RU2779981C1 - Гидроксамовые кислоты, производные 4-аминохиназолин-7-карбоновой кислоты как ингибиторы гистондеацетилазы и способ их получения - Google Patents
Гидроксамовые кислоты, производные 4-аминохиназолин-7-карбоновой кислоты как ингибиторы гистондеацетилазы и способ их получения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2779981C1 RU2779981C1 RU2021123597A RU2021123597A RU2779981C1 RU 2779981 C1 RU2779981 C1 RU 2779981C1 RU 2021123597 A RU2021123597 A RU 2021123597A RU 2021123597 A RU2021123597 A RU 2021123597A RU 2779981 C1 RU2779981 C1 RU 2779981C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- derivatives
- methyl
- aminoquinazoline
- carboxylic acid
- quinazoline
- Prior art date
Links
- 102000003964 Histone deacetylases Human genes 0.000 title claims abstract description 21
- 108090000353 Histone deacetylases Proteins 0.000 title claims abstract description 21
- 239000002253 acid Substances 0.000 title claims abstract description 20
- LLWPSTZOWBGKFK-UHFFFAOYSA-N 4-aminoquinazoline-7-carboxylic acid Chemical class OC(=O)C1=CC=C2C(N)=NC=NC2=C1 LLWPSTZOWBGKFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 16
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 title claims abstract description 14
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 title claims abstract description 13
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title claims abstract description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 title claims description 12
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 title description 10
- 230000002194 synthesizing Effects 0.000 title description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 48
- -1 derivatives of methyl 4-((phenyl)amino)quinazoline-7-carboxylates Chemical class 0.000 claims abstract description 33
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- GQHTUMJGOHRCHB-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,6,7,8,9,10-octahydropyrimido[1,2-a]azepine Chemical compound C1CCCCN2CCCN=C21 GQHTUMJGOHRCHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N Phosphoryl chloride Chemical compound ClP(Cl)(Cl)=O XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- JKEKMBGUVUKMQB-UHFFFAOYSA-N [benzotriazol-1-yloxy(dimethylamino)methylidene]-dimethylazanium;tetrafluoroborate Chemical compound F[B-](F)(F)F.C1=CC=C2N(OC(N(C)C)=[N+](C)C)N=NC2=C1 JKEKMBGUVUKMQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims abstract description 8
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims abstract description 8
- 230000000875 corresponding Effects 0.000 claims abstract description 6
- BYHDRGRVVXBJIP-UHFFFAOYSA-N methyl 4-chloroquinazoline-7-carboxylate Chemical class ClC1=NC=NC2=CC(C(=O)OC)=CC=C21 BYHDRGRVVXBJIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- RUSVJCCYUALGPZ-UHFFFAOYSA-N methyl 4-oxo-1H-quinazoline-7-carboxylate Chemical class N1C=NC(=O)C=2C1=CC(C(=O)OC)=CC=2 RUSVJCCYUALGPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 229960000583 Acetic Acid Drugs 0.000 claims abstract description 5
- GGSUCNLOZRCGPQ-UHFFFAOYSA-N Diethylaniline Chemical compound CCN(CC)C1=CC=CC=C1 GGSUCNLOZRCGPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 claims abstract description 5
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims abstract description 5
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims abstract description 5
- HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N acetylene Chemical compound C#C HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 238000007098 aminolysis reaction Methods 0.000 claims abstract description 4
- 150000001448 anilines Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims abstract description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 4
- DSSKDXUDARIMTR-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-aminobenzene-1,4-dicarboxylate Chemical class COC(=O)C1=CC=C(C(=O)OC)C(N)=C1 DSSKDXUDARIMTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N hydroxylamine Chemical compound ON AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 claims abstract description 4
- 230000000771 oncological Effects 0.000 claims abstract description 4
- XDOLZJYETYVRKV-UHFFFAOYSA-N 7-aminoheptanoic acid Chemical class NCCCCCCC(O)=O XDOLZJYETYVRKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 206010053643 Neurodegenerative disease Diseases 0.000 claims abstract description 3
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N Trimethylamine Chemical compound CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 238000005904 alkaline hydrolysis reaction Methods 0.000 claims abstract description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 3
- 230000001264 neutralization Effects 0.000 claims abstract description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract 2
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 claims description 2
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 claims description 2
- 230000005591 charge neutralization Effects 0.000 claims description 2
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 claims description 2
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 claims description 2
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 3
- 238000005020 pharmaceutical industry Methods 0.000 abstract description 2
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 abstract 1
- 150000005217 methyl ethers Chemical class 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 9
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 8
- TYHCBIKGTCZFTK-UHFFFAOYSA-N quinazoline-7-carboxamide Chemical compound C1=NC=NC2=CC(C(=O)N)=CC=C21 TYHCBIKGTCZFTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M NaHCO3 Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- JWVCLYRUEFBMGU-UHFFFAOYSA-N Quinazoline Chemical compound N1=CN=CC2=CC=CC=C21 JWVCLYRUEFBMGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N HCl Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WAEXFXRVDQXREF-UHFFFAOYSA-N Vorinostat Chemical compound ONC(=O)CCCCCCC(=O)NC1=CC=CC=C1 WAEXFXRVDQXREF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960000237 Vorinostat Drugs 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003276 histone deacetylase inhibitor Substances 0.000 description 4
- 125000002294 quinazolinyl group Chemical group N1=C(N=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 4
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100007189 HDAC6 Human genes 0.000 description 3
- 101700002249 HDAC6 Proteins 0.000 description 3
- 230000000975 bioactive Effects 0.000 description 3
- 230000001472 cytotoxic Effects 0.000 description 3
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N DMSO-d6 Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 2
- 102100002572 HDAC1 Human genes 0.000 description 2
- 101700036927 HDAC1 Proteins 0.000 description 2
- 108010033040 Histones Proteins 0.000 description 2
- 102000006947 Histones Human genes 0.000 description 2
- WTDHULULXKLSOZ-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine hydrochloride Chemical compound Cl.ON WTDHULULXKLSOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000003543 Lymphoma, T-Cell, Cutaneous Diseases 0.000 description 2
- FWZRWHZDXBDTFK-ZHACJKMWSA-N Panobinostat Chemical compound CC1=NC2=CC=C[CH]C2=C1CCNCC1=CC=C(\C=C\C(=O)NO)C=C1 FWZRWHZDXBDTFK-ZHACJKMWSA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 201000007241 cutaneous T cell lymphoma Diseases 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008079 hexane Substances 0.000 description 2
- 229940121372 histone deacetylase inhibitors Drugs 0.000 description 2
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- NTNPIJPZPRBNDW-UHFFFAOYSA-N methyl 4-(3-ethynylanilino)quinazoline-7-carboxylate;hydrochloride Chemical compound Cl.N=1C=NC2=CC(C(=O)OC)=CC=C2C=1NC1=CC=CC(C#C)=C1 NTNPIJPZPRBNDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000005962 mycosis fungoide Diseases 0.000 description 2
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 2
- 229960005184 panobinostat Drugs 0.000 description 2
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NNKQLUVBPJEUOR-UHFFFAOYSA-N 3-ethynylaniline Chemical compound NC1=CC=CC(C#C)=C1 NNKQLUVBPJEUOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004676 ANTITHROMBOTIC AGENTS Drugs 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- 108010077544 Chromatin Proteins 0.000 description 1
- 210000003483 Chromatin Anatomy 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N N'-amino-N-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- DTERQYGMUDWYAZ-ZETCQYMHSA-N N(6)-acetyl-L-lysine zwitterion Chemical compound CC(=O)NCCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O DTERQYGMUDWYAZ-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N Ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)C CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- NCNRHFGMJRPRSK-MDZDMXLPSA-N belinostat Chemical compound ONC(=O)\C=C\C1=CC=CC(S(=O)(=O)NC=2C=CC=CC=2)=C1 NCNRHFGMJRPRSK-MDZDMXLPSA-N 0.000 description 1
- 229960003094 belinostat Drugs 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional Effects 0.000 description 1
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking Effects 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000024881 catalytic activity Effects 0.000 description 1
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N deuterium Chemical compound [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- BYLKMWOSPVNYPL-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-amino-5-bromobenzene-1,4-dicarboxylate Chemical compound COC(=O)C1=CC(Br)=C(C(=O)OC)C=C1N BYLKMWOSPVNYPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000000132 electrospray ionisation Methods 0.000 description 1
- 238000000119 electrospray ionisation mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 230000001973 epigenetic Effects 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- YSLDOTFAFZJPOC-UHFFFAOYSA-N hydron;methyl 6-aminohexanoate;chloride Chemical compound Cl.COC(=O)CCCCCN YSLDOTFAFZJPOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 201000005296 lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- SRGSZEVWWPMFLC-UHFFFAOYSA-N methyl 4-(3-ethynylanilino)quinazoline-7-carboxylate Chemical compound N=1C=NC2=CC(C(=O)OC)=CC=C2C=1NC1=CC=CC(C#C)=C1 SRGSZEVWWPMFLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000009251 multiple myeloma Diseases 0.000 description 1
- 239000005445 natural product Substances 0.000 description 1
- 230000000626 neurodegenerative Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical Effects 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N oxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 150000003246 quinazolines Chemical class 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 230000014493 regulation of gene expression Effects 0.000 description 1
- 102220240796 rs553605556 Human genes 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cells Anatomy 0.000 description 1
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 1
- PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N zinc dication Chemical compound [Zn+2] PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004572 zinc-binding Effects 0.000 description 1
- 108010088577 zinc-binding protein Proteins 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к производным 4-аминохиназолин-7-карбоновой кислоты, и касается непосредственно новых производных 4-аминохиназолин-7-карбоновой кислоты, имеющих в составе гидроксамовую кислоту, которые могут использоваться в медицине для лечения ряда заболеваний посредством ингибирования гистоновых деацетилаз, например при лечении онкологических и нейродегенеративных заболеваний. Предлагаются новые гидроксамовые кислоты, производные 4-аминохиназолин-7-карбоновой кислоты в качестве ингибиторов гистондеацетилаз, имеющие следующую общую формулу I, в которой R1 R2, R3 R4 независимо друг от друга представляют собой водород, галоген, метил, ОМе, этин, а также R2, R3=-ОСН2СН2О-; R5 представляет собой водород или галоген; n=4, 5. Также предлагается способ получения новых гидроксамовых кислот, производных 4-аминохиназолин-7-карбоновой кислоты, общей формулы I, осуществляемый по следующей схеме: производные метил 4-гидроксихиназолин-7-карбоксилата, получаемые циклизацией производных диметил-2-аминотерефталата в формамиде взаимодействием с фосфорилхлоридом в присутствии диэтиланилина, переводятся в производные метил 4-хлорхиназолин-7-карбоксилата, которые при взаимодействии с замещенными анилинами в диметилфорамиде при комнатной температуре превращаются в производные метил 4-((фенил)амино)хиназолин-7-карбоксилатов, последние подвергаются щелочному гидролизу, превращаясь в соответствующие производные 4-[(арил)амино]хиназолин-7-карбоновых кислот, далее к последним присоединяются метиловые эфиры 6-аминогексановой или 7-аминогептановой кислот с использованием 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилуроний тетрафторбората (TBTU) в качестве конденсирующего агента и триметиламина в качестве основания, полученные соединения затем подвергают аминолизу 10-кратным мольным избытком гидроксиламина в безводном метаноле в присутствии 3-х эквивалентов 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ена (DBU), осуществляемому при комнатной температуре в течение 20-26 часов до образования целевого продукта, выделяемого упариванием реакционной массы в вакууме, нейтрализацией ледяной уксусной кислотой до рН 5, фильтрацией с последующей промывкой водой. Способ получения новых гидроксамовых кислот, производных 4-аминохиназолин-7-карбоновой кислоты, характеризуется низкой трудоемкостью процесса, доступностью реагентов и получением целевых соединений с чистотой, удовлетворяющей требованиям фармацевтической промышленности, и благодаря простоте проводимых операций и применяемого оборудования легко масштабируем до промышленного производства.
2 н. и 1 з.п. ф-лы, 7 табл., 10 пр.
Description
Настоящее изобретение относится к производным 4-аминохиназолин-7-карбоновой кислоты и касается непосредственно новых производных 4-аминохиназолин-7-карбоновой кислоты, имеющих в составе гидроксамовую кислоту, которые могут использоваться в медицине для лечения ряда заболеваний посредством ингибирования гистоновых деацетилаз, например, при лечении онкологических и нейродегенеративных заболеваний.
Как известно, гистондеацетилазы (HDAC) - это ферменты, катализирующие удаление ацетильной группы ε-N-ацетил-лизина гистонов. HDAC играют важную роль в регуляции экспрессии генов, так как они модифицируют гистоны и изменяют конформацию хроматина. Поэтому HDAC является важной эпигенетической мишенью при терапии рака, а ингибиторы HDAC демонстрируют успешную картину как цитотоксические агенты. Большинство ингибиторов HDAC имеют трехкомпонентную структуру, состоящую из цинк-связывающего участка, линкера, способного занимать канал фермента, и фрагмента, взаимодействующего с аминокислотными остатками у входа в активный центр HDAC. Ингибиторы классических деацетилаз функционируют путем связывания иона цинка в активном центре фермента и, таким образом, инактивируют систему смены зарядов. [Eckschlager, Т.; Plch, J.; Stiborova, М.; Hrabeta, J. Histone Deacetylase Inhibitors as Anticancer Drugs. Int. J. Mol. Sci. 2017, 18, 1414.]
Известно, что эффективными ингибиторами гистондеацетилаз (HDAC) являются производные гидроксамовой кислоты, например вориностат (SAHA), панобиностат (LBH589) и белиностат. ни одобрены FDA USA для лечения Т-клеточной лимфомы кожи (CTCL) и множественной миеломы [Mottamal М, et al. Molecules. 2015; 20(3): 898-941].
Одной из перспективных стратегий в создании новых фармацевтических препаратов в настоящее время является проектирование и синтез гибридных соединений, состоящих из двух или более различных биоактивных фрагментов, и действующих через активацию/блокирование нескольких мишеней. Совмещение двух активных групп в одной молекуле может приводить к более выраженному терапевтическому эффекту, по сравнению с индивидуальными компонентами при комбинированном применении.
Известно, что хиназолин является важным биоактивным фармакологическим фрагментом. Хиназолиновый цикл присутствует как в различных природных соединениях, так и в молекулах многих лекарственных препаратов. Объединение в одной молекуле хиназолиновой и гидроксамовой фармакофорных групп позволяет создавать новые перспективные биоактивные соединения, что подтверждается многочисленными примерами [Osipov V.N., Khachatryan D.S., Balaev A.N. Biologically active quinazoline-based hydroxamic acids. Med Chem Res (2020)].
Патентные публикации [WO 009063054, A61K 1/517, 2009; WO 008033749, A61K 1/517, 2008; WO 018005799, A61K 1/517, 2018; US 008221132, A61K 1/517, 2008; KR 01964810, A61K 1/517, 2019; US 2018098990, A61K 1/517, 2018] каждая, раскрывают ряд соединений, содержащих хиназолиновый цикл и гидроксамовую кислоту, применяемых в качестве бифункциональных ингибиторов тирозинкиназ и гистондеацетилаз.
Одним из возможных направлений присоединения гидроксаматной группы к прозводному хиназолина является 7-е положение хиназолинового цикла.
Известны примеры присоединения гидроксамовой кислоты с помощью линкера через кислород по 7-му положению хиназолинового цикла. Описанные в патентах [US 008221132, A61K 1/40, 2008; US 015284340, C07D 39/94] соединения, заявленны как ингибиторы гистондеацетилаз:
где R1=H, R2=3-этинил; R1=3-С1, R2=4-F; n=3-5
Известные примеры подобных соединений, заявленных как ингибиторы гистондеацетилаз, представлены в патенте [US 2019322643, А61Р 35/00]:
Известны примеры присоединения углеводородного линкера по 7-му положению хиназолинового цикла, описанные в патентах [US 2013267542, A61K 31/517; US 2015196563; RU 2629947, C07D 239/90]:
Известен пример производных амидов производных 4-аминохиназолин-7-карбоновой кислоты, заявленных как антитромботические средства в патенте [US 2009181958, A61K 31/47]:
Однако, гидроксамовые кислоты, производные 4-аминохиназолин-7-карбоновой кислоты неизвестны, как и неизвестны способы присоединения гидроксаматной функции через амидную группу в 7-м положении хиназолинового цикла.
Целью предлагаемого изобретения является расширение ассортимента эффективных препаратов, которые могут использоваться в качестве ингибиторов гистондеацетилаз различных изоформ и применяться для лечения онкологических, нейродегенеративных и других заболеваний, а также описание эффективного и промышленно-осуществимого способа получения таких препаратов.
С этой целью предлагаются новые гидроксамовые кислоты, производные 4-аминохиназолин-7-карбоновой кислоты в качестве ингибиторов гистондеацетилаз, имеющие следующую общую формулу:
Формула I
где R1, R2, R3 R4 независимо друг от друга представляют собой водород, галоген, метил, ОМе, этин, а также R2, R3=-ОСН2СН2О-; R5 представляет собой водород или галоген; п=4, 5.
Также заявляется способ получения новых гидроксамовых кислот, производных 4-аминохиназолин-7-карбоновой кислоты, общей формулы I, осуществляемый по следующей схеме: производные метил 4-гидроксихиназолин-7-карбоксилата, получаемые циклизацией производных диметил-2-аминотерефталата в формамиде, взаимодействием с фосфорилхлоридом в присутствии диэтиланилина переводятся в производные метил 4-хлорхиназолин-7-карбоксилата. которые при взаимодействии с замещенными анилинами в диметилфорамиде при комнатной температуре превращаются в производные метил 4-((фенил)амино)хиназолин-7-карбоксилатов, последние подвергаются щелочному гидролизу превращаясь в соответствующие производные 4-[(арил)амино]хиназолин-7-карбоновых кислот, далее к последним присоединяются метиловые эфиры 6-аминогексановой или 7-аминогептановой кислот с использованием 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилуроний тетрафторбората (TBTU) в качестве конденсирующего агента и триметиламина в качестве основания, полученные соединения затем подвергают аминолизу 10-ти кратным мольным избытком гидроксиламина в безводном метаноле в присутствии 3-х эквивалентов 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ена (DBU), осуществляемому при комнатной температуре в течение 20-26 часов до образования целевого продукта, выделяемого упариванием реакционной массы в вакууме, нейтрализацией ледяной уксусной кислотой до рН 5, фильтрацией с последующей промывкой водой.
Предлагаемый способ иллюстрируется следующей схемой:
Предлагаемым способом синтезированы, в частности, следующие новые соединения:
N-(6-(гидроксиамино)-6-оксогексил)-4-((4-метоксифенил)амино)хиназолин-7-карбоксамид (соединение 6-1).
N-(7-(гидроксиамино)-7-оксогептил)-4-((4-метоксифенил)амино)хиназолин-7-карбоксамид (соединение 6-2).
N-(6-(гидроксиамино)-6-оксогексил)-4-((3-метоксифенил)амино)хиназолин-7-карбоксамид (соединение 6-3).
N-(7-(гидроксиамино)-7-оксогептил)-4-((3-метоксифенил)амино)хиназолин-7-карбоксамид (соединение 6-4).
N-(6-(гидроксиамино)-6-оксогексил)-4-((3,4-диметоксифенил)амино)хиназолин-7-карбоксамид (соединение 6-5).
N-(7-(гидроксиамино)-7-оксогептил)-4-((3,4-диметоксифенил)амино)хиназолин-7-карбоксамид (соединение 6-6).
N-(6-(гидроксиамино)-6-оксогексил)-4-((3,5-диметилфенил)амино)хиназолин-7-карбоксамид (соединение 6-7).
N-(7-(гидроксиамино)-7-оксогептил)-4-((3,5-диметилфенил)амино)хиназолин-7-карбоксамид (соединение 6-8).
N-(6-(гидроксиамино)-6-оксогексил)-4-((3-этинилфенил)амино)хиназолин-7-карбоксамид (соединение 6-9).
N-(7-(гидроксиамино)-7-оксогептил)-4-((3-этинилфенил)амино)хиназолин-7-карбоксамид (соединение 6-10).
N-(7-(гидроксиамино)-7-оксогептил)-4-((2,3-Дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)амино)хиназолин-7-карбоксамид (соединение 6-11).
4-((4-бром-2-фторфенил)амино)-N-(6-(гидроксиамино)-6-оксогексил)хиназолин-7-карбоксамид (соединение 6-12).
4-((4-бром-2-фторфенил)амино)-N-(7-(гидроксиамино)-7-оксогептил)хиназолин-7-карбоксамид (соединение 6-13).
N-(6-(гидроксиамино)-6-оксогексил)-4-((3-хлор-4-фторфенил)амино)хиназолин-7-карбоксамид (соединение 6-14).
N-(7-(гидроксиамино)-7-оксогептил)-4-((3-хлор-4-фторфенил)амино)хиназолин-7-карбоксамид (соединение 6-15).
6-Бром-N-[-(6-(гидроксиамино)-6-оксогексил)-4-((3-метоксифенил)амино)хиназолин-7-карбоксамид (соединение 6-16).
N-(7-(гидроксиамино)-7-оксогептил)-4-((3-хлор-4-фторфенил)амино)хиназолин-7-карбоксамид (соединение 6-17).
Заявляемый способ получения новых гидроксамовых кислот, производных 4-аминохиназолин-7-карбоновой кислоты, осуществляется в простых условиях, имеет низкую трудоемкостью процесса, доступность реагентов. Заявляемый способ получения новых гидроксамовых кислот, производных 4-аминохиназолин-7-карбоновой кислоты, также заявляемый способ обеспечивает получение целевых соединений с чистотой, удовлетворяющей требованиям фармацевтической промышленности.
Применяемые аналитические методы и оборудование.
Аналитическую ВЭЖХ проводили на хроматографе фирмы Shimadzu. Колонка: Grom-Sil 12J ODS-4HE, 5 мкм, 250x4.6 мм. Условия: линейный градиент АВ: 5% В (0 мин) 100% В (20 мин). А - 0.01% ТФУ в воде, В - 0.01% ТФУ в ацетонитриле. Спектры ESI-MS регистрировали на приборе "Agilent LC/MS 1200" при ионизации пробы электрораспылением в режиме регистрации положительных ионов. Пробы готовили в системе ацетонитрил/вода 1/1, концентрация 2 мг/мл. Условия анализа: поток 1 мл/мин, давление на нибулайзере 20 psi, температура 360°, скорость потока осушающего газа 9 л/мин, напряжение 3500 В, целевая масса от 100 до 2000. Температуру плавления определяли на приборе марки "Melting Point М-565" (BUCHI). Спектры ЯМР 1Н получены на Фурье ЯМР-спектрометре Bruker AVANCE III NanoBay 300 МГц (для 1Н-ЯМР). Спектры регистрировали в режиме стабилизации по дейтерию, термостабилизация 25°С, внутренний стандарт - тетраметилсилан) в ДМСО-d6. Химические сдвиги приведены в миллионных долях (δ), КССВ - в герцах. ТСХ проводили на пластинах Merck TLC Silica gel 60 F254, проявление в УФ и нингидрином.
Ниже приводятся примеры осуществления изобретения.
Пример 1
Синтез метил 4-гидроксихиназолин-7-карбоксилата (соединение 1-1).
В конической колбе объемом 250 мл, снабженной обратным холодильником, растворяют 20.9 г (0.10 моля) диметилового эфира 2-аминотерефталевой кислоты в 100 мл формамида и перемешивают 5 часов при 150°С. Реакционную смесь выливают в 300 мл воды со льдом, 10%-ным раствором гидрокарбоната натрия доводят рН раствора до 8. Отфильтровывают осадок, промывают 50 мл воды, сушат на воздухе. Получают 20.0 г (98.1%) белого порошка. Т. пл. 270-272°С. 1Н ЯМР (ДМСО-d6, δ м. д., J, Гц) 12.42 (с, 1Н), 8.18 (д, J=8.3, 1Н), 8.15 (с, 1Н), 8.08 (д, J=1.6, 1H), 7.94 (дд, J=8.3, 1.7, 1Н), 3.90 (с, 3Н). Содержание основного продукта по данным ВЭЖХ 99.8%, ESI-MS, m/z 205.2 [М+Н]+. Найдено, %: С, 58.72; Н, 3.91; N, 13.44. C10H8N2O3. Вычислено, %: С, 58.82; Н, 3.92; N, 13.72.
Пример 2
Синтез метил 6-бром-4-гидроксихиназолин-7-карбоксилата (соединение 1-2).
Получают аналогично Примеру 1 из 28.8 г (0.10 моля) диметилового эфира 2-амино-5-бромтерефталевой кислоты. Выход 27.3 г (96.5%), светло-желтый порошок. Т. пл. 228-230°С. 1Н ЯМР (ДМСО-d6, δ м. д., J, Гц) 12.58 (с, 2Н), 8.30 (с, 1H), 8.19 (с, 1Н), 7.96 (с, 1Н), 3.91 (с, 3Н). Содержание основного продукта по данным ВЭЖХ 98.2%, ESI-MS, m/z 282.2 [М+Н]+. Найдено, %: С, 42.12; Н, 2.21; N, 9.49. C10H7BrN2O3. Вычислено, %: С, 42.43; Н, 2.49; N,9.90.
Пример 3
Синтез метил 4-хлорхиназолин-7-карбоксилата (соединение 2-1).
К суспензии метил-4-гидроксихиназолин-7-карбоксилата 1 (4.3 г, 21 ммоль) в 80 мл толуола добавляют диэтиланилин (6.8 мл, 53 ммоль) и затем приливают фосфорилхлорид (4.9 мл, 53 ммоль). Суспензию кипятят 3.5 часа, охлаждают, промывают 50 мл воды, 3×50 мл 8%-ной соляной кислотой, 50 мл воды. Органический слой упаривают в вакууме, кристаллический остаток переносят на фильтр и промывают 2×25 мл гексана, сушат на воздухе. Выход 3.9 г (83.5%), светло-бежевые кристаллы, содержание основного продукта по ВЭЖХ 94.6%. ESI-MS, m/z 223.1 [М+Н]+
Пример 4
Синтез метил 5-бром-4-хлорхиназолин-7-карбоксилата (соединение 2-2).
К суспензии метил 6-бром-гидроксихиназолин-7-карбоксилата 1 (5.7 г, 20 ммоль) в 80 мл толуола добавляют диэтиланилин (6.8 мл, 53 ммоль) и затем приливают фосфорилхлорид (4.9 мл, 53 ммоль). Суспензию кипятят 3.5 часа, охлаждают, промывают 50 мл воды, 3×50 мл 8%-ной соляной кислотой, 50 мл воды. Органический слой упаривают в вакууме, кристаллический остаток переносят на фильтр и промывают 2×25 мл гексана, сушат на воздухе. Выход 4.94 г (82.2%), бежевые кристаллы, содержание основного продукта по ВЭЖХ 95.2%. ESI-MS, m/z 300.7 [М+Н]+
Пример 5
Синтез метил 4-((3-этинилфенил)амино)хиназолин-7-карбоксилата хлоргидрата (соединение 3-4)
К суспензии метил-4-хлорхиназолин-7-карбоксилата (445 мг, 2 ммоль) в 5.5 мл ДМФА добавляют 3-этиниланилина (258 мг, 2.2 моль) и перемешивают 3.5 часа при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляют 10 мл воды, выпавшие кристаллы отфильтровывают, промывают водой и сушат на воздухе. Выход 530 мг (87.5%), Т. пл. 209.5-210.5°С. 1Н ЯМР (ДМСО-d6, δ м. д., J, Гц) 11.97 (уш.с.1 Н) 9.10 (д, J=8.71, 1Н) 9.03 (с, 1Н) 8.50 (д, J=1.47, 1Н) 8.26 (дд, J=8.71, 1.56, 1H) 7.93 (m, J=1.56, 1Н) 7.77-7.86 (м, 1H) 7.52 (m, J=7.79, 1H) 7.44 (дт, J=7.70, 1.17, 1Н) 4.32 (с, 1Н) 3.97 (с, 3Н). Содержание основного по ВЭЖХ 98.8%. ESI-MS: m/z 304.2 [М+Н]+.
По аналогичной методике получают другие производные метил 4-((фенил)амино)хиназолин-7-карбоксилатов из соответствующих замещенных анилинов (соединения 3-1-3-10) (Таблица 1)
Пример 6
Синтез 4-((3-этинилфенил)амино)хиназолин-7-карбоновой кислоты (соединение 4-5)
К раствору метил 4-((3-этинилфенил)амино)хиназолин-7-карбоксилата (530 мг 1.75 ммоль) в 10 мл метанола добавляют раствор гидроксида натрия (0.21 г, 5.25 ммоль) в 5 мл воды и перемешивают 2.5 часа при 100°С. Реакционную смесь охлаждают, нейтрализуют ледяной уксусной кислотой (0.42 мл, 7 ммоль), добавляют 10 мл воды, выпавшие кристаллы отфильтровывают, промывают 2×5 мл воды и сушат на воздухе. Выход 435 мг (77%), белый порошок. Чистота по ВЭЖХ 98.7% ESI-MS: m/z 290.2 [М+Н]+
По аналогичной методике получают другие производные 4-[(арил)амино]хиназолин-7-карбоновых кислот (соединения 4-1 - 4-10) (Таблица 2)
Пример 7
Синтез метил 6-(4-((3-этинилфенил)амино)хиназолин-7-карбоксамидо)гексаноата
К суспензии соответствующей 4-((3-этинилфенил)амино)хиназолин-7-карбоновой кислоты 530 мг (0.75 ммоль) в 5 мл ДМФА добавляют TBTU 321 мг (1 ммоль), гидрохлорида метилового эфира 6-аминогексановой кислоты 150 мг (0.83 ммоль), затем добавляют триэтиламин 230 мг (4 ммоль) и перемешивают 3 часа при комнатной температуре. К реакционной смеси добавляют 10 мл воды, выпавшие кристаллы отфильтровывают, промывают 2×5 мл воды и сушат на воздухе. Выход 275 мг (88%), содержание основного продукта по ВЭЖХ 96.9%. ESI-MS: m/z 417.4 [М+Н]+.
По аналогичной методике получают другие производные метил ω-(4-(ариламино)хиназолин-ω-карбоксамидо)алканоатов (соединения 5-1 - 5-16) (Таблица 3).
Пример 8
Синтез 4-((3-этинилфенил)амино)-N-(6-(гидроксиамино)-6-оксогексил)хиназолин-7-карбоксамида (соединение 6-9)
К раствору метил 6-(4-((3-этинилфенил)амино)хиназолин-7-карбоксамидо)гексаноата 417 мг (1 ммоль) в 10 мл метанола добавляют гидрохлорида гидроксиламина 695 мг (10 ммоль) приливают раствор метилата натрия, приготовленный из 230 мг (10 ммоль) натрия и 5 мл метанола и перемешивают 20 минут. Затем к этому раствору добавляют 456 мг (3 ммоль) 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ена и перемешивают при комнатной температуре. Окончание реакции (исчезновение исходного эфира, примерно 24 часа) определяют с помощью тонкослойной хроматографии (элюент хлороформ-метанол 10:1). Реакционную смесь упаривают в вакууме, добавляют 10 мл воды, нейтрализуют ледяной уксусной кислотой до рН 5, выпавшие кристаллы отфильтровывают, промывают 2×10 мл воды и сушат на воздухе. Остаток кристаллизуют из ДМФА/вода. Выход 156 мг (57%), Содержание основного продукта по ВЭЖХ 97.2%. ESI-MS: m/z 418.3 [М+Н]+
По аналогичной методике получают другие целевые соединения, гидроксамовые кислоты, производные 4-аминохиназолин-7-карбоновой кислоты (соединения 6-1 - 6-17) Структуры и физико-химические целевых соединений представлены в таблицах 4 и 5.
Пример 9
Определение цитотоксической активности
Цитотоксическую активность заявляемых соединений определяли с помощью МТТ-теста. Концентрацию полумаксимального ингибирования (IC50) для синтезированных веществ определяли на клетках рака толстой кишки НТО 116, карциномы легкого А549, рака предстательной железы РС-3, рака молочной железы MCF-7, рака почки SN-12
Для проведения исследования клетки опухолевых линий человека были нанесены в 96-луночный культуральный планшет (104 клеток в каждой лунке) и после 24 часов инкубации к клеткам были добавлены методом раститровки различные концентрации 14 исследуемых соединений в диапазоне 100±0.1 мкМ. В качестве контроля сравнения использовали препарат Вориностат (SAHA), являющийся гидроксамовой кислотой. Планшет с внесенными веществами помещали в СО2-инкубатор на 72 часа. После инкубации вносили в каждую лунку по 20 мкл рабочего раствора МТТ. Инкубировали планшет 3 часа в СО2-инкубаторе. После инкубации заменить в каждой лунке среду на 200 мкл ДМСО.
После растворения кристаллов формазана определяли оптическую плотность каждой лунки при 570 нм, вычитали измеренное фоновое поглощение при 620 нм с помощью планшетного фотометра. Значение концентрации, вызывающее 50% ингибирование роста популяции клеток (IC50), определяли на основе дозозависимых кривых и/или с помощью программного обеспечения (например, GraphPad Pricm 5.0 или OriginPro 9.0). Полученные результаты представлены в таблице 6.
Пример 10
Исследование влияния производных гидроксамовых кислот на активность ферментов HDAC1 и HDAC6.
Делают навески исследуемых веществ и приготовляют растворы с исходной концентрацией 5×10-3 М в подходящем растворителе (вода, спирт, ДМСО). Приготовляют стоковые растворы исследуемых веществ в растворителе для получения концентрационной зависимости с учетом того, что конечная концентрация вещества в инкубационной среде меньше в 4 раза (50 мкл раствора вещества в 200 мкл конечного объема пробы). В качестве эталонных веществ использовался известный ингибитор гистондеацетилазы препарат Вориностат (SAHA).
Эксперимент выполнялся в 96-луночном планшете. Добавляют 50 мкл раствора исследуемых соединений в лунки планшета, согласно схеме соответствующего эксперимента.
Фермент HDAC разбавляют с использованием буфера HDAC-Glo™ до желаемой концентрации. Вносят 50 мкл фермента HDAC в каждую лунку 96-луночного планшета, где уже находятся растворы исследуемых соединений, полученные на предыдущей стадии. Оставляют не менее 3-х лунок без HDAC, для формирования буферного фона, не менее 3-х лунок с HDAC и растворителем, для получения максимального сигнала активности фермента.
Содержимое планшета перемешивают при комнатной температуре в течение 30-60 секунд, используя орбитальный шейкер при 500-700 об/мин, чтобы обеспечить однородность.
Смесь фермент/исследуемое вещество инкубируют при комнатной температуре в течение по меньшей мере 30 минут (но не более 2 часов).
Готовят реагент HDAC-Glo™: 10 мл буфера HDAC-Glo™ добавляют к субстрату HDAC-Glo и осторожно перемешивают. Затем в эту смесь добавляют 10 мкл реагента-проявителя и также осторожно перемешивают.
Равный объем реагента HDAC-Glo™ добавляют в каждую лунку планшета (100 мкл для 96-луночного).
Смешивают содержимое ячеек при комнатной температуре в течение 30-60 секунд, используя орбитальный шейкер при 500-700 об/мин, чтобы обеспечить однородность. Затем содержимое инкубируют при комнатной температуре в течение 15-45 минут.
По истечению необходимого времени инкубации измеряют люминесценцию на многофункциональном планшетном анализаторе EnVicion.
Обработка полученных первичных данных, определение IC50
Так как амплитуды кривых могут различаться от повторения к повторению, полученные абсолютные значения хемилюминесценции нормировали для каждого отдельного повторения. За нулевое значение брали минимальное измеренное значение внутри одной серии разведений, за 100% - максимальное достигнутое значение. Нормированные три повторения вместе аппроксимировали кривой у=у(х), задающейся формулой:
где, у - нормированная интенсивность люминесценции, х - десятичный логарифм концентрации исследуемого вещества.
Параметры Bottom, Top, HillSlope и IgIC50 подбираются так, чтобы сумма квадратов отклонений экспериментальных точек от аппроксимирующей кривой была минимальна.
Обработка данных выполнена с использованием пакета GraphPad Prism 6. Полученные значения IC50 приведены в Таблице 7.
Ряд целевых заявляемых соединений обладает цитотоксической активностью в микромолярном диапазоне на различных линиях опухолевых клеток. Активность ряда соединений по отношению ферменту HDAC6 превышает или сравнима с активностью известного ингибитора гистондеацетилазы - Вориностата (SAHA), при этом необходимо отметить высокую селективность всех соединений к ферменту HDAC6 по сравнению с HDAC1.
Claims (13)
1. Гидроксамовые кислоты, производные 4-аминохиназолин-7-карбоновой кислоты общей формулы:
где R1, R2, R3 R4 независимо друг от друга представляют собой водород, галоген, метил, ОМе, этин, а также R2, R3=-ОСН2СН2О-;
R5 представляет собой водород или галоген;
n=4, 5,
которые могут использоваться в качестве ингибиторов гистондеацетилаз различных изоформ и применяться для лечения, в частности, онкологических и нейродегенеративных заболеваний
2. Способ получения гидроксамовых кислот, производных 4-аминохиназолин-7-карбоновой кислоты общей формулы:
где R1, R2, R3 R4 независимо друг от друга представляют собой водород, галоген, метил, ОМе, этин, а также R2, R3=-ОСН2СН2О-;
R5 представляет собой водород или галоген;
n=4, 5,
осуществляемый по следующей схеме: производные метил 4-гидроксихиназолин-7-карбоксилата, получаемые циклизацией производных диметил-2-аминотерефталата в формамиде, взаимодействием с фосфорилхлоридом в присутствии диэтиланилина переводятся в производные метил 4-хлорхиназолин-7-карбоксилата, которые при взаимодействии с замещенными анилинами в диметилфорамиде при комнатной температуре превращаются в производные метил 4-((фенил)амино)хиназолин-7-карбоксилатов, последние подвергаются щелочному гидролизу, превращаясь в соответствующие производные 4-[(арил)амино]хиназолин-7-карбоновых кислот, далее к последним присоединяются метиловые эфиры 6-аминогексановой или 7-аминогептановой кислот с использованием 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилуроний тетрафторбората (TBTU) в качестве конденсирующего агента и триметиламина в качестве основания, полученные соединения затем подвергают аминолизу 10-кратным мольным избытком гидроксиламина в безводном метаноле, осуществляемому при комнатной температуре в течение 20-26 часов до образования целевого продукта, выделяемого упариванием реакционной массы в вакууме, нейтрализацией ледяной уксусной кислотой до рН 5, фильтрацией и с последующей промывкой водой
3. Способ получения по п. 2, осуществляемый с использованием 3-х эквивалентов 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ена (DBU) на стадии аминолиза гидроксиламином.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2779981C1 true RU2779981C1 (ru) | 2022-09-16 |
Family
ID=
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20190134180A (ko) * | 2018-05-25 | 2019-12-04 | 충북대학교 산학협력단 | Hdac 억제제로서 신규한 퀴나졸린-4(3h)-원 기반 하이드록삼산 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물 |
| RU2722694C1 (ru) * | 2019-12-17 | 2020-06-03 | ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ УНИТАРНОЕ ПРЕДПРИЯТИЕ "ИНСТИТУТ ХИМИЧЕСКИХ РЕАКТИВОВ И ОСОБО ЧИСТЫХ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ НАЦИОНАЛЬНОГО ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКОГО ЦЕНТРА "КУРЧАТОВСКИЙ ИНСТИТУТ" (НИЦ "Курчатовский институт - ИРЕА) | Способ получения N-((гидроксиамино)-оксоалкил)-2-(хиназолин-4-иламино)-бензамидов |
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20190134180A (ko) * | 2018-05-25 | 2019-12-04 | 충북대학교 산학협력단 | Hdac 억제제로서 신규한 퀴나졸린-4(3h)-원 기반 하이드록삼산 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물 |
| RU2722694C1 (ru) * | 2019-12-17 | 2020-06-03 | ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ УНИТАРНОЕ ПРЕДПРИЯТИЕ "ИНСТИТУТ ХИМИЧЕСКИХ РЕАКТИВОВ И ОСОБО ЧИСТЫХ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ НАЦИОНАЛЬНОГО ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКОГО ЦЕНТРА "КУРЧАТОВСКИЙ ИНСТИТУТ" (НИЦ "Курчатовский институт - ИРЕА) | Способ получения N-((гидроксиамино)-оксоалкил)-2-(хиназолин-4-иламино)-бензамидов |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Hieu D.T. et al "Quinazoline-Based Hydroxamic Acids: Design, Synthesis, and Evaluation of Histone Deacetylase Inhibitory Effects and Cytotoxicity" Chem. Biodivers. 2018 Jun;15(6):e1800027. * |
| ГИЗАТУЛЛИН А.Р. и др. "СИНТЕЗ СПИРОЦИКЛИЧЕСКИХ ГИДРОКСАМОВЫХ КИСЛОТ И ИДЕНТИФИКАЦИЯ МОЛЕКУЛЯРНОЙ МИШЕНИ ДЕЙСТВИЯ В РАКОВЫХ КЛЕТКАХ" РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ Том: 16 Номер: S Год: 2017, Стр. 21-23. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2288220C2 (ru) | Производные тетралона в качестве противоопухолевых агентов и фармацевтическая композиция на их основе | |
| ES2459593T3 (es) | Derivados de 5-amino-3,6-dihidro-1H-pirazin-2-ona útiles como inhibidores de beta-secretasa (BACE) | |
| CN108864057B (zh) | 含有4-氨基吡唑结构的jak与hdac双靶点抑制剂及其制备方法和应用 | |
| CN101723896B (zh) | 酪氨酸衍生物类组蛋白去乙酰化酶抑制剂及其应用 | |
| EA016624B1 (ru) | Способ получения аминокротонильных соединений и лекарственное средство | |
| CN113754591A (zh) | 一种hdac、jak和bet三靶点抑制剂及其制备方法和应用 | |
| KR20150000901A (ko) | 히스톤 탈아세틸효소(hdacs) 억제제 | |
| CN104592145B (zh) | 一种苯并氧化呋咱组蛋白去乙酰化酶抑制剂及其制备方法和应用 | |
| CN105669520A (zh) | 含有色氨酸基本骨架的邻苯二胺类选择性组蛋白去乙酰化酶抑制剂及其制备方法和应用 | |
| CN114685382B (zh) | 具有HDACs抑制活性的喹唑啉-4-胺衍生物及其制备方法与用途 | |
| CN110143925B (zh) | 乙内酰脲异羟肟酸类组蛋白去乙酰化酶6亚型选择性抑制剂及制备方法和应用 | |
| CN110845425B (zh) | 一种酞嗪衍生物及其制备方法和应用 | |
| EP1330444B1 (en) | Nitrogenous heterocyclic compounds and process for making them | |
| CN114539267A (zh) | 一种吴茱萸碱衍生物及其应用 | |
| CN113233996B (zh) | 新型trpv1拮抗/faah抑制双靶点药物及其制备方法和应用 | |
| TW201946623A (zh) | 甲醯胺類化合物、其製備方法及其應用 | |
| RU2779981C1 (ru) | Гидроксамовые кислоты, производные 4-аминохиназолин-7-карбоновой кислоты как ингибиторы гистондеацетилазы и способ их получения | |
| CN114805357A (zh) | 一种靶向setdb1-ttd的小分子抑制剂及其制药用途 | |
| CN111499639B (zh) | 嘧啶酮衍生物及其在制药中的应用 | |
| CN112375070A (zh) | 含有酞嗪-1(2h)-酮结构的parp抑制剂、其制法及医药用途 | |
| RU2740503C1 (ru) | Производные 3-гидроксихиназолин-4(3Н)-она в качестве ингибиторов гистондеацетилазы и способ их получения | |
| RU2722694C1 (ru) | Способ получения N-((гидроксиамино)-оксоалкил)-2-(хиназолин-4-иламино)-бензамидов | |
| KR101571915B1 (ko) | Ｈｄａｃ 저해제로서의 술포닐피롤의 신규 제조 방법 | |
| RU2744750C1 (ru) | Способ получения гидроксамовых кислот, производных 2-арил-2,3-дигидрохиназолин-4(1Н)-онов | |
| CN111606888B (zh) | 吡咯类衍生物及其制备方法与应用 |