RU2747468C1 - Способ получения вакцины против цирковируса свиней (варианты) - Google Patents
Способ получения вакцины против цирковируса свиней (варианты) Download PDFInfo
- Publication number
- RU2747468C1 RU2747468C1 RU2020120767A RU2020120767A RU2747468C1 RU 2747468 C1 RU2747468 C1 RU 2747468C1 RU 2020120767 A RU2020120767 A RU 2020120767A RU 2020120767 A RU2020120767 A RU 2020120767A RU 2747468 C1 RU2747468 C1 RU 2747468C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- adjuvant
- strain
- virus
- pcv2
- shbc
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к ветеринарной биотехнологии и касается применения штамма цирковируса свиней 2 типа для производства профилактических и диагностических препаратов, используемых в научно-исследовательских институтах и предприятиях биологической промышленности при конструировании биопрепаратов, в частности вакцин против цирковируса свиней 2 типа. Изобретение представляет собой способ получения вакцины против цирковируса свиней, включающий получение вируссодержащего материала из штамма вируса и смешивание его с адъювантом, в качестве вируссодержащего материала вакцина содержит вируссодержащий материал из штамма «PCV2/SHBC» с инфекционной активностью 4,0-7,0 lg ТЦИД50/см3, который перед смешиванием с адъювантом инактивируют добавлением 4-5% раствора аминоэтилэтиленимина до конечной концентрации 0,001 - 0,005% при рН 7,6-7,8 и температуре 35-39°С в течение 20-22 часов с периодическим перемешиванием, а в качестве адъюванта используют масляный адъювант, при определенном соотношении компонентов, причем для инактивации в полученную композицию добавляют 4-5% раствор аминоэтилэтиленимина до конечной концентрации 0,001-0,005% при рН 7,6-7,8 и температуре 35-39°С в течение 20-22 часов с периодическим перемешиванием с последующей стерилизацией целевого продукта. Также в способе получения вакцины против цирковируса свиней, где получение вируссодержащего материала из штамма вируса и смешивание его с адъювантом, в качестве вируссодержащего материала вакцина содержит вируссодержащий материал из штамма «PCV2/SHBC» с инфекционной активностью 4,0-7,0 lg ТЦИД50/см3, который перед смешиванием с адъювантом инактивируют добавлением 4-5% раствора аминоэтилэтиленимина до конечной концентрации 0,001-0,005% при рН 7,6-7,8 и температуре 35-39°С в течение 20-22 часов с периодическим перемешиванием, а в качестве адъюванта используют масляный адъювант, дополнительно содержит стабилизатор хитозан при определенном соотношении компонентов, причем для инактивации в полученную композицию добавляют 4-5% раствор аминоэтилэтиленимина до конечной концентрации 0,001-0,005% при рН 7,6-7,8 и температуре 35-39°С в течение 20-22 часов с периодическим перемешиванием с последующей стерилизацией целевого продукта. Также в способе получения вакцины против цирковируса свиней, включающем получение вируссодержащего материала из штамма вируса и адъюванта и его инактивацию, в качестве адъюванта используют масляный адъювант ISA 201 VG, или ISA 206 VG, или масляный адъювант ВНИИЗЖ. Технический результат: повышение качества целевого продукта за счет увеличения его иммуногенности против цирковируса свиней 2 типа. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 1 табл., 13 пр.
Description
Изобретение относится к области ветеринарии, ветеринарной биотехнологии и касается применения штамма цирковируса свиней 2 типа для производства профилактических препаратов, используемый в научно-исследовательских институтах и предприятиях биологической промышленности при конструировании биопрепаратов, в частности вакцин против цирковируса свиней 2 типа.
Известен способ получения вакцины против цирковируса свиней, включающий получение вируссодержащего материала из штамма вируса и смешиванием его с адъювантом [Патент РФ №2493254, Способы и композиции для иммунизации свиней против свиного цирковируса, МПК C12N15/34; C12N7/00; А61К39/12; C12Q 1/68; опубликовано: 27.01.2012, Бюл. №3].
Недостатком данной вакцины является ее недостаточный срок хранения с сохранением качества целевого продукта.
Техническим решением предлагаемого изобретения является повышение качества целевого продукта за счет увеличения его иммуногенности против цирковируса свиней 2 типа.
Предложена группа изобретений, объединенная единым изобретательским замыслом с достижением единого технического результата.
Поставленная задача решается в способе получения вакцины против цирковируса свиней, включающем получение вируссодержащего материала из штамма вируса и смешиванием его с адъювантом тем, что в качестве вируссодержащего материала вакцина содержит вируссодержащий материал из штамма «PCV2/SHBC» с инфекционной активностью 4,0-7,0 lg ТЦИД50/см3, который перед смешиванием с адъювантом инактивируют добавлением 4-5% раствора аминоэтилэтиленимина до конечной концентрации 0,001-0,005% при рН 7,6-7,8 и температуре 35-39°С в течение 20-22 часов с периодическим перемешиванием, а в качестве адъюванта используют масляный адъювант, при следующем соотношении компонентов, мас. %:
Инактивированный вируссодержащий материал из штамма | |
цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной | |
активностью 4,0-7,0 lg ТЦИД50/см3 | 50,00-60,0 |
Масляный адъювант | остальное. |
Поставленная задача решается также в способе получения вакцины против цирковируса свиней, включающем получение вируссодержащего материала из штамма вируса и смешиванием его с адъювантом с тем, что в качестве вируссодержащего материала вакцина содержит вируссодержащий материал из штамма «PCV2/SHBC» с инфекционной активностью 4,0-7,0 lg ТЦИД50/см3, который перед смешиванием с адъювантом инактивируют добавлением 4-5% раствора аминоэтилэтиленимина до конечной концентрации 0,001-0,005% при рН 7,6-7,8 и температуре 35-39°С в течение 20-22 часов с периодическим перемешиванием, а в качестве адъюванта используют масляный адъювант, дополнительно содержит стабилизатор хитозан, при следующем соотношении компонентов, мас. %:
Хитозан | 5,0-10,0 |
Смесь инактивированного вируссодержащего материала из | |
штамма цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной | |
активностью 4,0-7,0 lg ТЦИД50/см3 и масляного адъюванта, | |
взятых в соотношении 1:1-1,5, соответственно | остальное. |
Поставленная задача решается также в способе получения вакцины против цирковируса свиней по п. 1 и 2, тем, что в качестве адъюванта используют масляный адъювант ISA 201 VG, или ISA 206 VG, или масляный адъювант ВНИИЗЖ.
Известен штамм «PCV2/SHBC» цирковируса свиней, семейства Circoviridae, депонированный в Государственной коллекции вирусов Института вирусологии Федерального государственного бюджетного учреждения «Федеральный научно-исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» под №2845, для производства профилактических и диагностических препаратов (см. приложение - удостоверение). Вирус выделен из суспензии клеток селезенки свиньи в 2015 году в частном хозяйстве Владимирской области. Штамм является новым, ранее неизвестным, выделен в Российской Федерации.
Известен аминоэтилэтиленимин (АЭЭИ) [Патент РФ №2214276, Инактивированная эмульсионная вакцина против парвовирусной инфекции свиней, МПК А61К39/23, C12N7/00, опубликовано: 20.10.2003 Бюл. №29].
Известен масляный адъювант ВНИИЗЖ (Патент РФ №2236253, Вакцина эмульсионная инактивированная против репродуктивно-респираторного синдрома свиней, МПК А61К39/23, C12N7/00, опубликовано: 20.09.2004, Бюл. №26).
Известен также масляный адъювант ISA 201 VG и ISA 206 VG («The comparison of the efficacy of swine FMD vaccine emulsified with oil adjuvant of ISA 201 VG or ISA 206 VG", Journal of Biosciences and Medicines 01(03):22-25-January 2013 with 203 Rea).
В патентной и научно-технической литературе неизвестны технические решения аналогичные заявляемому, т.е. предложение соответствует критерию изобретения «новизна».
Заявленная композиция решает актуальную проблему ветеринарии - профилактики цирковируса свиней, т.е. предложение «промышленно применимо».
В отечественной литературе не известно, что использование штамма цирковируса свиней «PCV2/SHBC» для получения вакцины против цирковируса свиней. Нами впервые показано, что сочетанное использование вышеуказанных отличительных признаков, взятых в определенных соотношениях компонентов, увеличивает сроки хранения целевого продукта с сохранением его иммуногенности против цирковируса свиней, что приводит к достижению технического результата. Следовательно, изобретение соответствует критерию «изобретательский уровень».
Изобретение иллюстрируется на следующих примерах:
Пример 1. Вируссодержащий материал готовят из посевной расплодки вируса штамма «PCV2/SHBC», выращенного в перевиваемой культуре перевиваемых клеток почки поросенка Sus scrofa РК-15/А11 [Патент РФ №2201960, Штамм перевиваемых клеток почки поросенка sus scrofa рк-15/a11, используемый для вирусологических исследований, МПК C12N5/06, C12N7/00, опубликовано: 10.04.2003 Бюл. №10] известным способом. Для инактивации в полученную композицию добавляют 4% раствор аминоэтилэтиленимина до конечной концентрации 0,001% при рН 7,6 и температуре 35°С в течение 20 часов с периодическим перемешиванием.
К 50 кг полученного вируссодержащего материала штамма цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной активностью 4,0 lg ТЦИД50/см3 добавляют 50 кг масляного адъюванта ISA 206 VG, получая состав 1 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
Инактивированный вируссодержащий материал из штамма | |
цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной | |
активностью 4,0 lg ТЦИД50/см3 | 50,00 |
Масляный адъювант | остальное |
Приготовленная таким образом вакцина представляет собой эмульсию бледно-розового цвета.
Пример 2. Вируссодержащий материал готовят из посевной расплодки вируса штамма «PCV2/SHBC», выращенного в перевиваемой культуре перевиваемых клеток почки поросенка Sus scrofa РК-15/А11 [Патент РФ №2201960, Штамм перевиваемых клеток почки поросенка sus scrofa рк-15/a11, используемый для вирусологических исследований, МПК C12N5/06, C12N7/00, опубликовано: 10.04.2003 Бюл. №10] известным способом. Для инактивации к вируссодержащему материалу добавляют 5% раствор аминоэтилэтиленимина до конечной концентрации 0,005% при рН 7,8 и температуре 39°С в течение 22 часов с периодическим перемешиванием
К 60 кг полученного инактивированного вируссодержащего материала штамма цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной активностью 4,0-7,0 lg ТЦИД50/см3 добавляют 40 кг масляного адъюванта ISA 206 VG, получая состав 2 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
Инактивированный вируссодержащий материал из штамма | |
цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной активностью | |
4,0-7,0 lg ТЦИД50/см3 | 60,0 |
Масляный адъювант | остальное |
Приготовленная таким образом вакцина представляет собой эмульсию бледно-розового цвета.
Пример 3. Вируссодержащий материал готовят из посевной расплодки вируса штамма «PCV2/SHBC», выращенного в перевиваемой культуре перевиваемых клеток почки поросенка Sus scrofa РК-15/А11 [Патент РФ №2201960, Штамм перевиваемых клеток почки поросенка sus scrofa рк-15/a11, используемый для вирусологических исследований, МПК C12N5/06, C12N7/00, опубликовано: 10.04.2003 Бюл. №10] известным способом. Для инактивации к вируссодержащему материалу добавляют 4% раствор аминоэтилэтиленимина до конечной концентрации 0,001% при рН 7,6 и температуре 35°C в течение 20 часов с периодическим перемешиванием.
К 50 кг полученного вируссодержащего материала штамма цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной активностью 4,0 lg ТЦИД50/см3 добавляют 50 кг масляного адъюванта ISA 201 VG, получая состав 3 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
Инактивированный вируссодержащий материал из штамма | |
цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной | |
активностью 4,0 lg ТЦИД50/см3 | 50,00 |
Масляный адъювант | остальное |
Приготовленная таким образом вакцина представляет собой эмульсию бледно-розового цвета.
Пример 4. Вируссодержащий материал готовят из посевной расплодки вируса штамма «PCV2/SHBC», выращенного в перевиваемой культуре перевиваемых клеток почки поросенка Sus scrofa РК-15/А11 [Патент РФ №2201960, Штамм перевиваемых клеток почки поросенка sus scrofa рк-15/a11, используемый для вирусологических исследований, МПК C12N5/06, C12N5/00, опубликовано: 10.04.2003 Бюл. №10] известным способом. Для инактивации к вируссодержащему материалу добавляют 5% раствор аминоэтилэтиленимина до конечной концентрации 0,005% при рН 7,8 и температуре 39°С в течение 22 часов с периодическим перемешиванием.
К 60 кг полученного вируссодержащего материала штамма цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной активностью 4,0-7,0 lg ТЦИД50/см3 добавляют 40 кг масляного адъюванта ISA 201 VG, получая состав 4 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
Инактивированный вируссодержащий материал из штамма | |
цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной | |
активностью 4,0-7,0 lg ТЦИД50/см3 | 60,0 |
Масляный адъювант | остальное |
Приготовленная таким образом вакцина представляет собой эмульсию бледно-розового цвета.
Пример 5. Вируссодержащий материал готовят из посевной расплодки вируса штамма «PCV2/SHBC», выращенного в перевиваемой культуре перевиваемых клеток почки поросенка Sus scrofa РК-15/А11 [Патент РФ №2201966, Штамм перевиваемых клеток почки поросенка sus scrofa рк-15/a11, используемый для вирусологических исследований, МПК C12N5/06, C12N5/00, опубликовано: 10.04.2003 Бюл. №10] известным способом. Для инактивации к вируссодержащему материалу добавляют 4% раствор аминоэтилэтиленимина до конечной концентрации 0,001% при рН 7,6 и температуре 35°С в течение 20 часов с периодическим перемешиванием.
К 50 кг полученного вируссодержащего материала штамма цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной активностью 4,0 lg ТЦИД50/см3 добавляют 50 кг масляного адъюванта ВНИИЗЖ, получая состав 5 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
Инактивированный вируссодержащий материал из штамма | |
цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной | |
активностью 4,0 lg ТЦИД50/см3 | 50,00 |
Масляный адъювант | остальное |
Приготовленная таким образом вакцина представляет собой эмульсию бледно-розового цвета.
Пример 6. Вируссодержащий материал готовят из посевной расплодки вируса штамма «PCV2/SHBC», выращенного в перевиваемой культуре перевиваемых клеток почки поросенка Sus scrofa РК-15/А11 [Патент РФ №2201960, Штамм перевиваемых клеток почки поросенка sus scrofa рк-15/a11, используемый для вирусологических исследований, МПК C12N5/06, C12N7/00, опубликовано: 10.04.2003 Бюл. №10] известным способом. Для инактивации к вируссодержащему материалу добавляют 5% раствор аминоэтилэтиленимина до конечной концентрации 0,005% при рН 7,8 и температуре 39°С в течение 22 часов с периодическим перемешиванием.
К 60 кг полученного вируссодержащего материала штамма цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной активностью 4,0-7,0 lg ТЦИД50/см3 добавляют 40 кг масляного адъюванта ВНИИЗЖ, получая состав 6 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
Инактивированный вируссодержащий материал из штамма | |
цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной | |
активностью 4,0-7,0 lg ТЦИД50/см3 | 60,0 |
Масляный адъювант | остальное |
Приготовленная таким образом вакцина представляет собой эмульсию бледно-розового цвета.
Пример 7. Вируссодержащий материал готовят из посевной расплодки вируса штамма «PCV2/SHBC», выращенного в перевиваемой культуре перевиваемых клеток почки поросенка Sus scrofa РК-15/А11 [Патент РФ №2201960, Штамм перевиваемых клеток почки поросенка sus scrofa рк-15/a11, используемый для вирусологических исследований, МПК C12N5/06, C12N7/00, опубликовано: 10.04.2003 Бюл. №10] известным способом. Для инактивации к вируссодержащему материалу добавляют 4% раствор аминоэтилэтиленимина до конечной концентрации 0,001% при рН 7,6 и температуре 35°С в течение 20 часов с периодическим перемешиванием
К 90 кг полученного вируссодержащего материала штамма цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной активностью 4,0 lg ТЦИД50/см3 и масляного адъюванта ISA 206 VG, взятых в соотношении 1:1, соответственно, добавляют 5,0 кг хитозана, получая состав 7 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
Хитозан | 5,0 |
Смесь инактивированного вируссодержащего материала из | |
штамма цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной | |
активностью 4,0 lg ТЦИД50/см3 и масляного адъюванта, | |
взятых в соотношении 1:1, соответственно | остальное, |
Приготовленная таким образом вакцина представляет собой эмульсию бледно-розового цвета.
Пример 8. Вируссодержащий материал готовят из посевной расплодки вируса штамма «PCV2/SHBC», выращенного в перевиваемой культуре перевиваемых клеток почки поросенка Sus scrofa РК-15/А11 [Патент РФ №2201960, Штамм перевиваемых клеток почки поросенка sus scrofa рк-15/a11, используемый для вирусологических исследований, МПК C12N5/06, C12N7/00, опубликовано: 10.04.2003 Бюл. №10] известным способом. Для инактивации к вируссодержащему материалу добавляют 5% раствор аминоэтилэтиленимина до конечной концентрации 0,005% при рН 7,8 и температуре 39°С в течение 22 часов с периодическим перемешиванием
К 90-95 кг полученного вируссодержащего материала штамма цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной активностью 7,0 lg ТЦИД50/см3 и масляного адъюванта ISA 206 VG, взятых в соотношении 1,5, соответственно, добавляют 10,0 кг хитозана, получая состав 8 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
Хитозан | 10,0 |
Смесь инактивированного вируссодержащего материала из | |
штамма цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной | |
активностью 7,0 lg ТЦИД50/см3 и масляного адъюванта, | |
взятых в соотношении 1,5, соответственно | остальное, |
Приготовленная таким образом вакцина представляет собой эмульсию бледно-розового цвета.
Пример 9. Вируссодержащий материал готовят из посевной расплодки вируса штамма «PCV2/SHBC», выращенного в перевиваемой культуре перевиваемых клеток почки поросенка Sus scrofa РК-15/А11 [Патент РФ №2201960, Штамм перевиваемых клеток почки поросенка sus scrofa рк-15/a11, используемый для вирусологических исследований, МПК C12N5/06, C12N7/00, опубликовано: 10.04.2003 Бюл. №10] известным способом. Для инактивации к вируссодержащему материалу добавляют 4% раствор аминоэтилэтиленимина до конечной концентрации 0,001% при рН 7,6 и температуре 35°С в течение 20 часов с периодическим перемешиванием К 90 кг полученного вируссодержащего материала штамма цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной активностью 4,0 lg ТЦИД50/см3 и масляного адъюванта ISA 201 VG, взятых в соотношении 1:1, соответственно, добавляют 5,0 кг хитозана, получая состав 9 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
Хитозан | 5,0 |
Смесь инактивированного вируссодержащего материала из | |
штамма цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной | |
активностью 4,0 lg ТЦИД50/см3 и масляного адъюванта, | |
взятых в соотношении 1:1, соответственно | остальное, |
Приготовленная таким образом вакцина представляет собой эмульсию бледно-розового цвета.
Пример 10. Вируссодержащий материал готовят из посевной расплодки вируса штамма «PCV2/SHBC», выращенного в перевиваемой культуре перевиваемых клеток почки поросенка Sus scrofa РК-15/А11 [Патент РФ №2201960, Штамм перевиваемых клеток почки поросенка sus scrofa рк-15/a11, используемый для вирусологических исследований, МПК C12N5/06, C12N7/00, опубликовано: 10.04.2003 Бюл. №10] известным способом. Для инактивации к вируссодержащему материалу добавляют 5% раствор аминоэтилэтиленимина до конечной концентрации 0,005% при рН 7,8 и температуре 39°С в течение 22 часов с периодическим перемешиванием
К 90-95 кг полученного вируссодержащего материала штамма цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной активностью 7,0 lg ТЦИД50/см3 и масляного адъюванта ISA 201 VG, взятых в соотношении 1,5, соответственно, добавляют 10,0 кг хитозана, получая состав 10 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
Хитозан | 10,0 |
Смесь инактивированного вируссодержащего материала из | |
штамма цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной | |
активностью 7,0 lg ТЦИД50/см3 и масляного адъюванта, | |
взятых в соотношении 1,5, соответственно | остальное, |
Приготовленная таким образом вакцина представляет собой эмульсию бледно-розового цвета.
Пример 11. Вируссодержащий материал готовят из посевной расплодки вируса штамма «PCV2/SHBC», выращенного в перевиваемой культуре перевиваемых клеток почки поросенка Sus scrofa РК-15/А11 [Патент РФ №2201960, Штамм перевиваемых клеток почки поросенка sus scrofa рк-15/a11, используемый для вирусологических исследований, МПК C12N5/06, C12N7/00, опубликовано: 10.04.2003 Бюл. №10] известным способом. Для инактивации к вируссодержащему материалу добавляют 4% раствор аминоэтилэтиленимина до конечной концентрации 0,001% при рН 7,6 и температуре 35°С в течение 20 часов с периодическим перемешиванием
К 90 кг полученного вируссодержащего материала штамма цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной активностью 4,0 lg ТЦИД50/см3 и масляного адъюванта ВНИИЗЖ, взятых в соотношении 1:1, соответственно, добавляют 5,0 кг хитозана, получая состав 11 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
Хитозан | 5,0 |
Смесь инактивированного вируссодержащего материала из | |
штамма цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной | |
активностью 4,0 lg ТЦИД50/см3 и масляного адъюванта, | |
взятых в соотношении 1:1, соответственно | остальное, |
Приготовленная таким образом вакцина представляет собой эмульсию бледно-розового цвета.
Пример 12. Вируссодержащий материал готовят из посевной расплодки вируса штамма «PCV2/SHBC», выращенного в перевиваемой культуре перевиваемых клеток почки поросенка Sus scrofa РК-15/А11 [Патент РФ №2201960, Штамм перевиваемых клеток почки поросенка sus scrofa рк-15/a11, используемый для вирусологических исследований, МПК C12N5/06, C12N7/00, опубликовано: 10.04.2003 Бюл. №10] известным способом. Для инактивации к вируссодержащему материалу добавляют 5% раствор аминоэтилэтиленимина до конечной концентрации 0,005% при рН 7,8 и температуре 39°С в течение 22 часов с периодическим перемешиванием.
К 90-95 кг полученного вируссодержащего материала штамма цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной активностью 7,0 lg ТЦИД50/см3 и масляного адъюванта ВНИИЗЖ, взятых в соотношении 1,5, соответственно, добавляют 10,0 кг хитозана, получая состав 12 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
Хитозан | 10,0 |
Смесь инактивированного вируссодержащего материала из | |
штамма цирковируса свиней «PCV2/SHBC» с инфекционной | |
активностью 7,0 lg ТЦИД50/см3 и масляного адъюванта, | |
взятых в соотношении 1,5, соответственно | остальное, |
Приготовленная таким образом вакцина представляет собой эмульсию бледно-розового цвета.
Пример 13. Иммуногенную активность полученной вакцины определяли на подсвинках живой массой 20-25 кг 6-8 недельного возраста, свободных от антител к вирусу PCV2. Вакцину вводили по 2,0 см3 внутримышечно в области шеи. Были сформированы 14 групп животных по 10 голов: из них опытных (с первого по двенадцатый номер) - 12 групп, которым вводили вакцины 1-12, полученные по примерам 1-12) и две группы контрольные (контрольная группа 1 - невакцинированные животные, контрольная группа 2 - вакцинированные вакциной-прототипом). У животных до вакцинации и через 21 день после вакцинации были отобраны пробы крови и исследованы в ИФА набора «ИФА тест-набор для определения антител к Цирковирусу свиней PCV2» («Semi-quantitative ELISA for detection of all antibodies induced by the different Porcine Circovirus type 2 strains») производства «BioChek» (Нидерланды) на наличие специфических антител. Их оценка проводилась по значению величины s/p против цирковируса свиней (см. данные таблицы 1).
Таким образом, полученная вакцина инактивированная эмульсионная из штамма цирковируса свиней «PCV2/SHBC» является стерильным, безвредным препаратом и обладает высокой иммуногенной активностью. Однократное введение вакцины обеспечивает высокий уровень антител в сыворотке крови у привитых животных (уровень антител в группах опытных животных в 2,3-3,35 раза выше, чем в группе животных, которым вводили известную вакцину). Процент заражения после применения предлагаемой вакцины снижается на 36%.
Claims (5)
1. Способ получения вакцины против цирковируса свиней, включающий получение вируссодержащего материала из штамма вируса и смешивание его с адъювантом, отличающийся тем, что в качестве вируссодержащего материала вакцина содержит вируссодержащий материал из штамма «PCV2/SHBC» с инфекционной активностью 4,0-7,0 lg ТЦИД50/см3, который перед смешиванием с адъювантом инактивируют добавлением 4-5% раствора аминоэтилэтиленимина до конечной концентрации 0,001-0,005% при рН 7,6-7,8 и температуре 35-39°С в течение 20-22 часов с периодическим перемешиванием, а в качестве адъюванта используют масляный адъювант, при следующем соотношении компонентов, мас. %:
2. Способ получения вакцины против цирковируса свиней, включающий получение вируссодержащего материала из штамма вируса и смешивание его с адъювантом, отличающийся тем, что в качестве вируссодержащего материала вакцина содержит вируссодержащий материал из штамма «PCV2/SHBC» с инфекционной активностью 4,0-7,0 lg ТЦИД50/см3, который перед смешиванием с адъювантом инактивируют добавлением 4-5% раствора аминоэтилэтиленимина до конечной концентрации 0,001-0,005% при рН 7,6-7,8 и температуре 35-39°С в течение 20-22 часов с периодическим перемешиванием, а в качестве адъюванта используют масляный адъювант, дополнительно содержит стабилизатор хитозан, при следующем соотношении компонентов, мас. %:
3. Способ получения вакцины против цирковируса свиней по пп. 1 и 2, включающий получение вируссодержащего материала из штамма вируса и адъюванта и его инактивацию, отличающийся тем, что в качестве адъюванта используют масляный адъювант ISA 201 VG, или ISA 206 VG, или масляный адъювант ВНИИЗЖ.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2020120767A RU2747468C1 (ru) | 2020-06-23 | 2020-06-23 | Способ получения вакцины против цирковируса свиней (варианты) |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2020120767A RU2747468C1 (ru) | 2020-06-23 | 2020-06-23 | Способ получения вакцины против цирковируса свиней (варианты) |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2747468C1 true RU2747468C1 (ru) | 2021-05-05 |
Family
ID=75850887
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2020120767A RU2747468C1 (ru) | 2020-06-23 | 2020-06-23 | Способ получения вакцины против цирковируса свиней (варианты) |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2747468C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2785113C1 (ru) * | 2021-12-21 | 2022-12-02 | Федеральное Казенное Предприятие "Щелковский Биокомбинат" | Вакцина против ящура (варианты) |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2214276C1 (ru) * | 2002-02-20 | 2003-10-20 | Федеральное государственное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт защиты животных | Инактивированная эмульсионная вакцина против парвовирусной инфекции свиней |
RU2236253C2 (ru) * | 2002-10-16 | 2004-09-20 | Федеральное государственное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт защиты животных | Вакцина эмульсионная инактивированная против репродуктивно-респираторного синдрома свиней |
RU2493254C2 (ru) * | 2007-12-21 | 2013-09-20 | ВАЙЕТ ЭлЭлСи | Способы и композиции для иммунизации свиней против свиного цирковируса |
-
2020
- 2020-06-23 RU RU2020120767A patent/RU2747468C1/ru active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2214276C1 (ru) * | 2002-02-20 | 2003-10-20 | Федеральное государственное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт защиты животных | Инактивированная эмульсионная вакцина против парвовирусной инфекции свиней |
RU2236253C2 (ru) * | 2002-10-16 | 2004-09-20 | Федеральное государственное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт защиты животных | Вакцина эмульсионная инактивированная против репродуктивно-респираторного синдрома свиней |
RU2493254C2 (ru) * | 2007-12-21 | 2013-09-20 | ВАЙЕТ ЭлЭлСи | Способы и композиции для иммунизации свиней против свиного цирковируса |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
DONG LI, et al. The comparison of the efficacy of swine FMD vaccine emulsified with oil adjuvant of ISA 201 VG or ISA 206 VG", Journal of Biosciences and Medicines 01(03):22-25-January 2013 with 203 Rea. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2785113C1 (ru) * | 2021-12-21 | 2022-12-02 | Федеральное Казенное Предприятие "Щелковский Биокомбинат" | Вакцина против ящура (варианты) |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP4176899A1 (en) | Porcine circovirus type 2 (pcv2) subunit vaccine | |
CN104968365B (zh) | 支原体疫苗的制备方法 | |
CN111000993B (zh) | 一种鸭病毒性肝炎、鸭呼肠孤病毒病二联灭活疫苗及其制备方法 | |
KR20170094186A (ko) | 즉시 사용가능한 pcv2/m.hyo 혼합 백신에 대한 방법 | |
CN109306360B (zh) | 一种利用杆状病毒表达外源蛋白的方法及其应用 | |
CN113491767A (zh) | 鸭圆环病毒病、新型鸭呼肠弧病毒病、鸭病毒性肝炎三联灭活疫苗及其制备方法 | |
CN104043117A (zh) | 一种疫苗组合物及其制备方法和应用 | |
RU2701808C2 (ru) | Вакцина широкого спектра действия против реовируса птиц | |
BR112015015199B1 (pt) | Composição imunogênica compreendendo antígenos de micoplasma e uso | |
CN113384692A (zh) | 鸭呼肠弧病毒、鸭圆环病毒二联灭活疫苗及其制备方法 | |
RU2747468C1 (ru) | Способ получения вакцины против цирковируса свиней (варианты) | |
CN106267176B (zh) | 鸡传染性鼻炎疫苗组合物及其制备方法和应用 | |
RU2443429C2 (ru) | Вакцина ассоциированная против ньюкаслской болезни птиц, инфекционного бронхита кур, синдрома снижения яйценоскости-76, инфекционной бурсальной болезни и реовирусного теносиновита птиц инактивированная эмульсионная | |
CN105802918B (zh) | 鸡肾型传染性支气管炎病毒毒株及其疫苗组合物、制备方法和应用 | |
EP0009277B1 (en) | Combined vaccine active against newcastle disease and egg production drop caused by adeno-like viruses, process for preparing it, adeno-like and newcastle disease virus strains | |
RU2779551C2 (ru) | Штамм "bartha щбк-61" вируса болезни ауески для изготовления диагностических и вакцинных препаратов и способ получения вакцины против болезни ауески животных (варианты) | |
RU2372938C1 (ru) | Инактивированная бивалентная вакцина против вирусной диареи и аденовирусной инфекции крупного рогатого скота и способ профилактики вирусной диареи и аденовирусной инфекции крупного рогатого скота | |
CN109022368B (zh) | 一种猪圆环病毒2型毒株、疫苗组合物及其制备方法和应用 | |
CN110951698A (zh) | 禽流感病毒tj株、禽流感灭活疫苗及其制备方法 | |
RU2306949C2 (ru) | Защитная среда для изготовления вирус-вакцин в птицеводстве | |
RU2746142C1 (ru) | Штамм "pcv2/shbc" цирковируса свиней для производства профилактических и диагностических препаратов | |
RU2741643C1 (ru) | Ассоциированная вакцина против миксоматоза, пастереллёза и вирусной геморрагической болезни кроликов 1 и 2 типов | |
CN113355293B (zh) | 一种小鹅瘟病毒疫苗株、疫苗及基于该疫苗的卵黄抗体 | |
RU2531054C1 (ru) | Вакцина ассоциированная против псевдомоноза и вирусной геморрагической болезни кроликов | |
CN114015658B (zh) | 一种h9n2亚型禽流感和鸡滑液囊支原体的二联灭活疫苗 |