RU2773758C2 - Связывающиеся с pd-1 антитела и способы их применения - Google Patents
Связывающиеся с pd-1 антитела и способы их применения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2773758C2 RU2773758C2 RU2020132497A RU2020132497A RU2773758C2 RU 2773758 C2 RU2773758 C2 RU 2773758C2 RU 2020132497 A RU2020132497 A RU 2020132497A RU 2020132497 A RU2020132497 A RU 2020132497A RU 2773758 C2 RU2773758 C2 RU 2773758C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- seq
- ser
- antibody
- gly
- thr
- Prior art date
Links
- 102000004965 antibodies Human genes 0.000 title claims abstract description 503
- 108090001123 antibodies Proteins 0.000 title claims abstract description 503
- 230000027455 binding Effects 0.000 title claims abstract description 119
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 48
- 108010045030 monoclonal antibodies Proteins 0.000 claims abstract description 41
- 102000005614 monoclonal antibodies Human genes 0.000 claims abstract description 41
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 11
- 102100019764 PDCD1 Human genes 0.000 claims description 138
- 108060007796 SPATA2 Proteins 0.000 claims description 138
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 131
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 129
- 108091007172 antigens Proteins 0.000 claims description 127
- 102000038129 antigens Human genes 0.000 claims description 127
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 77
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 47
- 230000004044 response Effects 0.000 claims description 35
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims description 34
- 102100007290 CD274 Human genes 0.000 claims description 29
- 101710012053 CD274 Proteins 0.000 claims description 29
- 206010025650 Malignant melanoma Diseases 0.000 claims description 14
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims description 14
- 230000001629 suppression Effects 0.000 claims description 10
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 claims description 8
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 claims description 7
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 7
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 claims description 5
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 4
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 claims description 3
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000008443 Pancreatic Carcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000006265 Renal Cell Carcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 3
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 3
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 206010024324 Leukaemias Diseases 0.000 claims description 2
- 206010061306 Nasopharyngeal cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010025310 Other lymphomas Diseases 0.000 claims description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 claims description 2
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000010897 colon adenocarcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 230000002496 gastric Effects 0.000 claims description 2
- 201000009251 multiple myeloma Diseases 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 21
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 20
- 210000004881 tumor cells Anatomy 0.000 abstract description 11
- 230000012010 growth Effects 0.000 abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 147
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 147
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 146
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 description 123
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 55
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 55
- WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N Ser-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N 0.000 description 52
- TWVKGYNQQAUNRN-ACZMJKKPSA-N Ile-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CO)C([O-])=O TWVKGYNQQAUNRN-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 51
- 229920003013 deoxyribonucleic acid Polymers 0.000 description 49
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 47
- NFDYGNFETJVMSE-BQBZGAKWSA-N Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO NFDYGNFETJVMSE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 44
- 108010051242 phenylalanylserine Proteins 0.000 description 41
- IPWKGIFRRBGCJO-IMJSIDKUSA-N Ala-Ser Chemical compound C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CO)C([O-])=O IPWKGIFRRBGCJO-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 40
- XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 40
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 40
- BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N 0.000 description 37
- XGDCYUQSFDQISZ-BQBZGAKWSA-N Leu-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XGDCYUQSFDQISZ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 37
- 230000000903 blocking Effects 0.000 description 36
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 34
- OLIFSFOFKGKIRH-WUJLRWPWSA-N Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN OLIFSFOFKGKIRH-WUJLRWPWSA-N 0.000 description 32
- IQHUITKNHOKGFC-MIMYLULJSA-N Thr-Phe Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 IQHUITKNHOKGFC-MIMYLULJSA-N 0.000 description 31
- 108010026333 seryl-proline Proteins 0.000 description 31
- STTYIMSDIYISRG-WDSKDSINSA-N Val-Ser Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O STTYIMSDIYISRG-WDSKDSINSA-N 0.000 description 29
- SITLTJHOQZFJGG-XPUUQOCRSA-N α-Glu-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 29
- BUQICHWNXBIBOG-LMVFSUKVSA-N Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N BUQICHWNXBIBOG-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 28
- ROHDXJUFQVRDAV-UWVGGRQHSA-N Phe-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 ROHDXJUFQVRDAV-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 28
- ILVGMCVCQBJPSH-WDSKDSINSA-N Ser-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO ILVGMCVCQBJPSH-WDSKDSINSA-N 0.000 description 28
- 108060001277 CDR2 Proteins 0.000 description 27
- 101700027814 CDR3 Proteins 0.000 description 27
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 27
- 101700073818 CDR1 Proteins 0.000 description 26
- 102100002977 CDR1 Human genes 0.000 description 26
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 26
- GVRKWABULJAONN-UHFFFAOYSA-N Valyl-Threonine Chemical compound CC(C)C(N)C(=O)NC(C(C)O)C(O)=O GVRKWABULJAONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 25
- 230000035492 administration Effects 0.000 description 25
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 25
- 108010078144 glutaminyl-glycine Proteins 0.000 description 25
- 108010070643 prolylglutamic acid Proteins 0.000 description 25
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 24
- RNKSNIBMTUYWSH-YFKPBYRVSA-N L-prolylglycine Chemical compound [O-]C(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCC[NH2+]1 RNKSNIBMTUYWSH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 24
- 230000000259 anti-tumor Effects 0.000 description 24
- 210000001744 T-Lymphocytes Anatomy 0.000 description 23
- 108010010147 glycylglutamine Proteins 0.000 description 23
- 108010044655 lysylproline Proteins 0.000 description 23
- 108010017391 lysylvaline Proteins 0.000 description 23
- LTFSLKWFMWZEBD-IMJSIDKUSA-N Ser-Asn Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O LTFSLKWFMWZEBD-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 22
- NFNVDJGXRFEYTK-YUMQZZPRSA-N Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O NFNVDJGXRFEYTK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 21
- BQBCIBCLXBKYHW-CSMHCCOUSA-N Thr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]([NH3+])[C@@H](C)O BQBCIBCLXBKYHW-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 21
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 21
- 238000006011 modification reaction Methods 0.000 description 21
- NYQBYASWHVRESG-MIMYLULJSA-N Phe-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 NYQBYASWHVRESG-MIMYLULJSA-N 0.000 description 20
- CKHWEVXPLJBEOZ-UHFFFAOYSA-N Threoninyl-Valine Chemical compound CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)C(C)O CKHWEVXPLJBEOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 20
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 20
- JEFZIKRIDLHOIF-BYPYZUCNSA-N Gln-Gly Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O JEFZIKRIDLHOIF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 19
- JYOAXOMPIXKMKK-UHFFFAOYSA-N Leucyl-Glutamine Chemical compound CC(C)CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCC(N)=O JYOAXOMPIXKMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 108010019706 Nivolumab Proteins 0.000 description 19
- JKHXYJKMNSSFFL-IUCAKERBSA-N Val-Lys Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN JKHXYJKMNSSFFL-IUCAKERBSA-N 0.000 description 19
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 19
- 108010068265 aspartyltyrosine Proteins 0.000 description 19
- 230000003899 glycosylation Effects 0.000 description 19
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 19
- 108010037850 glycylvaline Proteins 0.000 description 19
- 229960003301 nivolumab Drugs 0.000 description 19
- 108010044292 tryptophyltyrosine Proteins 0.000 description 19
- 108010003137 tyrosyltyrosine Proteins 0.000 description 19
- LOJYQMFIIJVETK-WDSKDSINSA-N Gln-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O LOJYQMFIIJVETK-WDSKDSINSA-N 0.000 description 18
- FYYSIASRLDJUNP-WHFBIAKZSA-N Glu-Asp Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O FYYSIASRLDJUNP-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 18
- ATIPDCIQTUXABX-UWVGGRQHSA-N Lys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN ATIPDCIQTUXABX-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 18
- 229940098444 Opdivo Drugs 0.000 description 18
- YKRQRPFODDJQTC-UHFFFAOYSA-N Threoninyl-Lysine Chemical compound CC(O)C(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCCN YKRQRPFODDJQTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 18
- RGTVXXNMOGHRAY-UHFFFAOYSA-N Cysteinyl-Arginine Chemical compound SCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCNC(N)=N RGTVXXNMOGHRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- PNMUAGGSDZXTHX-BYPYZUCNSA-N Gly-Gln Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O PNMUAGGSDZXTHX-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 17
- UPJONISHZRADBH-XPUUQOCRSA-N Val-Glu Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O UPJONISHZRADBH-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 17
- 108010040443 aspartyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 17
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 17
- 108010031719 prolyl-serine Proteins 0.000 description 17
- UEKYKRQIAQHOOZ-KBPBESRZSA-N Pro-Trp Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)[O-])C(=O)[C@@H]1CCC[NH2+]1 UEKYKRQIAQHOOZ-KBPBESRZSA-N 0.000 description 16
- PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N Ser-Phe Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 16
- RZEQTVHJZCIUBT-UHFFFAOYSA-N Serinyl-Arginine Chemical compound OCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCNC(N)=N RZEQTVHJZCIUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- CGWAPUBOXJWXMS-HOTGVXAUSA-N Tyr-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 CGWAPUBOXJWXMS-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 16
- MFEVVAXTBZELLL-UHFFFAOYSA-N Tyrosyl-Threonine Chemical compound CC(O)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 MFEVVAXTBZELLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- GIAZPLMMQOERPN-YUMQZZPRSA-N Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O GIAZPLMMQOERPN-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 16
- 108010092854 aspartyllysine Proteins 0.000 description 16
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 16
- KGVHCTWYMPWEGN-FSPLSTOPSA-N Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN KGVHCTWYMPWEGN-FSPLSTOPSA-N 0.000 description 15
- JBCLFWXMTIKCCB-VIFPVBQESA-N Gly-Phe Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-VIFPVBQESA-N 0.000 description 15
- YSZNURNVYFUEHC-BQBZGAKWSA-N Lys-Ser Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YSZNURNVYFUEHC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 15
- WBAXJMCUFIXCNI-WDSKDSINSA-N Ser-Pro Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O WBAXJMCUFIXCNI-WDSKDSINSA-N 0.000 description 15
- 108010050025 alpha-glutamyltryptophan Proteins 0.000 description 15
- 108010057821 leucylproline Proteins 0.000 description 15
- 230000000174 oncolytic Effects 0.000 description 15
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 15
- YBTCBQBIJKGSJP-BQBZGAKWSA-N Glu-Pro Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O YBTCBQBIJKGSJP-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 14
- YQAIUOWPSUOINN-IUCAKERBSA-N Lys-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN YQAIUOWPSUOINN-IUCAKERBSA-N 0.000 description 14
- GXDLGHLJTHMDII-WISUUJSJSA-N Thr-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GXDLGHLJTHMDII-WISUUJSJSA-N 0.000 description 14
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 description 14
- STKYPAFSDFAEPH-LURJTMIESA-N gly-val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN STKYPAFSDFAEPH-LURJTMIESA-N 0.000 description 14
- 108010067216 glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 14
- 230000001225 therapeutic Effects 0.000 description 14
- PMGDADKJMCOXHX-BQBZGAKWSA-N Arg-Gln Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O PMGDADKJMCOXHX-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 13
- OAMLVOVXNKILLQ-BQBZGAKWSA-N Asp-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O OAMLVOVXNKILLQ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 13
- YZQCXOFQZKCETR-UWVGGRQHSA-N Asp-Phe Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 YZQCXOFQZKCETR-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 13
- DWBZEJHQQIURML-IMJSIDKUSA-N Asp-Ser Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DWBZEJHQQIURML-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 13
- 210000004443 Dendritic Cells Anatomy 0.000 description 13
- JAQGKXUEKGKTKX-HOTGVXAUSA-N L-tyrosyl-L-tyrosine Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 JAQGKXUEKGKTKX-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 13
- NHUHCSRWZMLRLA-UHFFFAOYSA-N Sulfizole Chemical compound CC1=NOC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=C1C NHUHCSRWZMLRLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- LWFWZRANSFAJDR-JSGCOSHPSA-N Trp-Val Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 LWFWZRANSFAJDR-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 13
- BMPPMAOOKQJYIP-WMZOPIPTSA-N Tyr-Trp Chemical compound C([C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C([O-])=O)C1=CC=C(O)C=C1 BMPPMAOOKQJYIP-WMZOPIPTSA-N 0.000 description 13
- 108010008355 arginyl-glutamine Proteins 0.000 description 13
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 13
- 230000002708 enhancing Effects 0.000 description 13
- 230000003308 immunostimulating Effects 0.000 description 13
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 13
- 108010070409 phenylalanyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 13
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 13
- IJYZHIOOBGIINM-WDSKDSINSA-N Arg-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N IJYZHIOOBGIINM-WDSKDSINSA-N 0.000 description 12
- NALWOULWGHTVDA-UWVGGRQHSA-N Asp-Tyr Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 NALWOULWGHTVDA-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 12
- VBKIFHUVGLOJKT-UHFFFAOYSA-N Asparaginyl-Threonine Chemical compound CC(O)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC(N)=O VBKIFHUVGLOJKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- CLSDNFWKGFJIBZ-UHFFFAOYSA-N Glutaminyl-Lysine Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(N)=O CLSDNFWKGFJIBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 210000004408 Hybridomas Anatomy 0.000 description 12
- DRCKHKZYDLJYFQ-UHFFFAOYSA-N Isoleucyl-Threonine Chemical compound CCC(C)C(N)C(=O)NC(C(C)O)C(O)=O DRCKHKZYDLJYFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- LESXFEZIFXFIQR-LURJTMIESA-N Leu-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O LESXFEZIFXFIQR-LURJTMIESA-N 0.000 description 12
- HGNRJCINZYHNOU-LURJTMIESA-N Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O HGNRJCINZYHNOU-LURJTMIESA-N 0.000 description 12
- WEDDFMCSUNNZJR-WDSKDSINSA-N Met-Ser Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WEDDFMCSUNNZJR-WDSKDSINSA-N 0.000 description 12
- AFWBWPCXSWUCLB-WDSKDSINSA-N Pro-Ser Chemical compound OC[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]1CCC[NH2+]1 AFWBWPCXSWUCLB-WDSKDSINSA-N 0.000 description 12
- FFOKMZOAVHEWET-UHFFFAOYSA-N Serinyl-Cysteine Chemical compound OCC(N)C(=O)NC(CS)C(O)=O FFOKMZOAVHEWET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- VPZKQTYZIVOJDV-LMVFSUKVSA-N Thr-Ala Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VPZKQTYZIVOJDV-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 12
- 108010087924 alanylproline Proteins 0.000 description 12
- 229960000070 antineoplastic Monoclonal antibodies Drugs 0.000 description 12
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 12
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 12
- YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N glycylglycine zwitterion Chemical compound [NH3+]CC(=O)NCC([O-])=O YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229960000060 monoclonal antibodies Drugs 0.000 description 12
- 230000001717 pathogenic Effects 0.000 description 12
- 108010077112 prolyl-proline Proteins 0.000 description 12
- UKKNTTCNGZLJEX-UHFFFAOYSA-N γ-glutamyl-Serine Chemical compound NC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CO)C(O)=O UKKNTTCNGZLJEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- GJSURZIOUXUGAL-UHFFFAOYSA-N 2-((2,6-Dichlorophenyl)imino)imidazolidine Chemical compound ClC1=CC=CC(Cl)=C1NC1=NCCN1 GJSURZIOUXUGAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- VGRHZPNRCLAHQA-UHFFFAOYSA-N Aspartyl-Asparagine Chemical compound OC(=O)CC(N)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O VGRHZPNRCLAHQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- NTQDELBZOMWXRS-UHFFFAOYSA-N Aspartyl-Threonine Chemical compound CC(O)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC(O)=O NTQDELBZOMWXRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- VOVIALXJUBGFJZ-VXKMTNQYSA-N Budesonide Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1C[C@H]3O[C@@H](CCC)O[C@@]3(C(=O)CO)[C@@]1(C)C[C@@H]2O VOVIALXJUBGFJZ-VXKMTNQYSA-N 0.000 description 11
- 102100005310 CTLA4 Human genes 0.000 description 11
- 101700054183 CTLA4 Proteins 0.000 description 11
- SSHIXEILTLPAQT-UHFFFAOYSA-N Glutaminyl-Aspartate Chemical compound NC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CC(O)=O)C(O)=O SSHIXEILTLPAQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- ARPVSMCNIDAQBO-UHFFFAOYSA-N Glutaminyl-Leucine Chemical compound CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(N)=O ARPVSMCNIDAQBO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 11
- MLTRLIITQPXHBJ-BQBZGAKWSA-N Leu-Asn Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O MLTRLIITQPXHBJ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 11
- XWOBNBRUDDUEEY-UWVGGRQHSA-N Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 XWOBNBRUDDUEEY-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 11
- AIXUQKMMBQJZCU-IUCAKERBSA-N Lys-Pro Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O AIXUQKMMBQJZCU-IUCAKERBSA-N 0.000 description 11
- KNPVDQMEHSCAGX-UHFFFAOYSA-N Phenylalanyl-Cysteine Chemical compound SCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 KNPVDQMEHSCAGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- RVQDZELMXZRSSI-IUCAKERBSA-N Pro-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 RVQDZELMXZRSSI-IUCAKERBSA-N 0.000 description 11
- DSGIVWSDDRDJIO-ZXXMMSQZSA-N Thr-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O DSGIVWSDDRDJIO-ZXXMMSQZSA-N 0.000 description 11
- OBTCMSPFOITUIJ-FSPLSTOPSA-N Val-Asp Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O OBTCMSPFOITUIJ-FSPLSTOPSA-N 0.000 description 11
- 108010081404 acein-2 Proteins 0.000 description 11
- 108010086434 alanyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 11
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 11
- LCNASHSOFMRYFO-WDCWCFNPSA-N (2S)-5-amino-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O LCNASHSOFMRYFO-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 10
- FYRVDDJMNISIKJ-UWVGGRQHSA-N Asn-Tyr Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 FYRVDDJMNISIKJ-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 10
- BBBXWRGITSUJPB-YUMQZZPRSA-N Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O BBBXWRGITSUJPB-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 10
- 108090001095 Immunoglobulin G Proteins 0.000 description 10
- 102000004851 Immunoglobulin G Human genes 0.000 description 10
- 102000018358 Immunoglobulins Human genes 0.000 description 10
- 108060003951 Immunoglobulins Proteins 0.000 description 10
- QOOWRKBDDXQRHC-BQBZGAKWSA-N L-lysyl-L-alanine Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN QOOWRKBDDXQRHC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 10
- LRKCBIUDWAXNEG-CSMHCCOUSA-N Leu-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O LRKCBIUDWAXNEG-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 10
- QOLYAJSZHIJCTO-VQVTYTSYSA-N Thr-Pro Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O QOLYAJSZHIJCTO-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 10
- WCRFXRIWBFRZBR-GGVZMXCHSA-N Thr-Tyr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 WCRFXRIWBFRZBR-GGVZMXCHSA-N 0.000 description 10
- LUMXICQAOKVQOB-UHFFFAOYSA-N Threoninyl-Isoleucine Chemical compound CCC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)C(C)O LUMXICQAOKVQOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- ZSXJENBJGRHKIG-UHFFFAOYSA-N Tyrosyl-Serine Chemical compound OCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 ZSXJENBJGRHKIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- VEYJKJORLPYVLO-RYUDHWBXSA-N Val-Tyr Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 VEYJKJORLPYVLO-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 10
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 10
- 201000009910 diseases by infectious agent Diseases 0.000 description 10
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 10
- 108010044374 isoleucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 10
- 230000001404 mediated Effects 0.000 description 10
- 108010048818 seryl-histidine Proteins 0.000 description 10
- 241000894007 species Species 0.000 description 10
- 108010038745 tryptophylglycine Proteins 0.000 description 10
- QXRNAOYBCYVZCD-BQBZGAKWSA-N (2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-aminopropanoyl]amino]hexanoic acid Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN QXRNAOYBCYVZCD-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 9
- BSWHERGFUNMWGS-UHFFFAOYSA-N Aspartyl-Isoleucine Chemical compound CCC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC(O)=O BSWHERGFUNMWGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000035693 Fab Effects 0.000 description 9
- FBTYOQIYBULKEH-ZFWWWQNUSA-N His-Trp Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(O)=O)C1=CNC=N1 FBTYOQIYBULKEH-ZFWWWQNUSA-N 0.000 description 9
- CTCFZNBRZBNKAX-UHFFFAOYSA-N Histidinyl-Glutamine Chemical compound NC(=O)CCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 CTCFZNBRZBNKAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 108010027440 Immunoconjugates Proteins 0.000 description 9
- 102000018748 Immunoconjugates Human genes 0.000 description 9
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 9
- LDEBVRIURYMKQS-UHFFFAOYSA-N Serinyl-Threonine Chemical compound CC(O)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CO LDEBVRIURYMKQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- LZLREEUGSYITMX-UHFFFAOYSA-N Serinyl-Tryptophan Chemical compound C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(CO)N)C(O)=O)=CNC2=C1 LZLREEUGSYITMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- CUTPSEKWUPZFLV-UHFFFAOYSA-N Threoninyl-Cysteine Chemical compound CC(O)C(N)C(=O)NC(CS)C(O)=O CUTPSEKWUPZFLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 9
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 9
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 9
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M buffer Substances [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 230000001413 cellular Effects 0.000 description 9
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 9
- 108010081551 glycylphenylalanine Proteins 0.000 description 9
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 9
- QLROSWPKSBORFJ-BQBZGAKWSA-N pro glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 QLROSWPKSBORFJ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 9
- 108010020755 prolyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 9
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 9
- 108010009962 valyltyrosine Proteins 0.000 description 9
- SNFUTDLOCQQRQD-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-amino-4-carboxybutanoyl)amino]-3-methylpentanoic acid Chemical compound CCC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SNFUTDLOCQQRQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- MPZWMIIOPAPAKE-UHFFFAOYSA-N 4-amino-5-[[1-carboxy-4-(diaminomethylideneamino)butyl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCN=C(N)N MPZWMIIOPAPAKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- PSZNHSNIGMJYOZ-WDSKDSINSA-N Asp-Arg Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N PSZNHSNIGMJYOZ-WDSKDSINSA-N 0.000 description 8
- HHSJMSCOLJVTCX-UHFFFAOYSA-N Glutaminyl-Threonine Chemical compound CC(O)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(N)=O HHSJMSCOLJVTCX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- IKAIKUBBJHFNBZ-LURJTMIESA-N Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN IKAIKUBBJHFNBZ-LURJTMIESA-N 0.000 description 8
- UWBDLNOCIDGPQE-UHFFFAOYSA-N Isoleucyl-Lysine Chemical compound CCC(C)C(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCCN UWBDLNOCIDGPQE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- KAKJTZWHIUWTTD-VQVTYTSYSA-N Met-Thr Chemical compound CSCC[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C([O-])=O KAKJTZWHIUWTTD-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 8
- 101000309989 PDCD1 Proteins 0.000 description 8
- KLAONOISLHWJEE-UHFFFAOYSA-N Phenylalanyl-Glutamine Chemical compound NC(=O)CCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 KLAONOISLHWJEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- RWCOTTLHDJWHRS-YUMQZZPRSA-N Pro-Pro Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 RWCOTTLHDJWHRS-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 8
- IOWJRKAVLALBQB-IWGUZYHVSA-N Thr-Asp Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O IOWJRKAVLALBQB-IWGUZYHVSA-N 0.000 description 8
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 8
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 8
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 8
- 108010049041 glutamylalanine Proteins 0.000 description 8
- 102000025987 human PDCD1 protein Human genes 0.000 description 8
- 244000052769 pathogens Species 0.000 description 8
- 230000001105 regulatory Effects 0.000 description 8
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 108010051110 tyrosyl-lysine Proteins 0.000 description 8
- 229960005486 vaccines Drugs 0.000 description 8
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 8
- NJMYZEJORPYOTO-UHFFFAOYSA-N γ-glutamyl-Proline Chemical compound NC(=O)CCC(N)C(=O)N1CCCC1C(O)=O NJMYZEJORPYOTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-aminopropanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 7
- RDIKFPRVLJLMER-BQBZGAKWSA-N Ala-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N RDIKFPRVLJLMER-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 7
- WPWUFUBLGADILS-WDSKDSINSA-N Ala-Pro Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O WPWUFUBLGADILS-WDSKDSINSA-N 0.000 description 7
- XNSKSTRGQIPTSE-UHFFFAOYSA-N Arginyl-Threonine Chemical compound CC(O)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCCNC(N)=N XNSKSTRGQIPTSE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- JHFNSBBHKSZXKB-VKHMYHEASA-N Asp-Gly Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O JHFNSBBHKSZXKB-VKHMYHEASA-N 0.000 description 7
- MQLZLIYPFDIDMZ-UHFFFAOYSA-N Asparaginyl-Isoleucine Chemical compound CCC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC(N)=O MQLZLIYPFDIDMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 7
- KOSRFJWDECSPRO-WDSKDSINSA-N Glu-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-WDSKDSINSA-N 0.000 description 7
- MRVYVEQPNDSWLH-UHFFFAOYSA-N Glutaminyl-Valine Chemical compound CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(N)=O MRVYVEQPNDSWLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- VHOLZZKNEBBHTH-YUMQZZPRSA-N His-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CNC=N1 VHOLZZKNEBBHTH-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 7
- HZYHBDVRCBDJJV-HAFWLYHUSA-N Ile-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O HZYHBDVRCBDJJV-HAFWLYHUSA-N 0.000 description 7
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 7
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 7
- VTJUNIYRYIAIHF-IUCAKERBSA-N Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O VTJUNIYRYIAIHF-IUCAKERBSA-N 0.000 description 7
- 229920001850 Nucleic acid sequence Polymers 0.000 description 7
- SBMNPABNWKXNBJ-UHFFFAOYSA-N Serinyl-Lysine Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CO SBMNPABNWKXNBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- UYKREHOKELZSPB-JTQLQIEISA-N Trp-Gly Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O)=CNC2=C1 UYKREHOKELZSPB-JTQLQIEISA-N 0.000 description 7
- TYYLDKGBCJGJGW-WMZOPIPTSA-N Trp-Tyr Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)N)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 TYYLDKGBCJGJGW-WMZOPIPTSA-N 0.000 description 7
- NLKUJNGEGZDXGO-XVKPBYJWSA-N Tyr-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 NLKUJNGEGZDXGO-XVKPBYJWSA-N 0.000 description 7
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 7
- 108010018006 histidylserine Proteins 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 7
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M salicylate Chemical compound OC1=CC=CC=C1C([O-])=O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 229960001860 salicylate Drugs 0.000 description 7
- 210000001519 tissues Anatomy 0.000 description 7
- 108010020532 tyrosyl-proline Proteins 0.000 description 7
- XPJBQTCXPJNIFE-ZETCQYMHSA-N (2S)-2-[[2-[(2-azaniumylacetyl)amino]acetyl]amino]-4-methylpentanoate Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CN XPJBQTCXPJNIFE-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 6
- INGJLBQKTRJLFO-UKJIMTQDSA-N (4S)-4-amino-5-[[(2S,3S)-1-[[(1S)-1-carboxy-2-methylpropyl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O INGJLBQKTRJLFO-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 6
- CXISPYVYMQWFLE-VKHMYHEASA-N Ala-Gly Chemical compound C[C@H]([NH3+])C(=O)NCC([O-])=O CXISPYVYMQWFLE-VKHMYHEASA-N 0.000 description 6
- WYBVBIHNJWOLCJ-IUCAKERBSA-N Arg-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N WYBVBIHNJWOLCJ-IUCAKERBSA-N 0.000 description 6
- BNODVYXZAAXSHW-UHFFFAOYSA-N Arginyl-Histidine Chemical compound NC(=N)NCCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CN=CN1 BNODVYXZAAXSHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- KLKHFFMNGWULBN-VKHMYHEASA-N Asn-Gly Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O KLKHFFMNGWULBN-VKHMYHEASA-N 0.000 description 6
- KWBQPGIYEZKDEG-FSPLSTOPSA-N Asn-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O KWBQPGIYEZKDEG-FSPLSTOPSA-N 0.000 description 6
- 229940002671 Entocort Drugs 0.000 description 6
- PFMUCCYYAAFKTH-YFKPBYRVSA-N Gly-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN PFMUCCYYAAFKTH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 6
- VYZAGTDAHUIRQA-WHFBIAKZSA-N L-alanyl-L-glutamic acid Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O VYZAGTDAHUIRQA-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 6
- HFKJBCPRWWGPEY-BQBZGAKWSA-N L-arginyl-L-glutamic acid Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HFKJBCPRWWGPEY-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 6
- 102100017213 LAG3 Human genes 0.000 description 6
- 108060004270 LAG3 Proteins 0.000 description 6
- OTXBNHIUIHNGAO-UWVGGRQHSA-N Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN OTXBNHIUIHNGAO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 6
- LHSGPCFBGJHPCY-STQMWFEESA-N Leu-Tyr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 LHSGPCFBGJHPCY-STQMWFEESA-N 0.000 description 6
- CIOWSLJGLSUOME-BQBZGAKWSA-N Lys-Asp Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O CIOWSLJGLSUOME-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 6
- ZOKVLMBYDSIDKG-CSMHCCOUSA-N Lys-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN ZOKVLMBYDSIDKG-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- 108010079364 N-glycylalanine Proteins 0.000 description 6
- WEQJQNWXCSUVMA-RYUDHWBXSA-N Phe-Pro Chemical compound C([C@H]([NH3+])C(=O)N1[C@@H](CCC1)C([O-])=O)C1=CC=CC=C1 WEQJQNWXCSUVMA-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 6
- FELJDCNGZFDUNR-WDSKDSINSA-N Pro-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 FELJDCNGZFDUNR-WDSKDSINSA-N 0.000 description 6
- VBKBDLMWICBSCY-IMJSIDKUSA-N Ser-Asp Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O VBKBDLMWICBSCY-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 6
- BWUHENPAEMNGQJ-ZDLURKLDSA-N Thr-Gln Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O BWUHENPAEMNGQJ-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 6
- UQTNIFUCMBFWEJ-UHFFFAOYSA-N Threoninyl-Asparagine Chemical compound CC(O)C(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC(N)=O UQTNIFUCMBFWEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- AOLHUMAVONBBEZ-STQMWFEESA-N Tyr-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 AOLHUMAVONBBEZ-STQMWFEESA-N 0.000 description 6
- ONWMQORSVZYVNH-UHFFFAOYSA-N Tyrosyl-Asparagine Chemical compound NC(=O)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 ONWMQORSVZYVNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XXDVDTMEVBYRPK-XPUUQOCRSA-N Val-Gln Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O XXDVDTMEVBYRPK-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 6
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 6
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 230000002860 competitive Effects 0.000 description 6
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 6
- -1 e.g. Proteins 0.000 description 6
- 108010001064 glycyl-glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 6
- 108010087823 glycyltyrosine Proteins 0.000 description 6
- 108010036413 histidylglycine Proteins 0.000 description 6
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 6
- 108010078274 isoleucylvaline Proteins 0.000 description 6
- 108010012058 leucyltyrosine Proteins 0.000 description 6
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 6
- 108010004914 prolylarginine Proteins 0.000 description 6
- 108010080629 tryptophan-leucine Proteins 0.000 description 6
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 6
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 6
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 6
- OPINTGHFESTVAX-UHFFFAOYSA-N γ-glutamyl-Arginine Chemical compound NC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCNC(N)=N OPINTGHFESTVAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VNYDHJARLHNEGA-RYUDHWBXSA-N (2S)-1-[(2S)-2-azaniumyl-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]pyrrolidine-2-carboxylate Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 VNYDHJARLHNEGA-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 5
- LZDNBBYBDGBADK-KBPBESRZSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-methylbutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 LZDNBBYBDGBADK-KBPBESRZSA-N 0.000 description 5
- OCYROESYHWUPBP-VGMNWLOBSA-N (2S,3R)-3-methyl-2-[[(2S)-pyrrolidin-1-ium-2-carbonyl]amino]pentanoate Chemical compound CC[C@@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 OCYROESYHWUPBP-VGMNWLOBSA-N 0.000 description 5
- NAXPHWZXEXNDIW-JTQLQIEISA-N 2-[[2-[[(2S)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]acetyl]amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 NAXPHWZXEXNDIW-JTQLQIEISA-N 0.000 description 5
- MGHKSHCBDXNTHX-UHFFFAOYSA-N 4-amino-5-[(4-amino-1-carboxy-4-oxobutyl)amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O MGHKSHCBDXNTHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- RJUHZPRQRQLCFL-IMJSIDKUSA-N Asn-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O RJUHZPRQRQLCFL-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 5
- SONUFGRSSMFHFN-IMJSIDKUSA-N Asn-Ser Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SONUFGRSSMFHFN-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 5
- FRYULLIZUDQONW-IMJSIDKUSA-N Asp-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O FRYULLIZUDQONW-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 5
- OMSMPWHEGLNQOD-UHFFFAOYSA-N Asparaginyl-Phenylalanine Chemical compound NC(=O)CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 OMSMPWHEGLNQOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108010071919 Bispecific Antibodies Proteins 0.000 description 5
- 229960004436 Budesonide Drugs 0.000 description 5
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 5
- WXOFKRKAHJQKLT-UHFFFAOYSA-N Cysteinyl-Lysine Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CS WXOFKRKAHJQKLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 5
- YBAFDPFAUTYYRW-YUMQZZPRSA-N Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 5
- UQHGAYSULGRWRG-WHFBIAKZSA-N Glu-Ser Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UQHGAYSULGRWRG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 5
- FUESBOMYALLFNI-VKHMYHEASA-N Gly-Asn Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O FUESBOMYALLFNI-VKHMYHEASA-N 0.000 description 5
- WSDOHRLQDGAOGU-UHFFFAOYSA-N Histidinyl-Asparagine Chemical compound NC(=O)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 WSDOHRLQDGAOGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- WRPDZHJNLYNFFT-UHFFFAOYSA-N Histidinyl-Threonine Chemical compound CC(O)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 WRPDZHJNLYNFFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- MUFXDFWAJSPHIQ-XDTLVQLUSA-N Ile-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CC=C(O)C=C1 MUFXDFWAJSPHIQ-XDTLVQLUSA-N 0.000 description 5
- 206010021972 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 5
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 5
- 210000004185 Liver Anatomy 0.000 description 5
- FMIIKPHLJKUXGE-GUBZILKMSA-N Lys-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN FMIIKPHLJKUXGE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 5
- QCZYYEFXOBKCNQ-STQMWFEESA-N Lys-Phe Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 QCZYYEFXOBKCNQ-STQMWFEESA-N 0.000 description 5
- JPNRPAJITHRXRH-UHFFFAOYSA-N Lysyl-Asparagine Chemical compound NCCCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC(N)=O JPNRPAJITHRXRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- PBOUVYGPDSARIS-IUCAKERBSA-N Met-Leu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C PBOUVYGPDSARIS-IUCAKERBSA-N 0.000 description 5
- PESQCPHRXOFIPX-RYUDHWBXSA-N Met-Tyr Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 PESQCPHRXOFIPX-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 5
- JMEWFDUAFKVAAT-UHFFFAOYSA-N Methionyl-Asparagine Chemical compound CSCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC(N)=O JMEWFDUAFKVAAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108010066427 N-valyltryptophan Proteins 0.000 description 5
- HMNSRTLZAJHSIK-YUMQZZPRSA-N Pro-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 HMNSRTLZAJHSIK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 5
- OIDKVWTWGDWMHY-RYUDHWBXSA-N Pro-Tyr Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H]1NCCC1)C1=CC=C(O)C=C1 OIDKVWTWGDWMHY-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 5
- UJTZHGHXJKIAOS-WHFBIAKZSA-N Ser-Gln Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O UJTZHGHXJKIAOS-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 5
- YZMPDHTZJJCGEI-BQBZGAKWSA-N Ser-His Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 YZMPDHTZJJCGEI-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 5
- GRQCSEWEPIHLBI-UHFFFAOYSA-N Tryptophyl-Asparagine Chemical compound C1=CC=C2C(CC(N)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 GRQCSEWEPIHLBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- UBAQSAUDKMIEQZ-QWRGUYRKSA-N Tyr-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 UBAQSAUDKMIEQZ-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 5
- BNQVUHQWZGTIBX-IUCAKERBSA-N Val-His Chemical compound CC(C)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CN=CN1 BNQVUHQWZGTIBX-IUCAKERBSA-N 0.000 description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 5
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 5
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 5
- 108010052670 arginyl-glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 5
- 108010060035 arginylproline Proteins 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 5
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 5
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 5
- 238000000533 capillary isoelectric focusing Methods 0.000 description 5
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 5
- 108010060199 cysteinylproline Proteins 0.000 description 5
- 230000002068 genetic Effects 0.000 description 5
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 5
- 230000003463 hyperproliferative Effects 0.000 description 5
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 5
- 230000000051 modifying Effects 0.000 description 5
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 5
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N p-acetaminophenol Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108010053725 prolylvaline Proteins 0.000 description 5
- 108010071207 serylmethionine Proteins 0.000 description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 5
- ZJPGOXWRFNKIQL-JYJNAYRXSA-N (2S)-1-[(2S)-1-[(2S)-2-amino-3-phenylpropanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 ZJPGOXWRFNKIQL-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 4
- FAQVCWVVIYYWRR-WHFBIAKZSA-N (2S)-2-[[(2S)-2,5-diamino-5-oxopentanoyl]amino]propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O FAQVCWVVIYYWRR-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 4
- NIZKGBJVCMRDKO-KWQFWETISA-N (2S)-2-[[2-[[(2S)-2-aminopropanoyl]amino]acetyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 NIZKGBJVCMRDKO-KWQFWETISA-N 0.000 description 4
- PVMPDMIKUVNOBD-CIUDSAMLSA-N (3S)-3-[[(2S)-2-amino-4-methylpentanoyl]amino]-4-[[(1S)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O PVMPDMIKUVNOBD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 4
- RFCVXVPWSPOMFJ-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-azaniumyl-3-phenylpropanoyl)amino]-4-methylpentanoate Chemical compound CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 RFCVXVPWSPOMFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FSHURBQASBLAPO-WDSKDSINSA-N Ala-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N FSHURBQASBLAPO-WDSKDSINSA-N 0.000 description 4
- FFMIYIMKQIMDPK-BQBZGAKWSA-N Asn-His Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 FFMIYIMKQIMDPK-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 4
- CPMKYMGGYUFOHS-FSPLSTOPSA-N Asp-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CPMKYMGGYUFOHS-FSPLSTOPSA-N 0.000 description 4
- SJUXYGVRSGTPMC-UHFFFAOYSA-N Asparaginyl-Alanine Chemical compound OC(=O)C(C)NC(=O)C(N)CC(N)=O SJUXYGVRSGTPMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NPDLYUOYAGBHFB-UHFFFAOYSA-N Asparaginyl-Arginine Chemical compound NC(=O)CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCNC(N)=N NPDLYUOYAGBHFB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HXWUJJADFMXNKA-UHFFFAOYSA-N Asparaginyl-Leucine Chemical compound CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC(N)=O HXWUJJADFMXNKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RGGVDKVXLBOLNS-UHFFFAOYSA-N Asparaginyl-Tryptophan Chemical compound C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(CC(N)=O)N)C(O)=O)=CNC2=C1 RGGVDKVXLBOLNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BVRPESWOSNFUCJ-LKTVYLICSA-N BNC210 Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)CC)C(O)=O)=CNC2=C1 BVRPESWOSNFUCJ-LKTVYLICSA-N 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 102100006400 CSF2 Human genes 0.000 description 4
- 206010009887 Colitis Diseases 0.000 description 4
- YXQDRIRSAHTJKM-IMJSIDKUSA-N Cys-Ser Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YXQDRIRSAHTJKM-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 4
- YHDXIZKDOIWPBW-UHFFFAOYSA-N Cysteinyl-Glutamine Chemical compound SCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCC(N)=O YHDXIZKDOIWPBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NXTYATMDWQYLGJ-UHFFFAOYSA-N Cysteinyl-Leucine Chemical compound CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CS NXTYATMDWQYLGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 4
- 101700044513 FUT8 Proteins 0.000 description 4
- 102100012684 FUT8 Human genes 0.000 description 4
- SCCPDJAQCXWPTF-VKHMYHEASA-N Gly-Asp Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O SCCPDJAQCXWPTF-VKHMYHEASA-N 0.000 description 4
- XBGGUPMXALFZOT-VIFPVBQESA-N Gly-Tyr Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XBGGUPMXALFZOT-VIFPVBQESA-N 0.000 description 4
- 206010018651 Graft versus host disease Diseases 0.000 description 4
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 4
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 4
- 230000036499 Half live Effects 0.000 description 4
- 102000002812 Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 description 4
- 108010004889 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 4
- CZVQSYNVUHAILZ-UWVGGRQHSA-N His-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 CZVQSYNVUHAILZ-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 4
- 108010064750 Humanized Monoclonal Antibodies Proteins 0.000 description 4
- 102000015434 Humanized Monoclonal Antibodies Human genes 0.000 description 4
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- UGTZHPSKYRIGRJ-YUMQZZPRSA-N Lys-Glu Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O UGTZHPSKYRIGRJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 4
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 4
- ZKQOUHVVXABNDG-IUCAKERBSA-N Pro-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 ZKQOUHVVXABNDG-IUCAKERBSA-N 0.000 description 4
- SSJMZMUVNKEENT-IMJSIDKUSA-N Ser-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CO SSJMZMUVNKEENT-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 4
- LAFKUZYWNCHOHT-WHFBIAKZSA-N Ser-Glu Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O LAFKUZYWNCHOHT-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 4
- BIYXEUAFGLTAEM-WUJLRWPWSA-N Thr-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O BIYXEUAFGLTAEM-WUJLRWPWSA-N 0.000 description 4
- WXVIGTAUZBUDPZ-DTLFHODZSA-N Thr-His Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 WXVIGTAUZBUDPZ-DTLFHODZSA-N 0.000 description 4
- APIDTRXFGYOLLH-VQVTYTSYSA-N Thr-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O APIDTRXFGYOLLH-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 4
- PEEAINPHPNDNGE-JQWIXIFHSA-N Trp-Asp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 PEEAINPHPNDNGE-JQWIXIFHSA-N 0.000 description 4
- LYMVXFSTACVOLP-ZFWWWQNUSA-N Trp-Leu Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C([O-])=O)=CNC2=C1 LYMVXFSTACVOLP-ZFWWWQNUSA-N 0.000 description 4
- PDSLRCZINIDLMU-QWRGUYRKSA-N Tyr-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 PDSLRCZINIDLMU-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 4
- GJNDXQBALKCYSZ-RYUDHWBXSA-N Val-Phe Chemical compound CC(C)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CC=CC=C1 GJNDXQBALKCYSZ-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 230000000240 adjuvant Effects 0.000 description 4
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 4
- 108010069020 alanyl-prolyl-glycine Proteins 0.000 description 4
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 4
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 4
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 4
- 108010057083 glutamyl-aspartyl-leucine Proteins 0.000 description 4
- VPZXBVLAVMBEQI-VKHMYHEASA-N gly ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-VKHMYHEASA-N 0.000 description 4
- 108010053037 kyotorphin Proteins 0.000 description 4
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 4
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 4
- 108010056582 methionylglutamic acid Proteins 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 4
- 108010024654 phenylalanyl-prolyl-alanine Proteins 0.000 description 4
- 108010024607 phenylalanylalanine Proteins 0.000 description 4
- 108010073025 phenylalanylphenylalanine Proteins 0.000 description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 4
- 108010029020 prolylglycine Proteins 0.000 description 4
- 230000002829 reduced Effects 0.000 description 4
- 230000004936 stimulating Effects 0.000 description 4
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 4
- 230000003612 virological Effects 0.000 description 4
- 101700064281 ATP1 Proteins 0.000 description 3
- 206010069754 Acquired gene mutation Diseases 0.000 description 3
- XZWXFWBHYRFLEF-FSPLSTOPSA-N Ala-His Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 XZWXFWBHYRFLEF-FSPLSTOPSA-N 0.000 description 3
- 210000000612 Antigen-Presenting Cells Anatomy 0.000 description 3
- QCWJKJLNCFEVPQ-WHFBIAKZSA-N Asn-Gln Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O QCWJKJLNCFEVPQ-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- GSMPSRPMQQDRIB-WHFBIAKZSA-N Asp-Gln Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O GSMPSRPMQQDRIB-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- 229960001230 Asparagine Drugs 0.000 description 3
- QJMCHPGWFZZRID-UHFFFAOYSA-N Asparaginyl-Lysine Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC(N)=O QJMCHPGWFZZRID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UKGGPJNBONZZCM-WDSKDSINSA-N Aspartyl-L-proline Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O UKGGPJNBONZZCM-WDSKDSINSA-N 0.000 description 3
- 210000003719 B-Lymphocytes Anatomy 0.000 description 3
- 230000036912 Bioavailability Effects 0.000 description 3
- 102100019461 CD28 Human genes 0.000 description 3
- 101700033362 CD28 Proteins 0.000 description 3
- 210000003169 Central Nervous System Anatomy 0.000 description 3
- 229920002676 Complementary DNA Polymers 0.000 description 3
- HAYVTMHUNMMXCV-UHFFFAOYSA-N Cysteinyl-Alanine Chemical compound OC(=O)C(C)NC(=O)C(N)CS HAYVTMHUNMMXCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010012601 Diabetes mellitus Diseases 0.000 description 3
- DKEXFJVMVGETOO-LURJTMIESA-N Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN DKEXFJVMVGETOO-LURJTMIESA-N 0.000 description 3
- AJHCSUXXECOXOY-NSHDSACASA-N Gly-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)CN)C(O)=O)=CNC2=C1 AJHCSUXXECOXOY-NSHDSACASA-N 0.000 description 3
- 208000006454 Hepatitis Diseases 0.000 description 3
- HTOOKGDPMXSJSY-STQMWFEESA-N His-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CN=CN1 HTOOKGDPMXSJSY-STQMWFEESA-N 0.000 description 3
- 241000700588 Human alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 3
- 241000701806 Human papillomavirus Species 0.000 description 3
- PWWVAXIEGOYWEE-UHFFFAOYSA-N Isophenergan Chemical compound C1=CC=C2N(CC(C)N(C)C)C3=CC=CC=C3SC2=C1 PWWVAXIEGOYWEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- 241000829100 Macaca mulatta polyomavirus 1 Species 0.000 description 3
- OGGRSJFVXREKOR-CIUDSAMLSA-N Met-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCSC OGGRSJFVXREKOR-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- 206010027480 Metastatic malignant melanoma Diseases 0.000 description 3
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-Acetylglucosamine Chemical group CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 3
- 108010002311 N-glycylglutamic acid Proteins 0.000 description 3
- 102100007289 PDCD1LG2 Human genes 0.000 description 3
- 101710011976 PDCD1LG2 Proteins 0.000 description 3
- BXNGIHFNNNSEOS-UWVGGRQHSA-N Phe-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 BXNGIHFNNNSEOS-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 3
- PYOHODCEOHCZBM-RYUDHWBXSA-N Phe-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 PYOHODCEOHCZBM-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 3
- 206010039073 Rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 3
- PBUXMVYWOSKHMF-WDSKDSINSA-N Ser-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO PBUXMVYWOSKHMF-WDSKDSINSA-N 0.000 description 3
- BXLYSRPHVMCOPS-UHFFFAOYSA-N Serinyl-Isoleucine Chemical compound CCC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CO BXLYSRPHVMCOPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000002966 Serum Anatomy 0.000 description 3
- 241000580858 Simian-Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 3
- 108010088160 Staphylococcal Protein A Proteins 0.000 description 3
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 3
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 3
- 108091008153 T cell receptors Proteins 0.000 description 3
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 3
- PWIQCLSQVQBOQV-AAEUAGOBSA-N Trp-Glu Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 PWIQCLSQVQBOQV-AAEUAGOBSA-N 0.000 description 3
- NZCPCJCJZHKFGZ-UHFFFAOYSA-N Tryptophyl-Glutamine Chemical compound C1=CC=C2C(CC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 NZCPCJCJZHKFGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HPYDSVWYXXKHRD-VIFPVBQESA-N Tyr-Gly Chemical compound [O-]C(=O)CNC(=O)[C@@H]([NH3+])CC1=CC=C(O)C=C1 HPYDSVWYXXKHRD-VIFPVBQESA-N 0.000 description 3
- QJKMCQRFHJRIPU-XDTLVQLUSA-N Tyr-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 QJKMCQRFHJRIPU-XDTLVQLUSA-N 0.000 description 3
- IBIDRSSEHFLGSD-YUMQZZPRSA-N Val-Arg Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N IBIDRSSEHFLGSD-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 3
- WITCOKQIPFWQQD-FSPLSTOPSA-N Val-Asn Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O WITCOKQIPFWQQD-FSPLSTOPSA-N 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 231100000494 adverse effect Toxicity 0.000 description 3
- 108010041407 alanylaspartic acid Proteins 0.000 description 3
- 108010044940 alanylglutamine Proteins 0.000 description 3
- 108010070944 alanylhistidine Proteins 0.000 description 3
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 3
- 230000035514 bioavailability Effects 0.000 description 3
- 201000009030 carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 108020001096 dihydrofolate reductase family Proteins 0.000 description 3
- 102000004419 dihydrofolate reductase family Human genes 0.000 description 3
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 3
- 125000002446 fucosyl group Chemical group C1([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O1)C)* 0.000 description 3
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 3
- 108010013768 glutamyl-aspartyl-proline Proteins 0.000 description 3
- KZNQNBZMBZJQJO-YFKPBYRVSA-N gly pro Chemical compound NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O KZNQNBZMBZJQJO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- 108010050475 glycyl-leucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 3
- 108010045126 glycyl-tyrosyl-glycine Proteins 0.000 description 3
- 108010084389 glycyltryptophan Proteins 0.000 description 3
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 3
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 3
- 108010031614 immunorphin Proteins 0.000 description 3
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 3
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 108010027338 isoleucylcysteine Proteins 0.000 description 3
- 108010044311 leucyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 3
- 108010091871 leucylmethionine Proteins 0.000 description 3
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 3
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 3
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 3
- 108010073101 phenylalanylleucine Proteins 0.000 description 3
- 108010015796 prolylisoleucine Proteins 0.000 description 3
- 108010090894 prolylleucine Proteins 0.000 description 3
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 3
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 3
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 3
- 230000003248 secreting Effects 0.000 description 3
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 3
- 108010069117 seryl-lysyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 3
- 108010048397 seryl-lysyl-leucine Proteins 0.000 description 3
- 230000000392 somatic Effects 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 3
- 238000002849 thermal shift Methods 0.000 description 3
- 108010071097 threonyl-lysyl-proline Proteins 0.000 description 3
- 230000000699 topical Effects 0.000 description 3
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 3
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 3
- 108010084932 tryptophyl-proline Proteins 0.000 description 3
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 3
- DXJZITDUDUPINW-UHFFFAOYSA-N γ-glutamyl-Asparagine Chemical compound NC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O DXJZITDUDUPINW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SIGGQAHUPUBWNF-UHFFFAOYSA-N γ-glutamyl-Methionine Chemical compound CSCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(N)=O SIGGQAHUPUBWNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LQJAALCCPOTJGB-YUMQZZPRSA-N (2S)-1-[(2S)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O LQJAALCCPOTJGB-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- DWYAUVCQDTZIJI-VZFHVOOUSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-amino-3-hydroxybutanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DWYAUVCQDTZIJI-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 2
- KAJAOGBVWCYGHZ-JTQLQIEISA-N (2S)-2-[[2-[(2-azaniumylacetyl)amino]acetyl]amino]-3-phenylpropanoate Chemical compound [NH3+]CC(=O)NCC(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CC=CC=C1 KAJAOGBVWCYGHZ-JTQLQIEISA-N 0.000 description 2
- IESFZVCAVACGPH-PEFMBERDSA-N (2S,3S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-carboxybutanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-methylpentanoic acid Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O IESFZVCAVACGPH-PEFMBERDSA-N 0.000 description 2
- JEDIEMIJYSRUBB-FOHZUACHSA-N (3S)-3-[[(2S,3R)-2-amino-3-hydroxybutanoyl]amino]-4-(carboxymethylamino)-4-oxobutanoic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O JEDIEMIJYSRUBB-FOHZUACHSA-N 0.000 description 2
- KTGFOCFYOZQVRJ-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-amino-3-methylpentanoyl)amino]pentanedioic acid Chemical compound CCC(C)C(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCC(O)=O KTGFOCFYOZQVRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XUUXCWCKKCZEAW-YFKPBYRVSA-N 2-[[(2S)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N XUUXCWCKKCZEAW-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- VWHGTYCRDRBSFI-ZETCQYMHSA-N 2-[[2-[[(2S)-2-amino-4-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]acetic acid Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O VWHGTYCRDRBSFI-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IVLXQGJVBGMLRR-UHFFFAOYSA-N 2-aminoacetic acid;hydron;chloride Chemical compound Cl.NCC(O)=O IVLXQGJVBGMLRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LKKMLIBUAXYLOY-UHFFFAOYSA-N 3-Amino-1-methyl-5H-pyrido[4,3-b]indole Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1C=C(N)N=C2C LKKMLIBUAXYLOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XAEWTDMGFGHWFK-IMJSIDKUSA-N Ala-Asp Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O XAEWTDMGFGHWFK-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 2
- WUGMRIBZSVSJNP-UFBFGSQYSA-N Ala-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(O)=O)=CNC2=C1 WUGMRIBZSVSJNP-UFBFGSQYSA-N 0.000 description 2
- SITWEMZOJNKJCH-UHFFFAOYSA-N Alanyl-Arginine Chemical compound CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCNC(N)=N SITWEMZOJNKJCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JSLGXODUIAFWCF-UHFFFAOYSA-N Arginyl-Asparagine Chemical compound NC(N)=NCCCC(N)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O JSLGXODUIAFWCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZARXTZFGQZBYFO-JQWIXIFHSA-N Asp-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)N)C(O)=O)=CNC2=C1 ZARXTZFGQZBYFO-JQWIXIFHSA-N 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 206010011401 Crohn's disease Diseases 0.000 description 2
- ZSRSLWKGWFFVCM-WDSKDSINSA-N Cys-Pro Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O ZSRSLWKGWFFVCM-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- AYKQJQVWUYEZNU-UHFFFAOYSA-N Cysteinyl-Asparagine Chemical compound SCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC(N)=O AYKQJQVWUYEZNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LVNMAAGSAUGNIC-UHFFFAOYSA-N Cysteinyl-Histidine Chemical compound SCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CN=CN1 LVNMAAGSAUGNIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XZFYRXDAULDNFX-UHFFFAOYSA-N Cysteinyl-Phenylalanine Chemical compound SCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XZFYRXDAULDNFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WYVKPHCYMTWUCW-UHFFFAOYSA-N Cysteinyl-Threonine Chemical compound CC(O)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CS WYVKPHCYMTWUCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OELDIVRKHTYFNG-UHFFFAOYSA-N Cysteinyl-Valine Chemical compound CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CS OELDIVRKHTYFNG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N D-Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N D-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N 0.000 description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 2
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 229940088598 Enzyme Drugs 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 2
- 102100003082 FASLG Human genes 0.000 description 2
- 108010039471 Fas Ligand Protein Proteins 0.000 description 2
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 2
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 2
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 2
- 241000967808 Garra Species 0.000 description 2
- 241000224466 Giardia Species 0.000 description 2
- LSPKYLAFTPBWIL-BYPYZUCNSA-N Glu-Gly Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O LSPKYLAFTPBWIL-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- LLEUXCDZPQOJMY-AAEUAGOBSA-N Glu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)N)C(O)=O)=CNC2=C1 LLEUXCDZPQOJMY-AAEUAGOBSA-N 0.000 description 2
- JZOYFBPIEHCDFV-UHFFFAOYSA-N Glutaminyl-Histidine Chemical compound NC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CN=CN1 JZOYFBPIEHCDFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940088597 Hormone Drugs 0.000 description 2
- 241001502974 Human gammaherpesvirus 8 Species 0.000 description 2
- BCVIOZZGJNOEQS-XKNYDFJKSA-N Ile-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)[C@@H](C)CC BCVIOZZGJNOEQS-XKNYDFJKSA-N 0.000 description 2
- WMDZARSFSMZOQO-DRZSPHRISA-N Ile-Phe Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 WMDZARSFSMZOQO-DRZSPHRISA-N 0.000 description 2
- BBIXOODYWPFNDT-CIUDSAMLSA-N Ile-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O BBIXOODYWPFNDT-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- 210000003405 Ileum Anatomy 0.000 description 2
- 210000000987 Immune System Anatomy 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N L-serine Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- JXNRXNCCROJZFB-RYUDHWBXSA-N L-tyrosyl-L-arginine Chemical compound NC(=N)NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 JXNRXNCCROJZFB-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- NTISAKGPIGTIJJ-IUCAKERBSA-N Leu-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C NTISAKGPIGTIJJ-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- 208000000429 Leukemia, Lymphocytic, Chronic, B-Cell Diseases 0.000 description 2
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 2
- 108060001084 Luciferase family Proteins 0.000 description 2
- NPBGTPKLVJEOBE-IUCAKERBSA-N Lys-Arg Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N NPBGTPKLVJEOBE-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- 210000004379 Membranes Anatomy 0.000 description 2
- KBOPZPXVLCULAV-UHFFFAOYSA-N Mesalazine Chemical compound NC1=CC=C(O)C(C(O)=O)=C1 KBOPZPXVLCULAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTZXSYBVOSXBEJ-WDSKDSINSA-N Met-Asp Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O QTZXSYBVOSXBEJ-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 230000035633 Metabolized Effects 0.000 description 2
- 108010061543 Neutralizing Antibodies Proteins 0.000 description 2
- 208000002154 Non-Small-Cell Lung Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 108009000071 Non-small cell lung cancer Proteins 0.000 description 2
- 241000283898 Ovis Species 0.000 description 2
- 210000003819 Peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- MIDZLCFIAINOQN-WPRPVWTQSA-N Phe-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 MIDZLCFIAINOQN-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 2
- OZILORBBPKKGRI-RYUDHWBXSA-N Phe-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 OZILORBBPKKGRI-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 2
- HWMGTNOVUDIKRE-UWVGGRQHSA-N Phe-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 HWMGTNOVUDIKRE-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- IEHDJWSAXBGJIP-RYUDHWBXSA-N Phe-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]([NH3+])CC1=CC=CC=C1 IEHDJWSAXBGJIP-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 2
- 229960005190 Phenylalanine Drugs 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- JQOHKCDMINQZRV-WDSKDSINSA-N Pro-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]1CCC[NH2+]1 JQOHKCDMINQZRV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- SHAQGFGGJSLLHE-BQBZGAKWSA-N Pro-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]1CCC[NH2+]1 SHAQGFGGJSLLHE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 108010033725 Recombinant Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000007312 Recombinant Proteins Human genes 0.000 description 2
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 2
- 108010070144 Single-Chain Antibodies Proteins 0.000 description 2
- 102000005632 Single-Chain Antibodies Human genes 0.000 description 2
- 206010041823 Squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 2
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N Tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 2
- HYLXOQURIOCKIH-VQVTYTSYSA-N Thr-Arg Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N HYLXOQURIOCKIH-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 2
- BECPPKYKPSRKCP-ZDLURKLDSA-N Thr-Glu Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O BECPPKYKPSRKCP-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 231100000765 Toxin Toxicity 0.000 description 2
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 2
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 2
- DZHDVYLBNKMLMB-ZFWWWQNUSA-N Trp-Lys Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)=CNC2=C1 DZHDVYLBNKMLMB-ZFWWWQNUSA-N 0.000 description 2
- IMMPMHKLUUZKAZ-WMZOPIPTSA-N Trp-Phe Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)N)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 IMMPMHKLUUZKAZ-WMZOPIPTSA-N 0.000 description 2
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 2
- 108010001801 Tumor Necrosis Factor-alpha Proteins 0.000 description 2
- OYOQKMOWUDVWCR-RYUDHWBXSA-N Tyr-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OYOQKMOWUDVWCR-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 2
- QZOSVNLXLSNHQK-UHFFFAOYSA-N Tyrosyl-Aspartate Chemical compound OC(=O)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 QZOSVNLXLSNHQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010046392 Ureteric cancer Diseases 0.000 description 2
- WPSXZFTVLIAPCN-UHFFFAOYSA-N Valyl-Cysteine Chemical compound CC(C)C(N)C(=O)NC(CS)C(O)=O WPSXZFTVLIAPCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010047461 Viral infection Diseases 0.000 description 2
- 208000001756 Virus Disease Diseases 0.000 description 2
- 230000003213 activating Effects 0.000 description 2
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 108010008685 alanyl-glutamyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 2
- 108010045350 alanyl-tyrosyl-alanine Proteins 0.000 description 2
- 102000012086 alpha-L-Fucosidase Human genes 0.000 description 2
- 108010061314 alpha-L-Fucosidase Proteins 0.000 description 2
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 2
- 108010009111 arginyl-glycyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 2
- 108010043240 arginyl-leucyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 108010068380 arginylarginine Proteins 0.000 description 2
- 108010077245 asparaginyl-proline Proteins 0.000 description 2
- 108010093581 aspartyl-proline Proteins 0.000 description 2
- 108010038633 aspartylglutamate Proteins 0.000 description 2
- 201000004984 autoimmune cardiomyopathy Diseases 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000009566 cancer vaccine Methods 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 230000000295 complement Effects 0.000 description 2
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 230000000875 corresponding Effects 0.000 description 2
- 230000000139 costimulatory Effects 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 108010016616 cysteinylglycine Proteins 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic Effects 0.000 description 2
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 2
- 239000002619 cytotoxin Substances 0.000 description 2
- 230000005860 defense response to virus Effects 0.000 description 2
- 201000008286 diarrhea Diseases 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 230000000534 elicitor Effects 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012149 elution buffer Substances 0.000 description 2
- 201000002491 encephalomyelitis Diseases 0.000 description 2
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic Effects 0.000 description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000010579 first pass effect Methods 0.000 description 2
- 238000010230 functional analysis Methods 0.000 description 2
- 238000002825 functional assay Methods 0.000 description 2
- KGNSGRRALVIRGR-UHFFFAOYSA-N gln-tyr Chemical compound NC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 KGNSGRRALVIRGR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 108010080575 glutamyl-aspartyl-alanine Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010000434 glycyl-alanyl-leucine Proteins 0.000 description 2
- 108010059898 glycyl-tyrosyl-lysine Proteins 0.000 description 2
- 108010020688 glycylhistidine Proteins 0.000 description 2
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 2
- 239000001963 growth media Substances 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 2
- 230000001506 immunosuppresive Effects 0.000 description 2
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 2
- 230000001771 impaired Effects 0.000 description 2
- 230000000415 inactivating Effects 0.000 description 2
- 230000002458 infectious Effects 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal Effects 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 108010009298 lysylglutamic acid Proteins 0.000 description 2
- 108010038320 lysylphenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 210000004962 mammalian cells Anatomy 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 229960004963 mesalazine Drugs 0.000 description 2
- 200000000023 metastatic cancer Diseases 0.000 description 2
- 108010005942 methionylglycine Proteins 0.000 description 2
- 230000001264 neutralization Effects 0.000 description 2
- 230000036961 partial Effects 0.000 description 2
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 2
- 108010084572 phenylalanyl-valine Proteins 0.000 description 2
- 108010018625 phenylalanylarginine Proteins 0.000 description 2
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 2
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000002459 sustained Effects 0.000 description 2
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 2
- 108010033670 threonyl-aspartyl-tyrosine Proteins 0.000 description 2
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 2
- 108020003112 toxins Proteins 0.000 description 2
- 108010045269 tryptophyltryptophan Proteins 0.000 description 2
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 2
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- 230000017613 viral reproduction Effects 0.000 description 2
- XITLYYAIPBBHPX-UHFFFAOYSA-N γ-glutamyl-Isoleucine Chemical compound CCC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(N)=O XITLYYAIPBBHPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N (+)-methoprene Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CXRCVCURMBFFOL-FXQIFTODSA-N (2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-2-azaniumylpropanoyl]amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carboxylate Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O CXRCVCURMBFFOL-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- JSGWNFKWZNPDAV-YDHLFZDLSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]butanedioic acid Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 JSGWNFKWZNPDAV-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 1
- VKVDRTGWLVZJOM-DCAQKATOSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylpentanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VKVDRTGWLVZJOM-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- BQSLGJHIAGOZCD-CIUDSAMLSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylpentanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BQSLGJHIAGOZCD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- ZRLUISBDKUWAIZ-CIUDSAMLSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylpentanoyl]amino]propanoyl]amino]butanedioic acid Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O ZRLUISBDKUWAIZ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- STGXWWBXWXZOER-MBLNEYKQSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-amino-3-hydroxybutanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 STGXWWBXWXZOER-MBLNEYKQSA-N 0.000 description 1
- NJEMRSFGDNECGF-GCJQMDKQSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-amino-3-hydroxybutanoyl]amino]propanoyl]amino]butanedioic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O NJEMRSFGDNECGF-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 1
- BVZABQIRMYTKCF-JSGCOSHPSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-azaniumyl-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoate Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O)=CNC2=C1 BVZABQIRMYTKCF-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- ILDSIMPXNFWKLH-KATARQTJSA-N (2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ILDSIMPXNFWKLH-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- CCQOOWAONKGYKQ-BYPYZUCNSA-N (2S)-2-[[2-[(2-azaniumylacetyl)amino]acetyl]amino]propanoate Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)CN CCQOOWAONKGYKQ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- IAJFFZORSWOZPQ-SRVKXCTJSA-N (2S)-4-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O IAJFFZORSWOZPQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- OQANPHBRHBJGNZ-FYJGNVAPSA-N (3E)-6-oxo-3-[[4-(pyridin-2-ylsulfamoyl)phenyl]hydrazinylidene]cyclohexa-1,4-diene-1-carboxylic acid Chemical compound C1=CC(=O)C(C(=O)O)=C\C1=N\NC1=CC=C(S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)C=C1 OQANPHBRHBJGNZ-FYJGNVAPSA-N 0.000 description 1
- WTMZXOPHTIVFCP-QEWYBTABSA-N (4S)-4-amino-5-[[(2S,3S)-1-[[(1S)-1-carboxy-2-phenylethyl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 WTMZXOPHTIVFCP-QEWYBTABSA-N 0.000 description 1
- 125000000027 (C1-C10) alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 229920000160 (ribonucleotides)n+m Polymers 0.000 description 1
- BUXAPSQPMALTOY-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-amino-3-sulfanylpropanoyl)amino]pentanedioic acid Chemical compound SCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCC(O)=O BUXAPSQPMALTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YOKVEHGYYQEQOP-QWRGUYRKSA-N 2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-azaniumyl-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetate Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O YOKVEHGYYQEQOP-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 101700027111 3SA0 Proteins 0.000 description 1
- XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N 4-amino-5-[(1-carboxy-2-phenylethyl)amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940100198 ALKYLATING AGENTS Drugs 0.000 description 1
- 241000235389 Absidia Species 0.000 description 1
- 241000224424 Acanthamoeba sp. Species 0.000 description 1
- 206010000830 Acute leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010000880 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010001382 Adrenal suppression Diseases 0.000 description 1
- HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N Ala-Gln Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ALZVPLKYDKJKQU-XVKPBYJWSA-N Ala-Tyr Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 ALZVPLKYDKJKQU-XVKPBYJWSA-N 0.000 description 1
- LIWMQSWFLXEGMA-WDSKDSINSA-N Ala-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N LIWMQSWFLXEGMA-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- 241000269328 Amphibia Species 0.000 description 1
- 206010061424 Anal cancer Diseases 0.000 description 1
- 229940064005 Antibiotic throat preparations Drugs 0.000 description 1
- 229940083879 Antibiotics FOR TREATMENT OF HEMORRHOIDS AND ANAL FISSURES FOR TOPICAL USE Drugs 0.000 description 1
- 229940042052 Antibiotics for systemic use Drugs 0.000 description 1
- 108010083359 Antigen Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000006306 Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 229940042786 Antitubercular Antibiotics Drugs 0.000 description 1
- 208000006400 Arbovirus Encephalitis Diseases 0.000 description 1
- WVRUNFYJIHNFKD-WDSKDSINSA-N Arg-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N WVRUNFYJIHNFKD-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- PQBHGSGQZSOLIR-RYUDHWBXSA-N Arg-Phe Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PQBHGSGQZSOLIR-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 206010003246 Arthritis Diseases 0.000 description 1
- HZYFHQOWCFUSOV-IMJSIDKUSA-N Asn-Asp Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O HZYFHQOWCFUSOV-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- IIFDPDVJAHQFSR-WHFBIAKZSA-N Asn-Glu Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O IIFDPDVJAHQFSR-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- DVUFTQLHHHJEMK-IMJSIDKUSA-N Asp-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O DVUFTQLHHHJEMK-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- CKAJHWFHHFSCDT-WHFBIAKZSA-N Asp-Glu Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O CKAJHWFHHFSCDT-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- IQTUDDBANZYMAR-UHFFFAOYSA-N Asparaginyl-Methionine Chemical compound CSCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC(N)=O IQTUDDBANZYMAR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005261 Aspartic Acid Drugs 0.000 description 1
- FKBFDTRILNZGAI-UHFFFAOYSA-N Aspartyl-Cysteine Chemical compound OC(=O)CC(N)C(=O)NC(CS)C(O)=O FKBFDTRILNZGAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DYDKXJWQCIVTMR-UHFFFAOYSA-N Aspartyl-Methionine Chemical compound CSCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC(O)=O DYDKXJWQCIVTMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 208000006673 Asthma Diseases 0.000 description 1
- 206010003816 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 101710042656 BQ2027_MB1231C Proteins 0.000 description 1
- 241000223848 Babesia microti Species 0.000 description 1
- 241000193738 Bacillus anthracis Species 0.000 description 1
- 208000007456 Balantidiasis Diseases 0.000 description 1
- 241001235572 Balantioides coli Species 0.000 description 1
- 241000590572 Bia <butterfly> Species 0.000 description 1
- 241000228405 Blastomyces dermatitidis Species 0.000 description 1
- 108010007539 Blocking Antibodies Proteins 0.000 description 1
- 210000001218 Blood-Brain Barrier Anatomy 0.000 description 1
- 206010005949 Bone cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000003508 Botulism Diseases 0.000 description 1
- 206010006143 Brain stem glioma Diseases 0.000 description 1
- 102100013077 CD4 Human genes 0.000 description 1
- 101700022938 CD4 Proteins 0.000 description 1
- 102100008191 CD8A Human genes 0.000 description 1
- 101700054655 CD8A Proteins 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 210000000170 Cell Membrane Anatomy 0.000 description 1
- 108010019670 Chimeric Antigen Receptors Proteins 0.000 description 1
- 241000606161 Chlamydia Species 0.000 description 1
- 206010008631 Cholera Diseases 0.000 description 1
- 206010008943 Chronic leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 241000223205 Coccidioides immitis Species 0.000 description 1
- 229920001405 Coding region Polymers 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 210000001072 Colon Anatomy 0.000 description 1
- 206010052358 Colorectal cancer metastatic Diseases 0.000 description 1
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 description 1
- 229940064701 Corticosteroid nasal preparations for topical use Drugs 0.000 description 1
- 229960001334 Corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- 241000938605 Crocodylia Species 0.000 description 1
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 description 1
- 241000221204 Cryptococcus neoformans Species 0.000 description 1
- 241000295636 Cryptosporidium sp. Species 0.000 description 1
- 206010011652 Cushing's syndrome Diseases 0.000 description 1
- VBIIZCXWOZDIHS-UHFFFAOYSA-N Cysteinyl-Isoleucine Chemical compound CCC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CS VBIIZCXWOZDIHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010015742 Cytochrome P-450 Enzyme System Proteins 0.000 description 1
- 102000003849 Cytochrome P450 Human genes 0.000 description 1
- 108010090461 DFG peptide Proteins 0.000 description 1
- 101710007887 DHFR Proteins 0.000 description 1
- 102000003915 DNA Topoisomerases Human genes 0.000 description 1
- 108090000323 DNA Topoisomerases Proteins 0.000 description 1
- 241000725619 Dengue virus Species 0.000 description 1
- 230000036947 Dissociation constant Effects 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 102000003425 EC 1.14.18.1 Human genes 0.000 description 1
- 108060008724 EC 1.14.18.1 Proteins 0.000 description 1
- 231100000491 EC50 Toxicity 0.000 description 1
- 101700079760 EFCB Proteins 0.000 description 1
- 101710005090 ERVFC1-1 Proteins 0.000 description 1
- 101710013371 ERVS71-1 Proteins 0.000 description 1
- 241001466953 Echovirus Species 0.000 description 1
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 description 1
- 241000224432 Entamoeba histolytica Species 0.000 description 1
- 229940007078 Entamoeba histolytica Drugs 0.000 description 1
- 241000709661 Enterovirus Species 0.000 description 1
- 241000991587 Enterovirus C Species 0.000 description 1
- 229920001272 Exogenous DNA Polymers 0.000 description 1
- 241000710831 Flavivirus Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- 206010017758 Gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- OWOFCNWTMWOOJJ-WDSKDSINSA-N Gln-Glu Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O OWOFCNWTMWOOJJ-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- JZDHUJAFXGNDSB-WHFBIAKZSA-N Glu-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O JZDHUJAFXGNDSB-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- SXGAGTVDWKQYCX-BQBZGAKWSA-N Glu-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O SXGAGTVDWKQYCX-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- JSIQVRIXMINMTA-ZDLURKLDSA-N Glu-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O JSIQVRIXMINMTA-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- YSWHPLCDIMUKFE-QWRGUYRKSA-N Glu-Tyr Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 YSWHPLCDIMUKFE-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 229960002989 Glutamic Acid Drugs 0.000 description 1
- VHLZDSUANXBJHW-UHFFFAOYSA-N Glutaminyl-Phenylalanine Chemical compound NC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 VHLZDSUANXBJHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MFBYPDKTAJXHNI-VKHMYHEASA-N Gly-Cys Chemical compound [NH3+]CC(=O)N[C@@H](CS)C([O-])=O MFBYPDKTAJXHNI-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- IEFJWDNGDZAYNZ-BYPYZUCNSA-N Gly-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O IEFJWDNGDZAYNZ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- YIWFXZNIBQBFHR-LURJTMIESA-N Gly-His Chemical compound [NH3+]CC(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CN=CN1 YIWFXZNIBQBFHR-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000019483 Glycosyltransferases Human genes 0.000 description 1
- 108091022077 Glycosyltransferases Proteins 0.000 description 1
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 210000003714 Granulocytes Anatomy 0.000 description 1
- 206010053759 Growth retardation Diseases 0.000 description 1
- 229940093922 Gynecological Antibiotics Drugs 0.000 description 1
- 102100019126 HBB Human genes 0.000 description 1
- 108091005902 Hemoglobin subunit beta Proteins 0.000 description 1
- 208000009889 Herpes Simplex Diseases 0.000 description 1
- LYCVKHSJGDMDLM-LURJTMIESA-N His-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 LYCVKHSJGDMDLM-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- KRBMQYPTDYSENE-BQBZGAKWSA-N His-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CNC=N1 KRBMQYPTDYSENE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- VLDVBZICYBVQHB-IUCAKERBSA-N His-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]([NH3+])CC1=CN=CN1 VLDVBZICYBVQHB-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- IDXZDKMBEXLFMB-UHFFFAOYSA-N Histidinyl-Isoleucine Chemical compound CCC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 IDXZDKMBEXLFMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000228404 Histoplasma capsulatum Species 0.000 description 1
- 206010020243 Hodgkin's disease Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 241000714260 Human T-lymphotropic virus 1 Species 0.000 description 1
- 241000701085 Human alphaherpesvirus 3 Species 0.000 description 1
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 1
- 210000004754 Hybrid Cells Anatomy 0.000 description 1
- 206010020610 Hypercorticoidism Diseases 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 102100004115 ICAM1 Human genes 0.000 description 1
- 229960000310 ISOLEUCINE Drugs 0.000 description 1
- 102000009490 IgG Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010073807 IgG Receptors Proteins 0.000 description 1
- RCFDOSNHHZGBOY-ACZMJKKPSA-N Ile-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O RCFDOSNHHZGBOY-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- JWBXCSQZLLIOCI-GUBZILKMSA-N Ile-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C JWBXCSQZLLIOCI-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 108010064593 Intercellular Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 229940047124 Interferons Drugs 0.000 description 1
- 210000004347 Intestinal Mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 210000000936 Intestines Anatomy 0.000 description 1
- 229920002459 Intron Polymers 0.000 description 1
- WKXVAXOSIPTXEC-UHFFFAOYSA-N Isoleucyl-Aspartate Chemical compound CCC(C)C(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC(O)=O WKXVAXOSIPTXEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000007766 Kaposi Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 210000000244 Kidney Pelvis Anatomy 0.000 description 1
- 241000588748 Klebsiella Species 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 241001245510 Lambia <signal fly> Species 0.000 description 1
- 241000589248 Legionella Species 0.000 description 1
- 208000007764 Legionnaires' Disease Diseases 0.000 description 1
- 241000222722 Leishmania <genus> Species 0.000 description 1
- 241000222727 Leishmania donovani Species 0.000 description 1
- 241000209499 Lemna Species 0.000 description 1
- 206010024238 Leptospirosis Diseases 0.000 description 1
- HIZYETOZLYFUFF-BQBZGAKWSA-N Leu-Cys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O HIZYETOZLYFUFF-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- AZLASBBHHSLQDB-GUBZILKMSA-N Leu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C AZLASBBHHSLQDB-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 208000008456 Leukemia, Myelogenous, Chronic, BCR-ABL Positive Diseases 0.000 description 1
- 208000007046 Leukemia, Myeloid, Acute Diseases 0.000 description 1
- 206010025135 Lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 206010025169 Lyme disease Diseases 0.000 description 1
- 210000004698 Lymphocytes Anatomy 0.000 description 1
- 210000003171 Lymphocytes, Tumor-Infiltrating Anatomy 0.000 description 1
- NVGBPTNZLWRQSY-UWVGGRQHSA-N Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN NVGBPTNZLWRQSY-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- MYTOTTSMVMWVJN-STQMWFEESA-N Lys-Tyr Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 MYTOTTSMVMWVJN-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- IGRMTQMIDNDFAA-UHFFFAOYSA-N Lysyl-Histidine Chemical compound NCCCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CN=CN1 IGRMTQMIDNDFAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100008857 MLANA Human genes 0.000 description 1
- 101710012533 MLANA Proteins 0.000 description 1
- 229920002521 Macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 210000002540 Macrophages Anatomy 0.000 description 1
- 241000712079 Measles morbillivirus Species 0.000 description 1
- 210000002752 Melanocytes Anatomy 0.000 description 1
- 206010027406 Mesothelioma Diseases 0.000 description 1
- MUMXFARPYQTTSL-BQBZGAKWSA-N Met-Gln Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O MUMXFARPYQTTSL-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- ADHNYKZHPOEULM-BQBZGAKWSA-N Met-Glu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O ADHNYKZHPOEULM-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- QXOHLNCNYLGICT-YFKPBYRVSA-N Met-Gly Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O QXOHLNCNYLGICT-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 230000036740 Metabolism Effects 0.000 description 1
- 206010061289 Metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000235395 Mucor Species 0.000 description 1
- 241000235388 Mucorales Species 0.000 description 1
- 241000711386 Mumps virus Species 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 210000000066 Myeloid Cells Anatomy 0.000 description 1
- 229950006780 N-Acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- 108010047562 NGR peptide Proteins 0.000 description 1
- 241000224438 Naegleria fowleri Species 0.000 description 1
- 241000588653 Neisseria Species 0.000 description 1
- 241001045988 Neogene Species 0.000 description 1
- 241001126259 Nippostrongylus brasiliensis Species 0.000 description 1
- 206010029592 Non-Hodgkin's lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 108091005503 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000003725 ONE-Glo Luciferase Assay System Methods 0.000 description 1
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- QQBDLJCYGRGAKP-FOCLMDBBSA-N Olsalazine Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(\N=N\C=2C=C(C(O)=CC=2)C(O)=O)=C1 QQBDLJCYGRGAKP-FOCLMDBBSA-N 0.000 description 1
- 210000001672 Ovary Anatomy 0.000 description 1
- 241000526686 Paracoccidioides brasiliensis Species 0.000 description 1
- 206010034299 Penile cancer Diseases 0.000 description 1
- OHUXOEXBXPZKPT-STQMWFEESA-N Phe-His Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 OHUXOEXBXPZKPT-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- JWBLQDDHSDGEGR-DRZSPHRISA-N Phe-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 JWBLQDDHSDGEGR-DRZSPHRISA-N 0.000 description 1
- GKZIWHRNKRBEOH-HOTGVXAUSA-N Phe-Phe Chemical compound C([C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C([O-])=O)C1=CC=CC=C1 GKZIWHRNKRBEOH-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 1
- FSXRLASFHBWESK-HOTGVXAUSA-N Phe-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 FSXRLASFHBWESK-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 1
- 210000004214 Philadelphia Chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 206010061538 Pituitary tumour benign Diseases 0.000 description 1
- 206010035148 Plague Diseases 0.000 description 1
- 210000002381 Plasma Anatomy 0.000 description 1
- 241000223810 Plasmodium vivax Species 0.000 description 1
- 241000233872 Pneumocystis carinii Species 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 description 1
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- 229920001710 Polyorthoester Polymers 0.000 description 1
- 208000006664 Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- GVUVRRPYYDHHGK-UHFFFAOYSA-N Prolyl-Threonine Chemical compound CC(O)C(C(O)=O)NC(=O)C1CCCN1 GVUVRRPYYDHHGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 description 1
- 241000125945 Protoparvovirus Species 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 229940055023 Pseudomonas aeruginosa Drugs 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- 239000007759 RPMI Media 1640 Substances 0.000 description 1
- 101700079635 RTL1 Proteins 0.000 description 1
- 241000711798 Rabies lyssavirus Species 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 206010038038 Rectal cancer Diseases 0.000 description 1
- 241000725643 Respiratory syncytial virus Species 0.000 description 1
- 241000235527 Rhizopus Species 0.000 description 1
- 241000606701 Rickettsia Species 0.000 description 1
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 description 1
- 241000710799 Rubella virus Species 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 206010039447 Salmonellosis Diseases 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- 206010062261 Spinal cord neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000000952 Spleen Anatomy 0.000 description 1
- 241001149962 Sporothrix Species 0.000 description 1
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 229940076185 Staphylococcus aureus Drugs 0.000 description 1
- 108010057517 Strep-avidin conjugated horseradish peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- 229960001940 Sulfasalazine Drugs 0.000 description 1
- 102400000368 Surface protein Human genes 0.000 description 1
- 206010042971 T-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 102000004591 Telomerase Human genes 0.000 description 1
- 108010017842 Telomerase Proteins 0.000 description 1
- 210000003411 Telomere Anatomy 0.000 description 1
- 206010057644 Testis cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 1
- 229940024982 Topical Antifungal Antibiotics Drugs 0.000 description 1
- 241000223997 Toxoplasma gondii Species 0.000 description 1
- 229940118701 Toxoplasma gondii Drugs 0.000 description 1
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 1
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H Tricalcium phosphate Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 241000223105 Trypanosoma brucei Species 0.000 description 1
- 241000223109 Trypanosoma cruzi Species 0.000 description 1
- DXYQIGZZWYBXSD-UHFFFAOYSA-N Tryptophyl-Proline Chemical compound C=1NC2=CC=CC=C2C=1CC(N)C(=O)N1CCCC1C(O)=O DXYQIGZZWYBXSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YBRHKUNWEYBZGT-UHFFFAOYSA-N Tryptophyl-Threonine Chemical compound C1=CC=C2C(CC(N)C(=O)NC(C(O)C)C(O)=O)=CNC2=C1 YBRHKUNWEYBZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007537 Type II DNA Topoisomerases Human genes 0.000 description 1
- 108010046308 Type II DNA Topoisomerases Proteins 0.000 description 1
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 description 1
- 102400000757 Ubiquitin Human genes 0.000 description 1
- 206010046766 Uterine cancer Diseases 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 206010047741 Vulval cancer Diseases 0.000 description 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 201000005510 acute lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 201000005188 adrenal gland cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000005255 adrenal gland hyperfunction Diseases 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 108010045023 alanyl-prolyl-tyrosine Proteins 0.000 description 1
- 108010070783 alanyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic Effects 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000004037 angiogenesis inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940121369 angiogenesis inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 239000000611 antibody drug conjugate Substances 0.000 description 1
- 108091008116 antibody drug conjugates Proteins 0.000 description 1
- 238000009175 antibody therapy Methods 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic Effects 0.000 description 1
- 239000003080 antimitotic agent Substances 0.000 description 1
- 201000011165 anus cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 108010013835 arginine glutamate Proteins 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004104 aryloxy group Chemical group 0.000 description 1
- 239000010425 asbestos Substances 0.000 description 1
- 210000001815 ascending colon Anatomy 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000012131 assay buffer Substances 0.000 description 1
- 201000009596 autoimmune hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal Effects 0.000 description 1
- 229920000249 biocompatible polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010322 bone marrow transplantation Methods 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000002458 cell surface marker Substances 0.000 description 1
- 230000005591 charge neutralization Effects 0.000 description 1
- 230000000973 chemotherapeutic Effects 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000009104 chemotherapy regimen Methods 0.000 description 1
- 201000006934 chronic myeloid leukemia Diseases 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 229960005188 collagen Drugs 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 201000007336 cryptococcosis Diseases 0.000 description 1
- 238000010192 crystallographic characterization Methods 0.000 description 1
- 101700067609 ctx Proteins 0.000 description 1
- VOLSCWDWGMWXGO-UHFFFAOYSA-N cyclobuten-1-yl acetate Chemical compound CC(=O)OC1=CCC1 VOLSCWDWGMWXGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent Effects 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 201000008325 diseases of cellular proliferation Diseases 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 210000000750 endocrine system Anatomy 0.000 description 1
- 201000003914 endometrial carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N ethanolamine Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005038 ethylene vinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 201000001343 fallopian tube carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037240 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 108010037389 glutamyl-cysteinyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 108010079547 glutamylmethionine Proteins 0.000 description 1
- 108010033719 glycyl-histidyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010079413 glycyl-prolyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010077515 glycylproline Proteins 0.000 description 1
- 239000003163 gonadal steroid hormone Substances 0.000 description 1
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000002443 helper T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 1
- 108010045383 histidyl-glycyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010028295 histidylhistidine Proteins 0.000 description 1
- 108010092114 histidylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 239000003276 histone deacetylase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940121372 histone deacetylase inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 230000001976 improved Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000004073 interleukin-2 production Effects 0.000 description 1
- 229940079866 intestinal antibiotics Drugs 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 108010031424 isoleucyl-prolyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010060857 isoleucyl-valyl-tyrosine Proteins 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 108010090333 leucyl-lysyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010073472 leucyl-prolyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 201000001037 lung lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 108010056787 lysyl-arginyl-glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 1
- 201000004792 malaria Diseases 0.000 description 1
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000002609 media Substances 0.000 description 1
- 239000000155 melt Substances 0.000 description 1
- 229940072739 mesalamine Drugs 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000035786 metabolism Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic Effects 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000003278 mimic Effects 0.000 description 1
- 238000001823 molecular biology technique Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000014399 negative regulation of angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing Effects 0.000 description 1
- 230000030147 nuclear export Effects 0.000 description 1
- 229960004110 olsalazine Drugs 0.000 description 1
- 230000002246 oncogenic Effects 0.000 description 1
- 231100000590 oncogenic Toxicity 0.000 description 1
- 229940005935 ophthalmologic Antibiotics Drugs 0.000 description 1
- 230000003287 optical Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organs Anatomy 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic Effects 0.000 description 1
- 244000045947 parasites Species 0.000 description 1
- 230000000849 parathyroid Effects 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000001575 pathological Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 125000001151 peptidyl group Chemical group 0.000 description 1
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000000090 phagocyte Effects 0.000 description 1
- 108010082795 phenylalanyl-arginyl-arginine Proteins 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000865 phosphorylative Effects 0.000 description 1
- 201000005746 pituitary adenoma Diseases 0.000 description 1
- 101700016463 pls Proteins 0.000 description 1
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000001402 polyadenylating Effects 0.000 description 1
- 229920001601 polyetherimide Polymers 0.000 description 1
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 description 1
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000002335 preservative Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000007914 proliferative diabetic retinopathy Diseases 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged Effects 0.000 description 1
- 201000005825 prostate adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000003207 proteasome inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 239000012268 protein inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940121649 protein inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 238000003521 protein stability assay Methods 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 201000001275 rectum cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent Effects 0.000 description 1
- 229910052895 riebeckite Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003873 salicylate salts Chemical class 0.000 description 1
- 231100000486 side effect Toxicity 0.000 description 1
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000002314 small intestine cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000003003 spiro group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing Effects 0.000 description 1
- 201000003120 testicular cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 108010031491 threonyl-lysyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 1
- 229940083878 topical for treatment of hemorrhoids and anal fissures Corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional Effects 0.000 description 1
- 230000001131 transforming Effects 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 230000001960 triggered Effects 0.000 description 1
- 230000004565 tumor cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000005429 turbidity Methods 0.000 description 1
- 239000005483 tyrosine kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940121358 tyrosine kinase inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 108010079202 tyrosyl-alanyl-cysteine Proteins 0.000 description 1
- 108010017949 tyrosyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010035534 tyrosyl-leucyl-alanine Proteins 0.000 description 1
- 108010071635 tyrosyl-prolyl-arginine Proteins 0.000 description 1
- 108010078580 tyrosylleucine Proteins 0.000 description 1
- 201000011294 ureter cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000003761 vaginal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000004916 vulva carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 229920003169 water-soluble polymer Polymers 0.000 description 1
- ZQFAGNFSIZZYBA-UHFFFAOYSA-N γ-glutamyl-Tryptophan Chemical compound C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(CCC(N)=O)N)C(O)=O)=CNC2=C1 ZQFAGNFSIZZYBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Abstract
Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, в частности к новому антителу, и может быть использовано в медицине. Изобретение позволяет получить выделенное моноклональное антитело, способное связываться с PD-1 с повышенной аффинностью, и раскрывает возможность его применения, в том числе и в составе фармацевтической композиции, для подавления роста опухолевых клеток при терапии различных раковых заболеваний. 3 н. и 8 з.п. ф-лы, 12 табл., 2 ил., 10 пр.
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
[0001] Настоящее изобретение в целом относится к выделенному моноклональному антителу, в частности мышиному, гибридному или гуманизированному моноклональному антителу, которое специфично связывается с PD-1 человека с высокой аффинностью и функциональной активностью. Также предложена кодирующая указанное антитело молекула нуклеиновой кислоты, вектор экспрессии, клетка-хозяин и способ экспрессии указанного антитела. Настоящее изобретение дополнительно обеспечивает иммуноконъюгат, биспецифичную молекулу, онколитический вирус и фармацевтическую композицию, содержащую антитело, а также способ диагностики и лечения с использованием антитела против PD-1 согласно изобретению.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[0002] Белок программируемой клеточной гибели 1, также известный как PD-1 или CD279, представляет собой член семейства T-клеточных регуляторов CD28 и экспрессируется на активированных B-клетках, T-клетках и миелоидных клетках (Agata et al., (1996) Int Immunol 8:765-72; Okazaki et al., (2002) Curr. Opin. Immunol. 14: 391779-82; Bennett et al., (2003) J Immunol 170:711-8). Он содержит расположенный близко к мембране иммунорецепторный тирозиновый ингибиторный мотив (ITIM) и удаленный от мембраны тирозиновый переключающий мотив (ITSM) (Thomas, M. L. (1995) J Exp Med 181:1953-6; Vivier, E and Daeron, M (1997) Immunol Today 18:286-91). Были идентифицированы два лиганда PD-1 - PD-L1 и PD-L2, - оба из которых являются гомологами B7, которые связываются с PD-1, но не связываются с другими членами семейства CD28.
[0003] Некоторые данные дают основание полагать, что PD-1 и его лиганды обеспечивают отрицательную регуляцию иммунных ответов. Например, было обнаружено, что PD-1 присутствует в большом количестве в различных раковых опухолях человека (Dong et al., (2002) Nat. Med. 8:787-9). Также сообщалось, что взаимодействие между PD-1 и PD-L1 приводит к снижению уровня инфильтрирующих опухоль лимфоцитов и опосредованной T-клеточным рецептором пролиферации, а также ускользанию раковых клеток от иммунологического надзора (Dong et al., (2003) J. Mol. Med. 81:281-7; Blank et al., (2005) Cancer Immunol. Immunother. 54:307-314; Konishi et al., (2004) Clin. Cancer Res. 10:5094-100). Исследования также показали, что ингибирование локального взаимодействия PD-1 с PD-L1 может устранять подавление иммунитета, и указанный эффект усиливается при блокировании взаимодействия также между PD-1 и PD-L2 (Iwai et al., (2002) Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 99:12293-7; Brown et al., (2003) J. Immunol. 170:1257-66).
[0004] У животных с недостаточностью PD-1 могут развиваться различные аутоиммунные фенотипы, включая аутоиммунную кардиомиопатию и волчаночный синдром с артритом и нефритом (Nishimura et al., (1999) Immunity 11:141-51; Nishimura et al., (2001) Science 291:319-22). Кроме того, было обнаружено, что PD-1 принимает участие в аутоиммунном энцефаломиелите, системной красной волчанке, реакции «трансплантат против хозяина» (РТПХ), диабете I типа и ревматоидном артрите (Salama et al., (2003) J Exp Med 198:71-78; Prokunina and Alarcon-Riquelme (2004) Hum Mol Genet 13:R143; Nielsen et al., (2004) Lupus 13:510). На мышиной опухолевой линии B-клеток было показано, что ITSM-мотив PD-1 является важным для блокирования BCR-опосредованного Ca2+-тока и тирозинового фосфорилирования нижележащих эффекторных молекул (Okazaki et al., (2001) PNAS 98:13866-71).
[0005] Ряд агентов для противораковой иммунотерапии, которые нацелены на PD-1, были разработаны для лечения заболевания. Одно такое антитело против PD-1 представляет собой ниволумаб (продается под торговым названием OPDIVO® компанией Bristol Myers Squibb), который вызывал полные или частичные ответы в случае немелкоклеточного рака легких, меланомы и почечно-клеточного рака в клиническом исследовании, включающем в общем 296 пациентов (Topalian SL et al., (2012) The New England Journal of Medicine. 366 (26): 2443-54). Он был одобрен в Японии в 2014 и Управлением по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных средств США (FDA) в 2014 для лечения метастатической меланомы. Другое антитело против PD-1, пемролизумаб (KEYTRUDA™, MK-3475, Merck), направленное на PD-1, было также одобрено Управлением по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных средств США (FDA) в 2014 для лечения метастатической меланомы. Он используется в клинических исследованиях в США для лечения рака легких, лимфомы и мезотелиомы.
[0006] Несмотря на наличие уже разработанных и одобренных антител против PD-1, существует необходимость в дополнительных моноклональных антителах, обладающих повышенной аффинностью связывания с PD-1 и другими желаемыми фармацевтическими характеристиками.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0007] Настоящее изобретение обеспечивает выделенное моноклональное антитело, например, мышиное, человеческое, гибридное или гуманизированное моноклональное антитело, которое связывается с PD-1 (например, PD-1 человека и PD-1 обезьяны) и обладает повышенной аффинностью в отношении PD-1 и сравнимым или лучшим противоопухолевым эффектом по сравнению с существующими антителами против PD-1, такими как ниволумаб.
[0008] Антитело согласно изобретению можно использовать в различных способах применения, включая выявление белка PD-1 и лечение и предотвращение связанных с PD-1 заболеваний, таких как раковые заболевания, аутоиммунная кардиомиопатия, аутоиммунный энцефаломиелит, системная красная волчанка, реакция «трансплантат против хозяина» (РТПХ), диабет I типа и ревматоидный артрит.
[0009] Соответственно, согласно одному аспекту, изобретение относится к выделенному моноклональному антителу (например, мышиному, гибридному или гуманизированному антителу) или его антиген-связывающей части, которая связывается с PD-1 и содержит вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий участок CDR1, участок CDR2 и участок CDR3, где указанные участки CDR1, CDR2 и CDR3 содержат аминокислотные последовательности, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или 100% идентичные последовательностям (1) SEQ ID NO: 1, 2 и 3 соответственно; (2) SEQ ID NO: 4, 5 и 6 соответственно; (3) SEQ ID NO: 7, 8 и 9 соответственно; (4) SEQ ID NO: 10, 11 и 12 соответственно; (5) SEQ ID NO: 13, 14 и 15 соответственно; (6) SEQ ID NO: 16, 17 и 18 соответственно; (7) SEQ ID NO: 19, 20 и 21 соответственно; (8) SEQ ID NO: 22, 23 и 24 соответственно; (9) SEQ ID NO: 25, 26 и 27 соответственно; (10) SEQ ID NO: 28, 29 и 30 соответственно или (11) SEQ ID NO: 31, 32 и 33 соответственно, где указанное антитело или его антиген-связывающий фрагмент связывается с PD-1.
[0010] Согласно одному аспекту, выделенное моноклональное антитело или его антиген-связывающая часть согласно настоящему изобретению содержит вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или 100% идентичную последовательности SEQ ID NO: 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78 или 79, где указанное антитело или его антиген-связывающий фрагмент связывается с PD-1. Последовательности SEQ ID NO: 67 и 69-79 могут кодироваться последовательностями нуклеиновых кислот SEQ ID NO: 102-113 соответственно.
[0011] Согласно одному аспекту, выделенное моноклональное антитело или его антиген-связывающая часть согласно настоящему изобретению содержит вариабельный участок легкой цепи, который содержит участок CDR1, участок CDR2 и участок CDR3, где указанные участки CDR1, CDR2 и CDR3 содержат аминокислотные последовательности, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или 100% идентичные последовательностям (1) SEQ ID NO: 34, 35 и 36 соответственно; (2) SEQ ID NO: 37, 38 и 39 соответственно; (3) SEQ ID NO: 40, 41 и 42 соответственно; (4) SEQ ID NO: 43, 44 и 45 соответственно; (5) SEQ ID NO: 46, 47 и 48 соответственно; (6) SEQ ID NO: 49, 50 и 51 соответственно; (7) SEQ ID NO: 52, 53 и 54 соответственно; (8) SEQ ID NO: 55, 56 и 57 соответственно; (9) SEQ ID NO: 58, 59 и 60 соответственно; (10) SEQ ID NO: 61, 62 и 63 соответственно или (11) SEQ ID NO: 64, 65 и 66 соответственно, где указанное антитело или его антиген-связывающий фрагмент связывается с PD-1.
[0012] Согласно одному аспекту, выделенное моноклональное антитело или его антиген-связывающая часть согласно настоящему изобретению содержит вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или 100% идентичную последовательности SEQ ID NO: 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95 или 96, где указанное антитело или его антиген-связывающий фрагмент связывается с PD-1. SEQ ID NO: 80 и 86-96 могут кодироваться последовательностями нуклеиновых кислот SEQ ID NO: 114-125 соответственно.
[0013] Согласно одному аспекту, выделенное моноклональное антитело или его антиген-связывающая часть согласно настоящему изобретению содержит вариабельный участок тяжелой цепи и вариабельный участок легкой цепи, каждый из которых содержит участок CDR1, участок CDR2 и участок CDR3, где вариабельные участки тяжелой цепи CDR1, CDR2 и CDR3 и вариабельные участки легкой цепи CDR1, CDR2 и CDR3 содержат аминокислотные последовательности, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или 100% идентичные последовательностям (1) SEQ ID NO: 1, 2, 3, 34, 35 и 36 соответственно; (2) SEQ ID NO: 4, 5, 6, 37, 38 и 39 соответственно; (3) SEQ ID NO: 7, 8, 9, 40, 41 и 42 соответственно; (4) SEQ ID NO: 10, 11, 12, 43, 44 и 45 соответственно; (5) SEQ ID NO: 13, 14, 15, 46, 47 и 48 соответственно; (6) SEQ ID NO: 16, 17, 18, 49, 50 и 51 соответственно; (7) SEQ ID NO: 19, 20, 21, 52, 53 и 54 соответственно; (8) SEQ ID NO: 22, 23, 24, 55, 56 и 57 соответственно; (9) SEQ ID NO: 25, 26, 27, 58, 59 и 60 соответственно; (10) SEQ ID NO: 28, 29, 30, 61, 62 и 63 соответственно или (11) SEQ ID NO: 31, 32, 32, 64, 65 и 66 соответственно, где антитело или его антиген-связывающий фрагмент связывается с PD-1.
[0014] Согласно одному варианту реализации изобретения, выделенное моноклональное антитело или его антиген-связывающая часть согласно настоящему изобретению содержит вариабельный участок тяжелой цепи и вариабельный участок легкой цепи, где указанные вариабельный участок тяжелой цепи и вариабельный участок легкой цепи содержат аминокислотные последовательности, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или 100% идентичные последовательностям (1) SEQ ID NO: 67 и 80 соответственно; (2) SEQ ID NO: 68 и 81 соответственно; (3) SEQ ID NO: 69 и 81 соответственно; (4) SEQ ID NO: 68 и 82 соответственно; (5) SEQ ID NO: 68 и 83 соответственно; (6) SEQ ID NO: 68 и 84 соответственно; (7) SEQ ID NO: 68 и 85 соответственно; (8) SEQ ID NO: 68 и 86 соответственно; (9) SEQ ID NO: 69 и 86 соответственно; (10) SEQ ID NO: 70 и 87 соответственно; (11) SEQ ID NO: 71 и 88 соответственно; (12) SEQ ID NO: 72 и 89 соответственно; (13) SEQ ID NO: 73 и 90 соответственно; (14) SEQ ID NO: 74 и 91 соответственно; (15) SEQ ID NO: 75 и 92 соответственно; (16) SEQ ID NO: 76 и 93 соответственно; (17) SEQ ID NO: 77 и 94 соответственно; (18) SEQ ID NO: 78 и 95 соответственно; или (19) SEQ ID NO: 79 и 96 соответственно, где антитело или его антиген-связывающий фрагмент связывается с PD-1.
[0015] Согласно одному варианту реализации изобретения, выделенное моноклональное антитело или его антиген-связывающая часть согласно настоящему изобретению содержит тяжелую цепь и легкую цепь, где указанная тяжелая цепь содержит вариабельный участок тяжелой цепи и константный участок тяжелой цепи, а указанная легкая цепь содержит вариабельный участок легкой цепи и константный участок легкой цепи, где указанный константный участок тяжелой цепи содержит аминокислотные последовательности, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или 100% идентичные последовательностям SEQ ID No: 97, 99 или 129, и указанный константный участок легкой цепи содержит аминокислотные последовательности, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или 100% идентичные последовательностям SEQ ID No: 98 или 130, и указанные вариабельный участок тяжелой цепи и вариабельный участок легкой цепи содержат аминокислотные последовательности, описанные выше, где указанное антитело или его антиген-связывающий фрагмент связывается с PD-1. Указанные аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 97 и 99 могут кодироваться последовательностями нуклеиновых кислот SEQ ID NO: 126 и 128 соответственно. SEQ ID NO:98 может кодироваться последовательностью SEQ ID NO: 127.
[0016] Антитело согласно настоящему изобретению в соответствии с некоторыми вариантами реализации настоящего изобретения содержит или состоит из двух тяжелых цепей и двух легких цепей, где каждая указанная тяжелая цепь содержит константный участок тяжелой цепи, вариабельный участок или CDR-последовательности тяжелой цепи, перечисленные выше, и каждая легкая цепь содержит константный участок легкой цепи, вариабельный участок или CDR-последовательности легкой цепи, перечисленные выше, где указанное антитело связывается с PD-1. Антитело согласно изобретению может представлять собой полноразмерное антитело, например, изотип IgG1, IgG2 или IgG4. Антитело согласно настоящему изобретению в соответствии с другими вариантами реализации изобретения может представлять собой одноцепочечное антитело или фрагменты антитела, такие как Fab- или Fab′2-фрагменты.
[0017] Антитело или его антиген-связывающая часть согласно настоящему изобретению обладает повышенной аффинностью связывания с PD-1 человека по сравнению с антителами против PD-1 предшествующего уровня техники, такими как ниволумаб, связывающийся с PD-1 человека с KD, составляющей 6,36×10-9M или менее, и ингибирующим связывание PD-L1 с PD-1. Антитело или его антиген-связывающая часть согласно изобретению также обеспечивает сравнимый или лучший противоопухолевый эффект по сравнению с существующими антителами против PD-1, такими как ниволумаб.
[0018] Изобретение также обеспечивает иммуноконъюгат, содержащий антитело согласно изобретению или его антиген-связывающую часть, связанную с терапевтическим агентом, таким как цитотоксин. Изобретение также обеспечивает биспецифичную молекулу, содержащую антитело или его антиген-связывающую часть согласно изобретению, связанную со вторым функциональным фрагментом (например, вторым антителом), обладающим специфичностью связывания, отличной от специфичности указанного антитела или его антиген-связывающей части. Согласно другому аспекту, антитело или его антиген-связывающие части согласно настоящему изобретению могут быть созданы как часть гибридного антигенного рецептора (chimeric antigen receptor, CAR). Антитело или его антиген-связывающие части согласно настоящему изобретению также могут кодироваться онколитическим вирусом или использоваться совместно с онколитическим вирусом.
[0019] Также предложены композиции, содержащие антитело или его антиген-связывающую часть или иммуноконъюгат, биспецифичную молекулу, онколитический вирус или CAR согласно изобретению и фармацевтически приемлемый носитель.
[0020] Изобретение также включает молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие антитела или их антиген-связывающие части согласно изобретению, а также векторы экспрессии, содержащие такие нуклеиновые кислоты, и клетки-хозяева, содержащие указанные векторы экспрессии. Также предложен способ получения антитела против PD-1 с использованием клетки-хозяина, содержащей вектор экспрессии, включающий этапы (i) экспрессии антитела в клетке-хозяине и (ii) выделения указанного антитела из клетки-хозяина или ее клеточной линии.
[0021] Согласно другому аспекту, изобретение обеспечивает способ модулирования иммунного ответа у субъекта, включающий введение указанному субъекту антитела или его антиген-связывающей части согласно изобретению таким образом, что достигается модулирование иммунного ответа у указанного субъекта. Предпочтительно, антитело согласно изобретению усиливает, стимулирует или положительно регулирует иммунный ответ у субъекта. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения, способ включает введение композиции, биспецифичной молекулы, иммуноконъюгата, CAR-T-клетки или кодирующего антитело или содержащего антитело онколитического вируса согласно изобретению или, альтернативно, молекулы нуклеиновой кислоты, способной обеспечивать экспрессию антитела у указанного субъекта.
[0022] Согласно дополнительному аспекту, изобретение обеспечивает способ подавления опухолевого роста у субъекта, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества антитела или его антиген-связывающей части согласно настоящему изобретению. Опухоль может представлять собой солидную или не солидную опухоль, включая, но не ограничиваясь указанными, лимфому, лейкоз, множественную миелому, меланому, аденокарциному толстой кишки, рак поджелудочной железы, рак толстой кишки, желудочно-кишечный рак, рак предстательной железы, рак мочевого пузыря, рак почки, рак яичника, рак шейки матки, рак молочной железы, рак легких, почечно-клеточный рак и рак носоглотки. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения, способ включает введение композиции, биспецифичной молекулы, иммуноконъюгата, CAR-T-клетки или кодирующего антитело или содержащего антитело онколитического вируса согласно изобретению или, альтернативно, молекулы нуклеиновой кислоты, способной обеспечивать экспрессию антитела у указанного субъекта.
[0023] Согласно другому аспекту, изобретение обеспечивает способ лечения инфекционного заболевания у субъекта, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества антитела или его антиген-связывающей части согласно настоящему изобретению. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения, способ включает введение композиции, биспецифичной молекулы, иммуноконъюгата, CAR-T-клетки или кодирующего антитело или содержащего антитело онколитического вируса согласно изобретению или, альтернативно, молекулы нуклеиновой кислоты, способной обеспечивать экспрессию антитела у указанного субъекта.
[0024] Изобретение также обеспечивает способ усиления иммунного ответа на антиген у субъекта, включающий введение указанному субъекту: (i) антигена и (ii) антитела или его антиген-связывающей части таким образом, что происходит усиление иммунного ответа на указанный антиген у субъекта. Антиген может представлять собой, например, опухолевый антиген, вирусный антиген, бактериальный антиген или антиген патогена.
[0025] Антитела согласно изобретению можно использовать в комбинации по меньшей мере с одним дополнительным агентом, таким как иммуностимулирующее антитело (например, антитело против PD-L1 и/или антитело против CTLA-4), цитокин (например, IL-2 и/или IL-21) или костимулирующее антитело (например, антитело против CD137 и/или антитело против GITR).
[0026] Другие признаки и преимущества настоящего изобретения будут очевидны из следующего далее подробного описания и примеров, которые не ограничивают настоящее изобретение. Содержание всех ссылок, входных данных базы Genbank, патентов и опубликованных патентных заявок, цитированных в настоящей заявке, специально включено в настоящую заявку посредством ссылки.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
[0027] На Фигуре 1 показана кривая плавления гуманизированного антитела против PD-1 huC1E1-V10.
[0028] На Фигуре 2 показан результат эксклюзионной по размеру хроматографии гуманизированного антитела против PD-1 huC1E1-V10.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0029] Для более легкого понимания настоящего изобретения сначала будет приведено описание конкретных терминов. Дополнительные определения изложены в подробном описании.
[0030] Термин «PD-1» относится к белку программированной клеточной гибели 1. Термин «PD-1» включает варианты, изоформы, гомологи, ортологи и паралоги. Например, антитело, специфичное в отношении белка PD-1 человека, может в определенных случаях перекрестно реагировать с белком PD-1 из видов, отличных от человека, таких как обезьяна. Согласно другим вариантам реализации изобретения, антитело, специфичное в отношении белка PD-1 человека, может быть абсолютно специфичным в отношении белка PD-1 человека и не проявлять перекрестной реакционной активности с другими видами или другими типами или может перекрестно реагировать с PD-1 из конкретных других видов, но не всех других видов.
[0031] Термин «PD-1 человека» относится к белку PD-1, имеющему человеческую аминокислотную последовательность, такую как аминокислотная последовательность PD-1 человека, имеющая номер доступа в базе данных Genbank NP_005009,2. Термины «PD-1 обезьяны или макаки-резус» и «PD-1 мыши» относятся к последовательностям PD-1 обезьяны и мыши соответственно, например, последовательностями, имеющими аминокислотные последовательности, имеющие номер доступа в базе данных Genbank NP_001107830 и CAA48113 соответственно.
[0032] Термин «иммунный ответ» относится к действию, например, лимфоцитов, антиген-презентирующих клеток, фагоцитов, гранулоцитов и растворимых макромолекул, продуцируемых указанными выше клетками или печенью (включая антитела, цитокины и компоненты комплемента), которое приводит к селективному повреждению, разрушению или устранению из тела человека инвазирующих патогенов, инфицированных патогенами клеток или тканей, раковых клеток или нормальных клеток или тканей человека в случаях аутоиммунной реакции или патологического воспаления.
[0033] Термин «антиген-специфичный T-клеточный ответ» относится к ответу T-клетки, который является результатом стимуляции указанной T-клетки антигеном, в отношении которого указанная T-клетка является специфичной. Неограничивающие примеры ответов, осуществляемых T-клеткой при антиген-специфичной стимуляции, включают пролиферацию и продукцию цитокинов (например, продукцию IL-2).
[0034] Термин «антитело», как описано в настоящей заявке, включает полноразмерные антитела и любой антиген-связывающий фрагмент (т.е. «антиген-связывающую часть») или одну цепь антитела. Полноразмерные антитела представляют собой гликопротеины, содержащие две тяжелые (H) цепи и две легкие (L) цепи, связанные между собой дисульфидными связями. Каждая тяжелая цепь состоит из вариабельного участка тяжелой цепи (сокращенное название в настоящей заявке - VH) и константного участка тяжелой цепи. Константный участок тяжелой цепи состоит из трех доменов - CH1, CH2 и CH3. Каждая легкая цепь состоит из вариабельного участка легкой цепи (сокращенное название в настоящей заявке - VL) и константного участка легкой цепи. Константный участок легкой цепи состоит из одного домена - CL. Участки VH и VL можно дополнительно разделить на участки гипервариабельности, называемые определяющими комплементарность участками (complementarity determining regions, CDR), чередующиеся с участками, которые являются более консервативными и называются каркасными участками (framework regions, FR). Каждый VH и V L состоит из трех CDR и четырех FR, организованных от амино-конца к карбокси-концу в следующем порядке: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. Вариабельные участки тяжелой и легкой цепи содержат домен связывания, который взаимодействует с антигеном. Константные участки антитела могут опосредовать связывание иммуноглобулина с тканями и факторами хозяина, включая различные клетки иммунной системы (например, эффекторные клетки) и первый компонент (C1q) классической системы комплемента.
[0035] Термин «антиген-связывающая часть» антитела (или просто «часть антитела») при употреблении в настоящей заявке относится к одному или более фрагментам антитела, которые сохраняют способность специфично связываться с антигеном (например, белком PD-1). Было показано, что антиген-связывающая функция антитела может осуществляться фрагментами полноразмерного антитела. Примеры связывающих фрагментов, включенных в термин «антиген-связывающая часть» антитела, включают (i) Fab-фрагмент - моновалентный фрагмент, состоящий из доменов VL, VH, CL и C H1; (ii) F(ab')2-фрагмент - бивлентный фрагмент, содержащий два Fab-фрагмента, связанных с помощью дисульфидного мостика в шарнирном участке; (iii) Fd-фрагмент, состоящий из доменов VH и CH1; (iv) Fv-фрагмент, состоящий из доменов VL и VH одной цепи антитела, (v) dAb-фрагмент (Ward et al., (1989) Nature 341:544-546), который состоит из домена VH; (vi) выделенный определяющий комплементарность участок (CDR) и (viii) нанотело - вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий один вариабельный домен и два константных домена. Более того, несмотря на то что два домена Fv-фрагмента - VL и VH - кодируются отдельными генами, их можно соединять с помощью рекомбинантных методов с использованием синтетического линкера, который обеспечивает их получение в виде одной белковой цепи, в которой участки VL и VH соединяются с образованием моновалентных молекул (известных как одноцепочечный Fv (scFv); см., например, Bird et al., (1988) Science 242:423-426; и Huston et al., (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883). Предполагается, что такие одноцепочечные антитела также включены в термин «антиген-связывающая часть» антитела. Такие фрагменты антител получают с использованием стандартных способов, известных специалистам в данной области техники, и скрининг фрагментов на предмет их применимости проводят таким же образом, как и скрининг интактных антител.
[0036] Предполагается, что «выделенное антитело» при употреблении в настоящей заявке относится к антителу, которое по существу не содержит другие антитела, имеющие отличающуюся антигенную специфичность (например, выделенное антитело, которое специфично связывается с белком PD-1, по существу не содержит антитела, которые специфично связываются с антигенами, отличными от белков PD-1). Выделенное антитело, которое специфично связывается с белком PD-1 человека, может однако обладать перекрестной реакционной активностью с другими антигенами, такими как белки PD-1 из других видов. Более того, выделенное антитело может по существу не содержать другой клеточный материал и/или химические вещества.
[0037] Термины «моноклональное антитело» или «композиция моноклонального антитела» при употреблении в настоящей заявке относятся к препарату молекул антитела одномолекулярного состава. Композиция на основе моноклонального антитела проявляет единственную специфичность связывания и аффинность в отношении конкретного эпитопа.
[0038] Предполагается, что термин «мышиное антитело» при употреблении в настоящей заявке включает антитела, содержащие вариабельные участки, в которых как каркасные, так и CDR-участки происходят из последовательностей иммуноглобулинов мышиной зародышевой линии. Кроме того, если антитело содержит константный участок, то указанный константный участок также происходит из последовательностей иммуноглобулинов мышиной зародышевой линии. Мышиные антитела согласно изобретению могут включать аминокислотные остатки, не кодируемые последовательностями иммуноглобулинов мышиной зародышевой линии (например, содержащие мутации, введенные путем рандомного или сайт-специфично мутагенеза in vitro или путем соматической мутации in vivo). Однако предполагается, что термин «мышиное антитело» при употреблении в настоящей заявке не включает антитела, в которых последовательности CDR, происходящие из зародышевой линии других видов млекопитающих, были привиты на мышиные каркасные последовательности.
[0039] Термин «гибридное антитело» относится к антителу, созданному путем объединения генетического материала из нечеловеческого источника с генетическим материалом человека. Более обобщенно, гибридное антитело представляет собой антитело, содержащее генетический материал из конкретных видов с генетическим материалом из других видов.
[0040] Термин «гуманизированное антитело» при употреблении в настоящей заявке относится к антителу из видов, не представляющих собой человека, белковые последовательности которых были модифицированы для повышения степени подобия вариантам природных антител, которые продуцируются у людей.
[0041] Термин «изотип» относится к классу антител (например, IgM или IgG1), которые кодируются генами константных участков тяжелой цепи.
[0042] Фразы «антитело, распознающее антиген», и «антитело, специфичное в отношении антигена», используются в настоящей заявке взаимозаменяемо с термином «антитело, которое специфично связывается с антигеном».
[0043] Предполагается, что при употреблении в настоящей заявке антитело, которое «специфично связывается с PD-1 человека», относится к антителу, которое связывается с белком PD-1 человека (и, возможно, белком PD-1 из одного или более видов, не представляющих собой человека), но по существу не связывается с белками, не представляющими собой PD-1. Предпочтительно, антитело связывается с белком PD-1 человека с «высокой аффинностью», а именно со значением KD, составляющим 5,0 x10-8 M или менее, более предпочтительно, 1,0 x10-8 M или менее, и более предпочтительно, 7,0×10-9 M или менее.
[0044] Термин «по существу не связывается» с белком или клетками при употреблении в настоящей заявке означает отсутствие связывания или отсутствие связывания с высокой аффинностью с указанным белком или клетками, т.е. относится к связыванию с белком или клетками со значением KD, составляющим 1,0×10-6 M или более, более предпочтительно, 1,0×10-5 M или более, более предпочтительно, 1,0×10-4 M или более, более предпочтительно, 1,0×10-3 M или более, более предпочтительно, 1,0×10-2 M или более.
[0045] Термин «высокая аффинность», относящийся к антителу IgG, относится к антителу, имеющему значение KD для антигена-мишени, составляющее 1,0×10-6 M или менее, более предпочтительно, 5,0×10-8 M или менее, более предпочтительно, 1,0×10-8 M или менее, более предпочтительно, 7,0×10-9 M или менее, более предпочтительно, 1,0×10-9 M или менее. Однако «высокая аффинность» связывания может варьировать для других изотипов антитела. Например, «высокая аффинность» связывания для изотипа IgM относится к антителу, имеющему значение KD, составляющее 10-6 M или менее, более предпочтительно, 10-7 M или менее, более предпочтительно, 10-8 M или менее.
[0046] Предполагается, что термин «Kassoc» или «Ka» при употреблении в настоящей заявке относится к скорости ассоциации для конкретного взаимодействия антитело-антиген, тогда как термин «Kdis» или «Kd» при употреблении в настоящей заявке относится к скорости диссоциации для конкретного взаимодействия антитело-антиген. Предполагается, что термин «KD» при употреблении в настоящей заявке относится к константе диссоциации, которую получают из отношения Kd к Ka (т.е., Kd/Ka) и выражают как молярную концентрацию (M). Значения KD для антител можно определять с использованием способов, общепризнанных в данной области техники. Предпочтительный способ определения KD антитела представляет собой использование поверхностного плазмонного резонанса, предпочтительно, с использованием биосенсорной системы, такой как система Biacore™.
[0047] Термин «EC50», также известный как полумаксимальная эффективная концентрация, относится к концентрации антитела, которая вызывает ответ, интенсивность которого находится посередине между исходным уровнем и максимальным уровнем после определенного времени воздействия.
[0048] Термин «IC50», также известный как полумаксимальная ингибирующая концентрация, относится к концентрации антитела, которая приводит к подавлению специфической биологической или биохимической функции на 50% по отношению к подавлению в отсутствии антитела.
[0049] Термин «субъект» включает любое животное, представляющее или не представляющее собой человека. Термин «не представляющее собой человека животное» включает всех позвоночных, например, млекопитающих и не млекопитающих, таких как не представляющие собой человека приматы, овцы, собаки, кошки, коровы, лошади, куры, амфибии и рептилии, при этом млекопитающие являются предпочтительными, такие как не представляющие собой человека приматы, овцы, собаки, кошки, коровы и лошади.
[0050] Термин «терапевтически эффективное количество» означает количество антитела согласно настоящему изобретению, достаточное для предотвращения или ослабления симптомов, связанных с заболеванием или состоянием (таким как рак) и/или снижения тяжести указанного заболевания или состояния. Предполагается, что терапевтически эффективное количество рассматривается в контексте состояния, подлежащего лечению, при этом специалисты в данной области техники легко определят реальное эффективное количество.
[0051] Различные аспекты настоящего изобретению описаны более подробно в следующих подразделах.
[0052] Антитела против PD-1, обладающие повышенной аффинностью связывания с PD-1 человека и лучшим противоопухолевым эффектом
[0053] Антитело или его антиген-связывающая часть согласно изобретению специфично связывается с PD-1 человека и обладает повышенной аффинностью связывания, а также сравнимым или лучшим противоопухолевым эффектом по сравнению с ранее описанными антителами против PD-1, в частности, по сравнению с ниволумабом.
[0054] Антитело или его антиген-связывающая часть согласно изобретению предпочтительно связывается с белком PD-1 человека со значением KD, составляющим 7,0×10-9 M или менее, более предпочтительно, со значением KD, составляющим 5,0×10-10 M или менее. Антитела согласно изобретению также связываются с PD-1 макаков-крабоедов со значением KD, составляющим от примерно 1,0×10-7 M до 1,0×10-10 M.
[0055] Дополнительные функциональные свойства включают способность блокировать взаимодействие PD-1/PD-L1. Антитела согласно настоящему изобретению, согласно одному варианту реализации, могут ингибировать связывание PD-1 и PD-L1 в сходной с ниволумабом концентрации.
[0056] Другие функциональные свойства включают способность антитела стимулировать иммунный ответ, такой как антиген-специфичный T-клеточный ответ. Указанную способность можно проверить, например, путем оценки способности антитела стимулировать продукцию интерлейкина-2 (IL-2) при антиген-специфичном T-клеточном ответе. Согласно конкретным вариантам реализации изобретения, антитело связывается с PD-1 человека и стимулирует антиген-специфичный T-клеточный ответ. Согласно другим вариантам реализации изобретения, антитело связывается с PD-1 человека, но не стимулирует антиген-специфичный T-клеточный ответ. Другие способы оценки способности антитела стимулировать иммунный ответ включают исследование его способности подавлять опухолевый рост, например, на in vivo модели опухолевого трансплантата, или способности стимулировать аутоиммунный ответ, например, способности обеспечивать развитие аутоиммунного заболевания на аутоиммунной модели, например, способности обеспечивать развитие диабета на NOD-мышиной модели.
[0057] Предпочтительные антитела согласно изобретению представляют собой человеческие моноклональные антитела. Дополнительно или альтернативно, антитела могут, например, представлять собой гибридные или гуманизированные моноклональные антитела.
[0058] Моноклональное антитело против PD-1
[0059] Предпочтительное антитело согласно изобретению представляет собой моноклональное антитело, имеющее структурные и химические характеристики, описанные ниже и в следующих далее Примерах. Аминокислотная последовательность VH антитела против PD-1 представлена в последовательности SEQ ID NO: 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78 или 79. Аминокислотная последовательность VL антитела против PD-1 показана в последовательности SEQ ID NO: 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95 или 96. Идентификационные номера (ID) аминокислотных последовательностей вариабельных участков тяжелых/легких цепей антител суммированы в Таблице 1, ниже, при этом некоторые клоны содержат одинаковый VH- или VL-участок. Константный участок тяжелой цепи для всех клонов может представлять собой константный участок тяжелой цепи IgG, имеющий аминокислотную последовательность, представленную, например, в последовательности SEQ ID NO: 97 или 129, и константный участок легкой цепи для всех клонов может представлять собой константный участок каппа-цепи, имеющий аминокислотную последовательность, представленную, например, в SEQ ID NO: 98 или 130. Fab-антитело может содержать вариабельный участок тяжелой/легкой цепи, CH1-участок тяжелой цепи (такой как участок, представленный в последовательности SEQ ID NO: 99) и константный участок легкой цепи.
[0060] Вариабельные участки CDR тяжелых цепей и вариабельные участки CDR легких цепей из Таблицы 1 были определены с помощью системы нумерации IMGT и системы нумерации Кабата соответственно. Однако, как хорошо известно в данной области техники, участки CDR также можно определять с помощью других систем, таких как система нумерации Чотиа и CCG-система/метод, на основе последовательностей вариабельных участков тяжелой/легкой цепи.
Таблица 1. ID номера аминокислотных последовательностей вариабельных участков тяжелой/легкой цепи
Клон/SEQ ID NO | VH-CDR1 | VH-CDR2 | VH-CDR3 | VH | VL-CDR1 | VL-CDR2 | VL-CDR3 | VL |
C1E1 | 1 | 2 | 3 | 67 | 34 | 35 | 36 | 80 |
huC1E1-V1 | 1 | 2 | 3 | 68 | 34 | 35 | 36 | 81 |
huC1E1-V2 | 1 | 2 | 3 | 69 | 34 | 35 | 36 | 81 |
huC1E1-V3 | 1 | 2 | 3 | 68 | 34 | 35 | 36 | 82 |
huC1E1-V4 | 1 | 2 | 3 | 68 | 34 | 35 | 36 | 83 |
huC1E1-V5 | 1 | 2 | 3 | 68 | 34 | 35 | 36 | 84 |
huC1E1-V6 | 1 | 2 | 3 | 68 | 34 | 35 | 36 | 85 |
huC1E1-V7 | 1 | 2 | 3 | 68 | 34 | 35 | 36 | 86 |
huC1E1-V10 | 1 | 2 | 3 | 69 | 34 | 35 | 36 | 86 |
D1F2 | 4 | 5 | 6 | 70 | 37 | 38 | 39 | 87 |
C1F5 | 7 | 8 | 9 | 71 | 40 | 41 | 42 | 88 |
D1A1 | 10 | 11 | 12 | 72 | 43 | 44 | 45 | 89 |
D1F1 | 13 | 14 | 15 | 73 | 46 | 47 | 48 | 90 |
C1E2 | 16 | 17 | 18 | 74 | 49 | 50 | 51 | 91 |
C1A1 | 19 | 20 | 21 | 75 | 52 | 53 | 54 | 92 |
C1F4 | 22 | 23 | 24 | 76 | 55 | 56 | 57 | 93 |
D2C2 | 25 | 26 | 27 | 77 | 58 | 59 | 60 | 94 |
2G2 | 28 | 29 | 30 | 78 | 61 | 62 | 63 | 95 |
C1C5 | 31 | 32 | 33 | 79 | 64 | 65 | 66 | 96 |
[0060] Последовательности VH и VL (или последовательности CDR) других антител против PD-1, которые связываются с PD-1 человека, можно «сочетать и комбинировать» с последовательностями VH и VL (или последовательностями CDR) антитела против PD-1 согласно настоящему изобретению. Предпочтительно, когда сочетают и комбинируют цепи VH и VL (или CDR в пределах таких цепей), последовательность VH из конкретной пары VH/VL замещают на структурно сходную последовательность VH. Подобным образом, последовательность VL из конкретной пары VH/VL предпочтительно замещают на структурно сходную последовательность VL.
[0062] Соответственно, согласно одному варианту реализации изобретения, антитело согласно изобретению или его антиген-связывающая часть содержит:
(a) вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, перечисленную выше в Таблице 1; и
(b) вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, перечисленную выше в Таблице 1, или VL другого антитела против PD-1, где указанное антитело специфично связывается с PD-1 человека.
[0063] Согласно другому варианту реализации изобретения, антитело согласно изобретению или его антиген-связывающая часть содержит:
(a) участки CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельного участка тяжелой цепи, перечисленные выше в Таблице 1; и
(b) участки CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельного участка легкой цепи, перечисленные выше в Таблице 1, или участки CDR другого антитела против PD-1, где указанное антитело специфично связывается с PD-1 человека.
[0064] Согласно другому варианту реализации изобретения, антитело или его антиген-связывающая часть содержит вариабельный участок тяжелой цепи CDR2 антитела против PD-1, объединенный с участками CDR других антител, которые связываются с PD-1 человека, например, CDR1 и/или CDR3 из вариабельного участка тяжелой цепи и/или CDR1, CDR2 и/или CDR3 из вариабельного участка легкой цепи другого антитела против PD-1.
Кроме того, в данной области техники хорошо известно, что домен CDR3 независимо от домена (доменов) CDR1 и/или CDR2 отдельно может определять специфичность связывания антитела с когнатным антигеном и что представляется возможным создание множества антител на основе общей последовательности CDR3, обладающих одинаковой специфичностью связывания. См., например, Klimka et al.,, British J. of Cancer 83(2):252-260 (2000); Beiboer et al.,, J. Mol. Biol. 296:833-849 (2000); Rader et al.,, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 95:8910-8915 (1998); Barbas et al.,, J. Am. Chem. Soc. 116:2161-2162 (1994); Barbas et al.,, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 92:2529-2533 (1995); Ditzel et al.,, J. Immunol. 157:739-749 (1996); Berezov et al.,, BIAjournal 8: Scientific Review 8 (2001); Igarashi et al.,, J. Biochem (Tokyo) 117:452-7 (1995); Bourgeois et al.,, J. Virol 72:807-10 (1998); Levi et al.,, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90:4374-8 (1993); Polymenis and Stoller, J. Immunol. 152:5218-5329 (1994) and Xu and Davis, Immunity 13:37-45 (2000). См. также, патенты США № 6 951 646; 6 914 128; 6 090 382; 6 818 216; 6 156 313; 6 827 925; 5 833 943; 5 762 905 и 5 760 185. Каждая из указанных ссылок полностью включена в настоящую заявку посредством ссылки.
[0066] Соответственно, согласно другому варианту реализации изобретения, антитела согласно изобретению содержат CDR2 вариабельного участка тяжелой цепи антитела против PD-1 и по меньшей мере CDR3 вариабельного участка тяжелой и/или легкой цепи антитела против PD-1 или CDR3 вариабельного участка тяжелой и/или легкой цепи другого антитела против PD-1, где указанное антитело способно специфично связываться с PD-1 человека. Указанные антитела предпочтительно (a) конкурируют за связывание с PD-1; (b) сохраняют функциональные характеристики; (c) связываются с одним и тем же эпитопом и/или (d) обладают сходной аффинностью связывания по сравнению с антителом против PD-1 согласно настоящему изобретению. Согласно другому варианту реализации изобретения, антитела дополнительно могут содержать CDR2 вариабельного участка легкой цепи антитела против PD-1 или CDR2 вариабельного участка легкой цепи другого антитела против PD-1, где указанное антитело способно специфично связываться с PD-1 человека. Согласно другому варианту реализации изобретения, антитела согласно изобретению могут содержать CDR1 вариабельного участка тяжелой и/или легкой цепи антитела против PD-1 или CDR1 вариабельного участка тяжелой и/или легкой цепи другого антитела против PD-1, где указанное антитело способно специфично связываться с PD-1 человека.
[0067] Консервативные модификации
[0068] Согласно другому варианту реализации я, антитело согласно изобретению содержит последовательности вариабельного участка CDR1, CDR2 и CDR3 тяжелой и/или легкой цепи, которые отличаются от последовательностей антитела против PD-1 согласно настоящему изобретению по одной или более консервативным модификациям. Следует понимать в данной области техники, что возможны определенные консервативные модификации последовательности, которые не устраняют способность связывания антигена. См., например, Brummell et al., (1993) Biochem 32:1180-8; de Wildt et al., (1997) Prot. Eng. 10:835-41; Komissarov et al., (1997) J. Biol. Chem. 272:26864-26870; Hall et al., (1992) J. Immunol. 149:1605-12; Kelley and O'Connell (1993) Biochem,32:6862-35; Adib-Conquy et al., (1998) Int. Immunol,10:341-6 и Beers et al., (2000) Clin. Can. Res. 6:2835-43.
[0069] Соответственно, согласно одному варианту реализации изобретения, антитело содержит вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий последовательности CDR1, CDR2 и CDR3, и/или вариабельный участок легкой цепи, содержащий последовательности CDR1, CDR2 и CDR3, где:
(a) последовательность вариабельного участка тяжелой цепи CDR1 содержит последовательность, перечисленную в Таблице 1, выше, и/или ее консервативные модификации; и/или
(b) последовательность вариабельного участка тяжелой цепи CDR2 содержит последовательность, перечисленную в Таблице 1, выше, и/или ее консервативные модификации; и/или
(c) последовательность вариабельного участка тяжелой цепи CDR3 содержит последовательность, перечисленную в Таблице 1, выше, и ее консервативные модификации; и/или
(d) последовательности вариабельного участка легкой цепи CDR1 и/или CDR2 и/или CDR3 содержат последовательность (последовательности), перечисленную в Таблице 1, выше; и/или ее консервативные модификации; и
(e) антитело специфично связывается с PD-1 человека.
[0070] Антитело согласно настоящему изобретению обладает одним или более из следующих функциональных свойств, описанных выше, таких как высокая аффинность связывания с PD-1 человека и способность вызывать антитело-зависимую клеточную цитотоксичность (АЗКЦ) или комплемент-зависимую цитотоксичность (КЗЦ) в отношении PD-1-эксперссирующих клеток.
[0071] Согласно различным вариантам реализации изобретения, антитело может представлять собой, например, мышиное, человеческое, гуманизированное или гибридное антитело.
[0072] Предполагается, что при употреблении в настоящей заявке термин «консервативные модификации последовательности» относится к аминокислотным модификациям, которые значительно не влияют или не изменяют характеристики связывания антитела, содержащего указанную аминокислотную последовательность. Такие консервативные модификации включают аминокислотные замены, добавления и делеции. Модификации можно вводить в антитело согласно изобретению с помощью стандартных методов, известных в данной области техники, таких как сайт-направленный мутагенез и ПЦР-опосредованный мутагенез. Консервативные аминокислотные замены представляют собой замены, при которых аминокислотный остаток замещают на аминокислотный остаток, имеющий сходную боковую цепь. Семейства аминокислотных остатков, имеющих сходные боковые цепи, были определены в данной области техники. Указанные семейства включают аминокислоты с основными боковыми цепями (например, лизин, аргинин, гистидин), аминокислоты с кислотными боковыми цепями (например, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота), аминокислоты с незаряженными полярными боковыми цепями (например, глицин, аспарагин, глутамин, серин, треонин, тирозин, цистеин, триптофан), аминокислоты с неполярными боковыми цепями (например, аланин, валин, лейцин, изолейин, пролин, фенилаланин, метионин), аминокислоты с бета-разветвленными боковыми цепи (например, треонин, валин, изолейцин) и аминокислоты с ароматическими боковыми цепями (например, тирозин, фенилаланин, триптофан, гистидин). Таким образом, один или более аминокислотных остатков в пределах CDR-участков антитела согласно изобретению могут быть замещены на другие аминокислотные остатки из того же семейства по боковым цепям, и сохранение функции измененного антитела (т.е. функций, изложенных выше) можно исследовать с использованием функциональных анализов, описанных в настоящей заявке.
[0073] Сконструированные и модифицированные антитела
[0074] Антитела согласно изобретению могут быть получены с использованием антитела, содержащего одну или более из последовательностей VH/VL антитела против PD-1 согласно настоящему изобретению, в качестве исходного материала для конструирования модифицированного антитела. Антитело может быть сконструировано путем модифицирования одного или более остатков в пределах одного или обоих вариабельных участков (т.е. VH и/или VL), например, в пределах одного или более CDR-участков и/или в пределах одного или более каркасных участков. Дополнительно или альтернативно, антитело может быть сконструировано путем модифицирования остатков в пределах константного участка (участков), например, для изменения эффекторной функции (функций) указанного антитела.
[0075] Согласно конкретным вариантам реализации изобретения, прививку CDR можно использовать для конструирования вариабельных участков антител. Антитела взаимодействуют с антигенами-мишенями главным образом через аминокислотные остатки, которые расположены в шести определяющих комплементарность участках (CDR) тяжелой и легкой цепи. По этой причине аминокислотные последовательности в пределах CDR-участков различаются сильнее между отдельными антителами, чем последовательности вне CDR. Поскольку CDR-последовательности отвечают за большинство взаимодействий антитело-антиген, возможно экспрессировать рекомбинантные антитела, которые имитируют свойства специфичных природных антител, путем конструирования векторов экспрессии, которые содержат CDR-последовательности из специфичного природного антитела, привитые на каркасные последовательности из другого антитела с отличающимися свойствами (см., например, Riechmann et al., (1998) Nature 332:323-327; Jones et al., (1986) Nature 321:522-525; Queen et al., (1989) Proc. Natl. Acad. См. также заявки на патенты США 86:10029-10033; патенты США № 5 225 539; 5 530 101; 5 585 089; 5 693 762 и 6 180 370).
[0076] Соответственно, другой вариант реализации изобретения относится к выделенному моноклональному антителу или его антиген-связывающей части, содержащей вариабельный участок тяжелой цепи, который содержит последовательности CDR1, CDR2 и CDR3, содержащие последовательности согласно настоящему изобретению, как описано выше, и/или вариабельный участок легкой цепи, содержащий последовательности CDR1, CDR2 и CDR3, которые содержат последовательности согласно настоящему изобретению, как описано выше. Тогда как указанные антитела содержат CDR-последовательности VH и VL моноклонального антитела согласно настоящему изобретению, они могут содержать различные каркасные последовательности.
[0077] Такие каркасные последовательности могут быть получены из общедоступных баз данных ДНК или опубликованных ссылок, которые включают последовательности генов антител зародышевой линии. Например, последовательности ДНК зародышевой линии для генов человеческих вариабельных участков тяжелой и легкой цепи можно найти в базе данных последовательностей зародышевой линии человека «VBase» (доступна в интернете по адресу www.mrc-cpe.cam.ac.uk/vbase), а также в источнике Kabat et al., (1991), цитированном выше; Tomlinson et al., (1992) J. Mol. Biol. 227:776-798; и Cox et al., (1994) Eur. J. Immunol. 24:827-836; содержание каждого из которых специально включено в настоящую заявку посредством ссылки. В качестве другого примера, последовательности ДНК зародышевой линии для генов человеческого вариабельного участка тяжелой и легкой цепи можно найти в базе данных Genbank. Например, следующие последовательности тяжелой цепи зародышевой линии, встречающиеся в мышином HCo7 HuMAb, доступны по прилагаемым номерам доступа в базе данных Genbank: 1-69 (NG--0010109, NT--024637 & BC070333), 3-33 (NG--0010109 & NT--024637) и 3-7 (NG--0010109 & NT--024637). В качестве другого примера, следующие последовательности тяжелой цепи зародышевой линии, встречающиеся в мышином HCo12 HuMAb, доступны по прилагаемым номерам доступа в базе данных Genbank: 1-69 (NG--0010109, NT--024637 & BC070333), 5-51 (NG--0010109 & NT--024637), 4-34 (NG--0010109 & NT--024637), 3-30,3 (CAJ556644) & 3-23 (AJ406678).
[0078] Белковые последовательности антитела сравнивают с базой данных компилированных белковых последовательностей с использованием одного из способов поиска подобия по последовательностям, называемого Gapped BLAST (Altschul et al., (1997), выше), который хорошо известен специалисту в данной области техники.
[0079] Предпочтительные каркасные последовательности для применения в антителах согласно изобретению представляют собой последовательности, которые структурно сходны с каркасными последовательностями, используемыми в антителах согласно изобретению. Последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 VH можно прививать на каркасные участки, которые имеют последовательность, идентичную последовательности, встречающейся в гене иммуноглобулина зародышевой линии, из которой происходит каркасная последовательность, или CDR-последовательности можно прививать на каркасные участки, которые содержат одну или более мутаций по сравнению с последовательностями зародышевой линии. Например, было обнаружено, что в конкретных примерах благоприятным является введение мутаций в остатки в пределах каркасных участков для поддержания или усиления способности антитела связывать антиген (см., например, патенты США № 5 530 101; 5 585 089; 5 693 762 и 6 180 370).
[0080] Другой тип модификации вариабельного участка представляет собой мутацию аминокислотных остатков в пределах участков CDR1, CDR2 и/или CDR3 VH и/или VL для улучшения таким образом одного или более свойств связывания (например, аффинности) интересующего антитела. Для введения мутации (мутаций) можно осуществлять сайт-направленный мутагенез или ПЦР-опосредованный мутагенез и воздействие на связывание антитела или другое интересующее функциональное свойство можно оценивать с помощью in vitro или in vivo анализов, как известно в данной области техники. Предпочтительно вводят консервативные модификации (как известно в данной области техники). Мутации могут представлять собой аминокислотные замены, добавления или делеции, но предпочтительно представляют собой замены. Более того, как правило, изменяют не более чем один, два, три, четыре или пять остатков в пределах CDR-участка.
[0081] Соответственно, согласно другому варианту реализации, настоящее изобретение обеспечивает выделенные моноклональные антитела против PD-1 или их антиген-связывающие части, содержащие вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий: (a) участок CDR1 VH, содержащий последовательность согласно настоящему изобретению или аминокислотную последовательность, содержащую одну, две, три, четыре или пять аминокислотных замен, делеций или добавлений; (b) участок CDR2 VH, содержащий последовательность согласно настоящему изобретению или аминокислотную последовательность, содержащую одну, две, три, четыре или пять аминокислотных замен, делеций или добавлений; (c) участок CDR3 VH, содержащий последовательность согласно настоящему изобретению или аминокислотную последовательность, содержащую одну, две, три, четыре или пять аминокислотных замен, делеций или добавлений; (d) участок CDR1 VL, содержащий последовательность согласно настоящему изобретению или аминокислотную последовательность, содержащую одну, две, три, четыре или пять аминокислотных замен, делеций или добавлений; (e) участок CDR2 VL, содержащий последовательность согласно настоящему изобретению или аминокислотную последовательность, содержащую одну, две, три, четыре или пять аминокислотных замен, делеций или добавлений; и (f) участок CDR3 VL, содержащий последовательность согласно настоящему изобретению или аминокислотную последовательность, содержащую одну, две, три, четыре или пять аминокислотных замен, делеций или добавлений.
[0082] Сконструированные антитела согласно изобретению включают антитела, в которые были внесены модификации в каркасные остатки в пределах VH и/или VL, например для улучшения свойств указанного антитела. Как правило, такие модификации каркасных остатков осуществляют для снижения иммуногенности антитела. Например, один подход представляет собой «мутирование к первоначальному виду» одного или более каркасных остатков к соответствующей последовательности зародышевой линии. Более конкретно, антитело, которое прошло соматическую мутацию, может содержать каркасные остатки, которые отличаются от последовательности зародышевой линии, из которой произошло антитело. Такие остатки можно идентифицировать путем сравнения каркасных последовательностей антитела с последовательностями зародышевой линии, из которой произошло антитело.
[0083] Другой тип каркасной модификации включает мутирование одного или более остатков в пределах каркасного участка или даже в пределах одного или более CDR-участков для удаления T-клеточных эпитопов для снижения, таким образом, потенциальной иммуногенности антитела. Этот поход также называется «деиммунизацией» и описан более подробно в публикации патента США № 20030153043.
[0084] В качестве дополнения или альтернативы модификациям, сделанным в пределах каркасных или CDR-участков, антитела согласно изобретению могут быть сконструированы таким образом, что включают модификации в пределах Fc-участка, как правило, для изменения одного или более функциональных свойств указанного антитела, таких как время полужизни в сыворотке крови, связывание комплемента, связывание Fc-рецептора и/или антиген-зависимая клеточная цитотоксичность. Более того, антитело согласно изобретению может быть химически модифицировано (например, один или более химических фрагментов могут быть присоединены к антителу) или модифицировано с изменением степени его гликозилирования также для изменения одного или более функциональных свойств указанного антитела.
[0085] Согласно одному варианту реализации изобретения, шарнирный участок CH1 модифицирован таким образом, что количество цистеиновых остатков в указанном шарнирном участке изменено, например, повышено или понижено. Этот подход описан дополнительно в патенте США № 5 677 425. Количество цистеиновых остатков в шарнирном участке CH1 изменяют, например, для облегчения сборки легких и тяжелых цепей или для повышения или снижения стабильности антитела.
[0086] Согласно другому варианту реализации изобретения, в Fc-шарнирный участок антитела вводят мутации для снижения времени биологической полужизни антитела. Более конкретно, одну или более аминокислотных мутаций вводят в пограничную область домена CH2-CH3 Fc-шарнирного фрагмента таким образом, что связывание антитела с белком А стафилококка (SpA) нарушается по сравнению с SpA-связыванием нативного Fc-шарнирного домена. Этот подход описан более подробно в патенте США № 6 165 745.
[0087] Согласно другому варианту реализации изобретения, модифицируют степень гликозилирования антитела. Например, может быть получено гликозилированное антитело (т.е. если антитело не гликозилировано). Степень гликозилирования можно изменять, например, для повышения аффинности антитела в отношении антигена. Такие углеводные модификации можно осуществлять, например, путем изменения одного или более сайтов гликозилирования в пределах последовательности антитела. Например, могут быть сделаны одна или более аминокислотных замен, которые приводят к устранению одного или более сайтов гликозилирования в каркасе вариабельного участка для устранения таким образом гликозилирования в этом сайте. Такое агликозилирование может приводить к повышению аффинности антитела в отношении антигена. См., например, патент США № 5 714 350 и 6 350 861.
[0088] Дополнительно или альтернативно, может быть получено антитело с измененным типом гликозилирования, такое как гипофукозилированное антитело, содержащее пониженное количество фукозильных остатков, или антитело, имеющее повышенное содержание структур с остатком GlcNac в точке ветвления. Было продемонстрировано, что такие измененные паттерны гликозилирования повышают способность антитела к антитело-зависимой клеточной цитотоксичности (АЗКЦ). Такие углеводные модификации можно осуществлять путем, например, экспрессии антитела в клетке-хозяине с измененной системой гликозилирования. Клетки с измененной системой гликозилирования были описаны в данной области техники и могут использоваться в качестве клеток-хозяев для экспрессии в них рекомбинантного антитела согласно изобретению с получением таким образом антитела с измененным гликозилированием. Например, клеточные линии Ms704, Ms705 и Ms709 не содержат ген фукозилтрансферазы, FUT8 (α(1,6)-фукозилтрансфераза), и таким образом антитела, экспрессируемые в клеточных линиях Ms704, Ms705 и Ms709, не содержат фукозу на улеводах. Клеточные линии Ms704, Ms705 и Ms709 FUT8-/- были созданы с помощью направленного разрушения гена FUT8 в клетках CHO/DG44 с использованием двух векторов замещения (см. публикацию патента США № 20040110704 и Yamane-Ohnuki et al., (2004) Biotechnol Bioeng 87:614-22). В качестве другого примера, европейский патент EP 1 176 195 описывает клеточную линию с функционально разрушенным геном FUT8, который кодирует фукозилтрансферазу, таким образом, что антитела, экспрессируемые в такой клеточной линии, являются гипофукозилированными из-за снижения или удаления связанного с α-1,6-связью фермента. Европейский патент EP 1 176 195 также описывает клеточные линии, которые обладают низкой ферментативной активностью для добавления фукозы на N-ацетилглюкозамин, который связывается с Fc-участком антитела, или не обладает ферментативной активностью, например, крысиная клеточная линия миеломы YB2/0 (ATCC CRL 1662). Публикация международной заявки согласно PCT WO 03/035835 описывает вариант клеточной линии CHO - клетки Lec13 - со сниженной способностью присоединять фукозу к Asn(297)-связанным углеводам, что также приводит к гипофукозилированию антител, экспрессируемых в указанной клетке-хозяине (см. также Shields et al., (2002) J. Biol. Chem. 277:26733-26740). Антитела с модифицированным профилем гликозилирования также могут быть получены в куриных яйцах, как описано в публикации международной заявки согласно PCT WO 06/089231. Альтернативно, антитела с модифицированным профилем гликозилирования могут быть получены в растительных клетках, таких как Lemna. Способы получения антител в растительной системе описаны в заявке на патент США, соответствующей заявке Alston & Bird LLP, номер патентного реестра 040989/314911, поданной 11 августа 2006 года. Публикация международной заявки согласно PCT WO 99/54342 описывает клеточные линии, сконструированные для экспрессии модифицирующих гликопротеины гликозилтрансфераз (например, β(1,4)-N-ацетилглюкозаминилтранферазы III (GnTIII)) таким образом, что антитела, экспрессируемые в указанных сконструированных клеточных линиях, содержат повышенное количество структур с остатком GlcNac в точке ветвления, что приводит к повышенной АЗКЦ активности антител (см. также Umana et al., (1999) Nat. Biotech. 17:176-180). Альтернативно, фукозные остатки антитела можно отщеплять с использованием фермента фукозидазы; например, фукозидаза α-L-фукозидаза удаляет фукозильные остатки от антитела (Tarentino et al., (1975) Biochem. 14:5516-23).
[0089] Другая модификация антитела, описанного в настоящей заявке, которая рассматривается согласно настоящему изобретению, представляет собой пэгилирование. Антитело может быть пэгилировано, например, для повышения времени биологической полужизни (например, полужизни в сыворотке) указанного антитела. Для пэгилирования антитело или его фрагмент, как правило, подвергают реагированию с полиэтиленгликолем (ПЭГ), таким как реакционно активный сложный эфир или альдегидное производное ПЭГ, в условиях, при которых одна или более ПЭГ-групп присоединяется к антителу или фрагменту антитела. Предпочтительно, пэгилирование осуществляют посредством реакции ацилирования или реакции алкилирования с реакционно активной ПЭГ-молекулой (или аналогичным реакционно активным водорастворимым полимером). Предполагается, что при употреблении в настоящей заявке термин «полиэтиленгликоль» включает любые из форм ПЭГ, которые использовались для дериватизации других белков, такие как моно (C1-C10)алкокси- или арилокси-полиэтиленгликоль или полиэтиленгликоль-малеимид. Согласно конкретным вариантам реализации изобретения, антитело, подлежащее пэгилированию, представляет собой агликозилированное антитело. Способы пэгилирования белков известны в данной области техники и могут применяться для антител согласно изобретению. См., например, европейские патенты EP 0 154 316 и EP 0 401 384.
[0090] Физические свойства антитела
[0091] Антитела согласно изобретению могут быть охарактеризованы по различным физическим свойствам для выявления и/или определения различий между разными классами.
[0092] Например, антитела могут содержать один или более сайтов гликозилирования в вариабельном участке легкой или тяжелой цепи. Такие сайты гликозилирования могут приводить к повышенной иммуногенности антитела или изменению его pK благодаря измененному связыванию антигена (Marshall et al (1972) Annu Rev Biochem 41:673-702; Gala and Morrison (2004) J Immunol 172:5489-94; Wallick et al., (1988) J Exp Med 168:1099-109; Spiro (2002) Glycobiology 12:43R-56R; Parekh et al (1985) Nature 316:452-7; Mimura et al., (2000) Mol Immunol 37:697-706). Известно, что гликозилирование происходит в мотивах, содержащий последовательность N-X-S/T. В некоторых примерах предпочтительным является антитело против PD-1 без гликозилирования вариабельного участка, что может быть достигнуто либо путем выбора антител, которые не содержат мотив гликозилирования в вариабельном участке, либо путем мутирования остатков в области гликозилирования.
[0093] Согласно предпочтительному варианту реализации изобретения, антитела не содержат сайтов изомерии аспарагина. Дезамидирование аспарагина может происходить на последовательностях N-G или D-G и приводить к образованию остатка изоаспарагиновой кислоты, который вводит связь в полипептидную цепь и снижает ее стабильность (эффект изоаспарагиновой кислоты).
[0094] Каждое антитело имеет уникальную изоэлектрическую точку (pI), которая в целом находится в пределах диапазона pH между 6 и 9,5. Значение pI для антитела IgG1, как правило, находится в пределах диапазона pH 7-9,5, и значение pI для антитела IgG4, как правило, находится в пределах диапазона pH 6-8. Существует предположение, что антитела, значение pI которых находится за пределами нормального диапазона, могут характеризоваться некоторой степенью разворачивания и нестабильности в условиях in vivo. Таким образом, предпочтительным является антитело против PD-1, значение pI которого находится в пределах нормального диапазона, что может быть достигнуто путем выбора антител, имеющих pI в пределах нормального диапазона, или путем мутирования заряженных поверхностных остатков.
[0095] Молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие антитела согласно изобретению
[0096] Согласно другому аспекту, изобретение обеспечивает молекулы нуклеиновой кислоты, которые кодируют вариабельные участки или CDR-участки тяжелых и/или легких цепей антител согласно изобретению. Нуклеиновые кислоты могут быть представлены в целых клетках, в клеточном лизате или в частично очищенной или по существу чистой форме. Нуклеиновая кислота является «выделенной» или «приведенной по существу в чистое состояние», когда она очищена от других клеточных компонентов или других примесей, например, других клеточных нуклеиновых кислот или белков, с помощью стандартных методов. Нуклеиновая кислота согласно изобретению может представлять собой, например, ДНК или РНК и может содержать или не содержать интронные последовательности. Согласно предпочтительному варианту реализации изобретения, нуклеиновая кислота представляет собой молекулу кДНК.
[0097] Нуклеиновые кислоты согласно изобретению могут быть получены с использованием стандартных методов молекулярной биологии. В случае антител, экспрессированных с помощью гибридом (например, гибридом, полученных их трансгенных мышей, содержащих гены человеческого иммуноглобулина, как описано дополнительно ниже), молекулы кДНК, кодирующие легкие и тяжелые цепи указанного антитела, полученного с помощью гибридомы, можно получать с помощью стандартных методов ПЦР-амплификации или кДНК-клонирования. В случае антител, полученных из библиотеки генов иммуноглобулинов (например, с использованием методов фагового дисплея), нуклеиновая кислота, кодирующая такие антитела, может быть получена из генной библиотеки.
[0098] Предпочтительные молекулы нуклеиновых кислот согласно изобретению включают нуклеиновые кислоты, кодирующие последовательности VH и VL моноклонального антитела против PD-1 или участки CDR. После получения фрагментов ДНК, кодирующих сегменты VH и VL, указанные фрагменты можно подвергать дополнительным манипуляциям с помощью стандартных методов рекомбинантной ДНК, например, для превращения генов вариабельного участка в гены цепей полноразмерного антитела, в гены Fab-фрагмента или ген scFv. В указанных процедурах VL- или VH-кодирующий фрагмент ДНК функционально связан с другим фрагментом ДНК, кодирующим другой белок, такой как константный участок или подвижный линкер антитела. Предполагается, что термин «функционально связан» при использовании в данном контексте означает, что два фрагмента ДНК соединены таким образом, что аминокислотные последовательности, кодирующиеся двумя фрагментами ДНК, остаются в одной рамке считывания.
[0099] Выделенную ДНК, кодирующую VH-участок, можно превращать в ген полноразмерной тяжелой цепи путем функционального связывания кодирующей VH ДНК с другой молекулой ДНК, кодирующей константные участки тяжелой цепи (CH1, CH2 и CH3). Последовательности генов человеческих константных участков тяжелой цепи известны в данной области техники, и ДНК фрагменты, включающие эти участки, могут быть получены с помощью стандартной ПЦР-амплификации. Константный участок тяжелой цепи может представлять собой константный участок IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgE, IgM или IgD, но наиболее предпочтительно представляет собой константный участок IgG1 или IgG4. Для гена Fab-фрагмента тяжелой цепи кодирующая VH ДНК может быть функционально связана с другой молекулой ДНК, кодирующей только константный участок CH1 тяжелой цепи.
[00100] Выделенную ДНК, кодирующую VL-участок, можно превращать в ген полноразмерной легкой цепи (а также ген Fab легкой цепи) путем функционального связывания кодирующей VL ДНК с другой молекулой ДНК, кодирующей константный участок легкой цепи CL. Последовательности генов человеческого константного участка легкой цепи известны в данной области техники, и ДНК фрагменты, включающие указанные участки, могут быть получены с помощью стандартной ПЦР-амплификации. Согласно предпочтительным вариантам реализации, константный участок легкой цепи может представлять собой константный участок каппа- или лямбда-цепи.
[00101] Для создания гена scFv фрагменты ДНК, кодирующей VH и VL, функционально связывают с другим фрагментом, кодирующим подвижный линкер, например, кодирующим аминокислотную последовательность (Gly4-Ser)3, таким образом, что последовательности VH и VL могут экспрессироваться в виде непрерывного одноцепочечного белка, участки VL и VH которого соединены подвижным линкером (см. например, Bird et al., (1988) Science 242:423-426; Huston et al., (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883; McCafferty et al., (1990) Nature 348:552-554).
[00102] Получение моноклонального антитела согласно изобретению
[00103] Моноклональные антитела (mAb) согласно настоящему изобретению могут быть получены с использованием хорошо известного способа гибридизации соматических клеток (гибридомы) согласно источнику Kohler and Milstein (1975) Nature 256: 495. Другие варианты реализации для продукции моноклональных антител включают вирусную или онкогенную трансформацию B-лимфоцитов и методы фагового дисплея. Гибридные или гуманизированные антитела также хорошо известны в данной области техники. См., например, патенты США № 4 816 567; 5 225 539; 5 530 101; 5 585 089; 5 693 762 и 6 180 370, содержание которых специально полностью включено в настоящую заявку посредством ссылки.
[00104] Создание трансфектов, продуцирующих моноклональные антитела согласно изобретению
[00105] Антитела согласно изобретению также могут быть получены в трансфектомной клетке-хозяине с использованием, например, комбинации методов рекомбинантной ДНК и генной трансфекции, как хорошо известно в данной области техники (см, например, Morrison, S. (1985) Science 229:1202). Согласно одному варианту реализации изобретения, ДНК, кодирующую части или полноразмерные легкие и тяжелые цепи, полученную с помощью стандартных методов молекулярной биологии, встраивают в один или более векторов экспрессии таким образом, что гены функционально связывают с последовательностями регуляции транскрипции или трансляции. Предполагается, что в данном контексте термин «функционально связанные» означает, что ген антитела лигирован в вектор таким образом, что последовательности контроля транскрипции и трансляции в пределах указанного вектора выполняют свою предполагаемую функцию регуляции транскрипции и трансляции гена антитела.
[00106] Предполагается, что термин «регуляторная последовательность» включает промоторы, энхансеры и другие элементы контроля экспрессии (например, сигналы полиаденилирования), которые контролируют транскрипцию и трансляцию генов антитела. Такие регуляторные последовательности описаны, например, в источнике Goeddel, Gene Expression Technology. Methods in Enzymology 185, Academic Press, San Diego, Calif. (1990). Предпочтительные регуляторные последовательности для экспрессии в хозяйских клетках млекопитающих включают вирусные элементы, которые направляют белковую экспрессию на высоком уровне в указанных клетках млекопитающих, такие как промоторы и/или энхансеры, полученные из цитомегаловируса (CMV), вируса обезьян 40 (SV40), аденовируса, например, главный поздний промотор аденовируса (AdMLP) и полиом. Альтернативно, можно использовать невирусные регуляторные последовательности, такие как убиквитиновый промотор или промотор β-глобина. Кроме того, существуют регуляторные элементы, состоящие из последовательностей из различных источников, такие как система промоторов SRα, которая содержит последовательности из раннего просмотра SV40 и длинный концевой повтор вируса T-клеточного лейкоза человека 1 типа (Takebe et al., (1988) Mol. Cell. Biol. 8:466-472). Вектор экспрессии и последовательности контроля экспрессии выбирают таким образом, чтобы они были совместимы с системой экспрессии используемой клетки-хозяина.
[00107] Ген легкой цепи антитела и ген тяжелой цепи антитела можно встраивать в один или раздельные векторы экспрессии. Согласно предпочтительным вариантам реализации, вариабельные участки используются для создания генов полноразмерного антитела любого изотипа путем встраивания их в векторы экспрессии, уже кодирующие константные участки тяжелой цепи и легкой цепи желаемого изотипа, таким образом, чтобы VH-сегмент был функционально связан с CH-сегментом (сегментами) в пределах вектора и VL-сегмент был функционально связан с CL-сегментом в пределах вектора. Дополнительно или альтернативно, рекомбинантный вектор экспрессии может кодировать сигнальный пептид, который способствует секреции цепи антитела из клетки-хозяина. Ген цепи антитела можно клонировать в вектор таким образом, чтобы сигнальный пептид был связан в рамке считывания с амино-концом гена цепи антитела. Сигнальный пептид может представлять собой сигнальный пептид иммуноглобулина или гетерологичный сигнальный пептид (т.е. сигнальный пептид из белка, не представляющего собой иммуноглобулин).
[00108] Помимо генов цепи антитела и регуляторных последовательностей рекомбинантные векторы экспрессии согласно изобретению могут содержать дополнительные последовательности, такие как последовательности, которые регулируют репликацию вектора в клетках-хозяевах (например, ориджины репликации), и селектируемые маркерные гены. Селектируемый маркерный ген способствует селекции клеток-хозяев, в которые был встроен вектор (см., например, патенты США № 4 399 216; 4 634 665 и 5 179 017). Например, селектируемый маркерный ген, как правило, предоставляет клетке-хозяину, в которую был введен вектор, устойчивость к лекарственным средствам, таким как G418, гигромицин или метотрексат. Предпочтительные селектируемые маркерные гены включают ген дигидрофолатредуктазы (DHFR) (для применения в dhfr-клетках-хозяевах с селекцией/амплификацией по метатрексату) и нео-ген (для селекции по G418).
[00109] Для экспрессии легких и тяжелых цепей вектор (векторы) экспрессии, кодирующий указанные тяжелые и легкие цепи, трансфицируют в клетку-хозяина с помощью стандартных методов. Предполагается, что различные формы термина «трансфекция» включают широкое разнообразие методов, обычно используемых для введения экзогенной ДНК в прокариотическую ии эукариотическую клетку-хозяина, например, электропорацию, преципитацию фосфатом кальция, ДЭАЭ-декстрановую трансфекцию и т.п. Несмотря на теоретическую возможность экспрессии антител согласно изобретению как в прокариотических, так и в эукариотических клетках-хозяевах, наиболее предпочтительной является экспрессия антител в эукариотических клетках, наиболее предпочтительно, хозяйских клетках млекопитающих, поскольку в таких эукариотических клетках, в частности, клетках млекопитающих, с большей вероятностью происходит сборка и секреция правильно свернутого и иммунологически активного антитела по сравнению с прокариотическими клетками.
[00110] Предпочтительные хозяйские клетки млекопитающих для экспрессии рекомбинантных антител согласно изобретению включают клетки яичника китайского хомячка (CHO) (включая клетки dhfr-CHO, описанные в источнике Urlaub and Chasin, (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216-4220, используемые с DHFR-селектируемым маркером, например, как описано в источнике R. J. Kaufman and P. A. Sharp (1982) J. Mol. Biol. 159:601-621), клетки миеломы NSO, клетки COS и клетки SP2. В частности, для применения с клетками миеломы NSO другая предпочтительная система экспрессии представляет собой систему экспрессии гена GS, описанную в публикации международной заявки WO 87/04462, публикации международной заявки WO 89/01036 и европейском патенте EP 338 841. Когда рекомбинантные векторы экспрессии, кодирующие гены антитела, вводят в хозяйскую клетку млекопитающего, продукцию антител обеспечивают путем культивирования указанных клеток-хозяев в течение периода времени, достаточного для обеспечения экспрессии антитела в указанных клетках-хозяевах, или, более предпочтительно, секреции антитела в культуральную среду, в которой растят указанную клетку-хозяина. Антитела можно восстанавливать из культуральной среды с использованием стандартных способов белковой очистки.
[00111] Иммуноконъюгаты
[00112] Антитела согласно изобретению можно конъюгировать с терапевтическим агентом с образованием иммуноконъюгата, такого как конъюгат антитело-лекарственное средство (КАЛС). Подходящие терапевтические агенты включают цитотоксины, алкилирующие агенты, связывающиеся с малой бороздкой ДНК вещества, ДНК-интеркаляторы, ДНК-кросслинкеры, ингибиторы гистондеацетилазы, ингибиторы ядерного экспорта, протеасомные ингибиторы, ингибиторы топоизомеразы I или II, ингибиторы белков теплового шока, ингибиторы тирозинкиназы, антибиотики и антимитотические агенты. В КАЛС антитело и терапевтический агент предпочтительно конъюгированы с помощью расщепляемого линкера, такого как пептидильный, дифульфидный или гидразоновый линкер. Более предпочтительно, линкер представляет собой пептидильный линкер, такой как Val-Cit, Ala-Val, Val-Ala-Val, Lys-Lys, Pro-Val-Gly-Val-Val, Ala-Asn-Val, Val-Leu-Lys, Ala-Ala-Asn, Cit-Cit, Val-Lys, Lys, Cit, Ser или Glu. КАЛС могут быть получены, как описано в патентах США № 7 087 600; 6 989 452 и 7 129 261; публикации международной заявки согласно PCT WO 02/096910; публикации международной заявки WO 07/038 658; публикации международной заявки WO 07/051 081; публикации международной заявки WO 07/059 404; публикации международной заявки WO 08/083 312 и публикации международной заявки WO 08/103 693; публикациях патентов США 20060024317; 20060004081 и 20060247295; описание которых включено в настоящую заявку посредством ссылки.
[00113] Биспецифичные молекулы
[00114] Согласно другому аспекту, настоящее изобретение обеспечивает биспецифичные молекулы, содержащие одно или более антител согласно изобретению, связанных по меньшей мере с одной другой функциональной молекулой, например, другим пептидом или белком (например, другим антителом или лигандом рецептора) для создания биспецифичной молекулы, которая связывается по меньшей мере с двумя различными сайтами связывания или молекулами-мишенями. Таким образом, при употреблении в настоящей заявке термин «биспецифичная молекула» включает молекулы, которые обладают тремя или более специфичностями.
[00115] Согласно варианту реализации изобретения, биспецифичная молекула помимо специфичности связывания с Fc и специфичности связывания с PD-1 обладает третьей специфичностью. Указанная третья специфичность может представлять собой специфичность в отношении усиливающего фактора (enhancement factor, EF), например, молекулу, которая связывается с поверхностным белком, вовлеченным в цитотоксическую активность и, таким образом, повышает иммунный ответ в отношении клетки-мишени. Например, молекула, направленная на усиливающий фактор, может связываться с цитотоксической T-клеткой (например, через CD2, CD3, CD8, CD28, CD4, PD-1 или ICAM-1) или другой иммунной клеткой, приводя к повышенному иммунному ответу против клетки-мишени.
[00116] Биспецифичные молекулы могут иметь множество различных форм и размеров. Биспецифичная молекула одного конца размерного ряда сохраняет традиционную форму антитела, за исключением того, что вместо двух групп связывания, обладающих идентичной специфичностью, она содержит две группы связывания с разной специфичностью. Биспецифичные молекулы противоположного конца размерного ряда состоят из двух одноцепочечных фрагментов антитела (scFv's), связанных с помощью пептидной цепи, - так называемый конструкт Bs(scFv)2. Биспецифичные молекулы промежуточного размера включают два различных F(ab)-фрагмента, связанных с помощью пептидильного линкера. Биспецифичные молекулы указанных и других форм могут быть получены с помощью генной инженерии, соматической гибридизации или химических методов. См., например, источник Kufer et al, цитированный выше; Cao and Suresh, Bioconjugate Chemistry, 9 (6), 635-644 (1998); и van Spriel et al., Immunology Today, 21 (8), 391-397 (2000), и цитированные в них ссылки.
[00117] Онколитический вирус, кодирующий антитело и содержащий антитело
[00118] Онколитический вирус предпочтительно инфицирует и убивает раковые клетки. Антитела согласно настоящему изобретению можно использовать вместе с онколитическими вирусами. Альтернативно, онколитические вирусы, кодирующие антитела согласно настоящему изобретению, можно вводить в тело человека.
[00119] Фармацевтические композиции
[00120] Согласно другому аспекту, настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, содержащую одно или более антител согласно настоящему изобретению, представленных вместе с фармацевтически приемлемым носителем. Антитела могут быть дозированы раздельно, если композиция содержит более одного антитела. Композиция может необязательно содержать один или более дополнительных фармацевтически активных ингредиентов, таких как другое антитело или лекарственное средство, такое как противоопухолевое лекарственное средство.
[00121] Фармацевтическая композиция может содержать любое количество вспомогательных веществ. Вспомогательные вещества, которые можно использовать, включают носители, поверхностно-активные агенты, загустители или эмульгирующие агенты, твердые связующие вещества, дисперсионные или суспензионные добавки, солюбилизаторы, красители, ароматизаторы, покрытия, дезинтегрирующие агенты, скользящие вещества, подсластители, консерванты, изотонические агенты и их комбинации. Выбор и применение подходящих вспомогательных веществ обсуждаются в источнике Gennaro, ed., Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Ed. (Lippincott Williams & Wilkins 2003), описание которого включено в настоящую заявку посредством ссылки.
[00122] Предпочтительно, фармацевтическая композиция является подходящей для внутривенного, внутримышечного, подкожного, парентерального, спинномозгового или эпидермального введения (например, путем инъекция или инфузии). В зависимости от способа введения активный ингредиент может быть покрыт материалом для защиты от действия кислот и других природных условий, которые могут приводить к его инактивации. Фраза «парентеральное введение» при употреблении в настоящей заявке относится к способам введения, отличным от кишечного и местного введения, осуществляемым, как правило, путем инъекции, и включает, без ограничений, внутривенную, внутримышечную, интраартериальную, интратекальную, внутрисуставную, внутриглазничную, внутрисердечную, внтурикожную, внутрибрюшинную, транстрахеальную, подкожную, субкутикулярную, интраартикулярную, субкапсулярную, субарахноидальную, внутриспинномозговую, эпидуральную и интрастернальную инъекцию и инфузию. Альтернативно, антитело согласно изобретению можно вводить с помощью непарентерального способа, такого как местное, эпидермальное или слизистое введение, например, интраназально, перорально, вагинально, ректально, подъязычно или местно.
[00123] Фармацевтические композиции могут быть представлены в виде стерильных водных растворов или дисперсий. Они также могут быть представлены в виде микроэмульсии, липосомы или другой упорядоченной структуры, подходящей для введения высокой концентрации лекарственного средства.
[00124] Количество активного ингредиента, которое можно комбинировать с материалом носителя для получения единичной формы дозирования, варьирует в зависимости от субъекта, подлежащего лечению, и конкретного способа введения и в целом представляет собой такое количество композиции, которое производит терапевтический эффект. В целом, из ста процентов указанное количество варьирует от примерно 0,01% до примерно девяносто девяти процентов активного ингредиента, предпочтительно, от примерно 0,1% до примерно 70%, наиболее предпочтительно, от примерно 1% до примерно 30% активного ингредиента в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем.
[00125] Режимы дозирования адаптируют с достижением оптимального желаемого ответа (например, терапевтического ответа). Например, можно вводить одну болюсную дозу, можно вводить несколько раздельных доз в течение периода времени или же дозу можно пропорционально снижать или повышать в соответствии с нуждами терапевтической ситуации. Особенно предпочтительным является предоставление композиции для парентерального введения в виде стандартной лекарственной формы для простоты введения и единообразия дозы. Стандартная лекарственная форма при употреблении в настоящей заявке относится к физически дискретным единицам, адаптированным в качестве единичных доз для субъектов, подлежащих лечению; каждая единица содержит заранее определенное количество активного ингредиента, рассчитанное для получения желаемого терапевтического эффекта, вместе с требуемым фармацевтическим носителем. Альтернативно, антитело можно вводить в виде лекарственной формы с замедленным высвобождением, в случае чего требуется меньшая частота введений.
[00126] Для введения антитела доза может варьировать от примерно 0,0001 до 100 мг/кг, обычно от 0,01 до 5 мг/кг массы тела хозяина. Например, дозы могут составлять 0,3 мг/кг массы тела, 1 мг/кг массы тела, 3 мг/кг массы тела, 5 мг/кг массы тела или 10 мг/кг массы тела или в пределах диапазона 1-10 мг/кг. Пример режима лечения включает введение один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в три недели, один раз в четыре недели, один раз в месяц, один раз в каждые 3 месяца или один раз в от трех до 6 месяцев. Предпочтительные режимы дозирования для антитела против PD-1 согласно изобретению включают 1 мг/кг массы тела или 3 мг/кг массы тела посредством внутривенного введение, где указанное антитело вводится с использованием одного из следующих протоколов дозирования: (i) каждые четыре недели для шести доз, затем каждые три месяца; (ii) каждые три недели; (iii) один раз доза 3 мг/кг массы тела с последующей дозой 1 мг/кг массы тела каждые три недели. В некоторых способах дозу адаптируют для достижения концентрации антитела в плазме крови, составляющей примерно 1-1000 мкг/мл, и в некоторых способах - примерно 25-300 мкг/мл.
[00127] «Терапевтически эффективная доза» антитела против PD-1 согласно изобретению предпочтительно приводит к снижению тяжести симптомов заболевания, повышению частоты и продолжительности свободных от симптомов заболевания периодов времени или предотвращению нарушения или недостаточности, вызванной поражением заболеванием. Например, для лечения субъектов, имеющих опухоль, «терапевтически эффективная доза» предпочтительно подавляет опухолевый рост по меньшей мере примерно на 20%, более предпочтительно, по меньшей мере примерно на 40%, более предпочтительно, по меньшей мере примерно на 60%, и еще более предпочтительно, по меньшей мере примерно на 80% по отношению к субъектам, не получающим лечение. Терапевтически эффективное количество терапевтического антитела может приводить к снижению размер опухоли или ослаблять другим образом симптомы у субъекта, который, как правило, представляет собой человека или может представлять собой другое млекопитающее.
[00128] Фармацевтическая композиция может представлять собой лекарственную форму с контролируемым высвобождением, включая импланты, трансдермальные пластыри и микроинкапсулирваонные системы доставки. Можно использовать биодеградируемые биосовместимые полимеры, такие как этиленвинилацетат, полиангидриды, полигликолевая кислота, коллаген, полиортоэфиры и полимолочная кислота. См., например, Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J. R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978.
[00129] Терапевтические композиции можно вводить с помощью медицинских устройств, таких как (1) устройства для безыгольной подкожной инъекции (см., например, патенты США № 5 399 163; 5 383 851; 5 312 335; 5 064 413; 4 941 880; 4 790 824; и 4 596 556); (2) насосы для микроинфузии (патент США № 4 487 603); (3) трансдермальные устройства (патент США № 4 486 194); (4) инфузионные приборы (патенты США № 4 447 233 и 4 447 224) и (5) осмотические устройства (патенты США № 4 439 196 и 4 475 196); описание которых включено в настоящую заявку посредством ссылки.
[00130] Согласно конкретным вариантам реализации изобретения, моноклональные антитела согласно изобретению могут быть представлены в форме для обеспечения соответствующего распределения in vivo. Например, для обеспечения прохождения терапевтического антитела согласно изобретению через гематоэнцефалический барьер указанное антитело может быть представлено в виде липосом, которые могут дополнительно содержать нацеливающие фрагменты для усиления селективного транспорта к конкретным клеткам или органам. См., например патенты США № 4 522 811; 5 374 548; 5 416 016; и 5 399 331; V. V. Ranade (1989) J. Clin.Pharmacol.29:685; Umezawa et al., (1988) Biochem. Biophys. Res. Commun. 153:1038; Bloeman et al., (1995) FEBS Lett.357:140; M. Owais et al., (1995) Antimicrob. Agents Chemother. 39:180; Briscoe et al., (1995) Am. J. Physiol. 1233:134; Schreier et al., (1994) J. Biol. Chem. 269:9090; Keinanen and Laukkanen (1994) FEBS Lett. 346:123; and Killion and Fidler (1994) Immunomethods 4:273.
[00131] Применение и способы согласно изобретению
[00132] Антитела (композиции, биспецифичные антитела, иммуноконъюгаты и другие формы, включая онколитические вирусы) согласно настоящему изобретению имеют множество вариантов in vitro и in vivo применения, включая, например, усиление иммунных ответов путем блокирования PD-1. Антитела можно вводить в клетки в культуре, in vitro или ex vivo или субъектам, представляющим собой людей, например, in vivo, для усиления иммунитета в различных ситуациях. Соответственно, согласно одному аспекту, изобретение обеспечивает способ модифицирования иммунного ответа у субъекта, включающий введение указанному субъекту антитела или его антиген-связывающей части согласно изобретению таким образом, что происходит модифицирование иммунного ответ у указанного субъекта. Предпочтительно, происходит усиление, стимуляция или положительная регуляция иммунного ответа.
[00133] Предпочтительные субъекты включают пациентов, представляющих собой людей, нуждающихся в усилении иммунного ответа. Способы, в частности, подходят для лечения пациентов, представляющих собой людей, страдающих расстройством, которое можно лечить путем усиления иммунного ответа (например, опосредованного T-клетками иммунного ответа). Согласно конкретному варианту реализации изобретения, способы, в частности, подходят для лечения рака in vivo. Для достижения антиген-специфичного усиления иммунитета антитела против PD-1 можно вводить вместе с интересующим антигеном, или же указанный антиген уже может присутствовать у субъекта, подлежащего лечению (например, у субъекта, имеющего опухоль или вирус). Когда антитела против PD-1 вводят вместе с другими агентами, их можно вводить в любом порядке или одновременно.
134Учитывая способность антител против PD-1 согласно изобретению ингибировать связывание PD-1 с молекулами PD-L1 и/или PD-L2 и стимулировать антиген-специфичные T-клеточные ответы, изобретение также обеспечивает in vitro и in vivo способы применения антител для стимуляции, усиления или положительной регуляции антиген-специфичных T-клеточных ответов. Например, изобретение обеспечивает способ стимуляции антиген-специфичного T-клеточного ответа, включающий взаимодействие указанной T-клетки с антителом согласно изобретению таким образом, что происходит стимуляция антиген-специфичного T-клеточного ответа. Любой подходящий показатель антиген-специфичного T-клеточного ответа можно использовать для его измерения.
[00135] Неограничивающие примеры таких подходящих показателей включают повышенную пролиферацию T-клеток в присутствии антитела и/или повышенную продукцию цитокинов в присутствии антитела. Согласно предпочтительному варианту реализации изобретения, происходит стимуляция продукции интерлейкина-2 антиген-специфичной T-клеткой.
[00136] Изобретение также обеспечивает способ стимуляции иммунного ответа (например, антиген-специфичного T-клеточного ответа) у субъекта, включающий введение антитела согласно изобретению указанному субъекту таким образом, что происходит стимуляция иммунного ответа (например, антиген-специфичного T-клеточного ответа) у субъекта. Согласно предпочтительному варианту реализации изобретения, субъект представляет собой имеющего опухоль субъекта, и происходит стимуляция иммунного противоопухолевого ответа. Согласно другому предпочтительному варианту реализации изобретения, субъект представляет собой имеющего вирус субъекта, и происходит стимуляция иммунного противовирусного ответа.
[00137] Согласно другому варианту реализации, изобретение обеспечивает способы подавления роста опухолевых клеток у субъекта, включающие введение указанному субъекту антитела согласно изобретению таким образом, что у указанного субъекта происходит подавление роста опухоли. Согласно другому варианту реализации, изобретение обеспечивает способы лечения вирусной инфекции у субъекта, включающие введение указанному субъекту антитела согласно изобретению таким образом, что обеспечивается лечение вирусной инфекции у указанного субъекта.
[00138] Эти и другие способы согласно изобретению обсуждаются более подробно ниже.
[00139] Рак
[00140] Блокирование PD-1 антителами может приводить к усилению иммунного ответа против раковых клеток у пациента. Согласно одному аспекту, настоящее изобретение относится к лечению субъекта in vivo с использованием антитела против PD-1 таким образом, что происходит подавление роста раковых опухолей. Антитело против PD-1 можно использовать отдельно для подавления роста раковых опухолей. Альтернативно, антитело против PD-1 можно использовать вместе с другими иммуногенными агентами, используемыми в способах лечения рака, такими как онколитические вирусы или другие антитела, как описано ниже.
[00141] Соответственно, согласно одному варианту реализации, изобретение обеспечивает способ подавления роста опухолевых клеток у субъекта, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества антитела против PD-1 или его антиген-связывающей части. Предпочтительно, антитело представляет собой мышиное, гибридное или гуманизированное антитело против PD-1.
[00142] Предпочтительные раковые опухоли, рост которых можно подавлять с использованием антител согласно изобретению, включают раковые опухоли, как правило, чувствительные к иммунотерапии. Неограничивающие примеры предпочтительных раковых опухолей для лечения включают меланому (например, метастатическую злокачественную меланому), почечный рак (например, светлоклеточную карциному), рак предстательной железы (например, гормонально-рефрактерную аденокарциному предстательной железы), рак молочной железы, рак толстой кишки и рак легких (например, немелкоклеточный рак легких), первичный или метастатический. Дополнительно, изобретение включает рефрактерные или рецидивирующие злокачественные опухоли, рост которых можно подавлять с использованием антител согласно изобретению.
[00143] Примеры других раковых опухолей, которые можно лечить с использованием способов согласно изобретению, включают рак кости, рак поджелудочной железы, рак кожи, рак головы и шеи, кожную или интраокулярную злокачественную меланому, рак матки, рак яичников, ректальный рак, рак анальной области, рак желудка, рак яичка, карциному фаллопиевых труб, карциному эндометрия, карциному шейки матки, вагинальную карциному, карциному вульвы, ходжкинскую болезнь, неходжкинские лимфомы, рак пищевода, рак тонкого кишечника, рак эндокринной системы, рак щитовидной железы, рак паращитовидной железы, рак надпочечника, саркому мягких тканей, рак мочеточника, пениальный рак, хронические или острые лейкозы, включая острый миелоидный лейкоз, хронический миелоидный лейкоз, острый лимфобластный лейкоз, хронический лимфобластный лейкоз, солидные детские опухоли, лимфоцитарные лимфомы, рак мочевого пузыря, рак почки или мочеточника, карциному почечной лоханки, неоплазму центральной нервной системы (ЦНС), первичные лимфомы ЦНС, опухолевый ангиогенез, спинномозговую опухоль, глиому ствола мозга, аденому гипофиза, саркому Капоши, эпидермоидный рак, плоскоклеточный рак, T-клеточные лимфомы, вызванные окружающими условиями раковые опухоли, включая опухоли, вызванные асбестом, и комбинации указанных раковых опухолей. Настоящее изобретение также применимо для лечения метастатических раковых опухолей, в особенности, метастатических раковых опухолей, экспрессирующих PD-1 (Iwai et al., (2005) Int. Immunol. 17:133-144).
[00144] Необязательно антитела против PD-1 можно объединять с иммуногенными агентами, такими как раковые клетки, очищенные опухолевые антигены (включая рекомбинантные белки, пептиды и молекулы углеводов) и клетки, трансфицированные генами, кодирующими иммуностимулирующие цитокины (He et al., (2004) J. Immunol. 173:4919-28). Неограничивающие примеры опухолевых вакцин, которые можно использовать, включают пептиды антигенов меланом, такие как пептиды gp100, MAGE-антигены, Trp-2, MART1, и/или тирозиназу или опухолевые клетки, трансфицированные для экспрессии цитокина ГМ-КСФ.
[00145] Блокирование PD-1, вероятно, является более эффективным при комбинировании с протоколом вакцинации. Было разработано много экспериментальных подходов для противоопухолевой вакцинации (см. Rosenberg, S., 2000, Development of Cancer Vaccines, ASCO Educational Book Spring: 60-62; Logothetis, C., 2000, ASCO Educational Book Spring: 300-302; Khayat, D. 2000, ASCO Educational Book Spring: 414-428; Foon, K. 2000, ASCO Educational Book Spring: 730-738; см. также Restifo, N. and Sznol, M., Cancer Vaccines, Ch. 61, pp. 3023-3043 in DeVita et al. (eds.), 1997, Cancer: Principles and Practice of Oncology, Fifth Edition). В одной из указанных стратегий вакцину готовят с использованием аутологичных или аллогенных опухолевых клеток. Было показано, что указанные клеточные вакцины являются наиболее эффективными, когда опухолевые клетки тарнсдуцированы для экспрессии ГМ-КСФ. Было показано, что ГМ-КСФ является сильным активатором презентирования антигена для опухолевой вакцинации (Dranoff et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90: 3539-43).
[00146] Исследование паттернов генной экспрессии и широкомасштабной генной экспрессии в различных опухолях привело к определению так называемых опухоль-специфичных антигенов (Rosenberg, SA (1999) Immunity 10: 281-7). Во многих случаях указанные опухоль-специфичные антигены являются дифференцировочными антигенами, экспрессируемыми в опухолях и в клетках, из которых возникла опухоль, например, антигены меланоцитов gp100, MAGE-антигены и Trp-2. Более важно, может быть показано, что многие из указанных антигенов могут являться мишенями опухоль-специфичных T-клеток, встречающихся в организме хозяина. Блокирование PD-1 можно использовать вместе с набором рекомбинантных белков и/или пептидов, экспрессируемых в опухоли, для запуска иммунного ответа на указанные белки. В норме иммунная система воспринимает указанные белки как собственные антигены и, таким образом, толерантна к ним. Опухолевый антиген может включать белок теломеразу, которая требуется для синтеза теломер хромосом и которая экспрессируется в более чем 85% раковых опухолей человека и только в ограниченном количестве соматических тканей (Kim et al. (1994) Science 266: 2011-2013). Указанные соматические ткани можно защищать от иммунной атаки различными способами. Опухолевый антиген также может представлять собой «нео-антигены», экспрессируемые в раковых клетках в результате соматических мутаций, которые приводят к изменению белковой последовательности или созданию белков слияния между двумя несвязанными последовательностями (т.е. bcr-abl в хромосоме Philadelphia), или идиотип из B-клеточных опухолей.
[00147] Другие опухолевые вакцины могут включать белки из вирусов, вовлеченных в раковые заболевания человека, таких как вирусы папилломы человека (HPV), вирусы гепатита (HBV и HCV) и вирус герпеса, ассоциированный с саркомой Капоши (KHSV). Другая форма опухоль-специфичного антигена, который можно использовать вместе с блокирваонием PD-1, представляет собой очищенные белки теплового шока (HSP), выделенные из самой опухолевой ткани. Указанные белки теплового шока содержат фрагменты белков из опухолевых клеток и являются высоко эффективными в доставке к антиген-презентирующим клеткам для индукции противоопухолевого иммунного ответа (Suot & Srivastava (1995) Science 269:1585-1588; Tamura et al. (1997) Science 278:117-120).
[00148] Дендритные клетки (ДК) представляют собой активные антиген-презентирующие клетки, которые можно использовать для запуска антиген-специфичных ответов. ДК могут быть получены ex vivo и нагружены различными белковыми и пептидными антигенами, а также опухолевыми клеточными экстрактами (Nestle et al. (1998) Nature Medicine 4: 328-332). ДК также можно трансдуцировать с помощью генетических способов для экспрессии указанных опухолевых антигенов. ДК также сливали непосредственно с опухолевыми клетками для иммунизации (Kugler et al., (2000) Nature Medicine 6:332-336). В качестве способа вакцинации ДК-иммунизацию можно эффективно объединять с блокированием PD-1 для активации более сильных противоопухолевых ответов.
[00149] Блокирование PD-1 также можно комбинировать со стандартными способами лечениями рака. Блокирование PD-1 можно эффективно комбинировать с химиотерапевтическими схемами лечения. Указанные примеры могут позволять снизить дозу вводимого химиотерапевтического реагента (Mokyr et al., (1998) Cancer Research 58: 5301-5304). Пример такой комбинации представляет собой антитело против PD-1 в комбинации с декабазином для лечения меланомы. Другой пример такой комбинации представляет собой антитело против PD-1 в комбинации с интерлейкином-2 (IL-2) для лечения меланомы. Научным обоснованием комбинированного применения блокирования PD-1 и химиотерапии является то, что клеточная гибель, являющаяся последствием цитотоксического действия большинства химиотерапевтических соединений, должна приводить к повышенному уровню опухолевого антигена в пути антигенной презентации. Другие комбинированные терапии, которые вместе с блокированием PD-1 могут приводить в синергическому эффекту, опосредованному клеточной гибелью, представляют собой облучение, хирургическое лечение и выключение эндокринной функции. Каждый из указанных протоколов создает источник опухолевого антигена в организме-хозяине. Ингибиторы ангиогенеза также можно комбинировать с блокированием PD-1. Ингибирование ангиогенеза приводит к гибели опухолевых клеток, обеспечивающей опухолевый антиген в пути антигенной презентации хозяина.
[00150] Блокирующие PD-1 антитела также можно использовать в комбинации с биспецифичными антителами, которые нацеливают экспрессирующие Fcα- или Fcγ-рецептор эффекторные клетки на опухолевые клетки (см., например, патенты США № 5 922 845 и 5 837 243). Биспецифичные антитела можно использовать для нацеливания на два отдельных антигена. Например, биспецифичные антитела против Fc-рецептора/противоопухолевого антигена (например, Her-2/neu) использовались для нацеливания макрофагов на опухолевые участки. Такое нацеливание может вызывать более эффективную активацию специфичных в отношении опухоли ответы. T-клеточное звено указанных ответов будет усиливаться в результате блокирования PD-1. Альтернативно, антиген может быть доставлен непосредственно к ДК путем применения биспецифичных антител, которые связываются с опухолевым антигеном и специфичным для дендритных клеток маркером клеточной поверхности.
[00151] Опухоли ускользают от иммунного надзора с помощью большого разнообразия механизмов. Многие из указанных механизмов можно преодолевать путем инактивации белков, которые экспрессируются опухолями и которые являются иммуносупрессорными. Указанные белки включают среди прочих TGF-β (Kehrl et al., (1986) J. Exp. Med. 163: 1037-1050), IL-10 (Howard & O'Garra (1992) Immunology Today 13: 198-200) и Fas-лиганд (Hahne et al. (1996) Science 274: 1363-1365). Антитела к каждому из указанных факторов можно использовать в комбинации с антителами против PD-1 для противодействия эффектам иммуносупрессорного агента и содействия противоопухолевым иммунным ответам хозяина.
[00152] Другие антитела, которые активируют иммунный ответ хозяина, можно использовать в комбинации с антителами против PD-1. Указанные антитела включают молекулы на поверхности дендритных клеток (ДК), которые активируют функцию ДК и презентацию антигенов. Антитела против CD40 способны эффективно возмещать активность T-хелперных клеток (Ridge et al. (1998) Nature 393: 474-478) и могут использоваться вместе с антителами против PD-1 (Ito et al. (2000) Immunobiology 201 (5) 527-40). Активирующие антитела против T-клеточных костимулирующих молекул, таких как CTLA-4 (например, патент США № 5 811 097), OX-40 (Weinberg et al. (2000) Immunol 164: 2160-2169), 4-1BB (Melero et al. (1997) Nature Medicine 3: 682-685 (1997) и ICOS (Hutloff et al. (1999) Nature 397: 262-266), также могут обеспечивать повышенный уровень T-клеточной активации.
[00153] Также существует несколько экспериментальных лечебных протоколов, которые включают ex vivo активацию и размножение антиген-специфичных T-клеток и адоптивный перенос указанных клеток реципиенту для стимуляции противоопухолевого эффекта антиген-специфичных T-клеток (Greenberg & Riddell (1999) Science 285: 546-51). Указанные способы также можно использовать для активации T-клеточных ответов на инфекционные агенты, такие как CMV. Ex vivo активация в присутствии антитела против PD-1 может повысить количество и активность адаптивно перенесенных T-клеток.
[00154] Инфекционные заболевания
[00155] Другие способы согласно изобретению используются для лечения пациентов, которые были подвержены воздействию конкретных токсинов или патогенов. Соответственно, другой аспект настоящего изобретения обеспечивает способ лечения инфекционного заболевания у субъекта, включающий введение указанному субъекту антитела против PD-1 или его антиген-связывающей части таким образом, что обеспечивается лечение субъекта от указанного инфекционного заболевания. Предпочтительно, антитело представляет собой гибридное или гуманизированное антитело.
[00156] Подобно применению опосредованного антителом блокирования PD-1 в отношении опухолей, как обсуждается выше, его можно использовать отдельно или в качестве адъюванта в комбинации с вакцинами для стимуляции иммунного ответа на патогены, токсины и собственные антигены. Примеры патогенов, для которых указанный терапевтический подход может быть, в частности, полезен, включают патогены, для которых на сегодняшний день не существует эффективной вакцины, или патогены, для которых стандартные вакцины не полностью эффективны. Указанные патогены включают, но не ограничиваются указанными, ВИЧ, вирус гепатита (A, B и C), вирус гриппа, вирус герпеса, Giardia, Malaria, Leishmania, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa. Блокирование PD-1, в частности, является полезным для борьбы с установленными инфекциями, вызванными агентами, такими как ВИЧ, презентирующими измененные антигены во время инфекции. Указанные новые эпитопы распознаются как чужеродные во время введения антитела против PD-1 человека, вызывая таким образом сильный T-клеточный ответ, который не подавляется отрицательными сигналами, опосредованными PD-1.
[00157] Некоторые примеры патогенных вирусов, вызывающих инфекции, поддающиеся лечению с помощью способов согласно изобретению, включают ВИЧ, гепатит (A, B или C), вирус герпеса (например, VZV, HSV-1, HAV-6, HSV-II и CMV, вирус Эпштейна-Барра), аденовирус, вирус гриппа, флавивирусы, эховирусы, риновирусы, вирус Каксаки, коронавирус, респираторный синцитиальный вирус, вирус свинки, ротавирус, вирус кори, вирус краснухи, парвовирус, вирус коровьей оспы, Т-лимофцитарный вирус человека (HTLV), вирус денге, папилломавирус, вирус моллюска, полиовирус, вирус бешенства, вирус Джона Каннингема (JC) и арбовирусный вирус энцефалита.
[00158] Некоторые примеры патогенных бактерий, вызывающих инфекции, поддающиеся лечению с помощью способов согласно изобретению, включают хламидии, рикетсии, микобактерии, стафилококки, стрептококки, пневмококки, менингококки и гонококки, клебсиеллу, протеус, серацию, псевдомонаду, легионеллу, бактерии, вызывающие дифтерию, сальмонеллу, палочковидную бактерию, бактерию, вызывающую холеру, столбняк, ботулизм, сибирскую язву, чуму, лептоспироз и болезнь Лайма.
[00159] Некоторые примеры патогенных грибов, вызывающих инфекции, поддающиеся лечению с помощью способов согласно изобретению, включают грибы Candida (albicans, krusei, glabrata, tropicalis, и т.д.), Cryptococcus neoformans, Aspergillus (fumigatus, niger, и т.д.), Genus Mucorales (mucor, absidia, rhizopus), Sporothrix schenkii, Blastomyces dermatitidis, Paracoccidioides brasiliensis, Coccidioides immitis и Histoplasma capsulatum.
[00160] Некоторые примеры патогенных паразитов, вызывающих инфекции, поддающиеся лечению с помощью способов согласно изобретению, включают Entamoeba histolytica, Balantidium coli, Naegleriafowleri, Acanthamoeba sp., Giardia lambia, Cryptosporidium sp., Pneumocystis carinii, Plasmodium vivax, Babesia microti, Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi, Leishmania donovani, Toxoplasma gondii, Nippostrongylus brasiliensis.
[00161] Во всех из указанных выше способах блокирование PD-1 можно комбинировать с другими формами иммунотерапии, такими как лечение цитокинами (например, интерферонами, ГМ-КСФ, Г-КСФ, IL-2) или терапия биспецифичным антителом, которое обеспечивает усиленную презентацию опухолевых антигенов (см., например, Holliger (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448; Poljak (1994) Structure 2:1121-1123).
[00162] Аутоиммунные реакции
[00163] Антитела против PD-1 могут вызывать и усиливать аутоиммунные ответы. В самом деле, индукция противоопухолевых ответов с помощью опухолевой клетки и пептидных вакцин показывает, что многие противоопухолевые ответы вовлекают аутореактивность (van Elsas et al. (2001) J. Exp. Med. 194:481-489; Overwijk, et al., (1999) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 96: 2982-2987; Hurwitz, (2000), выше; Rosenberg & White (1996) J. Immunother Emphasis Опухоль Immunol 19 (1): 81-4). Таким образом, возможно рассматривать использование блокирования PD-1 вместе с различными собственными белками для разработки протоколов вакцинации для эффективной стимуляции иммунных ответов против указанных собственных белков для лечения заболевания.
[00164] Другие собственные белки также могут использоваться в качестве мишеней, например, IgE для лечения аллергии и астмы и TNFα для лечения ревматоидного артрита. Наконец, ответы антитела на различные гормоны могут быть вызваны применением антитела против PD-1. Ответы нейтрализующих антител на половые гормоны можно использовать для контрацепции. Ответ нейтрализующего антитела на гормоны и другие растворимые факторы, которые требуются для роста конкретных опухолей, также можно рассматривать как возможные мишени для вакцинации.
[00165] Аналогичные способы, как описано выше, для применения антитела против PD-1 можно использовать для индукции терапевтических аутоиммунных ответов для лечения пациентов, страдающих нарушенным накоплением других собственных антигенов, таких как цитокины, такие как TNFα и IgE.
[00166] Комбинированная терапия
[00167] Согласно другому аспекту, изобретение обеспечивает способы комбинированной терапии, в которых антитело против PD-1 (или его антиген-связывающую часть) согласно настоящему изобретению вводят совместно с одним или более дополнительными антителами, которые являются эффективными в стимулировании иммунных ответов, таким образом, для дополнительного усиления, стимуляции или положительной регуляции иммунных ответов у субъекта. Согласно одному варианту реализации, изобретение обеспечивает способ стимуляции иммунного ответа у субъекта, включающий введение указанному субъекту антитела против PD-1 и одного или более дополнительных иммуностимулирующих антител, таких как антитело против LAG-3, антитело против PD-L1 и/или антитело против CTLA-4, таким образом, что происходит стимуляция иммунного ответа у субъекта, например, для ингибирования опухолевого роста или для стимуляции противовирусного ответа. Согласно другому варианту реализации изобретения, субъекту вводят антитело против PD-1 и антитело против LAG-3. Согласно другому варианту реализации изобретения, субъекту вводят антитело против PD-1 и антитело против PD-L1. Согласно другому варианту реализации изобретения, субъекту вводят антитело против PD-1 и антитело против CTLA-4. Согласно другому варианту реализации изобретения, по меньшей мере одно дополнительное иммуностимулирующее антитело (например, антитело против PD-1, антитело против PD-L1 и/или антитело против CTLA-4) представляет собой человеческое антитело. Альтернативно, по меньшей мере одно дополнительное иммуностимулирующее антитело может представлять собой, например, гибридное или гуманизированное антитело (например, полученное из мыши антитело против LAG-3, антитело против PD-L1 и/или антитело против CTLA-4).
[00168] Согласно другому варианту реализации изобретения, изобретение обеспечивает способ лечения гиперпролиферативного заболевания (например, рака), включающий введение антитела против PD-1 и антитела против CTLA-4 субъекту. Согласно дополнительным вариантам реализации изобретения, антитело против PD-1 вводят в субтерапевтической дозе, антитело против CTLA-4 вводят в субтерапевтической дозе или оба указанных антитела вводят в субтерапевтической дозе. Согласно другому варианту реализации изобретения, настоящее изобретение обеспечивает способ изменения неблагоприятного явления, связанного с лечением гиперпролиферативного заболевания, с помощью иммуностимулирующего агента, включающий введение антитело против PD-1 и субтерапевтической дозы антитела против CTLA-4 субъекту. Согласно конкретным вариантам реализации изобретения, субъект представляет собой человека. Согласно другим вариантам реализации изобретения, антитело против CTLA-4 представляет собой человеческую последовательность моноклонального антитела 10D1 (описанного в публикации международной заявки согласно PCT WO 01/14424), и антитело против PD-1 представляет собой мышиную последовательность моноклонального антитела, такого как антитело против PD-1 C1H5, описанного в настоящей заявке. Другие антитела против CTLA-4, включенные согласно способам настоящего изобретения, включают, например, антитела, описанные в следующих источниках: публикация международной заявки WO 98/42752; публикация международной заявки WO 00/37504; патент США № 6 207 156; Hurwitz et al. (1998) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95(17):10067-10071; Camacho et al., (2004) J. Clin. Oncology 22(145): Abstract No. 2505 (antibody CP-675206); and Mokyr et al., (1998) Cancer Res. 58:5301-5304. Согласно конкретным вариантам реализации изобретения, антитело против CTLA-4 связывается с человеческим CTLA-4 со значением KD, составляющим 5x10-8 M или менее, связывается с человеческим CTLA-4 со значением KD, составляющим 1x10-8 M или менее, связывается с человеческим CTLA-4 со значением KD, составляющим 5x10-9 M или менее или связывается с человеческим CTLA-4 со значением KD, составляющим между 1x10-8 M и 1x10-10 M или менее.
[00169] Согласно другому варианту реализации изобретения, настоящее изобретение обеспечивает способ лечения гиперпролиферативного заболевания (например, рака), включающий введение антитела против PD-1 и антитела против LAG-3 субъекту.
[00170] Согласно другому варианту реализации изобретения, настоящее изобретение обеспечивает способ лечения гиперпролиферативного заболевания (например, рака), включающий введение антитела против PD-1 и антитела против PD-L1 субъекту.
[00171] Блокирование PD-1 и одного или более вторых антигенов-мишеней, таких как CTLA-4 и/или LAG-3 и/или PD-L1, антителами может приводить к усилению иммунного ответа на раковые клетки у пациента. Раковые опухоли, рост которых может подавляться при использовании антител согласно настоящему изобретению, включают раковые опухоли, как правило, чувствительные к иммунотерапии. Типичные примеры раковых опухолей для лечения с помощью комбинированной терапии согласно настоящему изобретению включают такие раковые опухоли, которые конкретно перечислены выше в обсуждении монотерапии антителами против PD-1.
[00172] Согласно конкретным вариантам реализации изобретения, комбинацию терапевтических антител, обсуждаемую в настоящей заявке, можно вводить одновременно в виде одной композиции в фармацевтически приемлемом носителе или одновременно в виде раздельных композиций, где каждое антитело представлено в фармацевтически приемлемом носителе. Согласно другому варианту реализации изобретения, комбинацию терапевтических антител можно вводить последовательно.
[00173] Более того, если комбинированная терапия предполагает последовательное введение более чем одной дозы, порядок указанного последовательного введения можно изменять или сохранять в каждый момент введения. Последовательные введения можно комбинировать с одновременными введениями или любой их комбинацией.
[00174] Опухоли ускользают от хозяйского иммунологического надзора с помощью большого разнообразия механизмов. Многие из указанных механизмов можно преодолевать с помощью инактивации белков, которые экспрессируются опухолями и которые являются иммуносупрессорными. Указанные механизмы включают среди прочих TGF-β (Kehrl et al., (1986) J. Exp. Med. 163: 1037-1050), IL-10 (Howard & O'Garra (1992) Immunology Today 13: 198-200), и Fas-лиганд (Hahne et al., (1996) Science 274: 1363-1365). В другом примере антитела к каждому из указанных элементов можно дополнительно комбинировать с комбинацией антител против PD-1 и против CTLA-4 и/или против LAG-3 и/или против PD-L1 для противодействия эффектам иммуносупрессорных агентов и содействия хозяйским противоопухолевым иммунным ответам.
[00175] Другие антитела, которые можно использовать для активации хозяйских иммунологических реакций можно дополнительно использовать вместе с комбинацией антител против PD-1 и против CTLA-4 и/или против LAG-3 и/или против PD-L1. Указанные антитела включают антитела против молекул на поверхности дендритных клеток, которые активируют функцию ДК и презентацию антигена. Антитела против CD40 (Ridge et al., выше) можно использовать вместе с комбинацией антител против PD-1 и против CTLA-4 и/или антител против LAG-3 и/или против PD-L1 (Ito et al., выше). Другие активирующие антитела к T-клеточным костимулирующим молекулам (Weinberg et al., выше, Melero et al., выше, Hutloff et al., выше) могут также обеспечивать повышенный уровень T-клеточной активации.
[00176] Как обсуждается выше, трансплантация костного мозга в настоящее время используется для лечения различных гематопоэтических опухолей. Комбинированное блокирование PD-1 и CTLA-4 и/или LAG-3 и/или PD-L1 можно использовать для повышения эффективности специфичных в отношении донорной трансплантированной опухоли T-клеток.
[00177] Некоторые экспериментaльные лечебные протоколы включают ex vivo активацию и размножение антиген-специфичных T-клеток и адоптивный перенос указанных клеток реципиентам антиген-специфичных T-клеток против опухоли (Greenberg & Riddell, выше). Указанные способы также можно применять для активации T-клеточных ответов на инфекционные агенты, такие как CMV. Ожидается, что ex vivo активация в присутствии антител против PD-1 и против CTLA-4 и/или против LAG-3 и/или против PD-L1 может повышать количество и активность адаптивно перенесенных T-клеток.
[00178] Согласно конкретным вариантам реализации, настоящее изобретение обеспечивает способ изменения неблагоприятного явления, связанного с лечением гиперпролиферативного заболевания (например, рака), с помощью иммуностимулирующего агента, включающий введение антитела против PD-1 и субтерапевтической дозы антитела против CTLA-4 и/или против LAG-3 и/или против PD-L1 субъекту. Например, способы согласно настоящему изобретению обеспечивают способ снижения встречаемости вызванного иммуностимулирующим терапевтическим антителом колита или диареи путем введения невсасывающегося стероида пациенту. Поскольку любой пациент, который получает иммуностимулирующее терапевтическое антитело, имеет риск развития колита или диареи, вызванных таким антителом, вся популяция указанных пациентов подходит для терапии в соответствии со способами согласно настоящему изобретению. Несмотря на то что введение стероидов использовалось для лечения воспалительного заболевания кишечника (ВЗК) и предотвращения обострений указанного ВЗК, оно не использовалось для предотвращения (снижения частоты встречаемости) ВЗК у пациентов, у которых не было диагностировано ВЗК. Значительные побочные эффекты, связанные со стероидами (даже невсасывающимися стероидами) ограничивали их профилактическое применение.
[00179] Согласно дополнительным вариантам реализации изобретения, комбинированное блокирование PD-1 и CTLA-4 и/или LAG-3 и/или PD-L1 (т.е. использование иммуностимулирующих терапевтических антител против PD-1 и CTLA-4 и/или антител против LAG-3 и/или против PD-L1) можно дополнительно комбинировать с применением любого невсасывающегося стероида. При употреблении в настоящей заявке «невсасывающийся стероид» представляет собой глюкокортикостероид, который подвергается активному метаболизму первого прохождения таким образом, что после его метаболизма в печени наблюдается низкая биодоступность указанного стероида, т.е. составляющая менее чем примерно 20%. Согласно одному варианту реализации изобретения, невсасывающийся стероид представляет собой будесонид. Будесонид представляет собой глюкокортикостероид местного действия, который активно подвергается метаболизму, главным образом, в печени, после перорального введения. ENTOCORT EC™ (Astra-Zeneca) представляет собой зависимую от pH и времени пероральную лекарственную форму будесонида, разработанную для оптимизации доставки лекарственного средства в подвздошную кишку на всю длину ободочной кишки. ENTOCORT EC™ одобрен в США для лечения болезни Крона от легкой до умеренной степени тяжести, затрагивающей подвздошную кишку и/или восходящую ободочную кишку. Обычная пероральная доза ENTOCORT EC™ для лечения болезни Крона составляет от 6 до 9 мг/день. ENTOCORT EC™ высвобождается в кишечнике до всасывания и удерживания в слизистой оболочке кишечника. После прохождения через кишечную слизистую ткань-мишень ENTOCORT EC™ подвергается активному метаболизму с помощью системы цитохрома P450 в печени до образования метаболитов, обладающих незначительной глюкокортикостероидной активностью. Таким образом, его биодоступность является низкой (примерно 10%). Низкая биодоступность будесонида приводит к улучшенному терапевтическому отношению по сравнению с другими глюкокортикостероидами, подвергающимися менее интенсивному метаболизму первого прохождения. Будесонид вызывает меньшие неблагоприятные эффекты, включая менее выраженное подавление гипоталамо-гипофизарной системы, по сравнению с кортикостероидами системного действия. Однако длительное введение ENTOCORT EC™ может приводить к системным эффектам глюкокортикостероидов, таким как гиперкортицизм и угнетение функции надпочечников. СМ. PDR 58th ed. 2004; 608-610.
[00180] Согласно другим дополнительным вариантам реализации изобретения, комбинированное блокирование PD-1 и CTLA-4 и/или LAG-3 и/или PD-L1 (т.е. использование иммуностимулирующих терапевтических антител против PD-1 и против CTLA-4 и/или антител против LAG-3 и/или против PD-L1) совместно с использованием невсасывающегося стероида можно дополнительно комбинировать с применением салицилата. Салицилаты включают 5-ASA агенты такие как, например: сульфасалазин (AZULFIDINE™, Pharmacia & UpJohn); ольсалазин (DIPENTUM™, Pharmacia & UpJohn); балсалазид (COLAZAL™, Salix Pharmaceuticals, Inc.); и месаламин (ASACOL™, Procter & Gamble Pharmaceuticals; PENTASA™, Shire US; CANASA™, Axcan Scandipharm, Inc.; ROWASA™, Solvay).
[00181] В соответствии со способами согласно настоящему изобретению, салицилат, вводимый в комбинации с антителами против PD-1 и против CTLA-4 и/или антителами против LAG-3 и/или против PD-L1 и невсасывающимся стероидом, может включать любое перекрывающееся или последовательное введение салицилата и невсасывающегося стероида для снижения частоты встречаемости колита, вызванного иммуностимулирующим антителом. Таким образом, например, способы снижения частоты встречаемости колита, вызванного иммуностимулирующим антителом в соответствии с настоящим изобретением, включают одновременное или последовательное введение салицилата и невсасывающегося стероида (например, салицилат вводят через 6 часов после введения невсасывающегося стероида) или любую их комбинацию. Дополнительно, в соответствии с настоящим изобретением, салицилат и невсасывающийся стероид можно вводить с помощью одного и того же способа (например, оба вещества вводят перорально) или с помощью различных способов (например, салицилат вводят перорально и невсасывающийся стероид вводят ректально), которые могут отличаться от способа (способов), используемых для введения комбинации антител против PD-1 и против CTLA-4 и/или антител против LAG-3 и/или против PD-L1.
[00182] Настоящее изобретение дополнительно проиллюстрировано с помощью следующих далее примеров, которые, как предполагается, дополнительно не ограничивают настоящее изобретение. Содержание всех фигур и всех ссылок, последовательностей согласно базе данных Genbank, патентов и опубликованных патентных заявок, цитированных на протяжении настоящей заявки, специально включено в настоящую заявку посредством ссылки.
[00183] Примеры
[00184] Пример 1. Создание мышиных моноклональных антител против PD-1 с использованием гибридомной технологии
[00185] Иммунизация
[00186] Мышей иммунизировали в соответствии со способом, как описано в источнике E Harlow, D. Lane, Antibody: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., 1998. Рекомбинантный человеческий белок PD-1 с меткой человеческого IgG1-Fc на C-конце (Acro biosystems, #PD-1-H5257, содержащий внеклеточный домен, AA Leu 25 - Gln 167) использовали в качестве иммуногена. Человеческий белок PD-1-his (Sino biological, #10377-H08H) применяли для определения антисывороточного титра и для скрининга гибридом, секретирующих антиген-специфичные антитела.
[00187] В частности, каждому животному инъецировали 25 мкг человеческого белка PD1-Fc в полном адъюванте Фрейнда (Sigma, Сент-Луис, Миссури, США) и затем проводили стимуляцию от 2 до 3 раз путем инъекции 25 мкг человеческого белка PD1-Fc в неполном адъюванте Фрейнда (Sigma, Сент-Луис, Миссури, США) в зависимости от антисывороточного титра. Антисывороточный титр измеряли с помощью скрининга на основе ИФА с использованием рекомбинантного человеческого белка PD1-his. Вкратце, разведенную сыворотку (60 мкл) добавляли в каждую лунку и инкубировали при 37°C в течение 40 минут. Планшеты затем промывали 4 раза, HRP-конъюгированные козьи антитела против IgG мыши (Jackson Immuno research, Cat#115-036-071) использовали для выявления и оптическую плотность (OD), характеризующую связывание, наблюдали при 450 нм. Животным, имеющим высокие титры, вводили конечную дополнительную дозу путем внутрибрюшинной инъекции до слияния гибридомы.
[00188] Слияние гибридомы и скрининг
[00189] Клетки мышиной клеточной линии миеломы (SP2/0-Ag14, ATCC#CRL-1581) культивировали до достижения фазы логарифмического роста непосредственно перед слиянием. Клетки селезенки из иммунизированных мышей получали в стерильных условиях и сливали с клетками миеломы в соответствии с методом, описанным в источнике Kohler G, and Milstein C, "Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity", Nature, 256: 495-497(1975). Слитые «гибридные клетки» затем распределяли в 96-луночные планшеты в среде DMEM/20% ЭБС/HAT. Выжившие колонии гибридом наблюдали под микроскопом через семь-десять дней после слияния. Через две недели супернатант из каждой лунки подвергали скринингу на основе ИФА с использованием рекомбинантного белка PD1-his человека. Вкратце, ИФА-планшеты покрывали 60 мкл человеческого PD1-his (Sino biological, #10377-H08H, 2,0 мкг/мл в PBS) в течение ночи при 4°C. Планшеты промывали 4 раза PBS-T и блокировали 200 мкл блокирующего буфера (5% обезжиренное молоко в PBS-T). Разведенный супернатант гибридомы (60 мкл) добавляли в каждую лунку и инкубировали при 37°C в течение 40 минут. Планшеты затем промывали 4 раза, конъюгированные с HRP козьи антитела против IgG мыши (Jackson Immuno research, Cat#115-036-071) использовали для выявления и OD, характеризующую связывание, наблюдали при 450 нм. Гибридому с положительным результатом, секретирующую антитело, которое связывается с человеческим PD1-his, затем выбирали и переносили в 24-луночные планшеты. Клоны гибридомы, продуцирующие антитела, которые показали высокое специфичное связывание и блокирующую PD1/PDL1 активность, субклонировали и антитела, продуцированные указанными субклонами, очищали с помощью аффинной хроматографии на белке А. Вкратце, колонку, содержащую белок A-сефарозу (от компании Bestchrom (Shanghai) Biosciences, Cat#AA0273), промывали с использованием буфера PBS в 5-10 колоночных объемах. Клеточные супернатанты пропускали через колонки и затем колонки промывали с использованием буфера PBS до тех пор, пока абсорбция белка не достигала базового уровня. Элюирование колонки проводили элюирующим буфером (0,1 М глицин-HCl, pH 2,7), который сразу собирали в пробирки на 1,5 мл, содержащие нейтрализующий буфер (1 M Трис-HCl, pH 9,0). Фракции, содержащие IgG, объединяли и диализовали в PBS в течение ночи при 4°C.
[00190] Пример 2. Определение аффинности мышиных моноклональных антител против PD-1 с использованием метода поверхностного плазмонного резонанса BIACORE
[00191] Осуществляли характеристику очищенных мышиных моноклональных антител (mAb) против PD-1, созданных в Примере 1, содержащих последовательности вариабельных участков тяжелой/легкой цепи, как описано в Таблице 1, выше, и последовательности константных участков тяжелой/легкой цепи SEQ ID NO: 129 и 130 соответственно, на предмет аффинности и кинетики связывания с помощью системы Biacore T200 (GE healthcare, Питтсбург, Пенсильвания, США).
[00192] Вкратце, козьи антитела против IgG мыши (GE healthcare, Cat#BR100839, набор для захвата человеческих антител) ковалентно связывали с чипом CM5 (покрытым карбоксиметилдекстраном чипом) через первичные амины с использованием стандартного набора для сопряжения аминов (GE healthcare, Питтсбург, Пенсильвания, США), предложенного Biacore. Непрореагировавшие фрагменты на поверхности биосенсора блокировали этаноламином. Затем очищенные антитела против PD-1 и ниволумаб (OPDIVO®) в концентрации 66,7 нМ наносили на чип при скорости потока 10 мкл/мин. Затем рекомбинантный человеческий белок PD-1-his (Sino biological, #10377-H08H) или белок PD-1-his макака-крабоеда (Acro biosystems, #PD-1-C5223) в буфере HBS EP (предложенном Biacore) наносили на чип при скорости потока 30 мкл/мин. За кинетикой ассоциации антиген-антитело наблюдали в течение 2 минут и за кинетикой диссоциации наблюдали в течение 10 минут. Кривые ассоциации и диссоциации подводили к 1:1 модели связывания Ленгмюра с использованием программы оценки BIA.
[00193] Значения ka, kd и KD были определены и показаны в Таблице 2, ниже.
Таблица 2. Кинетика связывания мышиных моноклональных антител против PD-1 с PD-1 человека или макака-крабоеда по результатам анализа Biacore
Кинетика по Biacore | ||||||
PD-1 человека | PD-1 макака-крабоеда | |||||
Ka | Kd | KD | Ka | Kd | KD | |
Клон | (M-1s-1) | (s-1) | (M) | (M-1s-1) | (s-1) | (M) |
D1F2 | 1,94E+05 | 2,03E-04 | 1,05E-09 | 2,00E+05 | 0,006324 | 3,17E-08 |
C1F5 | 3,53E+05 | 1,31E-04 | 3,72E-10 | 1,38E+05 | 0,002489 | 1,81E-08 |
C1E1 | 1,72E+05 | 5,88E-05 | 3,42E-10 | 2,03E+05 | 7,89E+04 | 3,90E-09 |
D1A1 | 1,88E+05 | 3,86E-04 | 2,06E-09 | 2,10E+05 | 0,002358 | 1,13E-08 |
D1F1 | 2,04E+05 | 5,77E-04 | 2,83E-09 | 2,60E+04 | 0,002919 | 1,12E-07 |
C1E2 | 1,53E+05 | 4,42E-04 | 2,88E-09 | 2,38E+05 | 0,002978 | 1,25E-08 |
C1A1 | 1,68E+05 | 1,89E-04 | 1,13E-09 | 3,48E+05 | 3,31E-03 | 9,50E-09 |
C1F4 | 1,56E+05 | 3,59E-04 | 2,30E-09 | 3,01E+05 | 0,005208 | 1,73E-08 |
D2C2 | 1,73E+05 | 3,07E-04 | 1,77E-09 | 2,06E+04 | 0,00238 | 1,16E-07 |
2G2 | 1,63E+05 | 4,36E-04 | 2,68E-09 | 1,40E+05 | 1,83E-03 | 1,30E-08 |
C1C5 | 2,31E+05 | 2,03E-04 | 8,80E-10 | 3,22E+05 | 4,70E-03 | 1,46E-08 |
OPDIVO® | 4,33E+05 | 1,41E-03 | 3,25E-09 | / | / | / |
[00194] Антитела согласно настоящему изобретению специфично связывались с PD-1 человека при более низком значении KD по сравнению с ниволумабом, что указывает на их более высокую аффинность в отношении PD-1 человека.
[00195] Пример 3. Активность связывания мышиных моноклональных антител против PD-1
[00196] 96-луночные микропланшеты покрывали козьими антителами против Fcγ-фрагментов IgG мыши в концентрации 2 мкг/мл (Jackson Immuno Research, #115-006-071,100 мкл/лунка) в PBS и инкубировали в течение ночи при 4°C. Планшеты промывали 4 раза промывочным буфером (PBS+0,05% Tween-20, PBS-T) и затем блокировали блокирующим буфером в концентрации 200 мкл/лунка (5% (по массе к объему) обезжиренное молоко в PBS-T ) в течение 2 часов при 37°C. Планшеты снова промывали и инкубировали с очищенными антителами против PD-1 из Примера 1 в концентрации 100 мкл/лунка и ниволумабом (0,004-66,7 нМ, 5-кратные серийные разведения в 2,5%-ом обезжиренном молоке в PBS-T) в течение 40 минут при 37°C и затем снова промывали 4 раза. Планшеты, содержащие захваченные антитела против PD-1, инкубировали с меченным биотином белком PD-1-Fc человека (SEQ ID NO: 100, 60 нМ в 2,5%-ом обезжиренном молоке в PBS-T, 100 мкл/лунка) в течение 40 минут при 37°C, промывали 4 раза и инкубировали с конъюгированной со стрептавидином пероксидазой хреннна (HRP, 1:10000 разведение в PBS-T, Jackson Immuno Research, #016-030-084, 100 мкл/лунка) в течение 40 минут при 37°C. После конечной промывки планшеты инкубировали в присутствии ™B-субстрата для ИФА (100 мкл/лунка, Innoreagents). Реакцию останавливали через 15 минут при 25°C с помощью 1М H2S04 в концентрации 50 мкл/лунка, и абсорбцию считывали при 450 нм. Данные анализировали с использованием программы Graphpad Prism и регситировали значения EC50.
[00197] Результаты суммированы в Таблице 3, ниже.
Таблица 3. Активность связывания антител против PD-1 с PD-1 человека
Клон | ИФА с захватом (EC50, нМ) |
D1F2 | 0,19 |
C1F5 | 0,16 |
C1E1 | 0,16 |
D1A1 | 0,2 |
D1F1 | 0,24 |
C1E2 | 0,2 |
C1A1 | 0,18 |
C1F4 | 0,25 |
D2C2 | 0,2 |
2G2 | 0,18 |
C1C5 | 0,16 |
OPDIVO® | 0,21 |
[00198] Результат показал, что антитела согласно настоящему изобретению специфично связывались с PD-1 человека, при этом несколько клонов имели более низкие значения EC50 по сравнению с ниволумабом.
[00199] Пример 4. Функциональные анализы блокирования с использованием ИФА и репортерных анализов
[00200] 4,1 ИФА-анализ блокирования лиганда
[00201] Способность антитела против PD-1 согласно настоящему изобретению блокировать взаимодействие PD-1-PD-L1 измеряли с использованием конкурентного ИФА-анализа. Вкратце, PD-L1-Fc белки человека (SEQ ID NO:101) наносили на 96-луночные микропланшеты в концентрации 2 мкг/мл PBS и инкубировали в течение ночи при 4°C. На следующий день планшеты промывали промывочным буфером (PBS+0,05% Tween-20, PBS-T) и блокировали 5% обезжиренным молоком в PBS-T в течение 2 часов при 37°C. Планшеты затем снова промывали с использованием промывочного буфера.
[00202] Готовили разведения антител против PD-1 согласно настоящему изобретению или ниволумаба (начиная с концентрации 100 нМ с 4-кратными серийными разведениями) в растворе меченного биотином PD1-Fc человека (SEQ ID NO: 100, 10 нМ в 2,5% обезжиренном молоке в PBS-T) и инкубировали при комнатной температуре в течение 40 минут, затем смеси антитела/PD-1-Fc-биотин (100 мкл/лунка) добавляли в покрытые PD-L1 планшеты. После инкубирования при 37°C в течение 40 минут планшеты промывали 4 раза с использованием промывочного буфера. Затем добавляли конъюгированную со стрептавидином HRP в концентрации 100 мкл/лунка и инкубировали в течение 40 минут при 37°C для выявления меченного биотином PD-1 человека, связанного с PD-L1. Планшеты снова промывали с использованием промывочного буфера. Наконец, добавляли ™B-субстрат и реакцию останавливали с использованием 1М H2SO4 и абсорбцию считывали при 450 нм. Данные анализировали с использованием программы Graphpad Prisme и регистрировали значения IC50.
[00203] 4,2 ИФА-анализ блокирования стандартного образца
[00204] Способность антител против PD-1 согласно настоящему изобретению блокировать стандартный образец измеряли связывание ниволумаб-PD-1 человека с использованием конкурентного ИФА-анализа. Вкратце, ниволумаб наносили на 96-луночные микропланшеты в концентрации 2 мкг/мл в PBS и инкубировали в течение ночи при температуре 4°C. На следующий день планшеты промывали промывочным буфером и блокировали 5%-ым обезжиренным молоком в PBS-T в течение 2 часов при 37°C. Во время блокирования меченный биотином PD-1-Fc человека (SEQ ID NO:100, 10 нМ в 2,5%-ом обезжиренном молоке в PBS-T) смешивали с каждым из тестируемых антител (137 пкМ-100 нМ, 3-кратные серийные разведения) и инкубировали в течение 40 минут при 25°C. После промывки смеси PD-1/антитело (100 мкл /лунка) добавляли в планшеты, покрытые ниволумабом, и инкубировали в течение 40 минут при 37°C. Планшеты снова промывали промывочным буфером и затем добавляли стрептавидин (SA)-HRP в концентрации 100 мкл/лунка и инкубировали в течение 40 минут при 37°C для выявления меченного биотином PD-1 человека, связанного с Opdivo®. Планшеты в конечном итоге промывали с использованием промывочного буфера. Добавляли ™B-субстрат и реакцию останавливали с использованием 1М H2SO4 и абсорбцию считывали при 450 нм. Данные анализировали с использованием программы Graphpad Prism и регистрировали значения IC50.
[00205] 4,3 Клеточные функциональные анализы
[00206] Активность блокирования антителами взаимодействия PD-1/PD-L1 на клеточной мембране оценивали с использованием клеточного репортерного анализа. Указанный анализ включал две генноинженерные клеточных линии - PD-1-эффекторную клеточную линию (Genscript, GS-J2/PD-1), стабильно экспрессирующую PD-1 человека и репортерный ген люциферазы, запускаемый репортерным элементом NFAT (NFAT-RE), и PD-L1-клеточную линию (Genscript, GS-C2/PD-L1, клетки APC), стабильно экспрессирующую человеческий PD-L1 и сконструированный белок клеточной поверхности-антигенный пептид/главный комплекс гистосовместимости (major histocompatibility complex, MHC). Когда указанные две клеточные линии сокультивировали, происходиол ингибирование опосредованной T-клеточным рецептором (T-cell receptor, TCR) экспрессии люциферазы в PD-1-эффекторных клетках (через путь NFAT) в результате взаимодействия PD-1/PD-L1.
[00207] Клеточный функциональный анализ проводили, как следует далее. Вкратце, клетки PD-L1 в фазе логарифмического роста высевали в 384-луночные планшеты для клеточных культур в плотности 5*105/мл. На следующий день готовили разведение антител против PD-1 согласно настоящему изобретению или ниволумаба (начиная с 333,3 нМ, 5-кратные серийные разведения) в аналитическом буфере (RPMI 1640+1%ЭБС). Тем временем среду от PD-L1-клеток в 384-луночных планшетах сливали и затем в 384-луночные планшеты для клеточных культур добавляли антитела против PD-1 в разведениях (20 мкл/лунка) и PD-1-эффекторные клетки (в плотности 6,25*105/мл, 20 мкл/лунка). После сокультивирования при 37°C в течение шести часов планшеты доставали из инкубатора и люминесценцию для каждой лунки считывали в соответствии с инструкциями производителя с использованием системы люциферазного анализа One-Glo (Promega, #E6120). Кривые зависимости эффекта от дозы анализировали с использованием программы Graphpad Prism и регистрировали значения EC50.
[00208] Результаты трех анализов суммированы в Таблице 4, ниже.
Таблица 4. Способность антител против PD-1 блокировать взаимодействие PD-1/PD-L1
Функциональные анализы блокирования | |||
Конкурентный ИФА (IC50, нМ) | Активация репортерного гена (EC50, нМ) | ||
Клон | PD-1 человека/ PD-L1 человека | Opdivo®/PD-1 человека | PD-1-клетки человека (NFAT-luc)/PD-L1 клетки человека |
D1F2 | 0,21 | 1,4 | 7,349 |
C1F5 | 0,21 | 0,87 | 7,579 |
C1E1 | 0,26 | 1,1 | 9,114 |
D1A1 | 0,22 | 1,28 | 9,128 |
D1F1 | 0,2 | 2,13 | 10,84 |
C1E2 | 0,25 | 1,49 | 11,13 |
C1A1 | 0,27 | 1,4 | 12,14 |
C1F4 | 0,43 | 2,26 | 13,24 |
D2C2 | 0,21 | 1,89 | 14,67 |
2G2 | 0,32 | 14,45 | 17,86 |
C1C5 | 0,23 | 1,34 | 23,36 |
OPDIVO® | 0,12 | 3,79 | 13,62 |
[00209] Можно видеть, что антитела согласно настоящему изобретению были способны блокировать взаимодействие PD-1 человека/PD-L1 человека, при этом несколько клонов имело более низкие значения EC50 или IC50 по сравнению с ниволумабом.
[00210] Данные также показали, что антитела согласно настоящему изобретению были способны блокировать взаимодействие PD-1 человека/ниволумаб, где антитела из клона 2G2 обеспечивали частичное блокирование, указывая на то, что они связывались с тем же или сходным эпитопом, что и ниволумаб.
[00211] Пример 5. Создание и характеристика гибридных антител
[00212] Вариабельные домены тяжелой и легкой цепи мышиного mAb против PD1 C1E1 клонировали в рамке считывания с константными участками тяжелой цепи IgGl человека и легкой каппа-цепи человека соответственно. Вариабельный участок тяжелой цепи и вариабельный участок легкой цепи имели аминокислотные последовательности, указанные в SEQ ID NO: 67 и 80 соответственно, тогда как аминокислотные последовательности константных участков тяжелой цепи IgGl человека и легкой каппа-цепи человека представлены в SEQ ID NO: 97 и 98 соответственно. Активность полученных гибридных антител подтверждали с помощью ИФА-анализа связывания с захватом, конкурентного ИФА и клеточного функционального репортерного анализа в соответствии с протоколами, описанными в предшествующих примерах. Данные показали, что гибридное антитело C1E1 обладало активностями, сравнимыми с активностями стандартного образца (OPDIVO®), как показано в Таблице 5, ниже.
Таблица 5. Связывание и функциональная активность гибридных антител
ID клона | ИФА связывания с захватом (EC50, нМ) | ИФА блокирования лиганда, PD1/PDL1 (IC50, нМ) | ИФА блокирования стандартного образца (IC50, нМ) | Клеточный функциональный репортерный анализ (IC50, нМ) |
Гибридное C1E1 | 0,23 | 0,53 | 0,20 | 8,53 |
OPDIVO® | 0,37 | 0,41 | 0,38 | 10,32 |
[00213] Пример 6. Гуманизирование мышиного моноклонального антитела против PD-1 C1E1
[00214] Мышиное антитело против PD1 C1E1 выбирали для гуманизирования и дополнительных исследований. Гуманизирование мышиного антитела проводили с использованием хорошо установленного метода прививки CDR, как описано подробно ниже.
[00215] Для выбора акцепторных каркасов для гуманизирования мышиного антитела C1E1 проводили исследование последовательности вариабельного участка легкой и тяжелой цепи мышиного C1E1 с помощью BLAST против базы данных генов человеческих иммуноглобулинов. Человеческие зародышевые линии IGVH и IGVK с максимальной гомологией к мышиному C1E1 были выбраны в качестве акцепторных каркасов для гуманизирования. CDR-участки вариабельного участка тяжелой/легкой цепи мышиного антитела встраивали в выбранные каркасы и остаток (остатки) в указанных каркасах дополнительно подвергали мутированию для получения большего количества вариабельных участков тяжелой цепи/легкой цепи, являющихся кандидатами.
[00216] Векторы, содержащие нуклеотидные последовательности, кодирующие вариабельные участки тяжелой цепи/легкой цепи гуманизированного C1E1 и константные участки тяжелой цепи IgGl человека и легкой каппа-цепи человека временно трансфицировали в 50 мл суспензионной клеточной культуры 293F с отношением конструктов, содержащих легкую цепь, к конструктам, содержащим тяжелую цепь, составляющим 60%:40%, в присутствии 1,2 мг/мл PEI. Клеточные супернатанты собирали через шесть дней во встряхиваемые колбы, откручивали для осаждения клеток и фильтровали через фильтр с размером пор 0,22 мкм до отделения IgG. Антитела очищали с помощью аффинной хроматографии на основе белка А. Вкратце, колонку, заполненную белок А-сефарозой (от компании Bestchrom (Shanghai) Biosciences, Cat#AA0273) промывали с использованием буфера PBS в 5-10 колоночных объемах. Клеточные супернатанты пропускали через колонки и затем колонки промывали с использованием буфера PBS до тех пор, пока абсорбция белка не достигала базового уровня. Элюирование колонок проводили с помощью элюирующего буфера (0,1 М глицин-HCl, pH 2,7), который сразу собирали в пробирки на 1,5 мл, содержавшие нейтрализующий буфер (1 M Трис-HCl, pH 9,0). Фракции, содержавшие IgG, объединяли и диализовали в PBS в течение ночи при 4°C.
[00217] В целом были получены 10 гуманизированных антител, 8 из которых были дополнительно охарактеризованы, а именно huC1E1-V1 - huC1E1-V7 и huC1E1-V10. Аминокислотные последовательности вариабельных участков тяжелой цепи/легкой цепи 8 указанных антител суммированы в Таблице 1, выше, и последовательности константных участков тяжелой цепи IgGl человека и легкой каппа-цепи человека указаны в SEQ ID NO: 97 и 98 соответственно.
[00218] Аффинность связывания huC1E1-V1 - huC1E1-V7 с PD1 человека оценивали с помощью метода BIACORE, как описано в Примере 2, и значения KD анализа аффинности суммированы в Таблице 6, ниже. Активность связывания антитела huC1E1-V10 с PD1 человека оценивали с помощью ИФА-анализа связывания с захватом, как описано в Примере 3, в котором для захвата IgG использовали козье захватывающие антитело против IgG-Fab человека (Jackson ImmunoResearch, Cat#109-005-097), и значения EC50 анализа связывания суммированы в Таблице 7. Все 8 гуманизированных антител обладали аффинностью, сравнимой с гибридным антителом C1E1.
Таблица 6. Аффинность гуманизированных mAb C1E1
mAb | PD1 человека |
Biacore (KD, M) | |
huC1E1-V1 | 3,88E-09 |
huC1E1-V2 | 2,49E-09 |
huC1E1-V3 | 4,52E-09 |
huC1E1-V4 | 2,95E-09 |
huC1E1-V5 | 3,37E-09 |
huC1E1-V6 | 3,05E-09 |
huC1E1-V7 | 6,36E-09 |
huC1E1-V10 | 9,68E-10 |
Гибридное C1E1 | 1,83E-09 |
OPDIVO® | 1,49E-08 |
Таблица 7. Активность связывания гуманизированного mAb C1E1
mAb | PD1 человека |
ИФА связывания с захватом (EC50, нМ) |
|
huC1E1-V10 | 0,44 |
Гибридное C1E1 | 0,16 |
OPDIVO® | 1,19 |
[00219] Гуманизированное антитело huC1E1-V10 затем исследовали на предмет аффинности в отношении PD1 человека и макака-крабоеда с помощью анализа Biacore и с помощью ИФА-анализа связывания с захватом, а также исследовали на предмет функциональной активности с помощью конкурентного ИФА и клеточного репортерного анализа в соответствии с протоколами, описанными в Примерах 2-4. Как показано в Таблице 8, huC1E1-V10 показал сравнимые с гибридным антителом C1E1 значения in vitro активности.
Таблица 8. Связывание и функциональная активность гуманизированного mAb C1E1
Краткое описание | ||||||
mAb | анализа связывания | функционального анализа | ||||
PD1 Человека | PD1 макака-крабоеда | Конкурентный ИФА (IC50, нМ) | Клеточный репортерный анализ (EC50, нМ) | |||
ИФА связывания (EC50, нМ) | Biacore (KD, M) | Biacore (KD, M) | Блокирование лиганда PD1/PDL1, ИФА | Стандартное блокированеи, ИФА | ||
huC1E1-V10 | 0,34 | 9,68E-10 | 8,92E-10 | 0,88 | 0,35 | 11,26 |
chC1E1 | 0,23 | 8,81E-10 | 8,45E-10 | 0,53 | 0,20 | 8,53 |
OPDIVO® | 0,37 | 8,17-09 | 1,40E-08 | 0,41 | 0,38 | 10,32 |
[00220] Пример 7. Физико-химические свойства гуманизированного антитела C1E1
[00221] Физико-химические свойства гуманизированного антитело против PD1 huC1E1-V10 проверяли с использованием белкового анализа теплового сдвига, метода cIEF, метода SEC и метода замораживания-оттаивания, как описано ниже.
[00222] Белковый анализ теплового сдвига для определения Tm
[00223] Термостабильность гуманизированного антитела против PD1 huC1E1-V10 измеряли с использованием набора для анализа белковой стабильности на основе теплового сдвига GloMelt™ (Biotium, Cat#33022-T, lot#: 181214). Вкратце, красителю GloMelt™ позволяли оттаивать и достигать комнатной температуры. Ампулу, содержащую краситель, вортексировали и центрифугировали. 10-кратный раствор красителя готовили путем добавления 5 мкл 200-кратного раствора красителя к 95 мкл PBS. 2 мкл 10-кратного раствора красителя и 10 мкг антитела добавляли в общей реакционный объем 20 мкл. Устанавливали параметры для запуска программы анализа кривой плавления, подробно описанные в Таблице 9. Пробирки быстро центрифугировали и помещали в амплификатор для ПЦР в реальном времени (Roche, LightCycler 480 II). Результаты анализировали с использованием программы Microsoft Excel 2010.
Таблица 9. Параметры для программы анализа кривой плавления
Этап программы | Температура | Скорость линейного измерения | Время удерживания |
Первоначальное удерживание | 25°C | NA | 30 с |
Кривая плавления | 25-99°C | 0,1°C/с | NA |
[00224] Метод cIEF для определения pI
[00225] Капиллярное изоэлектрическое фокусирование (cIEF) использовали для определения pI и гетерогенности заряда гуманизированного антитела против PD1 huC1E1-V10. Вкратце, 35 мкл 0,1% MC, 4 мкл pH3-10 Pharmlyte, 2 мкл Arg в концентрации 0,5 моль/л, 1 мкл Mark-7,05 и 1 мкл Mark-9,99 добавляли в пробирку, содержащую 20 мкг антитела в PBS, затем добавляли ddH2O до 100 мкл. Программа электрофореза состояла из двух фаз: изначальное разделение в течение 1 минуты при 1500 В с последующими разделением в течение 6 минут при 3000 В. Через 5 мин экспозиции для выявления данные анализировали с использованием программы Maurice™Compass™ (Proteinsimple Inc., США).
[00226] Метод SEC для определения агрегирования
[00227] Процент мономеров оценивали с помощью эксклюзионной по размеру хроматографии (size exclusion chromatography, SEC) (Agilent Technologies, 1260 Infinity II). Антитела, которые содержались в водной подвижной фазе, пропускали через пористую смолу, представляющую собой неподвижную фазу, упакованную в колонку. Время удерживания в колонке представляло собой функцию гидродинамического размера белка и размера пор в упакованном слое смолы. Меньшие по размеру молекулы могут проникать в более маленькие поры в смоле и удерживаются дольше по сравнению с молекулами большего размера. При элюировании из колонки белки выявляли с помощью УФ-абсорбции. Подвижная фаза представляла собой фосфатно-солевой буферный раствор. За абсорбцией наблюдали при 280 нм. Скорость потока составляла 0,8 мл/мин. Вводимый объем составлял 40 мкл образца в концентрации 1 мг/мл. Температура колонки представляла собой комнатную температуру. Температура автодозатора составляла 2-8°C. Общее время прогона составляло 25 минут.
[00228] Метод замораживания-оттаивания для определения стабильности
[00229] Растворы антитела в концентрации 1 мг/мл в лекарственной форме (формах), представляющей собой 1xPBS (содержащий 137 ммоль/л NaCl, 2,7 ммоль/л KCl, 10 ммоль/л Na2HPO4,12H2O, 2 ммоль/L KH2PO4), замораживали при -80°C по меньшей мере на 24 часа и затем оттаивали при комнатной температуре в течение 30-60 минут. Цикл замораживания и оттаивания повторяли 5 раз для каждого образца. После конкретных циклов замораживания-оттаивания, например, второго, третьего и четвертого, часть раствора отбирали для анализа с помощью SEC до повторного замораживания.
[00230] Нестабильность, приводящую к денатурации, оценивали с помощью набора для измерения белковой стабильности на основе теплового сдвига GloMelt™. Как показано на Фигуре 1, для гуманизированного антитела против PD1 huC1E1-V10 наблюдалась высокая температура плавления (Tm), как правило, 78°C, также наблюдался минорный пик при 69,5°C. Анализ huC1E1-V10 с помощью cIEF показал, что % содержание главной изоформы составляло примерно 81,5%, % содержание кислотных видов составляло примерно 11,0%, и % содержание основных видов составляло примерно 7,5%. Значения pI рассчитывали с использованием программы Maurice™Compass™. Значение pI для антитела huC1E1-V10 составляло 8,36. Значение pI гуманизированного антитела huC1E1-V10 значительно превышало 7, предполагая, таким образом, что указанное антитело, будет иметь значительный положительный заряд при нейтральном pH. SEC-анализ huC1E1-V10 показал, что % содержание мономеров составляло 100,0% (см. Фиг. 2). Устойчивость к замораживанию и оттаиванию оценивали с помощью эксклюзионной по размеру хроматографии (SEC). Для антитела huC1E1-V10 не было показано очевидного повышения уровня агрегирования с течением времени, также не наблюдалось осаждения или помутнения после 5 повторных замораживаний и оттаиваний.
[00231] Пример 8. In Vivo противоопухолевая эффективность мышиного антитела C1E1
[00232] In vivo противоопухолевую активность мышиного антитела C1E1 оценивали на мышах NCG. Вкратце, мышам NCG подкожно инъецировали 4x106 клеток меланомы человека A375, смешанных с 5x105 реактивированных опухолью мононуклеарных клеток периферической крови (МКПК) в правую подмышечную область на 1 день. Объем опухолей измеряли два раза в неделю в течение трех недель с использованием электронного штангенциркуля и рассчитывали как (длина × ширина2)/2. Двадцать четыре мыши, имеющие опухоли, выбирали и рандомизировали в четыре группы на 14 день. Животным вводили внутрибрюшинно наполнитель (5% раствор глюкозы), мышиное антитело C1E1, мышиное антитело C1E1-Fab и ниволумаб соответственно в дозе 3 мг/кг на 14, 21 и 28 день. Мышиное антитело C1E1 содержало мышиный вариабельный участок тяжелой цепи и человеческий константный участок IgG1, а также мышиный вариабельный участок легкой цепи и человеческий константный участок Ck, имеющие последовательности, представленные в SEQ ID NO: 67, 97, 80 и 98 соответственно, тогда как мышиный C1E1-Fab содержал мышиный вариабельный домен тяжелой цепь и человеческий константный домен CH1 IgG1, а также вариабельный домен легкой цепи и человеческий константный домен Ck1, имеющие последовательности, представленные в SEQ ID NO: 67, 99, 80 и 98 соответственно.
[00233] Мышей усыпляли на 35 день и опухоли собирали и взвешивали. Рассчитывали подавление опухолевого роста (%TGI = (1-средний объем опухоли в каждой лечебной группе/средний объем опухоли в контрольной группе) × 100%).
[00234] Все варианты лечения хорошо переносились содержащими опухоли животными. Как можно видеть из Таблицы 10, лечение мышиным C1E1 в концентрации 3 мг/кг и лечение мышиным C1E1-Fab в концентрации 3 мг/кг приводило к значительно лучшей эффективности по сравнению с ниволумабом в концентрации 3 мг/кг на модели ксенотрансплантата меланомы человека A375.
Таблица 10. Противоопухолевая эффективность мышиного антитела C1E1 на модели ксенотрансплантата клеток меланомы человека A375
№ группы | Лекарственное средство | Доза | Объем опухоли a (мм3) | %TGI | Масса опухоли (г) |
1 | Наполнитель | n/a | 509,22±132,69 | - | 0,61±0,20 |
2 | Мышиное C1E1 | 3 мг/кг | 116±40,33* | 77,22% | 0,13±0,06 |
3 | Мышиное C1E1-Fab | 3 мг/кг | 91,38±33,17* | 82,05% | 0,11±0,04 |
4 | OPDIVO® | 3 мг/кг | 276,47±124,61 | 45,71% | 0,28±0,12 |
a По сравнению с контрольной группой, получавшей наполнитель, по t-критерию Стьюдента,*P<0,05.
[00235] Пример 9. In Vivo противоопухолевая эффективность вируса герпеса T3011 со встроенными последовательностями, кодирующими мышиный C1E1
[00236] Противоопухолевая эффективность вируса герпеса T3011 со встроенными последовательностями, кодирующими мышиное антитело C1E1, оценивали на модели ксенотрансплантата меланомы B16F10-hPD-L1.
[00237] Вирус герпеса T3011 представляет собой генетически вирус простого герпеса 1 типа (HSV-1), модифицированный путем удаления области инвертированного повтора и замещения его на ген человеческого IL-12 (см., например, PCT/CN2016/080025) помимо инсерции последовательности Fab-фрагмента C1E1 в геномную область между UL3 и UL4. Последовательности Fab C1E1 содержат мышиный вариабельный домен тяжелой цепи и человеческий константный домен CH1 IgG1, а также мышиный вариабельный домен легкой цепи и человеческий константный домен Cкаппа1, имеющие последовательности, представленные в SEQ ID NO: 67, 99, 80 и 98 соответственно.
[00238] Вкратце, самкам гуманизированных мышей B-hPD-1 подкожно инъецировали в переднюю часть правого бока клетки меланомы B16F10-hPD-L1 в концентрации 1x105. Когда объем опухолей достигал примерно 90 мм3, мышей рандомизировали на пять групп, по 8 мышей в каждой группе. Указанным мышам вводили внутрь опухолей наполнитель (5% раствор глюкозы), T3011 (5×106 PFU/мышь), T3011 (1×107 PFU/мышь), T3011 (3×107 PFU/мышь) и NV1020 (3×107 PFU/мышь, рекомбинантный онколитический вирус на основе HSV, разработанный компанией MediGene (ранее NeuroVir) для потенциального лечения рака (см., например, Phase I/II study of oncolytic herpes simplex virus NV1020 in patients with extensively pretreated refractory colorectal cancer metastatic to the liver. Hum Gene Ther. 2010 Sep;21(9):1119-28) соответственно. Объем опухолей измеряли два раза в неделю.
[00239] Через двенадцать дней после введения лекарственного средства мышей усыпляли и опухоли собирали, взвешивали и фотографировали. Рассчитывали относительный объем опухоли (RTV = TVn/TV0, где TVn представляет собой объем опухоли на день n и TV0 представляет собой объем опухоли на день 0), коэффициент подавления опухолевого роста (TGI% = 1-средний объем опухоли в каждой лечебной группе/средний объем опухоли в контрольной группе) × 100%) и коэффициент снижения массы опухоли (IRTW = (1-средняя масса опухоли в каждой лечебной группе/средняя масса опухоли в контрольной группе) × 100%).
[00240] Как показано в Таблице 11, ниже, T3011 со встроенными последовательностями, кодирующими мышиное антитело C1E1, обеспечивал очевидную противоопухолевую дозозависимую активность. Введение T3011 показало лучшую противоопухолевую эффективность по сравнению с введением NV1020 в дозе 3×107 PFU/мышь.
Таблица 11. Противоопухолевая эффективность вируса герпеса T3011 со встроенными последовательностями, кодирующими мышиный C1E1, на модели ксенотрансплантата меланомы B16F10-hPD-L1
№ группы | Лекарственное средство | Доза | Объем опухолиa (мм3) | TGI (%) | IRTW |
1 | Наполнитель | n/a | 3396±836 | - | - |
2 | T3011 | 5×106 PFU/мышь | 1724±471* | 50,6% | 18,9% |
3 | T3011 | 1×107 PFU/мышь | 1365±361* | 61,4% | 28,4% |
4 | T3011 | 3×107 PFU/мышь | 458±128** | 88,9% | 73,6% |
5 | NV1020 | 3×107 PFU/мышь | 1277±423* | 64,1% | 41,2% |
a По сравнению с контрольной группой, получавшей наполнитель, по t-критерию Стьюдента, *P<0,05 и **P<0,01.
[00241] Пример 10. In Vivo Противоопухолевая эффективность гуманизированного антитела C1E1
[00242] Эффект гуманизированного антитела C1E1 на опухолевый рост оценивали на модели ксенотрансплантата MC38. Вкратце, самкам мышей B-hPD-1 подкожно инъецировали в заднюю часть правого бока 5×105 клеток. Когда объемы опухолей достигали примерно 100-150 мм3, мышей рандомизировали на 7 групп, по 8 мышей на группу. Животным внутрибрюшинно вводили наполнитель (PBS), huC1E1-V10 и OPDIVO® соответственно в дозе 1 мг/кг, 3 мг/кг или 10 мг/кг два раза в неделю в течение трех недель. Гуманизированное антитело huC1E1-V10 содержало вариабельный участок и константный участок тяжелой цепи, а также вариабельный участок и константный участок легкой цепи, имеющие последовательности, представленные в SEQ ID NO: 69, 97, 86 и 98 соответственно. Объем опухолей измеряли во время исследования.
[00243] Через двадцать три дня после начала лечения мышей усыпляли и опухоли собирали, взвешивали и фотографировали. Рассчитывали коэффициент подавления роста объема опухоли (TGITV), данные показаны в Таблице 12.
[00244] Как показано в Таблице 12, ниже, все варианты лечения хорошо переносились содержащими опухоли животными. Лечение HuC1E1-V10 приводило к дозозависимой противоопухолевой активности на модели ксенотрансплантата MC38, что было сравнимо с OPDIVO®.
Таблица 12. Противоопухолевая эффективность huC1E1-V10 на модели ксенотрансплантата MC38
№ группы | Лекарственное средство | Лечебная группа | Объем опухоли a (мм3) |
TGITV (%) |
1 | Наполнитель | n/a | 3438±571 | - |
2 | huC1E1-V10 | 1 мг/кг | 2357±410 | 32,6 |
3 | huC1E1-V10 | 3 мг/кг | 1335±241** | 63,4 |
4 | huC1E1-V10 | 10 мг/кг | 1189±250** | 67,8 |
5 | OPDIVO® | 1 мг/кг | 1255±139** | 65,9 |
6 | OPDIVO® | 3 мг/кг | 1444±190** | 60,2 |
7 | OPDIVO® | 10 мг/кг | 703±151** | 82,5 |
a По сравнению с контрольной группой, получавшей наполнитель, по t-критерию Стьюдента, *P<0,05 и **P<0,01.
[00245] Следует понимать, что несмотря на то, что изобретение было описано выше в связи с одним или более вариантами реализации, предполагается, что настоящее изобретение не ограничивается указанными вариантами реализации и что описание включает все альтернативы, модификации и эквиваленты, которые могут быть включены в объем и сущность прилагаемой формулы изобретения. Все ссылки, цитированные в настоящей заявке, также полностью включены посредством ссылки.
[00246] Последовательности, описанные в настоящей заявке, суммированы ниже.
Описание/ последовательность/SEQ ID NO |
VH-CDR1 для C1E1, huC1E1-V1 - huC1E1-V7 и huC1E1-V10 GFTFSSYL (SEQ ID NO: 1) |
VH-CDR2 для C1E1, huC1E1-V1 - huC1E1-V7 и huC1E1-V10 ISGGGGDT (SEQ ID NO: 2) |
VH-CDR3 для C1E1, huC1E1-V1 - huC1E1-V7 и huC1E1-V10 VRFGGAGYYWYFD (SEQ ID NO: 3) |
VH-CDR1 для D1F2 GFTFSSYT (SEQ ID NO: 4) |
VH-CDR2 для D1F2 ISGGGSNI (SEQ ID NO: 5) |
VH-CDR3 для D1F2 VLNYAYAMDYWGQ (SEQ ID NO: 6) |
VH-CDR1 для C1F5 GFAFSSYD (SEQ ID NO: 7) |
VH-CDR2 для C1F5 ITGGGSSS (SEQ ID NO: 8) |
VH-CDR3 для C1F5 ASPYLSYFDYWGQ (SEQ ID NO: 9) |
VH-CDR1 для D1A1 GFTFSNYA (SEQ ID NO: 10) |
VH-CDR2 для D1A1 ISGGGGNI (SEQ ID NO: 11) |
VH-CDR3 для D1A1 ASPYANYVWYLDV (SEQ ID NO: 12) |
VH-CDR1 для D1F1 GFTFSSNT (SEQ ID NO: 13) |
VH-CDR2 для D1F1 ISGGGVNT (SEQ ID NO: 14) |
VH-CDR3 для D1F1 ARHGNYNYYGMDY (SEQ ID NO: 15) |
VH-CDR1 для C1E2 GYTFTNYW (SEQ ID NO: 16) |
VH-CDR2 для C1E2 IYPGGGYT (SEQ ID NO: 17) |
VH-CDR3 для C1E2 ARGYGTNYWYFDV (SEQ ID NO: 18) |
VH-CDR1 для C1A1 GFSLSTSGMG (SEQ ID NO: 19) |
VH-CDR2 для C1A1 IWWDDDK (SEQ ID NO: 20) |
VH-CDR3 для C1A1 ARTGGFITTGYWY (SEQ ID NO: 21) |
VH-CDR1 для C1F4 GYKFTDYA (SEQ ID NO: 22) |
VH-CDR2 для C1F4 ISTYSGDV (SEQ ID NO: 23) |
VH-CDR3 для C1F4 SRLGITAGFAYWG (SEQ ID NO: 24) |
VH-CDR1 для D2C2 GFTFSSNT (SEQ ID NO: 25) |
VH-CDR2 для D2C2 ISGGGVDT (SEQ ID NO: 26) |
VH-CDR3 для D2C2 ARHGNYNYYGMDY (SEQ ID NO: 27) |
VH-CDR1 для 2G2 GFTFSYYG (SEQ ID NO: 28) |
VH-CDR2 для 2G2 ISSGSSFT (SEQ ID NO: 29) |
VH-CDR3 для 2G2 TRREGIYDASWDY (SEQ ID NO: 30) |
VH-CDR1 для C1C5 GYTFTNYG (SEQ ID NO: 31) |
VH-CDR2 для C1C5 INTYSGEP (SEQ ID NO: 32) |
VH-CDR3 для C1C5 VRQGDFDYEDAMD (SEQ ID NO: 33) |
VL-CDR1 для C1E1, huC1E1-V1 - huC1E1-V7 и huC1E1-V10 RASKSVDDSGISFMH (SEQ ID NO: 34) |
VL-CDR2 для C1E1, huC1E1-V1 - huC1E1-V7 и huC1E1-V10 AASNQGS (SEQ ID NO: 35) |
VL-CDR3 для C1E1, huC1E1-V1 - huC1E1-V7 и huC1E1-V10 HQTKEVPWT (SEQ ID NO: 36) |
VL-CDR1 для D1F2 RASQDISNFLN (SEQ ID NO: 37) |
VL-CDR2 для D1F2 YTSRLQS (SEQ ID NO: 38) |
VL-CDR3 для D1F2 QQGSSLPWT (SEQ ID NO: 39) |
VL-CDR1 для C1F5 RASQSISNNLH (SEQ ID NO: 40) |
VL-CDR2 для C1F5 GSQSMS (SEQ ID NO: 41) |
VL-CDR3 для C1F5 QQSNSWPLT (SEQ ID NO: 42) |
VL-CDR1 для D1A1 RASQDISNYLN (SEQ ID NO: 43) |
VL-CDR2 для D1A1 YTSRLHS (SEQ ID NO: 44) |
VL-CDR3 для D1A1 QQSNALPWT (SEQ ID NO: 45) |
VL-CDR1 для D1F1 RASESVDNSGISFMN (SEQ ID NO: 46) |
VL-CDR2 для D1F1 TASNQGS (SEQ ID NO: 47) |
VL-CDR3 для D1F1 QQSYEVPWT (SEQ ID NO: 48) |
VL-CDR1 для C1E2 KASQSVSNDVA (SEQ ID NO: 49) |
VL-CDR2 для C1E2 YAFHRYT (SEQ ID NO: 50) |
VL-CDR3 для C1E2 QQDYSSPYT(SEQ ID NO: 51) |
VL-CDR1 для C1A1 RASQDISNYLI (SEQ ID NO: 52) |
VL-CDR2 для C1A1 YTSRLHS (SEQ ID NO: 53) |
VL-CDR3 для C1A1 QQHKTLPWT (SEQ ID NO: 54) |
VL-CDR1 для C1F4 KASQNVRTAVA (SEQ ID NO: 55) |
VL-CDR2 для C1F4 LASNRHT (SEQ ID NO: 56) |
VL-CDR3 для C1F4 LQHWNYPYT (SEQ ID NO: 57) |
VL-CDR1 для D2C2 RASESVDNSGISFMN (SEQ ID NO: 58) |
VL-CDR2 для D2C2 IASNHGS (SEQ ID NO: 59) |
VL-CDR3 для D2C2 QQSYEVPWT (SEQ ID NO: 60) |
VL-CDR1 для 2G2 RSSQSIIRSNGNTYLE (SEQ ID NO: 61) |
VL-CDR2 для 2G2 KVSNRFS (SEQ ID NO: 62) |
VL-CDR3 для 2G2 FQGSHVPWT (SEQ ID NO: 63) |
VL-CDR1 для C1C5 RSSQSIVHSNGHIYLE (SEQ ID NO: 64) |
VL-CDR2 для C1C5 KVSKRFS (SEQ ID NO: 65) |
VL-CDR3 для C1C5 FQGSHGT (SEQ ID NO: 66) |
VH для C1E1 EVMLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFSSYLMSWVRQTPEKRLEWVATISGGGGDTYFPDSVKGRFTISRDNVKNNLYLQMSSLRSEDTALYYCVRFGGAGYYWYFDVWGAGTTVTVSS (SEQ ID NO: 67) GAAGTGATGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGGTTAGTGAAGCCTGGAGGGTCCCTGAAACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACGTTCAGTAGTTATCTTATGTCTTGGGTTCGCCAGACTCCGGAGAAGAGGCTGGAGTGGGTCGCAACCATTAGTGGTGGTGGTGGTGACACCTACTTTCCAGACAGTGTGAAGGGTCGATTCACCATCTCCAGAGACAATGTCAAGAACAACCTGTACCTGCAAATGAGCAGTCTTAGGTCTGAGGACACGGCCTTGTATTACTGTGTAAGATTTGGGGGCGCTGGTTACTACTGGTATTTCGATGTCTGGGGCGCAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA (SEQ ID NO: 102) |
VH для huC1E1-V1, huC1E1-V3 - huC1E1-V7 EVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYLMSWVRQAPGKGLEWVATISGGGGDTYFPDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVRFGGAGYYWYFDVWGAGTLVTVSS (SEQ ID NO: 68) |
VH для huC1E1-V2 и huC1E1-V10 EVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYLMSWVRQAPGKGLEWVATISGGGGDTYFPDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVRFGGAGYYWYFDVWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 69) GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGCTATCTTATGTCCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTAGAGTGGGTGGCAACTATATCAGGTGGTGGAGGTGACACATACTTCCCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCTGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGTGAGATTCGGTGGTGCTGGTTACTACTGGTACTTTGACGTCTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 103) |
VH для D1F2 EVMLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFSSY™SWVRQTPEKRLEWVATISGGGSNIYYPDSVEGRFTVSRDNARNTLYLHMSSLRSEDTALYYCVLNYAYAMDYWGQGTSVTVSS (SEQ ID NO: 70) GAAGTGATGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTAGTGAAGCCTGGAGGGTCCCTGAAACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAGCTATACCATGTCTTGGGTTCGCCAGACTCCGGAGAAGAGGCTGGAGTGGGTCGCAACCATTAGTGGTGGTGGTAGTAACATCTACTATCCAGACAGTGTGGAGGGTCGATTCACCGTCTCCAGAGACAATGCCAGGAACACCCTGTACCTGCATATGAGCAGTCTGAGGTCTGAGGACACGGCCTTATATTACTGTGTCCTTAACTACGCCTATGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGAACCTCAGTCACCGTCTCCTCA (SEQ ID NO: 104) |
VH для C1F5 EVQLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFAFSSYDMSWVRQTPEKRLEWVAYITGGGSSSFYPDTVKGRFTISRDNSKNTLYLQMTSLRSEDTAMYYCASPYLSYFDYWGQGTTLTVSS (SEQ ID NO: 71) GAAGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTAGTGAAGCCTGGAGGGTCCCTGAAACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCGCTTTCAGTAGCTATGACATGTCTTGGGTTCGCCAGACTCCGGAGAAGAGGCTGGAGTGGGTCGCATACATTACTGGTGGTGGTAGTAGTTCCTTCTATCCAGACACTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACCCTGTATTTGCAAATGACCAGTCTGAGGTCTGAGGACACAGCCATGTATTACTGTGCAAGCCCCTACTTATCCTACTTTGACTACTGGGGCCAAGGCACCACTCTCACAGTCTCCTCA (SEQ ID NO: 105) |
VH для D1A1 EVMLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFSNYAMSWVRQTPEKRLEWVATISGGGGNIYYPDSVKGRFTISRDNARNTLYLQMSSLRSEDTALYYCASPYANYVWYLDVWGAGTTVTVSS (SEQ ID NO: 72) GAAGTGATGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTAGTGAAGCCTGGAGGGTCCCTGAAACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAACTATGCCATGTCTTGGGTTCGCCAGACTCCGGAGAAGAGGCTGGAGTGGGTCGCAACCATTAGTGGTGGTGGTGGTAACATCTACTATCCAGACAGTGTGAAGGGTCGATTCACCATCTCCAGAGACAATGCCAGGAACACCCTGTACCTGCAAATGAGCAGTCTGAGGTCTGAGGACACGGCCTTGTATTATTGTGCAAGCCCGTATGCTAACTACGTATGGTACCTCGATGTCTGGGGCGCAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA (SEQ ID NO: 106) |
VH для D1F1 EVMLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFSSN™SWVRQTPEKRLEWVAAISGGGVNTYYPDSVKGRFTISRDNARNTLYLQMSSLRSEDTALYYCARHGNYNYYGMDYWGQGTSVTVSS (SEQ ID NO: 73) GAAGTGATGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTAGTGAAGCCTGGAGGGTCCCTGAAACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAGCAATACCATGTCTTGGGTTCGCCAGACTCCGGAGAAGAGGCTGGAGTGGGTCGCAGCCATTAGTGGTGGTGGTGTTAACACCTACTATCCAGACAGTGTGAAGGGTCGATTCACCATCTCCAGAGACAATGCCAGGAACACCCTGTACCTGCAAATGAGCAGTCTGAGGTCTGAGGACACGGCCCTGTATTACTGTGCAAGACATGGTAACTACAATTACTATGGTATGGACTACTGGGGTCAAGGAACCTCAGTCACCGTCTCCTCA (SEQ ID NO: 107) |
VH для C1E2 QVQLQQSGAELVRPGTSVKISCKASGYTFTNYWLGWVKQRPGHGLEWIGDIYPGGGYTNYNENFKGKATLTADTSSSTAYMQLSSLTSEDSAVFFCARGYGTNYWYFDVWGAGTTVTVSS (SEQ ID NO: 74) CAGGTCCAGTTGCAGCAGTCTGGAGCTGAGCTGGTAAGGCCTGGGACTTCAGTGAAGATATCCTGCAAGGCTTCTGGCTACACCTTCACTAACTACTGGCTAGGTTGGGTAAAACAGAGGCCTGGACATGGACTTGAGTGGATTGGAGATATTTACCCTGGAGGTGGTTATACTAACTACAATGAGAACTTCAAGGGCAAGGCCACACTGACTGCAGACACATCCTCCAGCACTGCCTACATGCAGCTCAGTAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCTGTCTTTTTCTGTGCAAGAGGCTACGGTACTAATTACTGGTACTTCGATGTCTGGGGCGCAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA (SEQ ID NO: 108) |
VH для C1A1 QVTLKESGPGILKPSQTLSLTCSFSGFSLSTSGMGVGWIRQPSGKGLEWLAHIWWDDDKFYNPSLKSQLTISKDTSRNQVFLKITSVDTADTATYYCARTGGFITTGYWYFDVWGAGTTVTVSS (SEQ ID NO: 75) CAAGTTACTCTAAAAGAGTCTGGCCCTGGGATATTGAAGCCCTCACAGACCCTCAGTCTGACTTGTTCTTTCTCTGGGTTTTCACTGAGCACTTCTGGTATGGGTGTAGGCTGGATTCGTCAGCCTTCAGGGAAGGGTCTGGAGTGGCTGGCACACATTTGGTGGGATGATGATAAGTTCTATAACCCATCCCTGAAGAGCCAGCTCACAATCTCCAAGGATACCTCCAGAAACCAGGTTTTCCTCAAGATCACCAGTGTGGACACTGCAGATACTGCCACTTACTACTGTGCTCGAACCGGGGGGTTTATTACTACGGGCTACTGGTACTTCGATGTCTGGGGCGCAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA (SEQ ID NO: 109) |
VH для C1F4 QVQLQQSGAELVRPGVSVKISCKGSGYKFTDYAMHWVRQSHAKSLEWIGIISTYSGDVSFNQNFKGKA™TVDKSSSTAYMELARLTSEDSAIYYCSRLGITAGFAYWGQGTLVTVSA (SEQ ID NO: 76) CAGGTCCAGCTGCAACAGTCTGGGGCTGAGCTGGTGAGGCCTGGGGTCTCAGTGAAGATTTCCTGCAAGGGTTCTGGCTACAAATTCACTGATTATGCTATGCACTGGGTGAGGCAGAGTCATGCAAAGAGTCTAGAGTGGATTGGAATTATTAGTACTTACTCTGGTGACGTTAGTTTCAACCAGAACTTCAAGGGCAAGGCCACAATGACTGTAGACAAATCCTCCAGCACAGCCTATATGGAACTTGCCAGACTGACATCTGAGGATTCTGCCATCTATTACTGTTCAAGACTGGGGATTACGGCGGGGTTTGCTTACTGGGGCCAAGGGACTCTGGTCACTGTCTCTGCA (SEQ ID NO: 110) |
VH для D2C2 EVMLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFSSN™SWVRQTPEKRLEWVAAISGGGVDTYYPDSVKGRFTISRDNARNTLYLQMSSLRSEDTALYYCARHGNYNYYGMDYWGQGTSVTVSS (SEQ ID NO: 77) GAAGTGATGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTAGTGAAGCCTGGAGGGTCCCTGAAACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAGCAATACCATGTCTTGGGTTCGCCAGACTCCGGAGAAGAGGCTGGAGTGGGTCGCAGCCATTAGTGGTGGTGGTGTTGACACCTACTATCCAGACAGTGTGAAGGGTCGATTCACCATCTCCAGAGACAATGCCAGGAACACCCTGTACCTGCAAATGAGCAGTCTGAGGTCTGAGGACACGGCCCTGTATTACTGTGCAAGACATGGTAACTACAATTACTATGGTATGGACTACTGGGGTCAAGGAACCTCAGTCACCGTCTCCTCA (SEQ ID NO: 111) |
VH для 2G2 EVQLVESGGDLVKPGGSLKLSCTASGFTFSYYGMSWVRQTPDKRLEWVATISSGSSFTYSPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLKSEDTAIYYCTRREGIYDASWDYSMDYWGQGTSVTVSS (SEQ ID NO: 78) GAGGTGCAACTGGTGGAGTCTGGGGGAGACTTAGTGAAGCCTGGAGGGTCCCTGAAACTCTCCTGTACAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTTACTATGGCATGTCTTGGGTTCGCCAGACTCCAGACAAGAGGCTGGAATGGGTCGCAACCATTAGTAGTGGTAGTAGTTTCACCTACTCTCCAGACAGTGTGAAGGGGCGATTCACCATCTCCAGAGACAATGCCAAGAACACCCTGTACCTACAAATGAACAGTCTGAAGTCTGAGGACACAGCCATTTATTACTGTACAAGACGAGAGGGGATCTATGATGCTTCCTGGGATTATTCTATGGACTACTGGGGTCAAGGAACCTCAGTCACCGTCTCCTCA (SEQ ID NO: 112) |
VH для C1C5 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTNYGINWVKQAPGKGLKWMGWINTYSGEPTYSDDFKGRFAFSLETSASTAYLQINNLKNEDTSTYFCVRQGDFDYEDAMDYWGQGTSVTVSS (SEQ ID NO: 79) CAGATCCAGTTGGTGCAGTCAGGACCTGAGCTGAAGAAGCCTGGAGAGACAGTCAAGATCTCCTGCAAGGCTTCTGGGTATACCTTCACAAACTATGGAATAAACTGGGTGAAGCAGGCTCCAGGAAAGGGTTTAAAGTGGATGGGCTGGATAAACACCTATAGTGGAGAGCCAACATATTCTGATGACTTCAAGGGACGCTTTGCCTTCTCTTTGGAAACCTCTGCCAGCACTGCCTATTTGCAGATCAACAACCTCAAAAATGAGGACACGTCTACATATTTCTGTGTAAGACAGGGGGACTTTGATTACGAGGATGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGAACCTCAGTCACCGTCTCCTCA (SEQ ID NO: 113) |
VL для C1E1 DIVLTQSPASLAVSLGQRATISCRASKSVDDSGISFMHWFQQKPGQPPKLLIYAASNQGSGVPARFRGSGSGTDFSLNIHPMEEDDTAMYFCHQTKEVPWTFGGGTKLEIK (SEQ ID NO: 80) GACATTGTGCTGACCCAATCTCCAGCTTCTTTGGCTGTGTCTCTAGGGCAGAGGGCCACCATCTCCTGCAGAGCCAGCAAAAGTGTTGATGATTCTGGCATTAGTTTTATGCACTGGTTCCAACAGAAACCAGGACAGCCACCCAAACTCCTCATCTATGCTGCATCCAACCAAGGATCCGGGGTCCCTGCCAGGTTTCGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCAGCCTCAACATCCATCCTATGGAGGAGGATGATACTGCAATGTATTTCTGTCACCAAACTAAGGAGGTTCCGTGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAA (SEQ ID NO: 114) |
VL для huC1E1-V1 и huC1E1-V2 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASKSVDDSGISFMHWFQQKPGQPPRLLIYAASNQGSGVPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYFCHQTKEVPWTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 81) |
VL для huC1E1-V3 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASKSVDDSGISFMHWYQQKPGQPPRLLIYAASNQGSGVPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYFCHQTKEVPWTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 82) |
VL для huC1E1-V4 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASKSVDDSGISFMHWFQQKPGQAPRLLIYAASNQGSGVPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYFCHQTKEVPWTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 83) |
VL для huC1E1-V5 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASKSVDDSGISFMHWFQQKPGQPPRLLIYAASNQGSGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYFCHQTKEVPWTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 84) |
VL для huC1E1-V6 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASKSVDDSGISFMHWFQQKPGQPPRLLIYAASNQGSGVPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCHQTKEVPWTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 85) |
VL для huC1E1-V7 и huC1E1-V10 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASKSVDDSGISFMHWYQQKPGQAPRLLIYAASNQGSGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCHQTKEVPWTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 86) GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTAAGTCTGTTGACGACAGTGGTATCAGCTTCATGCACTGGTATCAACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGCTGCATCCAACCAGGGCTCTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCATCAGACTAAGGAGGTGCCTTGGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA (SEQ ID NO: 115) |
VL для D1F2 DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISNFLNWYQQKPDGTVKLLIYYTSRLQSGVPSRFSGTGSGTDYSLTISNLEQEDLATYFCQQGSSLPWTFGGGTKLEIK (SEQ ID NO: 87) GATATCCAGATGACACAGACTACATCCTCCCTGTCTGCCTCTCTGGGAGACAGAGTCACCATCAGTTGCAGGGCCAGTCAGGACATTAGCAATTTTTTAAACTGGTATCAGCAGAAACCAGATGGAACTGTTAAACTCCTGATCTACTACACATCAAGATTACAGTCAGGAGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCACTGGGTCTGGGACAGATTATTCTCTCACCATTAGCAACCTGGAACAAGAAGATCTTGCCACTTACTTTTGCCAACAGGGTAGTTCGCTTCCGTGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAA (SEQ ID NO: 116) |
VL для C1F5 DIVLTQSPATLSVTPGDSVSLSCRASQSISNNLHWYQQKSHESPRLLIKYGSQSMSGIPSRFSGSGSGTDFTLVINSVETEDFGMYFCQQSNSWPLTFGAGTKLELK (SEQ ID NO: 88) GATATTGTGCTAACTCAGTCTCCAGCCACCCTGTCTGTGACTCCAGGAGATAGCGTCAGTCTTTCCTGCAGGGCCAGCCAAAGTATTAGCAACAACCTACACTGGTATCAACAAAAATCACATGAGTCTCCAAGGCTTCTCATCAAGTATGGTTCCCAGTCCATGTCTGGGATCCCCTCCAGGTTCAGTGGCAGTGGATCAGGGACAGATTTCACTCTCGTTATCAACAGTGTGGAGACTGAAGATTTTGGAATGTATTTCTGTCAACAGAGTAACAGCTGGCCTCTCACGTTCGGTGCTGGGACCAAGCTGGAGCTGAAA (SEQ ID NO: 117) |
VL для D1A1 DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISNYLNWYQQKPDGTVKLLIYYTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDFSLTISNLEEEDIATYFCQQSNALPWTFGGGTKLEIK (SEQ ID NO: 89) GATATCCAGATGACACAGACTACATCCTCCCTGTCTGCCTCTCTGGGAGACAGAGTCACCATCAGTTGCAGGGCAAGTCAGGACATTAGCAATTATTTAAACTGGTATCAGCAGAAACCAGATGGAACTGTTAAACTCCTGATCTACTACACATCAAGATTACACTCAGGAGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGAACAGATTTTTCTCTCACCATTAGCAACCTGGAAGAAGAAGATATTGCCACTTACTTTTGCCAACAGAGTAATGCGCTTCCGTGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAACTGGAAATCAAA (SEQ ID NO: 118) |
VL для D1F1 DIVLTQSPASLVVSLGQRATISCRASESVDNSGISFMNWFQQKPGQPPKLLIYTASNQGSGVPARFSGSGSGTDFSLNIHPMEEDDSAMYFCQQSYEVPWTFGGGTKLEIK (SEQ ID NO: 90) GACATTGTGCTGACCCAATCTCCAGCTTCTTTGGTTGTGTCTCTAGGGCAGAGGGCCACCATCTCCTGCAGAGCCAGCGAAAGTGTTGATAATTCTGGCATTAGTTTTATGAACTGGTTCCAACAGAAACCAGGACAGCCACCCAAACTCCTCATCTATACTGCATCCAACCAAGGATCCGGGGTCCCTGCCAGGTTTAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCAGCCTCAACATCCATCCTATGGAGGAGGATGATTCTGCAATGTATTTCTGTCAGCAAAGTTATGAGGTTCCTTGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAA (SEQ ID NO: 119) |
VL для C1E2 SIVMTQTPKFLLVSAGDRVTITCKASQSVSNDVAWYQQKPGQSPKLLIYYAFHRYTGVPDRFTGSGYGTDFTFTISTVQAEDLAVYFCQQDYSSPYTFGGGTKLEIK (SEQ ID NO: 91) AGTATTGTGATGACCCAGACTCCCAAATTCCTGCTTGTATCAGCAGGAGACAGGGTTACCATAACCTGCAAGGCCAGTCAGAGTGTGAGTAATGATGTAGCTTGGTACCAACAGAAGCCAGGGCAGTCTCCTAAACTGCTGATATACTATGCATTTCATCGCTACACTGGAGTCCCTGATCGCTTCACTGGCAGTGGATATGGGACGGATTTCACTTTCACCATCAGCACTGTGCAGGCTGAAGACCTGGCAGTTTATTTCTGTCAGCAGGATTATAGCTCTCCGTACACGTTCGGAGGGGGGACCAAGCTGGAAATAAAA (SEQ ID NO: 120) |
VL для C1A1 DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISNYLIWYQQKTDGTLKLLIYYTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQHKTLPWTFGGGTKLEIK (SEQ ID NO: 92) GATATCCAGATGACACAGACTACATCCTCCCTGTCTGCCTCTCTGGGAGACAGAGTCACCATCAGTTGCAGGGCAAGTCAGGACATTAGCAATTATTTAATCTGGTATCAGCAGAAAACAGATGGAACTCTTAAACTCCTGATCTACTACACATCAAGATTACACTCAGGAGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGAACAGATTATTCTCTCACCATTAGCAACCTGGAGCAAGAAGATATTGCCACTTACTTTTGCCAGCAGCATAAAACGCTTCCGTGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAA (SEQ ID NO: 121) |
VL для C1F4 DIVMTQSQKFMSTSVGDRVTITCKASQNVRTAVAWYQQKPGQSPKALIYLASNRHTGVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVQSKDLADYFCLQHWNYPYTFGGGTKLEIK (SEQ ID NO: 93) GACATTGTGATGACCCAGTCTCAAAAATTCATGTCCACATCAGTAGGAGACAGGGTCACCATCACCTGCAAGGCCAGTCAGAATGTTCGTACTGCTGTAGCCTGGTATCAACAGAAACCAGGGCAGTCTCCTAAAGCACTGATTTACTTGGCATCCAACCGGCACACTGGAGTCCCTGATCGCTTCACAGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATTAGCAATGTGCAATCTAAAGACCTGGCAGATTATTTCTGTCTGCAACATTGGAATTATCCGTACACGTTCGGAGGGGGGACCAAGCTGGAAATAAAA (SEQ ID NO: 122) |
VL для D2C2 DIVLTQSPASLAVSLGQRATISCRASESVDNSGISFMNWFQQKPGQSPKLLIYIASNHGSGVPARFSGSGSGTDFSLNIHPMEEDDSAMYFCQQSYEVPWTFGGGTKLEIK (SEQ ID NO: 94) GACATTGTGCTGACCCAATCTCCAGCTTCTTTGGCTGTGTCTCTAGGGCAGAGGGCCACCATCTCCTGCAGAGCCAGCGAAAGTGTTGATAATTCTGGCATTAGTTTTATGAACTGGTTCCAACAGAAACCAGGACAGTCACCCAAACTCCTCATCTATATTGCATCCAACCACGGATCCGGGGTCCCTGCCAGGTTTAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCAGCCTCAACATCCATCCTATGGAGGAGGATGATTCTGCAATGTATTTCTGTCAGCAAAGTTATGAGGTTCCTTGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAA (SEQ ID NO: 123) |
VL для 2G2 DVLMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQSIIRSNGNTYLEWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEADDLGLYYCFQGSHVPWTFGGGTKLEIK (SEQ ID NO: 95) GATGTTTTGATGACCCAAACTCCACTCTCCCTGCCTGTCAGTCTTGGAGATCAAGCCTCCATCTCTTGCAGATCTAGTCAGAGCATTATACGTAGTAATGGAAACACCTATTTAGAATGGTACCTGCAGAAACCAGGCCAGTCTCCAAAGCTCCTGATCTACAAAGTTTCCAACCGATTTTCTGGGGTCCCAGACAGGTTCAGTGGCAGTGGATCAGGGACAGATTTCACACTCAAGATCAGCAGAGTGGAGGCTGACGATCTGGGACTTTATTACTGCTTTCAAGGTTCACATGTTCCGTGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAA (SEQ ID NO: 124) |
VL для C1C5 DVLMTQSPLSLPVSLGDQASISCRSSQSIVHSNGHIYLEWYLQKPGQSPKLLIYKVSKRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYYCFQGSHGTFGGGTKLEIK (SEQ ID NO: 96) GATGTTTTGATGACCCAAAGTCCACTCTCCCTGCCTGTCAGTCTTGGAGATCAAGCCTCCATCTCTTGCAGATCTAGTCAGAGTATTGTACATAGTAATGGACACATCTATTTAGAATGGTACCTGCAGAAACCAGGCCAGTCTCCAAAGCTCCTGATCTACAAAGTTTCCAAGCGATTTTCTGGGGTCCCAGACAGGTTCAGTGGCAGTGGATCAGGGACAGATTTCACACTCAAGATCAGCAGAGTGGAGGCTGAGGATCTGGGAGTTTATTACTGCTTTCAAGGTTCACATGGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAA (SEQ ID NO: 125) |
Константный участок тяжелой цепи IgG1 человека ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 97) GCTAGCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACAAAACTCACACATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAACTCCTGGGGGGACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACATGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCTGAGGTCAAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTACAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAATGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGCCCTCCCAGCCCCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTATCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTACAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCCGGGTAAA (SEQ ID NO: 126) |
Константный участок легкой каппа-цепи человека RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 98) CGTACGGTGGCGGCGCCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGT (SEQ ID NO: 127) |
Участок CH1 тяжелой цепи IgG1 человека ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV (SEQ ID NO:99) Gcctccaccaagggcccatcggtcttccccctggcaccctcctccaagagcacctctgggggcacagcggccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgccctgaccagcggcgtgcacaccttcccggctgtcctacagtcctcaggactctactccctcagcagcgtggtgaccgtgccctccagcagcttgggcacccagacctacatctgcaacgtgaatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaagaaagtt (SEQ ID NO: 128) |
PD-1-Fc человека LDSPDRPWNPPTFSPALLVVTEGDNATFTCSFSNTSESFVLNWYRMSPSNQTDKLAAFPEDRSQPGQDCRFRVTQLPNGRDFHMSVVRARRNDSGTYLCGAISLAPKAQIKESLRAELRVTERRAEVPTAHPSPSPRPAGQFQEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSL (SEQ ID NO:100) |
PD-L1-Fc человека FTVTVPKDLYVVEYGSNMTIECKFPVEKQLDLAALIVYWEMEDKNIIQFVHGEEDLKVQHSSYRQRARLLKDQLSLGNAALQITDVKLQDAGVYRCMISYGGADYKRITVKVNAPYNKINQRILVVDPVTSEHELTCQAEGYPKAEVIWTSSDHQVLSGKTTTTNSKREEKLFNVTSTLRINTTTNEIFYCTFRRLDPEENHTAELVIPELPLAHPPNERTEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 101) |
Константный участок тяжелой цепи для мышиных антител AKTTPPSVYPLAPGSAAQTNSMVTLGCLVKGYFPEPVTVTWNSGSLSSGVHTFPAVLQSDLYTLSSSVTVPSSTWPSETVTCNVAHPASSTKVDKKIVPRDCGCKPCICTVPEVSSVFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCVVVDISKDDPEVQFSWFVDDVEVHTAQTQPREEQFNSTFRSVSELPIMHQDWLNGKEFKCRVNSAAFPAPIEKTISKTKGRPKAPQVYTIPPPKEQMAKDKVSLTCMITDFFPEDITVEWQWNGQPAENYKNTQPIMDTDGSYFVYSKLNVQKSNWEAGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKSLSHSPGK (SEQ ID NO: 129) |
Константный участок легкой цепи для мышиных антител RADAAPTVSIFPPSSEQLTSGGASVVCFLNNFYPKDINVKWKIDGSERQNGVLNSWTDQDSKDSTYSMSSTLTLTKDEYERHNSYTCEATHKTSTSPIVKSFNRGEC (SEQ ID NO: 130) |
SEQ ID NO:1-101, 129 и 130: аминокислотная последовательность; SEQ ID NO:102-128: нуклеотидная последовательность |
--->
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> Immvira Co., Limited
<120> СВЯЗЫВАЮЩИЕСЯ С PD-1 АНТИТЕЛА И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
<130> 55532 00004
<150> US62/657927
<151> 2018-04-15
<160> 130
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR1 для C1E1, huC1E1-V1 - huC1E1-V7 и huC1E1-V10
<400> 1
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Leu
1 5
<210> 2
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR2 для C1E1, huC1E1-V1 - huC1E1-V7 и huC1E1-V10
<400> 2
Ile Ser Gly Gly Gly Gly Asp Thr
1 5
<210> 3
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR3 для C1E1, huC1E1-V1 - huC1E1-V7 и huC1E1-V10
<400> 3
Val Arg Phe Gly Gly Ala Gly Tyr Tyr Trp Tyr Phe Asp
1 5 10
<210> 4
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR1 для D1F2
<400> 4
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Thr
1 5
<210> 5
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR2 для D1F2
<400> 5
Ile Ser Gly Gly Gly Ser Asn Ile
1 5
<210> 6
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR3 для D1F2
<400> 6
Val Leu Asn Tyr Ala Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
1 5 10
<210> 7
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR1 для C1F5
<400> 7
Gly Phe Ala Phe Ser Ser Tyr Asp
1 5
<210> 8
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR2 для C1F5
<400> 8
Ile Thr Gly Gly Gly Ser Ser Ser
1 5
<210> 9
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR3 для C1F5
<400> 9
Ala Ser Pro Tyr Leu Ser Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
1 5 10
<210> 10
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR1 для D1A1
<400> 10
Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Ala
1 5
<210> 11
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR2 для D1A1
<400> 11
Ile Ser Gly Gly Gly Gly Asn Ile
1 5
<210> 12
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR3 для D1A1
<400> 12
Ala Ser Pro Tyr Ala Asn Tyr Val Trp Tyr Leu Asp Val
1 5 10
<210> 13
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR1 для D1F1
<400> 13
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Asn Thr
1 5
<210> 14
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR2 для D1F1
<400> 14
Ile Ser Gly Gly Gly Val Asn Thr
1 5
<210> 15
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR3 для D1F1
<400> 15
Ala Arg His Gly Asn Tyr Asn Tyr Tyr Gly Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 16
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR1 для C1E2
<400> 16
Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Trp
1 5
<210> 17
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR2 для C1E2
<400> 17
Ile Tyr Pro Gly Gly Gly Tyr Thr
1 5
<210> 18
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR3 для C1E2
<400> 18
Ala Arg Gly Tyr Gly Thr Asn Tyr Trp Tyr Phe Asp Val
1 5 10
<210> 19
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR1 для C1A1
<400> 19
Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser Gly Met Gly
1 5 10
<210> 20
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR2 для C1A1
<400> 20
Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys
1 5
<210> 21
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR3 для C1A1
<400> 21
Ala Arg Thr Gly Gly Phe Ile Thr Thr Gly Tyr Trp Tyr
1 5 10
<210> 22
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR1 для C1F4
<400> 22
Gly Tyr Lys Phe Thr Asp Tyr Ala
1 5
<210> 23
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR2 для C1F4
<400> 23
Ile Ser Thr Tyr Ser Gly Asp Val
1 5
<210> 24
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR3 для C1F4
<400> 24
Ser Arg Leu Gly Ile Thr Ala Gly Phe Ala Tyr Trp Gly
1 5 10
<210> 25
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR1 для D2C2
<400> 25
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Asn Thr
1 5
<210> 26
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR2 для D2C2
<400> 26
Ile Ser Gly Gly Gly Val Asp Thr
1 5
<210> 27
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR3 для D2C2
<400> 27
Ala Arg His Gly Asn Tyr Asn Tyr Tyr Gly Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 28
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR1 для 2G2
<400> 28
Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr Gly
1 5
<210> 29
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR2 для 2G2
<400> 29
Ile Ser Ser Gly Ser Ser Phe Thr
1 5
<210> 30
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR3 для 2G2
<400> 30
Thr Arg Arg Glu Gly Ile Tyr Asp Ala Ser Trp Asp Tyr
1 5 10
<210> 31
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR1 для C1C5
<400> 31
Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Gly
1 5
<210> 32
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR2 для C1C5
<400> 32
Ile Asn Thr Tyr Ser Gly Glu Pro
1 5
<210> 33
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH-CDR3 для C1C5
<400> 33
Val Arg Gln Gly Asp Phe Asp Tyr Glu Asp Ala Met Asp
1 5 10
<210> 34
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR1 для C1E1, huC1E1-V1 - huC1E1-V7 и huC1E1-V10
<400> 34
Arg Ala Ser Lys Ser Val Asp Asp Ser Gly Ile Ser Phe Met His
1 5 10 15
<210> 35
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR2 для C1E1, huC1E1-V1 - huC1E1-V7 и huC1E1-V10
<400> 35
Ala Ala Ser Asn Gln Gly Ser
1 5
<210> 36
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR3 для C1E1, huC1E1-V1 - huC1E1-V7 и huC1E1-V10
<400> 36
His Gln Thr Lys Glu Val Pro Trp Thr
1 5
<210> 37
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR1 для D1F2
<400> 37
Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Phe Leu Asn
1 5 10
<210> 38
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR2 для D1F2
<400> 38
Tyr Thr Ser Arg Leu Gln Ser
1 5
<210> 39
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR3 для D1F2
<400> 39
Gln Gln Gly Ser Ser Leu Pro Trp Thr
1 5
<210> 40
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR1 для C1F5
<400> 40
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Asn Asn Leu His
1 5 10
<210> 41
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR2 для C1F5
<400> 41
Gly Ser Gln Ser Met Ser
1 5
<210> 42
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR3 для C1F5
<400> 42
Gln Gln Ser Asn Ser Trp Pro Leu Thr
1 5
<210> 43
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR1 для D1A1
<400> 43
Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 44
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR3 для D1A1
<400> 44
Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser
1 5
<210> 45
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR3 для D1A1
<400> 45
Gln Gln Ser Asn Ala Leu Pro Trp Thr
1 5
<210> 46
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR1 для D1F1
<400> 46
Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Ser Gly Ile Ser Phe Met Asn
1 5 10 15
<210> 47
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR2 для D1F1
<400> 47
Thr Ala Ser Asn Gln Gly Ser
1 5
<210> 48
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR3 для D1F1
<400> 48
Gln Gln Ser Tyr Glu Val Pro Trp Thr
1 5
<210> 49
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR1 для C1E2
<400> 49
Lys Ala Ser Gln Ser Val Ser Asn Asp Val Ala
1 5 10
<210> 50
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR2 для C1E2
<400> 50
Tyr Ala Phe His Arg Tyr Thr
1 5
<210> 51
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR3 для C1E2
<400> 51
Gln Gln Asp Tyr Ser Ser Pro Tyr Thr
1 5
<210> 52
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR1 для C1A1
<400> 52
Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Ile
1 5 10
<210> 53
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR2 для C1A1
<400> 53
Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser
1 5
<210> 54
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR3 для C1A1
<400> 54
Gln Gln His Lys Thr Leu Pro Trp Thr
1 5
<210> 55
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR1 для C1F4
<400> 55
Lys Ala Ser Gln Asn Val Arg Thr Ala Val Ala
1 5 10
<210> 56
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR2 для C1F4
<400> 56
Leu Ala Ser Asn Arg His Thr
1 5
<210> 57
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR3 для C1F4
<400> 57
Leu Gln His Trp Asn Tyr Pro Tyr Thr
1 5
<210> 58
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR1 для D2C2
<400> 58
Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Ser Gly Ile Ser Phe Met Asn
1 5 10 15
<210> 59
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR2 для D2C2
<400> 59
Ile Ala Ser Asn His Gly Ser
1 5
<210> 60
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR3 для D2C2
<400> 60
Gln Gln Ser Tyr Glu Val Pro Trp Thr
1 5
<210> 61
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR1 для 2G2
<400> 61
Arg Ser Ser Gln Ser Ile Ile Arg Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu
1 5 10 15
<210> 62
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR2 для 2G2
<400> 62
Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser
1 5
<210> 63
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR3 для 2G2
<400> 63
Phe Gln Gly Ser His Val Pro Trp Thr
1 5
<210> 64
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR1 для C1C5
<400> 64
Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Gly His Ile Tyr Leu Glu
1 5 10 15
<210> 65
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR2 для C1C5
<400> 65
Lys Val Ser Lys Arg Phe Ser
1 5
<210> 66
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL-CDR3 для C1C5
<400> 66
Phe Gln Gly Ser His Gly Thr
1 5
<210> 67
<211> 121
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для C1E1
<400> 67
Glu Val Met Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Thr Ile Ser Gly Gly Gly Gly Asp Thr Tyr Phe Pro Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Val Lys Asn Asn Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Arg Phe Gly Gly Ala Gly Tyr Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly
100 105 110
Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 68
<211> 121
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для huC1E1-V1, huC1E1-V3 - huC1E1-V7
<400> 68
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Thr Ile Ser Gly Gly Gly Gly Asp Thr Tyr Phe Pro Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Arg Phe Gly Gly Ala Gly Tyr Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly
100 105 110
Ala Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 69
<211> 121
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для huC1E1-V2 и huC1E1-V10
<400> 69
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Thr Ile Ser Gly Gly Gly Gly Asp Thr Tyr Phe Pro Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Arg Phe Gly Gly Ala Gly Tyr Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 70
<211> 117
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для D1F2
<400> 70
Glu Val Met Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Thr Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Thr Ile Ser Gly Gly Gly Ser Asn Ile Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60
Glu Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu His Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Leu Asn Tyr Ala Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 71
<211> 117
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для C1F5
<400> 71
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ala Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Thr Gly Gly Gly Ser Ser Ser Phe Tyr Pro Asp Thr Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Thr Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ser Pro Tyr Leu Ser Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr
100 105 110
Leu Thr Val Ser Ser
115
<210> 72
<211> 120
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для D1A1
<400> 72
Glu Val Met Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Thr Ile Ser Gly Gly Gly Gly Asn Ile Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ser Pro Tyr Ala Asn Tyr Val Trp Tyr Leu Asp Val Trp Gly Ala
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 73
<211> 120
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для D1F1
<400> 73
Glu Val Met Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Asn
20 25 30
Thr Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Ala Ile Ser Gly Gly Gly Val Asn Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Asn Tyr Asn Tyr Tyr Gly Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 74
<211> 120
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для C1E2
<400> 74
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Thr
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Trp Leu Gly Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Asp Ile Tyr Pro Gly Gly Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Glu Asn Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Phe Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Tyr Gly Thr Asn Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Ala
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 75
<211> 124
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для C1A1
<400> 75
Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Ile Leu Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser
20 25 30
Gly Met Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Ala His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Phe Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Gln Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Arg Asn Gln Val
65 70 75 80
Phe Leu Lys Ile Thr Ser Val Asp Thr Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Thr Gly Gly Phe Ile Thr Thr Gly Tyr Trp Tyr Phe Asp
100 105 110
Val Trp Gly Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 76
<211> 118
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для C1F4
<400> 76
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Val
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Lys Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ser His Ala Lys Ser Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Ile Ile Ser Thr Tyr Ser Gly Asp Val Ser Phe Asn Gln Asn Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Met Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ala Arg Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Ile Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Leu Gly Ile Thr Ala Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ala
115
<210> 77
<211> 120
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для D2C2
<400> 77
Glu Val Met Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Asn
20 25 30
Thr Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Ala Ile Ser Gly Gly Gly Val Asp Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Asn Tyr Asn Tyr Tyr Gly Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 78
<211> 124
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для 2G2
<400> 78
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Thr Ile Ser Ser Gly Ser Ser Phe Thr Tyr Ser Pro Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Arg Glu Gly Ile Tyr Asp Ala Ser Trp Asp Tyr Ser Met Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 79
<211> 121
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для C1C5
<400> 79
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Ile Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Ser Gly Glu Pro Thr Tyr Ser Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ser Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Val Arg Gln Gly Asp Phe Asp Tyr Glu Asp Ala Met Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 80
<211> 111
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для C1E1
<400> 80
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Lys Ser Val Asp Asp Ser
20 25 30
Gly Ile Ser Phe Met His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Gln Gly Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Arg Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Asn Ile His
65 70 75 80
Pro Met Glu Glu Asp Asp Thr Ala Met Tyr Phe Cys His Gln Thr Lys
85 90 95
Glu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 81
<211> 111
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для huC1E1-V1 и huC1E1-V2
<400> 81
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Lys Ser Val Asp Asp Ser
20 25 30
Gly Ile Ser Phe Met His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Arg Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Gln Gly Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65 70 75 80
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys His Gln Thr Lys
85 90 95
Glu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 82
<211> 111
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для huC1E1-V3
<400> 82
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Lys Ser Val Asp Asp Ser
20 25 30
Gly Ile Ser Phe Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Arg Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Gln Gly Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65 70 75 80
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys His Gln Thr Lys
85 90 95
Glu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 83
<211> 111
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для huC1E1-V4
<400> 83
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Lys Ser Val Asp Asp Ser
20 25 30
Gly Ile Ser Phe Met His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
35 40 45
Arg Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Gln Gly Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65 70 75 80
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys His Gln Thr Lys
85 90 95
Glu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 84
<211> 111
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для huC1E1-V5
<400> 84
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Lys Ser Val Asp Asp Ser
20 25 30
Gly Ile Ser Phe Met His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Arg Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Gln Gly Ser Gly Ile Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65 70 75 80
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys His Gln Thr Lys
85 90 95
Glu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 85
<211> 111
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для huC1E1-V6
<400> 85
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Lys Ser Val Asp Asp Ser
20 25 30
Gly Ile Ser Phe Met His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Arg Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Gln Gly Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65 70 75 80
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Thr Lys
85 90 95
Glu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 86
<211> 111
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для huC1E1-V7 и huC1E1-V10
<400> 86
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Lys Ser Val Asp Asp Ser
20 25 30
Gly Ile Ser Phe Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
35 40 45
Arg Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Gln Gly Ser Gly Ile Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65 70 75 80
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Thr Lys
85 90 95
Glu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 87
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для D1F2
<400> 87
Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Phe
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Thr Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Ser Ser Leu Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 88
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для C1F5
<400> 88
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Asp Ser Val Ser Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Asn Asn
20 25 30
Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser His Glu Ser Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Lys Tyr Gly Ser Gln Ser Met Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Val Ile Asn Ser Val Glu Thr
65 70 75 80
Glu Asp Phe Gly Met Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Asn Ser Trp Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 89
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для D1A1
<400> 89
Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Glu
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Asn Ala Leu Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 90
<211> 111
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для D1F1
<400> 90
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Val Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Ser
20 25 30
Gly Ile Ser Phe Met Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Thr Ala Ser Asn Gln Gly Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Asn Ile His
65 70 75 80
Pro Met Glu Glu Asp Asp Ser Ala Met Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Tyr
85 90 95
Glu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 91
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для C1E2
<400> 91
Ser Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Lys Phe Leu Leu Val Ser Ala Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Ser Asn Asp
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Ala Phe His Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Thr Val Gln Ala
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Asp Tyr Ser Ser Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 92
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для C1A1
<400> 92
Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Ile Trp Tyr Gln Gln Lys Thr Asp Gly Thr Leu Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln His Lys Thr Leu Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 93
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для C1F4
<400> 93
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Gln Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Arg Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Ala Leu Ile
35 40 45
Tyr Leu Ala Ser Asn Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Val Gln Ser
65 70 75 80
Lys Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Leu Gln His Trp Asn Tyr Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 94
<211> 111
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для D2C2
<400> 94
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Ser
20 25 30
Gly Ile Ser Phe Met Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Ile Ala Ser Asn His Gly Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Asn Ile His
65 70 75 80
Pro Met Glu Glu Asp Asp Ser Ala Met Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Tyr
85 90 95
Glu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 95
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для 2G2
<400> 95
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Ile Arg Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Asp Asp Leu Gly Leu Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 96
<211> 110
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для C1C5
<400> 96
Asp Val Leu Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Gly His Ile Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Lys Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Gly Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 97
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> константный участок тяжелой цепи IgG1 человека
<400> 97
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
225 230 235 240
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 98
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> константный участок легкой каппа-цепи человека
<400> 98
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 99
<211> 98
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CH1-участок тяжелой цепи IgG1 человека
<400> 99
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val
<210> 100
<211> 371
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 100
Leu Asp Ser Pro Asp Arg Pro Trp Asn Pro Pro Thr Phe Ser Pro Ala
1 5 10 15
Leu Leu Val Val Thr Glu Gly Asp Asn Ala Thr Phe Thr Cys Ser Phe
20 25 30
Ser Asn Thr Ser Glu Ser Phe Val Leu Asn Trp Tyr Arg Met Ser Pro
35 40 45
Ser Asn Gln Thr Asp Lys Leu Ala Ala Phe Pro Glu Asp Arg Ser Gln
50 55 60
Pro Gly Gln Asp Cys Arg Phe Arg Val Thr Gln Leu Pro Asn Gly Arg
65 70 75 80
Asp Phe His Met Ser Val Val Arg Ala Arg Arg Asn Asp Ser Gly Thr
85 90 95
Tyr Leu Cys Gly Ala Ile Ser Leu Ala Pro Lys Ala Gln Ile Lys Glu
100 105 110
Ser Leu Arg Ala Glu Leu Arg Val Thr Glu Arg Arg Ala Glu Val Pro
115 120 125
Thr Ala His Pro Ser Pro Ser Pro Arg Pro Ala Gly Gln Phe Gln Glu
130 135 140
Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
145 150 155 160
Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
165 170 175
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
180 185 190
Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
195 200 205
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
210 215 220
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
225 230 235 240
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
245 250 255
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
260 265 270
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
275 280 285
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
290 295 300
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
305 310 315 320
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
325 330 335
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
340 345 350
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
355 360 365
Leu Ser Leu
370
<210> 101
<211> 453
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 101
Phe Thr Val Thr Val Pro Lys Asp Leu Tyr Val Val Glu Tyr Gly Ser
1 5 10 15
Asn Met Thr Ile Glu Cys Lys Phe Pro Val Glu Lys Gln Leu Asp Leu
20 25 30
Ala Ala Leu Ile Val Tyr Trp Glu Met Glu Asp Lys Asn Ile Ile Gln
35 40 45
Phe Val His Gly Glu Glu Asp Leu Lys Val Gln His Ser Ser Tyr Arg
50 55 60
Gln Arg Ala Arg Leu Leu Lys Asp Gln Leu Ser Leu Gly Asn Ala Ala
65 70 75 80
Leu Gln Ile Thr Asp Val Lys Leu Gln Asp Ala Gly Val Tyr Arg Cys
85 90 95
Met Ile Ser Tyr Gly Gly Ala Asp Tyr Lys Arg Ile Thr Val Lys Val
100 105 110
Asn Ala Pro Tyr Asn Lys Ile Asn Gln Arg Ile Leu Val Val Asp Pro
115 120 125
Val Thr Ser Glu His Glu Leu Thr Cys Gln Ala Glu Gly Tyr Pro Lys
130 135 140
Ala Glu Val Ile Trp Thr Ser Ser Asp His Gln Val Leu Ser Gly Lys
145 150 155 160
Thr Thr Thr Thr Asn Ser Lys Arg Glu Glu Lys Leu Phe Asn Val Thr
165 170 175
Ser Thr Leu Arg Ile Asn Thr Thr Thr Asn Glu Ile Phe Tyr Cys Thr
180 185 190
Phe Arg Arg Leu Asp Pro Glu Glu Asn His Thr Ala Glu Leu Val Ile
195 200 205
Pro Glu Leu Pro Leu Ala His Pro Pro Asn Glu Arg Thr Glu Pro Lys
210 215 220
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu
225 230 235 240
Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
245 250 255
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
260 265 270
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
275 280 285
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
305 310 315 320
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
325 330 335
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
340 345 350
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln
355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
370 375 380
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
385 390 395 400
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
405 410 415
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Ser Pro Gly Lys
450
<210> 102
<211> 363
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для C1E1
<400> 102
gaagtgatgc tggtggagtc tgggggaggg ttagtgaagc ctggagggtc cctgaaactc
60
tcctgtgcag cctctggatt cacgttcagt agttatctta tgtcttgggt tcgccagact
120
ccggagaaga ggctggagtg ggtcgcaacc attagtggtg gtggtggtga cacctacttt
180
ccagacagtg tgaagggtcg attcaccatc tccagagaca atgtcaagaa caacctgtac
240
ctgcaaatga gcagtcttag gtctgaggac acggccttgt attactgtgt aagatttggg
300
ggcgctggtt actactggta tttcgatgtc tggggcgcag ggaccacggt caccgtctcc
360
tca
363
<210> 103
<211> 363
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для huC1E1-V2 и huC1E1-V10
<400> 103
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc
60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt agctatctta tgtcctgggt ccgccaggct
120
ccaggcaagg ggctagagtg ggtggcaact atatcaggtg gtggaggtga cacatacttc
180
ccagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat
240
ctgcaaatga acagcctgag agctgaggac acggctgtgt attactgtgt gagattcggt
300
ggtgctggtt actactggta ctttgacgtc tggggccaag gaaccctggt caccgtctcg
360
agt
363
<210> 104
<211> 351
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для D1F2
<400> 104
gaagtgatgc tggtggagtc tgggggaggc ttagtgaagc ctggagggtc cctgaaactc
60
tcctgtgcag cctctggatt cactttcagt agctatacca tgtcttgggt tcgccagact
120
ccggagaaga ggctggagtg ggtcgcaacc attagtggtg gtggtagtaa catctactat
180
ccagacagtg tggagggtcg attcaccgtc tccagagaca atgccaggaa caccctgtac
240
ctgcatatga gcagtctgag gtctgaggac acggccttat attactgtgt ccttaactac
300
gcctatgcta tggactactg gggtcaagga acctcagtca ccgtctcctc a
351
<210> 105
<211> 351
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для C1F5
<400> 105
gaagtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttagtgaagc ctggagggtc cctgaaactc
60
tcctgtgcag cctctggatt cgctttcagt agctatgaca tgtcttgggt tcgccagact
ccggagaaga ggctggagtg ggtcgcatac attactggtg gtggtagtag ttccttctat
180
ccagacactg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa caccctgtat
240
ttgcaaatga ccagtctgag gtctgaggac acagccatgt attactgtgc aagcccctac
300
ttatcctact ttgactactg gggccaaggc accactctca cagtctcctc a
351
<210> 106
<211> 360
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для D1A1
<400> 106
gaagtgatgc tggtggagtc tgggggaggc ttagtgaagc ctggagggtc cctgaaactc
60
tcctgtgcag cctctggatt cactttcagt aactatgcca tgtcttgggt tcgccagact
120
ccggagaaga ggctggagtg ggtcgcaacc attagtggtg gtggtggtaa catctactat
180
ccagacagtg tgaagggtcg attcaccatc tccagagaca atgccaggaa caccctgtac
240
ctgcaaatga gcagtctgag gtctgaggac acggccttgt attattgtgc aagcccgtat
300
gctaactacg tatggtacct cgatgtctgg ggcgcaggga ccacggtcac cgtctcctca
360
<210> 107
<211> 360
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для D1F1
<400> 107
gaagtgatgc tggtggagtc tgggggaggc ttagtgaagc ctggagggtc cctgaaactc
60
tcctgtgcag cctctggatt cactttcagt agcaatacca tgtcttgggt tcgccagact
120
ccggagaaga ggctggagtg ggtcgcagcc attagtggtg gtggtgttaa cacctactat
180
ccagacagtg tgaagggtcg attcaccatc tccagagaca atgccaggaa caccctgtac
240
ctgcaaatga gcagtctgag gtctgaggac acggccctgt attactgtgc aagacatggt
300
aactacaatt actatggtat ggactactgg ggtcaaggaa cctcagtcac cgtctcctca
360
<210> 108
<211> 360
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для C1E2
<400> 108
caggtccagt tgcagcagtc tggagctgag ctggtaaggc ctgggacttc agtgaagata
60
tcctgcaagg cttctggcta caccttcact aactactggc taggttgggt aaaacagagg
120
cctggacatg gacttgagtg gattggagat atttaccctg gaggtggtta tactaactac
180
aatgagaact tcaagggcaa ggccacactg actgcagaca catcctccag cactgcctac
240
atgcagctca gtagcctgac atctgaggac tctgctgtct ttttctgtgc aagaggctac
300
ggtactaatt actggtactt cgatgtctgg ggcgcaggga ccacggtcac cgtctcctca
360
<210> 109
<211> 372
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для C1A1
<400> 109
caagttactc taaaagagtc tggccctggg atattgaagc cctcacagac cctcagtctg
60
acttgttctt tctctgggtt ttcactgagc acttctggta tgggtgtagg ctggattcgt
120
cagccttcag ggaagggtct ggagtggctg gcacacattt ggtgggatga tgataagttc
180
tataacccat ccctgaagag ccagctcaca atctccaagg atacctccag aaaccaggtt
240
ttcctcaaga tcaccagtgt ggacactgca gatactgcca cttactactg tgctcgaacc
300
ggggggttta ttactacggg ctactggtac ttcgatgtct ggggcgcagg gaccacggtc
360
accgtctcct ca
372
<210> 110
<211> 354
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для C1F4
<400> 110
caggtccagc tgcaacagtc tggggctgag ctggtgaggc ctggggtctc agtgaagatt
tcctgcaagg gttctggcta caaattcact gattatgcta tgcactgggt gaggcagagt
120
catgcaaaga gtctagagtg gattggaatt attagtactt actctggtga cgttagtttc
180
aaccagaact tcaagggcaa ggccacaatg actgtagaca aatcctccag cacagcctat
240
atggaacttg ccagactgac atctgaggat tctgccatct attactgttc aagactgggg
300
attacggcgg ggtttgctta ctggggccaa gggactctgg tcactgtctc tgca
354
<210> 111
<211> 360
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для D2C2
<400> 111
gaagtgatgc tggtggagtc tgggggaggc ttagtgaagc ctggagggtc cctgaaactc
60
tcctgtgcag cctctggatt cactttcagt agcaatacca tgtcttgggt tcgccagact
120
ccggagaaga ggctggagtg ggtcgcagcc attagtggtg gtggtgttga cacctactat
180
ccagacagtg tgaagggtcg attcaccatc tccagagaca atgccaggaa caccctgtac
240
ctgcaaatga gcagtctgag gtctgaggac acggccctgt attactgtgc aagacatggt
300
aactacaatt actatggtat ggactactgg ggtcaaggaa cctcagtcac cgtctcctca
360
<210> 112
<211> 372
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для 2G2
<400> 112
gaggtgcaac tggtggagtc tgggggagac ttagtgaagc ctggagggtc cctgaaactc
60
tcctgtacag cctctggatt cactttcagt tactatggca tgtcttgggt tcgccagact
120
ccagacaaga ggctggaatg ggtcgcaacc attagtagtg gtagtagttt cacctactct
180
ccagacagtg tgaaggggcg attcaccatc tccagagaca atgccaagaa caccctgtac
240
ctacaaatga acagtctgaa gtctgaggac acagccattt attactgtac aagacgagag
300
gggatctatg atgcttcctg ggattattct atggactact ggggtcaagg aacctcagtc
360
accgtctcct ca
372
<210> 113
<211> 363
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VH для C1C5
<400> 113
cagatccagt tggtgcagtc aggacctgag ctgaagaagc ctggagagac agtcaagatc
60
tcctgcaagg cttctgggta taccttcaca aactatggaa taaactgggt gaagcaggct
120
ccaggaaagg gtttaaagtg gatgggctgg ataaacacct atagtggaga gccaacatat
180
tctgatgact tcaagggacg ctttgccttc tctttggaaa cctctgccag cactgcctat
240
ttgcagatca acaacctcaa aaatgaggac acgtctacat atttctgtgt aagacagggg
300
gactttgatt acgaggatgc tatggactac tggggtcaag gaacctcagt caccgtctcc
360
tca
363
<210> 114
<211> 333
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для C1E1
<400> 114
gacattgtgc tgacccaatc tccagcttct ttggctgtgt ctctagggca gagggccacc
60
atctcctgca gagccagcaa aagtgttgat gattctggca ttagttttat gcactggttc
120
caacagaaac caggacagcc acccaaactc ctcatctatg ctgcatccaa ccaaggatcc
180
ggggtccctg ccaggtttcg tggcagtggg tctgggacag acttcagcct caacatccat
240
cctatggagg aggatgatac tgcaatgtat ttctgtcacc aaactaagga ggttccgtgg
300
acgttcggtg gaggcaccaa gctggaaatc aaa
333
<210> 115
<211> 333
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для huC1E1-V7 и huC1E1-V10
<400> 115
gaaattgtgt tgacacagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc
60
ctctcctgca gggccagtaa gtctgttgac gacagtggta tcagcttcat gcactggtat
120
caacagaaac ctggccaggc tcccaggctc ctcatctatg ctgcatccaa ccagggctct
180
ggcatcccag ccaggttcag tggcagtggg tctgggacag acttcactct caccatcagc
240
agcctagagc ctgaagattt tgcagtttat tactgtcatc agactaagga ggtgccttgg
300
acgttcggcc aagggaccaa ggtggagatc aaa
333
<210> 116
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для D1F2
<400> 116
gatatccaga tgacacagac tacatcctcc ctgtctgcct ctctgggaga cagagtcacc
60
atcagttgca gggccagtca ggacattagc aattttttaa actggtatca gcagaaacca
120
gatggaactg ttaaactcct gatctactac acatcaagat tacagtcagg agtcccatca
180
aggttcagtg gcactgggtc tgggacagat tattctctca ccattagcaa cctggaacaa
240
gaagatcttg ccacttactt ttgccaacag ggtagttcgc ttccgtggac gttcggtgga
300
ggcaccaagc tggaaatcaa a
321
<210> 117
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для C1F5
<400> 117
gatattgtgc taactcagtc tccagccacc ctgtctgtga ctccaggaga tagcgtcagt
60
ctttcctgca gggccagcca aagtattagc aacaacctac actggtatca acaaaaatca
120
catgagtctc caaggcttct catcaagtat ggttcccagt ccatgtctgg gatcccctcc
180
aggttcagtg gcagtggatc agggacagat ttcactctcg ttatcaacag tgtggagact
240
gaagattttg gaatgtattt ctgtcaacag agtaacagct ggcctctcac gttcggtgct
300
gggaccaagc tggagctgaa a
321
<210> 118
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для D1A1
<400> 118
gatatccaga tgacacagac tacatcctcc ctgtctgcct ctctgggaga cagagtcacc
60
atcagttgca gggcaagtca ggacattagc aattatttaa actggtatca gcagaaacca
120
gatggaactg ttaaactcct gatctactac acatcaagat tacactcagg agtcccatca
180
aggttcagtg gcagtgggtc tggaacagat ttttctctca ccattagcaa cctggaagaa
240
gaagatattg ccacttactt ttgccaacag agtaatgcgc ttccgtggac gttcggtgga
300
ggcaccaaac tggaaatcaa a
321
<210> 119
<211> 333
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для D1F1
<400> 119
gacattgtgc tgacccaatc tccagcttct ttggttgtgt ctctagggca gagggccacc
60
atctcctgca gagccagcga aagtgttgat aattctggca ttagttttat gaactggttc
120
caacagaaac caggacagcc acccaaactc ctcatctata ctgcatccaa ccaaggatcc
180
ggggtccctg ccaggtttag tggcagtggg tctgggacag acttcagcct caacatccat
240
cctatggagg aggatgattc tgcaatgtat ttctgtcagc aaagttatga ggttccttgg
300
acgttcggtg gaggcaccaa gctggaaatc aaa
333
<210> 120
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для C1E2
<400> 120
agtattgtga tgacccagac tcccaaattc ctgcttgtat cagcaggaga cagggttacc
60
ataacctgca aggccagtca gagtgtgagt aatgatgtag cttggtacca acagaagcca
120
gggcagtctc ctaaactgct gatatactat gcatttcatc gctacactgg agtccctgat
180
cgcttcactg gcagtggata tgggacggat ttcactttca ccatcagcac tgtgcaggct
240
gaagacctgg cagtttattt ctgtcagcag gattatagct ctccgtacac gttcggaggg
300
gggaccaagc tggaaataaa a
321
<210> 121
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для C1A1
<400> 121
gatatccaga tgacacagac tacatcctcc ctgtctgcct ctctgggaga cagagtcacc
60
atcagttgca gggcaagtca ggacattagc aattatttaa tctggtatca gcagaaaaca
120
gatggaactc ttaaactcct gatctactac acatcaagat tacactcagg agtcccatca
180
aggttcagtg gcagtgggtc tggaacagat tattctctca ccattagcaa cctggagcaa
240
gaagatattg ccacttactt ttgccagcag cataaaacgc ttccgtggac gttcggtgga
300
ggcaccaagc tggaaatcaa a
321
<210> 122
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для C1F4
<400> 122
gacattgtga tgacccagtc tcaaaaattc atgtccacat cagtaggaga cagggtcacc
60
atcacctgca aggccagtca gaatgttcgt actgctgtag cctggtatca acagaaacca
120
gggcagtctc ctaaagcact gatttacttg gcatccaacc ggcacactgg agtccctgat
180
cgcttcacag gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccattagcaa tgtgcaatct
240
aaagacctgg cagattattt ctgtctgcaa cattggaatt atccgtacac gttcggaggg
300
gggaccaagc tggaaataaa a
321
<210> 123
<211> 333
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для D2C2
<400> 123
gacattgtgc tgacccaatc tccagcttct ttggctgtgt ctctagggca gagggccacc
60
atctcctgca gagccagcga aagtgttgat aattctggca ttagttttat gaactggttc
120
caacagaaac caggacagtc acccaaactc ctcatctata ttgcatccaa ccacggatcc
180
ggggtccctg ccaggtttag tggcagtggg tctgggacag acttcagcct caacatccat
240
cctatggagg aggatgattc tgcaatgtat ttctgtcagc aaagttatga ggttccttgg
300
acgttcggtg gaggcaccaa gctggaaatc aaa
333
<210> 124
<211> 336
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для 2G2
<400> 124
gatgttttga tgacccaaac tccactctcc ctgcctgtca gtcttggaga tcaagcctcc
60
atctcttgca gatctagtca gagcattata cgtagtaatg gaaacaccta tttagaatgg
120
tacctgcaga aaccaggcca gtctccaaag ctcctgatct acaaagtttc caaccgattt
180
tctggggtcc cagacaggtt cagtggcagt ggatcaggga cagatttcac actcaagatc
240
agcagagtgg aggctgacga tctgggactt tattactgct ttcaaggttc acatgttccg
300
tggacgttcg gtggaggcac caagctggaa atcaaa
336
<210> 125
<211> 330
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> VL для C1C5
<400> 125
gatgttttga tgacccaaag tccactctcc ctgcctgtca gtcttggaga tcaagcctcc
60
atctcttgca gatctagtca gagtattgta catagtaatg gacacatcta tttagaatgg
120
tacctgcaga aaccaggcca gtctccaaag ctcctgatct acaaagtttc caagcgattt
180
tctggggtcc cagacaggtt cagtggcagt ggatcaggga cagatttcac actcaagatc
240
agcagagtgg aggctgagga tctgggagtt tattactgct ttcaaggttc acatgggacg
300
ttcggtggag gcaccaagct ggaaatcaaa
330
<210> 126
<211> 990
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> константный участок тяжелой цепи IgG1 человека
<400> 126
gctagcacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg
60
ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg
120
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca
180
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc
240
tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagaa agttgagccc
300
aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggggga
360
ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct
420
gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg
480
tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac
540
agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag
600
gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc
660
aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggaggag
720
atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc
780
gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg
840
ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg
900
cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg
960
cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa
990
<210> 127
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> константный участок легкой каппа-цепи человека
<400> 127
cgtacggtgg cggcgccatc tgtcttcatc ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct
60
ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat aacttctatc ccagagaggc caaagtacag
120
tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt aactcccagg agagtgtcac agagcaggac
180
agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc accctgacgc tgagcaaagc agactacgag
240
aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag
300
agcttcaaca ggggagagtg t
321
<210> 128
<211> 294
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CH1-участок тяжелой цепи IgG1 человека
<400> 128
gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg
60
ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg
120
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca
180
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc
240
tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagaa agtt
294
<210> 129
<211> 324
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Константный участок тяжелой цепи для мышиных антител
<400> 129
Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Gly Ser Ala
1 5 10 15
Ala Gln Thr Asn Ser Met Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu
50 55 60
Ser Ser Ser Val Thr Val Pro Ser Ser Thr Trp Pro Ser Glu Thr Val
65 70 75 80
Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys
85 90 95
Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly Cys Lys Pro Cys Ile Cys Thr Val Pro
100 105 110
Glu Val Ser Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu
115 120 125
Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys Val Thr Cys Val Val Val Asp Ile Ser
130 135 140
Lys Asp Asp Pro Glu Val Gln Phe Ser Trp Phe Val Asp Asp Val Glu
145 150 155 160
Val His Thr Ala Gln Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr
165 170 175
Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu Pro Ile Met His Gln Asp Trp Leu Asn
180 185 190
Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn Ser Ala Ala Phe Pro Ala Pro
195 200 205
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Arg Pro Lys Ala Pro Gln
210 215 220
Val Tyr Thr Ile Pro Pro Pro Lys Glu Gln Met Ala Lys Asp Lys Val
225 230 235 240
Ser Leu Thr Cys Met Ile Thr Asp Phe Phe Pro Glu Asp Ile Thr Val
245 250 255
Glu Trp Gln Trp Asn Gly Gln Pro Ala Glu Asn Tyr Lys Asn Thr Gln
260 265 270
Pro Ile Met Asp Thr Asp Gly Ser Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Asn
275 280 285
Val Gln Lys Ser Asn Trp Glu Ala Gly Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val
290 295 300
Leu His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Glu Lys Ser Leu Ser His
305 310 315 320
Ser Pro Gly Lys
<210> 130
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Константный участок легкой цепи для мышиных антител
<400> 130
Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu
1 5 10 15
Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg
35 40 45
Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu
65 70 75 80
Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser
85 90 95
Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<---
Claims (44)
1. Выделенное моноклональное антитело или его антиген-связывающая часть, которое связывается с PD-1 и содержит:
вариабельную область тяжелой цепи, содержащую участок тяжелой цепи CDR1, участок тяжелой цепи CDR2 и участок тяжелой цепи CDR3, и
вариабельную область легкой цепи, содержащую участок легкой цепи CDR1, участок легкой цепи CDR2 и участок легкой цепи CDR3,
где указанные участок тяжелой цепи CDR1, участок тяжелой цепи CDR2, участок тяжелой цепи CDR3, участок легкой цепи CDR1, участок легкой цепи CDR2 и участок легкой цепи CDR3 содержат аминокислотные последовательности, представленные в последовательностях
(1) SEQ ID NO: 1, 2, 3, 34, 35, и 36, соответственно;
(2) SEQ ID NO: 4, 5, 6, 37, 38 и 39, соответственно;
(3) SEQ ID NO: 7, 8, 9, 40, 41 и 42, соответственно;
(4) SEQ ID NO: 10, 11, 12, 43, 44 и 45, соответственно;
(5) SEQ ID NO: 13, 14, 15, 46, 47 и 48, соответственно;
(6) SEQ ID NO: 16, 17, 18, 49, 50 и 51, соответственно;
(7) SEQ ID NO: 19, 20, 21, 52, 53 и 54, соответственно;
(8) SEQ ID NO: 22, 23, 24, 55, 56 и 57, соответственно;
(9) SEQ ID NO: 25, 26, 27, 58, 59 и 60, соответственно;
(10) SEQ ID NO: 28, 29, 30, 61, 62 и 63, соответственно; или
(11) SEQ ID NO: 31, 32, 33, 64, 65 и 66, соответственно.
2. Выделенное моноклональное антитело или его антиген-связывающая часть по п. 1, содержащее вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, где указанные вариабельные области тяжелой цепи и легкой цепи содержат аминокислотные последовательности, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или 100% идентичные последовательностям
(1) SEQ ID NO: 67 и 80 соответственно;
(2) SEQ ID NO: 68 и 81 соответственно;
(3) SEQ ID NO: 69 и 81 соответственно;
(4) SEQ ID NO: 68 и 82 соответственно;
(5) SEQ ID NO: 68 и 83 соответственно;
(6) SEQ ID NO: 68 и 84 соответственно;
(7) SEQ ID NO: 68 и 85 соответственно;
(8) SEQ ID NO: 68 и 86 соответственно;
(9) SEQ ID NO: 69 и 86 соответственно;
(10) SEQ ID NO: 70 и 87 соответственно;
(11) SEQ ID NO: 71 и 88 соответственно;
(12) SEQ ID NO: 72 и 89 соответственно;
(13) SEQ ID NO: 73 и 90 соответственно;
(14) SEQ ID NO: 74 и 91 соответственно;
(15) SEQ ID NO: 75 и 92 соответственно;
(16) SEQ ID NO: 76 и 93 соответственно;
(17) SEQ ID NO: 77 и 94 соответственно;
(18) SEQ ID NO: 78 и 95 соответственно или
(19) SEQ ID NO: 79 и 96 соответственно.
3. Выделенное моноклональное антитело или его антиген-связывающая часть по п. 1, содержащее константную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или 100% идентичную последовательности SEQ ID NO: 97, 99 или 129, и/или константную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или 100% идентичную последовательности SEQ ID NO: 98 или 130.
4. Антитело или его антиген-связывающая часть по п. 1, которое (a) связывается с PD-1 человека; (b) связывается с PD-1 обезьяны; (c) ингибирует связывание PD-L1 с PD-1; (d) повышает пролиферацию T-клеток; (e) стимулирует иммунный ответ и/или (f) стимулирует антиген-специфичный T-клеточный ответ.
5. Антитело или его антиген-связывающая часть по п. 1, представляющие собой мышиное, человеческое, гибридное или гуманизированное антитело.
6. Антитело или его антиген-связывающая часть по п. 1, представляющие собой изотип IgG1, IgG2 или IgG4.
7. Фармацевтическая композиция для лечения рака, содержащая антитело или его антиген-связывающую часть по п. 1 и фармацевтически приемлемый носитель.
8. Фармацевтическая композиция по п. 7, дополнительно содержащая противоопухолевый агент.
9. Способ подавления опухолевого роста у субъекта, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по п. 7.
10. Способ по п. 9, отличающийся тем, что опухоль представляет собой солидную или не солидную опухоль.
11. Способ по п. 9, отличающийся тем, что опухоль выбрана из группы, состоящей из лимфомы, лейкоза, множественной миеломы, меланомы, аденокарциномы толстой кишки, рака поджелудочной железы, рака толстой кишки, желудочно-кишечного рака, рака предстательной железы, рака мочевого пузыря, рака почки, рака яичника, рака шейки матки, рака молочной железы, рака легких, почечно-клеточного рака и рака носоглотки.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US62/657,927 | 2018-04-15 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2022114011A Division RU2812280C1 (ru) | 2018-04-15 | 2019-04-12 | Связывающиеся с pd-1 антитела и способы их применения |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2020132497A RU2020132497A (ru) | 2022-05-17 |
RU2773758C2 true RU2773758C2 (ru) | 2022-06-09 |
Family
ID=
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20160039921A1 (en) * | 2012-12-14 | 2016-02-11 | Suzhou Stainwei Biotech Inc. | Monoclonal antibody for antagonizing and inhibiting binding of vascular endothelial cell growth factor and its receptor, and coding sequence and use thereof |
RU2599417C2 (ru) * | 2005-05-09 | 2016-10-10 | Оно Фармасьютикал Ко., Лтд. | Моноклональные антитела человека к белку программируемой смерти 1 (pd-1) и способы лечения рака с использованием анти-pd-1-антител самостоятельно или в комбинации с другими иммунотерапевтическими средствами |
US20180011114A1 (en) * | 2014-09-26 | 2018-01-11 | Public University Corporation Nara Medical University | Method for measuring reactivity of fviii |
WO2018053709A1 (en) * | 2016-09-21 | 2018-03-29 | Wuxi Biologics (Shanghai) Co., Ltd. | The novel monoclonal antibodies to programmed death 1 (pd-1) |
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2599417C2 (ru) * | 2005-05-09 | 2016-10-10 | Оно Фармасьютикал Ко., Лтд. | Моноклональные антитела человека к белку программируемой смерти 1 (pd-1) и способы лечения рака с использованием анти-pd-1-антител самостоятельно или в комбинации с другими иммунотерапевтическими средствами |
US20160039921A1 (en) * | 2012-12-14 | 2016-02-11 | Suzhou Stainwei Biotech Inc. | Monoclonal antibody for antagonizing and inhibiting binding of vascular endothelial cell growth factor and its receptor, and coding sequence and use thereof |
US20180011114A1 (en) * | 2014-09-26 | 2018-01-11 | Public University Corporation Nara Medical University | Method for measuring reactivity of fviii |
WO2018053709A1 (en) * | 2016-09-21 | 2018-03-29 | Wuxi Biologics (Shanghai) Co., Ltd. | The novel monoclonal antibodies to programmed death 1 (pd-1) |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN114981309B (zh) | 结合bcma的抗体及其用途 | |
CN113423733B (zh) | 结合tslp的抗体及其用途 | |
US20190016800A1 (en) | Antibodies binding lag-3 and uses thereof | |
CN110799540B (zh) | 多特异性抗体及其制备和使用方法 | |
CN110831973B (zh) | 多特异性抗体及其制备和使用方法 | |
KR102558418B1 (ko) | Pd-1에 결합하는 항체 및 그 용도 | |
KR102651263B1 (ko) | Siglec15에 결합하는 항체 및 이의 용도 | |
KR20220160555A (ko) | Cd40에 결합하는 항체 및 이의 용도 | |
KR20220147642A (ko) | Il4r에 결합하는 항체 및 이의 용도 | |
CN112074533A (zh) | 结合pd-1的抗体及其用途 | |
RU2773758C2 (ru) | Связывающиеся с pd-1 антитела и способы их применения | |
KR20230060531A (ko) | Pd-1에 결합하는 항체 및 이의 용도 | |
RU2812280C1 (ru) | Связывающиеся с pd-1 антитела и способы их применения | |
RU2811477C2 (ru) | Мультиспецифические антитела и способы их получения и применения | |
KR20230009502A (ko) | Il6r에 결합하는 항체 및 이의 용도 | |
TW202313110A (zh) | 癌症之治療 |