RU2804886C9 - Применение лекарственного препарата Тамерон в качестве радиопротекторного, радиомитигаторного и радиосенсибилизирующего средства - Google Patents
Применение лекарственного препарата Тамерон в качестве радиопротекторного, радиомитигаторного и радиосенсибилизирующего средства Download PDFInfo
- Publication number
- RU2804886C9 RU2804886C9 RU2022115480A RU2022115480A RU2804886C9 RU 2804886 C9 RU2804886 C9 RU 2804886C9 RU 2022115480 A RU2022115480 A RU 2022115480A RU 2022115480 A RU2022115480 A RU 2022115480A RU 2804886 C9 RU2804886 C9 RU 2804886C9
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cells
- drug
- radioprotective
- tameron
- sodium
- Prior art date
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 37
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title claims abstract description 32
- 230000004223 radioprotective effect Effects 0.000 title claims abstract description 15
- 239000002534 radiation-sensitizing agent Substances 0.000 title claims abstract description 6
- OBMXPJHZTHIKOZ-UHFFFAOYSA-N 3-amino-2h-phthalazine-1,4-dione;sodium Chemical compound [Na].C1=CC=C2C(=O)N(N)NC(=O)C2=C1 OBMXPJHZTHIKOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 19
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 8
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 abstract description 7
- 229940124554 radiomitigator Drugs 0.000 abstract description 6
- 230000005865 ionizing radiation Effects 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 239000000718 radiation-protective agent Substances 0.000 abstract description 4
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 60
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 19
- HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N luminol Chemical compound O=C1NNC(=O)C2=C1C(N)=CC=C2 HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 13
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 12
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 12
- GAKDOEJMVPAICM-UHFFFAOYSA-N 3-amino-2h-phthalazine-1,4-dione Chemical compound C1=CC=C2C(=O)N(N)NC(=O)C2=C1 GAKDOEJMVPAICM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 11
- -1 alkaline earth metal salts Chemical class 0.000 description 11
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 11
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 10
- VZUNGTLZRAYYDE-UHFFFAOYSA-N N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine Chemical compound O=NN(C)C(=N)N[N+]([O-])=O VZUNGTLZRAYYDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 10
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 9
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 9
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 8
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 8
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 230000005782 double-strand break Effects 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 7
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 7
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 6
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 6
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 description 6
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 6
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 5
- 101000958041 Homo sapiens Musculin Proteins 0.000 description 5
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 208000019155 Radiation injury Diseases 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 102000046949 human MSC Human genes 0.000 description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 4
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 4
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 4
- 230000003537 radioprotector Effects 0.000 description 4
- 230000000637 radiosensitizating effect Effects 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 3
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- JKOQGQFVAUAYPM-UHFFFAOYSA-N amifostine Chemical compound NCCCNCCSP(O)(O)=O JKOQGQFVAUAYPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960001097 amifostine Drugs 0.000 description 3
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 3
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 3
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 3
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 3
- KBEKQQJUNVQLDZ-MDZDMXLPSA-N 4-[(e)-2-[(4-chlorophenyl)methylsulfonyl]ethenyl]benzoic acid Chemical compound C1=CC(C(=O)O)=CC=C1\C=C\S(=O)(=O)CC1=CC=C(Cl)C=C1 KBEKQQJUNVQLDZ-MDZDMXLPSA-N 0.000 description 2
- QPAMXNZWXFZISY-SDNWHVSQSA-N 5-[(e)-2-(3,5,5,8,8-pentamethyl-6,7-dihydronaphthalen-2-yl)prop-1-enyl]thiophene-2-carboxylic acid Chemical compound C=1C(C(CCC2(C)C)(C)C)=C2C=C(C)C=1C(/C)=C/C1=CC=C(C(O)=O)S1 QPAMXNZWXFZISY-SDNWHVSQSA-N 0.000 description 2
- XYJODUBPWNZLML-UHFFFAOYSA-N 5-ethyl-6-phenyl-6h-phenanthridine-3,8-diamine Chemical compound C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2N(CC)C1C1=CC=CC=C1 XYJODUBPWNZLML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010079458 CBLB502 Proteins 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 2
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- QADHLRWLCPCEKT-LOVVWNRFSA-N androst-5-ene-3beta,17beta-diol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CC=C21 QADHLRWLCPCEKT-LOVVWNRFSA-N 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 210000003074 dental pulp Anatomy 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 229950009493 entolimod Drugs 0.000 description 2
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- TZBJGXHYKVUXJN-UHFFFAOYSA-N genistein Natural products C1=CC(O)=CC=C1C1=COC2=CC(O)=CC(O)=C2C1=O TZBJGXHYKVUXJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N hydroxyl Chemical compound [OH] TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 150000002541 isothioureas Chemical class 0.000 description 2
- OFJHGWPRBMPXCX-UHFFFAOYSA-M lithium;2-oxopropanoate Chemical compound [Li+].CC(=O)C([O-])=O OFJHGWPRBMPXCX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 2
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 2
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 2
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 2
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- JKEBMURXLKGPLR-UHFFFAOYSA-N 5-amino-2,3-dihydrophthalazine-1,4-dione;sodium Chemical compound [Na].O=C1NNC(=O)C2=C1C(N)=CC=C2 JKEBMURXLKGPLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UCBSXTTUNYWOCC-UHFFFAOYSA-N 6-(cyclooctylamino)quinoline-5,8-dione Chemical compound O=C1C2=CC=CN=C2C(=O)C=C1NC1CCCCCCC1 UCBSXTTUNYWOCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012099 Alexa Fluor family Substances 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108020005199 Dehydrogenases Proteins 0.000 description 1
- 208000035859 Drug effect increased Diseases 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108010029961 Filgrastim Proteins 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 102100034533 Histone H2AX Human genes 0.000 description 1
- 101001067891 Homo sapiens Histone H2AX Proteins 0.000 description 1
- 101001033249 Homo sapiens Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 101000588302 Homo sapiens Nuclear factor erythroid 2-related factor 2 Proteins 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 1
- PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N L-N-acetyl-Cysteine Chemical compound CC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 102100031701 Nuclear factor erythroid 2-related factor 2 Human genes 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 229960004308 acetylcysteine Drugs 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000000695 adrenergic alpha-agonist Substances 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- NBMKJKDGKREAPL-DVTGEIKXSA-N beclomethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(Cl)[C@@H]1[C@@H]1C[C@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O NBMKJKDGKREAPL-DVTGEIKXSA-N 0.000 description 1
- 229940092705 beclomethasone Drugs 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000007665 chronic toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000160 chronic toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 1
- JXSJBGJIGXNWCI-UHFFFAOYSA-N diethyl 2-[(dimethoxyphosphorothioyl)thio]succinate Chemical compound CCOC(=O)CC(SP(=S)(OC)OC)C(=O)OCC JXSJBGJIGXNWCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 229940045109 genistein Drugs 0.000 description 1
- 235000006539 genistein Nutrition 0.000 description 1
- ZCOLJUOHXJRHDI-CMWLGVBASA-N genistein 7-O-beta-D-glucoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=C2C(=O)C(C=3C=CC(O)=CC=3)=COC2=C1 ZCOLJUOHXJRHDI-CMWLGVBASA-N 0.000 description 1
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 1
- 229940040731 human interleukin-12 Drugs 0.000 description 1
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-N hydroperoxyl Chemical compound O[O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000686 immunotropic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 108700021036 mouse gamma-H2AX Proteins 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- 229940029345 neupogen Drugs 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 239000002831 pharmacologic agent Substances 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 231100000683 possible toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006010 pyroptosis Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 230000003007 single stranded DNA break Effects 0.000 description 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000037380 skin damage Effects 0.000 description 1
- RVJVDCVIJCBUTH-UHFFFAOYSA-M sodium;5-amino-2h-phthalazin-3-ide-1,4-dione Chemical compound [Na+].O=C1N[N-]C(=O)C2=C1C(N)=CC=C2 RVJVDCVIJCBUTH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000000446 sulfanediyl group Chemical group *S* 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004357 third molar Anatomy 0.000 description 1
- 230000008467 tissue growth Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к области медицины и радиобиологии, а именно к применению лекарственного препарата Тамерон в качестве радиопротекторного, радиомитигаторного и радиосенсибилизирующего средства. Вышеописанное изобретение позволяет обеспечить радиопротекторные свойства препарата Тамерон посредством использования радиопротекторного средства на основе аминодигидрофталазиндиона натрия в дозах от 10 до 2000 мг как разово в качестве радиопротекторного и радиомитигаторного препарата, так и длительно в тех же суточных дозах при хроническом воздействии ионизирующего излучения или при курсе лучевой терапии. 6 ил., 1 пр.
Description
Изобретение относится к области медицины и радиобиологии, а именно радиопротекторному, радиомитигаторному и радиосенсибилизирующему фармакологическому средству, содержащему препарат ТАМЕРОН на основе активной фармацевтической субстанции 5-амино-2,3-дигидро-1,4-фталазиндион натрия (5-амино-2,3-дигидрофталазин-1,4-дион натрия, аминодигидрофталазиндиона натрия, люминол натрия), а также препаратов на основе других солей щелочных и щелочноземельных металлов аминодигидрофталазиндиона. Средство может применяться для лечения и профилактики лучевого поражения, а также при лечении онкологических заболеваний при лучевой терапии в качестве радиопротекторного и радиомитигаторного препарата, защищающего нормальные клетки организма от лучевого поражения при различных видах лучевой терапии и работающего как радиосенсибилизатор для раковых клеток.
В настоящее время известно несколько типов радиопротекторных средств, которые обладают прямым радиопротекторным действием - различные восстановленные тиосоединения (например, этиол (амифостин), N-ацетилцистеин) или вещества, блокирующие важные ферментные системы, играющие роль в развитии последствий лучевого поражения (например, ингибиторы NO-синтаз - N-ацил-S-алкилзамещенные изотиомочевины, индралин (альфа-адреномиметик)) [1]. В России к применению разрешен только индралин, а за рубежом - амифостин [2]. Ведутся разработки соединений на основе N-ацил-S-алкилзамещенных изотиомочевин, которые показали достаточно высокую эффективность в качестве радиопротекторов [3]. Также известны перспективные радиопротекторы на основе меланина [4] и пирувата лития [5]. В качестве радиомитигаторных средств для применения в ранние сроки после воздействия ионизирующего излучения в РФ зарегистрирован только интерлейкин-1β человека (Беталейкин). В США (US FDA) одобрено в качестве перспективных радиомитигаторов генистеин (BIO 300), 5-андростендиол (Neumune), рекомбинантный человеческий интерлейкин-12 (HemaMax), CBLB502 (Entolimod), гранулоцитарный колониестимулирующий фактор (G-CSF, Neupogen), ингибитор киназы ON01210 (ExRAD) и беклометазон (OrbeShield) [2].
Несмотря на достаточное количество известных потенциальных радиопротекторов и радиомитигаторов их эффективность проявляется в достаточно высоких концентрациях, при которых наблюдаются токсические эффекты. Поэтому применение таких веществ в качестве профилактических или тактических средств связано со значительными побочными эффектами. Аналогично и применение этих препаратов в онкологической практике ограничено в связи с плохой переносимостью и потенциальной токсичностью. В США единственным допущенным препаратом в качестве средства профилактики осложнений радиотерапии опухолей является амифостин, который в связи с токсичностью лишь ограниченно используется при лечении некоторых видов новообразований [2]. При этом в настоящее время нет препаратов, которые бы проявляли свойства радиопротектора, радиомитигатора и радиосенсибилизатора и обладали бы низкой токсичностью. В настоящем изобретении в качестве такого препарата предлагается использовать соединения аминодигидрофталазиндиона, а именно его соединения в виде соли натрия (лекарственный препарат ТАМЕРОН), а также других солей щелочных и щелочноземельных металлов аминодигидрофталазиндиона.
Препарат ТАМЕРОН на основе активной фармацевтической субстанции аминодигидрофталазиндиона натрия обладает иммунотропным действием, регулирует биологическую активность иммунных клеток, нормализуя избыточный синтез провоспалительных цитокинов - TNF-α, ИЛ-1, ИЛ-6 иммунными клетками [6-10]. Показано, что биологические свойства аминодигидрофталазиндиона натрия преимущественно связаны с его прямой и косвенной антиоксидантной активностью. Косвенная - за счет механизма опосредованной активации антиоксидантных систем препаратом ТАМЕРОН путем стабилизации транскрипционного фактора Nrf2. Этот белок влияет на экспрессию генов, связанных с регуляцией окислительно-восстановительного баланса клетки [11]. Прямая антиоксидантная защита реализуется путем химического взаимодействия аминодигидрофталазиндиона натрия с радикалами [12, 13].
Натриевая соль люминола способна диссоциировать с образованием аниона при более низких значениях рН, близких к физиологическим, в отличие от люминола, где реакция может происходить только в достаточно сильно-щелочных условиях (при рН 8-10), которые не свойственны организму. Аминодигидрофталазиндион натрия в биологических жидкостях не проявляет реакционной способности, но при добавлении индуктора окислительного стресса - пероксида водорода, люминол натрия окисляется, нейтрализуя свободные радикалы [14]. Известно, что соли других щелочных металлов и соли щелочноземельных металлов аминодигидрофталазиндиона обладают аналогичными иммуномодулирующим свойствами и полностью сохраняют свою реакционную способность в отношении активных форм кислорода [15]. Таким образом, вещества на основе солей щелочных и щелочноземельных металлов аминодигидрофталазиндиона могут длительное время, циркулируя в организме, нейтрализовать свободные АФК в местах лучевого поражения или окислительных процессов и воспаления после лучевой терапии [16]. Эти вещества взаимодействуют с наиболее токсичными для клетки радикалами - супероксид и гидропероксид анионами, которые отвечают за дальнейшее развитие свободнорадикальной цепи и процессы перекисного окисления липидов мембран клеток, белков, других биологических структур при воздействии ионизирующего излучения [17].
Отличительной чертой препарата ТАМЕРОН и других солей щелочных и щелочноземельных металлов аминодигидрофталазиндиона является и чрезвычайно малая токсичность для организма человека и животных. Так, LD50 для крыс составляет более 1000 мг/кг для острой токсичности, для хронической более 500 мг/кг. Для человека возможные разовые дозы применения препарата ТАМЕРОН и других солей щелочных и щелочноземельных металлов аминодигидрофталазиндиона от 10 до 2000 мг [6, 15].
Целью изобретения является обеспечение радиопротекторных свойств посредством использования радиопротекторного средства на основе аминодигидрофталазиндиона натрия (лекарственного препарата ТАМЕРОН) в дозах от 10 до 2000 мг как разово (внутримышечно и внутривенно в виде порошка или лиофилизата, сублингвально в виде таблеток, в виде кишечнорастворимых капсул, в виде свечей и других возможных лекарственных форм и способов введения) в качестве радиопротекторного и радиомитигаторного препарата, так и длительно в тех же суточных дозах (внутримышечно и внутривенно в виде порошка или лиофилизата, сублингвально в виде таблеток, в виде кишечнорастворимых капсул, в виде свечей и других возможных лекарственных форм и способов введения) при хроническом воздействии ионизирующего излучения или при курсе лучевой терапии. Применение этого препарата способно значительно снизить побочные эффекты лучевого поражения. Препарат ТАМЕРОН и другие соли щелочных и щелочноземельных металлов аминодигидрофталазиндиона возможно применять как в виде порошка чистого вещества, так и в составе композиций в виде мазей, крема и др. в качестве наружных средств для уменьшения лучевого повреждения кожи (в случае лечения кожных онкологических заболеваний или опасности лучевого поражения кожи). Применение препарата ТАМЕРОН и других солей щелочных и щелочноземельных металлов аминодигидрофталазиндиона в указанных выше дозах и способах при лучевой терапии является радиосенсибилизатором - усиливает гибель раковых клеток, но способствует выживанию нормальных клеток организма.
Для подтверждения достижения цели изобретения были проведены биологические испытания радиопротекторных, радиомитигаторных и радиосенсибилизирующих свойств препарата на основе натриевой соли аминодигидрофталазиндиона (препарат ТАМЕРОН) на примере культуры нормальных и раковых клеток человека, а также животных - лабораторных мышах.
Перечень фигур
Фиг. 1. Схема прямой антиоксидантной активности солей щелочных и щелочноземельных металлов аминдогидрофталазиндиона за счет химического взаимодействия со свободными радикалами.
Фиг. 2. Анализ жизнеспособности МСК человека и клеток остеосаркомы линии MNNG/Hos после инкубации с различными концентрациями аминодигидрофталазиндиона натрия (0.25-4 мМ) после облучения рентгеновскими лучами в дозе 15 Гр.
Фиг. 3. Радиопротекторные и радиомитигаторные свойства аминодигидрофталазиндиона натрия Тест жив-мертв МСК человека и клеток остеосаркомы линии MNNG/Hos после инкубации с различными концентрациями аминодигидрофталазиндиона натрия (0.25-4 мМ) после облучения рентгеновскими лучами в дозе 15 Гр. На микрофотографиях над диаграммами показаны типичное распределение клеток - зеленые живые, красные - мертвые. Линейка - 100 μm.
Фиг. 4. Радиопротекторные свойства аминодигидрофталазиндиона натрия. Анализ уровня внутриклеточных АФК (пероксидов и гидроксильного радикала) в МСК человека и клеток остеосаркомы линии MNNG/Hos после инкубации с различными концентрациями аминодигидрофталазиндиона натрия (0.25-4 мМ) после облучения рентгеновскими лучами в дозе 15 Гр. Клетки окрашивали селективными красителя CellROX и DHE.
Фиг. 5. Радиомитигаторные и радиосенсибилизирующие свойства аминодигидрофталазиндиона натрия, тест на двунитиевые разрывы ДНК после рентгеновского облучения в дозе 1,5 Гр мезенхимальных стволовых клеток (МСК) и раковых клеток линии MNNG/Hos. а - подсчет количества фокусов разрывов ДНК в культивируемых мезенхимальных стволовых клетках (МСК) человека через 1 и 4 часа после облучения рентгеном в дозе 1,5 Гр в контроле и в присутствии люминола натрия, б - визуализация разрывов ДНК в ядрах МСК на микрофтографиях, в - подсчет количества фокусов разрывов ДНК в культивируемых раковых клетках (MNNG/Hos) человека через 1 и 4 часа после облучения рентгеном в дозе 1,5 Гр в контроле и в присутствии люминола натрия, г - визуализация разрывов ДНК в ядрах клеток MNNG/Hos на микрофтографиях. Линейка - 10 мкм.
Фиг. 6. Радиомитигаторные свойства аминодигидрофталазиндиона натрия. Кривая выживаемости мышей линии SHK после облучения в дозе 5,4 Гр после 3-кратного внутрибрюшинного введения препарата ТАМЕРОН.
Пример. Исследование радиопротекторных, радиомитигаторных и радиосенсибилизирующих и свойств препарата ТАМЕРОН
На фиг. 1 представлена схема прямой антиоксидантной активности солей щелочных и щелочноземельных металлов аминодигидрофталазиндиона путем захвата анионом люминола свободных радикалов кислорода и его дальнейшего окисления до конечного продукта - 3-аминофталевой кислоты. Так анион люминола в растворе при взаимодействии с одно или двух электронным окислителем образует люминол - радикал. Далее он претерпевает превращение в азахинон с переходом в окисленное промежуточное перекисное соединение, как при взаимодействии с гидропероксильным радикалом, так и при непосредственном взаимодействии с супероксид радикалом. Промежуточный продукт этих реакций нестабилен и он превращается в 3-аминофталевый дианион, при этом электроны последнего соединения, находившиеся в триплетном состоянии, переходит в синглетное состояние. Возвращение электронов 3-аминофталевого дианиона из триплетного состояния в нормальное сопровождается испусканием квантов света с длиной волны 425 нм.
Анализ изменений уровня метаболической активности методом МТТ теста после облучения рентгеном показан на фиг 2. Он выявил, что у стволовых и раковых клеток значения этого показателя мало изменялись как в контроле, так и после облучения. Стоит отметить, что даже очень высокие концентрации аминодигидрофталазиндиона натрия (до 4 мМ) не обладали цитотоксическим эффектом. В целом стоит отметить, что МТТ тест является достаточно грубым и показывает изменения метаболической активности клеток только при значительных повреждениях систем метаболизма клеток.
На фиг 3 показаны более точные данные, полученные при оценке доли живых и мертвых клеток. Так, в культуре мезенхимальных стволовых клеток облучение рентгеном и аминодигидрофталазиндиона натрия значимо не вызывали увеличения доли мертвых клеток. Напротив, у раковых клеток аминодигидрофталазиндиона натрия приводил к развитию процесса гибели клеток и эффект увеличивался при повышении концентрации. При концентрации 4 мМ в популяции наблюдалось более 25% клеток. Стоит отметить, что на фоне облучения рентгеном он не проявлял радиозащитного эффекта, а напротив, даже усиливал гибель раковых клеток на 25%.
Анализ изменений уровня АФК в клетках после облучения рентгеном представлен на фиг. 4. Так облучение клеток МСК и MNNG/Hos сопровождалось значительным ростом генерации активных форм кислорода. Внесение люминола натрия в культуральную среду, где находились исследуемые клетки приводило к тому, что концентрация радикалов в клетках после облучения была значительно ниже, чем в контроле. В данном случае наблюдалась относительная обратная зависимость генерации АФК от концентрации люминола натрия - максимальный эффект ингибирования генерации свободных радикалов наблюдался при концентрациях 1 и 2 мМ. Анализ количества двунитевых разрывов ДНК методом иммуноокрашивания фосфорилированных локусов Н2АХ после облучения рентгеновскими лучами в дозе 1.5 Гр показан на фиг. 5. Он выявил различный ответ клеточных культур на предварительную их обработку аминодигидрофталазиндиона натрия в различных концентрациях (0.25-1 мМ). Предобработка МСК человека аминодигидрофталазиндионом натрия во всех исследованных концентрациях (0.25-1 мМ) через 1 час после облучения выявил достоверное снижение количества двунитевых разрывов ДНК по сравнению с необработанным контролем (*р ≤ 0.0001 для 0.25 мМ, p ≤ 0.0012 для 0.5 мМ, p ≤ 0.0001 для 1 мМ). При этом через 4 часа после облучения только максимальная концентрация препарата показала различие с контрольной группой. Более низкие концентрации препарата (0.25-0.5 мМ) через 4 часа после облучения не обеспечивали достоверного ускорения репарации двунитевых разрывов ДНК. В случае клеток остеосаркомы человека линии MNNG/Hos препарат не только не снижал количество двунитевых разрывов ДНК в концентрациях 0.25 и 0.5 мМ, но и достоверно увеличивал (*р ≤ 0.004) в максимальной концентрации (1 мМ). Через 4 часа после облучения количество двунитевых разрывов ДНК во всех исследованных концентрациях не имело достоверных различий с контрольной группой (без воздействия препарата).
На фигуре 6 показана кривая выживаемости мышей после облучения рентгеном в дозе 5,4 Гр. Животные, которые получали внутрибрюшинно физ. раствор или ТАМЕРОН в дозе 300 мг/кг (суммарно 900 мг/кг) показывали в течение 30 суток после введения выживаемость на уровне 100%. Мыши, получавшие внутрибрюшинно физ. раствор и подвергшиеся облучению рентгеном в дозе 5,4 Гр гибли с 20 суток после облучения, и количество погибших животных достигало 50% к 25 суткам наблюдения. Животные, которые после облучения троекратно получали инъекцию препарата ТАМЕРОН показывали более лучшую динамику выживаемости. Хотя и животные на фоне применения препарата начинали гибнуть несколько раньше (с 8 суток), но при этом выживаемость их достигла 70% к 18 суткам наблюдения и сохранялась на этом уровне до конца эксперимента, т.е. применение препарата ТАМЕРОН улучшало выживаемость животных на 20%, по сравнению с животными, которые препарат не получали.
Материалы и методы
Культуры клеток
Эксперименты проводились на культуре нормальных (мезенхимальные стволовые клетки, выделенные из пульпы зуба) и раковых клеток (остеосаркома человека линии MNNG/Hos). Мезенхимальные стволовые клетки человека (hMSc) были выделены из зачатка третьего моляра, извлеченного по ортодонтическим показаниям у здорового 16-летнего пациента. Клетки экстрагировали в среде DMEM/F12 (ПанЭко, Россия), содержащей 200 ЕД/мл пенициллина и 200 мг/мл стрептомицина (Life Technologies, США), шприцем, вставленным в верхушку зуба, с последующей обработкой 0,25% трипсином + 0,02% ЭДТА (Life Technologies). Technologies, США) в течение 30 мин при 37°С. Выделенные клетки центрифугировали в течение 2 мин при 1500 об/мин и ресуспендировали до состояния единичных клеток в культуральной среде, состоящей из DMEM/F12 (1:1; Life Technologies) с добавлением 10% эмбриональной бычьей сыворотки (FBS). Полученный раствор переносили во флаконы по 25 мл и культивировали в атмосфере 5% СО2 при 37°С с добавлением 10% FBS (HyClone), 100 ЕД/мл пенициллина/стрептомицина, 2 мМ L-глутамина в DMEM (ПанЭко, Россия). При достижении состояния субконфлюэнтных клеток культивируемые клетки обрабатывали 0,25% раствором ЭДТА/трипсин и добавляли во флаконы объемом 75 см2 в соотношении 1:3. Клетки культивировали в среде DMEM/F12 («ПанЭко», Россия) с добавлением 10% FBS, 100 ЕД/мл пенициллина/стрептомицина и 2 мМ L-глутамина. В нашем исследовании использовали культуры клеток 3-4 пассажей. Культура клеток остеосаркомы человека линии MNNG/Hos была получена из криобанка лаборатории роста клеток и тканей ИТЭБ РАН.
Облучение клеточных культур
Облучение клеточных клеток проводили с использованием терапевтического рентгеновского аппарата РУТ-15 (Мосрентген, Россия) в дозе 15 Гр при мощности дозы 1 Гр/мин, напряжении 200 кВ, фокусном расстоянии 37,5 см и ток 20 мА. Клетки облучали в 96 луночных культуральных планшетах или культуральных флаконах. Мышей облучали индивидуально в клетках в дозе 5,4 Гр, при мощности дозы 1 Гр/мин.
Анализ уровня внутриклеточных АФК
Уровень внутриклеточных АФК после облучения определялся с использованием 2 селективных флуоресцентных красителей: CellROX (Invitrogen) и дигидроэтидиум (Sigma Aldrich). Краситель CellROX (2 μM), способен эффективно проникать в клетку, и при окислении активными формами кислорода (в основном пероксидами) проявлять ярко-зеленую фотостабильную флуоресценцию и при последующем связывании с ДНК имеет максимумы поглощения/испускания при ~ 485/520 нм. Для анализа уровня гидроксильного радикала после облучения в присутствии особочистого люминола натрия был использован дигидроэтидиум (4 μM). Клетки были высеяны в 96-луночные культуральные планшеты в плотности 20 тыс.кл./см2. Плотность посева клеток MNNG составляла 15 тыс. кл/см2. После культивирования в течении 14 часов среде ДМЕМ/F12 (1:1) с 10% добавлением фетальной бычьей сыворотки (FBS) при температуре 37°С, 95%-ой влажности в атмосфере с содержанием 5% СО2 вносили различные концентрации люминола Na. Через 3 часа инкубации клетки окрашивали зондами CellRox и dihydroethdium. После окрашивания в течение 30 мин, добавляли культуральную среду без фенолового красного и облучали клетки рентгеновским излучением с дозой 15 Гр. Регистрировали флуоресценцию на планшетном ридере H1 Synergy Biotek (USA) в течение 20 часов.
Анализ уровня антиоксидантов
Были высеяны стволовые клетки, полученные из пульпы зуба человека (DPSc) в 96-луночные культуральные планшеты в плотности 2*104 кл/см2. Плотность посева клеток MNNG составляла 15 тыс. кл/см2. После культивирования в течении 14 часов среде ДМЕМ/F12 (1:1) с 10% добавлением фетальной бычьей сыворотки (FBS) при температуре 37°С, 95%-ой влажности в атмосфере с содержанием СО2 5% вносили разные концентрации люминола Na. Через 3 часа инкубации клетки окрашивали ThiolTracker (оценка уровня восстановленного глутатиона). После окрашивания в течение 30 мин, добавляли культуральную среду без фенолового красного и облучали клетки рентгеновским излучением с дозой 15 Gy. Регистрировали флуоресценцию на планшетном ридере H1 Synergy Biotek (USA) в течение 20 часов.
МТТ тест
Определение активности метаболической активности клеточных культур проводили методом МТТ теста, принцип которого основан на восстановлении клеточными дегидрогеназами бесцветной водорастворимой соли тетразолия (бромид 3-[4,5-диметилтиазол-2-ил]-2,5-дифенилтетразолия) до нерастворимых кристаллов формазана. Клетки высевали в 96-луночные планшеты и культивировали в атмосфере, содержащей 5% СО2, при 37°С. Через шесть часов после посева среду заменяли средой, содержащей различные концентрации люминола натрия (от 0.1 до 2 мМ). Через 24, 48 и 72 часа после добавления микрокапсул определяли жизнеспособность.
Тест жив-мертв
Оценку жизнеспособности клеток, культивируемых в присутствии особо чистого люминола натрия, проводили на микроскопе Carl Zeiss Axiovert 200. Для анализа использовали набор L-7007 LIVE/DEAD BaeLight Bacterial Viability Kit (Invitrogen), который включает флуоресцентный краситель SYTO 9 для окрашивания всех клеток (поглощение - 420 нм, испускание - 580 нм) и краситель йодида пропидия (PI), который окрашивает ядра только мертвых клеток (поглощение 488 нм и эмиссия 640 нм). В среду вносили смесь красителей (1 мкг/мл) и затем помещали культуральный планшет в СО2-инкубатор на 15 мин. Микрофотографии были сделаны после промывания клеток фосфатно-солевым буфером.
Анализ двунитевых разрывов ДНК
Клетки высевали с плотностью 2*104 см2, культивировали 16 часов (overnight) и вносили люминол натрия в различных концентрациях (0,25, 0,5 и 1 мМ). Далее клетки культивировались в присутствии синтезированного особо чистого люминола натрия в течение 24 часов и подвергались облучению рентгеновскими лучами в дозе 1,5 Гр. Анализ количества двунитевых разрывов ДНК проводили через 1 и 4 часа после облучения. После облучения клетки дважды промывали фосфатно-солевым буфером (PBS, рН 7,4). Затем клетки фиксировали 4% раствором параформальдегида в PBS в течение 10 минут, пермеабилизировали с использованием 0,3% раствора Triton Х-100 в PBS в течение 5 минут, тщательно промывали PBS, блокировали в 1% BSA в PBS в течение 30 минут при комнатной температуре. Для иммуноокрашивания использовали первичные антитела, моноклональные мышиные γH2AX (ab195188 Recombinant, Anti-gamma H2A.X (фосфо S139), (Alexa Fluor® 488), Abcam). Получение изображений очагов репарации DSB проводилось с использованием инвертированной микроскопии Zeiss Axiovert Observer 200М (Carl Zeiss Microscopy, Йена, Германия) с использованием объектива 63х. Анализ клеток, окрашенных γH2AX, проводили с помощью подключаемого модуля FindFoci ImageJ для автоматического распознавания очагов. Для каждой экспериментальной группы анализировалось не менее 20 полей зрения.
Анализ выживаемости мышей после облучения рентгеном
Эксперимент по выживаемости животных проводили на аутбредных мышах SHK, полученных из аккредитованного питомника «Столбовая» (Филиал "Столбовая" Федерального государственного бюджетного учреждения науки "Научный центр биомедицинских технологий Федерального медико-биологического агентства"). В эксперименте были следующие группы животных: контрольная группа, которой внутрибрюшинно кололи физ. раствор и не облучали рентгеном; группа, которой внутрибрюшинно кололи физ. раствор и облучали рентгеном в дозе 5,4 Гр; группа, которой внутрибрюшинно кололи ТАМЕРОН (лиофилизат, производства АНО Института инженерной физики) в дозе 300 мг/кг троекратно каждые сутки (3 введения в сумме) и не облучали рентгеном; группа, которой внутрибрюшинно кололи ТАМЕРОН (лиофилизат, производства АНО Института инженерной физики) в дозе 300 мг/кг троекратно каждые сутки (3 введения в сумме) после облучения рентгеном в дозе 5,4 Гр. Далее в течение 30 суток оценивали число выживших животных. В каждой группе было по 25 мышей.
Статистическая обработка экспериментальных данных
Статистический анализ проводился с использованием программы GraphPad Prism 8.0. Все экспериментальные данные были представлены как среднее значение ± стандартное отклонение (SD) и были проверены на наличие статистически значимых различий с использованием однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA). Различия между экспериментальными группами считали статистически значимыми при значении p<0,05.
Источники литературы
1. Васин М.В. Классификация противолучевых средств как отражение современного состояния и перспективы развития радиационной фармакологии // Радиац. биол. Радиоэкол. 2013, 53(5). С. 459-467.
2. Гребенюк А.Н., Гладких В.Д. Современное состояние и перспективны разработки лекарственных средств для профилактики и ранней терапии радиационных поражений // Радиац. биология. Радиоэкология. 2019. 59(2). С. 132-49.
3. Филимонова М.В. и др. Радиозащитное фармакологическое средство. Патент РФ № RU 2733883 C2 (15.04.2020).
4. Котенко К.В. и др. Способ профилактики и лечения острой лучевой болезни в эксперименте. Патент РФ №RU 2551619 C1 (19.05.2014).
5. Плотников Е.В., Третьякова М.С. Радиопротекторное средство. Патент РФ № RU 2737898 C1
6. Абидов М.Т., Хохлов А.П. Иммуномодулирующее средство. Патент РФ № RU 2113222 C1 (30.09.1997).
7. Царьков А.Н., Царькова Е.А. Инновационный препарат «ТАМЕРОН» // Известия Института инженерной физики, 2019. №4(54). С. 111-115.
8. Царьков А.Н., Краснова Ю.В., Царькова Е.А. Технология производства иммунотропного инновационного препарата «ТАМЕРОН» // Известия Института инженерной физики, 2020. №2(56). С. 82-86.
9. Мрикаев Б.М. Разработка физико-химических, клеточных и молекулярных моделей изучения эффектов нового отечественного иммуномодулятора «Галавит» (Экспериментальное исследование): дисс. канд. мед. наук. М., 2005. 138 с.
10. Вольский B.C. и др. Способ получения лиофилизата аминодигидрофталазиндион натрия - лекарственного препарата "Тамерон". Патент РФ №2744858 (28.04.2020).
11. Scofield V.L., Yan M., Kuang X., Kim S.J., Wong P.K. The drug monosodium luminol (GVT) preserves crypt-villus epithelial organization and allows survival of intestinal T cells in mice infected with the ts1 retrovirus // Immunol Lett, 2009. 122(2). P. 150-158.
12. Barni F., Lewis S.W., Berti A., Miskelly G.M., Lago G. Forensic application of the luminol reaction as a presumptive test for latent blood detection // Talanta, 2007. 72(3). P. 896-913.
13. Khan P., Idrees D., Moxley M.A., Corbett J.A., Ahmad F., von Figura G., Sly W.S., Waheed A., Hassan M.I. Luminol-based chemiluminescent signals: clinical and non-clinical application and future uses // Appl Biochem Biotechnol., 2014. 173(2). P. 333-55.
14. Ермаков A.M., Царькова Е.А. К вопросу об антиоксидантной активности препарата «ТАМЕРОН» // Известия Института инженерной физики. 2020. №3 (57). С. 103-106.
15. Предводителев Д.А., Абидов М.Т. Лекарственный препарат (варианты). Патент РФ №RU 2302863 C2 (20.11.2001).
16. Ермаков A.M., Царькова Е.А., Антонова О.Ю., Каменских К.А., Кочеткова О.Ю., Колманович Д.Д. К вопросу о радиопротекторных свойствах препарата Тамерон // Известия Института инженерной физики. 2022. №2 (64). С. 97-100.
17. Dong, S., Lyu, X., Yuan, S., Wang, S., Li, W., Chen, Z., Yu, H., Li, f, Jiang, Q., 2020. Oxidative stress: A critical hint in ionizing radiation induced pyroptosis. Radiation Medicine and Protection 1. P. 179-185.
Claims (1)
- Применение лекарственного препарата Тамерон в качестве радиопротекторного, радиомитигаторного и радиосенсибилизирующего средства.
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2804886C1 RU2804886C1 (ru) | 2023-10-09 |
| RU2804886C9 true RU2804886C9 (ru) | 2023-11-17 |
Family
ID=
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002009681A2 (en) * | 2000-08-02 | 2002-02-07 | Medinkor Zmm Ag | A method for correcting the immune system of live body |
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002009681A2 (en) * | 2000-08-02 | 2002-02-07 | Medinkor Zmm Ag | A method for correcting the immune system of live body |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Интернет-справочник Видаль, "Тамерон", найдено 17.06.2021, ссылка на источник: https://web.archive.org/web/20210617022909/https://www.vidal.ru/drugs/tameron. Интернет-справочник Видаль, "Галавит", сохраненная копия от 16.01.2021, ссылка на источник: https://web.archive.org/web/20210116094929/https://www.vidal.ru/drugs/galavit__44376. Интернет-справочник Видаль, "Галавит", сохраненная копия от 19.06.2021, ссылка на источник: https://web.archive.org/web/20210619071119/https://www.vidal.ru/drugs/galavit__44378. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4690918A (en) | Use of trichostatin compounds for treating tumor cells | |
| Oršolić et al. | Antitumor, hematostimulative and radioprotective action of water-soluble derivative of propolis (WSDP) | |
| Lu et al. | Photosynthetic Oxygenation‐Augmented Sonodynamic Nanotherapy of Hypoxic Tumors | |
| Khamseekaew et al. | Effects of iron overload, an iron chelator and a T-Type calcium channel blocker on cardiac mitochondrial biogenesis and mitochondrial dynamics in thalassemic mice | |
| CN109803664A (zh) | 用于改善细胞、组织和器官的活力和功能的试剂、组合物和方法 | |
| CN106109455A (zh) | 以5‑氨基乙酰丙酸或其衍生物作为有效成分的抗疟药 | |
| MXPA03008925A (es) | Fotosintetizadores y metodo para la produccion de los mismos. | |
| Ding et al. | Ozone pretreatment alleviates ischemiareperfusion injury-induced myocardial ferroptosis by activating the Nrf2/Slc7a11/Gpx4 axis | |
| Liu et al. | Sestrin2 is an endogenous antioxidant that improves contractile function in the heart during exposure to ischemia and reperfusion stress | |
| US20210145797A1 (en) | Compositions for treating skin | |
| Ali et al. | Myeloperoxidase exerts anti-tumor activity in glioma after radiotherapy | |
| RU2804886C9 (ru) | Применение лекарственного препарата Тамерон в качестве радиопротекторного, радиомитигаторного и радиосенсибилизирующего средства | |
| RU2804886C1 (ru) | Радиопротекторное, радиомитигаторное и радиосенсибилизирующее средство на основе натриевой соли аминодигидрофталазиндиона натрия (лекарственного препарата Тамерон) и других солей щелочных и щелочноземельных металлов аминодигидрофталазиндиона | |
| CN112516294A (zh) | 一种氧化铈纳米稳定剂在制备预防过敏性疾病药物中的应用及预防过敏性疾病的药物组合物 | |
| CN117017970A (zh) | 一种缓解氧化应激的药物组合和应用 | |
| JPS60501408A (ja) | 酸化剤ストレス誘導抗生物質に対する動物許容度を増加させる方法及び薬剤 | |
| CN104117064B (zh) | 异硫氰酸酯类化合物与激素类药物的联合应用 | |
| RU2317074C1 (ru) | Ингибитор дифференцировки кроветворных клеток-предшественников | |
| CN114599379A (zh) | 一种用于预防或治疗脓毒症的药物组合物、试剂盒及其应用和治疗方法 | |
| CN106822169B (zh) | 虫草素在制备预防和/或治疗放射损伤的药物中的应用 | |
| RU2407542C2 (ru) | Способ лечения бабезиоза собак | |
| JP2005538098A (ja) | ヘムオキシゲナーゼレベルの上昇を必要とする治療上の処置におけるレインの使用 | |
| CN105969725B (zh) | 枸杞红素的用途 | |
| US20040076618A1 (en) | Placental preparation having antitumor activity | |
| RU2185819C1 (ru) | Средство, обладающее противоопухолевым действием |