RU2317074C1 - Ингибитор дифференцировки кроветворных клеток-предшественников - Google Patents
Ингибитор дифференцировки кроветворных клеток-предшественников Download PDFInfo
- Publication number
- RU2317074C1 RU2317074C1 RU2006108074/15A RU2006108074A RU2317074C1 RU 2317074 C1 RU2317074 C1 RU 2317074C1 RU 2006108074/15 A RU2006108074/15 A RU 2006108074/15A RU 2006108074 A RU2006108074 A RU 2006108074A RU 2317074 C1 RU2317074 C1 RU 2317074C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cells
- symmetric
- phenyl
- mice
- irradiation
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/095—Sulfur, selenium, or tellurium compounds, e.g. thiols
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для лечения людей с заболеваниями, связанными с дифференцировкой кроветворных клеток-предшественников. В качестве ингибитора дифференцировки кроветворных клеток-предшественников используется органическое соединение селена, а именно: 9-фенил-симметричный - октагидроселеноксантен. Данное изобретение обеспечивает повышение эффективности применения облучения и цитостатиков за счет снижения повреждающего действия указанных агентов на процесс кроветворения, тем самым, обеспечивая более эффективную защиту нормальных тканей. 10 табл.
Description
Изобретение относится к области медицины и может быть использовано при лечении людей с заболеваниями, сопровождающимися дифференцировкой кроветворных клеток-предшественников, а также для их профилактики.
Кроветворение представляет собой сложный многостадийный процесс клеточных делений и дифференцировок, в результате которого образуются зрелые, функционально полноценные клетки крови. Система крови представляет собой чрезвычайно динамичную, постоянно обновляющуюся ткань, в норме быстро и точно реагирующую на изменяющиеся запросы организма.
Выделяют 6 основных классов клеток крови, из которых 3 класса включают в себя клетки-предшественницы кроветворения. Класс стволовых клеток состоит из наиболее ранних кроветворных клеток, дающих начало всем клеткам системы крови. Для дифференцировки и пролиферации стволовых клеток необходимо кроветворное микроокружение, состоящее из клеток стромы (макрофагов, фибробластов, эндотелиальных, жировых и ретикулярных клеток), микрососудов и внеклеточного матрикса (фибронектин, гемонектин, ламинин, коллаген и мукополисахариды - сульфат гепарана).
Следующий класс клеток составляют ближайшие потомки стволовой клетки - полипотентные или бипотентные (коммитированные) клетки-предшественницы, дифференцировочный потенциал которых ниже стволовых. Эти клетки образуют колонии в различных средах, поэтому их называют колониеобразующими единицами (КОЕ). Следующий класс клеток составляют унипотентные клетки предшественницы, которые могут дифференцироваться только в направлении определенного ростка.
Известные способы защиты органов кроветворения от цитотоксического действия радиации и химиотерапии включают использование различных препаратов, большинство из которых являются антиоксидантами.
Повышение устойчивости клеток к вредным агентам, вызываемое антиоксидантами обусловлено двумя различными механизмами. Основной из них, как общеизвестно, обусловлен способностью антиоксидантов связывать окислительные радикалы образующихся в клетках, главным образом в момент облучения. Указанный механизм эффективен только в тех случаях, когда антиоксидант присутствует в клетках в момент образования радикалов, например в момент действия ионизирующей радиации или цитостатиков. Эффективность защиты с помощью этого механизма в довольно широких пределах прямо пропорционально содержанию антиоксидантов в клетках. При этом радиопротекторные свойства проявляются при действии излучения и в малых и в больших дозах. Основным недостатком этого механизма действия антиоксидантов при лечении онкологических больных является то, что радиозащитный эффект при их введении в организм проявляется не только в отношении нормальных, но и злокачественно перерожденных клеток, что сильно ограничивает использование антиоксидантов для защиты кроветворных и других клеток организма при противоопухолевой терапии. Радиозащитный эффект антиоксидантов может нивелировать максимально две трети, поражающего действия ионизирующего излучения.
Второй механизм повышения радиоустойчивости описан в патенте РФ №2234918 /А61К 31/375, 2004/ и связан с прооксидантными свойствами антиоксидантов. Он обусловлен изменением биологических свойств клеток, происходящих при введении антиоксидантов, и выражающимся проявлением так называемого адаптивного ответа. Адаптивный ответ возникает при введении только определенных количеств антиоксидантов и проявляется, в основном, после элиминации введенного экзогенного антиоксиданта из клеток. Основное достоинство этого механизма повышения радиоустойчивости заключается в длительности его проявления. Он регистрируется, начиная с 4 часа после введения препарата, и длится в течение 7 и более дней. Основным недостатком этого механизма является то, что он действует в основном при облучении в небольших повреждающих дозах. При этом повышении радиочувствительности не происходит более чем в 1,3-1,5 раза.
В настоящее время исследователи сфокусировали свои усилия на изучении клеток-предшественников у животных, подвергавшихся различным онкогенным или лучевым воздействиям. Полагают, что стволовые и другие ранние клетки-предшественники гемопоэза играют важную роль в процессах злокачественного роста и метастазирования опухолей.
Известно, что регулируют пролиферацию и дифференцировку клеток-предшественниц кроветворения, а также функцию зрелых клеток крови гемопоэтические факторы роста, такие как эритропоэтин и фактор роста - ликвер, которые сейчас используются в клинической практике. Данные факторы являются естественными стимуляторами роста и дифференциации кроветворных клеток и используются при различного рода иммунных нарушениях.
В то же время существенное значение имеют и ингибиторы указанных функций кроветворных клеток. В частности, было показано, что коррекция пролиферации и дифференцировки СКК in vitro с помощью ингибирующего воздействия может создать условия для более эффективной аутотрансплантации гемопоэтических клеток при аутоиммунной патологии.
В качестве ближайшего аналога может быть указан способ дифференциальной защиты нормальных стволовых клеток млекопитающего от воздействия химиотерапии или излучения, заключающийся в назначении защищающей стволовые клетки ингибирующей их пролиферацию композиции, полипептида, выбранного из группы, включающей альфа-глобиновую цепь гемоглобина, бета-глобиновую цепь гемоглобина, гамма-глобиновую цепь гемоглобина, дельта-глобиновую цепь гемоглобина, ипсилон-глобиновую цепь гемоглобина и зета-глобиновую цепь гемоглобина, и (b) фармацевтически приемлемый носитель (RU 2186579 С1, 2002.08.10). Данное решение касается регуляции путем воздействия на пролиферацию стволовых клеток, которые относятся к одному из типов кроветворных клеток-предшественников.
Однако о средствах для лечения состояний, сопровождающихся дифференцировкой, вызывающих временное блокирование дифференцировки кроветворных клеток-предшественников и тем самым обеспечивающих протекцию нормальных тканей, нам не известно.
Задача настоящего изобретения заключается в создании способа временного ингибирования дифференцировки кроветворных клеток-предшественников.
Предложено ингибирование дифференцировки кроветворных клеток-предшественников осуществлять введением в организм больного органического соединения селена, а именно 9-фенил-симметричного-октагидроселеноксантена формулы
В частности, применение 9-фенил-симметричного-октагидроселеноксантена в качестве ингибитора дифференцировки позволяет защитить клетки-предшественники костного мозга от действия радиации в дозе до 1,5 Гр и от действия цитостатиков.
В случае, если дифференцировка клеток-предшественников связана с опухолью, на которую воздействуют радиацией или химиотерапевтическим препаратом, за 5-9, предпочтительно за 7 суток до момента воздействия в организм однократно вводят 9-фенил-симметричный - октагидроселеноксантен, вызывающий блокирование дифференцировки стволовых кроветворных клеток. Введение в организм может быть произведено перорально или инъекционно в предпочтительной дозе от 0,1 до 5 мг на кг массы тела.
В момент применения радиационного воздействия или введения цитостатиков дифференцирующиеся клетки-предшественники находятся на стадии дифференцировки, которая более устойчива к действию цитотоксических агентов.
Биологическая активность обусловлена главным образом не самим селеном, а молекулярным строением соединения в целом. В пользу такого утверждения свидетельствует следующее.
Соединения ксантенового ряда, к которым относится заявляемое вещество, обладают достаточно широким спектром биологических свойств. Причем их активность напрямую связана с химическим строением. Так, некоторые тиоксантены и тиоксантоны обладают высокой активностью в отношении шистоматоз, но замена метальной группы в них на метоксильную или атом хлора приводит к полной утрате их биологической активности / В.Г.Харченко, Т.И.Крупина, А.Ф.Блинохватов. Тиоксантены, гидротиоксантены и их производные. Издательство Саратовского университета, 1979, с.68-71/.
Далее, среди соединений этой группы имеются вещества, обладающие антимикробным, депрессивным и антидепрессивным действием, антигистаминной и жаропонижающей активностью, противоопухолевым действием. Следовательно, химическая природа данных соединений является определяющей.
Отметим, что в соединениях, о которых идет речь, селен отсутствует. Оказалось, что ксантеновые соединения являются хорошим предшественником для создания биологически активных соединений.
Заявленное соединение, относящееся к ксантеновому ряду, помимо всего прочего характеризуется тем, что в него введен селен. Установлено, что данное соединение способно активизировать некоторые системы организма. Однако о заявленных в изобретении свойствах ничего ранее не сообщалось. Разумеется, исключить то, что наблюдаемые эффекты отчасти связаны с селеном нельзя, но в то же время, очевидно, что в данном случае целое больше частей, т.е. мы имеем дело с соединением с новыми свойствами.
9-фенил-симметричный - октагидроселеноксантен может быть получен описанными ранее известными способами, например, по способу согласно RU 2221793, опубл. 2004.01.20.
Для доказательства соответствия изобретения условию применимости выполнены эксперименты на мышах с целью определения чувствительности к различного рода воздействий клеток костного мозга после введения препарата в оптимальных дозах.
Пример 1.
Изучение влияния 9-фенил-симметричный - октагидроселеноксантена на популяцию ранних кроветворных клеток-предшественников при различных повреждающих воздействиях.
Использовали 950 мышей двух линий - (СВАх С 57 В1/6) F1 самок. Облучение проводили на радитерапевтической установке «Луч-1» гамма-лучами 60Со при мощности дозы 0,9 Гр/мин. 9-фенил-симметричный - октагидроселеноксантен вводили мышам-донорам костного мозга per os, в дозе 5,0 мг/кг в 0,2 мл масляного раствора за 1 или 3 или 7 суток до облучения повреждающий дозой 1,5 Гр, через 10-15 мин после облучения извлекали костный мозг, готовили суспензию клеток и вводили летально облученным мышам-реципиентам (8 Гр) той же линии для определения их колониеобразующей активности методом экзогенных селезеночных колоний. Через 9 суток мышей умерщвляли, извлекали селезенки и подсчитывали число колоний.
Таблица 1 Влияние 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена (5 мг/кг), введенного в различные сроки до облучения в дозе 1,5 Гр, на относительное содержание КОЕ-С в костном мозге. |
||||
Облучение 1,5 Гр | Срок введения препарата до облучения, сут | Число мышей | Количество колоний на 105 клеток костного мозга М±m | Р |
- | - | 30 | 10,5±0,6 | |
- | 1 | 30 | 12,5±0,6 | |
- | 3 | 30 | 10,7±0,4 | |
- | 7 | 30 | 11,1±0,7 | |
+ | - | 30 | 3,6±0,3** | |
+ | 1 | 30 | 6,4±0,5 | р<0,001 |
+ | 3 | 30 | 9,1±0,5 | р<0,0001 |
+ | 7 | 30 | 12,7±0,7 | р<0,0001 |
** - достоверность рассчитана по отношению к данной группе |
Усредненные результаты трех независимых экспериментов по влиянию 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена на относительное содержание КОЕ-С в костном мозге, представленные в таблице 1, свидетельствуют, что его введение мышам-донорам в дозе 5,0 мг/кг за 1 или 3 или 7 суток перед облучением в дозе 1,5 Гр приводит к тому, что выживаемость клеток данного компартмента значительно превышает таковую в облученном контроле. Эффект сохраняется в течение 7 суток. При этом отмечена выраженная зависимость от сроков введения препарата: минимальное действие (увеличение относительного содержания КОЕ-С в 2 раза по сравнению с облученным контролем) наблюдается при применении его за 1 сутки до облучения, а максимальный - за 7 суток, когда повреждающее действие ионизирующей радиации на популяцию КОЕ-С ослабляется почти в три раза. Следует заметить, что препарат, введенный в дозе 5 мг/кг в различные сроки до взятия костного мозга, сам по себе практически не влияет на относительное содержание КОЕ-С в костном мозге мышей-доноров.
Для того чтобы оценить возможность 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена восстанавливать популяцию стволовых кроветворных клеток при большей степени их повреждения, изучено его влияние на относительное содержание КОЕ-С в костном мозге при облучении в различных повреждающих дозах.
В экспериментах использовали 300 мышей линии (СВА × С57В1/6) F1 самок. Облучение проводили на радиотерапевтической установке «Луч-1» гамма-лучами 60Со при мощности дозы 0,9 Гр/мин. Препарат вводили мышам-донорам костного мозга per os, в дозе 5,0 мг/кг в 0,2 мл масляного раствора за 7 суток до облучения повреждающими дозами: 1,5, 2,0, 3,0 или 5,0 Гр. Через 10-15 мин после облучения извлекали костный мозг, готовили суспензию клеток и вводили летально облученным мышам-реципиентам (8 Гр) той же линии для определения их колониеобразующей активности методом экзогенных селезеночных колоний. Через 9 суток мышей умерщвляли, извлекали селезенки и подсчитывали число колоний.
Усредненные результаты трех независимых экспериментов представлены в таблице 2 и свидетельствуют, что через 7 суток после введения 9-фенил-симметричного - октагид-роселеноксантена мышам-донорам в дозе 5,0 мг/кг наблюдается статистически значимое повышение устойчивости КОЕ-С к воздействию ионизирующей радиации в дозах 1,5, 2,0, 3,0 и 5,0 Гр. Выживаемость клеток при всех повреждающих дозах, кроме 1,5 Гр, вдвое превышают значения облученного контроля, а при облучении 1,5 Гр - выживаемость КОЕ-С практически не отличается от значения интактного контроля.
Проведена оценка способности 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена восстанавливать популяцию КОЕ-С в костном мозге после действия цитостатиков.
В экспериментах использовали 150 мышей линии (СВА × C57B1/6)F1 самок. Облучение реципиентов проводили на радиотерапевтической установке «Луч-1» гамма-лучами 60Со при мощности дозы 0,9 Гр/мин. 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантен вводили мышам-донорам костного мозга per os, в дозе 5,0 мг/кг в 0,2 мл масляного раствора за 7 суток до инъекции цисплатина (цисплатин-лэнс, «ЛЭНС-ФАРМ» Москва) в дозах: 2,5, 5,0 и 7,5 мкг/кг. Через 24 часа после цисплатина извлекали костный мозг, готовили суспензию клеток и вводили летально облученным мышам-реципиентам (8 Гр) той же линии для определения их колониеобразующей активности методом экзогенных селезеночных колоний. Через 9 суток мышей умерщвляли, извлекали селезенки и подсчитывали число колоний.
Результаты экспериментов представлены в таблице 3 и свидетельствуют, что через 7 суток после введения 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена мышам-донорам в дозе 5,0 мг/кг наблюдается статистически значимое повышение устойчивости КОЕ-С к воздействию цисплатина в дозах 2,5, 5,0 и 7,5 мкг/кг. Выживаемость клеток при всех повреждающих дозах статистически значимо превышают значения цисплатинового контроля, а при дозе препарата 2,5 мкг/мышь выживаемость КОЕ-С практически не отличается от значения интактного контроля.
Таблица 2 Влияние 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена, введенного мышам за 7 суток до облучения в интервале доз, на относительное содержание КОЕ-С в костном мозге. |
||||
Доза облучения Гр | Препарат 5 мг/кг | Число мышей | Количество колоний на 105 клеток костного мозга М±m | Р |
- | - | 30 | 10,3±0,7 | |
1,5 | - | 30 | 3,5±0,2 | р<0,00001 |
1,5 | + | 30 | 9,2±0,2 | |
2,0 | - | 30 | 2,7±0,1 | р=0,016 |
2,0 | + | 30 | 3,6±0,3 | |
3,0 | - | 30 | 1,4±0,1 | р=0,009 |
3,0 | + | 30 | 2,1±0,1 | |
5,0 | - | 30 | 0,3±0,05 | р=0,01 |
5,0 | + | 30 | 0,6±0,06 |
Таблица 3 Влияние 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена, введенного мышам за 7 суток до инъекции цисплатина в интервале доз, на относительное содержание КОЕ-С в костном мозге. |
||||
Доза цисплатина мг/кг | Препарат 5 мг/кг | Число мышей | Количество колоний на 105 клеток костного мозга M±m | P |
- | - | 24 | 10,4±0,5 | |
- | + | 24 | 10,5±0,5 | |
2,5 | - | 24 | 7,1±0,7 | |
2,5 | + | 24 | 9,9±0,6 | p=0,007 |
5,0 | - | 24 | 5,3±0,5 | |
5,0 | + | 24 | 8,1±0,3 | p=0,0004 |
7,5 | - | 24 | 4,1±0,3 | |
7,5 | + | 24 | 5,6±0,4 | p=0,02 |
Пример 2
Модифицирующее действие заявленного ингибитора при облучении животного организма неионизирующим излучением.
Исследовали защитные свойства 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена при облучении животного организма неионизирующим излучением на модели изучения образования микроядер в полихроматофильных эритроцитах периферической крови мышей линии С57 В1. Микроядра в интерфазном ядре, как правило, представляет собой ацентрические фрагменты хромосом. Животных подвергали воздействию электромагнитного излучения (ЭМИ) миллиметрового диапазона волн, частота 39,5 ГГц, длина 7,5 мм в течение 1 часа. Плотность потока энергии (ППЭ) составляла около 3 мкВт/см2, что в 300 раз меньше уровней, при которых возможен перегрев биообъекта из-за поглощения энергии поля.
Одной из групп мышей (n=5) за 7 суток до облучения вводили 9-фенил-симметричный - октагидроселеноксантен из расчета 5 мг/кг массы тела перорально в 0,2 мл подсолнечного масла. Второй группе мышей (n=5) за 7 суток до облучения вводили исключительно 0,2 мл подсолнечное масло. В качестве контроля использовали интактных мышей. Через сутки после облучения животных забивали и определяли количество микроядер в полихроматофильных эритроцитах периферической крови. Из каждого образца проанализировано по 150 тыс. полихроматофильных эритроцитов.
Результаты исследования представлены в таблице 4.
Таблица 4 Изменение частоты встречаемости полихроматофильных эритроцитов в периферической крови с микроядрами у мышей получивших и не получивших 9-фенил-симметричный - октагидроселеноксантен, подвергнутые облучению ЭМИ. |
|
Воздействие | Частота микроядерных полихроматофильных эритроцитов × 103 |
Интактные | 2,8±0,48 |
Облучение | 12,2±1,28 |
Ингибитор + облучение | 6,0±2,10 |
Таким образом, ингибитор дифференцировки клеток обуславливает не только радио-протекторное действие, но и защиту от любого другого рода облучения.
Пример 3.
Исследование влияния 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена на относительное количество низкодифференцированных предшественников клеток (CD34+) крови нормальных мышей, а также на состояние периферической крови у мышей на 2-ые сутки после облучения в дозе 1,5 Гр.
Проведено 4 серии экспериментов. Работа выполнена на 170 мышах гибридах (СВА × C57B1/6)F1 самках. При исследовании на нормальных мышах 9-фенил-симметричный - октагидроселеноксантен вводили per os в дозе 5 мг/кг за 7 суток до взятия органов. В экспериментах на облученных мышах препарат вводили за 7 суток до облучения в дозе 1,5 Гр. Органы брали через 2 суток после облучения. Анализ периферической крови проведен на гемоцитометре. Аликвоты образцов периферической крови и костного мозга были исследованы с помощью проточной цитометрии на содержание низкодифференцированных CD34+ предшественников клеток крови мышей. Для этого доля CD34+клеток и плотность этого поверхностного маркера определены одновременно в периферической крови и костном мозге. В каждом образце крови проанализировано 80 тыс. клеток, в костном мозге - 40 тыс. В таблицах представлены усредненные результаты 4-х опытов.
Оценивали относительное количество CD34+ клеток и плотность этого поверхностного маркера в периферической крови и костном мозге. Введение препарата не влияет на относительное количество низкодифференцированных клеток стволового типа (CD34+). Однако к 7-м суткам после введения препарата увеличивается плотность этого маркера на поверхности клеток (р<0,05), свидетельствуя о перераспределении клеток по степени дифференцировки за счет увеличения доли наименее дифференцированных клеток. Аналогичная картина наблюдается и в периферической крови: по данным 4-х опытов доля CD34+ клеток в крови не меняется после введения 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена, но на 7-е сутки более дифференцированных предшественников становится меньше (Таблица 5).
Таблица 5 Влияние 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена на относительное содержание и интенсивность флюоресценции CD34+ клеток костного мозга и периферической крови мышей |
||||
Воздействие | Периферическая кровь | Костный мозг | ||
CD34+ клетки, % | Средняя интенсивность флюоресценции CD34+ клеток, отн.ед. | CD34+ клетки, % | Средняя интенсивность флюоресценции CD34+ клеток, отн.ед. | |
Контроль | 0,25±0,04 | 199,1±25,2 | 0,85±0,1 | 105,8±7,2 |
Введение препарата за 7 суток до анализа | 0,29±0,05 | 518,0±41,0 р=0,0000001 | 0,88±0,3 | 190,0±10,8 р=0,00001 |
Анализ качественных и количественных показателей клеточного состава периферической крови и костного мозга у облученных животных позволяет предположить, что 9-фенил-симметричный-октагидроселеноксантен вызывает блок дифференцировки кроветворных клеток-предшественников гранулоцитарно-макрофагального ростка, т.е. через 7 суток после введения препарата, к моменту облучения, в костном мозге накапливаются низкодифференцированные предшественники, более устойчивые к повреждающему действию радиации. Вероятно, облучение и последующее опустошение кроветворных органов отменяют блок дифференцировки, что приводит к увеличению численности в периферической крови уже на 2-е сутки после облучения лейкоцитов, гранулоцитов и моноцитов.
Анализ качественных и количественных показателей клеточного состава периферической крови и костного мозга свидетельствует, что 9-фенил-симметричный-октагидроселеноксантен вызывает блок дифференцировки кроветворных клеток-предшественников, т.е. через 7 суток после введения препарата, к моменту облучения, в костном мозге происходит перераспределение стволовых клеток в пуле по степени дифференцировки: а именно, увеличивается количество низкодифференцированных предшественников, более устойчивых к повреждающему действию радиации. Вероятно, облучение и последующее опустошение кроветворных органов отменяет блок дифференцировки, что приводит к увеличению численности лейкоцитов, гранулоцитов и моноцитов в периферической крови уже на вторые сут после облучения (Таблица 6).
Таблица 6 Влияние 9-фенил-симметричного-октагидроселеноксантена, введенного за 7 суток до облучения в дозе 1,5 Гр, на численность клеток в периферической крови мышей |
||||||
Облучение 1,5 Гр | Препарат 5 мг, кг | Лейкоциты | Гранулоциты | Моноциты | Лимфоциты | Тромбоц. |
- | - | 5736±353 | 1478±275 | 1321±141 | 3092±354 | 635±20 |
+ | - | 1380±79* | 344±25* | 338±24* | 711±51 | 631±34* |
+ | + | 1875±200 р=0.025 | 486±54 р=0.02 | 460±49 р=0.02 | 796±146 | 675±27 р=0.009 |
* - стастическая достоверность рассчитана по отношению к этой группе |
Накопление низкодифференцированных предшественников в костном мозге под действием 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена через 7 суток после введения препарата должно приводить к увеличению численности КОЕ-12, которые формируют селезеночные колонии на 12-е сутки роста. КОЕ-12 - низкодифференцированные, полипотентные предшественники, которые способны дать начало всем рядам кроветворения.
В экспериментах использовали 120 мышей линии (СВА × C57B1/6)F1 самок. Облучение проводили на радиотерапевтической установке «Луч-1» гамма-лучами 60Со при мощности дозы 0,9 Гр/мин. 9-фенил-симметричный - октагидроселеноксантен мыши-доноры получали per os, в дозе 5,0 мг/кг в 0,2 мл масляного раствора за 7 суток до извлечения костного мозга. Суспензию клеток вводили летально облученным мышам-реципиентам (8 Гр) той же линии для определения их колониеобразующей активности методом экзогенных селезеночных колоний. Через 8 или 12 суток мышей умерщвляли, извлекали селезенки и подсчитывали число колоний.
Усредненные результаты двух независимых экспериментов, представленные в таблице 7, свидетельствуют, что через 7 суток после введения 9-фенид-симметричного-октагидроселеноксантена мышам-донорам в дозе 5,0 мг/кг в костном мозге последних происходит увеличение относительного количества низкодифференцированных КОЕ-С-12 при отсутствии влияния препарата на число более коммитированных КОЕ-С-8. Полученные данные свидетельствуют о накоплении в костном мозге на 7-ые сутки после действия 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена низкодифференцированных клеток-предшественников кроветворения.
Таблица 7 Влияние 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена, введенного мышам за 7 суток до извлечения костного мозга на формирование селезеночных колоний КОЕ-С-8 и КОЕ-С-12 |
|||
Препарат 5 мг/кг | Число мышей | Количество колоний на 105 клеток костного мозга на 8 сут (КОЕ-С-8) М±m | Количество колоний на 105 клеток костного мозга на 12 сут (КОЕ-С-12) М±m |
- | 20 | 11,0±0,8 | 9,7±0,7 |
+ | 20 | 11,3±0,4 | 13,9±0,2 р=0,00004 |
Пример 4.
В следующей серии экспериментов исследовано влияние 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена на опухолевые клетки при воздействии стандартного химиотерапевтического препарата - платидиама.
Результаты проведенного опыта приведены в таблице 8.
Таблица 8 Результаты опыта по изучению модифицирующего действия ингибитора на лечебное действие платидиама на рост и метастазирование опухоли LCC у мышей С57 В1/6. |
|||
Группа | Масса опухоли г, М±m | Объем опухоли см3, М±m | Среднее число метастазов в легких, М±m |
1. Контроль | 6,4±0,5 | 6,2±0,7 | 8,8±0,6 |
2. Платидиам | 4,5±0,5* | 4,6±0,6 | 6,2±0,7* |
3. Ингибитор + Платидиам | 5,3±0,3 | 5,1±0,4 | 5,4±0,5* |
* - р<0,05 по отношению к контролю |
Как можно видеть из данной таблицы, воздействие платидиама оказывает относительно слабое, но достоверное противоопухолевое действие по двум показателям - масса опухоли и число метастазов в легких. Введение мышам за 30 минут до химиопрепарата 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена не оказало существенного влияния на рост опухоли и на число метастазов в легких. Таким образом, в условиях данного эксперимента препарат 9-фенил-симметричный - октагидроселеноксантен не влияет на рост и метастазирование опухоли, подвергнутой лечебному воздействию стандартного химиопрепарата - платидиама. Так как ингибитор в примененной концентрации способен снижать вредное действие препаратов цис-платины на некоторые нормальные ткани, то это может служить обоснованием для применения его в качестве избирательного протектора нормальных тканей при проведении химиотерапии злокачественных новообразований.
Усредненные результаты 3-х экспериментов по изучению влияния 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена в комплексе с радиотерапией на рост карциномы Льюис представлены в таблицах 9 и 10. Оказалось, что, как и в предыдущих экспериментах, ингибитор практически не влияет на рост опухоли, хотя значения ИР для этой группы и несколько меньше контрольных, но различия статистически не значимы. Тот же вывод можно сделать и в результате анализа совместного действия на опухоль 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена и облучения. В этом случае значения ИР для групп «облучение» и «9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена + облучение» во все сроки наблюдения статистически значимо не отличаются.
На 21-е сутки роста опухоли у выживших экспериментальных мышей было определено число метастазов в легких. Как видно из данных, представленных в таблице 10, 9-фенил-симметричный - октагидроселеноксантен не оказывает значимого влияния на процесс метастазирования как у необлученных, так и подвергнутых лучевому воздействию мышей - опухоленосителей.
И так, сочетанием действий 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена и локального облучения препарат не защищает опухолевые клетки от воздействия радиации и статистически значимо не усиливает метастазирование опухоли.
Таблица 9 Значения индекса роста (ИР) карциномы Льюиса после введения ингибитора и локального облучения. |
||||||
Группа | Значения ИР | |||||
0 сут | 2 сут | 4 сут | 7 сут | 9 сут | 11 сут | |
Контроль | 1 | 1,8±0,05 | 2,2±0,1 | 4,3±0,4 | 5,8±0,4 | 7,5±0,6 |
Ингибитор | 1 | 1,6±0,1 | 1,98±0,13 | 3,6±0,5 | 5,6±0,3 | 6,4±0,7 |
Облучение | 1 | 1,6±0,1 | 1,3±0,2 | 1,4±0,4 | 2,3±0,7 | 3,6±1,0 |
Ингибитор + облучение | 1 | 1,4±0,1 | 1,37±0,2 | 1,8±0,3 | 3,1±0,6 | 4,2±0,7 |
Таблица 10 Влияние 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена и локального облучения на число метастазов в легких. |
||
Препарат | Число мышей | Среднее кол-во метастазов |
Контроль | 7 | 30,7±4,6 |
Ингибитор | 10 | 33,5±2,5 |
Облучение | 9 | 11,7±1,9 |
Ингибитор + облучение | 9 | 13,4±1,8 |
Применение изобретения позволит повысить эффективность применения облучения и цитостатиков за счет снижения повреждающего действия указанных агентов на процесс кроветворения, посредством введения 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена. Введение 9-фенил-симметричного - октагидроселеноксантена не повышает резистентность опухоли к облучению.
Claims (1)
Priority Applications (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2006108074/15A RU2317074C1 (ru) | 2006-03-16 | 2006-03-16 | Ингибитор дифференцировки кроветворных клеток-предшественников |
PCT/RU2007/000118 WO2007105990A1 (fr) | 2006-03-16 | 2007-03-13 | Inhibiteur de la différenciation des précurseurs hématopoïétiques |
US12/210,416 US20090131391A1 (en) | 2006-03-16 | 2008-09-15 | Inhibitor for differentiation of hematopoietic precursor cells |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2006108074/15A RU2317074C1 (ru) | 2006-03-16 | 2006-03-16 | Ингибитор дифференцировки кроветворных клеток-предшественников |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2006108074A RU2006108074A (ru) | 2007-09-27 |
RU2317074C1 true RU2317074C1 (ru) | 2008-02-20 |
Family
ID=38509735
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2006108074/15A RU2317074C1 (ru) | 2006-03-16 | 2006-03-16 | Ингибитор дифференцировки кроветворных клеток-предшественников |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20090131391A1 (ru) |
RU (1) | RU2317074C1 (ru) |
WO (1) | WO2007105990A1 (ru) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2451680C1 (ru) * | 2011-02-21 | 2012-05-27 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Исследовательская Компания "Медбиофарм" | Клатратный комплекс циклодекстрина или арабиногалактана с 9-фенил-симм-октагидроселеноксантеном, способ его получения (варианты), фармацевтическая композиция и лекарственное средство |
WO2017058063A1 (ru) * | 2015-10-02 | 2017-04-06 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Л-Пдск" | Средство, обладающее одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей |
WO2019004877A1 (ru) * | 2017-06-28 | 2019-01-03 | Рахимджан Ахметджанович РОЗИЕВ | Средство для лечения женского бесплодия и бесплодия самок животных |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5271925A (en) * | 1990-03-09 | 1993-12-21 | Benjamin Sredni | Method for protecting against the effects of radiation which is based on the administration of a selenium or tellurium based compound |
US5939391A (en) * | 1993-03-31 | 1999-08-17 | Pro-Neuron, Inc. | Hemoglobin alpha chain peptide fragments useful for inhibiting stem cell proliferation |
RU2234918C2 (ru) * | 2002-08-26 | 2004-08-27 | Общество с ограниченной ответственностью НАУЧНО-ПРОИЗВОДСТВЕННОЕ ПРЕДПРИЯТИЕ "МЕДБИОФАРМ" | Способ профилактики вредного воздействия окружающей среды |
-
2006
- 2006-03-16 RU RU2006108074/15A patent/RU2317074C1/ru not_active IP Right Cessation
-
2007
- 2007-03-13 WO PCT/RU2007/000118 patent/WO2007105990A1/ru active Application Filing
-
2008
- 2008-09-15 US US12/210,416 patent/US20090131391A1/en not_active Abandoned
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
. * |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2451680C1 (ru) * | 2011-02-21 | 2012-05-27 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Исследовательская Компания "Медбиофарм" | Клатратный комплекс циклодекстрина или арабиногалактана с 9-фенил-симм-октагидроселеноксантеном, способ его получения (варианты), фармацевтическая композиция и лекарственное средство |
WO2012115538A1 (ru) * | 2011-02-21 | 2012-08-30 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Исследовательская Компания "Медбиофарм" | Клатратный комплекс циклодекстрина или арабиногалактана с 9-фенил-симм-октагидроселеноксантеном |
EA024605B1 (ru) * | 2011-02-21 | 2016-10-31 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Л-Пдск" | Клатратный комплекс циклодекстрина или арабиногалактана с 9-фенил-симм-октагидроселеноксантеном, способ его получения (варианты), фармацевтическая композиция и лекарственное средство |
WO2017058063A1 (ru) * | 2015-10-02 | 2017-04-06 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Л-Пдск" | Средство, обладающее одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей |
RU2646497C2 (ru) * | 2015-10-02 | 2018-03-05 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Л-Пдск" | Средство, обладающее одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей |
WO2019004877A1 (ru) * | 2017-06-28 | 2019-01-03 | Рахимджан Ахметджанович РОЗИЕВ | Средство для лечения женского бесплодия и бесплодия самок животных |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2006108074A (ru) | 2007-09-27 |
US20090131391A1 (en) | 2009-05-21 |
WO2007105990A1 (fr) | 2007-09-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Shen et al. | Combination of melatonin and rapamycin for head and neck cancer therapy: Suppression of AKT/mTOR pathway activation, and activation of mitophagy and apoptosis via mitochondrial function regulation | |
Singh et al. | A review of radiation countermeasures focusing on injury-specific medicinals and regulatory approval status: part III. Countermeasures under early stages of development along with ‘standard of care’medicinal and procedures not requiring regulatory approval for use | |
EP1100589B1 (en) | Use of propionyl l-carnitine and acetyl l-carnitine in the preparation of medicaments with anticancer activity | |
Maestroni et al. | Hematopoietic rescue via T-cell-dependent, endogenous granulocyte-macrophage colony-stimulating factor induced by the pineal neurohormone melatonin in tumor-bearing mice | |
Oršolić et al. | Antitumor, hematostimulative and radioprotective action of water-soluble derivative of propolis (WSDP) | |
Eastgate et al. | A role for manganese superoxide dismutase in radioprotection of hematopoietic stem cells by interleukin-1 | |
RU2317074C1 (ru) | Ингибитор дифференцировки кроветворных клеток-предшественников | |
EP2922573B1 (en) | Pharmaceutical composition used for reducing damage caused by free radicals | |
Yi et al. | The protective effects of 1, 2-propanediol against radiation-induced hematopoietic injury in mice | |
Cherdyntseva et al. | Effect of tocopherol-monoglucoside (TMG), a water-soluble glycosylated derivate of vitamin E, on hematopoietic recovery in irradiated mice | |
JP2011506467A (ja) | 抗悪性腫瘍性熱ショックアポトーシス活性化因子(hsaa)と組み合わせられたアルファチモシンペプチドによる黒色腫の処置の方法 | |
CN110934879A (zh) | 靶向组织微环境中衰老细胞的抗衰老药物d/a及其应用 | |
RU2430932C1 (ru) | Сополимеры 2-метил-5-винилпиридина и n-винилпирролидона, активирующие продуцирование интерлейкина-1, и их применение в качестве противораковых агентов | |
JP2005532269A (ja) | 細胞分化の誘発方法 | |
RU2642957C2 (ru) | Липосома, фармацевтическая композиция и лекарственное средство для лечения местных радиационных поражений кожи, применение липосом и способ для лечения местных радиационных поражений кожи | |
CN111249274B (zh) | 银杏内酯b在制备胶质瘤细胞活性抑制剂中的应用 | |
EA016660B1 (ru) | Способ лечения меланомы | |
TWI722492B (zh) | 含蓮蓬萃取物之組合物及其用於治療頭頸癌症之用途 | |
Herman et al. | Addition of mitomycin C to cis-diamminedichloroplatinum (II)/hyperthermia/radiation therapy in the FSaIIC fibrosarcoma | |
RU2782931C2 (ru) | Производные индол-3-карбоновой кислоты, обладающие противоопухолевой активностью | |
CN114983991B (zh) | 一种兼具抗炎及抗氧化作用的药物 | |
RU2725135C1 (ru) | Гемопротекторное средство | |
Baymatov et al. | Identification of iron by methods of cytochemical analysis in the spleen tissues during experimental radiation pathology | |
Orsolic et al. | Radioprotective effect of a water-soluble derivative of propolis in mice | |
Sacks | Chang et al. |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20110722 |
|
QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE Effective date: 20131025 |
|
PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20151030 |
|
QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE Effective date: 20170918 |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200317 |