RU2781287C1 - Method for obtaining microbial protein from microbial biomass of a producer of methane-oxidizing bacteria by an enzymatic method - Google Patents
Method for obtaining microbial protein from microbial biomass of a producer of methane-oxidizing bacteria by an enzymatic method Download PDFInfo
- Publication number
- RU2781287C1 RU2781287C1 RU2021139908A RU2021139908A RU2781287C1 RU 2781287 C1 RU2781287 C1 RU 2781287C1 RU 2021139908 A RU2021139908 A RU 2021139908A RU 2021139908 A RU2021139908 A RU 2021139908A RU 2781287 C1 RU2781287 C1 RU 2781287C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- suspension
- biomass
- concentrate
- protein
- stage
- Prior art date
Links
- 230000000813 microbial Effects 0.000 title claims abstract description 53
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims abstract description 47
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 47
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 title claims abstract description 41
- 230000002255 enzymatic Effects 0.000 title claims abstract description 11
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 title claims abstract description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 62
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims abstract description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 27
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 239000000047 product Substances 0.000 claims abstract description 21
- 230000003204 osmotic Effects 0.000 claims abstract description 19
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 15
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 14
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 14
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims abstract description 14
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 claims abstract description 13
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 229940088598 Enzyme Drugs 0.000 claims abstract description 12
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims abstract description 12
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims abstract description 12
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims abstract description 12
- 108091005771 Peptidases Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims abstract description 10
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 claims abstract description 8
- 102000035443 Peptidases Human genes 0.000 claims abstract description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 8
- 102000004882 lipase Human genes 0.000 claims abstract description 8
- 108090001060 lipase Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 229940025131 Amylases Drugs 0.000 claims abstract description 7
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 claims abstract description 6
- 235000019749 Dry matter Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 230000001264 neutralization Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 claims abstract description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 18
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 claims description 8
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 7
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 6
- KDFQYGBJUYYWDJ-UHFFFAOYSA-N azane;sodium Chemical compound N.[Na] KDFQYGBJUYYWDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 2
- 238000011049 filling Methods 0.000 claims description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 claims 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 12
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 description 7
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 6
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 6
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 5
- 108010009736 Protein Hydrolysates Proteins 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial Effects 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 101700015794 pro Proteins 0.000 description 3
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 3
- 102000033147 ERVK-25 Human genes 0.000 description 2
- 229940023462 Paste Product Drugs 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-M azane;hydroxide Chemical compound N.[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 2
- 230000013777 protein digestion Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 239000012465 retentate Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 102000024969 Bacterial Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010077805 Bacterial Proteins Proteins 0.000 description 1
- AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L Calcium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ca+2] AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000005905 Hydrolysed protein Substances 0.000 description 1
- 229940040461 Lipase Drugs 0.000 description 1
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000005904 alkaline hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 235000004458 antinutrient Nutrition 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 239000000920 calcium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229910001861 calcium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000160 chronic toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth media Substances 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000002609 media Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000005445 natural product Substances 0.000 description 1
- 229930014626 natural products Natural products 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing Effects 0.000 description 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 238000000164 protein isolation Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical group 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000011343 solid material Substances 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 230000001131 transforming Effects 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Abstract
Description
Изобретение относится к способам получения микробного протеина ферментативным способом с высоким содержанием белка.The invention relates to methods for producing microbial protein by an enzymatic process with a high protein content.
Как известно ферментация — это процесс, в котором происходит преобразование исходного сырья в продукт с использованием биохимической деятельности микроорганизмов или изолированных клеток.As you know, fermentation is a process in which the transformation of raw materials into a product takes place using the biochemical activity of microorganisms or isolated cells.
Содержащие белок природные продукты и продукты расщепления растительного и животного происхождения могут быть разнообразными способами подготовлены для дальнейшего использования. Как правило, для этого необходимо, с одной стороны, экстрагировать белок из клетки носителя, а с другой стороны, удалить мешающие примеси.Protein-containing natural products and degradation products of plant and animal origin can be prepared in a variety of ways for further use. As a rule, for this it is necessary, on the one hand, to extract the protein from the host cell, and on the other hand, to remove interfering impurities.
Известен гидролиз белков, который за счет добавления кислот или щелочей под воздействием температуры ведет к образованию смеси аминокислот. После расщепления белка необходимо нейтрализовать раствор. Расщепление белков можно проводить также ферментативно, с помощью протеаз микробного происхождения. Known hydrolysis of proteins, which by adding acids or alkalis under the influence of temperature leads to the formation of a mixture of amino acids. After protein digestion, the solution must be neutralized. Protein digestion can also be carried out enzymatically, using proteases of microbial origin.
Из уровня техники известны функциональные протеиновые гидролизаты, способ их получения, использование этих протеиновых гидролизатов в качестве пищевых добавок и продукты, содержащие эти протеиновые гидролизаты (US4627983 (A), A23J3/00; A23L1/305; C12P21/06, 1986.12.09). Способ получения функционального гидролизата включает следующие этапы в указанном порядке: снижение содержания нуклеиновых кислот и липидов в микробном белке путем двухэтапной экстракционной обработки белка с использованием метанола/аммиака и воды; формирование суспензии микробного белка в воде, указанная суспензия имеет содержание твердых веществ от 10 до 20% по массе и рН от 7,0 до 8,0; ферментативный гидролиз микробного белка путем контактирования суспензии с эндопротеазой в массовом соотношении эндопротеазы к суспензии от 1:500 до 1:1000 при рН от 7,0 до 8,0; дезактивация эндопротеазы, ультрафильтрация образовавшегося гидролизата белка для получения пермеата и ретентата, при этом пермеат или ретентат представляют собой функциональный гидролизат. В качестве микробного белка применяется бактериальный белок.Functional protein hydrolysates, a method for their preparation, the use of these protein hydrolysates as food additives and products containing these protein hydrolysates are known from the prior art (US4627983 (A), A23J3/00; A23L1/305; C12P21/06, 1986.12.09). The method for obtaining a functional hydrolyzate includes the following steps in this order: reducing the content of nucleic acids and lipids in the microbial protein by a two-stage extraction treatment of the protein using methanol/ammonia and water; forming a suspension of microbial protein in water, said suspension having a solids content of 10 to 20% by weight and a pH of 7.0 to 8.0; enzymatic hydrolysis of microbial protein by contacting the suspension with endoprotease in a mass ratio of endoprotease to suspension from 1:500 to 1:1000 at pH from 7.0 to 8.0; deactivation of the endoprotease, ultrafiltration of the resulting protein hydrolyzate to obtain permeate and retentate, while the permeate or retentate is a functional hydrolyzate. Bacterial protein is used as microbial protein.
Однако использование метанола (токсичного вещества) требует дополнительной тщательной очистки от его остаточных концентраций в продукте и более жесткого контроля получаемого гидролизата на острую и хроническую токсичность.However, the use of methanol (a toxic substance) requires additional thorough purification from its residual concentrations in the product and more stringent control of the resulting hydrolyzate for acute and chronic toxicity.
Известен гидролизат микробного белка, способ его получения и применения, который включает следующие этапы: берут влажный или сухой микробный белок, добавляют воду, которая в 2-4 раза превышает количество микробного белка, равномерно перемешивают, добавляют сложную протеазу, которая составляет 0,02-0,05% от массы микробного белка, перемешивают и контролируют температуру ферментативного гидролиза при 45-55°C и значение рН 2,5-3,5. Далее проводят ферментативный гидролиз в течение 10-12 часов, нагревают до кипения и инактивируют, фильтруют, и обесцвечивают с использованием активированного угля для получения раствора ферментативного белка, который представляет собой гидролизат микробного белка. После получения раствора ферментативного гидролизованного белка его концентрируют в вакууме до пастообразного продукта с содержанием воды 17% -21%. Пастообразный продукт сушат распылением с получением порошкового продукта с содержанием воды от 3% до 7%, порошкообразный продукт обычно гранулируют с получением гранулированного продукта (CN102696856 (B), A23J3/00; A23J3/34; A23L1/305; A23L27/21, 2014.01.15).A microbial protein hydrolyzate is known, a method for its preparation and use, which includes the following steps: take a wet or dry microbial protein, add water, which is 2-4 times the amount of microbial protein, mix evenly, add a complex protease, which is 0.02- 0.05% by weight of microbial protein, mix and control the temperature of enzymatic hydrolysis at 45-55°C and pH 2.5-3.5. Next, enzymatic hydrolysis is carried out for 10-12 hours, heated to boiling and inactivated, filtered, and decolorized using activated carbon to obtain an enzymatic protein solution, which is a microbial protein hydrolyzate. After obtaining a solution of enzymatic hydrolysed protein, it is concentrated in vacuo to a paste product with a water content of 17% -21%. The paste product is spray dried to obtain a powder product with a water content of 3% to 7%, the powder product is usually granulated to obtain a granular product (CN102696856 (B), A23J3/00; A23J3/34; A23L1/305; A23L27/21, 2014.01. fifteen).
К недостаткам известного способа относится длительность проведения процесса ферментации, более того, полученный гидролизат содержит значительные концентрации нуклеиновых кислот и минеральных веществ, т.к. отсутствует стадия очистки от них получаемого продукта. Помимо прочего получаемый продукт отличается повышенной кислотностью, что ограничивает его применение.The disadvantages of the known method include the duration of the fermentation process, moreover, the resulting hydrolyzate contains significant concentrations of nucleic acids and minerals, tk. there is no stage of purification of the resulting product from them. Among other things, the resulting product is characterized by high acidity, which limits its use.
Известны композиции гидролизатов микробных белков, получаемые путем обработки биомассы, например, микробной биомассы, посредством комбинации физических, химических и/или ферментативных обработок, и способы их получения. (WO2021055366 (A1), A23L33/135; A61K31/00; A61K31/733, 2021.03.25). Получение белкового гидролизата включает этапы: (а) культивирование клеток микроорганизмов в культуральной среде с получением таким образом микробной биомассы, содержащей микробный белок; (b) сбор микробной биомассы; (c) получение композиции суспензии биомассы из собранной микробной биомассы, в которой композиция суспензии биомассы содержит микробный белок; (d) регулирование рН композиции суспензии биомассы до рН в пределах первого целевого диапазона рН, по меньшей мере, около 10, если необходимо, добавлением одного или более оснований, выбранных из гидроксида калия, гидроксида аммония, аммиака, гидроксида кальция и гидроксида натрия. Композиция суспензии биомассы, полученная на стадии (c), или композиция суспензии с скорректированным рН, полученная на стадии (d), представляет собой композицию щелочной суспензии; (e) нагревание композиции щелочной суспензии при давлении, по меньшей мере, около 15 фунтов на квадратный дюйм до первой температуры, по меньшей мере, около 40°C в течение первого периода времени, по меньшей мере, около 5 минут, тем самым получая суспензию щелочного гидролизата, которая содержит гидролизованный микробный белок, (f) отделение жидкой надосадочной жидкости от твердого материала в суспензии щелочного гидролизата, где надосадочная жидкость содержит растворимый гидролизованный микробный белок.Compositions of hydrolysates of microbial proteins obtained by processing biomass, for example, microbial biomass, through a combination of physical, chemical and/or enzymatic treatments, and methods for their preparation are known. (WO2021055366 (A1), A23L33/135; A61K31/00; A61K31/733, 2021.03.25). Obtaining a protein hydrolyzate includes the steps: (a) culturing microbial cells in a culture medium, thereby obtaining microbial biomass containing microbial protein; (b) collecting microbial biomass; (c) obtaining a biomass suspension composition from the harvested microbial biomass, wherein the biomass suspension composition contains a microbial protein; (d) adjusting the pH of the biomass slurry composition to a pH within a first target pH range of at least about 10, if necessary, by adding one or more bases selected from potassium hydroxide, ammonium hydroxide, ammonia, calcium hydroxide, and sodium hydroxide. The biomass slurry composition obtained in step (c) or the pH adjusted slurry composition obtained in step (d) is an alkaline slurry composition; (e) heating the alkaline slurry composition at a pressure of at least about 15 psi to a first temperature of at least about 40° C. for a first time period of at least about 5 minutes, thereby obtaining a slurry an alkaline hydrolyzate that contains a hydrolyzed microbial protein, (f) separating liquid supernatant from a solid material in an alkaline hydrolyzate suspension, where the supernatant contains a soluble hydrolyzed microbial protein.
Однако продукт, получаемый известным способом отличается большой концентрацией минеральных веществ (зольности), т.к. отсутствует стадия удаления гидролизующих и нейтразиющих кислот и щелочей, а также отсутствие стадии удаления нуклеиновых кислот, высокая концентрация которых при частом употреблении может привести к отложению солей в организме. Оба этих фактора значительно снижают дневную дозу полученного таким методом гидролизата. However, the product obtained by a known method is characterized by a high concentration of minerals (ash content), because. there is no stage for the removal of hydrolyzing and neutralizing acids and alkalis, as well as the absence of a stage for the removal of nucleic acids, a high concentration of which, with frequent use, can lead to the deposition of salts in the body. Both of these factors significantly reduce the daily dose of the hydrolyzate obtained by this method.
Технической задачей настоящего изобретения является разработка способа получения протеина микробного ферментативным методом из микробной биомассы, без вредных примесей.The technical objective of the present invention is to develop a method for obtaining protein microbial enzymatic method from microbial biomass, without harmful impurities.
Техническим результатом изобретения является повышение качества протеина микробного за счет чистоты полученного продукта, путем исключения вредных примесей, с высоким содержанием белка не менее 88 %. The technical result of the invention is to improve the quality of microbial protein due to the purity of the resulting product, by eliminating harmful impurities, with a high protein content of at least 88%.
Техническая проблема решается, а технический результат достигается за счет того, что способ получения микробного протеина из микробной биомассы продуцента метанокисляющих бактерий ферментативным методом осуществляют путем культивирования клеток полученной микробной биомассы, содержащей микробный белок, регулированием рН среды с помощью щелочи, нагрева и фильтрации. Согласно изобретению на первом этапе получают концентрат денуклеинизированной биомассы из нативной биомассы в виде суспензии метанокисляющих бактерий с СВ 10-12%, рН которой доводят до 3,0-3,5 серной кислотой концентрацией от 45% до 50%, затем ее нагревают при постоянном перемешивании с кратностью циркуляции от 30 до 40 ч-1 при температуре 75-85°С, после чего суспензию доводят до рН от 8,5 до 9,5 добавлением щелочного раствора и поддержанием температуры от 85°С до 95°С, выдерживая суспензию в течение от 1 до 2 часов до получения щелочного экстракта, который фильтруют на фильтре с диаметром пор 0,1-0,7 мкм под давлением 3-8 бар, промывают осмотической водой до 85-90% для удаления нуклеиновых компонентов, с получением концентрата денуклеинизированной биомассы (ДНБМ). На втором этапе осуществляют процесс гидролиза, где полученный концентрат смешивают в реакторе с комплексным ферментным препаратом, включающим амилазы, липазы и протеазы из расчета 30-35 г по сухому веществу концентрата на 7000 ед. по амилазе комплексного ферментного препарата, выдерживают суспензию при температуре 35-55°С и нейтральном рН при постоянном перемешивании с кратностью циркуляции 30-40 ч-1 до достижения стабилизации концентрации белка. На третьем этапе проводят инактивацию полученной суспензии путем повышения температуры до 85-95°С в течение 30-60 мин, с последующей фильтрацией на фильтре с диаметром пор 0,1-0,7 мкм под давлением 3-8 бар с получением концентрата денуклеинизированной биомассы и фильтрата, содержащего протеин микробный. Концентрат и фильтрат высушивают до получения порошкообразного продукта.The technical problem is solved, and the technical result is achieved due to the fact that the method of obtaining microbial protein from the microbial biomass of the producer of methane-oxidizing bacteria by the enzymatic method is carried out by cultivating cells of the obtained microbial biomass containing microbial protein, adjusting the pH of the medium using alkali, heating and filtration. According to the invention, at the first stage, a concentrate of denucleated biomass is obtained from native biomass in the form of a suspension of methane-oxidizing bacteria with a DM of 10-12%, the pH of which is adjusted to 3.0-3.5 with sulfuric acid with a concentration of 45% to 50%, then it is heated at a constant mixing with a circulation frequency of 30 to 40 h -1 at a temperature of 75-85°C, after which the suspension is adjusted to a pH of 8.5 to 9.5 by adding an alkaline solution and maintaining the temperature from 85°C to 95°C, keeping the suspension for 1 to 2 hours until an alkaline extract is obtained, which is filtered on a filter with a pore diameter of 0.1-0.7 microns under a pressure of 3-8 bar, washed with osmotic water up to 85-90% to remove nucleic components, to obtain a concentrate denucleinated biomass (DNBM). At the second stage, the hydrolysis process is carried out, where the resulting concentrate is mixed in a reactor with a complex enzyme preparation, including amylases, lipases and proteases at the rate of 30-35 g of dry matter concentrate per 7000 units. by amylase of the complex enzyme preparation, the suspension is kept at a temperature of 35-55°C and neutral pH with constant stirring with a circulation frequency of 30-40 h -1 until the protein concentration is stabilized. At the third stage, the resulting suspension is inactivated by raising the temperature to 85-95°C for 30-60 minutes, followed by filtration on a filter with a pore diameter of 0.1-0.7 μm under a pressure of 3-8 bar to obtain a concentrate of denucleinated biomass and a filtrate containing microbial protein. The concentrate and filtrate are dried to obtain a powdery product.
На первом этапе суспензию доводят до рН от 8,5 до 9,5 добавлением щелочного раствора гидроксида натрия или аммиака.In the first step, the suspension is adjusted to pH 8.5 to 9.5 by adding an alkaline solution of sodium hydroxide or ammonia.
Остатки суспензии смывают осмотической водой с фильтров на первом этапе процесса, для дальнейшего заполнения ею реактора до рабочего объема.The rest of the suspension is washed off with osmotic water from the filters at the first stage of the process, for further filling the reactor with it to the working volume.
Реактор на втором этапе заполняют от 60% до 80% объема реактора. На стадии инактивации время проведения процесса контролируют по содержанию посторонних микроорганизмов.The reactor in the second stage is filled from 60% to 80% of the reactor volume. At the stage of inactivation, the time of the process is controlled by the content of foreign microorganisms.
При проведении обработки нативной биомассы 45-50% серной кислотой необходим для обеспечения реологических свойств суспензии, облегчающих процесс фильтрования. При этом если рН раствора менее 3,0 происходит окисление и разрушение бактериальных клеток, что затрудняет дальнейшее удаление нуклеиновых компонентов и увеличивает потери белковой фракции, а при рН свыше 3,5 возможно повышение вязкости суспензии после щелочного гидролиза.When processing native biomass, 45-50% sulfuric acid is necessary to ensure the rheological properties of the suspension, which facilitate the filtration process. Moreover, if the pH of the solution is less than 3.0, oxidation and destruction of bacterial cells occurs, which makes it difficult to further remove the nucleic components and increases the loss of the protein fraction, and at pH above 3.5, the viscosity of the suspension may increase after alkaline hydrolysis.
Проведение нагрева суспензии до температуры 75-85°С, приводит к снижению вязкости суспензии, дальнейшее нагревание суспензии в кислотной среде нецелесообразно, т.к. может привести к окислению и разрушению бактериальных клеток, что затрудняет дальнейшее удаление нуклеиновых компонентов и увеличивает потери белковой фракции.Heating the suspension to a temperature of 75-85°C leads to a decrease in the viscosity of the suspension; can lead to oxidation and destruction of bacterial cells, which complicates the further removal of nucleic components and increases the loss of the protein fraction.
Кратность циркуляции 30-40 ч-1 подобрана опытным путем и способствует обеспечению интенсивного массообмена без застойных зон, без излишнего пенообразования, с высокой скоростью нагрева суспензии от термоэлементов.The circulation ratio of 30-40 h -1 was selected empirically and helps to ensure intensive mass transfer without stagnant zones, without excessive foaming, with a high heating rate of the suspension from thermoelements.
Доведение рН суспензии до 8,5-9,5 добавлением щелочного раствора гидроксида натрия или аммиака, а также повышение температуры до 85-95°С и проведение реакции в течение 1-2 часов необходимо для выделения нуклеиновых компонентов без разрушения бактериальных клеток.Bringing the pH of the suspension to 8.5-9.5 by adding an alkaline solution of sodium hydroxide or ammonia, as well as raising the temperature to 85-95°C and carrying out the reaction for 1-2 hours is necessary to isolate nucleic components without destroying bacterial cells.
Проведение микрофильтрации в установке микрофильтрации на фильтре с диаметром пор 0,1-0,7 мкм под давлением 3-8 бар обеспечивает высокое разделение фильтрата и концентрата. Carrying out microfiltration in a microfiltration unit on a filter with a pore diameter of 0.1-0.7 microns at a pressure of 3-8 bar provides a high separation of the filtrate and concentrate.
Выбор фильтров с диаметром пор 0,1-0,7 мкм и режимов фильтрации обусловлен размером бактериальных клеток и продуктов их гидролиза.The choice of filters with a pore diameter of 0.1-0.7 μm and filtration modes is determined by the size of bacterial cells and their hydrolysis products.
Промывание осмотической водой в условиях микрофильтрации производят до 85-90% удаления нуклеиновых компонентов с получением концентрата денуклеинизированной биомассы (ДНБМ), позволяет снизить содержание в готовом продукте нуклеиновых компонентов и экстрагирующих веществ.Washing with osmotic water under microfiltration conditions produces up to 85-90% removal of nucleic components to obtain a denucleinized biomass concentrate (DNBM), which makes it possible to reduce the content of nucleic components and extractive substances in the finished product.
На втором этапе способа происходит процесс получения протеина микробного. Рабочий объем реактора задается его конструкционными особенностями. При заполнении реактора меньше 60% рабочего объема начинается излишнее вспенивание, а при превышении объема свыше 80% от объема реактора, нарушается процесс массообмена, образующаяся пена может превысить воздушный объем реактора и вытечь из негоAt the second stage of the method, the process of obtaining microbial protein takes place. The working volume of the reactor is given by its design features. When the reactor is filled with less than 60% of the working volume, excessive foaming begins, and when the volume exceeds 80% of the reactor volume, the mass transfer process is disturbed, the resulting foam can exceed the air volume of the reactor and flow out of it
Нагрев полученного концентрата на втором этапе до 35-50°С необходим для достижения оптимальной температуры гидролиза.Heating the resulting concentrate in the second stage to 35-50°C is necessary to achieve the optimum hydrolysis temperature.
Использование ферментного комплексного препарата, содержащего амилазы, липазы и протеазы в количестве 7000 ед. (по амилазе) на 30-35 г субстрата по сухому веществу в суспензии ДНБМ обусловлено наибольшей эффективностью гидролиза субстрата и выделению белка в раствор.The use of an enzyme complex preparation containing amylases, lipases and proteases in the amount of 7000 units. (according to amylase) per 30-35 g of substrate in terms of dry matter in a suspension of DNBM is due to the highest efficiency of substrate hydrolysis and protein release into solution.
На этапе инактивации температуру суспензии поднимают до 85-95°С, для исключения ферментативной активности в протеине микробном и уничтожения всех форм живых микроорганизмов At the stage of inactivation, the temperature of the suspension is raised to 85-95 ° C, to exclude enzymatic activity in the microbial protein and destroy all forms of living microorganisms
Продолжительность процесса инактивации в течение 30-60 мин обусловлено тем, что для пищевых продуктов это 104 КОЕ, при нагреве менее 30 мин содержание живых микроорганизмов в готовом продукте может превысить допустимое значение, а увеличение времени нагрева свыше 60 мин - нецелесообразно.The duration of the inactivation process for 30-60 minutes is due to the fact that for food products it is 10 4 CFU, when heated for less than 30 minutes, the content of live microorganisms in the finished product may exceed the permissible value, and increasing the heating time over 60 minutes is not advisable.
Изобретение осуществляется следующим образом. The invention is carried out as follows.
Нативную биомассу загружают в реактор, серной кислотой концентрацией 45-50% доводят рН от 3,0 до 3,5, с получением суспензии. Полученную суспензию нагревают при постоянном перемешивании кратностью циркуляции 30-40 ч-1 до температуры 75-85°С. Затем в суспензию добавляют щелочной раствор (гидроксида натрия или аммиака) с доведением рН до 8,5-9,5. Суспензию нагревают до температуры 85-95°С и выдерживают 1-2 часа при постоянном перемешивании с получением щелочного экстракта.The native biomass is loaded into the reactor, the pH is adjusted from 3.0 to 3.5 with sulfuric acid at a concentration of 45-50% to obtain a suspension. The resulting suspension is heated with constant stirring at a circulation rate of 30-40 h-1 to a temperature of 75-85°C. Then an alkaline solution (sodium hydroxide or ammonia) is added to the suspension, adjusting the pH to 8.5-9.5. The suspension is heated to a temperature of 85-95°C and kept for 1-2 hours with constant stirring to obtain an alkaline extract.
Далее щелочной экстракт перегружают в установку микрофильтрации с диаметром пор 0,1-0,7 мкм (давление процесса фильтрации поддерживают 3-8 бар), после максимального концентрирования промывают осмотической водой до 85-90% удаления нуклеиновых компонентов с получением концентрата денуклеинизированной биомассы (ДНБМ). Содержания нуклеиновых компонентов в исходной суспензии и суспензии ДНБМ в % от сухого веса, отношение содержания нуклеиновых кислот в ДНБМ к содержанию нуклеиновых кислот в исходной биомассе позволяет оценить процент удаления нуклеиновых кислот.Next, the alkaline extract is loaded into a microfiltration unit with a pore diameter of 0.1-0.7 μm (the pressure of the filtration process is maintained at 3-8 bar), after maximum concentration, it is washed with osmotic water until 85-90% of the removal of nucleic components to obtain a concentrate of denucleated biomass (DNBM ). The content of nucleic components in the initial suspension and suspension of DNBM in % of dry weight, the ratio of the content of nucleic acids in DNBM to the content of nucleic acids in the initial biomass allows us to estimate the percentage of removal of nucleic acids.
ДНБМ из микрофильтрационной установки перегружают в реактор использованный на предыдущем этапе и подготовленный к повторной загрузке, остатки суспензии смывают с фильтров осмотической водой до заполнения рабочего объема реактора от 60% до 80%. DNBM from the microfiltration unit is reloaded into the reactor used at the previous stage and prepared for reloading, the remaining suspension is washed off the filters with osmotic water until the working volume of the reactor is filled from 60% to 80%.
Гидролиз суспензии осуществляют при температуре для ферментов микробного (растительного) происхождения от 45°С до 55°С, а для ферментов животного происхождения от 35°С до 40°С, при нейтральном рН. Загружают комплексный ферментный препарат содержащий амилазы, липазы и протеазы из расчета на 30-35 г субстрата по СВ 7000 ед. (по амилазе) Содержание СВ - сухих веществ (соотношение ферментный препарат/субстрат было установлено экспериментально, снижение приводит в уменьшению эффективности выделения белка, увеличение не приводит к положительному эффекту, т.е. нецелесообразно). Процесс гидролиза продолжают до достижения стабилизации концентрации белка Hydrolysis of the suspension is carried out at a temperature for enzymes of microbial (plant) origin from 45°C to 55°C, and for enzymes of animal origin from 35°C to 40°C, at neutral pH. A complex enzyme preparation containing amylases, lipases and proteases is loaded at the rate of 30-35 g of the substrate by CB 7000 units. (according to amylase) The content of CB - solids (the ratio of the enzyme preparation / substrate was established experimentally, a decrease leads to a decrease in the efficiency of protein isolation, an increase does not lead to a positive effect, i.e. it is not advisable). The hydrolysis process is continued until the stabilization of the protein concentration is reached.
Полученный экстракт далее подвергают инактивации, для чего температуру суспензии повышают до 85-95°С, процесс продолжают в течение 30-60 мин. Продолжительность процесса определяют минимальным содержанием посторонних) микроорганизмов.The resulting extract is then subjected to inactivation, for which the temperature of the suspension is raised to 85-95°C, the process is continued for 30-60 minutes. The duration of the process is determined by the minimum content of foreign) microorganisms.
Полученную суспензию перегружают в установку микрофильтрации с диаметром пор 0,1-0,7 мкм (давление процесса 3-8 бар), после концентрирования промывают осмотической водой для наиболее полного извлечения белка из суспензии в фильтрат (раствор протеина микробного).The resulting suspension is loaded into a microfiltration unit with a pore diameter of 0.1-0.7 μm (process pressure 3-8 bar), after concentration it is washed with osmotic water for the most complete extraction of the protein from the suspension into the filtrate (microbial protein solution).
Полученный концентрат депротеинизированной денуклеинизированной биомассы (ДПДНБМ) смывают с установки осмотической водой и передают на сушку.The resulting concentrate of deproteinized denucleinated biomass (DPDNBM) is washed off the unit with osmotic water and transferred to drying.
Полученный фильтрат (раствор содержащий протеин микробный) также сушат с получением готового продукта.The resulting filtrate (solution containing microbial protein) is also dried to obtain the finished product.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.The invention is illustrated by the following examples.
Пример 1Example 1
Нативную биомассу объемом 40 л (СВ 11%) загружали в реактор, серной кислотой (46 %) доводили до рН= 3,0, полученную суспензию нагревали при постоянном перемешивании кратностью циркуляции 30 ч-1.Native biomass with a volume of 40 l (CB 11%) was loaded into the reactor, sulfuric acid (46%) was adjusted to pH = 3.0, the resulting suspension was heated with constant stirring with a circulation rate of 30 h -1 .
При достижении температуры 75°С, в суспензию добавляли щелочной раствор (гидроксида аммиака) до рН 8,5, температура 87°С суспензии поддерживали 1 час. Затем щелочной экстракт перегружали в установку микрофильтрации с диаметром пор 0,45 мкм (давление процесса 3 бар), после максимального концентрирования промывали осмотической водой 5 раз до 85% для удаления нуклеиновых компонентов с получением концентрата денуклеинизированной биомассы (ДНБМ).Upon reaching a temperature of 75°C, an alkaline solution (ammonia hydroxide) was added to the suspension to pH 8.5, the temperature of 87°C of the suspension was maintained for 1 hour. Then the alkaline extract was transferred to a microfiltration unit with a pore diameter of 0.45 μm (process pressure 3 bar), after maximum concentration, it was washed with osmotic water 5 times up to 85% to remove nucleic components to obtain a denucleinized biomass concentrate (DNBM).
ДНБМ из микрофильтрационной установки перегружали в реактор, остатки суспензии смывали с фильтров 40 л осмотической воды. Устанавливали температуру суспензии ДНБМ 42°С, загружали 16 г комплексного ферментного препарата содержащего амилазы, липазы и протеазы. Процесс гидролиза продолжают 1,0 час при постоянной температуре и перемешивании (кратностью циркуляции 30 ч-1).DNBM from the microfiltration unit was loaded into the reactor, the remaining suspension was washed off the filters with 40 L of osmotic water. The temperature of the DNBM suspension was set at 42°C, and 16 g of a complex enzyme preparation containing amylases, lipases, and proteases was loaded. The hydrolysis process is continued for 1.0 hours at a constant temperature and stirring (circulation ratio 30 h -1 ).
Процесс инактивации проводили при температуре 85°С, в течение 30 мин.The inactivation process was carried out at a temperature of 85°C for 30 min.
Полученную суспензии перегружали в установку микрофильтрации с диаметром пор 0,45 мкм (давление процесса 3 бар), после концентрирования промывали 10 л осмотической воды. Полученный концентрат депротеинизированной денуклеинизированной биомассы (ДПДНБМ) смывали с установки 10 л осмотической воды и передали на сушку. Полученный фильтрат (раствор содержащий протеин микробный) также передают на сушку.The resulting suspension was transferred to a microfiltration unit with a pore diameter of 0.45 μm (process pressure 3 bar), after concentration it was washed with 10 l of osmotic water. The resulting concentrate of deproteinized denucleinated biomass (DPDNBM) was washed off the unit with 10 liters of osmotic water and transferred to dryer. The resulting filtrate (a solution containing microbial protein) is also passed for drying.
В результате, после сушки белкового раствора было получено 750 г протеина микробного с содержанием белка 92% и влажностью 5,6% и порошок высушенного концентрата ДПДНБМ 2110 г с содержанием белка 67% и влажностью 5,4%.As a result, after drying the protein solution, 750 g of microbial protein with a protein content of 92% and a moisture content of 5.6% and a powder of the dried DPDNBM concentrate of 2110 g with a protein content of 67% and a moisture content of 5.4% were obtained.
Пример 2Example 2
Осуществление процесса получения микробного протеина осуществляли аналогично примеру 1, но с другими режимами.The implementation of the process of obtaining microbial protein was carried out analogously to example 1, but with other modes.
Брали нативную биомассу объемом 35 л (СВ 12%).We took native biomass with a volume of 35 l (CB 12%).
Серной кислотой (48 %) доводили до рН 3,5.Sulfuric acid (48%) was adjusted to pH 3.5.
Суспензию нагревали при постоянном перемешивании кратностью циркуляции 40 ч-1.The suspension was heated with constant stirring at a circulation rate of 40 h -1 .
При достижении температуры 85°С, в суспензию добавляли щелочной раствор (гидроксида аммиака) до рН 9,5, повышали температуру 85°С и поддерживали 2 час. When the temperature reached 85°C, an alkaline solution (ammonia hydroxide) was added to the suspension to pH 9.5, the temperature was raised to 85°C and maintained for 2 hours.
Щелочной экстракт перегружали в установку микрофильтрации с диаметром пор 0,45 мкм (давление процесса 5 бар).The alkaline extract was transferred to a microfiltration unit with a pore diameter of 0.45 μm (process pressure 5 bar).
После максимального концентрирования промывали осмотической водой 6 раз до 93% удаления нуклеиновых компонентов с получением концентрата денуклеинизированной биомассы (ДНБМ).After maximum concentration, it was washed with osmotic water 6 times to 93% removal of nucleic components to obtain a denucleinized biomass concentrate (DNBM).
ДНБМ из микрофильтрационной установки перегружали в реактор, остатки суспензии смывали с фильтров 40 л осмотической воды. Устанавливали температуру суспензии ДНБМ 37°С, загружали 12 г комплексного ферментного препарата содержащего амилазы, липазы и протеазы. Гидролиз вели 30 мин. DNBM from the microfiltration unit was loaded into the reactor, the remaining suspension was washed off the filters with 40 L of osmotic water. The temperature of the DNBM suspension was set at 37°C, and 12 g of a complex enzyme preparation containing amylases, lipases, and proteases was loaded. Hydrolysis was carried out for 30 min.
Процесс инактивации проводили при температуре 91°С, в течение 60 мин.The inactivation process was carried out at a temperature of 91°C for 60 min.
Полученную суспензии перегружали в установку микрофильтрации. После сушки концентрата ДПДНБМ и фильтрата было получено 650 г протеина микробного с содержанием белка 93% и влажностью 5,2% и порошок 2016 г ДПДНБМ с содержанием белка 66% и влажностью 5,0%.The resulting suspension was transferred to a microfiltration unit. After drying the DPDNBM concentrate and filtrate, 650 g of microbial protein with a protein content of 93% and a moisture content of 5.2% and a 2016 DPDNBM powder with a protein content of 66% and a moisture content of 5.0% were obtained.
Пример 3Example 3
Пример осуществляли аналогично примеру 1 и 2.The example was carried out analogously to example 1 and 2.
Объем нативной биомассы 42 л (СВ 10,5%).The volume of native biomass is 42 l (DM 10.5%).
Серной кислотой (45%) доводили до рН 3,3.Sulfuric acid (45%) was adjusted to pH 3.3.
Полученную суспензию нагревали при постоянном перемешивании кратностью циркуляции 45 ч-1.The resulting suspension was heated with constant stirring at a circulation rate of 45 h -1 .
При достижении температуры 80°С, в суспензию добавляли щелочной раствор (гидроксида натрия) до рН 9,0.When the temperature reached 80°C, an alkaline solution (sodium hydroxide) was added to the suspension until pH 9.0.
Температуру 95°С суспензии поддерживали 1,5 часа.The temperature of 95°C suspension was maintained for 1.5 hours.
ДНБМ из микрофильтрационной установки перегружали в реактор, остатки суспензии смывают с фильтров 40 л осмотической воды. Устанавливали температуру суспензии ДНБМ 38°С, загружали 17 г комплексного ферментного препарата содержащего амилазы, липазы и протеазы, процесс гидролиза продолжают 40 мин при постоянной температуре и перемешивании (кратностью циркуляции 35 ч-1).DNBM from the microfiltration plant was loaded into the reactor, the remaining suspension is washed off the filters with 40 liters of osmotic water. The temperature of the DNBM suspension was set at 38°C, 17 g of a complex enzyme preparation containing amylase, lipase and protease was loaded, the hydrolysis process was continued for 40 min at a constant temperature and stirring (circulation ratio of 35 h -1 ).
Процесс инактивации проводили при температуре 95°С, в течение 45 мин.The inactivation process was carried out at a temperature of 95°C for 45 min.
Полученную суспензии перегружают в установку микрофильтрации с диаметром пор 0,01 мкм (давление процесса 4 бар), после концентрирования промывают 10 л осмотической воды. Полученный концентрат ДПДНБМ смывали с установки 10 л осмотической воды и передали на сушку.The resulting suspension is transferred to a microfiltration unit with a pore diameter of 0.01 μm (process pressure 4 bar), after concentration, washed with 10 l of osmotic water. The resulting DPDNBM concentrate was washed off the unit with 10 l of osmotic water and transferred to drying.
Полученный фильтрат (раствор содержащий протеин микробный) также сушили.The resulting filtrate (solution containing microbial protein) was also dried.
Было получено 790 г протеина микробного с содержанием белка 94% и влажностью 4,9% и порошок 2120 г ДПДНБМ с содержанием белка 66% и влажностью 5,0%.790 g of microbial protein with a protein content of 94% and a moisture content of 4.9% and a powder of 2120 g of DPDNBM with a protein content of 66% and a moisture content of 5.0% were obtained.
%protein content,
%
%Moisture contents,
%
Как видно из приведенных примеров, способ получения протеина микробного ферментативным методом позволяет получать продукт с содержанием белка не менее 88% из микробной биомассы, которая в отличие от растительного сырья не содержит пестицидов и антипитательных веществ.As can be seen from the above examples, the method of obtaining protein by the microbial enzymatic method makes it possible to obtain a product with a protein content of at least 88% from microbial biomass, which, unlike plant raw materials, does not contain pesticides and anti-nutrients.
Claims (5)
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2781287C1 true RU2781287C1 (en) | 2022-10-11 |
Family
ID=
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4627983A (en) * | 1981-11-05 | 1986-12-09 | Hoechst Aktiengesellschaft | Functional protein hydrolyzates, a process for their preparation, use of these protein hydrolyzates as a food additive, and foods containing these protein hydrolyzated |
| CN102696856A (en) * | 2012-04-18 | 2012-10-03 | 马长庆 | Microbial protein hydrolysate and preparation method and application thereof |
| RU2687135C1 (en) * | 2018-10-02 | 2019-05-07 | Общество с ограниченной ответственностью "ГИПРОБИОСИНТЕЗ" | Strain of heterotrophic bacteria cupriavidus gilardii - associate for producing microbial protein mass |
| RU2720121C1 (en) * | 2019-10-29 | 2020-04-24 | Ооо "Гипробиосинтез" | Method of producing microbial protein based on hydrocarbon material |
| WO2021055366A1 (en) * | 2019-09-16 | 2021-03-25 | Kiverdi, Inc. | Microbial protein hydrolysate compositions and methods of making same |
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4627983A (en) * | 1981-11-05 | 1986-12-09 | Hoechst Aktiengesellschaft | Functional protein hydrolyzates, a process for their preparation, use of these protein hydrolyzates as a food additive, and foods containing these protein hydrolyzated |
| CN102696856A (en) * | 2012-04-18 | 2012-10-03 | 马长庆 | Microbial protein hydrolysate and preparation method and application thereof |
| RU2687135C1 (en) * | 2018-10-02 | 2019-05-07 | Общество с ограниченной ответственностью "ГИПРОБИОСИНТЕЗ" | Strain of heterotrophic bacteria cupriavidus gilardii - associate for producing microbial protein mass |
| WO2021055366A1 (en) * | 2019-09-16 | 2021-03-25 | Kiverdi, Inc. | Microbial protein hydrolysate compositions and methods of making same |
| RU2720121C1 (en) * | 2019-10-29 | 2020-04-24 | Ооо "Гипробиосинтез" | Method of producing microbial protein based on hydrocarbon material |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ТИМОШЕНКО К.А. и др., Получение денуклеинизированной биомассы и фрагментов ДНК и РНК путем глубокой переработки биомассы бактерий Methylococcus capculatus штамма ГБС 15, Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии, ООО Издательский дом Русский врач, N 8, т. 20, 2017, с. 3-5. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3466189B2 (en) | Rice bran stabilization method and rice bran product | |
| RU2613493C2 (en) | Method of production of protein-vitamin additive of starch-containing grain raw material | |
| CN109251954B (en) | Production method of sea cucumber polypeptide | |
| US5891708A (en) | Nutrient composition resulting from maize steeping | |
| CN104011211A (en) | Mutant xylanase, manufacturing method and use therefor, and method for manufacturing saccharified lignocellulose | |
| Thakur et al. | Solid state fermentation of overheated soybean meal (waste) for production of protease using Aspergillus oryzae | |
| CN103243143A (en) | Method for extracting hydrolyzed collagen by using bone meal | |
| JP4693412B2 (en) | Method for recovering peptides / amino acids and oils / fat from raw materials containing one or more proteins, products produced by the method, and use of the products | |
| CN101869169A (en) | Method for preparing fish oligopeptide from gurry by combining fermentation and membrane technology | |
| CN104707128B (en) | Method for preparing anti-oxidation active liquid by performing enzymatic hydrolysis on soft-shelled turtle eggs | |
| RU2781287C1 (en) | Method for obtaining microbial protein from microbial biomass of a producer of methane-oxidizing bacteria by an enzymatic method | |
| CN106987611A (en) | A kind of method that microwave radiation technology prepares leaf of Moringa polypeptide with membrane filtration | |
| CN103276038A (en) | Method for producing reagent grade peptone | |
| US20230240329A1 (en) | System and method for producing byproducts from spent grains | |
| CN108191991A (en) | A kind of method of purification of Polysaccharide in Pleurotus eryngii | |
| US4766070A (en) | Fermentation process and substrate | |
| RU2261915C2 (en) | Method for preparing calcium citrate | |
| RU2612152C2 (en) | Method of producing lactic acid | |
| SU884574A3 (en) | Method of preparing protein from microorganism suspension | |
| RU2534355C1 (en) | Method of production of hydrolyzate from fruit and skin of bananas as growth stimulator for cultivation of leptospira | |
| RU2225122C2 (en) | Method for producing of hydrolyzed milk | |
| JPH0646823A (en) | Method for producing lactic acid and amino acid mineral liquid from fermented food lees | |
| RU2298940C2 (en) | Method for production of protein hydrolyzate | |
| JPS581900B2 (en) | Method for producing white seasoning liquid | |
| SU1500671A1 (en) | Method of producing alcohol and fodder |