RU2747733C1 - Терапевтические средства - Google Patents
Терапевтические средства Download PDFInfo
- Publication number
- RU2747733C1 RU2747733C1 RU2018105137A RU2018105137A RU2747733C1 RU 2747733 C1 RU2747733 C1 RU 2747733C1 RU 2018105137 A RU2018105137 A RU 2018105137A RU 2018105137 A RU2018105137 A RU 2018105137A RU 2747733 C1 RU2747733 C1 RU 2747733C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cells
- immunoreactive cell
- cell
- immunoreactive
- receptor
- Prior art date
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 title description 2
- 108010019670 Chimeric Antigen Receptors Proteins 0.000 claims abstract description 39
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 20
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 19
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 18
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims abstract description 18
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims abstract description 16
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 13
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims abstract 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 90
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 85
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 47
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 26
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 claims description 25
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 claims description 25
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 25
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 25
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 25
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 claims description 24
- 230000011664 signaling Effects 0.000 claims description 22
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 claims description 21
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 claims description 21
- 101000851370 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 9 Proteins 0.000 claims description 15
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 claims description 15
- 102100036856 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 9 Human genes 0.000 claims description 15
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 13
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 13
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 12
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 claims description 11
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 claims description 11
- 108091008034 costimulatory receptors Proteins 0.000 claims description 9
- 102100027207 CD27 antigen Human genes 0.000 claims description 8
- 101000914511 Homo sapiens CD27 antigen Proteins 0.000 claims description 8
- 102100022153 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Human genes 0.000 claims description 7
- 101710165473 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Proteins 0.000 claims description 7
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 6
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 claims description 5
- -1 ICOS Proteins 0.000 claims description 5
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 claims description 5
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims description 4
- 101000801234 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000679903 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 25 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000851376 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Proteins 0.000 claims description 3
- 108010061593 Member 14 Tumor Necrosis Factor Receptors Proteins 0.000 claims description 3
- 102100028785 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 14 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100033728 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100022203 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 25 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100036857 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Human genes 0.000 claims description 3
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 claims description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 claims description 3
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000000539 dimer Substances 0.000 claims description 2
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000002463 transducing effect Effects 0.000 claims description 2
- 102100028123 Macrophage colony-stimulating factor 1 Human genes 0.000 claims 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 27
- 102100028198 Macrophage colony-stimulating factor 1 receptor Human genes 0.000 description 17
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 17
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 14
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 14
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 14
- 108091007741 Chimeric antigen receptor T cells Proteins 0.000 description 13
- 101000916644 Homo sapiens Macrophage colony-stimulating factor 1 receptor Proteins 0.000 description 12
- 102000007651 Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 12
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 10
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 10
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 10
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 10
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 9
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 8
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 8
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 7
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 7
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- 101710135898 Myc proto-oncogene protein Proteins 0.000 description 7
- 102100038895 Myc proto-oncogene protein Human genes 0.000 description 7
- 101710150448 Transcriptional regulator Myc Proteins 0.000 description 7
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 7
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 7
- IYMAXBFPHPZYIK-BQBZGAKWSA-N Arg-Gly-Asp Chemical group NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O IYMAXBFPHPZYIK-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 6
- 108010058398 Macrophage Colony-Stimulating Factor Receptor Proteins 0.000 description 6
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 6
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 6
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 6
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 6
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 6
- 108010038486 Interleukin-4 Receptors Proteins 0.000 description 5
- 102000010787 Interleukin-4 Receptors Human genes 0.000 description 5
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 108010068380 arginylarginine Proteins 0.000 description 5
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 5
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 5
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 5
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 5
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 5
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 5
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 241000710198 Foot-and-mouth disease virus Species 0.000 description 4
- WUHBLPVELFTPQK-KKUMJFAQSA-N Leu-Tyr-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O WUHBLPVELFTPQK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 4
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 4
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 4
- LNLNHXIQPGKRJQ-SRVKXCTJSA-N Pro-Arg-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 LNLNHXIQPGKRJQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 4
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 4
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 4
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 4
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 4
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 3
- DIIGDGJKTMLQQW-IHRRRGAJSA-N Arg-Lys-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N DIIGDGJKTMLQQW-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 3
- 108010051330 Arg-Pro-Gly-Pro Proteins 0.000 description 3
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 3
- 101710197658 Capsid protein VP1 Proteins 0.000 description 3
- 102100035366 Centromere protein M Human genes 0.000 description 3
- 206010011968 Decreased immune responsiveness Diseases 0.000 description 3
- 102100041003 Glutamate carboxypeptidase 2 Human genes 0.000 description 3
- GLACUWHUYFBSPJ-FJXKBIBVSA-N Gly-Pro-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)CN GLACUWHUYFBSPJ-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 3
- 102100034458 Hepatitis A virus cellular receptor 2 Human genes 0.000 description 3
- 101000737696 Homo sapiens Centromere protein M Proteins 0.000 description 3
- 101000892862 Homo sapiens Glutamate carboxypeptidase 2 Proteins 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 3
- 101710118046 RNA-directed RNA polymerase Proteins 0.000 description 3
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 3
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 3
- CKHQKYHIZCRTAP-SOUVJXGZSA-N Tyr-Gln-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N)C(=O)O CKHQKYHIZCRTAP-SOUVJXGZSA-N 0.000 description 3
- 101710108545 Viral protein 1 Proteins 0.000 description 3
- 108010072041 arginyl-glycyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 3
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 description 3
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 3
- 230000004940 costimulation Effects 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 108010014614 prolyl-glycyl-proline Proteins 0.000 description 3
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 3
- 108010054624 red fluorescent protein Proteins 0.000 description 3
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 3
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 3
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 3
- FUSPCLTUKXQREV-ACZMJKKPSA-N Ala-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O FUSPCLTUKXQREV-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 2
- DPNZTBKGAUAZQU-DLOVCJGASA-N Ala-Leu-His Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N DPNZTBKGAUAZQU-DLOVCJGASA-N 0.000 description 2
- 206010073478 Anaplastic large-cell lymphoma Diseases 0.000 description 2
- IASNWHAGGYTEKX-IUCAKERBSA-N Arg-Arg-Gly Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(O)=O IASNWHAGGYTEKX-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- PNQWAUXQDBIJDY-GUBZILKMSA-N Arg-Glu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O PNQWAUXQDBIJDY-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- HQIZDMIGUJOSNI-IUCAKERBSA-N Arg-Gly-Arg Chemical compound N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O HQIZDMIGUJOSNI-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- VENMDXUVHSKEIN-GUBZILKMSA-N Arg-Ser-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O VENMDXUVHSKEIN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- JOTRDIXZHNQYGP-DCAQKATOSA-N Arg-Ser-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N JOTRDIXZHNQYGP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- WOZDCBHUGJVJPL-AVGNSLFASA-N Arg-Val-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N WOZDCBHUGJVJPL-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- RAQMSGVCGSJKCL-FOHZUACHSA-N Asn-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O RAQMSGVCGSJKCL-FOHZUACHSA-N 0.000 description 2
- VITDJIPIJZAVGC-VEVYYDQMSA-N Asn-Met-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O VITDJIPIJZAVGC-VEVYYDQMSA-N 0.000 description 2
- QCVXMEHGFUMKCO-YUMQZZPRSA-N Asp-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O QCVXMEHGFUMKCO-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- UZFHNLYQWMGUHU-DCAQKATOSA-N Asp-Lys-Arg Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O UZFHNLYQWMGUHU-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- FQHBAQLBIXLWAG-DCAQKATOSA-N Asp-Lys-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N FQHBAQLBIXLWAG-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- AHWRSSLYSGLBGD-CIUDSAMLSA-N Asp-Pro-Glu Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AHWRSSLYSGLBGD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- WOKXEQLPBLLWHC-IHRRRGAJSA-N Asp-Tyr-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 WOKXEQLPBLLWHC-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- GIKOVDMXBAFXDF-NHCYSSNCSA-N Asp-Val-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O GIKOVDMXBAFXDF-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 108090000565 Capsid Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 description 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 2
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 2
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 2
- 108090000331 Firefly luciferases Proteins 0.000 description 2
- TWHDOEYLXXQYOZ-FXQIFTODSA-N Gln-Asn-Gln Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N TWHDOEYLXXQYOZ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- KCJJFESQRXGTGC-BQBZGAKWSA-N Gln-Glu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O KCJJFESQRXGTGC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- LVCHEMOPBORRLB-DCAQKATOSA-N Glu-Gln-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C(O)=O LVCHEMOPBORRLB-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- NKLRYVLERDYDBI-FXQIFTODSA-N Glu-Glu-Asp Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O NKLRYVLERDYDBI-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- VMKCPNBBPGGQBJ-GUBZILKMSA-N Glu-Leu-Asn Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N VMKCPNBBPGGQBJ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- DNPCBMNFQVTHMA-DCAQKATOSA-N Glu-Leu-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O DNPCBMNFQVTHMA-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- HAOUOFNNJJLVNS-BQBZGAKWSA-N Gly-Pro-Ser Chemical compound NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O HAOUOFNNJJLVNS-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 2
- 208000021519 Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 101001068133 Homo sapiens Hepatitis A virus cellular receptor 2 Proteins 0.000 description 2
- 101001137987 Homo sapiens Lymphocyte activation gene 3 protein Proteins 0.000 description 2
- WUKLZPHVWAMZQV-UKJIMTQDSA-N Ile-Glu-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N WUKLZPHVWAMZQV-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 2
- LWWILHPVAKKLQS-QXEWZRGKSA-N Ile-Gly-Met Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)N LWWILHPVAKKLQS-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 2
- HUWYGQOISIJNMK-SIGLWIIPSA-N Ile-Ile-His Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N HUWYGQOISIJNMK-SIGLWIIPSA-N 0.000 description 2
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 2
- 102000017578 LAG3 Human genes 0.000 description 2
- 208000032004 Large-Cell Anaplastic Lymphoma Diseases 0.000 description 2
- BABSVXFGKFLIGW-UWVGGRQHSA-N Leu-Gly-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N BABSVXFGKFLIGW-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- HRTRLSRYZZKPCO-BJDJZHNGSA-N Leu-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O HRTRLSRYZZKPCO-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 2
- KYIIALJHAOIAHF-KKUMJFAQSA-N Leu-Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 KYIIALJHAOIAHF-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- UHNQRAFSEBGZFZ-YESZJQIVSA-N Leu-Phe-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O)N UHNQRAFSEBGZFZ-YESZJQIVSA-N 0.000 description 2
- DPURXCQCHSQPAN-AVGNSLFASA-N Leu-Pro-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 DPURXCQCHSQPAN-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- PPGBXYKMUMHFBF-KATARQTJSA-N Leu-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O PPGBXYKMUMHFBF-KATARQTJSA-N 0.000 description 2
- 102100025584 Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 1 Human genes 0.000 description 2
- NCTDKZKNBDZDOL-GARJFASQSA-N Lys-Asn-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)C(=O)O NCTDKZKNBDZDOL-GARJFASQSA-N 0.000 description 2
- LCMWVZLBCUVDAZ-IUCAKERBSA-N Lys-Gly-Glu Chemical compound [NH3+]CCCC[C@H]([NH3+])C(=O)NCC(=O)N[C@H](C([O-])=O)CCC([O-])=O LCMWVZLBCUVDAZ-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- UETQMSASAVBGJY-QWRGUYRKSA-N Lys-Gly-His Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 UETQMSASAVBGJY-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- OWRUUFUVXFREBD-KKUMJFAQSA-N Lys-His-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O OWRUUFUVXFREBD-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- LECIJRIRMVOFMH-ULQDDVLXSA-N Lys-Pro-Phe Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 LECIJRIRMVOFMH-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 2
- YLLWCSDBVGZLOW-CIUDSAMLSA-N Met-Gln-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O YLLWCSDBVGZLOW-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- UZWMJZSOXGOVIN-LURJTMIESA-N Met-Gly-Gly Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O UZWMJZSOXGOVIN-LURJTMIESA-N 0.000 description 2
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 2
- BJEYSVHMGIJORT-NHCYSSNCSA-N Phe-Ala-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 BJEYSVHMGIJORT-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 2
- WEDZFLRYSIDIRX-IHRRRGAJSA-N Phe-Ser-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 WEDZFLRYSIDIRX-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- BTAIJUBAGLVFKQ-BVSLBCMMSA-N Phe-Trp-Val Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 BTAIJUBAGLVFKQ-BVSLBCMMSA-N 0.000 description 2
- SSSFPISOZOLQNP-GUBZILKMSA-N Pro-Arg-Asp Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O SSSFPISOZOLQNP-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- SNGZLPOXVRTNMB-LPEHRKFASA-N Pro-Ser-Pro Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O SNGZLPOXVRTNMB-LPEHRKFASA-N 0.000 description 2
- 238000010240 RT-PCR analysis Methods 0.000 description 2
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 2
- 241001420369 Thosea Species 0.000 description 2
- ZSPQUTWLWGWTPS-HJGDQZAQSA-N Thr-Lys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O ZSPQUTWLWGWTPS-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 2
- BZTSQFWJNJYZSX-JRQIVUDYSA-N Thr-Tyr-Asp Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O BZTSQFWJNJYZSX-JRQIVUDYSA-N 0.000 description 2
- NMOIRIIIUVELLY-WDSOQIARSA-N Trp-Val-Leu Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C(C)C)=CNC2=C1 NMOIRIIIUVELLY-WDSOQIARSA-N 0.000 description 2
- OOEUVMFKKZYSRX-LEWSCRJBSA-N Tyr-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N OOEUVMFKKZYSRX-LEWSCRJBSA-N 0.000 description 2
- IIJWXEUNETVJPV-IHRRRGAJSA-N Tyr-Arg-Ser Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N)O IIJWXEUNETVJPV-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- QUILOGWWLXMSAT-IHRRRGAJSA-N Tyr-Gln-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O QUILOGWWLXMSAT-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- RYSNTWVRSLCAJZ-RYUDHWBXSA-N Tyr-Gln-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 RYSNTWVRSLCAJZ-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 2
- QFXVAFIHVWXXBJ-AVGNSLFASA-N Tyr-Ser-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O QFXVAFIHVWXXBJ-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- DIOSYUIWOQCXNR-ONGXEEELSA-N Val-Lys-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O DIOSYUIWOQCXNR-ONGXEEELSA-N 0.000 description 2
- AEFJNECXZCODJM-UWVGGRQHSA-N Val-Val-Gly Chemical compound CC(C)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC([O-])=O AEFJNECXZCODJM-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 description 2
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000029918 bioluminescence Effects 0.000 description 2
- 238000005415 bioluminescence Methods 0.000 description 2
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 2
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 2
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 108010078144 glutaminyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 108010079547 glutamylmethionine Proteins 0.000 description 2
- 108010050475 glycyl-leucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 2
- 108010018006 histidylserine Proteins 0.000 description 2
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 2
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 108010073472 leucyl-prolyl-proline Proteins 0.000 description 2
- 230000021633 leukocyte mediated immunity Effects 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 201000008129 pancreatic ductal adenocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- 108010083476 phenylalanyltryptophan Proteins 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 108010079317 prolyl-tyrosine Proteins 0.000 description 2
- 108010004914 prolylarginine Proteins 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 2
- 108010000998 wheylin-2 peptide Proteins 0.000 description 2
- ISJKIHHTPAQLLW-TUFLPTIASA-N (2S)-2-[[(2S)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-[[(2S)-1-[(2S)-pyrrolidine-2-carbonyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]propanoyl]amino]-4-methylpentanoic acid Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ISJKIHHTPAQLLW-TUFLPTIASA-N 0.000 description 1
- JPSHPWJJSVEEAX-OWPBQMJCSA-N (2s)-2-amino-4-fluoranylpentanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC([18F])C(O)=O JPSHPWJJSVEEAX-OWPBQMJCSA-N 0.000 description 1
- 102100023990 60S ribosomal protein L17 Human genes 0.000 description 1
- KVWLTGNCJYDJET-LSJOCFKGSA-N Ala-Arg-His Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N KVWLTGNCJYDJET-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- KMGOBAQSCKTBGD-DLOVCJGASA-N Ala-His-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)N)CC1=CN=CN1 KMGOBAQSCKTBGD-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- IPZQNYYAYVRKKK-FXQIFTODSA-N Ala-Pro-Ala Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O IPZQNYYAYVRKKK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- OLVCTPPSXNRGKV-GUBZILKMSA-N Ala-Pro-Pro Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 OLVCTPPSXNRGKV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- MTDDMSUUXNQMKK-BPNCWPANSA-N Ala-Tyr-Arg Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N MTDDMSUUXNQMKK-BPNCWPANSA-N 0.000 description 1
- GIVATXIGCXFQQA-FXQIFTODSA-N Arg-Ala-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N GIVATXIGCXFQQA-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- OVVUNXXROOFSIM-SDDRHHMPSA-N Arg-Arg-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(=O)O OVVUNXXROOFSIM-SDDRHHMPSA-N 0.000 description 1
- TTXYKSADPSNOIF-IHRRRGAJSA-N Arg-Asp-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O TTXYKSADPSNOIF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- SKTGPBFTMNLIHQ-KKUMJFAQSA-N Arg-Glu-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O SKTGPBFTMNLIHQ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- JJGRJMKUOYXZRA-LPEHRKFASA-N Asn-Arg-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)C(=O)O JJGRJMKUOYXZRA-LPEHRKFASA-N 0.000 description 1
- OLGCWMNDJTWQAG-GUBZILKMSA-N Asn-Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O OLGCWMNDJTWQAG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- JEEFEQCRXKPQHC-KKUMJFAQSA-N Asn-Leu-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O JEEFEQCRXKPQHC-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- DPWDPEVGACCWTC-SRVKXCTJSA-N Asn-Tyr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DPWDPEVGACCWTC-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- YNQIDCRRTWGHJD-ZLUOBGJFSA-N Asp-Asn-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O YNQIDCRRTWGHJD-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- ZELQAFZSJOBEQS-ACZMJKKPSA-N Asp-Asn-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ZELQAFZSJOBEQS-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- PZXPWHFYZXTFBI-YUMQZZPRSA-N Asp-Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O PZXPWHFYZXTFBI-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- 102100029822 B- and T-lymphocyte attenuator Human genes 0.000 description 1
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102100040840 C-type lectin domain family 7 member A Human genes 0.000 description 1
- 102100038078 CD276 antigen Human genes 0.000 description 1
- 101710185679 CD276 antigen Proteins 0.000 description 1
- 102100036008 CD48 antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 229940045513 CTLA4 antagonist Drugs 0.000 description 1
- 101100510617 Caenorhabditis elegans sel-8 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100314454 Caenorhabditis elegans tra-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000282836 Camelus dromedarius Species 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- SWJYSDXMTPMBHO-FXQIFTODSA-N Cys-Pro-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SWJYSDXMTPMBHO-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- 102100039498 Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Human genes 0.000 description 1
- 102100027816 Cytotoxic and regulatory T-cell molecule Human genes 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- 102100025012 Dipeptidyl peptidase 4 Human genes 0.000 description 1
- 102100031984 Ephrin type-B receptor 6 Human genes 0.000 description 1
- AAOBFSKXAVIORT-GUBZILKMSA-N Gln-Asn-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O AAOBFSKXAVIORT-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- KVXVVDFOZNYYKZ-DCAQKATOSA-N Gln-Gln-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KVXVVDFOZNYYKZ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- VOUSELYGTNGEPB-NUMRIWBASA-N Gln-Thr-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O VOUSELYGTNGEPB-NUMRIWBASA-N 0.000 description 1
- CSMHMEATMDCQNY-DZKIICNBSA-N Gln-Val-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O CSMHMEATMDCQNY-DZKIICNBSA-N 0.000 description 1
- RBXSZQRSEGYDFG-GUBZILKMSA-N Glu-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RBXSZQRSEGYDFG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- DMYACXMQUABZIQ-NRPADANISA-N Glu-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O DMYACXMQUABZIQ-NRPADANISA-N 0.000 description 1
- FZQLXNIMCPJVJE-YUMQZZPRSA-N Gly-Asp-Leu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O FZQLXNIMCPJVJE-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- YTSVAIMKVLZUDU-YUMQZZPRSA-N Gly-Leu-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O YTSVAIMKVLZUDU-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- WNZOCXUOGVYYBJ-CDMKHQONSA-N Gly-Phe-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)NC(=O)CN)O WNZOCXUOGVYYBJ-CDMKHQONSA-N 0.000 description 1
- HUFUVTYGPOUCBN-MBLNEYKQSA-N Gly-Thr-Ile Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O HUFUVTYGPOUCBN-MBLNEYKQSA-N 0.000 description 1
- JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N H-Gly-Phe-OH Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100035943 HERV-H LTR-associating protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 108010007712 Hepatitis A Virus Cellular Receptor 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100034459 Hepatitis A virus cellular receptor 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710083479 Hepatitis A virus cellular receptor 2 homolog Proteins 0.000 description 1
- LJUIEESLIAZSFR-SRVKXCTJSA-N His-Leu-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N LJUIEESLIAZSFR-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 101000864344 Homo sapiens B- and T-lymphocyte attenuator Proteins 0.000 description 1
- 101000716130 Homo sapiens CD48 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101001064451 Homo sapiens Ephrin type-B receptor 6 Proteins 0.000 description 1
- 101001021491 Homo sapiens HERV-H LTR-associating protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000984200 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily A member 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000984199 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily A member 4 Proteins 0.000 description 1
- 101000984196 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily A member 5 Proteins 0.000 description 1
- 101000984190 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000984189 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000984192 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000984186 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4 Proteins 0.000 description 1
- 101001063392 Homo sapiens Lymphocyte function-associated antigen 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000851176 Homo sapiens Pro-epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- 101000734646 Homo sapiens Programmed cell death protein 6 Proteins 0.000 description 1
- 101000684208 Homo sapiens Prolyl endopeptidase FAP Proteins 0.000 description 1
- 101000633778 Homo sapiens SLAM family member 5 Proteins 0.000 description 1
- 101000633786 Homo sapiens SLAM family member 6 Proteins 0.000 description 1
- 101000633784 Homo sapiens SLAM family member 7 Proteins 0.000 description 1
- 101000633782 Homo sapiens SLAM family member 8 Proteins 0.000 description 1
- 101000633792 Homo sapiens SLAM family member 9 Proteins 0.000 description 1
- 101000934346 Homo sapiens T-cell surface antigen CD2 Proteins 0.000 description 1
- 101000596234 Homo sapiens T-cell surface protein tactile Proteins 0.000 description 1
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 description 1
- 101001018021 Homo sapiens T-lymphocyte surface antigen Ly-9 Proteins 0.000 description 1
- 101000809875 Homo sapiens TYRO protein tyrosine kinase-binding protein Proteins 0.000 description 1
- 101000845170 Homo sapiens Thymic stromal lymphopoietin Proteins 0.000 description 1
- 101500027527 Homo sapiens Transforming growth factor alpha Proteins 0.000 description 1
- 101000795167 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13B Proteins 0.000 description 1
- UASTVUQJMLZWGG-PEXQALLHSA-N Ile-His-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)NCC(=O)O)N UASTVUQJMLZWGG-PEXQALLHSA-N 0.000 description 1
- APDIECQNNDGFPD-PYJNHQTQSA-N Ile-His-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N APDIECQNNDGFPD-PYJNHQTQSA-N 0.000 description 1
- DZMWFIRHFFVBHS-ZEWNOJEFSA-N Ile-Tyr-Phe Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=CC=C2)C(=O)O)N DZMWFIRHFFVBHS-ZEWNOJEFSA-N 0.000 description 1
- 108010065920 Insulin Lispro Proteins 0.000 description 1
- 108010008212 Integrin alpha4beta1 Proteins 0.000 description 1
- 102000018682 Interleukin Receptor Common gamma Subunit Human genes 0.000 description 1
- 108010066719 Interleukin Receptor Common gamma Subunit Proteins 0.000 description 1
- 102000010789 Interleukin-2 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038453 Interleukin-2 Receptors Proteins 0.000 description 1
- LHSGPCFBGJHPCY-UHFFFAOYSA-N L-leucine-L-tyrosine Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 LHSGPCFBGJHPCY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- XBBKIIGCUMBKCO-JXUBOQSCSA-N Leu-Ala-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O XBBKIIGCUMBKCO-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 1
- ZURHXHNAEJJRNU-CIUDSAMLSA-N Leu-Asp-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O ZURHXHNAEJJRNU-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- FMEICTQWUKNAGC-YUMQZZPRSA-N Leu-Gly-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O FMEICTQWUKNAGC-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- KVOFSTUWVSQMDK-KKUMJFAQSA-N Leu-His-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)CC1=CN=CN1 KVOFSTUWVSQMDK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- OYQUOLRTJHWVSQ-SRVKXCTJSA-N Leu-His-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O OYQUOLRTJHWVSQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 108010017736 Leukocyte Immunoglobulin-like Receptor B1 Proteins 0.000 description 1
- 102100025556 Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily A member 3 Human genes 0.000 description 1
- 102100025555 Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily A member 4 Human genes 0.000 description 1
- 102100025583 Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100025582 Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 3 Human genes 0.000 description 1
- 102100025578 Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4 Human genes 0.000 description 1
- 102100030984 Lymphocyte function-associated antigen 3 Human genes 0.000 description 1
- 102000004083 Lymphotoxin-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108090000542 Lymphotoxin-alpha Proteins 0.000 description 1
- NKKFVJRLCCUJNA-QWRGUYRKSA-N Lys-Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN NKKFVJRLCCUJNA-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- QBEPTBMRQALPEV-MNXVOIDGSA-N Lys-Ile-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN QBEPTBMRQALPEV-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 1
- ZXFRGTAIIZHNHG-AJNGGQMLSA-N Lys-Ile-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N ZXFRGTAIIZHNHG-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 1
- GHKXHCMRAUYLBS-CIUDSAMLSA-N Lys-Ser-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O GHKXHCMRAUYLBS-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- JHNOXVASMSXSNB-WEDXCCLWSA-N Lys-Thr-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O JHNOXVASMSXSNB-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- NDJSSFWDYDUQID-YTWAJWBKSA-N Met-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)N)O NDJSSFWDYDUQID-YTWAJWBKSA-N 0.000 description 1
- VYXIKLFLGRTANT-HRCADAONSA-N Met-Tyr-Pro Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O)N VYXIKLFLGRTANT-HRCADAONSA-N 0.000 description 1
- 241000713869 Moloney murine leukemia virus Species 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 101100407308 Mus musculus Pdcd1lg2 gene Proteins 0.000 description 1
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100029527 Natural cytotoxicity triggering receptor 3 ligand 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710201161 Natural cytotoxicity triggering receptor 3 ligand 1 Proteins 0.000 description 1
- 206010029260 Neuroblastoma Diseases 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- UUWCIPUVJJIEEP-SRVKXCTJSA-N Phe-Asn-Cys Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N UUWCIPUVJJIEEP-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- GXDPQJUBLBZKDY-IAVJCBSLSA-N Phe-Ile-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O GXDPQJUBLBZKDY-IAVJCBSLSA-N 0.000 description 1
- MMJJFXWMCMJMQA-STQMWFEESA-N Phe-Pro-Gly Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(O)=O)C1=CC=CC=C1 MMJJFXWMCMJMQA-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- ZYNBEWGJFXTBDU-ACRUOGEOSA-N Phe-Tyr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N ZYNBEWGJFXTBDU-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 1
- YYARMJSFDLIDFS-FKBYEOEOSA-N Pro-Phe-Trp Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O YYARMJSFDLIDFS-FKBYEOEOSA-N 0.000 description 1
- KDBHVPXBQADZKY-GUBZILKMSA-N Pro-Pro-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 KDBHVPXBQADZKY-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- SBVPYBFMIGDIDX-SRVKXCTJSA-N Pro-Pro-Pro Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1N(C(=O)[C@H]2NCCC2)CCC1 SBVPYBFMIGDIDX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- SXJOPONICMGFCR-DCAQKATOSA-N Pro-Ser-Lys Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O SXJOPONICMGFCR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- 101710098940 Pro-epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- 102100033237 Pro-epidermal growth factor Human genes 0.000 description 1
- 108700030875 Programmed Cell Death 1 Ligand 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100024213 Programmed cell death 1 ligand 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100034785 Programmed cell death protein 6 Human genes 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 102000018795 RELT Human genes 0.000 description 1
- 108010052562 RELT Proteins 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 102100029216 SLAM family member 5 Human genes 0.000 description 1
- 102100029197 SLAM family member 6 Human genes 0.000 description 1
- 102100029198 SLAM family member 7 Human genes 0.000 description 1
- 102100029214 SLAM family member 8 Human genes 0.000 description 1
- 102100029196 SLAM family member 9 Human genes 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- FIXILCYTSAUERA-FXQIFTODSA-N Ser-Ala-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O FIXILCYTSAUERA-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- LVVBAKCGXXUHFO-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ala-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O LVVBAKCGXXUHFO-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- SRTCFKGBYBZRHA-ACZMJKKPSA-N Ser-Ala-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O SRTCFKGBYBZRHA-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- HBZBPFLJNDXRAY-FXQIFTODSA-N Ser-Ala-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O HBZBPFLJNDXRAY-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- WDXYVIIVDIDOSX-DCAQKATOSA-N Ser-Arg-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)CCCN=C(N)N WDXYVIIVDIDOSX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- HEQPKICPPDOSIN-SRVKXCTJSA-N Ser-Asp-Tyr Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 HEQPKICPPDOSIN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- KMWFXJCGRXBQAC-CIUDSAMLSA-N Ser-Cys-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CO)N KMWFXJCGRXBQAC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- NNFMANHDYSVNIO-DCAQKATOSA-N Ser-Lys-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O NNFMANHDYSVNIO-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- OVQZAFXWIWNYKA-GUBZILKMSA-N Ser-Pro-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CO)N OVQZAFXWIWNYKA-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 102000008115 Signaling Lymphocytic Activation Molecule Family Member 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010074687 Signaling Lymphocytic Activation Molecule Family Member 1 Proteins 0.000 description 1
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 1
- 108700015968 Slam family Proteins 0.000 description 1
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 1
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 1
- 102100039367 T-cell immunoglobulin and mucin domain-containing protein 4 Human genes 0.000 description 1
- 101710174757 T-cell immunoglobulin and mucin domain-containing protein 4 Proteins 0.000 description 1
- 229940126547 T-cell immunoglobulin mucin-3 Drugs 0.000 description 1
- 102100025237 T-cell surface antigen CD2 Human genes 0.000 description 1
- 102100035268 T-cell surface protein tactile Human genes 0.000 description 1
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 description 1
- 102100033447 T-lymphocyte surface antigen Ly-9 Human genes 0.000 description 1
- 102000043124 TIM family Human genes 0.000 description 1
- 108091054435 TIM family Proteins 0.000 description 1
- 102100038717 TYRO protein tyrosine kinase-binding protein Human genes 0.000 description 1
- KCRQEJSKXAIULJ-FJXKBIBVSA-N Thr-Gly-Arg Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O KCRQEJSKXAIULJ-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 1
- XFTYVCHLARBHBQ-FOHZUACHSA-N Thr-Gly-Asn Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O XFTYVCHLARBHBQ-FOHZUACHSA-N 0.000 description 1
- COYHRQWNJDJCNA-NUJDXYNKSA-N Thr-Thr-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O COYHRQWNJDJCNA-NUJDXYNKSA-N 0.000 description 1
- 102100031294 Thymic stromal lymphopoietin Human genes 0.000 description 1
- 108010009583 Transforming Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000009618 Transforming Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 208000003721 Triple Negative Breast Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- MBLJBGZWLHTJBH-SZMVWBNQSA-N Trp-Val-Arg Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)=CNC2=C1 MBLJBGZWLHTJBH-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- 102100024587 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 15 Human genes 0.000 description 1
- 108090000138 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 15 Proteins 0.000 description 1
- 102100029675 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13B Human genes 0.000 description 1
- 102100033733 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1B Human genes 0.000 description 1
- 101710187830 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1B Proteins 0.000 description 1
- BSCBBPKDVOZICB-KKUMJFAQSA-N Tyr-Leu-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O BSCBBPKDVOZICB-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- MDXLPNRXCFOBTL-BZSNNMDCSA-N Tyr-Ser-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O MDXLPNRXCFOBTL-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- XUIOBCQESNDTDE-FQPOAREZSA-N Tyr-Thr-Ala Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N)O XUIOBCQESNDTDE-FQPOAREZSA-N 0.000 description 1
- AEOFMCAKYIQQFY-YDHLFZDLSA-N Tyr-Val-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 AEOFMCAKYIQQFY-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 1
- 108010079206 V-Set Domain-Containing T-Cell Activation Inhibitor 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100038929 V-set domain-containing T-cell activation inhibitor 1 Human genes 0.000 description 1
- DDRBQONWVBDQOY-GUBZILKMSA-N Val-Ala-Arg Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O DDRBQONWVBDQOY-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- LNYOXPDEIZJDEI-NHCYSSNCSA-N Val-Asn-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](C(C)C)N LNYOXPDEIZJDEI-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- XJFXZQKJQGYFMM-GUBZILKMSA-N Val-Cys-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N XJFXZQKJQGYFMM-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- WBAJDGWKRIHOAC-GVXVVHGQSA-N Val-Lys-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O WBAJDGWKRIHOAC-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- ILMVQSHENUZYIZ-JYJNAYRXSA-N Val-Met-Tyr Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)N ILMVQSHENUZYIZ-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- GUIYPEKUEMQBIK-JSGCOSHPSA-N Val-Tyr-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(=O)NCC(O)=O GUIYPEKUEMQBIK-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 108010072917 class-I restricted T cell-associated molecule Proteins 0.000 description 1
- 230000004186 co-expression Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 108010060199 cysteinylproline Proteins 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 108010025838 dectin 1 Proteins 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- BIPRZBFRCFOBDQ-KAGUSELOSA-N dnc008567 Chemical compound NC(=N)NCCC[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C BIPRZBFRCFOBDQ-KAGUSELOSA-N 0.000 description 1
- 108700004025 env Genes Proteins 0.000 description 1
- 101150030339 env gene Proteins 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 108010025306 histidylleucine Proteins 0.000 description 1
- 239000012642 immune effector Substances 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 108010043603 integrin alpha4beta7 Proteins 0.000 description 1
- 230000004073 interleukin-2 production Effects 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 108010012058 leucyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 208000022766 lymph node neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108010018625 phenylalanylarginine Proteins 0.000 description 1
- 108010051242 phenylalanylserine Proteins 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 108010093296 prolyl-prolyl-alanine Proteins 0.000 description 1
- 108010090894 prolylleucine Proteins 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 108010026333 seryl-proline Proteins 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 230000010473 stable expression Effects 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000011285 therapeutic regimen Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 208000022679 triple-negative breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000005748 tumor development Effects 0.000 description 1
- 230000005740 tumor formation Effects 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010020532 tyrosyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
- C07K14/70521—CD28, CD152
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4611—T-cells, e.g. tumor infiltrating lymphocytes [TIL], lymphokine-activated killer cells [LAK] or regulatory T cells [Treg]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/463—Cellular immunotherapy characterised by recombinant expression
- A61K39/4631—Chimeric Antigen Receptors [CAR]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- A61K39/464403—Receptors for growth factors
- A61K39/464406—Her-2/neu/ErbB2, Her-3/ErbB3 or Her 4/ ErbB4
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- A61K39/464416—Receptors for cytokines
- A61K39/464417—Receptors for tumor necrosis factors [TNF], e.g. lymphotoxin receptor [LTR], CD30
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- A61K39/464416—Receptors for cytokines
- A61K39/464418—Receptors for colony stimulating factors [CSF]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464436—Cytokines
- A61K39/46444—Interleukins [IL]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/53—Colony-stimulating factor [CSF]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/54—Interleukins [IL]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
- C07K14/7051—T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
- C07K14/70517—CD8
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70578—NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30, CD40, CD95
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0636—T lymphocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/27—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterized by targeting or presenting multiple antigens
- A61K2239/29—Multispecific CARs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/31—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterized by the route of administration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/38—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/46—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterised by the cancer treated
- A61K2239/48—Blood cells, e.g. leukemia or lymphoma
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/02—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a signal sequence
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/03—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a transmembrane segment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/33—Fusion polypeptide fusions for targeting to specific cell types, e.g. tissue specific targeting, targeting of a bacterial subspecies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2510/00—Genetically modified cells
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Oncology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Hematology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Virology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложена иммунореактивная клетка для лечения рака, экспрессирующая химерный антигенный рецептор второго поколения и химерный костимулирующий рецептор. Кроме того, рассмотрен способ получения иммунореактивной клетки, комбинация нуклеиновых кислот, вектор, комбинация векторов, способ стимуляции иммунного ответа. Данное изобретение может найти дальнейшее применение в терапии различных видов рака. 6 н. и 14 з.п. ф-лы, 25 ил., 4 пр.
Description
Настоящее изобретение относится к нуклеиновым кислотам, кодирующим новые химерные антигенные рецепторы (CAR), а также к самим CAR, клеткам, содержащим нуклеиновые кислоты, и их применению в терапии, в частности к способам, в которых они применяются для облегчения ответа Т-клеток на выбранную мишень.
Уровень техники изобретения
Химерные антигенные рецепторы (CAR), которые также могут обозначаться как искусственные Т-клеточные рецепторы, химерные Т-клеточные рецепторы (TCR) или химерные иммунорецепторы, являются рекомбинантными рецепторами, хорошо известными из уровня техники. Их используют прежде всего для трансформации иммунных эффекторных клеток, в частности Т-клеток, для того чтобы обеспечить эти клетки определенной специфичностью. Их в частности изучают в области иммунотерапии рака, где их можно использовать в таких методиках, как адаптивный перенос клеток. В этих способах терапии Т-клетки удаляют из пациента и модифицируют так, что они экспрессируют рецепторы, специфические в отношении антигенов, обнаруженных в определенной форме рака. Т-клетки, которые могут затем распознать и уничтожать раковые клетки, повторно вводят пациенту.
CAR первого поколения обеспечивают TCR-подобный сигнал, чаще всего использующий CD3-дзета (z) и за счет этого вызывают противоопухолевые функции. Однако вовлечение слитых рецепторов CD3z-цепи может являться недостаточным для того, чтобы вызвать существенную секрецию и/или пролиферацию IL-2 в отсутствие сопутствующего костимулирующего сигнала. В физиологических ответах Т-клеток оптимальная активация лимфоцитов требует вовлечения одного или нескольких костимулирующих рецепторов (сигнал 2), таких как CD28 или 4-1ВВ. Следовательно, Т-клетки также были сконструированы таким образом, чтобы они получали костимулирующий сигнал антиген-зависимым от опухоли способом.
Важным усовершенствованием в этом отношении было успешное конструирование "CAR второго поколения", которые трансформируют функциональный антиген-зависимый костимулирующий сигнал в первичных Т-клетках человека, обеспечивая пролиферацию Т-клеток в дополнение к противоопухолевой активности. CAR второго поколения чаще всего обеспечивают совместную стимуляцию с использованием модулей, полученных из CD28 или 4-1ВВ. Комбинированная доставка костимуляции плюс сигнал CD3-дзета делает CAR второго поколения явно превосходящими по функциональности по сравнению с их аналогами первого поколения (только сигнал CD3z). Пример CAR второго поколения приведен в патенте США №7446190.
Совсем недавно были получены так называемые "CAR третьего поколения". Они объединяют несколько сигнальных доменов, таких как CD28+4-1BB+CD3z или CD28+OX40+CD3z, для дальнейшего увеличения эффективности. В CAR 3-го поколения сигнальные домены последовательно выстраиваются в эндодомене CAR и помещаются выше CD3z.
В целом, однако, результаты, достигнутые с помощью данных CAR третьего поколения, неутешительно обеспечивали лишь незначительное улучшение по сравнению с конфигурациями 2-го поколения.
Было также предложено использование клеток, трансформированных несколькими конструкциями. Например, Kloss et al. Nature Biotechnology 2012, doi: 10.1038/nbt.2459 описывают трансдукцию T-клеток с помощью CAR, содержащих область активации сигнала (CD3-дзета-цепь), которая целенаправленно воздействует на первый антиген и химерный костимулирующий рецептор (CCR), содержащий как CD28, так и 4-1ВВ костимулирующие области, которые целенаправленно воздействуют на второй антиген. Эти две конструкции связываются с их соответствующими антигенами с различной аффинностью, что приводит к эффекту "обнаружения опухоли", который может повысить специфичность терапии с целью снижения побочных эффектов.
Желательно разработать системы, в которых Т-клетки могут поддерживаться в состоянии, в котором они могут расти, продуцировать цитокины и доставлять сигнал уничтожения через несколько повторных циклов стимуляции с помощью антиген-экспрессирующих опухолевых клеток-мишеней. Обеспечение субоптимальной костимуляции приводит к тому, что Т-клетки быстро теряют эти эффекторные функции при повторной стимуляции, входя в состояние, известное как "анергия". Если Т-клетки с CAR последовательно стимулируются повторно in vitro, они постепенно теряют эффекторные свойства (например, продукцию IL-2, способность к пролиферации) и дифференцируются, чтобы стать более эффектор-подобными, другими словами, с меньшей вероятностью проявляют эффекты костимуляции. Это является нежелательным для иммунотерапии рака, поскольку более дифференцированные клетки, как правило, обычно имеют меньшую продолжительность жизни и сниженную способность претерпевать дальнейший рост/активацию, когда их многократно стимулируют в микроокружении опухоли.
Краткое описание изобретения
Авторы настоящего изобретения обнаружили, что эффективные ответы Т-клеток могут генерироваться с использованием комбинации конструкций, в которой множественные костимулирующие области расположены в различных конструкциях.
В соответствии с первым аспектом настоящего изобретения предусматривается иммунореактивная клетка, экспрессирующая
(i) химерный антигенный рецептор второго поколения, содержащий
(a) сигнальную область;
(b) костимулирующую сигнальную область;
(c) трансмембранный домен и
(d) связывающий элемент, который специфически взаимодействует с первым эпитопом на целевом антигене; а также
(ii) химерный костимулирующий рецептор, содержащий
(e) костимулирующую сигнальную область, которая отличается от области (b);
(f) трансмембранный домен и
(g) связывающий элемент, который специфически взаимодействует со вторым эпитопом на целевом антигене.
Авторы настоящего изобретения обнаружили, что эффективность этой системы является хорошей и, в частности, может быть лучше, чем эффективность, достигнутая с использованием традиционных CAR третьего поколения, имеющих схожие элементы. Конструкции типа по настоящему изобретению можно назвать параллельными химерными активирующими рецепторами” или "pCAR".
Кроме того, пролиферация клеток, их способность поддерживать свою цитотоксическую активность и высвобождение IL-2 поддерживаются в течение многих повторных циклов стимуляции антиген-экспрессирующими опухолевыми клетками.
Не ограничиваясь теорией, конфигурация элементов в pCAR может способствовать активности. Например, по определению один из костимулирующих модулей в CAR 3-го поколения должен быть удален от своего естественного местоположения вблизи внутреннего слоя плазматической мембраны. Это может привести к тому, что он не будет нормально передавать сигнал из-за нарушения доступа к облигатным связанным с мембраной молекулам-партнерам. В качестве альтернативы, тесное сближение 2-х костимулирующих сигнальных модулей в CAR 3-го поколения может привести к возникновению стерических проблем, препятствуя полному задействованию одного или нескольких последовательных сигнальных путей. Обе эти проблемы избегаются в конфигурации по настоящему изобретению. Оба сигнальных фрагмента (b) и (е) могут быть слиты непосредственно в трансмембранный домен, гарантируя, что они оба прилегают к плазматической мембране внутри клетки. Кроме того, они могут располагаться на отдельных участках внутри клетки, чтобы они не взаимодействовали друг с другом стерически.
Подходящие иммунореактивные клетки для применения в первом аспекте настоящего изобретения включают Т-клетки, такие как цитотоксические Т-клетки, Т-клетки-хелперы или регуляторные Т-клетки и естественные клетки-киллеры (NK). В частности, иммунореактивная клетка представляет собой Т-клетку.
Подходящие элементы (а), приведенные выше, могут включать любую подходящую сигнальную область, включая любую область, содержащую иммунорецепторный тирозиновый активирующий мотив (ITAM), как описано, например, в Love et al. Cold Spring Harbor Perspect. Biol 2010 2(6)1 a002485. В конкретном варианте осуществления сигнальная область содержит внутриклеточный домен CD3-[дзета]-цепи человека, как описано, например, в патенте США №7446190, или его вариант.
В частности, она содержит домен, который охватывает аминокислотные остатки 52-163 полноразмерной CD3-дзета-цепи человека. Он имеет ряд полиморфных форм (например, Sequence ID: gb|AAF34793.1 и gb|ААА60394.1), которые показаны соответственно как SEQ ID NO: 1 и 2:
RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR (SEQ ID NO: 1)
RVKFSRSAEPPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR (SEQ ID NO: 2)
Используемый в данном документе термин "вариант" относится к полипептидной последовательности, которая представляет собой встречающуюся в природе полиморфную форму основной последовательности, а также синтетические варианты, в которых одна или несколько аминокислот в пределах цепи вставлены, удалены или заменены. Однако вариант обеспечивает биологический эффект, который аналогичный эффекту основной последовательности. Например, упомянутый выше вариант будет действовать так же, как и внутриклеточный домен CD3-[дзета]-цепи человека. Аминокислотные замены можно рассматривать как "консервативные", где аминокислоту заменяют другой аминокислотой в том же классе с широко подобными свойствами. Неконсервативные замены заключаются в замене аминокислот аминокислотами другого типа или класса.
Классы аминокислот определяются следующим образом.
Как хорошо известно специалистам в данной области техники, изменение первичной структуры пептида посредством консервативной замены не может существенно изменить активность этого пептида, поскольку боковая цепь аминокислоты, которая вставлена в последовательность, может быть способна образовывать аналогичные связи и контакты также как боковая цепь аминокислоты, которая была замещена. Это происходит даже тогда, когда замена находится в области, которая является существенно важной для определения конформации пептида.
Неконсервативные замены также могут быть возможны при условии, что они не прерывают функцию полипептида, описанную выше. В широком смысле, меньше неконсервативных замен будет возможно без изменения биологической активности полипептидов.
В целом, варианты будут иметь аминокислотные последовательности, которые будут по меньшей мере на 70%, например, по меньшей мере на 71%, 75%, 79%, 81%, 84%, 87%, 90%, 93%, 95%, 96% или 98% идентичны основной последовательности, например SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 2. Идентичность в этом контексте может быть определена с использованием компьютерной программы BLASTP с SEQ ID NO: 2 или фрагмента, в частности фрагмента, описанного ниже, в качестве основной последовательности. Программное обеспечение BLAST доступно по адресу http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi (доступ от 12 марта 2009 г.).
Костимулирующая сигнальная последовательность (b) подходящим образом расположена между трансмембранным доменом (с) и сигнальной областью (а) и удалена от связывающего элемента (d). Аналогично, костимулирующая сигнальная последовательность (е) соответствующим образом расположена рядом с трансмембранным доменом (f) и удалена от связывающего элемента (g).
Подходящие костимулирующие сигнальные области для применения в качестве элементов (b) и (е), приведенных выше, также хорошо известны из уровня техники и включают членов семейства B7/CD28, таких как В7-1, В7-2, В7-Н1, В7-Н2, В7-Н3, В7-Н4, В7-Н6, В7-Н7, BTLA, CD28, CTLA-4, Gi24, ICOS, PD-1, PD-L2 или PDCD6; или белки семейства ILT/CD85, такие как LILRA3, LILRA4, LILRB1, LILRB2, LILRB3 или LILRB4; или членов суперсемейства фактора некроза опухоли (TNF), таких как 4-1ВВ, BAFF, BAFF R, CD27, CD30, CD40, DR3, GITR, HVEM, LIGHT, лимфотоксин-альфа, ОХ40, RELT, TACI, TL1A, TNF-альфа или TNF RII; или членов семейства SLAM, таких как 2В4, BLAME, CD2, CD2F-10, CD48, CD58, CD84, CD229, CRACC, NTB-A или SLAM; или членов семейства TIM, таких как TIM-1, TIM-3 или TIM-4; или другие костимулирующие молекулы, такие как CD7, CD96, CD160, CD200, CD300a, CRTAM, DAP12, Dectin-1, DPPIV, EphB6, интегрин альфа-4 бета-1, интегрин альфа-4 бета-7/LPAM-1, LAG-3 или TSLP R.
Выбор костимулирующих сигнальных областей может быть определен в зависимости от конкретного применения, предназначенного для трансформированных клеток. В частности, костимулирующие сигнальные области, выбранные для (b) и (е), приведенных выше, являются такими, которые могут работать совместно или синергически вместе. Например, костимулирующие сигнальные области для (b) и (е) могут быть выбраны из CD28, CD27, ICOS, 4-1ВВ, ОХ40, CD30, GITR, HVEM, DR3 или CD40.
В конкретном варианте осуществления один из (b) или (е) представляет собой CD28, а другой - 4-1ВВ или OX40.
В конкретном варианте осуществления (b) представляет собой CD28.
В другом конкретном варианте осуществления (е) представляет собой 4-1ВВ или ОХ40 и, в частности, представляет собой 4-1ВВ. В другом варианте осуществления (е) представляет собой CD27.
Трансмембранные домены (с) и (f), приведенных выше, могут быть одинаковыми или различными, но, в частности, являются различными, чтобы обеспечить разделение конструкций на поверхности клетки. Выбор различных трансмембранных доменов может также повысить стабильность вектора, поскольку включение прямой повторяющейся последовательности нуклеиновой кислоты в вирусном векторе делает его подверженным реаранжировке с удалением последовательностей между прямыми повторами. Если трансмембранные домены (с) и (f) являются одинаковыми, этот риск можно уменьшить путем модификации или "неоднозначности" кодонов, выбранных для кодирования одной и той же последовательности белка.
Подходящие трансмембранные домены известны из уровня техники и включают, например, трансмембранные домены CD8α, CD28, CD4 или CD3z.
Когда костимулирующая сигнальная область содержит CD28, описанный выше, трансмембранный домен CD28 представляет собой подходящий вариант. Белок с полноразмерным CD28 представляет собой белок из 220 аминокислот SEQ ID NO: 3
MLRLLLALNLFPSIQVTGNKILVKQSPMLVAYDNAVNLSCKYSYNLFSREFRASLHKGLDSAVEVCVVGNYSQQLQVYSKTGFNCDGKLGNESVTFYLQNLYVNQTDIYFCKIEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAPIIPWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS (SEQ ID NO: 3),
где трансмембранный домен показан жирным шрифтом.
В частности, одна из костимулирующих сигнальных областей основана на шарнирной области и, соответственно, трансмембранном домене и эндодомене CD28. В частности, который содержит аминокислоты 114-220 SEQ ID NO: 3, показанные ниже как SEQ ID NO: 4.
IEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS (SEQ ID: NO: 4)
В конкретном варианте осуществления одна из костимулирующих сигнальных областей (b) или (е), приведенных выше, представляет собой модифицированную форму SEQ ID NO: 4, которая включает метку c-myc SEQ ID NO: 5.
Метка c-myc хорошо известна и представлена в SEQ ID NO: 5.
EQKLISEEDL (SEQ ID NO: 5)
Метка c-myc может быть добавлена в костимулирующую сигнальную область (b) или (е) путем введения в эктодомен или путем замены области в эктодомене, которая, следовательно, находится в области аминокислот 1-152 SEQ ID NO: 3.
В особенно предпочтительном варианте осуществления метка c-myc заменяет мотив MYPPPY в последовательности CD28. Этот мотив представляет собой потенциально опасную последовательность. Он отвечает за взаимодействие между CD28 и его природными лигандами, CD80 и CD86, таким образом, он обеспечивает возможность нецелевой токсичности, когда Т-клетки с CAR встречаются с клеткой-мишенью, которая экспрессирует любой из этих лигандов. Посредством замены этого мотива на последовательность метки, описанную выше, уменьшается потенциал для нежелательных побочных эффектов.
Таким образом, в конкретном варианте осуществления костимулирующая сигнальная область (b) конструкции представлена в SEQ ID NO: 6
IEVEQKLISEEDLLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS (SEQ ID NO: 6)
Кроме того, включение эпитопа c-myc означает, что облегчается обнаружение Т-клеток с CAR с использованием моноклонального антитела. Это очень полезно, поскольку проточное цитометрическое обнаружение оказалось ненадежным при использовании некоторых доступных антител.
Кроме того, предоставление эпитопной метки c-myc может облегчать антиген-независимое размножение целевых Т-клеток с CAR, например, путем перекрестного сшивания CAR с использованием соответствующего моноклонального антитела либо в растворе, либо иммобилизованного на твердую фазу (например, мешок).
Более того, экспрессия эпитопа для антитела к c-myc человека, 9е10, в вариабельной области TCR, как было показано ранее, является достаточной для обеспечения опосредованной антителом и опосредованной комплементом цитотоксичности как in vitro, так и in vivo (Kieback et al. (2008) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 105(2) 623-8). Таким образом, предоставление таких эпитопных меток также может быть использовано в качестве "системы самоубийства", при которой антитело можно использовать для истощения Т-клеток с CAR in vivo в случае токсичности.
Связывающие элементы (d) и (g) будут различными и будут связывать одинаковые, перекрывающиеся или различные эпитопы. В конкретном варианте осуществления первый и второй эпитопы ассоциированы с одним и тем же рецептором или антигеном. Таким образом, первый и второй эпитопы, описанные выше, могут в некоторых случаях быть одинаковыми или перекрываться, так что связывающие элементы (d) и (g) будут конкурировать за их связывание. В качестве альтернативы, первый и второй эпитопы могут быть различными и быть ассоциированными с одинаковыми или различными антигенами в зависимости от конкретной предусмотренной терапии. В одном варианте осуществления антигены являются различными, но могут быть ассоциированы с одним и тем же заболеванием, таким как одна и та же специфическая форма рака.
Используемый здесь термин "антиген" относится к любому члену конкретной связывающей пары, которая будет связываться со связывающими элементами. Таким образом, этот термин включает рецепторы на клетках-мишенях.
Таким образом, подходящими связывающими элементами (d) и (g) могут являться любые элементы, которые обеспечивают pCAR возможностью распознавать мишень, представляющую интерес. Мишенью, на которую направлены pCAR по настоящему изобретению, может являться любая мишень, представляющая клинический интерес, к которой было бы желательно индуцировать ответ Т-клетки. Это включает маркеры, ассоциированные с раком различных типов, в том числе, например, один или несколько рецепторов ErbB или интегрин αvβ6 маркеры, ассоциированные с раком предстательной железы (например, с использованием связывающего элемента, который связывается с простато-специфическим мембранным антигеном(PSMA)), раком молочной железы (например, с использованием связывающего элемента, который целенаправленно воздействует на Her-2 (также известный как ErbB2)) и нейробластомами (например, с использованием связывающего элемента, который целенаправленно воздействует на GD2), меланомами, мелкоклеточной или немелкоклеточной карциномой легкого, саркомами и опухолями мозга. В конкретном варианте осуществления мишень представляет собой один или несколько димеров ErbB, описанных выше, или рецептор колониестимулирующего фактора-1 (CSF-1R) или интегрин αvβ6, все из которых вовлечены в несколько солидных опухолей.
Связывающие элементы, используемые в pCAR по настоящему изобретению, могут включать антитела, которые распознают выбранную мишень. Для удобства, антитело, используемое в качестве связывающего элемента, предпочтительно представляет собой одноцепочечное антитело (scFv) или однодоменное антитело от верблюда, человека или других видов. Одноцепочечные антитела можно клонировать из V-области генов гибридомы, специфических в отношении целевой мишени. Получение таких гибридом стало обычной процедурой, и в данном документе процедуру не будут повторять. Методика, которая может быть использована для клонирования вариабельной области тяжелой цепи (VH) и вариабельной области легкой цепи (VL), была описана в Orlandi et al., Proc. Natl Acad. Sci. (США) 86: 3833-3837 (1989). Коротко, мРНК выделяют из линии клеток гибридомы и обратно транскрибируют в комплементарную ДНК (кДНК), например, используя набор для полимеразной цепной реакции с обратной транскриптазой (RT-PCR). Используют последовательность-специфические праймеры, соответствующие последовательности генов VH и VL. Анализ последовательности клонированных продуктов и сравнение с известной последовательностью генов VH и VL можно использовать, чтобы показать, что клонированный ген VH соответствует ожиданиям. Гены VH и VL затем соединяют друг с другом, например, с использованием олигонуклеотида, кодирующего линкер (gly4-ser)3.
В качестве альтернативы, связывающий элемент pCAR может включать лиганды, такие как пептид T1E (связывает гомо- и гетеродимеры ErbB), колониестимулирующий фактор-1 (CSF-1) или IL-34 (оба связываются с рецептором CSF-1). Пептид T1E представляет собой химерный слитый белок, состоящий из всего зрелого белка EGF человека, за исключением пяти последних N-концевых аминокислот (аминокислоты 971-975 предшественника про-эпидермального фактора роста (NP_001954.2)), которые были заменены семью последним N-концевым аминокислотам зрелого белка TGF-α человека (аминокислоты 40-46 альфа-изоформы 1 про-трансформирующего фактора роста (NP_003227.1)).
В другом варианте осуществления связывающий элемент pCAR включает интегрин αvβ6-специфичное связывающее средство. Интегрин αvβ6 в настоящее время рассматривается как мишень при раке, поскольку было установлено, что его экспрессия сильно повышена при многих типах рака. αvβ6 был идентифицирован как рецептор вируса ящура (FMDV) in vitro путем связывания посредством мотива RGD в вирусном капсидном белке VP1. В результате, как описано, например, в патенте США №8383593, ряд пептидов, полученных из FMDV и, в частности, пептиды, происходящие из белка VP1 из FMDV и содержащие мотив RGD, показали повышенную связывающую способность и специфичность связывания. В частности, эти пептиды содержат мотив последовательности
RGDLX5X6L (SEQ ID NO: 7) или
RGDLX5X6I (SEQ ID NO: 8),
где LX5X6L или LX5X6I содержатся в пределах альфа-спиральной структуры, где X5 и X6 представляют собой остатки, обеспечивающие образование спирали, которые имеют конформационное предпочтение, превышающее 1,0, для нахождения в середине [альфа]-спирали (из Creighton, 1993 и Расе CN и Scholtz JM (1998), Biophysical Journal, том 75, страницы 422-427). В частности, такие остатки независимо выбраны из группы, состоящей из Glu, Ala, Leu, Met, Gln, Lys, Arg, Val, Ile, Trp, Phe и Asp.
Конкретные примеры таких последовательностей включают SEQ ID NO: 9-11 или их варианты:
YTASARGDLAHLTTTHARHL (SEQ ID NO: 9)
GFTTGRRGDLATIHGMNRPF (SEQ ID NO: 10)
или
NAVPNLRGDLQVLAQKVART (SEQ ID NO: 11)
Эти пептиды могут образовывать определенную группу связывающих элементов для CAR по настоящей заявке.
Для отдельных злокачественных опухолей, таких как лимфома Ходжкина и некоторые виды рака молочной железы, двумя природными лигандами являются CSF-1 и IL-34, и они образуют особенно подходящие связывающие элементы для (d) и (g). Тем не менее, они связываются с различной аффинностью. Аффинность связывания может влиять на наблюдаемую активность. В этом случае может быть полезным обеспечить, чтобы связывающий элемент с более низкой аффинностью связывания использовали в качестве связывающего элемента (b) и чтобы элемент с более высокой аффинностью связывания использовали в качестве связывающего элемента (g). В частности, в варианте осуществления относительная аффинность CAR второго поколения (i) в отношении его родственной мишени ниже, чем у партнерского химерного костимулирующего рецептора на основе TNFR (ii). Это не исключает возможности использования фрагментов с высокой или низкой аффинностью в каждой позиции при условии сохранения этого отношения относительной аффинности. Таким образом, в случае настоящего изобретения в конкретном варианте осуществления связывающий элемент (b) представляет собой CSF-1, который имеет относительно низкую аффинность связывания, тогда как связывающий элемент (g) содержит IL-34, который имеет более высокую аффинность связывания.
Соответственно связывающий элемент ассоциирован с лидерной последовательностью, которая облегчает экспрессию на поверхности клетки. Многие лидерные последовательности известны из уровня техники, и они включают лидерную последовательность рецептора макрофагального колониестимулирующего фактора (FMS), или лидерную последовательность CD124.
В дополнительном варианте осуществления клетки, экспрессирующие pCAR, сконструированы для козкспрессии химерного рецептора цитокина, в частности 4αβ-химерного рецептора цитокина. В 4αβ эктодомен α-цепи рецептора IL-4 соединяется с трансмембранным доменом и эндодоменом β-цепи рецептора IL-2/15. Это обеспечивает селективное размножение и обогащение генетически сконструированных Т-клеток ex vivo посредством культивирования этих клеток в подходящей поддерживающей среде, которая в случае 4αβ, будет включать IL-4 в качестве единственной поддержки цитокинов. Аналогично, система может использоваться с химерным рецептором цитокина, в котором эктодомен α-цепи рецептора IL-4 соединяется с трансмембранным доменом и эндодоменом другого рецептора, который естественно связан с цитокином, который также связывается с общей γ цепью.
Как обсуждалось, эти клетки пригодны в терапии для стимулирования опосредованного Т-клетками иммунного ответа в отношении популяции клеток-мишеней. Таким образом, второй аспект настоящего изобретения предусматривает способ стимуляции опосредованного Т-клетками иммунного ответа в отношении популяции клеток-мишеней у нуждающегося в этом пациента, при этом указанный способ предусматривает введение пациенту популяции иммунореактивных клеток, описанных выше, где связывающие элементы (d) и (g) являются специфическими в отношении клетки-мишени.
В третьем аспекте настоящего изобретения предусматривается способ получения иммунореактивной клетки по любому из предыдущих пунктов, причем указанный способ предусматривает трансдуцирование клетки первой нуклеиновой кислотой, кодирующей CAR структуры (i), определенной выше; а также второй нуклеиновой кислотой, кодирующей CAR структуры (ii), определенной выше.
В частности, в этом способе лимфоциты пациента трансдуцируются нуклеиновыми кислотами, кодирующими CAR (i) и (ii). В частности, Т-клетки подвергают генетической модификации, например, с помощью ретровирус-опосредованной трансдукции, для введения нуклеиновых кислот, кодирующих CAR, в геном Т-клетки-хозяина, за счет чего обеспечивая стабильную экспрессию CAR. Затем они могут быть повторно введены пациенту необязательно после размножения, чтобы обеспечить благоприятный терапевтический эффект. Когда клетки, такие как Т-клетки, сконструированы для коэкспрессии химерного рецептора цитокина, такого как 4αβ, стадия размножения может включать стадию культивирования ex vivo в среде, которая содержит цитокин, такой как среда, содержащая IL-4 в качестве единственной поддержки цитокинов в случае 4αβ. В качестве альтернативы, химерный рецептор цитокина может включать эктодомен α-цепи рецептора IL-4, присоединенный к эндодомену, используемому общим цитокином γ с определенными свойствами, таким как IL-7. В этой установке размножение клеток в IL-4 может привести к меньшей дифференциацией клеток, используя естественную способность IL-7 достигать этого эффекта. Таким образом, можно обеспечить селективное размножение и обогащение генетически сконструированных Т-клеток с желаемым состоянием дифференциации.
В четвертом аспекте настоящего изобретения предусматривается комбинация первой нуклеиновой кислоты, кодирующей CAR (i), описанной выше, и второй нуклеиновой кислоты, кодирующей CCR (ii), описанной выше. Как указано ранее, эта комбинация упоминается как pCAR. Подходящие последовательности для нуклеиновых кислот будут очевидны для специалиста. Последовательности могут быть оптимизированы для применения в требуемой иммунореактивной клетке. Однако в некоторых случаях, как обсуждалось выше, кодоны могут отличаться от оптимума или "неоднозначного", чтобы избежать повторяющихся последовательностей. Конкретные примеры таких нуклеиновых кислот будут кодировать предпочтительные варианты осуществления, описанные выше.
Для достижения трансдукции нуклеиновые кислоты в четвертом аспекте настоящего изобретения подходящим образом вводят в вектор, такой как плазмида или ретровирусный вектор. Такие векторы, в том числе плазмидные векторы, или клеточные линии, содержащие их, образуют дополнительный аспект настоящего изобретения.
Первая и вторая нуклеиновые кислоты или векторы, содержащие их, могут быть объединены в наборе, который поставляется с целью создания иммунореактивных клеток по первому аспекту настоящего изобретения in situ.
Параллельные химерные активирующие рецепторы (pCAR), кодируемые описанными выше нуклеиновыми кислотами, образуют дополнительный аспект настоящего изобретения.
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение теперь будет, в частности, описано в качестве примера со ссылкой на следующие фигуры, на которых
на фигуре 1 показана схематическая диаграмма, показывающая панель CAR и pCAR (называемая С34В и 34СВ), осуществляющая настоящее изобретение. Все CAR и pCAR коэкспрессировали в ретровирусном векторе SFG с 4αβ, химерном рецепторе цитокина, в котором эктодомен α-цепи рецептора IL-4 был слит с трансмембранным доменом и эндодоменом β-цепи рецептора IL-2. Применение 4αβ обеспечивает селективное обогащение и размножение генно-модифицированных Т-клеток посредством культивирования в IL-4, поскольку он вовлекает цепь гамма с (γс).
На фигуре 2 показаны результаты эксперимента с применением CAR, показанных на фигуре 1. Т-клетки (1×106 клеток), экспрессирующие эти CAR и pCAR (или нетрансдуцированные (UT) в качестве контроля), совместно культивировали in vitro в течение 24 часов с опухолевыми клетками T47D, которые экспрессируют (T47D-FMS) или не имеют (T47D) родственного целевого антигена (рецептор колониестимулирующего фактора-1 (CSF-1R), кодируемый c-fms). Оставшиеся жизнеспособные опухолевые клетки затем оценивали количественно посредством МТТ-анализа.
На фигуре 3 показан иллюстративный эксперимент, в котором Т-клетки, которые экспрессируют CAR и pCAR на фигуре 1 (или нетрансдуцированные Т-клетки в качестве контроля), подвергали последующим циклам стимуляции Ag в отсутствие экзогенного цитокина.
Стимуляцию обеспечивали посредством еженедельного культивирования на монослоях T47D FMS и в указанные промежутки времени подсчитывали количество Т-клеток.
На фигуре 4 показаны объединенные данные из 7 повторных экспериментов, аналогичных показанным на фигуре 3, что указывает на кратное размножение Т-клеток с CAR, которое происходило через неделю после каждого цикла стимуляции.
На фигуре 5 показаны иллюстративные анализы цитотоксичности, выполненные во время циклов стимуляции 2, 6, 9 и 12 в эксперименте, показанном на фигуре 3. Это следует из тестирования Т-клеток в отношении их способности уничтожать T47D FMS и немодифицированные монослои T47D (МТТ-анализ), через двадцать четыре часа после каждого цикла повторной стимуляции.
На фигуре 6 показаны результаты тестирования супернатанта, удаляемого из культур через один день после каждого цикла стимуляции, в отношении содержания IL-2 и IFN-γ с помощью ELISA.
На фигуре 7 показано создание ксенотрансплантантной модели in vivo CSF-1R-экспрессирующей анапластической крупноклеточной лимфомы, которая обеспечила проведение последующего тестирования противоопухолевой активности CAR и pCAR-сконструированных Т-клеток. Модель была создана с использованием клеток K299, сконструированных для экспрессии люциферазы светлячков (luc) и красного флуоресцентного белка (RFP). На фигуре 7А показано образование опухоли после внутривенной инъекции указанных доз клеток K299 luc, количественно определяемых с помощью биолюминесцентной визуализации (BLI). Иллюстративные изображения BLI показаны на фигуре 7В у мышей, которые получили 2 миллиона опухолевых клеток. Показана экспрессия опухолевых клеток RFP+ (фигура 7С) в указанных тканях, что свидетельствует о том, что опухоли образовались только в лимфатических узлах этой модели. Экспрессия CSF-1R на пяти иллюстративных опухолях лимфатических узлов показана на фигуре 7D.
На фигуре 8 показаны результаты терапевтических исследований, в которых клетки K299 luc были введены внутривенно мышам SCID Beige (n=9 на группу, разделенных на 2 отдельных эксперимента). Через 5 дней мышей обрабатывали Т-клетками с CAR. Объединенное биолюминесцентное излучение от опухолей показана на фигуре 8А. Биолюминесцентное излучение у отдельных мышей показана на фигуре 8В, а выживаемость мышей показана на фигуре 8С.
На фигуре 9 показаны значения веса животных, используемые в терапевтическом исследовании с течением времени.
На фигурах 10-13 показаны результаты анализа экспрессии "маркеров истощения" из Т-клеток, экспрессирующих двойные CAR (С34В) по настоящему изобретению, где на фигуре 10 показаны результаты анализа PD1; на фигуре 11 показаны результаты анализа TIM3; на фигуре 12 показаны результаты анализа LAG3, а на фигуре 13 показаны результаты анализа 2В4.
На фигуре 14 показана схематическая диаграмма панели CAR и конструкций, целенаправленно воздействующих на интегрин αvβ6, которые были получены, в том числе pCAR (названный SFG TIE-41BB/A20-28z), осуществляющий настоящее изобретение. A20-28z представляет собой CAR второго поколения, который нацелен на применение пептида А20, полученного из вируса ящура. А20 связывается с высокой аффинностью с αvβ6 и с 85-1000-кратной более низкой аффинностью с другими RGD-связывающими интегринами. C20-28z представляет собой подобранный контроль, в котором ключевые элементы А20 были мутированы для отмены интегрин-связывающей активности. Все CAR были коэкспрессированы с 4αβ, как описано на фигуре 1.
На фигуре 15 представлена серия гистограмм, полученных с помощью проточной цитометрии, иллюстрирующих экспрессию интегрина в клетках А375 puro и Pane1. Клетки окрашивали антителом к β6 (Biogen Idec) с последующим вторичным антителами к РЕ мыши, антителами к αvβ3 или антителами к αvβ5 (оба конъюгированные с АРС, Bio-Techne). Рамки устанавливали на основе только вторичных антител или изотипических контролей.
На фигуре 16 представлена серия графиков, иллюстрирующих цитотоксичность CAR, в том числе pCAR по настоящему изобретению, целенаправленно воздействующих на αvβ6. Т-клетки, зкспрессирующие указанные CAR и pCAR, совместно культивировали с αvβ6-негативными (Panel и А375 puro) или αvβ6-позитивными (Вхрс3 и А375 puro β6) опухолевыми клетками. Данные показывают среднее ± SEM из 2-7 независимых экспериментов, каждое из которых выполняли в трех повторах. *р<0,05; **р<0,01; ***р<0,001.
На фигуре 17 представлена серия графиков, показывающих получение IFN-γ посредством CAR, в том числе pCAR по настоящему изобретению, целенаправленно воздействующих на αvβ6. Т-клетки, зкспрессирующие указанные CAR и pCAR, совместно культивировали с αvβ6-негативными (Panel и А375 puro) или αvβ6-позитивными (Вхрс3 и А375 puro β6) опухолевыми клетками. Данные показывают среднее ± SEM из 5-6 независимых экспериментов, каждое из которых выполняли в двух повторах. *р<0,05; **р<0,01; ***р<0,001; ns - незначимый.
На фигуре 18 показаны результаты экспериментов по повторной стимуляции с применением CAR и pCAR-сконструированных Т-клеток, описанных выше, и указывающих способность Т-клеток A20-28z/T1E-41BB с pCAR переносить повторную стимуляцию антигеном, сопровождающуюся размножением Т-клеток и разрушением клеток-мишеней, которые экспрессируют (Вхрс3), или не экспрессируют (Pane1) интегрин αvβ6.
На фигуре 19 показаны результаты экспериментов по повторной стимуляции с использованием pCAR-сконструированных Т-клеток, в которых A20-28Z коэкспрессировали с Т1Е-41ВВ, T1E-CD27 или T1E-CD40, что обеспечило проведение сравнительной оценки совместной стимуляции дополнительными членами семейства рецепторов TNF. Контрольные Т-клетки являлись нетранедуцированными (NT), в то время как CAR содержали усеченные (tr) эндодомены. Т-клетки повторно стимулировали на клетках-мишенях, которые экспрессируют (Вхрс3), или не экспрессируют (Panc1) интегрин αvβ6, проводя сравнение с нестимулированными Т-клетками. В случае клеток Вхрс3 превосходное размножение (фигура 19А), сопровождающееся устойчивой цитотоксической активностью (фигура 19В), наблюдали с Т-клетками A20-28z/T1E-CD27. Напротив, с клетками Panel превосходное размножение (фигура 19А), сопровождающееся устойчивой цитотоксической активностью (фигура 19В), наблюдали с Т-клетками A20-28z/T1E-CD27. Эти данные показывают, что дополнительные члены семейства рецепторов TNF также могут оказывать совместную стимуляцию с применением формата pCAR.
Пример 1
Получали панели CAR, целенаправленно воздействующих на рецептор CSF-1 (кодируемую c-FMS), который является сверхэкспрессированым при лимфоме Ходжкина, анапластической крупноклеточной лимфоме и некоторых солидных опухолях, таких как трижды негативный рак молочной железы, и схематически проиллюстрированы на фигуре 1. Панель CAR включала CAR как второго, так и третьего поколения с любым из двух природных лигандов, CSF-1 или IL-34, в качестве целевых фрагментов. Хотя оба CSF-1 и IL-34 связываются с рецептором CSF-1, IL-34 связывается с гораздо более высокой аффинностью (в 34 раза выше, чем CSF-1).
Конструкции SFG и SFG CTr клонировали в ретровирусном векторе SFG в виде фрагментов NcoI/XhoI, обеспечивая то, что их стартовые кодоны находятся на участке встречающегося в природе сайта NcoI, ранее занятого удаленным геном env. Экспрессия гена достигается из длинного концевого повтора (LTR) вируса мышиного лейкоза Молони (MoMLV), который характеризуется промоторной активностью, и вирусная упаковка РНК обеспечивается сигналом упаковки MoML ψ, который фланкирован участком донора сплайсинга и участком акцептора сплайсинга.
Все остальные конструкции сконструировали и клонировали с использованием способа клонирования с использованием полимеразы и удлинением неполностью комплементарных праймеров (PIPE). Способ клонирования PIPE является альтернативой, основанной на ПЦР, традиционным способам клонирования, зависимым от рестрикционного фермента и лигирования. Это устраняет необходимость включения сайтов рестрикции, которые могут кодировать дополнительные нежелательные остатки в экспрессированные белки. Способ PIPE основан на неэффективности процесса амплификации в заключительных циклах реакции ПЦР, возможно, из-за снижения доступности dNTP, что приводит к получению частично одноцепочечных (PIPE) ПЦР-продуктов с выступающими 5'-концами. Для векторной линеаризации ПЦР использовали набор вектор-специфических праймеров и другой набор праймеров с перекрывающимися последовательностями 5'-векторного конца, которые затем использовали для вставки амплификации, образуя неполные продукты удлинения с помощью PIPE. На следующей стадии продукты PIPE смешивали и одноцепочечные перекрывающиеся последовательности отжигали и собирали в виде полной конструкции SFG CAR. Успешное клонирование подтверждали диагностическим рестрикционным расщеплением. Секвенирование ДНК выполняли на всех конструкциях для подтверждения того, что предсказываемая кодирующая последовательность присутствовала без каких-либо ПЦР-индуцированных мутаций (Source Bioscience, Великобритания).
Панель включала два химерных активирующих рецептора (pCAR) ''двойного нацеливания'', в которых CSF-1 или IL-34 соединены с 28z и 4-1ВВ, или наоборот. Комбинации pCAR двойного нацеливания затем стехиометрически коэкспрессировали в одной и той же популяции Т-клеток с использованием Thosea Asigna (Т) 2А-содержащего ретровирусного вектора. Один из этих CAR обозначали как ''С34В'' (CSF1-28Z плюс IL34-41BB), а другой называли ''34СВ'' (IL34-28z плюс CSF1-41BB).
В этих Т-клетках с CAR двойного нацеливания оба костимулирующих мотива (CD28/4-1BB) помещали в их естественное месторасположение вблизи мембраны, физически отделяли друг от друга, и коэкспрессировали в одной и той же Т-клетке.
Все CAR коэкспрессировали с IL-4-реактивным 4αβ рецептором с использованием дополнительного Т2А элемента в векторе. Это позволяет обогащать/размножать Т-клетки с использованием IL-4, что облегчает сравнение функции этих разнообразных популяций клеток после отбора.
Основное внимание в экспериментах заключалось в проверке поведения Т-клеток при повторной стимуляции с опухолевыми клетками-мишенями, которые либо экспрессируют, либо не имеют целевой рецептор FMS/CSF-1. В каждом цикле 1 миллион указанных размноженный с помощью IL-4 Т-клеток с CAR суспендировали в RPMI + человеческой АВ-сывороткой и культивировали с конфлюентным монослоем (24-луночная планшет) антиген-экспрессирующей мишени (T47D FMS) или мишени без антигена (T47D).
После этого, если Т-клетки с CAR выживали и уничтожали монослой, 1 миллион Т-клеток удаляли и повторно стимулировали аналогичным образом каждую неделю. Общее количество клеток было экстраполировано в каждый момент времени в зависимости от размножения Т-клеток, которое происходило в каждом недельном цикле.
Во всех этих экспериментах Т-клетки культивировали в отсутствие какого-либо экзогенного цитокина, такого как IL-2 или IL-4, поэтому им пришлось продуцировать свои собственные цитокины, чтобы выживать и размножаться. Продукцию цитокинов (IFN-γ и IL-2) измеряли с помощью ELISA в супернатантах, собранных из совместных культур Т-клеток/опухолевых клеток, обеспечивая второй маркер эффективной костимуляции.
Было обнаружено (фигура 2), что при их первом воздействии на монослой опухоли, который экспрессирует мишень (FMS-кодированный CSF-1-рецептор), все CAR, которые, как предполагается, будут уничтожать, делают это (объединенные данные из 12 экспериментов). Контролем являются UT (нетрансдуцированные), Р4 (целенаправленно воздействует на нерелевантный антиген, PSMA) и СТ4, в котором эндодомен усечен. Как и ожидалось, ни одна из Т-клеток с CAR не уничтожает опухолевые клетки, у которых отсутствует рецептор CSF-1 (T47D).
Иллюстративный эксперимент повторной стимуляции показан на фигуре 3. Объединенные данные повторной стимуляции из 7 экспериментов показаны на фигуре 4. В этом случае пролиферация в первом цикле была подобной для большинства конструкций, хотя целевые конструкции второго и третьего поколений, целенаправленно воздействующие на IL-34, продемонстрировали худший результат. Это может быть связано с тем, что аффинность в отношении фрагмента, целенаправленно воздействующего на IL-34, является слишком большой.
Однако в более поздних циклах комбинация двойного pCAR С34В (28z CAR второго поколения, целенаправленно воздействующий на CSF-1, коэкспрессируемый с костимулирующим мотивом 4-1ВВ, целенаправленно воздействующим на IL-34) последовательно становилась очевидно превосходящей.
В эксперименте, показанном на фигуре 3, супернатант собирали через 24 часа после каждого цикла повторной стимуляции и анализировали в отношении содержания цитокинов (IFN-γ и IL-2) с помощью ELISA. Процент жизнеспособности оставшихся опухолевых клеток измеряли посредством МТТ-анализа (иллюстративные примеры, показанные на фигуре 5). Результаты продукции цитокинов показаны на фигуре 6. Было обнаружено, что только Т-клетки с С34В CAR сохраняют способность продуцировать IL-2 на протяжении каждого цикла стимуляции. Это утрачивалось всеми другими комбинациями CAR после первого цикла. Устойчивое сохранение способности вырабатывать IL-2 через рекурсивную повторную стимуляцию обычно не наблюдается с Т-клетками с CAR, и это предполагает, что эта доставка двойной костимуляции в корне меняет дифференциацию этих клеток in vitro, задерживая начало анергии.
Также контролировали количество жизнеспособных Т-клеток после разрушения монослоя в последовательных циклах Ag-стимуляции, и результаты показаны на фигуре 5. После второго цикла повторной стимуляции все CAR, за исключением С34В, начинали терять способность достигать CSF-1R-зависимого уничтожения опухолевых клеток. Напротив, Т-клетки, которые экспрессируют С34В, сохраняют антиген-зависимую активность в этом цитотоксическом анализе до 13 повторяющихся циклов повторной стимуляции, но никогда не вызывают цитотоксичность против немодифицированных клеток T47D.
Кроме того, на этих Т-клетках с помощью проточной цитометрии также измеряли так называемые "маркеры истощения'' (PD1, TIM3, 2В4 и LAG3). Результаты показаны на фигурах 10-13. Как и ожидалось, процент Т-клеток, которые экспрессировали различные маркеры истощения, постепенно увеличивался на повторно стимулированных Т-клетках, но это не замедляло пролиферацию, разрушение опухолевых клеток или выделение цитокинов клетками С34В при стимуляции антигенами. Это говорит о том, что превосходящая функция С34В не является результатом отсроченной регуляции маркеров истощения.
Таким образом, подход pCAR по настоящему изобретению, по-видимому, поддерживает клетки в состоянии, благодаря которому они сохраняют реактивность к антигену через большее количество циклов повторной стимуляции. Имеются свидетельства того, что он может замедлить дифференциацию за пределами контролируемого состояния памяти и, как представляется, задерживает начало анергии, сохраняя при этом способность клеток продуцировать IL-2 после активации.
Пример 2
Анализ эффектов in vivo
Панель CAR, используемую в примере 1, описанном выше, тестировали в отношении противоопухолевой активности с использованием высокоагрессивной ксенотрансплантной модели in vivo, в которой рецептор-мишень CSF-1 экспрессируется на низких уровнях и в которой заболевание распространяется по всем лимфатическим узлам (фигура 7). Опухолевые клетки были помечены люциферазой светлячков, обеспечивая неинвазивный контроль тяжести заболевания.
Мышей SCID/Beige рандомизировали на 6 групп (9 животных на группу объединены в двух независимых экспериментах) и инокулировали внутривенно (IV) опухолевыми клетками 2×106 К299, повторно суспендированными в 200 мкл PBS. На 5-й день группы обрабатывали с помощью одного из терапевтических режимов, указанных ниже.
• Группа С4В: 20×106 Т-клеток с С4В IV
• Группа С34В: 20×106 Т-клеток с С34В IV
• 43428Bz: 20×106 Т-клеток с 43428Bz IV
• Группа 34СВ: 20×106 Т-клеток с 34СВ IV
• Группа UT (нетрансдуцированные): 20×106 нетрансдуцированных Т-клеток IV
• Группа NT (необработанные): 200 мкл PBS IV
Рост опухоли контролировали с использованием биолюминесцентной визуализации (BLI) в соответствующие моменты времени на протяжении всего исследования.
Результаты показаны на фигуре 8. Опять же, наиболее эффективной системой была система pCAR, С34В, обозначенная более низким средним излучением BLI (фигуры 8А-В), задержкой развития опухоли или регрессии опухоли, что приводит к длительному выживанию мышей (фигура 8С).
Животных взвешивали на протяжении всего эксперимента, и значительная токсичность не отмечалась (фигура 9).
Пример 3
Выбор целевых фрагментов для конструирования pCAR, которые вызывают активацию Т-клеток αvβ6-зависимым образом.
Получали панели CAR, которые целенаправленно воздействуют на интегрин αvβ6 отдельно или вместе с расширенным семейством ErbB и схематично показаны на фигуре 14. Связывающим элементом, используемым в этом случае, являлся пептид А20 (SEQ ID NO: 11), полученный из GH-петли капсидного белка VP1 вируса ящура (серотип 01 BFS) (США 8927501). Его размещали ниже сигнального пептида CD124 и сливали с эндодоменами CD28 и с образованием CAR 2-го поколения. Получали контроль содержащий аналогичную конструкцию, но с рандомизированным нацеливающим пептидом (названным С20), в котором ключевой мотив RGDL был заменен на АААА. Второй контроль содержал А20, слитый с усеченным эндодоменом CD28 (А20-Tr).
Для создания pCAR по настоящему изобретению (названный TIE-41BB/A20-28z), A20-28z был коэкспрессирован с химерным костимулирующим рецептором, содержащим целевой пептид pan-ErbB (T1E), слитый с CD8α-трансмембранным доменом и 41ВВ эндодоменом.
Там, где это указано, CAR коэкспрессировали с 4αβ химерным рецептором цитокинов, чтобы обеспечить опосредованное IL-4 обогащение in vitro. Эквимолярная коэкспрессия IL-4-реактивного 4αβ химерного рецептора цитокина, в котором α-эктодомен рецептора IL-4 слит с трансмембранным доменом и эндодоменом β-цепи общего рецептора IL-2/15, была достигнута с использованием Thosea Asigna (Т) 2А рибосомального пропускающего пептида. Эти химерные молекулы экспрессировали в Т-клетках человека посредством ретровирусного переноса гена.
Паттерн экспрессии интегрина в клеточных линиях рака А375 оценивали с использованием проточной цитометрии (фигура 15) и их разделяли на αvβ6-отрицательные (Panel и А375 puro) или αvβ6-положительные (Вхрс3 и А375 puro β6) опухолевые клетки. Эти клетки совместно культивировали с Т-клетками с CAR при соотношении эффектор : мишень 1:1 в течение либо 24, либо 28, либо 72 часов, после чего цитотоксичность оценивали с помощью МТТ-анализа и экспрессировали относительно необработанных опухолевых клеток. Результаты показаны на фигуре 16.
Эти данные показывают, что Т-клетки с CAR A20-28z уничтожают все клетки-мишени, которые экспрессируют интегрин αvβ6 (Вхрс3 и А375 β6 puro), но сохраняют мишени, у которых отсутствует этот интегрин (Panel и А375 puro). Во-вторых, контрольные CAR C20-28z и А20-Tr являются неактивными в этих анализах. В-третьих, Т-клетки, которые экспрессируют pCAR T1E-41BB/A20-28z, вызывают эффективное уничтожение клеток-мишеней, которые экспрессируют интегрин αvβ6 (Вхрс3 и А375 β6 puro). Все эти результаты соответствуют ожиданиям. Примечательно, однако, что Т-клетки, которые экспрессируют pCAR Т1Е-41BB/A20-28z, также вызывают уничтожение клеток-мишеней, у которых отсутствует αvβ6 (Panel и А375 puro). Это указывает на то, что в конфигурации pCAR способность пептида А20 связывать интегрины без αvβ6 с низкой аффинностью является достаточной для активации этих сконструированных Т-клеток.
Затем оценивали продукцию IFN-γ в pCAR и контрольных сконструированных Т-клетках. Опухолевые клетки, у которых отсутствовали αvβ36 (Panel и A375 puro) или которые экспрессировали αvβ6 (Вхрс3 и А375 puro β6), совместно культивировали с генетически сконструированными Т-клетками при соотношении эффектор : мишень 1:1 и супернатант собирали после 24, 48 или 72 часов. Уровни IFN-γ определяли количественно с помощью ELISA (eBioscience). Результаты показаны на фигуре 17. Как и ожидалось, контроли не образовывали значительных количеств IFN-γ, в то время как Т-клетки с CAR AB20-28z высвобождали IFN-γ при культивировании с αvβ6-положительными (Вхрс3 и А375 puro β6) опухолевыми клетками. Примечательно, что Т-клетки, которые экспрессируют pCAR по настоящему изобретению, TIE-41BB/A20z, продуцируют больше IFN-γ, чем Т-клетки A20-28z при культивировании с αvβ6-положительными (Вхрс3) опухолевыми клетками. Кроме того, Т-клетки TIE-41BB/A20z+ продуцировали IFN-γ при культивировании с αvβ6-негативными (Pane1 и А375 puro) опухолевыми клетками. Еще раз это демонстрирует, что в конфигурации pCAR низкоаффинное связывание пептида А20 с интегринами без αvβ6 является достаточным для инициации активации этих сконструированных Т-клеток.
Затем популяции Т-клеток с CAR повторно стимулировали раз в две недели в отсутствие поддержки IL-2 на опухолевых клетках Panel (αvβ6-отрицательные) или Вхрс3 (αvβ6-положительные). Опухолевые клетки совместно культивировали с Т-клетками-CAR, полученными от пациента с аденокарциномой протоков поджелудочной железы (PDAC) при соотношении эффектор : мишень 1:1 (фигура 18). Т-клетки первоначально добавляли при 2×105 клеток/лунка и подсчитывали через 72 часа после совместного культивирования для оценки размножения (верхние панели). Цитотоксичность оценивали через 72 часа после добавления Т-клеток с помощью МТТ-анализа (нижние панели). Если было достаточное количество Т-клеток (2×105), Т-клетки повторно стимулировали на свежем монослое опухоли, и процесс повторяли позже еще через 72 часа.
Результаты показаны на фигуре 18. Это иллюстрирует, что Т-клетки A20-28z/T1E-41BB+ подвергали нескольким циклам размножения, сопровождаемым высвобождением IL-2 (данные не показаны) и разрушением клеток αvβ6+ Вхрс3. И снова их также подвергли нескольким циклам размножения, сопровождаемым высвобождением IL-2 и разрушением опухолевых клеток Panel.
В целом результаты ясно показали, что pCAR, содержащий A20-28z/T1E-41ВВ, проявляет улучшенную функциональность in vitro по сравнению с CAR 2-го поколения, целенаправленно воздействующим на αvβ6. Кроме того, Т-клетки A20-28z/T1E-41BB+ также подвергали активации с помощью клеток Panel или А375 puro, которые экспрессируют от минимального до невыявляемого уровни этого интегрина. Принимая во внимание полученные данные с использованием С34В pCAR (примеры 1 и 2), это указывает на то, что конфигурация pCAR обеспечивает осуществление активации Т-клетки при последовательной повторной стимуляции, когда взаимодействие с высокой аффинностью связывания происходит с 41ВВ CCR, тогда как с более низкой аффинностью взаимодействия происходит с 28z CAR 2-го поколения.
Пример 4
Использование альтернативного члена семейства рецепторов TNF, CD27 для конструирования функционального pCAR.
Используя pCAR A20-28z/T1E-41BB в качестве исходного материала, сконструировали дополнительные pCAR, в которых модуль 41ВВ был заменен альтернативными членами семейства рецепторов TNF, а именно CD27 или CD40. Сконструировали контрольные pCAR, в которых эндодомены были усечены (tr). Клетки-мишени, зкспрессирующие (Вхрс3) или не имеющие (Panel) αvβ6, высевали при плотности 5×104 клеток на лунку 24-луночного планшета. Через 24 часа 5×104 Т-клеток с pCAR добавляли к клеткам-мишеням или в пустые лунки ("нестимулированные") без поддержки экзогенных цитокинов. Спустя еще 72 часа Т-клетки собирали из лунок и подсчитывали (фигура 19А). Проводили МТТ-анализ для определения процентной жизнеспособности оставшихся клеток-мишеней, сравнивая с контрольными клетками-мишенями, которые были высеяны без добавления Т-клеток (фигура 19В). Если Т-клетки пролиферировали после каждого цикла стимуляции, их повторно стимулировали на свежих клетках-мишенях, точно так же, как описано выше. Пролиферацию Т-клеток с pCAR (фигура 19А) и МТТ-анализ (фигура 19В) проводили через 72 часа, как и раньше. Повторяющуюся повторную стимуляцию Т-клеток с pCAR и оценку уничтожения клеток-мишеней продолжали таким образом, пока Т-клетки больше не пролиферировали в течение каждого 72-часового цикла.
Эти данные еще раз подтверждают превосходную функциональность А20-28z/T1E-41BB pCAR, когда Т-клетки стимулируются клетками-мишенями Panel, что указывает на устойчивую пролиферацию Т-клеток и уничтожение опухолевых клеток. Это обеспечивает дальнейшее подтверждение того, что связывание с низкой аффинностью пептида А20 с интегринами без αvβ6 является достаточным для инициации активации этих сконструированных Т-клеток. Примечательно, однако, что А20-28z/T1E-CD27 pCAR достигла наибольшего уровня пролиферации (фигура 19А) и продолжительного уничтожения опухолевых клеток (фигура 19В) при повторной стимуляции на αvβ6-экспрессирующих клетках Вхрс3. Напротив, pCAR на основе CD40 демонстрировали умеренную функцию в этих анализах. Вместе эти данные показывают, что ряд членов семейства рецепторов TNF можно использовать для разработки pCAR, которые демонстрируют превосходную функциональность, примером которой является CD27 или 41ВВ.
--->
SEQUENCE LISTING
<110> King's College London
<120> Therapeutic Agents
<130> P3052/WO
<150> GB1513540.3
<151> 2015-07-31
<160> 11
<170> BiSSAP 1.3.6
<210> 1
<211> 112
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 1
Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly
1 5 10 15
Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr
20 25 30
Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys
35 40 45
Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys
50 55 60
Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg
65 70 75 80
Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala
85 90 95
Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
100 105 110
<210> 2
<211> 112
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 2
Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Glu Pro Pro Ala Tyr Gln Gln Gly
1 5 10 15
Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr
20 25 30
Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys
35 40 45
Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys
50 55 60
Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg
65 70 75 80
Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala
85 90 95
Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
100 105 110
<210> 3
<211> 220
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 3
Met Leu Arg Leu Leu Leu Ala Leu Asn Leu Phe Pro Ser Ile Gln Val
1 5 10 15
Thr Gly Asn Lys Ile Leu Val Lys Gln Ser Pro Met Leu Val Ala Tyr
20 25 30
Asp Asn Ala Val Asn Leu Ser Cys Lys Tyr Ser Tyr Asn Leu Phe Ser
35 40 45
Arg Glu Phe Arg Ala Ser Leu His Lys Gly Leu Asp Ser Ala Val Glu
50 55 60
Val Cys Val Val Tyr Gly Asn Tyr Ser Gln Gln Leu Gln Val Tyr Ser
65 70 75 80
Lys Thr Gly Phe Asn Cys Asp Gly Lys Leu Gly Asn Glu Ser Val Thr
85 90 95
Phe Tyr Leu Gln Asn Leu Tyr Val Asn Gln Thr Asp Ile Tyr Phe Cys
100 105 110
Lys Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser
115 120 125
Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro
130 135 140
Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly
145 150 155 160
Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile
165 170 175
Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met
180 185 190
Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro
195 200 205
Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser
210 215 220
<210> 4
<211> 107
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 4
Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn
1 5 10 15
Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu
20 25 30
Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly
35 40 45
Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe
50 55 60
Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn
65 70 75 80
Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr
85 90 95
Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser
100 105
<210> 5
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> tag
<400> 5
Glu Gln Lys Leu Ile Ser Glu Glu Asp Leu
1 5 10
<210> 6
<211> 111
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> costimulatory signalling region
<400> 6
Ile Glu Val Glu Gln Lys Leu Ile Ser Glu Glu Asp Leu Leu Asp Asn
1 5 10 15
Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys
20 25 30
Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val
35 40 45
Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala
50 55 60
Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser
65 70 75 80
Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His
85 90 95
Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser
100 105 110
<210> 7
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic peptide
<220>
<221> SITE
<222> 5,6
<223> Xaa is any amino acid residue
<400> 7
Arg Gly Asp Leu Xaa Xaa Leu
1 5
<210> 8
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic peptide
<220>
<221> SITE
<222> 5,6
<223> Xaa is any residue
<400> 8
Arg Gly Asp Leu Xaa Xaa Ile
1 5
<210> 9
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic peptide
<400> 9
Tyr Thr Ala Ser Ala Arg Gly Asp Leu Ala His Leu Thr Thr Thr His
1 5 10 15
Ala Arg His Leu
20
<210> 10
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic peptide
<400> 10
Gly Phe Thr Thr Gly Arg Arg Gly Asp Leu Ala Thr Ile His Gly Met
1 5 10 15
Asn Arg Pro Phe
20
<210> 11
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic peptide
<400> 11
Asn Ala Val Pro Asn Leu Arg Gly Asp Leu Gln Val Leu Ala Gln Lys
1 5 10 15
Val Ala Arg Thr
20
<---
Claims (34)
1. Иммунореактивная клетка для лечения рака, экспрессирующая
(i) химерный антигенный рецептор второго поколения, содержащий
(a) сигнальную область;
(b) костимулирующую сигнальную область;
(с) трансмембранный домен и
(d) связывающий элемент, который специфически взаимодействует с первым эпитопом на целевом раковом антигене; а также
(ii) химерный костимулирующий рецептор, содержащий
(e) костимулирующую сигнальную область, которая отличается от области (b);
(f) трансмембранный домен и
(g) связывающий элемент, который специфически взаимодействует со вторым эпитопом на целевом раковом антигене,
где аффинность связывания связывающего элемента (d) не выше, чем аффинность связывания связывающего элемента (g); и
где иммунореактивная клетка выбрана из цитотоксической T-клетки, Т-клетки-хелпера и естественной клетки-киллера (NK).
2. Иммунореактивная клетка по п. 1, где сигнальная область (а) содержит внутриклеточный домен CD3-[дзета]-цепи человека или его вариант.
3. Иммунореактивная клетка по п. 1 или 2, где костимулирующие сигнальные области (b) и (e) выбраны из CD28, CD27, ICOS, 4-1BB, OX40, CD30, GITR, HVEM, DR3 или CD40.
4. Иммунореактивная клетка по п. 3, где один из (b) или (e) представляет собой CD28, а другой представляет собой 4-1BB или OX40.
5. Иммунореактивная клетка по п. 4, где (b) представляет собой CD28.
6. Иммунореактивная клетка по п. 3, где (b) представляет собой CD28 и (e) представляет собой 4-1BB или CD27.
7. Иммунореактивная клетка по любому из пп. 1-6, где трансмембранные домены (с) и (f) выбраны из трансмембранных доменов CD8α и CD28.
8. Иммунореактивная клетка по любому из пп. 1-7, где первый и второй эпитопы ассоциированы с одним и тем же раковым антигеном.
9. Иммунореактивная клетка по любому из пп. 1-8, которая коэкспрессирует химерный рецептор цитокина.
10. Иммунореактивная клетка по п. 9, где химерный рецептор цитокина представляет собой 4αβ.
11. Иммунореактивная клетка по любому из пп. 1-10, где по меньшей мере один из связывающего элемента (d) или связывающего элемента (g) является лигандом для димера ErbB, рецептора для колониестимулирующего фактора-1 (CSF-1R) или связывающим средством, специфическим в отношении интегрина αvβ6.
12. Иммунореактивная клетка по любому из пп. 1-11, где связывающий элемент (d) содержит CSF-1 и связывающий элемент (g) содержит IL-34.
13. Иммунореактивная клетка по любому из пп. 1-7 и 9-11, где связывающий элемент (d) представляет собой связывающее средство, специфическое в отношении интегрина αvβ6, которое является пептидом, содержащим мотив последовательности
RGDLX5X6L (SEQ ID NO: 7) или
RGDLX5X6I (SEQ ID NO: 8),
где LX5X6L или LX5X6I содержатся в пределах альфа-спиральной структуры, где X5 и X6 представляют собой остатки, обеспечивающие образование спирали, и связывающий элемент (g) представляет собой пептид TIE.
14. Иммунореактивная клетка по любому из пп. 1-13, где аффинность связывания связывающего элемента (d) ниже, чем связывающего элемента (g).
15. Способ получения иммунореактивной клетки по любому из пп. 1-14, при этом указанный способ предусматривает трансдуцирование клетки первой нуклеиновой кислотой, кодирующей CAR структуры (i), определенный в п. 1, а также второй нуклеиновой кислотой, кодирующей CCR структуры (ii), определенный в п. 1.
16. Способ по п. 15, где иммунореактивная клетка содержит химерный рецептор цитокина и где стадию размножения осуществляют в присутствии указанного цитокина.
17. Комбинация первой нуклеиновой кислоты, кодирующей CAR (i), определенный в п. 1, и второй нуклеиновой кислоты, кодирующей CCR (ii), определенный в п. 1, для получения иммунореактивной клетки по любому из пп. 1-14.
18. Вектор, содержащий комбинацию по п. 17, для получения иммунореактивной клетки по любому из пп. 1-14.
19. Комбинация векторов, содержащая комбинацию по п. 17, для получения иммунореактивной клетки по любому из пп. 1-14.
20. Способ стимуляции опосредованного Т-клетками иммунного ответа в отношении популяции клеток-мишеней у нуждающегося в этом пациента, при этом указанный способ предусматривает введение пациенту иммунореактивной клетки по любому из пп. 1-14, описанной выше, где связывающие элементы (d) и (g) являются специфическими в отношении клетки-мишени.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GBGB1513540.3A GB201513540D0 (en) | 2015-07-31 | 2015-07-31 | Therapeutic agents |
GB1513540.3 | 2015-07-31 | ||
PCT/GB2016/052324 WO2017021701A1 (en) | 2015-07-31 | 2016-07-28 | Therapeutic agents |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2747733C1 true RU2747733C1 (ru) | 2021-05-13 |
Family
ID=54062973
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2018105137A RU2747733C1 (ru) | 2015-07-31 | 2016-07-28 | Терапевтические средства |
Country Status (16)
Country | Link |
---|---|
US (5) | US10703794B2 (ru) |
EP (2) | EP3939992A1 (ru) |
JP (2) | JP7053037B2 (ru) |
KR (1) | KR102411571B1 (ru) |
CN (1) | CN107735407B (ru) |
AU (1) | AU2016303355B2 (ru) |
CA (1) | CA2993746A1 (ru) |
DK (1) | DK3328880T3 (ru) |
ES (1) | ES2883633T3 (ru) |
GB (1) | GB201513540D0 (ru) |
HK (1) | HK1256383A1 (ru) |
IL (1) | IL256511B (ru) |
MX (1) | MX2018001009A (ru) |
RU (1) | RU2747733C1 (ru) |
SG (1) | SG10201912416QA (ru) |
WO (1) | WO2017021701A1 (ru) |
Families Citing this family (28)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9511092B2 (en) | 2013-01-28 | 2016-12-06 | St. Jude Children's Research Hospital, Inc. | Chimeric receptor with NKG2D specificity for use in cell therapy against cancer and infectious disease |
SG11201609118RA (en) | 2014-05-15 | 2016-11-29 | Univ Singapore | Modified natural killer cells and uses thereof |
GB201513540D0 (en) | 2015-07-31 | 2015-09-16 | King S College London | Therapeutic agents |
GB201514874D0 (en) | 2015-08-20 | 2015-10-07 | Autolus Ltd | Cell |
WO2018102785A2 (en) | 2016-12-03 | 2018-06-07 | Juno Therapeutics, Inc. | Methods and compositions for use of therapeutic t cells in combination with kinase inhibitors |
EP3336107A1 (en) * | 2016-12-15 | 2018-06-20 | Miltenyi Biotec GmbH | Immune cells expressing an antigen binding receptor and a chimeric costimulatory receptor |
KR102312222B1 (ko) | 2016-12-22 | 2021-10-12 | 우니베르시따 델리 스투디 만냐 그레챠 카탄차로 | Cd43의 독특한 시알로글리코실화된 암-연관 에피토프를 표적으로 하는 모노클로날 항체 |
WO2018182511A1 (en) | 2017-03-27 | 2018-10-04 | National University Of Singapore | Stimulatory cell lines for ex vivo expansion and activation of natural killer cells |
EP3600356A4 (en) | 2017-03-27 | 2020-12-23 | National University of Singapore | ABBREVIATED NKG2D CHIMERIC RECEPTORS AND USES THEREOF IN IMMUNOTHERAPY WITH NATURAL KILLER CELLS |
AU2018275894A1 (en) | 2017-06-02 | 2019-12-12 | Juno Therapeutics, Inc. | Articles of manufacture and methods for treatment using adoptive cell therapy |
EP3658578A1 (en) * | 2017-07-26 | 2020-06-03 | Cellectis | Methods of antigen-dependent chimeric antigen receptor (car) immune cell selection |
CN109971724B (zh) * | 2017-12-28 | 2023-10-31 | 上海细胞治疗研究院 | 靶向ErbB受体家族且自表达PD-1抗体的CAR-T细胞及其用途 |
CN110615842B (zh) * | 2018-06-20 | 2023-05-09 | 上海隆耀生物科技有限公司 | 一种包含共刺激受体的嵌合抗原受体及应用 |
EP3587454A1 (en) * | 2018-06-27 | 2020-01-01 | Albert-Ludwigs-Universität Freiburg | Chimeric antigen receptors that bind to prostate specific membrane antigen |
GB201900858D0 (en) * | 2019-01-22 | 2019-03-13 | Price Nicola Kaye | Receptors providing targeted costimulation for adoptive cell therapy |
GB201902277D0 (en) | 2019-02-19 | 2019-04-03 | King S College London | Therapeutic agents |
MX2021010670A (es) | 2019-03-05 | 2021-11-12 | Nkarta Inc | Receptores de antigeno quimerico dirigidos a cd19 y usos de los mismos en inmunoterapia. |
US20220152103A1 (en) * | 2019-03-11 | 2022-05-19 | Leucid Bio Ltd | MUC1 PARALLEL CAR (pCAR) THERAPEUTIC AGENTS |
WO2021038036A1 (en) | 2019-08-28 | 2021-03-04 | King's College London | B CELL TARGETED PARALLEL CAR (pCAR) THERAPEUTIC AGENTS |
GB202003277D0 (en) | 2020-03-06 | 2020-04-22 | King S College London | Therapeutic agents |
WO2022020456A2 (en) * | 2020-07-21 | 2022-01-27 | Allogene Therapeutics, Inc. | Chimeric antigen receptors with enhanced signaling and activities and uses thereof |
WO2022036495A1 (en) | 2020-08-17 | 2022-02-24 | Utc Therapeutics Inc. | Lymphocytes-antigen presenting cells co-stimulators and uses thereof |
WO2022083668A1 (en) * | 2020-10-21 | 2022-04-28 | Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. | Use of a chimeric co-stimulatory receptor for cell therapy |
AU2022327766A1 (en) * | 2021-08-13 | 2023-12-14 | Ludwig-Maximilians-Universität München | Anti-csf1r car expressing lymphocytes for targeted tumor therapy |
CA3229493A1 (en) * | 2021-08-18 | 2023-02-23 | Legend Biotech Ireland Limited | Modified immune cells expressing tlr receptors |
AU2022387845A1 (en) | 2021-11-15 | 2024-05-23 | Neogene Therapeutics B.V. | Engineered t cells with reduced tgf-beta receptor signaling |
WO2023129929A1 (en) | 2021-12-30 | 2023-07-06 | Tr1X, Inc. | Cd4+ t cells expressing il-10 and chimeric antigen receptors and uses thereof |
WO2023217062A1 (zh) * | 2022-05-10 | 2023-11-16 | 星尘生物科技(上海)有限公司 | 一种嵌合抗原受体及其应用 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2167676C2 (ru) * | 1995-02-24 | 2001-05-27 | Дзе Дженерал Хоспитал Корпорейшн | Перенаправление клеточного иммунитета посредством химерных рецепторов |
WO2014055668A1 (en) * | 2012-10-02 | 2014-04-10 | Memorial Sloan-Kettering Cancer Center | Compositions and methods for immunotherapy |
Family Cites Families (30)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7446190B2 (en) | 2002-05-28 | 2008-11-04 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Nucleic acids encoding chimeric T cell receptors |
GB0520068D0 (en) | 2005-10-03 | 2005-11-09 | Cancer Res Technology | av peptide ligand |
EP2141997B1 (en) | 2007-03-30 | 2012-10-31 | Memorial Sloan-Kettering Cancer Center | Constitutive expression of costimulatory ligands on adoptively transferred t lymphocytes |
US9206440B2 (en) | 2009-01-23 | 2015-12-08 | Roger Williams Hospital | Viral vectors encoding multiple highly homologus non-viral polypeptides and the use of same |
WO2011041093A1 (en) | 2009-10-01 | 2011-04-07 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Anti-vascular endothelial growth factor receptor-2 chimeric antigen receptors and use of same for the treatment of cancer |
CN106074601A (zh) | 2011-03-23 | 2016-11-09 | 弗雷德哈钦森癌症研究中心 | 用于细胞免疫治疗的方法和组合物 |
ES2888651T3 (es) | 2011-07-29 | 2022-01-05 | Univ Pennsylvania | Receptores de conmutación coestimulantes |
WO2013033626A2 (en) | 2011-08-31 | 2013-03-07 | Trustees Of Dartmouth College | Nkp30 receptor targeted therapeutics |
AU2013222288A1 (en) | 2012-02-22 | 2014-08-14 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Use of ICOS-based CARs to enhance antitumor activity and CAR persistence |
MX2014010185A (es) | 2012-02-22 | 2014-11-14 | Univ Pennsylvania | Uso de dominio de señalizacion cd2 en receptores de antigeno quimericos de segunda generacion. |
CN103483452B (zh) | 2012-06-12 | 2021-08-13 | 上海细胞治疗集团有限公司 | 双信号独立的嵌合抗原受体及其用途 |
KR102141259B1 (ko) | 2012-09-04 | 2020-08-05 | 셀렉티스 | 멀티―체인 키메라 항원 수용체 및 그것의 용도들 |
US9365641B2 (en) | 2012-10-01 | 2016-06-14 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Compositions and methods for targeting stromal cells for the treatment of cancer |
WO2014055657A1 (en) | 2012-10-05 | 2014-04-10 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Use of a trans-signaling approach in chimeric antigen receptors |
EP2953475B1 (en) | 2013-02-06 | 2019-07-03 | Celgene Corporation | Modified t lymphocytes having improved specificity |
CN105142677B (zh) | 2013-02-15 | 2019-08-30 | 加利福尼亚大学董事会 | 嵌合抗原受体及其使用方法 |
US20160017286A1 (en) | 2013-03-06 | 2016-01-21 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Ikaros inhibition to augment adoptive t cell transfer |
WO2014164544A1 (en) | 2013-03-09 | 2014-10-09 | Baylor College Of Medicine | Vascular-targeted t-cell therapy |
US9944690B2 (en) | 2013-03-14 | 2018-04-17 | Bellicum Pharmaceuticals, Inc. | Methods for controlling T cell proliferation |
EP2986636B1 (en) | 2013-04-17 | 2018-11-14 | Baylor College Of Medicine | Immunosuppressive tgf-beta signal converter |
CN105873952A (zh) | 2013-10-31 | 2016-08-17 | 弗莱德哈钦森癌症研究中心 | 经修饰的造血干细胞/祖细胞和非t效应细胞及其用途 |
PT3071222T (pt) | 2013-11-21 | 2020-11-20 | Ucl Business Plc | Célula |
WO2015090229A1 (en) | 2013-12-20 | 2015-06-25 | Novartis Ag | Regulatable chimeric antigen receptor |
WO2015099604A1 (en) * | 2013-12-26 | 2015-07-02 | Agrawal Avichal | A fluid handling device and a method of heating or cooling a fluid flow |
US20170233452A1 (en) | 2014-04-23 | 2017-08-17 | Immusoft Corporation | Chimeric antigen receptors specific to avb6 integrin and methods of use thereof to treat cancer |
CN107075483A (zh) * | 2014-07-15 | 2017-08-18 | 朱诺治疗学股份有限公司 | 用于过继细胞治疗的工程改造的细胞 |
KR102612313B1 (ko) | 2014-07-21 | 2023-12-12 | 노파르티스 아게 | 인간화 항-bcma 키메라 항원 수용체를 사용한 암의 치료 |
US10828353B2 (en) | 2015-01-31 | 2020-11-10 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Compositions and methods for T cell delivery of therapeutic molecules |
EP3303586A1 (en) | 2015-05-29 | 2018-04-11 | Juno Therapeutics, Inc. | Composition and methods for regulating inhibitory interactions in genetically engineered cells |
GB201513540D0 (en) * | 2015-07-31 | 2015-09-16 | King S College London | Therapeutic agents |
-
2015
- 2015-07-31 GB GBGB1513540.3A patent/GB201513540D0/en not_active Ceased
-
2016
- 2016-07-28 DK DK16750211.1T patent/DK3328880T3/da active
- 2016-07-28 CA CA2993746A patent/CA2993746A1/en active Pending
- 2016-07-28 ES ES16750211T patent/ES2883633T3/es active Active
- 2016-07-28 EP EP21177321.3A patent/EP3939992A1/en not_active Withdrawn
- 2016-07-28 MX MX2018001009A patent/MX2018001009A/es unknown
- 2016-07-28 JP JP2018503642A patent/JP7053037B2/ja active Active
- 2016-07-28 CN CN201680039617.1A patent/CN107735407B/zh active Active
- 2016-07-28 EP EP16750211.1A patent/EP3328880B1/en active Active
- 2016-07-28 SG SG10201912416QA patent/SG10201912416QA/en unknown
- 2016-07-28 KR KR1020187005607A patent/KR102411571B1/ko active IP Right Grant
- 2016-07-28 RU RU2018105137A patent/RU2747733C1/ru active
- 2016-07-28 WO PCT/GB2016/052324 patent/WO2017021701A1/en active Application Filing
- 2016-07-28 US US15/749,016 patent/US10703794B2/en active Active
- 2016-07-28 AU AU2016303355A patent/AU2016303355B2/en active Active
-
2017
- 2017-12-24 IL IL256511A patent/IL256511B/en unknown
-
2018
- 2018-12-04 HK HK18115486.9A patent/HK1256383A1/zh unknown
-
2020
- 2020-05-18 US US16/877,035 patent/US10865231B2/en active Active
- 2020-05-18 US US16/877,008 patent/US10899818B2/en active Active
- 2020-12-10 US US17/118,045 patent/US11802143B2/en active Active
-
2021
- 2021-07-09 JP JP2021114022A patent/JP2021168675A/ja active Pending
-
2023
- 2023-09-22 US US18/472,441 patent/US20240076348A1/en active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2167676C2 (ru) * | 1995-02-24 | 2001-05-27 | Дзе Дженерал Хоспитал Корпорейшн | Перенаправление клеточного иммунитета посредством химерных рецепторов |
WO2014055668A1 (en) * | 2012-10-02 | 2014-04-10 | Memorial Sloan-Kettering Cancer Center | Compositions and methods for immunotherapy |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
KLOSS CC et. al. "Combinatorial antigen recognition with balanced signaling promotes selective tumor eradication by engineered T cells", Nature Biotechnology, Vol. 31, No. 1, 2013, pp. 71-76. LANITIS E et. al. "Chimeric Antigen Receptor T Cells with Dissociated Signaling Domains Exhibit Focused Antitumor Activity with Reduced Potential for Toxicity In Vivo", Cancer Immunol Res, Vol. 1(1), 2013, pp. 43-59. LO et. al. "Harnessing the tumour-derived cytokine, CSF-1, to co-stimulate T-cell growth and activation", Molecular Immunology, Vol. 45, 2008, pp. 1276-1287. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20190002521A1 (en) | 2019-01-03 |
SG10201912416QA (en) | 2020-02-27 |
GB201513540D0 (en) | 2015-09-16 |
JP2018521663A (ja) | 2018-08-09 |
ES2883633T3 (es) | 2021-12-09 |
US20210095000A1 (en) | 2021-04-01 |
US20200331981A1 (en) | 2020-10-22 |
US10865231B2 (en) | 2020-12-15 |
HK1256383A1 (zh) | 2019-09-20 |
CN107735407B (zh) | 2022-08-16 |
US20200277353A1 (en) | 2020-09-03 |
MX2018001009A (es) | 2018-06-07 |
EP3328880A1 (en) | 2018-06-06 |
US10703794B2 (en) | 2020-07-07 |
EP3939992A1 (en) | 2022-01-19 |
WO2017021701A1 (en) | 2017-02-09 |
KR102411571B1 (ko) | 2022-06-21 |
US20240076348A1 (en) | 2024-03-07 |
AU2016303355B2 (en) | 2020-08-06 |
IL256511A (en) | 2018-02-28 |
IL256511B (en) | 2021-09-30 |
EP3328880B1 (en) | 2021-07-07 |
KR20180028528A (ko) | 2018-03-16 |
JP7053037B2 (ja) | 2022-04-12 |
CA2993746A1 (en) | 2017-02-09 |
DK3328880T3 (da) | 2021-08-30 |
US10899818B2 (en) | 2021-01-26 |
CN107735407A (zh) | 2018-02-23 |
US11802143B2 (en) | 2023-10-31 |
JP2021168675A (ja) | 2021-10-28 |
AU2016303355A1 (en) | 2018-01-04 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2747733C1 (ru) | Терапевтические средства | |
US11708401B2 (en) | Chimeric transmembrane proteins and uses thereof | |
US20220380435A1 (en) | Fusion proteins of pd-1 and 4-1bb | |
KR20180042361A (ko) | 통합된 통제가능한 기능들을 가진 키메라 항원 수용체들 | |
JP2020537521A (ja) | 細胞 | |
US20220152103A1 (en) | MUC1 PARALLEL CAR (pCAR) THERAPEUTIC AGENTS | |
CN111479918A (zh) | 细胞 | |
US20220298223A1 (en) | B CELL TARGETED PARALLEL CAR (pCAR) THERAPEUTIC AGENTS | |
JP2022001021A (ja) | Cd26特異的キメラ抗原受容体 | |
WO2023150698A2 (en) | Chimeric ilt receptor compositions and methods |