RU2747291C1 - Длительно действующий рекомбинантный свиной гибридный белок FSH, способ его приготовления и его применение - Google Patents
Длительно действующий рекомбинантный свиной гибридный белок FSH, способ его приготовления и его применение Download PDFInfo
- Publication number
- RU2747291C1 RU2747291C1 RU2020102568A RU2020102568A RU2747291C1 RU 2747291 C1 RU2747291 C1 RU 2747291C1 RU 2020102568 A RU2020102568 A RU 2020102568A RU 2020102568 A RU2020102568 A RU 2020102568A RU 2747291 C1 RU2747291 C1 RU 2747291C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- pfsh
- subunit
- fsh
- fusion protein
- thr
- Prior art date
Links
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 title claims abstract description 39
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 title claims abstract description 37
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 7
- 102000012673 Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 claims abstract description 74
- 108010079345 Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 claims abstract description 74
- 229940028334 follicle stimulating hormone Drugs 0.000 claims abstract description 72
- 230000012173 estrus Effects 0.000 claims abstract description 41
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 34
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 19
- 206010042573 Superovulation Diseases 0.000 claims abstract description 13
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 22
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 claims description 15
- 241000283707 Capra Species 0.000 claims description 11
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 claims description 11
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 claims description 11
- 241000282887 Suidae Species 0.000 claims description 11
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 9
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 9
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 claims description 6
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 5
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 4
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 4
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 claims description 3
- 239000013599 cloning vector Substances 0.000 claims description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 24
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 45
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 42
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 21
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 17
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 238000003975 animal breeding Methods 0.000 description 12
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- 102000003864 Human Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 description 9
- 108010082302 Human Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 description 9
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 9
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 7
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 7
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 7
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 7
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 7
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 description 6
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 6
- 108010009298 lysylglutamic acid Proteins 0.000 description 6
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 6
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 6
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 5
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 5
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 5
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- HKZAAJSTFUZYTO-LURJTMIESA-N (2s)-2-[[2-[[2-[[2-[(2-aminoacetyl)amino]acetyl]amino]acetyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O HKZAAJSTFUZYTO-LURJTMIESA-N 0.000 description 4
- 102000006771 Gonadotropins Human genes 0.000 description 4
- 108010086677 Gonadotropins Proteins 0.000 description 4
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 4
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 4
- 108010078144 glutaminyl-glycine Proteins 0.000 description 4
- 239000002622 gonadotropin Substances 0.000 description 4
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 4
- JOTRDIXZHNQYGP-DCAQKATOSA-N Arg-Ser-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N JOTRDIXZHNQYGP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 3
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 3
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 3
- 101001038874 Homo sapiens Glycoprotein hormones alpha chain Proteins 0.000 description 3
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005411 Van der Waals force Methods 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 3
- 108010049041 glutamylalanine Proteins 0.000 description 3
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 3
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 3
- 108010073472 leucyl-prolyl-proline Proteins 0.000 description 3
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 3
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 3
- 108010051242 phenylalanylserine Proteins 0.000 description 3
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 3
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 3
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 3
- BRPMXFSTKXXNHF-IUCAKERBSA-N (2s)-1-[2-[[(2s)-pyrrolidine-2-carbonyl]amino]acetyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)CNC(=O)[C@H]1NCCC1 BRPMXFSTKXXNHF-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 2
- BUDNAJYVCUHLSV-ZLUOBGJFSA-N Ala-Asp-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BUDNAJYVCUHLSV-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 2
- SFNFGFDRYJKZKN-XQXXSGGOSA-N Ala-Gln-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](C)N)O SFNFGFDRYJKZKN-XQXXSGGOSA-N 0.000 description 2
- 108010076441 Ala-His-His Proteins 0.000 description 2
- ATAKEVCGTRZKLI-UWJYBYFXSA-N Ala-His-His Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(O)=O)C1=CN=CN1 ATAKEVCGTRZKLI-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 2
- YMIYZAOBQDRCPP-UHFFFAOYSA-N Ala-Thr-Cys-Cys Chemical compound CC(N)C(=O)NC(C(O)C)C(=O)NC(CS)C(=O)NC(CS)C(O)=O YMIYZAOBQDRCPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LSMDIAAALJJLRO-XQXXSGGOSA-N Ala-Thr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O LSMDIAAALJJLRO-XQXXSGGOSA-N 0.000 description 2
- ZXKNLCPUNZPFGY-LEWSCRJBSA-N Ala-Tyr-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O)N ZXKNLCPUNZPFGY-LEWSCRJBSA-N 0.000 description 2
- NONSEUUPKITYQT-BQBZGAKWSA-N Arg-Asn-Gly Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)NCC(=O)O)N)CN=C(N)N NONSEUUPKITYQT-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- OTCJMMRQBVDQRK-DCAQKATOSA-N Arg-Asp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O OTCJMMRQBVDQRK-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- HNJNAMGZQZPSRE-GUBZILKMSA-N Arg-Pro-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O HNJNAMGZQZPSRE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- FVBZXNSRIDVYJS-AVGNSLFASA-N Arg-Pro-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N FVBZXNSRIDVYJS-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- ZJBUILVYSXQNSW-YTWAJWBKSA-N Arg-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)O ZJBUILVYSXQNSW-YTWAJWBKSA-N 0.000 description 2
- FTSAJSADJCMDHH-CIUDSAMLSA-N Asn-Lys-Asp Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N FTSAJSADJCMDHH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- HNXWVVHIGTZTBO-LKXGYXEUSA-N Asn-Ser-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O HNXWVVHIGTZTBO-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 2
- LIVXPXUVXFRWNY-CIUDSAMLSA-N Asp-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O LIVXPXUVXFRWNY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- KPSHWSWFPUDEGF-FXQIFTODSA-N Asp-Pro-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CC(O)=O KPSHWSWFPUDEGF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- JSNWZMFSLIWAHS-HJGDQZAQSA-N Asp-Thr-Leu Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)O JSNWZMFSLIWAHS-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 2
- AEJSNWMRPXAKCW-WHFBIAKZSA-N Cys-Ala-Gly Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O AEJSNWMRPXAKCW-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- KABHAOSDMIYXTR-GUBZILKMSA-N Cys-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N KABHAOSDMIYXTR-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- ZEXHDOQQYZKOIB-ACZMJKKPSA-N Cys-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ZEXHDOQQYZKOIB-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 2
- OHLLDUNVMPPUMD-DCAQKATOSA-N Cys-Leu-Val Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N OHLLDUNVMPPUMD-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- CHRCKSPMGYDLIA-SRVKXCTJSA-N Cys-Phe-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CHRCKSPMGYDLIA-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- SMEYEQDCCBHTEF-FXQIFTODSA-N Cys-Pro-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SMEYEQDCCBHTEF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- JTEGHEWKBCTIAL-IXOXFDKPSA-N Cys-Thr-Phe Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N)O JTEGHEWKBCTIAL-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 2
- ALTQTAKGRFLRLR-GUBZILKMSA-N Cys-Val-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N ALTQTAKGRFLRLR-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 2
- QYKBTDOAMKORGL-FXQIFTODSA-N Gln-Gln-Asp Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N QYKBTDOAMKORGL-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- PODFFOWWLUPNMN-DCAQKATOSA-N Gln-His-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O PODFFOWWLUPNMN-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- HMIXCETWRYDVMO-GUBZILKMSA-N Gln-Pro-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HMIXCETWRYDVMO-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- HNAUFGBKJLTWQE-IFFSRLJSSA-N Gln-Val-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)O HNAUFGBKJLTWQE-IFFSRLJSSA-N 0.000 description 2
- ITYRYNUZHPNCIK-GUBZILKMSA-N Glu-Ala-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ITYRYNUZHPNCIK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- SVZIKUHLRKVZIF-GUBZILKMSA-N Glu-Asn-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N SVZIKUHLRKVZIF-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- ISXJHXGYMJKXOI-GUBZILKMSA-N Glu-Cys-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O ISXJHXGYMJKXOI-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- NUSWUSKZRCGFEX-FXQIFTODSA-N Glu-Glu-Cys Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O NUSWUSKZRCGFEX-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- HNVFSTLPVJWIDV-CIUDSAMLSA-N Glu-Glu-Gln Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O HNVFSTLPVJWIDV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- FBEJIDRSQCGFJI-GUBZILKMSA-N Glu-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FBEJIDRSQCGFJI-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- SOEPMWQCTJITPZ-SRVKXCTJSA-N Glu-Met-Lys Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N SOEPMWQCTJITPZ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- AAJHGGDRKHYSDH-GUBZILKMSA-N Glu-Pro-Gln Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O AAJHGGDRKHYSDH-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- ZNOHKCPYDAYYDA-BPUTZDHNSA-N Glu-Trp-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O ZNOHKCPYDAYYDA-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 2
- QXPRJQPCFXMCIY-NKWVEPMBSA-N Gly-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)CN QXPRJQPCFXMCIY-NKWVEPMBSA-N 0.000 description 2
- UEGIPZAXNBYCCP-NKWVEPMBSA-N Gly-Cys-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CN)C(=O)O UEGIPZAXNBYCCP-NKWVEPMBSA-N 0.000 description 2
- NPSWCZIRBAYNSB-JHEQGTHGSA-N Gly-Gln-Thr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O NPSWCZIRBAYNSB-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 2
- LHRXAHLCRMQBGJ-RYUDHWBXSA-N Gly-Glu-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)CN LHRXAHLCRMQBGJ-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 2
- GMTXWRIDLGTVFC-IUCAKERBSA-N Gly-Lys-Glu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GMTXWRIDLGTVFC-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- SOEGEPHNZOISMT-BYPYZUCNSA-N Gly-Ser-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SOEGEPHNZOISMT-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- SYOJVRNQCXYEOV-XVKPBYJWSA-N Gly-Val-Glu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O SYOJVRNQCXYEOV-XVKPBYJWSA-N 0.000 description 2
- AFPFGFUGETYOSY-HGNGGELXSA-N His-Ala-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AFPFGFUGETYOSY-HGNGGELXSA-N 0.000 description 2
- WMKXFMUJRCEGRP-SRVKXCTJSA-N His-Asn-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O)N WMKXFMUJRCEGRP-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- OHOXVDFVRDGFND-YUMQZZPRSA-N His-Cys-Gly Chemical compound N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O OHOXVDFVRDGFND-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- LBCAQRFTWMMWRR-CIUDSAMLSA-N His-Cys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LBCAQRFTWMMWRR-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- LLZLRXBTOOFODM-QSFUFRPTSA-N Ile-Asp-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N LLZLRXBTOOFODM-QSFUFRPTSA-N 0.000 description 2
- LKACSKJPTFSBHR-MNXVOIDGSA-N Ile-Gln-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N LKACSKJPTFSBHR-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 2
- ODPKZZLRDNXTJZ-WHOFXGATSA-N Ile-Gly-Phe Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N ODPKZZLRDNXTJZ-WHOFXGATSA-N 0.000 description 2
- PFPUFNLHBXKPHY-HTFCKZLJSA-N Ile-Ile-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N PFPUFNLHBXKPHY-HTFCKZLJSA-N 0.000 description 2
- QQFSKBMCAKWHLG-UHFFFAOYSA-N Ile-Phe-Pro-Pro Chemical compound C1CCC(C(=O)N2C(CCC2)C(O)=O)N1C(=O)C(NC(=O)C(N)C(C)CC)CC1=CC=CC=C1 QQFSKBMCAKWHLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PZWBBXHHUSIGKH-OSUNSFLBSA-N Ile-Thr-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N PZWBBXHHUSIGKH-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 2
- GNXGAVNTVNOCLL-SIUGBPQLSA-N Ile-Tyr-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N GNXGAVNTVNOCLL-SIUGBPQLSA-N 0.000 description 2
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 2
- YFBBUHJJUXXZOF-UWVGGRQHSA-N Leu-Gly-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O YFBBUHJJUXXZOF-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- YUTNOGOMBNYPFH-XUXIUFHCSA-N Leu-Pro-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O YUTNOGOMBNYPFH-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 2
- DPURXCQCHSQPAN-AVGNSLFASA-N Leu-Pro-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 DPURXCQCHSQPAN-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- BGGTYDNTOYRTTR-MEYUZBJRSA-N Leu-Tyr-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N)O BGGTYDNTOYRTTR-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 2
- FDBTVENULFNTAL-XQQFMLRXSA-N Leu-Val-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N FDBTVENULFNTAL-XQQFMLRXSA-N 0.000 description 2
- WSXTWLJHTLRFLW-SRVKXCTJSA-N Lys-Ala-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O WSXTWLJHTLRFLW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- DEFGUIIUYAUEDU-ZPFDUUQYSA-N Lys-Asn-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O DEFGUIIUYAUEDU-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 2
- RDIILCRAWOSDOQ-CIUDSAMLSA-N Lys-Cys-Asp Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N RDIILCRAWOSDOQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- ZXEUFAVXODIPHC-GUBZILKMSA-N Lys-Glu-Asn Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O ZXEUFAVXODIPHC-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- DCRWPTBMWMGADO-AVGNSLFASA-N Lys-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O DCRWPTBMWMGADO-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- LUTDBHBIHHREDC-IHRRRGAJSA-N Lys-Pro-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O LUTDBHBIHHREDC-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- JOSAKOKSPXROGQ-BJDJZHNGSA-N Lys-Ser-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O JOSAKOKSPXROGQ-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 2
- WAAZECNCPVGPIV-RHYQMDGZSA-N Lys-Thr-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O WAAZECNCPVGPIV-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 2
- LMMBAXJRYSXCOQ-ACRUOGEOSA-N Lys-Tyr-Phe Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(O)=O LMMBAXJRYSXCOQ-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 2
- MDDUIRLQCYVRDO-NHCYSSNCSA-N Lys-Val-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN MDDUIRLQCYVRDO-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 2
- STLBOMUOQNIALW-BQBZGAKWSA-N Met-Gly-Cys Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O STLBOMUOQNIALW-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- FWAHLGXNBLWIKB-NAKRPEOUSA-N Met-Ile-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CCSC FWAHLGXNBLWIKB-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 2
- XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N N-alpha-L-glutamyl-L-phenylalanine Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000009328 Perro Species 0.000 description 2
- CPTJPDZTFNKFOU-MXAVVETBSA-N Phe-Cys-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N CPTJPDZTFNKFOU-MXAVVETBSA-N 0.000 description 2
- ZFVWWUILVLLVFA-AVGNSLFASA-N Phe-Gln-Cys Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N ZFVWWUILVLLVFA-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- CJAHQEZWDZNSJO-KKUMJFAQSA-N Phe-Lys-Cys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 CJAHQEZWDZNSJO-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- AAERWTUHZKLDLC-IHRRRGAJSA-N Phe-Pro-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O AAERWTUHZKLDLC-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- MVIJMIZJPHQGEN-IHRRRGAJSA-N Phe-Ser-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H]([NH3+])CC1=CC=CC=C1 MVIJMIZJPHQGEN-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- CGBYDGAJHSOGFQ-LPEHRKFASA-N Pro-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@@H]2CCCN2 CGBYDGAJHSOGFQ-LPEHRKFASA-N 0.000 description 2
- NMELOOXSGDRBRU-YUMQZZPRSA-N Pro-Glu-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 NMELOOXSGDRBRU-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- UIMCLYYSUCIUJM-UWVGGRQHSA-N Pro-Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1 UIMCLYYSUCIUJM-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- MMAPOBOTRUVNKJ-ZLUOBGJFSA-N Ser-Asp-Ser Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O MMAPOBOTRUVNKJ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 2
- LQESNKGTTNHZPZ-GHCJXIJMSA-N Ser-Ile-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O LQESNKGTTNHZPZ-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 2
- ZOPISOXXPQNOCO-SVSWQMSJSA-N Ser-Ile-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N ZOPISOXXPQNOCO-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 2
- XUDRHBPSPAPDJP-SRVKXCTJSA-N Ser-Lys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CO XUDRHBPSPAPDJP-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- LRZLZIUXQBIWTB-KATARQTJSA-N Ser-Lys-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O LRZLZIUXQBIWTB-KATARQTJSA-N 0.000 description 2
- PMCMLDNPAZUYGI-DCAQKATOSA-N Ser-Lys-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O PMCMLDNPAZUYGI-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- MQUZANJDFOQOBX-SRVKXCTJSA-N Ser-Phe-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MQUZANJDFOQOBX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- FZNNGIHSIPKFRE-QEJZJMRPSA-N Ser-Trp-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O FZNNGIHSIPKFRE-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 2
- PZHJLTWGMYERRJ-SRVKXCTJSA-N Ser-Tyr-Cys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)O PZHJLTWGMYERRJ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- HNDMFDBQXYZSRM-IHRRRGAJSA-N Ser-Val-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O HNDMFDBQXYZSRM-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- CTONFVDJYCAMQM-IUKAMOBKSA-N Thr-Asn-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)N CTONFVDJYCAMQM-IUKAMOBKSA-N 0.000 description 2
- NLJKZUGAIIRWJN-LKXGYXEUSA-N Thr-Asp-Cys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)O NLJKZUGAIIRWJN-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 2
- VEWZSFGRQDUAJM-YJRXYDGGSA-N Thr-Cys-Tyr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)N)O VEWZSFGRQDUAJM-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 2
- VOHWDZNIESHTFW-XKBZYTNZSA-N Thr-Glu-Cys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)O VOHWDZNIESHTFW-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 2
- GXUWHVZYDAHFSV-FLBSBUHZSA-N Thr-Ile-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GXUWHVZYDAHFSV-FLBSBUHZSA-N 0.000 description 2
- PUEWAXRPXOEQOW-HJGDQZAQSA-N Thr-Met-Gln Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O PUEWAXRPXOEQOW-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 2
- WTMPKZWHRCMMMT-KZVJFYERSA-N Thr-Pro-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O WTMPKZWHRCMMMT-KZVJFYERSA-N 0.000 description 2
- MROIJTGJGIDEEJ-RCWTZXSCSA-N Thr-Pro-Pro Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 MROIJTGJGIDEEJ-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 2
- XHWCDRUPDNSDAZ-XKBZYTNZSA-N Thr-Ser-Glu Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N)O XHWCDRUPDNSDAZ-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 2
- CSZFFQBUTMGHAH-UAXMHLISSA-N Thr-Thr-Trp Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)N)O CSZFFQBUTMGHAH-UAXMHLISSA-N 0.000 description 2
- XVHAUVJXBFGUPC-RPTUDFQQSA-N Thr-Tyr-Phe Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O XVHAUVJXBFGUPC-RPTUDFQQSA-N 0.000 description 2
- XGFYGMKZKFRGAI-RCWTZXSCSA-N Thr-Val-Arg Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N XGFYGMKZKFRGAI-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 2
- PWONLXBUSVIZPH-RHYQMDGZSA-N Thr-Val-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N)O PWONLXBUSVIZPH-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 2
- XGFGVFMXDXALEV-XIRDDKMYSA-N Trp-Leu-Asn Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N XGFGVFMXDXALEV-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 2
- SSSDKJMQMZTMJP-BVSLBCMMSA-N Trp-Tyr-Val Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C1=CC=C(O)C=C1 SSSDKJMQMZTMJP-BVSLBCMMSA-N 0.000 description 2
- SGFIXFAHVWJKTD-KJEVXHAQSA-N Tyr-Arg-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O SGFIXFAHVWJKTD-KJEVXHAQSA-N 0.000 description 2
- QYSBJAUCUKHSLU-JYJNAYRXSA-N Tyr-Arg-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O QYSBJAUCUKHSLU-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 2
- BODHJXJNRVRKFA-BZSNNMDCSA-N Tyr-Cys-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O BODHJXJNRVRKFA-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- WVGKPKDWYQXWLU-BZSNNMDCSA-N Tyr-His-Lys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N)O WVGKPKDWYQXWLU-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- VXFXIBCCVLJCJT-JYJNAYRXSA-N Tyr-Pro-Pro Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O VXFXIBCCVLJCJT-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 2
- RGYCVIZZTUBSSG-JYJNAYRXSA-N Tyr-Pro-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O RGYCVIZZTUBSSG-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 2
- NHOVZGFNTGMYMI-KKUMJFAQSA-N Tyr-Ser-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 NHOVZGFNTGMYMI-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- RIVVDNTUSRVTQT-IRIUXVKKSA-N Tyr-Thr-Gln Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N)O RIVVDNTUSRVTQT-IRIUXVKKSA-N 0.000 description 2
- COYSIHFOCOMGCF-UHFFFAOYSA-N Val-Arg-Gly Natural products CC(C)C(N)C(=O)NC(C(=O)NCC(O)=O)CCCN=C(N)N COYSIHFOCOMGCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QHDXUYOYTPWCSK-RCOVLWMOSA-N Val-Asp-Gly Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)NCC(=O)O)N QHDXUYOYTPWCSK-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 2
- ZXAGTABZUOMUDO-GVXVVHGQSA-N Val-Glu-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N ZXAGTABZUOMUDO-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 2
- ZIGZPYJXIWLQFC-QTKMDUPCSA-N Val-His-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O ZIGZPYJXIWLQFC-QTKMDUPCSA-N 0.000 description 2
- SBJCTAZFSZXWSR-AVGNSLFASA-N Val-Met-His Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N SBJCTAZFSZXWSR-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- SJRUJQFQVLMZFW-WPRPVWTQSA-N Val-Pro-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O SJRUJQFQVLMZFW-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 2
- NZYNRRGJJVSSTJ-GUBZILKMSA-N Val-Ser-Val Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NZYNRRGJJVSSTJ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- PFMSJVIPEZMKSC-DZKIICNBSA-N Val-Tyr-Glu Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N PFMSJVIPEZMKSC-DZKIICNBSA-N 0.000 description 2
- RLVTVHSDKHBFQP-ULQDDVLXSA-N Val-Tyr-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)CC1=CC=C(O)C=C1 RLVTVHSDKHBFQP-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 2
- BGTDGENDNWGMDQ-KJEVXHAQSA-N Val-Tyr-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O BGTDGENDNWGMDQ-KJEVXHAQSA-N 0.000 description 2
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 2
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 2
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 2
- 108010004073 cysteinylcysteine Proteins 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 108010037389 glutamyl-cysteinyl-lysine Proteins 0.000 description 2
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 2
- XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N glycyl-L-tyrosine hemihydrate Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010067216 glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 108010001064 glycyl-glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 108010010147 glycylglutamine Proteins 0.000 description 2
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 230000009027 insemination Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 108010091871 leucylmethionine Proteins 0.000 description 2
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 2
- 108010038320 lysylphenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 230000016087 ovulation Effects 0.000 description 2
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 2
- 108010031719 prolyl-serine Proteins 0.000 description 2
- 208000017443 reproductive system disease Diseases 0.000 description 2
- 210000002863 seminiferous tubule Anatomy 0.000 description 2
- 108010026333 seryl-proline Proteins 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 230000021595 spermatogenesis Effects 0.000 description 2
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 238000003146 transient transfection Methods 0.000 description 2
- 210000003905 vulva Anatomy 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 206010000234 Abortion spontaneous Diseases 0.000 description 1
- WCBVQNZTOKJWJS-ACZMJKKPSA-N Ala-Cys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O WCBVQNZTOKJWJS-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- DPNZTBKGAUAZQU-DLOVCJGASA-N Ala-Leu-His Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N DPNZTBKGAUAZQU-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- UCDOXFBTMLKASE-HERUPUMHSA-N Ala-Ser-Trp Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)N UCDOXFBTMLKASE-HERUPUMHSA-N 0.000 description 1
- HPSVTWMFWCHKFN-GARJFASQSA-N Arg-Glu-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(=O)O HPSVTWMFWCHKFN-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- FFEUXEAKYRCACT-PEDHHIEDSA-N Arg-Ile-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)[C@@H](C)CC)C(O)=O FFEUXEAKYRCACT-PEDHHIEDSA-N 0.000 description 1
- OLVIPTLKNSAYRJ-YUMQZZPRSA-N Asn-Gly-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(=O)N)N OLVIPTLKNSAYRJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- YUOXLJYVSZYPBJ-CIUDSAMLSA-N Asn-Pro-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O YUOXLJYVSZYPBJ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- QIRJQYQOIKBPBZ-IHRRRGAJSA-N Asn-Tyr-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O QIRJQYQOIKBPBZ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- WSGVTKZFVJSJOG-RCOVLWMOSA-N Asp-Gly-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O WSGVTKZFVJSJOG-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 1
- TZOZNVLBTAFJRW-UGYAYLCHSA-N Asp-Ile-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N TZOZNVLBTAFJRW-UGYAYLCHSA-N 0.000 description 1
- YUELDQUPTAYEGM-XIRDDKMYSA-N Asp-Trp-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N YUELDQUPTAYEGM-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- WAEDSQFVZJUHLI-BYULHYEWSA-N Asp-Val-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O WAEDSQFVZJUHLI-BYULHYEWSA-N 0.000 description 1
- QOJJMJKTMKNFEF-ZKWXMUAHSA-N Asp-Val-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O QOJJMJKTMKNFEF-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 238000013449 Capto Q chromatography Methods 0.000 description 1
- VJGGHXVGBSZVMZ-QIZQQNKQSA-N Cloprostenol Chemical compound C([C@H](O)\C=C\[C@@H]1[C@H]([C@@H](O)C[C@H]1O)C\C=C/CCCC(O)=O)OC1=CC=CC(Cl)=C1 VJGGHXVGBSZVMZ-QIZQQNKQSA-N 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- RRIJEABIXPKSGP-FXQIFTODSA-N Cys-Ala-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CS RRIJEABIXPKSGP-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- ZXCAQANTQWBICD-DCAQKATOSA-N Cys-Lys-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CS)N ZXCAQANTQWBICD-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 241000283087 Equus Species 0.000 description 1
- 102000008175 FSH Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010060374 FSH Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108091006020 Fc-tagged proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000001951 Fetal Death Diseases 0.000 description 1
- 206010055690 Foetal death Diseases 0.000 description 1
- DLOHWQXXGMEZDW-CIUDSAMLSA-N Gln-Arg-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O DLOHWQXXGMEZDW-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- LWDGZZGWDMHBOF-FXQIFTODSA-N Gln-Glu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O LWDGZZGWDMHBOF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- ZEEPYMXTJWIMSN-GUBZILKMSA-N Gln-Lys-Ser Chemical compound NCCCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZEEPYMXTJWIMSN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- UESYBOXFJWJVSB-AVGNSLFASA-N Gln-Phe-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UESYBOXFJWJVSB-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- DYVMTEWCGAVKSE-HJGDQZAQSA-N Gln-Thr-Arg Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)O DYVMTEWCGAVKSE-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- CSMHMEATMDCQNY-DZKIICNBSA-N Gln-Val-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O CSMHMEATMDCQNY-DZKIICNBSA-N 0.000 description 1
- LXAUHIRMWXQRKI-XHNCKOQMSA-N Glu-Asn-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)C(=O)O LXAUHIRMWXQRKI-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 1
- RFDHKPSHTXZKLL-IHRRRGAJSA-N Glu-Gln-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N RFDHKPSHTXZKLL-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- UHVIQGKBMXEVGN-WDSKDSINSA-N Glu-Gly-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O UHVIQGKBMXEVGN-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- OAGVHWYIBZMWLA-YFKPBYRVSA-N Glu-Gly-Gly Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O OAGVHWYIBZMWLA-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ZIYGTCDTJJCDDP-JYJNAYRXSA-N Glu-Phe-Lys Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N ZIYGTCDTJJCDDP-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- YQPFCZVKMUVZIN-AUTRQRHGSA-N Glu-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O YQPFCZVKMUVZIN-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 1
- ZALGPUWUVHOGAE-GVXVVHGQSA-N Glu-Val-His Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N ZALGPUWUVHOGAE-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- PABFFPWEJMEVEC-JGVFFNPUSA-N Gly-Gln-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)CN)C(=O)O PABFFPWEJMEVEC-JGVFFNPUSA-N 0.000 description 1
- XMPXVJIDADUOQB-RCOVLWMOSA-N Gly-Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)CNC(=O)C[NH3+] XMPXVJIDADUOQB-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 1
- VNNRLUNBJSWZPF-ZKWXMUAHSA-N Gly-Ser-Ile Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O VNNRLUNBJSWZPF-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N H-Gly-Phe-OH Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FYVHHKMHFPMBBG-GUBZILKMSA-N His-Gln-Asp Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N FYVHHKMHFPMBBG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- CSTDQOOBZBAJKE-BWAGICSOSA-N His-Tyr-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)N)O CSTDQOOBZBAJKE-BWAGICSOSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000893054 Homo sapiens Follitropin subunit beta Proteins 0.000 description 1
- WEWCEPOYKANMGZ-MMWGEVLESA-N Ile-Cys-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N WEWCEPOYKANMGZ-MMWGEVLESA-N 0.000 description 1
- VOCZPDONPURUHV-QEWYBTABSA-N Ile-Phe-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N VOCZPDONPURUHV-QEWYBTABSA-N 0.000 description 1
- VGSPNSSCMOHRRR-BJDJZHNGSA-N Ile-Ser-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N VGSPNSSCMOHRRR-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- AUNMOHYWTAPQLA-XUXIUFHCSA-N Leu-Met-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O AUNMOHYWTAPQLA-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- WMIOEVKKYIMVKI-DCAQKATOSA-N Leu-Pro-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O WMIOEVKKYIMVKI-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- IDGZVZJLYFTXSL-DCAQKATOSA-N Leu-Ser-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N IDGZVZJLYFTXSL-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- VUBIPAHVHMZHCM-KKUMJFAQSA-N Leu-Tyr-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 VUBIPAHVHMZHCM-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- 108010073521 Luteinizing Hormone Proteins 0.000 description 1
- 102000009151 Luteinizing Hormone Human genes 0.000 description 1
- IWWMPCPLFXFBAF-SRVKXCTJSA-N Lys-Asp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O IWWMPCPLFXFBAF-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- KWUKZRFFKPLUPE-HJGDQZAQSA-N Lys-Asp-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O KWUKZRFFKPLUPE-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- LUAJJLPHUXPQLH-KKUMJFAQSA-N Lys-Phe-Ser Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N LUAJJLPHUXPQLH-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- 239000012515 MabSelect SuRe Substances 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- RKIIYGUHIQJCBW-SRVKXCTJSA-N Met-His-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O RKIIYGUHIQJCBW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-proline Natural products NCC(=O)N1CCCC1C(O)=O KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010033165 Ovarian failure Diseases 0.000 description 1
- CDNPIRSCAFMMBE-SRVKXCTJSA-N Phe-Asn-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CDNPIRSCAFMMBE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- BWTKUQPNOMMKMA-FIRPJDEBSA-N Phe-Ile-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 BWTKUQPNOMMKMA-FIRPJDEBSA-N 0.000 description 1
- MRWOVVNKSXXLRP-IHPCNDPISA-N Phe-Ser-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O MRWOVVNKSXXLRP-IHPCNDPISA-N 0.000 description 1
- FISHYTLIMUYTQY-GUBZILKMSA-N Pro-Gln-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 FISHYTLIMUYTQY-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- UAYHMOIGIQZLFR-NHCYSSNCSA-N Pro-Gln-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O UAYHMOIGIQZLFR-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- VPEVBAUSTBWQHN-NHCYSSNCSA-N Pro-Glu-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O VPEVBAUSTBWQHN-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- PEYNRYREGPAOAK-LSJOCFKGSA-N Pro-His-Ala Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C([O-])=O)NC(=O)[C@H]1[NH2+]CCC1)C1=CN=CN1 PEYNRYREGPAOAK-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- KLSOMAFWRISSNI-OSUNSFLBSA-N Pro-Ile-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 KLSOMAFWRISSNI-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 1
- ULWBBFKQBDNGOY-RWMBFGLXSA-N Pro-Lys-Pro Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O ULWBBFKQBDNGOY-RWMBFGLXSA-N 0.000 description 1
- FHZJRBVMLGOHBX-GUBZILKMSA-N Pro-Pro-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@H](NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H]1CCCN1)C(O)=O FHZJRBVMLGOHBX-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- PRKWBYCXBBSLSK-GUBZILKMSA-N Pro-Ser-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O PRKWBYCXBBSLSK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- OYEDZGNMSBZCIM-XGEHTFHBSA-N Ser-Arg-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O OYEDZGNMSBZCIM-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- ZOHGLPQGEHSLPD-FXQIFTODSA-N Ser-Gln-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ZOHGLPQGEHSLPD-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- GZSZPKSBVAOGIE-CIUDSAMLSA-N Ser-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O GZSZPKSBVAOGIE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- RHAPJNVNWDBFQI-BQBZGAKWSA-N Ser-Pro-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O RHAPJNVNWDBFQI-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- DDPVJPIGACCMEH-XQXXSGGOSA-N Thr-Ala-Gln Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O DDPVJPIGACCMEH-XQXXSGGOSA-N 0.000 description 1
- GZYNMZQXFRWDFH-YTWAJWBKSA-N Thr-Arg-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O GZYNMZQXFRWDFH-YTWAJWBKSA-N 0.000 description 1
- ASJDFGOPDCVXTG-KATARQTJSA-N Thr-Cys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ASJDFGOPDCVXTG-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- NCXVJIQMWSGRHY-KXNHARMFSA-N Thr-Leu-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O NCXVJIQMWSGRHY-KXNHARMFSA-N 0.000 description 1
- MXDOAJQRJBMGMO-FJXKBIBVSA-N Thr-Pro-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O MXDOAJQRJBMGMO-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 1
- ZESGVALRVJIVLZ-VFCFLDTKSA-N Thr-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O ZESGVALRVJIVLZ-VFCFLDTKSA-N 0.000 description 1
- BEZTUFWTPVOROW-KJEVXHAQSA-N Thr-Tyr-Arg Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N)O BEZTUFWTPVOROW-KJEVXHAQSA-N 0.000 description 1
- SCZJKZLFSSPJDP-ACRUOGEOSA-N Tyr-Phe-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O SCZJKZLFSSPJDP-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 1
- SQUMHUZLJDUROQ-YDHLFZDLSA-N Tyr-Val-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O SQUMHUZLJDUROQ-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 1
- BMGOFDMKDVVGJG-NHCYSSNCSA-N Val-Asp-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N BMGOFDMKDVVGJG-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- SCBITHMBEJNRHC-LSJOCFKGSA-N Val-Asp-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N SCBITHMBEJNRHC-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- JXGWQYWDUOWQHA-DZKIICNBSA-N Val-Gln-Phe Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N JXGWQYWDUOWQHA-DZKIICNBSA-N 0.000 description 1
- RKIGNDAHUOOIMJ-BQFCYCMXSA-N Val-Glu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 RKIGNDAHUOOIMJ-BQFCYCMXSA-N 0.000 description 1
- UKEVLVBHRKWECS-LSJOCFKGSA-N Val-Ile-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N UKEVLVBHRKWECS-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- ZHQWPWQNVRCXAX-XQQFMLRXSA-N Val-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N ZHQWPWQNVRCXAX-XQQFMLRXSA-N 0.000 description 1
- RYHUIHUOYRNNIE-NRPADANISA-N Val-Ser-Gln Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N RYHUIHUOYRNNIE-NRPADANISA-N 0.000 description 1
- PGQUDQYHWICSAB-NAKRPEOUSA-N Val-Ser-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](C(C)C)N PGQUDQYHWICSAB-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- ZLNYBMWGPOKSLW-LSJOCFKGSA-N Val-Val-Asp Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O ZLNYBMWGPOKSLW-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- LLJLBRRXKZTTRD-GUBZILKMSA-N Val-Val-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N LLJLBRRXKZTTRD-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 108010087924 alanylproline Proteins 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 1
- 108010013835 arginine glutamate Proteins 0.000 description 1
- 108010077245 asparaginyl-proline Proteins 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 239000013622 capto Q Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 210000003711 chorioallantoic membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 229960004409 cloprostenol Drugs 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 210000004696 endometrium Anatomy 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 1
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 description 1
- 231100000479 fetal death Toxicity 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 108010081551 glycylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010077515 glycylproline Proteins 0.000 description 1
- 150000002402 hexoses Chemical class 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 108010027338 isoleucylcysteine Proteins 0.000 description 1
- 108010057821 leucylproline Proteins 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 229940040129 luteinizing hormone Drugs 0.000 description 1
- 108010003700 lysyl aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010017391 lysylvaline Proteins 0.000 description 1
- 230000013011 mating Effects 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 208000015994 miscarriage Diseases 0.000 description 1
- 102000035118 modified proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005573 modified proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 210000004237 neck muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 208000025661 ovarian cyst Diseases 0.000 description 1
- 208000015124 ovarian disease Diseases 0.000 description 1
- 201000004535 ovarian dysfunction Diseases 0.000 description 1
- 231100000539 ovarian failure Toxicity 0.000 description 1
- 108010073101 phenylalanylleucine Proteins 0.000 description 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108010077112 prolyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010070643 prolylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 239000012474 protein marker Substances 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 1
- 102220315697 rs1553622313 Human genes 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 208000000995 spontaneous abortion Diseases 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/59—Follicle-stimulating hormone [FSH]; Chorionic gonadotropins, e.g.hCG [human chorionic gonadotropin]; Luteinising hormone [LH]; Thyroid-stimulating hormone [TSH]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/24—Follicle-stimulating hormone [FSH]; Chorionic gonadotropins, e.g. HCG; Luteinising hormone [LH]; Thyroid-stimulating hormone [TSH]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/62—DNA sequences coding for fusion proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2227/00—Animals characterised by species
- A01K2227/10—Mammal
- A01K2227/108—Swine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2267/00—Animals characterised by purpose
- A01K2267/02—Animal zootechnically ameliorated
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Gynecology & Obstetrics (AREA)
- Pregnancy & Childbirth (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к рекомбинантному фолликулостимулирующему гормону (ФСГ, FSH), и может быть использовано в ветеринарии для синхронизации эструса и суперовуляции у животного. Предложены два гибридных белка ФСГ pFSHбета:pFSHальфа-L-Fc)2 и (pFSHальфа:pFSHбета-L-Fc)2, представленных в форме дивалентных гомодимеров. Изобретение обеспечивает получение рекомбинантного FSH с более длительным периодом полувыведения по сравнению с периодом полувыведения у натурального свиного FSH. 8 н.п. ф-лы, 3 ил., 6 табл., 9 пр.
Description
Область техники
Настоящее изобретение относится к области биомедицины и технологии разведения животных, в частности к длительно действующему рекомбинантному гибридному белку ФСГ свиного (FSH) и способу его приготовления и его применению.
Уровень техники
Свиной фолликул о стимулирующий гормон (pFSH) - гонадотропин, секретируемый свиным аденогипофизом, который сформирован α-субъединицей и β-субъединицей, связанными нековалентной связью, где α-субъединица является высококонсервативной и идентична α-субъединице свиного лютеинизирующего гормона (pLH) и свиного тироидстимулирующего гормона (pTSH); а β-субъединица не идентична, что в основном определяет функциональную специфичность ФСГ. pFSH может стимулировать рост и созревание эндометрия, яичника и фолликулов свиноматки; стимулировать синтез и секрецию эстрогена; и вызывать развитие семенных канальцев хряка и поддерживать сперматогенез. pFSH обычно используют в области разведения животных для синхронизации эструса, суперовуляции, трансплантации эмбрионов и лечения заболеваний яичников у самок. Исследования показывают, что влияние свиного ФСГ на суперовуляцию крупного рогатого скота и овец лучше, чем такое влияние ФСГ крупного рогатого скота и овец, и, таким образом, pFSH имеет большое значение в производстве животноводческой продукции и промышленном разведении животных.
В настоящее время в родственных патентах и статьях сообщается об экспрессии гибридных белков ФСГ, но большинство из них относится к рекомбинантной экспрессии и применению человеческого ФСГ. Применение человеческого ФСГ в области разведения животных также достигло некоторого успеха. Однако, хотя люди и домашние животные относятся к млекопитающим, есть большие видовые различия в белковых последовательностях (человеческий ФСГ и свиной ФСГ имеют гомологию 73% в отношении аминокислотной последовательности α-субъединицы, гомологию 93% в отношении β-субъединицы, и гомологию 73% в отношении Fc-фрагмента). Если человеческий рекомбинантный ФСГ используют у животных в течение долгого времени, иммунная система животного будет распознавать человеческий рекомбинантный ФСГ и вызывать образование антител (включая нейтрализующие антитела), которые специфично связываются со связывающим сайтом рецептора ФСГ животного, тем самым блокируя биологическую активность лекарственного средства и приводя к все более низкой биодоступности человеческого ФСГ у животных, что ограничивает применение человеческого ФСГ у животных, в частности у промышленных животных, таких как свиньи, крупный рогатый скот и овцы, которые нуждаются в применении ФСГ в течение долгого времени. Это одна из причин того, почему имеющийся в настоящее время в продаже человеческий рекомбинантный ФСГ не применяют в области разведения животных.
В настоящее время коммерческие продукты ФСГ, имеющиеся в продаже, преимущественно включают ФСГ, выделенный из свиного аденогипофиза, и гонадотропин из сыворотки беременных кобыл (PMSG). ФСГ из свиного аденогипофиза, такой как фоллтропин-V (Канада), имеет короткий период полувыведения (5 часов) и требует частого введения, что приводит к высокой стоимости кормления и ухода для конечных потребителей. Кроме того, при очистке из ткани свиного аденогипофиза свиной ФСГ сложно отделить от LH, и сложная очистка и низкая продуктивность существенно ограничивают практическое применение свиного ФСГ. PMSG - гликопротеиновый гормон, секретируемый клетками хориоаллантоисной мембраны плаценты животного из рода Equus, имеющий как ФСГ (высокую) так и LH (низкую) активности, и оказывающий влияние на стимулирование репродуктивной функции яичников и семенников животных. В области разведения животных PMSG часто используют для того чтобы индуцировать синхронизацию эструса и суперовуляцию у самок, и для лечения репродуктивных заболеваний и недостаточности яичников у самок; стимулированию развития семенных канальцев и сперматогенеза у самцов. Однако, поскольку молекулы PMSG содержат сравнительно высокое количество гексозы и сиаловой кислоты и имеют долгий период полувыведения у животных (120 ч), при использовании у животных для суперовуляции легко вызвать у маток различные побочные эффекты, такие как цисты яичников, раннюю деградацию эмбриона в начале беременности. Кроме того, коммерческий PMSG выделяют и очищают из сыворотки беременных лошадей; при использовании у других животных будут вырабатываться антитела, и PMSG обладает определенной иммуногенностью, и его нельзя использовать в течение долгого времени. В добавление, PMSG изготавливают, собирая сыворотку от беременных лошадей, что часто вызывает выкидыш у беременных лошадей и смерть плода из-за обширного забора крови, что не соответствует этике обращения с животными.
Следовательно, на основе того, что человеческий ФСГ не подходит для животных, ФСГ из свиного аденогипофиза требует частого введения, a PMSG часто вызывает нежелательные явления, есть потребность в длительно действующем ФСГ из животного источника в области разведения животных, в частности в промышленном разведении животных.
Сущность изобретения
Цель настоящего изобретения - обеспечить новый длительно действующий рекомбинантный гибридный белок свиного ФСГ и способ его приготовления и применения.
Концепция настоящего изобретения состоит в следующем: технология гибридного белка Fc - одна из наиболее широко используемых и стабильных технологий в разработке длительно действующих белковых лекарственных средств, и ФСГ гибридизирован с Fc посредством технологии генетической инженерии для получения нового рекомбинантного белка ФСГ-Fc. Можно не только достичь высокой биологической активности ФСГ, но также получить более длительный период полу вы ведения. В то же время полученный рекомбинантный белок имеет высокую чистоту, сравнительно однородное качество, отсутствие LH и высокий фактор безопасности. Использование экспрессионной системы млекопитающих, в частности клеток яичника китайского хомячка (СНО) для экспрессии рекомбинантных белков обеспечивает белковые молекулы, которые являются наиболее близкими к природным молекулам в отношении молекулярной структуры, физико-химических свойств и биологических функций.
Для целей настоящего изобретения длительно действующие рекомбинантные гибридные белки свиного ФСГ согласно настоящему изобретению содержат гибридные белки pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2, где α-субъединица pFSH-Fc-1 гибридного белка свиного ФСГ прямо или непрямо гибридизирована с Fc-фрагментом посредством связывающего компонента, а β-субъединица pFSH-Fc-1 гибридного белка свиного ФСГ связана с α-субъединицей посредством ван-дер-ваальсовой силы или связывающего компонента; а β-субъединица pFSH-Fc-2 гибридного белка свиного ФСГ прямо или непрямо гибридизирована с Fc-фрагментом посредством связывающего компонента, а α-субъединица pFSH-Fc-2 гибридного белка свиного ФСГ связана с β-субъединицей посредством ван-дер-ваальсовой силы или связывающего компонента.
Гибридный белок свиного ФСГ содержит две пептидные цепи, соответствующие следующей формуле: (pFSHβ:pFSHα-L-Fc)2 или (pFSHα:pFSHβ-L-Fc)2, где pFSHβ относится к β-субъединице свиного ФСГ с удаленным сигнальным пептидом; двоеточие представляет связь, которой β-субъединица и α-субъединица свиного ФСГ связаны посредством ван-дер-ваальсовой связи; pFSHα относится к α-субъединице свиного ФСГ с удаленным сигнальным пептидом; L обозначает линкерную связь между pFSHα- или pFSHβ-субъединицей и Fc-фрагментом; Fc относится к Fc-фрагменту иммуноглобулина, или к его мутанту; индекс 2 за скобками означает, что гибридный белок свиного ФСГ представляет собой дивалентный гомодимер.
Аминокислотная последовательность pFSHα представлена SEQ ID NO: 1, или pFSHα составлена из аминокислотной последовательности, имеющей гомологию 90% или более с SEQ ID NO: 1 и активность, эквивалентную активности SEQ ID NO: 1.
Аминокислотная последовательность pFSHβ представлена SEQ ID NO: 3, или pFSHβ составлена из аминокислотной последовательности, имеющей гомологию 90% или более с SEQ ID NO: 3 и активность, эквивалентную активности SEQ ID NO: 3.
Fc содержит шарнирный участок, а также участки СН2 и СН3 иммуноглобулина.
Иммуноглобулин получен из человека, свиньи, крупного рогатого скота, овцы, лошади или собаки. Иммуноглобулины классифицируют на IgG, IgM, IgA, IgD и IgE, и каждый тип иммуноглобулинов включает различные подтипы, такие как IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4.
Мутант Fc относится к варианту Fc, содержащему аминокислотную мутацию в одном или более сайтах Fc-фрагмента, и включает вариант Fc человеческого IgG2, содержащий шарнирный участок человеческого IgG2, участок СН2 и участок СН3, с мутацией Pro331Ser.
Предпочтительно Fc получен из свиного иммуноглобулина, т.е. pFc, и содержит шарнирный участок, участки СН2 и СН3 свиного иммуноглобулина. Аминокислотная последовательность pFc представлена SEQ ID NO: 5, или pFc составлен из аминокислотной последовательности, имеющей гомологию 80% или более с SEQ ID NO: 5 и активность, эквивалентную активности SEQ ID NO: 5.
Субъединица pFSHα или pFSHβ связана с Fc прямо или линкером, предпочтительно линкером.
При этом линкер представляет собой лабильный полипептид, состоящий из от 2 до 20 лабильных аминокислот, выбранных из по меньшей мере одного из Gly, Ser, Ala и Thr;
предпочтительно линкер представляет собой (Gly-Gly-Gly-Gly-Ser)n, где n является целочисленной переменной от 2 до 5, более предпочтительно n составляет 3.
Предпочтительно pFSHα-L-Fc представляет собой: i) белок, составленный аминокислотной последовательностью, представленной SEQ ID No. 6; или
ii) белок, полученный из i), который состоит из аминокислотной последовательности, имеющей функцию, эквивалентную функции SEQ ID No. 6 и полученной из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID No. 6, путем замены, делеции и/или добавления одной или более аминокислот; или
iii) белок, составленный аминокислотной последовательностью, имеющей гомологию 90% или более с аминокислотной последовательностью, представленной SEQ ID No. 6 и имеющей функцию, эквивалентную SEQ ID No. 6.
Предпочтительно pFSHβ-L-Fc представляет собой: iv) белок, составленный аминокислотной последовательностью, представленной SEQ ID No. 8; или
v) белок, полученный из iv), который состоит из аминокислотной последовательности, имеющей функцию, эквивалентную функции SEQ ID No. 8 и полученной из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID No. 8, путем замены, делеции и/или добавления одной или более аминокислот; или
vi) белок, составленный аминокислотной последовательностью, имеющей гомологию 90% или более с аминокислотной последовательностью, представленной SEQ ID No. 8 и имеющей функцию, эквивалентную SEQ ID No. 8.
Настоящее изобретение также обеспечивает экспрессионную кассету, экспрессионный вектор, клонирующий вектор, инженерные бактерии или трансгенную клеточную линию, содержащую (содержащий) нуклеиновую кислоту, кодирующую гибридный белок, описанный выше.
Длительно действующий рекомбинантный гибридный белок свиного ФСГ согласно настоящему изобретению может быть приготовлен следующим образом: искусственный синтез генов, кодирующих pFSHα, pFSHβ, pFSHα-L-Fc и pFSHβ-L-Fc, проведение оптимизации кодонов и клонирование оптимизированных генов в эукариотные экспрессионные векторы, соответственно; одновременная трансформация рекомбинантного вектора pFSHα и рекомбинантного вектора pFSHβ-L-Fc в эукариотные клетки, и экспрессия в эукариотных клетках и выделение и очистка целевого белка; одновременная трансформация рекомбинантного вектора pFSHβ и рекомбинантного вектора pFSHα-L-Fc в эукариотные клетки, и экспрессия в эукариотных клетках и выделение и очистка целевого белка.
Эукариотный экспрессионный вектор включает, но не ограничиваясь тем самым, pcDNA3.1, и эукариотные клетки включают, но не ограничиваясь тем самым, клетки 293 и СНО.
Настоящее изобретение также обеспечивает применение вышеупомянутого длительно действующего рекомбинантного свиного гибридного белка для приготовления лекарственного средства для стимуляции разведения животных (включая синхронизацию эструса, суперовуляцию и тому подобное) и для лечения связанного с репродуктивной функцией заболевания у животных. При этом животное включает, но не ограничиваясь тем самым, свинью, крупный рогатый скот, лошадь или собаку; предпочтительно свинью.
Настоящее изобретение дополнительно обеспечивает лекарственное средство для стимулирования разведения животных (включая синхронизацию эструса, суперовуляцию и тому подобное) и для лечения связанного с репродуктивной функцией заболевания у животных, приготовленное из вышеупомянутого длительно действующего рекомбинантного гибридного белка свиного ФСГ.
Изобретение также обеспечивает применение вышеупомянутого длительно действующего рекомбинантного гибридного белка свиного ФСГ в области разведения животных.
В объем настоящего изобретения входят все модифицированные белки, включая два гибридных белка pFSH-Fc-1, pFSH-Fc-2 или свиной ФСГ, который гликозилирован, пегилирован, ацетилирован или связан с BSA, и тому подобные.
Сконструированные белки, включая два гибридных белка pFSH-Fc-1, pFSH-Fc-2 или гибридные белки, которые составлены гибридным белком свиного ФСГ со свиным Fc или другими белками, без изменений в активности белка свиного ФСГ, все входят в объем настоящего изобретения.
В сравнении с предыдущим уровнем техники, настоящее изобретение имеет следующие преимущества:
(I) Длительно действующий рекомбинантный гибридный белок свиного ФСГ и/или свиной белок ФСГ и полученные из них белки или модифицированные из них белки, обеспеченные согласно настоящему изобретению, имеют период полувыведения около 60 ч, который выше, чем у ФСГ из свиного аденогипофиза, но ниже, чем у ФСГ из PMSG. Они не требуют постоянных инъекций и не вызывают нежелательные реакции, поскольку период полувыведения у домашнего скота увеличен; и они не иммуногенны для свиноматок и не вызывают образования антител с лекарственной устойчивостью.
(II) Длительно действующий рекомбинантный гибридный белок свиного ФСГ и/или свиной белок ФСГ, и полученные из него или модифицированные из него белки, обеспеченные согласно настоящему изобретению, имеют степень эффективности стимулирования эструса свиноматок 90% или более и степень эффективности лечения анэструса свиноматок 85% и более, и достижение среднего размера овуляции около 27 на свинью, и среднего размера помета около 13 на свинью, и оказывают лучший эффект на эструс и суперовуляцию, чем PMSG, hFSH-hFc и pFSH-hFc.
(III) Длительно действующий рекомбинантный гибридный белок свиного ФСГ и/или белок свиного ФСГ, и полученные из него или модифицированные из него белки, обеспеченные согласно настоящему изобретению, могут также улучшать частоту эструса у крупного рогатого скота и овец и стимулировать эффект суперовуляции: количество эструсов на корову составляет около 8,0, а количество доступных эмбрионов на корову составляет около 6,1, что соответственно выше, чем при воздействии PMSG, hFSH-hFc и pFSH-hFc; и имеют степень эффективности стимулирования эструса овцематок 90%, что также лучше, чем при воздействии PMSG, hFSH-hFc и pFSH-hFc.
(IV) Длительно действующий рекомбинантный гибридный белок свиного ФСГ и/или белок свиного ФСГ, и полученные из него или модифицированные из него белки, обеспеченные согласно настоящему изобретению, могут эффективно обеспечить безопасное и эффективное лекарственное средство для усиления коэффициента воспроизводства у животных, в частности при промышленном разведении животных.
(V) При применении в области разведения животных, длительно действующий рекомбинантный гибридный белок свиного ФСГ и/или белок свиного ФСГ, и полученные из него или модифицированные из него белки имеют пониженную иммуногенность и повышенную биологическую активность по сравнению с человеческим ФСГ, имеют более высокую чистоту и более продолжительный период полувыведения по сравнению с природным ФСГ из свиного аденогипофиза, и вызывают меньше нежелательных побочных явлений и имеют пониженную иммуногенность по сравнению с PMSG.
(VI) Длительно действующий рекомбинантный гибридный белок свиного ФСГ, обеспеченный согласно настоящему изобретению, может эффективно пролонгировать период полувыведения свиного ФСГ, снизить количество введений, снизить иммуногенность и повысить частоту эструса и количество овуляций у свиней, крупного рогатого скота, овец и тому подобного, и не вызывает нежелательных реакций у животных, и может заменить ФСГ из свиного аденогипофиза и PMSG в области разведения животных.
Краткое описание чертежей
На Фигуре 1 представлена диаграмма, показывающая ДСН-ПААГ электрофорез pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2 в Примере 1 настоящего изобретения. При этом А и С - денатурированные электрофореграммы pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2, соответственно; В и D - не денатурированные электрофореграммы pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2, соответственно. МК: Белковый маркер; 1: Очищенный ферментационный бульон; 2: проточный раствор из хроматографии Белка А; 3: раствор, собранный при хроматографии Белка А; 4: раствор, собранный при хроматографии Capto S; и 5: раствор, собранный при хроматографии Capto Q. Структурная формула pFSH-Fc-1 - (pFSHβ:pFSHα-L-Fc)2, а структурная формула pFSH-Fc-2 - (pFSHα:pFSHβ-L-Fc)2.
На Фигуре 2 представлена диаграмма, показывающая яичник крысы в группах pFSH-Fc-1, pFSH-Fc-2 и PMSG в Примере 2 настоящего изобретения. При этом 10 ME, 20 ME и 40 ME показывают, что крысам в группах pFSH-Fc-1, pFSH-Fc-2 и PMSG сделали инъекцию соответствующих лекарственных средств в количествах 10 ME, 20 ME и 40 ME, соответственно.
На Фигуре 3 представлена диаграмма, показывающая яичник суперовулированных первородящих овцематок No. 1 в группах pFSH-Fc-1, pFSH-Fc-2, PMSG, hFSH-hFc и pFSH-hFc в Примере 4 настоящего изобретения.
Конкретные способы осуществления вариантов реализации
Следующие примеры предназначены для иллюстрации настоящего изобретения, но не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения. Если не указано иное, Примеры основаны на стандартных экспериментальных условиях, таких как Sambrook J & Russell DW, молекулярное клонирование: лабораторное руководство, 2001, или в соответствии с условиями, предполагаемыми в инструкциях производителя.
hFSH-hFc и pFSH-hFc, описанные в следующих примерах, получены путем связывания β-субъединиц с hFc, и способ конструирования такой же, как в pFSH-Fc-2, и включает: генетические последовательности человеческого ФСГα, человеческого ФСГβ и человеческого Fc были найдены после поиска, после оптимизации кодонов, гены hFSHα, hFSHβ-L-hFc, pFSHα и pFSHβ-L-hFc были синтезированы искусственно, и рекомбинантные плазмиды hFSHα и hFSHβ-L-hFc, pFSHα и pFSHβ-L-hFc были перенесены в клетки 293 путем транзиентной трансфекции для экспрессии, и очистка была проведена для получения hFSH-hFc и pFSH-hFc.
Пример 1: Приготовление белков pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2
В базе данных GeneBank проводили поиск последовательностей генов свиного ФСГα (GenBank NM-214446.1), свиного ФСГβ (GenBank NM-213875.1) и свиного Fc (GenBank ВАЕ20056). Проводили оптимизацию кодонов. Нуклеотидная последовательность pFSHα представлена SEQ ID NO: 2; нуклеотидная последовательность pFSHβ представлена SEQ ID NO: 4; последовательность pFSHα-L-pFc представлена SEQ ID NO: 7; нуклеотидная последовательность pFSHβ-L-pFc представлена SEQ ID NO: 9.
Искусственно синтезированные гены pFSHα, pFSHβ, pFSHα-L-pFc и pFSHβ-L-pFc клонировали в вектор pcDNA3.1, соответственно. Рекомбинантные векторы pFSHβ и pFSHα-L-pFc, pFSHα и pFSHβ-L-pFc соответственно электрофоретически переносили в клетки 293 для экспрессии pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2, а белки, полученные путем транзиентной трансфекции и экспрессии, очищали и проверяли на активность. После подтверждения активности рекомбинантные векторы pFSHβ и pFSHα-L-pFc, pFSHα и pFSHβ-L-pFc линеаризовали и электрофоретически перенесли в клетки СНО для получения стабильных клеточных линий pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2.
Стабильные клетки pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2 подвергали ферментативному культивированию в ферментере, ферментативный бульон подвергали фильтрации для удаления клеток и клеточного дебриса с использованием двухступенчатого толстослойного комплекта фильтрующих мембран, а затем отфильтрован через фильтрующую мембрану с размером пор 0,22 мкм для получения осветленного ферментативного бульона. Ферментативный бульон первоначально очищали методом афинной хроматографии на основе связывания с белком A (MabSelect SuReTM, GE Healthcare): сначала уравновешивали до базовой линии уравновешивающим раствором (50 мМ глицина, 0,15 М NaCl, рН 7,2), а затем элюировали элюентом (50 мМ глицина, рН 3,0) и собирали элюат. Раствор, собранный после хроматографии на основе связывания с белком А, очищали далее методом хроматографии на колонке с катионообменной средой Capto S (GE Healthcare): уровень рН собранного раствора доводили до 6,5 при помощи 1 М NaOH, проводимость вышеуказанного раствора доводили до 4,5-5,0 мСм/см при помощи воды, собранный раствор уравновешивали уравновешивающим раствором (50 мМ глицина, рН 6,5), загружали и собирали проточный элюат. Раствор, собранной после хроматографии на колонке с катионообменной средой Capto S, подвергали итоговой очистке на колонке с анионообменной средой Capto Q (GE Healthcare): рН собранного раствора доводили до 8 при помощи 1 М NaOH, уравновешивали до базовой линии уравновешивающим раствором (50 мМ глицина, рН 8,0) с последующим элюированием элюентом (50 mM глицина, 1 М KCl, рН 8,0) и собирали очищенный белок. Изучаемый очищенный белок исследовали методом электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия (ДСН-ПААГ) (Фиг. 1).
Пример 2: Анализ активности белков pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2
Активность белков pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2 измеряли с помощью теста на увеличение веса яичников у крыс (тест Стилмана-Поли). Продукт по настоящему изобретению предназначен для применения в области разведения животных вместо PMSG. Таким образом, активность образца определяли согласно "Serum Gonadotropin Bioassay" в Pharmacopoeia of China, издание 2015 г., используя PMSG в качестве стандарта. В частности, тест осуществлялся следующим образом: из pFSH-Fc-1 (с расчетным значением специфической активности 10000 ед./мг), pFSH-Fc-2 (с расчетным значением специфической активности 10000 ед./мг) и PMSG готовили составы в трех дозах: 40 ME (высокая концентрация), 20 ME (средняя концентрация) и 10 ME (низкая концентрация) соответственно. Самки крыс линии Спрег-Доули (SD) в возрасте 21-23 дня и весом 40-55 г в произвольном порядке делили на 9 групп, по 6 особей в каждой группе. Каждой крысе вводили по 0,5 мл соответствующего препарата подкожно. По прошествии 6 дней крыс умерщвляли, взвешивали и иссекали, яичники удаляли и взвешивали, полученные значения веса яичников переводили в вес яичников на 100 г веса тела (Фиг. 2). Значение специфической активности pFSH-Fc-1 согласно расчетам с применением программного обеспечения "Pharmacopoeia Bioassay Statistics BS2000" Национальных институтов по контролю качества пищевых продуктов и медикаментов (National Institutes for Food and Drug Control) приблизительно составило 9600 ед./мг, a значение специфической активности pFSH-Fc-2 составило около 10700 ед./мг.
Пример 3: Исследование фармакокинетических свойств белков pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2
Десять самок крыс линии SD весом примерно 40 г в произвольном порядке делили на две группы: группу pFSH-Fc-1 и группу pFSH-Fc-2. Соответствующий лекарственный препарат вводили подкожно в дозе 20 МЕ/кг веса тела, отбирали по 100 мкл крови в контрольных точках 0, 1, 2, 4, 8, 12, 24, 48, 72, 96, 120 и 144 часа после введения, соответственно, центрифугировали при 3000 об./мин, отбирали сыворотку и хранили при -80°C для целей криоконсервации. Содержание pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2 в сыворотке измеряли при помощи набора ИФА для определения ФСГ, и каждый образец крови анализировали в трех повторностях. В соответствии с расчетами с применением программного обеспечения PKSolver период полувыведения pFSH-Fc-1 составил 57,2 часа, а период полувыведения pFSH-Fc-2 составил 63,4 часа, оба из которых были выше, чем период полувыведения натурального свиного ФСГ и были ниже, чем период полувыведения PMSG.
Пример 4: Применение белков pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2 для стимулирования синхронизации эструса и суперовуляции у первородящих и повторнородящих свиноматок
Отобрали 100 первородящих свиноматок йоркширской породы и повторнородящих свиноматок йоркширской породы с отсутствием эструса через 2 недели после отъема, весом 85-100 кг, одинакового экстерьера и со схожими признаками, соответственно. Животных делили на 5 групп в произвольном порядке: группы pFSH-Fc-1, pFSH-Fc-2, PMSG, hFSH-hFc и pFSH-hFc; далее каждую из групп делили на группу первородящих и группу повторнородящих свиноматок. По 1000 ME соответствующих препаратов вводили в виде инъекции в мышцы шеи, позади уха свиней-доноров каждой из групп, а через 72 часа вводили еще по 500 ME HCG в виде инъекции. Эструс в каждой группе свиноматок наблюдали спустя 5 дней. За исключением того, что свиноматку йоркширской породы №1 в эструсе из группы первородящих свиноматок забивали и изымали яичник для фотосъемки, свиноматок в эструсе из других групп случали с хряками такого же экстерьера 3 раза с интервалами в 12 часов каждый раз. Через 36 часов после первой случки у свиней-доноров хирургическим путем извлекали яйцеклетки и подсчитывали количество овулировавших яйцеклеток (Фиг. 3).
Полученные результаты приведены в Таблице 1. У свиней-доноров в каждой из групп был хороший эструс, показатели эструса у первородящих и у повторнородящих свиноматок в группе pFSH-Fc-1 составили 90% и 95%, соответственно, что было выше, чем показатели эструса в группе PMSG (60% и 65%), в группе hFSH-hFc (65% и 70%) и в группе pFSH-hFc (80% и 85%), и существенно отличались от показателей эструса в группе PMSG и в группе hFSH-hFc (Р<0,05). Показатели эструса первородящих и повторнородящих свиноматок в группе pFSH-Fc-2 составили 100% и существенно отличались от показателей эструса в группе PMSG и в группе hFSH-hFc (Р<0,01).
Число овулировавших яйцеклеток в каждой группе свиноматок было выше, чем у здоровых свиноматок в естественном эструсе (от 8 до 14 на свинью), а среднее число овулировавших яйцеклеток на свинью у первородящих и повторнородящих животных в группе pFSH-Fc-1 составило 27,7 и 27,5, соответственно, что было выше, чем в группе PMSG (19,8 и 20,2), в группе hFSH-hFc (22,1 и 21,6) и в группе pFSH-hFc (25,7 и 26,2) и существенно отличалось от аналогичных показателей в группе PMSG и группе hFSH-hFc (Р<0,05). Среднее число овулировавших яйцеклеток на свинью у первородящих и повторнородящих животных в группе pFSH-Fc-2 составило 29,9 и 29,1, соответственно, что было выше, чем в группе PMSG, в группе hFSH-hFc и в группе pFSH-hFc и существенно отличалось от аналогичных показателей в группе PMSG и в группе hFSH-hFc (Р<0,05).
Пример 5: Применение белков pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2 для увеличения размера помета у свиноматок
Отобрали 50 первородящих свиноматок йоркширской породы одинакового экстерьера и со схожими признаками. Их разделили на 5 групп: группы pFSH-Fc-1, pFSH-Fc-2, PMSG, hFSH-hFc и pFSH-hFc, каждой группе свиноматок вводили в виде инъекции препараты согласно способу, описанному в Примере 4. Во время эструса свиноматок в эструсе случали с хряками такого же экстерьера 3 раза с интервалами в 12 часов каждый раз. Размер помета в каждой группе свиноматок подробно фиксировали.
Полученные результаты показаны в Таблице 2, суммарный размер помета свиноматок в группах pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2 (123 и 125) было выше, чем в группе PMSG (65), группе hFSH-hFc (68) и группе pFSH-hFc (99) и существенно отличалось от аналогичных показателей в группах PMSG и hFSH-hFc (Р<0,05). Средний размер помета на один опорос в группах pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2 (13,7 и 13,9) также был выше, чем в группе PMSG (10,1), группе hFSH-hFc (10,5) и группе pFSH-hFc (12,4).
Пример 6: Применение белков pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2 в лечении свиноматок с анэструсом
100 свиноматок йоркширской породы без эструса на протяжении более 21 дня после отъема произвольно разделили на 5 групп: группы pFSH-Fc-1, pFSH-Fc-2, PMSG, hFSH-hFc и pFSH-hFc. По 1000 ME соответствующих препаратов вводили в виде инъекции соответственно в мышцы шеи, позади уха свиней-доноров каждой из групп, а через 72 часа вводили еще по 500 ME HCG в виде инъекции. Наблюдали характеристики эструса у свиноматок: такие как покраснение и слизь в вульве; и рефлекс неподвижности при нажатии на спину. Свиноматок в эструсе случали с хряками согласно Примерам 4 и 5, и фиксировали условия оплодотворения.
Полученные результаты приведены в Таблице 3. Свиноматки в анэструсе были чувствительны к реакциям препарата, показатели эструса у свиноматок в группах pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2 (85% и 90%) были выше, чем в группе PMSG (55%), группе hFSH-hFc (65%) и группе pFSH-hFc (75%) и существенно отличались от показателя в группе PMSG (Р<0,05). Показатели супоросности свиноматок в группах pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2 (88,2% и 88,9%) также были выше, чем в группе PMSG (63,6%), группе hFSH-hFc (61,5%) и группе pFSH-hFc (73,3%), и разница была несущественной (Р>0,05).
Пример 7: Применение белков pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2 в стимуляции суперовуляции у коров
50 коров голштинской породы в возрасте 3-6 лет, здоровых, без заболеваний произвольным образом разделили на группы pFSH-Fc-1, pFSH-Fc-2, PMSG, hFSH-hFc и pFSH-hFc. Каждая группа коров получала по 1 кг комбикорма на основе оригинального рациона, одновременно коровам внутримышечно вводили VA, VD и VE. Каждой корове-донору имплантировали интравагинально вкладыш CIDR с препаратом прогестерона (содержащий прогестерон в концентрации 1,56 г/интравагинальный вкладыш). День введения вкладыша регистрировали как День 0, коровам-донорам в каждой группе внутримышечно вводили инъекции по 1000 ME соответствующего препарата (День 5) и по 0,5 мг клопростенола (ПГ), затем вкладыш извлекали (День 10) и наблюдали эструс, приоритетным показателем считали садку быка, принимаемую коровой-донором. Первое осеменение проводили через 12 часов активной течки, второе осеменение проводили через 24 часа активной течки. Зародышей собирали на День 16 путем нехирургической промывки и подсчитывали количество зародышей.
Полученные результаты приведены в Таблице 4, эффекты, оказываемые на суперовуляцию коров-доноров в каждой группе введения были значительными (в естественных условиях от одной коровы получают только один эмбрион), а среднее количество эмбрионов на одну корову в группах pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2 (7,9 и 8,7) было выше, чем в группе PMSG (5,7), группе hFSH-hFc (6,1) и группе pFSH-hFc (7,3) и существенно отличалось от аналогичного показателя в группе PMSG и в группе hFSH-hFc (Р<0,05). Среднее количество пригодных для дальнейшего развития эмбрионов на одну корову в группах pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2 (6,1 и 7,4) было выше, чем в группе PMSG (3,5), группе hFSH-hFc (3,9), а также в группе pFSH-hFc (5,7) и существенно отличалось от показателя в группе PMSG и в группе hFSH-hFc (Р<0,05). Среднее количество непригодных для дальнейшего развития эмбрионов на одну корову в группах pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2 (1,8 и 1,3) было ниже, чем в группе PMSG (2,2) и группе hFSH-hFc (2,2), и показатель в группе pFSH-Fc-2 был меньше, чем в группе pFSH-hFc (1,6), и разница между группой pFSH-Fc-2 и группой PMFG, а также hFSH-hFc была значительной (Р<0,05).
Пример 8 Применение белков pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2 в стимуляции синхронизации эструса у самок коз
75 коз в возрасте 1,5-3 года, весом 30-45 кг, здоровых, без заболеваний произвольным образом разделили на группы pFSH-Fc-1, pFSH-Fc-2, PMSG, hFSH-hFc и pFSH-hFc. Каждой козе-донору имплантировали интравагинально вкладыш с препаратом прогестерона в любой день цикла эструса, и такой день регистрировали как День 0. Каждой козе-донору внутримышечно вводили по 300 ME соответствующего препарата (День 10), затем вкладыш извлекали (День 12). Наблюдали характеристики эструса у самок коз, для определения прихода самок коз в эструс использовали козла-пробника. Ситуации, в которых имело место покраснение и слизь в вульве у самок коз, а также принятие садки считали эструсом, и рассчитывали показатель эструса.
Полученные результаты приведены в Таблице 5, эструс у самок коз в каждой группе был очевидным, оба показателя эструса самок коз в группах pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2 составили 93,3%, чтобы было выше показателей в группе PMSG (60%), группе hFSH-hFc (73,3%) и группе pFSH-hFc (80,0%) и существенно отличались от показателя в группе PMSG (Р<0,05).
Пример 9: Детекция антигенного иммунитета белков pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2
Антигенный иммунитет белков pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2 детектировали посредством детекции антител к лекарственному препарату (ADA) в сыворотке образца с помощью мостикового ИФА. Отобрали 40 йоркширских первородящих свиноматок и разделили их на 4 группы: группа pFSH-Fc-1, группа pFSH-Fc-2, группа hFSH-hFc и группа pFSH-hFc. По 1000 ME препаратов вводили в виде инъекции в мышцы шеи, позади уха каждой свиньи-донора, и вводили один раз каждые три дня на протяжении в общей сложности 5 недель (13 раз введения), и день первого введения регистрировали как День 0. Образцы крови отбирали в следующих точках: перед первым введением (День-2), перед третьим введением (День 6), перед пятым введением (День 12) и перед шестым введением до последнего введения (День 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33 и 36), и на третий день после последнего введения (День 39). Кровь центрифугировали, собирали сыворотку, детектировали при OD490 нм значение ADA в сыворотке на планшете для ИФА, покрытом pFSH-Fc-1, pFSH-Fc-2, hFSH-hFc или pFSH-hFc, соответственно. Готовили образцы для положительного контроля с кроличьим моноклональным антителом против pFSH-Fc-1, против pFSH-Fc-2, против hFSH-hFc или против pFSH-hFc, разведенным с 100% смешанной свиной сывороткой, соответственно; и готовили образцы отрицательного контроля (N) с сывороткой первородящей свиноматки йоркширской породы, инъецированной с таким же количеством буфера PBS. Пороговое значение (SCP) использовали в качестве критерия оценки для разграничения испытуемых образцов на положительные и отрицательные. В соответствии с расчетами с применением программного обеспечения JMP® для статистического анализа значение SCP составило 1,15, то есть, при значении SCP≥1,15 образец считали положительным и содержащим ADA; в противном случае образец считали отрицательным и не содержащим ADA.
Результаты приведены в Таблице 6, все значения SCP для образцов, полученных от свиней-доноров в группах pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2, были ниже, чем 1,15, и ADA не детектировали, что свидетельствовало об отсутствии образования антител к лекарственному препарату у свиноматок йоркширской породы, инъецированных 1000 ME pFSH-Fc-1 или pFSH-Fc-2. В группе hFSH-hFc значения SCP в образцах сыворотки свиноматок №№1, 2, 4, 7 и 9 были больше, чем 1,15 в День 27 и после Дня 27 (первое обнаружение в День 27, последнее обнаружение в День 39), а значения SCP в образцах сыворотки других свиноматок были больше, чем 1,15 в День 30 и после Дня 30 (первое обнаружение в День 30, последнее обнаружение в День 39), что свидетельствует о том, что ADA детектировали у всех свиноматок в группе hFSH-hFc, т.е. показатель позитивности составил 100%. В группе pFSH-hFc значения SCP в образцах сыворотки свиноматок №№2, 3, 6, 7 и 9 были больше, чем 1,15 в День 30 и после Дня 30 (первое обнаружение в День 30, последнее обнаружение в День 39), значения SCP в образцах сыворотки свиноматок №№1, 5 и 8 были больше, чем 1,15 в День 36 и после Дня 36 (первое обнаружение в День 36, последнее обнаружение в День 39), и значения SCP во всех образцах сыворотки свиноматок №№4 и 10 были меньше, чем 1,15, что свидетельствует о том, что ADA детектировали у 8 свиноматок в группе pFSH-hFc, т.е. показатель позитивности составил 80%. Приведенные выше результаты свидетельствуют о том, что у свиноматок йоркширской породы, инъецированных 1000 ME hFSH-hFc или pFSH-hFc, вырабатываются антитела к лекарственному препарату.
Хотя настоящее изобретение подробно описано выше при помощи общего описания и конкретных вариантов осуществления, возможность внесения некоторых модификаций или улучшений на основе настоящего изобретения будет очевидной для специалиста в данной области техники. Следовательно, все такие модификации и улучшения, внесенные без отклонения от сути настоящего изобретения, подпадают под объем защиты настоящего изобретения.
Промышленная применимость
В настоящем изобретении предложены два длительно действующих рекомбинантных гибридных белка свиного ФСГ (follicle-stimulating hormone - фолликулостимулирующего гормона), содержащих pFSH-Fc-1 и pFSH-Fc-2. α-субъединица/β-субъединица прямо или непрямо гибридизирована с Fc-фрагментом посредством связывающего компонента; β-субъединица/α-субъединица связана с α-субъединицей/β-субъединицей посредством ван-дер-ваальсовой силы или связывающего компонента. Гибридные белки свиного ФСГ можно приготовить, используя эукариотическую систему экспрессии на основе технологии генной инженерии. Два гибридных белка свиного ФСГ, предложенных в настоящем изобретении, обладают хорошим лечебным эффектом и более длительным периодом полувыведения по сравнению с периодом полувыведения у натурального свиного ФСГ; не вызывают нежелательных эффектов у животных, не приводят к иммуногенности у свиноматок, не вызывают выработку антител к препарату и могут заменить гонадотропин из сыворотки беременных кобыл (PMSG), применяемый в разведении животных, могут эффективно стимулировать коэффициент воспроизводства животных, в особенности сельскохозяйственных животных, а также имеют хорошие экономическую ценность и перспективы применения.
--->
Перечень последовательностей
<110> BEIJING VJT BIO CO., LTD.
<120> Long-acting Recombinant Porcine FSH Fusion Protein and Preparation
Method and Application Thereof
<130> KHP193910062.1
<160> 9
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 96
<212> PRT
<213> Sus scrofa
<400> 1
Phe Pro Asp Gly Glu Phe Thr Met Gln Gly Cys Pro Glu Cys Lys Leu
1 5 10 15
Lys Glu Asn Lys Tyr Phe Ser Lys Leu Gly Ala Pro Ile Tyr Gln Cys
20 25 30
Met Gly Cys Cys Phe Ser Arg Ala Tyr Pro Thr Pro Ala Arg Ser Lys
35 40 45
Lys Thr Met Leu Val Pro Lys Asn Ile Thr Ser Glu Ala Thr Cys Cys
50 55 60
Val Ala Lys Ala Phe Thr Lys Ala Thr Val Met Gly Asn Ala Arg Val
65 70 75 80
Glu Asn His Thr Glu Cys His Cys Ser Thr Cys Tyr Tyr His Lys Ser
85 90 95
<210> 2
<211> 288
<212> DNA
<213> Sus scrofa
<400> 2
ttccctgacg gcgagttcac catgcagggc tgccccgagt gcaagctgaa ggagaacaag 60
tacttctcca agctgggcgc ccccatctac cagtgcatgg gctgctgctt ctcccgggct 120
taccctaccc ctgcccggtc caagaagacc atgctggtgc ccaagaacat cacctccgag 180
gccacctgtt gcgtggccaa ggccttcacc aaggccaccg tgatgggcaa cgccagggtg 240
gagaaccaca ccgagtgcca ctgcagcacc tgctactacc acaagtcc 288
<210> 3
<211> 109
<212> PRT
<213> Sus scrofa
<400> 3
Cys Glu Leu Thr Asn Ile Thr Ile Thr Val Glu Lys Glu Glu Cys Asn
1 5 10 15
Phe Cys Ile Ser Ile Asn Thr Thr Trp Cys Ala Gly Tyr Cys Tyr Thr
20 25 30
Arg Asp Leu Val Tyr Lys Asp Pro Ala Arg Pro Asn Ile Gln Lys Thr
35 40 45
Cys Thr Phe Lys Glu Leu Val Tyr Glu Thr Val Lys Val Pro Gly Cys
50 55 60
Ala His His Ala Asp Ser Leu Tyr Thr Tyr Pro Val Ala Thr Glu Cys
65 70 75 80
His Cys Gly Lys Cys Asp Ser Asp Ser Thr Asp Cys Thr Val Arg Gly
85 90 95
Leu Gly Pro Ser Tyr Cys Ser Phe Ser Glu Met Lys Glu
100 105
<210> 4
<211> 327
<212> DNA
<213> Sus scrofa
<400> 4
tgcgaactca caaacatcac catcaccgtg gaaaaggagg agtgcaactt ctgcatcagc 60
atcaacacca cctggtgcgc cggctattgc tatacaaggg atctggtcta caaggacccc 120
gccaggccca acatccagaa gacatgcacc ttcaaggagc tggtgtatga aaccgtgaag 180
gtccccggat gcgcccatca cgccgattcc ctgtacacct accccgtggc taccgagtgc 240
cattgcggca agtgcgactc cgactccacc gattgtacag tgaggggcct cggaccctcc 300
tactgctcct ttagcgagat gaaggag 327
<210> 5
<211> 221
<212> PRT
<213> Sus scrofa
<400> 5
Ile Cys Pro Ala Cys Glu Ser Pro Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro
1 5 10 15
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Gln Val Thr
20 25 30
Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asn Pro Glu Val Gln Phe Ser
35 40 45
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Arg Pro Lys
50 55 60
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile
65 70 75 80
Gln His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn
85 90 95
Asn Lys Asp Leu Pro Ala Pro Ile Thr Arg Ile Ile Ser Lys Ala Lys
100 105 110
Gly Gln Thr Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro His Ala Glu
115 120 125
Glu Leu Ser Arg Ser Lys Val Ser Ile Thr Cys Leu Val Ile Gly Phe
130 135 140
Tyr Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln Arg Asn Gly Gln Pro Glu
145 150 155 160
Pro Glu Gly Asn Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Gln Asp Val Asp Gly
165 170 175
Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Phe Ser Val Asp Lys Ala Ser Trp Gln
180 185 190
Gly Gly Gly Ile Phe Gln Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn
195 200 205
His Tyr Thr Gln Lys Ser Ile Ser Lys Thr Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 6
<211> 332
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<400> 6
Phe Pro Asp Gly Glu Phe Thr Met Gln Gly Cys Pro Glu Cys Lys Leu
1 5 10 15
Lys Glu Asn Lys Tyr Phe Ser Lys Leu Gly Ala Pro Ile Tyr Gln Cys
20 25 30
Met Gly Cys Cys Phe Ser Arg Ala Tyr Pro Thr Pro Ala Arg Ser Lys
35 40 45
Lys Thr Met Leu Val Pro Lys Asn Ile Thr Ser Glu Ala Thr Cys Cys
50 55 60
Val Ala Lys Ala Phe Thr Lys Ala Thr Val Met Gly Asn Ala Arg Val
65 70 75 80
Glu Asn His Thr Glu Cys His Cys Ser Thr Cys Tyr Tyr His Lys Ser
85 90 95
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ile
100 105 110
Cys Pro Ala Cys Glu Ser Pro Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Gln Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asn Pro Glu Val Gln Phe Ser Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Arg Pro Lys Glu
165 170 175
Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gln
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn
195 200 205
Lys Asp Leu Pro Ala Pro Ile Thr Arg Ile Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Thr Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro His Ala Glu Glu
225 230 235 240
Leu Ser Arg Ser Lys Val Ser Ile Thr Cys Leu Val Ile Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Pro Asp Ile Asp Val Glu Trp Gln Arg Asn Gly Gln Pro Glu Pro
260 265 270
Glu Gly Asn Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Gln Asp Val Asp Gly Thr
275 280 285
Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Phe Ser Val Asp Lys Ala Ser Trp Gln Gly
290 295 300
Gly Gly Ile Phe Gln Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
305 310 315 320
Tyr Thr Gln Lys Ser Ile Ser Lys Thr Pro Gly Lys
325 330
<210> 7
<211> 996
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<400> 7
ttccctgacg gcgagttcac catgcagggc tgccccgagt gcaagctgaa ggagaacaag 60
tacttctcca agctgggcgc ccccatctac cagtgcatgg gctgctgctt ctcccgggct 120
taccctaccc ctgcccggtc caagaagacc atgctggtgc ccaagaacat cacctccgag 180
gccacctgtt gcgtggccaa ggccttcacc aaggccaccg tgatgggcaa cgccagggtg 240
gagaaccaca ccgagtgcca ctgcagcacc tgctactacc acaagtccgg aggaggagga 300
tccggaggag gcggctccgg cggcggaggc agcatctgtc ctgcttgtga gagccccggc 360
cctagcgtgt ttatcttccc ccccaagccc aaggacaccc tgatgatctc caggaccccc 420
caggtcacct gtgtcgtggt ggacgtgagc caggagaacc ctgaggtcca gttttcctgg 480
tacgtggatg gcgtggaggt gcacaccgcc cagaccaggc ccaaggagga acagttcaat 540
tccacctacc gggtggtgag cgtgctgcct atccagcatc aggactggct gaacggaaag 600
gagtttaagt gcaaggtcaa caacaaggac ctgcccgccc ccatcaccag gatcatcagc 660
aaagctaaag gccagacccg ggaaccccag gtgtacaccc tgcctcccca cgctgaggag 720
ctgtccagga gcaaggtgag catcacatgc ctggtcattg gcttctaccc tcccgacatc 780
gacgtcgaat ggcagaggaa tggccagccc gaacccgagg gaaactacag gaccacccct 840
ccccagcagg acgtggatgg aacctatttt ctgtactcca agttctccgt ggacaaggcc 900
tcctggcagg gcggcggaat ttttcagtgc gccgtgatgc acgaggctct ccacaaccat 960
tacacccaga agtccatctc caagaccccc ggcaaa 996
<210> 8
<211> 345
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<400> 8
Cys Glu Leu Thr Asn Ile Thr Ile Thr Val Glu Lys Glu Glu Cys Asn
1 5 10 15
Phe Cys Ile Ser Ile Asn Thr Thr Trp Cys Ala Gly Tyr Cys Tyr Thr
20 25 30
Arg Asp Leu Val Tyr Lys Asp Pro Ala Arg Pro Asn Ile Gln Lys Thr
35 40 45
Cys Thr Phe Lys Glu Leu Val Tyr Glu Thr Val Lys Val Pro Gly Cys
50 55 60
Ala His His Ala Asp Ser Leu Tyr Thr Tyr Pro Val Ala Thr Glu Cys
65 70 75 80
His Cys Gly Lys Cys Asp Ser Asp Ser Thr Asp Cys Thr Val Arg Gly
85 90 95
Leu Gly Pro Ser Tyr Cys Ser Phe Ser Glu Met Lys Glu Gly Gly Gly
100 105 110
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ile Cys Pro Ala
115 120 125
Cys Glu Ser Pro Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys
130 135 140
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Gln Val Thr Cys Val Val Val
145 150 155 160
Asp Val Ser Gln Glu Asn Pro Glu Val Gln Phe Ser Trp Tyr Val Asp
165 170 175
Gly Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Arg Pro Lys Glu Glu Gln Phe
180 185 190
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Pro Ile Gln His Gln Asp
195 200 205
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu
210 215 220
Pro Ala Pro Ile Thr Arg Ile Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Thr Arg
225 230 235 240
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro His Ala Glu Glu Leu Ser Arg
245 250 255
Ser Lys Val Ser Ile Thr Cys Leu Val Ile Gly Phe Tyr Pro Pro Asp
260 265 270
Ile Asp Val Glu Trp Gln Arg Asn Gly Gln Pro Glu Pro Glu Gly Asn
275 280 285
Tyr Arg Thr Thr Pro Pro Gln Gln Asp Val Asp Gly Thr Tyr Phe Leu
290 295 300
Tyr Ser Lys Phe Ser Val Asp Lys Ala Ser Trp Gln Gly Gly Gly Ile
305 310 315 320
Phe Gln Cys Ala Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln
325 330 335
Lys Ser Ile Ser Lys Thr Pro Gly Lys
340 345
<210> 9
<211> 1035
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<400> 9
tgcgaactca caaacatcac catcaccgtg gaaaaggagg agtgcaactt ctgcatcagc 60
atcaacacca cctggtgcgc cggctattgc tatacaaggg atctggtcta caaggacccc 120
gccaggccca acatccagaa gacatgcacc ttcaaggagc tggtgtatga aaccgtgaag 180
gtccccggat gcgcccatca cgccgattcc ctgtacacct accccgtggc taccgagtgc 240
cattgcggca agtgcgactc cgactccacc gattgtacag tgaggggcct cggaccctcc 300
tactgctcct ttagcgagat gaaggaggga ggaggaggat ccggaggagg cggctccggc 360
ggcggaggca gcatctgtcc tgcttgtgag agccccggcc ctagcgtgtt tatcttcccc 420
cccaagccca aggacaccct gatgatctcc aggacccccc aggtcacctg tgtcgtggtg 480
gacgtgagcc aggagaaccc tgaggtccag ttttcctggt acgtggatgg cgtggaggtg 540
cacaccgccc agaccaggcc caaggaggaa cagttcaatt ccacctaccg ggtggtgagc 600
gtgctgccta tccagcatca ggactggctg aacggaaagg agtttaagtg caaggtcaac 660
aacaaggacc tgcccgcccc catcaccagg atcatcagca aagctaaagg ccagacccgg 720
gaaccccagg tgtacaccct gcctccccac gctgaggagc tgtccaggag caaggtgagc 780
atcacatgcc tggtcattgg cttctaccct cccgacatcg acgtcgaatg gcagaggaat 840
ggccagcccg aacccgaggg aaactacagg accacccctc cccagcagga cgtggatgga 900
acctattttc tgtactccaa gttctccgtg gacaaggcct cctggcaggg cggcggaatt 960
tttcagtgcg ccgtgatgca cgaggctctc cacaaccatt acacccagaa gtccatctcc 1020
aagacccccg gcaaa 1035
<---
Claims (11)
1. Длительно действующий рекомбинантный гибридной белок свиного ФСГ (фолликулостимулирующего гормона), pFSH-Fc-1,
где pFSH-Fc-1 содержит две пептидные цепи и соответствует формуле (pFSHβ:pFSHα-L-Fc)2, где pFSHβ относится к β-субъединице свиного ФСГ с удаленным сигнальным пептидом; двоеточие обозначает, что β-субъединица и α-субъединица свиного ФСГ связаны посредством ван-дер-ваальсовой связи; pFSHα относится к α-субъединице свиного ФСГ с удаленным сигнальным пептидом; L обозначает линкерную связь между субъединицей pFSHα и Fc-фрагментом; Fc относится к Fc-фрагменту иммуноглобулина; нижний индекс 2 за скобками означает, что pFSH-Fc-1 представляет собой дивалентный гомодимер,
причем аминокислотная последовательность pFSHα-L-Fc представлена в SEQ ID NO: 6, а аминокислотная последовательность pFSHβ представлена в SEQ ID NO: 3.
2. Длительно действующий рекомбинантный гибридный белок свиного ФСГ pFSH-Fc-2, где pFSH-Fc-2 содержит две пептидные цепи и соответствует формуле (pFSHα:pFSHβ-L-Fc)2, где pFSHβ относится к β-субъединице свиного ФСГ с удаленным сигнальным пептидом; двоеточие обозначает, что β-субъединица и α-субъединица свиного ФСГ связаны посредством ван-дер-ваальсовой связи; pFSHα относится к α-субъединице свиного ФСГ с удаленным сигнальным пептидом; L обозначает линкерную связь между субъединицей pFSHβ и Fc-фрагментом; Fc относится к Fc-фрагменту иммуноглобулина; нижний индекс 2 за скобками означает, что pFSH-Fc-2 представляет собой дивалентный гомодимер;
причем аминокислотная последовательность pFSHβ-L-Fc представлена в SEQ ID NO: 8, а аминокислотная последовательность pFSHα представлена в SEQ ID NO: 1.
3. Экспрессионная кассета, содержащая нуклеиновую кислоту, кодирующую гибридный белок по любому из пп. 1 или 2.
4. Экспрессионный вектор, содержащий нуклеиновую кислоту, кодирующую гибридный белок по любому из пп. 1 или 2.
5. Клонирующий вектор, содержащий нуклеиновую кислоту, кодирующую гибридный белок по любому из пп. 1 или 2.
6. Клетка СНО для экспрессии гибридного белка по любому из пп. 1 или 2, содержащая экспрессионный вектор по п. 4.
7. Применение гибридного белка по любому из пп. 1 или 2 для получения лекарственного средства для синхронизации эструса и суперовуляции у животного, при этом животное представляет собой свинью, крупный рогатый скот или козу.
8. Применение гибридного белка по любому из пп. 1 или 2 для получения лекарственного средства для лечения анэструса у свиней.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710833452.1A CN107540748B (zh) | 2017-09-15 | 2017-09-15 | 长效重组猪fsh融合蛋白及其制备方法与应用 |
CN201710833452.1 | 2017-09-15 | ||
PCT/CN2017/108854 WO2019051954A1 (zh) | 2017-09-15 | 2017-11-01 | 长效重组猪fsh融合蛋白及其制备方法与应用 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2747291C1 true RU2747291C1 (ru) | 2021-05-04 |
Family
ID=60963196
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2020102568A RU2747291C1 (ru) | 2017-09-15 | 2017-11-01 | Длительно действующий рекомбинантный свиной гибридный белок FSH, способ его приготовления и его применение |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US11299527B2 (ru) |
EP (1) | EP3722323A4 (ru) |
CN (1) | CN107540748B (ru) |
AU (1) | AU2017431494B2 (ru) |
BR (1) | BR112020001332A2 (ru) |
CA (1) | CA3065112A1 (ru) |
RU (1) | RU2747291C1 (ru) |
WO (1) | WO2019051954A1 (ru) |
Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108531508B (zh) * | 2018-03-20 | 2021-07-16 | 西北民族大学 | 一种绵羊促卵泡激素基因重组表达制备方法 |
CN108676096B (zh) * | 2018-05-22 | 2022-03-29 | 北京伟杰信生物科技有限公司 | 重组猪fsh-ctp融合蛋白及其制备方法与应用 |
CN108503705A (zh) * | 2018-07-10 | 2018-09-07 | 北京伟杰信生物科技有限公司 | 一种重组绒促性素(rhCG)的纯化方法 |
CN109336981A (zh) * | 2018-09-19 | 2019-02-15 | 北京伟杰信生物科技有限公司 | 一种重组马绒毛膜促性腺激素融合蛋白及其制备方法和其应用 |
CN109942717A (zh) * | 2019-04-24 | 2019-06-28 | 上海延立药业有限公司 | 一种长效重组人促卵泡激素及其制备方法和应用 |
CN111848814B (zh) * | 2020-06-21 | 2022-12-06 | 北京伟杰信生物科技有限公司 | 一种重组猪il-29融合蛋白及其制备方法与应用 |
CN114957442B (zh) * | 2022-04-05 | 2023-07-14 | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 | 一种具有促进大菱鲆卵巢发育功能的重组蛋白 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7563763B2 (en) * | 1998-07-23 | 2009-07-21 | Ares Trading S.A. | FSH and FSH variant formulations, products and methods |
RU2483081C2 (ru) * | 2008-07-23 | 2013-05-27 | Ханми Сайенс Ко.,Лтд.,Kr | Полипептидный комплекс, содержащий непептидильный полимер, обладающий тремя функциональными концами |
WO2015062349A1 (zh) * | 2013-11-01 | 2015-05-07 | 广州优联康医药科技有限公司 | 一种长效重组人促卵泡激素融合蛋白 |
EP2924049A1 (en) * | 2012-11-22 | 2015-09-30 | Suzhou Alphamab Co., Ltd | Trophic hormone fusion protein, preparation method and application thereof |
EP3027647A2 (en) * | 2013-07-31 | 2016-06-08 | Amgen Inc. | Stabilization of fc-containing polypeptides |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008504012A (ja) * | 2004-01-28 | 2008-02-14 | シントニックス・ファーマシューティカルズ・インコーポレーテッド | 不妊治療のためのへテロ二量体卵胞刺激ホルモン−Fc(FSH−Fc)融合タンパク質 |
CN2924049Y (zh) * | 2006-04-06 | 2007-07-18 | 重庆宗申技术开发研究有限公司 | 发动机火花塞异步点火装置 |
US8956623B2 (en) * | 2012-07-24 | 2015-02-17 | Sbc Virbac Limited | Recombinant fusion interferon for animals |
US8784834B2 (en) * | 2012-07-24 | 2014-07-22 | Sbc Virbac Biotech Co., Ltd. | Recombinant fusion interferon for animals |
CN103539862B (zh) | 2013-11-01 | 2015-04-01 | 广州联康生物科技有限公司 | 一种长效重组促卵泡激素及其应用 |
CN103554268B (zh) | 2013-11-01 | 2015-04-01 | 广州联康生物科技有限公司 | 长效重组促卵泡激素及其应用 |
CN103554269B (zh) * | 2013-11-01 | 2015-02-11 | 广州联康生物科技有限公司 | 重组猪促卵泡激素融合蛋白 |
CN106496331B (zh) | 2016-11-08 | 2020-03-13 | 北京智岭生物医药科技有限公司 | 一种FSH-Fc融合蛋白及其制备方法和用途 |
-
2017
- 2017-09-15 CN CN201710833452.1A patent/CN107540748B/zh active Active
- 2017-11-01 RU RU2020102568A patent/RU2747291C1/ru active
- 2017-11-01 BR BR112020001332-3A patent/BR112020001332A2/pt unknown
- 2017-11-01 US US16/609,543 patent/US11299527B2/en active Active
- 2017-11-01 AU AU2017431494A patent/AU2017431494B2/en active Active
- 2017-11-01 WO PCT/CN2017/108854 patent/WO2019051954A1/zh unknown
- 2017-11-01 EP EP17925156.6A patent/EP3722323A4/en active Pending
- 2017-11-01 CA CA3065112A patent/CA3065112A1/en active Pending
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7563763B2 (en) * | 1998-07-23 | 2009-07-21 | Ares Trading S.A. | FSH and FSH variant formulations, products and methods |
RU2483081C2 (ru) * | 2008-07-23 | 2013-05-27 | Ханми Сайенс Ко.,Лтд.,Kr | Полипептидный комплекс, содержащий непептидильный полимер, обладающий тремя функциональными концами |
EP2924049A1 (en) * | 2012-11-22 | 2015-09-30 | Suzhou Alphamab Co., Ltd | Trophic hormone fusion protein, preparation method and application thereof |
EP3027647A2 (en) * | 2013-07-31 | 2016-06-08 | Amgen Inc. | Stabilization of fc-containing polypeptides |
WO2015062349A1 (zh) * | 2013-11-01 | 2015-05-07 | 广州优联康医药科技有限公司 | 一种长效重组人促卵泡激素融合蛋白 |
Non-Patent Citations (12)
Title |
---|
ARNAU J. et al., Current strategies for the use of affinity tags and tag removal for the purification of recombinant proteins, Protein expression and purification, 2006, V. 48, N. 1, p.1-13; * |
BENJAMIN W. U. et al., Pharmacokinetics of peptide-Fc fusion proteins, Journal of pharmaceutical sciences, 2014, V. 103, N. 1, p.53-64; * |
BERRY M. J. et al., Substitution of cysteine for selenocysteine in type I iodothyronine deiodinase reduces the catalytic efficiency of the protein but enhances its translation, Endocrinology, 1992, V. 131, N. 4, p.1848-1852; * |
BRUNO LUNENFELD, Historical perspectives in gonadotrophin therapy, Human Reproduction Update, 2004, V.10, Iss.6, P.453-467 * |
CHEN X. et al., Fusion protein linkers: property, design and functionality, Advanced drug delivery reviews, 2013, v. 65, n. 10, p.1357-1369; * |
FRANKEL A.E. et al., Characterization of diphtheria fusion proteins targeted to the human interleukin-3 receptor, Protein Eng., 2000, v.13, n.8, p.575-581; * |
GASSER B. Et al., Antibody production with yeasts and filamentous fungi: on the road to large scale?, Biotechnology letters, 2007, V. 29, N. 2, p.201-212; * |
MAEDA Y. et al., Engineering of functional chimeric protein G-VargulaLuciferase, Analytical biochemistry, 1997, v. 249, n. 2, p.147-152; * |
ORLANDO M., Modification of proteins and low molecular weight substances with hydroxyethyl starch (HES), Inauguraldissertation, Giesen, 2003, p.166; * |
ORLANDO M., Modification of proteins and low molecular weight substances with hydroxyethyl starch (HES), Inauguraldissertation, Giesen, 2003, p.166; FRANKEL A.E. et al., Characterization of diphtheria fusion proteins targeted to the human interleukin-3 receptor, Protein Eng., 2000, v.13, n.8, p.575-581; ARNAU J. et al., Current strategies for the use of affinity tags and tag removal for the purification of recombinant proteins, Protein expression and purification, 2006, V. 48, N. 1, p.1-13; SUZUKI T. et al., Importance of neonatal FcR in regulating the serum half-life of therapeutic proteins containing the Fc domain of human IgG1: a comparative study of the affinity of monoclonal antibodies and Fc-fusion proteins to human neonatal FcR, The journal of immunology, 2010, V. 184, N. 4, p.1968-1976; BENJAMIN W. U. et al., Pharmacokinetics of peptide-Fc fusion proteins, Journal of pharmaceutical sciences, 2014, V. 103, N. 1, p.53-64; CHEN X. et al., Fusion protein linkers: property, design a * |
SUZUKI T. et al., Importance of neonatal FcR in regulating the serum half-life of therapeutic proteins containing the Fc domain of human IgG1: a comparative study of the affinity of monoclonal antibodies and Fc-fusion proteins to human neonatal FcR, The journal of immunology, 2010, V. 184, N. 4, p.1968-1976; * |
Диагностика, терапия и групповая профилактика болезней органов размножения быков-производителей: метод. пособие/Россельхозакадемия, ГНУ Красноярский НИИЖ. - Красноярск, 2014, 46 с.. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2019051954A1 (zh) | 2019-03-21 |
EP3722323A4 (en) | 2021-05-19 |
EP3722323A1 (en) | 2020-10-14 |
NZ760019A (en) | 2023-08-25 |
CA3065112A1 (en) | 2019-03-21 |
US11299527B2 (en) | 2022-04-12 |
CN107540748A (zh) | 2018-01-05 |
AU2017431494B2 (en) | 2021-04-15 |
US20200223896A1 (en) | 2020-07-16 |
BR112020001332A2 (pt) | 2020-08-11 |
AU2017431494A1 (en) | 2020-01-16 |
CN107540748B (zh) | 2020-07-14 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2747291C1 (ru) | Длительно действующий рекомбинантный свиной гибридный белок FSH, способ его приготовления и его применение | |
CN108676096B (zh) | 重组猪fsh-ctp融合蛋白及其制备方法与应用 | |
CN103930134A (zh) | 长效促黄体激素(lh)化合物 | |
US20210054041A1 (en) | Glycoprotein Hormone Long-Acting Superagonists | |
RU2193599C2 (ru) | Рецептор фолликулостимулирующего гормона (fsh) человека, днк, вектор, способ получения, фармацевтическая композиция | |
US20160264639A1 (en) | Glycoprotein Hormone Long-Acting Superagonists | |
EA013975B1 (ru) | Мутантный fsh и способы его применения | |
US20190127432A1 (en) | Glycoprotein hormone long-acting superagonists | |
NZ760019B2 (en) | Long-acting recombinant porcine fsh fusion protein, and preparation method and application thereof | |
AU643444B2 (en) | SRIF-related peptides and uses thereof | |
Kumari | Gonadotropins: In Specific Context To The Mare Placental Gonadotropins | |
RU2803047C1 (ru) | Рекомбинантный хорионический гонадотропин, способ его получения, фармацевтические композиции и применения | |
MXPA06011898A (es) | Superagonistas de hormona foliculoestimulante |