RU2759049C1 - Способ диагностики острого отторжения трансплантата у реципиентов сердца - Google Patents
Способ диагностики острого отторжения трансплантата у реципиентов сердца Download PDFInfo
- Publication number
- RU2759049C1 RU2759049C1 RU2021108610A RU2021108610A RU2759049C1 RU 2759049 C1 RU2759049 C1 RU 2759049C1 RU 2021108610 A RU2021108610 A RU 2021108610A RU 2021108610 A RU2021108610 A RU 2021108610A RU 2759049 C1 RU2759049 C1 RU 2759049C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- papp
- heart
- rejection
- acute
- recipients
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к трансплантации органов и клинической лабораторной диагностике. Определяют в плазме периферической крови реципиента концентрацию протеина плазмы А (РАРР-А) и при уровне РАРР-А выше 7 мМЕ/л диагностируют наличие острого отторжения трансплантата. Способ позволяет сократить время проведения диагностики при одновременном достижении достоверной диагностики острого отторжения трансплантата, а также повысить выживаемость реципиентов и улучшить результаты трансплантации сердца за счет своевременного определения показаний к внеплановой эндомиокардиальной биопсии. 2 пр.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к трансплантации органов и клинической лабораторной диагностике, может быть использовано при ведении реципиентов сердца для диагностики острого отторжения трансплантата.
Несмотря на значительные достижения и существенный прогресс в лечении реципиентов сердца, острое отторжение трансплантированного сердца является главной причиной потери трансплантата на ранних и отдаленных сроках после операции. Частыми причинами возникновения кризов отторжения выступают: недостаточная дозировка иммуносупрессивнных препаратов, несоблюдение реципиентом предписанной схемы лекарственной терапии, активация иммунной системы пациента вследствие развития воспалительных процессов инфекционного генеза и др.
Приоритетной задачей большинства современных исследований в области трансплантации сердца стоит повышение продолжительности и качества жизни реципиентов, в том числе за счет совершенствования технологий диагностики посттрансплантационных осложнений. Однако диагностика острого клеточного и гуморального отторжения сердечного трансплантата по-прежнему базируется на результатах инвазивных методов – эндомиокардиальной биопсии и коронароангиографии.
Объективным отражением системности процессов, происходящих в организме реципиентов, является изменение концентрации в крови ряда специфических молекул - биомаркеров. С этой позиции поиски новых эффективных биомаркеров, сигнализирующих о развитии патологии трансплантированного сердца приобретают особую актуальность.
В последние годы получены убедительные данные о прогностическом значении ряда биомаркеров воспаления, неоангиогенеза в отношении развития сердечно-сосудистых осложнений у больных ишемической болезнью сердца и у пациентов с трансплантированным сердцем.
Показан диагностический потенциал измерения концентрации VEGF-A в образцах крови пациентов в отношении развития острого клеточного отторжения [RU 2618404 С1], но данная методика эффективна только в отношении диагностики острого клеточного отторжения, несмотря на то, что около 20% случаев острого отторжения трансплантированного сердца протекает по гуморальному типу.
Известно, что ассоциированный с беременностью протеин плазмы А (РАРР-А), будучи цинксодержащей металлопротеиназой, активирующей инсулиноподобный фактор роста, в изобилии продуцируется клетками атеросклеротической бляшки, особенно нестабильной [Cosin-Sales J., Christiansen M., Kaminski P. et al., Pregnancy-associated plasma protein A and its endogenous inhibitor, the proform of eosinophil major basic protein (proMBP), are related to complex stenosis morphology in patients with stable angina pectoris // Circulation. - 2004. - Vol. 109. - P. 1724-1728]. Источниками РАРР-А являются макрофаги, фибробласты, остеобласты, стромальные клетки костного мозга и гладкомышечные клетки сосудистой стенки.
Прогностическое значение уровней РАРР-А в отношении развития сердечно-сосудистых осложнений (острого коронарного синдрома, острого инфаркта миокарда и мозгового инсульта) показано не только у больных ишемической болезнью сердца [Steffensen L.B., Conover С.А., Oxvig С. РАРР-А and the IGF system in atherosclerosis: what's up, what's down? // Am J Physiol Heart Circ Physiol. - 2019. - Vol. 317(5): H1039-H1049], но и у реципиентов солидных органов. Болезнь коронарных артерий пересаженного сердца (васкулопатия трансплантата) является наиболее частой причиной ретрансплантации сердца и смерти пациентов, проживших более года после операции [Nagumo S, Gallinoro E, Candreva A. et al., Vessel Fractional Flow Reserve and Graft Vasculopathy in Heart Transplant Recipients // J Interv Cardiol. - 2020. - Vol. 12. - doi: 10.1155/2020/9835151]. В исследовании Шевченко О.П. и соавт. показано, что у реципиентов с васкулопатией уровень РАРР-А выше, чем у пациентов без таковой [Шевченко О.П. Ассоциированный с беременностью протеин плазмы а (РАРР-А) при васкулопатии трансплантированного сердца / О.П. Шевченко, О.В. Орлова, Э.Н. Казаков и др. // Вестник трансплантологии и искусственных органов. - 2011. - Том XIII. - №2. - С. 46-51]. В то же время не была изучена диагностическая значимость РАРР-А в отношении острого отторжения сердечного трансплантата, развивающегося как в ранние, так и в отдаленные сроки после пересадки.
На сегодняшний день объективным методом верификации степени и характера острого отторжения трансплантированного сердца является эндомиокардиальная биопсия (ЭМБ) и коронографическое исследование [Клинические рекомендации. Трансплантация сердца, наличие трансплантированного сердца, отмирание и отторжение трансплантата сердца / Профессиональная ассоциация: Общероссийская общественная организация трансплантологов «Российское трансплантологическое общество». - 2020] (прототип). ЭМБ выполняются в сроки после трансплантации, предусмотренные протоколом, а также при проявлении признаков нарушения функции трансплантированного сердца.
Однако ЭМБ имеет ряд ограничений и рисков, свойственных инвазивным методам диагностики. Кроме того, при получении биоптата исследуют локальный участок, который не всегда может отражать состояние целого трансплантированного органа. Многочисленные публикации зарубежных и отечественных авторов свидетельствуют о высоком риске осложнений и неблагоприятного исхода при использовании данного метода. В связи с его трудоемкостью существует очевидная необходимость в разработке нового неинвазивного диагностического средства, которое может не только выявить наличие острого отторжения трансплантата, но и контролировать лечение реципиента.
Нами поставлена задача – разработать доступный, достоверный способ неинвазивной диагностики острого отторжения трансплантата клеточного и/или гуморального типов у реципиентов трансплантированного сердца.
Технический результат, достигаемый при осуществлении изобретения, заключается в обеспечении простоты, доступности, неинвазивности диагностики, сокращении времени ее проведения при одновременном достижении достоверного диагностического скрининга острого отторжения клеточного и/или гуморального типов как в раннем, так и в отдаленном посттрансплантационном периоде у реципиентов сердца, а также в улучшении результатов трансплантации сердца, повышении выживаемости реципиентов путем своевременного определения показаний к внеплановой ЭМБ и уточнения тактики ведения больных путем определения концентрации РАРР-А в плазме периферической крови.
Нами эмпирически установлен достоверный диагностический показатель развития острого отторжения трансплантированного сердца, основанный на оценке уровня концентрации РАРР-А в плазме периферической крови реципиентов сердца, который оказался информативным в любые сроки после трансплантации.
Использование предполагаемого маркера позволяет ограничить круг пациентов, которым требуется проведение ЭМБ для уточнения диагноза острого отторжения трансплантированного сердца.
Сущность изобретения состоит в следующем.
Для диагностики острого отторжения (клеточного и/или гуморального типа) трансплантированного сердца в плазме периферической крови реципиентов определяют концентрацию РАРР-А и при уровне РАРР-А выше 7 мМЕ/л диагностируют острое отторжение трансплантата.
Способ осуществляется следующим образом.
В качестве материала для исследования концентрации биомаркера используют плазму периферической крови. Взятие крови для исследования производят, как правило, одновременно с плановым обследованием пациентов.
Кровь собирают в одноразовые пробирки (BD Vacutainer, Becton Dickinson, США) и центрифугируют в течение 10 минут при 3500/1500 g оборотах при комнатной температуре. Полученную плазму переносят в пробирки объемом 1,5 мл и замораживают при необходимости. Образцы плазмы необходимо хранить при температуре -20°С.
Концентрация РАРР-А может быть измерена иммуноферментным методом, например, с помощью наборов реагентов РАРР-А ELISA (IBL Internatinal GMBH, Hamburg, Germany).
Определение проводят в соответствии с инструкцией к набору.
В подготовленные для работы планшеты с фиксированными на дне лунок моноклональными антителами к РАРР-А, добавляют калибраторы, контроли, образцы плазмы периферической крови пациентов по 10 мкл и 100 мкл рабочего буфера. Тщательно размешав смесь в течение 10 секунд, микропланшет инкубируют 30 минут при комнатной температуре (18-25°С).
После трехкратной промывки планшета от несвязавшихся компонентов в каждую лунку вносят по 100 мкл конъюгата (HRP). Инкубируют планшет при комнатной температуре (18-25°С) в течение 30 минут.
На заключительном этапе трехкратно отмывают планшет и вносят по 100 мкл ТМБ-субстрата для выявления ферментной метки.
Время инкубации составляет 15 минут при комнатной температуре (18-25°С). Реакцию останавливают с помощью стоп-реагента (50 мкл в лунку). Оптическую плотность при длине волны 450 нм измеряют на спектрофотометре. Интенсивность изменения цвета реагентной смеси прямо коррелирует с концентрацией РАРР-А в исследуемом образце.
При уровне РАРР-А выше 7 мМЕ/л у реципиентов сердца диагностируют острое отторжение трансплантата.
Для доказательств возможности реализации заявленного назначения и достижения указанного технического результата приводим следующие данные.
Пример 1.
Пациенту Н., 26 лет, выполнена ортотопическая трансплантация сердца. Измеренный на 378 сутки после операции уровень концентрации РАРР-А в плазме периферической крови составил 26 мМЕ/л. В соответствии с предлагаемым способом у пациента диагностировано развитие острого отторжения трансплантата. По данным морфологического исследования образца посредством ЭМБ диагноз подтвержден: выявлено острое клеточное отторжение, что соответствует степени клеточного отторжения R1G по классификации ISHLT-2014. Проведена коррекция иммуносупрессивной терапии, назначено лечение по показаниям.
Пример 2.
Пациенту П., 25 лет, выполнена ортотопическая трансплантация сердца. Послеоперационный период протекал без осложнений. В течение периода наблюдения (с 7 суток и до 14 месяцев после трансплантации) у пациента данных морфологических исследований образцов ЭМБ об эпизодах развития острого отторжения сердечного трансплантата не получено. Измеренный на 325 сутки после операции уровень концентрации РАРР-А составил 2 мМЕ/л. По данным морфологического исследования образца посредством ЭМБ признаков острого отторжения трансплантата не выявлено.
Предложенный способ апробирован в клинической практике на 28 реципиентах сердца. У 9 (32,1%) реципиентов отмечены эпизоды острого клеточного и/или гуморального отторжения, верифицированных ЭМБ; из них в 8 (88,9%) случаях уровень концентрации РАРР-А был выше рассчитанного порогового значения 7 мМЕ/л.
Чувствительность предлагаемого способа составляет 88,9%.
Использование в клинической практике патентуемого способа дает возможность диагностировать острое отторжение трансплантата у реципиентов сердца.
Claims (1)
- Способ диагностики острого отторжения трансплантата у реципиента трансплантированного сердца, отличающейся тем, что в плазме периферической крови реципиента определяют концентрацию протеина плазмы А (РАРР-А) и при уровне РАРР-А выше 7 мМЕ/л диагностируют наличие острого отторжения трансплантата.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2021108610A RU2759049C1 (ru) | 2021-03-30 | 2021-03-30 | Способ диагностики острого отторжения трансплантата у реципиентов сердца |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2021108610A RU2759049C1 (ru) | 2021-03-30 | 2021-03-30 | Способ диагностики острого отторжения трансплантата у реципиентов сердца |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2759049C1 true RU2759049C1 (ru) | 2021-11-09 |
Family
ID=78466889
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2021108610A RU2759049C1 (ru) | 2021-03-30 | 2021-03-30 | Способ диагностики острого отторжения трансплантата у реципиентов сердца |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2759049C1 (ru) |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2493567C1 (ru) * | 2012-04-10 | 2013-09-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный научный центр трансплантологии и искусственных органов имени академика В.И. Шумакова" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации | Способ прогнозирования развития необратимой дисфункции трансплантата у реципиентов сердца |
RU2618404C1 (ru) * | 2015-11-10 | 2017-05-03 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный научный центр транспланталогии и искусственных органов имени академика В.И. Шумакова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ скрининговой диагностики острого клеточного отторжения трансплантированного сердца |
RU2671637C1 (ru) * | 2018-01-09 | 2018-11-06 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО КубГМУ Минздрава России) | Способ прогнозирования риска отторжения почки до ее трансплантации |
RU2688172C1 (ru) * | 2018-04-05 | 2019-05-20 | Государственное бюджетное учреждение здравоохранения Московской области "Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского" (ГБУЗ МО МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского) | Способ профилактики отторжения трансплантата трупной почки |
-
2021
- 2021-03-30 RU RU2021108610A patent/RU2759049C1/ru active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2493567C1 (ru) * | 2012-04-10 | 2013-09-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный научный центр трансплантологии и искусственных органов имени академика В.И. Шумакова" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации | Способ прогнозирования развития необратимой дисфункции трансплантата у реципиентов сердца |
RU2618404C1 (ru) * | 2015-11-10 | 2017-05-03 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный научный центр транспланталогии и искусственных органов имени академика В.И. Шумакова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ скрининговой диагностики острого клеточного отторжения трансплантированного сердца |
RU2671637C1 (ru) * | 2018-01-09 | 2018-11-06 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО КубГМУ Минздрава России) | Способ прогнозирования риска отторжения почки до ее трансплантации |
RU2688172C1 (ru) * | 2018-04-05 | 2019-05-20 | Государственное бюджетное учреждение здравоохранения Московской области "Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского" (ГБУЗ МО МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского) | Способ профилактики отторжения трансплантата трупной почки |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Steffensen L.B., Conover С.А., Oxvig С. РАРР-А and the IGF system in atherosclerosis: what's up, what's down? Am J Physiol Heart Circ Physiol. - 2019. - Vol. 317(5): H1039-H1049. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6449247B2 (ja) | 移植拒絶反応、神経変性疾患又はうつ病と特に関連する潜在的炎症のインビトロ早期検出方法 | |
Sayre et al. | Measurement of cardiac troponin T is an effective method for predicting complications among emergency department patients with chest pain | |
KR20110104930A (ko) | 갈렉틴-3 면역검정 | |
CA2509063A1 (en) | Scd40l and placental growth factor (plgf) as biochemical marker combinations in cardiovascular diseases | |
JP2007510892A (ja) | 冠動脈疾患の危険性を層別化するための動脈血栓および炎症の基部マーカー | |
Tay et al. | Serum myeloperoxidase levels in predicting the severity of stroke and mortality in acute ischemic stroke patients | |
US20090246810A1 (en) | Use of MRP 8/14 levels for discrimination of individuals at risk of acute coronary syndromes | |
RU2759049C1 (ru) | Способ диагностики острого отторжения трансплантата у реципиентов сердца | |
RU2750973C1 (ru) | Способ диагностики обструкции бронхов у реципиентов легочного трансплантата | |
US6150121A (en) | Assessing immunological state of transplant recipients | |
RU2618404C1 (ru) | Способ скрининговой диагностики острого клеточного отторжения трансплантированного сердца | |
RU2665144C1 (ru) | Способ определения уровня стрессоустойчивости человека | |
US20120171716A1 (en) | Measurement of Mitochondrial Membrane Potential to Assess Organ Dysfunction | |
RU2697395C1 (ru) | Способ прогнозирования идиопатического бесплодия мужчин | |
KR102368475B1 (ko) | 유산 태반 피브린 과침착증 진단용 바이오마커 조성물 및 이의 용도 | |
RU2772054C1 (ru) | Способ неинвазивной диагностики фиброза миокарда сердечного аллотрансплантата | |
RU2759048C1 (ru) | Способ диагностики обструкции бронха у реципиента трансплантированных легких | |
CN111856037B (zh) | Unc45a与hsp10的比值在pop早期预警、诊断、预后评估中的应用和产品 | |
RU2614726C1 (ru) | Способ скрининговой диагностики острого клеточного отторжения трансплантированного сердца | |
ES2389022T3 (es) | Mioglobina como predictor precoz del infarto de miocardio | |
Yucel | Cardiac biomarkers: Definition, detection, diagnostic use, and efficiency | |
RU2758973C1 (ru) | Способ диагностики острого отторжения трансплантата у реципиента трансплантированного сердца | |
RU2770285C1 (ru) | Способ оценки вероятности развития неблагоприятного ремоделирования левого желудочка сердца у больных острым инфарктом миокарда с подъемом сегмента ST | |
RU2758994C1 (ru) | Способ диагностики острого отторжения трансплантата у реципиентов трансплантированного сердца | |
RU2739321C1 (ru) | Способ диагностики хронического активного лимфоцитарного миокарда у пациентов с "идиопатической" формой фибрилляции предсердий |