TWI722492B

TWI722492B - 含蓮蓬萃取物之組合物及其用於治療頭頸癌症之用途

Info

Publication number: TWI722492B
Application number: TW108125338A
Authority: TW
Inventors: 陳璟賢; 林慧萱
Original assignee: 中山醫學大學
Priority date: 2018-07-17
Filing date: 2019-07-17
Publication date: 2021-03-21
Also published as: TW202005664A

Abstract

本發明係提供一種含蓮蓬萃取物之組合物及其用於治療頭頸癌症之用途，其將自天然植物之蓮蓬萃取物與現有癌症藥物組合，而能夠抑制癌細胞生長，並且降低癌細胞復發之可能性，以有效達到治療或改善頭頸癌症之功效。

Description

含蓮蓬萃取物之組合物及其用於治療頭頸癌症之用途

本發明係有關於一種醫藥組合物及其用途，特別係指一種含蓮蓬萃取物之組合物及其用於治療頭頸癌症之用途。

按，根據行政院衛生福利部之統計，口腔癌係為2016年十大癌症死亡原因中之第五位，佔12.5%，口腔癌係為一種頭頸部癌症。其病理表現係多以鱗狀上皮細胞癌化為主，並且，其範圍係涵蓋顏面、鼻咽腔、鼻腔、口腔、咽喉及頸部。由於頭頸部癌症於臨床上初期表現較容易與一般感冒混淆，又沒有較為普及之篩檢方法，所以大多時候皆為晚期發現，使得治療上之難度增加。

目前頭頸部癌臨床上治療方法主要分為以下幾種：手術治療、放射線治療、化學治療、標靶治療。手術治療雖然可以直接切除病灶，但是常會造成語音或聽力喪失、咽喉腫脹呼吸困難等嚴重副作用，因而為避免手術對患者造成難以回復之副作用，目前係以放射線治療結合化學療法作為主要治療手段，惟，放射線治療仍會造成吞嚥困難、食慾下降、聽力損傷等副作用；化學治療係會造成食慾下降、腹瀉、感染風險等副作用。因此，對於罹患頭頸部癌症之患者來說，現有臨床治療手段係會使其面臨副作用之高風險，導致患者治療意願及求生意志下降。

本發明之主要目的係在於提供一種含蓮蓬萃取物之組合物及其用於治療癌症之用途，其將自天然植物之蓮蓬萃取物與現有癌症藥物組合，而能夠抑制癌細胞生長，並且降低癌細胞復發之可能性，以有效達到治療或改善癌症之功效。

本發明之另一目的係在於提供一種含蓮蓬萃取物之組合物及其用於治療癌症之用途，其係能夠藉由一天然植物提昇癌症藥物之治療效果，而能於減少癌症藥物之劑量之同時，亦能夠達到相同或更佳之治療效果，以降低癌症藥物對於人體造成之副作用或不適感。

緣是，為能達成上述目的，本發明係揭露一種頭頸癌症輔療組合物，係包含有一有效量之蓮蓬萃取物、一如順鉑之化療藥物及一藥學上能夠接受之載體，其中：

該蓮蓬萃取物之濃度至少為20μg/ml，而該蓮蓬萃取物係以下列步驟所製得：將蓮蓬以水作為萃取溶劑，於高溫下進行萃取，經冷卻後，過濾出一蓮蓬液，移除水分後得到一蓮蓬膏，再於高溫下乾燥。

更進一步來說，藉由共同投予一有效量之癌症輔療物及一如順鉑之化療藥物至一罹患癌症之個體，係能夠治療或改善頭頸癌，例如口腔癌、鼻咽癌。

再者，由於本發明所揭蓮蓬萃取物係具有增加癌症藥物抑制癌細胞生長及自噬反應，並且，促進癌細胞走向凋亡之能力，因此，於本發明之實施例中係揭露將蓮蓬萃取物用於製備頭頸癌症輔療物、細胞自噬抑制劑或細胞凋亡促進劑之用途，其中，該蓮蓬萃取物之濃度至少為20μg/ml。

具體來說，該蓮蓬萃取物係以下列方式所製得者：將蓮蓬以水作為萃取溶劑，於高溫下進行萃取，經冷卻後，過濾出一蓮蓬液，移除水分後得到一蓮蓬膏，再於高溫下乾燥。

為能增加上述癌症輔療物、細胞自噬抑制劑或細胞凋亡促進劑對於癌症之治療效果，該癌症輔療物、細胞自噬抑制劑或細胞凋亡促進劑係分別更包含有一化療藥物，例如順鉑。

本發明所揭化療藥物係指一種含有金屬之藥物，其係能夠用於治療癌症，例如順鉑。

本發明所揭蓮蓬萃取物，係指將一蓮蓬經萃取、分離、純化所得之混合物；並且，具體來說，本發明所揭蓮蓬萃取物經分析後可知，其成份中幾乎不含有沒食子兒茶素，而含有高量之槲皮素3-O-葡糖苷酸。

本發明所揭藥學上能夠接受之載體，係指任何標準於醫藥產品上所使用之載體，而該載體係依據組合物之型態，得為固態、半固態或液態。舉例來說，載體包含，但不限於，明膠、乳化劑、烴類混合物、水、甘油、生理食鹽水、緩衝生理鹽水、羊毛脂、石蠟、蜂蠟、二甲基硅油、乙醇。

本發明所揭「有效量」，係指欲使一組合物產生所求特定效果所需化合物或活性成份之量，得以其在組合物中所佔重量百分比表示。而該有效量會因為投予途徑而有所不同。一般來說，該有效量係指活性成分或化合物於組合物中之量可佔該組合物重量之約1%至約100%，較佳者係為約30%至約100%。

以下，為能說明本發明及其功效，將茲舉若干實例並搭配圖式做更進一步說明如后。

以下實例中所使用之順鉑（cisplatin, CDDP）為ACROS 公司所製造，貨號: A0364307，純度≥99.9%，分子量300.046 g/mol。而所使用之順鉑溶液係將計算所得之順鉑（mg）溶於適當體積之去離子水中所得者，舉例來說，配置1mM 順鉑溶液，則取0.3mg 順鉑粉末溶於1ml之去離子水中。

以下實例中所使用之細胞係為FaDu細胞（ATCC number : HTB-43），一種人類下咽部鱗狀上皮癌細胞，購自於台灣新竹財團法人食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心。

實例一：製備蓮蓬萃取物

秤取150 g的乾燥蓮蓬並加入6 L的去離子水，100℃煮沸後悶煮3小時，再開鍋蓋煮1小時，冷卻後再進行過濾，將過濾好的蓮蓬汁以減壓濃縮機將90%水分抽出，得到膏狀的產物後再放入真空高溫熱風乾燥機將其乾燥後製成粉狀，此即為本發明所揭蓮蓬萃取物。

更進一步以Waters Symmetry分析管柱（2.1 × 150 mm, 3.5 µm, Waters Corp., Milford, MA, USA）以及C18 管柱（Security-Guard Ultra C18 guard column, 2.1 mm × 2.0 mm, sub-2 µm, Phenomenex, Inc., Torrance, CA, USA），並搭配具有光電二極管陣列探測器之HPLC系統，對本發明所揭蓮蓬萃取物進行HPLC/ESI-MS-MS 分析，分析結果如第二十圖所示。

其中，取本發明所揭蓮蓬萃取物5mg ，溶於1ml、20％甲醇，過濾後，進行HPLC/ESI-MS-MS分析；

分析環境及條件如下：

溶劑A：含有0.1％甲酸的水；溶劑B：含有0.1％甲酸的乙腈；

流速：0.3mL / min；管柱溫度：35℃；5分鐘：5％ B溶劑、15-40分鐘：5-35％B溶劑、15-40分鐘：35-60％B溶劑、40-45分鐘：60-95％B溶劑、最後10分鐘：95％B溶劑；

以光電二極管陣列探測器於210～600nm內掃描，並監測於254、280、325、375nm之吸收光譜。

另以SPE（HLB）處理本發明所揭蓮蓬萃取物後，再以30％甲醇洗脫後進行HPLC/ESI-MS-MS 分析，分析條件及環境如上所述，結果如第二十一圖所示。

將第二十圖至第二十二圖之結果可知，本發明所揭蓮蓬萃取物於滯留時間18～19分鐘時，偵測到含有大量槲皮素3-O-葡糖苷酸，並且幾乎不具有兒茶素。

實例二：細胞培養

將FaDu細胞置於培養盤中，每孔種4.5X10⁵ 顆細胞，培養24小時後，於細胞滿度約7分滿時，分別進行細胞試驗。

而FaDu細胞之培養條件如下：5% 二氧化碳、37°C恆溫細胞培養箱中；培養基為MEM培養基，並且其額外添加10%之胎牛血清、1%盤尼西林、1%丙酮酸鈉、1%MEM-非必需胺基酸。

實例三：細胞試驗（一）

取將不同濃度之蓮蓬萃取物溶液及10μM順鉑，進行組合後用以處理FaDu細胞，將處理過後之FaDu細胞進行培養24小時，而後進行PI染色（1mg/ml），以流式細胞儀計算細胞存活率，結果如第一圖所示。

由第一圖之結果顯示，單獨投予順鉑，或投予濃度為10μg/ml之蓮蓬萃取物溶液及10μM順鉑，係無法使FaDu細胞死亡；投予濃度為20μg/ml之蓮蓬萃取物溶液係能誘發約37％之細胞死亡；而同時投予濃度為20μg/ml之蓮蓬萃取物溶液及10μM順鉑係能夠誘發FaDu細胞死亡，並且，死亡率高於50％。

實例四：細胞試驗（二）

將FaDu細胞分為四組，分別以下列條件處理：第一組係為控制組，未投予任何藥物；第二組係為化療組，投予10μM順鉑；第三組係為合併治療組，投予10μM順鉑及濃度為20μg/ml之蓮蓬萃取物溶液；第四組係為蓮蓬組，投予濃度為20μg/ml之蓮蓬萃取物溶液。而各該組細胞之培養條件係如實例二所述，故於此不加以贅述。各該組細胞以不同條件培養24小時後，分別以DAPI染劑（1mg/ml）染色法及Annexin V/PI雙染色法檢測細胞狀態，並分析其細胞凋亡之數量，結果如第二圖至第五圖所示。

由第二圖至第五圖之結果可知，當FaDu細胞以20μg/ml之蓮蓬萃取物溶液及10μM順鉑處理後，係能使FaDu細胞發生細胞縮小、核濃染等細胞走向凋亡之型態。再者，由第三圖至第五圖之結果可知，相較於未處理順鉑及蓮蓬萃取物溶液之細胞來說，投予20μg/ml之蓮蓬萃取物溶液及10μM順鉑係能夠誘發大量FaDu細胞走向凋亡；而相較於僅投予順鉑之細胞來說，同時投予20μg/ml之蓮蓬萃取物溶液及10μM順鉑係能夠使細胞更快速地大量凋亡。

由此結果顯示，投予含有一有效量之蓮蓬萃取物的組合物至罹患頭頸癌之患者，係能夠誘發癌細胞走向凋亡，意即能夠有效地抑制癌細胞生長，並且，當該組合物具有如順鉑之化療藥物時，蓮蓬萃取物係能夠提昇化療藥物之抑癌能力，達到增加抑制癌細胞生長之效果。

實例五：西方墨點法分析與細胞凋亡相關蛋白質表現之結果

分別以西方墨點法檢測實例四中各組細胞內p-p53/p53、細胞凋亡蛋白酶Caspase 3、活化態PARP-1之表現量，結果如第六圖及第七圖所示。

由第六圖及第七圖之結果顯示，相較於第一組細胞來說，第三組細胞內p-p53/p53表現量係提高2.5倍；而相較於第二組細胞來說，第三組細胞內p-p53/p53表現量係提高1.26倍，並且，第三組細胞內活化態之PARP-1之表現量係上升1.43倍。

由此可知，經由含蓮蓬萃取物溶液與順鉑之組合物處理之細胞，其內p-p53/p53及活化態之PARP-1之表現量係明顯提昇。換言之，藉由投予本發明所揭蓮蓬萃取物或其與順鉑組合物至罹患頭頸癌患者，係能有效抑制癌症細胞生長，達到治療或改善頭頸癌之功效。

實例六：檢測與細胞凋亡相關蛋白質之活性

以Muse™ 多種細胞凋亡酶活性（multicaspase）套組分析實例四中各組細胞內之凋亡蛋白酶之活性，包含有細胞凋亡起始相關之凋亡蛋白酶2、凋亡蛋白酶8、凋亡蛋白酶9及凋亡蛋白酶10，以及與細胞凋亡執行相關之凋亡蛋白酶3、凋亡蛋白酶6、凋亡蛋白酶7。檢測結果係如第八圖所示。

由第八圖之結果可知，相較於第一組，第三組之細胞內之細胞凋亡酶活性係明顯上升，並較第二組之活性上升1.45倍。由此結果可知，藉由投予含蓮蓬萃取物溶液與順鉑之組合物，係能夠提昇多細胞凋亡酶活性，達到促進細胞凋亡之功效。

實例七：粒線體膜電位改變

以Thermo粒線體分離套組自實例四中各組細胞中分離出離線體，再以JC-1染色法分別檢測各組粒線體膜電位之變化，結果係如第九圖所示。

由第九圖之結果可知，相較於第一組，第二組至第四組係被誘發粒線體膜電位去極化，分別為25%、28％以及21%，並且，相較於第二組來說，第三組細胞之粒線體膜電位去極化之程度係顯著上升了1.12倍（p>0.05）。

實例八：檢測調控細胞凋亡蛋白質之表現

於本實例中係分析實例四中各組細胞內與調控細胞凋亡路徑相關蛋白之表現，包含有Bcl-2、Bax、Cytochrome C，結果如第十圖及第十一圖所示。

由第十圖及第十一圖之結果可知，相較於第一組，第二組及第四組細胞內Bcl-2表現量係分別下降0.84及0.8倍，其MCL-1表現量分別下降0.81及0.71倍，其Bax表現量係分別上升1.32倍及1.34倍。而相較於第二組來說，第三組細胞內Bcl-2、MCL-1表現量係分別明顯下降0.8及0.79倍，並且，Bax表現量係明顯上升1.5倍，而相較於第四組來說，第三組細胞內p-Bad/Bad表現量係下降0.76倍。

由上述結果顯示，藉由投予含有蓮蓬萃取物及順鉑之組合物至一罹患頭頸言之患者，係能夠降低癌細胞中Bcl-2家族中抑制凋亡之蛋白表現，並且，同時能夠顯著提升其內促進細胞凋亡相關蛋白表現量，因此，本發明所揭含有含有蓮蓬萃取物及順鉑之組合物係可透過抑制p-Bad、Bcl-2、MCL-1及促進Bax之表現量，調控細胞內在凋亡路徑，進而能夠達到治療或改善頭頸癌之功效。

實例九：分析細胞之自噬作用

於本實例中係以AVO染色法於螢光顯微鏡下觀察實例四中各組細胞自噬反應之變化，再以Image J量化，並且，以流式細胞儀分析AVO染色之細胞，結果係如第十二圖及第十三圖所示。

更進一步地，以西方墨點法分析各組細胞中與細胞自噬反應相關蛋白之表現，包含有Atg5/12、Beclin-1、LC3，結果如第十四圖所示。

由第十二圖之結果可知，第二組之亮點數及螢光強度是最明顯而為第一組之1.39倍；第四組之亮點數及螢光強度係為第一組之0.6倍；第三組之亮點數及螢光強度係較第二組下降0.52倍。由第十三圖之結果可知，第一組及第二組之螢光訊號係右移1.32％，而第四組相較於第一組係左移0.25％，第三組相較於第二組係左移0.34％。

再者，由第十四圖之結果可知，就Atg 5/12表現量來說，第二組係為第一組之1.19倍，第四組係較第一組下降0.8倍，而第三組係較第二組下降0.72倍；而以Beclin-1蛋白表現量來說，第二組係為控制組之0.96倍，第四組係較第一組下降0.59倍，而第三組係較第二組下降0.83倍；以LC3 I之蛋白表現量來說，以第四組係較控制組下降0.59倍，第三組係較第二降0.72倍；以LC3 II之蛋白表現量來說，第四組係比第一組下降0.53倍，第三組係較第二組下降0.67倍。

由本實例之結果可知，投予順鉑至癌細胞時，會使細胞之自噬能力上升，意即會無法有效抑制癌細胞生長，反而會促使癌細胞於惡劣環境下分解自身作為能量，繼續生長；而反觀投予本發明所揭蓮蓬萃取物或其與順鉑之組合物，係能夠降低癌細胞本身之自噬作用，而能確實地抑制癌細胞繼續生長。換言之，本發明所揭含有蓮蓬萃取物及順鉑之組合物係能夠有效抑制癌細胞之自噬作用，避免癌細胞持續分解自己而生長，達到改善或治療癌症之功效。

實例十：分析本發明所揭組合物能夠加速癌細胞死亡之機制

分別以3-MA（3-Methyladenine）細胞自噬劑合併順鉑10μM、3-MA細胞自噬劑與順鉑10μM及20μg/ml 蓮蓬萃取物溶液合併、3-MA細胞自噬劑合併20μg/ml 蓮蓬萃取物溶液處理FaDu細胞24小時，以Annexin V/PI雙染色法檢測各細胞狀態，並且，以流式細胞儀分析AVO染色之細胞，結果如第十五圖及第十六圖所示。

由第十五圖及第十六圖之結果可知，由於3-MA細胞自噬劑加入細胞中係會增加細胞凋亡之程度，並且使細胞自噬之速度下降，因此，可以得知藉由本發明含有蓮蓬萃取物及順鉑之組合物係能夠透過抑制癌細胞自噬反應，抑制癌細胞生長及促進癌細胞死亡。

實例十一：動物實驗

由國家實驗動物中心購入16隻雌性，周齡4周大之BALB/c nu/nu 鼠（下稱裸鼠），並且於每隻裸鼠背上移植2顆FaDu細胞（腫瘤），隨機分為四組，其中，第一組係為空白組；第二組係為順鉑組，劑量為5mg/kg，每週進行腹腔注射一次；第三組係為蓮蓬萃取物組，將1％蓮蓬萃取粉（0.05g/隻/天）係以混於飼料中之方式給予；第四組係為治療組，順鉑劑量為5mg/kg，每週進行腹腔注射一次，而1％蓮蓬萃取粉（0.05g/隻/天）係以混於飼料中之方式給予。其中，FaDu細胞係以皮下注射方式將5x10⁶ 顆的細胞液（100μl）與基質膠（100μl）之混合物植入。

各該組裸鼠適應一週後開始進行試驗，試驗飼養四週，並且於試驗期間每三天測量各該組裸鼠之腫瘤大小。於試驗結束後，自各該組裸鼠取出腫瘤後拍照，結果如第十七圖及第十八圖所示。

由第十七圖及第十八圖之結果可知，相較於其他組別，第四組裸鼠之腫瘤尺寸係明顯縮小，並且，腫瘤生長速度係隨著治療時間增加而下降。是以，由上述結果顯示藉由投予含有順鉑及蓮蓬萃取物之組合物至罹患癌症或腫瘤之個體時，係能夠有效減緩腫瘤生長速度或是癌症惡化速度，達到改善或治療腫瘤或癌症之功效。

實例十二：檢測與腫瘤細胞凋亡相關蛋白表現

取出實例十一中各該組裸鼠之腫瘤，分別分析pro-caspase 3，PARP-1，Bax，Bcl-2之蛋白表現，結果如第十九圖所示。

由第十九圖之結果可知，第四組裸鼠腫瘤中之活化態的PARP-1表現量係分別較第二組及第三組上升1.55及1.45倍，其Bax 蛋白表現量係較第三組增加1.25倍，並且其Bcl-2蛋白表現量係較第二組下降0.82倍。由此結果顯示藉由順鉑及蓮蓬萃取物進行合併治療係能夠增加癌細胞凋亡，並且增加癌細胞死亡，故能夠達到治療或改善癌症之功效。

無

第一圖係為各組細胞經不同處理後之細胞存活率。第二圖係為各組細胞經不同處理後經DAPI染色後之結果。第三圖係為分析各組細胞中DAPI染色陽性細胞數量之結果。第四圖係為以Annexin V/PI雙染色法檢測各組細胞狀態之結果。第五圖係為分析各組細胞中細胞凋亡數量之結果。第六圖A係為檢測各組細胞內與細胞凋亡相關蛋白質表現之結果（一）。第六圖B係為量化第六圖A中各組細胞內與細胞凋亡相關蛋白質表現之結果。第七圖A係為檢測各組細胞內與細胞凋亡相關蛋白質表現之結果（二）。第七圖B係為量化第七圖A中各組細胞內與細胞凋亡相關蛋白質表現之結果。第八圖A係以Muse™ 多種細胞凋亡酶活性（multicaspase）套組分析各組細胞內與細胞凋亡相關蛋白質之活性的結果。第八圖B係為量化第八圖A中各組細胞內與細胞凋亡相關蛋白質表現之結果。第九圖A係以JC-1染色法分析各組細胞內粒線體膜電位之結果。第九圖B係為量化第九圖A中各組細胞內粒線體膜去極化之結果。第十圖A係檢測各組細胞內與調控細胞凋亡路徑相關蛋白之表現（一）。第十圖B係為量化第十圖A中各組細胞內與調控細胞凋亡路徑相關蛋白之表現之結果。第十一圖A係檢測各組細胞內與調控細胞凋亡路徑相關蛋白之表現（二）。第十一圖B係為量化第十一圖A中各組細胞內與調控細胞凋亡路徑相關蛋白之表現之結果。第十二圖A係以AVO染色法檢測各組細胞細胞自噬反應之變化。第十二圖B係量化第十二圖A中各組細胞進行自噬反應之結果。第十三圖A係以流式細胞儀分析AVO染色分析各組細胞經AVO染色之結果。第十三圖B係量化各組細胞中AVO染色陽性細胞之數量的結果。第十四圖A係檢測各組細胞內與細胞自噬反應相關蛋白之表現。第十四圖B係為量化第十四圖A中各組細胞內與細胞自噬反應相關蛋白之表現之結果。第十五圖A係以Annexin V/PI雙染色法檢測經不同處理之各組細胞。第十五圖B係為量化第十五圖A中各組細胞內凋亡之細胞數量。第十六圖係為量化第十五圖A中各組細胞中AVO染色陽性細胞之數量的結果。第十七圖係為各組小鼠之腫瘤外觀及尺寸。第十八圖係顯示各組小鼠之腫瘤尺寸變化。第十九圖A係為各組小鼠腫瘤細胞中與腫瘤細胞凋亡相關蛋白表現。第十九圖B係為量化第十九圖A中各組小鼠腫瘤細胞中與腫瘤細胞凋亡相關蛋白表現之結果。第二十圖係為本發明所揭蓮蓬萃取物未經SPE處理後直接進行HPLC/ESI-MS-MS之結果。第二十一圖係為本發明所揭蓮蓬萃取物經SPE處理後進行HPLC/ESI-MS-MS之結果。第二十二圖係為第二十一圖之下方圖示比對文獻後之結果。

無

Claims

一種頭頸癌症輔療組合物，係包含有一有效量之蓮蓬萃取物、一化療藥物：順鉑及一藥學上能夠接受之載體，其中：該蓮蓬萃取物之濃度至少為20μg/ml；以及該蓮蓬萃取物係以下列步驟所製得：將蓮蓬以水作為萃取溶劑，於高溫下進行萃取，經冷卻後，過濾出一蓮蓬液，移除水分後得到一蓮蓬膏，再於高溫下乾燥。
一種將如申請專利範圍第1項所述頭頸癌症輔療組合物用於製備治療頭頸癌症之醫藥組合物之用途。
一種將蓮蓬萃取物用於製備頭頸癌症輔療物之用途，而該頭頸癌症輔療物係與順鉑合併投予至一個體，其中：該蓮蓬萃取物之濃度至少為20μg/ml；該蓮蓬萃取物係以下列步驟所製備而成：將蓮蓬以水作為萃取溶劑，於高溫下進行萃取，經冷卻後，過濾出一蓮蓬液，移除水分後得到一蓮蓬膏，再於高溫下乾燥。
一種將蓮蓬萃取物用於製備FaDu細胞自噬抑制劑之用途，其中：該FaDu細胞自噬抑制劑係更包含有順鉑；該蓮蓬萃取物之濃度至少為20μg/ml；以及該蓮蓬萃取物係以下列步驟所製備而成：將蓮蓬以水作為萃取溶劑，於高溫下進行萃取，經冷卻後，過濾出一蓮蓬液，移除水分後得到一蓮蓬膏，再於高溫下乾燥。
依據申請專利範圍第4項所述用途，其中，該FaDu細胞自噬抑制劑係能抑制Atg5/12蛋白、Beclin-1蛋白、LC3 I或LC3 II蛋白之表現。
一種將蓮蓬萃取物用於製備FaDu細胞凋亡促進劑之用途，其中：該FaDu細胞凋亡促進劑係更包含有順鉑；該蓮蓬萃取物之濃度至少為20μg/ml；以及該蓮蓬萃取物係以下列步驟所製備而成：將蓮蓬以水作為萃取溶劑，於高溫下進行萃取，經冷卻後，過濾出一蓮蓬液，移除水分後得到一蓮蓬膏，再於高溫下乾燥。