RU2797711C1 - Способ исследования клеток с использованием застудневания композиции раствора на спиртовой основе - Google Patents

Abstract

Настоящее изобретение относится к технологии, позволяющей преобразовать жидкость для хранения образцов, содержащихся в пробирке, в студнеобразное состояние, безопасно транспортировать образец в центр обследования без его деформации, повторно растворить жидкость для хранения образцов до жидкой фазы в центре обследования и провести исследование образца. Настоящее изобретение имеет преимущество, заключающееся в том, что застудневание жидкости для фиксации клеток, наливаемой внутрь пробирки, осуществляется простым способом, поскольку жидкость для фиксации клеток превращают в студень путем смешивания выбранного раствора и выбранного материала. 4 н.п. ф-лы, 5 ил., 23 табл.

Description

Область техники изобретения

[001] Настоящее изобретение относится к технологии, позволяющей превратить образец (например, слущенные клетки из человеческого организма) внутри пробирки в студень, безопасно транспортировать образец в центр обследования, восстановить образец до его первоначального состояния (например, осуществить его преобразование в жидкую фазу) в центре обследования и провести исследование образца.

[002] В частности, настоящее изобретение относится к технологии, позволяющей преобразовать жидкость для хранения образцов, содержащихся в пробирке, в студнеобразное состояние, безопасно транспортировать образец в центр обследования без его деформации, повторно растворить жидкость для хранения образцов до жидкой фазы в центре обследования и провести исследование образца.

Уровень техники

[003] Как правило, состояние слущенных клеток для постановки диагноза можно изучать после того, как образец (слущенные клетки) был получен из организма человека, а затем слущенные клетки были распределены на предметном стекле для цитологической диагностики в центре обследования.

[004] В настоящем изобретении пациенты, испытывающие трудности с посещением центра обследования, должны собрать свои собственные слущенные клетки (образец), а затем доставить слущенные клетки в центр обследования в состоянии, в котором слущенные клетки остаются неповрежденными. С этой целью образец можно поместить в пробирку, представляющую собой герметичный контейнер, вместе с жидкостью для фиксации клеток, чтобы защитить образец и транспортировать его в центр обследования.

[005] Жидкость для фиксации клеток, наливаемая в пробирку для предотвращения деформации образца, обычно содержит водный раствор. В процессе транспортировки пробирки жидкость для фиксации клеток часто просачивается через зазор между корпусом и крышкой пробирки, и это может привести к деформации образца.

[006] Необходимо разработать технологию, позволяющую решить такие проблемы известного уровня техники.

[007] Между тем, к настоящему изобретению относятся следующие литературные источники предшествующего уровня техники.

[008] (1) EP 0511430 A2 (November 04, 1992) "Cell preservative solution" («Консервирующий раствор для клеток», 04 ноября 1992 года)

[009] (2) US 2006/0088814 A1 (April 27, 2006) "Enhanced cell preservative solution and methods for using same" («Усовершенствованный консервирующий раствор для клеток и способы его применения», 27 апреля 2006 года)

[010] (3) Выложенная заявка на корейский патент № 10-2005-0116689 (December 13, 2005) Gel preservative, method for preparing the same, and cell examining method using the same (Гелевый консервант, способ его получения и способ исследования клеток с его использованием, 13 декабря 2005 года).

РАСКРЫТИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Техническая проблема

[011] Настоящее изобретение было предложено с учетом вышеуказанных проблем, и его цель заключается в предложении способа исследования клеток с использованием застудневания композиции раствора на спиртовой основе, посредством которого образец (например, слущенные клетки из человеческого организма), содержащийся в пробирке, превращают в студень с помощью композиции раствора на спиртовой основе, чтобы образец можно было безопасно транспортировать на большие расстояния и легко восстанавливать до исходного состояния при проведении исследования клеток в центре обследования.

Техническое решение

[012] Для достижения поставленной цели способ исследования клеток с использованием застудневания композиции раствора на спиртовой основе согласно первому варианту осуществления настоящего изобретения может содержать следующие этапы: (a) смешивают любой один раствор, выбранный из двух, а именно: первый раствор, содержащий от 30 до 60 весовых частей водного раствора метанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА, от 0,01 до 0,05 весовых частей холевой кислоты и от 0,05 до 0,1 весовых частей 1 Н водного раствора уксусной кислоты, или второй раствор, содержащий от 40 до 50 весовых частей водного раствора этанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА и от 0,2 до 1 весовой части добавки из двухатомного спирта, с любым одним материалом, выбранным из следующих материалов: от 5 до 20 весовых частей желатина и (или) фотоотверждаемого белка, от 1 до 100 весовых частей натурального целлюлозного полимерного материала или от 1 до 100 весовых частей гранул синтезированного акрилового полимерного материала, при температуре от 1°C до 40° C для застудневания, чтобы получить студнеобразный материал на спиртовой основе; (b) помещают собранный образец внутрь воздухонепроницаемого контейнера, содержащего студнеобразный материал на спиртовой основе; (d) добавляют полученный студнеобразный материал на спиртовой основе в воздухонепроницаемом контейнере в раствор для повторного растворения; (е) выдерживают раствор с целью повторного растворения при температуре от 1° C до 40° C, чтобы растворить студнеобразный материал на спиртовой основе до жидкой фазы; и (f) получают образец из студнеобразного материала на спиртовой основе в повторно растворенном состоянии и исследуют образец.

[013] Способ исследования клеток с использованием застудневания композиции раствора на спиртовой основе согласно второму варианту осуществления настоящего изобретения может содержать следующие этапы: (a) помещают любой один раствор (далее - выбранный раствор) из двух, а именно: первый раствор, содержащий от 30 до 60 весовых частей водного раствора метанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА, от 0,01 до 0,05 весовых частей холевой кислоты и от 0,05 до 0,1 весовых частей 1 Н водного раствора уксусной кислоты, или второй раствор, содержащий от 40 до 50 весовых частей водного раствора этанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА и от 0,2 до 1 весовой части добавки из двухатомного спирта в воздухонепроницаемый контейнер; (b) помещают образец внутрь воздухонепроницаемого контейнера, заполненного выбранным раствором; (c) помещают любой один материал, выбранный из следующих материалов: от 5 до 20 весовых частей желатина и (или) фотоотверждаемого белка, от 1 до 100 весовых частей натурального целлюлозного полимерного материала или от 1 до 100 весовых частей гранул синтезированного акрилового полимерного материала, в воздухонепроницаемый контейнер, содержащий выбранный раствор и образец при температуре от 1° C до 40° C, и превращают смесь в студнеобразный материал на спиртовой основе; (d) добавляют полученный студнеобразный материал на спиртовой основе в воздухонепроницаемом контейнере в раствор для повторного растворения; (е) выдерживают раствор с целью повторного растворения при температуре от 1° C до 40° C, чтобы растворить студнеобразный материал на спиртовой основе до состояния жидкого материала; и (f) получают образец из жидкого материала в повторно растворенном состоянии и исследуют образец.

[014] При этом этап (d) может содержать этап приготовления раствора для повторного растворения, содержащего от 30 до 60 весовых частей водного раствора метанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА, от 0,01 до 0,05 весовых частей холевой кислоты и от 0,05 до 0,1 весовых частей 1 Н водного раствора уксусной кислоты.

[015] Кроме того, этап (d) может содержать этап приготовления раствора для повторного растворения, содержащего от 40 до 50 весовых частей водного раствора этанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА и от 0,2 до 1 весовой части добавки из двухатомного спирта.

Полезные эффекты

[016] Настоящее изобретение имеет преимущество, заключающееся в том, что застудневание жидкости для фиксации клеток, наливаемой внутрь пробирки, осуществляется простым способом, поскольку жидкость для фиксации клеток превращают в студень путем смешивания выбранного раствора и выбранного материала.

[017] Настоящее изобретение имеет преимущество, заключающееся в том, что утечку жидкости для фиксации клеток из пробирки во время транспортировки на большие расстояния можно предотвратить путем застудневания жидкости для фиксации клеток.

[018] Настоящее изобретение также имеет преимущество, заключающееся в том, что переход из студнеобразного состояния в жидкую фазу для исследования клеток осуществляется простым способом.

Краткое описание чертежей

[019] На Фиг. 1 в качестве примера показан вид пробирки, представляющей собой воздухонепроницаемый контейнер, содержащий образец для транспортировки.

[020] На Фиг. 2 в качестве примера показано состояние, когда пробирка установлена на мешалке для приготовления студня.

[021] На Фиг. 3 в качестве примера показано состояние, когда пробирка установлена на мешалке для повторного растворения.

[022] На Фиг. 4 показана блок-схема, иллюстрирующая процесс исследования клеток с использованием застудневания композиции раствора на спиртовой основе в соответствии с первым вариантом осуществления настоящего изобретения.

[023] На Фиг. 5 показана блок-схема, иллюстрирующая процесс исследования клеток с использованием застудневания композиции раствора на спиртовой основе в соответствии со вторым вариантом осуществления настоящего изобретения.

Вариант осуществления изобретения

[024] Далее настоящее изобретение будет раскрыто подробно.

[025] На Фиг. 1 в качестве примера показан вид пробирки, представляющей собой воздухонепроницаемый контейнер, содержащий образец для транспортировки. Как показано на Фиг. 1, пробирка 10 может содержать полый корпус 12 с одним открытым концом и колпачком 11, открывающим и закрывающим открытую часть корпуса 12.

[026] При этом пробирка 10 может быть изготовлена путем экструзии смолы, содержащей антиоксидант, поскольку спиртовой компонент может окисляться, когда пробирка 10 подвергается воздействию света или кислорода, когда внутри находится жидкость для фиксации клеток. Пробирка 10 также может быть выполнена полупрозрачной путем добавления светонепроницаемого красителя.

[027] Воздействие кислорода или света можно предотвратить, используя непрозрачный упаковочный материал типа пакета в качестве контейнера, содержащего жидкость для фиксации клеток.

[028] Между тем, часть образца, не погруженная в жидкость для фиксации клеток, может повредиться в процессе помещения наконечника щетки для сбора образца (не показан) в пробирку 10. Таким образом, предпочтительно, чтобы пробирка 10 изготавливалась такого размера, который может полностью вместить наконечник щетки. Также предпочтительно полностью заполнить пробирку 10 жидкостью для фиксации клеток в состоянии, когда наконечник щетки для сбора образца помещен внутрь пробирки 10.

[029] Обычно, когда жидкость для фиксации клеток в форме водного раствора заливали в пробирку 10 вместе с образцом, возникала проблема деформации образца из-за утечки во время транспортировки на большие расстояния. Для решения этой проблемы в настоящем изобретении предложена композиция, позволяющая превращать жидкость для фиксации клеток в студень. Другими словами, когда жидкость для фиксации клеток превращают в студень, вероятность утечки или испарения невелика, и можно сохранить исходное состояние образца.

[030] В настоящем изобретении жидкость для фиксации клеток, содержащуюся в пробирке 10, транспортируют в центр обследования в студнеобразном состоянии, а студнеобразное состояние поддерживают путем хранения пробирки 10 в низкотемпературном состоянии при комнатной температуре или ниже во время транспортировки.

[031] На Фиг. 2 в качестве примера показано состояние, когда пробирка 10 установлена на мешалке 20 для приготовления студня. Как показано на Фиг. 2, мешалка 20 для приготовления студня может оснащаться как механизм для перемешивания выбранного раствора и выбранного материала в соответствии с настоящим изобретением для получения студнеобразного материала на спиртовой основе.

[032] Сначала пробирку 10 устанавливают на столик 21 мешалки 20 для приготовления студня. В этом состоянии мешалку 20 для приготовления студня приводят в действие, размещая столик 21 под впрыскивающим элементом 22, и студнеобразная композиция заполняет пробирку 10 по мере того, как она выбрасывается вниз из впрыскивающего элемента 22.

[033] Студнеобразная композиция в пробирке 10 может тщательно перемешиваться путем приведения в действие мешалки для приготовления студня 20 и, как следствие, возвратно-поступательного перемещения столика 21 в направлении стрелки, изображенной на Фиг. 2.

[034] На Фиг. 3 в качестве примера показано состояние, когда пробирка 10 установлена на мешалке для повторного растворения. Когда студнеобразный материал на спиртовой основе в соответствии с настоящим изобретением поступает в центр обследования вместе с образцом в пробирке 10, перед извлечением образца из пробирки 10 студнеобразный материал на спиртовой основе, содержащийся в пробирке 10, требуется повторно преобразовать в жидкую фазу.

[035] С этой целью пробирку 10 устанавливают на столике 31 мешалки 30 для повторного растворения. В этом состоянии мешалку 30 для повторного растворения приводят в действие, размещая столик 31 под впрыскивающим элементом 32, и студнеобразный материал на спиртовой основе, содержащийся в пробирке 10, повторно переходит в жидкую фазу, когда раствор для повторного растворения выбрасывается вниз из впрыскивающего элемента 32.

[036] При этом раствор для повторного растворения в пробирке 10 может тщательно перемешиваться со студнеобразной композицией путем приведения в действие мешалки 30 для повторного растворения, и, как следствие, возвратно-поступательного перемещения столика 31 в направлении стрелки, изображенной на Фиг. 3.

[037] В настоящем описании мешалка 20 для приготовления студня, изображенная на Фиг. 2, и мешалка 30 для повторного растворения, изображенная на Фиг. 3, были описаны под разными названиями для удобства объяснения, однако для этих целей может использоваться одно и то же устройство. Мешалка 20 для приготовления студня, изображенная на Фиг. 2, и мешалка 30 для повторного растворения, изображенная на Фиг. 3, были представлены как имеющие аналогичную форму, но они могут быть реализованы по-разному.

[038] На Фиг. 4 показана блок-схема, иллюстрирующая процесс исследования клеток с использованием застудневания композиции раствора на спиртовой основе в соответствии с первым вариантом осуществления настоящего изобретения.

[039] Этап S110: сначала из двух растворов, а именно: первого раствора, содержащего от 30 до 60 весовых частей водного раствора метанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА, от 0,01 до 0,05 весовых частей холевой кислоты и от 0,05 до 0,1 весовых частей 1 Н водного раствора уксусной кислоты, или второго раствора, содержащего от 40 до 50 весовых частей водного раствора этанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА и от 0,2 до 1 весовой части добавки из двухатомного спирта, выбирают любой один раствор (далее - выбранный раствор).

[040] Кроме того, из следующих материалов, а именно: от 5 до 20 весовых частей желатина и (или) фотоотверждаемого белка (метакрилола желатина; GelMA), от 1 до 100 весовых частей натурального целлюлозного полимерного материала или от 1 до 100 весовых частей гранул синтезированного акрилового полимерного материала - выбирают любой один материал (далее - выбранный материал).

[041] Далее выбранный раствор и выбранный материал помещают в пробирку 10 и затем перемешивают при температуре от 1° C до 40° C для застудневания, чтобы получить студнеобразный материал на спиртовой основе.

[042] В данном случае, если температура снаружи пробирки 10 составляет менее 1° C, желатин, фотоотверждаемый белок, натуральный целлюлозный полимерный материал и гранулы синтезированного акрилового полимера в пробирке 10 не растворяются, что приводит к слабому гелеобразованию или застудневанию.

[043] Когда во время застудневания температура снаружи пробирки 10 становится выше 40° C, компоненты на основе спирта, имеющие низкие температуры кипения, испаряются, что приводит к изменению физических свойств всей композиции, и способность средства фиксации клеток фиксировать образец становится слишком сильной или слишком слабой.

[044] Этап S120: затем образец помещают в пробирку 10, содержащую студнеобразный материал на спиртовой основе. При этом предпочтительно, чтобы пробирка 10 была изготовлена такого размера, который сможет полностью вместить наконечник щетки для сбора образца (не показан), чтобы наконечник щетки беспрепятственно помещался внутри пробирки 10.

[045] Пробирку 10, содержащую образец в таком виде, транспортируют в центр обследования. Во время процесса транспортировки пробирку 10 необходимо поддерживать в низкотемпературном состоянии при комнатной температуре или ниже для предотвращения перехода из студнеобразного состояния в жидкую фазу.

[046] После транспортировки пробирки 10, содержащей образец, его необходимо извлечь из пробирки 10 и подвергнуть клеточному исследованию в центре обследования. При этом, чтобы безопасно извлечь образец из пробирки 10 без деформации, необходимо повторно преобразовать средство фиксации клеток, находящееся в пробирке 10, в жидкую фазу.

[047] Этапы S130 и S140: студнеобразный материал на спиртовой основе, содержащийся в пробирке 10, можно повторно растворить до жидкой фазы путем добавления студнеобразного материала на спиртовой основе в раствор для повторного растворения с последующей выдержкой раствора для повторного растворения при температуре от 1° C до 40° C.

[048] При этом возможен вариант, при котором раствор для повторного растворения помещают внутрь пробирки 10, в то время как пробирку 10, содержащую студнеобразный материал и образец, устанавливают на механизм мешалки 30 для повторного растворения, как показано на Фиг. 3. Также возможен вариант, при котором пробирку 10 помещают в раствор для повторного растворения отдельно от мешалки 30 для повторного растворения.

[049] Между тем, раствор для повторного растворения в первом варианте осуществления настоящего изобретения может содержать от 30 до 60 весовых частей водного раствора метанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА, от 0,01 до 0,05 весовых частей холевой кислоты и от 0,05 до 0,1 весовых частей 1 Н водного раствора уксусной кислоты.

[050] Раствор для повторного растворения в первом варианте осуществления настоящего изобретения может также содержать от 40 до 50 весовых частей водного раствора этанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА и от 0,2 до 1 весовой части добавки из двухатомного спирта.

[051] Этап S150: как показано на Фиг. 3, после повторного превращения материала, содержащегося в пробирке 10, в жидкую фазу образец из пробирки 10 можно извлечь с помощью отдельного устройства (не показано) и затем подвергнуть клеточному исследованию.

[052] В первом варианте осуществления настоящего изобретения выбранный раствор выбирают из двух растворов, а именно: первого раствора, содержащего от 30 до 60 весовых частей водного раствора метанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА, от 0,01 до 0,05 весовых частей холевой кислоты и от 0,05 до 0,1 весовых частей 1 Н водного раствора уксусной кислоты, или второго раствора, содержащего от 40 до 50 весовых частей водного раствора этанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА и от 0,2 до 1 весовой части добавки из двухатомного спирта. Выбранный материал выбирают из следующих материалов: от 5 до 20 весовых частей желатина и (или) фотоотверждаемого белка, от 1 до 100 весовых частей натурального целлюлозного полимерного материала или от 1 до 100 весовых частей гранул синтезированного акрилового полимерного материала.

[053] Для первого варианта осуществления настоящего изобретения, описанного выше, были исследованы физические свойства в зависимости от соотношения компонентов, а влияние отдельного компонента на физические свойства всей композиции было исследовано при изменении коэффициента смешивания отдельного компонента.

[054] В таблице 1 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для водного раствора метанола, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов в первом варианте осуществления настоящего изобретения остаются неизменными.

[055]

[Таблица 1]
«Эксперимент 1»	Пример			Сравнительный пример
	A1	B1	C1	a1	b1
Водный раствор метанола (30-60)	30	45	60	25	65
ЭДТА (0,1-0,2)	0,15	0,15	0,15	0,15	0,15
Холевая кислота (0,01-0,05)	0,03	0,03	0,03	0,03	0,03
1 Н водный раствор уксусной кислоты (0,05-0,1)	0,07	0,07	0,07	0,07	0,07
Желатин (5-20)	13	13	13	13	13

[056] В таблице 2 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для ЭДТА, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов в первом варианте осуществления настоящего изобретения остаются неизменными.

[057]

[Таблица 2]
«Эксперимент 2»	Пример			Сравнительный пример
	A2	B2	C2	a2	b2
Водный раствор метанола (30-60)	45	45	45	45	45
ЭДТА (0,1-0,2)	0,1	0,15	0,2	0,05	0,25
Холевая кислота (0,01-0,05)	0,03	0,03	0,03	0,03	0,03
1 Н водный раствор уксусной кислоты (0,05-0,1)	0,07	0,07	0,07	0,07	0,07
Желатин (5-20)	13	13	13	13	13

[058] В таблице 3 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для холевой кислоты, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов в первом варианте осуществления настоящего изобретения остаются неизменными.

[059]

[Таблица 3]
«Эксперимент 3»	Пример			Сравнительный пример
	A3	B3	C3	a3	b3
Водный раствор метанола (30-60)	45	45	45	45	45
ЭДТА (0,1-0,2)	0,15	0,15	0,15	0,15	0,15
Холевая кислота (0,01-0,05)	0,02	0,03	0,04	0,00	0,07
1 Н водный раствор уксусной кислоты (0,05-0,1)	0,07	0,07	0,07	0,07	0,07
Желатин (5-20)	13	13	13	13	13

[060] В таблице 4 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для 1 Н водного раствора уксусной кислоты, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов в первом варианте осуществления настоящего изобретения остаются неизменными.

[061]

[Таблица 4]
«Эксперимент 4»	Пример			Сравнительный пример
	A4	B4	C4	a4	b4
Водный раствор метанола (30-60)	45	45	45	45	45
ЭДТА (0,1-0,2)	0,15	0,15	0,15	0,15	0,15
Холевая кислота (0,01-0,05)	0,03	0,03	0,03	0,03	0,03
1 Н водный раствор уксусной кислоты (0,05-0,1)	0,06	0,07	0,09	0,03	0,13
Желатин (5-20)	13	13	13	13	13

[062] В таблице 5 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для желатина, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов в первом варианте осуществления настоящего изобретения остаются неизменными.

[063]

[Таблица 5]
«Эксперимент 5»	Пример			Сравнительный пример
	A5	B5	C5	a5	b5
Водный раствор метанола (30-60)	45	45	45	45	45
ЭДТА (0,1-0,2)	0,15	0,15	0,15	0,15	0,15
Холевая кислота (0,01-0,05)	0,03	0,03	0,03	0,03	0,03
1 Н водный раствор уксусной кислоты (0,05-0,1)	0,07	0,07	0,07	0,07	0,07
Желатин (5-20)	6	13	19	3	23

[064] В таблицах 1-5 в примерах (с А1 по А5, с В1 по В5 и с С1 по С5) фиксирующая способность студнеобразного средства фиксации клеток была оптимальной. С другой стороны, в сравнительных примерах (с а1 по а5 и с b1 по b5) способность фиксировать образец внутри пробирки 10 была слишком сильной или слишком слабой. Следовательно, в сравнительных примерах в процессе извлечения (например, при повторном растворении) образца из пробирки 10 возникала проблема (например, деформация образца).

[065] Что касается первого варианта осуществления настоящего изобретения, в дополнение к тем экспериментам, что представлены в таблицах 1-5, были проведены другие эксперименты, но их описание было опущено для удобства объяснения.

[066] При этом в студнеобразном материале согласно первому варианту осуществления настоящего изобретения от 5 до 20 весовых частей любого желатина и (или) фотоотверждаемого белка можно заменить на натуральный целлюлозный полимер (например, мецеллозу или гекеллозу) с концентрацией по массе от 1 до 100 весовых частей или гранулы синтезированного акрилового полимера (например, метилметакрилат-со-этиленгликоль диметакрилат; ММА) с концентрацией по массе от 1 до 100 весовых частей.

[067] В рамках настоящего изобретения в отношении натурального целлюлозного полимера также был проведен эксперимент в диапазонах коэффициента смешивания натурального целлюлозного полимера менее 1 весовой части и более 100 весовых частей в качестве сравнительных примеров, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов оставались неизменными, и, как результат, способность к фиксации образца внутри пробирки 10 за пределами диапазона от 1 до 100 весовых частей не была оптимальной.

[068] Кроме того, в отношении гранул синтезированного акрилового полимера также был проведен эксперимент в диапазонах коэффициента смешивания гранул синтезированного акрилового полимера менее 1 весовой части и более 100 весовых частей в качестве сравнительных примеров, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов оставались неизменными, и, как результат, способность к фиксации образца внутри пробирки 10 за пределами диапазона от 1 до 100 весовых частей не была оптимальной.

[069] Между тем, раствор для повторного растворения, используемый на этапе S130 в первом варианте осуществления настоящего изобретения, может содержать от 30 до 60 весовых частей водного раствора метанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА, от 0,01 до 0,05 весовых частей холевой кислоты и от 0,05 до 0,1 весовых частей 1 Н водного раствора уксусной кислоты (далее - первый раствор для повторного растворения).

[070] В первом варианте осуществления настоящего изобретения были исследованы физические свойства в зависимости от соотношения компонентов в таком первом растворе для повторного растворения, а влияние отдельного компонента на физические свойства всей композиции было исследовано при изменении коэффициента смешивания отдельного компонента.

[071] В таблице 6 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для водного раствора метанола, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов остаются неизменными в процессе повторного растворения с использованием первого раствора для повторного растворения в первом варианте осуществления настоящего изобретения.

[072]

[Таблица 6]
«Эксперимент 6»	Пример			Сравнительный пример
	A6	B6	C6	a6	b6
Водный раствор метанола (30-60)	30	45	60	25	65
ЭДТА (0,1-0,2)	0,15	0,15	0,15	0,15	0,15
Холевая кислота (0,01-0,05)	0,03	0,03	0,03	0,03	0,03
1 Н водный раствор уксусной кислоты (0,05-0,1)	0,07	0,07	0,07	0,07	0,07

[073] В таблице 7 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для ЭДТА, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов остаются неизменными в процессе повторного растворения с использованием первого раствора для повторного растворения в первом варианте осуществления настоящего изобретения.

[074]

[Таблица 7]
«Эксперимент 7»	Пример			Сравнительный пример
	A7	B7	C7	a7	b7
Водный раствор метанола (30-60)	45	45	45	45	45
ЭДТА (0,1-0,2)	0,1	0,15	0,2	0,05	0,25
Холевая кислота (0,01-0,05)	0,03	0,03	0,03	0,03	0,03
1 Н водный раствор уксусной кислоты (0,05-0,1)	0,07	0,07	0,07	0,07	0,07

[075] В таблице 8 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для холевой кислоты, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов остаются неизменными в процессе повторного растворения с использованием первого раствора для повторного растворения в первом варианте осуществления настоящего изобретения.

[076]

[Таблица 8]
«Эксперимент 8»	Пример			Сравнительный пример
	A8	B8	C8	a8	b8
Водный раствор метанола (30-60)	45	45	45	45	45
ЭДТА (0,1-0,2)	0,15	0,15	0,15	0,15	0,15
Холевая кислота (0,01-0,05)	0,02	0,03	0,04	0,00	0,07
1 Н водный раствор уксусной кислоты (0,05-0,1)	0,07	0,07	0,07	0,07	0,07

[077] В таблице 9 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для 1 Н водного раствора уксусной кислоты, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов остаются неизменными в процессе повторного растворения с использованием первого раствора для повторного растворения в первом варианте осуществления настоящего изобретения.

[078]

[Таблица 9]
«Эксперимент 9»	Пример			Сравнительный пример
	A9	B9	C9	a9	b9
Водный раствор метанола (30-60)	45	45	45	45	45
ЭДТА (0,1-0,2)	0,15	0,15	0,15	0,15	0,15
Холевая кислота (0,01-0,05)	0,03	0,03	0,03	0,03	0,03
1 Н водный раствор уксусной кислоты (0,05-0,1)	0,06	0,07	0,09	0,03	0,13

[079] В таблицах 6-9 в примерах (с A6 по A9, с B6 по B9 и с C6 по C9) не возникало никаких особых проблем в процессе извлечения (например, при повторном растворении) образца из пробирки 10. С другой стороны, в сравнительных примерах (с a6 по a9 и с b6 по b9) в процессе извлечения (например, при повторном растворении) образца из пробирки 10 возникала проблема (например, деформация образца).

[080] При этом, раствор для повторного растворения в первом варианте осуществления настоящего изобретения может содержать от 40 до 50 весовых частей водного раствора этанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА и от 0,2 до 1 весовой части добавки из двухатомного спирта (далее - второй раствор для повторного растворения).

[081] В первом варианте осуществления настоящего изобретения были исследованы физические свойства в зависимости от соотношения компонентов во втором растворе для повторного растворения, а влияние отдельного компонента на физические свойства всей композиции было исследовано при изменении коэффициента смешивания отдельного компонента.

[082] В таблице 10 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для водного раствора этанола, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов остаются неизменными в процессе повторного растворения с использованием второго раствора для повторного растворения в первом варианте осуществления настоящего изобретения.

[083]

[Таблица 10]
«Эксперимент 10»	Пример			Сравнительный пример
	A10	B10	C10	a10	b10
Водный раствор этанола (40-50)	40	45	50	30	60
ЭДТА (0,1-0,2)	0,15	0,15	0,15	0,15	0,15
Добавка из двухатомного спирта (0,2-1)	0,6	0,6	0,6	0,6	0,6

[084] В таблице 11 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для ЭДТА, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов остаются неизменными в процессе повторного растворения с использованием второго раствора для повторного растворения в первом варианте осуществления настоящего изобретения.

[085]

[Таблица 11]
«Эксперимент 11»	Пример			Сравнительный пример
	A11	B11	C11	a11	b11
Водный раствор этанола (40-50)	45	45	45	45	45
ЭДТА (0,1-0,2)	0,1	0,15	0,2	0,05	0,25
Добавка из двухатомного спирта (0,2-1)	0,6	0,6	0,6	0,6	0,6

[086] В таблице 12 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для добавки из двухатомного спирта, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов остаются неизменными в процессе повторного растворения с использованием второго раствора для повторного растворения в первом варианте осуществления настоящего изобретения.

[087]

[Таблица 12]
«Эксперимент 11»	Пример			Сравнительный пример
	A12	B12	C12	a12	b12
Водный раствор этанола (40-50)	45	45	45	45	45
ЭДТА (0,1-0,2)	0,15	0,15	0,15	0,15	0,15
Добавка из двухатомного спирта (0,2-1)	0,3	0,6	0,9	0,1	1,4

[088] В таблицах 10-12 в примерах (с A10 по A12, с B10 по B12 и с C10 по C12) не возникало никаких особых проблем в процессе извлечения (например, при повторном растворении) образца из пробирки 10. С другой стороны, в сравнительных примерах (с a10 по a12 и с b10 по b12) в процессе извлечения (например, при повторном растворении) образца из пробирки 10 возникла проблема (например, деформация образца).

[089] На Фиг. 5 показана блок-схема, иллюстрирующая процесс исследования клеток с использованием застудневания композиции раствора на спиртовой основе в соответствии со вторым вариантом осуществления настоящего изобретения.

[090] Этап S210: сначала из двух растворов, а именно: первого раствора, содержащего от 30 до 60 весовых частей водного раствора метанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА, от 0,01 до 0,05 весовых частей холевой кислоты и от 0,05 до 0,1 весовых частей 1 Н водного раствора уксусной кислоты, или второго раствора, содержащего от 40 до 50 весовых частей водного раствора этанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА и от 0,2 до 1 весовой части добавки из двухатомного спирта, выбирают любой один раствор (далее - выбранный раствор), а затем выбранный раствор помещают в пробирку 10.

[091] Этап S220: далее образец помещают в пробирку 10. При этом предпочтительно, чтобы пробирка 10 изготавливалась такого размера, который может полностью вместить наконечник щетки.

[092] Этап S230: далее из следующих материалов, а именно: от 5 до 20 весовых частей желатина и (или) фотоотверждаемого белка (метакрилола желатина; GelMA), от 1 до 100 весовых частей натурального целлюлозного полимерного материала или от 1 до 100 весовых частей гранул синтезированного акрилового полимерного материала - выбирают любой один материал (далее - выбранный материал).

[093] Затем выбранный материал помещают внутрь пробирки 10, содержащей образец, при этом температура снаружи пробирки 10 поддерживается на уровне от 1° C до 40° C, и смесь превращают в студнеобразный материал на спиртовой основе.

[094] В данном случае, если температура снаружи пробирки 10 составляет менее 1° C, желатин, фотоотверждаемый белок, полимерный материал из натуральной целлюлозы и гранулы синтезированного акрилового полимера в пробирке 10 не растворяются, что приводит к слабому гелеобразованию или застудневанию.

[095] Когда во время застудневания температура снаружи пробирки 10 становится выше 40° C, компоненты на основе спирта, имеющие низкие температуры кипения, испаряются, что приводит к изменению физических свойств всей композиции, и способность средства фиксации клеток фиксировать образец становится слишком сильной или слишком слабой.

[096] После этого пробирку 10, содержащую образец, транспортируют в центр обследования. Во время процесса транспортировки пробирку 10 необходимо поддерживать в низкотемпературном состоянии при комнатной температуре или ниже для предотвращения перехода из студнеобразного состояния в жидкую фазу.

[097] После транспортировки пробирки 10, содержащей образец, его необходимо извлечь из пробирки 10 и подвергнуть клеточному исследованию в центре обследования. При этом, чтобы безопасно извлечь образец из пробирки 10 без деформации, необходимо повторно преобразовать средство фиксации клеток, находящееся в пробирке 10, в жидкую фазу.

[098] Этапы S240 и S250: студнеобразный материал на спиртовой основе, содержащийся в пробирке 10, можно повторно растворить до жидкой фазы путем добавления студнеобразного материала на спиртовой основе в раствор для повторного растворения с последующей выдержкой раствора для повторного растворения при температуре от 1° C до 40° C.

[099] При этом возможен вариант, при котором раствор для повторного растворения помещают внутрь пробирки 10, в то время как пробирку 10, содержащую студнеобразный материал и образец, устанавливают на механизм мешалки 30 для повторного растворения, как показано на Фиг. 3. Также возможен вариант, при котором пробирку 10 помещают в раствор для повторного растворения отдельно от мешалки 30 для повторного растворения.

[0100] Между тем, раствор для повторного растворения во втором варианте осуществления настоящего изобретения может содержать от 30 до 60 весовых частей водного раствора метанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА, от 0,01 до 0,05 весовых частей холевой кислоты и от 0,05 до 0,1 весовых частей 1 Н водного раствора уксусной кислоты.

[0101] Раствор для повторного растворения во втором варианте осуществления настоящего изобретения может также содержать от 40 до 50 весовых частей водного раствора этанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА и от 0,2 до 1 весовой части добавки из двухатомного спирта.

[0102] Этап S260: как показано на Фиг. 3, после повторного превращения материала, содержащегося в пробирке 10, в жидкую фазу образец из пробирки 10 можно извлечь с помощью отдельного устройства (не показано) и затем подвергнуть клеточному исследованию.

[0103] Во втором варианте осуществления настоящего изобретения выбранный раствор выбирают из двух растворов, а именно: первого раствора, содержащего от 30 до 60 весовых частей водного раствора метанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА, от 0,01 до 0,05 весовых частей холевой кислоты и от 0,05 до 0,1 весовых частей 1 Н водного раствора уксусной кислоты, или второго раствора, содержащего от 40 до 50 весовых частей водного раствора этанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА и от 0,2 до 1 весовой части добавки из двухатомного спирта. Выбранный материал выбирают из следующих материалов: от 5 до 20 весовых частей желатина и (или) фотоотверждаемого белка, от 1 до 100 весовых частей натурального целлюлозного полимерного материала или от 1 до 100 весовых частей гранул синтезированного акрилового полимерного материала.

[0104] Для второго варианта осуществления настоящего изобретения, описанного выше, были исследованы физические свойства в зависимости от соотношения компонентов, а влияние отдельного компонента на физические свойства всей композиции было исследовано при изменении коэффициента смешивания отдельного компонента.

[0105] В таблице 13 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для водного раствора этанола, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов во втором варианте осуществления настоящего изобретения остаются неизменными.

[0106]

[Таблица 13]
«Эксперимент 13»	Пример			Сравнительный пример
	A13	B13	C13	a13	b13
Водный раствор этанола (40-50)	40	45	50	30	60
ЭДТА (0,1-0,2)	0,15	0,15	0,15	0,15	0,15
Добавка из двухатомного спирта (0,2-1)	0,6	0,6	0,6	0,6	0,6
Желатин (5-20)	13	13	13	13	13

[0107] В таблице 14 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для ЭДТА, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов во втором варианте осуществления настоящего изобретения остаются неизменными.

[0108]

[Таблица 14]
«Эксперимент 14»	Пример			Сравнительный пример
	A14	B14	C14	a14	b14
Водный раствор этанола (40-50)	45	45	45	45	45
ЭДТА (0,1-0,2)	0,1	0,15	0,2	0,05	0,25
Добавка из двухатомного спирта (0,2-1)	0,6	0,6	0,6	0,6	0,6
Желатин (5-20)	13	13	13	13	13

[0109] В таблице 15 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для добавки из двухатомного спирта, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов во втором варианте осуществления настоящего изобретения остаются неизменными.

[0110]

[Таблица 15]
«Эксперимент 15»	Пример			Сравнительный пример
	A15	B15	C15	a15	b15
Водный раствор этанола (40-50)	45	45	45	45	45
ЭДТА (0,1-0,2)	0,15	0,15	0,15	0,15	0,15
Добавка из двухатомного спирта (0,2-1)	0,3	0,6	0,9	0,1	1,4
Желатин (5-20)	13	13	13	13	13

[0111] В таблице 16 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для желатина, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов во втором варианте осуществления настоящего изобретения остаются неизменными.

[0112]

[Таблица 16]
«Эксперимент 16»	Пример			Сравнительный пример
	A16	B16	C16	a16	b16
Водный раствор этанола (40-50)	45	45	45	45	45
ЭДТА (0,1-0,2)	0,15	0,15	0,15	0,15	0,15
Добавка из двухатомного спирта (0,2-1)	0,3	0,6	0,9	0,1	1,4
Желатин (5-20)	6	13	19	3	23

[0113 ]В таблицах 13-16 в примерах (с А13 по А16, с В13 по В16 и с С13 по С16) фиксирующая способность средства фиксации клеток, подвергнутых застудневанию, была оптимальной. С другой стороны, в сравнительных примерах (с а13 по а16 и с b13 по b16) способность фиксировать образец внутри пробирки 10 была слишком сильной или слишком слабой. Следовательно, в сравнительных примерах в процессе извлечения (например, при повторном растворении) образца из пробирки 10 возникла проблема (например, деформация образца).

[0114] Что касается второго варианта осуществления настоящего изобретения, в дополнение к тем экспериментам, что представлены в таблицах 13-16, были проведены другие эксперименты, но их описание было опущено для удобства объяснения.

[0115] При этом во втором варианте осуществления настоящего изобретения от 5 до 20 весовых частей любого желатина и (или) фотоотверждаемого белка можно заменить на натуральный целлюлозный полимер (например, мецеллозу или гекеллозу) с концентрацией по массе от 1 до 100 весовых частей или гранулы синтезированного акрилового полимера (например, метилметакрилат-со-этиленгликоль диметакрилат; ММА) с концентрацией по массе от 1 до 100 весовых частей.

[0116] В рамках настоящего изобретения в отношении натурального целлюлозного полимера также был проведен эксперимент в диапазонах коэффициента смешивания натурального целлюлозного полимера менее 1 весовой части и более 100 весовых частей в качестве сравнительных примеров, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов оставались неизменными, и, как результат, способность к фиксации образца внутри пробирки 10 за пределами диапазона от 1 до 100 весовых частей не была оптимальной.

[0117] Кроме того, в отношении гранул синтезированного акрилового полимера также был проведен эксперимент в диапазонах коэффициента смешивания гранул синтезированного акрилового полимера менее 1 весовой части и более 100 весовых частей в качестве сравнительных примеров, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов оставались неизменными, и в результате, способность к фиксации образца внутри пробирки 10 за пределами диапазона от 1 до 100 весовых частей не была оптимальной.

[0118] Между тем, раствор для повторного растворения, используемый на этапе S240 во втором варианте осуществления настоящего изобретения, может содержать от 30 до 60 весовых частей водного раствора метанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА, от 0,01 до 0,05 весовых частей холевой кислоты и от 0,05 до 0,1 весовых частей 1 Н водного раствора уксусной кислоты (далее - третий раствор для повторного растворения).

[0119] Во втором варианте осуществления настоящего изобретения были исследованы физические свойства в зависимости от соотношения компонентов в третьем растворе для повторного растворения, а влияние отдельного компонента на физические свойства всей композиции было исследовано при изменении коэффициента смешивания отдельного компонента.

[0120] В таблице 17 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для водного раствора метанола, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов остаются неизменными в процессе повторного растворения с использованием третьего раствора для повторного растворения во втором варианте осуществления настоящего изобретения.

[0121]

[Таблица 17]
«Эксперимент 17»	Пример			Сравнительный пример
	A17	B17	C17	a17	b17
Водный раствор метанола (30-60)	30	45	60	25	65
ЭДТА (0,1-0,2)	0,15	0,15	0,15	0,15	0,15
Холевая кислота (0,01-0,05)	0,03	0,03	0,03	0,03	0,03
1 Н водный раствор уксусной кислоты (0,05-0,1)	0,07	0,07	0,07	0,07	0,07

[0122] В таблице 18 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для ЭДТА, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов остаются неизменными в процессе повторного растворения с использованием третьего раствора для повторного растворения во втором варианте осуществления настоящего изобретения.

[0123]

[Таблица 18]
«Эксперимент 18»	Пример			Сравнительный пример
	A18	B18	C18	a18	b18
Водный раствор метанола (30-60)	45	45	45	45	45
ЭДТА (0,1-0,2)	0,1	0,15	0,2	0,05	0,25
Холевая кислота (0,01-0,05)	0,03	0,03	0,03	0,03	0,03
1 Н водный раствор уксусной кислоты (0,05-0,1)	0,07	0,07	0,07	0,07	0,07

[0124] В таблице 19 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для холевой кислоты, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов остаются неизменными в процессе повторного растворения с использованием третьего раствора для повторного растворения во втором варианте осуществления настоящего изобретения.

[0125]

[Таблица 19]
«Эксперимент 19»	Пример			Сравнительный пример
	A19	B19	C19	a19	b19
Водный раствор метанола (30-60)	45	45	45	45	45
ЭДТА (0,1-0,2)	0,15	0,15	0,15	0,15	0,15
Холевая кислота (0,01-0,05)	0,02	0,03	0,04	0,00	0,07
1 Н водный раствор уксусной кислоты (0,05-0,1)	0,07	0,07	0,07	0,07	0,07

[0126] В таблице 20 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для 1 Н водного раствора уксусной кислоты, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов остаются неизменными в процессе повторного растворения с использованием третьего раствора для повторного растворения во втором варианте осуществления настоящего изобретения.

[0127]

[Таблица 20]
«Эксперимент 20»	Пример			Сравнительный пример
	A20	B20	C20	a20	b20
Водный раствор метанола (30-60)	45	45	45	45	45
ЭДТА (0,1-0,2)	0,15	0,15	0,15	0,15	0,15
Холевая кислота (0,01-0,05)	0,03	0,03	0,03	0,03	0,03
1 Н водный раствор уксусной кислоты (0,05-0,1)	0,06	0,07	0,09	0,03	0,13

[0128] При этом в таблицах 17-20 в примерах (с A17 по A20, с B17 по B20 и с C17 по C20) не возникало особых проблем в процессе извлечения (например, при повторном растворении) образца из пробирки 10. С другой стороны, в сравнительных примерах (с a17 по a20 и с b17 по b20) в процессе извлечения (например, при повторном растворении) образца из пробирки 10 возникала проблема (например, деформация образца).

[0129] При этом раствор для повторного растворения во втором варианте осуществления настоящего изобретения может содержать от 40 до 50 весовых частей водного раствора этанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА и от 0,2 до 1 весовой части добавки из двухатомного спирта (далее - четвертый раствор для повторного растворения).

[0130] Во втором варианте осуществления настоящего изобретения были исследованы физические свойства в зависимости от соотношения компонентов в четвертом растворе для повторного растворения, а влияние отдельного компонента на физические свойства всей композиции было исследовано при изменении коэффициента смешивания отдельного компонента.

[0131] В таблице 21 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для водного раствора этанола, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов остаются неизменными в процессе повторного растворения с использованием четвертого раствора для повторного растворения во втором варианте осуществления настоящего изобретения.

[0132]

[Таблица 21]
«Эксперимент 21»	Пример			Сравнительный пример
	A21	B21	C21	a21	b21
Водный раствор этанола (30-60)	40	45	50	30	60
ЭДТА (0,1-0,2)	0,15	0,15	0,15	0,15	0,15
Добавка из двухатомного спирта (0,02-1)	0,06	0,06	0,06	0,06	0,06

[0133] В таблице 22 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для ЭДТА, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов остаются неизменными в процессе повторного растворения с использованием четвертого раствора для повторного растворения во втором варианте осуществления настоящего изобретения.

[0134]

[Таблица 22]
«Эксперимент 22»	Пример			Сравнительный пример
	A22	B22	C22	a22	b22
Водный раствор этанола (30-60)	45	45	45	45	45
ЭДТА (0,1-0,2)	0,1	0,15	0,2	0,05	0,25
Добавка из двухатомного спирта (0,02-1)	0,06	0,06	0,06	0,06	0,06

[0135] В таблице 23 представлены экспериментальные условия, при которых изменяется коэффициент смешивания только для добавки из двухатомного спирта, в то время как коэффициенты смешивания других компонентов остаются неизменными в процессе повторного растворения с использованием четвертого раствора для повторного растворения во втором варианте осуществления настоящего изобретения.

[0136]

[Таблица 23]
«Эксперимент 23»	Пример			Сравнительный пример
	A23	B23	C23	a23	b23
Водный раствор этанола (30-60)	45	45	45	45	45
ЭДТА (0,1-0,2)	0,15	0,15	0,15	0,15	0,15
Добавка из двухатомного спирта (0,02-1)	0,3	0,6	0,9	0,1	1,4

[0137] В таблицах 21-23 в примерах (с A21 по A23, с B21 по B23 и с C21 по C23) не возникало никаких особых проблем в процессе извлечения (например, при повторном растворении) образца из пробирки 10. С другой стороны, в сравнительных примерах (с a21 по a23 и с b21 по b23) в процессе извлечения (например, при повторном растворении) образца из пробирки 10 возникала проблема (например, деформация образца).

Claims (30)

1. Способ исследования клеток с использованием застудневания композиции раствора на спиртовой основе, содержащий следующие этапы:

(а) смешивают любой один раствор, выбранный из двух, а именно: первый раствор, содержащий от 30 до 60 весовых частей водного раствора метанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА, от 0,01 до 0,05 весовых частей холевой кислоты и от 0,05 до 0,1 весовых частей 1 Н водного раствора уксусной кислоты, или второй раствор, содержащий от 40 до 50 весовых частей водного раствора этанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА и от 0,2 до 1 весовой части добавки из двухатомного спирта, с любым одним материалом, выбранным из следующих материалов: от 5 до 20 весовых частей желатина и (или) фотоотверждаемого белка, от 1 до 100 весовых частей натурального целлюлозного полимерного материала или от 1 до 100 весовых частей гранул синтезированного акрилового полимерного материала, при температуре от 1 до 40°C для застудневания, чтобы получить студнеобразный материал на спиртовой основе;

(b) помещают собранный образец в воздухонепроницаемый контейнер, содержащий студнеобразный материал на спиртовой основе;

(c) приготавливают раствор для повторного растворения, содержащий от 30 до 60 весовых частей водного раствора метанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА, от 0,01 до 0,05 весовых частей холевой кислоты и от 0,05 до 0,1 весовых частей 1 Н водного раствора уксусной кислоты;

(d) добавляют полученный студнеобразный материал на спиртовой основе, содержащийся в воздухонепроницаемом контейнере, в раствор для повторного растворения;

(e) выдерживают раствор для повторного растворения при температуре от 1 до 40°C с целью повторного растворения студнеобразного материала на спиртовой основе до жидкой фазы; и

(f) получают образец из студнеобразного материала на спиртовой основе в повторно растворенном состоянии и исследуют образец.

2. Способ исследования клеток с использованием застудневания композиции раствора на спиртовой основе, содержащий следующие этапы:

(a) помещают любой один раствор (далее – выбранный раствор) из двух растворов, а именно: первый раствор, содержащий от 30 до 60 весовых частей водного раствора метанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА, от 0,01 до 0,05 весовых частей холевой кислоты и от 0,05 до 0,1 весовых частей 1 Н водного раствора уксусной кислоты, или второй раствор, содержащий от 40 до 50 весовых частей водного раствора этанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА и от 0,2 до 1 весовой части добавки из двухатомного спирта, в воздухонепроницаемый контейнер;

(b) помещают образец внутрь воздухонепроницаемого контейнера, заполненного выбранным раствором;

(c) помещают любой один материал, выбранный из следующих материалов: от 5 до 20 весовых частей желатина и (или) фотоотверждаемого белка, от 1 до 100 весовых частей натурального целлюлозного полимерного материала или от 1 до 100 весовых частей гранул синтезированного акрилового полимерного материала, внутрь воздухонепроницаемого контейнера, содержащего выбранный раствор и образец при температуре от 1 до 40°C, и превращают смесь в студнеобразный материал на спиртовой основе;

(d) приготавливают раствор для повторного растворения, содержащий от 30 до 60 весовых частей водного раствора метанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА, от 0,01 до 0,05 весовых частей холевой кислоты и от 0,05 до 0,1 весовых частей 1 Н водного раствора уксусной кислоты;

(e) добавляют полученный студнеобразный материал на спиртовой основе, содержащийся в воздухонепроницаемом контейнере, в раствор для повторного растворения;

(f) выдерживают раствор для повторного растворения при температуре от 1 до 40°C с целью повторного растворения полученного студнеобразного материала на спиртовой основе до состояния жидкого материала; и

(g) получают образец из жидкого материала в повторно растворенном состоянии и исследуют образец.

3. Способ исследования клеток с использованием застудневания композиции раствора на спиртовой основе, содержащий следующие этапы:

(а) смешивают любой один раствор, выбранный из двух, а именно: первый раствор, содержащий от 30 до 60 весовых частей водного раствора метанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА, от 0,01 до 0,05 весовых частей холевой кислоты и от 0,05 до 0,1 весовых частей 1 Н водного раствора уксусной кислоты, или второй раствор, содержащий от 40 до 50 весовых частей водного раствора этанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА и от 0,2 до 1 весовой части добавки из двухатомного спирта, с любым одним материалом, выбранным из следующих материалов: от 5 до 20 весовых частей желатина и (или) фотоотверждаемого белка, от 1 до 100 весовых частей натурального целлюлозного полимерного материала или от 1 до 100 весовых частей гранул синтезированного акрилового полимерного материала, при температуре от 1 до 40°C для застудневания, чтобы получить студнеобразный материал на спиртовой основе;

(b) помещают собранный образец в воздухонепроницаемый контейнер, содержащий студнеобразный материал на спиртовой основе;

(c) приготавливают раствор для повторного растворения, содержащий от 40 до 50 весовых частей водного раствора этанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА и от 0,2 до 1 весовой части добавки из двухатомного спирта;

(d) добавляют полученный студнеобразный материал на спиртовой основе, содержащийся в воздухонепроницаемом контейнере, в раствор для повторного растворения;

(e) выдерживают раствор для повторного растворения при температуре от 1 до 40°C с целью повторного растворения студнеобразного материала на спиртовой основе до жидкой фазы; и

(f) получают образец из студнеобразного материала на спиртовой основе в повторно растворенном состоянии и исследуют образец.

4. Способ исследования клеток с использованием застудневания композиции раствора на спиртовой основе, содержащий следующие этапы:

(a) помещают любой один раствор (далее – выбранный раствор) из двух растворов, а именно: первый раствор, содержащий от 30 до 60 весовых частей водного раствора метанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА, от 0,01 до 0,05 весовых частей холевой кислоты и от 0,05 до 0,1 весовых частей 1 Н водного раствора уксусной кислоты, или второй раствор, содержащий от 40 до 50 весовых частей водного раствора этанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА и от 0,2 до 1 весовой части добавки из двухатомного спирта, в воздухонепроницаемый контейнер;

(b) помещают образец внутрь воздухонепроницаемого контейнера, заполненного выбранным раствором;

(c) помещают любой один материал, выбранный из следующих материалов: от 5 до 20 весовых частей желатина и (или) фотоотверждаемого белка, от 1 до 100 весовых частей натурального целлюлозного полимерного материала или от 1 до 100 весовых частей гранул синтезированного акрилового полимерного материала, внутрь воздухонепроницаемого контейнера, содержащего выбранный раствор и образец при температуре от 1 до 40°C, и превращают смесь в студнеобразный материал на спиртовой основе;

(d) приготавливают раствор для повторного растворения, содержащий от 40 до 50 весовых частей водного раствора этанола, от 0,1 до 0,2 весовых частей ЭДТА и от 0,2 до 1 весовой части добавки из двухатомного спирта;

(e) добавляют полученный студнеобразный материал на спиртовой основе, содержащийся в воздухонепроницаемом контейнере, в раствор для повторного растворения;

(f) выдерживают раствор для повторного растворения при температуре от 1 до 40°C с целью повторного растворения полученного студнеобразного материала на спиртовой основе до состояния жидкого материала; и

(g) получают образец из жидкого материала в повторно растворенном состоянии и исследуют образец.

Images