs of marsh cinquefoil / Bulletin of Moscow University. Series 2. Chemistry. - 2006 - T. 47, No. 5. - P. 342-345.].
Недостатком прототипа является то, что авторы использовали для количественного определения измерение оптической плотности исследуемых растворов при длине волны 280 нм. Однако и другие фенольные соединения, такие как флавоноиды, галловая кислота, танин имеют максимумы поглощения при данной длине волны, что будет приводит к погрешности при определении в анализируемом сырье суммы гидроксиоксикоричных кислот в пересчете на вещества, специфические для побегов боярышника крупноколючкового.The disadvantage of the prototype is that the authors used for quantitative determination the measurement of the optical density of the solutions under study at a wavelength of 280 nm. However, other phenolic compounds, such as flavonoids, gallic acid, tannin, have absorption maxima at a given wavelength, which will lead to an error in determining the amount of hydroxyoxycinnamic acids in the analyzed raw materials in terms of substances specific to the shoots of hawthorn.
Задачей изобретения является разработка способа количественного определения суммы гидроксикоричных кислот в побегах боярышника крупноколючкового в пересчете на хлорогеновую кислоту, обладающего высокой специфичностью, точностью и воспроизводимостью.The objective of the invention is to develop a method for quantitative determination of the amount of hydroxycinnamic acids in the shoots of large-thorned hawthorn in terms of chlorogenic acid, which has high specificity, accuracy and reproducibility.
Техническим результатом является повышение точности определения.The technical result is to increase the accuracy of determination.
Предлагаемый способ количественного определения суммы гидроксикоричных кислот в побегах боярышника крупноколючкового реализуется следующим образом. Аналитическую пробу сырья побегов боярышника крупноколючкового измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 4 мм. Около 0,5 г точной навески измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляют 100 мл 60% этилового спирта. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 60 минут, периодически встряхивая для смывания частиц со стенок. Затем колбу охлаждают в течение 30 мин, потом содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу 100 мл и восполняют недостающий экстрагент 60% этиловым спиртом до метки.The proposed method for quantitative determination of the amount of hydroxycinnamic acids in the shoots of hawthorn is implemented as follows. An analytical sample of raw hawthorn shoots is crushed to a particle size that passes through a sieve with holes 4 mm in diameter. About 0.5 g of an accurately weighed portion of the crushed raw material is placed in a flask with a ground section with a capacity of 250 ml, and 100 ml of 60% ethyl alcohol is added. The flask is connected to a reflux condenser and heated in a boiling water bath for 60 minutes, shaking occasionally to wash off particles from the walls. Then the flask is cooled for 30 minutes, then the contents of the flask are filtered through a paper filter into a 100 ml volumetric flask and the missing extractant is replenished with 60% ethyl alcohol to the mark.
Испытуемый раствор для анализа суммы гидроксикоричных кислот готовят следующим образом: 2 мл полученного извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объем раствора до метки 60% этиловым спиртом (испытуемый раствор). У испытуемого раствора измеряют оптическую плотность при длине волны 330 нм. В качестве раствора сравнения используют 60% этиловый спирт.The test solution for analyzing the amount of hydroxycinnamic acids is prepared as follows: 2 ml of the resulting extract is placed in a 25 ml volumetric flask and the volume of the solution is adjusted to the mark with 60% ethyl alcohol (test solution). The optical density of the test solution is measured at a wavelength of 330 nm. 60% ethyl alcohol is used as a reference solution.
Содержание суммы гидроксикоричных кислот в пересчете на хлорогеновую кислоту вычисляют по формуле:The content of the total hydroxycinnamic acids in terms of chlorogenic acid is calculated using the formula:
где:Where:
X - сумма гидроксикоричных кислот в пересчете на хлорогеновую кислоту, %;X is the sum of hydroxycinnamic acids in terms of chlorogenic acid, %;
А - оптическая плотность испытуемого раствора;A is the optical density of the test solution;
m - масса сырья, г;m - mass of raw materials, g;
W - потеря в массе при высушивании, %;W - weight loss during drying, %;
507 - удельный показатель поглощения () стандартного образца хлорогеновой кислоты при 330 нм [Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV, том IV. ФС.2.5.0019.15, Москва, 2018].507 - specific absorption rate ( ) standard sample of chlorogenic acid at 330 nm [State Pharmacopoeia of the Russian Federation. XIV, volume IV. FS.2.5.0019.15, Moscow, 2018].
При изучении УФ-спектральных характеристик извлечений из побегов боярышника крупноколючкового выявлено, что именно хлорогеновая кислота определяет характер кривой поглощения водно-спиртового извлечения из побегов боярышника крупноколючкового (фигура).When studying the UV spectral characteristics of extracts from the shoots of the hawthorn, it was revealed that it is chlorogenic acid that determines the nature of the absorption curve of the aqueous-alcoholic extract from the shoots of the hawthorn (figure).
Изучение УФ-спектров спиртовых извлечений из побегов боярышника крупноколючкового показало максимум собственного поглощения гидроксикоричных кислот 330 нм. Раствор стандартного образца хлорогеновой кислоты так же имеет максимум поглощения при 330 нм. Максимумы поглощения исследуемого извлечения из побегов боярышника крупноколючкового и раствора стандартного образца хлорогеновой кислоты совпадают, что делает целесообразным проведение пересчета суммы гидроксикоричных кислот на хлорогеновую кислоту при использовании метода прямой спектрофотомерии.A study of the UV spectra of alcoholic extracts from the shoots of hawthorn showed the maximum intrinsic absorption of hydroxycinnamic acids at 330 nm. A solution of a standard sample of chlorogenic acid also has an absorption maximum at 330 nm. The absorption maxima of the studied extract from the shoots of hawthorn and a solution of a standard sample of chlorogenic acid coincide, which makes it advisable to recalculate the amount of hydroxycinnamic acids to chlorogenic acid using the direct spectrophotomery method.
Данный факт позволяет также проводить спектрофотометрическое определение суммы гидроксикоричных кислот в побегах боярышника крупноколючкового при длине волны, равной 330 нм.This fact also allows us to carry out a spectrophotometric determination of the amount of hydroxycinnamic acids in the shoots of hawthorn at a wavelength of 330 nm.
Нами изучено влияние экстрагента на процесс экстракции (таблица 1). В результате эксперимента в качестве оптимального экстрагента нами был выбран 60% этиловый спирт, так как выход действующих веществ из сырья при его использовании максимален.We studied the effect of the extractant on the extraction process (Table 1). As a result of the experiment, we chose 60% ethyl alcohol as the optimal extractant, since the yield of active substances from raw materials when used is maximum.
Далее изучено влияние продолжительности экстракции на кипящей водяной бане, выбрано оптимальное время экстракции 60 минут (таблица 2).Next, the effect of the duration of extraction in a boiling water bath was studied, and the optimal extraction time of 60 minutes was selected (Table 2).
В таблице 3 представлена зависимость выхода гидроксикоричных кислот побегов боярышника крупноколючкового от соотношения «сырье-экстрагент». Максимальный выход действующих веществ наблюдается при соотношении «сырье-экстрагент» 1:200, по этой причине данное соотношение выбрано нами в качестве оптимального.Table 3 shows the dependence of the yield of hydroxycinnamic acids from large hawthorn shoots on the raw material-extractant ratio. The maximum yield of active ingredients is observed at a raw material-extractant ratio of 1:200, for this reason we chose this ratio as optimal.
В таблице 4 представлена зависимость выхода гидроксикоричных кислот побегов боярышника крупноколючкового от степени измельчения побегов. Из таблицы 4 видно, что максимальный выход действующих веществ наблюдается при степени измельчения - 4 мм.Table 4 shows the dependence of the yield of hydroxycinnamic acids from large hawthorn shoots on the degree of grinding of the shoots. From Table 4 it can be seen that the maximum yield of active substances is observed at a degree of grinding of 4 mm.
Учитывая, что увеличение числа операций на стадии пробоподготовки ведет к возрастанию ошибки, нами сделан выбор в пользу одностадийного процесса экстракции с подтверждением требуемой точности количественного определения.Considering that an increase in the number of operations at the sample preparation stage leads to an increase in error, we chose a one-stage extraction process with confirmation of the required accuracy of quantitative determination.
Таким образом, определено, что оптимальными параметрами экстракции являются: однократное извлечение 60% этиловым спиртом на кипящей водяной бане в течение 60 минут в соотношении «сырье экстрагент» - 1:200, оптимальная степень измельчения - 4 мм.Thus, it has been determined that the optimal extraction parameters are: single extraction with 60% ethyl alcohol in a boiling water bath for 60 minutes at a “raw material extractant” ratio of 1:200, the optimal degree of grinding is 4 mm.
Предлагаемый способ поясняется следующим примером.The proposed method is illustrated by the following example.
Аналитическую пробу сырья побегов боярышника крупноколючкового (заготовлено в Ботаническом саду, г. Уфа 2022 г.) измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 4 мм. 0,5112 г измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляют 100 мл 60% этилового спирта.An analytical sample of raw hawthorn shoots (prepared in the Botanical Garden, Ufa 2022) is crushed to a particle size that passes through a sieve with holes 4 mm in diameter. 0.5112 g of crushed raw material is placed in a flask with a ground section with a capacity of 250 ml, 100 ml of 60% ethyl alcohol is added.
Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 60 минут. Затем колбу охлаждают в течение 30 мин, потом содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу 100 мл и восполняют недостающий экстрагент 60% этиловым спиртом до метки.The flask is connected to a reflux condenser and heated in a boiling water bath for 60 minutes. Then the flask is cooled for 30 minutes, then the contents of the flask are filtered through a paper filter into a 100 ml volumetric flask and the missing extractant is replenished with 60% ethyl alcohol to the mark.
Испытуемый раствор для анализа суммы гидроксикоричных кислот готовят следующим образом: 2 мл полученного извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объем раствора до метки спиртом этиловым 60%) (испытуемый раствор). У испытуемого раствора измеряют оптическую плотность при длине волны 330 нм. В качестве раствора сравнения используют 60% этиловый спирт.The test solution for analyzing the amount of hydroxycinnamic acids is prepared as follows: 2 ml of the resulting extract is placed in a 25 ml volumetric flask and the volume of the solution is adjusted to the mark with 60% ethyl alcohol (test solution). The optical density of the test solution is measured at a wavelength of 330 nm. 60% ethyl alcohol is used as a reference solution.
Содержание суммы гидроксикоричных кислот в пересчете на хлорогеновую кислоту и абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле:The content of the sum of hydroxycinnamic acids in terms of chlorogenic acid and absolutely dry raw materials is calculated using the formula:
где:Where:
X - сумма гидроксикоричных кислот в пересчете на хлорогеновую кислоту, %X is the sum of hydroxycinnamic acids in terms of chlorogenic acid, %
0,5821 - оптическая плотность испытуемого раствора;0.5821 - optical density of the test solution;
507 - удельный показатель поглощения хлорогеновой кислоты при 330 нм;507 - specific absorption rate of chlorogenic acid at 330 nm;
0,5112 - масса сырья, г;0.5112 - mass of raw materials, g;
9,1 - потеря в массе при высушивании, %.9.1 - weight loss during drying, %.
Х=3,09%.X=3.09%.
Содержание суммы гидроксикоричных кислот в пересчете на хлорогеновую кислоту равно 3,09%.The content of the sum of hydroxycinnamic acids in terms of chlorogenic acid is 3.09%.
Все результаты были статистически обработаны. Ошибка единичного количественного определения составила ±0,42%).All results were statistically processed. The error of a single quantitative determination was ±0.42%).
Таким образом, предлагаемый способ количественного определения суммы гидроксикоричных кислот в пересчете на хлорогеновую кислоту в побегах боярышника крупноколючкового с использованием прямой спектрофотометрии разработан впервые для данного вида сырья и обладает следующими преимуществами:Thus, the proposed method for quantitative determination of the amount of hydroxycinnamic acids in terms of chlorogenic acid in the shoots of hawthorn using direct spectrophotometry was developed for the first time for this type of raw material and has the following advantages:
1. Разработанный метод является специфичным и селективным, а также позволяет проводить экстракцию сырья однократно 60% этиловым спиртом, позволяющим исчерпывающе извлекать гидроксикоричные кислоты.1. The developed method is specific and selective, and also allows for the extraction of raw materials once with 60% ethyl alcohol, which allows for the exhaustive extraction of hydroxycinnamic acids.
2. Пересчет суммы гидроксикоричных кислот идет на специфическое соединение для побегов боярышника крупноколючкового - хлорогеновую кислоту, определяющее характер кривой поглощения в УФ - спектре испытуемого раствора (длина волны 330 нм).2. The amount of hydroxycinnamic acids is recalculated to a specific compound for shoots of large-thorned hawthorn - chlorogenic acid, which determines the nature of the absorption curve in the UV spectrum of the test solution (wavelength 330 nm).
3. Ошибка единичного определения предлагаемого способа составляет ±0,42%, что свидетельствует об объективности разработанного способа.3. The error of a single determination of the proposed method is ±0.42%, which indicates the objectivity of the developed method.
Предлагаемый способ можно применять в центрах контроля качества лекарственных средств, на фармацевтических предприятиях и контрольно-аналитических лабораториях при проведении количественного анализа в побегах боярышника крупноколючкового (Crataegus macracantha).The proposed method can be used in drug quality control centers, pharmaceutical factories and control and analytical laboratories when conducting quantitative analysis in the shoots of large-thorn hawthorn (Crataegus macracantha).
Claims (8)
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2812737C1 true RU2812737C1 (en) | 2024-02-01 |
Family
ID=
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2012130664A (en) * | 2012-07-17 | 2014-01-27 | Владимир Александрович Куркин | METHOD FOR ANALYSIS OF THE FRUIT OF HAWTHORN |
| RU2531940C1 (en) * | 2013-04-15 | 2014-10-27 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВПО "ВГУ") | Method for spectrophotometric measurement of combination of chlorophyll, carotinoids and hydroxycinnamic acid in great nettle leaves |
| RU2695760C1 (en) * | 2018-12-25 | 2019-07-25 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for quantitative determination of sum of flavonoids in quebec hawthorn berries |
| RU2747483C1 (en) * | 2020-10-14 | 2021-05-05 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for quantitative determination of amount of phenylpropanoids in lilac flowers |
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2012130664A (en) * | 2012-07-17 | 2014-01-27 | Владимир Александрович Куркин | METHOD FOR ANALYSIS OF THE FRUIT OF HAWTHORN |
| RU2531940C1 (en) * | 2013-04-15 | 2014-10-27 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВПО "ВГУ") | Method for spectrophotometric measurement of combination of chlorophyll, carotinoids and hydroxycinnamic acid in great nettle leaves |
| RU2695760C1 (en) * | 2018-12-25 | 2019-07-25 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for quantitative determination of sum of flavonoids in quebec hawthorn berries |
| RU2747483C1 (en) * | 2020-10-14 | 2021-05-05 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for quantitative determination of amount of phenylpropanoids in lilac flowers |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Federico Ferioli et al., Application of different analytical methods for the determination of phenolics and antioxidant activity in hawthorn (Crataegus spp.) bud and sprout herbal extracts, Journal of Applied Botany and Food Quality 93, 1 - 10 (2020). Гончаров Н.Ф. и др., ГИДРОКСИКОРИЧНЫЕ КИСЛОТЫ ЦВЕТКОВ И ЛИСТЬЕВ НЕФАРМАКОПЕЙНЫХ ВИДОВ РОДА БОЯРЫШНИК // Фундаментальные исследования. - 2011. No 9-1, стр. 146-148; https://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=28113. Трофимова, Светлана Валерьевна, Фармакогностическое изучение листьев боярышника кроваво-красного Crataegus sanguinea Pall. из флоры Башкортостана, автореферат диссерт., Пермь, 2014 г. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104306745B (en) | A kind of detection method of gastrodia tuber refreshment capsule | |
| RU2669162C1 (en) | Method for quantifying the amount of flavonoids in siberian hawthorn leaves | |
| RU2696770C1 (en) | Method for quantitative determination of sum of flavonoids in wild bergamot herb | |
| RU2701726C1 (en) | Method for quantitative determination of the sum of flavonoids in poplar leaves in black | |
| CA2307614A1 (en) | Pharmaceutical grade echinacea | |
| CN103529008A (en) | Method for determining residual quantity of sulfur dioxide in Chinese herbal medicines | |
| Ren et al. | Quality assessment of Typhae Pollen Carbonisata based on chromaticity analysis combined with UPLC fingerprinting and thrombin activity | |
| RU2812737C1 (en) | Method of quantitative determination of hydroxycinman acids in shoots of hawtown | |
| CN110638990B (en) | Extraction process of cassia twig, peony and rhizoma anemarrhenae prescription preparation extract | |
| RU2747483C1 (en) | Method for quantitative determination of amount of phenylpropanoids in lilac flowers | |
| Nesterova et al. | Quantitative determination of arbutin in malus sylvestris leaves by high-performance liquid chromatography | |
| AU1363399A (en) | Pharmaceutical grade ginkgo biloba | |
| CN108426960A (en) | The content assaying method of oleanolic acid in Fructus Chaenomelis and ursolic acid | |
| CA2307047A1 (en) | Pharmaceutical grade ginseng | |
| RU2806035C1 (en) | Yarrow herb flavonoids assay method | |
| CN103575823A (en) | Detection method of 8 chemical components in Tangminling preparation | |
| RU2807831C1 (en) | Method of quantitative determination of total flavonoids in leaves of the three-leaf watch | |
| RU2695760C1 (en) | Method for quantitative determination of sum of flavonoids in quebec hawthorn berries | |
| RU2772821C1 (en) | Method for quantitative determination of sum of flavonoids in spreading marigold flowers | |
| RU2790821C1 (en) | Method for the quantitative determination of saponins in gynostemma pentaphyllum | |
| RU2786835C1 (en) | Method for quantitative determination of the amount of flavonoids in the herb of the wild thistle | |
| RU2786440C1 (en) | Method for quantitative determination of the amount of flavonoids in nigerus grass | |
| RU2823884C1 (en) | Method for quantitative determination of saponins in pennsylvania thorn sprouts | |
| RU2763264C1 (en) | Method for quantitative determination of the amount of phenylpropanoids in moringa oil leaves | |
| RU2747482C1 (en) | Method for quantifying amount of flavonoids in walnut leaves |