RU2740312C2 - Инсектицидные белки и способы их применения - Google Patents

Инсектицидные белки и способы их применения Download PDF

Info

Publication number
RU2740312C2
RU2740312C2 RU2017128859A RU2017128859A RU2740312C2 RU 2740312 C2 RU2740312 C2 RU 2740312C2 RU 2017128859 A RU2017128859 A RU 2017128859A RU 2017128859 A RU2017128859 A RU 2017128859A RU 2740312 C2 RU2740312 C2 RU 2740312C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
seq
pip
polypeptide
accession
sequence
Prior art date
Application number
RU2017128859A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2017128859A3 (ru
RU2017128859A (ru
Inventor
Стивен ГРУВЕР
Хитер КОЗИ
Джессика О'Рир
Барбара Роузен
Уте Шелленбергер
Цзюнь-чжи Вэй
Вэйпин Се
Сяохун Чжун
Гэньхай Чжу
Original Assignee
Пайониэ Хай-Бред Интернешнл, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Пайониэ Хай-Бред Интернешнл, Инк. filed Critical Пайониэ Хай-Бред Интернешнл, Инк.
Publication of RU2017128859A publication Critical patent/RU2017128859A/ru
Publication of RU2017128859A3 publication Critical patent/RU2017128859A3/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2740312C2 publication Critical patent/RU2740312C2/ru

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H1/00Processes for modifying genotypes ; Plants characterised by associated natural traits
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/195Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • C07K14/21Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Pseudomonadaceae (F)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H5/00Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their plant parts; Angiosperms characterised otherwise than by their botanic taxonomy
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N37/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids
    • A01N37/44Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids containing at least one carboxylic group or a thio analogue, or a derivative thereof, and a nitrogen atom attached to the same carbon skeleton by a single or double bond, this nitrogen atom not being a member of a derivative or of a thio analogue of a carboxylic group, e.g. amino-carboxylic acids
    • A01N37/46N-acyl derivatives
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/20Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A01N63/27Pseudomonas
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/50Isolated enzymes; Isolated proteins
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07HSUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H21/00Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
    • C07H21/04Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with deoxyribosyl as saccharide radical
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • C12N15/8279Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance
    • C12N15/8286Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance for insect resistance
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/10Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in agriculture
    • Y02A40/146Genetically Modified [GMO] plants, e.g. transgenic plants

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Insects & Arthropods (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области биохимии, в частности к инсектицидному полипептиду, обладающему инсектицидной активностью против западного кукурузного жука (WCRW). Также раскрыты: инсектицидная композиция, содержащая указанный полипептид; полинуклеотид, кодирующий указанный полипептид; ДНК-конструкция, трансгенное растение, содержащая указанный полинуклеотид. Также раскрыты способы ингибирования роста, контроля заражения с помощью указанного полипептида, а также применение указанного полипептида. Изобретение позволяет эффективно бороться с западным кукурузным жуком. 16 н. и 2 з.п. ф-лы, 8 ил., 19 табл., 11 пр.

Description

ССЫЛКА НА ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ, ПРЕДСТАВЛЕННЫЙ В ЭЛЕКТРОННОМ ВИДЕ
Перечень последовательностей с названием файла "5914-PCT_seq_list.txt", созданный 19 ноября 2015 года, и размером 542 килобайта подается в машиночитаемой форме одновременно с настоящим описанием. Перечень последовательностей является частью настоящего описания и в полном объеме включен в данный документ с помощью ссылки.
Государственная поддержка
Государство имеет определенные права на настоящее изобретение в соответствии с соглашением № LB09005376.
ОБЛАСТЬ
Настоящее раскрытие относится к области молекулярной биологии. Предусматриваются новые гены, которые кодируют пестицидные белки. Эти пестицидные белки и последовательности нуклеиновой кислоты, которые их кодируют, применимы в приготовлении пестицидных составов и в получении трансгенных растений, устойчивых к вредителям.
ПРЕДПОСЫЛКИ
Биологический контроль насекомых-вредителей, имеющих сельскохозяйственное значение, с применением микробного агента, такого как грибы, бактерии или другие виды насекомых, представляет не оказывающую отрицательного влияния на окружающую среду и коммерчески привлекательную альтернативу синтетическим химическим пестицидам. В целом можно сказать, что применение биопестицидов приводит к меньшему риску загрязнения и неблагоприятных воздействий на окружающую среду, и биопестициды обеспечивают большую специфичность по отношению к мишени, чем та, которая характерна для традиционных химических инсектицидов широкого спектра действия. Кроме того, зачастую производство биопестицидов стоит дешевле, и, вследствие этого, улучшается экономически эффективный выход продукции для широкого спектра сельскохозяйственных культур.
Как известно, определенные виды микроорганизмов рода Bacillus обладают пестицидной активностью в отношении ряда насекомых-вредителей, в том числе Lepidoptera, Diptera, Coleoptera, Hemiptera и других. Bacillus thuringiensis (Bt) и Bacillus popilliae входят в число наиболее успешных средств биологического контроля, обнаруженных на сегодняшний день. Патогенность в отношении насекомых также приписывалась штаммам B. larvae, B. lentimorbus, B. sphaericus и B. cereus. Микробные инсектициды, в частности полученные из штаммов Bacillus, сыграли важную роль в сельском хозяйстве как альтернатива химическому контролю вредителей.
Были разработаны культурные растения с улучшенной устойчивостью к насекомым с помощью генной инженерии культурных растений для выработки пестицидных белков Bacillus. Например, с помощью генной инженерии были разработаны растения кукурузы и хлопчатника для выработки пестицидных белков, выделенных из штаммов Bt. Данные сельскохозяйственные культуры, разработанные с помощью генной инженерии, в настоящее время широко применяются в сельском хозяйстве и предоставляют фермеру не оказывающую отрицательного влияния на окружающую среду альтернативу традиционным способам контроля насекомых. В то время как они были признаны коммерчески очень успешными, данные разработанные с помощью генной инженерии устойчивые к насекомым культурные растения обеспечивают устойчивость только к узкому диапазону экономически важных насекомых-вредителей. В некоторых случаях насекомые могут развивать устойчивость к различным инсектицидным соединениям, что повышает необходимость в установлении альтернативных биологических средств контроля для контроля вредителей.
Соответственно, остается необходимость в новых пестицидных белках с различными диапазонами инсектицидной активности в отношении насекомых-вредителей, например инсектицидных белках, которые активны в отношении ряда насекомых из отряда Lepidoptera и отряда Coleoptera, в том числе без ограничения насекомых-вредителей, которые развили устойчивость к существующим инсектицидам.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ
Предусматриваются композиции и способы обеспечения пестицидной активности у бактерий, растений, растительных клеток, тканей и семян. Композиции включают молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие последовательности пестицидных и инсектицидных полипептидов, векторы, содержащие такие молекулы нуклеиновой кислоты, и клетки-хозяева, содержащие векторы. Композиции также включают последовательности пестицидных полипептидов и антитела к таким полипептидам. Последовательности нуклеиновой кислоты можно применять в ДНК-конструкциях или кассетах экспрессии для трансформации и экспрессии в организмах, в том числе микроорганизмах и растениях. Нуклеотидные или аминокислотные последовательности могут представлять собой синтетические последовательности, которые были сконструированы для экспрессии в организме, в том числе без ограничения микроорганизме или растении. Композиции также содержат трансформированные бактерии, растения, растительные клетки, ткани и семена.
В частности, предусматриваются выделенные или рекомбинантные молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие полипептиды, инсектицидный белок-45-1 Pseudomonas (PIP-45-1), в том числе аминокислотные замены, делеции, вставки и их фрагменты и их комбинации. Дополнительно, охватываются аминокислотные последовательности, соответствующие полипептидам PIP-45-1. Предусматриваются выделенные или рекомбинантные молекулы нуклеиновой кислоты, способные кодировать полипептид PIP-45-1 с SEQ ID NO: 1, а также аминокислотные замены, делеции, вставки, их фрагменты и их комбинации. Также охватываются последовательности нуклеиновой кислоты, которые комплементарны последовательности нуклеиновой кислоты согласно вариантам осуществления или которые гибридизуются с последовательностью согласно вариантам осуществления. Также предусматриваются выделенные или рекомбинантные полипептиды PIP-45-1 с SEQ ID NO: 1, а также аминокислотные замены, делеции, вставки, их фрагменты и их комбинации.
В частности, предусматриваются выделенные или рекомбинантные молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие полипептиды, инсектицидный белок-45-2 Pseudomonas (PIP-45-2), в том числе аминокислотные замены, делеции, вставки и их фрагменты и их комбинации. Дополнительно, охватываются аминокислотные последовательности, соответствующие полипептидам PIP-45-2. Предусматриваются выделенные или рекомбинантные молекулы нуклеиновой кислоты, способные кодировать полипептид PIP-45-2 с SEQ ID NO: 2, а также аминокислотные замены, делеции, вставки, их фрагменты и их комбинации. Также охватываются последовательности нуклеиновой кислоты, которые комплементарны последовательности нуклеиновой кислоты согласно вариантам осуществления или которые гибридизуются с последовательностью согласно вариантам осуществления. Также предусматриваются выделенные или рекомбинантные полипептиды PIP-45-2 с SEQ ID NO: 2, а также аминокислотные замены, делеции, вставки, их фрагменты и их комбинации.
В частности, предусматриваются выделенные или рекомбинантные молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие полипептиды, инсектицидный белок-64-1 Pseudomonas (PIP-64-1), в том числе аминокислотные замены, делеции, вставки и их фрагменты и их комбинации. Дополнительно, охватываются аминокислотные последовательности, соответствующие полипептидам PIP-64-1. Предусматриваются выделенные или рекомбинантные молекулы нуклеиновой кислоты, способные кодировать полипептид PIP-64-1 с SEQ ID NO: 53, а также аминокислотные замены, делеции, вставки, их фрагменты и их комбинации. Также охватываются последовательности нуклеиновой кислоты, которые комплементарны последовательности нуклеиновой кислоты согласно вариантам осуществления или которые гибридизуются с последовательностью согласно вариантам осуществления. Также предусматриваются выделенные или рекомбинантные полипептиды PIP-64-1 с SEQ ID NO: 53, а также аминокислотные замены, делеции, вставки, их фрагменты и их комбинации.
В частности, предусматриваются выделенные или рекомбинантные молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие полипептиды, инсектицидный белок-64-2 Pseudomonas (PIP-64-2), в том числе аминокислотные замены, делеции, вставки и их фрагменты и их комбинации. Дополнительно, охватываются аминокислотные последовательности, соответствующие полипептидам PIP-64-2. Предусматриваются выделенные или рекомбинантные молекулы нуклеиновой кислоты, способные кодировать полипептид PIP-64-2 с SEQ ID NO: 54, а также аминокислотные замены, делеции, вставки, их фрагменты и их комбинации. Также охватываются последовательности нуклеиновой кислоты, которые комплементарны последовательности нуклеиновой кислоты согласно вариантам осуществления или которые гибридизуются с последовательностью согласно вариантам осуществления. Также предусматриваются выделенные или рекомбинантные полипептиды PIP-64-2 с SEQ ID NO: 54, а также аминокислотные замены, делеции, вставки, их фрагменты и их комбинации.
В частности, предусматриваются выделенные или рекомбинантные молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие полипептиды, инсектицидный белок-74-1 Pseudomonas (PIP-74-1), в том числе аминокислотные замены, делеции, вставки и их фрагменты и их комбинации. Дополнительно, охватываются аминокислотные последовательности, соответствующие полипептидам PIP-74-1. Предусматриваются выделенные или рекомбинантные молекулы нуклеиновой кислоты, способные кодировать полипептид PIP-74-1 с SEQ ID NO: 73, а также аминокислотные замены, делеции, вставки, их фрагменты и их комбинации. Также охватываются последовательности нуклеиновой кислоты, которые комплементарны последовательности нуклеиновой кислоты согласно вариантам осуществления или которые гибридизуются с последовательностью согласно вариантам осуществления. Также предусматриваются выделенные или рекомбинантные полипептиды PIP-74-1 с SEQ ID NO: 73, а также аминокислотные замены, делеции, вставки, их фрагменты и их комбинации.
В частности, предусматриваются выделенные или рекомбинантные молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие полипептиды, инсектицидный белок-74-2 Pseudomonas (PIP-74-2), в том числе аминокислотные замены, делеции, вставки и их фрагменты и их комбинации. Дополнительно, охватываются аминокислотные последовательности, соответствующие полипептидам PIP-74-2. Предусматриваются выделенные или рекомбинантные молекулы нуклеиновой кислоты, способные кодировать полипептид PIP-74-2 с SEQ ID NO: 74, а также аминокислотные замены, делеции, вставки, их фрагменты и их комбинации. Также охватываются последовательности нуклеиновой кислоты, которые комплементарны последовательности нуклеиновой кислоты согласно вариантам осуществления или которые гибридизуются с последовательностью согласно вариантам осуществления. Также предусматриваются выделенные или рекомбинантные полипептиды PIP-74-2 с SEQ ID NO: 74, а также аминокислотные замены, делеции, вставки, их фрагменты и их комбинации.
В частности, предусматриваются выделенные или рекомбинантные молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие полипептиды, инсектицидный белок-75 Pseudomonas (PIP-75), в том числе аминокислотные замены, делеции, вставки и их фрагменты и их комбинации. Дополнительно, охватываются аминокислотные последовательности, соответствующие полипептидам PIP-75. Предусматриваются выделенные или рекомбинантные молекулы нуклеиновой кислоты, способные кодировать полипептид PIP-75 с SEQ ID NO: 79, а также аминокислотные замены, делеции, вставки, их фрагменты и их комбинации. Также охватываются последовательности нуклеиновой кислоты, которые комплементарны последовательности нуклеиновой кислоты согласно вариантам осуществления или которые гибридизуются с последовательностью согласно вариантам осуществления. Также предусматриваются выделенные или рекомбинантные полипептиды PIP-75 с SEQ ID NO: 79, а также аминокислотные замены, делеции, вставки, их фрагменты и их комбинации.
В частности, предусматриваются выделенные или рекомбинантные молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие полипептиды, инсектицидный белок-77 Pseudomonas (PIP-77), в том числе аминокислотные замены, делеции, вставки и их фрагменты и их комбинации. Дополнительно, охватываются аминокислотные последовательности, соответствующие полипептидам PIP-77. Предусматриваются выделенные или рекомбинантные молекулы нуклеиновой кислоты, способные кодировать полипептид PIP-77 с SEQ ID NO: 88, а также аминокислотные замены, делеции, вставки, их фрагменты и их комбинации. Также охватываются последовательности нуклеиновой кислоты, которые комплементарны последовательности нуклеиновой кислоты согласно вариантам осуществления или которые гибридизуются с последовательностью согласно вариантам осуществления. Также предусматриваются выделенные или рекомбинантные полипептиды PIP-77 с SEQ ID NO: 88, а также аминокислотные замены, делеции, вставки, их фрагменты и их комбинации.
Предусматриваются способы получения инсектицидных полипептидов и применения данных полипептидов для контроля или уничтожения вредителей из группы чешуекрылых, жесткокрылых, нематод, грибков и/или двукрылых. Трансгенные растения согласно вариантам осуществления экспрессируют одну или несколько пестицидных последовательностей, раскрытых в данном документе. В различных вариантах осуществления трансгенное растение дополнительно содержит один или несколько дополнительных генов для устойчивости к насекомым, например один или несколько дополнительных генов для контроля вредителей из группы жесткокрылых, чешуекрылых, полужесткокрылых или нематод. Специалисту в данной области будет понятно, что трансгенное растение может содержать какой-либо ген, обеспечивающий агрономический признак, представляющий интерес.
Также включены способы выявления нуклеиновых кислот и полипептидов согласно вариантам осуществления в образце. Предусматривается набор для выявления присутствия инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию или выявления присутствия нуклеотидной последовательности, кодирующей инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию в образце. Набор может предусматриваться вместе со всеми реагентами и контрольными образцами, необходимыми для осуществления способа выявления предполагаемого средства, а также с инструкциями по применению.
Композиции и способы согласно вариантам осуществления применимы для получения организмов с улучшенной устойчивостью к вредителям или переносимостью их. Эти организмы и композиции, содержащие организмы, подходят для сельскохозяйственных целей. Композиции согласно вариантам осуществления также применимы для получения измененных или улучшенных белков, которые обладают пестицидной активностью, или для выявления присутствия инсектицидных полипептидов по настоящему раскрытию или нуклеиновых кислот, кодирующих таковые в продуктах или организмах.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
На фигурах 1a-1m показано выравнивание аминокислотных последовательностей PIP-45Aa-1 (SEQ ID NO: 1), PIP-45Ab-1 (SEQ ID NO: 3), PIP-45Ac-1 (SEQ ID NO: 5), PIP-45Ad-1 (SEQ ID NO: 7), PIP-45Ae-1 (SEQ ID NO: 9), PIP-45Af-1 (SEQ ID NO: 11), PIP-45Ba-1 (SEQ ID NO: 13), PIP-45Bb-1 (SEQ ID NO: 15), PIP-45Bc-1 (SEQ ID NO: 17), PIP-45Bd-1 (SEQ ID NO: 19), PIP-45Be-1 (SEQ ID NO: 21), PIP-45Bf-1 (SEQ ID NO: 23), PIP-45Bg-1 (SEQ ID NO: 25), PIP-45Bh-1 (SEQ ID NO: 27), PIP-45Bi-1 (SEQ ID NO: 29), PIP-45Bj-1 (SEQ ID NO: 31), PIP-45Bk-1 (SEQ ID NO: 33), PIP-45Bl-1 (SEQ ID NO: 232), PIP-45Bm-1 (SEQ ID NO: 234), PIP-45Ca-1 (SEQ ID NO: 35), PIP-45Cb-1 (SEQ ID NO: 37), PIP-45Cc-1 (SEQ ID NO: 39), PIP-45Cd-1 (SEQ ID NO: 41), PIP-45Ce-1 (SEQ ID NO: 43), PIP-45Cf-1 (SEQ ID NO: 236), PIP-45Da-1 (SEQ ID NO: 45), PIP-45Db-1 (SEQ ID NO: 47), PIP-45Ea-1 (SEQ ID NO: 49), и PIP-45Ga-1 (SEQ ID NO: 51). Несходство аминокислот между гомологами полипептидов PIP-45-1 показано штриховкой.
На фигурах 2a-2l показано выравнивание аминокислотных последовательностей PIP-45Aa-2 (SEQ ID NO: 2), PIP-45Ab-2 (SEQ ID NO: 4), PIP-45Ac-2 (SEQ ID NO: 6), PIP-45Ad-2 (SEQ ID NO: 8), PIP-45Ae-2 (SEQ ID NO: 10), PIP-45Af-2 (SEQ ID NO: 12), PIP-45Ba-2 (SEQ ID NO: 14), PIP-45Bb-2 (SEQ ID NO: 16), PIP-45Bc-2 (SEQ ID NO: 18), PIP-45Bd-2 (SEQ ID NO: 20), PIP-45Be-2 (SEQ ID NO: 22), PIP-45Bf-2 (SEQ ID NO: 24), PIP-45Bg-2 (SEQ ID NO: 26), PIP-45Bh-2 (SEQ ID NO: 28), PIP-45Bi-2 (SEQ ID NO: 30), PIP-45Bj-2 (SEQ ID NO: 32), PIP-45Bk-2 (SEQ ID NO: 34), PIP-45Bl-2 (SEQ ID NO: 233), PIP-45Bm-2 (SEQ ID NO: 235), PIP-45Ca-2 (SEQ ID NO: 36), PIP-45Cb-2 (SEQ ID NO: 38), PIP-45Cc-2 (SEQ ID NO: 40), PIP-45Cd-2 (SEQ ID NO: 42), PIP-45Ce-2 (SEQ ID NO: 44), PIP-45Cf-2 (SEQ ID NO: 237), PIP-45Da-2 (SEQ ID NO: 46), PIP-45Db-2 (SEQ ID NO: 48), PIP-45Ea-2 (SEQ ID NO: 50), и PIP-45Ga-2 (SEQ ID NO: 52). Несходство аминокислот между гомологами полипептидов PIP-45-2 показано штриховкой.
На фигурах 3a-3b показано выравнивание аминокислотных последовательностей PIP-64Aa-1 (SEQ ID NO: 53), PIP-64Ba-1 (SEQ ID NO: 238), PIP-64Ca-1 (SEQ ID NO: 56), PIP-64Ea-1 (SEQ ID NO: 58), PIP-64Eb-1 (SEQ ID NO: 60), PIP-64Ec-1 (SEQ ID NO: 62), PIP-64Ga-1 (SEQ ID NO: 64), PIP-64Ha-1 (SEQ ID NO: 65), PIP-64Hb-1 (SEQ ID NO: 67), PIP-64Hc-1 (SEQ ID NO: 69), и PIP-64Hd-1 (SEQ ID NO: 71). Несходство аминокислот между гомологами полипептидов PIP-64-1 показано штриховкой.
На фигурах 4a-4b показано выравнивание аминокислотных последовательностей PIP-64Aa-2 (SEQ ID NO: 54), PIP-64Ab-2 (SEQ ID NO: 55), PIP-64Ba-2 (SEQ ID NO: 239), PIP-64Ca-2 (SEQ ID NO: 57), PIP-64Ea-2 (SEQ ID NO: 59), PIP-64Eb-2 (SEQ ID NO: 61), PIP-64Ec-2 (SEQ ID NO: 63), PIP-64Ha-2 (SEQ ID NO: 66), PIP-64Hb-2 (SEQ ID NO: 68), PIP-64Hc-2 (SEQ ID NO: 70), и PIP-64Hd-2 (SEQ ID NO: 72). Несходство аминокислот между гомологами полипептидов PIP-64-2 показано штриховкой.
На фигурах 5a-5b показано выравнивание аминокислотных последовательностей PIP-74Aa-1 (SEQ ID NO: 73), PIP-74Ab-1 (SEQ ID NO: 75), и PIP-74Ca-1 (SEQ ID NO: 77). Несходство аминокислот между гомологами полипептидов PIP-74-1 показано штриховкой.
На фигуре 6 показано выравнивание аминокислотных последовательностей PIP-74Aa-2 (SEQ ID NO: 74), PIP-74Ab-2 (SEQ ID NO: 76), и PIP-74Ca-2 (SEQ ID NO: 78). Несходство аминокислот между гомологами полипептидов PIP-74-2 показано штриховкой.
На фигуре 7 показано выравнивание аминокислотных последовательностей PIP-75Aa (SEQ ID NO: 79), PIP-75Ba (SEQ ID NO: 80), PIP-75Da (SEQ ID NO: 81), PIP-75Ea (SEQ ID NO: 82), PIP-75Ga (SEQ ID NO: 83), PIP-75Gb (SEQ ID NO: 84), PIP-75Gc (SEQ ID NO: 85), PIP-75Gd (SEQ ID NO: 86), PIP-75Ge (SEQ ID NO: 87). Несходство аминокислот между гомологами полипептидов PIP-75 показано штриховкой.
На фигурах 8a-8b показано выравнивание аминокислотных последовательностей PIP-77Aa (SEQ ID NO: 88, PIP-77Ab (SEQ ID NO: 89), PIP-77Ac (SEQ ID NO: 90), PIP-77Ad (SEQ ID NO: 91), PIP-77Ae (SEQ ID NO: 92), PIP-77Af (SEQ ID NO: 240), PIP-77Ba (SEQ ID NO: 93), PIP-77Bb (SEQ ID NO: 94), PIP-77Bc (SEQ ID NO: 95), PIP-77Bd (SEQ ID NO: 96), PIP-77Be (SEQ ID NO: 97), PIP-77Bf (SEQ ID NO: 98), PIP-77Bg (SEQ ID NO: 99), PIP-77Bh (SEQ ID NO: 241), PIP-77Bi (SEQ ID NO: 242), PIP-77Ca (SEQ ID NO: 100), PIP-77Ea (SEQ ID NO: 101), PIP-77Eb (SEQ ID NO: 102), PIP-77Ec (SEQ ID NO: 103), PIP-77Ed (SEQ ID NO: 104), PIP-77Ee (SEQ ID NO: 105), PIP-77Ef (SEQ ID NO: 106), PIP-77Eg (SEQ ID NO: 107), PIP-77Eh (SEQ ID NO: 243), PIP-77Ei (SEQ ID NO: 244), и PIP-77Ej (SEQ ID NO: 245). Несходство аминокислот между гомологами полипептидов PIP-77 показано штриховкой.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Следует понимать, что настоящее раскрытие не ограничивается конкретными описанными методиками, протоколами, клеточными линиями, родами и реагентами, в связи с этим они могут варьировать. Также следует понимать, что терминология, используемая в данном документе, предназначена лишь для описания конкретных вариантов осуществления и не подразумевается как ограничивающая объем настоящего раскрытия.
Используемая в данном документе форма единственного числа включает ссылки на множественное число, если контекст явно не указывает иное. Так, например, ссылка на "клетку" включает множество таких клеток, и ссылка на "белок" включает ссылку на один или несколько белков или их эквивалентов, известных специалистам в данной области, и т. д. Все технические и научные термины, используемые в данном документе, имеют то же значение, как обычно понимается специалистом обычной квалификации в данной области, к которой принадлежит настоящее раскрытие, если явно не указано иное.
Настоящее раскрытие представляет композиции и способы для контроля вредителей. Способы включают трансформацию организмов последовательностями нуклеиновой кислоты, кодирующими инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию. В частности, последовательности нуклеиновой кислоты согласно вариантам осуществления применимы для получения растений и микроорганизмов, которые обладают пестицидной активностью. Таким образом, предусматриваются трансформированные бактерии, растения, растительные клетки, растительные ткани и семена. Композиции представляют собой пестицидные нуклеиновые кислоты и белки из видов бактерий. Последовательности нуклеиновой кислоты находят применение в конструировании векторов экспрессии для последующей трансформации организмов, представляющих интерес, в качестве зондов для выделения других гомологичных (или частично гомологичных) генов и для образования измененных инсектицидных полипептидов с помощью способов, известных в уровне техники, таких как сайт-направленный мутагенез, замена доменов или ДНК-шаффлинг. Инсектицидные полипептиды по настоящему раскрытию находят применение при контроле или уничтожении популяций вредителей из группы чешуекрылых, жесткокрылых, двукрылых, грибов, полужесткокрылых и нематод и при получении композиций с пестицидной активностью. Насекомые-вредители, представляющие интерес, включают без ограничения виды из отряда Lepidoptera, в том числе без ограничения моль капустную, например Helicoverpa zea Boddie; соевую совку, например Pseudoplusia includens Walker, и гусеницу ночницы, питающуюся бархатными бобами, например Anticarsia gemmatalis Hübner, и виды из отряда Coleoptera, в том числе без ограничения западного кукурузного жука (Diabrotica virgifera) - WCRW, блошку одиннадцатиточечную Говарда (Diabrotica undecimpunctata howardi) -SCRW и северного кукурузного жука (Diabrotica barberi) - NCRW.
Под "пестицидным токсином" или "пестицидным белком", используемым в данном документе, подразумевают токсин, который характеризуется токсической активностью в отношении одного или нескольких вредителей, в том числе без ограничения представителей отрядов Lepidoptera, Diptera, Hemiptera и Coleoptera или типа Nematoda, или белок, который характеризуется гомологией с таким белком. Пестицидные белки были выделены из организмов, в том числе, например, Bacillus sp., Pseudomonas sp., Photorhabdus sp., Xenorhabdus sp., Clostridium bifermentans и Paenibacillus popilliae. Пестицидные белки включают без ограничения инсектицидные белки из Pseudomonas sp., такие как PSEEN3174 (Monalysin; (2011) PLoS Pathogens 7:1-13); из штамма CHA0 и Pf-5 Pseudomonas protegens (ранее fluorescens) (Pechy-Tarr, (2008) Environmental Microbiology 10:2368-2386; № доступа в GenBank EU400157); из Pseudomonas Taiwanensis (Liu, et al., (2010) J. Agric. Food Chem. 58:12343-12349) и из Pseudomonas pseudoalcligenes (Zhang, et al., (2009) Annals of Microbiology 59:45-50 и Li, et al., (2007) Plant Cell Tiss. Organ Cult. 89:159-168); инсектицидные белки из Photorhabdus sp. и Xenorhabdus sp. (Hinchliffe, et al., (2010) The Open Toxicology Journal 3:101-118 и Morgan, et al., (2001) Applied and Envir. Micro. 67:2062-2069); патент США № 6048838 и патент США № 6379946; полипептид PIP-1 из патентной публикации США № US2014-0007292A1; полипептид(-ы) AfIP-1A и/или AfIP-1B из патентной публикации США № US2014-0033361; полипептиды PHI-4 из патентного документа США с серийным № 13/839702; полипептиды PIP-47 из публикации согласно PCT с серийным № PCT/US14/51063; полипептид PHI-4 из патентной публикации США US20140274885 или патентной публикации согласно PCT WO2014/150914; полипептид PIP-72 из публикации согласно PCT с серийным № PCT/US14/55128; инсектицидные белки из патентных документов США с серийными №№ 61/863761 и 61/863763 и δ-эндотоксины, в том числе без ограничения: классы Cry1, Cry2, Cry3, Cry4, Cry5, Cry6, Cry7, Cry8, Cry9, Cry10, Cry11, Cry12, Cry13, Cry14, Cry15, Cry16, Cry17, Cry18, Cry19, Cry20, Cry21, Cry22, Cry23, Cry24, Cry25, Cry26, Cry27, Cry28, Cry29, Cry30, Cry31, Cry32, Cry33, Cry34, Cry35, Cry36, Cry37, Cry38, Cry39, Cry40, Cry41, Cry42, Cry43, Cry44, Cry45, Cry 46, Cry47, Cry49, Cry 51, Cry52, Cry 53, Cry 54, Cry55, Cry56, Cry57, Cry58, Cry59, Cry60, Cry61, Cry62, Cry63, Cry64, Cry65, Cry66, Cry67, Cry68, Cry69, Cry70, Cry71 и Cry72 генов δ-эндотоксинов и цитолитические гены cyt1 и cyt2 B. thuringiensis. Представители этих классов инсектицидных белков B. thuringiensis включают без ограничения Cry1Aa1 (№ доступа AAA22353); Cry1Aa2 (№ доступа № доступа AAA22552); Cry1Aa3 (№ доступа BAA00257); Cry1Aa4 (№ доступа CAA31886); Cry1Aa5 (№ доступа BAA04468); Cry1Aa6 (№ доступа AAA86265); Cry1Aa7 (№ доступа AAD46139); Cry1Aa8 (№ доступа I26149); Cry1Aa9 (№ доступа BAA77213); Cry1Aa10 (№ доступа AAD55382); Cry1Aa11 (№ доступа CAA70856); Cry1Aa12 (№ доступа AAP80146); Cry1Aa13 (№ доступа AAM44305); Cry1Aa14 (№ доступа AAP40639); Cry1Aa15 (№ доступа AAY66993); Cry1Aa16 (№ доступа HQ439776); Cry1Aa17 (№ доступа HQ439788); Cry1Aa18 (№ доступа HQ439790); Cry1Aa19 (№ доступа HQ685121); Cry1Aa20 (№ доступа JF340156); Cry1Aa21 (№ доступа JN651496); Cry1Aa22 (№ доступа KC158223); Cry1Ab1 (№ доступа AAA22330); Cry1Ab2 (№ доступа AAA22613); Cry1Ab3 (№ доступа AAA22561); Cry1Ab4 (№ доступа BAA00071 ); Cry1Ab5 (№ доступа CAA28405); Cry1Ab6 (№ доступа AAA22420); Cry1Ab7 (№ доступа CAA31620); Cry1Ab8 (№ доступа AAA22551); Cry1Ab9 (№ доступа CAA38701); Cry1Ab10 (№ доступа A29125); Cry1Ab11 (№ доступа I12419); Cry1Ab12 (№ доступа AAC64003); Cry1Ab13 (№ доступа AAN76494); Cry1Ab14 (№ доступа AAG16877); Cry1Ab15 (№ доступа AAO13302); Cry1Ab16 (№ доступа AAK55546); Cry1Ab17 (№ доступа AAT46415); Cry1Ab18 (№ доступа AAQ88259); Cry1Ab19 (№ доступа AAW31761); Cry1Ab20 (№ доступа ABB72460); Cry1Ab21 (№ доступа ABS18384); Cry1Ab22 (№ доступа ABW87320); Cry1Ab23 (№ доступа HQ439777); Cry1Ab24 (№ доступа HQ439778); Cry1Ab25 (№ доступа HQ685122); Cry1Ab26 (№ доступа HQ847729); Cry1Ab27 (№ доступа JN135249); Cry1Ab28 (№ доступа JN135250); Cry1Ab29 (№ доступа JN135251); Cry1Ab30 (№ доступа JN135252); Cry1Ab31 (№ доступа JN135253); Cry1Ab32 (№ доступа JN135254); Cry1Ab33 (№ доступа AAS93798); Cry1Ab34 (№ доступа KC156668); Cry1Ab-подобный (№ доступа AAK14336); Cry1Ab-подобный (№ доступа AAK14337); Cry1Ab-подобный (№ доступа AAK14338); Cry1Ab-подобный (№ доступа ABG88858); Cry1Ac1 (№ доступа AAA22331); Cry1Ac2 (№ доступа AAA22338); Cry1Ac3 (№ доступа CAA38098); Cry1Ac4 (№ доступа AAA73077); Cry1Ac5 (№ доступа AAA22339); Cry1Ac6 (№ доступа AAA86266); Cry1Ac7 (№ доступа AAB46989); Cry1Ac8 (№ доступа AAC44841); Cry1Ac9 (№ доступа AAB49768); Cry1Ac10 (№ доступа CAA05505 ); Cry1Ac11 (№ доступа CAA10270); Cry1Ac12 (№ доступа I12418); Cry1Ac13 (№ доступа AAD38701); Cry1Ac14 (№ доступа AAQ06607); Cry1Ac15 (№ доступа AAN07788); Cry1Ac16 (№ доступа AAU87037); Cry1Ac17 (№ доступа AAX18704); Cry1Ac18 (№ доступа AAY88347); Cry1Ac19 (№ доступа ABD37053); Cry1Ac20 (№ доступа ABB89046 ); Cry1Ac21 (№ доступа AAY66992 ); Cry1Ac22 (№ доступа ABZ01836); Cry1Ac23 (№ доступа CAQ30431); Cry1Ac24 (№ доступа ABL01535); Cry1Ac25 (№ доступа FJ513324); Cry1Ac26 (№ доступа FJ617446); Cry1Ac27 (№ доступа FJ617447); Cry1Ac28 (№ доступа ACM90319); Cry1Ac29 (№ доступа DQ438941); Cry1Ac30 (№ доступа GQ227507); Cry1Ac31 (№ доступа GU446674); Cry1Ac32 (№ доступа HM061081); Cry1Ac33 (№ доступа GQ866913); Cry1Ac34 (№ доступа HQ230364); Cry1Ac35 (№ доступа JF340157); Cry1Ac36 (№ доступа JN387137); Cry1Ac37 (№ доступа JQ317685); Cry1Ad1 (№ доступа AAA22340); Cry1Ad2 (№ доступа CAA01880); Cry1Ae1 (№ доступа AAA22410); Cry1Af1 (№ доступа AAB82749); Cry1Ag1 (№ доступа AAD46137); Cry1Ah1 (№ доступа AAQ14326); Cry1Ah2 (№ доступа ABB76664); Cry1Ah3 (№ доступа HQ439779); Cry1Ai1 (№ доступа AAO39719); Cry1Ai2 (№ доступа HQ439780); Cry1A-подобный (№ доступа AAK14339); Cry1Ba1 (№ доступа CAA29898); Cry1Ba2 (№ доступа CAA65003); Cry1Ba3 (№ доступа AAK63251); Cry1Ba4 (№ доступа AAK51084); Cry1Ba5 (№ доступа ABO20894); Cry1Ba6 (№ доступа ABL60921); Cry1Ba7 (№ доступа HQ439781); Cry1Bb1 (№ доступа AAA22344); Cry1Bb2 (№ доступа HQ439782); Cry1Bc1 (№ доступа CAA86568); Cry1Bd1 (№ доступа AAD10292); Cry1Bd2 (№ доступа AAM93496); Cry1Be1 (№ доступа AAC32850); Cry1Be2 (№ доступа AAQ52387); Cry1Be3 (№ доступа ACV96720); Cry1Be4 (№ доступа HM070026); Cry1Bf1 (№ доступа CAC50778); Cry1Bf2 (№ доступа AAQ52380); Cry1Bg1 (№ доступа AAO39720); Cry1Bh1 (№ доступа HQ589331); Cry1Bi1 (№ доступа KC156700); Cry1Ca1 (№ доступа CAA30396); Cry1Ca2 (№ доступа CAA31951); Cry1Ca3 (№ доступа AAA22343); Cry1Ca4 (№ доступа CAA01886); Cry1Ca5 (№ доступа CAA65457); Cry1Ca6 [1] (№ доступа AAF37224 ); Cry1Ca7 (№ доступа AAG50438); Cry1Ca8 (№ доступа AAM00264); Cry1Ca9 (№ доступа AAL79362); Cry1Ca10 (№ доступа AAN16462); Cry1Ca11 (№ доступа AAX53094); Cry1Ca12 (№ доступа HM070027); Cry1Ca13 (№ доступа HQ412621); Cry1Ca14 (№ доступа JN651493); Cry1Cb1 (№ доступа M97880); Cry1Cb2 (№ доступа AAG35409); Cry1Cb3 (№ доступа ACD50894 ); Cry1Cb-подобный (№ доступа AAX63901); Cry1Da1 (№ доступа CAA38099); Cry1Da2 (№ доступа I76415); Cry1Da3 (№ доступа HQ439784); Cry1Db1 (№ доступа CAA80234 ); Cry1Db2 (№ доступа AAK48937 ); Cry1Dc1 (№ доступа ABK35074); Cry1Ea1 (№ доступа CAA37933); Cry1Ea2 (№ доступа CAA39609); Cry1Ea3 (№ доступа AAA22345); Cry1Ea4 (№ доступа AAD04732); Cry1Ea5 (№ доступа A15535); Cry1Ea6 (№ доступа AAL50330); Cry1Ea7 (№ доступа AAW72936); Cry1Ea8 (№ доступа ABX11258); Cry1Ea9 (№ доступа HQ439785); Cry1Ea10 (№ доступа ADR00398); Cry1Ea11 (№ доступа JQ652456); Cry1Eb1 (№ доступа AAA22346); Cry1Fa1 (№ доступа AAA22348); Cry1Fa2 (№ доступа AAA22347); Cry1Fa3 (№ доступа HM070028); Cry1Fa4 (№ доступа HM439638); Cry1Fb1 (№ доступа CAA80235); Cry1Fb2 (№ доступа BAA25298); Cry1Fb3 (№ доступа AAF21767); Cry1Fb4 (№ доступа AAC10641); Cry1Fb5 (№ доступа AAO13295); Cry1Fb6 (№ доступа ACD50892); Cry1Fb7 (№ доступа ACD50893); Cry1Ga1 (№ доступа CAA80233); Cry1Ga2 (№ доступа CAA70506); Cry1Gb1 (№ доступа AAD10291); Cry1Gb2 (№ доступа AAO13756); Cry1Gc1 (№ доступа AAQ52381); Cry1Ha1 (№ доступа CAA80236); Cry1Hb1 (№ доступа AAA79694); Cry1Hb2 (№ доступа HQ439786); Cry1H-подобный (№ доступа AAF01213); Cry1Ia1 (№ доступа CAA44633); Cry1Ia2 (№ доступа AAA22354); Cry1Ia3 (№ доступа AAC36999); Cry1Ia4 (№ доступа AAB00958); Cry1Ia5 (№ доступа CAA70124); Cry1Ia6 (№ доступа AAC26910); Cry1Ia7 (№ доступа AAM73516); Cry1Ia8 (№ доступа AAK66742); Cry1Ia9 (№ доступа AAQ08616); Cry1Ia10 (№ доступа AAP86782); Cry1Ia11 (№ доступа CAC85964 ); Cry1Ia12 (№ доступа AAV53390); Cry1Ia13 (№ доступа ABF83202); Cry1Ia14 (№ доступа ACG63871); Cry1Ia15 (№ доступа FJ617445); Cry1Ia16 (№ доступа FJ617448); Cry1Ia17 (№ доступа GU989199); Cry1Ia18 (№ доступа ADK23801); Cry1Ia19 (№ доступа HQ439787); Cry1Ia20 (№ доступа JQ228426); Cry1Ia21 (№ доступа JQ228424); Cry1Ia22 (№ доступа JQ228427); Cry1Ia23 (№ доступа JQ228428); Cry1Ia24 (№ доступа JQ228429); Cry1Ia25 (№ доступа JQ228430); Cry1Ia26 (№ доступа JQ228431); Cry1Ia27 (№ доступа JQ228432); Cry1Ia28 (№ доступа JQ228433); Cry1Ia29 (№ доступа JQ228434); Cry1Ia30 (№ доступа JQ317686); Cry1Ia31 (№ доступа JX944038); Cry1Ia32 (№ доступа JX944039); Cry1Ia33 (№ доступа JX944040); Cry1Ib1 (№ доступа AAA82114); Cry1Ib2 (№ доступа ABW88019); Cry1Ib3 (№ доступа ACD75515); Cry1Ib4 (№ доступа HM051227); Cry1Ib5 (№ доступа HM070028); Cry1Ib6 (№ доступа ADK38579); Cry1Ib7 (№ доступа JN571740); Cry1Ib8 (№ доступа JN675714); Cry1Ib9 (№ доступа JN675715); Cry1Ib10 (№ доступа JN675716); Cry1Ib11 (№ доступа JQ228423); Cry1Ic1 (№ доступа AAC62933); Cry1Ic2 (№ доступа AAE71691); Cry1Id1 (№ доступа AAD44366); Cry1Id2 (№ доступа JQ228422); Cry1Ie1 (№ доступа AAG43526); Cry1Ie2 (№ доступа HM439636); Cry1Ie3 (№ доступа KC156647); Cry1Ie4 (№ доступа KC156681); Cry1If1 (№ доступа AAQ52382); Cry1Ig1 (№ доступа KC156701); Cry1I-подобный (№ доступа AAC31094); Cry1I-подобный (№ доступа ABG88859); Cry1Ja1 (№ доступа AAA22341); Cry1Ja2 (№ доступа HM070030); Cry1Ja3 (№ доступа JQ228425); Cry1Jb1 (№ доступа AAA98959); Cry1Jc1 (№ доступа AAC31092); Cry1Jc2 (№ доступа AAQ52372); Cry1Jd1 (№ доступа CAC50779); Cry1Ka1 (№ доступа AAB00376); Cry1Ka2 (№ доступа HQ439783); Cry1La1 (№ доступа AAS60191); Cry1La2 (№ доступа HM070031); Cry1Ma1 (№ доступа FJ884067); Cry1Ma2 (№ доступа KC156659); Cry1Na1 (№ доступа KC156648); Cry1Nb1 (№ доступа KC156678); Cry1-подобный (№ доступа AAC31091); Cry2Aa1 (№ доступа AAA22335); Cry2Aa2 (№ доступа AAA83516); Cry2Aa3 (№ доступа D86064); Cry2Aa4 (№ доступа AAC04867); Cry2Aa5 (№ доступа CAA10671); Cry2Aa6 (№ доступа CAA10672); Cry2Aa7 (№ доступа CAA10670); Cry2Aa8 (№ доступа AAO13734); Cry2Aa9 (№ доступа AAO13750 ); Cry2Aa10 (№ доступа AAQ04263); Cry2Aa11 (№ доступа AAQ52384); Cry2Aa12 (№ доступа ABI83671); Cry2Aa13 (№ доступа ABL01536); Cry2Aa14 (№ доступа ACF04939); Cry2Aa15 (№ доступа JN426947); Cry2Ab1 (№ доступа AAA22342); Cry2Ab2 (№ доступа CAA39075); Cry2Ab3 (№ доступа AAG36762); Cry2Ab4 (№ доступа AAO13296 ); Cry2Ab5 (№ доступа AAQ04609); Cry2Ab6 (№ доступа AAP59457); Cry2Ab7 (№ доступа AAZ66347); Cry2Ab8 (№ доступа ABC95996); Cry2Ab9 (№ доступа ABC74968); Cry2Ab10 (№ доступа EF157306); Cry2Ab11 (№ доступа CAM84575); Cry2Ab12 (№ доступа ABM21764); Cry2Ab13 (№ доступа ACG76120); Cry2Ab14 (№ доступа ACG76121); Cry2Ab15 (№ доступа HM037126); Cry2Ab16 (№ доступа GQ866914); Cry2Ab17 (№ доступа HQ439789); Cry2Ab18 (№ доступа JN135255); Cry2Ab19 (№ доступа JN135256); Cry2Ab20 (№ доступа JN135257); Cry2Ab21 (№ доступа JN135258); Cry2Ab22 (№ доступа JN135259); Cry2Ab23 (№ доступа JN135260); Cry2Ab24 (№ доступа JN135261); Cry2Ab25 (№ доступа JN415485); Cry2Ab26 (№ доступа JN426946); Cry2Ab27 (№ доступа JN415764); Cry2Ab28 (№ доступа JN651494); Cry2Ac1 (№ доступа CAA40536); Cry2Ac2 (№ доступа AAG35410); Cry2Ac3 (№ доступа AAQ52385); Cry2Ac4 (№ доступа ABC95997); Cry2Ac5 (№ доступа ABC74969); Cry2Ac6 (№ доступа ABC74793); Cry2Ac7 (№ доступа CAL18690); Cry2Ac8 (№ доступа CAM09325); Cry2Ac9 (№ доступа CAM09326); Cry2Ac10 (№ доступа ABN15104); Cry2Ac11 (№ доступа CAM83895); Cry2Ac12 (№ доступа CAM83896); Cry2Ad1 (№ доступа AAF09583); Cry2Ad2 (№ доступа ABC86927); Cry2Ad3 (№ доступа CAK29504); Cry2Ad4 (№ доступа CAM32331); Cry2Ad5 (№ доступа CAO78739 ); Cry2Ae1 (№ доступа AAQ52362); Cry2Af1 (№ доступа ABO30519); Cry2Af2 (№ доступа GQ866915); Cry2Ag1 (№ доступа ACH91610); Cry2Ah1 (№ доступа EU939453); Cry2Ah2 (№ доступа ACL80665); Cry2Ah3 (№ доступа GU073380); Cry2Ah4 (№ доступа KC156702); Cry2Ai1 (№ доступа FJ788388); Cry2Aj (№ доступа ); Cry2Ak1 (№ доступа KC156660); Cry2Ba1 (№ доступа KC156658); Cry3Aa1 (№ доступа AAA22336); Cry3Aa2 (№ доступа AAA22541); Cry3Aa3 (№ доступа CAA68482); Cry3Aa4 (№ доступа AAA22542); Cry3Aa5 (№ доступа AAA50255); Cry3Aa6 (№ доступа AAC43266); Cry3Aa7 (№ доступа CAB41411); Cry3Aa8 (№ доступа AAS79487); Cry3Aa9 (№ доступа AAW05659); Cry3Aa10 (№ доступа AAU29411); Cry3Aa11 (№ доступа AAW82872); Cry3Aa12 (№ доступа ABY49136 ); Cry3Ba1 (№ доступа CAA34983); Cry3Ba2 (№ доступа CAA00645); Cry3Ba3 (№ доступа JQ397327); Cry3Bb1 (№ доступа AAA22334); Cry3Bb2 (№ доступа AAA74198); Cry3Bb3 (№ доступа I15475); Cry3Ca1 (№ доступа CAA42469); Cry4Aa1 (№ доступа CAA68485); Cry4Aa2 (№ доступа BAA00179); Cry4Aa3 (№ доступа CAD30148); Cry4Aa4 (№ доступа AFB18317); Cry4A-подобный (№ доступа AAY96321); Cry4Ba1 (№ доступа CAA30312); Cry4Ba2 (№ доступа CAA30114); Cry4Ba3 (№ доступа AAA22337); Cry4Ba4 (№ доступа BAA00178); Cry4Ba5 (№ доступа CAD30095); Cry4Ba-подобный (№ доступа ABC47686); Cry4Ca1 (№ доступа EU646202); Cry4Cb1 (№ доступа FJ403208); Cry4Cb2 (№ доступа FJ597622); Cry4Cc1 (№ доступа FJ403207); Cry5Aa1 (№ доступа AAA67694); Cry5Ab1 (№ доступа AAA67693); Cry5Ac1 (№ доступа I34543); Cry5Ad1 (№ доступа ABQ82087); Cry5Ba1 (№ доступа AAA68598); Cry5Ba2 (№ доступа ABW88931); Cry5Ba3 (№ доступа AFJ04417); Cry5Ca1 (№ доступа HM461869); Cry5Ca2 (№ доступа ZP_04123426); Cry5Da1 (№ доступа HM461870); Cry5Da2 (№ доступа ZP_04123980); Cry5Ea1 (№ доступа HM485580); Cry5Ea2 (№ доступа ZP_04124038); Cry6Aa1 (№ доступа AAA22357); Cry6Aa2 (№ доступа AAM46849); Cry6Aa3 (№ доступа ABH03377); Cry6Ba1 (№ доступа AAA22358); Cry7Aa1 (№ доступа AAA22351); Cry7Ab1 (№ доступа AAA21120); Cry7Ab2 (№ доступа AAA21121); Cry7Ab3 (№ доступа ABX24522); Cry7Ab4 (№ доступа EU380678); Cry7Ab5 (№ доступа ABX79555); Cry7Ab6 (№ доступа ACI44005); Cry7Ab7 (№ доступа ADB89216); Cry7Ab8 (№ доступа GU145299); Cry7Ab9 (№ доступа ADD92572); Cry7Ba1 (№ доступа ABB70817); Cry7Bb1 (№ доступа KC156653); Cry7Ca1 (№ доступа ABR67863); Cry7Cb1 (№ доступа KC156698); Cry7Da1 (№ доступа ACQ99547); Cry7Da2 (№ доступа HM572236); Cry7Da3 (№ доступа KC156679); Cry7Ea1 (№ доступа HM035086); Cry7Ea2 (№ доступа HM132124); Cry7Ea3 (№ доступа EEM19403); Cry7Fa1 (№ доступа HM035088); Cry7Fa2 (№ доступа EEM19090); Cry7Fb1 (№ доступа HM572235); Cry7Fb2 (№ доступа KC156682); Cry7Ga1 (№ доступа HM572237); Cry7Ga2 (№ доступа KC156669); Cry7Gb1 (№ доступа KC156650); Cry7Gc1 (№ доступа KC156654); Cry7Gd1 (№ доступа KC156697); Cry7Ha1 (№ доступа KC156651); Cry7Ia1 (№ доступа KC156665); Cry7Ja1 (№ доступа KC156671); Cry7Ka1 (№ доступа KC156680); Cry7Kb1 (№ доступа BAM99306); Cry7La1 (№ доступа BAM99307); Cry8Aa1 (№ доступа AAA21117); Cry8Ab1 (№ доступа EU044830); Cry8Ac1 (№ доступа KC156662); Cry8Ad1 (№ доступа KC156684); Cry8Ba1 (№ доступа AAA21118); Cry8Bb1 (№ доступа CAD57542); Cry8Bc1 (№ доступа CAD57543); Cry8Ca1 (№ доступа AAA21119); Cry8Ca2 (№ доступа AAR98783); Cry8Ca3 (№ доступа EU625349); Cry8Ca4 (№ доступа ADB54826); Cry8Da1 (№ доступа BAC07226); Cry8Da2 (№ доступа BD133574); Cry8Da3 (№ доступа BD133575); Cry8Db1 (№ доступа BAF93483); Cry8Ea1 (№ доступа AAQ73470); Cry8Ea2 (№ доступа EU047597); Cry8Ea3 (№ доступа KC855216); Cry8Fa1 (№ доступа AAT48690); Cry8Fa2 (№ доступа HQ174208); Cry8Fa3 (№ доступа AFH78109); Cry8Ga1 (№ доступа AAT46073); Cry8Ga2 (№ доступа ABC42043); Cry8Ga3 (№ доступа FJ198072); Cry8Ha1 (№ доступа AAW81032); Cry8Ia1 (№ доступа EU381044); Cry8Ia2 (№ доступа GU073381); Cry8Ia3 (№ доступа HM044664); Cry8Ia4 (№ доступа KC156674); Cry8Ib1 (№ доступа GU325772); Cry8Ib2 (№ доступа KC156677); Cry8Ja1 (№ доступа EU625348); Cry8Ka1 (№ доступа FJ422558); Cry8Ka2 (№ доступа ACN87262); Cry8Kb1 (№ доступа HM123758); Cry8Kb2 (№ доступа KC156675); Cry8La1 (№ доступа GU325771); Cry8Ma1 (№ доступа HM044665); Cry8Ma2 (№ доступа EEM86551); Cry8Ma3 (№ доступа HM210574); Cry8Na1 (№ доступа HM640939); Cry8Pa1 (№ доступа HQ388415); Cry8Qa1 (№ доступа HQ441166); Cry8Qa2 (№ доступа KC152468); Cry8Ra1 (№ доступа AFP87548); Cry8Sa1 (№ доступа JQ740599); Cry8Ta1 (№ доступа KC156673); Cry8-подобный (№ доступа FJ770571); Cry8-подобный (№ доступа ABS53003); Cry9Aa1 (№ доступа CAA41122); Cry9Aa2 (№ доступа CAA41425); Cry9Aa3 (№ доступа GQ249293); Cry9Aa4 (№ доступа GQ249294); Cry9Aa5 (№ доступа JX174110); Cry9Aa like (№ доступа AAQ52376); Cry9Ba1 (№ доступа CAA52927); Cry9Ba2 (№ доступа GU299522); Cry9Bb1 (№ доступа AAV28716); Cry9Ca1 (№ доступа CAA85764); Cry9Ca2 (№ доступа AAQ52375); Cry9Da1 (№ доступа BAA19948); Cry9Da2 (№ доступа AAB97923); Cry9Da3 (№ доступа GQ249293); Cry9Da4 (№ доступа GQ249297); Cry9Db1 (№ доступа AAX78439); Cry9Dc1 (№ доступа KC156683); Cry9Ea1 (№ доступа BAA34908); Cry9Ea2 (№ доступа AAO12908); Cry9Ea3 (№ доступа ABM21765); Cry9Ea4 (№ доступа ACE88267); Cry9Ea5 (№ доступа ACF04743); Cry9Ea6 (№ доступа ACG63872 ); Cry9Ea7 (№ доступа FJ380927); Cry9Ea8 (№ доступа GQ249292); Cry9Ea9 (№ доступа JN651495); Cry9Eb1 (№ доступа CAC50780); Cry9Eb2 (№ доступа GQ249298); Cry9Eb3 (№ доступа KC156646); Cry9Ec1 (№ доступа AAC63366); Cry9Ed1 (№ доступа AAX78440); Cry9Ee1 (№ доступа GQ249296); Cry9Ee2 (№ доступа KC156664); Cry9Fa1 (№ доступа KC156692); Cry9Ga1 (№ доступа KC156699); Cry9-подобный (№ доступа AAC63366); Cry10Aa1 (№ доступа AAA22614); Cry10Aa2 (№ доступа E00614); Cry10Aa3 (№ доступа CAD30098); Cry10Aa4 (№ доступа AFB18318); Cry10A-подобный (№ доступа DQ167578); Cry11Aa1 (№ доступа AAA22352); Cry11Aa2 (№ доступа AAA22611); Cry11Aa3 (№ доступа CAD30081); Cry11Aa4 (№ доступа AFB18319); Cry11Aa-подобный (№ доступа DQ166531); Cry11Ba1 (№ доступа CAA60504); Cry11Bb1 (№ доступа AAC97162); Cry11Bb2 (№ доступа HM068615); Cry12Aa1 (№ доступа AAA22355); Cry13Aa1 (№ доступа AAA22356); Cry14Aa1 (№ доступа AAA21516); Cry14Ab1 (№ доступа KC156652); Cry15Aa1 (№ доступа AAA22333); Cry16Aa1 (№ доступа CAA63860); Cry17Aa1 (№ доступа CAA67841); Cry18Aa1 (№ доступа CAA67506); Cry18Ba1 (№ доступа AAF89667); Cry18Ca1 (№ доступа AAF89668); Cry19Aa1 (№ доступа CAA68875); Cry19Ba1 (№ доступа BAA32397); Cry19Ca1 (№ доступа AFM37572); Cry20Aa1 (№ доступа AAB93476); Cry20Ba1 (№ доступа ACS93601); Cry20Ba2 (№ доступа KC156694); Cry20-подобный (№ доступа GQ144333); Cry21Aa1 (№ доступа I32932); Cry21Aa2 (№ доступа I66477); Cry21Ba1 (№ доступа BAC06484); Cry21Ca1 (№ доступа JF521577); Cry21Ca2 (№ доступа KC156687); Cry21Da1 (№ доступа JF521578); Cry22Aa1 (№ доступа I34547); Cry22Aa2 (№ доступа CAD43579); Cry22Aa3 (№ доступа ACD93211); Cry22Ab1 (№ доступа AAK50456); Cry22Ab2 (№ доступа CAD43577); Cry22Ba1 (№ доступа CAD43578); Cry22Bb1 (№ доступа KC156672); Cry23Aa1 (№ доступа AAF76375); Cry24Aa1 (№ доступа AAC61891); Cry24Ba1 (№ доступа BAD32657); Cry24Ca1 (№ доступа CAJ43600); Cry25Aa1 (№ доступа AAC61892); Cry26Aa1 (№ доступа AAD25075); Cry27Aa1 (№ доступа BAA82796); Cry28Aa1 (№ доступа AAD24189); Cry28Aa2 (№ доступа AAG00235); Cry29Aa1 (№ доступа CAC80985); Cry30Aa1 (№ доступа CAC80986); Cry30Ba1 (№ доступа BAD00052); Cry30Ca1 (№ доступа BAD67157); Cry30Ca2 (№ доступа ACU24781); Cry30Da1 (№ доступа EF095955); Cry30Db1 (№ доступа BAE80088); Cry30Ea1 (№ доступа ACC95445); Cry30Ea2 (№ доступа FJ499389); Cry30Fa1 (№ доступа ACI22625 ); Cry30Ga1 (№ доступа ACG60020); Cry30Ga2 (№ доступа HQ638217); Cry31Aa1 (№ доступа BAB11757); Cry31Aa2 (№ доступа AAL87458); Cry31Aa3 (№ доступа BAE79808); Cry31Aa4 (№ доступа BAF32571); Cry31Aa5 (№ доступа BAF32572); Cry31Aa6 (№ доступа BAI44026); Cry31Ab1 (№ доступа BAE79809); Cry31Ab2 (№ доступа BAF32570); Cry31Ac1 (№ доступа BAF34368); Cry31Ac2 (№ доступа AB731600); Cry31Ad1 (№ доступа BAI44022); Cry32Aa1 (№ доступа AAG36711); Cry32Aa2 (№ доступа GU063849); Cry32Ab1 (№ доступа GU063850); Cry32Ba1 (№ доступа BAB78601); Cry32Ca1 (№ доступа BAB78602); Cry32Cb1 (№ доступа KC156708); Cry32Da1 (№ доступа BAB78603); Cry32Ea1 (№ доступа GU324274); Cry32Ea2 (№ доступа KC156686); Cry32Eb1 (№ доступа KC156663); Cry32Fa1 (№ доступа KC156656); Cry32Ga1 (№ доступа KC156657); Cry32Ha1 (№ доступа KC156661); Cry32Hb1 (№ доступа KC156666); Cry32Ia1 (№ доступа KC156667); Cry32Ja1 (№ доступа KC156685); Cry32Ka1 (№ доступа KC156688); Cry32La1 (№ доступа KC156689); Cry32Ma1 (№ доступа KC156690); Cry32Mb1 (№ доступа KC156704); Cry32Na1 (№ доступа KC156691); Cry32Oa1 (№ доступа KC156703); Cry32Pa1 (№ доступа KC156705); Cry32Qa1 (№ доступа KC156706); Cry32Ra1 (№ доступа KC156707); Cry32Sa1 (№ доступа KC156709); Cry32Ta1 (№ доступа KC156710); Cry32Ua1 (№ доступа KC156655); Cry33Aa1 (№ доступа AAL26871); Cry34Aa1 (№ доступа AAG50341); Cry34Aa2 (№ доступа AAK64560); Cry34Aa3 (№ доступа AAT29032); Cry34Aa4 (№ доступа AAT29030); Cry34Ab1 (№ доступа AAG41671); Cry34Ac1 (№ доступа AAG50118); Cry34Ac2 (№ доступа AAK64562); Cry34Ac3 (№ доступа AAT29029); Cry34Ba1 (№ доступа AAK64565); Cry34Ba2 (№ доступа AAT29033); Cry34Ba3 (№ доступа AAT29031); Cry35Aa1 (№ доступа AAG50342); Cry35Aa2 (№ доступа AAK64561); Cry35Aa3 (№ доступа AAT29028); Cry35Aa4 (№ доступа AAT29025); Cry35Ab1 (№ доступа AAG41672); Cry35Ab2 (№ доступа AAK64563); Cry35Ab3 (№ доступа AY536891); Cry35Ac1 (№ доступа AAG50117); Cry35Ba1 (№ доступа AAK64566); Cry35Ba2 (№ доступа AAT29027); Cry35Ba3 (№ доступа AAT29026); Cry36Aa1 (№ доступа AAK64558); Cry37Aa1 (№ доступа AAF76376 ); Cry38Aa1 (№ доступа AAK64559); Cry39Aa1 (№ доступа BAB72016); Cry40Aa1 (№ доступа BAB72018); Cry40Ba1 (№ доступа BAC77648); Cry40Ca1 (№ доступа EU381045); Cry40Da1 (№ доступа ACF15199); Cry41Aa1 (№ доступа BAD35157); Cry41Ab1 (№ доступа BAD35163); Cry41Ba1 (№ доступа HM461871); Cry41Ba2 (№ доступа ZP_04099652); Cry42Aa1 (№ доступа BAD35166); Cry43Aa1 (№ доступа BAD15301); Cry43Aa2 (№ доступа BAD95474 ); Cry43Ba1 (№ доступа BAD15303); Cry43Ca1 (№ доступа KC156676); Cry43Cb1 (№ доступа KC156695); Cry43Cc1 (№ доступа KC156696); Cry43-подобный (№ доступа BAD15305); Cry44Aa (№ доступа BAD08532); Cry45Aa (№ доступа BAD22577); Cry46Aa (№ доступа BAC79010); Cry46Aa2 (№ доступа BAG68906); Cry46Ab (№ доступа BAD35170); Cry47Aa (№ доступа AAY24695); Cry48Aa (№ доступа CAJ18351); Cry48Aa2 (№ доступа CAJ86545); Cry48Aa3 (№ доступа CAJ86546 ); Cry48Ab (№ доступа CAJ86548); Cry48Ab2 (№ доступа CAJ86549); Cry49Aa (№ доступа CAH56541); Cry49Aa2 (№ доступа CAJ86541); Cry49Aa3 (№ доступа CAJ86543); Cry49Aa4 (№ доступа CAJ86544); Cry49Ab1 (№ доступа CAJ86542); Cry50Aa1 (№ доступа BAE86999); Cry50Ba1 (№ доступа GU446675); Cry50Ba2 (№ доступа GU446676); Cry51Aa1 (№ доступа ABI14444); Cry51Aa2 (№ доступа GU570697); Cry52Aa1 (№ доступа EF613489); Cry52Ba1 (№ доступа FJ361760); Cry53Aa1 (№ доступа EF633476); Cry53Ab1 (№ доступа FJ361759); Cry54Aa1 (№ доступа ACA52194); Cry54Aa2 (№ доступа GQ140349); Cry54Ba1 (№ доступа GU446677); Cry55Aa1 (№ доступа ABW88932); Cry54Ab1 (№ доступа JQ916908); Cry55Aa2 (№ доступа AAE33526); Cry56Aa1 (№ доступа ACU57499); Cry56Aa2 (№ доступа GQ483512); Cry56Aa3 (№ доступа JX025567); Cry57Aa1 (№ доступа ANC87261); Cry58Aa1 (№ доступа ANC87260); Cry59Ba1 (№ доступа JN790647); Cry59Aa1 (№ доступа ACR43758); Cry60Aa1 (№ доступа ACU24782); Cry60Aa2 (№ доступа EAO57254); Cry60Aa3 (№ доступа EEM99278); Cry60Ba1 (№ доступа GU810818); Cry60Ba2 (№ доступа EAO57253); Cry60Ba3 (№ доступа EEM99279); Cry61Aa1 (№ доступа HM035087); Cry61Aa2 (№ доступа HM132125); Cry61Aa3 (№ доступа EEM19308); Cry62Aa1 (№ доступа HM054509); Cry63Aa1 (№ доступа BAI44028); Cry64Aa1 (№ доступа BAJ05397); Cry65Aa1 (№ доступа HM461868); Cry65Aa2 (№ доступа ZP_04123838); Cry66Aa1 (№ доступа HM485581); Cry66Aa2 (№ доступа ZP_04099945); Cry67Aa1 (№ доступа HM485582); Cry67Aa2 (№ доступа ZP_04148882); Cry68Aa1 (№ доступа HQ113114); Cry69Aa1 (№ доступа HQ401006); Cry69Aa2 (№ доступа JQ821388); Cry69Ab1 (№ доступа JN209957); Cry70Aa1 (№ доступа JN646781); Cry70Ba1 (№ доступа ADO51070); Cry70Bb1 (№ доступа EEL67276); Cry71Aa1 (№ доступа JX025568); Cry72Aa1 (№ доступа JX025569); Cyt1Aa (Номер доступа GenBank X03182); Cyt1Ab (Номер доступа GenBank X98793); Cyt1B (Номер доступа GenBank U37196); Cyt2A (Номер доступа GenBank Z14147); и Cyt2B (Номер доступа GenBank U52043).
Примеры δ-эндотоксинов также включают без ограничения белки Cry1A из патентов США №№ 5880275 и 7858849; токсин DIG-3 или DIG-11 (варианты белков cry с N-терминальной делецией α-спирали 1 и/или α-спирали 2, такие как Cry1A, Cry3A) из патентов США №№ 8304604, 8304605 и 8476226; Cry1B из заявки на выдачу патента США с серийным № 10/525318; Cry1C из патента США № 6033874; Cry1F из патентов США №№ 5188960 и 6218188; химеры Cry1A/F из патентов США №№ 7070982; 6962705 и 6713063); белок Cry2, такой как белок Cry2Ab из патента США № 7064249; белок Cry3A, в том числе без ограничения сконструированный гибридный инсектицидный белок (eHIP), созданный путем слияния уникальных комбинаций вариабельных участков и консервативных блоков по меньшей мере двух различных белков Cry (публикация заявки на выдачу патента США № 2010/0017914); белок Cry4; белок Cry5; белок Cry6; белки Cry8 из патентов США №№ 7329736, 7449552, 7803943, 7476781, 7105332, 7378499 и 7462760; белок Cry9, такой как представители семейств Cry9A, Cry9B, Cry9C, Cry9D, Cry9E и Cry9F; белок Cry15 из Naimov, et al., (2008) Applied and Environmental Microbiology, 74:7145-7151; Cry22, белок Cry34Ab1 из патентов США №№ 6127180, 6624145 и 6340593; белок CryET33 и cryET34 из патентов США №№ 6248535, 6326351, 6399330, 6949626, 7385107 и 7504229; гомологи CryET33 и CryET34 из публикации заявки на выдачу патента США № 2006/0191034, 2012/0278954 и публикации согласно PCT номер WO 2012/139004; белок Cry35Ab1 из патентов США №№ 6083499, 6548291 и 6340593; белок Cry46, белок Cry 51, бинарный токсин Cry; TIC901 или родственный токсин; TIC807 из публикации заявки на выдачу патента США № 2008/0295207; ET29, ET37, TIC809, TIC810, TIC812, TIC127, TIC128 из публикации согласно PCT US 2006/033867; токсины TIC853 из патента США № 8513494, AXMI-027, AXMI-036 и AXMI-038 из патента США № 8236757; AXMI-031, AXMI-039, AXMI-040, AXMI-049 из патента США № 7923602; AXMI-018, AXMI-020 и AXMI-021 из WO 2006/083891; AXMI-010 из WO 2005/038032; AXMI-003 из WO 2005/021585; AXMI-008 из публикации заявки на выдачу патента США № 2004/0250311; AXMI-006 из публикации заявки на выдачу патента США № 2004/0216186; AXMI-007 из публикации заявки на выдачу патента США № 2004/0210965; AXMI-009 из заявки на выдачу патента США № 2004/0210964; AXMI-014 из публикации заявки на выдачу патента США № 2004/0197917; AXMI-004 из публикации заявки на выдачу патента США № 2004/0197916; AXMI-028 и AXMI-029 из WO 2006/119457; AXMI-007, AXMI-008, AXMI-0080rf2, AXMI-009, AXMI-014 и AXMI-004 из WO 2004/074462; AXMI-150 из патента США № 8084416; AXMI-205 из публикации заявки на выдачу патента США № 2011/0023184; AXMI-011, AXMI-012, AXMI-013, AXMI-015, AXMI-019, AXMI-044, AXMI-037, AXMI-043, AXMI-033, AXMI-034, AXMI-022, AXMI-023, AXMI-041, AXMI-063 и AXMI-064 из публикации заявки на выдачу патента США № 2011/0263488; AXMI-R1 и родственные белки из публикации заявки на выдачу патента США № 2010/0197592; AXMI221Z, AXMI222z, AXMI223z, AXMI224z и AXMI225z из WO 2011/103248; AXMI218, AXMI219, AXMI220, AXMI226, AXMI227, AXMI228, AXMI229, AXMI230 и AXMI231 из WO 2011/103247; AXMI-115, AXMI-113, AXMI-005, AXMI-163 и AXMI-184 из патента США № 8334431; AXMI-001, AXMI-002, AXMI-030, AXMI-035 и AXMI-045 из публикации заявки на выдачу патента США № 2010/0298211; AXMI-066 и AXMI-076 из публикации заявки на выдачу патента США № 2009/0144852; AXMI128, AXMI130, AXMI131, AXMI133, AXMI140, AXMI141, AXMI142, AXMI143, AXMI144, AXMI146, AXMI148, AXMI149, AXMI152, AXMI153, AXMI154, AXMI155, AXMI156, AXMI157, AXMI158, AXMI162, AXMI165, AXMI166, AXMI167, AXMI168, AXMI169, AXMI170, AXMI171, AXMI172, AXMI173, AXMI174, AXMI175, AXMI176, AXMI177, AXMI178, AXMI179, AXMI180, AXMI181, AXMI182, AXMI185, AXMI186, AXMI187, AXMI188, AXMI189 из патента США № 8318900; AXMI079, AXMI080, AXMI081, AXMI082, AXMI091, AXMI092, AXMI096, AXMI097, AXMI098, AXMI099, AXMI100, AXMI101, AXMI102, AXMI103, AXMI104, AXMI107, AXMI108, AXMI109, AXMI110, AXMI111, AXMI112, AXMI114, AXMI116, AXMI117, AXMI118, AXMI119, AXMI120, AXMI121, AXMI122, AXMI123, AXMI124, AXMI1257, AXMI1268, AXMI127, AXMI129, AXMI164, AXMI151, AXMI161, AXMI183, AXMI132, AXMI138, AXMI137 из публикации заявки на выдачу патента США № 2010/0005543, белки cry, такие как Cry1A и Cry3A, имеющие модифицированные протеолитические участки, из патента США № 8319019; белок-токсин Cry1Ac, Cry2Aa и Cry1Ca из штамма VBTS 2528 Bacillus thuringiensis из публикации заявки на выдачу патента США № 2011/0064710. Другие белки Cry хорошо известны специалисту в данной области (см. Crickmore, et al., "Bacillus thuringiensis toxin nomenclature" (2011), на сайте по адресу lifesci.sussex.ac.uk/home/Neil_Crickmore/Bt/, доступ к которому можно получить через всемирную сеть Интернет с использованием префикса "www"). Инсектицидная активность белков Cry хорошо известна специалисту в данной области (для обзора см. van Frannkenhuyzen, (2009) J. Invert. Path. 101:1-16). Применение белков Cry в качестве признаков трансгенного растения хорошо известно специалисту в данной области, и трансгенные растения с Cry, в том числе без ограничения растения, экспрессирующие Cry1Ac, Cry1Ac+Cry2Ab, Cry1Ab, Cry1A.105, Cry1F, Cry1Fa2, Cry1F+Cry1Ac, Cry2Ab, Cry3A, mCry3A, Cry3Bb1, Cry34Ab1, Cry35Ab1, Vip3A, mCry3A, Cry9c и CBI-Bt, были разрешены контролирующими органами (см. Sanahuja, (2011) Plant Biotech Journal 9:283-300 и CERA (2010), базу данных ГМ растений центра по оценке риска для окружающей среды (CERA), Исследовательский фонд ILSI, город Вашингтон, на сайте по адресу cera-gmc.org/index.php?action=gm_crop_database, доступ к которому можно получить через всемирную сеть Интернет с использованием префикса "www"). В растениях также может экспрессироваться два или более пестицидных белков, хорошо известных специалисту в данной области, таких как Vip3Ab и Cry1Fa (US2012/0317682); Cry1BE и Cry1F (US2012/0311746); Cry1CA и Cry1AB (US2012/0311745); Cry1F и CryCa (US2012/0317681); Cry1DA и Cry1BE (US2012/0331590); Cry1DA и Cry1Fa (US2012/0331589); Cry1AB и Cry1BE (US2012/0324606); Cry1Fa и Cry2Aa, а также Cry1I и Cry1E (US2012/0324605); Cry34Ab/35Ab и Cry6Aa (US20130167269); Cry34Ab/VCry35Ab и Cry3Aa (US20130167268) и Cry3A, а также Cry1Ab или Vip3Aa (US20130116170). Пестицидные белки включают также инсектицидные липазы, в том числе гидролазы омыляемых липидов из патента США № 7491869 и холестерин-оксидазы, как, например, из Streptomyces (Purcell et al. (1993) Biochem Biophys Res Commun 15:1406-1413). Пестицидные белки также включают токсины VIP (вегетативные инсектицидные белки) из патентов США №№ 5877012, 6107279, 6137033, 7244820, 7615686 и 8237020 и т. п. Другие белки VIP хорошо известны специалисту в данной области (см. сайт по адресу lifesci.sussex.ac.uk/home/Neil_Crickmore/Bt/vip.html, доступ к которому можно получить через всемирную сеть Интернет с использованием префикса "www"). Пестицидные белки включают также белки токсинового комплекса (TC), которые можно получить из организмов, таких как Xenorhabdus, Photorhabdus и Paenibacillus (см. патенты США №№ 7491698 и 8084418). Некоторые TC-белки обладают "самостоятельной" инсектицидной активностью, а другие TC-белки повышают активность самостоятельных токсинов, вырабатываемых тем же данным организмом. Токсичность "самостоятельного" TC-белка (например, из Photorhabdus, Xenorhabdus или Paenibacillus) может повышаться с помощью одного или нескольких TC-белков-"усилителей", полученных из организма-источника из другого рода. Существуют три основных типа TC-белков. Как изложено в данном документе, белки класса A ("белок A") представляют собой самостоятельные токсины. Белки класса B ("белок B") и белки класса C ("белок C") повышают токсичность белков класса A. Примерами белков класса A являются TcbA, TcdA, XptA1 и XptA2. Примерами белков класса B являются TcaC, TcdB, XptB1Xb и XptC1Wi. Примерами белков класса C являются TccC, XptC1Xb и XptB1Wi. Пестицидные белки также включают белки яда пауков, змей и скорпионов. Примеры пептидов яда пауков включают без ограничения пептиды ликотоксин-1 и его мутантные формы (патент США № 8334366).
В некоторых вариантах осуществления инсектицидные полипептиды по настоящему раскрытию включают аминокислотные последовательности, выведенные из последовательностей нуклеиновой кислоты полной длины, раскрытых в данном документе, и аминокислотные последовательности, которые короче, чем последовательности полной длины, либо полученные в результате применения альтернативного сайта инициации, расположенного ниже, либо полученные в результате процессинга, дающего более короткий белок с пестицидной активностью. Процессинг может происходить в организме, в котором экспрессируется белок, или во вредителе после поглощения белка.
Таким образом, в данном документе предусматриваются новые выделенные или рекомбинантные последовательности нуклеиновой кислоты, которые обеспечивают пестицидную активность. Также предусматриваются аминокислотные последовательности инсектицидных полипептидов по настоящему раскрытию. Белок, полученный в результате трансляции генов этих инсектицидных полипептидов, обеспечивает возможность клеткам контролировать или уничтожать вредителей, которые их поглощают.
Молекулы нуклеиновой кислоты, а также их варианты и фрагменты
Один аспект настоящего раскрытия относится к выделенным или рекомбинантным молекулам нуклеиновой кислоты, содержащим последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующие инсектицидные полипептиды по настоящему раскрытию или их биологически активные части, а также к молекулам нуклеиновой кислоты, подходящим для применения в качестве гибридизационных зондов для идентификации молекул нуклеиновой кислоты, кодирующих белки с участками гомологии последовательностей. Термин "молекула нуклеиновой кислоты", используемый в данном документе, относится к молекулам ДНК (например, рекомбинантной ДНК, кДНК, геномной ДНК, пластидной ДНК, митохондриальной ДНК), и молекулам РНК (например, mRNA), и аналогам ДНК или РНК, полученным с применением аналогов нуклеотидов. Молекула нуклеиновой кислоты может быть одноцепочечной или двухцепочечной, но предпочтительно представляет собой двухцепочечную ДНК.
"Выделенная" молекула нуклеиновой кислоты (или ДНК) используется в данном документе для обозначения последовательности нуклеиновой кислоты (или ДНК), которая больше не находится в своей естественной среде, например находится in vitro. "Рекомбинантная" молекула нуклеиновой кислоты (или ДНК) используется в данном документе для обозначения последовательности нуклеиновой кислоты (или ДНК), которая находится в рекомбинантной бактериальной или растительной клетке-хозяине. В некоторых вариантах осуществления "выделенная" или "рекомбинантная" нуклеиновая кислота не содержит последовательности (предпочтительно последовательности, кодирующие белок), которые в естественных условиях фланкируют нуклеиновую кислоту (т. е. последовательности, расположенные на 5′- и 3′-концах нуклеиновой кислоты) в геномной ДНК организма, из которого получена нуклеиновая кислота. Для целей настоящего раскрытия "выделенные" или "рекомбинантные", при использовании для обозначения молекул нуклеиновой кислоты, исключают выделенные хромосомы. Например, в различных вариантах осуществления рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая инсектицидный полипептид, может содержать менее приблизительно 5 т. н., 4 т. н., 3 т. н., 2 т. н., 1 т. н., 0,5 т. н. или 0,1 т. н. последовательностей нуклеиновой кислоты, которые в естественных условиях фланкируют молекулу нуклеиновой кислоты в геномной ДНК клетки, из которой получена нуклеиновая кислота.
В некоторых вариантах осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию, имеет одно или несколько изменений в последовательности нуклеиновой кислоты по сравнению с нативной или геномной последовательностью нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах осуществления изменение в нативной или геномной последовательности нуклеиновой кислоты включает без ограничения изменения в последовательности нуклеиновой кислоты вследствие вырожденности генетического кода; изменения в последовательности нуклеиновой кислоты вследствие аминокислотной замены, вставки, делеции и/или добавления относительно нативной или геномной последовательности; удаление одного или нескольких интронов; делецию одного или нескольких регуляторных участков, расположенных выше или ниже; и делецию 5'- и/или 3'-нетранслируемого участка, ассоциированного с геномной последовательностью нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая инсектицидный полипептид, представляет собой последовательность, отличную от геномной.
Полинуклеотиды, кодирующие полипептиды PIP-45-1, охвачены настоящим раскрытием. Предполагается ряд полинуклеотидов, кодирующих полипептиды PIP-45-1. Одним источником полинуклеотида, кодирующего полипептид PIP-45-1 или родственные белки, является бактериальный штамм, который содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 124, SEQ ID NO: 126, SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 136, SEQ ID NO: 138, SEQ ID NO: 140, SEQ ID NO: 142, SEQ ID NO: 146, SEQ ID NO: 150, SEQ ID NO: 152, SEQ ID NO: 220 или SEQ ID NO: 222, соответственно кодирующий полипептид PIP-45-1 с SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 234 и SEQ ID NO: 236. Один источник полинуклеотида, кодирующего полипептид PIP-45-1 или родственные белки, происходит из штамма Pseudomonas, Thalassuspira, Paracoccus или Cellvibrio. Один источник полинуклеотида, кодирующего полипептид PIP-45-1 или родственные белки, происходит из штамма Pseudomonas, выбранного без ограничения из Pseudomonas brenneri, Pseudomonas monteilii, Pseudomonas gessardii, Pseudomonas plecoglossicida, Pseudomonas putida, Pseudomonas poae, Pseudomonas trivialis, Pseudomonas libanensis, Pseudomonas fluorescens и Pseudomonas asplenii.
В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид PIP-45-1, представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, отличную от геномной. Используемые в данном документе "последовательность нуклеиновой кислоты, отличная от геномной", или "молекула нуклеиновой кислоты, отличная от геномной", или "полинуклеотид, отличный от геномного" относятся к молекуле нуклеиновой кислоты, которая имеет одно или несколько изменений в последовательности нуклеиновой кислоты по сравнению с нативной или геномной последовательностью нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах осуществления изменение по отношению к нативной или геномной молекуле нуклеиновой кислоты включает без ограничения изменения в последовательности нуклеиновой кислоты, обусловленные вырожденностью генетического кода; оптимизацию кодонов последовательности нуклеиновой кислоты для экспрессии в растениях; изменения в последовательности нуклеиновой кислоты для введения по меньшей мере одной аминокислотной замены, вставки, делеции и/или добавления по сравнению с нативной или геномной последовательностью; удаление одного или нескольких интронов, ассоциированных с геномной последовательностью нуклеиновой кислоты; вставку одного или нескольких гетерологичных интронов; делецию одной или нескольких регуляторных областей, расположенных выше или ниже, которые ассоциированы с геномной последовательностью нуклеиновой кислоты; вставку одного или нескольких гетерологичных регуляторных участков, расположенных выше или ниже; делецию 5'- и/или 3'-нетранслируемой области, ассоциированной с геномной последовательностью нуклеиновой кислоты; вставку гетерологичной 5'- и/или 3'-нетранслируемой области и модификацию сайта полиаденилирования. В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, отличная от геномной, представляет собой кДНК. В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, отличная от геномной, представляет собой синтетическую последовательность нуклеиновой кислоты.
В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-1, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 234 или SEQ ID NO: 236, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. Термин ʺприблизительноʺ, используемый в данном документе, при использовании в отношении идентичности последовательности означает±0,5%. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-45-1.
В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 234 или SEQ ID NO: 236.
В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 99,1% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 1. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 99,4% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 17. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 99,6% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 19. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 87% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 21. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 88% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 23. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 99,1% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 27. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 99,8% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 29. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 92,3% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 31. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 91,1% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 33. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 95,4% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 35. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 93% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 39. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 97,5% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 43. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 45. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 94% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 234. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 96% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 236.
Полинуклеотиды, кодирующие полипептиды PIP-45-2, охвачены настоящим раскрытием. Предполагается ряд полинуклеотидов, кодирующих полипептиды PIP-45-2. Одним источником полинуклеотидов, кодирующих полипептид PIP-45-2 или родственный белок, является бактериальный штамм, который содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 109, SEQ ID NO: 125, SEQ ID NO: 127, SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 137, SEQ ID NO: 139, SEQ ID NO: 141, SEQ ID NO: 143, SEQ ID NO: 147, SEQ ID NO: 151, SEQ ID NO: 153, SEQ ID NO: 221 или SEQ ID NO: 223, соответственно кодирующий полипептид PIP-45-2 с SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 235 и SEQ ID NO: 237. Один источник полинуклеотида, кодирующего полипептид PIP-45-2 или родственный белок, происходит из штамма Pseudomonas, Thalassuspira, Paracoccus или Cellvibrio. Один источник полинуклеотида, кодирующего полипептид PIP-45-2 или родственные белки, происходит из штамма Pseudomonas, выбранного без ограничения из Pseudomonas brenneri, Pseudomonas monteilii, Pseudomonas gessardii, Pseudomonas plecoglossicida, Pseudomonas putida, Pseudomonas poae, Pseudomonas trivialis, Pseudomonas libanensis, Pseudomonas fluorescens и Pseudomonas asplenii.
В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид PIP-45-2, представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, отличную от геномной. В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, отличная от геномной, представляет собой кДНК. В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, отличная от геномной, представляет собой синтетическую последовательность нуклеиновой кислоты.
В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-2, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 235 или SEQ ID NO: 237, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-45-2. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 235 или SEQ ID NO: 237.
В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 99,2% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 98,5% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 18. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 96% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 20. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 80% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 22. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 81% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 24. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 99,5% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 28. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 98,5% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 30. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 92% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 32. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 91,5% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 34. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 36. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 90% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 40. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 94% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 44. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 46. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 91% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 235. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 93,5% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 237.
Полинуклеотиды, кодирующие полипептиды PIP-64-1, охвачены настоящим раскрытием. Предполагается ряд полинуклеотидов, кодирующих полипептиды PIP-64-1. Одним источником полинуклеотида, кодирующего полипептид PIP-64-1 или родственный белок, является бактериальный штамм, который содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 165 или SEQ ID NO: 224, кодирующий полипептид PIP-64-1 с SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 58 и SEQ ID NO: 238. Один источник полинуклеотида, кодирующего полипептид PIP-64-1 или родственный белок, происходит из штамма Pseudomonas, Enterobacter или Alcaligenes. Один источник полинуклеотида, кодирующего полипептид PIP-64-1 или родственные белки, происходит из штамма Pseudomonas или Alcaligenes, выбранного без ограничения из Pseudomonas brenneri, Pseudomonas gessardii, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas brassicacearum, Pseudomonas entomophila и Alcaligenes faecalis.
В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид PIP-64-1, представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, отличную от геномной. В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, отличная от геномной, представляет собой кДНК. В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, отличная от геномной, представляет собой синтетическую последовательность нуклеиновой кислоты.
В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-64-1, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 58 или SEQ ID NO: 238, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-64-1. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-64-1, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 58 или SEQ ID NO: 238.
В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-64-1, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 53. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-64-1, последовательность которого по меньшей мере на 99,7% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 58. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-64-1, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 238.
Полинуклеотиды, кодирующие полипептиды PIP-64-2, охвачены настоящим раскрытием. Предполагается ряд полинуклеотидов, которые кодируют полипептиды PIP-64-2. Одним источником полинуклеотида, кодирующего полипептид PIP-64-2 или родственный белок, является бактериальный штамм, который содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 166 или SEQ ID NO: 225, соответственно кодирующий полипептид PIP-64-2 с SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 59 и SEQ ID NO: 239. Один источник полинуклеотида, кодирующего полипептид PIP-64-2 или родственный белок, происходит из штамма Pseudomonas, Enterobacter или Alcaligenes. Один источник полинуклеотида, кодирующего полипептид PIP-64-2 или родственный белок, происходит из штамма Pseudomonas или Alcaligenes, выбранного без ограничения из Pseudomonas brenneri, Pseudomonas gessardii, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas brassicacearum, Pseudomonas entomophila и Alcaligenes faecalis.
В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид PIP-64-2, представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, отличную от геномной. В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, отличная от геномной, представляет собой кДНК. В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, отличная от геномной, представляет собой синтетическую последовательность нуклеиновой кислоты.
В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-64-2, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 59 или SEQ ID NO: 239, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-64-2. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-64-2 по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 59 или SEQ ID NO: 239.
В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-64-2, последовательность которого по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 54. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-64-2, последовательность которого по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 55. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-64-2, последовательность которого по меньшей мере на 91% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 59. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-64-2, последовательность которого по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 239.
Полинуклеотиды, кодирующие полипептиды PIP-74-1, охвачены настоящим раскрытием. Предполагается ряд полинуклеотидов, кодирующих полипептиды PIP-74-1. Одним источником полинуклеотида, кодирующего полипептид PIP-74-1 или родственный белок, является бактериальный штамм, который содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 180, SEQ ID NO: 182 или SEQ ID NO: 184, соответственно кодирующий полипептид PIP-74-1 с SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 75 и SEQ ID NO: 77,. Один источник полинуклеотида, кодирующего полипептид PIP-74-1 или родственный белок, происходит из штамма Pseudomonas. Один источник полинуклеотида, кодирующего полипептид PIP-74-1 или родственные белки, происходит из штамма Pseudomonas, выбранного без ограничения из Pseudomonas rhodesiae и Pseudomonas orientalis.
В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид PIP-74-1, представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, отличную от геномной. В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, отличная от геномной, представляет собой кДНК. В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, отличная от геномной, представляет собой синтетическую последовательность нуклеиновой кислоты.
В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-74-1, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 75 или SEQ ID NO: 77, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-74-1. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-74-1, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 75 или SEQ ID NO: 77.
В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-74-1, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 73. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-74-1, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 75. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-74-1, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 77.
Полинуклеотиды, кодирующие полипептиды PIP-74-2, охвачены настоящим раскрытием. Предполагается ряд полинуклеотидов, кодирующих полипептиды PIP-74-2. Одним источником полинуклеотида, кодирующего полипептид PIP-74-2 или родственный белок, является бактериальный штамм, который содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 185, соответственно кодирующий полипептид PIP-74-2 с SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 76 и SEQ ID NO: 78. Один источник полинуклеотида, кодирующего полипептид PIP-74-2 или родственные белки, происходит из штамма Pseudomonas. Один источник полипептида PIP-74-2 или родственных белков происходит из штамма Pseudomonas, выбранного без ограничения из Pseudomonas rhodesiae и Pseudomonas orientalis.
В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид PIP-74-2, представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, отличную от геномной. В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, отличная от геномной, представляет собой кДНК. В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, отличная от геномной, представляет собой синтетическую последовательность нуклеиновой кислоты.
В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-74-2, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 76 или SEQ ID NO: 78, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-74-2. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-74-2, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 76 или SEQ ID NO: 78.
В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-74-2, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 74. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-74-2, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 76. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-74-2, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 78.
Полинуклеотиды, кодирующие полипептиды PIP-75, охвачены настоящим раскрытием. Предполагается ряд полинуклеотидов, кодирующих полипептиды PIP-75. Одним источником полинуклеотида, кодирующего полипептид PIP-75 или родственный белок, является бактериальный штамм, который содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 187, SEQ ID NO: 188, SEQ ID NO: 191, SEQ ID NO: 192, SEQ ID NO: 193 или SEQ ID NO: 194, кодирующий полипептид PIP-75 c SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86 и SEQ ID NO: 87. Один источник полинуклеотида, кодирующего полипептид PIP-75 или родственный белок, происходит из штамма Pseudomonas, Enterobacter или Serratia. Один источник полипептида PIP-75 или родственных белков происходит из штамма Pseudomonas, Enterobacter или Serratia, выбранного без ограничения из Pseudomonas Antarctica, Pseudomonas orientalis, Enterobacter asburiae, Serratia plymuthica и Serratia liquefaciens.
В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид PIP-75, представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, отличную от геномной. В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, отличная от геномной, представляет собой кДНК. В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, отличная от геномной, представляет собой синтетическую последовательность нуклеиновой кислоты.
В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-75, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86 или SEQ ID NO: 87, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-75. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86 или SEQ ID NO: 87.
В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 79. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 80. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на 86% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 81. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 84. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 85. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 86. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 87.
Полинуклеотиды, кодирующие полипептиды PIP-77, охвачены настоящим раскрытием. Предполагается ряд полинуклеотидов, кодирующих полипептиды PIP-77. Одним источником полинуклеотида, кодирующего полипептид PIP-77 или родственные белки, является бактериальный штамм, который содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 195, SEQ ID NO:196, SEQ ID NO:197, SEQ ID NO:198, SEQ ID NO:199, SEQ ID NO: 200, SEQ ID NO: 201, SEQ ID NO: 202, SEQ ID NO: 203, SEQ ID NO: 204, SEQ ID NO: 205, SEQ ID NO: 207, SEQ ID NO: 227, SEQ ID NO: 228 или SEQ ID NO: 231, соответственно кодирующий полипептид PIP-77 с SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242 и SEQ ID NO: 245. Один источник полинуклеотида, кодирующего полипептид PIP-77 или родственные белки, происходит из штамма Pseudomonas, Enterobacter, Shewanella, Haemophilus или Aeromonas. Один источник полипептида PIP-77 или родственных белков происходит из штамма Pseudomonas, выбранного без ограничения из Pseudomonas chlororaphis, Pseudomonas brassicacearum, Pseudomonas fluorescens и Pseudomonas rhodesiae.
В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид PIP-77, представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, отличную от геномной. В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, отличная от геномной, представляет собой кДНК. В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, отличная от геномной, представляет собой синтетическую последовательность нуклеиновой кислоты.
В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-77, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242 или SEQ ID NO: 245, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-77. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242 или SEQ ID NO: 245.
В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 93% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 88. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 97% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 89. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 99% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 90. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 97% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 92. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 87% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 93. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 86% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 94. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 85% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 95. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 84% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 96. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 85% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 97. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 83% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 98. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 79% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 100.
Эти полинуклеотидные последовательности были выделены из Pseudomonas или других бактериальных хозяев и, таким образом, являются подходящими для экспрессии кодируемых инсектицидных полипептидов в других бактериальных хозяев, которые включают без ограничения бактериальные клетки-хозяева Agrobacterium, Bacillus, Escherichia, Salmonella, Pseudomonas и Rhizobium. Полинуклеотиды также применимы в качестве зондов для выделения гомологичных или практически гомологичных полинуклеотидов, которые кодируют инсектицидные полипептиды по настоящему раскрытию или родственные белки. Такие зонды можно применять для идентификации гомологичных или практически гомологичных полинуклеотидов, полученных из Pseudomonas или других родственных бактерий.
Полинуклеотиды, которые кодируют инсектицидный полипептид, также можно синтезировать de novo, исходя из полипептидной последовательности. Последовательность гена полинуклеотида можно вывести, исходя из полипептидной последовательности, благодаря применению генетического кода. Компьютерные программы, такие как ʺBackTranslateʺ (GCG™ Package, Acclerys, Inc., Сан-Диего, Калифорния), можно применять для перевода пептидной последовательности в соответствующую нуклеотидную последовательность, кодирующую пептид. Кроме того, можно разрабатывать синтетические полинуклеотидные последовательности по настоящему раскрытию таким образом, что они будут экспрессироваться в растениях. В патенте США № 5500365 описан способ синтеза генов растения для улучшения уровня экспрессии белка, кодируемого синтезированным геном. Данный способ относится к модификации последовательностей структурных генов экзогенного трансгена, что приводит к их более эффективным транскрипции, процессингу, трансляции и экспрессии в растении. Свойства генов, которые хорошо экспрессируются в растениях, включают удаление последовательностей, которые могут вызывать нежелательный сплайсинг интронов или полиаденилирование в кодирующем участке генного транскрипта, при этом в существенной мере сохраняется аминокислотная последовательность токсичной части инсектицидного белка. Аналогичный способ для получения усиленной экспрессии трансгенов в однодольных растениях раскрыт в патенте США № 5689052.
"Комплементарная последовательность" используется в данном документе для обозначения последовательности нуклеиновой кислоты, которая в достаточной степени комплементарна данной последовательности нуклеиновой кислоты, так что она может гибридизоваться с данной последовательностью нуклеиновой кислоты, с образованием тем самым стабильного дуплекса. "Варианты полинуклеотидной последовательности" используются в данном документе для обозначения последовательности нуклеиновой кислоты, которая без учета несходства, связанного с вырожденностью генетического кода, кодирует тот же полипептид.
В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию, представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, отличную от геномной. Используемая в данном документе "последовательность нуклеиновой кислоты, отличная от геномной" или "молекула нуклеиновой кислоты, отличная от геномной" относится к молекуле нуклеиновой кислоты, которая имеет одно или несколько изменений в последовательности нуклеиновой кислоты по сравнению с нативной или геномной последовательностью нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах осуществления изменение по отношению к нативной или геномной молекуле нуклеиновой кислоты включает без ограничения изменения в последовательности нуклеиновой кислоты, обусловленные вырожденностью генетического кода; оптимизацию кодонов последовательности нуклеиновой кислоты для экспрессии в растениях; изменения в последовательности нуклеиновой кислоты для введения по меньшей мере одной аминокислотной замены, вставки, делеции и/или добавления по сравнению с нативной или геномной последовательностью; удаление одного или нескольких интронов, ассоциированных с геномной последовательностью нуклеиновой кислоты; вставку одного или нескольких гетерологичных интронов; делецию одной или нескольких регуляторных областей, расположенных выше или ниже, которые ассоциированы с геномной последовательностью нуклеиновой кислоты; вставку одного или нескольких гетерологичных регуляторных участков, расположенных выше или ниже; делецию 5'- и/или 3'-нетранслируемой области, ассоциированной с геномной последовательностью нуклеиновой кислоты; вставку гетерологичной 5'- и/или 3'-нетранслируемой области и модификацию сайта полиаденилирования. В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, отличная от геномной, представляет собой кДНК.
Также предусматриваются молекулы нуклеиновой кислоты, которые кодируют продукты транскрипции и/или трансляции, которые впоследствии подвергаются сплайсингу с образованием в конечном итоге функциональных инсектицидных полипептидов. Сплайсинг может осуществляться in vitro или in vivo, и он может включать цис- или транс-сплайсинг. Субстратом для сплайсинга могут быть полинуклеотиды (например, РНК-транскрипты) или полипептиды. Примером цис-сплайсинга полинуклеотида является ситуация, когда интрон, вставленный в кодирующую последовательность, удаляется и два фланкирующих экзонных участка соединяются с образованием последовательности кодирующей, инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию. Примером транс-сплайсинга будет ситуация, когда полинуклеотид кодируется с разделением кодирующей последовательности на два или более фрагментов, которые могут транскрибироваться раздельно, а затем соединяться с образованием пестицидной кодирующей последовательности полной длины. Применение последовательности энхансера сплайсинга, которую можно вводить в конструкцию, может облегчать сплайсинг, как цис-, так и транс-сплайсинг полипептидов (патенты США №№ 6365377 и 6531316). Таким образом, в некоторых вариантах осуществления полинуклеотиды непосредственно не кодируют инсектицидный полипептид полной длины по настоящему раскрытию, а вернее кодируют фрагмент или фрагменты инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию. Эти полинуклеотиды можно применять для экспрессии функционального инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию посредством механизма, включающего сплайсинг, при этом сплайсинг может происходить на уровне полинуклеотида (например, интрон/экзон) и/или полипептида (например, интеин/экстеин). Это может быть полезным, например, при контроле экспрессии пестицидной активности, поскольку функциональный пестицидный полипептид будет экспрессироваться только в том случае, если все требуемые фрагменты экспрессируются в среде, которая обеспечивает возможность процессов сплайсинга с образованием функционального продукта. В другом примере введение одной или нескольких инсерционных последовательностей в полинуклеотид может облегчать рекомбинацию с полинуклеотидом с низкой гомологией; при этом применение интрона или интеина в отношении инсерционной последовательности облегчает удаление вставочной последовательности, что восстанавливает тем самым функцию кодируемого варианта.
Молекулы нуклеиновой кислоты, которые являются фрагментами этих последовательностей нуклеиновой кислоты, кодирующих инсектицидные полипептиды, также охватываются вариантами осуществления. ʺФрагментʺ, используемый в данном документе, относится к части последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию. Фрагмент последовательности нуклеиновой кислоты может кодировать биологически активную часть инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию, или он может представлять собой фрагмент, который можно применять в качестве гибридизационного зонда или ПЦР-праймера с применением раскрытых ниже способов. Молекулы нуклеиновой кислоты, которые являются фрагментами последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию, содержат по меньшей мере приблизительно 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250 или 260 смежных нуклеотидов или вплоть до количества нуклеотидов, присутствующих в последовательности нуклеиновой кислоты полной длины, кодирующей инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию, раскрытый в данном документе, в зависимости от предполагаемого применения. "Смежные нуклеотиды" используется в данном документе для обозначения нуклеотидных остатков, которые непосредственно прилегают друг к другу. Фрагменты последовательностей нуклеиновой кислоты согласно вариантам осуществления будут кодировать фрагменты белка, которые сохраняют биологическую активность инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию и, вследствие этого, сохраняют инсектицидную активность. "Сохраняет инсектицидную активность" используют в данном документе для обозначения полипептида, обладающего по меньшей мере приблизительно 10%, по меньшей мере приблизительно 30%, по меньшей мере приблизительно 50%, по меньшей мере приблизительно 70%, 80%, 90%, 95% или более высокой инсектицидной активностью нативного полипептида полной длины. В одном варианте осуществления инсектицидная активность представляет собой активность в отношении Lepidoptera. В одном варианте осуществления инсектицидная активность представляет собой активность в отношении видов жесткокрылых. В одном варианте осуществления инсектицидная активность представляет собой активность в отношении вида Diabrotica. В одном варианте осуществления инсектицидная активность представляет собой активность в отношении одного или нескольких насекомых-вредителей из группы кукурузных жуков: западного кукурузного жука, Diabrotica virgifera virgifera; северного кукурузного жука, D. barberi: блошки одиннадцатиточечной Говарда или жука-блошки одиннадцатиточечной; Diabrotica undecimpunctata howardi, и мексиканского кукурузного жука, D. virgifera zeae. В одном варианте осуществления инсектицидная активность представляет собой активность в отношении западного кукурузного жука, Diabrotica virgifera virgifera.
В некоторых вариантах осуществления фрагмент последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию, кодирующий биологически активную часть белка, будет кодировать по меньшей мере приблизительно 15, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84 или 85 смежных аминокислот или вплоть до общего количества аминокислот, присутствующих в инсектицидном полипептиде полной длины согласно вариантам осуществления. В некоторых вариантах осуществления фрагмент представляет собой таковой с N-терминальным и/или C-терминальным усечением по меньшей мере приблизительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или более аминокислот с N-конца и/или C-конца путем протеолиза, вставкой старт-кодона, делецией кодонов, кодирующих удаляемые аминокислоты, с одновременной вставкой стоп-кодона или путем вставки стоп-кодона в кодирующую последовательность.
Настоящее раскрытие предусматривает выделенные или рекомбинантные полинуклеотиды, которые кодируют любые из инсектицидных полипептидов, раскрытых в данном документе. Специалисты обычной квалификации в данной области легко поймут, что вследствие вырожденности генетического кода существует множество нуклеотидных последовательностей, кодирующих инсектицидные полипептиды по настоящему раскрытию. Таблица 1 представляет собой таблицу кодонов, которая представляет синонимичные кодоны для каждой аминокислоты. Например, все кодоны AGA, AGG, CGA, CGC, CGG и CGU кодируют аминокислоту аргинин. Таким образом, в каждом положении в нуклеиновых кислотах по настоящему раскрытию, в котором аргинин обозначен кодоном, кодон может быть изменен на любой из соответствующих вышеописанных кодонов без изменения кодируемого полипептида. Понятно, что U в последовательности РНК соответствует T в последовательности ДНК.
Таблица 1
Аланин Ala GCA GCC GCG GCU
Цистеин Cys UGC UGU
Аспарагиновая кислота Asp GAC GAU
Глутаминовая кислота Glu GAA GAG
Фенилаланин Phe UUC UUU
Глицин Gly GGA GGC GGG GGU
Гистидин His CAC CAU
Изолейцин Ile AUA AUC AUU
Лизин Lys AAA AAG
Лейцин Leu UUA UUG CUA CUC CUG CUU
Метионин Met AUG
Аспарагин Asn AAC AAU
Пролин Pro CCA CCC CCG CCU
Глутамин Gln CAA CAG
Аргинин Arg AGA AGG CGA CGC CGG CGU
Серин Ser AGC AGU UCA UCC UCG UCU
Треонин Thr ACA ACC ACG ACU
Валин Val GUA GUC GUG UU
Триптофан Trp UGG
Тирозин Tyr UAC UAU
Кроме того, специалист в данной области поймет, что изменения можно вводить путем внесения мутаций в последовательности нуклеиновой кислоты, что ведет, тем самым, к изменениям в аминокислотной последовательности кодируемых инсектицидных полипептидов без изменения биологической активности белков. Таким образом, вариантные молекулы нуклеиновой кислоты можно создавать путем введения одной или нескольких нуклеотидных замен, добавлений и/или делеций в соответствующую последовательность нуклеиновой кислоты, раскрытую в данном документе, так что одна или несколько аминокислотных замен, добавлений или делеций вводятся в кодируемый белок. Мутации можно вводить с помощью стандартных методик, таких как сайт-направленный мутагенез и ПЦР-опосредованный мутагенез. Такие вариантные последовательности нуклеиновой кислоты также охватываются настоящим раскрытием.
В качестве альтернативы, вариантные последовательности нуклеиновой кислоты можно получать путем введения мутаций случайным образом по всей или части кодирующей последовательности, как, например, путем сайт-насыщающего мутагенеза, и полученных мутантов можно подвергать скринингу в отношении способности обеспечивать пестицидную активность для идентификации мутантов, которые сохраняют активность. После мутагенеза кодируемый белок можно экспрессировать рекомбинантным способом, и активность белка можно определять с применением стандартных методик анализа.
Полинуклеотиды по настоящему раскрытию и их фрагменты необязательно применяют в качестве субстратов для ряда реакций рекомбинации и рекуррентной рекомбинации, в дополнение к стандартным способам клонирования, изложенным, например, в Ausubel, Berger и Sambrook, т. е. для получения дополнительных гомологов пестицидных полипептидов и их фрагментов с требуемыми свойствами. Известен ряд таких реакций, в том числе разработанные авторами настоящего изобретения и их сотрудниками. Способы получения варианта любой нуклеиновой кислоты, приведенной в данном документе, включают рекуррентную рекомбинацию такого полинуклеотида со вторым (или большим количеством) полинуклеотидом, таким образом, получение библиотеки вариантных полинуклеотидов также представляет собой варианты осуществления по настоящему раскрытию, также как и полученные библиотеки, клетки, содержащие библиотеки и любой рекомбинантный полинуклеотид, полученный такими способами. Дополнительно такие способы необязательно включают отбор вариантного полинуклеотида из таких библиотек на основе пестицидной активности, как есть, где такую рекуррентную рекомбинацию осуществляют in vitro или in vivo.
Ряд протоколов создания разнообразия, в том числе протоколы рекуррентной рекомбинации нуклеиновых кислот, доступен и полностью описан в уровне техники. Для получения одного или нескольких вариантов нуклеиновой кислоты или набора нуклеиновых кислот, а также вариантов кодируемых белков, процедуры можно применять отдельно и/или в комбинации. По отдельности и вместе эти процедуры обеспечивают надежные, широко применяемые способы создания диверсифицированных нуклеиновых кислот и наборов нуклеиновых кислот (в том числе, например, библиотек нуклеиновых кислот), применимых, например, для конструирования или быстрой эволюции нуклеиновых кислот, белков, метаболических путей, клеток и/или организмов с новыми и/или улучшенными характеристиками.
Хотя в ходе следующего обсуждения для ясности делают разграничение и классификацию, будет принято во внимание, что методики часто не являются взаимоисключающими. Более того, различные способы можно применять по отдельности или в комбинации, одновременно или последовательно, для получения доступа к различным вариантам последовательностей.
Результатом любой из процедур создания разнообразия, описанных в данном документе, может быть создание одной или нескольких нуклеиновых кислот, которые можно подвергнуть отбору или скринингу в отношении нуклеиновых кислот, имеющих требуемые свойства или обеспечивающих их, или нуклеиновых кислот, которые кодируют белки, имеющие требуемые свойства или обеспечивающие их. После диверсификации с помощью одного или нескольких способов, описанных в данном документе или иным образом доступных специалисту в данной области, любые получаемые нуклеиновые кислоты можно подвергать отбору в отношении требуемой активности или свойства, например пестицидной активности или такой активности при требуемом значении pH и т. д. Это может включать идентификацию любой активности, которую можно выявить, например в автоматизированном или автоматизируемом формате, посредством любого из анализов, известных в уровне техники, см., например, обсуждение проведения скрининга в отношении инсектицидной активности, ниже. Можно оценивать ряд связанных (или даже несвязанных) свойств последовательно или одновременно, на усмотрение специалиста-практика.
Описание ряда процедур создания разнообразия с целью создания модифицированных последовательностей нуклеиновой кислоты, например последовательностей, кодирующих полипептиды с пестицидной активностью или их фрагменты,находят в следующих публикациях и литературе, приводимой в них: Soong, et al., (2000) Nat Genet 25(4):436-439; Stemmer, et al., (1999) Tumor Targeting 4:1-4; Ness, et al., (1999) Nat Biotechnol 17:893-896; Chang, et al., (1999) Nat Biotechnol 17:793-797; Minshull and Stemmer, (1999) Curr Opin Chem Biol 3:284-290; Christians, et al., (1999) Nat Biotechnol 17:259-264; Crameri, et al., (1998) Nature 391:288-291; Crameri, et al., (1997) Nat Biotechnol 15:436-438; Zhang, et al., (1997) PNAS USA 94:4504-4509; Patten, et al., (1997) Curr Opin Biotechnol 8:724-733; Crameri, et al., (1996) Nat Med 2:100-103; Crameri, et al., (1996) Nat Biotechnol 14:315-319; Gates, et al., (1996) J Mol Biol 255:373-386; Stemmer, (1996) ʺSexual PCR and Assembly PCRʺ в: The Encyclopedia of Molecular Biology. VCH Publishers, New York. pp. 447-457; Crameri and Stemmer, (1995) BioTechniques 18:194-195; Stemmer, et al., (1995) Gene, 164:49-53; Stemmer, (1995) Science 270: 1510; Stemmer, (1995) Bio/Technology 13:549-553; Stemmer, (1994) Nature 370:389-391 и Stemmer, (1994) PNAS USA 91:10747-10751.
Мутационные способы создания разнообразия включают, например, сайт-направленный мутагенез (Ling, et al., (1997) Anal Biochem 254(2):157-178; Dale, et al., (1996) Methods Mol Biol 57:369-374; Smith, (1985) Ann Rev Genet 19:423-462; Botstein and Shortle, (1985) Science 229:1193-1201; Carter, (1986) Biochem J 237:1-7 и Kunkel, (1987) ʺThe efficiency of oligonucleotide directed mutagenesisʺ в Nucleic Acids & Molecular Biology (Eckstein and Lilley, eds., Springer Verlag, Berlin)); мутагенез с применением урацил-содержащих матриц (Kunkel, (1985) PNAS USA 82:488-492; Kunkel, et al., (1987) Methods Enzymol 154:367-382 и Bass, et al., (1988) Science 242:240-245); олигонуклеотид-направленный мутагенез (Zoller and Smith, (1983) Methods Enzymol 100:468-500; Zoller and Smith, (1987) Methods Enzymol 154:329-350 (1987); Zoller and Smith, (1982) Nucleic Acids Res 10:6487-6500), мутагенез фосфотиоат-модифицированной ДНК (Taylor, et al., (1985) Nucl Acids Res 13:8749-8764; Taylor, et al., (1985) Nucl Acids Res 13:8765-8787 (1985); Nakamaye and Eckstein, (1986) Nucl Acids Res 14:9679-9698; Sayers, et al., (1988) Nucl Acids Res 16:791-802 и Sayers, et al., (1988) Nucl Acids Res 16:803-814); мутагенез с применением дуплексной ДНК с гэпом (Kramer, et al., (1984) Nucl Acids Res 12:9441-9456; Kramer and Fritz, (1987) Methods Enzymol 154:350-367; Kramer, et al., (1988) Nucl Acids Res 16:7207 и Fritz, et al., (1988) Nucl Acids Res 16:6987-6999).
Дополнительные подходящие способы включают точечную репарацию ошибочно спаренных оснований (Kramer, et al., (1984) Cell 38:879-887), мутагенез с применением штаммов-хозяев с недостаточностью репарации (Carter, et al., (1985) Nucl Acids Res 13:4431-4443 и Carter, (1987) Methods in Enzymol 154:382-403), делеционный мутагенез (Eghtedarzadeh and Henikoff, (1986) Nucl Acids Res 14:5115), рестрикцию-отбор и рестрикцию-очистку (Wells, et al., (1986) Phil Trans R Soc Lond A 317:415-423), мутагенез посредством полного синтеза гена (Nambiar, et al., (1984) Science 223:1299-1301; Sakamar and Khorana, (1988) Nucl Acids Res 14:6361-6372; Wells, et al., (1985) Gene 34:315-323 и Grundström, et al., (1985) Nucl Acids Res 13:3305-3316), репарацию двухцепочечных разрывов (Mandecki, (1986) PNAS USA, 83:7177-7181 и Arnold, (1993) Curr Opin Biotech 4:450-455). Дополнительные сведения по многим из вышеуказанных способов можно найти в Methods Enzymol, том 154, в котором также описаны полезные руководства по поиску и устранению проблем в случае различных способов мутагенеза.
Дополнительные подробности, касающиеся различных способов создания разнообразия, можно найти в следующих патентах США, публикациях и заявках согласно PCT и публикациях EPO: патенте США № 5723323, патенте США № 5763192, патенте США № 5814476, патенте США № 5817483, патенте США № 5824514, патенте США № 5976862, патенте США № 5605793, патенте США № 5811238, патенте США № 5830721, патенте США № 5834252, патенте США № 5837458, WO 1995/22625, WO 1996/33207, WO 1997/20078, WO 1997/35966, WO 1999/41402, WO 1999/41383, WO 1999/41369, WO 1999/41368, EP 752008, EP 0932670, WO 1999/23107, WO 1999/21979, WO 1998/31837, WO 1998/27230, WO 1998/27230, WO 2000/00632, WO 2000/09679, WO 1998/42832, WO 1999/29902, WO 1998/41653, WO 1998/41622, WO 1998/42727, WO 2000/18906, WO 2000/04190, WO 2000/42561, WO 2000/42559, WO 2000/42560, WO 2001/23401 и PCT/US01/06775.
Нуклеотидные последовательности согласно вариантам осуществления также можно применять для выделения соответствующих последовательностей из других организмов, в частности других бактерий, в частности видов рода Pseudomonas и более конкретно Pseudomonas putida, Pseudomonas fulva или штамма Pseudomonas chlororaphis. Таким образом, такие способы как ПЦР, гибридизация и т. п. можно применять для идентификации таких последовательностей на основе гомологии их последовательности с последовательностями, изложенными в данном документе. Вариантами осуществления охватываются последовательности, выбранные на основе идентичности их последовательности полным последовательностям, изложенным в данном документе, или их фрагментам. Такие последовательности включают в себя последовательности, которые являются ортологами раскрытых последовательностей. Термин "ортологи" относится к генам, происходящим от общего предкового гена и выявляемым у различных видов вследствие видообразования. Гены, обнаруживаемые у различных видов, считаются ортологами, в случае если их нуклеотидные последовательности и/или кодируемые ими белковые последовательности имеют существенную степень идентичности, как определено в других разделах данного документа. Функции ортологов часто являются высококонсервативными среди видов.
В случае подхода, основанного на ПЦР, олигонуклеотидные праймеры можно сконструировать для применения в ПЦР-реакциях для амплификации соответствующих последовательностей ДНК, исходя из кДНК или геномной ДНК, извлеченных из какого-либо организма, представляющего интерес. Способы конструирования ПЦР-праймеров и ПЦР-клонирования, как правило, известны в уровне техники и раскрыты в Sambrook, et al., (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2d ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Plainview, New York), в дальнейшем "Sambrook". См. также Innis et al., eds. (1990) PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications (Academic Press, New York); Innis and Gelfand, eds. (1995) PCR Strategies (Academic Press, New York); и Innis and Gelfand, eds. (1999) PCR Methods Manual (Academic Press, New York). Известные способы ПЦР включают без ограничения способы с применением парных праймеров, гнездовых праймеров, одиночных специфичных праймеров, вырожденных праймеров, ген-специфичных праймеров, вектор-специфичных праймеров, частично ошибочно спаренных праймеров и т. п.
Для идентификации потенциальных инсектицидных полипептидов из коллекций бактерий, лизаты бактериальных клеток можно подвергать скринингу с применением антител, вырабатываемых в отношении инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию с применением способов вестерн-блоттинга и/или ELISA. Этот тип анализов можно проводить высокопроизводительным образом. Положительные образцы можно дополнительно анализировать с помощью различных методик, таких как очистка и идентификация белков с помощью антител. Способы получения антител хорошо известны в уровне техники, как обсуждается ниже.
В качестве альтернативы, для идентификации гомологов инсектицидных полипептидов можно применять способ идентификации белков на основе масс-спектрометрии с применением протоколов из литературных источников (Scott Patterson, (1998), 10.22, 1-24, Current Protocol in Molecular Biology, опубликованный John Wiley & Son Inc). Точнее говоря, способ идентификации белков на основе LC-MS/MS применяют для установления связи MS-данных указанных клеточных лизатов или образцов, обогащенных молекулами с требуемым молекулярным весом (вырезанных из геля SDS-PAGE с полосками с соответствующим молекулярным весом), с информацией о последовательности инсектицидных полипептидов по настоящему раскрытию. Любое совпадение в пептидных последовательностях указывает на возможность наличия гомологов в образцах. Дополнительные методики (очистки белка и методики молекулярной биологии) можно применять для выделения белка и идентификации последовательностей гомологов.
В способах гибридизации для скрининга кДНК или геномных библиотек можно применять всю или часть последовательности пестицидной нуклеиновой кислоты. Способы для конструирования таких кДНК и геномных библиотек, как правило, известны в уровне техники и раскрыты в Sambrook и Russell, (2001), выше. Так называемые гибридизационные зонды могут представлять собой фрагменты геномной ДНК, фрагменты кДНК, фрагменты РНК или другие олигонуклеотиды, и они могут быть помечены детектируемой группой, такой как 32P, или любым другим детектируемым маркером, таким как другие радиоактивные изотопы, флуоресцентное соединение, фермент или кофактор фермента. Зонды для гибридизации можно получать путем мечения синтетических олигонуклеотидов, основанных на последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей инсектицидный полипептид, раскрытой в данном документе. Дополнительно можно применять вырожденные праймеры, сконструированные на основе консервативных нуклеотидных или аминокислотных остатков в последовательности нуклеиновой кислоты или кодируемой аминокислотной последовательности. Как правило, зонд содержит участок последовательности нуклеиновой кислоты, который гибридизуется при жестких условиях по меньшей мере с приблизительно 12, по меньшей мере с приблизительно 25, по меньшей мере с приблизительно 50, 75, 100, 125, 150, 175 или 200 смежными нуклеотидами последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию или его фрагмент или вариант. Способы получения зондов для гибридизации, как правило, известны в уровне техники и раскрыты в Sambrook и Russell, (2001), выше, включенном в данный документ с помощью ссылки.
Например, полную последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию, раскрытую в данном документе, или одну или несколько ее частей можно применять в качестве зонда, способного специфично гибридизоваться с соответствующими последовательностями нуклеиновой кислоты, кодирующими последовательности, подобные инсектицидному полипептиду, и матричными РНК. Для достижения специфичной гибридизации при различных условиях такие зонды включают в себя последовательности, которые являются уникальными и предпочтительно состоят по меньшей мере из приблизительно 10 нуклеотидов в длину или по меньшей мере из приблизительно 20 нуклеотидов в длину. Такие зонды можно применять для амплификации соответствующих пестицидных последовательностей из выбранного организма с помощью ПЦР. Эту методику можно применять для выделения дополнительных кодирующих последовательностей из требуемого организма или в качестве диагностического анализа для определения присутствия кодирующих последовательностей в организме. Методики гибридизации включают гибридизационный скрининг высеянных ДНК-библиотек (либо бляшек, либо колоний; см., например, Sambrook, et al., (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2d ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.).
Гибридизацию таких последовательностей можно проводить в жестких условиях. "Жесткие условия" или "жесткие условия гибридизации" применяются в данном документе для обозначения условий, при которых зонд будет гибридизоваться со своей целевой последовательностью в явно большей степени, чем с другими последовательностями (например, по меньшей мере в 2 раза больше по сравнению с фоновой последовательностью). Жесткие условия являются зависимыми от последовательности и будут отличаться при различных обстоятельствах. Путем контроля жесткости условий гибридизации и/или отмывки можно идентифицировать целевые последовательности, которые на 100% комплементарны зонду (гибридизация с гомологичным зондом). В качестве альтернативы, условия жесткости можно откорректировать для обеспечения некоторого ошибочного спаривания в последовательностях с тем, чтобы выявлять более низкие степени сходства (гибридизация с гетерологичным зондом). В целом, зонд составляет менее приблизительно 1000 нуклеотидов в длину, предпочтительно менее 500 нуклеотидов в длину.
Как правило, жесткие условия будут такими, при которых концентрация соли составляет менее приблизительно 1,5 M ионов Na, обычно концентрация ионов Na (или других солей) составляет приблизительно 0,01-1,0 M при pH 7,0-8,3, а температура составляет по меньшей мере приблизительно 30°C для коротких зондов (например, 10-50 нуклеотидов) и по меньшей мере приблизительно 60°C для длинных зондов (например, более 50 нуклеотидов). Жесткие условия также могут быть достигнуты с помощью добавления дестабилизирующих средств, таких как формамид. Иллюстративные условия низкой жесткости включают гибридизацию в буферном растворе с 30-35% формамида, 1 M NaCl, 1% SDS (додецилсульфата натрия) при 37°C и отмывку в 1× - 2×SSC (20×SSC=3,0 M NaCl/0,3 M цитрата тринатрия) при 50-55°C. Иллюстративные условия умеренной жесткости включают гибридизацию в 40-45% формамиде, 1,0 M NaCl, 1% SDS при 37°C и отмывку в 0,5× - 1×SSC при 55-60°C. Иллюстративные условия высокой жесткости включают гибридизацию в 50% формамиде, 1 M NaCl, 1% SDS при 37°C и отмывку в 0,1×SSC при 60-65°C. Необязательно, отмывочные буферы могут содержать от приблизительно 0,1% до приблизительно 1% SDS. В целом, длительность гибридизации составляет менее приблизительно 24 часов, обычно от приблизительно 4 до приблизительно 12 часов.
Специфичность, как правило, зависит от процедур отмывки после гибридизации, причем ключевыми факторами являются ионная сила и температура конечного отмывающего раствора. Для гибридов ДНК-ДНК Tm можно примерно рассчитать из уравнения Meinkoth и Wahl, (1984) Anal. Biochem. 138:267-284: Tm=81,5°C+16,6 (log M)+0,41 (% GC) - 0,61 (% форм.) - 500/л; где M представляет собой молярность одновалентных катионов, % GC представляет собой процентную долю гуанозиновых и цитозиновых нуклеотидов в ДНК, % форм. представляет собой процентную долю формамида в растворе для гибридизации, и L представляет собой длину гибрида в парах оснований. Tm представляет собой температуру (при определенной ионной силе и pH), при которой 50% комплементарной целевой последовательности гибридизуется с идеально совпадающим зондом. Tm снижают на приблизительно 1°C для каждого 1% ошибочного спаривания; таким образом, Tm, условия гибридизации и/или отмывки можно откорректировать для гибридизации с последовательностями требуемой идентичности. Например, если необходимы последовательности, идентичные на ≧90%, то Tm можно снизить на 10°C. Как правило, жесткие условия выбирают так, чтобы они были приблизительно на 5°C ниже температуры плавления (Tm) конкретной последовательности и комплементарной ей последовательности при определенных ионной силе и значении pH. Однако при условиях сильной жесткости могут применяться гибридизация и/или отмывка при температуре на 1, 2, 3 или 4°C ниже температуры плавления (Tm); при условиях умеренной жесткости могут применяться гибридизация и/или отмывка при температуре на 6, 7, 8, 9 или 10°C ниже температуры плавления (Tm); при условиях низкой жесткости могут применяться гибридизация и/или отмывка при температуре на 11, 12, 13, 14, 15 или 20°C ниже температуры плавления (Tm). Специалистам будет понятно, что изменения жесткости растворов для гибридизации и/или отмывающих растворов по сути описаны с применением уравнения, композиций для гибридизации и отмывки и требуемой Tm. Если требуемая степень ошибочного спаривания приводит к Tm меньше 45°C (водный раствор) или 32°C (раствор формамида), то предпочтительно повысить концентрацию SSC так, чтобы можно было применять более высокую температуру. Исчерпывающее руководство по гибридизации нуклеиновых кислот приведено в Tijssen, (1993) Laboratory Techniques in Biochemistry and Molecular Biology-Hybridization with Nucleic Acid Probes, Part I, Chapter 2 (Elsevier, N.Y.) и Ausubel, et al., eds. (1995) Current Protocols in Molecular Biology, Chapter 2 (Greene Publishing and Wiley-Interscience, New York). См. Sambrook, et al., (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2d ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.).
Белки, а также их варианты и фрагменты
Один аспект настоящего раскрытия представляет собой выделенные инсектицидные полипептиды.
Полипептиды PIP-45-1 охвачены настоящим раскрытием. "Инсектицидный белок 45-1 Pseudomonas ", "полипептид PIP-45-1" или "белок PIP-45-1", используемые в данном документе взаимозаменяемо, относятся к полипептиду с инсектицидной активностью в отношении одного или нескольких насекомых-вредителей из отрядов Lepidoptera и/или Coleoptera и достаточно гомологичны белку с SEQ ID NO: 1. Предполагается ряд полипептидов PIP-45-1. Одним источником полипептида PIP-45-1 или родственных белков является бактериальный штамм, который содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 124, SEQ ID NO: 126, SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 136, SEQ ID NO: 138, SEQ ID NO: 140, SEQ ID NO: 142, SEQ ID NO: 146, SEQ ID NO: 150, SEQ ID NO: 152, SEQ ID NO: 220 или SEQ ID NO: 222, соответственно кодирующий полипептид PIP-45-1 с SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 234 и SEQ ID NO: 236. Один источник полипептида PIP-45-1 или родственных белков происходит из штамма Pseudomonas, Thalassuspira, Paracoccus или Cellvibrio. Один источник полипептида PIP-45-1 или родственных белков происходит из штамма Pseudomonas, выбранного без ограничения из Pseudomonas brenneri, Pseudomonas monteilii, Pseudomonas gessardii, Pseudomonas plecoglossicida, Pseudomonas putida, Pseudomonas poae, Pseudomonas trivialis, Pseudomonas libanensis, Pseudomonas fluorescens и Pseudomonas asplenii.
В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-1 достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 234 или SEQ ID NO: 236, и он обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-45-1.
В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-1 по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 234 или SEQ ID NO: 236.
В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-1 по меньшей мере на 99,1% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 1. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-1 по меньшей мере на 99,4% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 17. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-1 по меньшей мере на 99,6% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 19. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-1 по меньшей мере на 87% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 21. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-1 по меньшей мере на 88% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 23. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-1 по меньшей мере на 99,1% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 27. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-1 по меньшей мере на 99,8% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 29. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-1 по меньшей мере на 92,3% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 31. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-1 по меньшей мере на 91,1% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 33. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-1 по меньшей мере на 95,4% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 35. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-1 по меньшей мере на 93% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 39. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-1 по меньшей мере на 97,5% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 43. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-1 по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 45.
Полипептиды PIP-45-2 охвачены настоящим раскрытием. "Инсектицидный белок 45-2 Pseudomonas ", "полипептид PIP-45-2" или "белок PIP-45-2", используемые в данном документе взаимозаменяемо, относятся к полипептиду с инсектицидной активностью в отношении одного или нескольких насекомых-вредителей из отрядов Lepidoptera и/или Coleoptera и достаточно гомологичны белку с SEQ ID NO: 2. Предполагается ряд полипептидов PIP-45-2. Одним источником полипептида PIP-45-2 или родственных белков является бактериальный штамм, который содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 109, SEQ ID NO: 125, SEQ ID NO: 127, SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 137, SEQ ID NO: 139, SEQ ID NO: 141, SEQ ID NO: 143, SEQ ID NO: 147, SEQ ID NO: 151, SEQ ID NO: 153, SEQ ID NO: 221 или SEQ ID NO: 223, соответственно кодирующий полипептид PIP-45-2 с SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 235 и SEQ ID NO: 237. Один источник полипептида PIP-45-2 или родственных белков происходит из штамма Pseudomonas, Thalassuspira, Paracoccus или Cellvibrio. Один источник полипептида PIP-45-2 или родственных белков происходит из штамма Pseudomonas, выбранного без ограничения из Pseudomonas brenneri, Pseudomonas monteilii, Pseudomonas gessardii, Pseudomonas plecoglossicida, Pseudomonas putida, Pseudomonas poae, Pseudomonas trivialis, Pseudomonas libanensis, Pseudomonas fluorescens и Pseudomonas asplenii.
В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-2 достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 235 или SEQ ID NO: 237, и он обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-45-2. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-2 по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 235 или SEQ ID NO: 237.
В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-2 по меньшей мере на 99,2% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-2 по меньшей мере на 98,5% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 18. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-2 по меньшей мере на 96% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 20. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-2 по меньшей мере на 80% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 22. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-2 по меньшей мере на 81% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 24. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-2 по меньшей мере на 99,5% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 28. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-2 по меньшей мере на 98,5% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 30. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-2 по меньшей мере на 92% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 32. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-2 по меньшей мере на 91,5% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 34. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-2 по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 36. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-2 по меньшей мере на 90% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 40. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-2 по меньшей мере на 94% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 44. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-45-2 по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 46.
Полипептиды PIP-64-1 охвачены настоящим раскрытием. "Инсектицидный белок 64-1 Pseudomonas ", "полипептид PIP-64-1" или "белок PIP-64-1", используемые в данном документе взаимозаменяемо, относятся к полипептиду с инсектицидной активностью в отношении одного или нескольких насекомых-вредителей из отрядов Lepidoptera и/или Coleoptera и достаточно гомологичны белку с SEQ ID NO: 53. Предполагается ряд полипептидов PIP-64-1. Одним источником полипептида PIP-64-1 или родственных белков является бактериальный штамм, который содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 165 или SEQ ID NO: 224, который кодирует полипептид PIP-64-1 с SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 58 и SEQ ID NO: 238. Один источник полипептида PIP-64-1 или родственных белков происходит из штамма Pseudomonas, Enterobacter или Alcaligenes. Один источник полипептида PIP-64-1 или родственных белков происходит из штамма Pseudomonas или Alcaligenes, выбранного без ограничения из Pseudomonas brenneri, Pseudomonas gessardii, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas brassicacearum, Pseudomonas entomophila и Alcaligenes faecalis.
В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-64-1 достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 58 или SEQ ID NO: 238, и он обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-64-1. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-64-1 по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 58 или SEQ ID NO: 238.
В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-64-1 по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 53. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-64-1 по меньшей мере на 99,7% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 58. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-64-1 по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 238.
Полипептиды PIP-64-2 охвачены настоящим раскрытием. "Инсектицидный белок 64-2 Pseudomonas ", "полипептид PIP-64-2" или "белок PIP-64-2", используемые в данном документе взаимозаменяемо, относятся к полипептиду с инсектицидной активностью в отношении одного или нескольких насекомых-вредителей из отрядов Lepidoptera и/или Coleoptera и достаточно гомологичны белку с SEQ ID NO:54. Предполагается ряд полипептидов PIP-64-2. Одним источником полипептида PIP-64-2 или родственных белков является бактериальный штамм, который содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 166 или SEQ ID NO: 225, соответственно кодирующий полипептид PIP-64-2 с SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 59 и SEQ ID NO: 239. Один источник полипептида PIP-64-2 или родственных белков происходит из штамма Pseudomonas, Enterobacter или Alcaligenes. Один источник полипептида PIP-64-2 или родственных белков происходит из штамма Pseudomonas или Alcaligenes, выбранного без ограничения из Pseudomonas brenneri, Pseudomonas gessardii, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas brassicacearum, Pseudomonas entomophila и Alcaligenes faecalis.
В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-64-2 достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 59 или SEQ ID NO: 239, и он обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-64-2. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-64-2 по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 59 или SEQ ID NO: 239.
В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-64-2 по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 54. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-64-2 по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 55. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-64-2 по меньшей мере на 91% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 59. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-64-2 по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 239.
Полипептиды PIP-74-1 охвачены настоящим раскрытием. "Инсектицидный белок 74-1 Pseudomonas ", "полипептид PIP-74-1" или "белок PIP-74-1", используемые в данном документе взаимозаменяемо, относятся к полипептиду с инсектицидной активностью в отношении одного или нескольких насекомых-вредителей из отрядов Lepidoptera и/или Coleoptera и достаточно гомологичны белку с SEQ ID NO: 73. Предполагается ряд полипептидов PIP-74-1. Одним источником полипептида PIP-74-1 или родственных белков является бактериальный штамм, который содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 180, SEQ ID NO: 182 или SEQ ID NO: 184, соответственно кодирующий полипептид PIP-74-1 с SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 75 и SEQ ID NO: 77. Один источник полипептида PIP-74-1 или родственных белков происходит из штамма Pseudomonas. Один источник полипептида PIP-74-1 или родственных белков происходит из штамма Pseudomonas, выбранного без ограничения из Pseudomonas rhodesiae и Pseudomonas orientalis.
В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-74-1 достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 75 или SEQ ID NO: 77, и он обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-74-1. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-74-1 по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 75 или SEQ ID NO: 77.
В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-74-1 по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 73. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-74-1 по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 75. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-74-1 по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 77.
Полипептиды PIP-74-2 охвачены настоящим раскрытием. "Инсектицидный белок 74-2 Pseudomonas ", "полипептид PIP-74-2" или "белок PIP-74-2", используемые в данном документе взаимозаменяемо, относятся к полипептиду с инсектицидной активностью в отношении одного или нескольких насекомых-вредителей из отрядов Lepidoptera и/или Coleoptera и достаточно гомологичны белку с SEQ ID NO: 74. Предполагается ряд полипептидов PIP-74-2. Одним источником полипептида PIP-74-2 или родственных белков является бактериальный штамм, который содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 185, соответственно кодирующий полипептид PIP-74-2 с SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 76 и SEQ ID NO: 78. Один источник полипептида PIP-74-2 или родственных белков происходит из штамма Pseudomonas. Один источник полипептида PIP-74-2 или родственных белков происходит из штамма Pseudomonas, выбранного без ограничения из Pseudomonas rhodesiae и Pseudomonas orientalis.
В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-74-2 достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 76 или SEQ ID NO: 78, и он обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-74-2. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-74-2 по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 76 или SEQ ID NO: 78.
В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-74-2 по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 74. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-74-2 по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 76. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-74-2 по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 78.
Полипептиды PIP-75 охвачены настоящим раскрытием. "Инсектицидный белок 75 Pseudomonas ", "полипептид PIP-75" или "белок PIP-75", используемые в данном документе взаимозаменяемо, относятся к полипептиду с инсектицидной активностью в отношении одного или нескольких насекомых-вредителей из отрядов Lepidoptera и/или Coleoptera и достаточно гомологичны белку с SEQ ID NO: 79. Предполагается ряд полипептидов PIP-75. Одним источником полипептида PIP-75 или родственных белков является бактериальный штамм, который содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 187, SEQ ID NO: 188, SEQ ID NO: 191, SEQ ID NO: 192, SEQ ID NO: 193 или SEQ ID NO: 194, соответственно кодирующий полипептид PIP-75 с SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86 и SEQ ID NO: 87. Один источник полипептида PIP-75 или родственных белков происходит из штамма Pseudomonas, Enterobacter или Serratia. Один источник полипептида PIP-75 или родственных белков происходит из штамма Pseudomonas, Enterobacter или Serratia, выбранного без ограничения из Pseudomonas Antarctica, Pseudomonas orientalis, Enterobacter asburiae, Serratia plymuthica и Serratia liquefaciens.
В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-75 достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86 или SEQ ID NO: 87, и он обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-75. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-75 по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86 или SEQ ID NO: 87.
В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-75 по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 79. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-75 по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 80. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-75 по меньшей мере на 86% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 81. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-75 по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 84. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-75 по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 85. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-75 по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 86. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-75 по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 87.
Полипептиды PIP-77 охвачены настоящим раскрытием. "Инсектицидный белок 77 Pseudomonas", "полипептид PIP-77" или "белок PIP-77", используемые в данном документе взаимозаменяемо, относятся к полипептиду с инсектицидной активностью в отношении одного или нескольких насекомых-вредителей из отрядов Lepidoptera и/или Coleoptera и достаточно гомологичны белку с SEQ ID NO: 88. Предполагается ряд полипептидов PIP-77. Одним источником полипептида PIP-77 или родственных белков является бактериальный штамм, который содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 195, SEQ ID NO:196, SEQ ID NO:197, SEQ ID NO:198, SEQ ID NO:199, SEQ ID NO: 200, SEQ ID NO: 201, SEQ ID NO: 202, SEQ ID NO: 203, SEQ ID NO: 204, SEQ ID NO: 205, SEQ ID NO: 207, SEQ ID NO: 227, SEQ ID NO: 228 или SEQ ID NO: 231, соответственно кодирующий полипептид PIP-77 с SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242 и SEQ ID NO: 245. Один источник полипептида PIP-77 или родственных белков происходит из штамма Pseudomonas, Enterobacter, Shewanella, Haemophilus или Aeromonas. Один источник полипептида PIP-77 или родственных белков происходит из штамма Pseudomonas, выбранного без ограничения из Pseudomonas chlororaphis, Pseudomonas brassicacearum, Pseudomonas fluorescens и Pseudomonas rhodesiae.
В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-77 достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242 или SEQ ID NO: 245, и он обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-77. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-77 по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242 или SEQ ID NO: 245.
В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-77 по меньшей мере на 93% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 88. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-77 по меньшей мере на 97% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 89. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-77 по меньшей мере на 99% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 90. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-77 по меньшей мере на 97% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 92. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-77 по меньшей мере на 87% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 93. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-77 по меньшей мере на 86% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 94. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-77 по меньшей мере на 85% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 95. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-77 по меньшей мере на 84% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 96. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-77 по меньшей мере на 85% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 97. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-77 по меньшей мере на 83% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 98. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-77 по меньшей мере на 80% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 100. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-77 по меньшей мере на 85% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 241. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-77 по меньшей мере на 83% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 242. В некоторых вариантах осуществления последовательность полипептида PIP-77 по меньшей мере на 96% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 245.
Термины "белок", "пептидная молекула" или "полипептид", используемые в данном документе, включают в себя любую молекулу, которая содержит пять или более аминокислот. В уровне техники хорошо известно, что белковые, пептидные или полипептидные молекулы могут подвергаться модификации, в том числе посттрансляционным модификациям, таким как без ограничения образование дисульфидных связей, гликозилирование, фосфорилирование или олигомеризация. Таким образом, используемые в данном документе термины "белок", "пептидная молекула" или "полипептид" включают в себя любой белок, который модифицирован посредством какого-либо биологического или небиологического процесса. Термины "аминокислота" и "аминокислоты" относятся ко всем встречающимся в природе L-аминокислотам.
В некоторых вариантах осуществления полипептид PIP-45-1 характеризуется расчетным молекулярным весом, составляющим от приблизительно 40 кДа до приблизительно 80 кДа, от приблизительно 50 кДа до приблизительно 70 кДа, от приблизительно 60 кДа до приблизительно 65 кДа, от приблизительно 61 кДа до приблизительно 64 кДа, от приблизительно 62 кДа до приблизительно 63 кДа и от приблизительно 62,25 кДа до приблизительно 62,75 кДа. Термин ʺприблизительноʺ, используемый в данном документе в контексте молекулярного веса инсектицидного полипептида, обозначает±0,25 килодальтон.
В некоторых вариантах осуществления полипептид PIP-45-2 характеризуется расчетным молекулярным весом, составляющим от приблизительно 40 кДа до приблизительно 80 кДа, от приблизительно 50 кДа до приблизительно 64 кДа, от приблизительно 55 кДа до приблизительно 60 кДа, от приблизительно 56,5 кДа до приблизительно 59 кДа и от приблизительно 57,25 кДа до приблизительно 58 кДа.
В некоторых вариантах осуществления полипептид PIP-64-1 характеризуется расчетным молекулярным весом, составляющим от приблизительно 20 кДа до приблизительно 40 кДа, от приблизительно 25 кДа до приблизительно 32 кДа, от приблизительно 26 кДа до приблизительно 31 кДа, от приблизительно 27 кДа до приблизительно 30 кДа, от приблизительно 28 кДа до приблизительно 29 кДа и от приблизительно 28,1 кДа до приблизительно 28,7 кДа.
В некоторых вариантах осуществления полипептид PIP-64-2 характеризуется расчетным молекулярным весом, составляющим от приблизительно 20 кДа до приблизительно 40 кДа, от приблизительно 25 кДа до приблизительно 32 кДа, от приблизительно 26 кДа до приблизительно 31 кДа, от приблизительно 27 кДа до приблизительно 30 кДа и от приблизительно 28,25 кДа до приблизительно 29 кДа.
В некоторых вариантах осуществления полипептид PIP-74-1 характеризуется расчетным молекулярным весом, составляющим от приблизительно 40 кДа до приблизительно 80 кДа, от приблизительно 50 кДа до приблизительно 70 кДа, от приблизительно 55 кДа до приблизительно 73 кДа, от приблизительно 57 кДа до приблизительно 61 кДа, от приблизительно 58 кДа до приблизительно 60 кДа и от приблизительно 58,75 кДа до приблизительно 59,25 кДа. Термин ʺприблизительноʺ, используемый в данном документе в контексте молекулярного веса инсектицидного полипептида, обозначает±0,25 килодальтон.
В некоторых вариантах осуществления полипептид PIP-74-2 характеризуется расчетным молекулярным весом, составляющим от приблизительно 35 кДа до приблизительно 65 кДа, от приблизительно 45 кДа до приблизительно 51,5 кДа, от приблизительно 47,5 кДа до приблизительно 49,5 кДа и от приблизительно 48,25 кДа до приблизительно 48,75 кДа.
В некоторых вариантах осуществления полипептид PIP-75 характеризуется расчетным молекулярным весом, составляющим от приблизительно 6 кДа до приблизительно 14 кДа, от приблизительно 8 кДа до приблизительно 13,5 кДа, от приблизительно 9 кДа до приблизительно 12 кДа, от приблизительно 9,5 кДа до приблизительно 11,5 кДа и от приблизительно 10,4 кДа до приблизительно 10,8 кДа.
В некоторых вариантах осуществления полипептид PIP-77 характеризуется расчетным молекулярным весом, составляющим от приблизительно 7 кДа до приблизительно 13 кДа, от приблизительно 8 кДа до приблизительно 12 кДа, от приблизительно 9 кДа до приблизительно 11 кДа, от приблизительно 9,5 кДа до приблизительно 10,3 кДа и от приблизительно 9,75 кДа до приблизительно 10,25 кДа.
В некоторых вариантах осуществления инсектицидные полипептиды по настоящему раскрытию характеризуются модифицированным физическим свойством. Термин "физическое свойство", используемый в данном документе, относится к любому параметру, который подходит для описания физико-химических характеристик белка. "Физическое свойство, представляющее интерес" и "свойство, представляющее интерес", используемые в данном документе, используются взаимозаменяемо для обозначения физических свойств белков, подлежащих исследованию и/или модификации. Примеры физических свойств включают без ограничения суммарный поверхностный заряд и распределение зарядов на поверхности белка, суммарную гидрофобность и распределение гидрофобных остатков на поверхности белка, плотность поверхностного заряда, плотность гидрофобности поверхности, общее число поверхностных ионизируемых групп, поверхностное натяжение, размер белка и его распределение в растворе, температуру плавления, теплоемкость и второй вириальный коэффициент. Примеры физических свойств также включают без ограничения растворимость, фолдинг, стабильность и усвояемость. В некоторых вариантах осуществления инсектицидные полипептиды по настоящему раскрытию характеризуется повышенной усвояемостью протеолитических фрагментов в кишечнике насекомого. Модели для расщепления с помощью искусственного желудочного сока известны специалисту в данной области (Fuchs, R.L. and J.D. Astwood. Food Technology 50: 83-88, 1996; Astwood, J.D., et al Nature Biotechnology 14: 1269-1273, 1996; Fu TJ et al J. Agric Food Chem. 50: 7154-7160, 2002).
В некоторых вариантах осуществления варианты включают полипептиды, которые отличаются по аминокислотной последовательности вследствие мутагенеза. Вариантные белки, охваченные настоящим раскрытием, являются биологически активными, то есть они все еще обладают требуемой биологической активностью (т. е. пестицидной активностью) нативного белка. В некоторых вариантах осуществления вариант будет обладать по меньшей мере приблизительно 10%, по меньшей мере приблизительно 30%, по меньшей мере приблизительно 50%, по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 80% или более инсектицидной активности нативного белка. В некоторых вариантах осуществления варианты могут обладать усиленной активностью по сравнению с нативным белком.
Бактериальные гены довольно часто имеют несколько метиониновых инициаторных кодонов поблизости от стартового сайта открытой рамки считывания. Зачастую, инициация трансляции по одному или нескольким из этих старт-кодонов будет приводить к образованию функционального белка. Эти старт-кодоны могут включать кодоны ATG. Однако бактерии, такие как Bacillus sp., также распознают кодон GTG в качестве старт-кодона, и белки, трансляция которых инициируется по кодонам GTG, в качестве первой аминокислоты содержат метионин. В редких случаях, трансляция в бактериальных системах может инициироваться по кодону TTG, хотя в таком случае TTG кодирует метионин. Кроме того, зачастую a priori не определяют, какой из этих кодонов естественным образом используется в бактерии. Таким образом понятно, что применение одного из взаимных метиониновых кодонов может также приводить к образованию пестицидных белков. Эти пестицидные белки охватываются настоящим раскрытием и могут применяться в способах по настоящему раскрытию. Будет понятно, что при экспрессии в растениях будет необходимо изменить взаимный старт-кодон на ATG для надлежащей трансляции.
В другом аспекте инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию может экспрессироваться в виде белка-предшественника со вставочной последовательностью, которая катализирует многостадийный посттрансляционный сплайсинг белка. Сплайсинг белка предусматривает вырезание вставочных последовательностей из полипептида с одновременным присоединением фланкирующих последовательностей с получением нового полипептида (Chong, et al., (1996) J. Biol. Chem., 271:22159-22168). Эта вставочная последовательность или элемент сплайсинга белка, называемые интеинами, которые катализируют свое собственное вырезание посредством трех согласованных реакций на N-терминальной и C-терминальной границах сплайсинга: ацильной перестройки N-терминального цистеина или серина; реакции переэтерификации между двумя концами с образованием разветвленного сложноэфирного или тиоэфирного промежуточного соединения и расщепления пептидной связи, сопряженного с образованием кольца с участием C-терминального аспарагина интеина с высвобождением интеина (Evans, et al., (2000) J. Biol. Chem., 275:9091-9094). Выяснение механизма сплайсинга белка привело к возникновению ряда применений, связанных с интеинами (Comb et al., патент США № 5496714; Comb et al., патент США № 5834247; Camarero and Muir, (1999) J. Amer. Chem. Soc. 121:5597-5598; Chong, et al., (1997) Gene 192:271-281, Chong, et al., (1998) Nucleic Acids Res. 26:5109-5115; Chong, et al., (1998) J. Biol. Chem. 273:10567-10577; Cotton, et al., (1999) J. Am. Chem. Soc. 121:1100-1101; Evans, et al., (1999) J. Biol. Chem. 274:18359-18363; Evans, et al., (1999) J. Biol. Chem. 274:3923-3926; Evans, et al., (1998) Protein Sci. 7:2256-2264; Evans, et al., (2000) J. Biol. Chem. 275:9091-9094; Iwai and Pluckthun, (1999) FEBS Lett. 459:166-172; Mathys, et al., (1999) Gene 231:1-13; Mills, et al., (1998) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95:3543-3548; Muir, et al., (1998) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95:6705-6710; Otomo, et al., (1999) Biochemistry 38:16040-16044; Otomo, et al., (1999) J. Biolmol. NMR 14:105-114; Scott, et al., (1999) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96:13638-13643; Severinov and Muir, (1998) J. Biol. Chem. 273:16205-16209; Shingledecker, et al., (1998) Gene 207:187-195; Southworth, et al., (1998) EMBO J. 17:918-926; Southworth, et al., (1999) Biotechniques 27:110-120; Wood, et al., (1999) Nat. Biotechnol. 17:889-892; Wu, et al., (1998a) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95:9226-9231; Wu, et al., (1998b) Biochim Biophys Acta 1387:422-432; Xu, et al., (1999) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96:388-393; Yamazaki, et al., (1998) J. Am. Chem. Soc., 120:5591-5592). Относительно применения интеинов в растительных трансгенах см. Yang, et al., (Transgene Res 15:583-593 (2006)) и Evans, et al., (Annu. Rev. Plant Biol. 56:375-392 (2005)).
В другом аспекте инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию может кодироваться двумя отдельными генами, при этом интеин белка-предшественника берет начало от двух генов, называемый сплит-интеином, и две части предшественника соединяются при образовании пептидной связи. Это образование пептидной связи осуществляется с помощью транс-сплайсинга, опосредованного интеином. С этой целью, первая и вторая кассеты экспрессии, содержащие два отдельных гена, дополнительно кодируют интеины, способные опосредовать транс-сплайсинг белков. С помощью транс-сплайсинга белки и полипептиды, кодируемые первым и вторым фрагментами, могут быть связаны путем образования пептидной связи. Интеины транс-сплайсинга можно выбирать из ядерного генома или генома органелл различных организмов, в том числе эукариот, архебактерий и эубактерий. Интеины, которые можно применять, перечислены на сайте по адресу neb.com/neb/inteins.html, доступ к которому можно получить через всемирную сеть Интернет с использованием префикса "www"). Нуклеотидную последовательность, кодирующую интеин, можно разделять на 5′-часть и 3′-часть, которые кодируют соответственно 5′-часть и 3′-часть интеина. Части последовательности, которые не являются необходимыми для интеин-сплайсинга (например, домен хоминг-эндонуклеазы), могут быть удалены. Интеин-кодирующая последовательность расщепляется, так что 5′- и 3′-части способны к транс-сплайсингу. Для выбора подходящего сайта расщепления интеин-кодирующей последовательности можно следовать соображениям, опубликованным у Southworth, et al., (1998) EMBO J. 17:918-926. При конструировании первой и второй кассет экспрессии 5′ интеин-кодирующую последовательность соединяют с 3′-концом первого фрагмента, кодирующего N-терминальную часть инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию, а 3′ интеин-кодирующую последовательность соединяют с 5′-концом второго фрагмента, кодирующего C-терминальную часть инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию.
В целом, партнеров для транс-сплайсинга можно конструировать с использованием любого сплит-интеина, в том числе любых встречающихся в природе или искусственно расщепленных сплит-интеинов. Известны несколько встречающихся в природе сплит-интеинов, например: сплит-интеин гена DnaE PCC6803 Synechocystis sp. (см. Wu, et al., (1998) Proc Natl Acad Sci USA. 95(16):9226-31 и Evans, et al., (2000) J Biol Chem. 275(13):9091-4 и гена DnaE из Nostoc punctiforme (см. Iwai, et al., (2006) FEBS Lett. 580(7):1853-8). Интеины, не относящиеся к сплит-интеинам, были искусственно расщеплены в лаборатории с созданием новых сплит-интеинов, например: искусственно расщепленный интеин Ssp DnaB (см. Wu, et al., (1998) Biochim Biophys Acta. 1387:422-32), и расщепленный интеин Sce VMA (см. Brenzel, et al., (2006) Biochemistry. 45(6):1571-8), и искусственно расщепленный грибной мини-интеин (см. Elleuche, et al., (2007) Biochem Biophys Res Commun. 355(3):830-4). Также доступны базы данных по интеинам, в которых перечислены известные интеины (см., например, базу данных, доступную в режиме реального времени на сайте по адресу: bioinformatics.weizmann.ac.il/˜pietro/inteins/Inteinstable.html, доступ к которому можно получить через всемирную сеть Интернет с использованием префикса "www").
Встречающиеся в природе интеины, не относящиеся к сплит-интеинам, могут обладать эндонуклеазной или другими видами ферментативной активности, которые, как правило, можно устранять при конструировании искусственно расщепленного сплит-интеина. Такие мини-интеины или минимизированные сплит-интеины хорошо известны из уровня техники и, как правило, они состоят из менее чем 200 аминокислотных остатков в длину (см. Wu, et al., (1998) Biochim Biophys Acta. 1387:422-32). Подходящие сплит-интеины могут иметь другие обеспечивающие очистку полипептидные элементы, добавляемые к их структуре, при условии, что такие элементы не ингибируют сплайсинг сплит-интеина, или их добавляют таким способом, который дает возможность удалить их перед сплайсингом. Сообщалось о сплайсинге белка с применением белков, которые содержат бактериальные интеин-подобные (BIL) домены (см. Amitai, et al., (2003) Mol Microbiol. 47:61-73) и самопроцессирующиеся домены hedgehog (Hog) (последние при объединении с интеинами называют суперсемейством Hog/интеин или семейством HINT (см. Dassa, et al., (2004) J Biol Chem. 279:32001-7), и домены, такие как эти, можно также применять для получения искусственно расщепленных интеинов. В частности, не подвергающихся сплайсингу представителей таких семейств можно модифицировать с помощью методик молекулярной биологии для введения или восстановления активности сплайсинга в таких родственных разновидностях. Последние исследования показывают, что сплайсинг можно наблюдать при обеспечении реакции N-терминального компонента сплит-интеина с C-терминальным компонентом сплит-интеина, при этом в естественных условиях он не является его "партнером"; например, сплайсинг наблюдали при использовании партнеров, которые всего на 30-50% гомологичны "природному" сплайсинг-партнеру (см. Dassa, et al., (2007) Biochemistry. 46(1):322-30). Было показано, что другие такие смеси несовместимых партнеров сплит-интеинов не реагируют друг с другом (см. Brenzel, et al., (2006) Biochemistry. 45(6):1571-8). Однако, в пределах компетенции специалиста в соответствующей области определить, может ли конкретная пара полипептидов связываться друг с другом с обеспечением функционального интеина, с применением стандартных способов и без использования изобретательских навыков.
В другом аспекте инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию представляет собой вариант с круговыми перестановками. Разработка способов с применением рекомбинантной ДНК обеспечивала возможность исследовать эффекты транспозиции последовательностей на фолдинг, структуру и функцию белка. Подход, применяемый при создании новых последовательностей, напоминает то, что происходит со встречающимися в природе парами белков, которые связываются посредством линейной реорганизации их аминокислотных последовательностей (Cunningham, et al., (1979) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 76:3218-3222; Teather and Erfle, (1990) J. Bacteriol. 172:3837-3841; Schimming, et al., (1992) Eur. J. Biochem. 204:13-19; Yamiuchi and Minamikawa, (1991) FEBS Lett. 260:127-130; MacGregor, et al., (1996) FEBS Lett. 378:263-266). Первое in vitro применение этого типа перестановки у белков описали Goldenberg и Creighton (J. Mol. Biol. 165:407-413, 1983). При создании варианта с круговыми перестановками новый N-конец выбирают во внутреннем сайте (точечный разрыв) оригинальной последовательности, при этом новая последовательность имеет такой же порядок аминокислот, как и оригинальная, от точечного разрыва до тех пор, пока она не достигает аминокислоты, которая находится в оригинальном C-конце или вблизи него. В данной точке новая последовательность присоединяется либо непосредственно, либо через дополнительную часть последовательности (линкер) к аминокислоте, которая находится на оригинальном N-конце или вблизи него, и новая последовательность продолжается такой же последовательностью, что и оригинальная до тех пор, пока она не достигнет точки, которая находится в аминокислоте, которая была N-терминальной по отношению к сайту точечного разрыва оригинальной последовательности, или вблизи него, причем этот остаток образует новый C-конец цепи. Длину аминокислотной последовательности линкера можно выбирать эмпирически, или исходя из информации о структуре, или путем применения комбинации двух этих подходов. Если информация о структуре является недоступной, то можно получить небольшие серии линкеров для тестирования с использованием конструирования, длина которого варьирует для охвата диапазона от 0 до 50 Å и последовательность которого выбрана таким образом, чтобы соответствовать доступности поверхностных групп (гидрофильность, Hopp and Woods, (1983) Mol. Immunol. 20:483-489; Kyte and Doolittle, (1982) J. Mol. Biol. 157:105-132; площади поверхности, доступной воздействию растворителя, Lee and Richards, (1971) J. Mol. Biol. 55:379-400) и способности принимать необходимую конформацию без нарушения конфигурации пестицидного полипептида (конформационно подвижный; Karplus and Schulz, (1985) Naturwissenschaften 72:212-213). При условии, что при трансляции средняя длина остатка составляет 2,0-3,8 Å, это будет означать, что длина, подлежащая тестированию, будет составлять от 0 до 30 остатков, при этом предпочтительным диапазоном является 0-15 остатков. Примером такой эмпирической серии будет конструирование линкеров с применением кассетной последовательности, такой как Gly-Gly-Gly-Ser, повторяемой n раз, где n составляет 1, 2, 3 или 4. Специалисты в данной области поймут, что существует множество таких последовательностей, варьирующихся по длине или составу, которые могут служить в качестве линкеров с первоочередным соображением, что они не являются ни чрезмерно длинными, ни чрезмерно короткими (см. Sandhu, (1992) Critical Rev. Biotech. 12:437-462); причем если они являются слишком длинными, то энтропийные эффекты вероятно будут дестабилизировать трехмерную укладку и также могут делать фолдинг кинетически невыполнимым, а если они являются слишком короткими, то они вероятно будут дестабилизировать молекулу вследствие скручивающей или стерической деформации. Специалисты, разбирающиеся в анализе информации о структуре белка, будут понимать, что при наличии расстояние между концами цепей, определяемое как расстояние между c-альфа атомами углерода, можно применять для определения длины используемой последовательности или по меньшей мере для ограничения числа возможностей, которые требуется протестировать при эмпирическом отборе линкеров. Они также будут понимать, что иногда встречается случай, когда положения концов полипептидной цепи являются нечеткими в структурных моделях, полученных по данным рентгеноструктурного анализа или ядерной магнитно-резонансной спектроскопии, и в случае такой ситуации, следовательно, ее необходимо принимать во внимание для правильной оценки длины требуемого линкера. На основании остатков, положение которых четко определено, выбирают два остатка, которые близки по последовательности к концам цепи, и расстояние между их c-альфа атомами углерода используют для расчета приблизительной длины для линкера между ними. С использованием расчетной длины в качестве предварительных данных, далее отбирают линкеры в пределах диапазона количества остатков (из расчета 2-3,8 Å на остаток). Эти линкеры можно составлять из оригинальной последовательности, укороченной или удлиненной при необходимости, и в случае удлинения можно выбирать дополнительные остатки, которые являются гибкими и гидрофильными, как описано выше; или необязательно оригинальная последовательность может замещаться с применением серии линкеров, причем одним примером является вышеупомянутый подход с использованием кассеты Gly-Gly-Gly-Ser; или необязательно можно применять комбинацию оригинальной последовательности и новой последовательности, имеющей подходящую общую длину. Последовательности пестицидных полипептидов, способных к фолдингу с образованием биологически активных состояний, можно получать путем соответствующего отбора начальных (амино-конец) и концевых (карбоксильный конец) положений из оригинальной полипептидной цепи, при этом с применением линкерной последовательности, которая описана выше. Амино-конец и карбоксильный конец выбирают из общего отрезка последовательности, называемого участком точечного разрыва, с использованием нижеописанных рекомендаций. Таким образом, новую аминокислотную последовательность получают путем отбора амино-конца и карбоксильного конца из одного участка точечного разрыва. Во многих случаях выбор новых концов будет таким, что оригинальное положение карбоксильного конца непосредственно предшествует положению амино-конца. Однако специалисты в данной области поймут, что выборы концов в каком-либо месте в пределах участка могут оказывать влияние, и что он фактически будет приводить либо к удалениям, либо к добавлениям к амино-части или карбоксильной части новой последовательности. Основным положением молекулярной биологии является то, что первичная аминокислотная последовательность белка обуславливает фолдинг в трехмерную структуру, необходимую для проявления его биологической функции. Специалистам в данной области известны способы получения и интерпретации информации о трехмерной структуре с применением рентгеноструктурного анализа одиночных кристаллов белка или ядерной магнитно-резонансной спектроскопии растворов белка. Примеры информации о структуре, которая подходит для идентификации участков точечного разрыва, включают расположение и тип вторичной структуры белка (альфа- и 3-10 спирали, параллельные и антипараллельные бета-слои, обращения или повороты цепи и петли; Kabsch and Sander, (1983) Biopolymers 22:2577-2637; степень доступности аминокислотных остатков для растворителя, масштаб и тип взаимодействий остатков друг с другом (Chothia, (1984) Ann. Rev. Biochem. 53:537-572), а также статическое и динамическое распределение конформаций на протяжении полипептидной цепи (Alber and Mathews, (1987) Methods Enzymol. 154:511-533). В некоторых случаях известна дополнительная информация о доступности остатков для растворителя; причем одним примером является сайт посттрансляционного прикрепления углеводов, который обязательно находится на поверхности белка. Если экспериментальная информация о структуре не доступна или ее невозможно получить, то также доступны способы для анализа первичной аминокислотной последовательности с тем, чтобы делать прогнозы о третичной и вторичной структуре белка, доступности для растворителя и наличии поворотов и петель. Для эмпирического определения доступности поверхностных групп также иногда применимы биохимические способы, если прямые способы определения структуры невозможны; например, применение идентификации сайтов деполимеризации после ограниченного протеолиза для того, чтобы делать заключение о доступности поверхностных групп (Gentile and Salvatore, (1993) Eur. J. Biochem. 218:603-621). Таким образом, путем применения либо информации о структуре, полученной экспериментальным путем, либо прогностических способов (например, Srinivisan and Rose, (1995) Proteins: Struct., Funct. & Genetics 22:81-99) проводят исследование исходной аминокислотной последовательности для классификации участков в отношении того, важны ли они для поддержания вторичной и третичной структур. Наличия последовательностей в участках, которые, как известно, участвуют в периодической вторичной структуре (альфа и 3-10 спирали, параллельные и антипараллельные бета-слои), следует избегать. Аналогично, участки аминокислотной последовательности, которые, как наблюдается или прогнозируется, обладают низкой степенью доступности для действия растворителя, наиболее вероятно являются частью так называемого гидрофобного ядра белка, и их следует также избегать при выборе амино-конца или карбоксильного конца. В отличие от этого, участки, которые, как известно или прогнозируется, находятся в поверхностных поворотах или петлях, и в частности те участки, о которых известно, что они не требуются для биологической активности, являются предпочтительными сайтами для расположения противоположных концов полипептидной цепи. Предпочтительные непрерывные отрезки аминокислотной последовательности, основанные на вышеприведенных критериях, называют участком точечного разрыва. Полинуклеотиды, кодирующие инсектицидные полипептиды с круговыми перестановками по настоящему раскрытию с новым N-концом/C-концом, которые содержат линкерный участок, отделяющий оригинальный C-конец и N-конец, фактически можно получать по способу, описанному в Mullins, et al., (1994) J. Am. Chem. Soc. 116:5529-5533. Несколько стадий амплификации посредством полимеразной цепной реакции (ПЦР) применяют для перестройки последовательности ДНК, кодирующей первичную аминокислотную последовательность белка. Полинуклеотиды, кодирующие инсектицидные полипептиды с круговыми перестановками по настоящему раскрытию с новым N-концом/C-концом, которые содержат линкерный участок, отделяющий оригинальный C-конец и N-конец, можно получать опираясь на способ тандемных повторов, описанный в Horlick, et al., (1992) Protein Eng. 5:427-431. Амплификацию посредством полимеразной цепной реакции (ПЦР) генов с новыми N-концом/C-концом проводят с применением ДНК-матрицы с тандемными повторами.
В другом аспекте предусматриваются белки слияния, в аминокислотную последовательность которых включена аминокислотная последовательность, содержащая инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию. Способы разработки и конструирования белков слияния (и кодирующих их полинуклеотидов) известны специалистам в данной области. Полинуклеотиды, кодирующие инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию, могут быть слиты с сигнальными последовательностями, которые будут управлять локализацией инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию относительно инсектицидного полипептида согласно вариантам осуществления из прокариотической или эукариотической клетки. Например, в E. coli, может потребоваться направить экспрессию белка в периплазматическое пространство. Примеры сигнальных последовательностей или белков (или их фрагментов), с которыми можно сливать инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию с тем, чтобы направлять экспрессию полипептида в периплазматическое пространство бактерий, включают без ограничения сигнальную последовательность pelB, сигнальную последовательность белка, связывающего мальтозу (MBP), MBP, сигнальную последовательность ompA, сигнальную последовательность B-субъединицы периплазматического неустойчивого к нагреванию энтеротоксина E. coli и сигнальную последовательность щелочной фосфатазы. Для конструирования белков слияния коммерчески доступны несколько векторов, которые будут управлять локализацией белка, такие как серия векторов pMAL (в частности, серия pMAL-p), доступная от New England Biolabs® (County Road, 240, Ипсуич, Массачусетс, 01938-2723). В определенном варианте осуществления инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию можно сливать с сигнальной последовательностью пектатлиазы pelB для увеличения эффективности экспрессии и очистки таких полипептидов у грамм-отрицательных бактерий (см. патенты США №№ 5576195 и 5846818). Слияния пластидный транзитный пептид растения/полипептид хорошо известны в уровне техники (см. патент США № 7193133). Апопластные транзитные пептиды, такие как сигнальная последовательность для секреции альфа-амилазы риса или ячменя, также хорошо известны в уровне техники. Пластидный транзитный пептид сливают, как правило, со стороны N-конца с полипептидом, подлежащим нацеливанию (например, партнером слияния). В одном варианте осуществления белок слияния фактически состоит из пластидного транзитного пептида и инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию, подлежащего нацеливанию. В другом варианте осуществления белок слияния состоит из пластидного транзитного пептида и полипептида, подлежащего нацеливанию. В таких вариантах осуществления пластидный транзитный пептид, предпочтительно, находится на N-конце белка слияния. Однако дополнительные аминокислотные остатки могут находиться на N-конце относительно пластидного транзитного пептида при условии, что белок слияния по меньшей мере частично нацеливается на пластиду. В определенном варианте осуществления пластидный транзитный пептид находится на N-терминальной половине, N-терминальной трети или N-терминальной четверти белка слияния. Как правило, большая часть или весь пластидный транзитный пептид вырезается из белка слияния после вставки в пластиду. Положение расщепления может слегка варьировать между видами растений, на различных стадиях развития растения, в результате специфических внутриклеточных условий или конкретной комбинации применяемого транзитного пептида/партнера слияния. В одном варианте осуществления сайт расщепления пластидного транзитного пептида является гомогенным, так что сайт расщепления является идентичным в популяции белков слияния. В другом варианте осуществления сайт расщепления пластидного транзитного пептида не является гомогенным, так что сайт расщепления варьирует по 1-10 аминокислотам в популяции белков слияния. Пластидный транзитный пептид можно рекомбинантно сливать со вторым белком одним из нескольких путей. Например, сайт распознавания рестрикционной эндонуклеазы можно вводить в нуклеотидную последовательность транзитного пептида в положении, соответствующем его C-терминальному концу, и такой же или совместимый сайт можно вводить способами генной инженерии в нуклеотидную последовательность белка, подлежащего нацеливанию, по его N-терминальному концу. При конструировании этих сайтов нужно позаботиться о том, чтобы быть уверенными в том, что кодирующие последовательности транзитного пептида и второго белка содержатся "в рамке" для обеспечения синтеза требуемого белка слияния. В некоторых случаях предпочтительным может быть удаление инициаторного метионинового кодона второго белка при введении нового сайта рестрикции. Введение сайтов распознавания рестрикционной эндонуклеазы в обе исходные молекулы и их последующее соединение посредством методик с использованием рекомбинантной ДНК может приводить к добавлению одной или нескольких дополнительных аминокислот между транзитным пептидом и вторым белком. Как правило, это не влияет на нацеливающую активность, поскольку сайт расщепления транзитного пептида остается доступным и функционирование второго белка не изменится при добавлении этих дополнительных аминокислот по его N-концу. В качестве альтернативы, специалист в данной области может создать точный сайт расщепления между транзитным пептидом и вторым пептидом (с его инициирующим метионином или без него) с применением синтеза генов (Stemmer, et al., (1995) Gene 164:49-53) или аналогичных способов. В дополнение, слияние транзитного пептида может намеренно включать аминокислоты ниже сайта расщепления. Аминокислоты на N-конце зрелого белка могут воздействовать на способность транзитного пептида нацеливать белки в пластиды и/или эффективность расщепления после импорта белков. Это может зависеть от белка, подлежащего нацеливанию. См., например, Comai, et al., (1988) J. Biol. Chem. 263(29):15104-9.
В некоторых вариантах осуществления представлены белки слияния, содержащие инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию и инсектицидный полипептид, присоединенный аминокислотным линкером.
В некоторых вариантах осуществления предусматриваются белки слияния, представленные формулой, выбранной из группы, состоящей из:
R1-L-R2, R2-L- R1, R1- R2 или R2- R1,
где R1 представляет собой инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию. Полипептид R1 слит либо непосредственно, либо через линкерный (L) сегмент с полипептидом R2. Термин "непосредственно" обозначает слияния, в которых полипептиды соединены без пептидного линкера. Таким образом, "L" представляет собой химическую связь или полипептидный сегмент, с которым оба R1 и R2 слиты в рамке, при этом наиболее часто L представляет собой линейный пептид, с которым R1 и R2 связаны посредством амидных связей, связывающих карбокси-конец R1 с амино-концом L и карбокси-конец L с амино-концом R2. Под "слиты в рамке" подразумевают, что между рамками считывания R1 и R2 отсутствует сайт терминации трансляции или разрыв. Линкерная группа (L) представляет собой обычно полипептид, составляющий от 1 до 500 аминокислот в длину. Линкеры, соединяющие две молекулы, предпочтительно конструируют так, (1) чтобы они давали возможность двум молекулам сворачиваться и действовать независимо друг от друга, (2) чтобы они не имели склонности к развитию упорядоченной вторичной структуры, которая может вступать в конфликт с функциональными доменами двух белков, (3) чтобы они имели минимальную гидрофобную или зарядную характеристику, которая может вступать в конфликт с функциональными доменами белка, и (4) чтобы они обеспечивали стерическое разделение R1 и R2, так что R1 и R2 могли одновременно взаимодействовать со своими соответствующими рецепторами на одной клетке. Как правило, поверхностные аминокислоты в гибких участках белка включают Gly, Asn и Ser. По сути, любая перестановка аминокислотных последовательностей, содержащих Gly, Asn и Ser, как ожидается, будет удовлетворять вышеуказанным критериям для линкерной последовательности. Другие нейтральные аминокислоты, такие как Thr и Ala, также можно применять в линкерной последовательности. Дополнительные аминокислоты также можно включать в линкеры, поскольку добавление уникальных сайтов рестрикции в линкерную последовательность облегчает конструирование слияний.
В некоторых вариантах осуществления линкеры содержат последовательности, выбранные из группы формул: (Gly3Ser)n, (Gly4Ser)n, (Gly5Ser)n, (GlynSer)n или (AlaGlySer)n, где n представляет собой целое число. Одним примером очень гибкого линкера является спейсерный участок, богатый (GlySer), присутствующий в белке pIII нитевидных бактериофагов, например бактериофагов M13 или fd (Schaller, et al., 1975). Этот участок обеспечивает длинный гибкий спейсерный участок между двумя доменами поверхностного белка pIII. Также включены линкеры, в состав которых входит последовательность распознавания эндопептидазы. Такой сайт расщепления может быть очень важным для отделения отдельных компонентов слияния с целью определения того, являются ли они правильным образом свернутыми и активными in vitro. Примеры различных эндопептидаз включают без ограничения плазмин, энтерокиназу, калликреин, урокиназу, тканевой активатор плазминогена, клострипаин, химозин, коллагеназу, протеазу яда гадюки Рассела, фермент расщепления постпролина, протеазу V8, тромбин и фактор Xa. В некоторых вариантах осуществления линкер содержит аминокислоты EEKKN (SEQ ID NO: 215) из мультигенного экспрессионного "проводника" (MGEV), который расщепляется протеазами вакуолей, как раскрыто в публикации заявки на выдачу патента США № 2007/0277263. В других вариантах осуществления пептидные линкерные сегменты из шарнирного участка тяжелой цепи иммуноглобулинов IgG, IgA, IgM, IgD или IgE обеспечивают угловое взаимодействие между прикрепленными полипептидами. Особенно применимыми являются такие шарнирные участки, в которых остатки цистеина замещены на остатки серина. Линкеры по настоящему раскрытию включают последовательности, полученные из шарнирного участка IgG гамма 2b мыши, в котором остатки цистеина были заменены на остатки серина. Белки слияния не ограничиваются формой, размером или количеством используемых линкерных последовательностей, и единственным требованием для линкера является то, что функционально он отрицательно не затрагивает фолдинг и функционирование отдельных молекул слияния.
В другом аспекте предусматриваются химерные инсектицидные полипептиды, которые создают путем соединения двух или более частей генов инсектицидных полипептидов по настоящему раскрытию, изначально кодирующих отдельные инсектицидные белки, с созданием химерного гена. Трансляция химерного гена приводит к единому химерному инсектицидному полипептиду с участками, мотивами или доменами, полученными из каждого из исходных полипептидов.
Понятно, что последовательности ДНК можно изменять различными способами, и что эти изменения могут приводить к последовательностям ДНК, кодирующим белки с аминокислотными последовательностями, отличными от тех, которые кодируют пестицидный белок дикого типа (или нативный). В некоторых вариантах осуществления последовательность инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию можно изменять различными путями, в том числе с помощью аминокислотных замен, делеций, усечений и вставок одной или нескольких аминокислот, в том числе до 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45 или более аминокислотных замен, делеций и/или вставок или их комбинаций по сравнению с любой последовательностью под SEQ ID NO: 1 - SEQ ID NO: 107, и SEQ ID NO: 232 - SEQ ID NO: 245. В некоторых вариантах осуществления инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию предусматривает делецию 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 или более аминокислот с N-конца и/или C-конца инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию.
Способы осуществления таких манипуляций, как правило, известны в уровне техники. Например, варианты инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию можно получить с помощью мутаций в ДНК. Это также можно осуществлять с помощью одной из нескольких форм мутагенеза и/или путем направленной эволюции. В некоторых аспектах изменения, закодированные в аминокислотной последовательности, не будут существенно влиять на функцию белка. Такие варианты будут обладать требуемой пестицидной активностью. Однако понятно, что способность инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию обеспечивать пестицидную активность можно повышать путем применения таких методик в композициях по настоящему раскрытию.
Например, можно делать консервативные аминокислотные замены по одному или нескольким прогнозируемым несущественным аминокислотным остаткам. ʺНесущественныйʺ аминокислотный остаток представляет собой остаток, который можно изменять по сравнению с последовательностью дикого типа инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию без изменения биологической активности. "Консервативная аминокислотная замена" представляет собой замену, при которой аминокислотный остаток замещен на аминокислотный остаток, имеющий аналогичную боковую цепь. Семейства аминокислотных остатков, имеющие аналогичные боковые цепи, были определены в уровне техники. Такие семейства включают: аминокислоты с основными боковыми цепями (например, лизин, аргинин, гистидин); кислотными боковыми цепями (например, аспарагиновую кислоту, глутаминовую кислоту); полярными отрицательно заряженными остатками и их амидами (например, аспарагиновую кислоту, аспарагин, глутаминовую кислоту, глутамин); незаряженными полярными боковыми цепями (например, глицин, аспарагин, глутамин, серин, треонин, тирозин, цистеин); небольшими алифатическими неполярными или слабополярными остатками (например, аланин, серин, треонин, пролин, глицин); неполярными боковыми цепями (например, аланин, валин, лейцин, изолейцин, пролин, фенилаланин, метионин, триптофан); крупными алифатическими неполярными остатками (например, метионин, лейцин, изолейцин, валин, цистеин); бета-разветвленными боковыми цепями (например, треонин, валин, изолейцин); ароматическими боковыми цепями (например, тирозин, фенилаланин, триптофан, гистидин); крупными ароматическими боковыми цепями (например, тирозин, фенилаланин, триптофан).
Аминокислотные замены можно проводить в неконсервативных участках, которые сохраняют функцию. В целом, такие замены не следует проводить для консервативных аминокислотных остатков или для аминокислотных остатков, находящихся в консервативном мотиве, где такие остатки являются существенными для активности белка. Примеры остатков, которые являются консервативными и которые могут быть существенными для активности белка, включают, например, остатки, которые идентичны у всех белков, содержащихся в выравнивании аналогичных или родственных токсинов с последовательностями согласно вариантам осуществления (например, остатки, которые идентичны при выравнивании гомологов). Примеры остатков, которые являются консервативными, но которые могут обеспечивать консервативные аминокислотные замены и все еще сохранять активность, включают, например, остатки, которые характеризуются только консервативными заменами у всех белков, содержащихся в выравнивании аналогичных или родственных токсинов с последовательностями согласно вариантам осуществления (например, остатки, которые характеризуются только консервативными заменами у всех белков, содержащихся в выравнивании гомологов). Однако специалисту в данной области будет понятно, что функциональные варианты могут иметь незначительные консервативные или неконсервативные изменения по консервативным остаткам. Указания в отношении подходящих аминокислотных замен, которые не влияют на биологическую активность белка, представляющего интерес, можно найти в модели Dayhoff, et al., (1978) Atlas of Protein Sequence and Structure (Natl. Biomed. Res. Found., Washington, D.C.), включенном в данный документ с помощью ссылки.
При осуществлении таких изменений можно учитывать индекс гидропатичности аминокислот. Важность индекса гидропатичности аминокислот для обеспечения согласованной биологической функции белка, в целом, понятна в уровне техники (Kyte and Doolittle, (1982) J Mol Biol. 157(1):105-32). Признают, что относительная гидропатичность аминокислоты вносит вклад во вторичную структуру полученного в результате белка, что в свою очередь определяет взаимодействие белка с другими молекулами, например, ферментами, субстратами, рецепторами, ДНК, антителами, антигенами и т. п.
В уровне техники известно, что определенные аминокислоты можно замещать другими аминокислотами, имеющими аналогичный индекс или балл гидропатичности, и в результате это все еще получать белок с аналогичной биологической активностью, т. е. по-прежнему получают эквивалентный белок с биологической функцией. Каждой аминокислоте был присвоен индекс гидропатичности на основании ее гидрофобности и зарядных характеристик (Kyte and Doolittle, ibid). Они являются следующими: изолейцин (+4,5); валин (+4,2); лейцин (+3,8); фенилаланин (+2,8); цистеин/цистин (+2,5); метионин (+1,9); аланин (+1,8); глицин (-0,4); треонин (-0,7); серин (-0,8); триптофан (-0,9); тирозин (-1,3); пролин (-1,6); гистидин (-3,2); глутамат (-3,5); глутамин (-3,5); аспартат (-3,5); аспарагин (-3,5); лизин (-3,9) и аргинин (-4,5). При осуществлении таких изменений предпочтительной является замена аминокислот, индексы гидропатичности которых находятся в пределах до +2, особенно предпочтительной тех с индексами в пределах до +1 и даже более предпочтительной тех с индексами в пределах до +0,5.
В уровне техники также понятно, что замену подобных аминокислот можно эффективно проводить на основании гидрофильности. В патенте США № 4554101 заявляется, что наибольшая локальная средняя гидрофильность белка, определяемая гидрофильностью смежных аминокислот, коррелирует с биологическим свойством белка.
Как подробно описано в патенте США № 4554101, аминокислотным остаткам были присвоены следующие значения гидрофильности: аргинин (+3,0); лизин (+3,0); аспартат (+3,0.+0,1); глутамат (+3,0.+0,1); серин (+0,3); аспарагин (+0,2); глутамин (+0,2); глицин (0); треонин (-0,4); пролин (-0,5.+0,1); аланин (-0,5); гистидин (-0,5); цистеин (-1,0); метионин (-1,3); валин (-1,5); лейцин (-1,8); изолейцин (-1,8); тирозин (-2,3); фенилаланин (-2,5); триптофан (-3,4).
В качестве альтернативы, изменения можно совершать в белковой последовательности многих белков на амино- или карбокси-конце без существенного влияния на активность. Они могут включать вставки, делеции или изменения, введенные с помощью современных молекулярных способов, таких как ПЦР, в том числе амплификации посредством ПЦР, которые изменяют или расширяют последовательность, кодирующую белок, за счет включения последовательностей, кодирующих аминокислоты, в олигонуклеотиды, используемые при амплификации посредством ПЦР. В качестве альтернативы, добавленные белковые последовательности могут включать последовательности, кодирующие весь белок, например такие, которые обычно применяют в области техники для получения слияний белков. Такие белки слияния часто применяют для (1) усиления экспрессии белка, представляющего интерес, (2) введения связывающего домена, ферментативной активности или эпитопа для облегчения либо очистки белка, выявления белка либо других экспериментальных применений, известных в уровне техники, (3) нацеливания секреции или трансляции белка во внутриклеточную органеллу, такую как периплазматическое пространство грамотрицательных бактерий, митохондрия или хлоропласты растений или эндоплазматический ретикулум эукариотических клеток, причем последнее зачастую приводит к гликозилированию белка.
Вариантные нуклеотидные и аминокислотные последовательности по настоящему раскрытию также охватывают последовательности, полученные в результате процедур, связанных с мутациями и рекомбинациями, такими как ДНК-шаффлинг. С помощью такой процедуры один или несколько различных кодирующих участков инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию можно применять для создания нового инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию, обладающего требуемыми свойствами. Таким образом, библиотеки рекомбинантных полинуклеотидов создают из популяции родственных по последовательностям полинуклеотидов, содержащих участки последовательностей, которые характеризуются значительной идентичностью последовательности и могут подвергаться гомологичной рекомбинации in vitro или in vivo. Например, с использованием данного подхода мотивы с кодирующими домен последовательностями, представляющий интерес, можно подвергать шаффлингу между пестицидным геном и другими известными пестицидными генами с получением нового гена, кодирующего белок с улучшенным свойством, представляющим интерес, таким как повышенная инсектицидная активность. Стратегии для такого ДНК-шаффлинга известны в уровне техники. См., например, Stemmer, (1994) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91:10747-10751; Stemmer, (1994) Nature 370:389-391; Crameri, et al., (1997) Nature Biotech. 15:436-438; Moore, et al., (1997) J. Mol. Biol. 272:336-347; Zhang, et al., (1997) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94:4504-4509; Crameri, et al., (1998) Nature 391:288-291; и патенты США №№ 5605793 и 5837458.
Замена доменов или шаффлинг представляет собой другой механизм получения измененных инсектицидных полипептидов по настоящему раскрытию. Можно проводить замену доменов между инсектицидными полипептидами по настоящему раскрытию, что дает гибридные или химерные токсины с повышенной пестицидной активностью или расширенным спектром мишеней. Способы получения рекомбинантных белков и тестирования их в отношении пестицидной активности хорошо известны в уровне техники (см., например, Naimov, et al., (2001) Appl. Environ. Microbiol. 67:5328-5330; de Maagd, et al., (1996) Appl. Environ. Microbiol. 62:1537-1543; Ge, et al., (1991) J. Biol. Chem. 266:17954-17958; Schnepf, et al., (1990) J. Biol. Chem. 265:20923-20930; Rang, et al., 91999) Appl. Environ. Microbiol. 65:2918-2925).
Выравнивание гомологов инсектицидного полипептида (фигуры 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 и 8) позволило идентифицировать остатки, которые являются высококонсервативными среди гомологов в этих семействах.
Композиции
Также предусматриваются композиции, содержащие инсектицидные полипептиды по настоящему раскрытию. Предполагаются композиции, содержащие полипептид PIP-45-1 по настоящему раскрытию и полипептид PIP-45-2 по настоящему раскрытию. В некоторых вариантах осуществления композиции содержат инсектицидно эффективную концентрацию полипептида PIP-45-1 по настоящему раскрытию и полипептида PIP-45-2 по настоящему раскрытию. Предполагаются композиции, содержащие полипептид PIP-64-1 по настоящему раскрытию и полипептид PIP-64-2 по настоящему раскрытию. В некоторых вариантах осуществления композиции содержат инсектицидно эффективную концентрацию полипептида PIP-64-1 по настоящему раскрытию и полипептида PIP-64-2 по настоящему раскрытию. Предполагаются композиции, содержащие полипептид PIP-74-1 по настоящему раскрытию и полипептид PIP-74-2 по настоящему раскрытию. В некоторых вариантах осуществления композиции содержат инсектицидно эффективную концентрацию полипептида PIP-74-1 по настоящему раскрытию и полипептида PIP-74-2 по настоящему раскрытию. Предполагаются композиции, содержащие полипептид PIP-75 по настоящему раскрытию. В некоторых вариантах осуществления композиции содержат инсектицидно эффективную концентрацию полипептида PIP-75 по настоящему раскрытию. Предполагаются композиции, содержащие полипептид PIP-77 по настоящему раскрытию. В некоторых вариантах осуществления композиции содержат инсектицидно эффективную концентрацию полипептида PIP-77 по настоящему раскрытию. В некоторых вариантах осуществления композиция дополнительно содержит приемлемый с точки зрения сельского хозяйства носитель.
Антитела
Также охвачены антитела к инсектицидному полипептиду по настоящему раскрытию согласно вариантам осуществления или к его вариантам или фрагментам. Антитела по настоящему раскрытию включают поликлональные и моноклональные антитела, а также их фрагменты, которые сохраняют способность связываться с инсектицидными белками, обнаруженными в кишечнике насекомого. Полагают, что антитело, моноклональное антитело или его фрагмент способны связывать молекулу, если они способны специфично реагировать с молекулой, связывая, тем самым, молекулу с антителом, моноклональным антителом или его фрагментом. Как подразумевается, термин "антитело" (Ab) или "моноклональное антитело" (Mab) включает интактные молекулы, а также их фрагменты, или связывающие участки, или домены (такие как, например, фрагменты Fab и F(ab)2), которые способны связывать гаптен. Как правило, такие фрагменты получают с помощью протеолитического расщепления, например с помощью папаина или пепсина. В качестве альтернативы, гаптен-связывающие фрагменты можно получать посредством применения технологии рекомбинантной ДНК или с помощью синтетической химии. Как правило, способы получения антител по настоящему раскрытию известны в уровне техники. Например, см. Antibodies, A Laboratory Manual, Ed Harlow and David Lane (eds.) Cold Spring Harbor Laboratory, N.Y. (1988), а также приводимые в нем литературные источники. Стандартные справочные работы, излагающие общие принципы иммунологии, включают: Klein, J. Immunology: The Science of Cell-Noncell Discrimination, John Wiley & Sons, N.Y. (1982); Dennett, et al., Monoclonal Antibodies, Hybridoma: A New Dimension in Biological Analyses, Plenum Press, N.Y. (1980) и Campbell, "Monoclonal Antibody Technology," в Laboratory Techniques in Biochemistry and Molecular Biology, Vol. 13, Burdon, et al., (eds.), Elsevier, Amsterdam (1984). См. также патенты США №№ 4196265; 4609893; 4713325; 4714681; 4716111; 4716117 и 4720459. Антитела к инсектицидным полипептидам по настоящему раскрытию или их антиген-связывающие части можно получать с помощью ряда методик, в том числе традиционных методик получения моноклональных антител, например стандартной методики гибридизации соматических клеток согласно Kohler and Milstein, (1975) Nature 256:495. Также можно использовать другие методики получения моноклонального антитела, такие как вирусная или онкогенная трансформация B-лимфоцитов. Животная система для получения гибридом представляет собой мышиную систему. В уровне техники известны протоколы иммунизации и методики для выделения спленоцитов иммунизированных животных для слияния. Также известны партнеры слияния (например, клетки миеломы мыши) и процедуры слияния. Антитело и моноклональные антитела по настоящему раскрытию в качестве антигенов можно получить путем использования инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию.
Предусматривается набор для выявления присутствия инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию или выявления присутствия нуклеотидной последовательности, кодирующей инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию в образце. В одном варианте осуществления в наборе имеются реагенты на основе антитела для выявления присутствия в образце ткани инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию. В другом варианте осуществления в наборе имеются меченые зонды из нуклеиновой кислоты, применяемые для выявления присутствия одного или нескольких полинуклеотидов, кодирующих инсектицидный(-ые) полипептид(-ы) по настоящему раскрытию. В наборе также имеются соответствующие реагенты и контрольные образцы для проведения способа выявления, а также инструкции для применения набора.
Идентификация и выделение рецепторов
Также охвачены рецепторы к инсектицидному полипептиду согласно вариантам осуществления или к его вариантам или фрагментам. Способы идентификации рецепторов, хорошо известные в уровне техники (см. Hofmann, et. al., (1988) Eur. J. Biochem. 173:85-91; Gill, et al., (1995) J. Biol. Chem. 27277-27282), можно использовать для идентификации и выделения рецептора, который распознает инсектицидные полипептиды по настоящему раскрытию с использованием мембранных пузырьков из щеточной каемки восприимчивых насекомых. В дополнение к способу радиоактивного мечения, приведенному в упомянутом литературном источнике, инсектицидный полипептид можно метить с помощью флуоресцентного красителя и других общепринятых меток, таких как стрептавидин. Мембранные пузырьки из щеточной каемки (BBMV) восприимчивых насекомых, таких как соевая совка и щитники, можно получать в соответствии с протоколами, приведенными в ссылочных документах, и разделять на геле SDS-PAGE, а также переносить на подходящую мембрану. Меченые инсектицидные полипептиды по настоящему раскрытию можно инкубировать с мембраной с перенесенными BBMV и при этом меченые инсектицидные полипептиды по настоящему раскрытию можно идентифицировать с помощью меченых репортеров. Идентификацию белковой(-ых) полоски(-сок), которая(-ые) взаимодействует(-ют) с инсектицидными полипептидами по настоящему раскрытию, можно проводить с помощью секвенирования N-терминальных аминокислотных остатков в газовой фазе или способа идентификации белков на основе масс-спектрометрии (Patterson, (1998) 10.22, 1-24, Current Protocol in Molecular Biology published by John Wiley & Son Inc). После идентификации белка соответствующий ген можно клонировать из библиотеки геномной ДНК или кДНК восприимчивых насекомых и сродство связывания можно оценивать непосредственно с помощью инсектицидных полипептидов по настоящему раскрытию. Рецепторную функцию в отношении инсектицидной активности у инсектицидных полипептидов по настоящему раскрытию можно подтвердить путем осуществления с помощью типа RNAi способа нокаута гена (Rajagopal, et al., (2002) J. Biol. Chem. 277:46849-46851).
Нуклеотидные конструкции, кассеты и векторы экспрессии
Использование термина "нуклеотидные конструкции" в данном документе не предназначено ограничивать варианты осуществления нуклеотидными конструкциями, содержащими ДНК. Специалистам обычной квалификации в данной области будет понятно, что нуклеотидные конструкции, в частности полинуклеотиды и олигонуклеотиды, состоящие из рибонуклеотидов и комбинаций рибонуклеотидов и дезоксирибонуклеотидов, также можно использовать в способах, раскрытых в данном документе. Нуклеотидные конструкции, нуклеиновые кислоты и нуклеотидные последовательности согласно вариантам осуществления дополнительно охватывают все комплементарные формы таких конструкций, молекул и последовательностей. Кроме того, нуклеотидные конструкции, нуклеотидные молекулы и нуклеотидные последовательности согласно вариантам осуществления охватывают все нуклеотидные конструкции, молекулы и последовательности, которые можно использовать в способах согласно вариантам осуществления для трансформации растений, в том числе без ограничения состоящие из дезоксирибонуклеотидов, рибонуклеотидов и их комбинаций. Такие дезоксирибонуклеотиды и рибонуклеотиды имеют в составе как встречающиеся в природе молекулы, так и синтетические аналоги. Нуклеотидные конструкции, нуклеиновые кислоты и нуклеотидные последовательности согласно вариантам осуществления также охватывают все формы нуклеотидных конструкций, в том числе без ограничения одноцепочечные формы, двухцепочечные формы, шпильки, структуры "стебель-и-петля" и т. п.
Дополнительный вариант осуществления относится к трансформированному организму, такому как организм, выбранный из растительных клеток или клеток насекомых, бактерий, дрожжей, бакуловируса, простейших, нематод и водорослей. Трансформированный организм содержит молекулу ДНК согласно вариантам осуществления, кассету экспрессии, содержащую молекулу ДНК, или вектор, содержащий кассету экспрессии, которые могут быть стабильно встроенными в геном трансформированного организма.
Последовательности согласно вариантам осуществления предусматриваются в составе ДНК-конструкций для экспрессии в организме, представляющем интерес. Конструкции будут включать 5' и 3' регуляторные последовательности, функционально связанные с последовательностью согласно вариантам осуществления. Термин "функционально связанный", используемый в данном документе, относится к функциональной связи между промотором и второй последовательностью, где последовательность промотора инициирует и опосредует транскрипцию последовательности ДНК, соответствующей второй последовательности. Как правило, функционально связанный означает, что связанные последовательности нуклеиновой кислоты являются смежными, и при необходимости соединяют два кодирующих белок участка в одной рамке считывания. Конструкция может дополнительно содержать по меньшей мере один дополнительный ген, подлежащий введению в организм путем котрансформации. В качестве альтернативы, дополнительный(-ые) ген(-ы) может(-гут) предусматриваться в нескольких ДНК-конструкциях.
Такая ДНК-конструкция снабжена несколькими сайтами рестрикции для вставки последовательности гена инсектицидного полипептида, транскрипция которой будет регулироваться регуляторными участками. ДНК-конструкция может дополнительно содержать селектируемые маркерные гены.
Как правило, в направлении транскрипции от 5' к 3' концу ДНК-конструкция будет включать: участок инициации транскрипции и трансляции (т. е. промотор), последовательность ДНК согласно вариантам осуществления и участок терминации транскрипции и трансляции (т. е. участок терминации), функционирующие в организме, служащем хозяином. Участок инициации транскрипции (т. е. промотор) может быть нативным, аналогичным, чужеродным или гетерологичным относительно организма-хозяина и/или последовательности согласно вариантам осуществления. Кроме того, промотор может представлять собой природную последовательность или, в качестве альтернативы, синтетическую последовательность. Термин "чужеродный", используемый в данном документе, указывает на то, что промотор не найден в нативном организме, в который введен промотор. Если промотор является "чужеродным" или "гетерологичным" относительно последовательности согласно вариантам осуществления, то предполагается, что промотор не является нативным или встречающимся в природе промотором для функционально связанной последовательности согласно вариантам осуществления. Используемый в данном документе химерный ген содержит кодирующую последовательность, функционально связанную с участком инициации транскрипции, который является гетерологичным для кодирующей последовательности. Если промотор представляет собой нативную или природную последовательностью, то экспрессия функционально связанной последовательности изменена по сравнению с экспрессией дикого типа, что приводит к изменению фенотипа.
В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция может также включать последовательность транскрипционного энхансера. Термин "энхансер", используемый в данном документе, относится к последовательности ДНК, которая может стимулировать активность промотора и которая может представлять собой характерный элемент промотора или гетерологичный элемент, вставленный для повышения уровня активности или тканевой специфичности промотора. В уровне техники известны различные энхансеры, в том числе, например, интроны со свойствами усиления экспрессии гена в растениях (публикация заявки на выдачу патента США № 2009/0144863, убиквитиновый интрон (т. е. убиквитиновый интрон 1 маиса (см., например, последовательность из NCBI S94464; Christensen and Quail (1996) Transgenic Res. 5:213-218; Christensen et al. (1992) Plant Molecular Biology 18:675-689)), энхансер омега и энхансер омега штрих (Gallie, et al., (1989) Molecular Biology of RNA ed. Cech (Liss, New York) 237-256 и Gallie, et al., (1987) Gene 60:217-25), энхансер CaMV 35S (см., например, Benfey, et al., (1990) EMBO J. 9:1685-96), интрон маиса AdhI (Kyozuka et al. (1991) Mol. Gen. Genet. 228:40-48; Kyozuka et al. (1990) Maydica 35:353-357), а также можно применять энхансеры из патента США № 7803992, каждый из которых включен с помощью ссылки. Вышеприведенный перечень транскрипционных энхансеров не предназначен для ограничения. В вариантах осуществления можно применять любой подходящий транскрипционный энхансер.
Участок терминации может быть нативным относительно участка инициации транскрипции, может быть нативным относительно функционально связанной последовательности ДНК, представляющей интерес, может быть нативным относительно растения-хозяина или может быть получен из другого источника (т. e. чужеродный или гетерологичный для промотора, последовательности, представляющей интерес, растения-хозяина или какой-либо их комбинации).
Подходящие участки терминации доступны из Ti-плазмиды A. tumefaciens, такие как участки терминации генов октопинсинтазы и нопалинсинтазы. См. также Guerineau et al. (1991) Mol. Gen. Genet. 262:141-144; Proudfoot (1991) Cell 64:671-674; Sanfacon et al. (1991) Genes Dev. 5:141-149; Mogen, et al., (1990) Plant Cell 2:1261-1272; Munroe, et al., (1990) Gene 91:151-158; Ballas, et al., (1989) Nucleic Acids Res. 17:7891-7903 и Joshi, et al., (1987) Nucleic Acid Res. 15:9627-9639.
При необходимости, нуклеиновую кислоту можно оптимизировать для усиления экспрессии в организме-хозяине. Таким образом, если организм-хозяин является растением, то для усиления экспрессии можно синтезировать синтетические нуклеиновые кислоты с применением кодонов, предпочтительных для растений. См. например Campbell and Gowri, (1990) Plant Physiol. 92:1-11, где обсуждается применение кодонов, предпочтительных для хозяина. Например, хотя последовательности нуклеиновой кислоты согласно вариантам осуществления могут экспрессироваться как у видов однодольных, так и видов двудольных растений, последовательности можно модифицировать с учетом специфичных предпочтений кодонов и предпочтений по содержанию GC у однодольных или двудольных, если было показано, что предпочтения отличаются (Murray et al. (1989) Nucleic Acids Res. 17:477-498). Таким образом, кодон, предпочтительный для маиса, для конкретной аминокислоты можно получить из известных последовательностей генов маиса. Данные о частоте использования кодонов в маисе для 28 генов из растений маиса приведены в таблице 4 в Murray, et al., выше. В уровне техники доступны способы синтеза генов, предпочтительных для растений. См., например, патенты США №№ 5380831 и 5436391, а также Murray, et al., (1989) Nucleic Acids Res. 17:477-498 и Liu H et al. Mol Bio Rep 37:677-684, 2010, включенные в данный документ с помощью ссылки. Таблицу использования кодонов Zea maize также можно найти на сайте по адресу kazusa.or.jp/codon/cgi-bin/showcodon.cgi?species=4577, доступ к которому можно получить с использованием префикса www. В таблице 2 показан анализ оптимальных кодонов маиса (адаптировано из Liu H et al. Mol Bio Rep 37:677-684, 2010).
Таблица 2
Аминокислота Кодон Высокая встречаемость RSCU Низкая встречаемость RSCU Аминокислота Кодон Высокая встречаемость RSCU Низкая встречаемость RSCU
Phe UUU 115 0.04 2,301 1.22 Ala GCU 629 0.17 3,063 1.59
UUC* 5,269 1.96 1,485 0.78 GCC* 8,057 2.16 1,136 0.59
Ser UCU 176 0.13 2,498 1.48 GCA 369 0.1 2,872 1.49
UCC* 3,489 2.48 1,074 0.63 GCG* 5,835 1.57 630 0.33
UCA 104 0.07 2,610 1.54 Tyr UAU 71 0.04 1,632 1.22
UCG* 1,975 1.4 670 0.4 UAC* 3,841 1.96 1,041 0.78
AGU 77 0.05 1,788 1.06 His CAU 131 0.09 1,902 1.36
AGC* 2,617 1.86 1,514 0.89 CAC* 2,800 1.91 897 0.64
Leu UUA 10 0.01 1,326 0.79 Cys UGU 52 0.04 1,233 1.12
UUG 174 0.09 2,306 1.37 UGC* 2,291 1.96 963 0.88
CUU 223 0.11 2,396 1.43 Gln CAA 99 0.05 2,312 1.04
CUC* 5,979 3.08 1,109 0.66 CAG* 3,557 1.95 2,130 0.96
CUA 106 0.05 1,280 0.76 Arg CGU 153 0.12 751 0.74
CUG* 5,161 2.66 1,646 0.98 CGC* 4,278 3.25 466 0.46
Pro CCU 427 0.22 1,900 1.47 CGA 92 0.07 659 0.65
CCC* 3,035 1.59 601 0.47 CGG* 1,793 1.36 631 0.62
CCA 311 0.16 2,140 1.66 AGA 83 0.06 1,948 1.91
CCG* 3,846 2.02 513 0.4 AGG* 1,493 1.14 1,652 1.62
Ile AUU 138 0.09 2,388 1.3 Asn AAU 131 0.07 3,074 1.26
AUC* 4,380 2.85 1,353 0.74 AAC* 3,814 1.93 1,807 0.74
AUA 88 0.06 1,756 0.96 Lys AAA 130 0.05 3,215 0.98
Thr ACU 136 0.09 1,990 1.43 AAG* 5,047 1.95 3,340 1.02
ACC* 3,398 2.25 991 0.71 Asp GAU 312 0.09 4,217 1.38
ACA 133 0.09 2,075 1.5 GAC* 6,729 1.91 1,891 0.62
ACG* 2,378 1.57 495 0.36 Gly GGU 363 0.13 2,301 1.35
Val GUU 182 0.07 2,595 1.51 GGC* 7,842 2.91 1,282 0.75
GUC* 4,584 1.82 1,096 0.64 GGA 397 0.15 2,044 1.19
GUA 74 0.03 1,325 0.77 GGG* 2,186 0.81 1,215 0.71
GUG* 5,257 2.08 1,842 1.07 Glu GAA 193 0.06 4,080 1.1
GAG* 6,010 1.94 3,307 0.9
Использование кодонов сравнивали с применением критерия сопряженности хи-квадрат для идентификации оптимальных кодонов. Кодоны, которые встречаются статистически более часто (P\0,01), обозначены звездочкой.
Таблица использования кодонов Glycine max показана в виде таблицы 3, и ее можно найти также на сайте по адресу kazusa.or.jp/codon/cgi-bin/showcodon.cgi?species=3847&aa=1&style=N, доступ к которому можно получить с использованием префикса www.
Таблица 3
TTT F 21.2 (10493) TCT S 18.4 (9107)
TTC F 21.2 (10487) TCC S 12.9 (6409)
TTA L 9.2 (4545) TCA S 15.6 (7712)
TTG L 22.9 (11340) TCG S 4.8 (2397)
CTT L 23.9 (11829) CCT P 18.9 (9358)
CTC L 17.1 (8479) CCC P 10.1 (5010)
CTA L 8.5 (4216) CCA P 19.1 (9461)
CTG L 12.7 (6304) CCG P 4.7 (2312)
ATT I 25.1 (12411) ACT T 17.1 (8490)
ATC I 16.3 (8071) ACC T 14.3 (7100)
ATA I 12.9 (6386) ACA T 14.9 (7391)
ATG M 22.7 (11218) ACG T 4.3 (2147)
GTT V 26.1 (12911) GCT A 26.7 (13201)
GTC V 11.9 (5894) GCC A 16.2 (8026)
GTA V 7.7 (3803) GCA A 21.4 (10577)
GTG V 21.4 (10610) GCG A 6.3 (3123)
TAT Y 15.7 (7779) TGT C 8.1 (3995)
TAC Y 14.9 (7367) TGC C 8.0 (3980)
TAA * 0.9 (463) TGA * 1.0 (480)
TAG * 0.5 (263) TGG W 13.0 (6412)
CAT H 14.0 (6930) CGT R 6.6 (3291)
CAC H 11.6 (5759) CGC R 6.2 (3093)
CAA Q 20.5 (10162) CGA R 4.1 (2018)
CAG Q 16.2 (8038) CGG R 3.1 (1510)
AAT N 22.4 (11088) AGT S 12.6 (6237)
AAC N 22.8 (11284) AGC S 11.3 (5594)
AAA K 26.9 (13334) AGA R 14.8 (7337)
AAG K 35.9 (17797) AGG R 13.3 (6574)
GAT D 32.4 (16040) GGT G 20.9 (10353)
GAC D 20.4 (10097) GGC G 13.4 (6650)
GAA E 33.2 (16438) GGA G 22.3 (11022)
GAG E 33.2 (16426) GGG G 13.0 (6431)
В некоторых вариантах осуществления рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию, имеет кодоны, оптимизированные для маиса.
Известны дополнительные модификации последовательности для усиления экспрессии гена у клеточного хозяина. Они включают устранение последовательностей, кодирующих ложные сигналы полиаденилирования, сигналы сайта сплайсинга экзонов и интронов, транспозон-подобные повторы и другие хорошо изученные последовательности, которые могут быть вредны для экспрессии гена. Содержание GC в последовательности можно скорректировать до уровней, средних для данного клеточного хозяина, рассчитываемых с учетом известных генов, экспрессируемых в клетке-хозяине. Термин "клетка-хозяин", используемый в данном документе, относится к клетке, которая содержит вектор и которая поддерживает репликацию и/или экспрессию предполагаемых векторов экспрессии. Клетки-хозяева могут быть прокариотическими клетками, такими как E. coli, или эукариотическими клетками, такими как клетки дрожжей, насекомых, амфибий или млекопитающих, или клетками однодольных или двудольных растений. Примером клетки-хозяина, относящейся к однодольному растению, является клетка-хозяин маиса. Если возможно, последовательность модифицируют для того, чтобы избежать образования прогнозируемых шпилечных вторичных структур mRNA.
Кассеты экспрессии могут дополнительно содержать 5'-лидерные последовательности. Такие лидерные последовательности могут способствовать усилению трансляции. Лидерные последовательности трансляции известны в уровне техники и предусматривают лидерные последовательности пикорнавирусов, например лидерную последовательность EMCV (5'-некодирующий участок вируса энцефаломиокардита) (Elroy-Stein, et al., (1989) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:6126-6130); лидерные последовательности потивирусов, например лидерную последовательность TEV (вируса гравировки табака) (Gallie, et al., (1995) Gene 165(2):233-238), лидерную последовательность MDMV (вируса карликовой мозаики кукурузы), последовательность белка, связывающего тяжелую цепь иммуноглобулина человека (BiP) (Macejak, et al., (1991) Nature 353:90-94); нетранслируемую лидерную последовательность из mRNA белка оболочки вируса мозаики люцерны (AMV RNA 4) (Jobling, et al., (1987) Nature 325:622-625); лидерную последовательность вируса табачной мозаики (TMV) (Gallie, et al., (1989) in Molecular Biology of RNA, ed. Cech (Liss, New York), pp. 237-256) и лидерную последовательность вируса хлорозной мозаики маиса (MCMV) (Lommel, et al., (1991) Virology 81:382-385). См. также Della Cioppa et al. (1987) Plant Physiology 84:965-968. Такие конструкции могут также содержать "сигнальную последовательность" или "лидерную последовательность" для облегчения сопряженного с трансляцией или посттрансляционного транспорта пептида в определенные внутриклеточные структуры, такие как хлоропласт (или другая пластида), эндоплазматический ретикулум или аппарат Гольджи.
"Сигнальная последовательность", используемая в данном документе, относится к последовательности, которая, как известно или как ожидается, приводит к сопряженному с трансляцией или посттрансляционному транспорту пептида через клеточную мембрану. У эукариот это обычно подразумевает секрецию в пузырьках аппарата Гольджи, при этом происходит гликолизирование до некоторой степени. Инсектицидные токсины бактерий зачастую синтезируются в виде протоксинов, которые активируются под действием протеолиза в кишечнике целевого вредителя (Chang, (1987) Methods Enzymol. 153:507-516). В некоторых вариантах осуществления сигнальная последовательность расположена в нативной последовательности или может быть получена из последовательности согласно вариантам осуществления. "Лидерная последовательность", используемая в данном документе, относится к любой последовательности, которая при трансляции приводит к аминокислотной последовательности, способной запускать сопряженный с трансляцией транспорт пептидной цепи во внутриклеточную органеллу. Таким образом, это предусматривает лидерные последовательности, нацеливающие транспорт и/или гликозилирование посредством перехода в эндоплазматический ретикулум, перехода в вакуоли, пластиды, в том числе хлоропласты, митохондрии и т. п. Кодируемые в ядре белки, нацеленные в компартмент полости тилакоида хлоропластов, имеют характерный двойной транзитный пептид, состоящий из сигнального пептида, нацеливающего на строму, и сигнального пептида, нацеливающего на полость. Информация для нацеливания на строму находится в ближайшей к амино-концу части транзитного пептида. Сигнальный пептид, нацеливающий на полость, находится в ближайшей к карбокси-концу части транзитного пептида и содержит всю информацию для нацеливания на полость. Последние исследования по протеомике хлоропластов высших растений добились успеха в идентификации многочисленных кодируемых в ядре белков полости (Kieselbach et al. FEBS LETT 480:271-276, 2000; Peltier et al. Plant Cell 12:319-341, 2000; Bricker et al. Biochim. Biophys Acta 1503:350-356, 2001), при этом их сигнальный пептид, нацеливающий на полость, можно потенциально применять в соответствии с настоящим раскрытием. О приблизительно 80 белках из Arabidopsis, а также гомологичных белках из шпината и гороха огородного, сообщается в Kieselbach et al., Photosynthesis Research, 78:249-264, 2003. В частности, в таблице 2 данной публикации, которая включена в настоящее описание с помощью ссылки, раскрыто 85 белков из полости хлоропласта, идентифицированных по их номеру доступа (см. также публикацию заявки на выдачу патента США 2009/09044298). В дополнение, опубликованная недавно предварительная версия генома риса (Goff et al, Science 296:92-100, 2002) является подходящим источником для информации о сигнальном пептиде, нацеливающим на полость, который можно применять в соответствии с настоящим раскрытием.
Подходящие транзитные пептиды хлоропластов (CTP), хорошо известные специалисту в данной области, включают также химерные CTP, содержащие без ограничения N-терминальный домен, центральный домен или C-терминальный домен из CTP из 1-дезокси-D-ксилоза-5-фосфатсинтазы Oryza sativa, супероксиддисмутазы Oryza sativa, синтазы растворимого крахмала Oryza sativa, NADP-зависимого фермента, действующего на яблочную кислоту, Oryza sativa, фосфо-2-дегидро-3-дезоксигептонатальдолазы 2 Oryza sativa, L-аскорбатпероксидазы 5 Oryza sativa, фосфоглюкан-вода-дикиназы Oryza sativa, ssRUBISCO Zea Mays, бета-глюкозидазы Zea Mays, малатдегидрогеназы Zea Mays, тиоредоксина M-типа Zea Mays (публикация заявки на выдачу патента США 2012/0304336). Транзитные пептиды хлоропластов из публикации заявки на выдачу патентов США US20130205440A1, US20130205441A1 и US20130210114A1.
Ген инсектицидного полипептида, подлежащего нацеливанию в хлоропласт, можно оптимизировать для экспрессии в хлоропласте с учетом отличий по использованию кодонов между растительным ядром и этой органеллой. Таким образом, нуклеиновые кислоты, представляющие интерес, можно синтезировать с применением кодонов, предпочтительных для хлоропласта. См., например, патент США № 5380831, включенный в данный документ с помощью ссылки.
При получении кассеты экспрессии с различными фрагментами ДНК можно проводить манипуляции так, чтобы получить последовательности ДНК в надлежащей ориентации и, при необходимости, в надлежащей рамке считывания. С данной целью для соединения фрагментов ДНК можно использовать адаптеры или линкеры или можно задействовать другие манипуляции для обеспечения подходящих сайтов рестрикции, удаления избыточной ДНК, удаления сайтов рестрикции и т. п. С данной целью можно задействовать мутагенез in vitro, репарацию с помощью праймеров, рестрикцию, гибридизацию, повторные замены, например транзиции и трансверсии.
При практическом осуществлении вариантов осуществления можно применять ряд промоторов. Промоторы можно выбирать, исходя из необходимого результата. Нуклеиновые кислоты можно комбинировать с конститутивными, предпочтительными для ткани, индуцируемыми или другими промоторами для экспрессии в организме-хозяине. Подходящие конститутивные промоторы для применения в растительной клетке-хозяине включают, например, основной промотор промотора Rsyn7 и других конститутивных промоторов, раскрытых в WO 1999/43838 и патенте США № 6072050; основной промотор 35S CaMV (Odell, et al., (1985) Nature 313:810-812); промотор актина риса (McElroy, et al., (1990) Plant Cell 2:163-171); убиквитиновый промотор (Christensen, et al., (1989) Plant Mol. Biol. 12:619-632 и Christensen, et al., (1992) Plant Mol. Biol. 18:675-689); pEMU (Last, et al., (1991) Theor. Appl. Genet. 81:581-588); MAS (Velten, et al., (1984) EMBO J. 3:2723-2730); промотор ALS (патент США № 5659026) и т. п. Другие конститутивные промоторы включают, например, раскрытые в патентах США №№ 5608149; 5608144; 5604121; 5569597; 5466785; 5399680; 5268463; 5608142 и 6177611. Подходящие конститутивные промоторы также включают промоторы, которые характеризуются значительной экспрессией почти во всех тканях, однако характеризуются низкой экспрессией в пыльце, в том числе без ограничения: промоторы вируса полосатости банана (Acuminata Yunnan) (BSV(AY)), раскрытые в патенте США US8338662; промоторы вируса полосатости банана (Acuminata Vietnam) (BSV(AV)), раскрытые в патенте США US8350121, и промоторы вируса полосатости банана (Mysore) (BSV(MYS)), раскрытые в патенте США US8395022.
В зависимости от требуемого результата, может быть полезно экспрессировать ген с помощью индуцируемого промотора. Особый интерес для регуляции экспрессии нуклеотидных последовательностей согласно вариантам осуществления у растений представляют собой индуцируемые ранением промоторы. Такие индуцируемые ранением промоторы могут реагировать на повреждение, вызванное питанием насекомого, и они включают промотор гена ингибитора протеиназы (pin II) картофеля (Ryan, (1990) Ann. Rev. Phytopath. 28:425-449; Duan, et al., (1996) Nature Biotechnology 14:494-498); wun1 и wun2, патент США № 5428148; win1 и win2 (Stanford, et al., (1989) Mol. Gen. Genet. 215:200-208); системин (McGurl, et al., (1992) Science 225:1570-1573); WIP1 (Rohmeier, et al., (1993) Plant Mol. Biol. 22:783-792; Eckelkamp, et al., (1993) FEBS Letters 323:73-76); ген MPI (Corderok, et al., (1994) Plant J. 6(2):141-150) и т. п., включенные в данный документ с помощью ссылки.
Кроме того, в способах и нуклеотидных конструкциях согласно вариантам осуществления можно использовать индуцируемые патогеном промоторы. Такие индуцируемые патогеном промоторы включают промоторы из белков, связанных с патогенезом (PR-белков), которые индуцируются после заражения патогеном; например PR-белков, SAR-белков, бета-1,3-глюканазы, хитиназы и т. д. См., например, Redolfi, et al., (1983) Neth. J. Plant Pathol. 89:245-254; Uknes, et al., (1992) Plant Cell 4: 645-656 и Van Loon, (1985) Plant Mol. Virol. 4:111-116. См. также WO 1999/43819, включенную в данный документ с помощью ссылки.
Представляют интерес промоторы, которые экспрессируются локально в месте заражения патогеном или рядом с ним. См., например, Marineau, et al., (1987) Plant Mol. Biol. 9:335-342; Matton, et al., (1989) Molecular Plant-Microbe Interactions 2:325-331; Somsisch, et al., (1986) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83:2427-2430; Somsisch, et al., (1988) Mol. Gen. Genet. 2:93-98 и Yang, (1996) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:14972-14977. См. также Chen, et al., (1996) Plant J. 10:955-966; Zhang, et al., (1994) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91:2507-2511; Warner, et al., (1993) Plant J. 3:191-201; Siebertz, et al., (1989) Plant Cell 1:961-968; патент США № 5750386 (индуцируемый нематодами); а также источники, приведенные в данных документах. Особый интерес представляет индуцируемый промотор для гена PRms маиса, экспрессия которого индуцируется патогеном Fusarium moniliforme (см, например, Cordero, et al., (1992) Physiol. Mol. Plant Path. 41:189-200).
Регулируемые химическими веществами промоторы можно использовать для модулирования экспрессии гена в растении посредством применения экзогенного химического регулятора. В зависимости от цели, промотор может представлять собой индуцируемый химическим веществом промотор, при этом применение химического вещества индуцирует экспрессию гена, или репрессируемый химическим веществом промотор, при этом применение химического вещества подавляет экспрессию гена. Индуцируемые химическими веществами промоторы известны в уровне техники и включают без ограничения промотор In2-2 маиса, который активируется антидотами к бензолсульфонамидным гербицидам, промотор GST маиса, который активируется гидрофобными электрофильными соединениями, которые применяются в качестве предвсходовых гербицидов, и промотор PR-1a табака, который активируется салициловой кислотой. Другие регулируемые химическими веществами промоторы, представляющие интерес, включают чувствительные к стероидам промоторы (см., например, индуцируемый глюкокортикоидом промотор в Schena, et al., (1991) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:10421-10425 и McNellis, et al., (1998) Plant J. 14(2):247-257), а также индуцируемые тетрациклинами и репрессируемые тетрациклинами промоторы (см., например, Gatz, et al., (1991) Mol. Gen. Genet. 227:229-237 и патенты США №№ 5814618 и 5789156), включенные в данный документ с помощью ссылки.
Для целенаправленного воздействия на усиленную экспрессию инсектицидного полипептида в конкретной ткани растения можно использовать предпочтительные для ткани промоторы. Предпочтительные для ткани промоторы включают промоторы, обсуждаемые в Yamamoto, et al., (1997) Plant J. 12(2)255-265; Kawamata, et al., (1997) Plant Cell Physiol. 38(7):792-803; Hansen, et al., (1997) Mol. Gen Genet. 254(3):337-343; Russell, et al., (1997) Transgenic Res. 6(2):157-168; Rinehart, et al., (1996) Plant Physiol. 112(3):1331-1341; Van Camp, et al., (1996) Plant Physiol. 112(2):525-535; Canevascini, et al., (1996) Plant Physiol. 112(2):513-524; Yamamoto, et al., (1994) Plant Cell Physiol. 35(5):773-778; Lam, (1994) Results Probl. Cell Differ. 20:181-196; Orozco, et al., (1993) Plant Mol Biol. 23(6):1129-1138; Matsuoka, et al., (1993) Proc Natl. Acad. Sci. USA 90(20):9586-9590 и Guevara-Garcia, et al., (1993) Plant J. 4(3):495-505. Такие промоторы можно модифицировать в случае необходимости для получения слабой экспрессии.
Промоторы, предпочтительные для листа, известны в уровне техники. См., например, Yamamoto, et al., (1997) Plant J. 12(2):255-265; Kwon, et al., (1994) Plant Physiol. 105:357-67; Yamamoto, et al., (1994) Plant Cell Physiol. 35(5):773-778; Gotor, et al., (1993) Plant J. 3:509-18; Orozco, et al., (1993) Plant Mol. Biol. 23(6):1129-1138 и Matsuoka, et al., (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90(20):9586-9590.
Известны промоторы, предпочтительные для корня, или промоторы, специфичные в отношении корня, и их можно выбирать из многих доступных из литературных источников или выделенных de novo из различных совместимых видов. См., например, Hire, et al., (1992) Plant Mol. Biol. 20(2):207-218 (специфичный в отношении корня сои ген глутаминсинтетазы); Keller and Baumgartner, (1991) Plant Cell 3(10):1051-1061 (специфичный в отношении корня регуляторный элемент в гене GRP 1.8 фасоли); Sanger, et al., (1990) Plant Mol. Biol. 14(3):433-443 (специфичный в отношении корня промотор гена маннопинсинтазы (MAS) из Agrobacterium tumefaciens) и Miao, et al., (1991) Plant Cell 3(1):11-22 (кДНК-клон полной длины, кодирующий цитозольную глутаминсинтетазу (GS), которая экспрессируется в корнях и корневых клубеньках сои). См. также Bogusz, et al., (1990) Plant Cell 2(7):633-641, где описаны два промотора, специфичные в отношении корня, выделенные из генов гемоглобина от азотфиксирующего растения Parasponia andersonii, не относящегося к бобовым, и родственного растения Trema tomentosa, не относящегося к бобовым и не являющегося азотфиксирующим. Промоторы этих генов были связаны с репортерным геном β-глюкуронидазы и введены как в растение Nicotiana tabacum, не относящееся к бобовым, так и в бобовое растение Lotus corniculatus, и при этом в обоих случаях специфичная в отношении корня активность промотора сохранялась. Leach и Aoyagi (1991) описывают свой анализ промоторов, обеспечивающих высокий уровень экспрессии генов roIC и roID Agrobacterium rhizogenes, индуцирующих разрастание корней (см. Plant Science (Limerick) 79(1):69-76). Они пришли к выводу, что в этих промоторах энхансер и предпочтительные для ткани ДНК-детерминанты разделены. Teeri et al. (1989) применяли слияние гена с lacZ для того, чтобы показать, что ген из T-DNA Agrobacterium, кодирующий октопинсинтазу, является особенно активным в эпидермисе кончика корня, и что ген TR2' является специфичным в отношении корня в интактном растении и стимулируется при ранении в ткани листа, что является особенно необходимой комбинацией характеристик для применения с инсектицидным или ларвицидным геном (см. EMBO J. 8(2):343-350). Ген TR1', слитый с nptII (неомицинфосфотрансферазой II), продемонстрировал аналогичные характеристики. Дополнительные промоторы, предпочтительные для корня, включают промотор гена VfENOD-GRP3 (Kuster, et al., (1995) Plant Mol. Biol. 29(4):759-772) и промотор rolB (Capana, et al., (1994) Plant Mol. Biol. 25(4):681-691. См. также, патенты США №№ 5837876; 5750386; 5633363; 5459252; 5401836; 5110732 и 5023179. Регуляторные последовательности, предпочтительные для корня, Arabidopsis thaliana раскрыты в US20130117883. Промоторы RCc3, предпочтительные для корней сорго (Sorghum bicolor), раскрыты в заявке на выдачу патента США US20120210463.
Промоторы, ʺпредпочтительные для семениʺ, включают как промоторы, ʺспецифичные в отношении семениʺ (промоторы, которые активны во время развития семени, такие как промоторы запасных белков семени), так и промоторы ʺпрорастания семениʺ (промоторы, которые активны во время прорастания семени). См. Thompson, et al., (1989) BioEssays 10:108, включенную в данный документ с помощью ссылки. Такие промоторы, предпочтительные для семени, включают без ограничения Cim1 (индуцируемый цитокинином транскрипт); cZ19B1 (зеин маиса весом 19 кДа) и milps (мио-инозитол-1-фосфатсинтаза); (см. патент США № 6225529, включенный в данный документ с помощью ссылки). Гамма-зеин и Glb-1 являются специфичными в отношении эндосперма промоторами. В случае двудольных растений, промоторы, специфические в отношении семени, включают без ограничения промотор гена ингибитора трипсина Кунитца 3 (KTi3) (Jofuku and Goldberg, (1989) Plant Cell 1:1079-1093), β-фазеолина бобов, напина, β-конглицинина, глицинина 1, лектина сои, круциферина и т. п. В случае однодольных растений, промоторы, специфичные в отношении семени, включают без ограничения промоторы из генов зеина весом 15 кДа, зеина весом 22 кДа, зеина весом 27 кДа, g-зеина, waxy, shrunken 1, shrunken 2, глобулина 1 маиса и т. д. См. также WO 2000/12733, где раскрыты промоторы, предпочтительные для семени, из генов end1 и end2, включенную в данный документ с помощью ссылки. У двудольных растений промоторы, специфичные в отношении семени, включают без ограничения промотор гена белков семенной оболочки из Arabidopsis, pBAN; а также промоторы генов раннего развития семян из Arabidopsis, p26, p63 и p63tr (патенты США №№ 7294760 и 7847153). Промотор, который характеризуется "предпочтительной" экспрессией в конкретной ткани, экспрессируется в такой ткани в большей степени, чем по меньшей мере в одной другой растительной ткани. Для некоторых предпочтительных для ткани промоторов показана экспрессия почти исключительно в конкретной ткани.
Если требуется низкий уровень экспрессии, то будут применять слабые промоторы. Как правило, используемый в данном документе термин "слабый промотор" относится к промотору, который управляет экспрессией кодирующей последовательности на низком уровне. Под низким уровнем экспрессии подразумевают уровни от приблизительно 1/1000 транскриптов до приблизительно 1/100000 транскриптов, до приблизительно 1/500000 транскриптов. В качестве альтернативы, понятно, что термин "слабые промоторы" также охватывает промоторы, которые управляют экспрессией только в небольшом количестве клеток и не управляют в других, при этом обеспечивается общий низкий уровень экспрессии. Если промотор управляет экспрессией на неприемлемо высоких уровнях, то части промоторной последовательности можно удалить или модифицировать для снижения уровней экспрессии.
Такие слабые конститутивные промоторы включают, например, основной промотор промотора Rsyn7 (WO 1999/43838 и патент США № 6072050), основной промотор 35S CaMV и т. п. Другие конститутивные промоторы включают, например, раскрытые в патентах США №№ 5608149; 5608144; 5604121; 5569597; 5466785; 5399680; 5268463; 5608142 и 6177611, включенных в данный документ с помощью ссылки.
Приведенный выше перечень промоторов не предназначен для ограничения. В вариантах осуществления можно применять любой подходящий промотор.
Как правило, кассета экспрессии будет содержать селектируемый маркерный ген для отбора трансформированных клеток. Селектируемые маркерные гены используют для отбора трансформированных клеток или тканей. Маркерные гены включают гены, кодирующие устойчивость к антибиотику, такие как гены, кодирующие неомицинфосфотрансферазу II (NEO) и гигромицинфосфотрансферазу (HPT), а также гены, обеспечивающие устойчивость к гербицидным соединениям, таким как глуфосинат аммония, бромоксинил, имидазолиноны и 2,4-дихлорфеноксиацетат (2,4-D). Дополнительные примеры подходящих селектируемых маркерных генов включают без ограничения гены, кодирующие устойчивость к хлорамфениколу (Herrera Estrella, et al., (1983) EMBO J. 2:987-992); метотрексату (Herrera Estrella, et al., (1983) Nature 303:209-213 и Meijer, et al., (1991) Plant Mol. Biol. 16:807-820); стрептомицину (Jones, et al., (1987) Mol. Gen. Genet. 210:86-91); спектиномицину (Bretagne-Sagnard, et al., (1996) Transgenic Res. 5:131-137); блеомицину (Hille, et al., (1990) Plant Mol. Biol. 7:171-176); сульфонамиду (Guerineau, et al., (1990) Plant Mol. Biol. 15:127-136); бромоксинилу (Stalker, et al., (1988) Science 242:419-423); глифосату (Shaw, et al., (1986) Science 233:478-481 и заявки на выдачу патентов США с серийными №№ 10/004357 и 10/427692); фосфинотрицин (DeBlock, et al., (1987) EMBO J. 6:2513-2518). См., в целом, Yarranton, (1992) Curr. Opin. Biotech. 3:506-511; Christopherson, et al., (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:6314-6318; Yao, et al., (1992) Cell 71:63-72; Reznikoff, (1992) Mol. Microbiol. 6:2419-2422; Barkley, et al., (1980) в The Operon, pp. 177-220; Hu, et al., (1987) Cell 48:555-566; Brown, et al., (1987) Cell 49:603-612; Figge, et al., (1988) Cell 52:713-722; Deuschle, et al., (1989) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:5400-5404; Fuerst, et al., (1989) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:2549-2553; Deuschle, et al., (1990) Science 248:480-483; Gossen, (1993) диссертация на соискание научной степени доктора, Гейдельбергский университет; Reines, et al., (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:1917-1921; Labow, et al., (1990) Mol. Cell. Biol. 10:3343-3356; Zambretti, et al., (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:3952-3956; Baim, et al., (1991) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:5072-5076; Wyborski, et al., (1991) Nucleic Acids Res. 19:4647-4653; Hillenand-Wissman, (1989) Topics Mol. Struc. Biol. 10:143-162; Degenkolb, et al., (1991) Antimicrob. Agents Chemother. 35:1591-1595; Kleinschnidt, et al., (1988) Biochemistry 27:1094-1104; Bonin, (1993) диссертация на соискание научной степени доктора, Гейдельбергский университет; Gossen, et al., (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:5547-5551; Oliva, et al., (1992) Antimicrob. Agents Chemother. 36:913-919; Hlavka, et al., (1985) Handbook of Experimental Pharmacology, Vol. 78 (Springer-Verlag, Berlin) и Gill, et al., (1988) Nature 334:721-724. Такие раскрытия включены в данный документ с помощью ссылки.
Приведенный выше перечень селектируемых маркерных генов не предназначен для ограничения. В вариантах осуществления можно применять любой селектируемый маркерный ген.
ДНК-конструкции
Охватываются ДНК-конструкции, содержащие полинуклеотид, кодирующий инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1 функционально связанный с гетерологичным регуляторным элементом. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 110, SEQ ID NO: 112, SEQ ID NO: 114, SEQ ID NO: 116, SEQ ID NO: 118, SEQ ID NO: 120, SEQ ID NO: 122, SEQ ID NO: 124, SEQ ID NO: 126, SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 136, SEQ ID NO: 138, SEQ ID NO: 140, SEQ ID NO: 142, SEQ ID NO: 144, SEQ ID NO: 146, SEQ ID NO: 148, SEQ ID NO: 150, SEQ ID NO: 152, SEQ ID NO: 154, SEQ ID NO: 156, SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 218, SEQ ID NO: 220 или SEQ ID NO: 222, соответственно кодирующий полипептид PIP-45-1 с SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 37, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 41, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 47, SEQ ID NO: 49, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 232, SEQ ID NO: 234 и SEQ ID NO: 236. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 124, SEQ ID NO: 126, SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 136, SEQ ID NO: 138, SEQ ID NO: 140, SEQ ID NO: 142, SEQ ID NO: 146, SEQ ID NO: 150, SEQ ID NO: 152, SEQ ID NO: 220 или SEQ ID NO: 222, соответственно кодирующий полипептид PIP-45-1 c SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 234 и SEQ ID NO: 236. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит отличную от геномной молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид PIP-45-1. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 37, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 41, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 47, SEQ ID NO: 49, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 232, SEQ ID NO: 234 или SEQ ID NO: 236, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 234 или SEQ ID NO: 236, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-45-1.
В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 37, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 41, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 47, SEQ ID NO: 49, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 232, SEQ ID NO: 234 или SEQ ID NO: 236, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 234 или SEQ ID NO: 236, и который обладает инсектицидной активностью.
В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 99,1% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 1. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 99,4% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 17. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 99,6% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 19. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 87% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 21. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 88% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 23. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 99,1% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 27. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 99,8% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 29. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 92,3% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 31. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 91,1% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 33. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 95,4% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 35. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 93% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 39. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 97,5% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 43. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 45.
Трансгенные растения или растительные клетки, содержащие полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, также охвачены настоящим раскрытием. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 109, SEQ ID NO: 111, SEQ ID NO: 113, SEQ ID NO: 115, SEQ ID NO: 117, SEQ ID NO: 119, SEQ ID NO: 121, SEQ ID NO: 123, SEQ ID NO: 125, SEQ ID NO: 127, SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 137, SEQ ID NO: 139, SEQ ID NO: 141, SEQ ID NO: 143, SEQ ID NO: 145, SEQ ID NO: 147, SEQ ID NO: 149, SEQ ID NO: 151, SEQ ID NO: 153, SEQ ID NO: 155, SEQ ID NO: 157, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 219, SEQ ID NO: 221 или SEQ ID NO: 223, соответственно кодирующий полипептиды PIP-45-2 с SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 48, SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 233, SEQ ID NO: 235 и SEQ ID NO: 237. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 109, SEQ ID NO: 125, SEQ ID NO: 127, SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 137, SEQ ID NO: 139, SEQ ID NO: 141, SEQ ID NO: 143, SEQ ID NO: 147, SEQ ID NO: 151, SEQ ID NO: 153, SEQ ID NO: 221 или SEQ ID NO: 223, соответственно кодирующий полипептид PIP-45-2 с SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 235 и SEQ ID NO: 237. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит отличную от геномной молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид PIP-45-2. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 48, SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 233, SEQ ID NO: 235 и SEQ ID NO: 237, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 235 или SEQ ID NO: 237, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-45-2.
В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 48, SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 233, SEQ ID NO: 235 или SEQ ID NO: 237, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 235 или SEQ ID NO: 237, и который обладает инсектицидной активностью.
В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 99,2% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 98,5% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 18. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 96% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 20. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 80% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 22. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 81% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 24. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 99,5% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 28. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 98,5% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 30. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 92% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 32. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 91,5% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 34. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 36. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 90% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 40. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 94% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 44. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 46.
Трансгенные растения или растительные клетки, содержащие полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-1, также охвачены настоящим раскрытием. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 163, SEQ ID NO: 165, SEQ ID NO: 167, SEQ ID NO: 169, SEQ ID NO: 171, SEQ ID NO: 172, SEQ ID NO: 174, SEQ ID NO: 176, SEQ ID NO: 178 или SEQ ID NO: 224, соответственно кодирующий полипептид PIP-64-1 с SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 56, SEQ ID NO: 58, SEQ ID NO: 60, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 64, SEQ ID NO: 65, SEQ ID NO: 67, SEQ ID NO: 69, SEQ ID NO: 71 и SEQ ID NO: 238. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 165 или SEQ ID NO: 224, кодирующий полипептид PIP-64-1 с SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 58 и SEQ ID NO: 238. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит отличную от геномной молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид PIP-64-1. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-1, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 56, SEQ ID NO: 58, SEQ ID NO: 60, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 64, SEQ ID NO: 65, SEQ ID NO: 67, SEQ ID NO: 69, SEQ ID NO: 71 или SEQ ID NO: 238, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-1, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 58 или SEQ ID NO: 238, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-64-1. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-1, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 56, SEQ ID NO: 58, SEQ ID NO: 60, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 64, SEQ ID NO: 65, SEQ ID NO: 67, SEQ ID NO: 69, SEQ ID NO: 71 или SEQ ID NO: 238. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-1, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 58 или SEQ ID NO: 238.
В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-1, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 53. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-1, последовательность которого по меньшей мере на 99,7% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 58. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-1, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 238.
Трансгенные растения или растительные клетки, содержащие полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-2, также охвачены настоящим раскрытием. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 164, SEQ ID NO: 166, SEQ ID NO: 168, SEQ ID NO: 170, SEQ ID NO: 173, SEQ ID NO: 175, SEQ ID NO: 177, SEQ ID NO: 179 или SEQ ID NO: 225, соответственно кодирующий полипептид PIP-64-2 с SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 57, SEQ ID NO: 59, SEQ ID NO: 61, SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 68, SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 72 и SEQ ID NO: 239. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 166 или SEQ ID NO: 225, соответственно кодирующий полипептид PIP-64-2 с SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 59 и SEQ ID NO: 239. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит отличную от геномной молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид PIP-64-2. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-2, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 57, SEQ ID NO: 59, SEQ ID NO: 61, SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 68, SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 239, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-2, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 59 или SEQ ID NO: 239, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-64-2. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-2, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 57, SEQ ID NO: 59, SEQ ID NO: 61, SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 68, SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 239, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-2, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 59 или SEQ ID NO: 239, и который обладает инсектицидной активностью.
В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-2, последовательность которого по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 54. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-2, последовательность которого по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 55. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-2, последовательность которого по меньшей мере на 91% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 59. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-2, последовательность которого по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 239.
Трансгенные растения или растительные клетки, содержащие полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-74-1, также охвачены настоящим раскрытием. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 180, SEQ ID NO: 182 или SEQ ID NO: 184, соответственно кодирующий полипептид PIP-74-1 с SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 75 и SEQ ID NO: 77. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит отличную от геномной молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид PIP-74-1. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-74-1, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 75 или SEQ ID NO: 77, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-74-1. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-74-1, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 75 или SEQ ID NO: 77.
В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-74-1, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 73. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-74-1, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 75. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-74-1, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 77.
Трансгенные растения или растительные клетки, содержащие полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-74-2, также охвачены настоящим раскрытием. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 185, соответственно кодирующий полипептид PIP-74-2 с SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 76 и SEQ ID NO: 78. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит отличную от геномной молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид PIP-74-2. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-74-2, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 76 или SEQ ID NO: 78, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-74-2. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-74-2, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 76 или SEQ ID NO: 78.
В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-74-2, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 74. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-74-2, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 76. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-74-2, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 78.
Трансгенные растения или растительные клетки, содержащие полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-75, также охвачены настоящим раскрытием. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 187, SEQ ID NO: 188, SEQ ID NO: 189, SEQ ID NO: 190, SEQ ID NO: 191, SEQ ID NO: 192, SEQ ID NO: 193 или SEQ ID NO: 194, соответственно кодирующий полипептид PIP-75 с SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 83, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86 и SEQ ID NO: 87. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 187, SEQ ID NO: 188, SEQ ID NO: 191, SEQ ID NO: 192, SEQ ID NO: 193 или SEQ ID NO: 194, соответственно кодирующий полипептид PIP-75 с SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86 и SEQ ID NO: 87. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит отличную от геномной молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид PIP-75. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-75, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 83, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86 или SEQ ID NO: 87. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-75, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86 или SEQ ID NO: 87, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-75. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 83, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86 или SEQ ID NO: 87, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86 или SEQ ID NO: 87, и который обладает инсектицидной активностью.
В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 79. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 80. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на 86% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 81. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 84. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 85. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 86. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 87.
ДНК-конструкции, содержащие полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, также охвачены настоящим раскрытием. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 195, SEQ ID NO: 196, SEQ ID NO:197, SEQ ID NO:198, SEQ ID NO:199, SEQ ID NO: 200, SEQ ID NO: 201, SEQ ID NO: 202, SEQ ID NO: 203, SEQ ID NO: 204, SEQ ID NO: 205, SEQ ID NO: 206, SEQ ID NO: 207, SEQ ID NO: 208, SEQ ID NO: 209, SEQ ID NO: 210, SEQ ID NO: 211, SEQ ID ID NO: 212, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 214, SEQ ID NO: 226, SEQ ID NO: 227, SEQ ID NO: 228, SEQ ID NO: 229, SEQ ID NO: 230 или SEQ ID NO: 231, соответственно кодирующий полипептид PIP-77 с SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 101, SEQ ID NO: 102, SEQ ID NO: 103, SEQ ID NO: 104, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 107, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 243, SEQ ID NO: 244 и SEQ ID NO: 245. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 195, SEQ ID NO:196, SEQ ID NO:197, SEQ ID NO:198, SEQ ID NO:199, SEQ ID NO: 200, SEQ ID NO: 201, SEQ ID NO: 202, SEQ ID NO: 203, SEQ ID NO: 204, SEQ ID NO: 205, SEQ ID NO: 207, SEQ ID NO: 227, SEQ ID NO: 228 или SEQ ID NO: 231, соответственно кодирующий полипептид PIP-77 с SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242 и SEQ ID NO: 245. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 101, SEQ ID NO: 102, SEQ ID NO: 103, SEQ ID NO: 104, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 107, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 243, SEQ ID NO: 244 или SEQ ID NO: 245, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242 или SEQ ID NO: 245, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-77.
В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 101, SEQ ID NO: 102, SEQ ID NO: 103, SEQ ID NO: 104, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 107, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 243, SEQ ID NO: 244 или SEQ ID NO: 245, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 80% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 101, SEQ ID NO: 102, SEQ ID NO: 103, SEQ ID NO: 104, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 107, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 243, SEQ ID NO: 244 или SEQ ID NO: 245, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 90% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 101, SEQ ID NO: 102, SEQ ID NO: 103, SEQ ID NO: 104, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 107, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 243, SEQ ID NO: 244 или SEQ ID NO: 245, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 95% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 101, SEQ ID NO: 102, SEQ ID NO: 103, SEQ ID NO: 104, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 107, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 243, SEQ ID NO: 244 или SEQ ID NO: 245, и который обладает инсектицидной активностью.
В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242 или SEQ ID NO: 245, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 80% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242 или SEQ ID NO: 245, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 95% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242 или SEQ ID NO: 245, и который обладает инсектицидной активностью.
В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 93% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 88. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 97% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 89. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 99% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 90. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 97% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 92. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 87% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 93. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 86% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 94. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 85% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 95. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 84% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 96. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 85% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 97. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 83% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 98. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 80% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 100. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 85% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 241. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 83% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 242. В некоторых вариантах осуществления ДНК-конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 96% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 245.
Трансформация растений
Способы согласно вариантам осуществления включают введение полипептида или полинуклеотида в растение. "Введение", используемое в данном документе, означает включение в растение полинуклеотида или полипептида таким образом, что последовательность попадает внутрь клетки растения. Способы согласно вариантам осуществления не зависят от конкретного способа введения полинуклеотида или полипептида в растение, нужно лишь чтобы полинуклеотид или полипептиды проникали внутрь по меньшей мере одной клетки растения. В уровне техники известны способы введения полинуклеотида и/или полипептидов в растения, в том числе без ограничений способы стабильной трансформации, способы транзиентной трансформации и способы трансформации, опосредованной вирусами.
"Стабильная трансформация", используемая в данном документе, означает, что нуклеотидная конструкция, введенная в растение, интегрируется в геном растения и может наследоваться его потомством. "Транзиентная трансформация", используемая в данном документе, означает, что полинуклеотид вводят в растение, и он не интегрируется в геном растения, или в растение вводят полипептид. "Растение", используемое в данном документе, относится к целым растениям, органам растения (например, листьям, стеблям, корням и т. д.), семенам, растительным клеткам, частям растения для вегетативного размножения, зародышам и их потомству. Растительные клетки могут быть дифференцированными или недифференцированными (например, клетками каллюса, клетками суспензионных культур, протопластами, клетками листьев, клетками корней, клетками флоэмы и пыльцой).
Протоколы трансформации, а также протоколы для введения нуклеотидных последовательностей в растения, могут изменяться в зависимости от типа растения или растительной клетки, т. е. класса однодольных или двудольных, на которые нацелена трансформация. Подходящие способы введения нуклеотидных последовательностей в растительные клетки и последующая вставка в геном растения включают микроинъекцию (Crossway, et al., (1986) Biotechniques 4:320-334), электропорацию (Riggs, et al., (1986) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83:5602-5606), трансформацию, опосредованную Agrobacterium (патенты США №№ 5563055 и 5981840), прямой перенос генов (Paszkowski, et al., (1984) EMBO J. 3:2717-2722) и баллистическое ускорение частиц (см., например, патенты США №№ 4945050; 5879918; 5886244 и 5932782; Tomes, et al., (1995) в Plant Cell, Tissue, and Organ Culture: Fundamental Methods, ed. Gamborg and Phillips, (Springer-Verlag, Berlin) и McCabe, et al., (1988) Biotechnology 6:923-926) и трансформацию гена Lecl (WO 00/28058). Относительно трансформации картофеля см. Tu, et al., (1998) Plant Molecular Biology 37:829-838 и Chong, et al., (2000) Transgenic Research 9:71-78. Дополнительные процедуры трансформации можно найти в Weissinger, et al., (1988) Ann. Rev. Genet. 22:421-477; Sanford, et al., (1987) Particulate Science and Technology 5:27-37 (лук репчатый); Christou, et al., (1988) Plant Physiol. 87:671-674 (соя); McCabe, et al., (1988) Bio/Technology 6:923-926 (соя); Finer and McMullen, (1991) In Vitro Cell Dev. Biol. 27P:175-182 (соя); Singh, et al., (1998) Theor. Appl. Genet. 96:319-324 (соя); Datta, et al., (1990) Biotechnology 8:736-740 (рис); Klein, et al., (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:4305-4309 (маис); Klein, et al., (1988) Biotechnology 6:559-563 (маис); патенты США №№ 5240855; 5322783 и 5324646; Klein, et al., (1988) Plant Physiol. 91:440-444 (маис); Fromm, et al., (1990) Biotechnology 8:833-839 (маис); Hooykaas-Van Slogteren, et al., (1984) Nature (London) 311:763-764; патент США № 5736369 (злаки); Bytebier, et al., (1987) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84:5345-5349 (Liliaceae); De Wet, et al., (1985) в The Experimental Manipulation of Ovule Tissues, ed. Chapman, et al., (Longman, New York), pp. 197-209 (пыльца); Kaeppler, et al., (1990) Plant Cell Reports 9:415-418 и Kaeppler, et al., (1992) Theor. Appl. Genet. 84:560-566 (трансформация, опосредованная прокалыванием клеток путем встряхивания их в суспензии микроигл); D'Halluin, et al., (1992) Plant Cell 4:1495-1505 (электропорация); Li, et al., (1993) Plant Cell Reports 12:250-255 и Christou and Ford, (1995) Annals of Botany 75:407-413 (рис); Osjoda, et al., (1996) Nature Biotechnology 14:745-750 (маис при участии Agrobacterium tumefaciens); все из которых включены в данный документ с помощью ссылки.
В конкретных вариантах осуществления последовательности согласно вариантам осуществления можно вводить в растение с применением ряда способов транзиентной трансформации. Такие способы транзиентной трансформации включают без ограничения введение белка инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию или его вариантов и фрагментов непосредственно в растение или введение транскрипта инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию в растение. Такие способы включают, например, микроинъекцию или бомбардировку частицами. См, например, Crossway, et al., (1986) Mol Gen. Genet. 202:179-185; Nomura, et al., (1986) Plant Sci. 44:53-58; Hepler, et al., (1994) Proc. Natl. Acad. Sci. 91:2176-2180 и Hush, et al., (1994) The Journal of Cell Science 107:775-784, все из которых включены в данный документ с помощью ссылки. В альтернативном случае, растение может быть транзиентно трансформировано для экспрессии инсектицидного полипептида с полинуклеотида по настоящему раскрытию с помощью методик, известных в уровне техники. Такие методики включают применение вирусной векторной системы и осаждение полинуклеотида таким способом, который исключает последующее высвобождение ДНК. Таким образом, может происходить транскрипция ДНК, связанной с частицами, однако частота, с которой она высвобождается для интеграции в геном, в значительной степени снижена. Такие способы включают применение частиц, покрытых полиэтиленимином (PEI; № по кат. Sigma P3143).
В уровне техники известны способы нацеленной вставки полинуклеотида в конкретное местоположение в геноме растения. В одном варианте осуществления вставку полинуклеотида в требуемое местоположение в геноме выполняют с использованием системы сайт-специфичной рекомбинации. См., например, WO 1999/25821, WO 1999/25854, WO 1999/25840, WO 1999/25855 и WO 1999/25853, все из которых включены в данный документ с помощью ссылки. Вкратце, полинуклеотид согласно вариантам осуществления может содержаться в кассете для переноса, фланкированной двумя неидентичными сайтами рекомбинации. Кассету для переноса вводят в растение, имеющее в своем геноме стабильно встроенный целевой сайт, который фланкирован двумя неидентичными сайтами рекомбинации, которые соответствуют сайтам кассеты для переноса. Обеспечивают подходящую рекомбиназу, и кассета для переноса интегрируется в целевой сайт. Полинуклеотид, представляющий интерес, таким образом интегрируется в конкретное хромосомное положение в геноме растения.
Векторы для трансформации растений могут состоять из одного или нескольких ДНК-векторов, необходимых для достижения трансформации растения. Например, общепринятой практикой в области техники является использование векторов для трансформации растений, которые состоят из более одного смежного сегмента ДНК. В уровне техники эти векторы зачастую называют "бинарными векторами". Бинарные векторы, а также векторы с плазмидами-помощниками наиболее часто применяются при трансформации, опосредованной Agrobacterium, при этом размер и сложность сегментов ДНК, необходимых для достижения эффективной трансформации, являются очень большими, и предпочтительным является разделение функций на отдельных молекулах ДНК. Бинарные векторы обычно содержат плазмидный вектор, который содержит действующие в цис-положении последовательности, требуемые для переноса T-DNA (как, например, левой границы и правой границы), селектируемый маркер, который разрабатывают таким образом, что он способен экспрессироваться в растительной клетке, и "ген, представляющий интерес" (ген, разработанный таким образом, что он способен экспрессироваться в растительной клетке, из которой требуется получить трансгенные растения). Также в этом плазмидном векторе присутствуют последовательности, требуемые для репликации в бактериях. Действующие в цис-положении последовательности расположены так, чтобы обеспечить возможность эффективного переноса в растительные клетки и экспрессии в них. Например, селектируемый маркерный ген и пестицидный ген расположены между левой и правой границами. Часто второй плазмидный вектор содержит действующие в транс-положении факторы, которые опосредуют перенос T-DNA из Agrobacterium в растительные клетки. Эта плазмида часто содержит функции вирулентности (гены Vir), что обеспечивает возможность заражения растительных клеток Agrobacterium и перенос ДНК путем расщепления по граничным последовательностям и переноса ДНК, опосредованного vir, как понятно из уровня техники (Hellens and Mullineaux, (2000) Trends in Plant Science 5:446-451). Для трансформации растений можно применять несколько типов штаммов Agrobacterium (например, LBA4404, GV3101, EHA101, EHA105 и т. п.). Второй плазмидный вектор не является необходимым для трансформации растений другими способами, такими как бомбардировка микрочастицами, микроинъекция, электропорация, с помощью полиэтиленгликоля и т. д.
В целом, способы трансформации растений включают перенос гетерологичной ДНК в целевые растительные клетки (например, незрелые или зрелые зародыши, суспензионные культуры, недифференцированный каллюс, протопласты и т. д.), с последующим применением соответствующего отбора с максимальным пороговым значением (в зависимости от селектируемого маркерного гена) для выделения трансформированных растительных клеток из группы нетрансформированной клеточной массы. После интеграции гетерологичной чужеродной ДНК в растительные клетки затем применяют соответствующий отбор с максимальным пороговым значением в среде для уничтожения нетрансформированных клеток и отделения и размножения предположительно трансформированных клеток, которые переживают эту обработку с отбором, посредством регулярного переноса на свежую среду. С помощью продолжающегося пассирования и проверки с помощью соответствующего отбора идентифицируют и размножают клетки, которые трансформированы плазмидным вектором. Затем можно применять молекулярные и биохимические способы для подтверждения присутствия интегрированного гетерологичного гена, представляющего интерес, в геноме трансгенного растения.
Как правило, эксплантаты переносят на свежую порцию той же среды и культивируют обычным способом. Впоследствии трансформированные клетки дифференцируются в побеги после помещения в среду для регенерации, дополненную средством отбора с максимальным пороговым значением. Затем побеги переносят на селективную среду для выращивания растений с получением укоренившихся побегов или саженцев. Затем трансгенный саженец выращивают до зрелого растения и получают фертильные семена (например, Hiei, et al., (1994) The Plant Journal 6:271-282; Ishida, et al., (1996) Nature Biotechnology 14:745-750). Как правило, эксплантаты переносят на свежую порцию той же среды и культивируют обычным способом. Общее описание методик и способов для получения трансгенных растений приведены в Ayres and Park, (1994) Critical Reviews in Plant Science 13:219-239 и Bommineni and Jauhar, (1997) Maydica 42:107-120. Поскольку трансформированный материал содержит множество клеток, то как трансформированные, так и нетрансформированные клетки присутствуют в любой части подвергнутого воздействию целевого каллюса, или ткани, или группы клеток. Возможность уничтожать нетрансформированные клетки и обеспечивать размножение трансформированных клеток приводит в результате к трансформированным растительным культурам. Зачастую, возможность удаления нетрансформированных клеток является ограничивающим фактором для быстрого получения трансформированных растительных клеток и успешного выращивания трансгенных растений.
Из клеток, которые были трансформированы, можно вырастить растения в соответствии с традиционными способами. См., например, McCormick, et al., (1986) Plant Cell Reports 5:81-84. Эти растения затем можно выращивать и опылять либо с использованием такой же трансформированной линии, либо других линий, и получать гибрид с конститутивной или индуцируемой экспрессией требуемого идентифицированного фенотипического свойства. Можно вырастить два или более поколений для того, чтобы убедиться в том, что экспрессия требуемой фенотипической характеристики стабильно поддерживается и наследуется, а затем собрать семена, чтобы убедиться в том, что экспрессия требуемого фенотипического свойства была достигнута.
Нуклеотидные последовательности согласно вариантам осуществления можно обеспечить в растении путем приведения растения в контакт с вирусом или вирусными нуклеиновыми кислотами. Как правило, такие способы включают встраивание нуклеотидной конструкции, представляющей интерес, в вирусную молекулу ДНК или РНК. Понятно, что рекомбинантные белки согласно вариантам осуществления можно первоначально синтезировать как часть вирусного полипротеина, который позже может быть процессирован путем протеолиза in vivo или in vitro с получением требуемого инсектицидного полипептида. Также понятно, что такой вирусный полипротеин, содержащий по меньшей мере часть аминокислотной последовательности инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию согласно вариантам осуществления, может обладать требуемой пестицидной активностью. Такие вирусные полипротеины и нуклеотидные последовательности, которые их кодируют, охвачены вариантами осуществления. Способы получения растений с нуклеотидными конструкциями и продукции кодируемых белков в растениях, которые включают вирусные молекулы ДНК или РНК, известны в уровне техники. См., например, патенты США №№ 5889191; 5889190; 5866785; 5589367 и 5316931; включенные в данный документ с помощью ссылки.
Способы трансформации хлоропластов известны в уровне техники. См., например, Svab, et al., (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:8526-8530; Svab and Maliga, (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:913-917; Svab and Maliga, (1993) EMBO J. 12:601-606. Способ основан на доставке генной пушкой ДНК, содержащей селектируемый маркер, и нацеливании ДНК в геном пластид с помощью гомологичной рекомбинации. Кроме того, трансформацию пластид можно осуществлять трансактивацией молчащего трансгена, находящегося в пластидах, путем экспрессии, предпочтительной для определенной ткани, РНК-полимеразы, кодируемой ядерным геномом и функционирующей в пластиде. О такой системе сообщали в McBride, et al., (1994) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91:7301-7305.
Варианты осуществления дополнительно относятся к материалу для размножения трансформированного растения согласно вариантам осуществления, в том числе без ограничения семенам, клубням, клубнелуковицам, луковицам, листьям и черенкам корней и побегов.
Варианты осуществления можно применять для трансформации любых видов растений, в том числе без ограничения однодольных и двудольных. Примеры растений, представляющих интерес, включают без ограничений кукурузу (Zea mays), Brassica sp. (например, B. napus, B. rapa, B. juncea), в частности виды Brassica, пригодные в качестве источников масла из семян растений, люцерну (Medicago sativa), рис (Oryza sativa), рожь (Secale cereale), сорго (Sorghum bicolor, Sorghum vulgare), просо (например, пеннисетум рогозовидный (Pennisetum glaucum), просо культурное (Panicum miliaceum), щетинник итальянский (Setaria italica), просо пальчатое (Eleusine coracana)), подсолнечник (Helianthus annuus), сафлор (Carthamus tinctorius), пшеницу (Triticum aestivum), сою (Glycine max), табак (Nicotiana tabacum), картофель (Solanum tuberosum), разновидности арахиса (Arachis hypogaea), хлопчатник (Gossypium barbadense, Gossypium hirsutum), сладкий картофель (Ipomoea batatus), маниок (Manihot esculenta), кофейное дерево (Coffea spp.), кокосовую пальму (Cocos nucifera), ананас (Ananas comosus), цитрусовые деревья (Citrus spp.), шоколадное дерево (Theobroma cacao), чайный куст (Camellia sinensis), банан (Musa spp.), авокадо (Persea americana), инжир (Ficus casica), гуаву (Psidium guajava), манго (Mangifera indica), маслину (Olea europaea), папайю (Carica papaya), кешью (Anacardium occidentale), макадамию (Macadamia integrifolia), миндаль (Prunus amygdalus), разновидности сахарной свеклы (Beta vulgaris), сахарный тростник (Saccharum spp.), разновидности овса, ячмень, овощи, декоративные растения и хвойные деревья.
Овощи включают разновидности томата (Lycopersicon esculentum), латук (например, Lactuca sativa), разновидности зеленой фасоли (Phaseolus vulgaris), разновидности лимской фасоли (Phaseolus limensis), разновидности гороха (Lathyrus spp.) и представителей рода Cucumis, таких как огурец (C. sativus), канталупа (C. cantalupensis) и дыня мускусная (C. melo). Декоративные растения включают азалию (Rhododendron spp.), гортензию (Macrophylla hydrangea), гибискус (Hibiscus rosasanensis), розы (Rosa spp.), тюльпаны (Tulipa spp.), нарциссы (Narcissus spp.), петунии (Petunia hybrida), гвоздику (Dianthus caryophyllus), пуансеттию (Euphorbia pulcherrima) и хризантему. Хвойные, которые можно использовать при практическом осуществлении вариантов осуществления, включают, например, разновидности сосны, такие как сосна ладанная (Pinus taeda), сосна Эллиота (Pinus elliotii), сосна желтая (Pinus ponderosa), сосна скрученная широкохвойная (Pinus contorta) и сосна лучистая (Pinus radiata); псевдотсугу Мензиса (Pseudotsuga menziesii); тсугу канадскую (Tsuga canadensis); ель сизую (Picea glauca); секвойю (Sequoia sempervirens); разновидности пихты, такие как пихта миловидная (Abies amabilis) и пихта бальзамическая (Abies balsamea), и разновидности туйи, такие как туя гигантская (Thuja plicata) и каллитропсис нутканский (Chamaecyparis nootkatensis). Растения согласно вариантам осуществления включают культурные растения (например, кукурузу, люцерну, подсолнечник, Brassica, сою, хлопчатник, сафлор, арахис, сорго, пшеницу, просо, табак и т. д.), такие как растения кукурузы и сои.
Разновидности газонной травы включают без ограничения: мятлик однолетний (Poa annua); райграс однолетний (Lolium multiflorum); мятлик сплюснутый (Poa compressa); овсяницу красную Чуинга (Festuca rubra); полевицу тонкую (Agrostis tenuis); полевицу болотную (Agrostis palustris); житняк пустынный (Agropyron desertorum); житняк гребенчатый (Agropyron cristatum); овсяницу длиннолистную (Festuca longifolia); мятлик луговой (Poa pratensis); ежу сборную (Dactylis glomerata); плевел многолетний (Lolium perenne); овсяницу красную (Festuca rubra); полевицу белую (Agrostis alba); мятлик обыкновенный (Poa trivialis); овсяницу овечью (Festuca ovina); костер безостый (Bromus inermis); овсяницу тростниковую (Festuca arundinacea); тимофеевку луговую (Phleum pratense); полевицу собачью (Agrostis canina); бескильницу расставленную (Puccinellia distans); пырей Смита (Agropyron smithii); свинорой пальчатый (Cynodon spp.); узкобороздник однобокий (Stenotaphrum secundatum); зойсию (Zoysia spp.); гречку заметную (Paspalum notatum); аксонопус афинский (Axonopus affinis); эремохлою змеехвостую (Eremochloa ophiuroides); кикуйю (Pennisetum clandesinum); паспалум влагалищный (Paspalum vaginatum); москитную траву (Bouteloua gracilis); бизонову траву (Buchloe dactyloids); боковой овес (Bouteloua curtipendula).
Растения, представляющие интерес, включают зерновые растения, которые дают семена, представляющие интерес, масличные растения и бобовые растения. Семена, представляющие интерес, включают семена зерновых культур, таких как кукуруза, пшеница, ячмень, рис, сорго, рожь, просо и т. д. Масличные растения включают хлопчатник, сою, сафлор, подсолнечник, Brassica, маис, люцерну, пальму, кокосовую пальму, лен, клещевину, маслину и т. д. Бобовые растения включают разновидности бобов и разновидности гороха. Разновидности бобов включают гуар, рожковое дерево, пажитник, сою, разновидности обыкновенной фасоли, вигну китайскую, золотистую фасоль, лимскую фасоль, стручковую фасоль, разновидности чечевицы, турецкий горох и т. д.
Трансгенные растения
Трансгенные растения или растительные клетки, содержащие полинуклеотид, кодирующий инсектицидный полипептид, также охвачены настоящим раскрытием. Настоящим раскрытием охвачены трансгенные растения или растительные клетки, содержащие полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид с SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 110, SEQ ID NO: 112, SEQ ID NO: 114, SEQ ID NO: 116, SEQ ID NO: 118, SEQ ID NO: 120, SEQ ID NO: 122, SEQ ID NO: 124, SEQ ID NO: 126, SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 136, SEQ ID NO: 138, SEQ ID NO: 140, SEQ ID NO: 142, SEQ ID NO: 144, SEQ ID NO: 146, SEQ ID NO: 148, SEQ ID NO: 150, SEQ ID NO: 152, SEQ ID NO: 154, SEQ ID NO: 156, SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 218, SEQ ID NO: 220 или SEQ ID NO: 222, соответственно кодирующий полипептид PIP-45-1 с SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 37, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 41, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 47, SEQ ID NO: 49, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 232, SEQ ID NO: 234 и SEQ ID NO: 236. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид с SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 124, SEQ ID NO: 126, SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 136, SEQ ID NO: 138, SEQ ID NO: 140, SEQ ID NO: 142, SEQ ID NO: 146, SEQ ID NO: 150, SEQ ID NO: 152, SEQ ID NO: 220 или SEQ ID NO: 222, соответственно кодирующий полипептид PIP-45-1 с SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 234 и SEQ ID NO: 236. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат отличную от геномной молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид PIP-45-1. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 37, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 41, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 47, SEQ ID NO: 49, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 232, SEQ ID NO: 234 или SEQ ID NO: 236, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 234 или SEQ ID NO: 236, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-45-1.
В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 37, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 41, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 47, SEQ ID NO: 49, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 232, SEQ ID NO: 234 или SEQ ID NO: 236, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 234 или SEQ ID NO: 236, и который обладает инсектицидной активностью.
В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 99,1% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 1. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 99,4% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 17. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 99,6% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 19. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 87% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 21. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 88% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 23. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 99,1% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 27. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 99,8% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 29. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 92,3% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 31. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 91,1% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 33. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 95,4% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 35. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 95% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 39. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 97,5% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 43. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 45. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 94% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 234. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-1, последовательность которого по меньшей мере на 96% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 236.
Трансгенные растения или растительные клетки, содержащие полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, также охвачены настоящим раскрытием. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид с SEQ ID NO: 109, SEQ ID NO: 111, SEQ ID NO: 113, SEQ ID NO: 115, SEQ ID NO: 117, SEQ ID NO: 119, SEQ ID NO: 121, SEQ ID NO: 123, SEQ ID NO: 125, SEQ ID NO: 127, SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 137, SEQ ID NO: 139, SEQ ID NO: 141, SEQ ID NO: 143, SEQ ID NO: 145, SEQ ID NO: 147, SEQ ID NO: 149, SEQ ID NO: 151, SEQ ID NO: 153, SEQ ID NO: 155, SEQ ID NO: 157, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 219, SEQ ID NO: 221 или SEQ ID NO: 223, соответственно кодирующий полипептид PIP-45-2 с SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 48, SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 233, SEQ ID NO: 235 и SEQ ID NO: 237. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид с SEQ ID NO: 109, SEQ ID NO: 125, SEQ ID NO: 127, SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 137, SEQ ID NO: 139, SEQ ID NO: 141, SEQ ID NO: 143, SEQ ID NO: 147, SEQ ID NO: 151, SEQ ID NO: 153, SEQ ID NO: 221 или SEQ ID NO: 223, соответственно кодирующий полипептид PIP-45-2 с SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 235 и SEQ ID NO: 237. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат отличную от геномной молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид PIP-45-2. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 48, SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 233, SEQ ID NO: 235 и SEQ ID NO: 237, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 235 или SEQ ID NO: 237, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-45-2.
В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 48, SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 233, SEQ ID NO: 235 или SEQ ID NO: 237, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 235 или SEQ ID NO: 237, и который обладает инсектицидной активностью.
В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 99,2% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 98,5% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 18. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 96% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 20. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 80% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 22. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 81% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 24. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 99,5% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 28. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 98,5% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 30. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 92% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 32. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 91,5% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 34. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 36. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 90% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 40. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 94% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 44. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-45-2, последовательность которого по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 46.
Трансгенные растения или растительные клетки, содержащие полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-1, также охвачены настоящим раскрытием. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид с SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 163, SEQ ID NO: 165, SEQ ID NO: 167, SEQ ID NO: 169, SEQ ID NO: 171, SEQ ID NO: 172, SEQ ID NO: 174, SEQ ID NO: 176, SEQ ID NO: 178 или SEQ ID NO: 224, соответственно кодирующий полипептид PIP-64-1 с SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 56, SEQ ID NO: 58, SEQ ID NO: 60, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 64, SEQ ID NO: 65, SEQ ID NO: 67, SEQ ID NO: 69, SEQ ID NO: 71 и SEQ ID NO: 238. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид с SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 165 или SEQ ID NO: 224, кодирующий полипептид PIP-64-1 с SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 58 и SEQ ID NO: 238. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат отличную от геномной молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид PIP-64-1. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-1, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 56, SEQ ID NO: 58, SEQ ID NO: 60, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 64, SEQ ID NO: 65, SEQ ID NO: 67, SEQ ID NO: 69, SEQ ID NO: 71 или SEQ ID NO: 238, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-1, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 58 или SEQ ID NO: 238, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-64-1. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-1, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 56, SEQ ID NO: 58, SEQ ID NO: 60, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 64, SEQ ID NO: 65, SEQ ID NO: 67, SEQ ID NO: 69, SEQ ID NO: 71 или SEQ ID NO: 238. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-1, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 58 или SEQ ID NO: 238.
В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-1, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 53. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-1, последовательность которого по меньшей мере на 99,7% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 58. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-1, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 238.
Трансгенные растения или растительные клетки, содержащие полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-2, также охвачены настоящим раскрытием. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид с SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 164, SEQ ID NO: 166, SEQ ID NO: 168, SEQ ID NO: 170, SEQ ID NO: 173, SEQ ID NO: 175, SEQ ID NO: 177, SEQ ID NO: 179 или SEQ ID NO: 225, соответственно кодирующий полипептид PIP-64-2 с SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 57, SEQ ID NO: 59, SEQ ID NO: 61, SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 68, SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 72 и SEQ ID NO: 239. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид с SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 166 или SEQ ID NO: 225, соответственно кодирующий полипептид PIP-64-2 с SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 59 и SEQ ID NO: 239. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат отличную от геномной молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид PIP-64-2. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-2, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 57, SEQ ID NO: 59, SEQ ID NO: 61, SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 68, SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 239, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-2, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 59 или SEQ ID NO: 239, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-64-2. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-2, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 57, SEQ ID NO: 59, SEQ ID NO: 61, SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 68, SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 239, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-2, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 59 или SEQ ID NO: 239, и который обладает инсектицидной активностью.
В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-2, последовательность которого по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 54. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-2, последовательность которого по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 55. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-2, последовательность которого по меньшей мере на 91% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 59. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-64-2, последовательность которого по меньшей мере на 70% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 239.
Трансгенные растения или растительные клетки, содержащие полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-74-1, также охвачены настоящим раскрытием. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полипептид с SEQ ID NO: 180, SEQ ID NO: 182 или SEQ ID NO: 184, соответственно кодирующий полипептид PIP-74-1 с SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 75 и SEQ ID NO: 77. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат отличную от геномной молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид PIP-74-1. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-74-1, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 75 или SEQ ID NO: 77, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-74-1. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-74-1, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 75 или SEQ ID NO: 77.
В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-74-1, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 73. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-74-1, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 75. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-74-1, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 77.
Трансгенные растения или растительные клетки, содержащие полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-74-2, также охвачены настоящим раскрытием. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полипептид с SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 185, соответственно кодирующий полипептид PIP-74-2 с SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 76 и SEQ ID NO: 78. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат отличную от геномной молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид PIP-74-2. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-74-2, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 76 или SEQ ID NO: 78, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-74-2. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-74-2, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 76 или SEQ ID NO: 78.
В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-74-2, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 74. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-74-2, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 76. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-74-2, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 78.
Трансгенные растения или растительные клетки, содержащие полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-75, также охвачены настоящим раскрытием. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид с SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 187, SEQ ID NO: 188, SEQ ID NO: 189, SEQ ID NO: 190, SEQ ID NO: 191, SEQ ID NO: 192, SEQ ID NO: 193 или SEQ ID NO: 194, соответственно кодирующий полипептид PIP-75 с SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 83, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86 и SEQ ID NO: 87. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид с SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 187, SEQ ID NO: 188, SEQ ID NO: 191, SEQ ID NO: 192, SEQ ID NO: 193 или SEQ ID NO: 194, соответственно кодирующий полипептид PIP-75 с SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86 и SEQ ID NO: 87. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат отличную от геномной молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид PIP-75. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-75, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 83, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86 или SEQ ID NO: 87. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-75, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86 или SEQ ID NO: 87, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-75. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 83, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86 или SEQ ID NO: 87, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид кодирует полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86 или SEQ ID NO: 87, и который обладает инсектицидной активностью.
В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 79. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 80. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на 86% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 81. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 84. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 85. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 86. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-75, последовательность которого по меньшей мере на 75% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 87.
Трансгенные растения или растительные клетки, содержащие полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, также охвачены настоящим раскрытием. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид с SEQ ID NO: 195, SEQ ID NO: 196, SEQ ID NO:197, SEQ ID NO:198, SEQ ID NO:199, SEQ ID NO: 200, SEQ ID NO: 201, SEQ ID NO: 202, SEQ ID NO: 203, SEQ ID NO: 204, SEQ ID NO: 205, SEQ ID NO: 206, SEQ ID NO: 207, SEQ ID NO: 208, SEQ ID NO: 209, SEQ ID NO: 210, SEQ ID NO: 211, SEQ ID ID NO: 212, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 214, SEQ ID NO: 226, SEQ ID NO: 227, SEQ ID NO: 228, SEQ ID NO: 229, SEQ ID NO: 230 или SEQ ID NO: 231, соответственно кодирующий полипептид PIP-77 с SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 101, SEQ ID NO: 102, SEQ ID NO: 103, SEQ ID NO: 104, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 107, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 243, SEQ ID NO: 244 и SEQ ID NO: 245. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид с SEQ ID NO: 195, SEQ ID NO:196, SEQ ID NO:197, SEQ ID NO:198, SEQ ID NO:199, SEQ ID NO: 200, SEQ ID NO: 201, SEQ ID NO: 202, SEQ ID NO: 203, SEQ ID NO: 204, SEQ ID NO: 205, SEQ ID NO: 207, SEQ ID NO: 227, SEQ ID NO: 228 или SEQ ID NO: 231, соответственно кодирующий полипептид PIP-77 с SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242 и SEQ ID NO: 245. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 101, SEQ ID NO: 102, SEQ ID NO: 103, SEQ ID NO: 104, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 107, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 243, SEQ ID NO: 244 или SEQ ID NO: 245, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого достаточно гомологична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242 или SEQ ID NO: 245, и который обладает инсектицидной активностью. "Достаточно гомологична" используется в данном документе для обозначения аминокислотной последовательности, последовательность которой по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более гомологична эталонной последовательности с применением одной из программ выравнивания, описанных в данном документе, с применением стандартных параметров. Специалисту в данной области будет понятно, что эти значения можно соответствующим образом скорректировать для определения соответствующей гомологии белков, принимая во внимание аминокислотное сходство и т. п. В некоторых вариантах осуществления гомологию последовательности определяют относительно последовательности полной длины полипептида PIP-77.
В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 101, SEQ ID NO: 102, SEQ ID NO: 103, SEQ ID NO: 104, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 107, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 243, SEQ ID NO: 244 или SEQ ID NO: 245, и который обладает инсектицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на приблизительно 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентична последовательности под SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242 или SEQ ID NO: 245, и который обладает инсектицидной активностью.
В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 86% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 88. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 85% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 89. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 85% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 90. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 85% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 91. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 85% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 92. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 85% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 93. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 85% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 94. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 85% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 95. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 80% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 96. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 80% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 97. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 80% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 98. В некоторых вариантах осуществления трансгенные растение или растительная клетка содержат полинуклеотид, кодирующий полипептид PIP-77, последовательность которого по меньшей мере на 80% или более идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 100.
Оценка трансформации растений
После введения гетерологичной чужеродной ДНК в растительные клетки трансформацию или интеграцию гетерологичного гена в геном растения подтверждают с помощью различных способов, таких как анализ нуклеиновых кислот, белков и метаболитов, связанных с интегрированным геном.
ПЦР-анализ представляет собой быстрый способ скрининга трансформированных клеток, ткани или побегов в отношении присутствия встроенного гена на ранней стадии перед высаживанием в почву (Sambrook and Russell, (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY). ПЦР проводят с применением олигонуклеотидных праймеров, специфичных в отношении гена, представляющего интерес, или исходных последовательностей вектора на основе Agrobacterium и т. д.
Трансформацию растений можно подтвердить с помощью Саузерн-блот анализа геномной ДНК (Sambrook and Russell, (2001) выше). В целом, общую ДНК экстрагируют из трансформанта, разрезают соответствующими ферментами рестрикции, фракционируют в агарозном геле и переносят на нитроцеллюлозную или найлоновую мембрану. Затем мембрану или "блот" анализируют с помощью зонда, например целевого фрагмента ДНК с радиоактивной меткой 32P, с целью подтверждения интеграции внедренного гена в геном растения в соответствии со стандартными методиками (Sambrook и Russell, (2001) выше).
При нозерн-блот анализе РНК выделяют из специфичных тканей трансформанта, фракционируют в агарозном геле, содержащем формальдегид, и переносят на найлоновый фильтр в соответствии со стандартными процедурами, которые обычно применяют в области техники (Sambrook and Russell, (2001) выше). Затем экспрессию РНК, кодируемой пестицидным геном, тестировали с помощью гибридизации фильтра с радиоактивным зондом, полученным из пестицидного гена, посредством способов, известных в уровне техники (Sambrook и Russell, (2001) выше).
Вестерн-блот, биохимические анализы и т. п. можно проводить в отношении трансгенных растений для подтверждения присутствия белка, кодируемого пестицидным геном, с помощью стандартных процедур (Sambrook и Russell, 2001, выше) с применением антител, которые связываются с одним или несколькими эпитопами, присутствующими на инсектицидном полипептиде по настоящему раскрытию.
Пакетирование признаков в трансгенном растении
Трансгенные растения могут содержать пакет из одного или нескольких инсектицидных полинуклеотидов, раскрытых в данном документе, с одним или несколькими дополнительными полинуклеотидами, приводящими к продуцированию или супрессии нескольких полипептидных последовательностей. Трансгенные растения, содержащие пакеты из последовательностей полинуклеотидов, можно получить либо с помощью традиционных способов скрещивания, либо посредством способов генной инженерии, либо применяя и то, и другое. Эти способы включают без ограничений размножение индивидуальных линий, при этом каждая содержит полинуклеотид, представляющий интерес, трансформацию трансгенного растения, содержащего ген, раскрытый в данном документе, добавочным геном и котрансформацию генов одной растительной клетки. Термин "пакетированный", используемый в данном документе, предусматривает состояние, при котором в одном растении присутствуют несколько признаков (т. е. оба признака включены в ядерный геном, один признак включен в ядерный геном и один признак включен в геном пластиды, или оба признака включены в геном пластиды). В одном неограничивающем примере "пакетированные признаки" предусматривают молекулярный пакет, в котором последовательности физически граничат друг с другом. "Признак", используемый в данном документе, относится к фенотипу, обусловленному конкретной последовательностью или группами последовательностей. Котрансформацию генов можно проводить с применением единых векторов для трансформации, содержащих несколько генов, или нескольких векторов, которые несут отдельные гены. Если последовательности пакетированы с помощью генетической трансформации растений, то представляющие интерес полинуклеотидные последовательности можно комбинировать в любое время и в любом порядке. Признаки можно вводить одновременно в протоколе котрансформации с представляющими интерес полинуклеотидами, представленными любой комбинацией кассет трансформации. Например, если будут вводиться две последовательности, то эти две последовательности могут содержаться в отдельных кассетах для трансформации (транс) или содержаться в одной кассете для трансформации (цис). Экспрессия этих последовательностей может управляться одним и тем же промотором или различными промоторами. В определенных случаях может потребоваться введение кассеты для трансформации, которая будет супрессировать экспрессию представляющего интерес полинуклеотида. Ее можно комбинировать с любой комбинацией других кассет супрессии или кассет сверхэкспрессии для получения требуемой комбинации признаков в растении. Кроме того, считается, что полинуклеотидные последовательности можно пакетировать в требуемом местоположении в геноме с применением системы для сайт-специфичной рекомбинации. См., например, WO 1999/25821, WO 1999/25854, WO 1999/25840, WO 1999/25855 и WO 1999/25853, все из которых включены в данный документ с помощью ссылки.
В некоторых вариантах осуществления полинуклеотиды, кодирующие инсектицидные полипептиды, раскрытые в данном документе, отдельно или пакетированные с одним или несколькими дополнительными признаками устойчивости к насекомым, можно пакетировать с одним или несколькими дополнительными вводимыми признаками (например, устойчивость к гербициду, устойчивость к грибам, устойчивость к вирусам, переносимость стрессов, устойчивость к заболеваниям, мужская стерильность, сила стебля и т. п.), или признаками, влияющими на выход (например, повышенная урожайность, разновидности модифицированного крахмала, улучшенный профиль масел, сбалансированные аминокислоты, высокое содержание лизина или метионина, повышенная усвояемость, улучшенное качество волокон, устойчивость к засухе и т. п.). Таким образом, варианты осуществления полинуклеотида можно применять для обеспечения полного комплекса агрономических признаков, обеспечивающих улучшенное качество сельскохозяйственной культуры, с возможностью гибкого и экономически эффективного контроля любого количества сельскохозяйственных вредителей.
Трансгены, пригодные для пакетирования, включают без ограничения приведенные ниже.
1. Трансгены, которые обеспечивают устойчивость к насекомым или заболеваниям и которые кодируют приведенные ниже.
(A) Гены устойчивости растения к заболеваниям. Защитные механизмы растений зачастую активируются посредством специфического взаимодействия между продуктом гена устойчивости к заболеваниям (R) в растении и продуктом соответствующего гена авирулентности (Avr) в патогене. Разновидность растения можно трансформировать с помощью клонированного гена устойчивости с целью разработки растений, которые устойчивы к специфичным штаммам патогена. См., например, Jones, et al., (1994) Science 266:789 (клонирование гена Cf-9 томата, обеспечивающего устойчивость к Cladosporium fulvum); Martin, et al., (1993) Science 262:1432 (ген Pto томата, обеспечивающий устойчивость к Pseudomonas syringae pv. томата, кодирует протеинкиназу); Mindrinos, et al., (1994) Cell 78:1089 (ген RSP2 Arabidopsis, обеспечивающий устойчивость к Pseudomonas syringae), McDowell and Woffenden, (2003) Trends Biotechnol. 21(4):178-83 и Toyoda, et al., (2002) Transgenic Res. 11(6):567-82. Растение, устойчивое к заболеванию, представляет собой растение, которое более устойчиво к патогену по сравнению с растением дикого типа.
(B) Гены, кодирующие белок Bacillus thuringiensis, его производное или синтетический полипептид, смоделированный на его основе. См., например, Geiser, et al., (1986) Gene 48:109, которые раскрывают клонирование и нуклеотидную последовательность гена дельта-эндотоксина Bt. Кроме того, молекулы ДНК, кодирующие гены дельта-эндотоксина, можно приобрести в Американской коллекции типовых культур (Роквилл, Мэриленд), например, под номерами доступа ATCC® 40098, 67136, 31995 и 31998. Другие неограничивающие примеры трансгенов Bacillus thuringiensis, разработанных с помощью методик генной инженерии, приведены в следующих патентах и заявках на выдачу патентов, и тем самым включены с помощью ссылки для данной цели: патенты США №№ 5188960; 5689052; 5880275; 5986177; 6023013, 6060594, 6063597, 6077824, 6620988, 6642030, 6713259, 6893826, 7105332; 7179965, 7208474; 7227056, 7288643, 7323556, 7329736, 7449552, 7468278, 7510878, 7521235, 7544862, 7605304, 7696412, 7629504, 7705216, 7772465, 7790846, 7858849 и WO 1991/14778; WO 1999/31248; WO 2001/12731; WO 1999/24581 и WO 1997/40162.
Гены, кодирующие пестицидные белки, также можно пакетировать в том числе без ограничения: с инсектицидными белками из Pseudomonas sp., такими как PSEEN3174 (Monalysin, (2011) PLoS Pathogens, 7:1-13), из штамма CHA0 и Pf-5 Pseudomonas protegens (ранее fluorescens) (Pechy-Tarr, (2008) Environmental Microbiology 10:2368-2386: № доступа в GenBank EU400157); из Pseudomonas Taiwanensis (Liu, et al., (2010) J. Agric. Food Chem. 58:12343-12349) и из Pseudomonas pseudoalcligenes (Zhang, et al., (2009) Annals of Microbiology 59:45-50 и Li, et al., (2007) Plant Cell Tiss. Organ Cult. 89:159-168); инсектицидными белками из Photorhabdus sp. и Xenorhabdus sp. (Hinchliffe, et al., (2010) The Open Toxinology Journal 3:101-118 и Morgan, et al., (2001) Applied and Envir. Micro. 67:2062-2069); патент США № 6048838 и патент США № 6379946; полипептидом PIP-1 из патентной публикации США № US2014-0007297-A1; полипептидами AfIP-1A и/или AfIP-1B из патентной публикации США № US/2014-0033361; полипептидами PHI-4 из патентного документа США с серийным № 13/839702; полипептидами PIP-47 из публикации согласно PCT с серийным № PCT/US14/51063; полипептидом PHI-4 из патентной публикации США № US20140274885 или патентной публикации согласно PCT WO2014/150914; полипептидом PIP-72 из публикации согласно PCT с серийным № PCT/US14/55128; инсектицидными белками из патентных документов США с серийными №№ 61/863761 и 61/863763; и с δ-эндотоксинами, в том числе без ограничения: классы Cry1, Cry2, Cry3, Cry4, Cry5, Cry6, Cry7, Cry8, Cry9, Cry10, Cry11, Cry12, Cry13, Cry14, Cry15, Cry16, Cry17, Cry18, Cry19, Cry20, Cry21, Cry22, Cry23, Cry24, Cry25, Cry26, Cry27, Cry28, Cry29, Cry30, Cry31, Cry32, Cry33, Cry34, Cry35, Cry36, Cry37, Cry38, Cry39, Cry40, Cry41, Cry42, Cry43, Cry44, Cry45, Cry 46, Cry47, Cry49, Cry 51, Cry52, Cry 53, Cry 54, Cry55, Cry56, Cry57, Cry58, Cry59, Cry60, Cry61, Cry62, Cry63, Cry64, Cry65, Cry66, Cry67, Cry68, Cry69, Cry70, Cry71 и Cry72 генов δ-эндотоксинов, а также цитолитические гены Cyt1 и Cyt2 B. thuringiensis. Представители этих классов инсектицидных белков B. thuringiensis включают без ограничения Cry1Aa1 (№ доступа AAA22353); Cry1Aa2 (№ доступа № доступа AAA22552); Cry1Aa3 (№ доступа BAA00257); Cry1Aa4 (№ доступа CAA31886); Cry1Aa5 (№ доступа BAA04468); Cry1Aa6 (№ доступа AAA86265); Cry1Aa7 (№ доступа AAD46139); Cry1Aa8 (№ доступа I26149); Cry1Aa9 (№ доступа BAA77213); Cry1Aa10 (№ доступа AAD55382); Cry1Aa11 (№ доступа CAA70856); Cry1Aa12 (№ доступа AAP80146); Cry1Aa13 (№ доступа AAM44305); Cry1Aa14 (№ доступа AAP40639); Cry1Aa15 (№ доступа AAY66993); Cry1Aa16 (№ доступа HQ439776); Cry1Aa17 (№ доступа HQ439788); Cry1Aa18 (№ доступа HQ439790); Cry1Aa19 (№ доступа HQ685121); Cry1Aa20 (№ доступа JF340156); Cry1Aa21 (№ доступа JN651496); Cry1Aa22 (№ доступа KC158223); Cry1Ab1 (№ доступа AAA22330); Cry1Ab2 (№ доступа AAA22613); Cry1Ab3 (№ доступа AAA22561); Cry1Ab4 (№ доступа BAA00071 ); Cry1Ab5 (№ доступа CAA28405); Cry1Ab6 (№ доступа AAA22420); Cry1Ab7 (№ доступа CAA31620); Cry1Ab8 (№ доступа AAA22551); Cry1Ab9 (№ доступа CAA38701); Cry1Ab10 (№ доступа A29125); Cry1Ab11 (№ доступа I12419); Cry1Ab12 (№ доступа AAC64003); Cry1Ab13 (№ доступа AAN76494); Cry1Ab14 (№ доступа AAG16877); Cry1Ab15 (№ доступа AAO13302); Cry1Ab16 (№ доступа AAK55546); Cry1Ab17 (№ доступа AAT46415); Cry1Ab18 (№ доступа AAQ88259); Cry1Ab19 (№ доступа AAW31761); Cry1Ab20 (№ доступа ABB72460); Cry1Ab21 (№ доступа ABS18384); Cry1Ab22 (№ доступа ABW87320); Cry1Ab23 (№ доступа HQ439777); Cry1Ab24 (№ доступа HQ439778); Cry1Ab25 (№ доступа HQ685122); Cry1Ab26 (№ доступа HQ847729); Cry1Ab27 (№ доступа JN135249); Cry1Ab28 (№ доступа JN135250); Cry1Ab29 (№ доступа JN135251); Cry1Ab30 (№ доступа JN135252); Cry1Ab31 (№ доступа JN135253); Cry1Ab32 (№ доступа JN135254); Cry1Ab33 (№ доступа AAS93798); Cry1Ab34 (№ доступа KC156668); Cry1Ab-подобный (№ доступа AAK14336); Cry1Ab-подобный (№ доступа AAK14337); Cry1Ab-подобный (№ доступа AAK14338); Cry1Ab-подобный (№ доступа ABG88858); Cry1Ac1 (№ доступа AAA22331); Cry1Ac2 (№ доступа AAA22338); Cry1Ac3 (№ доступа CAA38098); Cry1Ac4 (№ доступа AAA73077); Cry1Ac5 (№ доступа AAA22339); Cry1Ac6 (№ доступа AAA86266); Cry1Ac7 (№ доступа AAB46989); Cry1Ac8 (№ доступа AAC44841); Cry1Ac9 (№ доступа AAB49768); Cry1Ac10 (№ доступа CAA05505 ); Cry1Ac11 (№ доступа CAA10270); Cry1Ac12 (№ доступа I12418); Cry1Ac13 (№ доступа AAD38701); Cry1Ac14 (№ доступа AAQ06607); Cry1Ac15 (№ доступа AAN07788); Cry1Ac16 (№ доступа AAU87037); Cry1Ac17 (№ доступа AAX18704); Cry1Ac18 (№ доступа AAY88347); Cry1Ac19 (№ доступа ABD37053); Cry1Ac20 (№ доступа ABB89046 ); Cry1Ac21 (№ доступа AAY66992 ); Cry1Ac22 (№ доступа ABZ01836); Cry1Ac23 (№ доступа CAQ30431); Cry1Ac24 (№ доступа ABL01535); Cry1Ac25 (№ доступа FJ513324); Cry1Ac26 (№ доступа FJ617446); Cry1Ac27 (№ доступа FJ617447); Cry1Ac28 (№ доступа ACM90319); Cry1Ac29 (№ доступа DQ438941); Cry1Ac30 (№ доступа GQ227507); Cry1Ac31 (№ доступа GU446674); Cry1Ac32 (№ доступа HM061081); Cry1Ac33 (№ доступа GQ866913); Cry1Ac34 (№ доступа HQ230364); Cry1Ac35 (№ доступа JF340157); Cry1Ac36 (№ доступа JN387137); Cry1Ac37 (№ доступа JQ317685); Cry1Ad1 (№ доступа AAA22340); Cry1Ad2 (№ доступа CAA01880); Cry1Ae1 (№ доступа AAA22410); Cry1Af1 (№ доступа AAB82749); Cry1Ag1 (№ доступа AAD46137); Cry1Ah1 (№ доступа AAQ14326); Cry1Ah2 (№ доступа ABB76664); Cry1Ah3 (№ доступа HQ439779); Cry1Ai1 (№ доступа AAO39719); Cry1Ai2 (№ доступа HQ439780); Cry1A-подобный (№ доступа AAK14339); Cry1Ba1 (№ доступа CAA29898); Cry1Ba2 (№ доступа CAA65003); Cry1Ba3 (№ доступа AAK63251); Cry1Ba4 (№ доступа AAK51084); Cry1Ba5 (№ доступа ABO20894); Cry1Ba6 (№ доступа ABL60921); Cry1Ba7 (№ доступа HQ439781); Cry1Bb1 (№ доступа AAA22344); Cry1Bb2 (№ доступа HQ439782); Cry1Bc1 (№ доступа CAA86568); Cry1Bd1 (№ доступа AAD10292); Cry1Bd2 (№ доступа AAM93496); Cry1Be1 (№ доступа AAC32850); Cry1Be2 (№ доступа AAQ52387); Cry1Be3 (№ доступа ACV96720); Cry1Be4 (№ доступа HM070026); Cry1Bf1 (№ доступа CAC50778); Cry1Bf2 (№ доступа AAQ52380); Cry1Bg1 (№ доступа AAO39720); Cry1Bh1 (№ доступа HQ589331); Cry1Bi1 (№ доступа KC156700); Cry1Ca1 (№ доступа CAA30396); Cry1Ca2 (№ доступа CAA31951); Cry1Ca3 (№ доступа AAA22343); Cry1Ca4 (№ доступа CAA01886); Cry1Ca5 (№ доступа CAA65457); Cry1Ca6 [1] (№ доступа AAF37224 ); Cry1Ca7 (№ доступа AAG50438); Cry1Ca8 (№ доступа AAM00264); Cry1Ca9 (№ доступа AAL79362); Cry1Ca10 (№ доступа AAN16462); Cry1Ca11 (№ доступа AAX53094); Cry1Ca12 (№ доступа HM070027); Cry1Ca13 (№ доступа HQ412621); Cry1Ca14 (№ доступа JN651493); Cry1Cb1 (№ доступа M97880); Cry1Cb2 (№ доступа AAG35409); Cry1Cb3 (№ доступа ACD50894 ); Cry1Cb-подобный (№ доступа AAX63901); Cry1Da1 (№ доступа CAA38099); Cry1Da2 (№ доступа I76415); Cry1Da3 (№ доступа HQ439784); Cry1Db1 (№ доступа CAA80234 ); Cry1Db2 (№ доступа AAK48937 ); Cry1Dc1 (№ доступа ABK35074); Cry1Ea1 (№ доступа CAA37933); Cry1Ea2 (№ доступа CAA39609); Cry1Ea3 (№ доступа AAA22345); Cry1Ea4 (№ доступа AAD04732); Cry1Ea5 (№ доступа A15535); Cry1Ea6 (№ доступа AAL50330); Cry1Ea7 (№ доступа AAW72936); Cry1Ea8 (№ доступа ABX11258); Cry1Ea9 (№ доступа HQ439785); Cry1Ea10 (№ доступа ADR00398); Cry1Ea11 (№ доступа JQ652456); Cry1Eb1 (№ доступа AAA22346); Cry1Fa1 (№ доступа AAA22348); Cry1Fa2 (№ доступа AAA22347); Cry1Fa3 (№ доступа HM070028); Cry1Fa4 (№ доступа HM439638); Cry1Fb1 (№ доступа CAA80235); Cry1Fb2 (№ доступа BAA25298); Cry1Fb3 (№ доступа AAF21767); Cry1Fb4 (№ доступа AAC10641); Cry1Fb5 (№ доступа AAO13295); Cry1Fb6 (№ доступа ACD50892); Cry1Fb7 (№ доступа ACD50893); Cry1Ga1 (№ доступа CAA80233); Cry1Ga2 (№ доступа CAA70506); Cry1Gb1 (№ доступа AAD10291); Cry1Gb2 (№ доступа AAO13756); Cry1Gc1 (№ доступа AAQ52381); Cry1Ha1 (№ доступа CAA80236); Cry1Hb1 (№ доступа AAA79694); Cry1Hb2 (№ доступа HQ439786); Cry1H-подобный (№ доступа AAF01213); Cry1Ia1 (№ доступа CAA44633); Cry1Ia2 (№ доступа AAA22354); Cry1Ia3 (№ доступа AAC36999); Cry1Ia4 (№ доступа AAB00958); Cry1Ia5 (№ доступа CAA70124); Cry1Ia6 (№ доступа AAC26910); Cry1Ia7 (№ доступа AAM73516); Cry1Ia8 (№ доступа AAK66742); Cry1Ia9 (№ доступа AAQ08616); Cry1Ia10 (№ доступа AAP86782); Cry1Ia11 (№ доступа CAC85964 ); Cry1Ia12 (№ доступа AAV53390); Cry1Ia13 (№ доступа ABF83202); Cry1Ia14 (№ доступа ACG63871); Cry1Ia15 (№ доступа FJ617445); Cry1Ia16 (№ доступа FJ617448); Cry1Ia17 (№ доступа GU989199); Cry1Ia18 (№ доступа ADK23801); Cry1Ia19 (№ доступа HQ439787); Cry1Ia20 (№ доступа JQ228426); Cry1Ia21 (№ доступа JQ228424); Cry1Ia22 (№ доступа JQ228427); Cry1Ia23 (№ доступа JQ228428); Cry1Ia24 (№ доступа JQ228429); Cry1Ia25 (№ доступа JQ228430); Cry1Ia26 (№ доступа JQ228431); Cry1Ia27 (№ доступа JQ228432); Cry1Ia28 (№ доступа JQ228433); Cry1Ia29 (№ доступа JQ228434); Cry1Ia30 (№ доступа JQ317686); Cry1Ia31 (№ доступа JX944038); Cry1Ia32 (№ доступа JX944039); Cry1Ia33 (№ доступа JX944040); Cry1Ib1 (№ доступа AAA82114); Cry1Ib2 (№ доступа ABW88019); Cry1Ib3 (№ доступа ACD75515); Cry1Ib4 (№ доступа HM051227); Cry1Ib5 (№ доступа HM070028); Cry1Ib6 (№ доступа ADK38579); Cry1Ib7 (№ доступа JN571740); Cry1Ib8 (№ доступа JN675714); Cry1Ib9 (№ доступа JN675715); Cry1Ib10 (№ доступа JN675716); Cry1Ib11 (№ доступа JQ228423); Cry1Ic1 (№ доступа AAC62933); Cry1Ic2 (№ доступа AAE71691); Cry1Id1 (№ доступа AAD44366); Cry1Id2 (№ доступа JQ228422); Cry1Ie1 (№ доступа AAG43526); Cry1Ie2 (№ доступа HM439636); Cry1Ie3 (№ доступа KC156647); Cry1Ie4 (№ доступа KC156681); Cry1If1 (№ доступа AAQ52382); Cry1Ig1 (№ доступа KC156701); Cry1I-подобный (№ доступа AAC31094); Cry1I-подобный (№ доступа ABG88859); Cry1Ja1 (№ доступа AAA22341); Cry1Ja2 (№ доступа HM070030); Cry1Ja3 (№ доступа JQ228425); Cry1Jb1 (№ доступа AAA98959); Cry1Jc1 (№ доступа AAC31092); Cry1Jc2 (№ доступа AAQ52372); Cry1Jd1 (№ доступа CAC50779); Cry1Ka1 (№ доступа AAB00376); Cry1Ka2 (№ доступа HQ439783); Cry1La1 (№ доступа AAS60191); Cry1La2 (№ доступа HM070031); Cry1Ma1 (№ доступа FJ884067); Cry1Ma2 (№ доступа KC156659); Cry1Na1 (№ доступа KC156648); Cry1Nb1 (№ доступа KC156678); Cry1-подобный (№ доступа AAC31091); Cry2Aa1 (№ доступа AAA22335); Cry2Aa2 (№ доступа AAA83516); Cry2Aa3 (№ доступа D86064); Cry2Aa4 (№ доступа AAC04867); Cry2Aa5 (№ доступа CAA10671); Cry2Aa6 (№ доступа CAA10672); Cry2Aa7 (№ доступа CAA10670); Cry2Aa8 (№ доступа AAO13734); Cry2Aa9 (№ доступа AAO13750 ); Cry2Aa10 (№ доступа AAQ04263); Cry2Aa11 (№ доступа AAQ52384); Cry2Aa12 (№ доступа ABI83671); Cry2Aa13 (№ доступа ABL01536); Cry2Aa14 (№ доступа ACF04939); Cry2Aa15 (№ доступа JN426947); Cry2Ab1 (№ доступа AAA22342); Cry2Ab2 (№ доступа CAA39075); Cry2Ab3 (№ доступа AAG36762); Cry2Ab4 (№ доступа AAO13296 ); Cry2Ab5 (№ доступа AAQ04609); Cry2Ab6 (№ доступа AAP59457); Cry2Ab7 (№ доступа AAZ66347); Cry2Ab8 (№ доступа ABC95996); Cry2Ab9 (№ доступа ABC74968); Cry2Ab10 (№ доступа EF157306); Cry2Ab11 (№ доступа CAM84575); Cry2Ab12 (№ доступа ABM21764); Cry2Ab13 (№ доступа ACG76120); Cry2Ab14 (№ доступа ACG76121); Cry2Ab15 (№ доступа HM037126); Cry2Ab16 (№ доступа GQ866914); Cry2Ab17 (№ доступа HQ439789); Cry2Ab18 (№ доступа JN135255); Cry2Ab19 (№ доступа JN135256); Cry2Ab20 (№ доступа JN135257); Cry2Ab21 (№ доступа JN135258); Cry2Ab22 (№ доступа JN135259); Cry2Ab23 (№ доступа JN135260); Cry2Ab24 (№ доступа JN135261); Cry2Ab25 (№ доступа JN415485); Cry2Ab26 (№ доступа JN426946); Cry2Ab27 (№ доступа JN415764); Cry2Ab28 (№ доступа JN651494); Cry2Ac1 (№ доступа CAA40536); Cry2Ac2 (№ доступа AAG35410); Cry2Ac3 (№ доступа AAQ52385); Cry2Ac4 (№ доступа ABC95997); Cry2Ac5 (№ доступа ABC74969); Cry2Ac6 (№ доступа ABC74793); Cry2Ac7 (№ доступа CAL18690); Cry2Ac8 (№ доступа CAM09325); Cry2Ac9 (№ доступа CAM09326); Cry2Ac10 (№ доступа ABN15104); Cry2Ac11 (№ доступа CAM83895); Cry2Ac12 (№ доступа CAM83896); Cry2Ad1 (№ доступа AAF09583); Cry2Ad2 (№ доступа ABC86927); Cry2Ad3 (№ доступа CAK29504); Cry2Ad4 (№ доступа CAM32331); Cry2Ad5 (№ доступа CAO78739 ); Cry2Ae1 (№ доступа AAQ52362); Cry2Af1 (№ доступа ABO30519); Cry2Af2 (№ доступа GQ866915); Cry2Ag1 (№ доступа ACH91610); Cry2Ah1 (№ доступа EU939453); Cry2Ah2 (№ доступа ACL80665); Cry2Ah3 (№ доступа GU073380); Cry2Ah4 (№ доступа KC156702); Cry2Ai1 (№ доступа FJ788388); Cry2Aj (№ доступа ); Cry2Ak1 (№ доступа KC156660); Cry2Ba1 (№ доступа KC156658); Cry3Aa1 (№ доступа AAA22336); Cry3Aa2 (№ доступа AAA22541); Cry3Aa3 (№ доступа CAA68482); Cry3Aa4 (№ доступа AAA22542); Cry3Aa5 (№ доступа AAA50255); Cry3Aa6 (№ доступа AAC43266); Cry3Aa7 (№ доступа CAB41411); Cry3Aa8 (№ доступа AAS79487); Cry3Aa9 (№ доступа AAW05659); Cry3Aa10 (№ доступа AAU29411); Cry3Aa11 (№ доступа AAW82872); Cry3Aa12 (№ доступа ABY49136 ); Cry3Ba1 (№ доступа CAA34983); Cry3Ba2 (№ доступа CAA00645); Cry3Ba3 (№ доступа JQ397327); Cry3Bb1 (№ доступа AAA22334); Cry3Bb2 (№ доступа AAA74198); Cry3Bb3 (№ доступа I15475); Cry3Ca1 (№ доступа CAA42469); Cry4Aa1 (№ доступа CAA68485); Cry4Aa2 (№ доступа BAA00179); Cry4Aa3 (№ доступа CAD30148); Cry4Aa4 (№ доступа AFB18317); Cry4A-подобный (№ доступа AAY96321); Cry4Ba1 (№ доступа CAA30312); Cry4Ba2 (№ доступа CAA30114); Cry4Ba3 (№ доступа AAA22337); Cry4Ba4 (№ доступа BAA00178); Cry4Ba5 (№ доступа CAD30095); Cry4Ba-подобный (№ доступа ABC47686); Cry4Ca1 (№ доступа EU646202); Cry4Cb1 (№ доступа FJ403208); Cry4Cb2 (№ доступа FJ597622); Cry4Cc1 (№ доступа FJ403207); Cry5Aa1 (№ доступа AAA67694); Cry5Ab1 (№ доступа AAA67693); Cry5Ac1 (№ доступа I34543); Cry5Ad1 (№ доступа ABQ82087); Cry5Ba1 (№ доступа AAA68598); Cry5Ba2 (№ доступа ABW88931); Cry5Ba3 (№ доступа AFJ04417); Cry5Ca1 (№ доступа HM461869); Cry5Ca2 (№ доступа ZP_04123426); Cry5Da1 (№ доступа HM461870); Cry5Da2 (№ доступа ZP_04123980); Cry5Ea1 (№ доступа HM485580); Cry5Ea2 (№ доступа ZP_04124038); Cry6Aa1 (№ доступа AAA22357); Cry6Aa2 (№ доступа AAM46849); Cry6Aa3 (№ доступа ABH03377); Cry6Ba1 (№ доступа AAA22358); Cry7Aa1 (№ доступа AAA22351); Cry7Ab1 (№ доступа AAA21120); Cry7Ab2 (№ доступа AAA21121); Cry7Ab3 (№ доступа ABX24522); Cry7Ab4 (№ доступа EU380678); Cry7Ab5 (№ доступа ABX79555); Cry7Ab6 (№ доступа ACI44005); Cry7Ab7 (№ доступа ADB89216); Cry7Ab8 (№ доступа GU145299); Cry7Ab9 (№ доступа ADD92572); Cry7Ba1 (№ доступа ABB70817); Cry7Bb1 (№ доступа KC156653); Cry7Ca1 (№ доступа ABR67863); Cry7Cb1 (№ доступа KC156698); Cry7Da1 (№ доступа ACQ99547); Cry7Da2 (№ доступа HM572236); Cry7Da3 (№ доступа KC156679); Cry7Ea1 (№ доступа HM035086); Cry7Ea2 (№ доступа HM132124); Cry7Ea3 (№ доступа EEM19403); Cry7Fa1 (№ доступа HM035088); Cry7Fa2 (№ доступа EEM19090); Cry7Fb1 (№ доступа HM572235); Cry7Fb2 (№ доступа KC156682); Cry7Ga1 (№ доступа HM572237); Cry7Ga2 (№ доступа KC156669); Cry7Gb1 (№ доступа KC156650); Cry7Gc1 (№ доступа KC156654); Cry7Gd1 (№ доступа KC156697); Cry7Ha1 (№ доступа KC156651); Cry7Ia1 (№ доступа KC156665); Cry7Ja1 (№ доступа KC156671); Cry7Ka1 (№ доступа KC156680); Cry7Kb1 (№ доступа BAM99306); Cry7La1 (№ доступа BAM99307); Cry8Aa1 (№ доступа AAA21117); Cry8Ab1 (№ доступа EU044830); Cry8Ac1 (№ доступа KC156662); Cry8Ad1 (№ доступа KC156684); Cry8Ba1 (№ доступа AAA21118); Cry8Bb1 (№ доступа CAD57542); Cry8Bc1 (№ доступа CAD57543); Cry8Ca1 (№ доступа AAA21119); Cry8Ca2 (№ доступа AAR98783); Cry8Ca3 (№ доступа EU625349); Cry8Ca4 (№ доступа ADB54826); Cry8Da1 (№ доступа BAC07226); Cry8Da2 (№ доступа BD133574); Cry8Da3 (№ доступа BD133575); Cry8Db1 (№ доступа BAF93483); Cry8Ea1 (№ доступа AAQ73470); Cry8Ea2 (№ доступа EU047597); Cry8Ea3 (№ доступа KC855216); Cry8Fa1 (№ доступа AAT48690); Cry8Fa2 (№ доступа HQ174208); Cry8Fa3 (№ доступа AFH78109); Cry8Ga1 (№ доступа AAT46073); Cry8Ga2 (№ доступа ABC42043); Cry8Ga3 (№ доступа FJ198072); Cry8Ha1 (№ доступа AAW81032); Cry8Ia1 (№ доступа EU381044); Cry8Ia2 (№ доступа GU073381); Cry8Ia3 (№ доступа HM044664); Cry8Ia4 (№ доступа KC156674); Cry8Ib1 (№ доступа GU325772); Cry8Ib2 (№ доступа KC156677); Cry8Ja1 (№ доступа EU625348); Cry8Ka1 (№ доступа FJ422558); Cry8Ka2 (№ доступа ACN87262); Cry8Kb1 (№ доступа HM123758); Cry8Kb2 (№ доступа KC156675); Cry8La1 (№ доступа GU325771); Cry8Ma1 (№ доступа HM044665); Cry8Ma2 (№ доступа EEM86551); Cry8Ma3 (№ доступа HM210574); Cry8Na1 (№ доступа HM640939); Cry8Pa1 (№ доступа HQ388415); Cry8Qa1 (№ доступа HQ441166); Cry8Qa2 (№ доступа KC152468); Cry8Ra1 (№ доступа AFP87548); Cry8Sa1 (№ доступа JQ740599); Cry8Ta1 (№ доступа KC156673); Cry8-подобный (№ доступа FJ770571); Cry8-подобный (№ доступа ABS53003); Cry9Aa1 (№ доступа CAA41122); Cry9Aa2 (№ доступа CAA41425); Cry9Aa3 (№ доступа GQ249293); Cry9Aa4 (№ доступа GQ249294); Cry9Aa5 (№ доступа JX174110); Cry9Aa like (№ доступа AAQ52376); Cry9Ba1 (№ доступа CAA52927); Cry9Ba2 (№ доступа GU299522); Cry9Bb1 (№ доступа AAV28716); Cry9Ca1 (№ доступа CAA85764); Cry9Ca2 (№ доступа AAQ52375); Cry9Da1 (№ доступа BAA19948); Cry9Da2 (№ доступа AAB97923); Cry9Da3 (№ доступа GQ249293); Cry9Da4 (№ доступа GQ249297); Cry9Db1 (№ доступа AAX78439); Cry9Dc1 (№ доступа KC156683); Cry9Ea1 (№ доступа BAA34908); Cry9Ea2 (№ доступа AAO12908); Cry9Ea3 (№ доступа ABM21765); Cry9Ea4 (№ доступа ACE88267); Cry9Ea5 (№ доступа ACF04743); Cry9Ea6 (№ доступа ACG63872 ); Cry9Ea7 (№ доступа FJ380927); Cry9Ea8 (№ доступа GQ249292); Cry9Ea9 (№ доступа JN651495); Cry9Eb1 (№ доступа CAC50780); Cry9Eb2 (№ доступа GQ249298); Cry9Eb3 (№ доступа KC156646); Cry9Ec1 (№ доступа AAC63366); Cry9Ed1 (№ доступа AAX78440); Cry9Ee1 (№ доступа GQ249296); Cry9Ee2 (№ доступа KC156664); Cry9Fa1 (№ доступа KC156692); Cry9Ga1 (№ доступа KC156699); Cry9-подобный (№ доступа AAC63366); Cry10Aa1 (№ доступа AAA22614); Cry10Aa2 (№ доступа E00614); Cry10Aa3 (№ доступа CAD30098); Cry10Aa4 (№ доступа AFB18318); Cry10A-подобный (№ доступа DQ167578); Cry11Aa1 (№ доступа AAA22352); Cry11Aa2 (№ доступа AAA22611); Cry11Aa3 (№ доступа CAD30081); Cry11Aa4 (№ доступа AFB18319); Cry11Aa-подобный (№ доступа DQ166531); Cry11Ba1 (№ доступа CAA60504); Cry11Bb1 (№ доступа AAC97162); Cry11Bb2 (№ доступа HM068615); Cry12Aa1 (№ доступа AAA22355); Cry13Aa1 (№ доступа AAA22356); Cry14Aa1 (№ доступа AAA21516); Cry14Ab1 (№ доступа KC156652); Cry15Aa1 (№ доступа AAA22333); Cry16Aa1 (№ доступа CAA63860); Cry17Aa1 (№ доступа CAA67841); Cry18Aa1 (№ доступа CAA67506); Cry18Ba1 (№ доступа AAF89667); Cry18Ca1 (№ доступа AAF89668); Cry19Aa1 (№ доступа CAA68875); Cry19Ba1 (№ доступа BAA32397); Cry19Ca1 (№ доступа AFM37572); Cry20Aa1 (№ доступа AAB93476); Cry20Ba1 (№ доступа ACS93601); Cry20Ba2 (№ доступа KC156694); Cry20-подобный (№ доступа GQ144333); Cry21Aa1 (№ доступа I32932); Cry21Aa2 (№ доступа I66477); Cry21Ba1 (№ доступа BAC06484); Cry21Ca1 (№ доступа JF521577); Cry21Ca2 (№ доступа KC156687); Cry21Da1 (№ доступа JF521578); Cry22Aa1 (№ доступа I34547); Cry22Aa2 (№ доступа CAD43579); Cry22Aa3 (№ доступа ACD93211); Cry22Ab1 (№ доступа AAK50456); Cry22Ab2 (№ доступа CAD43577); Cry22Ba1 (№ доступа CAD43578); Cry22Bb1 (№ доступа KC156672); Cry23Aa1 (№ доступа AAF76375); Cry24Aa1 (№ доступа AAC61891); Cry24Ba1 (№ доступа BAD32657); Cry24Ca1 (№ доступа CAJ43600); Cry25Aa1 (№ доступа AAC61892); Cry26Aa1 (№ доступа AAD25075); Cry27Aa1 (№ доступа BAA82796); Cry28Aa1 (№ доступа AAD24189); Cry28Aa2 (№ доступа AAG00235); Cry29Aa1 (№ доступа CAC80985); Cry30Aa1 (№ доступа CAC80986); Cry30Ba1 (№ доступа BAD00052); Cry30Ca1 (№ доступа BAD67157); Cry30Ca2 (№ доступа ACU24781); Cry30Da1 (№ доступа EF095955); Cry30Db1 (№ доступа BAE80088); Cry30Ea1 (№ доступа ACC95445); Cry30Ea2 (№ доступа FJ499389); Cry30Fa1 (№ доступа ACI22625 ); Cry30Ga1 (№ доступа ACG60020); Cry30Ga2 (№ доступа HQ638217); Cry31Aa1 (№ доступа BAB11757); Cry31Aa2 (№ доступа AAL87458); Cry31Aa3 (№ доступа BAE79808); Cry31Aa4 (№ доступа BAF32571); Cry31Aa5 (№ доступа BAF32572); Cry31Aa6 (№ доступа BAI44026); Cry31Ab1 (№ доступа BAE79809); Cry31Ab2 (№ доступа BAF32570); Cry31Ac1 (№ доступа BAF34368); Cry31Ac2 (№ доступа AB731600); Cry31Ad1 (№ доступа BAI44022); Cry32Aa1 (№ доступа AAG36711); Cry32Aa2 (№ доступа GU063849); Cry32Ab1 (№ доступа GU063850); Cry32Ba1 (№ доступа BAB78601); Cry32Ca1 (№ доступа BAB78602); Cry32Cb1 (№ доступа KC156708); Cry32Da1 (№ доступа BAB78603); Cry32Ea1 (№ доступа GU324274); Cry32Ea2 (№ доступа KC156686); Cry32Eb1 (№ доступа KC156663); Cry32Fa1 (№ доступа KC156656); Cry32Ga1 (№ доступа KC156657); Cry32Ha1 (№ доступа KC156661); Cry32Hb1 (№ доступа KC156666); Cry32Ia1 (№ доступа KC156667); Cry32Ja1 (№ доступа KC156685); Cry32Ka1 (№ доступа KC156688); Cry32La1 (№ доступа KC156689); Cry32Ma1 (№ доступа KC156690); Cry32Mb1 (№ доступа KC156704); Cry32Na1 (№ доступа KC156691); Cry32Oa1 (№ доступа KC156703); Cry32Pa1 (№ доступа KC156705); Cry32Qa1 (№ доступа KC156706); Cry32Ra1 (№ доступа KC156707); Cry32Sa1 (№ доступа KC156709); Cry32Ta1 (№ доступа KC156710); Cry32Ua1 (№ доступа KC156655); Cry33Aa1 (№ доступа AAL26871); Cry34Aa1 (№ доступа AAG50341); Cry34Aa2 (№ доступа AAK64560); Cry34Aa3 (№ доступа AAT29032); Cry34Aa4 (№ доступа AAT29030); Cry34Ab1 (№ доступа AAG41671); Cry34Ac1 (№ доступа AAG50118); Cry34Ac2 (№ доступа AAK64562); Cry34Ac3 (№ доступа AAT29029); Cry34Ba1 (№ доступа AAK64565); Cry34Ba2 (№ доступа AAT29033); Cry34Ba3 (№ доступа AAT29031); Cry35Aa1 (№ доступа AAG50342); Cry35Aa2 (№ доступа AAK64561); Cry35Aa3 (№ доступа AAT29028); Cry35Aa4 (№ доступа AAT29025); Cry35Ab1 (№ доступа AAG41672); Cry35Ab2 (№ доступа AAK64563); Cry35Ab3 (№ доступа AY536891); Cry35Ac1 (№ доступа AAG50117); Cry35Ba1 (№ доступа AAK64566); Cry35Ba2 (№ доступа AAT29027); Cry35Ba3 (№ доступа AAT29026); Cry36Aa1 (№ доступа AAK64558); Cry37Aa1 (№ доступа AAF76376 ); Cry38Aa1 (№ доступа AAK64559); Cry39Aa1 (№ доступа BAB72016); Cry40Aa1 (№ доступа BAB72018); Cry40Ba1 (№ доступа BAC77648); Cry40Ca1 (№ доступа EU381045); Cry40Da1 (№ доступа ACF15199); Cry41Aa1 (№ доступа BAD35157); Cry41Ab1 (№ доступа BAD35163); Cry41Ba1 (№ доступа HM461871); Cry41Ba2 (№ доступа ZP_04099652); Cry42Aa1 (№ доступа BAD35166); Cry43Aa1 (№ доступа BAD15301); Cry43Aa2 (№ доступа BAD95474 ); Cry43Ba1 (№ доступа BAD15303); Cry43Ca1 (№ доступа KC156676); Cry43Cb1 (№ доступа KC156695); Cry43Cc1 (№ доступа KC156696); Cry43-подобный (№ доступа BAD15305); Cry44Aa (№ доступа BAD08532); Cry45Aa (№ доступа BAD22577); Cry46Aa (№ доступа BAC79010); Cry46Aa2 (№ доступа BAG68906); Cry46Ab (№ доступа BAD35170); Cry47Aa (№ доступа AAY24695); Cry48Aa (№ доступа CAJ18351); Cry48Aa2 (№ доступа CAJ86545); Cry48Aa3 (№ доступа CAJ86546 ); Cry48Ab (№ доступа CAJ86548); Cry48Ab2 (№ доступа CAJ86549); Cry49Aa (№ доступа CAH56541); Cry49Aa2 (№ доступа CAJ86541); Cry49Aa3 (№ доступа CAJ86543); Cry49Aa4 (№ доступа CAJ86544); Cry49Ab1 (№ доступа CAJ86542); Cry50Aa1 (№ доступа BAE86999); Cry50Ba1 (№ доступа GU446675); Cry50Ba2 (№ доступа GU446676); Cry51Aa1 (№ доступа ABI14444); Cry51Aa2 (№ доступа GU570697); Cry52Aa1 (№ доступа EF613489); Cry52Ba1 (№ доступа FJ361760); Cry53Aa1 (№ доступа EF633476); Cry53Ab1 (№ доступа FJ361759); Cry54Aa1 (№ доступа ACA52194); Cry54Aa2 (№ доступа GQ140349); Cry54Ba1 (№ доступа GU446677); Cry55Aa1 (№ доступа ABW88932); Cry54Ab1 (№ доступа JQ916908); Cry55Aa2 (№ доступа AAE33526); Cry56Aa1 (№ доступа ACU57499); Cry56Aa2 (№ доступа GQ483512); Cry56Aa3 (№ доступа JX025567); Cry57Aa1 (№ доступа ANC87261); Cry58Aa1 (№ доступа ANC87260); Cry59Ba1 (№ доступа JN790647); Cry59Aa1 (№ доступа ACR43758); Cry60Aa1 (№ доступа ACU24782); Cry60Aa2 (№ доступа EAO57254); Cry60Aa3 (№ доступа EEM99278); Cry60Ba1 (№ доступа GU810818); Cry60Ba2 (№ доступа EAO57253); Cry60Ba3 (№ доступа EEM99279); Cry61Aa1 (№ доступа HM035087); Cry61Aa2 (№ доступа HM132125); Cry61Aa3 (№ доступа EEM19308); Cry62Aa1 (№ доступа HM054509); Cry63Aa1 (№ доступа BAI44028); Cry64Aa1 (№ доступа BAJ05397); Cry65Aa1 (№ доступа HM461868); Cry65Aa2 (№ доступа ZP_04123838); Cry66Aa1 (№ доступа HM485581); Cry66Aa2 (№ доступа ZP_04099945); Cry67Aa1 (№ доступа HM485582); Cry67Aa2 (№ доступа ZP_04148882); Cry68Aa1 (№ доступа HQ113114); Cry69Aa1 (№ доступа HQ401006); Cry69Aa2 (№ доступа JQ821388); Cry69Ab1 (№ доступа JN209957); Cry70Aa1 (№ доступа JN646781); Cry70Ba1 (№ доступа ADO51070); Cry70Bb1 (№ доступа EEL67276); Cry71Aa1 (№ доступа JX025568); Cry72Aa1 (№ доступа JX025569).
Примеры δ-эндотоксинов также включают без ограничения белки Cry1A из патентов США №№ 5880275 и 7858849; токсин DIG-3 или DIG-11 (варианты белков cry с N-терминальной делецией α-спирали 1 и/или α-спирали 2, такие как Cry1A) из патентов США №№ 8304604 и 8304605, Cry1B из заявки на выдачу патента США с серийным номером 10/525318; Cry1C из патента США № 6033874; Cry1F из патентов США №№ 5188960, 6218188; химеры Cry1A/F из патентов США №№ 7070982; 6962705 и 6713063; белок Cry2, такой как белок Cry2Ab из патента США № 7064249); белок Cry3A, в том числе без ограничения разработанный гибридный инсектицидный белок (eHIP), созданный путем слияния уникальных комбинаций вариабельных участков и консервативных блоков по меньшей мере двух различных белков Cry (публикация заявки на выдачу патента США №2010/0017914); белок Cry4; белок Cry5; белок Cry6; белки Cry8 из патентов США №№ 7329736, 7449552, 7803943, 7476781, 7105332, 7378499 и 7462760; белок Cry9, такой как представители семейств Cry9A, Cry9B, Cry9C, Cry9D, Cry9E и Cry9F; белок Cry15 из Naimov, et al., (2008) Applied and Environmental Microbiology 74:7145-7151; белок Cry22, белок Cry34Ab1 из патентов США №№ 6127180, 6624145 и 6340593; белки CryET33 и CryET34 из патентов США №№ 6248535, 6326351, 6399330, 6949626, 7385107 и 7504229; гомологи CryET33 и CryET34 из публикации заявки на выдачу патента США №№ 2006/0191034, 2012/0278954 и публикации согласно PCT номер WO 2012/139004; белок Cry35Ab1 из патентов США №№ 6083499, 6548291 и 6340593; белок Cry46, белок Cry 51, бинарный токсин Cry; TIC901 или родственный токсин; TIC807 из US 2008/0295207; ET29, ET37, TIC809, TIC810, TIC812, TIC127, TIC128 из публикации согласно PCT US 2006/033867; TIC807 из US2040194351, токсины TIC853 из патента США № 8513494, AXMI-027, AXMI-036 и AXMI-038 из патента США № 8236757; AXMI-031, AXMI-039, AXMI-040, AXMI-049 из US7923602; AXMI-018, AXMI-020 и AXMI-021 из WO 2006/083891; AXMI-010 из WO 2005/038032; AXMI-003 из WO 2005/021585; AXMI-008 из US 2004/0250311; AXMI-006 из US 2004/0216186; AXMI-007 из US 2004/0210965; AXMI-009 из US 2004/0210964; AXMI-014 из US 2004/0197917; AXMI-004 из US 2004/0197916; AXMI-028 и AXMI-029 из WO 2006/119457; AXMI-007, AXMI-008, AXMI-0080rf2, AXMI-009, AXMI-014 и AXMI-004 из WO 2004/074462; AXMI-150 из патента США № 8084416; AXMI-205 из US20110023184; AXMI-011, AXMI-012, AXMI-013, AXMI-015, AXMI-019, AXMI-044, AXMI-037, AXMI-043, AXMI-033, AXMI-034, AXMI-022, AXMI-023, AXMI-041, AXMI-063 и AXMI-064 из US 2011/0263488; AXMI-R1 и родственные белки из US 2010/0197592; AXMI221Z, AXMI222z, AXMI223z, AXMI224z и AXMI225z из WO 2011/103248; AXMI218, AXMI219, AXMI220, AXMI226, AXMI227, AXMI228, AXMI229, AXMI230 и AXMI231 из WO11/103247; AXMI-115, AXMI-113, AXMI-005, AXMI-163 и AXMI-184 из патента США № 8334431; AXMI-001, AXMI-002, AXMI-030, AXMI-035 и AXMI-045 из US 2010/0298211; AXMI-066 и AXMI-076 из US20090144852; AXMI128, AXMI130, AXMI131, AXMI133, AXMI140, AXMI141, AXMI142, AXMI143, AXMI144, AXMI146, AXMI148, AXMI149, AXMI152, AXMI153, AXMI154, AXMI155, AXMI156, AXMI157, AXMI158, AXMI162, AXMI165, AXMI166, AXMI167, AXMI168, AXMI169, AXMI170, AXMI171, AXMI172, AXMI173, AXMI174, AXMI175, AXMI176, AXMI177, AXMI178, AXMI179, AXMI180, AXMI181, AXMI182, AXMI185, AXMI186, AXMI187, AXMI188, AXMI189 из патента США № 8318900; AXMI079, AXMI080, AXMI081, AXMI082, AXMI091, AXMI092, AXMI096, AXMI097, AXMI098, AXMI099, AXMI100, AXMI101, AXMI102, AXMI103, AXMI104, AXMI107, AXMI108, AXMI109, AXMI110, AXMI111, AXMI112, AXMI114, AXMI116, AXMI117, AXMI118, AXMI119, AXMI120, AXMI121, AXMI122, AXMI123, AXMI124, AXMI1257, AXMI1268, AXMI127, AXMI129, AXMI164, AXMI151, AXMI161, AXMI183, AXMI132, AXMI138, AXMI137 из US 2010/0005543; AXMI221 из US2014/0196175; AXMI345 из US 20140373195 и белки Cry, такие как Cry1A и Cry3A, имеющие модифицированные протеолитические сайты, из патента США № 8319019; а также белок-токсин Cry1Ac, Cry2Aa и Cry1Ca из штамма VBTS 2528 Bacillus thuringiensis из публикации заявки на выдачу патента США № 2011/0064710. Другие белки Cry хорошо известны специалисту в данной области (см. Crickmore, et al., "Bacillus thuringiensis toxin nomenclature" (2011), на сайте по адресу lifesci.sussex.ac.uk/home/Neil_Crickmore/Bt/intro.html, доступ к которому можно получить через всемирную сеть Интернет с использованием префикса "www"). Инсектицидная активность белков Cry хорошо известна специалисту в данной области (для обзора см. van Frannkenhuyzen, (2009) J. Invert. Path. 101:1-16). Применение белков Cry в качестве признаков трансгенного растения хорошо известно специалисту в данной области, и трансгенные растения с Cry, в том числе без ограничения с Cry1Ac, Cry1Ac+Cry2Ab, Cry1Ab, Cry1A.105, Cry1F, Cry1Fa2, Cry1F+Cry1Ac, Cry2Ab, Cry3A, mCry3A, Cry3Bb1, Cry34Ab1, Cry35Ab1, Vip3A, mCry3A, Cry9c и CBI-Bt были разрешены контролирующими органами (см. Sanahuja, (2011) Plant Biotech Journal 9:283-300 и CERA (2010), базу данных ГМ растений центра по оценке риска для окружающей среды (CERA), Исследовательский фонд ILSI, город Вашингтон, на сайте по адресу cera-gmc.org/index.php?action=gm_crop_database, доступ к которому можно получить через всемирную сеть Интернет с использованием префикса "www"). В растениях также может экспрессироваться два или более пестицидных белков, хорошо известных специалисту в данной области, таких как Vip3Ab и Cry1Fa (US2012/0317682), Cry1BE и Cry1F (US2012/0311746), Cry1CA и Cry1AB (US2012/0311745), Cry1F и CryCa (US2012/0317681), Cry1DA и Cry1BE (US2012/0331590), Cry1DA и Cry1Fa (US2012/0331589), Cry1AB и Cry1BE (US2012/0324606), а также Cry1Fa и Cry2Aa, Cry1I или Cry1E (US2012/0324605). Пестицидные белки также включают инсектицидные липазы, в том числе гидролазы омыляемых липидов из патента США № 7491869 и холестерин-оксидазы, например из Streptomyces (Purcell et al. (1993) Biochem Biophys Res Commun 15:1406-1413). Пестицидные белки также включают токсины VIP (вегетативные инсектицидные белки) из патентов США №№ 5877012, 6107279, 6137033, 7244820, 7615686 и 8237020 и т. п. Другие белки VIP хорошо известны специалисту в данной области (см. сайт по адресу lifesci.sussex.ac.uk/home/Neil_Crickmore/Bt/vip.html, доступ к которому можно получить через всемирную сеть Интернет с использованием префикса "www"). Пестицидные белки также включают белки токсинового комплекса (TC), которые можно получить из организмов, таких как Xenorhabdus, Photorhabdus и Paenibacillus (см. патенты США №№ 7491698 и 8084418). Некоторые TC-белки обладают "самостоятельной" инсектицидной активностью, а другие TC-белки повышают активность самостоятельных токсинов, вырабатываемых тем же данным организмом. Токсичность "самостоятельного" TC-белка (например, из Photorhabdus, Xenorhabdus или Paenibacillus) может повышаться с помощью одного или нескольких TC-белков-"усилителей", полученных из организма-источника из другого рода. Существуют три основных типа TC-белков. Как изложено в данном документе, белки класса A ("белок A") представляют собой самостоятельные токсины. Белки класса B ("белок B") и белки класса C ("белок C") повышают токсичность белков класса A. Примерами белков класса A являются TcbA, TcdA, XptA1 и XptA2. Примерами белков класса B являются TcaC, TcdB, XptB1Xb и XptC1Wi. Примерами белков класса C являются TccC, XptC1Xb и XptB1Wi. Пестицидные белки также включают белки яда пауков, змей и скорпионов. Примеры пептидов яда пауков включают без ограничения пептиды ликотоксин-1 и его мутантные формы (патент США № 8334366).
(C) Полинуклеотид, кодирующий специфичный в отношении насекомых гормон или феромон, такой как экдистероид и ювенильный гормон, его вариант, миметик на его основе или его антагонист или агонист. См., например, раскрытие Hammock, et al., (1990) Nature 344:458 бакуловирусной экспрессии клонированной эстеразы ювенильного гормона, инактиватора ювенильного гормона.
(D) Полинуклеотид, кодирующий специфичный в отношении насекомых пептид, который при экспрессии нарушает физиологию насекомого, на которого оказывают воздействие. Например, см. раскрытия Regan, (1994) J. Biol. Chem. 269:9 (экспрессионное клонирование приводит к ДНК, кодирующей рецептор диуретического гормона насекомых); Pratt, et al., (1989) Biochem. Biophys. Res. Comm. 163:1243 (аллостатин, обнаруженный у Diploptera puntata); Chattopadhyay, et al., (2004) Critical Reviews in Microbiology 30(1):33-54; Zjawiony, (2004) J Nat Prod 67(2):300-310; Carlini and Grossi-de-Sa, (2002) Toxicon 40(11):1515-1539; Ussuf, et al., (2001) Curr Sci. 80(7):847-853 и Vasconcelos and Oliveira, (2004) Toxicon 44(4):385-403. См. также патент США № 5266317, Tomalski, et al., в котором раскрыты гены, кодирующие специфичные для насекомых токсины.
(E) Полинуклеотид, кодирующий фермент, ответственный за гипернакопление монотерпена, сесквитерпена, стероида, гидроксамовой кислоты, производного фенилпропаноида или другой небелковой молекулы с инсектицидной активностью, в том числе без ограничения с 7-эпизингиберенсинтазой (публикация патента США № 20140157456).
(F) Полинуклеотид, кодирующий фермент, вовлеченный в модификацию, в том числе посттрансляционную модификацию, биологически активной молекулы; например, гликолитический фермент, протеолитический фермент, липолитический фермент, нуклеаза, циклаза, трансаминаза, эстераза, гидролаза, фосфатаза, киназа, фосфорилаза, полимераза, эластаза, хитиназа и глюканаза, либо натуральные, либо синтетические. См. заявку согласно PCT WO 1993/02197 на имя Scott, et al., в которой раскрыта нуклеотидная последовательность гена каллазы. Молекулы ДНК, которые содержат последовательности, кодирующие хитиназу, можно получить, например, из ATCC® под номерами доступа 39637 и 67152. См. также Kramer, et al., (1993) Insect Biochem. Molec. Biol. 23:691, в которой содержатся сведения о нуклеотидной последовательности кДНК, кодирующей хитиназу табачного бражника, и Kawalleck, et al., (1993) Plant Molec. Biol. 21:673, в которой предложена нуклеотидная последовательность гена полиубиквитина ubi4-2 петрушки, и патенты США №№ 6563020; 7145060 и 7087810.
(G) Полинуклеотид, кодирующий молекулу, которая стимулирует сигнальную трансдукцию. Например, см. раскрытие в Botella, et al., (1994) Plant Molec. Biol. 24:757, каcающееся нуклеотидных последовательностей клонов кДНК кальмодулина из фасоли золотистой, и Griess, et al., (1994) Plant Physiol. 104:1467, в которой представлена нуклеотидная последовательность клона кДНК кальмодулина маиса.
(H) Полинуклеотид, кодирующий пептид с гидрофобным моментом. См. заявку согласно PCT WO 1995/16776 и патент США № 5580852, раскрывающие пептидные производные тахиплезина, которые ингибируют грибковые патогены растений, и заявку согласно PCT WO 1995/18855, а также патент США № 5607914 (в котором раскрыты синтетические противомикробные пептиды, которые придают устойчивость к заболеваниям).
(I) Полинуклеотид, кодирующий мембранную пермеазу, каналообразователь или блокатор каналов. Например, см. раскрытие в Jaynes, et al., (1993) Plant Sci. 89:43 гетерологичной экспрессии аналога цекропин-бета литического пептида для придания трансгенным растениям табака устойчивости к Pseudomonas solanacearum.
(J) Ген, кодирующий вирусный инвазивный белок или сложный токсин, полученный из него. Например, накопление белков вирусной оболочки в трансформированных растительных клетках придает устойчивость к вирусной инфекции и/или развитию заболевания, вызванного вирусом, из которого получен ген белка оболочки, а также родственными вирусами. См. Beachy, et al., (1990) Ann. Rev. Phytopathol. 28:451. Устойчивость, опосредованную белком оболочки, придавали трансформированным растениям в отношении вируса мозаики люцерны, вируса мозаики огурца, вируса полосатости табака, вируса X картофеля, вируса Y картофеля, вируса гравировки табака, вируса погремковости табака и вируса табачной мозаики. Там же.
(K) Ген, кодирующий антитело, специфичное в отношении насекомого, или полученный из него иммунотоксин. Таким образом, антитело, нацеленное на критическую метаболическую функцию в кишке насекомого, будет инактивировать фермент, на который оказывается воздействие, с уничтожением насекомого. См. также Taylor, et al., Abstract #497, SEVENTH INT′L SYMPOSIUM ON MOLECULAR PLANT-MICROBE INTERACTIONS (Эдинбург, Шотландия, 1994) (ферментативная инактивация в трансгенном табаке посредством выработки одноцепочечных фрагментов антител).
(L) Ген, кодирующий антитело, специфичное в отношении вируса. См., например, Tavladoraki, et al., (1993) Nature 366:469, где показано, что трансгенные растения, экспрессирующие гены рекомбинантного антитела, защищены от поражения вирусом.
(M) Полинуклеотид, кодирующий белок, останавливающий развитие, вырабатываемый в природе патогеном или паразитом. Таким образом, грибные эндо-альфа-1,4-D-полигалактуроназы облегчают грибную колонизацию и высвобождение питательных веществ для растений путем солюбилизации гомо-альфа-1,4-D-галактуроназы клеточной стенки растения. См. Lamb, et al., (1992) Bio/Technology 10:1436. Клонирование и определение характеристик гена, который кодирует белок, ингибирующий эндополигалактуроназу бобов, описан в Toubart, et al., (1992) Plant J. 2:367.
(N) Полинуклеотид, кодирующий белок, останавливающий развитие, вырабатываемый в природе растением. Например, Logemann, et al., (1992) Bio/Technology 10:305 показали, что трансгенные растения, экспрессирующие ген ячменя, инактивирующий рибосомы, обладали повышенной устойчивостью к грибковым заболеваниям.
(O) Гены, вовлеченные в реакцию системной приобретенной устойчивости (SAR) и/или гены, связанные с патогенезом. Briggs, (1995) Current Biology 5(2), Pieterse and Van Loon, (2004) Curr. Opin. Plant Bio. 7(4):456-64, и Somssich, (2003) Cell 113(7):815-6.
(P) Противогрибковые гены (Cornelissen and Melchers, (1993) Pl. Physiol. 101:709-712, и Parijs, et al., (1991) Planta 183:258-264, и Bushnell, et al., (1998) Can. J. of Plant Path. 20(2):137-149. Также см. публикации заявок на выдачу патентов США с серийными №№ 09/950933; 11/619645; 11/657710; 11/748994; 11/774121 и патенты США №№ 6891085 и 7306946. Киназы, подобные рецептору LysM, для распознавания фрагментов хитина, как первая стадия в защитной реакции растения в отношении грибков-патогенов (US 2012/0110696).
(Q) Гены системы детоксикации, такие как кодирующие фумонизин, беауверицин, монилиформин и зеараленон и их структурно родственные производные. Например, см. патенты США №№ 5716820; 5792931; 5798255; 5846812; 6083736; 6538177; 6388171 и 6812380.
(R) Полинуклеотид, кодирующий цистатин и ингибиторы цистеинпротеиназы. См. патент США № 7205453.
(S) Гены дефензинов. См. WO 2003/000863 и патенты США №№ 6911577; 6855865; 6777592 и 7238781.
(T) Гены, обеспечивающие устойчивость к нематодам. См., например, заявку согласно PCT WO 1996/30517; заявку согласно PCT WO 1993/19181, WO 2003/033651 и Urwin, et al., (1998) Planta 204:472-479, Williamson, (1999) Curr Opin Plant Bio. 2(4):327-31; патенты США №№ 6284948 и 7301069 и гены miR164 (WO 2012/058266).
(U) Гены, которые обеспечивают устойчивость к корневой гнили, вызываемой Phytophthora, такие как Rps 1, Rps 1-a, Rps 1-b, Rps 1-c, Rps 1-d, Rps 1-e, Rps 1-k, Rps 2, Rps 3-a, Rps 3-b, Rps 3-c, Rps 4, Rps 5, Rps 6, Rps 7 и другие гены Rps. См., например, Shoemaker, et al., Phytophthora Root Rot Resistance Gene Mapping in Soybean, Plant Genome IV Conference, San Diego, Calif. (1995).
(V) Гены, которые обеспечивают устойчивость к бурой стеблевой гнили, такие как описаны в патенте США № 5689035, включенном с помощью ссылки с этой целью.
(W) Гены, которые обеспечивают устойчивость к Colletotrichum, такие как описанные в публикации заявки на выдачу патента США US 2009/0035765, включенной с помощью ссылки с этой целью. Они включают локус Rcg, который можно использовать как конверсию одного локуса.
2. Трансгены, которые обеспечивают устойчивость к гербициду, например приведенные ниже
(A) Полинуклеотид, кодирующий устойчивость к гербициду, который ингибирует конус нарастания или меристему, такому как имидазолинон или сульфонилмочевина. Иллюстративные гены в этой категории кодируют мутантный фермент ALS и AHAS, как описано, например, соответственно у Lee, et al., (1988) EMBO J. 7:1241 и Miki, et al., (1990) Theor. Appl. Genet. 80:449. См. также патенты США №№ 5605011; 5013659; 5141870; 5767361; 5731180; 5304732; 4761373; 5331107; 5928937 и 5378824; заявку на выдачу патента США с серийным № 11/683737 и публикацию международной заявки WO 1996/33270.
(B) Полинуклеотид, кодирующий белок для устойчивости к глифосату (устойчивость придают мутантные гены 5-енолприрувил-3-фосфошикиматсинтазы (EPSP) и aroA соответственно), и другим фосфоновым соединениям, таким как глуфосинат (гены фосфинотрицинацетилтрансферазы (PAT) и фосфинотрицинацетилтрансферазы (bar) Streptomyces hygroscopicus), и пиридинокси- или феноксипропионовым кислотам и циклогексонам (гены, кодирующие ингибитор ACCазы). См., например, патент США № 4940835, Shah, et al., в котором раскрыта нуклеотидная последовательность формы EPSPS, которая может придавать устойчивость к глифосату. В патенте США № 5627061, Barry, et al., также описаны гены, кодирующие ферменты EPSPS. См. также патенты США №№ 6566587; 6338961; 6248876 B1; 6040497; 5804425; 5633435; 5145783; 4971908; 5312910; 5188642; 5094945, 4940835; 5866775; 6225114 B1; 6130366; 5310667; 4535060; 4769061; 5633448; 5510471; Re. 36449; RE 37287 E и 5491288 и публикации международных заявок EP 1173580; WO 2001/66704; EP 1173581 и EP 1173582, которые включены в данный документ с помощью ссылки для данной цели. Устойчивость к глифосату также придается растениям, которые экспрессируют ген, кодирующий фермент глифосат-оксидоредуктазу, как более подробно описано в патентах США №№ 5776760 и 5463175, которые включены в данный документ для данной цели с помощью ссылки. Кроме того, устойчивость к глифосату может придаваться растениям посредством сверхэкспрессии генов, кодирующих глифосат-N-ацетилтрансферазу. См., например, патенты США №№ 7462481; 7405074 и публикацию заявки на выдачу патента США № US 2008/0234130. Молекулу ДНК, кодирующую мутантный ген aroA, можно получить под номером доступа ATCC® 39256, а нуклеотидная последовательность мутантного гена раскрыта в патенте США № 4769061, выданном Comai. В заявке EP № 0333033, выданном Kumada, et al. и патенте США № 4975374, выданном Goodman, et al., раскрыты нуклеотидные последовательности генов глутаминсинтетазы, придающие устойчивость к гербицидам, таким как L-фосфинотрицин. Нуклеотидная последовательность гена фосфинотрицин-ацетилтрансферазы представлена в заявках EP №№ 0242246 и 0242236, Leemans, et al.; De Greef, et al., (1989) Bio/Technology 7:61, где описано получение трансгенных растений, которые экспрессируют химерные гены bar, кодирующие фосфинотрицинацетилтрансферазную активность. См. также патенты США №№ 5969213; 5489520; 5550318; 5874265; 5919675; 5561236; 5648477; 5646024; 6177616 B1 и 5879903, которые включены в данный документ для данной цели с помощью ссылки. Иллюстративные гены, придающие устойчивость к феноксипропионовым кислотам и циклогексонам, таким как сетоксидим и галоксифоп, представляют собой гены Acc1-S1, Acc1-S2 и Acc1-S3, описанные у Marshall, et al., (1992) Theor. Appl. Genet. 83:435.
(C) Полинуклеотид, кодирующий белок, обеспечивающий устойчивость к гербициду, который ингибирует фотосинтез, такому как триазин (гены psbA и gs+) и бензонитрил (ген нитрилазы). Przibilla, et al., (1991) Plant Cell 3:169 описывают трансформацию Chlamydomonas с помощью плазмид, кодирующих мутантные гены psbA. Нуклеотидные последовательности генов нитрилазы раскрыты в патенте США № 4810648, выданном Stalker, и молекулы ДНК, содержащие эти гены, доступны под номерами доступа ATCC® 53435, 67441 и 67442. Клонирование и экспрессия ДНК, кодирующей глутатион-S-трансферазу, описаны у Hayes, et al., (1992) Biochem. J. 285:173.
(D) В ряд растений был введен полинуклеотид, кодирующий белок, обеспечивающий устойчивость к синтазе ацетогидроксикислот, которая, как было обнаружено, делает растения, которые экспрессируют данный фермент, устойчивыми к нескольким типам гербицидов (см., например, Hattori, et al., (1995) Mol Gen Genet. 246:419). Другие гены, которые придают устойчивость к гербицидам, включают в себя ген, кодирующий химерный белок цитохрома P4507A1 крысы и NADPH-цитохром-P450-оксидоредуктазы дрожжей (Shiota, et al., (1994) Plant Physiol 106:17), гены, кодирующие глутатионредуктазу и супероксиддисмутазу (Aono, et al., (1995) Plant Cell Physiol 36:1687), и гены, кодирующие различные фосфотрансферазы (Datta, et al., (1992) Plant Mol Biol 20:619).
(E) Полинуклеотид, кодирующий устойчивость к гербициду, целенаправленно воздействующему на протопорфириногеноксидазу (protox), которая необходима для выработки хлорофилла. Фермент protox служит в качестве мишени для ряда гербицидных соединений. Эти гербициды также ингибируют рост всех присутствующих различных видов растений, вызывая их полное разрушение. Разработка растений, характеризующихся измененной protox-активностью, которые устойчивы к этим гербицидам, описана в патентах США №№ 6288306 B1; 6282837 B1 и 5767373 и публикации международной заявки WO 2001/12825.
(F) Ген aad-1 (изначально из Sphingobium herbicidovorans) кодирует белок арилоксиалканоатдиоксигеназу (AAD-1). Признак обеспечивает переносимость гербицидов на основе 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты и арилоксифеноксипропионата (обычно называемых "фоп"-гербициды, таких как квизалофоп). Ген aad-1, как таковой, обеспечивающий переносимость гербицида у растений, впервые был раскрыт в WO 2005/107437 (см. также US 2009/0093366). Ген aad-12, полученный от Delftia acidovorans, который кодирует белок арилоксиалканоатдиоксигеназу (AAD-12), приводящий к переносимости гербицидов на основе 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты и пиридилоксиацетата путем инактивации некоторых гербицидов с арилоксиалканоатным фрагментом, в том числе фенокси-ауксина (например, 2,4-D, MCPA), а также видов пиридилокси-ауксина (например, флуроксипира, триклопира).
(G) Полинуклеотид, кодирующий устойчивую к гербициду дикамба-монооксигеназу, раскрытый в публикации заявки на выдачу патента США 2003/0135879, для придания переносимости дикамбы.
(H) Полинуклеотидная молекула, кодирующая бромоксинилнитрилазу (Bxn), раскрытая в патенте США № 4810648, для придания переносимости бромоксинила.
(I) Полинуклеотидная молекула, кодирующая фитоен (crtl), описанный у Misawa, et al., (1993) Plant J. 4:833-840 и у Misawa, et al., (1994) Plant J. 6:481-489, для переносимости норфлуразона.
3. Трансгены, которые обеспечивают измененные характеристики зерна или вносят в них вклад
Например.
(A) Измененное содержание жирных кислот, например с помощью приведенного ниже.
(1) Подавления стеароил-ACP для повышения содержания стеариновой кислоты в растении. См. Knultzon, et al., (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:2624 и WO 1999/64579 (Genes to Alter Lipid Profiles in Corn).
(2) Повышения содержания олеиновой кислоты посредством модификации гена FAD-2 и/или снижения содержания линоленовой кислоты посредством модификации гена FAD-3 (см. патенты США №№ 6063947; 6323392; 6372965 и WO 1993/11245).
(3) Изменения содержания конъюгированных линоленовой или линолевой кислоты, как, например, в WO 2001/12800.
(4) Изменения LEC1, AGP, Dek1, Superal1, mi1 ps, различных генов Ipa, таких как Ipa1, Ipa3, hpt или hggt. Например, см. WO 2002/42424, WO 1998/22604, WO 2003/011015, WO 2002/057439, WO 2003/011015, патенты США №№ 6423886, 6197561, 6825397 и публикации заявок на выдачу патентов США с номерами US 2003/0079247, US 2003/0204870 и Rivera-Madrid, et al., (1995) Proc. Natl. Acad. Sci. 92:5620-5624.
(5) Генов, кодирующих дельта-8-десатуразу для получения длинноцепочечных полиненасыщенных жирных кислот (патенты США №№ 8058571 и 8338152), дельта-9 десатуразу для снижения содержания насыщенных жиров (патент США № 8063269), Δ6-десатуразу примулы для улучшения профилей омега-3-жирных кислот.
(6) Выделенных нуклеиновых кислот и белков, ассоциированных с регуляцией метаболизма липидов и сахаров, в частности белка липидного метаболизма (LMP), применяемых в способах получения трансгенных растений и модуляции уровней запасных веществ семени, в том числе липидов, жирных кислот, видов крахмала или запасных белков семени, и их применения в способах модуляции размера семени, количества семян, веса семян, длины корней и размера листьев растений (EP 2404499).
(7) Изменения экспрессии белка с высоким уровнем экспрессии, индуцируемого сахарами 2 (HSI2), в растении для повышения или снижения экспрессии HSI2 в растении. Повышение экспрессии HSI2 повышает содержание масла, тогда как понижение экспрессии HSI2 снижает восприимчивость к абсцизовой кислоте и/или повышает устойчивость к засухе (публикация заявки на выдачу патента США № 2012/0066794).
(8) Экспрессии цитохрома b5 (Cb5) отдельно или вместе с FAD2 для модуляции содержания масла в семени растения, в частности для повышения уровней омега-3-жирных кислот и улучшения соотношения омега-6- и омега-3-жирных кислот (публикация заявки на выдачу патента США № 2011/0191904).
(9) Молекул нуклеиновой кислоты, кодирующих wrinkled1-подобные полипептиды для модуляции метаболизма сахаров (патент США № 8217223).
(B) Измененное содержание фосфора, например с помощью приведенного ниже.
(1) Введения гена, кодирующего фитазу, при этом будет улучшаться распад фитата, что приводит к большему количеству свободного фосфата в трансформированном растении. Например, см. Van Hartingsveldt, et al., (1993) Gene 127:87 относительно раскрытия нуклеотидной последовательности гена фитазы Aspergillus niger.
(2) Модуляции гена, который снижает содержание фитата. У маиса это можно осуществлять, например, с помощью клонирования, а затем повторного введения ДНК, ассоциированной с одним или несколькими аллелями, такими как аллели LPA, обнаруженные у мутантов маиса, характеризующихся низкими уровнями фитиновой кислоты, как например в WO 2005/113778, и/или посредством изменения активности инозитолкиназы, как в WO 2002/059324, публикации заявки на выдачу патента США № 2003/0009011, WO 2003/027243, публикации заявки на выдачу патента США № 2003/0079247, WO 1999/05298, патенте США № 6197561, патенте США № 6291224, патенте США № 6391348, WO 2002/059324, публикации заявки на выдачу патента США № 2003/0079247, WO 1998/45448, WO 1999/55882, WO 2001/04147.
(C) Измененные углеводы, на которые воздействовали, например, путем изменения гена, кодирующего фермент, который воздействует на паттерн ветвления крахмала, или гена, изменяющего тиоредоксин, такого как NTR и/или TRX (см. патент США № 6531648, который включен для данной цели с помощью ссылки), и/или нокаута гамма-зеина или использования мутанта, такого как cs27, или TUSC27, или en27 (см. патент США № 6858778 и публикацию заявки на выдачу патента США № 2005/0160488, публикацию заявки на выдачу патента США № 2005/0204418, которые включены для данной цели с помощью ссылки). См. Shiroza, et al., (1988) J. Bacteriol. 170:810 (нуклеотидная последовательность мутантного гена фруктозилтрансферазы Streptococcus), Steinmetz, et al., (1985) Mol. Gen. Genet. 200:220 (нуклеотидная последовательность гена левансахаразы Bacillus subtilis), Pen, et al., (1992) Bio/Technology 10:292 (получение трансгенных растений, которые экспрессируют альфа-амилазу Bacillus licheniformis), Elliot, et al., (1993) Plant Molec. Biol. 21:515 (нуклеотидные последовательности генов инвертазы томата), Søgaard, et al., (1993) J. Biol. Chem. 268:22480 (сайт-направленный мутагенез гена альфа-амилазы ячменя) и Fisher, et al., (1993) Plant Physiol. 102:1045 (фермент II ветвления крахмала эндосперма маиса), WO 1999/10498 (улучшенная усвояемость и/или извлечение крахмала путем модификации UDP-D-ксилоза 4-эпимеразы, Fragile 1 и 2, Ref1, HCHL, C4H), патент США № 6232529 (способ получения семян с высоким содержанием масла путем модификации уровней крахмала (AGP)). Гены модификации жирных кислот, упомянутые в данном документе, можно применять также для воздействия на содержание и/или состав крахмала благодаря взаимосвязи путей метаболизма крахмала и масла.
(D) Измененное содержание или состав антиоксидантов, как, например, изменение токоферола или токотриенолов. Например, см. патент США № 6787683, публикацию заявки на выдачу патента США № 2004/0034886 и WO 2000/68393, предусматривающие манипуляцию с уровнями антиоксидантов, и WO 2003/082899, благодаря изменению гомогентизатгеранилгеранилтрансферазы (hggt).
(E) Измененное содержание незаменимых аминокислот в семени. Например, см. патент США № 6127600 (способ повышения накопления незаменимых аминокислот в семенах), патент США № 6080913 (бинарные способы повышения накопления незаменимых аминокислот в семенах), патент США № 5990389 (высокое содержание лизина), WO 1999/40209 (изменение аминокислотного состава семян), WO 1999/29882 (способы изменения аминокислотного состава белков), патент США № 5850016 (изменение аминокислотного состава семян), WO 1998/20133 (белки с повышенными уровнями незаменимых аминокислот), патент США № 5885802 (высокое содержание метионина), патент США № 5885801 (высокое содержание треонина), патент США № 6664445 (растительные ферменты биосинтеза аминокислот), патент США № 6459019 (повышенное содержание лизина и треонина), патент США № 6441274 (бета-субъединица растительной триптофансинтазы), патент США № 6346403 (ферменты метаболизма метионина), патент США № 5939599 (высокое содержание серы), патент США № 5912414 (повышенное содержание метионина), WO 1998/56935 (растительные ферменты биосинтеза аминокислот), WO 1998/45458 (разработанный с помощью генной инженерии белок семени, имеющий более высокую процентную долю незаменимых аминокислот), WO 1998/42831 (повышенное содержание лизина), патент США № 5633436 (повышение содержания серосодержащих аминокислот), патент США № 5559223 (синтетические запасные белки с определенной структурой, содержащие программируемые уровни незаменимых аминокислот для улучшения питательной ценности растений), WO 1996/01905 (повышенное содержание треонина), WO 1995/15392 (повышенное содержание лизина), публикацию заявки на выдачу патента США № 2003/0163838, публикацию заявки на выдачу патента США № 2003/0150014, публикацию заявки на выдачу патента США № 2004/0068767, патент США № 6803498, WO 2001/79516.
4. Гены, контролирующие мужскую стерильность
Доступно несколько способов обеспечения генетической мужской стерильности, как, например, несколько мутантных генов в отдельных положениях в пределах генома, которые придают мужскую стерильность, как раскрыто в патентах США №№ 4654465 и 4727219, Brar, et al., и хромосомные транслокации, как описано Patterson в патенте США №№ 3861709 и 3710511. В дополнение к этим способам, Albertsen, et al. в патенте США № 5432068 описывают систему ядерной мужской стерильности, которая включает: идентификацию гена, который крайне важен для мужской фертильности; сайленсинг этого нативного гена, который крайне важен для мужской фертильности; удаление нативного промотора из гена, важного для мужской фертильности, и замещение его на индуцируемый промотор; вставку этого полученного с помощью генной инженерии гена обратно в растение, и таким образом создание растения, которое характеризуется мужской стерильностью, поскольку индуцируемый промотор не "включен", в результате чего ген мужской фертильности не транскрибируется. Фертильность восстанавливают посредством индуцирования или "включения" промотора, который, в свою очередь, осуществляет транскрипцию гена, обеспечивающего мужскую фертильность.
(A) Введение гена деацетилазы под управлением промотора, специфичного в отношении тапетума, и с применением химического N-Ac-PPT (WO 2001/29237).
(B) Введение различных промоторов, специфичных в отношении тычинок (WO 1992/13956, WO 1992/13957).
(C) Введение барназы и гена барстара (Paul, et al., (1992) Plant Mol. Biol. 19:611-622).
Дополнительные примеры систем и генов ядерной мужской и женской стерильности см. также в патентах США №№ 5859341; 6297426; 5478369; 5824524; 5850014 и 6265640, все из которых тем самым включены с помощью ссылки.
5. Гены, которые создают сайт для сайт-специфичной интеграции ДНК
Подразумевается введение сайтов FRT, которые можно применять в системе FLP/FRT, и/или сайтов Lox, которые можно применять в системе Cre/Loxp. Например, см. Lyznik, et al., (2003) Plant Cell Rep 21:925-932 и WO 1999/25821, которые включены в данный документ с помощью ссылки. Другие системы, которые можно применять, включают рекомбиназу Gin из фага Mu (Maeser, et al., (1991) Vicki Chandler, The Maize Handbook ch. 118 (Springer-Verlag 1994), рекомбиназу Pin из E. coli (Enomoto, et al., 1983) и систему R/RS из плазмиды pSRi (Araki, et al., 1992).
6. Гены, которые воздействуют на устойчивость к абиотическому стрессу
В том числе без ограничений на цветение, развитие початка и семени, улучшение эффективности использования азота, измененную реактивность в отношении азота, устойчивость к засухе или ее переносимость, устойчивость к холоду или его переносимость, а также устойчивость к засолению или ее переносимость и повышенную урожайность при стрессе.
(A) Например, см. WO 2000/73475, где эффективность использования воды изменена благодаря изменению содержания малата; патенты США №№ 5892009, 5965705, 5929305, 5891859, 6417428, 6664446, 6706866, 6717034, 6801104, WO 2000/060089, WO 2001/026459, WO 2001/035725, WO 2001/034726, WO 2001/035727, WO 2001/036444, WO 2001/036597, WO 2001/036598, WO 2002/015675, WO 2002/017430, WO 2002/077185, WO 2002/079403, WO 2003/013227, WO 2003/013228, WO 2003/014327, WO 2004/031349, WO 2004/076638, WO 199809521.
(B) WO 199938977, в которой описаны гены, в том числе гены CBF, и факторы транскрипции, эффективные в ослаблении отрицательных эффектов замораживания, высокого содержания солей и засухи на растения, а также обеспечивающие другие положительные эффекты в отношении фенотипа растения.
(C) Публикация заявки на выдачу патента США № 2004/0148654 и WO 2001/36596, где в растениях изменяют содержание абсцизовой кислоты, что приводит к улучшенному фенотипу растения, такому как повышенная урожайность и/или повышенная переносимость абиотического стресса.
(D) WO 2000/006341, WO 2004/090143, патенты США №№ 7531723 и 6992237, где экспрессия цитокинина модифицируется, что приводит к растениям с повышенной переносимостью стрессов, как, например, переносимостью засухи и/или повышенной урожайностью. Также см. WO 2002/02776, WO 2003/052063, JP 2002/281975, патент США № 6084153, WO 2001/64898, патент США № 6177275 и патент США № 6107547 (улучшение использования азота и измененная реактивность в отношении азота).
(E) Что касается изменения содержания этилена, см. публикацию заявки на выдачу патента США № 2004/0128719, публикацию заявки на выдачу патента США № 2003/0166197 и WO 2000/32761.
(F) Что касается растительных факторов транскрипции или транскрипционных регуляторов, связанных с реакцией на абиотический стресс, см., например, публикацию заявки на выдачу патента США № 2004/0098764 или публикацию заявки на выдачу патента США № 2004/0078852.
(G) Гены, которые повышают экспрессию вакуолярной пирофосфатазы, такие как AVP1 (патент США № 8058515), для повышенной урожайности; нуклеиновая кислота, кодирующая полипептиды HSFA4 или HSFA5 (фактор теплового шока класса A4 или A5), полипептид, подобный белку транспортера олигопептидов (OPT4-подобный); пластохрон-2-подобный (PLA2-подобный) полипептид или Wuschel-родственный гомеобокс 1-подобный (WOX1-подобный) полипептид (публикация заявки на выдачу патента США № US 2011/0283420).
(H) Подавление полинуклеотидов, кодирующих белки поли-(АДФ-рибоза)-полимеразы (PARP) для модуляции запрограммированной клеточной смерти (патент США № 8058510), для повышения мощности.
(I) Полинуклеотид, кодирующий полипептиды DTP21, для обеспечения устойчивости к засухе (публикация заявки на выдачу патента США № US 2011/0277181).
(J) Нуклеотидные последовательности, кодирующие белки ACC синтазы 3 (ACS3) для модуляции развития, модуляции реакции на стресс и модуляции переносимости стрессов (публикация заявки на выдачу патента США № US 2010/0287669).
(K) Полинуклеотиды, кодирующие белки, которые приводят к фенотипу переносимости засухи (DTP), для обеспечения устойчивости к засухе (WO 2012/058528).
(L) Гены токоферолциклазы (TC) для обеспечения переносимости засухи и засоления (публикация заявки на выдачу патента США № 2012/0272352).
(M) Белки семейства протеаз, нацеленные на CAAX-концевые аминокислоты, для придания переносимости стрессов (патент США № 8338661).
(N) Мутации в гене, кодирующем SAL1, характеризовались повышенной переносимостью стрессов, в том числе характеризовались повышенной устойчивостью к засухе (публикация заявки на выдачу патента США № 2010/0257633).
(O) Экспрессия последовательности нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид, выбранный из группы, состоящей из: полипептида GRF, RAA1-подобного полипептида, полипептида SYR, полипептида ARKL и полипептида YTP, усиливающих признаки, связанные с урожайностью (публикация заявки на выдачу патента США № 2011/0061133).
(P) Модуляция экспрессии в растении нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид трегалоза-фосфатфосфатазу (TPP) класса III для улучшения у растений признаков, связанных с урожайностью, в частности повышения урожайности семян (публикация заявки на выдачу патента США № 2010/0024067).
Другие гены и факторы транскрипции, которые воздействуют на рост и агрономические признаки растений, такие как урожайность, цветение, рост растения и/или структура растения, можно вводить или интрогрессировать в растения, см., например, WO 1997/49811 (LHY), WO 1998/56918 (ESD4), WO 1997/10339 и патент США № 6573430 (TFL), патент США № 6713663 (FT), WO 1996/14414 (CON), WO 1996/38560, WO 2001/21822 (VRN1), WO 2000/44918 (VRN2), WO 1999/49064 (GI), WO 2000/46358 (FR1), WO 1997/29123, патент США № 6794560, патент США № 6307126 (GAI), WO 1999/09174 (D8 и Rht) и WO 2004/076638, а также WO 2004/031349 (факторы транскрипции).
7. Гены, которые обеспечивают повышенную урожайность
(A) Трансгенное культурное растение, трансформированное с помощью нуклеиновой кислоты, кодирующей 1-аминоциклопропан-1-карбоксилатдезаминаза-подобный полипептид (ACCDP), где экспрессия последовательности нуклеиновой кислоты в культурном растении приводит к повышенному росту корней, и/или повышенной урожайности, и/или повышенной переносимости стрессов под влиянием факторов среды у растения, по сравнению с разновидностью дикого типа растения (патент США № 8097769).
(B) Как было показано, сверхэкспрессия гена белков "цинковых пальцев" маиса (Zm-ZFP1) с применением промотора, активного преимущественно в семенах, усиливает рост растения, увеличивает количество зерен и общий вес зерен на растение (публикация заявки на выдачу патента США № 2012/0079623).
(C) Как было показано, конститутивная сверхэкспрессия белка с доменом границ латеральных органов (LOB) (Zm-LOBDP1) маиса увеличивает количество зерен и общий вес зерен на растение (публикация заявки на выдачу патента США № 2012/0079622).
(D) Улучшение у растений признаков, связанных с урожайностью, с помощью модуляции экспрессии у растения нуклеиновой кислоты, кодирующей VIM1 (вариант с метилированием 1)-подобный полипептид, или VTC2-подобный (GDP-L-галактоза-фосфорилаза) полипептид, или полипептид DUF1685, или ARF6-подобный (восприимчивый к ауксину фактор) полипептид (WO 2012/038893).
(E) Модуляция экспрессии в растении нуклеиновой кислоты, кодирующей Ste20-подобный полипептид или его гомолог, позволяет растениям обеспечивать повышенную урожайность относительно контрольных растений (EP 2431472).
(F) Гены, кодирующие полипептиды нуклеозиддифосфаткиназы (NDK) и их гомологи для модификации строения корня растения (публикация заявки на выдачу патента США № 2009/0064373).
8. Гены, которые обеспечивают усвояемость растения
(A) Изменение уровня ксилана, присутствующего в клеточной стенке растения, с помощью модуляции экспрессии ксилансинтазы (патент США № 8173866).
В некоторых вариантах осуществления пакетированный признак может представлять собой признак или трансгенный объект, который получил разрешение контролирующих органов, в том числе без ограничения является трансгенным объектом из таблицы 4A - 4F.
Таблица 4A. Подсолнечник Helianthus annuus
Трансгенный объект Компания Описание
X81359 BASF Inc. Переносимость имидазолиноновых гербицидов при помощи отбора встречающегося в природе мутанта.
Таблица 4B. Рис Oryza sativa
Трансгенный объект Компания Описание
CL121, CL141, CFX51 BASF Inc. Переносимость имидазолинонового гербицида, имазетапира, индуцированная химическим мутагенезом фермента ацетолактатсинтазы (ALS) с применением этилметансульфоната (EMS).
IMINTA-1, IMINTA-4 BASF Inc. Переносимость имидазолиноновых гербицидов, индуцированная химическим мутагенезом фермента ацетолактатсинтазы (ALS) с применением азида натрия.
LLRICE06, LLRICE62 Aventis CropScience Рис с переносимостью гербицида глуфосината аммония, полученный с помощью вставки гена, кодирующего модифицированную фосфинотрицинацетилтрансферазу (PAT), из почвенной бактерии Streptomyces hygroscopicus).
LLRICE601 Bayer CropScience (Aventis CropScience (AgrEvo)) Рис с переносимостью гербицида глуфосината аммония, полученный с помощью вставки гена, кодирующего модифицированную фосфинотрицинацетилтрансферазу (PAT), из почвенной бактерии Streptomyces hygroscopicus).
PWC16 BASF Inc. Переносимость имидазолинонового гербицида, имазетапира, индуцированная химическим мутагенезом фермента ацетолактатсинтазы (ALS) с применением этилметансульфоната (EMS).
Таблица 4C. Соя Glycine max L.
Трансгенный объект Компания Описание
A2704-12, A2704-21, A5547-35 Bayer CropScience (Aventis CropScience (AgrEvo)) Соя с переносимостью гербицида глуфосината аммония, полученная с помощью вставки гена, кодирующего модифицированную фосфинотрицинацетилтрансферазу (PAT), из почвенной бактерии Streptomyces viridochromogenes.
A5547-127 Bayer CropScience (Aventis CropScience (AgrEvo)) Соя с переносимостью гербицида глуфосината аммония, полученная с помощью вставки гена, кодирующего модифицированную фосфинотрицинацетилтрансферазу (PAT), из почвенной бактерии Streptomyces viridochromogenes.
BPS-CV127-9 BASF Inc. Введенный ген csr1-2 из Arabidopsis thaliana кодирует белок ацетогидроксикислота-синтазу, который обеспечивает переносимость имидазолиноновых гербицидов вследствие точечной мутации, которая приводит к замене одной аминокислоты, при которой остаток серина в положении 653 замещен аспарагином (S653N).
DP-305423 Pioneer Hi-Bred International Inc. Соя с высоким содержанием олеиновой кислоты, полученная с помощью вставки дополнительных копий части гена, кодирующего омега-6-десатуразу, gm-fad2-1, что приводит к сайленсингу гена эндогенной омега-6-десатуразы (FAD2-1).
DP356043 Pioneer Hi-Bred International Inc. Трансгенный объект сои с двумя генами переносимости гербицидов: геном глифосат-N-ацетилтрансферазы, которая нейтрализует глифосат, и геном модифицированной ацетолактатсинтазы (ALS), которая не восприимчива к ALS-ингибирующим гербицидам.
G94-1, G94-19, G168 DuPont Canada Agricultural Products Соя с высоким содержанием олеиновой кислоты, полученная с помощью вставки второй копии гена, кодирующего десатуразу жирной кислоты (GmFad2-1), из сои, что приводит к "сайленсингу" эндогенного гена хозяина.
GTS 40-3-2 Monsanto Company Сорт сои с переносимостью глифосата, полученный с помощью вставки гена, кодирующего модифицированную 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазу (EPSPS), из почвенной бактерии Agrobacterium tumefaciens.
GU262 Bayer CropScience (Aventis CropScience (AgrEvo)) Соя с переносимостью гербицида глуфосината аммония, полученная с помощью вставки гена, кодирующего модифицированную фосфинотрицинацетилтрансферазу (PAT), из почвенной бактерии Streptomyces viridochromogenes.
MON87701 Monsanto Company Устойчивость к чешуекрылым вредителям сои, в том числе к гусенице, питающейся бархатными бобами (Anticarsia gemmatalis), и соевой совке (Pseudoplusia includens).
MON87701 x MON89788 Monsanto Company Переносимость гербицида глифосата благодаря экспрессии гена, кодирующего EPSPS, из штамма CP4 A. tumefaciens и устойчивость к чешуекрылым вредителям сои, в том числе к гусенице, питающейся бархатными бобами (Anticarsia gemmatalis), и соевой совке (Pseudoplusia includens), благодаря экспрессии гена, кодирующего Cry1Ac, из B. thuringiensis.
MON89788 Monsanto Company Соя с переносимостью глифосата, полученная с помощью вставки гена aroA (epsps), кодирующего модифицированную 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазу (EPSPS), из Agrobacterium tumefaciens CP4.
OT96-15 Agriculture & Agri-Food Canada Соя с низким содержанием линоленовой кислоты, полученная благодаря традиционному кроссбридингу для введения нового признака, обусловленного встречающимся в природе мутантом гена fan1, который отбирали в отношении низкого содержания линоленовой кислоты.
W62, W98 Bayer CropScience (Aventis CropScience (AgrEvo)) Соя с переносимостью гербицида глуфосината аммония, полученная с помощью вставки гена, кодирующего модифицированную фосфинотрицинацетилтрансферазу (PAT), из почвенной бактерии Streptomyces hygroscopicus.
Таблица 4D. Пшеница Triticum aestivum
Трансгенный объект Компания Описание
AP205CL BASF Inc. Отбор в отношении подвергнутой мутагенезу версии фермента ацетогидроксикислота-синтазы (AHAS), также известной как ацетолактатсинтаза (ALS) или ацетолактат-пируват-лиаза.
AP602CL BASF Inc. Отбор в отношении подвергнутой мутагенезу версии фермента ацетогидроксикислота-синтазы (AHAS), также известной как ацетолактатсинтаза (ALS) или ацетолактат-пируват-лиаза.
BW255-2, BW238-3 BASF Inc. Отбор в отношении подвергнутой мутагенезу версии фермента ацетогидроксикислота-синтазы (AHAS), также известной как ацетолактатсинтаза (ALS) или ацетолактат-пируват-лиаза.
BW7 BASF Inc. Переносимость имидазолиноновых гербицидов, индуцированная посредством химического мутагенеза гена ацетогидроксикислота-синтазы (AHAS) с применением азида натрия.
MON71800 Monsanto Company Сорт пшеницы с переносимостью глифосата, полученный с помощью вставки гена, кодирующего модифицированную 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазу (EPSPS), из штамма CP4 почвенной бактерии Agrobacterium tumefaciens.
SWP965001 Cyanamid Crop Protection Отбор в отношении подвергнутой мутагенезу версии фермента ацетогидроксикислота-синтазы (AHAS), также известной как ацетолактатсинтаза (ALS) или ацетолактат-пируват-лиаза.
Teal 11A BASF Inc. Отбор в отношении подвергнутой мутагенезу версии фермента ацетогидроксикислота-синтазы (AHAS), также известной как ацетолактатсинтаза (ALS) или ацетолактат-пируват-лиаза.
Таблица 4E. Люцерна Medicago sativa
Трансгенный объект Компания Описание
J101, J163 Monsanto Company и Forage Genetics International Люцерна (люцерна посевная) с переносимостью гербицида глифосата, полученная с помощью вставки гена, кодирующего фермент 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазу (EPSPS) из штамма CP4 Agrobacterium tumefaciens.
Таблица 4F. Маис Zea mays L.
Трансгенный объект Компания Описание
176 Syngenta Seeds, Inc. Маис с устойчивостью к насекомым, полученный с помощью вставки гена Cry1Ab из Bacillus thuringiensis, подвид kurstaki. Генетическая модификация придает устойчивость к нападению огневки кукурузной (ECB).
3751IR Pioneer Hi-Bred International Inc. Отбор сомаклональных вариантов путем культивирования зародышей на среде, содержащей имидазолинон.
676, 678, 680 Pioneer Hi-Bred International Inc. Маис с мужской стерильностью и переносимостью гербицида глуфосината аммония, полученный с помощью вставки генов, кодирующих ДНК-аденин-метилазу и фосфинотрицинацетилтрансферазу (PAT) соответственно из Escherichia coli и Streptomyces viridochromogenes.
B16 (DLL25) Dekalb Genetics Corporation Маис с переносимостью гербицида глуфосината аммония, полученный с помощью вставки гена, кодирующего фосфинотрицинацетилтрансферазу (PAT), из Streptomyces hygroscopicus.
BT11 (X4334CBR, X4734CBR) Syngenta Seeds, Inc. Маис с устойчивостью к насекомым и переносимостью гербицидов, полученный с помощью вставки гена Cry1Ab из Bacillus thuringiensis, подвид kurstaki, и гена, кодирующего фосфинотрицин-N-ацетилтрансферазу (PAT), из S. viridochromogenes.
BT11 x GA21 Syngenta Seeds, Inc. Маис с пакетированной устойчивостью к насекомым и переносимостью гербицидов, полученный с помощью традиционного кроссбридинга родительских линий BT11 (уникальный идентификатор OECD: SYN-BTO11-1) и GA21 (уникальный идентификатор OECD: MON-OOO21-9).
BT11 x MIR162 x MIR604 x GA21 Syngenta Seeds, Inc. Устойчивость к жесткокрылым вредителям, в частности к вредителям кукурузным жукам (Diabrotica spp.) и к нескольким чешуекрылым вредителям кукурузы, в том числе к огневке кукурузной (ECB, Ostrinia nubilalis), хлопковой совке (CEW, Helicoverpa zea), кукурузной листовой совке (FAW, Spodoptera frugiperda) и совке-ипсилон (BCW, Agrotis ipsilon); переносимость гербицидов, содержащих глифосат и глуфосинат-аммоний.
BT11 x MIR162 Syngenta Seeds, Inc. Маис с пакетированной устойчивостью к насекомым и переносимостью гербицидов, полученный с помощью традиционного кроссбридинга родительских линий BT11 (уникальный идентификатор OECD: SYN-BTO11-1) и MIR162 (уникальный идентификатор OECD: SYN-IR162-4). Устойчивость к огневке кукурузной и переносимость гербицида глуфосината аммония (Liberty) получают от BT11, которая содержит ген Cry1Ab из Bacillus thuringiensis, подвид kurstaki, и ген, кодирующий фосфинотрицин-N-ацетилтрансферазу (PAT), из S. viridochromogenes. Устойчивость к другим чешуекрылым вредителям, в том числе H. zea, S. frugiperda, A. ipsilon и S. albicosta, получают от MIR162, которая содержит ген vip3Aa из штамма AB88 Bacillus thuringiensis.
BT11 x MIR162 x MIR604 Syngenta Seeds, Inc. Белок дельта-эндотоксин Cry1Ab от Bacillus thuringiensis и генетический материал, необходимый для его выработки (с помощью элементов вектора pZO1502) в трансгенном объекте Bt11 кукурузы (уникальный идентификатор OECD: SYN-BTO11-1), x инсектицидный белок Vip3Aa20 от Bacillus thuringiensis и генетический материал, необходимый для его выработки (с помощью элементов вектора pNOV1300) в трансгенном объекте MIR162 маиса (уникальный идентификатор OECD: SYN-IR162-4), x модифицированный белок Cry3A и генетический материал, необходимый для его выработки (с помощью элементов вектора pZM26) в трансгенном объекте MIR604 кукурузы (уникальный идентификатор OECD: SYN-IR6O4-5).
CBH-351 Aventis CropScience Маис с устойчивостью к насекомым и переносимостью гербицида глуфосината аммония, разработанный посредством вставки генов, кодирующих белок Cry9C из Bacillus thuringiensis, подвид tolworthi, и фосфинотрицинацетилтрансферазу (PAT) из Streptomyces hygroscopicus.
DAS-06275-8 DOW AgroSciences LLC Маис с устойчивостью к чешуекрылым насекомым и переносимостью гербицида глуфосината аммония, полученный с помощью вставки гена Cry1F из Bacillus thuringiensis вар. aizawai и фосфинотрицинацетилтрансферазы (PAT) из Streptomyces hygroscopicus.
BT11 x MIR604 Syngenta Seeds, Inc. Маис с пакетированной устойчивостью к насекомым и переносимостью гербицидов, полученный с помощью традиционного кроссбридинга родительских линий BT11 (уникальный идентификатор OECD: SYN-BTO11-1) и MIR604 (уникальный идентификатор OECD: SYN-IR6O5-5). Устойчивость к огневке кукурузной и переносимость гербицида глуфосината аммония (Liberty) получают от BT11, которая содержит ген Cry1Ab из Bacillus thuringiensis, подвид kurstaki, и ген, кодирующий фосфинотрицин-N-ацетилтрансферазу (PAT), из S. viridochromogenes. Устойчивость к кукурузному жуку получают от MIR604, которая содержит ген mCry3A из Bacillus thuringiensis.
BT11 x MIR604 x GA21 Syngenta Seeds, Inc. Маис с пакетированной устойчивостью к насекомым и переносимостью гербицидов, полученный с помощью традиционного кроссбридинга родительских линий BT11 (уникальный идентификатор OECD: SYN-BTO11-1), MIR604 (уникальный идентификатор OECD: SYN-IR6O5-5) и GA21 (уникальный идентификатор OECD: MON-OOO21-9). Устойчивость к огневке кукурузной и переносимость гербицида глуфосината аммония (Liberty) получают от BT11, которая содержит ген Cry1Ab из Bacillus thuringiensis, подвид kurstaki, и ген, кодирующий фосфинотрицин-N-ацетилтрансферазу (PAT), из S. viridochromogenes. Устойчивость к кукурузному жуку получают от MIR604, которая содержит ген mCry3A из Bacillus thuringiensis. Переносимость гербицида глифосата получают от GA21, которая содержит ген модифицированной EPSPS из маиса.
DAS-59122-7 DOW AgroSciences LLC и Pioneer Hi-Bred International Inc. Маис с устойчивостью к кукурузному жуку, полученный с помощью вставки генов Cry34Ab1 и Cry35Ab1 из штамма PS149B1 Bacillus thuringiensis. Ген, кодирующий PAT, из Streptomyces viridochromogenes вводили в качестве селектируемого маркера.
DAS-59122-7 x TC1507 x NK603 DOW AgroSciences LLC и Pioneer Hi-Bred International Inc. Маис с пакетированной устойчивостью к насекомым и переносимостью гербицидов, полученный с помощью традиционного кроссбридинга родительских линий DAS-59122-7 (уникальный идентификатор OECD: DAS-59122-7) и TC1507 (уникальный идентификатор OECD: DAS-O15O7-1) с NK603 (уникальный идентификатор OECD: MON-OO6O3-6). Устойчивость к кукурузному жуку получают от DAS-59122-7, которая содержит гены Cry34Ab1 и Cry35Ab1 из штамма PS149B1 Bacillus thuringiensis. Устойчивость к чешуекрылым и переносимость гербицида глуфосината аммония получают от TC1507. Переносимость гербицида глифосата получают от NK603.
DBT418 Dekalb Genetics Corporation Маис с устойчивостью к насекомым и переносимостью гербицида глуфосината аммония, разработанный посредством вставки генов, кодирующих белок Cry1AC из Bacillus thuringiensis, подвид kurstaki, и фосфинотрицинацетилтрансферазу (PAT) из Streptomyces hygroscopicus.
MIR604 x GA21 Syngenta Seeds, Inc. Маис с пакетированной устойчивостью к насекомым и переносимостью гербицидов, полученный с помощью традиционного кроссбридинга родительских линий MIR604 (уникальный идентификатор OECD: SYN-IR6O5-5) и GA21 (уникальный идентификатор OECD: MON-OOO21-9). Устойчивость к кукурузному жуку получают от MIR604, которая содержит ген mCry3A из Bacillus thuringiensis. Переносимость гербицида глифосата получают от GA21.
MON80100 Monsanto Company Маис с устойчивостью к насекомым, полученный с помощью вставки гена Cry1Ab из Bacillus thuringiensis, подвид kurstaki. Генетическая модификация придает устойчивость к нападению огневки кукурузной (ECB).
MON802 Monsanto Company Маис с устойчивостью к насекомым и переносимостью гербицида глифосата, полученный с помощью вставки генов, кодирующих белок Cry1Ab из Bacillus thuringiensis и 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазу (EPSPS) из штамма CP4 A. tumefaciens.
MON809 Pioneer Hi-Bred International Inc. Устойчивость к огневке кукурузной (Ostrinia nubilalis) с помощью введения синтетического гена Cry1Ab. Устойчивость к глифосату с помощью введения бактериальной версии растительного фермента, 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазы (EPSPS).
MON810 Monsanto Company Маис с устойчивостью к насекомым, полученный с помощью вставки усеченной формы гена Cry1Ab из Bacillus thuringiensis, подвид kurstaki HD-1. Генетическая модификация придает устойчивость к нападению огневки кукурузной (ECB).
MON810 x LY038 Monsanto Company Маис с пакетированной устойчивостью к насекомым и увеличенным содержанием лизина, полученный в результате традиционного кроссбридинга родительских линий MON810 (идентификатор OECD: MON-OO81O-6) и LY038 (идентификатор OECD: REN-OOO38-3).
MON810 x MON88017 Monsanto Company Маис с пакетированной устойчивостью к насекомым и переносимостью глифосата, полученный в результате традиционного кроссбридинга родительских линий MON810 (идентификатор OECD: MON-OO81O-6) и MON88017 (идентификатор OECD: MON-88O17-3). Устойчивость к огневке кукурузной (ECB) получена благодаря усеченной форме гена Cry1Ab из Bacillus thuringiensis, подвид kurstaki HD-1, присутствующего в MON810. Устойчивость к кукурузному жуку получают благодаря гену Cry3Bb1 из штамма EG4691 Bacillus thuringiensis, подвид kumamotoensis, присутствующему в MON88017. Переносимость глифосата получают благодаря гену, кодирующему 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазу (EPSPS), из штамма CP4 Agrobacterium tumefaciens, присутствующему в MON88017.
MON832 Monsanto Company Введение посредством бомбардировки частицами глифосатоксидазы (GOX) и модифицированной 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазы (EPSPS), фермента, вовлеченного в биохимический метаболический путь шикимата, для выработки ароматических аминокислот.
MON863 Monsanto Company Маис с устойчивостью к кукурузному жуку, полученный с помощью вставки гена Cry3Bb1 из Bacillus thuringiensis, подвид kumamotoensis.
MON863 x MON810 Monsanto Company Гибрид кукурузы с пакетированной устойчивостью к насекомым, полученный в результате традиционного кроссбридинга родительских линий MON863 (идентификатор OECD: MON-OO863-5) и MON810 (идентификатор OECD: MON-OO81O-6)
MON863 x MON810 x NK603 Monsanto Company Гибрид кукурузы с пакетированной устойчивостью к насекомым и переносимостью гербицидов, полученный в результате традиционного кроссбридинга гибрида с пакетированными генами MON-OO863-5 x MON-OO81O-6 и NK603 (идентификатор OECD:MON-OO6O3-6).
MON863 x NK603 Monsanto Company Гибрид кукурузы с пакетированной устойчивостью к насекомым и переносимостью гербицидов, полученный в результате традиционного кроссбридинга родительских линий MON863 (идентификатор OECD:MON-OO863-5) и NK603 (идентификатор OECD: MON-OO6O3-6).
MON87460 Monsanto Company MON 87460 разрабатывали для обеспечения сниженной потери урожая в условиях ограниченного количества воды относительно традиционного маиса. Эффективность по отношению к MON 87460 получают с помощью экспрессии вставленного белка холодового шока B (CspB) Bacillus subtilis.
MON88017 Monsanto Company Маис с устойчивостью к кукурузному жуку, полученный с помощью вставки гена Cry3Bb1 из штамма EG4691 Bacillus thuringiensis, подвид kumamotoensis. Переносимость глифосата получают с помощью вставки гена, кодирующего 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазу (EPSPS), из штамма CP4 Agrobacterium tumefaciens.
MON89034 Monsanto Company Трансгенный объект маиса, экспрессирующий два различных инсектицидных белка из Bacillus thuringiensis, обеспечивающий устойчивость к ряду чешуекрылых вредителей.
MON89034 x MON88017 Monsanto Company Маис с пакетированной устойчивостью к насекомым и переносимостью глифосата, полученный в результате традиционного кроссбридинга родительских линий MON89034 (идентификатор OECD: MON-89O34-3) и MON88017 (идентификатор OECD:MON-88O17-3). Устойчивость к чешуекрылым насекомым получают благодаря двум генам Cry, присутствующим в MON89043. Устойчивость к кукурузному жуку получают благодаря одному гену Cry, и переносимость глифосата получают благодаря гену, кодирующему 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазу (EPSPS) из Agrobacterium tumefaciens, присутствующему в MON88017.
MON89034 x NK603 Monsanto Company Пакетированный маис с устойчивостью к насекомым и переносимостью гербицидов, полученный с помощью традиционного кроссбридинга родительских линий MON89034 (идентификатор OECD: MON-89O34-3) с NK603 (уникальный идентификатор OECD: MON-OO6O3-6). Устойчивость к чешуекрылым насекомым получают благодаря двум генам Cry, присутствующим в MON89043. Переносимость гербицида глифосата получают от NK603.
NK603 x MON810 Monsanto Company Гибрид кукурузы с пакетированной устойчивостью к насекомым и переносимостью гербицидов, полученный в результате традиционного кроссбридинга родительских линий NK603 (идентификатор OECD: MON-OO6O3-6) и MON810 (идентификатор OECD: MON-OO81O-6).
MON89034 x TC1507 x MON88017 x DAS-59122-7 Monsanto Company и Mycogen Seeds c/o Dow AgroSciences LLC Маис с пакетированной устойчивостью к насекомым и переносимостью гербицидов, полученный с помощью традиционного кроссбридинга родительских линий: MON89034, TC1507, MON88017 и DAS-59122. Устойчивость к наземным и подземным насекомым-вредителям и переносимость гербицидов глифосата и глуфосината аммония.
MS3 Bayer CropScience (Aventis CropScience (AgrEvo)) Мужская стерильность, вызванная экспрессией гена рибонуклеазы барназы из Bacillus amyloliquefaciens; устойчивость к PPT присутствовала благодаря PPT-ацетилтрансферазе (PAT).
MS6 Bayer CropScience (Aventis CropScience (AgrEvo)) Мужская стерильность, вызванная экспрессией гена рибонуклеазы барназы из Bacillus amyloliquefaciens; устойчивость к PPT присутствовала благодаря PPT-ацетилтрансферазе (PAT).
NK603 Monsanto Company Введение путем бомбардировки частицами модифицированной 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазы (EPSPS), фермента, вовлеченного в биохимический метаболический путь шикимата, для выработки ароматических аминокислот.
NK603 x T25 Monsanto Company Гибрид маиса с пакетированной переносимостью гербицида глуфосината аммония и глифосата, полученный в результате традиционного кроссбридинга родительских линий NK603 (идентификатор OECD: MON-OO6O3-6) и T25 (идентификатор OECD: ACS-ZM003-2).
T25 x MON810 Bayer CropScience (Aventis CropScience (AgrEvo)) Гибрид кукурузы с пакетированной устойчивостью к насекомым и переносимостью гербицидов, полученный в результате традиционного кроссбридинга родительских линий T25 (идентификатор OECD: ACS-ZMOO3-2) и MON810 (идентификатор OECD:MON-OO81O-6).
TC1507 Mycogen (c/o Dow AgroSciences); Pioneer (c/o DuPont) Маис с устойчивостью к насекомым и переносимостью гербицида глуфосината аммония, полученный с помощью вставки гена Cry1F из Bacillus thuringiensis вар. aizawai и гена, кодирующего фосфинотрицин-N-ацетилтрансферазу, из Streptomyces viridochromogenes.
TC1507 x NK603 DOW AgroSciences LLC Гибрид кукурузы с пакетированной устойчивостью к насекомым и переносимостью гербицидов, полученный в результате традиционного кроссбридинга родительских линий 1507 (идентификатор OECD: DAS-O15O7-1) и NK603 (идентификатор OECD: MON-OO6O3-6).
TC1507 x DAS-59122-7 DOW AgroSciences LLC и Pioneer Hi-Bred International Inc. Маис с пакетированной устойчивостью к насекомым и переносимостью гербицидов, полученный с помощью традиционного кроссбридинга родительских линий TC1507 (уникальный идентификатор OECD: DAS-O15O7-1) с DAS-59122-7 (уникальный идентификатор OECD: DAS-59122-7). Устойчивость к чешуекрылым насекомым получают от TC1507 вследствие присутствия гена Cry1F из Bacillus thuringiensis вар. aizawai. Устойчивость к кукурузному жуку получают от DAS-59122-7, которая содержит гены Cry34Ab1 и Cry35Ab1 из штамма PS149B1 Bacillus thuringiensis. Переносимость гербицида глуфосината аммония получают от TC1507 благодаря гену, кодирующему фосфинотрицин-N-ацетилтрансферазу из Streptomyces viridochromogenes.
Другие трансгенные объекты, разрешенные контролирующими органами, хорошо известны специалисту в данной области и их можно найти на сайте Центра оценки риска для окружающей среды (cera-gmc.org/?action=gm_crop_database, доступ к которому можно получить с использованием префикса www) и на сайте Международной службы по приобретению агробиотехнологических приложений (isaaa.org/gmapprovaldatabase/default.asp, доступ к которому можно получить с использованием префикса www).
Сайленсинг генов
В некоторых вариантах осуществления пакетированный признак может быть в форме, применяемой для сайленсинга одного или нескольких полинуклеотидов, представляющих интерес, что приводит к супрессии одного или нескольких целевых полипептидов вредителя. В некоторых вариантах осуществления сайленсинг достигается благодаря применению супрессионной ДНК-конструкции.
В некоторых вариантах осуществления один или несколько полинуклеотидов, кодирующих полипептиды из инсектицидных полипептидов по настоящему раскрытию или их фрагментов или вариантов, могут быть пакетированы с одним или несколькими полинуклеотидами, кодирующими один или несколько полипептидов, характеризующихся инсектицидной активностью или агрономическими признаками, изложенными выше, и необязательно может дополнительно предусматривать один или несколько полинуклеотидов, предусмотренных для сайленсинга генов одного или нескольких целевых полинуклеотидов, как обсуждается ниже.
"Супрессионная ДНК-конструкция" представляет собой рекомбинантную ДНК-конструкцию, которая при трансформации или стабильной интеграции в геном растения приводит в результате к "сайленсингу" целевого гена в растении. Целевой ген может быть эндогенным или трансгенным по отношению к растению. "Сайленсинг", используемый в данном документе по отношению к целевому гену, обычно относится к супрессии уровней mRNA или белка/фермента, экспрессируемых целевым геном, и/или уровня активности фермента или функционирования белка. Термин "супрессия" предусматривает понижение, снижение, ухудшение, уменьшение, ингибирование, устранение и предотвращение. "Сайленсинг" или "сайленсинг генов" не определяет механизм и включают без ограничения супрессию, опосредованную антисмысловыми олигонуклеотидами, косупрессию, супрессию, опосредованную вирусами, супрессию, опосредованную шпильками, супрессию, опосредованную структурами типа "стебель-петля", подходы на основе RNAi и подходы на основе низкомолекулярных РНК.
Супрессионная ДНК-конструкция может содержать участок, происходящий от целевого гена, представляющего интерес, и может содержать всю или часть последовательности нуклеиновой кислоты смысловой нити (или антисмысловой нити) целевого гена, представляющего интерес. В зависимости от подхода, который будет использоваться, участок может быть на 100% идентичным или менее, чем на 100% идентичным (например, по меньшей мере на 50% или на любое целое число от 51% до 100% идентичным) всей смысловой нити (или антисмысловой нити) гена, представляющего интерес, или ее части.
Супрессионные ДНК-конструкции хорошо известны в уровне техники, легко конструируются сразу после выбора целевого гена, представляющего интерес, и включают без ограничения косупрессионные конструкции, антисмысловые конструкции, вирусные супрессионные конструкции, шпильковые супрессионные конструкции, супрессионные конструкции типа "стебель-петля", конструкции, вырабатывающие двухнитевые РНК, и в более общем смысле конструкции для RNAi (РНК-интерференции) и конструкции на основе небольших РНК, такие как конструкции на основе siRNA (коротких интерферирующих РНК) и miRNA (микроРНК).
"Антисмысловое ингибирование" относится к продуцированию антисмысловых РНК-транскриптов, способных супрессировать экспрессию целевого белка.
"Антисмысловая РНК" относится к РНК-транскрипту, который комплементарен всему или части целевого первичного транскрипта или mRNA, и который блокирует экспрессию фрагмента целевой выделенной нуклеиновой кислоты (патент США № 5107065). Комплементарность антисмысловой РНК может быть с любой частью конкретного генного транскрипта, т. е. с 5'-некодирующей последовательностью, 3'-некодирующей последовательностью, интронами или кодирующей последовательностью.
"Косупрессия" относится к выработке смысловых РНК-транскриптов, способных супрессировать экспрессию целевого белка. "Смысловая" РНК относится к РНК-транскрипту, который включает mRNA, и она может быть транслирована с образованием белка в клетке или in vitro. Конструкции для косупрессии у растений ранее разрабатывались с основным вниманием к сверхэкспрессии последовательностей нуклеиновой кислоты, имеющих гомологию с нативной мРНК, в смысловой ориентации, что приводит к снижению уровней всех РНК, имеющих гомологию со сверхэкспрессированной последовательностью (см., Vaucheret, et al., (1998) Plant J. 16:651-659 и Gura, (2000) Nature 404:804-808).
В другом варианте описывается применение последовательностей растительных вирусов для управления супрессией проксимальных последовательностей, кодирующих mRNA (публикация согласно PCT WO 1998/36083).
В недавней работе было описано применение "шпильковых" структур, которые включают всю или часть mRNA-кодирующей последовательности в комплементарной ориентации, что приводит к потенциальной структуре "стебель-петля" у экспрессированной РНК (публикация согласно PCT WO 1999/53050). В данном случае стебель формируется полинуклеотидами, соответствующими гену, представляющему интерес, в смысловой или в антисмысловой ориентации по отношению к промотору, а петля формируется несколькими полинуклеотидами гена, представляющего интерес, которые не имеют комплементарной последовательности в конструкции. Это повышает частоту косупрессии или сайленсинга в регенерированных трансгенных растениях. Обзор шпильковой супрессии см. в Wesley, et al., (2003) Methods in Molecular Biology, Plant Functional Genomics: Methods and Protocols 236:273-286.
Конструкция, в которой стебель образован по меньшей мере 30 нуклеотидами из гена, который подлежит супрессии, и петля образована случайной нуклеотидной последовательностью, также эффективно применялась для супрессии (публикация согласно PCT WO 1999/61632).
Также было описано применение последовательностей поли-T и поли-A для получения стебля в структуре "стебель-петля" (публикация согласно PCT WO 2002/00894).
Еще один вариант включает применение синтетических повторов для содействия образованию стебля в структуре "стебель-петля". Было показано, что трансгенные организмы, полученные с такими фрагментами рекомбинантной ДНК, характеризуются сниженными уровнями белка, кодируемого нуклеотидным фрагментом, который образует петлю, как описано в публикации согласно РСТ WO 2002/00904.
РНК-интерференция относится к процессу, специфичному в отношении последовательности посттранскрипционного сайленсинга генов у животных, который опосредован короткими интерферирующими РНК (siRNA) (Fire, et al., (1998) Nature 391:806). Соответствующий процесс у растений обычно называют посттранскрипционным сайленсингом генов (PTGS) или РНК-опосредованным сайленсингом, и также называют подавлением у грибов. Процесс посттранскрипционного сайленсинга генов считается эволюционно-консервативным механизмом клеточной защиты, применяющимся для предотвращения экспрессии чужеродных генов, и он широко распространен у различных представителей растительного мира и типов животных (Fire, et al., (1999) Trends Genet. 15:358). Такая защита от экспрессии чужеродных генов могла развиться в ответ на выработку двухцепочечных РНК (dsRNA), полученных в результате вирусной инфекции или в результате случайной интеграции транспозонных элементов в геном хозяина, путем клеточного ответа, который специфически разрушает гомологичную одноцепочечную РНК вирусной геномной РНК. Присутствие dsRNA в клетках вызывает RNAi-ответ через механизм, который полностью еще не охарактеризован.
Присутствие длинных dsRNA в клетках стимулирует активность фермента рибонуклеазы III, называемого ʺдайсерʺ. Дайсер вовлекается в процессинг dsRNA с образованием коротких фрагментов dsRNA, называемых короткими интерферирующими РНК (siRNA) (Berstein et al., Nature 409:363, 2001). Как правило, короткие интерферирующие РНК, полученные в результате активности дайсер, имеют длину от приблизительно 21 до приблизительно 23 нуклеотидов, и включают дуплексы из приблизительно 19 пар оснований (Elbashir, et al., (2001) Genes Dev. 15:188). Кроме того, дайсер был вовлечен в вырезание 21- и 22-нуклеотидных небольших временных РНК (stRNA) из РНК-предшественника консервативной структуры, которые вовлечены в контроль на уровне трансляции (Hutvagner, et al., (2001) Science 293:834). Для RNAi-ответа также характерен эндонуклеазный комплекс, обычно называемый комплексом РНК-индуцированного сайленсинга (RISC), который опосредует расщепление одноцепочечной РНК, последовательность которой комплементарна антисмысловой цепи дуплекса siRNA. Расщепление целевой РНК происходит в середине участка, комплементарного антисмысловой цепи дуплекса siRNA (Elbashir et al., Genes Dev. 15:188). Кроме того, РНК-интерференция также может подразумевать сайленсинг генов, опосредованный небольшими РНК (например, miRNA), предположительно посредством клеточных механизмов, которые регулируют структуру хроматина, и тем самым предотвращают транскрипцию последовательностей целевых генов (см., например, Allshire, (2002) Science 297:1818-1819; Volpe, et al., (2002) Science 297:1833-1837; Jenuwein, (2002) Science 297:2215-2218 и Hall, et al., (2002) Science 297:2232-2237). Таким образом, молекулы miRNA по настоящему раскрытию можно применять для опосредования сайленсинга генов путем взаимодействия с РНК-транскриптами или, в качестве альтернативы, взаимодействия с конкретными генными последовательностями, где такое взаимодействие приводит к сайленсингу генов либо на транскрипционном, либо на посттранскрипционном уровне.
Дополнительно предусмотрены способы и композиции, которые обеспечивают возможность повышения уровня RNAi, получаемой с помощью элемента сайленсинга. В таких вариантах осуществления в способах и композициях используется первый полинуклеотид, содержащий элемент сайленсинга для целевой последовательности вредителя, функционально связанный с промотором, активным в растительной клетке; и второй полинуклеотид, содержащий усиливающий супрессию элемент, содержащий целевую последовательность вредителя или ее активный вариант или фрагмент, функционально связанные с промотором, активным в растительной клетке. Объединенная экспрессия элемента сайленсинга с усиливающим супрессию элементом ведет к увеличению амплификации ингибиторных РНК, вырабатываемых на основе элемента сайленсинга сверх того уровня, который достигается при экспрессии только элемента сайленсинга самого по себе. В дополнение к увеличенной амплификации специфических видов молекул для RNAi самих по себе, способы и композиции дополнительно обеспечивают возможность выработки отличающейся группы видов молекул для RNAi, которые могут улучшать эффективность нарушения экспрессии целевого гена. Таким образом, когда усиливающий супрессию элемент экспрессируется в растительной клетке в комбинации с элементом сайленсинга, способы и композиции могут обеспечивать возможность системной выработки молекул для RNAi по всему растению; выработку больших количеств молекул для RNAi, чем можно было бы наблюдать в случае только конструкции элемента сайленсинга отдельно; и улучшенную загрузку молекул для RNAi во флоэму растения, таким образом обеспечивается лучший контроль насекомых, питающихся флоэмой, с помощью подхода с RNAi. Таким образом, различные способы и композиции обеспечивают улучшенные способы доставки ингибиторных РНК целевому организму. См., например, публикацию заявки на выдачу патента США 2009/0188008.
"Усиливающий супрессию элемент", используемый в данном документе, включает полинуклеотид, содержащий целевую последовательность, подлежащую супрессии, или ее активный фрагмент или вариант. Понятно, что усиливающий супрессию элемент не должен быть идентичным целевой последовательности, но усиливающий супрессию элемент скорее может содержать вариант целевой последовательности, при условии что последовательность усиливающего супрессию элемента в достаточной степени идентична целевой последовательности, чтобы обеспечить возможность повышенного уровня RNAi, получаемой с помощью элемента сайленсинга, сверх того уровня, который достигается при экспрессии только элемента сайленсинга. Аналогично, усиливающий супрессию элемент может содержать фрагмент целевой последовательности, где фрагмент имеет достаточную длину, чтобы обеспечить возможность повышенного уровня RNAi, получаемой с помощью элемента сайленсинга, сверх того уровня, который достигается при экспрессии только элемента сайленсинга.
Понятно, что можно использовать несколько усиливающих супрессию элементов из одной целевой последовательности, или из различных целевых последовательностей, или из различных участков одной целевой последовательности. Например, используемые усиливающие супрессию элементы могут содержать фрагменты целевой последовательности, полученные из другого участка целевой последовательности (т. е. из 3′UTR, кодирующей последовательности, интрона и/или 5′UTR). Кроме того, усиливающий супрессию элемент может содержаться в кассете экспрессии, как описано в другом месте данного документа, и в определенных вариантах осуществления усиливающий супрессию элемент находится на одном или на другом ДНК-векторе или -конструкции по отношению к элементу сайленсинга. Усиливающий супрессию элемент может быть функционально связан с промотором, раскрытым в данном документе. Понятно, что усиливающий супрессию элемент может экспрессироваться конститутивно, или, в качестве альтернативы, он может вырабатываться способом, зависящим от стадии, с использованием различных индуцируемых, или предпочительных для ткани, или регулируемых развитием промоторов, которые обсуждаются в другом месте данного документа.
В определенных вариантах осуществления при использовании как элемента сайленсинга, так и усиливающего супрессию элемента системная выработка молекул для RNAi происходит по всему растению. В дополнительных вариантах осуществления растение или части растения по настоящему раскрытию имеют повышенную нагрузку молекул для RNAi во флоэме растения, что можно было наблюдать при экспрессии конструкции элемента сайленсинга отдельно, и таким образом обеспечивается лучший контроль насекомых, питающихся флоэмой, с помощью подхода с использованием RNAi. В определенных вариантах осуществления растения, части растения и растительные клетки по настоящему раскрытию можно дополнительно охарактеризовать как обеспечивающие возможность выработки разнообразных видов молекул для RNAi, которые могут улучшать эффективность нарушения экспрессии целевого гена.
В определенных вариантах осуществления объединенная экспрессия элемента сайленсинга и усиливающего супрессию элемента повышает концентрацию ингибиторных РНК в растительной клетке, растении, части растения, растительной ткани или флоэме сверх того уровня, который достигается при экспрессии элемента сайленсинга отдельно.
"Повышенный уровень ингибиторных РНК", используемое в данном документе, включает какое-либо статистически значимое повышение уровня молекул для RNAi, вырабатываемых в растении, обладающем комбинированной экспрессией по сравнению с соответствующим контрольным растением. Например, повышение уровня RNAi в растении, части растения или растительной клетке может предусматривать по меньшей мере приблизительно 1%, приблизительно 1% - 5%, приблизительно 5% - 10%, приблизительно 10% - 20%, приблизительно 20% - 30%, приблизительно 30% - 40%, приблизительно 40% - 50%, приблизительно 50% - 60%, приблизительно 60-70%, приблизительно 70% - 80%, приблизительно 80% - 90%, приблизительно 90% - 100% или большее повышение уровня RNAi в растении, части растения, растительной клетке или флоэме по сравнению с соответствующим контролем. В других вариантах осуществления повышение уровня RNAi в растении, части растения, растительной клетке или флоэме может предусматривать по меньшей мере приблизительно 1-кратное, приблизительно 1-кратное - 5-кратное, приблизительно 5-кратное - 10-кратное, приблизительно 10-кратное - 20-кратное, приблизительно 20-кратное - 30-кратное, приблизительно 30-кратное - 40-кратное, приблизительно 40-кратное - 50-кратное, приблизительно 50-кратное - 60-кратное, приблизительно 60-кратное - 70-кратное, приблизительно 70-кратное - 80-кратное, приблизительно 80-кратное - 90-кратное, приблизительно 90-кратное - 100-кратное или большее повышение уровня RNAi в растении, части растения, растительной клетке или флоэме по сравнению с подходящим контролем. Примеры объединенной экспрессии элемента сайленсинга с усиливающим супрессию элементом для контроля щитников и Lygus можно найти в публикации заявки на выдачу патента США 2011/0301223 и публикации заявки на выдачу патента США 2009/0192117.
Некоторые варианты осуществления относятся к понижающей регуляции экспрессии целевых генов у видов насекомых-вредителей с помощью интерферирующих молекул рибонуклеиновой кислоты (РНК). В публикации согласно PCT WO 2007/074405 описаны способы ингибирования экспрессии целевых генов у беспозвоночных вредителей, в том числе колорадского жука. В публикации согласно PCT WO 2005/110068 описаны способы ингибирования экспрессии целевых генов у беспозвоночных вредителей, в том числе, в частности, у западного кукурузного жука, в качестве средства контроля заражения насекомыми. Кроме того, в публикации согласно PCT WO 2009/091864 описаны композиции и способы супрессии целевых генов из видов насекомых-вредителей, в том числе вредителей из рода Lygus. Молекулы нуклеиновой кислоты, в том числе молекулы для RNAi для нацеливания на H-субъединицу вакуолярной АТФазы, пригодны для контроля популяции и заражения жесткокрылыми вредителями, как описано в публикации заявки на выдачу патента США 2012/0198586. В публикации согласно PCT WO 2012/055982 описана рибонуклеиновая кислота (РНК или двухцепочечная РНК), которая ингибирует или обеспечивает подавление экспрессии целевого гена, который кодирует: рибосомальный белок насекомого, такой как рибосомальный белок L19, рибосомальный белок L40 или рибосомальный белок S27A; субъединицу протеасомы насекомого, такую как белок Rpn6, Pros 25, белок Rpn2, белок бета 1 субъединицы протеасомы или белок бета 2 Pros; β-коатомер COPI-везикулы насекомого, γ-коатомер COPI-везикулы, β'-коатомерный белок или ζ-коатомер COPI-везикулы; белок тетраспанин 2 A насекомого, который представляет собой предполагаемый белок трансмембранного домена; белок насекомого, принадлежащий к семейству актина, такой как актин 5C; белок убиквитин-5E насекомого; белок Sec23 насекомого, который представляет собой активатор ГТФазы, вовлеченной во внутриклеточный транспорт белков; белок "crinkled" насекомого, который представляет собой нестандартный миозин, который вовлечен в двигательную активность; белок "crooked neck" насекомого, который вовлечен в регуляцию ядерного альтернативного сплайсинга mRNA; белок G-субъединицы вакуолярной H+-АТФазы насекомого и Tbp-1 насекомого, такой как Tat-связывающий белок. В публикациях заявок на выдачу патентов США 2012/029750, US 20120297501 и 2012/0322660 описаны интерферирующие рибонуклеиновые кислоты (РНК или двухцепочечная РНК), которые функционируют при поглощении видами насекомых-вредителей с понижающей регуляцией экспрессии целевого гена в указанном насекомом-вредителе, где РНК содержит по меньшей мере один элемент сайленсинга, где элемент сайленсинга представляет собой участок двухцепочечной РНК, содержащий гибридизованные комплементарные цепи, из которых одна цепь содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах целевого гена. В публикации заявки на выдачу патента США 2012/0164205 описаны потенциальные мишени для интерферирующих двухцепочечных рибонуклеиновых кислот для подавления беспозвоночных вредителей, в том числе: гомологичная последовательность Chd3, гомологичная последовательность бета-тубулина, гомологичная последовательность весом 40 кДа V-АТФазы, гомологичная последовательность EF1α, гомологичная последовательность субъединицы p28 протеосомы 26S, гомологичная последовательность эпоксидгидролазы ювенильного гормона, гомологичная последовательность белка хлоридных каналов, зависимых от набухания, гомологичная последовательность белка глюкоза-6-фосфат-1-дегидрогеназы, гомологичная последовательность белка Act42A, гомологичная последовательность фактора 1 АДФ-рибозилирования, гомологичная последовательность белка фактора транскрипции IIB, гомологичные последовательности хитиназы, гомологичная последовательность фермента, конъюгирующего убиквитин, гомологичная последовательность глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы, гомологичная последовательность убиквитина B, гомолог эстеразы ювенильного гормона и гомологичная последовательность альфа-тубулина.
Применение в пестицидном контроле
В уровне техники известны общие способы использования штаммов, содержащих последовательность нуклеиновой кислоты согласно вариантам осуществления или ее вариант, в пестицидном контроле или при конструировании других организмов в качестве пестицидных средств. См., например, патент США № 5039523 и EP 0480762A2.
Могут быть выбраны микроорганизмы-хозяева, которые как известно заселяют "фитосферу" (филлоплан, филлосферу, ризосферу и/или ризоплан) одной или нескольких сельскохозяйственных культур, представляющих интерес. Эти микроорганизмы выбирают таким образом, чтобы они могли успешно конкурировать в конкретной среде с микроорганизмами дикого типа, обеспечивать стабильное поддержание и экспрессию гена, экспрессирующего инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию, и желательно обеспечивать улучшенную защиту пестицида от разрушения и инактивации в окружающей среде.
Такие микроорганизмы включают в себя бактерии, водоросли и грибы. Особый интерес представляют микроорганизмы, такие как бактерии, например, Pseudomonas, Erwinia, Serratia, Klebsiella, Xanthomonas, Streptomyces, Rhizobium, Rhodopseudomonas, Methylius, Agrobacterium, Acetobacter, Lactobacillus, Arthrobacter, Azotobacter, Leuconostoc, и Alcaligenes, грибы, в частности дрожжи, например, Saccharomyces, Cryptococcus, Kluyveromyces, Sporobolomyces, Rhodotorula, и Aureobasidium. Особый интерес представляют такие виды бактерий фитосферы как as Pseudomonas syringae, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas chlororaphis, Serratia marcescens, Acetobacter xylinum, Agrobacteria, Rhodopseudomonas spheroides, Xanthomonas campestris, Rhizobium melioti, Alcaligenes entrophus, Clavibacter xyli и Azotobacter vinelandii, а также виды дрожжей фитосферы, такие как Rhodotorula rubra, R. glutinis, R. marina, R. aurantiaca, Cryptococcus albidus, C. diffluens, C. laurentii, Saccharomyces rosei, S. pretoriensis, S. cerevisiae, Sporobolomyces roseus, S. odorus, Kluyveromyces veronae, и Aureobasidium pollulans. Особый интерес представляют пигментированные микроорганизмы. Организмы-хозяева, представляющие особый интерес, включают дрожжи, такие как Rhodotorula spp., Aureobasidium spp., Saccharomyces spp. (такие как S. cerevisiae), Sporobolomyces spp., организмы филлоплана, такие как Pseudomonas spp. (такие как P. aeruginosa, P. fluorescens, P. chlororaphis), Erwinia spp., и Flavobacterium spp., и другие такие организмы, в том числе Agrobacterium tumefaciens, E. coli, Bacillus subtilis, Bacillus cereus и т. п.
Гены, кодирующие инсектицидные полипептиды согласно вариантам осуществления можно вводить в микроорганизмы, которые размножаются на растениях (эпифиты) для доставки инсектицидного полипептида в организм потенциальных целевых вредителей. Например, эпифиты могут представлять собой грамм-положительные или грамм-отрицательные бактерии.
Например, бактерии, колонизирующие корни, можно выделять из растений, представляющих интерес, с помощью способов, известных в уровне техники. А именно, штамм Bacillus cereus, который колонизирует корни, можно выделять из корней растения (см. например Handelsman et al. (1991) Appl. Environ. Microbiol. 56:713-718). Гены, кодирующие инсектицидные полипептиды согласно вариантам осуществления, можно вводить в Bacillus cereus, колонизирующую корни, с помощью стандартных способов, известных в уровне техники.
Гены, кодирующие инсектицидные полипептиды по настоящему раскрытию, можно вводить например в Bacillus, колонизирующую корни, посредством электротрансформации. А именно, гены, кодирующие инсектицидные полипептиды по настоящему раскрытию можно клонировать в челночный вектор, например pHT3101 (Lerecius, et al., (1989) FEMS Microbiol. Letts. 60:211-218. С помощью челночного вектора pHT3101, содержащего кодирующую последовательность конкретного гена инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию, можно, например, трансформировать Bacillus, колонизирующую корни, посредством электропорации (Lerecius, et al., (1989) FEMS Microbiol. Letts. 60:211-218).
Экспрессирующие системы можно разрабатывать таким образом, что инсектицидные полипептиды по настоящему раскрытию секретируются снаружи цитоплазмы грамм-отрицательных бактерий, таких как, например, E. coli. Преимуществами обеспечения секреции инсектицидных полипептидов по настоящему раскрытию являются: (1) возможность избежать потенциальных цитотоксических эффектов инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию и (2) улучшение эффективности очистки инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию, в том числе без ограничения повышение эффективности выделения и очистки белка в расчете на объем клеточного бульона и снижение времени и/или затрат на извлечение и очистку в пересчете на единицу белка.
Инсектицидные полипептиды по настоящему раскрытию можно создавать так, чтобы они секретировались в E. coli, например путем слияния подходящего сигнального пептида E. coli с амино-терминальным концом инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию. Сигнальные пептиды, распознаваемые E. coli, можно найти в белках, которые, как уже известно, секретируются в E. coli, например белок OmpA (Ghrayeb, et al., (1984) EMBO J, 3:2437-2442). OmpA представляет собой главный белок внешней мембраны E. coli, и, таким образом, полагают, что его сигнальный пептид является эффективным в процессе транслокации. Также, сигнальный пептид OmpA не нужно модифицировать перед процессингом, как может быть в случае других сигнальных пептидов, например сигнального пептида липопротеинов (Duffaud, et al., (1987) Meth. Enzymol. 153:492).
Инсектицидные полипептиды согласно вариантам осуществления можно ферментировать в бактерии-хозяине, а полученные бактерии обрабатывать и использовать в виде микробных распыляемых растворов тем же способом, что и штаммы Bt, которые применялись в виде инсектицидных распыляемых растворов. В случае инсектицидного полипептида по настоящему(-им) раскрытию(-ям), который секретируется Bacillus, сигнал секреции удаляют или подвергают мутации с применением процедур, известных в уровне техники. Такие мутации и/или делеции предотвращают секрецию инсектицидного(-ых) полипептида(-ов) в ростовую среду в ходе ферментации. Инсектицидные полипептиды по настоящему раскрытию остаются в клетке, и затем клетки обрабатывают с целью получения инкапсулированных инсектицидных полипептидов. С данной целью можно применять любой подходящий микроорганизм. Для экспрессии Bt-токсинов в качестве инкапсулированных белков применяли Pseudomonas, и полученные клетки обрабатывали и распыляли в качестве инсектицида (Gaertner, et al., (1993), в Advanced Engineered Pesticides, ed. Kim).
В качестве альтернативы, инсектицидные полипептиды по настоящему раскрытию получают путем введения в клеточного хозяина гетерологичных генов. Экспрессия гетерологичного гена приводит, непосредственно или опосредованно, к выработке и сохранению пестицида внутри клетки. Эти клетки затем обрабатывают при условиях, которые продлевают активность токсина, вырабатываемого в клетке, когда осуществляют применение клетки по отношению к среде целевого(-ых) вредителя(-ей). Полученный продукт сохраняет токсичность токсина. Эти естественным образом инкапсулированные инсектицидные полипептиды можно затем составлять в соответствии с традиционными методиками для внесения в среду пребывания целевого вредителя, например в почву, воду и на листву растений. См., например, EPA 0192319 и ссылочные документы, приведенные в нем.
Пестицидные композиции
В некоторых вариантах осуществления активные ингредиенты можно наносить в форме композиции, и можно наносить на возделываемую площадь или растение, подлежащие обработке, одновременно или последовательно с другими соединениями. Эти соединения могут представлять собой удобрения, средства борьбы с сорняками, криопротекторы, поверхностно-активные вещества, детергенты, пестицидные мыла, масла, применяемые во время состояния покоя, полимеры и/или составы с носителем с замедленным высвобождением или биоразлагаемым носителем, который обеспечивает длительное дозированное внесение в целевой области после однократного нанесения состава. Они также могут представлять собой селективные гербициды, химические инсектициды, вируциды, микробициды, амебоциды, пестициды, фунгициды, бактерициды, нематоциды, моллюскоциды или смеси из нескольких этих препаратов, при необходимости вместе с дополнительными приемлемыми с точки зрения сельского хозяйства носителями, поверхностно-активными веществами или вспомогательными средствами, способствующими нанесению, традиционно используемыми в области техники, связанной с получением составов. Подходящие носители и вспомогательные средства могут быть твердыми или жидкими и соответствуют веществам, обычно используемым в технологии составления, например природным или регенерированным минеральным веществам, растворителям, диспергирующим веществам, смачивающим средствам, веществам, придающим клейкость, связующим или удобрениям. Аналогично, составы можно готовить в виде съедобных "приманок" или формировать в "ловушки" для вредителей, что обеспечивает поедание или заглатывание пестицидного состава целевым вредителем.
Способы нанесения активного ингредиента или агрохимической композиции, которая содержит по меньшей мере один из инсектицидных полипептидов по настоящему раскрытию, вырабатываемых штаммами бактерий, включают нанесение на листья, покрытие семян и внесение в почву. Количество применений и норма применения зависят от интенсивности поражения соответствующим вредителем.
Композицию можно составлять в виде порошка, дуста, пеллеты, гранулы, распыляемого раствора, эмульсии, коллоидного вещества, раствора и т. п., и ее можно получать с помощью таких традиционных способов как сушка, лиофилизация, гомогенизация, экстракция, фильтрация, центрифугирование, осаждение или концентрирование культуры клеток, содержащих полипептид. Во всех таких композициях, которые содержат по меньшей мере один такой пестицидный полипептид, полипептид может присутствовать в концентрации от приблизительно 1% до приблизительно 99% по весу.
Вредителей группы чешуекрылых, двукрылых, настоящих клопов, нематод, полужесткокрылых или жесткокрылых можно уничтожать или снижать их количество в указанной области с помощью способов по настоящему раскрытию или средства можно наносить профилактически на область окружающей среды с целью предотвращения заражения восприимчивым вредителем. Предпочтительно, вредитель заглатывает пестицидно эффективное количество полипептида или контактирует с ним. "Пестицидно эффективное количество", используемое в данном документе, относится к количеству пестицида, которое может приводить к гибели по меньшей мере одного вредителя или к заметно сниженному росту, питанию или нормальному физиологическому развитию вредителя. Данное количество будет варьировать в зависимости от таких факторов, как, например, специфические целевые вредители, подлежащие контролю, специфическая среда, местоположение, растение, культура или сельскохозяйственный участок, подлежащий обработке, условия окружающей среды и способ, норма, концентрация, стабильность и количество применений пестицидно эффективной полипептидной композиции. Составы также могут варьировать в зависимости от климатических условий, экологических соображений, и/или частоты нанесения, и/или тяжести заражения вредителями.
Описанные пестицидные композиции можно получать путем составления либо суспензии бактериальных клеток, кристаллов и/или спор, либо выделенного белкового компонента с требуемым носителем, приемлемым с точки зрения сельского хозяйства. Композиции можно составлять перед введением с помощью надлежащих способов, таких как лиофилизация, сублимационная сушка, высушивание, или в водном носителе, среде или подходящем растворителе, таком как солевой раствор или другой буфер. Составленные композиции могут находиться в форме дуста, или гранулированного материала, или суспензии в масле (растительном или минеральном), или водных эмульсий или эмульсий масло/вода, или в виде смачиваемого порошка, или в комбинации с любым другим материалом носителя, подходящим для сельскохозяйственного применения. Подходящие носители, приемлемые с точки зрения сельского хозяйства, могут быть твердыми или жидкими и хорошо известны из уровня техники. Термин "приемлемый с точки зрения сельского хозяйства носитель" охватывает все вспомогательные средства, инертные компоненты, диспергирующие вещества, поверхностно-активные вещества, вещества, придающие клейкость, связующие и т. д., которые обычно применяют в технологии составления пестицидов; причем они хорошо известны специалистам по составлению пестицидов. Составы можно смешивать с одним или несколькими твердыми или жидкими вспомогательными средствами и получать с помощью различных способов, например, путем равномерного перемешивания, смешивания и/или размалывания пестицидной композиции с подходящими вспомогательными средствами с применением традиционных методик составления. Подходящие составы и способы нанесения описаны в патенте США № 6468523, включенном в данный документ с помощью ссылки. Растения можно также обрабатывать одной или несколькими химическими композициями, в том числе одним или несколькими гербицидами, инсектицидами или фунгицидами. Иллюстративные химические композиции включают следующее. Гербициды для фруктов/овощей: атразин, бромацил, диурон, глифосат, линурон, метрибузин, симазин, трифлуралин, флуазифоп, глуфосинат, галосульфурон от Gowan, паракват, пропизамид, сетоксидим, бутафенацил, галосульфурон, индазифлам; инсектициды для фруктов/овощей: алдикарб, Bacillus thuriengiensis, карбарил, карбофуран, хлорпирифос, циперметрин, дельтаметрин, диазинон, малатион, абамектин, цифлутрин/бета-цифлутрин, эсфенвалерат, лямбда-цигалотрин, ацеквиноцил, бифеназат, метоксифенозид, новалурон, кромафенозид, тиаклоприд, динотефуран, флуакрипирим, толфенпирад, клотианидин, спиродиклофен, гамма-цигалотрин, спиромезифен, спиносад, ринаксипир, циазипир, спинотерам, трифлумурон, спиротетрамат, имидаклоприд, флубендиамид, тиодикарб, метафлумизон, сульфоксафлор, цифлуметофен, цианопирафен, имидаклоприд, клотианидин, тиаметоксам, спиноторам, тиодикарб, флоникамид, метиокарб, эмамектин-бензоат, индоксакарб, фортиазат, фенамифос, кадусафос, пирипроксифен, фенбутатин-оксид, гекстиазокс, метомил, 4-[[(6-хлорпиридин-3-ил)метил](2,2-дифторэтил)амино]фуран-2(5H)-он; фунгициды для фруктов/овощей: карбендазим, хлороталонил, EBDC, сера, тиофанат-метил, азоксистробин, цимоксанил, флуазинам, фосетил, ипродион, крезоксим-метил, металаксил/мефеноксам, трифлоксистробин, этабоксам, ипроваликарб, трифлоксистробин, фенгексамид, окспоконазола фумарат, циазофамид, фенамидон, зоксамид, пикоксистробин, пираклостробин, цифлуфенамид, боскалид; гербициды для злаков: изопротурон, бромоксинил, иоксинил, фенокси-соединения, хлорсульфурон, клодинафоп, диклофоп, дифлуфеникан, феноксапроп, флорасулам, флуроксипир, метсульфурон, триасульфурон, флукарбазон, йодосульфурон, пропоксикарбазон, пиколинафен, мезосульфурон, бефлубутамид, пиноксаден, амидосульфурон, тифенсульфурон-метил, трибенурон, флупирсульфурон, сульфосульфурон, пирасульфотол, пироксулам, флуфенацет, тралкоксидим, пироксасульфон; фунгициды для злаков: карбендазим, хлороталонил, азоксистробин, ципроконазол, ципродинил, фенпропиморф, эпоксиконазол, крезоксим-метил, квиноксифен, тебуконазол, трифлоксистробин, симеконазол, пикоксистробин, пираклостробин, димоксистробин, протиоконазол, флуоксастробин; инсектициды для злаков: диметоат, лямбда-цигалотрин, дельтаметрин, альфа-циперметрин, β-цифлутрин, бифентрин, имидаклоприд, клотианидин, тиаметоксам, тиаклоприд, ацетамиприд, динетофуран, хлорпирифос, метамидофос, оксидеметон-метил, пиримикарб, метиокарб; гербициды для маиса: атразин, алахлор, бромоксинил, ацетохлор, дикамба, клопиралид, (S-)диметенамид, глуфосинат, глифосат, изоксафлутол, (S-)метолахлор, мезотрион, никосульфурон, примисульфурон, римсульфурон, сулькотрион, форамсульфурон, топрамезон, темботрион, сафлуфенацил, тиенкарбазон, флуфенацет, пироксасульфон; инсектициды для маиса: карбофуран, хлорпирифос, бифентрин, фипронил, имидаклоприд, лямбда-цигалотрин, тефлутрин, тербуфос, тиаметоксам, клотианидин, спиромезифен, флубендиамид, трифлумурон, ринаксипир, дельтаметрин, тиодикарб, β-цифлутрин, циперметрин, бифентрин, люфенурон, трифлуморон, тефлутрин, тебупиримфос, этипрол, циазипир, тиаклоприд, ацетамиприд, динетофуран, авермектин, метиокарб, спиродиклофен, спиротетрамат; фунгициды для маиса: фенитропан, тирам, протиоконазол, тебуконазол, трифлоксистробин; гербициды для риса: бутахлор, пропанил, азимсульфурон, бенсульфурон, цигалофоп, даимурон, фентразамид, имазосульфурон, мефенацет, оксазикломефон, пиразосульфурон, пирибутикарб, квинклорак, тиобенкарб, инданофан, флуфенацет, фентразамид, галосульфурон, оксазикломефон, бензобициклон, пирифталид, пеноксулам, биспирибак, оксадиаргил, этоксисульфурон, претилахлор, мезотрион, тефурилтрион, оксадиазон, феноксапроп, пиримисульфан; инсектициды для риса: диазинон, фенитротион, фенобукарб, монокротофос, бенфуракарб, бупрофезин, динотефуран, фипронил, имидаклоприд, изопрокарб, тиаклоприд, кромафенозид, тиаклоприд, динотефуран, клотианидин, этипрол, флубендиамид, ринаксипир, дельтаметрин, ацетамиприд, тиаметоксам, циазипир, спиносад, спиноторам, эмамектин-бензоат, циперметрин, хлорпирифос, картап, метамидофос, этофенпрокс, триазофос, 4-[[(6-хлорпиридин-3-ил)метил](2,2-дифторэтил)амино]фуран-2(5H)-он, карбофуран, бенфуракарб; фунгициды для риса: тиофанат-метил, азоксистробин, карпропамид, эдифенфос, феримзон, ипробенфос, изопротиолан, пенцикурон, пробеназол, пироквилон, трициклазол, трифлоксистробин, диклоцимет, феноксанил, симеконазол, тиадинил; гербициды для хлопчатника: диурон, флуометурон, MSMA, оксифлуорфен, прометрин, трифлуралин, карфентразон, клетодим, флуазифоп-бутил, глифосат, норфлуразон, пендиметалин, пиритиобак-натрий, трифлоксисульфурон, тепралоксидим, глуфосинат, флумиоксазин, тидиазурон; инсектициды для хлопчатника: ацефат, алдикарб, хлорпирифос, циперметрин, дельтаметрин, малатион, монокротофос, абамектин, ацетамиприд, эмамектин бензоат, имидаклоприд, индоксакарб, лямбда-цигалотрин, спиносад, тиодикарб, гамма-цигалотрин, спиромезифен, пиридалил, флоникамид, флубендиамид, трифлумурон, ринаксипир, бета-цифлутрин, спиротетрамат, клотианидин, тиаметоксам, тиаклоприд, динетофуран, флубендиамид, циазипир, спиносад, спиноторам, гамма-цигалотрин, 4-[[(6-хлорпиридин-3-ил)метил](2,2-дифторэтил)амино]фуран-2(5H)-он, тиодикарб, авермектин, флоникамид, пиридалил, спиромезифен, сульфоксафлор, профенофос, триазофос, эндосульфан; фунгициды для хлопчатника: этридиазол, металаксил, квинтозен; гербициды для сои: алахлор, бентазон, трифлуралин, хлоримурон-этил, хлорансулам-метил, феноксапроп, фомесафен, флуазифоп, глифосат, имазамокс, имазаквин, имазетапир, (S-)метолахлор, метрибузин, пендиметалин, тепралоксидим, глуфосинат; инсектициды для сои: лямбда-цигалотрин, метомил, паратион, тиокарб, имидаклоприд, клотианидин, тиаметоксам, тиаклоприд, ацетамиприд, динетофуран, флубендиамид, ринаксипир, циазипир, спиносад, спиноторам, эмамектин-бензоат, фипронил, этипрол, дельтаметрин, β-цифлутрин, гамма- и лямбда-цигалотрин, 4-[[(6-хлорпиридин-3-ил)метил](2,2-дифторэтил)амино]фуран-2(5H)-он, спиротетрамат, спинодиклофен, трифлумурон, флоникамид, тиодикарб, бета-цифлутрин; фунгициды для сои: азоксистробин, ципроконазол, эпоксиконазол, флутриафол, пираклостробин, тебуконазол, трифлоксистробин, протиоконазол, тетраконазол; гербициды для сахарной свеклы: хлоридазон, десмедифам, этофумезат, фенмедифам, триаллат, клопиралид, флуазифоп, ленацил, метамитрон, квинмерак, циклоксидим, трифлусульфурон, тепралоксидим, квизалофоп; инсектициды для сахарной свеклы: имидаклоприд, клотианидин, тиаметоксам, тиаклоприд, ацетамиприд, динетофуран, дельтаметрин, β-цифлутрин, гамма/лямбда-цигалотрин, 4-[[(6-хлорпиридин-3-ил)метил](2,2-дифторэтил)амино]фуран-2(5H)-он, тефлутрин, ринаксипир, циаксипир, фипронил, карбофуран; гербициды для канолы: клопиралид, диклофоп, флуазифоп, глуфосинат, глифосат, метазахлор, трифлуралин, этаметсульфурон, квинмерак, квизалофоп, клетодим, тепралоксидим; фунгициды для канолы: азоксистробин, карбендазим, флудиоксонил, ипродион, прохлораз, винклозолин; инсектициды для канолы: карбофурановые фосфороорганические соединения, пиретроиды, тиаклоприд, дельтаметрин, имидаклоприд, клотианидин, тиаметоксам, ацетамиприд, динетофуран, β-цифлутрин, гамма и лямбда-цигалотрин, тау-флувалериат, этипрол, спиносад, спиноторам, флубендиамид, ринаксипир, циазипир, 4-[[(6-хлорпиридин-3-ил)метил](2,2-дифторэтил)амино]фуран-2(5H)-он.
В некоторых вариантах осуществления гербицид представляет собой атразин, бромацил, диурон, хлорсульфурон, метсульфурон, тифенсульфурон-метил, трибенурон, ацетохлор, дикамбу, изоксафлутол, никосульфурон, римсульфурон, пиритиобак-натрий, флумиоксазин, хлоримурон-этил, метрибузин, квизалофоп, S-метолахлор, гексазинон или их комбинацию.
В некоторых вариантах осуществления инсектицид представляет собой эсфенвалерат, хлорантранилипрол, метомил, индоксакарб, оксамил или их комбинацию.
Пестицидная и инсектицидная активность
"Вредитель" включает без ограничения насекомых, грибки, бактерии, нематод, клещей, иксодовых клещей и т. п. Насекомые-вредители включают насекомых, выбранных из отрядов Coleoptera, Diptera, Hymenoptera, Lepidoptera, Mallophaga, Homoptera, Hemiptera, Orthroptera, Thysanoptera, Dermaptera, Isoptera, Anoplura, Siphonaptera, Trichoptera и т. д., в частности Lepidoptera и Coleoptera.
Специалистам в данной области будет понятно, что не все соединения в равной степени эффективны в отношении всех вредителей. Соединения согласно вариантам осуществления проявляют активность в отношении насекомых-вредителей, которые могут включать экономически важных вредителей агрономических, лесных, тепличных продуктов, продуктов питомников декоративных растений, продуктов пищи и волокнистых продуктов, продуктов, связанных со здоровьем людей и животных, продуктов, связанных с домашней и коммерческой структурой, товаров для дома и продуктов для хранения.
Личинки из отряда Lepidoptera включают без ограничения совок, подгрызающих совок, пядениц и гелиотин семейства Noctuidae Spodoptera frugiperda JE Smith (совка травяная); S. exigua Hübner (совка малая); S. litura Fabricius (табачная совка, гусеница, пожирающая соцветия); Mamestra configurata Walker (совка Берта); M. brassicae Linnaeus (совка капустная); Agrotis ipsilon Hufnagel (совка-ипсилон); A. orthogonia Morrison (совка прямоугольная); A. subterranea Fabricius (совка зернистая); Alabama argillacea Hübner (совка хлопковая американская); Trichoplusia ni Hübner (совка ни); Pseudoplusia includens Walker (соевая совка); Anticarsia gemmatalis Hübner (совка бархатных бобов); Hypena scabra Fabricius (совка клеверная); Heliothis virescens Fabricius (табачная листовертка); Pseudaletia unipuncta Haworth (совка луговая); Athetis mindara Barnes и Mcdunnough (шершавая совка); Athetis lepigone; Euxoa messoria Harris (чернобокая гусеница совки); Earias insulana Boisduval (совка хлопковая египетская); E. vittella Fabricius (совка пятнистая); Helicoverpa armigera Hübner (совка щетинконогая резедовая); H. zea Boddie (совка кукурузная или хлопковая совка); Melanchra picta Harris (совка); Egira (Xylomyges) curialis Grote (цитрусовая совка); огневок, чехлоносок, бабочек, строящих паутинные гнезда, конусных бабочек Sesamia inferens (азиатский розовый стеблевой точильщик) и вредителей, скелетирующих листья, из семейства Pyralidae Ostrinia nubilalis Hübner (мотылек стеблевой кукурузный); Amyelois transitella Walker (гусеницы, повреждающие рубчики цитрусовых); Anagasta kuehniella Zeller (огневка мельничная); Cadra cautella Walker (огневка сухофруктовая); Chilo suppressalis Walker (желтая рисовая огневка); C. partellus (сорговая огневка); Corcyra cephalonica Stainton (огневка рисовая); Crambus caliginosellus Clemens (огневка кукурузная); C. teterrellus Zincken (огневка мятликовая); Cnaphalocrocis medinalis Guenée (листовертка рисовая); Desmia funeralis Hübner (виноградная листовертка); Diaphania hyalinata Linnaeus (дынная огневка); D. nitidalis Stoll (огневка огурцов-пикули); Diatraea grandiosella Dyar (огневка кукурузная юго-западная), D. saccharalis Fabricius (огневка сахарного тростника); Eoreuma loftini Dyar (мексиканская рисовая огневка); Ephestia elutella Hübner (огневка зерновая (какао)); Galleria mellonella Linnaeus (большая восковая моль); Herpetogramma licarsisalis Walker (огневка-травянка); Homoeosoma electellum Hulst (огневка подсолнечниковая); Elasmopalpus lignosellus Zeller (малая кукурузная огневка); Achroia grisella Fabricius (малая восковая моль); Loxostege sticticalis Linnaeus (луговой мотылек); Orthaga thyrisalis Walker (чайная моль); Maruca testulalis Geyer (огневка акациевая); Plodia interpunctella Hübner (моль индийская мучная); Scirpophaga incertulas Walker (стеблевая рисовая огневка); Udea rubigalis Guenée (огневка ржаво-коричневая); и листоверток, листоверток-почкоедов, плодожорок и гусениц-вредителей плодов из семейства Tortricidae Acleris gloverana Walsingham (западная черноголовая листовертка); A. variana Fernald (восточная черноголовая листовертка); Archips argyrospila Walker (листовертка плодовых деревьев); A. rosana Linnaeus (европейская листовертка) и другие виды Archips, Adoxophyes orana Fischer von Rösslerstamm (листовертка сетчатая); Cochylis hospes Walsingham (полосатая подсолнечниковая моль); Cydia latiferreana Walsingham (лещинная плодожорка); C. pomonella Linnaeus (яблонная плодожорка); Platynota flavedana Clemens (листовертка изменчивая); P. stultana Walsingham (листовертка всеядная); Lobesia botrana Denis & Schiffermüller (листовертка европейская виноградная); Spilonota ocellana Denis & Schiffermüller (листовертка почковая); Endopiza viteana Clemens (листовертка виноградная); Eupoecilia ambiguella Hübner (листовертка гроздевая); Bonagota salubricola Meyrick (листовертка бразильская яблочная); Grapholita molesta Busck (плодожорка восточная персиковая); Suleima helianthana Riley (листовертка подсолнечниковая); Argyrotaenia spp.; Choristoneura spp.
Другие выбранные сельскохозяйственные вредители из отряда Lepidoptera включают в себя без ограничения Alsophila pometaria Harris (осенний плодовый червь); Anarsia lineatella Zeller (моль фруктовая полосатая); Anisota senatoria J.E. Smith (сатурния оранжевая дубовая); Antheraea pernyi Guérin-Méneville (китайский дубовый шелкопряд); Bombyx mori Linnaeus (тутовый шелкопряд); Bucculatrix thurberiella Busck (кривоусая хлопковая моль); Colias eurytheme Boisduval (люцерновая желтушка); Conogethes punctiferalis (желтая персиковая моль); Datana integerrima Grote & Robinson (хохлатка ореховая); Dendrolimus sibiricus Tschetwerikov (сибирский шелкопряд), Ennomos subsignaria Hübner (пяденица ильмовая); Erannis tiliaria Harris (пяденица липовая); Euproctis chrysorrhoea Linnaeus (шелкопряд золотистый); Harrisina americana Guérin-Méneville (пироморфида американская); Hemileuca oliviae Cockrell (гусеница бабочки-сатурнии); Hyphantria cunea Drury (американская белая бабочка); Keiferia lycopersicella Walsingham (томатная моль); Lambdina fiscellaria fiscellaria Hulst (пяденица гемлоковая восточная); L. fiscellaria lugubrosa Hulst (пяденица гемлоковая западная); Leucoma salicis Linnaeus (волнянка ивовая); Lymantria dispar Linnaeus (непарный шелкопряд); Manduca quinquemaculata Haworth (бражник пятиточечный, томатный бражник); M. sexta Haworth (томатный бражник, табачный бражник); Operophtera brumata Linnaeus (пяденица зимняя); Paleacrita vernata Peck (пяденица весенняя); Papilio cresphontes Cramer (парусник кресфонтес, «апельсиновая собака»); Phryganidia californica Packard (коконопряд кольчатый калифорнийский); Phyllocnistis citrella Stainton (цитрусовая минирующая мушка); Phyllonorycter blancardella Fabricius (моль-пестрянка плодовая нижнесторонняя); Pieris brassicae Linnaeus (белянка капустная большая); P. rapae Linnaeus (белянка капустная малая); P. napi Linnaeus (белянка брюквенная); Platyptilia carduidactyla Riley (пальцекрылка артишоковая); Plutella xylostella Linnaeus (моль капустная); Pectinophora gossypiella Saunders (розовый коробочный червь); Pontia protodice Boisduval и Leconte (клетчатая белянка); Sabulodes aegrotata Guenée (всеядная пяденица); Schizura concinna J.E. Smith (хохлатка); Sitotroga cerealella Olivier (моль ячменная ангумуазская); Thaumetopoea pityocampa Schiffermuller (походный шелкопряд сосновый); Tineola bisselliella Hummel (моль комнатная); Tuta absoluta Meyrick (томатная моль); Yponomeuta padella Linnaeus (горностаевая моль плодовая); Heliothis subflexa Guenée; Malacosoma spp. и Orgyia spp.
Представляют интерес личинки и имаго из отряда Coleoptera, в том числе долгоносики из семейств Anthribidae, Bruchidae и Curculionidae (в том числе без ограничения: Anthonomus grandis Boheman (долгоносик хлопковый); Lissorhoptrus oryzophilus Kuschel (долгоносик рисовый водяной); Sitophilus granarius Linnaeus (долгоносик амбарный); S. oryzae Linnaeus (долгоносик рисовый); Hypera punctata Fabricius (долгоносик точечный); Cylindrocopturus adspersus LeConte (долгоносик подсолнечниковый стеблевой); Smicronyx fulvus LeConte (красный подсолнечниковый долгоносик); S. sordidus LeConte (серый подсолнечниковый долгоносик); Sphenophorus maidis Chittenden (долгоносик маисовый)); земляные блошки, огуречные листоеды, корневые черви, листоеды, картофельные жуки и листовые минеры семейства Chrysomelidae (в том числе без ограничения: Leptinotarsa decemlineata Say (колорадский жук); Diabrotica virgifera virgifera LeConte (западный кукурузный жук); D. barberi Smith and Lawrence (северный кукурузный жук); D. undecimpunctata howardi Barber (южный кукурузный жук); Chaetocnema pulicaria Melsheimer (земляная кукурузная блошка); Phyllotreta cruciferae Goeze (блошка крестоцветная); Phyllotreta striolata (полосатая блошка); Colaspis brunnea Fabricius (листоед виноградный); Oulema melanopus Linnaeus (пьявица красногрудая); Zygogramma exclamationis Fabricius (подсолнечниковый листоед)); жуки из семейства Coccinellidae (в том числе без ограничения Epilachna varivestis Mulsant (мексиканская фасолевая коровка)); хрущи и другие жуки из семейства Scarabaeidae (в том числе без ограничения: Popillia japonica Newman (хрущик японский); Cyclocephala borealis Arrow (дупляк северный, хрущ); C. immaculata Olivier (дупляк южный, хрущ); Rhizotrogus majalis Razoumowsky (хрущ европейский); Phyllophaga crinita Burmeister (личинка хруща); Ligyrus gibbosus De Geer (жук морковный)); кожееды семейства Dermestidae; проволочники из семейства Elateridae, Eleodes spp., Melanotus spp.; Conoderus spp.; Limonius spp.; Agriotes spp.; Ctenicera spp.; Aeolus spp.; короеды из семейства Scolytidae и жуки из семейства Tenebrionidae.
Представляют интерес имаго и незрелые особи отряда Diptera, в том числе минирующие мушки Agromyza parvicornis Loew (кукурузная минирующая мушка); галлицы (в том числе без ограничения: Contarinia sorghicola Coquillett (галлица сорговая); Mayetiola destructor Say (гессенская муха); Sitodiplosis mosellana Géhin (злаковая оранжевая галлица); Neolasioptera murtfeldtiana Felt, (подсолнечниковая галлица)); плодовые мушки (Tephritidae), Oscinella frit Linnaeus (плодовые мушки); цветочные мухи (в том числе без ограничения: Delia platura Meigen (муха ростковая); D. coarctata Fallen (муха озимая) и другие Delia spp., Meromyza americana Fitch (американская меромиза); Musca domestica Linnaeus (комнатные мухи); Fannia canicularis Linnaeus, F. femoralis Stein (малые комнатные мухи); Stomoxys calcitrans Linnaeus (жигалки осенние)); мухи полевые, жигалки, мухи мясные, Chrysomya spp.; Phormia spp. и другие мухи-вредители надсемейства Muscoidea, слепни Tabanus spp.; носоглоточные оводы Gastrophilus spp.; Oestrus spp.; бычьи оводы Hypoderma spp.; пестряки Chrysops spp.; Melophagus ovinus Linnaeus (кровососки овечьи) и другие Brachycera, комары Aedes spp.; Anopheles spp.; Culex spp.; мошки Prosimulium spp.; Simulium spp.; мокрецы, москиты, сциариды и другие Nematocera.
В качестве представляющих интерес насекомых включены имаго и насекомые на стадии нимфы отрядов Hemiptera и Homoptera, такие как без ограничения хермесы из семейства Adelgidae, слепняки из семейства Miridae, цикады из семейства Cicadidae, цикадки, Empoasca spp.; из семейства Cicadellidae, насекомые надсемейства Fulgoroidea из семейств Cixiidae, Flatidae, Fulgoroidea, Issidae и Delphacidae, горбатки из семейства Membracidae, листоблошки из семейства Psyllidae, белокрылки из семейства Aleyrodidae, тли из семейства Aphididae, филлоксеры из семейства Phylloxeridae, мучнистые червецы из семейства Pseudococcidae, червецы из семейств Asterolecanidae, Coccidae, Dactylopiidae, Diaspididae, Eriococcidae Ortheziidae, Phoenicococcidae и Margarodidae, кружевницы из семейства Tingidae, щитники из семейства Pentatomidae, клопы-черепашки, Blissus spp.; и другие наземники из семейства Lygaeidae, пенницы из семейства Cercopidae, краевики из семейства Coreidae, а также красноклопы и красноклопы хлопковые из семейства Pyrrhocoridae.
Важные с точки зрения сельского хозяйства представители отряда Homoptera дополнительно включают без ограничения: Acyrthisiphon pisum Harris (тля гороховая); Aphis craccivora Koch (тля люцерновая); A. fabae Scopoli (тля свекловичная); A. gossypii Glover (тля хлопковая, тля бахчевая); A. maidiradicis Forbes (тля кукурузная корневая); A. pomi De Geer (тля яблоневая); A. spiraecola Patch (тля зеленая цитрусовая); Aulacorthum solani Kaltenbach (тля картофельная обыкновенная); Chaetosiphon fragaefolii Cockerell (тля земляничная американская); Diuraphis noxia Kurdjumov/Mordvilko (русская пшеничная тля); Dysaphis plantaginea Paaserini (тля яблоневая розовая); Eriosoma lanigerum Hausmann (тля яблоневая кровяная); Brevicoryne brassicae Linnaeus (капустная тля); Hyalopterus pruni Geoffroy (тля сливовая опыленная); Lipaphis erysimi Kaltenbach (тля ложнокапустная); Metopolophium dirrhodum Walker (розанно-злаковая тля); Macrosiphum euphorbiae Thomas (большая картофельная тля); Myzus persicae Sulzer (тля персиковая, тля оранжерейная); Nasonovia ribisnigri Mosley (тля салатная зеленая); Pemphigus spp. (тли корневые и тли галловые); Rhopalosiphum maidis Fitch (тля сорговая); R. padi Linnaeus (тля черемуховая обыкновенная); Schizaphis graminum Rondani (тля злаковая обыкновенная); Sipha flava Forbes (тля желтая сахарного тростника); Sitobion avenae Fabricius (тля листовая); Therioaphis maculata Buckton (пятнистая люцерновая тля); Toxoptera aurantii Boyer de Fonscolombe (тля померанцевая) и T. citricida Kirkaldy (тля цитрусовая); Adelges spp. (хермесы); Phylloxera devastatrix Pergande (филлоксера гикори); Bemisia tabaci Gennadius (белокрылка табачная, белокрылка хлопковая); B. argentifolii Bellows и Perring (белокрылка магнолиевая); Dialeurodes citri Ashmead (белокрылка цитрусовая); Trialeurodes abutiloneus (белокрылка полосатокрылая) и T. vaporariorum Westwood (белокрылка тепличная); Empoasca fabae Harris (цикадка картофельная); Laodelphax striatellus Fallen (темная цикадка); Macrolestes quadrilineatus Forbes (цикадка астровая); Nephotettix cinticeps Uhler (цикадка зеленая); N. nigropictus Stål (рисовая цикадка); Nilaparvata lugens Stål (бурая рисовая цикадка); Peregrinus maidis Ashmead (цикадка кукурузная); Sogatella furcifera Horvath (цикадка белоспинная); Sogatodes orizicola Muir (дельфацид рисовый); Typhlocyba pomaria McAtee (цикадка яблоневая); Erythroneoura spp. (цикадки виноградные); Magicicada septendecim Linnaeus (периодическая цикада); Icerya purchasi Maskell (червец австралийский желобчатый); Quadraspidiotus perniciosus Comstock (щитовка калифорнийская); Planococcus citri Risso (мучнистый червец виноградный); Pseudococcus spp. (другие мучнистые червецы); Cacopsylla pyricola Foerster (листоблошка грушевая); Trioza diospyri Ashmead (листоблошка хурмовая).
Виды, представляющие интерес с точки зрения сельского хозяйства, из отряда Hemiptera включают без ограничения: Acrosternum hilare Say (щитник зеленый); Anasa tristis De Geer (клоп-ромбовик печальный); Blissus leucopterus leucopterus Say (клоп-черепашка); Corythuca gossypii Fabricius (кружевница хлопковая); Cyrtopeltis modesta Distant (клоп томатный); Dysdercus suturellus Herrich-Schäffer (красноклоп хлопковый); Euschistus servus Say (клоп коричневый вонючий); E. variolarius Palisot de Beauvois (щитник однопятнистый); Graptostethus spp. (комплекс клопов-наземников); Leptoglossus corculus Say (клоп-краевик сосновый); Lygus lineolaris Palisot de Beauvois (клоп луговой); L. Hesperus Knight (слепняк западный матовый); L. pratensis Linnaeus (клопик полевой); L. rugulipennis Poppius (клоп травяной европейский); Lygocoris pabulinus Linnaeus (зеленый слепняк); Nezara viridula Linnaeus (зеленый овощной клоп); Oebalus pugnax Fabricius (клоп-щитник рисовый); Oncopeltus fasciatus Dallas (клоп молочайный большой); Pseudatomoscelis seriatus Reuter (клоп-слепняк хлопковый).
Кроме того, варианты осуществления могут быть эффективными в отношении Hemiptera, таких как Calocoris norvegicus Gmelin (клопик картофельный); Orthops campestris Linnaeus; Plesiocoris rugicollis Fallen (клоп яблоневый северный); Cyrtopeltis modestus Distant (томатный клоп); Cyrtopeltis notatus Distant (клоп-слепняк); Spanagonicus albofasciatus Reuter (слепняк белоточечный); Diaphnocoris chlorionis Say (клоп-слепняк гледичии); Labopidicola allii Knight (слепняк луковый); Pseudatomoscelis seriatus Reuter (слепняк хлопковый); Adelphocoris rapidus Say (клоп быстрый); Poecilocapsus lineatus Fabricius (слепняк четырехлинейный); Nysius ericae Schilling (низиус вересковый); Nysius raphanus Howard (ложная черепашка); Nezara viridula Linnaeus (зеленый овощной клоп); Eurygaster spp.; Coreidae spp.; Pyrrhocoridae spp.; Tinidae spp.; Blostomatidae spp.; Reduviidae spp. и Cimicidae spp.
Также включены имаго и личинки из отряда Acari (клещи), такие как Aceria tosichella Keifer (галловый клещ пшеничный); Petrobia latens Müller (петробия многоядная); клещики паутинные и клещики красные семейства Tetranychidae, Panonychus ulmi Koch (красный плодовый клещ); Tetranychus urticae Koch (обыкновенный паутинный клещ); (T. mcdanieli McGregor (клещик Макданиела); T. cinnabarinus Boisduval (красный паутинный клещик); T. turkestani Ugarov & Nikolski (туркестанский паутинный клещик); плоские клещи семейства Tenuipalpidae, Brevipalpus lewisi McGregor (оранжевый клещ); ржавчинные и почковые клещи семейства Eriophyidae и другие клещи, питающиеся листьями, а также клещи, важные для здоровья человека и животных, т. е. пылевые клещи семейства Epidermoptidae, железницы семейства Demodicidae, зерновые клещи семейства Glycyphagidae, иксодовые клещи отряда Ixodidae. Ixodes scapularis Say (черноногий клещ); I. holocyclus Neumann (австралийский паралитический клещ); Dermacentor variabilis Say (клещ иксодовый собачий); Amblyomma americanum Linnaeus (иксодовый клещ Amblyomma) и конские и чесоточные клещи семейств Psoroptidae, Pyemotidae и Sarcoptidae.
Представляющими интерес насекомыми-вредителями из отряда Thysanura являются, например, Lepisma saccharina Linnaeus (чешуйница); Thermobia domestica Packard (термобия).
Дополнительные охватываемые вредители-артроподы включают: пауков из отряда Araneae, таких как Loxosceles reclusa Gertsch and Mulaik (бурый паук-отшельник) и Latrodectus mactans Fabricius (черная вдова), а также многоножек из отряда Scutigeromorpha, таких как Scutigera coleoptrata Linnaeus (обыкновенная мухоловка).
Насекомое-вредитель, представляющее интерес, включает надсемейство щитников и других родственных насекомых, в том числе без исключения виды, принадлежащие к семейству Pentatomidae (Nezara viridula, Halyomorpha halys, Piezodorus guildini, Euschistus servus, Acrosternum hilare, Euschistus heros, Euschistus tristigmus, Acrosternum hilare, Dichelops furcatus, Dichelops melacanthus, и Bagrada hilaris (клоп из рода Bagrada)), семейству Plataspidae (Megacopta cribraria - полушаровидный щитник) и семейству Cydnidae (Scaptocoris castanea - коричневый клоп-землекоп), а также виды Lepidoptera, в том числе без ограничения: моль капустную, например Helicoverpa zea Boddie; соевую совку, например Pseudoplusia includens Walker, и совку бархатных бобов, например Anticarsia gemmatalis Hübner.
Способы измерения пестицидной активности хорошо известны в уровне техники. См., например, Czapla and Lang, (1990) J. Econ. Entomol. 83:2480-2485; Andrews, et al., (1988) Biochem. J. 252:199-206; Marrone, et al., (1985) J. of Economic Entomology 78:290-293 и патент США № 5743477, все из которых включены в данный документ с помощью ссылки во полном объеме. Как правило, белок смешивают и применяют в анализах питания. См., например, Marrone, et al., (1985) J. of Economic Entomology 78:290-293. Такие анализы могут включать приведение растений в контакт с одним или несколькими вредителями и определение способности растения выживать и/или вызывать гибель вредителей.
Нематоды включают паразитических нематод, таких как галловые, цистообразующие и ранящие нематоды, в том числе Heterodera spp., Meloidogyne spp. и Globodera spp.; в частности, представителей цистообразующих нематод, в том числе без ограничения Heterodera glycines (соевая цистообразующая нематода); Heterodera schachtii (цистообразующая нематода свеклы); Heterodera avenae (цистообразующая нематода злаков), а также Globodera rostochiensis и Globodera pailida (цистообразующые нематоды картофеля). Ранящие нематоды включают Pratylenchus spp.
Средство для обработки семян
Для защиты и для повышения продукции урожая и улучшения технологий усовершенствования признаков дополнительные средства для обработки семян могут обеспечивать дополнительную гибкость культурных растений и экономически эффективный контроль в отношении насекомых, сорняков и заболеваний. Семенной материал можно обрабатывать, обычно обрабатывать поверхность с помощью композиции, содержащей комбинации химических или биологических гербицидов, антидотов гербицидов, инсектицидов, фунгицидов, ингибиторов и усилителей прорастания, питательных веществ, регуляторов и активаторов роста растений, бактерицидов, нематоцидов, авицидов и/или моллюскоцидов. Эти соединения обычно составляют вместе с дополнительными носителями, поверхностно-активными веществами или вспомогательными средствами, способствующими нанесению, традиционно используемыми в области техники, связанной с получением составов. Покрытия можно наносить с помощью пропитки материала для размножения жидким составом или с помощью покрытия комбинированным влажным или сухим составом. Примеры различных типов соединений, которые можно применять в качестве средств для обработки семян, представлены в The Pesticide Manual: A World Compendium, C.D.S. Tomlin Ed., Published by the British Crop Production Council, который включен в данный документ с помощью ссылки.
Некоторые средства для обработки семян, которые можно применять в отношении семян культур, включают без ограничения один или несколько из абсцизовой кислоты, ацибензолар-S-метила, авермектина, амитрола, азаконазола, азоспириллума, азадирахтина, азоксистробина, Bacillus spp. (в том числе один или несколько из видов cereus, firmus, megaterium, pumilis, sphaericus, subtilis и/или thuringiensis), Bradyrhizobium spp. (в том числе один или несколько из betae, canariense, elkanii, iriomotense, japonicum, liaonigense, pachyrhizi и/или yuanmingense), каптана, карбоксина, хитозана, клотианидина, меди, циазипира, дифеноконазола, этидиазола, фипронила, флудиоксонила, флуоксастробина, флуквинконазола, флуразола, флуксофенима, белка гарпина, имазалила, имидаклоприда, ипконазола, изофлавеноидов, липохитоолигосахарида, манкозеба, марганца, манеба, мефеноксама, металаксила, метконазола, миклобутанила, PCNB, пенфлуфена, пинециллума, пентиопирада, перметрина, пикоксистробина, протиоконазола, пираклостробина, ринаксипира, S-метолахлора, сапонина, седаксана, TCMTB, тебуконазола, тиабендазола, тиаметоксама, тиокарба, тирама, толклофос-метила, триадименола, триходермы, трифлоксистробина, тритиконазола и/или цинка. Покрытие семян PCNB, относящееся к номеру регистрации EPA 00293500419, содержит квинтозен и терразол. TCMTB обозначает 2-(тиоцианометилтио)бензотиазол.
Сорта семян и семена со специфическими трансгенными признаками можно тестировать для определения того, какие дополнительные варианты обработки семян и нормы внесения могут дополнять такие сорта и трансгенные признаки для повышения урожайности. Например, сорт с хорошей потенциальной урожайностью, но восприимчивостью к пыльной головне, может выиграть от применения средства для обработки семян, которое обеспечивает защиту от пыльной головни, сорт с хорошей потенциальной урожайностью, но восприимчивостью к цистообразующим нематодам, может выиграть от применения средства обработки семян, которое обеспечивает защиту от цистообразующей нематоды и т. д. Аналогично, сорт, включающий трансгенный признак, который обеспечивает устойчивость к насекомым, может выиграть от второго механизма действия, придаваемого средством для обработки семян, сорт, включающий трансгенный признак, который придает устойчивость к гербициду, может выиграть от средства обработки семян с антидотом, который повышает устойчивость растений к такому гербициду и т. д. Кроме того, хорошее укоренение и ранняя всхожесть, которые являются результатом правильного применения средства для обработки семян, могут приводить к более эффективному использованию азота, лучшей способности переносить засуху и общему повышению потенциальной урожайности сорта или сортов, содержащих определенный признак, в комбинации со средством для обработки семян.
Способы уничтожения насекомого-вредителя и контроля популяции насекомых
В некоторых вариантах осуществления предусматриваются способы уничтожения насекомого-вредителя, включающие приведение насекомого-вредителя в контакт с инсектицидно эффективным количеством рекомбинантного инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию. В некоторых вариантах осуществления предусматриваются способы уничтожения насекомого-вредителя, включающие приведение насекомого-вредителя в контакт с инсектицидно эффективным количеством полипептида PIP-45-1 согласно вариантам осуществления и полипептида PIP-45-2 согласно вариантам осуществления, полипептида PIP-64-1 согласно вариантам осуществления и полипептида PIP-64-2 согласно вариантам осуществления, полипептида PIP-74-1 согласно вариантам осуществления и полипептида PIP-74-2 согласно вариантам осуществления, полипептида PIP-75 согласно вариантам осуществления и/или полипептида PIP-77 согласно вариантам осуществления.
В некоторых вариантах осуществления предусматриваются способы контроля популяции насекомых-вредителей, включающие приведение популяции насекомых-вредителей в контакт с инсектицидно эффективным количеством рекомбинантного инсектицидного полипептида согласно вариантам осуществления. В некоторых вариантах осуществления предусматриваются способы контроля популяции насекомых-вредителей, включающие приведение популяции насекомых-вредителей в контакт с инсектицидно эффективным количеством полипептида PIP-45-1 согласно вариантам осуществления и полипептида PIP-45-2 согласно вариантам осуществления, полипептида PIP-64-1 согласно вариантам осуществления и полипептида PIP-64-2 согласно вариантам осуществления, полипептида PIP-74-1 согласно вариантам осуществления и полипептида PIP-74-2 согласно вариантам осуществления, полипептида PIP-75 согласно вариантам осуществления и/или полипептида PIP-77 согласно вариантам осуществления. "Осуществление контроля популяции вредителей" или "контроль вредителя", используемые в данном документе, относятся к любому эффекту в отношении вредителя, который приводит к ограничению вреда, который наносит вредитель. Контроль вредителя включает без ограничений уничтожение вредителя, подавление развития вредителя, изменение плодовитости или роста вредителя таким образом, что вредитель оказывает меньше вреда в отношении растения, снижение количества производимого потомства, получение менее приспособленных вредителей, получение вредителей, более восприимчивых к нападению хищников или удержание вредителей от поедания растения.
В некоторых вариантах осуществления предусматриваются способы контроля популяции насекомых-вредителей, устойчивых к пестицидному белку, включающие приведение популяции насекомых-вредителей в контакт с инсектицидно эффективным количеством рекомбинантного инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию. В некоторых вариантах осуществления предусматриваются способы контроля популяции насекомых-вредителей, устойчивых к пестицидному белку, включающие приведение популяции в контакт насекомых-вредителей с инсектицидно эффективным количеством полипептида PIP-45-1 согласно вариантам осуществления и полипептида PIP-45-2 согласно вариантам осуществления, полипептида PIP-64-1 согласно вариантам осуществления и полипептида PIP-64-2 согласно вариантам осуществления, полипептида PIP-74-1 согласно вариантам осуществления и полипептида PIP-74-2 согласно вариантам осуществления, полипептида PIP-75 согласно вариантам осуществления и/или полипептида PIP-77 согласно вариантам осуществления.
В некоторых вариантах осуществления предусматриваются способы защиты растения от насекомого-вредителя, включающие экспрессию в растении или его клетке рекомбинантного полинуклеотида, кодирующего инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию. В некоторых вариантах осуществления предусматриваются способы защиты растения от насекомого-вредителя, включающие экспрессию в растении или его клетке рекомбинантного полинуклеотида, кодирующего пестицидный белок полипептида PIP-45-1 согласно вариантам осуществления и полипептида PIP-45-2 согласно вариантам осуществления, полипептида PIP-64-1 согласно вариантам осуществления и полипептида PIP-64-2 согласно вариантам осуществления, полипептида PIP-74-1 согласно вариантам осуществления и полипептида PIP-74-2 согласно вариантам осуществления, полипептида PIP-75 согласно вариантам осуществления и/или полипептида PIP-77 согласно вариантам осуществления.
Стратегии управления устойчивостью насекомых (IRM)
Было доказано, что экспрессия δ-эндотоксинов B. thuringiensis в трансгенных растениях кукурузы является эффективным средством контроля важных с точки зрения сельского хозяйства насекомых-вредителей (Perlak, et al., 1990; 1993). Однако, возникли насекомые, которые устойчивы к δ-эндотоксинам B. thuringiensis, экспрессирующимся в трансгенных растениях. Такая устойчивость, если она станет широко распространенной, будет явно ограничивать коммерческое значение идиоплазмы, содержащей гены, кодирующие такие δ-эндотоксины B. thuringiensis.
Одним способом повышения эффективности трансгенных инсектицидов в отношении целевых вредителей и одновременного снижения развития устойчивых к инсектицидам вредителей является применение полученных нетрансгенных (т. е. с неинсектицидным белком) рефугиев (раздел неинсектицидных сельскохозяйственных культур/кукурузы) для применения трансгенных сельскохозяйственных культур, вырабатывающих один инсектицидный белок, активный в отношении целевых вредителей. Управление по охране окружающей среды Соединенных Штатов Америки (epa.gov/oppbppdl/biopesticides/pips/bt_corn_refuge_2006.htm, доступ к которому можно получить с использованием префикса www) публикует требования по применению трансгенных сельскохозяйственных культур, вырабатывающих один Bt-белок, активный в отношении целевых вредителей. В дополнение, Национальная ассоциация кукурузоводов на своем веб-сайте: (ncga.com/insect-resistance-management-fact-sheet-bt-corn, доступ к которому можно получить с использованием префикса www) также предлагает аналогичные руководства, касающиеся требований к рефугиям. Из-за потерь, обусловленных насекомыми в пределах зоны регуфиев, более крупные рефугии могут снижать общую урожайность.
Другим способом повышения эффективности трансгенных инсектицидов в отношении целевых вредителей и одновременного снижения развития устойчивых к инсектицидам вредителям будет хранилище инсектицидных генов, которые эффективны в отношении групп насекомых-вредителей и которые проявляют свои эффекты посредством отличающихся механизмов действия.
Экспрессия в растении двух или более инсектицидных композиций, токсичных для одного вида насекомых, при этом каждый инсектицид экспрессируется на эффективных уровнях, будет представлять собой другой способ для достижения контроля развития устойчивости. Это основано на принципе, что эволюция устойчивости к двум отдельным механизмам действия значительно менее вероятна, чем только к одному. Например, Roush описывает стратегию двух токсинов, также называемую "создание пирамиды" или "пакетирование," для управления инсектицидными трансгенными сельскохозяйственными культурами. (The Royal Society. Phil. Trans. R. Soc. Lond. B. (1998) 353:1777-1786). Пакетирование или создание пирамиды из двух различных белков, каждый из которых эффективен в отношении целевых вредителей, и при этом отсутствует перекрестная устойчивость или она невелика, может обеспечивать возможность применения меньшего рефугия. Управление по охране окружающей среды США требует существенно меньший (как правило 5%) структурированный рефугий для высаживания кукурузы, не являющейся Bt, чем для продуктов с одним признаком (как правило 20%). Существуют различные способы обеспечения эффектов IRM рефугия, в том числе различные геометрические паттерны высаживания в полях и смеси семян "в мешке", как дополнительно обсуждается у Roush.
В некоторых вариантах осуществления инсектицидные полипептиды по настоящему раскрытию применимы в качестве стратегии управления устойчивостью насекомых в комбинации (т. е. в составе пирамиды) с другими пестицидными белками, включающими без ограничения Bt-токсины, инсектицидные белки Xenorhabdus sp. или Photorhabdus sp. и т. п.
Предусматриваются способы контроля в отношении заражения(-ий) трансгенного растения насекомыми отряда Lepidoptera и/или Coleoptera, которые обеспечивают управление устойчивостью насекомых, включающие экспрессию в растении по меньшей мере двух различных инсектицидных белков, характеризующихся отличающимися механизмами действия.
В некоторых вариантах осуществления способы контроля в отношении заражения трансгенного растения насекомыми из отряда Lepidoptera и/или Coleoptera и содействия в управлении устойчивостью насекомых по меньшей мере к одному из инсектицидных белков включают инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию, инсектицидный в отношении насекомых из отряда Lepidoptera и/или Coleoptera.
В некоторых вариантах осуществления способы контроля в отношении заражения трансгенного растения насекомыми из отряда Lepidoptera и/или Coleoptera и содействия в управлении устойчивостью насекомых включают экспрессию в трансгенном растении инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию и белка Cry, инсектицидных в отношении насекомых из отряда Lepidoptera и/или Coleoptera, причем они характеризуются отличающимися механизмами действия.
В некоторых вариантах осуществления способы контроля в отношении заражения трансгенного растения насекомыми из отряда Lepidoptera и/или Coleoptera и содействия в управлении устойчивостью насекомых включают экспрессию в трансгенном растении полипептида PIP-45-1 согласно вариантам осуществления и полипептида PIP-45-2 согласно вариантам осуществления, полипептида PIP-64-1 согласно вариантам осуществления и полипептида PIP-64-2 согласно вариантам осуществления, полипептида PIP-74-1 согласно вариантам осуществления и полипептида PIP-74-2 согласно вариантам осуществления, полипептида PIP-75 согласно вариантам осуществления или полипептида PIP-77 согласно вариантам осуществления и белка Cry, инсектицидных в отношении насекомых из отряда Lepidoptera и/или Coleoptera, причем они характеризуются отличающимися механизмами действия.
Также предусматриваются способы снижения вероятности появления устойчивости у насекомых из отряда Lepidoptera и/или Coleoptera к трансгенным растениям, экспрессирующим в растениях инсектицидные белки для контроля видов насекомых, включающие экспрессию инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию, инсектицидного в отношении вида насекомых, в комбинации со вторым белком, инсектицидным в отношении вида насекомых, причем они характеризуются отличающимися механизмами действия.
Также предусматриваются способы снижения вероятности появления устойчивости у насекомых из отряда Lepidoptera и/или Coleoptera к трансгенным растениям, экспрессирующим в растениях инсектицидные белки для контроля видов насекомых, включающие экспрессию полипептида PIP-45-1 согласно вариантам осуществления и полипептида PIP-45-2 согласно вариантам осуществления, полипептида PIP-64-1 согласно вариантам осуществления и полипептида PIP-64-2 согласно вариантам осуществления, полипептида PIP-74-1 согласно вариантам осуществления и полипептида PIP-74-2 согласно вариантам осуществления, полипептида PIP-75 согласно вариантам осуществления или полипептида PIP-77 согласно вариантам осуществления, инсектицидным в отношении вида насекомых в комбинации со вторым инсектицидным белком, характеризующимся отличающимся механизмом действия
Также предусматриваются средства для эффективного управления устойчивостью насекомых из отряда Lepidoptera и/или Coleoptera к трансгенным растениям, включающие совместную экспрессию на высоких уровнях в растениях двух или более инсектицидных белков, токсичных для насекомых из отряда Lepidoptera и/или Coleoptera, но при этом каждый характеризуется отличающимся механизмом осуществления его активности применительно к уничтожению, где два или более инсектицидных белка включают инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию и белок Cry. Также предусматриваются средства для эффективного управления устойчивостью насекомых из отряда Lepidoptera и/или Coleoptera к трансгенным растениям, включающие совместную экспрессию на высоких уровнях в растениях двух или более инсектицидных белков, токсичных для насекомых из отряда Lepidoptera и/или Coleoptera, но при этом каждый характеризуется отличающимся механизмом осуществления его активности в отношении уничтожения, где два или более инсектицидных белков включают полипептид PIP-45-1 согласно вариантам осуществления и полипептид PIP-45-2 согласно вариантам осуществления, полипептид PIP-64-1 согласно вариантам осуществления и полипептид PIP-64-2 согласно вариантам осуществления, полипептид PIP-74-1 согласно вариантам осуществления и полипептид PIP-74-2 согласно вариантам осуществления, полипептид PIP-75 согласно вариантам осуществления или полипептид PIP-77 согласно вариантам осуществления, а также белок Cry.
В дополнение, предусматриваются способы получения разрешения контролирующих органов для выращивания или коммерческой реализации растений, экспрессирующих белки, инсектицидные в отношении насекомых из отряда Lepidoptera и/или Coleoptera, включающие стадию обращения, предоставления или ссылки на данные анализов связывания белков насекомых, демонстрирующие, что инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию не конкурирует с сайтами связывания белков Cry у данных насекомых. В дополнение, предусматриваются способы получения разрешения контролирующих органов для выращивания или коммерческой реализации растений, экспрессирующих белки, инсектицидные в отношении насекомых из отряда Lepidoptera и/или Coleoptera, включающие стадию обращения, предоставления или ссылки на данные анализов связывания белков насекомых, демонстрирующие, что полипептид PIP-45-1 согласно вариантам осуществления и полипептид PIP-45-2 согласно вариантам осуществления, полипептид PIP-64-1 согласно вариантам осуществления и полипептид PIP-64-2 согласно вариантам осуществления, полипептид PIP-74-1 согласно вариантам осуществления и полипептид PIP-74-2 согласно вариантам осуществления, полипептид PIP-75 согласно вариантам осуществления или полипептид PIP-77 согласно вариантам осуществления не конкурирует с сайтами связывания белков Cry у данных насекомых.
Способы повышения урожайности у растений
Предусматриваются способы повышения урожайности. Способы включают получение растения или растительной клетки, экспрессирующих полинуклеотид, кодирующий пестицидную полипептидную последовательность, раскрытую в данном документе, и выращивание растения или его семени в поле, зараженном вредителем, в отношении которого полипептид характеризуется пестицидной активностью. В некоторых вариантах осуществления полипептид характеризуется пестицидной активностью в отношении вредителя из группы чешуекрылых, жесткокрылых, двукрылых, полужесткокрылых или нематод, и при этом поле заражено вредителем из группы чешуекрылых, полужесткокрылых, жесткокрылых, двукрылых или нематод.
Как определено в данном документе, "урожайностью" растения называют качество и/или количество биомассы, продуцируемой растением. "Биомасса", используемая в данном документе, относится к любому измеренному продукту растения. Увеличением продукции биомассы является любое улучшение урожайности измеренного продукта растения. Увеличение урожайности растения имеет несколько коммерческих применений. Например, увеличение биомассы листьев растения может приводить к увеличению урожайности листовых овощей для потребления человеком или животными. Кроме того, увеличение биомассы листьев можно применять для увеличения производства фармацевтических или промышленных продуктов растительного происхождения. Увеличение урожайности может предусматривать любое статистически значимое увеличение, в том числе без ограничения по меньшей мере 1% повышение, по меньшей мере 3% повышение, по меньшей мере 5% повышение, по меньшей мере 10% повышение, по меньшей мере 20% повышение, по меньшей мере 30% повышение, по меньшей мере 50% повышение, по меньшей мере 70% повышение, по меньшей мере 100% или большее повышение урожайности по сравнению с растением, не экспрессирующим пестицидную последовательность.
В конкретных способах урожайность растения повышается в результате улучшенной устойчивости к вредителю растения, экспрессирующего инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию, раскрытый в данном документе. Экспрессия инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию приводит к сниженной способности вредителя к заражению растения или питанию на растении, улучшая таким образом урожайность растения.
Способы переработки
Дополнительно предусматриваются способы переработки растения, части растения или семени с получением пищевого или кормового продукта из растения, части растения или семени, содержащих инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию. Растения, части растения или семена, предусматриваемые в данном документе, можно перерабатывать с получением масла, белковых продуктов и/или побочных продуктов, которые являются производными, полученными путем переработки, которые имеют коммерческое значение. Неограничивающие примеры включают трансгенные семена, содержащие молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию, который можно перерабатывать с получением соевого масла, соевых продуктов и/или соевых побочных продуктов.
"Переработка" относится к любым физическим и химическим способам, применяемым для получения какого-либо соевого продукта, и включает без ограничения кондиционирование нагреванием, вальцевание и измельчение, экструзию, экстракцию растворителем или вымачивание в воде и экстракцию цельных или дробленых семян.
Следующие примеры представлены для иллюстрации, а не для ограничения.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Пример 1. Анализы с кормлением насекомых
Биологические скрининг-анализы инсектицидной активности проводили с очищенным лизатом для оценки эффектов инсектицидных белков в отношении ряда видов Lepidoptera (огневки кукурузной (Ostrinia nubilalis), хлопковой совки (Helicoverpa zea), совки-ипсилон (Agrotis ipsilon), совки травяной (Spodoptera frugiperda), соевой совки (Pseudoplusia includens) и совки, гусеница которой питается бархатными бобами (Anticarsia gemmatalis)), вида Coleoptera (западного кукурузного жука (Diabrotica virgifera), и двух видов Hemiptera, Lygus hesperus и Nezara viridula (зеленого овощного клопа).
Анализы с использованием видов отряда Lepidoptera
Анализы с кормлением видов отряда Lepidoptera проводили на искусственном рационе, содержащем очищенные лизаты бактериальных штаммов в установке с 96-луночным планшетом. Очищенный лизат включали в специфичный для чешуекрылых искусственный рацион в соотношении 20 мкл очищенного лизата и 40 мкл пищевой смеси. Две из пяти новорожденных личинок помещали в каждую лунку для питания в течение 5 дней. Результаты выражали как положительные в отношении реакций личинок, таких как остановка развития и/или смерть. Результаты выражали как отрицательные, если личинки были подобны отрицательному контролю, который питался рационом, в который вносили только вышеуказанный буфер. Каждый очищенный лизат анализировали на огневке кукурузной (Ostrinia nubilalis), хлопковой совке (Helicoverpa zea), совке-ипсилон (Agrotis ipsilon), совке травяной (Spodoptera frugiperda), соевой совке (Pseudoplusia includens) и совке, гусеница которой питается бархатными бобами (Anticarsia gemmatalis). Серии концентраций образцов очищенного белка анализировали в отношении этих насекомых и рассчитывали концентрации для 50% смертности (LC50) или ингибирования роста 50% особей (IC50).
Анализы с использованием видов отряда Coleoptera
Анализы с кормлением видов отряда Coleoptera проводили на искусственном рационе, содержащем очищенные лизаты бактериальных штаммов в установке с 96-луночным планшетом. Очищенный лизат включали в специфичный для жесткокрылых искусственный рацион в соотношении 10 мкл очищенного лизата и 50 мкл пищевой смеси. Две из пяти новорожденных личинок западного кукурузного жука (Diabrotica virgifera) помещали в каждую лунку для питания в течение 5 дней. Результаты выражали как положительные в отношении реакций личинок, таких как остановка развития и/или смерть. Результаты выражали как отрицательные, если личинки были подобны отрицательному контролю, который питался рационом, в который вносили только вышеуказанный буфер. Серии концентраций образцов очищенного белка анализировали в отношении этих насекомых и рассчитывали концентрации для 50% смертности (LC50) или ингибирования роста 50% особей (IC50).
Биологический анализ с использованием вида рода Lygus ( Lygus hesperus )
20 мкл образцов очищенного лизата смешивали с 75 мкл рациона вида рода Lygus (Bio-Serv F9644B) в каждой лунке 96-луночного планшета для биологических анализов (BD Falcon 353910) и покрывали листом парафильма. Различные количества нимф на стадии второго возраста Lygus hesperus (2-7) помещали в каждую лунку 96-луночного фильтровального планшета. Затем планшет с образцами переворачивали на фильтровальный планшет и держали вместе с резиновыми полосками. Анализ проводили в течение четырех дней при 25⁰C и затем проводили оценку смертности насекомых и/или остановку роста насекомых. Серии концентраций образцов очищенного белка анализировали в отношении этих насекомых и рассчитывали концентрации для 50% смертности (LC50) или ингибирования роста 50% особей (IC50).
Биологический анализ с использованием зеленого овощного клопа ( Nezara viridula ) и коричневого мраморного щитника ( Halyomorpha haly)
40 мкл образцов очищенного лизата смешивали с 360 мкл рациона вида рода Lygus (Bio-Serv F9644B) в пакетах Parafilm®. 10-15 недавно полинявших насекомых на стадии нимфы помещали в чашки Петри из полистирола (100 мм x 20 мм), выстеленных влажной фильтровальной бумагой Whatman® (диаметр 100 мм). В чашку добавляли источник воды. Посуду с биологическим анализом инкубировали при 25⁰C в темноте в течение четырех дней. Результаты биологического анализа оценивали на смертность и остановку роста. Для получения данных ILC50 или LC50 анализировали серию концентраций очищенных белков в отношении насекомых, и концентрация, при которой 50% насекомых получили серьезный ущерб, составляла ILC50, а концентрация, при которой 50% насекомых погибали, составляла LC50.
Биологический анализ с использованием колорадского жука ( Leptinotarsa decemlineata )
20 мкл образцов очищенного лизата смешивали с 75 мкл модифицированного рациона жесткокрылых (Bio-Serv F9800B) в каждой лунке 96-луночного планшета для биологических анализов (BD Falcon 353910) и давали затвердеть. В каждую лунку помещали одну новорожденную личинку и планшет запечатывали покрытием Mylar®. Отверстия пробивали в листе Mylar® и планшет инкубировали при 25°C без света в течение четырех дней. Результаты биологического анализа оценивали на смертность и/или остановку роста.
Пример 2. Идентификация штаммов инсектицидной активностью
Инсектицидные активности в отношении SBL, CEW, BCW, VBC, ECB, Lygus, SGSB и WCRW наблюдали с очищенным клеточным лизатом бактериальных штаммов, выращенных либо в среде LB (10 г/л триптона, 5 г/л дрожжевого экстракта и 10 г/л NaCl), либо среде TSB (триптического соевого бульона) (17 г/л триптона, 3 г/л сойтона, 2,5 г/л декстрозы, 2,5 г/л K2HPO4 и 5 г/л NaCl) и культивированных в течение ночи при 26°C со встряхиванием при 250 об./мин. Эта инсектицидная активность была чувствительна к теплу и протеиназе, что указывало на ее белковый характер. Активные штаммы и их инсектицидные активности приведены в таблице 5.
Таблица 5
Штамм Вид Целевые насекомые Ген № послед.
LBV5480 Pseudomonas brenneri WCRW PIP-45Aa-1/2 SEQ ID NO: 1/SEQ ID NO: 2
LBV9691 Pseudomonas brenneri WCRW исключительно PIP-64Aa-1 SEQ ID NO: 53
LBV9691 Pseudomonas brenneri SBL, CEW, BCW, VBC, ECB, Lygus, SGSB PIP-64Aa-1/2 SEQ ID NO: 53/SEQ ID NO: 54
SS135B4b Pseudomonas rhodesiae WCRW PIP-74Aa-1/2 SEQ ID NO: 73/SEQ ID NO: 74
LBV6019 Pseudomonas antarctica WCRW PIP-75Aa SEQ ID NO: 79
SSP344E5a Pseudomonas chlororaphis WCRW PIP-77Aa SEQ ID NO: 88
Пример 3. Идентификация видов и секвенирование генома активных штаммов
Геномную ДНК из активных штаммов экстрагировали с помощью набора Sigma® для экстракции бактериальной геномной ДНК (номер по кат. NA2110-KT, Sigma-Aldrich, почтовый ящик 14508, Сент-Луис, Миссури, 63178) в соответствии с инструкциями изготовителя. Концентрацию ДНК определяли с помощью спектрофотометра NanoDrop™ (Thermo Scientific, 3411 Silverside Road, Bancroft Building, Suite 100, Уилмингтон, Делавер, 19810) и геномную ДНК разбавляли до 40 нг/мкл стерилизованной водой. 25 мкл смеси для ПЦР-реакции получали путем объединения 80 нг геномной ДНК, 2 мкл (5 мкМ) праймеров 16S рибосомальных ДНК TACCTTGTTACGACTT (SEQ ID NO: 216) и AGAGTTTGATCMTGGCTCAG (SEQ ID NO: 217), 1 мкл 10 мМ dNTP, 1x буфера Phusion® HF и 1 единицы высокоточной ДНК-полимеразы Phusion® (New England Biolabs, номер по кат. M0530L, 240 County Road, Ипсуич, Массачусетс, 01938-2723). ПЦР-реакцию проводили в термоциклере MJ Research PTC-200 (Bio-Rad Laboratories, Inc., 1000 Alfred Nobel Drive, Херкулиз, Калифорния, 94547, США) со следующей программой: 96°C 1 мин.; 30 циклов 96°C 15 секунд, 52°C 2 минуты и 72°C 2 минуты; 72°C 10 минут; и удерживали при 4°C. ПЦР-продукты очищали с помощью набора для очистки ДНК Qiaquick® (номер по кат. 28104, QIAGEN Inc., 27220 Turnberry Lane, Валенсия, Калифорния, 91355). Очищенный ПЦР-образец подвергали ДНК-секвенированию и полученную последовательность 16S рибосомальной ДНК подвергали поиску BLAST в отношении базы данных NCBI. Первые результаты поиска показывали вид штамма (см. таблицу 5).
Геномную ДНК активных штаммов также получали в соответствии с протоколом конструирования библиотеки, разработанным Illumina, и секвенировали с использованием Illumina MiSeq™. Собирали последовательности контигов нуклеиновых кислот и получали открытые рамки считывания.
Пример 4. Идентификация инсектицидных белков с помощью LC-MS/MS
Все инсектицидные белки фракционировали и обогащали, как описано. С целью идентификации полоски с кандидатными белками вырезали, обрабатывали трипсином и анализировали с помощью нано-жидкостной хроматографии/тандемной масс-спектрометрии (нано-LC/ESI-MS/MS) на масс-спектрометре Thermo Q Exactive™ Orbitrap™ (Thermo Fisher Scientific), сопряженного с системой Eksigent® NanoLC-1D™ Plus nanoLC™ (AB Sciex). Десять спектров ионов-продуктов собирали в зависимом от информации режиме обнаружения после MS1-обзорного сканирования.
Идентификацию белка осуществляли с помощью поисков по базам данных с использованием Mascot (Matrix Science). Поиски проводили в отношении лабораторной базы данных Bacteria-Plus, которая объединяет все бактериальные белковые последовательности и последовательности кератина из неизбыточной базы данных NCBI (nr), а также лабораторных белковых последовательностей.
Пример 5. Выделение и идентификация инсектицидных белков
Выделение и идентификация PIP-45-Aa-1 и PIP-45-Aa-2
Инсектицидную активность в отношении WCRW (Diabrotica virgifera) наблюдали с очищенным клеточным лизатом штамма LBV 5480 Pseudomonas brenneri, выращенного в питательном бульоне (пептон- 5 г/л, мясной экстракт - 1 г/л, дрожжевой экстракт - 2 г/л, хлорид натрия - 5 г/л) и культивированного в течение ночи при 26°C со встряхиванием при 250 об./мин. Эта инсектицидная активность была чувствительна к теплу и протеазе, что указывало на ее белковый характер.
Клеточную массу LBV 5480 гомогенизировали при ~20000 фунтов/кв. дюйм после повторного суспендирования в трис-буфере, pH 8. Неочищенный лизат очищали центрифугированием и загружали в колонку HiTrap® Q-FF (GE Healthcare). Связанный белок элюировали линейным градиентом хлорида натрия и фракционировали. Фракции, которые содержали белок, представляющий интерес, объединяли и доводили до концентрации 1 М сульфата аммония в 50 мМ трис (буфер А). Данный материал загружали на колонку с фенилсефарозой HP HiTrap® (GE Healthcare), уравновешенную в буфере A. Активный белок элюировали линейным градиентом от 1 М до 0 М сульфата аммония и далее очищали с помощью эксклюзионной хроматографии. С этой целью фенил-пул концентрировали и загружали в колонку Superdex® 200 (GE Healthcare), уравновешенную в 20 мМ трис, 150 мМ NaCl, pH 8. Анализ способом SDS-PAGE фракций с активностью в отношении WCRW показал 2 преобладающие полосы после окрашивания голубым красителем Coomassie®. Для идентификации двух новых генов, кодируемых штаммом LBV 5480, использовали LC-MS/MS. Эти гены образуют оперон, и оба продукта гена необходимы для инсектицидной активности, что подтверждалось рекомбинантным белком. Эти белки обозначали как PIP-45-Aa-1 (SEQ ID NO: 1) и PIP-45-Aa-2 (SEQ ID NO: 2).
Выделение и идентификация PIP-64-Aa-1 и PIP-64-Aa-2
Инсектицидную активность в отношении WCRW (Diabrotica virgifera) и соевой совки (SBL Chrysodeixis includes) наблюдали с очищенным клеточным лизатом штамма LBV 9691 Pseudomonas brenneri, выращенного в среде 2x YT (16 г/л триптона, 10 г/л дрожжевого экстракта, 5 г/л NaCl) и культивированного в течение 3 дней при 26°C со встряхиванием при 250 об./мин. Эта инсектицидная активность была чувствительна к теплу и протеазе, что указывало на ее белковый характер.
Условия роста и активность насекомых сильно различались. Более высокая активность также коррелировала с повышенными уровнями экспрессии белка, соответствующего полосе ~28 кДа, определяемой с помощью SDS-PAGE. Чтобы дополнительно подтвердить данную полосу с кандидатом, клеточную массу LVB 9691 гомогенизировали при 30000 фунтов/кв. дюйм после повторного суспендирования в 20 мМ трис-буфере, рН 8. Неочищенный лизат очищали центрифугированием и загружали в колонку Superdex® 75 (GE Healthcare). Типы активности в отношении WCRW и SBL были сильно связаны с полосой 28 кДа во фракциях элюирования. Полосу белка идентифицировали с помощью LC-MS/MS. С помощью поиска в базе данных идентифицировали два новых белка аналогичного размера, закодированных в опероне штаммом LBV 9691, обозначенные PIP-64-Aa-1 (SEQ ID NO: 53) и PIP-64-Aa-2 (SEQ ID NO: 54). Рекомбинантная экспрессия показала, что при тестируемых концентрациях оба белка необходимы для активности в отношении видов чешуекрылых и жесткокрылых. Было установлено, что активность была оптимальной при молярном соотношении соответственно PIP-64Aa-1 (SEQ ID NO: 53) и PIP-64Aa-2 (SEQ ID NO: 54), составляющем 5:1. Для активности в отношении WCRW было достаточно только PIP-64-Aa-1 (SEQ ID NO: 53).
Выделение и идентификация PIP-74-Aa-1 и PIP-74-Aa-2
Инсектицидную активность в отношении WCRW (Diabrotica virgifera) наблюдали с очищенным клеточным лизатом штамма SS135B4 Pseudomonas brenneri, выращенного в среде 2x YT и культивированного в течение 2 дней при 26°C со встряхиванием при 250 об./мин. Эта инсектицидная активность была чувствительна к теплу и протеазе, что указывало на ее белковый характер.
Клеточную массу SS135B4 гомогенизировали при 30000 фунтов/кв. дюйм после повторного суспендирования в 25 мМ трис-буфере, pH 9. Неочищенный лизат очищали центрифугированием, доводили до 0,5 М сульфата аммония и загружали на колонку Phenyl Sepharose FF (GE Healthcare). Активный белок в отношении WCRW элюировали линейным градиентом до 0 М сульфата аммония, объединяли и диализировали в 50 мМ натрий-ацетатном буфере, рН 5. Скорректированный пул затем загружали на колонку S-Sepharose FF (GE Healthcare), которую уравновешивали тем же буфером. В несвязанной белковой фракции, содержаще активный белок в отношении WCRW, заменяли буфер на 50 мМ CAPS, pH 10, загружали на колонку MonoQ® (GE Healthcare) и элюировали линейным градиентом хлорида натрия в 50 мМ CAPS, pH 10. Анализ способом SDS-PAGE этих фракций показал несколько полос после окрашивания голубым красителем Coomassie®. Полосы белка вырезали и идентифицировали с помощью LC-MS/MS. С помощью поиска в базе данных идентифицировали два новых белка, закодированных в опероне штаммом SS135B4, обозначенные PIP-74-Aa-1 (SEQ ID NO: 73) и PIP-74-Aa-2 (SEQ ID NO: 74) соответственно. Рекомбинантная экспрессия показала, что при тестируемых концентрациях оба белка необходимы для активности в отношении WCRW.
Выделение и идентификация PIP-75-Aa
Инсектицидную активность в отношении WCRW (Diabrotica virgifera) наблюдали с очищенным клеточным лизатом штамма LBV 6019 Pseudomonas antarctica, выращенного в среде 2x YT в течение 1 дня при 26°C со встряхиванием при 250 об./мин. Эта инсектицидная активность была чувствительна к теплу и протеазе, что указывало на ее белковый характер.
Клеточную массу LBV 6019 гомогенизировали при ~30000 фунтов/кв. дюйм после повторного суспендирования в 25 мМ трис-буфере, pH 8,5. Неочищенный лизат очищали центрифугированием и загружали в колонку POROS® Q (Life Technologies). В несвязанной белковой фракции, содержащей активный белок в отношении WCRW, заменяли буфер путем диализа относительно 10 мМ MES, pH 6, и затем загружали на колонку HiTrap® S-HP (GE Healthcare) и элюировали линейным градиентом хлорида натрия. Фракции, содержащие активный белок, объединяли, корректировали буфером и подвергали повторной стадии анионного обмена при рН 8,5. В неограниченной фракции снова заменяли буфер перед заключительной стадией фракционирования на колонке Mono S® (GE Healthcare), уравновешенной 20 мМ MES, pH 6. После элюирования с помощью линейного градиента до 0,3 М NaCl получали несколько активных фракций. Анализ способом SDS-PAGE фракций с активностью в отношении WCRW показал несколько преобладающих полос после окрашивания голубым красителем Coomassie®. Полосы белка вырезали и идентифицировали посредством LC-MS/MS.
С помощью поиска в базе данных выявляли 3 новых кандидатных гена, кодируемых штаммом LBV 6019. С помощью клонирования и рекомбинантной экспрессии подтверждали инсектицидную активность одного из кандидатов. Данный белок обозначали как PIP-75-Aa (SEQ ID NO: 79).
Выделение и идентификация PIP-77-Aa
Инсектицидную активность в отношении WCRW (Diabrotica virgifera) наблюдали с очищенным клеточным лизатом штамма SS344E5 Pseudomonas chlororaphis, выращенного в триптическом соевом бульоне (TSB, пептон из казеина 15 г/л; пептон из соевых продуктов 5 г/л; хлорид натрия 5,0 г/л) в течение 1 дня при 26°C со встряхиванием при 250 об./мин. Эта инсектицидная активность была чувствительна к теплу и протеазе, что указывало на ее белковый характер.
Клеточную массу SS344E5 гомогенизировали при 30000 фунтов/кв. дюйм после повторного суспендирования в 25 мМ трис-буфере, pH 8,5. Неочищенный лизат очищали центрифугированием и загружали в колонку POROS® Q (Life Technologies). Несвязанную белковую фракцию, содержащую активный белок в отношении WCRW, подвергали диализу относительно 10 мМ MES, pH 6, загружали в колонку HiTrap® S-HP (GE Healthcare) и элюировали линейным градиентом хлорида натрия до 0,5 М. Фракции, содержащие активный белок в отношении WCRW, объединяли и затем разделяли с помощью эксклюзионной хроматографии с использованием колонки Superdex® 75 (GE Healthcare). Анализ способом SDS-PAGE фракций с активностью в отношении WCRW показал преобладающую полосу в 7 кДа после окрашивания голубым красителем Coomassie®. Для идентификации двух новых генов, кодируемых штаммом SS344E5, использовали LC-MS/MS. Клонирование и рекомбинантная экспрессия подтверждали инсектицидную активность данного генного продукта, который обозначили как PIP-77-Aa (SEQ ID NO: 88).
Пример 6. Идентификация гомологов
Геномную ДНК экстрагировали из различных внутренних штаммов, вид идентифицировали и геном представлял собой последовательности, как описано в примере 3. Генную идентичность можно определить посредством проведения поисков BLAST (средство поиска основного локального выравнивания; Altschul, et al., (1993) J. Mol. Biol. 215:403-410; см. также ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/, доступ к которому можно получить с применением префикса www) с параметрами по умолчанию относительно сходства с последовательностями, которые содержатся во внутренних геномах и в публично доступной "nr" базе данных BLAST (содержащей все неизбыточные CDS-трансляции из GenBank, последовательности, полученные на основании 3-мерной структуры базы данных белков Brookhaven, последней главной версии базы данных белковых последовательностей SWISS-PROT, баз данных EMBL и DDBJ). Анализировали полипептидные последовательности под SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 79 и SEQ ID NO: 88.
В таблице 6 показаны идентифицированные гомологи полипептида PIP-45-1 и полипептида PIP-45-2, идентификационные номера последовательностей для каждого и штаммы бактерий, из которых они были идентифицированы. В таблице 7 показан процент идентичности последовательности между гомологами полипептида PIP-45-1. На фигурах 1a-1m показано выравнивание аминокислотных последовательностей гомологов полипептида PIP-45-1.
Таблица 6
Ген № последовательности Источник Вид Активность
PIP-45Aa-1 SEQ ID NO: 1 LBV5480 Pseudomonas brenneri да
PIP-45Aa-2 SEQ ID NO: 2
PIP-45Ab-1 SEQ ID NO: 3 LBV2335-5 (1-2aa различие); LBV8526-5; гипотетический белок NCBI ZP_10476580 и ZP_10476581 Pseudomonas sp. Ag1 н.о.
PIP-45Ab-2 SEQ ID NO: 4
PIP-45Ac-1 SEQ ID NO: 5 Гипотетический белок NCBI ZP_10430003 и ZP_10430004 Pseudomonas sp. PAMC 25886 н.о.
PIP-45Ac-2 SEQ ID NO: 6
PIP-45Ad-1 SEQ ID NO: 7 Гипотетический белок NCBI ZP_10430003, JGI_XylAfBL_518010 Pseudomonas sp. PAMC 25886 да
PIP-45Ad-2 SEQ ID NO: 8
PIP-45Ae-1 SEQ ID NO: 9 Внутренний штамм SSP143E2; LBV9925-5;
EMBL K1AVN2_PSEFL; NCBI ZP_1559991;
Pseudomonas fluorescens н.о.
PIP-45Ae-2 SEQ ID NO: 10 Внутренний штамм SSP143E2;
EMBL K1B453_PSEFL; NCBI ZP_15599912;
PIP-45Af-1 SEQ ID NO: 11 Гипотетический белок NCBI WP_017475319 Pseudomonas sp. PAMC 26793 н.о.
PIP-45Af-2 SEQ ID NO: 12 Гипотетический белок NCBI WP_017475320
PIP-45Ba-1 SEQ ID NO: 13 Гипотетический белок NCBI PPs_2675 (YP_004702108.1) и PPS_2674 (YP_004702107.1) Pseudomonas putida да
PIP-45Ba-2 SEQ ID NO: 14
PIP-45Bb-1 SEQ ID NO: 15 JGI - гипотетический белок AECFG_342250 Fungus garden combined н.о.
PIP-45Bb-2 SEQ ID NO: 16 JGI - гипотетический белок AECFG_342240
PIP-45Bc-1 SEQ ID NO: 17 Внутренняя коллекция SSP145B2; SSP469C8a Pseudomonas monteilii н.о.
PIP-45Bc-2 SEQ ID NO: 18
PIP-45Bd-1 SEQ ID NO: 19 Внутренняя коллекция - SS160F12; SSP165H7; SS153D5a; SS165D11-2; JH23144-1; Pseudomonas monteilii да
PIP-45Bd-2 SEQ ID NO: 20
PIP-45Be-1 SEQ ID NO: 21 LBV9691 Pseudomonas brenneri да
PIP-45Be-2 SEQ ID NO: 22
PIP-45Bf-1 SEQ ID NO: 23 LBV11272; LBV11224: LBV10925 Pseudomonas gessardii н.о.
PIP-45Bf-2 SEQ ID NO: 24
PIP-45Bg-1 SEQ ID NO: 25 NCBI B479_12925 Pseudomonas putida н.о.
PIP-45Bg-2 SEQ ID NO: 26 NCBI B479_12920
PIP-45Bh-1 SEQ ID NO: 27 Внутренняя коллекция - SSP339E12-1 Pseudomonas plecoglossicida н.о.
PIP-45Bh-2 SEQ ID NO: 28
PIP-45Bi-1 SEQ ID NO: 29 Внутренняя коллекция - SSP340D9a Pseudomonas putida н.о.
PIP-45Bi-2 SEQ ID NO: 30
PIP-45Bj-1 SEQ ID NO: 31 Внутренняя коллекция - JH27606-2, SSP4C8 Pseudomonas putida н.о.
PIP-45Bj-2 SEQ ID NO: 32
PIP-45Bk-1 SEQ ID NO: 33 Внутренняя коллекция - SSP4E8 Pseudomonas monteilii н.о.
PIP-45Bk-2 SEQ ID NO: 34
PIP-45Bl-1 SEQ ID NO: 232 Внутренняя коллекция - JH59565-1; гипотетические белки NCBI YP_008763564 и WP_023380724 Pseudomonas sp. VLB120 н.о.
PIP-45Bl-2 SEQ ID NO: 233
PIP-45Bm-1 SEQ ID NO: 234 Внутренняя коллекция - JH58750-1 Pseudomonas putida н.о.
PIP-45Bm-2 SEQ ID NO: 235
PIP-45Ca-1 SEQ ID NO: 35 Внутренняя коллекция - SSi43B5; SSi44A10; SSP259D11-1; SSP429D11a; SSP429D6a; SS143D2; LBV8661 (различие 2aa для 45-2) Pseudomonas poae да
PIP-45Ca-2 SEQ ID NO: 36
PIP-45Cb-1 SEQ ID NO: 37 JGI - гипотетический белок DPOB_377060 и DPOB_377050 Mountain Pine Beetle microbial communities да
PIP-45Cb-2 SEQ ID NO: 38
PIP-45Cc-1 SEQ ID NO: 39 Внутренняя коллекция - SS137B2 Pseudomonas trivialis н.о.
PIP-45Cc-2 SEQ ID NO: 40
PIP-45Cd-1 SEQ ID NO: 41 NCBI-ZP_11188561 Pseudomonas sp. R81 н.о.
PIP-45Cd-2 SEQ ID NO: 42 NCBI-ZP_11188562
PIP-45Ce-1 SEQ ID NO: 43 Внутренняя коллекция - SSP493B7b Pseudomonas libanensis н.о.
PIP-45Ce-2 SEQ ID NO: 44
PIP-45Cf-1 SEQ ID NO: 236 Внутренняя коллекция - SSP557A12-2 Pseudomonas poae н.о.
PIP-45Cf-2 SEQ ID NO: 237 Pseudomonas poae н.о.
PIP-45Da-1 SEQ ID NO: 45 Внутренний активный штамм - SSP347B8a Pseudomonas asplenii н.о.
PIP-45Da-2 SEQ ID NO: 46
PIP-45Db-1 SEQ ID NO: 47 NCBI-ZP_11115718 Thalassospira xiamenensis н.о.
PIP-45Db-2 SEQ ID NO: 48 NCBI-ZP_11115719
PIP-45Ea-1 SEQ ID NO: 49 Гипотетический белок NCBI Pden_4642
(YP_918399.1) и Pden_4641 (YP_918398.1)
Paracoccus denitrificans PD1222 да
PIP-45Ea-2 SEQ ID NO: 50
PIP-45Ga-1 SEQ ID NO: 51 Гипотетический белок NCBI YP_001984231.1 и YP_001984230.1 Cellvibrio japonicus Ueda107 нет
PIP-45Ga-2 SEQ ID NO: 52
† н.о.=не определено
Таблица 7
PIP-45Ab-1 SEQ ID NO: 3 PIP-45Ac-1 SEQ ID NO: 5 PIP-45Ad-1 SEQ ID NO: 7 PIP-45Ae-1 SEQ ID NO: 9 PIP-45Af-1 SEQ ID NO: 11 PIP-45Ba-1 SEQ ID NO: 13 PIP-45Bb-1 SEQ ID NO: 15 PIP-45Bc-1 SEQ ID NO: 17 PIP-45Bd-1 SEQ ID NO: 19
PIP-45Aa-1 98.6 96.5 96.9 98.6 99.0 88.6 88.4 88.4 87.9
PIP-45Ab-1 - 96.5 97.2 99.7 98.3 88.1 87.9 87.9 87.7
PIP-45Ac-1 - - 99.0 96.5 96.0 87.2 87.0 87.0 87.6
PIP-45Ad-1 - - - 97.2 96.4 87.4 87.2 87.2 87.7
PIP-45Ae-1 - - - - 98.3 88.1 87.9 87.9 87.7
PIP-45Af-1 - - - - - 88.6 88.4 88.4 87.9
PIP-45Ba-1 - - - - - - 99.1 99.3 95.5
PIP-45Bb-1 - - - - - - - 99.1 95.2
PIP-45Bc-1 - - - - - - - - 95.2
PIP-45Bd-1 - - - - - - - - -
PIP-45Be-1 - - - - - - - - -
PIP-45Bf-1 - - - - - - - - -
PIP-45Bg-1 - - - - - - - - -
PIP-45Bh-1 - - - - - - - - -
PIP-45Bi-1 - - - - - - - - -
PIP-45Bj-1 - - - - - - - - -
PIP-45Bk-1 - - - - - - - - -
PIP-45Bl-1 - - - - - - - - -
PIP-45Bm-1 - - - - - - - - -
PIP-45Ca-1 - - - - - - - - -
PIP-45Cb-1 - - - - - - - - -
PIP-45Cc-1 - - - - - - - - -
PIP-45Cd-1 - - - - - - - - -
PIP-45Ce-1 - - - - - - - - -
PIP-45Cf-1 - - - - - - - - -
PIP-45Da-1 - - - - - - - - -
PIP-45Db-1 - - - - - - - - -
PIP-45Ea-1
Таблица 7 продолж.
PIP-45Be-1 SEQ ID NO: 21 PIP-45Bf-1 SEQ ID NO: 23 PIP-45Bg-1 SEQ ID NO: 25 PIP-45Bh-1 SEQ ID NO: 27 PIP-45Bi-1 SEQ ID NO: 29 PIP-45Bj-1 SEQ ID NO: 31 PIP-45Bk-1 SEQ ID NO: 33 PIP-45Bl-1 SEQ ID NO: 232 PIP-45Bm-1 SEQ ID NO: 234
PIP-45Aa-1 87.1 87.5 87.7 88.4 88.2 86.0 86.2 86.5 87.4
PIP-45Ab-1 86.6 87.5 87.2 87.9 87.7 86.2 86.2 86.5 87.4
PIP-45Ac-1 85.9 87.0 86.4 87.0 86.9 85.3 85.8 86.0 86.7
PIP-45Ad-1 86.1 87.2 86.5 87.2 87.0 85.8 85.3 86.0 86.7
PIP-45Ae-1 86.8 87.7 87.2 87.9 87.7 85.8 86.0 86.7 87.5
PIP-45Af-1 86.6 87.0 87.7 88.4 88.2 86.0 85.8 85.8 87.4
PIP-45Ba-1 84.7 86.3 98.6 99.0 99.1 92.2 91.0 91.7 93.6
PIP-45Bb-1 84.4 86.0 99.1 98.8 99.7 91.7 90.8 91.5 93.8
PIP-45Bc-1 84.4 85.8 98.6 98.6 99.1 91.9 91.0 91.9 93.3
PIP-45Bd-1 84.2 86.3 94.6 95.3 95.2 92.9 90.0 90.8 92.6
PIP-45Be-1 - 92.6 84.2 85.1 84.7 81.6 83.8 82.3 83.0
PIP-45Bf-1 - - 85.5 86.5 86.0 83.6 86.0 84.3 85.3
PIP-45Bg-1 - - - 98.3 99.5 91.2 90.3 91.0 92.9
PIP-45Bh-1 - - - - 98.8 92.0 91.2 91.2 93.3
PIP-45Bi-1 - - - - - 91.7 90.8 91.5 93.4
PIP-45Bj-1 - - - - - - 88.6 87.9 90.3
PIP-45Bk-1 - - - - - - - 90.1 90.8
PIP-45Bl-1 - - - - - - - - 91.0
PIP-45Bm-1 - - - - - - - - -
PIP-45Ca-1 - - - - - - - - -
PIP-45Cb-1 - - - - - - - - -
PIP-45Cc-1 - - - - - - - - -
PIP-45Cd-1 - - - - - - - - -
PIP-45Ce-1 - - - - - - - - -
PIP-45Cf-1 - - - - - - - - -
PIP-45Da-1 - - - - - - - - -
PIP-45Db-1 - - - - - - - - -
PIP-45Ea-1
Таблица 7 продолж.
PIP-45Ca-1 SEQ ID NO: 35 PIP-45Cb-1 SEQ ID NO: 37 PIP-45Cc-1 SEQ ID NO: 39 PIP-45Cd-1 SEQ ID NO: 41 PIP-45Ce-1 SEQ ID NO: 43 PIP-45Cf-1 SEQ ID NO: 236 PIP-45Da-1 SEQ ID NO: 45 PIP-45Db-1 SEQ ID NO: 47 PIP-45Ea-1 SEQ ID NO: 49 PIP-45Ga-1 SEQ ID NO: 51
PIP-45Aa-1 77.9 77.3 76.8 76.8 77.9 78.5 65.1 63.5 59.8 38.8
PIP-45Ab-1 77.9 76.8 76.5 76.8 77.3 78.2 65.1 63.9 59.8 38.8
PIP-45Ac-1 77.2 77.0 76.9 76.7 77.4 77.7 64.3 63.9 59.1 38.0
PIP-45Ad-1 77.0 76.5 76.3 76.0 76.9 77.7 64.0 63.7 59.0 37.9
PIP-45Ae-1 77.9 77.2 76.6 76.9 77.7 78.4 65.3 64.0 59.9 39.0
PIP-45Af-1 77.2 76.6 76.1 76.1 77.2 77.9 65.5 63.5 59.9 38.6
PIP-45Ba-1 77.3 76.8 76.5 76.1 77.0 78.0 67.0 65.1 59.9 38.4
PIP-45Bb-1 77.3 76.8 76.5 76.1 77.2 78.0 66.8 64.9 59.8 38.4
PIP-45Bc-1 77.3 76.8 76.5 76.1 77.0 78.0 67.5 65.1 60.1 38.2
PIP-45Bd-1 77.0 76.1 75.8 75.4 76.5 77.2 66.5 64.4 59.4 38.3
PIP-45Be-1 75.6 73.9 73.4 73.9 74.2 75.3 65.4 63.1 57.9 38.8
PIP-45Bf-1 77.4 76.0 76.0 75.5 76.0 76.9 66.7 64.2 59.6 37.9
PIP-45Bg-1 76.8 76.3 75.8 75.4 76.5 77.5 66.7 64.4 59.7 38.3
PIP-45Bh-1 77.7 77.2 76.8 76.5 77.5 78.2 67.0 64.7 60.1 38.5
PIP-45Bi-1 77.3 76.8 76.3 76.0 77.0 78.0 67.0 64.9 60.1 38.3
PIP-45Bj-1 77.0 75.8 75.4 75.8 75.4 77.2 66.1 64.4 59.6 37.7
PIP-45Bk-1 77.7 76.3 76.1 76.0 76.1 76.8 66.1 64.4 59.4 39.4
PIP-45Bl-1 77.3 76.6 77.0 76.3 76.6 77.9 64.6 64.4 59.6 39.1
PIP-45Bm-1 76.5 76.0 76.3 75.6 76.5 77.0 66.0 64.8 60.2 38.7
PIP-45Ca-1 - 95.3 92.7 94.3 94.6 98.1 64.9 66.8 60.8 38.7
PIP-45Cb-1 - - 94.3 96.0 97.4 95.3 64.2 66.1 59.5 37.7
PIP-45Cc-1 - - - 92.9 93.6 92.9 63.1 65.6 59.5 38.1
PIP-45Cd-1 - - - - 96.2 93.8 64.4 65.4 59.4 37.9
PIP-45Ce-1 - - - - - 94.6 64.4 65.9 59.8 37.6
PIP-45Cf-1 - - - - - - 65.2 67.0 61.0 38.8
PIP-45Da-1 - - - - - - - 66.6 59.9 37.6
PIP-45Db-1 - - - - - - - - 66.2 37.0
PIP-45Ea-1 35.7
В таблице 8 показан процент идентичности последовательности между гомологами полипептида PIP-45-2. На фигурах 2a-2l показано выравнивание аминокислотных последовательностей гомологов полипептида PIP-45-2.
Таблица 8
. PIP-45Ab-2 SEQ ID NO: 4 PIP-45Ac-2 SEQ ID NO: 6 PIP-45Ad-2 SEQ ID NO: 8 PIP-45Ae-2 SEQ ID NO: 10 PIP-45Af-2 SEQ ID NO: 12 PIP-45Ba-2 SEQ ID NO: 14 PIP-45Bb-2 SEQ ID NO: 16 PIP-45Bc-2 SEQ ID NO: 18 PIP-45Bd-2 SEQ ID NO: 20 PIP-45Be-2 SEQ ID NO: 22
PIP-45Aa-2 98.7 96.3 94.4 98.7 99.1 84.0 83.9 83.4 84.3 78.0
PIP-45Ab-2 - 96.1 94.2 99.6 98.9 84.2 84.1 83.6 84.1 78.2
PIP-45Ac-2 - - 95.7 96.1 96.4 84.3 84.3 83.8 84.1 79.1
PIP-45Ad-2 - - - 94.6 94.6 84.0 83.7 83.6 83.4 79.5
PIP-45Ae-2 - - - - 98.9 84.2 84.1 83.6 84.1 78.2
PIP-45Af-2 - - - - - 84.1 84.1 83.6 84.7 78.2
PIP-45Ba-2 - - - - - - 99.3 98.3 95.5 76.2
PIP-45Bb-2 - - - - - - - 98.3 95.9 75.9
PIP-45Bc-2 - - - - - - - - 95.0 75.6
PIP-45Bd-2 - - - - - - - - - 76.3
PIP-45Be-2 - - - - - - - - - -
PIP-45Bf-2 - - - - - - - - - -
PIP-45Bg-2 - - - - - - - - - -
PIP-45Bh-2 - - - - - - - - - -
PIP-45Bi-2 - - - - - - - - - -
PIP-45Bj-2 - - - - - - - - - -
PIP-45Bk-2 - - - - - - - - - -
PIP-45Bl-2 - - - - - - - - - -
PIP-45Bm-2 - - - - - - - - - -
PIP-45Ca-2 - - - - - - - - - -
PIP-45Cb-2 - - - - - - - - - -
PIP-45Cc-2 - - - - - - - - - -
PIP-45Cd-2 - - - - - - - - - -
PIP-45Ce-2 - - - - - - - - - -
PIP-45Cf-2 - - - - - - - - - -
PIP-45Da-2 - - - - - - - - - -
PIP-45Db-2 - - - - - - - - - -
PIP-45Ea-2 - - - - - - - - - -
Таблица 8 продолж.
. PIP-45Bf-2 SEQ ID NO: 24 PIP-45Bg-2 SEQ ID NO: 26 PIP-45Bh-2 SEQ ID NO: 28 PIP-45Bi-2 SEQ ID NO: 30 PIP-45Bj-2 SEQ ID NO: 32 PIP-45Bk-2 SEQ ID NO: 34 PIP-45Bl-2 SEQ ID NO: 233 PIP-45Bm-2 SEQ ID NO: 235 PIP-45Ca-2 SEQ ID NO: 36
PIP-45Aa-2 80.1 83.6 83.9 83.4 83.0 83.7 82.4 82.6 67.0
PIP-45Ab-2 79.9 83.8 84.1 83.6 83.0 83.6 82.8 82.6 66.9
PIP-45Ac-2 79.7 83.9 84.3 83.7 83.7 83.6 82.8 82.6 67.7
PIP-45Ad-2 80.8 83.4 83.9 83.6 83.6 83.9 82.4 82.1 67.3
PIP-45Ae-2 79.9 83.8 84.1 83.6 83.0 83.6 82.6 82.5 66.9
PIP-45Af-2 79.9 83.7 84.1 83.6 83.4 83.9 82.6 82.8 67.2
PIP-45Ba-2 76.7 98.9 99.3 97.9 91.2 90.1 91.6 90.1 67.2
PIP-45Bb-2 76.5 99.3 99.3 98.3 91.4 90.1 91.6 90.1 67.3
PIP-45Bc-2 76.4 97.9 98.3 99.6 90.8 89.2 90.7 89.9 67.3
PIP-45Bd-2 76.7 95.5 95.7 94.9 91.8 89.7 91.8 90.1 67.2
PIP-45Be-2 88.7 75.6 76.1 75.6 75.9 75.9 76.5 75.7 67.9
PIP-45Bf-2 - 76.1 76.7 76.3 77.2 77.4 77.1 76.3 68.7
PIP-45Bg-2 - - 98.9 98.3 91.0 89.7 91.2 89.7 67.3
PIP-45Bh-2 - - - 98.3 91.4 90.3 91.8 90.3 67.2
PIP-45Bi-2 - - - - 90.8 89.1 90.6 89.9 67.3
PIP-45Bj-2 - - - - - 88.2 88.8 87.5 68.3
PIP-45Bk-2 - - - - - - 89.0 86.5 66.6
PIP-45Bl-2 - - - - - - - 88.2 68.3
PIP-45Bm-2 - - - - - - - - 66.8
PIP-45Ca-2 - - - - - - - - -
PIP-45Cb-2 - - - - - - - - -
PIP-45Cc-2 - - - - - - - - -
PIP-45Cd-2 - - - - - - - - -
PIP-45Ce-2 - - - - - - - - -
PIP-45Cf-2 - - - - - - - - -
PIP-45Da-2 - - - - - - - - -
PIP-45Db-2 - - - - - - - - -
PIP-45Ea-2 - - - - - - - - -
Таблица 8 продолж.
. PIP-45Cb-2 SEQ ID NO: 38 PIP-45Cc-2 SEQ ID NO: 40 PIP-45Cd-2 SEQ ID NO: 42 PIP-45Ce-2 SEQ ID NO: 44 PIP-45Cf-2 SEQ ID NO: 237 PIP-45Da-2 SEQ ID NO: 46 PIP-45Db-2 SEQ ID NO: 48 PIP-45Ea-2 SEQ ID NO: 50 PIP-45Ga-2 SEQ ID NO: 52
PIP-45Aa-2 66.8 68.6 67.7 68.3 66.8 56.6 51.3 47.4 30.6
PIP-45Ab-2 66.9 68.5 67.6 68.1 66.7 56.5 51.4 47.7 30.1
PIP-45Ac-2 67.5 68.8 68.1 68.1 67.3 56.4 51.8 47.7 30.8
PIP-45Ad-2 67.5 68.8 67.9 68.1 67.0 57.3 52.6 48.4 29.8
PIP-45Ae-2 66.7 68.5 67.8 68.1 66.7 56.5 51.4 47.7 30.1
PIP-45Af-2 66.8 68.6 67.9 68.5 67.0 56.4 51.3 47.8 30.6
PIP-45Ba-2 67.4 67.9 67.3 67.9 67.1 58.1 52.6 49.3 30.5
PIP-45Bb-2 67.9 68.3 67.5 68.0 67.2 57.8 52.4 49.5 30.2
PIP-45Bc-2 67.9 68.3 67.5 68.0 67.2 58.0 52.3 49.8 30.8
PIP-45Bd-2 68.1 67.9 67.3 67.7 67.2 57.6 52.6 50.2 31.1
PIP-45Be-2 67.7 70.2 67.7 68.9 67.7 58.8 51.9 48.3 30.8
PIP-45Bf-2 69.1 69.9 69.7 70.2 68.8 58.6 53.4 47.9 32.1
PIP-45Bg-2 68.1 68.3 67.7 68.1 67.2 57.6 52.5 49.5 30.4
PIP-45Bh-2 67.4 67.9 67.2 67.7 66.7 58.3 52.5 49.7 30.5
PIP-45Bi-2 67.9 68.3 67.5 68.0 67.2 58.0 52.6 49.9 30.9
PIP-45Bj-2 69.0 68.5 68.3 68.5 67.9 56.7 52.0 48.0 31.8
PIP-45Bk-2 67.3 67.5 66.8 67.0 66.3 57.8 53.5 49.4 31.2
PIP-45Bl-2 68.5 68.6 67.3 67.9 67.5 56.7 53.4 49.4 31.5
PIP-45Bm-2 66.2 67.3 67.0 67.5 66.7 57.0 51.8 48.7 31.9
PIP-45Ca-2 93.0 89.0 92.1 93.6 96.6 56.8 53.6 46.4 30.1
PIP-45Cb-2 - 89.4 91.7 93.8 93.2 56.6 53.0 46.5 31.5
PIP-45Cc-2 - - 88.3 90.3 89.8 58.3 53.1 46.2 31.8
PIP-45Cd-2 - - - 93.6 92.6 56.5 51.9 46.1 31.6
PIP-45Ce-2 - - - - 94.7 56.9 53.6 46.7 32.5
PIP-45Cf-2 - - - - - 57.2 53.7 47.0 32.1
PIP-45Da-2 - - - - - - 55.6 48.6 32.0
PIP-45Db-2 - - - - - - - 49.1 30.4
PIP-45Ea-2 - - - - - - - - 32.5
В таблице 9 показаны идентифицированные гомологи полипептида PIP-64-1 и полипептида PIP-64-2, идентификационные номера последовательностей для каждого и штаммы бактерий, из которых они были идентифицированы. В таблице 10 показан процент идентичности последовательности между гомологами полипептида PIP-64-1. На фигурах 3a-3b показано выравнивание аминокислотных последовательностей гомологов полипептида PIP-64-1. В таблице 11 показан процент идентичности последовательности между гомологами полипептида PIP-64-2. На фигурах 4a-4b показано выравнивание аминокислотных последовательностей гомологов полипептида PIP-64-2.
Таблица 9
Ген Источник Вид
PIP-64Aa-1 SEQ ID NO: 53 LBV9691 Pseudomonas brenneri
PIP-64Aa-2 SEQ ID NO: 54
PIP-64Aa-1 SEQ ID NO: 53 LBV10925; LBV10914 Pseudomonas gessardii
PIP-64Ab-2 SEQ ID NO: 55
PIP-64Ba-1 SEQ ID NO: 238 Внутренняя коллекция - SSP560F2b Pseudomonas entomophila
PIP-64Ba-2 SEQ ID NO: 239
PIP-64Ca-1 SEQ ID NO: 56 Гипотетический белок NCBI WP_016977798 Pseudomonas fluorescens
PIP-64Ca-2 SEQ ID NO: 57 Гипотетический белок NCBI WP_016977799
PIP-64Ea-1 SEQ ID NO: 58 Внутренняя коллекция DuPont P4G7 Alcaligenes faecalis
PIP-64Ea-2 SEQ ID NO: 59
PIP-64Eb-1 SEQ ID NO: 60 ATCC33950 - внутренняя геномная последовательность Alcaligenes faecalis
PIP-64Eb-2 SEQ ID NO: 61
PIP-64Ec-1 SEQ ID NO: 62 EMBL - неохарактеризованный белок M5J334_9BURK и M5IW68_9BURK Alcaligenes sp. HPC1271
PIP-64Ec-2 SEQ ID NO: 63
PIP-64Ga-1 SEQ ID NO: 64 EMBL R9VGC3_9ENTR Enterobacter
PIP-64Ha-1 SEQ ID NO: 65 Гипотетический белок NCBI PSF113_0646 (YP_005206077.1) и PSF113_0647 (YP_005206078.1) Pseudomonas fluorescens
PIP-64Ha-2 SEQ ID NO: 66
PIP-64Hb-1 SEQ ID NO: 67 Гипотетический белок NCBI PSEBR_a622 (YP_004351774.1) и PSEBR_a623 (YP_004351775.1) Pseudomonas brassicacearum
PIP-64Hb-2 SEQ ID NO: 68
PIP-64Hc-1 SEQ ID NO: 69 JGI - гипотетический белок SwiRh_808460 Микробное сообщество ризосферы проса прутьевидного из Мичигана
PIP-64Hc-2 SEQ ID NO: 70 JGI - гипотетический белок SwBS_00338360
PIP-64Hd-1 SEQ ID NO: 71 JGI - гипотетический белок SwiRh_668170 Микробное сообщество ризосферы мискантуса из Келлогга
PIP-64Hd-2 SEQ ID NO: 72 JGI - гипотетический белок MRS2a_00580520
Таблица 10
PIP-64Ba-1 SEQ ID NO: 238 PIP-64Ca-1 SEQ ID NO: 56 PIP-64Ea-1 SEQ ID NO: 58 PIP-64Eb-1 SEQ ID NO: 60 PIP-64Ec-1 SEQ ID NO: 62 PIP-64Ga-1 SEQ ID NO: 64 PIP-64Ha-1 SEQ ID NO: 65 PIP-64Hb-1 SEQ ID NO: 67 PIP-64Hc-1 SEQ ID NO: 69 PIP-64Hd-1 SEQ ID NO: 71
PIP-64Aa-1 84.0 72.3 59.1 59.1 59.1 33.2 27.8 27.4 28.6 27.9
PIP-64Ba-1 - 74.2 56.4 56.8 56.4 31.4 25.7 26.9 26.0 27.2
PIP-64Ca-1 - - 55.6 55.6 55.6 32.1 23.7 23.4 25.2 26.4
PIP-64Ea-1 - - - 99.2 99.6 31.6 25.4 24.6 25.3 26.0
PIP-64Eb-1 - - - - 98.8 31.6 25.0 24.6 25.3 26.0
PIP-64Ec-1 - - - - - 31.6 25.4 24.6 25.3 26.0
PIP-64Ga-1 - - - - - - 22.1 23.1 22.4 22.6
PIP-64Ha-1 - - - - - - - 94.6 66.2 62.1
PIP-64Hb-1 - - - - - - - - 66.2 62.1
PIP-64Hc-1 - - - - - - - - - 76.8
Таблица 11
. PIP-64Ab-2 SEQ ID NO: 55 PIP-64Ba-2 SEQ ID NO: 239 PIP-64Ca-2 SEQ ID NO: 57 PIP-64Ea-2 SEQ ID NO: 59 PIP-64Eb-2 SEQ ID NO: 61 PIP-64Ec-2 SEQ ID NO: 63 PIP-64Ha-2 SEQ ID NO: 66 PIP-64Hb-2 SEQ ID NO: 68 PIP-64Hc-2 SEQ ID NO: 70 PIP-64Hd-2 SEQ ID NO: 72
PIP-64Aa-2 95.8 66.9 54.8 38.9 40.0 39.6 24.0 24.8 24.0 23.0
PIP-64Ab-2 - 66.2 54.8 39.6 41.2 40.8 25.9 23.1 22.3 22.3
PIP-64Ba-2 - - 49.8 38.5 41.1 39.6 21.3 24.4 24.0 19.0
PIP-64Ca-2 - - - 39.0 42.5 40.6 22.5 24.5 23.8 22.5
PIP-64Ea-2 - - - - 85.4 90.7 22.3 18.2 22.0 21.9
PIP-64Eb-2 - - - - - 93.4 25.5 21.6 22.7 21.9
PIP-64Ec-2 - - - - - - 23.3 19.0 23.0 21.7
PIP-64Ha-2 - - - - - - - 72.3 49.2 35.7
PIP-64Hb-2 - - - - - - - - 52.5 38.5
PIP-64Hc-2 - - - - - - - - - 41.2
В таблице 12 показаны идентифицированные гомологи полипептида PIP-74-1 и полипептида PIP-74-2, идентификационные номера последовательностей для каждого и штаммы бактерий, из которых они были идентифицированы. В таблице 13 показан процент идентичности последовательности между представителями семейства полипептидов PIP-74-1. На фигурах 5a-5b показано выравнивание аминокислотных последовательностей гомологов полипептида PIP-74-1. В таблице 14 показан процент идентичности последовательности между представителями семейства полипептидов PIP-74-2. На фигуре 6 показано выравнивание аминокислотных последовательностей гомологов полипептида PIP-74-2.
Таблица 12
Ген Источник Вид
PIP-74Aa-1 SEQ ID NO: 73 Внутренняя коллекция - SS135B4b Pseudomonas rhodesiae
PIP-74Aa-2 SEQ ID NO: 74
PIP-74Ab-1 SEQ ID NO: 75 Внутренняя коллекция - SSP427D6-1 Pseudomonas orientalis
PIP-74Ab-2 SEQ ID NO: 76
PIP-74Ca-1 SEQ ID NO: 77 Внутренняя коллекция - JH21146-1 Pseudomonas sp. PKRS11
PIP-74Ca-2 SEQ ID NO: 78
Таблица 13
PIP-74Ab-1 PIP-74Ca-1
PIP-74Aa-1 99.6 74.5
PIP-74Ab-1 - 74.5
Таблица 14
PIP-74Ab-2 PIP-74Ca-2
PIP-74Aa-2 98.0 66.3
PIP-74Ab-2 - 66.3
В таблице 15 показаны идентифицированные гомологи полипептида PIP-75, идентификационные номера последовательностей для каждого и штаммы бактерий, из которых они были идентифицированы. В таблице 16 показан процент идентичности последовательности между представителями семейства полипептидов PIP-75. На фигуре 7 показано выравнивание аминокислотных последовательностей гомологов полипептида PIP-75.
Таблица 15
Ген Источник Вид
PIP-75Aa SEQ ID NO: 79 LBV6019 Pseudomonas antarctica
PIP-75Ba SEQ ID NO: 80 LBV2669 Pseudomonas orientalis
PIP-75Da SEQ ID NO: 81 Внутренний - JH34920-1 Enterobacter asburiae
PIP-75Ea SEQ ID NO: 82 NCBI A936_14984 Enterobacter sp.
PIP-75Ga SEQ ID NO: 83 NCBI-YP_004234966 Acidovorax avenae subsp. avenae ATCC 19860
PIP-75Gb SEQ ID NO: 84 Внутренняя коллекция - SSP443E10-1 Serratia plymuthica
PIP-75Gc SEQ ID NO: 85 Внутренняя коллекция - JH20785-4 Serratia liquefaciens
PIP-75Gd SEQ ID NO: 86 Внутренняя коллекция - SSP291H3-2 Serratia sp.
PIP-75Ge SEQ ID NO: 87 Внутренняя коллекция - JH20487-2 Serratia sp.
Таблица 16
. PIP-75Ba PIP-75Da PIP-75Ea PIP-75Ga PIP-75Gb PIP-75Gc PIP-75Gd PIP-75Ge
PIP-75Aa 83.3 65.6 60.4 33.6 36.7 33.7 33.7 32.7
PIP-75Ba - 65.6 59.4 33.6 34.0 32.0 38.1 31.6
PIP-75Da - - 85.3 35.2 39.6 38.5 32.3 34.4
PIP-75Ea - - - 35.8 37.5 35.4 30.2 31.2
PIP-75Ga - - - - 24.8 25.2 24.6 23.8
PIP-75Gb - - - - - 86.2 67.0 75.5
PIP-75Gc - - - - - - 61.3 73.1
PIP-75Gd - - - - - - - 82.1
В таблице 17 показаны идентифицированные гомологи полипептида PIP-77, идентификационные номера последовательностей для каждого и штаммы бактерий, из которых они были идентифицированы. В таблице 18 показан процент идентичности последовательности между представителями семейства полипептидов PIP-77. На фигурах 8a-8b показано выравнивание аминокислотных последовательностей гомологов полипептида PIP-77.
Таблица 17
Ген Источник Вид
PIP-77Aa SEQ ID NO: 88 SSP344E5 и другие 29 внутренних штаммов Pseudomonas chlororaphis
PIP-77Ab SEQ ID NO: 89 SSP346A11a Pseudomonas chlororaphis
PIP-77Ac SEQ ID NO: 90 JH19897-4; JH19820-2; JH19887-2; JH20257-4; JH19881-4; JH19896-4; JH20401-2; Pseudomonas brassicacearum
PIP-77Ad SEQ ID NO: 91 SSP423G5-1; SSP344E7a; SSP283E1-2; SSP283E2-1; SSP283E6-1; SSP259H3-2; JH20450-1; SSP459A9-4; SSP459B9-3; JH21227-2; JH22700-1; NCBI-WP_007925627; Pseudomonas chlororaphis
PIP-77Ae SEQ ID NO: 92 SSP346D1a Pseudomonas chlororaphis
PIP-77Af SEQ ID NO: 240 Гипотетический белок NCBI WP_023965133.1; внутренняя коллекция - SSP555A5b Pseudomonas chlororaphis
PIP-77Ba SEQ ID NO: 93 JH17731-2; JH17330-1; JH17729-3; JH17728-1; JH17574-1; JH17564-4 Pseudomonas fluorescens
PIP-77Bb SEQ ID NO: 94 JH20704-3; JH20495-2 Pseudomonas fluorescens
PIP-77Bc SEQ ID NO: 95 JH18994-3; JH18447-2 Pseudomonas fluorescens
PIP-77Bd SEQ ID NO: 96 JH17494-4; JH17581-1; JH19353-3; JH17541-1; JH17554-4; JH16392-2; JH17546-4; JH17696-1; JH17549-1; JH17110-1; SSP454G12-1; JH17430-2 Pseudomonas fluorescens
PIP-77Be SEQ ID NO: 97 SSP347B8a Pseudomonas fluorescens
PIP-77Bf SEQ ID NO: 98 JH18110-4; JH18354-4; JH18107-3; SSP450C9-1 Pseudomonas rhodesiae
PIP-77Bg SEQ ID NO: 99 NCBI-WP_007969132 Pseudomonas-sp
PIP-77Bh SEQ ID NO: 241 Внутренняя коллекция - SSP535F3b Pseudomonas rhodesiae
PIP-77Bi SEQ ID NO: 242 Внутренняя коллекция - SSP557G7-4 Pseudomonas rhodesiae
PIP-77Ca SEQ ID NO: 100 SS154F1; SSP154F5a Pseudomonas fluorescens
PIP-77Ea SEQ ID NO: 101 NCBI-WP_008458969 Enterobacter-sp
PIP-77Eb SEQ ID NO: 102 NCBI-YP_564720 Shewanella denitrificans
PIP-77Ec SEQ ID NO: 103 NCBI-WP_005351930 Aeromonas diversa
PIP-77Ed SEQ ID NO: 104 NCBI-YP_001141694 Aeromonas salmonicida
PIP-77Ee SEQ ID NO: 105 NCBI-YP_004392889 Aeromonas veronii
PIP-77Ef SEQ ID NO: 106 NCBI-WP_005909090 Aeromonas molluscorum
PIP-77Eg SEQ ID NO: 107 NCBI-WP_010633780 Aeromonas aquariorum
PIP-77Eh SEQ ID NO: 243 Гипотетический белок NCBI AH4AK4_1885 AHE49340 Aeromonas hydrophila
PIP-77Ei SEQ ID NO: 244 EMBL-U1H356_9GAMM Aeromonas veronii
PIP-77Ej SEQ ID NO: 245 Внутренняя коллекция - JH58766-1 Haemophilus piscium
Таблица 18
PIP-77Ab
SEQ ID NO: 89
PIP-77Ac
SEQ ID NO: 90
PIP-77Ad
SEQ ID NO: 91
PIP-77Ae
SEQ ID NO: 92
PIP-77Af
SEQ ID NO: 240
PIP-77Ba
SEQ ID NO: 93
PIP-77Bb
SEQ ID NO: 94
PIP-77Bc
SEQ ID NO: 95
PIP-77Bd
SEQ ID NO: 96
PIP-77Be
SEQ ID NO: 97
PIP-77Bf
SEQ ID NO: 98
PIP-77Bg
SEQ ID NO: 99
PIP-77Bh
SEQ ID NO: 241
PIP-77Aa 94.4 93.3 92.1 92.1 92.1 87.6 86.5 85.4 84.3 84.3 83.1 85.4 86.5
PIP-77Ab - 95.5 96.6 94.4 95.5 86.5 85.4 84.3 83.1 83.1 82.0 84.3 85.4
PIP-77Ac - - 98.9 95.5 98.9 85.4 84.3 83.1 82.0 83.1 80.9 82.0 84.3
PIP-77Ad - - - 96.6 98.9 86.5 85.4 84.3 83.1 84.3 82.0 82.0 85.4
PIP-77Ae - - - - 95.5 85.4 84.3 83.1 82.0 84.3 80.9 84.3 84.3
PIP-77Af - - - - - 85.4 84.3 83.1 82.0 83.1 80.9 82.0 84.3
PIP-77Ba - - - - - - 97.8 96.6 95.5 88.8 94.4 80.9 98.9
PIP-77Bb - - - - - - - 98.9 97.8 86.5 96.6 82.0 96.6
PIP-77Bc - - - - - - - - 96.6 85.4 95.5 80.9 95.5
PIP-77Bd - - - - - - - - - 84.3 98.9 79.8 94.4
PIP-77Be - - - - - - - - - - 83.1 78.7 89.9
PIP-77Bf - - - - - - - - - - - 78.7 93.3
PIP-77Bg - - - - - - - - - - - - 82.0
PIP-77Bh - - - - - - - - - - - - -
PIP-77Bi - - - - - - - - - - - - -
PIP-77Ca - - - - - - - - - - - - -
PIP-77Ea - - - - - - - - - - - - -
PIP-77Eb - - - - - - - - - - - - -
PIP-77Ec - - - - - - - - - - - - -
PIP-77Ed - - - - - - - - - - - - -
PIP-77Ee - - - - - - - - - - - - -
PIP-77Ef - - - - - - - - - - - - -
PIP-77Eg - - - - - - - - - - - - -
PIP-77Eh - - - - - - - - - - - - -
PIP-77Ei - - - - - - - - - - - - -
Таблица 18 продолжение
PIP-77Bi
SEQ ID NO: 242
PIP-77Ca
SEQ ID NO: 100
PIP-77Ea
SEQ ID NO: 101
PIP-77Eb
SEQ ID NO: 102
PIP-77Ec
SEQ ID NO: 103
PIP-77Ed
SEQ ID NO: 104
PIP-77Ee
SEQ ID NO: 105
PIP-77Ef
SEQ ID NO: 106
PIP-77Eg
SEQ ID NO: 107
PIP-77Eh
SEQ ID NO: 243
PIP-77Ei
SEQ ID NO: 244
PIP-77Ej
SEQ ID NO: 245
PIP-77Aa 84.3 78.0 56.5 55.1 55.6 55.6 56.7 51.1 56.7 56.7 55.6 55.6
PIP-77Ab 83.1 76.9 58.7 55.1 56.7 55.6 56.7 51.1 56.7 56.7 55.6 55.6
PIP-77Ac 80.9 79.1 60.9 56.2 55.6 54.4 55.6 50.0 55.6 55.6 54.4 54.4
PIP-77Ad 82.0 78.0 60.9 56.2 55.6 53.3 54.4 48.9 54.4 54.4 53.3 53.3
PIP-77Ae 80.9 78.0 58.7 55.1 54.4 52.2 53.3 47.8 53.3 53.3 52.2 52.2
PIP-77Af 80.9 78.0 60.9 56.2 55.6 53.3 54.4 48.9 54.4 54.4 53.3 53.3
PIP-77Ba 94.4 74.7 57.6 51.7 54.4 53.3 54.4 47.8 53.3 53.3 52.2 53.3
PIP-77Bb 96.6 75.8 57.6 51.7 55.6 54.4 55.6 48.9 54.4 54.4 53.3 54.4
PIP-77Bc 95.5 74.7 57.6 51.7 54.4 53.3 54.4 47.8 53.3 53.3 52.2 53.3
PIP-77Bd 98.9 73.6 55.4 49.4 53.3 52.2 53.3 48.9 52.2 52.2 51.1 52.2
PIP-77Be 83.1 78.0 57.6 53.9 51.1 48.9 50.0 45.6 51.1 51.1 48.9 48.9
PIP-77Bf 97.8 72.5 54.3 49.4 52.2 52.2 53.3 48.9 52.2 52.2 51.1 52.2
PIP-77Bg 79.8 75.8 56.5 55.1 56.7 55.6 56.7 51.1 56.7 56.7 55.6 55.6
PIP-77Bh 93.3 75.8 58.7 52.8 53.3 52.2 53.3 46.7 52.2 52.2 51.1 52.2
PIP-77Bi - 72.5 55.4 49.4 53.3 52.2 53.3 48.9 52.2 52.2 51.1 52.2
PIP-77Ca - - 62.4 57.1 57.6 54.3 55.4 51.1 56.5 56.5 54.3 54.3
PIP-77Ea - - - 57.6 53.8 54.8 54.8 50.0 55.9 55.9 53.8 55.9
PIP-77Eb - - - - 53.3 51.1 51.1 46.7 53.3 53.3 53.3 51.1
PIP-77Ec - - - - - 86.7 85.6 70.3 85.6 84.4 84.4 86.7
PIP-77Ed - - - - - - 96.7 75.8 88.9 90.0 94.4 90.0
PIP-77Ee - - - - - - - 75.6 87.8 88.9 97.8 88.9
PIP-77Ef - - - - - - - - 84.6 85.7 75.6 80.2
PIP-77Eg - - - - - - - - - 98.9 87.8 95.6
PIP-77Eh - - - - - - - - - - 88.9 94.4
PIP-77Ei - - - - - - - - - - - 86.7
Пример 7. Функциональный тест компонентов PIP-45-1 и PIP-45-2 из разных источников происхождения
Чтобы протестировать функциональность компонентов PIP-45-1 и PIP-45-2 из разных гомологов PIP-45, пять выбранных пар активных гомологов экспрессировали отдельно (перечислены в таблице 19). Каждый компонент PIP-45-1 смешивали с каждым из пяти компонентов PIP-45-2. Все пары тестировали на инсектицидную активность в отношении WCRW в анализах на основе рациона, как описано выше. Результаты показаны в таблице 19, что указывало на то, что при совместном спаривании компонентов PIP-45-1 и PIP-45-2 из разных источников можно обеспечить инсектицидную активность.
Таблица 19
Активность PIP045Aa-2
SEQ ID NO:2
PIP045Ad-2
SEQ ID NO:8
PIP045Ba-2
SEQ ID NO:14
PIP045Ca-2
SEQ ID NO:36
PIP045Cb-2
SEQ ID NO:38
PIP045Aa-1
SEQ ID NO: 1
Активный Активный Активный Активный Активный
PIP045Ad-1
SEQ ID NO: 7
Активный Активный Активный Активный Активный
PIP045Ba-1
SEQ ID NO:13
Активный Неактивный Активный Неактивный Неактивный
PIP045Ca-1 SEQ ID NO:35 Неактивный Неактивный Неактивный Активный Активный
PIP045Cb-1
SEQ ID NO:37
Неактивный Неактивный Неактивный Активный Активный
Активный жирным шрифтом=от исходной пары; активный=инсектицидная активность, выявленная с компонентами из разных источников происхождения
Пример 8. Субклонирование генов и экспрессия E. coli
Целевые гены, кодирующие инсектицидные белки, сначала амплифицировали с помощью ПЦР с использованием в качестве матриц их геномной ДНК. ПЦР-праймеры конструировали на основе 5'- и 3'-концевых последовательностей со встроенными соответствующими сайтами рестрикции. После расщепления рестрикционным ферментом продукты ПЦР клонировали в различные векторы экспрессии E.coli, т. е. pCOLD™ 1 с меткой N-His, вектор pMAL™ с MBP-слиянием или без него или векторы pCOLD™ с His-меткой или без нее. Белки экспрессировались в клетках-хозяевах BL21 (DE3) или C41 E.coli при индукции 1 мМ IPTG в течение ночи при 16°C.
Рекомбинантный белок экстрагировали из культуры E. coli после индукции, очищали и анализировали на насекомых-мишенях, как описано в примере 1.
Пример 9. Транзиентная экспрессия и биологический анализ с использованием насекомого на тканях листьев с транзиентной экспрессией
Полинуклеотиды, кодирующие как PIP-64Aa-1 (SEQ ID NO: 160), так и PIP-64Aa-2 (SEQ ID NO: 161) клонировали в вектор для транзиентной экспрессии под управлением соответственно вирусного промотора pDMMV (Dav, et. al., (1999) Plant Mol. Biol. 40:771-782). В уровне техники хорошо известен способ инфильтрации агробактериями путем введения клеточной суспензии Agrobacterium в растительные клетки интактных тканей для того, чтобы можно было измерить или изучить воспроизводимые инфицирование и дальнейшую экспрессию трансгена, полученного из растения (Kapila, et. al., (1997) Plant Science 122:101-108). Вкратце, молодые проростки кустовой фасоли (фасоль обыкновенная, Phaseolus vulgaris) и сои (Glycine max), подвергали инфильтрации агробактериями с помощью нормализованных культур бактериальных клеток тестируемых и контрольных штаммов. Для каждого проростка создавали 10 дисков из листов и заражали 3 новорожденными личинками как совки кукурузной (SBL) (Pseudoplusia includes), так и совки, гусеница которой питается бархатными бобами (VBC) (Velvet Anticarsia gemmatalis), отдельно с двумя контрольными дисками из листов, образованными только с Agrobacterium и вектором экспрессии с флуоресцентным маркером DsRed2 (Clontech, Маунтин-Вью, Калифорния) в Agrobacterium. Потребление зеленых тканей листа оценивали через два дня после заражения. Транзиентные экспрессии белков как PIP-64-1 (SEQ ID NO: 53), так и PIP-64-2 (SEQ ID NO: 54) подтверждали способом идентификации белка на основе масс-спектрометрии с использованием экстрагированных белковых лизатов из подвергнутых ко-инфильтрации тканей листа (Patterson, (1998) 10(22):1-24, Current Protocol in Molecular Biology published by John Wiley & Son Inc). Транзиентно ко-экспрессируемые PIP-64-1 (SEQ ID NO: 53) и PIP-64-2 (SEQ ID NO: 54) защищали диски из листьев от потребления насекомыми, которыми их заражали, в то же время общее потребление зеленой ткани наблюдали для двух отрицательных контролей.
Пример 10. Опосредованная Agrobacterium стабильная трансформация маиса
Для опосредованной Agrobacterium трансформации инсектицидных полипептидов маиса применяли способ Zhao (патент США № 5981840 и международная патентная публикация WO 1998/32326, содержание которых тем самым включено в данный документ с помощью ссылки). Вкратце, незрелые зародыши выделяли из маиса и зародыши приводили в контакт с суспензией Agrobacterium, где бактерии были способны переносить полинуклеотид, кодирующий инсектицидный полипептид по настоящему раскрытию, по меньшей мере в одну клетку по меньшей мере одного из незрелых зародышей (стадия 1: стадия инфицирования). На данной стадии незрелые зародыши погружали в суспензию Agrobacterium для инициации инокуляции. Зародыши в течение определенного времени культивировали совместно с Agrobacterium (стадия 2: стадия совместного культивирования). Незрелые зародыши культивировали на твердой среде с антибиотиком, но без селективного средства, для исключения Agrobacterium и для обеспечения фазы покоя для инфицированных клеток. Затем инокулированные зародыши культивировали на среде, содержащей средство для отбора, и выделяли растущий трансформированный каллюс (стадия 4: стадия отбора). Незрелые зародыши культивировали на твердой среде со средством для отбора, что приводило к выборочному росту трансформированных клеток. Затем каллюс регенерировали в растения (стадия 5: стадия регенерации) и каллюсы, выросшие на селективной среде, культивировали на твердой среде для регенерации растений.
Для выявления инсектицидного полипептида в ткани листьев, 4 лиофилизированных высеченных с помощью штамповочного пресса кругов из листьев/образца листа растирали в порошок и повторно суспендировали в 100 мкл PBS, содержащего 0,1% TWEEN™ 20 (PBST), 1% бета-меркаптоэтанола, содержащего 1 таблетку/7 мл ингибитора протеиназы Complete Mini (Roche 1183615301). Суспензию обрабатывали ультразвуком в течение 2 мин. и затем центрифугировали при 4°C, 20000 g в течение 15 минут. К надосадочной жидкости добавляли аликвоту из 1/3 объема 3X NuPAGE® LDS буфера для образца (Invitrogen™ (Калифорния, США), 1% B-ME, содержащего 1 таблетку/7 мл ингибитора протеиназы complete Mini. Реакционную смесь нагревали при 80°C в течение 10 мин. и затем центрифугировали. Образец надосадочной жидкости загружали на гели 4-12% Bis-Tris Midi с подвижным буфером MES в соответствии с инструкциями производителя (Invitrogen™) и переносили на нитроцеллюлозную мембрану с применением устройства iBlot® (Invitrogen™). Нитроцеллюлозную мембрану инкубировали в PBST, содержащем 5% порошка обезжиренного молока, в течение 2 часов перед инкубацией в течение ночи с очищенным с помощью аффинной хроматографии антителом кролика к инсектицидному полипептиду в PBST на протяжении ночи. Мембрану три раза промывали PBST и затем инкубировали в PBST в течение 15 мин., а затем дважды по 5 мин. перед инкубацией в течение 2 часов в PBST с антителом козы к Ig кролика, конъюгированным с HRP, на протяжении 3 часов. Выявленные белки визуализировали с применением реагентов для вестерн-блоттинга ECL (GE Healthcare, № по кат. RPN2106) и пленки Kodak® Biomax® MR. Для выявления инсектицидного белка в корнях, корни лиофилизировали и 2 мг порошка на образец повторно суспендировали в LDS, добавляли 1% бета-меркаптоэтанола, содержащего 1 таблетку/7 мл ингибитора протеиназы Complete Mini. Реакционную смесь нагревали при 80°C в течение 10 мин. и затем центрифугировали при 4°C, 20000 g в течение 15 мин. Образец надосадочной жидкости загружали на гели 4-12% Bis-Tris Midi с подвижным буфером MES в соответствии с инструкциями производителя (Invitrogen™) и переносили на нитроцеллюлозную мембрану с применением устройства iBlot® (Invitrogen™). Нитроцеллюлозную мембрану инкубировали в PBST, содержащем 5% порошка обезжиренного молока, в течение 2 часов перед инкубацией в течение ночи с очищенным с помощью аффинной хроматографии поликлональным антителом кролика к инсектицидному полипептиду в PBST на протяжении ночи. Мембрану трижды промывали PBST и затем инкубировали в PBST в течение 15 мин., а затем дважды по 5 мин. перед инкубацией в течение 2 часов в PBST с антителом козы к Ig кролика, конъюгированным с HRP, на протяжении 3 ч. Связанные с антителом инсектицидные белки выявляли с применением реагентов для вестерн-блоттинга ECL™ (GE Healthcare, № по кат. RPN2106) и пленки Kodak® Biomax® MR.
Трансгенные растения маиса, положительные в отношении экспрессии инсектицидных белков, тестировали на пестицидную активность с использованием стандартных биологических анализов, известных в уровне техники. Такие способы включали, например, биологические анализы с иссечением корня и биологические анализы целого растения. См., например, публикацию заявки на выдачу патента США № US 2003/0120054 и международную публикацию № WO 2003/018810.
Пример 11. Конструкции вектора экспрессии для экспрессии инсектицидных полипептидов в растениях
Векторы экспрессии для растений могут быть сконструированы так, чтобы включать в себя трансгенную кассету, содержащую кодирующую последовательность инсектицидного полипептида под контролем промотора вируса мозаики мирабилис (MMV) [Dey N and Maiti IB, 1999, Plant Mol. Biol. 40(5):771-82] в сочетании с энхансерным элементом. Эти конструкции могут быть использованы для генерации трансгенных событий маиса с целью тестирования эффективности в отношении кукурузных червей, обеспечиваемой экспрессией инсектицидного полипептида по настоящему раскрытию.
Эффективность в теплицах T0 трансгенных событий может быть измерена по защите корней от западного кукурузного жука. Защиту корня оценивали, основываясь на количестве узлов пораженных корней (CRWNIS=показатель поражения узлов кукурузным жуком), с применением способа, разработанного Oleson, et al. (2005) [J. Econ Entomol. 98(1):1-8]. Показатель поражения корня оценивали от ʺ0ʺ до ʺ3ʺ, при этом ʺ0ʺ указывал на отсутствие видимого поражения корня, ʺ1ʺ означало 1 узел корневого повреждения, ʺ2ʺ означало 2 узла корневого повреждения, и ʺ3ʺ означало максимальный показатель в 3 узла корневого повреждения. Средние показатели (например, 1,5) указывают на дополнительную долю узлов повреждения (например, один и половина пораженного узла).
--->
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> Pioneer Hi-Bred International INc.
Steve, Gruver
Heather, Kozy
Jessica, O'Rear
Rosen, Barbara
Schellenberger, Ute
Wei, Zun-Zhi
Xie, Weiping
Zhong, Xiaohong
Zhu, Genhai
<120> ИНСЕКТИЦИДНЫЕ БЕЛКИ И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
<130> 5914-PCT
<150> 62/103787
<151> 2015-01-15
<160> 245
<170> PatentIn версия 3.5
<210> 1
<211> 578
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas brenneri
<400> 1
Met Ser Thr Pro Phe Lys Gln Phe Thr Ser Pro Ala Gly Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asn Gln Leu Pro Gln Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asp Leu Thr Gly Trp Thr Gln Ser Ala Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Gly Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Val Glu Gly Tyr Gly Pro Thr Thr Pro Pro Ala Ile Thr
65 70 75 80
Trp Ala Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Thr Ala Val Ile Pro Gln Leu Gly Gly Lys Ala Met Ser Leu Gln Gln
100 105 110
Val Met Glu Leu Thr Asp Asn Gly Gln Ile Thr Ile Asn Asn Thr Leu
115 120 125
Tyr Met Leu Tyr Asp Pro Asn Lys Gln Gly Thr Leu Leu Gln Leu Pro
130 135 140
Val Thr Arg Cys Pro Thr Ile Asp Trp Gln Gly Lys Tyr Lys Asp Phe
145 150 155 160
Ser Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser
165 170 175
Ile Val Arg Asp Ala Asp Gly Asn Met Arg Lys Ile Thr Phe Thr Cys
180 185 190
Glu Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Ala Met Trp Arg Ile Asp Pro Asn Ala
195 200 205
Val Leu Gly Leu Tyr Arg Asp Tyr Ile Asp Pro Gln Val Gln Leu Glu
210 215 220
Asp Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Ala Asp Cys Pro Thr Gly Lys Ala Gly
225 230 235 240
Asp Pro Val Ile Asp Pro Thr Thr Gly Gln Pro Ala Tyr Asp Thr Val
245 250 255
Asn Lys Trp Asn Ala Gly Thr Ala Cys Val Pro Gly Gln Tyr Gly Gly
260 265 270
Ala Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Val Tyr
275 280 285
Leu Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Arg Pro Leu Ala Ser Ser Gln Asn
290 295 300
Ser Gln Ala Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn
305 310 315 320
Ser Asp Pro His Ile Gly Phe Ser Ala Asn Ser Val Ala Val Asn Asn
325 330 335
Arg Leu Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Thr
340 345 350
Asp Phe Ser Ala Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Gln Tyr
355 360 365
Trp Lys Ile Thr Arg Gly Thr Ala Lys Ser Ala Ala Asn Gly Ser Asp
370 375 380
Gln Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Val Ser Ala Gly Phe Ser
385 390 395 400
Ile Asn Asp Ile Thr Ile Ser Gly Gln Pro Ile Asp Tyr Val Trp Val
405 410 415
Ile Ala Gln Gln Leu Leu Val Gly Leu Ser Val Thr Thr Thr Pro Ile
420 425 430
Ser Pro Thr Pro Asp Ser Cys Pro Cys Val Lys Asp Arg Val Asn Gly
435 440 445
Val Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Leu Asp Leu Phe Tyr Gly
450 455 460
Gln Ser Pro Thr Asp Leu Pro Ala Trp Leu Ala Pro Gly Thr Ser Gly
465 470 475 480
Gln Phe Ala Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Leu Lys Thr Thr Ala Glu
485 490 495
Thr Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Val Thr Ala Gln Val Thr
500 505 510
Gln Phe Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asn Ser Gly
515 520 525
Gly Thr Gln Gly Tyr Leu Leu Thr Ile Thr Val Ser Pro Thr Ala Ala
530 535 540
Pro Gly Leu Val Thr Val Arg Ala Leu Asn Pro Gly Glu Ala Asp Asn
545 550 555 560
Pro Ser Ala Thr Glu His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val Pro
565 570 575
Gly Ala
<210> 2
<211> 535
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas brenneri
<400> 2
Met Ser Arg Leu Arg Leu Ser Val Leu Ser Leu Leu Thr Ser Val Val
1 5 10 15
Leu Ser Leu Phe Ala Met Gln Ala Ala Tyr Ala Ser Pro Thr Ser Asp
20 25 30
Ala Asp Ala Cys Val Gln Gln Gln Leu Val Phe Asn Pro Lys Ser Gly
35 40 45
Gly Phe Leu Pro Ile Asn Asn Phe Asn Ala Thr Gly Gln Ser Phe Met
50 55 60
Asn Cys Phe Gly Trp Gln Leu Phe Ile Ala Leu Asn Trp Pro Val Asn
65 70 75 80
Pro Gly Trp Pro Ala Thr Pro Ala Leu Ala Gly Glu Pro Asp Met Asn
85 90 95
Ser Thr Leu Ala Gln Phe Gly Val Pro Thr Ala Ser Gly Gln Pro Met
100 105 110
Ser Val Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Asn Asp Ile Phe
115 120 125
Leu Pro Gly Ala Pro Ala Pro Thr Gly Trp Gly Val Gln Thr Leu Val
130 135 140
Pro Ser Asn Cys Ser Thr Gln Gly Ser Leu Arg Ala Ile Ser Val Gly
145 150 155 160
Ala Arg Lys Phe Met Thr Ala Thr Ser Glu Ser Ala Ile Asn Ala Arg
165 170 175
His Gly Phe His Leu Ser Ser Gly Thr Leu Ala Ser Ile Pro Asp Pro
180 185 190
Ile Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ser Gln Asn Leu
195 200 205
Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr Ile Val
210 215 220
Ser Lys Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Thr Val Ala Gln Asn
225 230 235 240
Leu Asp Asn Gln Asn Pro Gly Gly Leu Ser Leu Pro Ile Gly Glu Pro
245 250 255
Met Arg Ser Leu Pro Pro Asn Pro Val Pro Gln Glu Gln Leu Gly Ala
260 265 270
Leu Glu Val Lys Ala Ala Trp Arg Ile Leu Thr Gly Lys Pro Glu Leu
275 280 285
Tyr Gly Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Lys Asn Pro Ala Thr
290 295 300
Leu Gln Cys Thr Gln Gln Val Val Gly Leu Val Gly Leu His Ile Ile
305 310 315 320
Asn Lys Thr Gln Ala Ser Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe Glu Gln
325 330 335
Val Asp Asn Val Pro Glu Pro Asn Gln Val Pro Pro Gln Gln Thr Pro
340 345 350
Pro Asp Ser Phe Ala Phe Asn Asn Pro Asn Cys Gly Thr Gly Pro Glu
355 360 365
Cys Thr Pro Asn Val Ala Arg Ile Gln Cys Lys Gln His His Pro Asp
370 375 380
Arg Asp Cys Thr Glu Pro Phe Pro Arg Asp Gln Pro Val Gln Thr Thr
385 390 395 400
Arg Glu His Pro Leu Pro Thr Glu Leu Gln Ala Leu Asn Gly Ala Val
405 410 415
Gln Ala Asn Phe Ala Gln Gln Ser Gln Gly Lys Ser Val Phe Gln Tyr
420 425 430
Tyr Lys Leu Ile Asn Val Leu Trp Thr Leu Thr Pro Asn Pro Pro Thr
435 440 445
Gln Pro Glu Pro Gly Val Ser Ala Gln Val Pro Leu Ser Tyr Gly Pro
450 455 460
Phe Ile Ser Gln Gly Asn Val Pro Val Ala Asn Thr Thr Leu Glu Thr
465 470 475 480
Tyr Val Gln Gly Asp Asn Cys Asn Ala Cys His Gln Tyr Ala Thr Ile
485 490 495
Ala Gly Ser Ser Thr Leu Ala Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Asn Ser
500 505 510
Ala Asp Ser Ala Ser Lys Asn Ser Leu Val Lys Arg Val Lys Ala Phe
515 520 525
Gln Thr Leu Lys Asp Gln Pro
530 535
<210> 3
<211> 578
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas sp. Ag1
<400> 3
Met Ser Thr Pro Phe Lys Gln Phe Thr Ser Pro Ala Gly Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asn Gln Leu Pro Gln Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asp Leu Thr Gly Trp Thr Gln Ser Ala Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Gly Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Val Glu Gly Tyr Gly Pro Thr Thr Pro Pro Ala Ile Thr
65 70 75 80
Trp Ala Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Thr Ala Val Ile Pro Gln Leu Gly Gly Lys Ala Met Ser Met Gln Gln
100 105 110
Val Met Glu Leu Thr Asp Asn Gly Gln Ile Thr Ile Asn Asn Thr Leu
115 120 125
Tyr Met Leu Tyr Asp Pro Asn Lys Gln Gly Thr Leu Leu Gln Leu Pro
130 135 140
Val Thr Arg Cys Pro Ser Ile Asp Trp Gln Gly Lys Tyr Lys Asp Phe
145 150 155 160
Ser Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser
165 170 175
Ile Val Arg Asp Ala Asp Gly Asn Met Arg Lys Ile Thr Phe Thr Cys
180 185 190
Glu Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Ala Met Trp Arg Ile Asp Pro Thr Ala
195 200 205
Val Leu Gly Leu Tyr Arg Asp Tyr Ile Asp Pro Gln Val Gln Leu Glu
210 215 220
Asp Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Ala Asp Cys Pro Thr Gly Lys Ala Gly
225 230 235 240
Asp Pro Val Ile Asp Pro Thr Thr Gly Gln Pro Ala Tyr Asp Thr Val
245 250 255
Asn Lys Trp Asn Ala Gly Thr Ala Cys Val Pro Gly Gln Tyr Gly Gly
260 265 270
Ala Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Val Tyr
275 280 285
Leu Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Arg Pro Leu Ser Ser Ser Gln Asn
290 295 300
Ser Gln Ala Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn
305 310 315 320
Ser Asp Pro His Ile Gly Phe Ser Ala Asn Ser Val Ala Val Asn Asn
325 330 335
Arg Leu Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Thr
340 345 350
Asp Phe Ser Ala Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Gln Tyr
355 360 365
Trp Lys Ile Thr Arg Gly Thr Ala Lys Ser Ala Ala Asn Gly Ser Asp
370 375 380
Gln Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Val Ser Ala Gly Phe Ser
385 390 395 400
Ile Asn Glu Ile Thr Ile Ser Gly Gln Pro Ile Asp Tyr Val Trp Val
405 410 415
Ile Ala Gln Gln Leu Leu Val Gly Leu Ser Val Thr Thr Thr Pro Ile
420 425 430
Ser Pro Thr Pro Asp Ser Cys Pro Cys Val Thr Asp Arg Val Asn Gly
435 440 445
Val Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Leu Asp Leu Phe Tyr Gly
450 455 460
Gln Ser Pro Thr Asp Leu Pro Ala Trp Leu Ala Pro Gly Thr Ser Gly
465 470 475 480
Gln Phe Ala Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Leu Lys Thr Thr Ala Glu
485 490 495
Thr Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Val Thr Ala Gln Val Thr
500 505 510
Lys Phe Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asn Ser Gly
515 520 525
Gly Thr Gln Gly Tyr Leu Leu Thr Ile Thr Val Ser Pro Thr Ala Ala
530 535 540
Pro Gly Leu Val Thr Val Arg Ala Leu Asn Pro Gly Glu Ala Asp Asn
545 550 555 560
Pro Ser Ala Ala Glu His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val Pro
565 570 575
Gly Ala
<210> 4
<211> 536
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas sp. Ag1
<400> 4
Met Ser Arg Leu Arg Leu Ser Val Leu Ser Leu Leu Thr Ser Val Val
1 5 10 15
Leu Ser Leu Phe Ala Met Gln Ala Ala Tyr Ala Ser Pro Thr Ser Asp
20 25 30
Ala Asp Ala Cys Val Gln Gln Gln Leu Val Phe Asn Pro Lys Ser Gly
35 40 45
Gly Phe Leu Pro Ile Asn Asn Phe Asn Ala Thr Gly Gln Ser Phe Met
50 55 60
Asn Cys Phe Gly Trp Gln Leu Phe Ile Ala Leu Asn Trp Pro Val Asn
65 70 75 80
Pro Gly Trp Pro Ala Thr Pro Ala Leu Ala Gly Glu Pro Asp Met Asn
85 90 95
Ser Thr Leu Ala Gln Phe Gly Val Pro Thr Ala Ser Gly Gln Pro Met
100 105 110
Ser Val Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Asn Asp Ile Phe
115 120 125
Leu Pro Gly Ala Pro Ala Pro Thr Gly Trp Gly Val Gln Thr Leu Val
130 135 140
Pro Ser Asn Cys Ser Thr Gln Gly Ser Leu Arg Ala Met Ser Val Gly
145 150 155 160
Ala Arg Lys Phe Met Thr Ala Thr Ser Glu Ser Ala Ile Asn Ala Arg
165 170 175
His Gly Phe His Leu Ser Ser Gly Thr Leu Ala Ser Ile Pro Asp Pro
180 185 190
Ile Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ser Gln Asn Leu
195 200 205
Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr Ile Val
210 215 220
Ser Lys Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Lys Val Ala Gln Asn
225 230 235 240
Leu Asp Asn Gln Asn Pro Gly Gly Leu Ser Leu Pro Ile Gly Glu Pro
245 250 255
Met Arg Ser Leu Pro Pro Asn Pro Val Pro Gln Glu Gln Leu Gly Ala
260 265 270
Leu Glu Val Lys Ala Ala Trp Arg Ile Leu Thr Gly Lys Pro Glu Leu
275 280 285
Tyr Gly Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Lys Asn Pro Ala Thr
290 295 300
Leu Gln Cys Thr Gln Gln Val Val Gly Leu Val Gly Leu His Ile Ile
305 310 315 320
Asn Lys Thr Gln Ala Ser Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe Glu Gln
325 330 335
Val Asp Asn Val Pro Glu Pro Asp Gln Val Pro Pro Gln Gln Thr Pro
340 345 350
Pro Asp Ser Phe Ala Phe Asn Asn Pro Asn Cys Gly Thr Gly Pro Glu
355 360 365
Cys Thr Pro Asn Val Ala Arg Ile Gln Cys Lys Gln Gln His Pro Asp
370 375 380
Arg Asp Cys Thr Glu Pro Phe Pro Arg Asp Gln Pro Val Gln Thr Thr
385 390 395 400
Arg Glu His Pro Leu Pro Thr Glu Leu Gln Ala Leu Asn Gly Ala Val
405 410 415
Gln Ala Asn Phe Ala Gln Gln Ser Gln Gly Lys Ser Val Phe Gln Tyr
420 425 430
Tyr Lys Leu Ile Asn Val Leu Trp Thr Leu Thr Pro Asn Pro Pro Thr
435 440 445
Gln Pro Glu Pro Gly Val Ser Ala Gln Val Pro Leu Ser Tyr Gly Pro
450 455 460
Phe Ile Ser Gln Gly Asn Val Pro Val Ala Asn Thr Thr Leu Glu Thr
465 470 475 480
Tyr Val Gln Gly Asp Asn Cys Asn Ala Cys His Gln Tyr Ala Thr Ile
485 490 495
Ala Gly Ser Ser Thr Leu Ala Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Asn Ser
500 505 510
Ala Asp Ser Ala Ser Lys Lys Ser Leu Val Lys Arg Val Lys Ala Phe
515 520 525
Gln Thr Leu Lys Asp Gly Ser Pro
530 535
<210> 5
<211> 579
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas sp. PAMC 25886
<400> 5
Met Ser Thr Pro Phe Asn Gln Phe Thr Ser Pro Ala Gly Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asn Gln Leu Pro Gln Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asp Leu Thr Gly Trp Thr Gln Ser Ala Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Gly Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Val Glu Gly Tyr Gly Pro Thr Thr Pro Pro Ala Ile Thr
65 70 75 80
Trp Ala Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Thr Ala Val Ile Pro Gln Leu Gly Gly Lys Ala Met Thr Leu Gln Gln
100 105 110
Val Met Glu Leu Thr Asp Asn Gly Gln Ile Thr Leu Asn Asn Thr Leu
115 120 125
Tyr Thr Leu Tyr Asp Pro Asn Lys Gln Gly Thr Leu Leu Gln Leu Pro
130 135 140
Val Thr Arg Cys Pro Ser Ile Asp Trp Gln Gly Lys Tyr Lys Asp Phe
145 150 155 160
Ser Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser
165 170 175
Ile Val Arg Asp Pro Gly Thr Gln Asn Met Arg Lys Ile Thr Phe Thr
180 185 190
Cys Glu Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Ala Met Trp Arg Ile Asp Pro Asn
195 200 205
Ala Val Leu Gly Leu Tyr Arg Asp Tyr Ile Asp Pro Gln Val Gln Leu
210 215 220
Glu Asp Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Ala Asp Cys Pro Thr Gly Asn Lys
225 230 235 240
Gly Asp Pro Val Met Asp Pro Thr Thr Gly Gln Pro Ala Tyr Asp Thr
245 250 255
Val Asn Lys Trp Asn Ala Gly Thr Ala Cys Val Pro Gly Gln Tyr Gly
260 265 270
Gly Ala Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Val
275 280 285
Tyr Leu Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Arg Pro Leu Ala Ser Ser Gln
290 295 300
Asn Ser Gln Ala Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg
305 310 315 320
Asn Ser Asp Pro His Ile Gly Phe Ser Ala Asn Ser Val Ala Val Asn
325 330 335
Asn Arg Leu Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro
340 345 350
Thr Asp Phe Ser Ala Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Gln
355 360 365
Tyr Trp Lys Ile Thr Arg Gly Thr Ala Lys Ser Ala Ala Asn Gly Ser
370 375 380
Asp Gln Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Val Ser Ala Gly Phe
385 390 395 400
Ser Ile Asn Asp Ile Thr Ile Ser Gly Gln Ser Ile Asp Tyr Val Trp
405 410 415
Val Ile Ala Gln Gln Leu Leu Val Gly Leu Ser Val Thr Thr Thr Pro
420 425 430
Ile Ser Pro Thr Pro Glu Ser Cys Pro Cys Val Thr Asp Arg Val Thr
435 440 445
Gly Val Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Leu Asp Leu Phe Tyr
450 455 460
Gly Gln Ser Pro Thr Asp Leu Pro Ala Trp Leu Ala Pro Gly Thr Ser
465 470 475 480
Gly Gln Phe Ala Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Leu Lys Thr Thr Ala
485 490 495
Glu Thr Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Val Thr Ala Val Val
500 505 510
Thr Lys Phe Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asn Ser
515 520 525
Gly Gly Thr Gln Gly Tyr Leu Leu Thr Ile Thr Val Ser Pro Thr Ala
530 535 540
Ala Pro Gly Leu Val Thr Val Arg Ala Leu Asn Pro Gly Glu Ala Asp
545 550 555 560
Asn Pro Ser Ala Ala Gln His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val
565 570 575
Pro Gly Ala
<210> 6
<211> 535
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas sp. PAMC 25886
<400> 6
Met Ser Arg Leu Arg Leu Ser Val Leu Ser Leu Leu Thr Ser Val Val
1 5 10 15
Leu Ser Leu Phe Ala Val Gln Ser Ala Tyr Ala Thr Pro Gln Ser Asp
20 25 30
Ala Asp Ala Cys Val Gln Gln Gln Leu Val Phe Asn Pro Ala Ser Gly
35 40 45
Gly Phe Leu Pro Val Asn Asn Phe Asn Ala Thr Gly Gln Ser Phe Met
50 55 60
Asn Cys Phe Gly Trp Gln Leu Phe Ile Ala Leu Asn Trp Pro Val Asn
65 70 75 80
Pro Gly Trp Pro Ala Thr Pro Ala Leu Ala Gly Glu Pro Asp Met His
85 90 95
Ser Ser Leu Ala Gln Phe Gly Val Pro Pro Ala Ser Gly Gln Pro Met
100 105 110
Thr Val Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Asn Asp Ile Phe
115 120 125
Leu Pro Gly Ala Pro Val Pro Thr Gly Trp Gly Val Gln Thr Leu Val
130 135 140
Pro Ser Asn Cys Ser Thr Gln Gly Ser Leu Lys Ala Met Ala Val Gly
145 150 155 160
Ala Arg Lys Phe Met Thr Ala Thr Ser Glu Ser Ala Ile Asn Ala Arg
165 170 175
His Gly Phe His Leu Ser Ser Gly Thr Leu Ala Ser Ile Pro Asp Pro
180 185 190
Ile Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ser Lys Asn Leu
195 200 205
Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr Ile Val
210 215 220
Ser Lys Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Thr Val Ala Gln Asn
225 230 235 240
Leu Asp Asn Gln Asn Pro Gly Gly Leu Ser Leu Pro Ile Gly Glu Pro
245 250 255
Met Arg Ser Leu Pro Pro Asp Pro Val Pro Gln Glu Gln Leu Gly Ala
260 265 270
Leu Glu Val Lys Ala Ala Trp Arg Ile Leu Thr Gly Lys Pro Glu Leu
275 280 285
Tyr Gly Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Lys Asn Pro Ala Thr
290 295 300
Leu Gln Cys Thr Gln Gln Val Val Gly Leu Val Gly Leu His Ile Ile
305 310 315 320
Asn Lys Thr Gln Ala Ser Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe Glu Gln
325 330 335
Val Asp Asn Val Pro Glu Pro Asp Gln Val Pro Pro Gln Gln Thr Pro
340 345 350
Pro Asp Ser Phe Ala Phe Asn Asn Pro Asn Cys Gly Thr Gly Pro Glu
355 360 365
Cys Thr Pro Asn Val Ala Arg Ile Gln Cys Lys Gln His His Pro Asp
370 375 380
Arg Asp Cys Thr Glu Pro Tyr Pro Arg Asp Gln Pro Val Gln Thr Thr
385 390 395 400
Arg Glu His Pro Leu Pro Thr Glu Leu Gln Ala Leu Asn Gly Ala Val
405 410 415
Gln Ala Asn Phe Ala Gln Gln Ser Gln Gly Lys Ser Val Phe Gln Tyr
420 425 430
Tyr Lys Leu Ile Asn Val Leu Trp Thr Leu Thr Pro Asn Pro Pro Thr
435 440 445
Gln Pro Glu Pro Gly Val Ser Ala Gln Val Pro Leu Ser Tyr Gly Pro
450 455 460
Phe Ile Ser Gln Gly Asn Val Pro Val Ala Asn Thr Thr Leu Glu Thr
465 470 475 480
Tyr Val Gln Gly Asp Asn Cys Asn Ala Cys His Gln Tyr Ala Thr Ile
485 490 495
Ala Gly Ser Ser Thr Leu Ala Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Asn Ser
500 505 510
Ala Asp Ser Ala Ser Lys Lys Ser Leu Val Lys Arg Val Lys Ala Phe
515 520 525
Glu Thr Leu Lys Asp Gln Pro
530 535
<210> 7
<211> 579
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas sp. PAMC 25886
<400> 7
Met Ser Thr Pro Phe Lys Gln Phe Thr Ser Pro Ala Gly Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asn Gln Leu Pro Gln Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asp Leu Thr Gly Trp Thr Gln Ser Ala Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Gly Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Val Glu Gly Tyr Gly Pro Thr Thr Pro Pro Ala Ile Thr
65 70 75 80
Trp Ala Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Thr Ala Val Ile Pro Gln Leu Gly Gly Lys Ala Met Thr Leu Gln Gln
100 105 110
Val Met Glu Leu Thr Asp Asn Gly Gln Ile Thr Leu Asn Asn Thr Leu
115 120 125
Tyr Thr Leu Tyr Asp Pro Asn Lys Gln Gly Thr Leu Leu Gln Leu Pro
130 135 140
Val Thr Arg Cys Pro Ser Ile Asp Trp Gln Gly Lys Tyr Lys Asp Phe
145 150 155 160
Ser Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser
165 170 175
Ile Val Arg Asp Pro Gly Thr Gln Asn Met Arg Lys Ile Thr Phe Thr
180 185 190
Cys Glu Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Ala Met Trp Arg Ile Asp Pro Asn
195 200 205
Ala Val Leu Gly Leu Tyr Arg Asp Tyr Ile Asp Pro Gln Val Gln Leu
210 215 220
Glu Asp Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Ala Asp Cys Pro Thr Gly Asn Lys
225 230 235 240
Gly Asp Pro Val Met Asp Pro Thr Thr Gly Gln Pro Ala Tyr Asp Thr
245 250 255
Val Asn Lys Trp Asn Ala Gly Thr Ala Cys Val Pro Gly Gln Tyr Gly
260 265 270
Gly Ala Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Val
275 280 285
Tyr Leu Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Arg Pro Leu Ser Ser Ser Gln
290 295 300
Asn Ser Gln Ala Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg
305 310 315 320
Asn Ser Asp Pro His Ile Gly Phe Ser Ala Asn Ser Val Ala Val Asn
325 330 335
Asn Arg Leu Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro
340 345 350
Thr Asp Phe Ser Ala Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Gln
355 360 365
Tyr Trp Lys Ile Thr Arg Gly Ala Ala Lys Ser Ala Ala Asn Gly Ser
370 375 380
Asp Gln Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Val Ser Ala Gly Phe
385 390 395 400
Ser Ile Asn Asp Ile Thr Ile Ser Gly Gln Ser Ile Asp Tyr Val Trp
405 410 415
Val Ile Ala Gln Gln Leu Leu Val Gly Leu Ser Val Thr Thr Thr Pro
420 425 430
Ile Ser Pro Thr Pro Asp Ser Cys Pro Cys Val Thr Asp Arg Val Asn
435 440 445
Gly Val Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Leu Asp Leu Phe Tyr
450 455 460
Gly Gln Ser Pro Thr Asp Leu Pro Ala Trp Leu Ala Pro Gly Thr Ser
465 470 475 480
Gly Gln Phe Ala Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Leu Lys Thr Thr Ala
485 490 495
Glu Thr Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Val Thr Ala Val Val
500 505 510
Thr Lys Phe Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asn Ser
515 520 525
Gly Gly Thr Gln Gly Tyr Leu Leu Thr Ile Thr Val Ser Pro Thr Ala
530 535 540
Ala Pro Gly Leu Val Thr Val Arg Ala Leu Asn Pro Gly Glu Ala Asp
545 550 555 560
Asn Pro Ser Ala Ala Glu His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val
565 570 575
Pro Gly Ala
<210> 8
<211> 535
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas sp. PAMC 25886
<400> 8
Met Ser Arg Leu Arg Leu Ser Val Leu Ser Leu Leu Ala Ser Val Val
1 5 10 15
Leu Ser Leu Phe Ala Leu Gln Ser Ala Tyr Ala Thr Pro Gln Ser Asp
20 25 30
Ala Asp Ala Cys Val Gln Gln Gln Leu Val Phe Asn Pro Lys Ser Gly
35 40 45
Gly Phe Leu Pro Val Asn Asn Phe Asn Ala Thr Gly Gln Ser Phe Met
50 55 60
Asn Cys Phe Gly Trp Gln Leu Phe Ile Ala Leu Asn Trp Pro Val Asn
65 70 75 80
Pro Gly Trp Pro Thr Thr Ala Ala Leu Ala Gly Glu Pro Asp Met Asn
85 90 95
Ser Ser Leu Ala Gln Phe Gly Val Pro Thr Thr Ala Gly Gln Pro Met
100 105 110
Thr Val Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Asn Asp Ile Phe
115 120 125
Leu Pro Gly Ala Pro Val Pro Ser Gly Trp Gly Val Gln Thr Leu Val
130 135 140
Pro Ser Asn Cys Ser Thr Gln Gly Ser Leu Lys Ala Met Ser Val Gly
145 150 155 160
Ala Arg Lys Phe Met Thr Ala Thr Ser Glu Ser Ala Ile Asn Ala Arg
165 170 175
His Gly Phe His Leu Ser Ser Gly Thr Leu Ala Thr Ile Pro Asp Pro
180 185 190
Ile Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ala Gly Gln Leu
195 200 205
Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr Ile Val
210 215 220
Ser Lys Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Lys Val Ala Gln Asn
225 230 235 240
Leu Asp Asn Gln Asn Pro Gly Gly Leu Ser Leu Pro Ile Gly Glu Pro
245 250 255
Met Arg Ser Leu Pro Pro Thr Pro Val Pro Gln Glu Gln Leu Gly Ala
260 265 270
Leu Glu Leu Lys Ala Ala Trp Arg Ile Leu Thr Gly Lys Pro Glu Leu
275 280 285
Tyr Gly Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Lys Asn Pro Ala Thr
290 295 300
Leu Gln Cys Thr Gln Gln Val Val Gly Leu Val Gly Leu His Ile Ile
305 310 315 320
Asn Lys Thr Gln Ala Ser Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe Glu Gln
325 330 335
Val Asp Asn Val Pro Glu Pro Asn Gln Leu Pro Pro Gln Gln Thr Pro
340 345 350
Pro Asp Ser Phe Ala Phe Asn Asn Pro Asn Cys Gly Thr Gly Pro Glu
355 360 365
Cys Thr Pro Asn Val Ala Arg Ile Gln Cys Gln Gln His His Pro Asp
370 375 380
Arg Asp Cys Thr Glu Pro Tyr Pro Arg Asp Gln Pro Val Gln Thr Thr
385 390 395 400
Arg Glu His Pro Leu Pro Thr Glu Leu Gln Ala Leu Asn Gly Ala Val
405 410 415
Gln Ala Asn Phe Ala Gln Gln Ser Gln Gly Lys Ser Val Phe Gln Tyr
420 425 430
Tyr Lys Leu Ile Asn Val Leu Trp Thr Leu Thr Pro Asn Pro Pro Val
435 440 445
Gln Pro Glu Pro Gly Val Ser Ala Ala Val Pro Leu Ser Tyr Gly Pro
450 455 460
Phe Ile Ser Gln Gly Asn Val Pro Val Ala Asn Thr Thr Leu Glu Thr
465 470 475 480
Tyr Val Gln Gly Asp Asn Cys Asn Ala Cys His Gln Tyr Ala Thr Ile
485 490 495
Ala Gly Ser Ser Thr Leu Ala Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Asn Ser
500 505 510
Ala Asp Ser Ala Ser Lys Lys Ser Leu Val Lys Arg Val Lys Ala Phe
515 520 525
Glu Thr Leu Lys Asp Gln Pro
530 535
<210> 9
<211> 578
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 9
Met Ser Thr Pro Phe Lys Gln Phe Thr Ser Pro Ala Gly Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asn Gln Leu Pro Gln Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asp Leu Thr Gly Trp Thr Gln Ser Ala Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Gly Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Val Glu Gly Tyr Gly Pro Thr Thr Pro Pro Ala Ile Thr
65 70 75 80
Trp Ala Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Thr Ala Val Ile Pro Gln Leu Gly Gly Lys Ala Met Ser Met Gln Gln
100 105 110
Val Met Glu Leu Thr Asp Asn Gly Gln Ile Thr Ile Asn Asn Thr Leu
115 120 125
Tyr Met Leu Tyr Asp Pro Lys Lys Gln Gly Thr Leu Leu Gln Leu Pro
130 135 140
Val Thr Arg Cys Pro Ser Ile Asp Trp Gln Gly Lys Tyr Lys Asp Phe
145 150 155 160
Ser Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser
165 170 175
Ile Val Arg Asp Ala Asp Gly Asn Met Arg Lys Ile Thr Phe Thr Cys
180 185 190
Glu Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Ala Met Trp Arg Ile Asp Pro Thr Ala
195 200 205
Val Leu Gly Leu Tyr Arg Asp Tyr Ile Asp Pro Gln Val Gln Leu Glu
210 215 220
Asp Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Ala Asp Cys Pro Thr Gly Lys Ala Gly
225 230 235 240
Asp Pro Val Ile Asp Pro Thr Thr Gly Gln Pro Ala Tyr Asp Thr Val
245 250 255
Asn Lys Trp Asn Ala Gly Thr Ala Cys Val Pro Gly Gln Tyr Gly Gly
260 265 270
Ala Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Val Tyr
275 280 285
Leu Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Arg Pro Leu Ser Ser Ser Gln Asn
290 295 300
Ser Gln Ala Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn
305 310 315 320
Ser Asp Pro His Ile Gly Phe Ser Ala Asn Ser Val Ala Val Asn Asn
325 330 335
Arg Leu Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Thr
340 345 350
Asp Phe Ser Ala Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Gln Tyr
355 360 365
Trp Lys Ile Thr Arg Gly Thr Ala Lys Ser Ala Ala Asn Gly Ser Asp
370 375 380
Gln Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Val Ser Ala Gly Phe Ser
385 390 395 400
Ile Asn Asp Ile Thr Ile Ser Gly Gln Pro Ile Asp Tyr Val Trp Val
405 410 415
Ile Ala Gln Gln Leu Leu Val Gly Leu Ser Val Thr Thr Thr Pro Ile
420 425 430
Ser Pro Thr Pro Asp Ser Cys Pro Cys Val Thr Asp Arg Val Asn Gly
435 440 445
Val Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Leu Asp Leu Phe Tyr Gly
450 455 460
Gln Ser Pro Thr Asp Leu Pro Ala Trp Leu Ala Pro Gly Thr Ser Gly
465 470 475 480
Gln Phe Ala Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Leu Lys Thr Thr Ala Glu
485 490 495
Thr Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Val Thr Ala Gln Val Thr
500 505 510
Lys Phe Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asn Ser Gly
515 520 525
Gly Thr Gln Gly Tyr Leu Leu Thr Ile Thr Val Ser Pro Thr Ala Ala
530 535 540
Pro Gly Leu Val Thr Val Arg Ala Leu Asn Pro Gly Glu Ala Asp Asn
545 550 555 560
Pro Ser Ala Ala Glu His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val Pro
565 570 575
Gly Ala
<210> 10
<211> 536
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 10
Met Ser Arg Leu Arg Leu Ser Val Leu Ser Leu Leu Thr Ser Val Val
1 5 10 15
Leu Ser Leu Phe Ala Met Gln Ala Ala Tyr Ala Ser Pro Thr Ser Asp
20 25 30
Ala Asp Ala Cys Val Gln Gln Gln Leu Val Phe Asn Pro Lys Ser Gly
35 40 45
Gly Phe Leu Pro Ile Asn Asn Phe Asn Ala Thr Gly Gln Ser Phe Met
50 55 60
Asn Cys Phe Gly Trp Gln Leu Phe Ile Ala Leu Asn Trp Pro Val Asn
65 70 75 80
Pro Gly Trp Pro Ala Thr Pro Ala Leu Ala Gly Glu Pro Asp Met Asn
85 90 95
Ser Thr Leu Ala Gln Phe Gly Val Pro Thr Ala Ser Gly Gln Pro Met
100 105 110
Ser Val Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Asn Asp Ile Phe
115 120 125
Leu Pro Gly Ala Pro Val Pro Thr Gly Trp Gly Val Gln Thr Leu Val
130 135 140
Pro Ser Asn Cys Ser Thr Gln Gly Ser Leu Arg Ala Met Ser Val Gly
145 150 155 160
Ala Arg Lys Phe Met Thr Ala Thr Ser Glu Ser Ala Ile Asn Ala Arg
165 170 175
His Gly Phe His Leu Ser Ser Gly Thr Leu Ala Ser Ile Pro Asp Pro
180 185 190
Ile Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ser Gln Asn Leu
195 200 205
Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr Ile Val
210 215 220
Ser Lys Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Lys Val Ala Gln Asn
225 230 235 240
Leu Asp Asn Gln Asn Pro Gly Gly Leu Ser Leu Pro Ile Gly Glu Pro
245 250 255
Met Arg Ser Leu Pro Pro Asn Pro Val Pro Gln Glu Gln Leu Gly Ala
260 265 270
Leu Glu Val Lys Ala Ala Trp Arg Ile Leu Thr Gly Lys Pro Glu Leu
275 280 285
Tyr Gly Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Lys Asn Pro Ala Thr
290 295 300
Leu Gln Cys Thr Gln Gln Val Val Gly Leu Val Gly Leu His Ile Ile
305 310 315 320
Asn Lys Thr Gln Ala Ser Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe Glu Gln
325 330 335
Val Asp Asn Val Pro Glu Pro Asn Gln Val Pro Pro Gln Gln Thr Pro
340 345 350
Pro Asp Ser Phe Ala Phe Asn Asn Pro Asn Cys Gly Thr Gly Pro Glu
355 360 365
Cys Thr Pro Asn Val Ala Arg Ile Gln Cys Lys Gln Gln His Pro Asp
370 375 380
Arg Asp Cys Thr Glu Pro Phe Pro Arg Asp Gln Pro Val Gln Thr Thr
385 390 395 400
Arg Glu His Pro Leu Pro Thr Glu Leu Gln Ala Leu Asn Gly Ala Val
405 410 415
Gln Ala Asn Phe Ala Gln Gln Ser Gln Gly Lys Ser Val Phe Gln Tyr
420 425 430
Tyr Lys Leu Ile Asn Val Leu Trp Thr Leu Thr Pro Asn Pro Pro Thr
435 440 445
Gln Pro Glu Pro Gly Val Ser Ala Gln Val Pro Leu Ser Tyr Gly Pro
450 455 460
Phe Ile Ser Gln Gly Asn Val Pro Val Ala Asn Thr Thr Leu Glu Thr
465 470 475 480
Tyr Val Gln Gly Asp Asn Cys Asn Ala Cys His Gln Tyr Ala Thr Ile
485 490 495
Ala Gly Ser Ser Thr Leu Ala Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Asn Ser
500 505 510
Ala Asp Ser Ala Ser Lys Lys Ser Leu Val Lys Arg Val Lys Ala Phe
515 520 525
Gln Thr Leu Lys Asp Gly Ser Pro
530 535
<210> 11
<211> 578
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas sp. PAMC 26793
<400> 11
Met Ser Thr Pro Phe Lys Gln Phe Thr Ser Pro Ala Gly Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asn Gln Leu Pro Gln Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asp Leu Thr Gly Trp Thr Gln Ser Ala Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Gly Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Val Glu Gly Tyr Gly Pro Ser Thr Pro Pro Ala Ile Thr
65 70 75 80
Trp Ala Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Thr Ala Val Ile Pro Gln Leu Gly Gly Lys Ala Met Ser Met Gln Gln
100 105 110
Val Met Glu Leu Thr Asp Asn Gly Gln Ile Thr Ile Asn Asn Thr Leu
115 120 125
Tyr Met Leu Tyr Asp Pro Asn Lys Gln Gly Thr Leu Leu Gln Leu Pro
130 135 140
Val Thr Arg Cys Pro Thr Ile Asp Trp Gln Gly Lys Tyr Lys Asp Phe
145 150 155 160
Ser Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser
165 170 175
Ile Val Arg Asp Ala Asn Gly Asn Met Arg Lys Ile Thr Phe Thr Cys
180 185 190
Glu Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Ala Met Trp Arg Ile Asp Pro Asn Ala
195 200 205
Val Leu Gly Leu Tyr Arg Asp Tyr Ile Asp Pro Gln Val Gln Leu Glu
210 215 220
Asp Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Ala Asp Cys Pro Thr Gly Lys Ala Gly
225 230 235 240
Asp Pro Val Ile Asp Pro Thr Thr Gly Gln Pro Ala Tyr Asp Thr Val
245 250 255
Asn Lys Trp Asn Ala Gly Thr Ala Cys Val Pro Gly Gln Tyr Gly Gly
260 265 270
Ala Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Val Tyr
275 280 285
Leu Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Arg Pro Leu Ala Ser Ser Gln Asn
290 295 300
Ser Gln Ala Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn
305 310 315 320
Ser Asp Pro His Ile Gly Phe Ser Ala Asn Ser Val Ala Val Asn Asn
325 330 335
Arg Leu Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Thr
340 345 350
Asp Phe Ser Ala Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Gln Tyr
355 360 365
Trp Lys Ile Thr Arg Gly Thr Ala Lys Ser Ala Ala Asn Gly Ser Asp
370 375 380
Gln Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Val Ser Ala Gly Phe Ser
385 390 395 400
Ile Asn Asp Ile Thr Ile Ser Gly Gln Pro Ile Asn Tyr Val Trp Val
405 410 415
Ile Ala Gln Gln Leu Leu Val Gly Leu Ser Val Thr Thr Thr Pro Ile
420 425 430
Ser Pro Thr Pro Asp Ser Cys Pro Cys Val Thr Asp Arg Val Asn Gly
435 440 445
Val Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Leu Asp Leu Phe Tyr Gly
450 455 460
Gln Ser Pro Thr Asp Leu Pro Ala Trp Leu Ala Pro Gly Thr Ser Gly
465 470 475 480
Gln Phe Ala Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Leu Lys Thr Thr Ala Glu
485 490 495
Thr Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Ser Val Thr Ala Gln Val Thr
500 505 510
Gln Phe Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asn Ser Gly
515 520 525
Gly Thr Gln Gly Tyr Leu Leu Thr Ile Thr Val Ser Pro Thr Ala Ala
530 535 540
Pro Gly Leu Val Thr Val Arg Ala Leu Asn Pro Gly Glu Ala Asp Asn
545 550 555 560
Pro Ser Ala Thr Glu His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val Pro
565 570 575
Gly Ala
<210> 12
<211> 535
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas sp. PAMC 26793
<400> 12
Met Ser Arg Leu Arg Leu Ser Val Leu Ser Leu Leu Thr Ser Val Val
1 5 10 15
Leu Ser Leu Phe Ala Met Gln Ala Ala Tyr Ala Ser Pro Thr Ser Asp
20 25 30
Ala Asp Ala Cys Val Gln Gln Gln Leu Val Phe Asn Pro Lys Ser Gly
35 40 45
Gly Phe Leu Pro Ile Asn Asn Phe Asn Ala Thr Gly Gln Ser Phe Met
50 55 60
Asn Cys Phe Gly Trp Gln Leu Phe Ile Ala Leu Asn Trp Pro Val Asn
65 70 75 80
Pro Gly Trp Pro Ala Thr Pro Ala Leu Ala Gly Glu Pro Asp Met Asn
85 90 95
Ser Thr Leu Ala Gln Phe Gly Val Pro Pro Ala Ser Gly Gln Pro Met
100 105 110
Ser Val Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Asn Asp Ile Phe
115 120 125
Leu Pro Gly Ala Pro Ala Pro Thr Gly Trp Gly Val Gln Thr Leu Val
130 135 140
Pro Ser Asn Cys Ser Thr Gln Gly Ser Leu Arg Ala Met Ser Val Gly
145 150 155 160
Ala Arg Lys Phe Met Thr Ala Thr Ser Glu Ser Ala Ile Asn Ala Arg
165 170 175
His Gly Phe His Leu Ser Ser Gly Thr Leu Ala Ser Ile Pro Asp Pro
180 185 190
Ile Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ser Gln Asn Leu
195 200 205
Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr Ile Val
210 215 220
Ser Lys Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Lys Val Ala Gln Asn
225 230 235 240
Ile Asp Asn Gln Asn Pro Gly Gly Leu Ser Leu Pro Ile Gly Glu Pro
245 250 255
Met Arg Ser Leu Pro Pro Asn Pro Val Pro Gln Glu Gln Leu Gly Ala
260 265 270
Leu Glu Val Lys Ala Ala Trp Arg Ile Leu Thr Gly Lys Pro Glu Leu
275 280 285
Tyr Gly Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Lys Asn Pro Ala Thr
290 295 300
Leu Gln Cys Thr Gln Gln Val Val Gly Leu Val Gly Leu His Ile Ile
305 310 315 320
Asn Lys Thr Gln Ala Ser Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe Glu Gln
325 330 335
Val Asp Asn Val Pro Glu Pro Asn Gln Val Pro Pro Gln Gln Thr Pro
340 345 350
Pro Asp Ser Phe Ala Phe Asn Asn Pro Asn Cys Gly Thr Gly Pro Glu
355 360 365
Cys Thr Pro Asn Val Ala Arg Ile Gln Cys Lys Gln His His Pro Asp
370 375 380
Arg Asp Cys Thr Glu Pro Phe Pro Arg Asp Gln Pro Val Gln Thr Thr
385 390 395 400
Arg Glu His Pro Leu Pro Thr Glu Leu Gln Ala Leu Asn Gly Ala Val
405 410 415
Gln Ala Asn Phe Ala Gln Gln Ser Gln Gly Lys Ser Val Phe Gln Tyr
420 425 430
Tyr Lys Leu Ile Asn Val Leu Trp Thr Leu Thr Pro Asn Pro Pro Thr
435 440 445
Gln Pro Glu Pro Gly Val Ser Ala Gln Val Pro Leu Ser Tyr Gly Pro
450 455 460
Phe Ile Ser Gln Gly Asn Val Pro Val Ala Asn Thr Thr Leu Glu Thr
465 470 475 480
Tyr Val Gln Gly Asp Asn Cys Asn Ala Cys His Gln Tyr Ala Thr Ile
485 490 495
Ala Gly Ser Ser Thr Leu Ala Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Asn Ser
500 505 510
Ala Asp Ser Ala Ser Lys Lys Ser Leu Val Lys Arg Val Lys Ala Phe
515 520 525
Gln Thr Leu Lys Asp Gln Pro
530 535
<210> 13
<211> 578
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas putida
<400> 13
Met Ser Thr Pro Phe Lys Gln Phe Thr Ser Pro Ala Gly Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asp Gln Leu Pro Gln Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asn Leu Thr Gly Trp Thr Glu Ser Ser Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Gly Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Val Glu Gly Phe Gly Asp Val Thr Ala Pro Ala Ile Thr
65 70 75 80
Trp Ala Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Ala Ala Val Ile Pro Gln Leu Gly Gly Lys Ala Met Thr Leu Asp Gln
100 105 110
Val Met Glu Leu Thr Asp His Gly Gln Ile Thr Leu Asp Asn Thr Leu
115 120 125
Tyr Met Leu Tyr Asp Pro Asn Lys Gln Gly Thr Val Leu Gln Leu Pro
130 135 140
Ala Lys Arg Cys Pro Ser Ile Asp Trp Asn Gly Lys Tyr Thr Ala Phe
145 150 155 160
Ser Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser
165 170 175
Ile Val Arg Asp Ala Asn Gly Asn Met Arg Lys Ile Thr Phe Thr Cys
180 185 190
Glu Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Thr Met Trp Arg Ile Asp Pro Asn Ala
195 200 205
Val Leu Gly Leu Tyr Arg Asp Tyr Ile Asp Pro Asn Val Gln Leu Glu
210 215 220
Asp Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Val Asp Cys Pro Thr Gly Lys Ala Gly
225 230 235 240
Asp Pro Val Ile Asp Pro Thr Thr Gly Lys Pro Ala Tyr Asp Thr Val
245 250 255
Asn Lys Trp Asn Ala Gly Thr Ala Cys Val Pro Gly Gln Tyr Gly Gly
260 265 270
Ala Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Val Tyr
275 280 285
Leu Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Arg Pro Val Ser Ser Ser Gln Asn
290 295 300
Ala Gln Ser Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn
305 310 315 320
Ser Asp Pro His Ile Gly Phe Met Ala Asn Thr Thr Ala Val Asn Asn
325 330 335
Arg Leu Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Thr
340 345 350
Asp Phe Ser Ala Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Gln Tyr
355 360 365
Trp Arg Ile Thr Arg Gly Thr Ala Lys Ser Ala Ala Asn Gly Ser Asp
370 375 380
Gln Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Glu Ser Ala Gly Phe Ser
385 390 395 400
Ile Asn Asp Ile Thr Ile Asn Asn Gln Lys Val Asn Tyr Val Trp Val
405 410 415
Ile Ala Gln Gln Leu Leu Val Gly Leu Ser Val Thr Val Lys Pro Leu
420 425 430
Ser Ala Thr Leu Gln Ala Phe Pro Cys Val Gln Asp Arg Val Ala Gly
435 440 445
Leu Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Leu Asp Leu Phe Tyr Gly
450 455 460
Gln Ser Pro Thr Asp Leu Pro Ala Trp Leu Ala Pro Gly Ser Ser Asn
465 470 475 480
Gln Phe Val Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Pro Thr Thr Thr Ala Gln
485 490 495
Asn Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Val Thr Ala Gln Val Thr
500 505 510
Gln Tyr Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asn Ser Gly
515 520 525
Gly Thr Gln Ala Tyr Ile Leu Thr Ile Thr Val Ser Pro Ser Ala Ala
530 535 540
Pro Gly Leu Val Thr Val Arg Ala Leu Asn Pro Gly Glu Asp Val Asn
545 550 555 560
Val Ser Ala Thr Asp His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val Pro
565 570 575
Gly Ala
<210> 14
<211> 535
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas putida
<400> 14
Met Met Ser Arg Ser Arg Leu Ser Pro Leu Ser Leu Leu Cys Gly Ile
1 5 10 15
Leu Leu Cys Leu Ser Thr Leu Gln Pro Ala Thr Ala Ala Thr Leu Ser
20 25 30
Asp Ala Asp Thr Cys Val Gln Gln Gln Leu Val Phe Asn Pro Ala Ser
35 40 45
Gly Gly Phe Leu Pro Val Asn Asn Phe Asn Ala Thr Ser Gln Ala Phe
50 55 60
Met Asn Cys Phe Gly Trp Gln Leu Phe Ile Ala Leu Asn Trp Pro Val
65 70 75 80
Asn Pro Gly Trp Pro Ala Thr Ala Ser Leu Ala Gly Glu Pro Asp Met
85 90 95
Gln Ser Thr Leu Ala Gln Phe Gly Val Pro Ser Ala Pro Gly Gln Pro
100 105 110
Met Ser Val Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Asn Asp Ile
115 120 125
Phe Leu Pro Gly Ala Pro Thr Pro Thr Gly Trp Gly Val Gln Thr Leu
130 135 140
Val Pro Ser Gly Cys Ser Thr Gln Gly Ser Leu Lys Ala Leu Lys Val
145 150 155 160
Gly Ala Arg Lys Phe Met Asn Ala Thr Ser Glu Gly Ala Ile Asn Ala
165 170 175
Leu His Gly Phe His Leu Ser Thr Gly Thr Leu Ala Ser Ile Pro Asp
180 185 190
Pro Val Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ala Gly Lys
195 200 205
Leu Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr Ile
210 215 220
Val Asp Lys Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Lys Val Ala Gln
225 230 235 240
Asn Leu Asp Gly Gln Thr Pro Glu Gly Leu Ser Leu Pro Ile Gly Glu
245 250 255
Pro Met Arg Ser Leu Pro Thr Ser Pro Val Pro Gln Glu Gln Leu Gly
260 265 270
Ala Ile Glu Leu Lys Ala Ala Trp Arg Val Leu Thr Gly Lys Pro Glu
275 280 285
Leu Phe Gly Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Lys Arg Pro Asp
290 295 300
Thr Leu Glu Cys Thr Gln Glu Val Val Gly Leu Val Gly Leu His Ile
305 310 315 320
Ile Asn Lys Thr Gln Ala Ser Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe Glu
325 330 335
Gln Val Asp Asn Val Pro Glu Pro Ala Gln Val Pro Pro Gln Gln Thr
340 345 350
Pro Pro Asn Gly Phe Ala Phe Asn Asn Pro Asp Cys Gly Asp Gly Pro
355 360 365
Glu Cys Thr Pro Asn Gln Ala Arg Ile Gln Cys Lys Gln Thr His Pro
370 375 380
Asp Lys Asp Cys Thr Asp Leu Phe Pro Arg Asp Gln Pro Val Gln Thr
385 390 395 400
Thr Arg Glu His Pro Val Pro Gly Asp Leu Gln Ala Leu Asn Ser Ala
405 410 415
Val Gln Ala Asn Phe Ala Gln His Ser Gln Gly Lys Ser Val Phe Gln
420 425 430
Tyr Tyr Lys Leu Ile Asn Val Leu Trp Thr Leu Ala Pro Asn Pro Pro
435 440 445
Ser Pro Glu Pro Gly Ala Asn Ala Gln Val Pro Leu Ser Tyr Gly Pro
450 455 460
Phe Ile Ser Gln Gly Asn Val Pro Val Ala Asn Thr Thr Met Glu Thr
465 470 475 480
Tyr Val Gln Gly Asp Asp Cys Asn Gln Cys His Gln Tyr Ala Thr Ile
485 490 495
Ala Gly Ser Pro Ser Leu Ala Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Asn Ser
500 505 510
Ala Gly Ser Ala Ser Asn Lys Ser Leu Ile Lys Ser Val Lys Ala Phe
515 520 525
Glu Thr Leu Lys Asp Arg Pro
530 535
<210> 15
<211> 578
<212> БЕЛОК
<213> Неустановленное
<220>
<223> Грибной сад комбинированный
<400> 15
Met Ser Thr Pro Phe Lys Gln Phe Thr Ser Pro Ala Gly Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asp Gln Leu Pro Gln Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asn Leu Thr Gly Trp Thr Glu Ser Ser Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Gly Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Val Glu Gly Phe Gly Asp Val Thr Ala Pro Ala Ile Thr
65 70 75 80
Trp Ala Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Ala Ala Val Ile Pro Gln Leu Gly Gly Lys Ala Met Thr Leu Asp Gln
100 105 110
Val Met Ala Leu Thr Asp His Gly Gln Ile Thr Leu Asp Asn Thr Leu
115 120 125
Tyr Met Leu Tyr Asp Pro Asn Lys Gln Gly Thr Val Leu Gln Leu Pro
130 135 140
Ala Lys Arg Cys Pro Ser Ile Asp Trp Asn Gly Lys Tyr Thr Ala Phe
145 150 155 160
Ser Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser
165 170 175
Ile Val Arg Asp Ala Asn Gly Asn Met Arg Lys Ile Thr Phe Thr Cys
180 185 190
Glu Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Thr Met Trp Arg Ile Asp Pro Asn Ala
195 200 205
Val Leu Gly Leu Tyr Arg Asp Tyr Ile Asp Pro Asn Val Gln Leu Glu
210 215 220
Asp Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Val Asp Cys Pro Thr Gly Lys Ala Gly
225 230 235 240
Asp Pro Val Ile Asp Pro Thr Thr Gly Lys Pro Ala Tyr Asp Thr Val
245 250 255
Asn Lys Trp Asn Ala Gly Thr Ala Cys Val Pro Gly Gln Tyr Gly Gly
260 265 270
Ala Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Val Tyr
275 280 285
Leu Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Arg Pro Val Ser Ser Ser Gln Asn
290 295 300
Ala Gln Ser Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn
305 310 315 320
Ser Asp Pro His Ile Gly Phe Met Ala Asn Thr Thr Ala Val Asn Asn
325 330 335
Arg Leu Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Thr
340 345 350
Asp Phe Ser Ala Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Gln Tyr
355 360 365
Trp Arg Ile Thr Arg Gly Thr Ala Lys Ser Ala Ala Asn Gly Ser Asp
370 375 380
Gln Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Glu Ser Ala Gly Phe Ser
385 390 395 400
Ile Asn Asp Ile Thr Ile Asn Asn Gln Lys Val Asn Tyr Val Trp Val
405 410 415
Ile Ala Gln Gln Leu Leu Val Gly Leu Ser Val Thr Val Lys Pro Leu
420 425 430
Ser Thr Thr Pro Gln Ala Phe Pro Cys Val Gln Asp Arg Val Ala Gly
435 440 445
Arg Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Leu Asp Leu Phe Tyr Gly
450 455 460
Gln Ser Pro Thr Asp Leu Pro Ala Trp Leu Ala Pro Gly Ser Ser Asn
465 470 475 480
Gln Phe Val Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Pro Thr Thr Thr Ala Gln
485 490 495
Asn Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Val Thr Ala Gln Val Thr
500 505 510
Gln Tyr Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asn Ser Gly
515 520 525
Gly Thr Gln Ala Tyr Ile Leu Thr Ile Thr Val Ser Pro Ser Ala Ala
530 535 540
Pro Gly Leu Val Ala Val Arg Ala Leu Asn Pro Gly Glu Asp Val Asn
545 550 555 560
Val Ser Ala Thr Asp His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val Pro
565 570 575
Gly Ala
<210> 16
<211> 534
<212> БЕЛОК
<213> Неустановленное
<220>
<223> Грибной сад комбинированный
<400> 16
Met Ser Arg Ser Arg Leu Ser Leu Leu Ser Leu Leu Cys Gly Ile Leu
1 5 10 15
Leu Cys Leu Ser Thr Pro Gln Pro Ala Thr Ala Ala Thr Leu Ser Asp
20 25 30
Ala Asp Thr Cys Val Gln Gln Gln Leu Val Phe Asn Pro Ala Ser Gly
35 40 45
Gly Phe Leu Pro Val Asn Asn Phe Asn Ala Thr Ser Gln Ala Phe Met
50 55 60
Asn Cys Phe Gly Trp Gln Leu Phe Ile Ala Leu Asn Trp Pro Val Asn
65 70 75 80
Pro Gly Trp Pro Ala Thr Ala Ser Leu Ala Gly Glu Pro Asp Met Gln
85 90 95
Ser Thr Leu Ala Gln Phe Gly Val Pro Ser Ala Pro Gly Gln Pro Met
100 105 110
Ser Val Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Asn Asp Ile Phe
115 120 125
Leu Pro Gly Ala Pro Thr Pro Thr Gly Trp Gly Val Gln Thr Leu Val
130 135 140
Pro Ser Gly Cys Ser Thr Gln Gly Asn Leu Lys Ala Leu Lys Val Gly
145 150 155 160
Ala Arg Lys Phe Met Asn Ala Thr Ser Glu Gly Ala Ile Asn Ala Leu
165 170 175
His Gly Phe His Leu Ser Thr Gly Thr Leu Ala Ser Ile Pro Asp Pro
180 185 190
Val Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ala Gly Lys Leu
195 200 205
Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr Ile Val
210 215 220
Asp Lys Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Lys Val Ala Gln Asn
225 230 235 240
Leu Asp Gly Gln Thr Pro Glu Gly Leu Ser Leu Pro Ile Gly Glu Pro
245 250 255
Met Arg Ser Leu Pro Thr Ser Pro Val Pro Gln Glu Gln Leu Gly Ala
260 265 270
Ile Glu Leu Lys Ala Ala Trp Arg Val Leu Thr Gly Lys Pro Glu Leu
275 280 285
Phe Gly Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Lys Arg Pro Asp Thr
290 295 300
Leu Glu Cys Thr Gln Glu Val Val Gly Leu Val Gly Leu His Ile Ile
305 310 315 320
Asn Lys Thr Gln Ala Ser Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe Glu Gln
325 330 335
Val Asp Asn Val Pro Glu Pro Ala Gln Val Pro Pro Gln Gln Thr Pro
340 345 350
Pro Asn Gly Phe Ala Phe Asn Asn Pro Asp Cys Gly Asp Gly Pro Glu
355 360 365
Cys Thr Pro Asn Gln Ala Arg Ile Gln Cys Lys Gln Thr His Pro Asp
370 375 380
Lys Asp Cys Thr Asp Leu Phe Pro Arg Asp Gln Pro Val Gln Thr Thr
385 390 395 400
Arg Glu His Pro Val Pro Gly Asp Leu Gln Ala Leu Asn Ser Ala Val
405 410 415
Gln Ala Asn Phe Ala Gln His Ser Gln Gly Lys Ser Val Phe Gln Tyr
420 425 430
Tyr Lys Leu Ile Asn Val Leu Trp Thr Leu Ala Pro Asn Pro Pro Ser
435 440 445
Pro Glu Pro Gly Ala Asn Ala Gln Val Pro Leu Ser Tyr Gly Pro Phe
450 455 460
Ile Ser Gln Gly Asn Val Pro Val Ala Asn Thr Thr Met Glu Thr Tyr
465 470 475 480
Val Gln Gly Asp Asp Cys Asn Gln Cys His Gln Tyr Ala Thr Ile Ala
485 490 495
Gly Ser Pro Ser Leu Ala Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Asn Ser Ala
500 505 510
Gly Ser Ala Ser Asn Lys Ser Leu Ile Lys Ser Val Lys Ala Phe Glu
515 520 525
Thr Leu Lys Asp Arg Pro
530
<210> 17
<211> 578
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas monteilii
<400> 17
Met Ser Thr Pro Phe Lys Gln Phe Thr Ser Pro Ala Gly Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asp Gln Leu Pro Gln Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asn Leu Thr Gly Trp Thr Glu Ser Ser Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Gly Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Val Glu Gly Phe Gly Asp Val Thr Ala Pro Ala Ile Thr
65 70 75 80
Trp Ala Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Ala Ala Val Ile Pro Gln Leu Gly Gly Lys Ala Met Thr Leu Asp Gln
100 105 110
Val Met Glu Leu Thr Asp His Gly Gln Ile Thr Leu Asp Asn Thr Leu
115 120 125
Tyr Met Leu Tyr Asp Pro Asn Lys Gln Gly Thr Val Leu Gln Leu Pro
130 135 140
Ala Lys Arg Cys Pro Ser Ile Asp Trp Asn Gly Lys Tyr Thr Ala Phe
145 150 155 160
Ser Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser
165 170 175
Ile Val Arg Asp Ala Asn Gly Asn Met Arg Lys Ile Thr Phe Thr Cys
180 185 190
Glu Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Thr Met Trp Arg Ile Asp Pro Asn Ala
195 200 205
Val Leu Gly Leu Tyr Arg Asp Tyr Ile Asp Pro Asn Val Gln Leu Glu
210 215 220
Asp Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Val Asp Cys Pro Thr Gly Lys Ala Gly
225 230 235 240
Asp Pro Val Ile Asp Pro Thr Thr Gly Lys Pro Ala Tyr Asp Thr Val
245 250 255
Asn Lys Trp Asn Ala Gly Thr Ala Cys Val Pro Gly Gln Tyr Gly Gly
260 265 270
Ala Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Val Tyr
275 280 285
Leu Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Arg Pro Val Ser Ser Ser Gln Asn
290 295 300
Ala Gln Ser Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn
305 310 315 320
Ser Asp Pro His Ile Gly Phe Met Ala Asn Thr Thr Ala Val Asn Asn
325 330 335
Arg Leu Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Thr
340 345 350
Asp Phe Ser Ala Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Gln Tyr
355 360 365
Trp Arg Ile Thr Arg Gly Thr Ala Lys Ser Ala Ala Asn Gly Ser Asp
370 375 380
Gln Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Glu Ser Ala Gly Phe Ser
385 390 395 400
Ile Asn Asp Ile Thr Ile Asn Asn Gln Lys Val Asn Tyr Val Trp Val
405 410 415
Ile Ala Gln Gln Leu Leu Val Gly Leu Ser Val Thr Ala Lys Pro Leu
420 425 430
Ser Ala Thr Pro Gln Ala Phe Pro Cys Val Gln Asp Arg Val Ala Gly
435 440 445
Leu Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Leu Asp Leu Phe Tyr Gly
450 455 460
Gln Ser Pro Thr Asp Leu Pro Ala Trp Leu Ala Pro Gly Ser Ser Asn
465 470 475 480
Gln Phe Val Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Pro Thr Thr Thr Ala Gln
485 490 495
Asn Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Val Thr Ala Gln Val Thr
500 505 510
Gln Tyr Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asn Ser Gly
515 520 525
Gly Thr Gln Ala Tyr Ile Leu Thr Ile Thr Val Ser Pro Ser Ala Ala
530 535 540
Pro Gly Leu Val Ala Leu Arg Ala Leu Asn Pro Gly Glu Asp Val Asn
545 550 555 560
Val Ser Ala Thr Asp His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val Pro
565 570 575
Gly Ala
<210> 18
<211> 535
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas monteilii
<400> 18
Met Met Ser Arg Ser Arg Leu Ser Leu Leu Ser Leu Leu Cys Gly Ile
1 5 10 15
Leu Leu Cys Leu Ser Thr Pro Gln Pro Ala Thr Ala Ala Thr Leu Ser
20 25 30
Asp Ala Asp Thr Cys Val Gln Gln Gln Leu Val Phe Asn Pro Ala Ser
35 40 45
Gly Gly Phe Leu Pro Val Asn Asn Phe Asn Ala Thr Ser Gln Ala Phe
50 55 60
Met Asn Cys Phe Gly Trp Gln Leu Phe Ile Ala Leu Asn Trp Pro Val
65 70 75 80
Asn Pro Gly Trp Pro Ala Thr Ala Ser Leu Ala Gly Glu Pro Asp Met
85 90 95
Gln Ser Thr Leu Ala Gln Phe Gly Val Pro Ser Thr Pro Gly Gln Pro
100 105 110
Met Ser Val Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Asn Asp Ile
115 120 125
Phe Leu Pro Gly Ala Pro Thr Pro Thr Gly Trp Gly Val Gln Thr Leu
130 135 140
Val Pro Ser Asp Cys Ser Thr Gln Gly Ser Leu Lys Thr Leu Lys Val
145 150 155 160
Gly Ala Arg Lys Phe Met Asn Ala Thr Ser Glu Gly Ala Ile Asn Ala
165 170 175
Leu His Gly Phe His Leu Ser Thr Gly Thr Leu Ala Ser Ile Pro Asp
180 185 190
Pro Val Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ala Gly Lys
195 200 205
Leu Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr Ile
210 215 220
Val Asp Lys Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Lys Val Ala Arg
225 230 235 240
Asn Leu Asp Gly Gln Thr Pro Glu Gly Leu Ser Leu Pro Ile Gly Glu
245 250 255
Pro Met Arg Ser Leu Pro Thr Ser Pro Val Pro Gln Glu Gln Leu Gly
260 265 270
Ala Ile Glu Leu Lys Ala Ala Trp Arg Val Leu Thr Gly Lys Pro Glu
275 280 285
Leu Phe Gly Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Lys Arg Pro Asp
290 295 300
Thr Leu Glu Cys Thr Gln Glu Val Val Gly Leu Val Gly Leu His Ile
305 310 315 320
Ile Asn Lys Thr Gln Ala Ser Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe Glu
325 330 335
Gln Val Asp Asn Val Pro Glu Pro Ala Gln Val Pro Pro Gln Gln Thr
340 345 350
Pro Pro Asn Gly Phe Ala Phe Asn Asn Pro Asp Cys Gly Asn Gly Pro
355 360 365
Glu Cys Thr Pro Asn Gln Ala Arg Ile Gln Cys Lys Gln Thr His Pro
370 375 380
Asp Lys Asp Cys Thr Asp Leu Phe Pro Arg Asp Gln Pro Val Gln Thr
385 390 395 400
Thr Arg Glu His Pro Val Pro Gly Asp Leu Gln Ala Leu Asn Ser Ala
405 410 415
Val Gln Ala Asn Phe Ala Gln His Ser Gln Gly Lys Ser Val Phe Gln
420 425 430
Tyr Tyr Lys Leu Val Asn Val Leu Trp Thr Leu Ala Pro Asn Pro Pro
435 440 445
Ser Pro Glu Pro Gly Ala Asn Ala Gln Val Pro Leu Ser Tyr Gly Pro
450 455 460
Phe Ile Ser Gln Gly Asn Val Pro Val Ala Asn Thr Thr Met Glu Thr
465 470 475 480
Tyr Val Gln Gly Asp Asn Cys Asn Gln Cys His Gln Tyr Ala Thr Ile
485 490 495
Ala Gly Ser Pro Ser Leu Ala Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Asn Ser
500 505 510
Ala Gly Ser Ala Ser Asn Lys Ser Leu Ile Lys Ser Val Lys Ala Phe
515 520 525
Glu Thr Leu Lys Asp Arg Pro
530 535
<210> 19
<211> 578
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas monteilii
<400> 19
Met Ser Thr Pro Phe Lys Gln Phe Thr Ser Pro Ala Gly Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asp Gln Leu Pro Gln Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asn Leu Thr Gly Trp Thr Gln Ser Ser Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Gly Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Val Glu Gly Phe Gly Asp Val Thr Pro Pro Ala Ile Thr
65 70 75 80
Trp Ala Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Ala Ala Val Ile Pro Gln Leu Gly Gly Lys Ala Met Thr Leu Asp Gln
100 105 110
Val Met Glu Leu Ala Asp His Gly Gln Ile Thr Leu Asp Asn Thr Leu
115 120 125
Tyr Thr Leu Tyr Asp Pro Asn Lys Lys Gly Thr Val Leu Gln Leu Pro
130 135 140
Val Lys Arg Cys Pro Ser Ile Ala Trp Asn Gly Thr Tyr Lys Asp Phe
145 150 155 160
Thr Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser
165 170 175
Ile Val Arg Asp Ala Asn Gly Asn Met Arg Lys Ile Thr Phe Thr Cys
180 185 190
Glu Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Ala Met Trp Arg Ile Asp Pro Asn Ala
195 200 205
Val Leu Gly Leu Tyr Arg Glu Tyr Ile Asp Pro Ser Val Gln Leu Glu
210 215 220
Asp Leu Tyr Leu Arg Tyr Ala Glu Asp Cys Pro Thr Gly Lys Ala Gly
225 230 235 240
Asp Pro Val Met Asp Pro Thr Thr Gly Lys Pro Ala Tyr Asp Thr Val
245 250 255
Asn Lys Trp Asn Ala Gly Thr Ala Cys Val Pro Gly Gln Tyr Gly Gly
260 265 270
Ala Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Val Tyr
275 280 285
Leu Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Arg Pro Val Ser Ser Ser Gln Asn
290 295 300
Ala Gln Ser Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn
305 310 315 320
Ser Asp Pro His Ile Gly Phe Met Ala Asn Thr Thr Ala Val Asn Asn
325 330 335
Arg Leu Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Thr
340 345 350
Asp Phe Ser Ala Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Gln Tyr
355 360 365
Trp Arg Ile Thr Arg Gly Thr Ala Lys Ser Ala Ala Asn Gly Ser Asp
370 375 380
Gln Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Glu Ser Ala Gly Phe Ser
385 390 395 400
Ile Asn Asp Ile Thr Ile Asn Asn Gln Lys Val Asn Tyr Val Trp Val
405 410 415
Ile Ala Gln Gln Leu Leu Val Gly Leu Ser Val Thr Val Lys Pro Leu
420 425 430
Ser Val Thr Pro Gln Ser Phe Pro Cys Val Gln Asp Arg Val Ala Gly
435 440 445
Leu Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Leu Asp Leu Phe Tyr Gly
450 455 460
Asn Ser Pro Thr Asp Leu Pro Ala Trp Leu Ala Pro Gly Ser Ser Asn
465 470 475 480
Gln Phe Val Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Lys Thr Thr Thr Ala Gln
485 490 495
Asn Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Val Thr Ala Gln Val Thr
500 505 510
Gln Tyr Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asn Ala Gly
515 520 525
Gly Thr Gln Ala Tyr Ile Leu Thr Ile Thr Val Ser Pro Thr Ala Ala
530 535 540
Pro Gly Leu Val Thr Val Arg Ala Leu Asn Pro Asp Glu Asp Val Asn
545 550 555 560
Val Ser Ala Ala Asp His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val Pro
565 570 575
Gly Ala
<210> 20
<211> 534
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas monteilii
<400> 20
Met Ser Arg Ser Arg Leu Ser Leu Leu Ser Leu Leu Cys Gly Ile Leu
1 5 10 15
Leu Cys Leu Ser Thr Pro Gln Pro Ala Met Ala Ala Thr Leu Ser Asp
20 25 30
Ala Asp Ala Cys Val Gln Gln Gln Leu Val Phe Asn Pro Ala Ser Gly
35 40 45
Gly Phe Leu Pro Val Asn Asn Phe Asn Ala Thr Ser Gln Ala Phe Met
50 55 60
Asn Cys Phe Gly Trp Gln Leu Phe Ile Ala Leu Asn Trp Pro Val Asn
65 70 75 80
Pro Gly Trp Pro Ala Thr Ala Ser Leu Ala Gly Glu Pro Asp Met Asn
85 90 95
Ser Thr Leu Ala Gln Phe Gly Val Pro Ser Ala Pro Gly Gln Pro Met
100 105 110
Ser Val Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Asn Asp Ile Phe
115 120 125
Leu Pro Gly Ala Pro Thr Pro Thr Gly Trp Gly Val Gln Thr Leu Val
130 135 140
Pro Ser Gly Cys Ser Thr Gln Gly Ser Leu Lys Ser Leu Lys Val Gly
145 150 155 160
Ala Arg Lys Phe Met Asn Ala Thr Ser Glu Gly Ala Ile Asn Ala Leu
165 170 175
His Arg Phe His Leu Ser Thr Gly Thr Leu Ala Ser Ile Pro Asp Pro
180 185 190
Val Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ser Gly Asn Leu
195 200 205
Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr Ile Val
210 215 220
Asp Lys Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Lys Val Ala Gln Asn
225 230 235 240
Gln Asp Gly Lys Thr Pro Glu Gly Leu Ser Leu Pro Ile Gly Glu Pro
245 250 255
Met Arg Ser Leu Pro Pro Ser Pro Val Pro Gln Glu Gln Leu Gly Ala
260 265 270
Ile Glu Leu Lys Ala Ala Trp Arg Val Leu Thr Gly Lys Pro Glu Leu
275 280 285
Phe Gly Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Lys Arg Pro Asp Thr
290 295 300
Leu Asn Cys Thr Gln Glu Val Val Gly Leu Val Gly Leu His Ile Ile
305 310 315 320
Asn Lys Thr Gln Ala Ser Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe Glu Gln
325 330 335
Val Asp Asn Val Pro Glu Pro Ala Gln Ala Pro Pro Gln Gln Thr Pro
340 345 350
Pro Asn Gly Phe Ala Phe Asn Asn Pro Asp Cys Gly Ser Gly Pro Glu
355 360 365
Cys Thr Pro Asn Gln Ala Arg Ile Gln Cys Lys Gln His His Pro Asp
370 375 380
Lys Gln Cys Thr Asp Leu Phe Pro Arg Asp Gln Pro Val Gln Thr Thr
385 390 395 400
Arg Glu His Pro Ile Pro Ser Asp Leu Gln Ala Leu Asn Ser Ala Val
405 410 415
Gln Ala Asn Phe Ala Gln His Ser Gln Gly Gln Ser Val Phe Gln Tyr
420 425 430
Tyr Lys Leu Ile Asn Val Leu Trp Thr Leu Ala Pro Asn Pro Pro Ser
435 440 445
Pro Glu Pro Gly Ala Asn Ala Gln Val Pro Leu Ser Tyr Gly Pro Phe
450 455 460
Ile Ser Gln Gly Asn Val Pro Val Ala Asn Thr Thr Met Glu Thr Tyr
465 470 475 480
Val Gln Gly Asp Asp Cys Asn Gln Cys His Gln Tyr Ala Thr Ile Ala
485 490 495
Gly Ser Pro Ser Leu Ala Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Asn Ser Ala
500 505 510
Gly Ser Ala Ser Thr Lys Ser Leu Ile Lys Ser Val Lys Ala Phe Gln
515 520 525
Thr Leu Lys Asp Gln Pro
530
<210> 21
<211> 581
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas brenneri
<400> 21
Met Ser Thr Pro Phe Lys Gln Phe Thr Ser Pro Ala Gly Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asp Gln Leu Pro Gln Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asp Ile Thr Gly Trp Thr Glu Ala Ala Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Gly Leu Tyr Asp Ala Pro Arg Ser Ala Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Val Glu Gly Tyr Gly Asp Thr Thr Leu Pro Ala Ile Thr
65 70 75 80
Trp Gln Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Thr Ala Val Ile Pro Gln Leu Gly Asn Lys Ala Met Thr Leu Gln Gln
100 105 110
Val Met Glu Leu Thr Asp Asn Gly Gln Ile Thr Ile Asn Gly Thr Leu
115 120 125
Tyr Thr Leu Tyr Asp Pro Asp Lys Lys Gly Thr Leu Leu Gln Leu Pro
130 135 140
Val Thr Arg Cys Pro Thr Ile Asp Trp Asn Gly Lys Tyr Lys Asp Phe
145 150 155 160
Ser Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser
165 170 175
Ile Val Arg Asp Thr Asn Gly Asn Met Arg Lys Ile Thr Phe Thr Ser
180 185 190
Glu Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Ala Met Trp Arg Ile Asp Pro Asn Ala
195 200 205
Val Leu Gly Leu Tyr Arg Asp Tyr Ile Asp Pro Asn Val Gln Leu Gln
210 215 220
Asp Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Ala Asp Cys Lys Thr Gly Lys Ala Gly
225 230 235 240
Asp Pro Val Ile Asp Pro Thr Thr Gly Leu Pro Ala Tyr Asp Thr Val
245 250 255
Asn Lys Trp Asn Ser Gly Thr Ala Cys Thr Pro Gly Gln Phe Gly Gly
260 265 270
Ala Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Val Tyr
275 280 285
Leu Ala Ala Ala Ala Thr Ile Met Arg Pro Leu Lys Ser Ser Gln Ser
290 295 300
Ala Gln Ala Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn
305 310 315 320
Ser Asp Pro His Ile Gly Phe Ala Ala Asn Gly Ala Thr Asn Asp Gly
325 330 335
Ala Thr Pro Ser Arg Ile Ser Leu Thr Asn Pro Ile Ala Leu Tyr Leu
340 345 350
Gln Gln Pro Thr Asn Phe Asn Ala Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp
355 360 365
Val Ser Gln Tyr Trp Arg Ile Thr Arg Gly Thr Ala Lys Ser Ala Ile
370 375 380
Asn Gly Ser Asp Gln Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Glu Ser
385 390 395 400
Ala Gly Phe Ser Ile Asn Asp Ile Thr Ile Asn Gly Gln Ala Val Asp
405 410 415
Tyr Val Trp Val Ile Ala Gln Gln Leu Leu Val Gly Leu Ser Val Thr
420 425 430
Thr Met Pro Ser Thr Ala Gln Gln Gln Ser Pro Cys Val Gln Asp Arg
435 440 445
Val Asn Gly Leu Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Leu Asp Leu
450 455 460
Phe Tyr Gly Gln Ser Pro Thr Asp Leu Pro Ala Trp Leu Ala Pro Gly
465 470 475 480
Thr Ser Gly Gln Phe Ala Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Leu Lys Thr
485 490 495
Thr Ala Ala Thr Ala Arg Ile Gln Phe Asn Asn Pro Gly Val Thr Ala
500 505 510
Gln Val Thr Glu Phe Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr
515 520 525
Asn Ala Gly Gly Thr Gln Gly Tyr Ile Met Thr Ile Thr Val Ala Lys
530 535 540
Asp Ala Ala Pro Gly Leu Val Thr Val Arg Ala Leu Asn Pro Gly Glu
545 550 555 560
Ala Asp Asn Val Ser Ala Ala Asp His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala
565 570 575
Leu Val Pro Ser Thr
580
<210> 22
<211> 532
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas brenneri
<400> 22
Met Tyr Arg Phe Arg Leu Arg Gly Leu Leu Leu Val Gly Thr Leu Leu
1 5 10 15
Ser Leu Phe Leu Leu Pro Thr Ala Gln Ala Ser Asp Ala Asp Thr Cys
20 25 30
Val Gln Gln Gln Leu Val Phe Asp Pro Asn Ser Gly Gly Phe Leu Pro
35 40 45
Val Asn Asn Phe Asn Thr Thr Gly Gln Ser Phe Met Asn Cys Phe Gly
50 55 60
Trp Gln Leu Phe Ile Ala Leu Asn Trp Pro Val Asp Pro Gly Trp Pro
65 70 75 80
Ala Asn Ala Ala Leu Ala Gly Glu Pro Asn Arg Lys Ile Ser Met Ala
85 90 95
Gln Phe Gly Val Pro Gln Val Ala Gly Gln Pro Met Thr Thr Ala Pro
100 105 110
Val Trp Ala Ser Phe Lys Asp Ala Asn Asp Ile Phe Leu Pro Gly Ala
115 120 125
Arg Pro Pro Thr Gly Trp Gly Val Gln Thr Leu Val Pro Ser Asn Cys
130 135 140
Ser Ser Glu Gly Ser Leu Lys Ala Leu Ser Val Gly Ala Arg Lys Phe
145 150 155 160
Met Asn Ala Thr Ser Glu Ser Ala Thr Asn Ala Lys His Arg Phe His
165 170 175
Leu Ser Ser Gly Thr Leu Ala Ser Ile Pro Asp Pro Ile Met Glu Ala
180 185 190
Ala Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Thr Gly Asn Leu Val Tyr Phe Glu
195 200 205
Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr Ile Val Lys Tyr Gly Leu
210 215 220
Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Met Val Val Ala Gln Asn Ser Asp Gly Asn
225 230 235 240
His Pro Ala Gly Leu Ser Leu Pro Ala Gly Glu Leu Met Arg Ser Met
245 250 255
Pro Ala Gln Pro Leu Pro Gln Glu Gln Leu Gly Ala Leu Glu Leu Lys
260 265 270
Ala Ala Trp Arg Ile Leu Thr Gly Lys Pro Gln Leu Tyr Gly Arg Tyr
275 280 285
Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Lys Asn Pro Ala Thr Leu Gln Cys Thr
290 295 300
Gln Gln Val Val Gly Leu Val Gly Leu His Ile Ile Asn Lys Thr Gln
305 310 315 320
Ser Ser Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe Glu Gln Val Asp Asn Val
325 330 335
Gln Glu Pro Gly Gln Val Pro Ala Gln Gln Thr Pro Pro Asp Gly Phe
340 345 350
Thr Phe Tyr Asn Pro Asn Cys Thr Gly Gly Pro Asp Val Cys Thr Pro
355 360 365
Asn Val Ala Arg Ile Gln Cys Gln Gln His His Pro Asp Arg Glu Cys
370 375 380
Thr Glu Pro Tyr Pro Arg Asn Gln Pro Val Gln Thr Thr Arg Glu His
385 390 395 400
Pro Leu Pro Ser Asp Met Gln Ala Leu Asn Gly Ala Val Gln Ala Asn
405 410 415
Phe Ala Gln Gln Thr Asn Gly Gln Ser Val Phe Gln Tyr Tyr Lys Leu
420 425 430
Val Asn Val Leu Trp Ile Thr Ala Pro Thr Ala Pro Asp Pro Glu Pro
435 440 445
Gly Ala Gly Ala Lys Val Pro Leu Ser Tyr Gly Ala Phe Ile Ser Asp
450 455 460
Ser Asn Val Pro Val Ala Asn Thr Thr Met Glu Thr Tyr Val Gln Ser
465 470 475 480
Met Asp Cys Asn Ala Cys His Gln Gln Ala Thr Ile Ala Gly Ser Ser
485 490 495
Ser Leu Ala Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Asn Asn Ala Asp Ser Ala
500 505 510
Lys Gln Lys Ser Leu Ile Lys Arg Val Asn Ala Phe Glu Thr Leu Lys
515 520 525
Asp Gly Pro Pro
530
<210> 23
<211> 577
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas gessardii
<400> 23
Met Ser Thr Pro Phe Lys Gln Phe Thr Ser Pro Ala Gly Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asp Gln Leu Pro Gln Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asp Val Thr Gly Trp Thr Glu Ala Ala Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Gly Leu Tyr Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Val Glu Gly Tyr Gly Asp Thr Thr Pro Pro Ala Ile Thr
65 70 75 80
Trp Gln Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Ser Asn Gly
85 90 95
Thr Ala Val Ile Pro Gln Leu Gly Gly Lys Ala Met Thr Leu Gln Gln
100 105 110
Val Met Glu Leu Thr Asp Asn Gly Gln Ile Thr Ile Asn Asp Thr Leu
115 120 125
Tyr Thr Leu Tyr Asp Pro Asp Lys Lys Gly Thr Leu Leu Gln Leu Pro
130 135 140
Val Thr Arg Cys Pro Ser Ile Asp Trp Asn Gly Lys Tyr Lys Asp Phe
145 150 155 160
Ser Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser
165 170 175
Ile Val Arg Asp Ala Asn Gly Asp Met Arg Lys Ile Thr Phe Thr Ser
180 185 190
Glu Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Ala Met Trp Arg Ile Asp Pro Asn Ala
195 200 205
Val Leu Gly Leu Tyr Arg Asp Tyr Ile Asp Pro Asn Val Gln Leu Glu
210 215 220
Asp Leu Tyr Leu Arg Tyr Ala Thr Asp Cys Pro Thr Gly Asn Ala Gly
225 230 235 240
Asp Pro Val Ile Asp Pro Thr Thr Gly Leu Pro Ala Tyr Asp Thr Val
245 250 255
Asn Lys Trp Asn Ala Gly Thr Ala Cys Thr Pro Gly Gln Phe Gly Gly
260 265 270
Ala Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Val Tyr
275 280 285
Leu Ala Ala Ala Ala Thr Ile Met Arg Pro Leu Lys Ser Ser Gln Asn
290 295 300
Pro Gln Ser Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn
305 310 315 320
Ser Asp Pro His Ile Gly Phe Ala Ala Asn Glu Ala Ala Ile Ser Asn
325 330 335
Arg Ile Ser Leu Thr Asn Pro Ile Ala Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Thr
340 345 350
Asn Phe Ser Ala Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Gln Tyr
355 360 365
Trp Arg Ile Thr Arg Gly Thr Ala Lys Ser Ala Ile Asn Gly Ser Asp
370 375 380
Gln Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Gln Ser Ala Gly Phe Ser
385 390 395 400
Ile Asn Asp Ile Thr Ile Asn Gly Gln Ala Val Asp Tyr Val Trp Val
405 410 415
Ile Ala Gln Gln Leu Leu Val Gly Leu Ser Val Thr Val Met Pro Ser
420 425 430
Thr Thr Ala Ala Pro Ser Pro Cys Val Gln Asp Arg Val Asn Gly Leu
435 440 445
Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Leu Asp Leu Phe Tyr Gly Gln
450 455 460
Ser Pro Thr Asp Leu Pro Ala Trp Leu Ala Pro Gly Ser Ser Gly Gln
465 470 475 480
Phe Val Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Leu Gln Thr Thr Ala Ala Thr
485 490 495
Ala Arg Ile Gln Phe Ser Asn Pro Gly Val Thr Ala Gln Val Thr Lys
500 505 510
Phe Met Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asn Ala Gly Gly
515 520 525
Thr Gln Gly Tyr Ile Met Thr Ile Ser Val Ala Ala Asn Ala Ala Pro
530 535 540
Gly Leu Val Thr Val Arg Ala Leu Asn Pro Gly Glu Ala Asp Asn Val
545 550 555 560
Ser Ala Ala Asp His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val Pro Ser
565 570 575
Thr
<210> 24
<211> 532
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas gessardii
<400> 24
Met Ser Arg Phe Arg Leu Ser Arg Leu Leu Leu Val Ser Thr Leu Leu
1 5 10 15
Ser Leu Phe Ile Leu Pro Leu Ala His Ala Ser Asp Ala Asp Asn Cys
20 25 30
Val Gln Gln Gln Leu Val Phe Asn Pro Lys Ser Gly Gly Phe Met Pro
35 40 45
Val Asn Asn Phe Asn Thr Thr Gly Gln Ser Phe Met Asn Cys Phe Gly
50 55 60
Trp Gln Leu Phe Ile Ala Leu Asn Trp Pro Val Asp Pro Gly Trp Pro
65 70 75 80
Ala Asn Ala Ser Leu Ala Gly Glu Pro Asp Arg Thr Ile Thr Val Ala
85 90 95
Gln Phe Gly Val Pro Thr Thr Ala Gly Gln Pro Met Ser Val Ala Pro
100 105 110
Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Asn Glu Ile Phe Leu Pro Gly Ala
115 120 125
Pro Lys Pro Ser Gly Trp Gly Val Gln Thr Leu Val Pro Pro Asn Cys
130 135 140
Ser Ser Gln Asp Ser Leu Gln Ala Leu Ser Val Gly Ala Arg Lys Phe
145 150 155 160
Met Asn Ala Thr Ser Glu Ser Ala Thr Asn Ala Lys His Arg Phe His
165 170 175
Leu Ser Ser Gly Thr Leu Ala Ser Ile Pro Asp Pro Ile Met Glu Ala
180 185 190
Ala Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Thr Gly Asn Leu Val Tyr Phe Glu
195 200 205
Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr Ile Val Asp Asn Gly Leu
210 215 220
Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Ile Val Ala Gln Asn Ser Asp Gly Lys
225 230 235 240
His Pro Ala Gly Leu Ser Leu Pro Ala Gly Glu Leu Met Arg Ser Met
245 250 255
Pro Thr Thr Pro Leu Pro Gln Glu Gln Leu Gly Ala Leu Glu Leu Lys
260 265 270
Ala Ala Trp Arg Ile Leu Thr Gly Gln Pro Gln Leu Tyr Gly Arg Tyr
275 280 285
Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Lys Asn Pro Ala Thr Leu Gln Cys Thr
290 295 300
Gln Gln Val Val Gly Leu Val Gly Leu His Ile Ile Asn Lys Thr Gln
305 310 315 320
Ser Ser Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe Glu His Val Asp Asn Val
325 330 335
Pro Glu Pro Gly Gln Val Pro Ala Gln Gln Leu Pro Pro Asp Gly Tyr
340 345 350
Thr Phe Asn Asn Pro Asn Cys Thr Gly Gly Pro Asp Val Cys Thr Pro
355 360 365
Asn Val Ala Arg Ile Gln Cys Lys Gln His His Pro Asp Arg Glu Cys
370 375 380
Thr Glu Pro Tyr Pro Arg Asp Gln Pro Val Gln Thr Thr Arg Glu His
385 390 395 400
Pro Leu Ser Ser Asp Met Gln Ala Leu Asn Gly Ala Val Gln Ala Ser
405 410 415
Phe Ala Gln Gln Thr Asn Gly Gln Ser Val Phe Gln Tyr Tyr Lys Leu
420 425 430
Ile Asn Val Leu Trp Ile Thr Ala Pro Thr Pro Pro Asp Pro Glu Pro
435 440 445
Gly Pro Asn Ala Lys Val Pro Leu Ser Tyr Gly Ala Phe Ile Ser Asp
450 455 460
Ser Asn Val Pro Val Ala Asn Thr Thr Leu Glu Thr Tyr Val Gln Gly
465 470 475 480
Met Asn Cys Asn Asp Cys His Gln Gln Ala Thr Ile Ala Gly Ser Ala
485 490 495
Thr Leu Ala Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Asn Asn Ala Asp Ser Ala
500 505 510
Lys His Thr Ser Leu Ile Lys Arg Val His Ala Phe Glu Thr Leu Lys
515 520 525
Asp Gly Gln Pro
530
<210> 25
<211> 578
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas putida
<400> 25
Met Ser Ala Pro Phe Lys Gln Phe Thr Ser Pro Ala Gly Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asp Gln Leu Pro Gln Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asn Leu Thr Gly Trp Thr Glu Ser Ser Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Gly Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Val Glu Gly Phe Gly Asp Val Thr Ala Pro Ala Ile Thr
65 70 75 80
Trp Ala Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Ala Ala Val Ile Pro Gln Leu Gly Gly Lys Ala Met Thr Leu Asp Gln
100 105 110
Val Met Ala Leu Thr Asp His Gly Gln Ile Thr Leu Asp Asn Thr Leu
115 120 125
Tyr Met Leu Tyr Asp Pro Asn Lys Gln Gly Thr Val Leu Gln Leu Pro
130 135 140
Ala Lys Arg Cys Pro Ser Ile Asp Trp Asn Gly Lys Tyr Thr Ala Phe
145 150 155 160
Ser Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser
165 170 175
Ile Val Arg Asp Ala Asn Gly Asn Met Arg Lys Ile Thr Phe Thr Cys
180 185 190
Glu Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Thr Met Trp Arg Ile Asp Pro Asn Ala
195 200 205
Val Leu Gly Leu Tyr Arg Asp Tyr Ile Asp Pro Asn Val Gln Leu Glu
210 215 220
Asp Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Val Asp Cys Pro Thr Gly Lys Ala Gly
225 230 235 240
Asp Pro Val Ile Asp Pro Thr Thr Gly Lys Pro Ala Tyr Asp Thr Val
245 250 255
Asn Lys Trp Asn Ala Gly Thr Ala Cys Val Pro Gly Gln Tyr Gly Gly
260 265 270
Ala Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Val Tyr
275 280 285
Leu Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Gly Pro Val Ser Ser Ser Gln Asn
290 295 300
Ala Gln Ser Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn
305 310 315 320
Ser Asp Pro His Ile Gly Phe Met Ala Asn Thr Thr Ala Val Asn Asn
325 330 335
Arg Leu Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Thr
340 345 350
Asp Phe Ser Ala Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Gln Tyr
355 360 365
Trp Arg Ile Thr Arg Gly Thr Ala Lys Ser Ala Ala Asn Gly Ser Asp
370 375 380
Gln Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Glu Ser Ala Gly Phe Ser
385 390 395 400
Ile Asn Asp Ile Thr Ile Asn Asn Gln Lys Val Asn Tyr Val Trp Val
405 410 415
Ile Ala Gln Gln Leu Leu Val Gly Leu Ser Val Thr Val Lys Pro Leu
420 425 430
Ser Thr Ala Pro Gln Ala Phe Pro Cys Val Gln Asp Arg Val Ala Gly
435 440 445
Leu Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Leu Asp Leu Phe Tyr Gly
450 455 460
Gln Ser Pro Thr Asp Leu Pro Ala Trp Leu Ala Pro Gly Ser Ser Asn
465 470 475 480
Gln Phe Val Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Pro Thr Thr Thr Ala Gln
485 490 495
Asn Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Val Thr Ala Gln Val Thr
500 505 510
Gln Tyr Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Ser Gln Thr Asn Ser Gly
515 520 525
Gly Thr Gln Ala Tyr Ile Leu Thr Ile Thr Val Ser Pro Ser Ala Ala
530 535 540
Pro Gly Leu Val Ala Val Arg Ala Leu Asn Pro Gly Glu Asp Val Asn
545 550 555 560
Val Ser Ala Thr Asp His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val Pro
565 570 575
Gly Ala
<210> 26
<211> 534
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas putida
<400> 26
Met Ser Arg Ser Arg Leu Ser Leu Leu Ser Leu Leu Cys Gly Ile Leu
1 5 10 15
Leu Cys Leu Ser Thr Pro Gln Pro Ala Thr Ala Ala Thr Leu Ser Asp
20 25 30
Ala Asp Thr Cys Val Gln Lys Gln Leu Val Phe Asn Pro Ala Ser Gly
35 40 45
Gly Phe Leu Pro Val Asn Asn Phe Asn Ala Thr Ser Gln Ala Phe Met
50 55 60
Asn Cys Phe Gly Trp Gln Leu Phe Ile Ala Leu Asn Trp Pro Val Asn
65 70 75 80
Pro Gly Trp Pro Ala Thr Ala Ser Leu Ala Gly Glu Pro Asp Met Gln
85 90 95
Ser Thr Leu Ala Gln Phe Gly Val Pro Ser Ala Pro Gly Gln Pro Met
100 105 110
Ser Val Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Asn Asp Ile Phe
115 120 125
Leu Pro Gly Ala Pro Thr Pro Thr Gly Trp Gly Val Glu Thr Leu Val
130 135 140
Pro Ser Gly Cys Ser Thr Gln Gly Ser Leu Lys Ala Leu Lys Val Gly
145 150 155 160
Ala Arg Lys Phe Met Asn Ala Thr Ser Glu Gly Ala Ile Asn Ala Leu
165 170 175
His Gly Phe His Leu Ser Thr Gly Thr Leu Ala Ser Ile Pro Asp Pro
180 185 190
Val Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ala Gly Lys Leu
195 200 205
Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr Ile Val
210 215 220
Asp Lys Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Lys Val Ala Gln Asn
225 230 235 240
Leu Asp Gly Gln Thr Pro Glu Gly Leu Ser Leu Pro Ile Gly Glu Pro
245 250 255
Met Arg Ser Leu Pro Thr Ser Pro Val Pro Gln Glu Gln Leu Gly Ala
260 265 270
Ile Glu Leu Lys Ala Ala Trp Arg Val Leu Thr Gly Lys Pro Glu Leu
275 280 285
Phe Gly Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Lys Arg Pro Asp Thr
290 295 300
Leu Glu Cys Thr Gln Glu Val Val Gly Leu Val Gly Leu His Ile Ile
305 310 315 320
Asn Lys Thr Gln Ala Ser Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe Glu Gln
325 330 335
Val Asp Asn Val Pro Glu Pro Ala Gln Val Pro Pro Gln Gln Thr Pro
340 345 350
Pro Asn Gly Phe Ala Phe Asn Asn Pro Asp Cys Gly Asp Gly Pro Glu
355 360 365
Cys Thr Pro Asn Gln Ala Arg Ile Gln Cys Lys Gln Thr His Pro Asp
370 375 380
Lys Asp Cys Thr Asp Leu Phe Pro Arg Asp Gln Pro Val Gln Thr Thr
385 390 395 400
Arg Val His Pro Val Pro Gly Asp Leu Gln Ala Leu Asn Ser Ala Val
405 410 415
Gln Ala Asn Phe Ala Gln His Ser Gln Gly Lys Ser Val Phe Gln Tyr
420 425 430
Tyr Lys Leu Ile Asn Val Leu Trp Thr Leu Ala Pro Asn Pro Pro Ser
435 440 445
Pro Glu Pro Gly Ala Asn Ala Gln Val Pro Leu Ser Tyr Gly Pro Phe
450 455 460
Ile Ser Gln Gly Asn Val Pro Val Ala Asn Thr Thr Met Glu Thr Tyr
465 470 475 480
Val Gln Gly Asp Asp Cys Asn Gln Cys His Gln Tyr Ala Thr Ile Ala
485 490 495
Gly Ser Pro Ser Leu Ala Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Asn Ser Ala
500 505 510
Gly Ser Ala Ser Asn Lys Ser Leu Ile Lys Ser Val Lys Ala Phe Glu
515 520 525
Thr Leu Lys Asp Arg Pro
530
<210> 27
<211> 578
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas plecoglossicida
<400> 27
Met Ser Thr Pro Phe Lys Gln Phe Thr Ser Pro Ala Gly Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asp Gln Leu Pro Gln Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asn Leu Thr Gly Trp Thr Glu Ser Ser Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Gly Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Val Glu Gly Phe Gly Asp Val Thr Ala Pro Ala Ile Thr
65 70 75 80
Trp Ala Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Ala Ala Val Ile Pro Gln Leu Gly Gly Lys Ala Met Thr Leu Asp Gln
100 105 110
Val Met Glu Leu Thr Asp His Gly Gln Ile Thr Leu Asp Asn Thr Leu
115 120 125
Tyr Met Leu Tyr Asp Pro Asn Lys Arg Gly Thr Val Leu Gln Leu Pro
130 135 140
Ala Lys Arg Cys Pro Ser Ile Asp Trp Asn Gly Lys Tyr Thr Ala Phe
145 150 155 160
Ser Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser
165 170 175
Ile Val Arg Asp Ala Asn Gly Asn Met Arg Lys Ile Thr Phe Thr Cys
180 185 190
Glu Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Thr Met Trp Arg Ile Asp Pro Asn Ala
195 200 205
Val Leu Gly Leu Tyr Arg Asp Tyr Ile Asp Pro Asn Val Gln Leu Glu
210 215 220
Asp Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Ala Asp Gly Pro Thr Gly Lys Ala Gly
225 230 235 240
Asp Pro Val Ile Asp Pro Thr Thr Gly Lys Pro Ala Tyr Asp Thr Val
245 250 255
Asn Lys Trp Asn Ala Gly Thr Ala Cys Val Pro Gly Gln Phe Gly Gly
260 265 270
Ala Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Val Tyr
275 280 285
Leu Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Arg Pro Val Ser Ser Ser Gln Asn
290 295 300
Ala Gln Ser Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn
305 310 315 320
Ser Asp Pro His Ile Gly Phe Met Ala Asn Thr Thr Ala Val Asn Asn
325 330 335
Arg Leu Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Thr
340 345 350
Asp Phe Ser Ala Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Gln Tyr
355 360 365
Trp Arg Ile Thr Arg Gly Thr Ala Lys Ser Ala Ala Asn Gly Ser Asp
370 375 380
Gln Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Glu Ser Ala Gly Phe Ser
385 390 395 400
Ile Asn Asp Ile Thr Ile Asn Asn Gln Lys Val Asn Tyr Val Trp Val
405 410 415
Ile Ala Gln Gln Leu Leu Val Gly Leu Ser Val Thr Val Lys Pro Leu
420 425 430
Ser Thr Thr Pro Gln Ala Phe Pro Cys Val Gln Asp Arg Val Ala Gly
435 440 445
Leu Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Leu Asp Leu Phe Tyr Gly
450 455 460
Gln Ser Pro Thr Asp Leu Pro Ala Trp Leu Ala Pro Gly Ser Ser Asn
465 470 475 480
Gln Phe Val Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Pro Thr Thr Thr Ala Gln
485 490 495
Asn Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Val Thr Ala Gln Val Thr
500 505 510
Gln Tyr Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asn Ser Gly
515 520 525
Gly Thr Gln Ala Tyr Ile Leu Thr Ile Thr Val Ser Pro Ser Ala Ala
530 535 540
Pro Gly Leu Val Thr Val Arg Ala Leu Asn Pro Gly Glu Asp Val Asn
545 550 555 560
Val Ser Ala Thr Asp His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val Pro
565 570 575
Gly Ala
<210> 28
<211> 534
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas plecoglossicida
<400> 28
Met Ser Arg Ser Arg Leu Ser Leu Leu Ser Leu Leu Cys Gly Ile Leu
1 5 10 15
Leu Cys Leu Ser Thr Leu Gln Pro Ala Thr Ala Ala Thr Leu Ser Asp
20 25 30
Ala Asp Thr Cys Val Gln Gln Gln Leu Val Phe Asn Pro Ala Ser Gly
35 40 45
Gly Phe Leu Pro Val Asn Asn Phe Asn Ala Thr Ser Gln Ala Phe Met
50 55 60
Asn Cys Phe Gly Trp Gln Leu Phe Ile Ala Leu Asn Trp Pro Val Asn
65 70 75 80
Pro Gly Trp Pro Ala Thr Ala Ser Leu Ala Gly Glu Pro Asp Met Gln
85 90 95
Ser Thr Leu Ala Gln Phe Gly Val Pro Ser Ala Pro Gly Gln Pro Met
100 105 110
Ser Val Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Asn Asp Ile Phe
115 120 125
Leu Pro Gly Ala Pro Thr Pro Thr Gly Trp Gly Val Gln Thr Leu Val
130 135 140
Pro Ser Gly Cys Ser Thr Gln Gly Ser Leu Lys Ala Leu Lys Val Gly
145 150 155 160
Ala Arg Lys Phe Met Asn Ala Thr Ser Glu Gly Ala Ile Asn Ala Leu
165 170 175
His Gly Phe His Leu Ser Thr Gly Thr Leu Ala Ser Ile Pro Asp Pro
180 185 190
Val Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ala Gly Lys Leu
195 200 205
Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr Ile Val
210 215 220
Asp Lys Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Lys Val Ala Gln Asn
225 230 235 240
Leu Asp Gly Gln Thr Pro Glu Gly Leu Ser Leu Pro Ile Gly Glu Pro
245 250 255
Met Arg Ser Leu Pro Thr Ser Pro Val Pro Gln Glu Gln Leu Gly Ala
260 265 270
Ile Glu Leu Lys Ala Ala Trp Arg Val Leu Thr Asp Lys Pro Glu Leu
275 280 285
Phe Gly Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Lys Arg Pro Asp Thr
290 295 300
Leu Glu Cys Thr Gln Glu Val Val Gly Leu Val Gly Leu His Ile Ile
305 310 315 320
Asn Lys Thr Gln Ala Ser Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe Glu Gln
325 330 335
Val Asp Asn Val Pro Glu Pro Ala Gln Val Pro Pro Gln Gln Thr Pro
340 345 350
Pro Asn Gly Phe Ala Phe Asn Asn Pro Asp Cys Gly Asn Gly Pro Glu
355 360 365
Cys Thr Pro Asn Gln Ala Arg Ile Gln Cys Lys Gln Thr His Pro Asp
370 375 380
Lys Asp Cys Thr Asp Leu Phe Pro Arg Asp Gln Pro Val Gln Thr Thr
385 390 395 400
Arg Glu His Pro Val Pro Gly Asp Leu Gln Ala Leu Asn Ser Ala Val
405 410 415
Gln Ala Asn Phe Ala Gln His Ser Gln Gly Lys Ser Val Phe Gln Tyr
420 425 430
Tyr Lys Leu Ile Asn Val Leu Trp Thr Leu Ala Pro Asn Pro Pro Ser
435 440 445
Pro Glu Pro Gly Ala Asn Ala Gln Val Pro Leu Ser Tyr Gly Pro Phe
450 455 460
Ile Ser Gln Gly Asn Val Pro Val Ala Asn Thr Thr Met Glu Thr Tyr
465 470 475 480
Val Gln Gly Asp Asp Cys Asn Gln Cys His Gln Tyr Ala Thr Ile Ala
485 490 495
Gly Ser Pro Ser Leu Ala Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Asn Ser Ala
500 505 510
Gly Ser Ala Ser Asn Lys Ser Leu Ile Lys Ser Val Lys Ala Phe Glu
515 520 525
Thr Leu Lys Asp Arg Pro
530
<210> 29
<211> 578
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas putida
<400> 29
Met Ser Thr Pro Phe Lys Gln Phe Thr Ser Pro Ala Gly Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asp Gln Leu Pro Gln Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asn Leu Thr Gly Trp Thr Glu Ser Ser Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Gly Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Val Glu Gly Phe Gly Asp Val Thr Ala Pro Ala Ile Thr
65 70 75 80
Trp Ala Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Ala Ala Val Ile Pro Gln Leu Gly Gly Lys Ala Met Thr Leu Asp Gln
100 105 110
Val Met Ala Leu Thr Asp His Gly Gln Ile Thr Leu Asp Asn Thr Leu
115 120 125
Tyr Met Leu Tyr Asp Pro Asn Lys Gln Gly Thr Val Leu Gln Leu Pro
130 135 140
Ala Lys Arg Cys Pro Ser Ile Asp Trp Asn Gly Lys Tyr Thr Ala Phe
145 150 155 160
Ser Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser
165 170 175
Ile Val Arg Asp Ala Asn Gly Asn Met Arg Lys Ile Thr Phe Thr Cys
180 185 190
Glu Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Thr Met Trp Arg Ile Asp Pro Asn Ala
195 200 205
Val Leu Gly Leu Tyr Arg Asp Tyr Ile Asp Pro Asn Val Gln Leu Glu
210 215 220
Asp Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Val Asp Cys Pro Thr Gly Lys Ala Gly
225 230 235 240
Asp Pro Val Ile Asp Pro Thr Thr Gly Lys Pro Ala Tyr Asp Thr Val
245 250 255
Asn Lys Trp Asn Ala Gly Thr Ala Cys Val Pro Gly Gln Tyr Gly Gly
260 265 270
Ala Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Val Tyr
275 280 285
Leu Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Arg Pro Val Ser Ser Ser Gln Asn
290 295 300
Ala Gln Ser Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn
305 310 315 320
Ser Asp Pro His Ile Gly Phe Met Ala Asn Thr Thr Ala Val Asn Asn
325 330 335
Arg Leu Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Thr
340 345 350
Asp Phe Ser Ala Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Gln Tyr
355 360 365
Trp Arg Ile Thr Arg Gly Thr Ala Lys Ser Ala Ala Asn Gly Ser Asp
370 375 380
Gln Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Glu Ser Ala Gly Phe Ser
385 390 395 400
Ile Asn Asp Ile Thr Ile Asn Asn Gln Lys Val Asn Tyr Val Trp Val
405 410 415
Ile Ala Gln Gln Leu Leu Val Gly Leu Ser Val Thr Val Lys Pro Leu
420 425 430
Ser Thr Ala Pro Gln Ala Phe Pro Cys Val Gln Asp Arg Val Ala Gly
435 440 445
Leu Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Leu Asp Leu Phe Tyr Gly
450 455 460
Gln Ser Pro Thr Asp Leu Pro Ala Trp Leu Ala Pro Gly Ser Ser Asn
465 470 475 480
Gln Phe Val Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Pro Thr Thr Thr Ala Gln
485 490 495
Asn Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Val Thr Ala Gln Val Thr
500 505 510
Gln Tyr Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asn Ser Gly
515 520 525
Gly Thr Gln Ala Tyr Ile Leu Thr Ile Thr Val Ser Pro Ser Ala Ala
530 535 540
Pro Gly Leu Val Ala Val Arg Ala Leu Asn Pro Gly Glu Asp Val Asn
545 550 555 560
Val Ser Ala Thr Asp His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val Pro
565 570 575
Gly Ala
<210> 30
<211> 534
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas putida
<400> 30
Met Ser Arg Ser Arg Leu Ser Leu Leu Ser Leu Leu Cys Gly Ile Leu
1 5 10 15
Leu Cys Leu Ser Thr Pro Gln Pro Ala Thr Ala Ala Thr Leu Ser Asp
20 25 30
Ala Asp Thr Cys Val Gln Lys Gln Leu Val Phe Asn Pro Ala Ser Gly
35 40 45
Gly Phe Leu Pro Val Asn Asn Phe Asn Ala Thr Ser Gln Ala Phe Met
50 55 60
Asn Cys Phe Gly Trp Gln Leu Phe Ile Ala Leu Asn Trp Pro Val Asn
65 70 75 80
Pro Gly Trp Pro Ala Thr Ala Ser Leu Ala Gly Glu Pro Asp Met Gln
85 90 95
Ser Thr Leu Ala Gln Phe Gly Val Pro Ser Thr Pro Gly Gln Pro Met
100 105 110
Ser Val Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Asn Asp Ile Phe
115 120 125
Leu Pro Gly Ala Pro Thr Pro Thr Gly Trp Gly Val Gln Thr Leu Val
130 135 140
Pro Ser Asp Cys Ser Thr Gln Gly Ser Leu Lys Thr Leu Lys Val Gly
145 150 155 160
Ala Arg Lys Phe Met Asn Ala Thr Ser Glu Gly Ala Ile Asn Ala Leu
165 170 175
His Gly Phe His Leu Ser Thr Gly Thr Leu Ala Ser Ile Pro Asp Pro
180 185 190
Val Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ala Gly Lys Leu
195 200 205
Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr Ile Val
210 215 220
Asp Lys Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Lys Val Ala Arg Asn
225 230 235 240
Leu Asp Gly Gln Thr Pro Glu Gly Leu Ser Leu Pro Ile Gly Glu Pro
245 250 255
Met Arg Ser Leu Pro Thr Ser Pro Val Pro Gln Glu Gln Leu Gly Ala
260 265 270
Ile Glu Leu Lys Ala Ala Trp Arg Val Leu Thr Gly Lys Pro Glu Leu
275 280 285
Phe Gly Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Lys Arg Pro Asp Thr
290 295 300
Leu Glu Cys Thr Gln Glu Val Val Gly Leu Val Gly Leu His Ile Ile
305 310 315 320
Asn Lys Thr Gln Ala Ser Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe Glu Gln
325 330 335
Val Asp Asn Val Pro Glu Pro Ala Gln Val Pro Pro Gln Gln Thr Pro
340 345 350
Pro Asn Gly Phe Ala Phe Asn Asn Pro Asp Cys Gly Asn Gly Pro Glu
355 360 365
Cys Thr Pro Asn Gln Ala Arg Ile Gln Cys Lys Gln Thr His Pro Asp
370 375 380
Lys Asp Cys Thr Asp Leu Phe Pro Arg Asp Gln Pro Val Gln Thr Thr
385 390 395 400
Arg Glu His Pro Val Pro Gly Asp Leu Gln Ala Leu Asn Ser Ala Val
405 410 415
Gln Ala Asn Phe Ala Gln His Ser Gln Gly Lys Ser Val Phe Gln Tyr
420 425 430
Tyr Lys Leu Val Asn Val Leu Trp Thr Leu Ala Pro Asn Pro Pro Ser
435 440 445
Pro Glu Pro Gly Ala Asn Ala Gln Val Pro Leu Ser Tyr Gly Pro Phe
450 455 460
Ile Ser Gln Gly Asn Val Pro Val Ala Asn Thr Thr Met Glu Thr Tyr
465 470 475 480
Val Gln Gly Asp Asn Cys Asn Gln Cys His Gln Tyr Ala Thr Ile Ala
485 490 495
Gly Ser Pro Ser Leu Ala Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Asn Ser Ala
500 505 510
Gly Ser Ala Ser Asn Lys Ser Leu Ile Lys Ser Val Lys Ala Phe Glu
515 520 525
Thr Leu Lys Asp Arg Pro
530
<210> 31
<211> 578
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas putida
<400> 31
Met Ser Thr Pro Phe Lys Gln Phe Thr Ser Pro Ala Gly Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asp Gln Leu Pro Gln Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asn Leu Thr Gly Trp Thr Glu Ser Ser Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Gly Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Val Glu Gly Phe Gly Asp Val Thr Pro Pro Ala Ile Thr
65 70 75 80
Trp Ala Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Thr Ala Val Ile Pro Gln Leu Gly Gly Lys Ala Met Thr Leu Asp Gln
100 105 110
Val Met Glu Leu Ala Asp His Gly Gln Ile Ser Leu Asp Asn Thr Val
115 120 125
Tyr Arg Leu Tyr Asp Pro Asn Lys Gln Gly Asn Leu Leu Gln Leu Pro
130 135 140
Ala Lys Arg Cys Pro Ser Ile Ala Trp Asn Gly Pro Tyr Lys Asp Phe
145 150 155 160
Ser Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser
165 170 175
Ile Val Arg Asp Gly Asn Gly Lys Met Arg Lys Ile Thr Phe Thr Cys
180 185 190
Glu Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Thr Met Trp Arg Ile Asp Pro Asn Ala
195 200 205
Val Leu Gly Leu Tyr Arg Glu Tyr Ile Asp Pro Asn Val Gln Leu Glu
210 215 220
Asp Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Glu Asp Gly Pro Thr Gly Lys Ala Gly
225 230 235 240
Glu Pro Val Ile Asp Pro Thr Thr Gly Lys Pro Ala Tyr Asp Thr Val
245 250 255
Asn Lys Trp Asn Ala Gly Thr Val Ser Val Pro Gly Gln Tyr Gly Gly
260 265 270
Ala Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Val Tyr
275 280 285
Leu Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Arg Pro Val Ser Ser Ser Gln Asn
290 295 300
Ala Gln Ser Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn
305 310 315 320
Ser Asp Pro His Ile Gly Phe Met Ala Asn Ser Thr Ala Val Asn Asn
325 330 335
Arg Leu Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Thr
340 345 350
Asp Phe Ser Thr Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Gln Tyr
355 360 365
Trp His Ile Thr Arg Gly Ala Ala Lys Ser Ala Ala Asn Gly Ser Asp
370 375 380
Gln Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Ile Pro Glu Ser Ala Gly Phe Ser
385 390 395 400
Ile Asn Glu Val Thr Ile Asn Lys Gln Pro Val Asn His Val Trp Val
405 410 415
Ile Ala Gln Gln Leu Leu Val Gly Leu Ser Val Thr Val Lys Pro Leu
420 425 430
Ala Ala Thr Pro Ala Ser Tyr Pro Cys Val Gln Asp Arg Val Ala Gly
435 440 445
Leu Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Leu Asp Leu Phe Tyr Gly
450 455 460
Asn Ser Pro Thr Asp Leu Pro Ala Trp Leu Ala Pro Gly Ser Ser Asn
465 470 475 480
Gln Phe Val Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Glu Asn Thr Thr Ala Glu
485 490 495
Asn Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Val Thr Ala Gln Val Thr
500 505 510
Gln Tyr Leu Pro Asp Ala Thr Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asn Thr Gly
515 520 525
Gly Thr Gln Ala Tyr Ile Leu Thr Ile Thr Val Ser Pro Thr Ala Ala
530 535 540
Pro Gly Leu Val Thr Val Arg Ala Leu Asn Pro Asp Glu Asp Ala Asn
545 550 555 560
Val Ser Ala Ala Asp His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val Pro
565 570 575
Gly Ala
<210> 32
<211> 534
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas putida
<400> 32
Met Ser Ser Leu Arg Leu Ser Leu Leu Ser Leu Leu Ser Gly Ile Leu
1 5 10 15
Leu Cys Leu Ser Ala Gln Gln Thr Ala Thr Ala Ala Thr Gln Ser Asp
20 25 30
Ala Asp Ser Cys Val Gln Gln Gln Leu Val Phe Asn Pro Ala Ser Gly
35 40 45
Gly Phe Leu Pro Val Asn Asn Phe Asn Ala Thr Ser Gln Ala Phe Met
50 55 60
Asn Cys Phe Ala Trp Gln Leu Phe Ile Ala Leu Asn Trp Pro Val Asn
65 70 75 80
Leu Gly Trp Pro Gly Thr Ala Ser Leu Ala Gly Glu Pro Asp Leu Asn
85 90 95
Ser Ser Leu Ala Gln Phe Gly Val Pro Ala Thr Pro Gly Gln Pro Met
100 105 110
Ser Val Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Asn Asp Ile Phe
115 120 125
Leu Pro Gly Ala Pro Thr Pro Ser Gly Trp Gly Val Gln Thr Leu Val
130 135 140
Pro Ala Asn Cys Ser Thr Gln Gly Ser Leu Lys Ala Leu Lys Val Gly
145 150 155 160
Ala Arg Lys Phe Met Asn Ala Thr Ser Lys Ser Ala Ile Asn Val Leu
165 170 175
His Gly Phe His Leu Ser Ser Gly Thr Leu Ala Ser Ser Pro Asp Pro
180 185 190
Phe Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ser Gly Asn Leu
195 200 205
Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr Ile Val
210 215 220
Asp Asn Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Lys Val Ala Gln Asn
225 230 235 240
Gln Asp Gly Lys Ser Pro Ala Gly Leu Ser Leu Pro Ala Gly Glu Pro
245 250 255
Met Arg Ser Leu Pro Ala Ala Pro Val Pro Gln Glu Gln Leu Gly Ala
260 265 270
Ile Glu Val Lys Ala Ala Trp Arg Val Leu Thr Gly Lys Pro Glu Leu
275 280 285
Phe Gly Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Lys Arg Pro Asp Thr
290 295 300
Leu Ala Cys Thr Gln Glu Val Val Gly Leu Val Gly Leu His Ile Ile
305 310 315 320
Asn Lys Thr Gln Ala Ser Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe Glu Gln
325 330 335
Val Asp Asn Val Pro Glu Pro Ala Gln Ala Pro Pro Gln Gln Thr Pro
340 345 350
Pro Asn Gly Phe Ala Phe Asn Asn Pro Asp Cys Gly Ser Gly Pro Glu
355 360 365
Cys Thr Pro Asn Gln Ala Arg Ile Gln Cys Lys Gln His His Pro Asp
370 375 380
Lys Asp Cys Thr Asp Arg Phe Pro Arg Asp Gln Pro Val Gln Thr Thr
385 390 395 400
Arg Glu His Pro Val Pro Gly Asp Leu Gln Ala Leu Asn Ser Ala Val
405 410 415
Gln Ala Asn Phe Ala Gln His Ser Gln Gly Gln Ser Val Phe Gln Tyr
420 425 430
Tyr Lys Leu Ile Asn Val Leu Trp Thr Leu Ala Pro Asn Pro Pro Ser
435 440 445
Pro Glu Pro Gly Ala Asn Ala Gln Val Pro Leu Ser Tyr Gly Pro Phe
450 455 460
Ile Ser Gln Gly Asn Val Pro Val Ala Asn Thr Thr Leu Glu Thr Tyr
465 470 475 480
Val Gln Gly Asp Asp Cys Asn Gln Cys His Gln Tyr Ala Thr Ile Ala
485 490 495
Gly Ser Pro Ser Leu Ala Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Asn Ser Ala
500 505 510
Asp Ser Ala Ser Asn Lys Ser Leu Ile Lys Ser Val Lys Ala Phe Glu
515 520 525
Thr Leu Lys Asp Leu Pro
530
<210> 33
<211> 578
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas monteilii
<400> 33
Met Ser Thr Pro Phe Asn Gln Phe Thr Ser Pro Ala Glu Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asn Gln Leu Pro Gln Phe Glu
20 25 30
Ser Asp Trp Asn Asn Tyr Leu Thr Gly Trp Thr Glu Ser Ser Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Ser Leu Tyr Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Val Glu Gly Phe Gly Asp Val Val Val Pro Ala Ile Thr
65 70 75 80
Trp Ala Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Ala Ala Val Ile Pro Gln Leu Gly Gly Lys Ala Met Thr Leu Gln Gln
100 105 110
Val Met Glu Leu Ala Asp Tyr Gly Gln Ile Thr Leu Asn Asp Thr Leu
115 120 125
Tyr Thr Leu Tyr Asp Pro Asp Asn Lys Gly Thr Leu Leu Gln Leu Pro
130 135 140
Ala Lys Arg Cys Pro Ser Ile Asp Trp Asn Gly Lys Tyr Thr Ala Phe
145 150 155 160
Ser Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser
165 170 175
Ile Val Arg Asp Ala Asn Gly Asn Met Arg Lys Ile Thr Phe Thr Cys
180 185 190
Glu Asn Pro Ala Tyr Tyr Leu Ala Met Trp Arg Ile Asp Pro Asn Ala
195 200 205
Val Leu Gly Leu Tyr Arg Glu Tyr Ile Asp Pro Asn Val Gln Leu Glu
210 215 220
Asp Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Val Asp Cys Pro Thr Gly Lys Ala Gly
225 230 235 240
Asp Pro Val Ile Asp Pro Thr Thr Gly Leu Pro Ala Tyr Asp Thr Val
245 250 255
Asn Lys Trp Asn Ala Gly Thr Ala Cys Val Pro Gly Gln Phe Gly Gly
260 265 270
Ala Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Val Tyr
275 280 285
Leu Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Arg Pro Val Thr Ser Ser Gln Asn
290 295 300
Ala Gln Ser Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn
305 310 315 320
Ser Asp Pro His Ile Gly Phe Met Ala Asn Ser Lys Ala Val Asn Asn
325 330 335
Arg Leu Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Thr
340 345 350
Asp Phe Ser Thr Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Gln Tyr
355 360 365
Trp Arg Val Thr Arg Gly Thr Ala Lys Ser Ala Ala Asn Gly Ser Asp
370 375 380
Gln Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Glu Ser Ala Gly Phe Ser
385 390 395 400
Ile Asn Glu Ile Thr Ile Asn Lys Gln Pro Val Asp Tyr Val Trp Val
405 410 415
Ile Ala Gln Gln Leu Leu Val Gly Leu Ser Val Ser Ala Leu Pro Pro
420 425 430
Ala Thr Thr Pro Pro Ser Phe Pro Cys Val Gln Asp Arg Val Thr Gly
435 440 445
Leu Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Leu Asp Leu Phe Tyr Gly
450 455 460
Gln Ser Pro Thr Asp Leu Pro Ala Cys Leu Ala Pro Gly Ser Ser Asn
465 470 475 480
Gln Phe Val Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Pro Asn Thr Thr Ala Gln
485 490 495
Ser Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Ile Ser Ala Gln Val Thr
500 505 510
Gln Phe Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asn Ala Gly
515 520 525
Gly Thr Gln Ala Tyr Ile Leu Thr Ile Thr Val Ser Pro Ser Ala Ala
530 535 540
Pro Gly Leu Val Thr Val Arg Ala Leu Asn Pro Gly Glu Asp Gly Asn
545 550 555 560
Val Ser Ala Ala Asp His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val Pro
565 570 575
Gly Ala
<210> 34
<211> 534
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas monteilii
<400> 34
Met Ser Arg Leu Arg Leu Ser Leu Leu Ser Leu Leu Ser Gly Met Leu
1 5 10 15
Leu Cys Leu Ser Thr Leu Pro Ala Ala Thr Ala Ala Pro Met Thr Glu
20 25 30
Ala Asp Ala Cys Val Gln Gln Gln Leu Val Phe Asn Pro Ala Ser Gly
35 40 45
Gly Phe Leu Pro Val Asn Asn Phe Asn Ala Ser Asn Gln Ala Phe Met
50 55 60
Asn Cys Phe Ala Trp Gln Leu Phe Ile Ala Leu Asn Trp Pro Val Asn
65 70 75 80
Pro Gly Trp Pro Ala Thr Ala Ser Leu Ala Gly Glu Pro Asp Met Asn
85 90 95
Ser Thr Leu Ala Gln Phe Gly Val Pro Ser Asp Pro Gly Gln Pro Met
100 105 110
Ser Val Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Asn Asp Ile Phe
115 120 125
Leu Pro Gly Ala Pro Lys Pro Ser Gly Trp Gly Val Gln Thr Leu Val
130 135 140
Pro Ser Gly Cys Gly Thr Gln Gly Ser Leu Lys Ala Leu Lys Val Gly
145 150 155 160
Ala Arg Lys Phe Met Asn Ala Thr Ser Glu Ser Ala Ile Asn Ala Val
165 170 175
His Gly Phe His Leu Ser Ser Gly Thr Leu Ala Ser Leu Pro Asp Ser
180 185 190
Ile Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ala Gly Asn Leu
195 200 205
Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr Ile Val
210 215 220
Gly Lys Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Lys Val Ala Gln Asn
225 230 235 240
Ala Asp Gly Thr Thr Pro Glu Gly Leu Ser Leu Pro Ile Gly Glu Pro
245 250 255
Met Arg Ser Leu Pro Pro Ser Pro Val Pro Gln Glu Gln Leu Gly Ala
260 265 270
Ile Glu Leu Lys Ala Ala Trp Arg Ile Leu Thr Gly Lys Pro Glu Leu
275 280 285
Phe Gly Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Lys Arg Pro Asp Thr
290 295 300
Leu Thr Cys Thr Gln Glu Val Val Gly Leu Val Gly Leu His Ile Ile
305 310 315 320
Asn Lys Thr Gln Ala Ser Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe Glu Gln
325 330 335
Val Asp Asn Val Pro Glu Pro Gly Gln Val Pro Pro Gln Gln Thr Pro
340 345 350
Pro Asn Gly Phe Ala Phe Asn Asn Pro Asp Cys Gly Ser Gly Pro Glu
355 360 365
Cys Glu Pro Asn Gln Pro Arg Ile Gln Cys Lys Gln His His Pro Asp
370 375 380
Arg Asp Cys Thr Asp Leu Phe Pro Arg Asp Gln Pro Val Gln Thr Thr
385 390 395 400
Arg Glu His Pro Val Pro Ser Asp Leu Gln Ala Leu Asn Gly Ala Val
405 410 415
Gln Ala Thr Phe Ala Gln His Ser Gln Gly Lys Ser Val Phe Gln Tyr
420 425 430
Tyr Lys Leu Ile Asn Val Leu Trp Thr Leu Ala Pro Asn Pro Pro Ser
435 440 445
Pro Glu Pro Gly Ala Asn Ala Pro Val Pro Leu Ser Tyr Gly Ala Tyr
450 455 460
Ile Ser Gln Gly Asn Val Pro Val Ala Asn Thr Thr Leu Glu Thr Tyr
465 470 475 480
Val Gln Gly Asp Asp Cys Asn Gln Cys His Gln Tyr Ala Thr Ile Ala
485 490 495
Gly Ser Ser Ser Leu Ala Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Asn Ser Ala
500 505 510
Ser Ser Ala Ser Lys His Ser Leu Ile Lys Arg Val Gln Ala Phe Glu
515 520 525
Thr Leu Lys Asp Arg Arg
530
<210> 35
<211> 577
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas poae
<400> 35
Met Ser Thr Pro Phe Thr Gln Phe Thr Ser Pro Ala Glu Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asp Gln Leu Pro Ala Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asn Val Thr Gly Trp Thr Gln Met Ser Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Asn Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Glu Ser Gly Tyr Gly Thr Leu Thr Pro Lys Thr Ile Thr
65 70 75 80
Trp Gln Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Glu Gly
85 90 95
Ala Ala Val Val Pro Gln Leu Gly Gly Lys Ala Met Thr Leu Asp Gln
100 105 110
Val Met Gln Leu Thr Asp His Gly Gln Ile Thr Leu Asn Asp Thr Leu
115 120 125
Tyr Ser Leu Tyr Pro Asp Pro Lys Ala Thr Gln Leu Gln Ile Pro Ser
130 135 140
Val Leu Cys Lys Ser Ile Asn Trp Asn Gly Pro Tyr Ala Asp Phe Ser
145 150 155 160
Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser Ile
165 170 175
Thr Arg Asp Pro Asp Gly Asn Met Arg Ser Ile Met Phe Thr Ser Glu
180 185 190
Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Thr Met Trp Asn Ile Asp Pro Gly Ala Val
195 200 205
Leu Gly Leu Tyr Gln Ala Tyr Val Asp Pro Gln Val Lys Leu Glu Asp
210 215 220
Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Ala Asp Gly Pro Thr Gly Lys Ala Gly Glu
225 230 235 240
Pro Val Leu Asp Pro Thr Thr Gly Gln Pro Ala Tyr Asp Thr Val Asn
245 250 255
Lys Trp Asn Ser Gly Thr Val Arg Ile Pro Gly Val Ser Gly Gly Ala
260 265 270
Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Ile Tyr Leu
275 280 285
Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Arg Pro Leu Thr Ser Ser Gln Asn Gln
290 295 300
Gln Ser Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn Ser
305 310 315 320
Asp Pro His Ile Gly Phe Ser Ala Asn Gln Ala Ala Val Asn Asn Leu
325 330 335
Ile Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Lys Ser
340 345 350
Phe Ser Thr Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Ser Tyr Trp
355 360 365
Arg Val Thr Arg Gly Thr Ala Gly Thr Gly Pro Asn Asn Ser Asp Gln
370 375 380
Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Ala Ser Ala Gly Phe Ser Ile
385 390 395 400
Asn Glu Ile Thr Ile Asn Gly Thr Pro Ile Asp Tyr Val Trp Val Ile
405 410 415
Ala Asn Glu Leu Asn Val Ala Leu Ser Val Thr Pro Ala Pro Leu Thr
420 425 430
Ala Gln Pro Lys Glu Cys Ala Cys Val Ala Ala Asn Thr Thr Asp Ala
435 440 445
Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Ile Asp Leu Phe Tyr Gly Gln
450 455 460
Ser Pro Ser Asp Leu Pro Ala Ser Phe Ala Pro Gly Ser Ser Gly Gln
465 470 475 480
Phe Val Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Pro Asn Thr Thr Ala Ala Asp
485 490 495
Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Ile Thr Ala Gln Val Thr Gln
500 505 510
Phe Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asp Gly Gly Gly
515 520 525
Thr Gln Gly Tyr Ile Met Thr Ile Thr Val Ser Ser Asn Ala Ala Pro
530 535 540
Gly Leu Val Ser Val Arg Ala Leu Asn Pro Ser Glu Ala Ala Asn Pro
545 550 555 560
Ser Ala Ser Glu His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val Pro Ser
565 570 575
Ala
<210> 36
<211> 529
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas poae
<400> 36
Met Asn Gly Trp Leu Arg Pro Leu Arg Arg Ala Arg Leu Arg Ile Ala
1 5 10 15
Cys Ala Ile Thr Cys Thr Leu Leu Pro Leu Leu Ala Ala Thr Pro Ala
20 25 30
Asn Ala Ala Ser Asp Ala Gln Ser Cys Val Ser Gln Leu Val Phe Asp
35 40 45
Pro Thr Ser Gly Gly Phe Leu Pro Val Asn Asn Phe Gly Thr Glu Gln
50 55 60
Ala Phe Leu Asn Cys Phe Gly Trp Gln Leu Phe Ile Ala Met Asn Trp
65 70 75 80
Pro Val Asn Pro Gly Trp Pro Ala Asn Pro Ser Leu Ala Gly Glu Pro
85 90 95
Asp Thr Gln Ser Ser Ala Ala Gln Phe Gly Val Pro Pro Thr Pro Gly
100 105 110
Gln Pro Met Ser Asn Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Ser
115 120 125
Glu Ile Phe Leu Pro Gly Ala Ala Lys Pro Ser Gly Trp Gly Val Glu
130 135 140
Thr Leu Val Pro Ser Asn Cys Thr Ala Thr Gly Asn Leu Lys Ala Phe
145 150 155 160
Ala Thr Gly Ala Arg Lys Phe Ile Thr Ala Thr Ser Glu Ser Ala Ile
165 170 175
Asn Arg Lys His Arg Phe His Leu Ser Ser Gly Thr Gln Val Thr Leu
180 185 190
Pro Asp Ser Ile Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ser
195 200 205
Gly Asn Leu Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp
210 215 220
Tyr Ile Val Asp Asn Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Ile Val
225 230 235 240
Ala Gln Asn Ser Asp Asn Arg His Pro Ala Gly Leu Ser Leu Pro Ala
245 250 255
Gly Lys Pro Val Arg Glu Leu Pro Ala Lys Ala Leu Pro Gln Glu Glu
260 265 270
Leu Gly Ala Leu Glu Leu Lys Ala Ala Trp Arg Val Leu Thr Asn Lys
275 280 285
Pro Asp Leu Tyr Gly Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Gln Arg
290 295 300
Pro Asp Thr Leu Gln Cys Thr Gln Glu Val Ile Gly Leu Val Gly Leu
305 310 315 320
His Ile Ile Asn Lys Thr Gln Thr Gln Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr
325 330 335
Phe Glu Gln Ile Asp Asn Val Pro Asp Gly Gly Ala Ala Pro Pro Gln
340 345 350
Gly Tyr Ser Phe Asn Asn Pro Glu Cys Thr Gly Asp Ala Cys Ala Pro
355 360 365
Asn Val Ala Arg Val Gln Cys Asp Ala Thr His Thr Pro Pro Asp Cys
370 375 380
Thr Pro Leu Asp Gln Pro Val Gln Ala Thr Arg Leu Asn Ala Thr Pro
385 390 395 400
Gln Asp Met Gln Ala Leu Asn Thr Ala Val Gln Gln Thr Phe Ala Gln
405 410 415
Gln Thr Gln Gly Gln Ser Val Phe Gln Tyr Tyr Lys Leu Val Asn Val
420 425 430
Leu Trp Ser Lys Thr Pro Asn Ala Pro Asn Asp Pro Gly Pro Gly Pro
435 440 445
Asn Val Lys Val Pro Leu Ser Tyr Gly Pro Phe Val Ser Asp Gln Ser
450 455 460
Val Val Val Ala Asn Thr Thr Met Glu Thr Tyr Val Gln Thr Asp Asn
465 470 475 480
Cys Asn Asp Cys His Gln Tyr Ala Ala Ile Ala Gly Lys Ser Gly Leu
485 490 495
Ala Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Gly Asn Ala Asp Ser Ala Lys Asn
500 505 510
Thr Arg Leu Ile Lys Arg Ile Glu Ser Phe Lys Thr Leu Lys Asp Asn
515 520 525
Pro
<210> 37
<211> 577
<212> БЕЛОК
<213> Неустановленное
<220>
<223> Микробные сообщества лубоеда сосны горной
<400> 37
Met Ser Thr Pro Phe Thr Gln Phe Thr Ser Pro Ala Glu Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asn Gln Leu Pro Thr Phe Glu
20 25 30
Thr Asn Trp Asn Asn Asn Val Thr Gly Trp Thr Gln Met Ser Val Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Asn Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Glu Ser Gly Tyr Gly Thr Gln Thr Pro Val Thr Ile Thr
65 70 75 80
Trp Gln Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Ala Ala Val Val Pro Gln Leu Gly Gly Lys Ala Met Thr Leu Asp Gln
100 105 110
Val Met Gln Leu Thr Asp His Gly Gln Ile Thr Leu Asn Asn Thr Leu
115 120 125
Tyr Ser Leu Tyr Pro Asp Pro Lys Ala Thr Gln Leu Gln Ile Pro Ser
130 135 140
Val Leu Cys Lys Ser Ile Asn Trp Asn Gly Pro Tyr Ala Asp Phe Ser
145 150 155 160
Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser Ile
165 170 175
Thr Arg Asp Pro Asp Gly Asn Met Arg Ser Ile Met Phe Thr Ser Glu
180 185 190
Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Thr Met Trp Asn Ile Asp Pro Gln Ala Val
195 200 205
Leu Gly Leu Tyr Lys Ala Tyr Val Asp Pro Gln Val Lys Ile Glu Asp
210 215 220
Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Ala Asn Gly Pro Thr Gly Gln Ala Gly Glu
225 230 235 240
Pro Val Leu Asp Pro Thr Thr Gly Gln Pro Ala Tyr Asp Thr Val Asn
245 250 255
Lys Trp Asn Ser Gly Thr Val Arg Ile Pro Gly Val Ser Gly Gly Ala
260 265 270
Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Ile Tyr Leu
275 280 285
Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Arg Pro Leu Asn Ser Ser Arg Asn Gln
290 295 300
Gln Ser Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn Ser
305 310 315 320
Asp Pro His Ile Gly Phe Ser Ala Asn Gln Ala Ala Val Asn Asn Leu
325 330 335
Ile Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Lys Ser
340 345 350
Phe Ser Thr Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Ser Tyr Trp
355 360 365
Arg Val Thr Arg Gly Thr Ala Gly Thr Gly Pro Asn Asn Ser Asp Gln
370 375 380
Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Gln Ser Ala Gly Phe Ser Ile
385 390 395 400
Asn Asp Ile Thr Ile Asn Gly Thr Pro Ile Asp Tyr Val Trp Val Ile
405 410 415
Ala Asn Glu Leu Asn Val Ala Leu Ser Val Thr Pro Ala Pro Leu Pro
420 425 430
Ala Pro Pro Lys Glu Cys Asp Cys Val Ala Ala Asn Asn Thr Asp Ala
435 440 445
Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Ile Asp Leu Phe Tyr Gly Gln
450 455 460
Ser Pro Ser Asp Leu Pro Ala Ser Phe Ala Pro Gly Ser Ser Gly Gln
465 470 475 480
Phe Val Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Pro Asn Thr Thr Ala Ala Asp
485 490 495
Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Ile Thr Ala Gln Val Thr Gln
500 505 510
Phe Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asp Ser Gly Gly
515 520 525
Thr Gln Gly Tyr Ile Met Thr Val Thr Val Ser Ser Asn Ala Ala Pro
530 535 540
Gly Leu Val Ser Val Arg Ala Leu Asn Pro Ser Glu Gly Ala Asn Pro
545 550 555 560
Ser Ala Thr Gln His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val Pro Asp
565 570 575
Ala
<210> 38
<211> 529
<212> БЕЛОК
<213> Неустановленное
<220>
<223> Микробные сообщества лубоеда сосны горной
<400> 38
Met Asn Gly Trp Leu Arg Pro Leu Arg Arg Ala Arg Leu Arg Val Phe
1 5 10 15
Cys Trp Ile Thr Cys Ala Leu Leu Pro Leu Leu Ala Pro Ser Pro Ala
20 25 30
Asn Ala Ala Thr Asp Ala Gln Ser Cys Val Ser Gln Leu Val Phe Asp
35 40 45
Pro Thr Ser Gly Gly Phe Leu Pro Val Asn Asn Phe Gly Thr Glu Gln
50 55 60
Asp Phe Leu Asn Cys Phe Gly Trp Gln Leu Phe Ile Ala Met Asn Trp
65 70 75 80
Pro Val Asn Pro Gly Trp Pro Ala Asn Ala Ser Leu Ala Gly Glu Pro
85 90 95
Asp Thr Gln Ser Ser Val Ala Gln Phe Gly Val Pro Ala Thr Pro Gly
100 105 110
Gln Pro Met Ser Asn Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Ser
115 120 125
Glu Ile Phe Leu Pro Gly Ala Pro Lys Pro Ser Gly Trp Gly Leu Glu
130 135 140
Thr Leu Val Pro Ser Asn Cys Thr Ala Ser Gly Asn Leu Lys Ala Tyr
145 150 155 160
Ala Thr Gly Ala Arg Lys Phe Ile Thr Ala Thr Ser Glu Ser Ala Ile
165 170 175
Asn Arg Lys His Arg Phe His Leu Ser Ser Gly Thr Gln Val Thr Leu
180 185 190
Pro Asp Ser Ile Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ser
195 200 205
Gly Asn Leu Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp
210 215 220
Tyr Ile Val Asp Asn Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Ile Val
225 230 235 240
Ala Gln Asn Ser Asp Asn Arg His Pro Ala Gly Leu Ser Leu Pro Ala
245 250 255
Gly Lys Leu Val Arg Glu Leu Pro Ala Gln Ala Leu Pro Gln Glu Glu
260 265 270
Leu Gly Ala Leu Glu Leu Lys Ala Ala Trp Arg Val Leu Thr Asn Lys
275 280 285
Pro Glu Leu Tyr Gly Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Gln Arg
290 295 300
Pro Asp Thr Leu Gln Cys Thr Gln Glu Val Val Gly Leu Val Gly Leu
305 310 315 320
His Ile Ile Asn Lys Thr Gln Thr Gln Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr
325 330 335
Phe Glu Gln Val Asp Asn Val Pro Asp Ala Gly Pro Thr Pro Pro Gln
340 345 350
Gly Tyr Ser Phe Asn Asn Pro Ala Cys Ser Gly Thr Ala Cys Thr Pro
355 360 365
Asn Val Ala Arg Val Gln Cys Asp Ala Thr His Ala Pro Pro Asn Cys
370 375 380
Thr Pro Leu Asp Gln Pro Val Gln Ala Thr Arg Val Asn Ala Thr Pro
385 390 395 400
Gln Asp Leu Gln Ala Leu Asn Thr Ala Val Gln Gln Thr Phe Ala Gln
405 410 415
Lys Thr Gln Gly Gln Ser Val Phe Gln Tyr Tyr Lys Leu Val Asn Val
420 425 430
Leu Trp Ser Lys Thr Pro Asn Ala Pro Asn Asp Pro Gly Pro Gly Pro
435 440 445
Asn Val Lys Thr Pro Leu Ser Tyr Gly Pro Phe Val Ser Asp Gln Ser
450 455 460
Val Val Val Ala Asn Thr Thr Met Glu Thr Tyr Val Gln Ala Asp Asn
465 470 475 480
Cys Asn Asp Cys His Gln Tyr Ala Ala Ile Ala Gly Lys Ser Gly Leu
485 490 495
Ala Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Gly Asn Ala Asp Ser Ala Lys Asn
500 505 510
Thr Arg Leu Ile Lys Arg Ile Glu Gly Phe Lys Thr Leu Lys Asp Asp
515 520 525
Gln
<210> 39
<211> 577
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas trivialis
<400> 39
Met Ser Thr Pro Phe Thr Gln Phe Thr Ser Pro Ala Glu Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asp Gln Leu Ser Thr Phe Glu
20 25 30
Thr Asn Trp Asn Asn Asn Val Thr Gly Trp Thr Gln Met Ser Val Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Asn Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Glu Ser Gly Tyr Gly Thr Gln Thr Pro Leu Thr Ile Thr
65 70 75 80
Trp Gln Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Ala Ala Val Val Pro Gln Leu Gly Gly Thr Ala Met Thr Leu Asp Gln
100 105 110
Val Met Gln Leu Thr Asp His Gly Gln Ile Thr Leu Asn Asn Thr Leu
115 120 125
Tyr Ser Leu Tyr Pro Asp Pro Ala Ala Thr Gln Leu Gln Ile Pro Lys
130 135 140
Val Leu Cys Lys Ser Ile Asn Trp His Gly Pro Tyr Ala Asp Phe Ser
145 150 155 160
Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser Ile
165 170 175
Thr Arg Asp Pro Asp Gly Asn Met Arg Ser Ile Met Phe Thr Ser Glu
180 185 190
Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Thr Met Trp Asn Ile Asp Pro Asn Ala Val
195 200 205
Leu Gly Leu Tyr Gln Ala Tyr Val Asp Pro Gln Val Lys Leu Glu Asp
210 215 220
Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Ala Asn Gly Pro Thr Gly Asn Ala Gly Asp
225 230 235 240
Pro Val Ile Asp Glu Thr Thr Gly Arg Pro Ala Tyr Asp Thr Val Asn
245 250 255
Lys Trp Asn Ala Gly Thr Val Arg Ile Pro Gly Val Ser Gly Gly Ala
260 265 270
Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Ile Tyr Leu
275 280 285
Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Arg Pro Ile Gln Ser Ser Gly Asn Gln
290 295 300
Gln Asn Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn Ser
305 310 315 320
Asp Pro His Ile Gly Phe Ser Ala Asn Gln Ala Ala Val Lys Asn Leu
325 330 335
Ile Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Lys Ser
340 345 350
Phe Ser Thr Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Ser Tyr Trp
355 360 365
Arg Val Thr Arg Gly Thr Ala Gly Thr Gly Pro Asn Asn Ser Asp Gln
370 375 380
Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Gln Ser Ala Gly Phe Ser Ile
385 390 395 400
Asn Asp Ile Thr Ile Asn Gly Thr Pro Ile Asp Tyr Val Trp Val Ile
405 410 415
Ala Asn Glu Leu Asn Val Ala Leu Ser Val Thr Pro Ala Pro Leu Thr
420 425 430
Ala Thr Pro Lys Glu Cys Asp Cys Val Ala Ala Asn Asn Thr Asp Ala
435 440 445
Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Leu Asp Leu Phe Tyr Gly Gln
450 455 460
Ser Pro Ser Asp Leu Pro Ala Ser Phe Ala Pro Gly Ser Ser Ala Gln
465 470 475 480
Phe Val Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Pro Asn Thr Thr Val Ala Asp
485 490 495
Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Ile Ser Ala Gln Val Thr Gln
500 505 510
Phe Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asp Ser Gly Gly
515 520 525
Thr Gln Gly Tyr Val Met Thr Val Asn Val Ser Gly Asn Ala Ala Pro
530 535 540
Gly Leu Val Ser Val Arg Ala Leu Asn Pro Ser Glu Ala Ala Asn Pro
545 550 555 560
Ser Ala Ala Gln His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val Pro Gly
565 570 575
Ala
<210> 40
<211> 528
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas trivialis
<400> 40
Met Tyr Gly Trp Pro Arg Pro Leu Cys Arg Ala Arg Leu Asn Val Phe
1 5 10 15
Ser Leu Leu Ala Gly Ala Leu Leu Ser Leu Val Ala Pro Pro Pro Ala
20 25 30
Ser Ala Ser Asp Ala Gln Thr Cys Val Gln Gln Leu Val Phe Asp Pro
35 40 45
Ala Ser Gly Gly Phe Leu Pro Val Asn Asn Phe Gly Thr Glu Gln Asp
50 55 60
Phe Leu Asn Cys Phe Gly Trp Gln Leu Phe Ile Ala Met Asn Trp Pro
65 70 75 80
Val Asn Pro Gly Trp Pro Ala Asp Pro Thr Leu Ala Gly Glu Pro Asp
85 90 95
Thr Gln Ser Ser Ala Ala Gln Phe Gly Val Pro Gln Thr Pro Gly Lys
100 105 110
Pro Met Ser Asn Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Asn Asp
115 120 125
Ile Phe Leu Pro Gly Ala Pro Lys Pro Thr Gly Trp Gly Val Glu Thr
130 135 140
Leu Val Pro Ser Asn Cys Thr Ala Thr Gly Asn Leu Lys Ala Leu Ser
145 150 155 160
Thr Gly Ala Arg Lys Phe Ile Thr Ala Thr Ser Glu Ser Ala Ile Asn
165 170 175
Arg Lys His Arg Phe His Leu Ser Ser Gly Thr Gln Val Thr Leu Pro
180 185 190
Asp Ser Ile Met Glu Ala Ala Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ser Gly
195 200 205
Asn Leu Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr
210 215 220
Ile Val Asn Asn Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Ile Val Ala
225 230 235 240
Gln Asn Ser Asp Asn Arg His Pro Ala Gly Leu Ser Leu Pro Ala Gly
245 250 255
Lys Leu Val Arg Glu Leu Pro Ala Lys Ala Leu Pro Gln Glu Glu Leu
260 265 270
Gly Ala Leu Glu Leu Lys Ala Ala Trp Arg Val Leu Thr His Lys Pro
275 280 285
Glu Leu Tyr Ala Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Gln Arg Pro
290 295 300
Asp Thr Leu Gln Cys Thr Gln Glu Val Val Gly Leu Val Gly Leu His
305 310 315 320
Ile Ile Asn Lys Thr Gln Thr Gln Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe
325 330 335
Glu Gln Val Asp Asn Val Pro Asp Gly Gly Ala Thr Pro Pro Gln Gly
340 345 350
Tyr Ser Phe Asn Asn Pro Ala Cys Thr Gly Asp Ala Cys Thr Pro Asn
355 360 365
Val Ala Arg Val Gln Cys Asp Ala Thr His Thr Pro Pro Asn Cys Thr
370 375 380
Pro Phe Asn Gln Pro Val Gln Ala Thr Arg Ala Asn Ala Thr Pro Glu
385 390 395 400
Asp Met Gln Ala Leu Asn Thr Ala Val Gln Gln Thr Phe Ala Gln Gln
405 410 415
Thr Gln Gly Gln Ser Val Phe Gln Tyr Tyr Lys Leu Val Asn Val Leu
420 425 430
Trp Ser Lys Thr Pro Asn Ala Pro Asn Asp Pro Gly Pro Gly Pro Asn
435 440 445
Val Lys Thr Pro Leu Ser Tyr Gly Pro Phe Val Ser Asp Gln Ser Val
450 455 460
Ala Val Ala Asn Thr Thr Leu Glu Thr Tyr Val Gln Thr Glu Asn Cys
465 470 475 480
Asn Asp Cys His Gln Tyr Ala Ala Ile Ala Gly Gly Ser Lys Leu Ala
485 490 495
Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Gly Ser Ala Asp Ser Ala Lys Asn Thr
500 505 510
Arg Leu Ile Lys Arg Ile Glu Ala Phe Lys Thr Leu Lys Asp Asp His
515 520 525
<210> 41
<211> 577
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas sp. R81
<400> 41
Met Ser Thr Pro Phe Thr Gln Phe Thr Ser Pro Ala Glu Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asn Gln Leu Pro Thr Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asn Val Thr Gly Trp Thr Gln Met Ser Val Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Asn Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Asp Ser Gly Tyr Gly Thr Gln Thr Pro Val Thr Ile Thr
65 70 75 80
Trp Gln Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asp Gly
85 90 95
Ala Ala Val Val Pro Gln Leu Gly Gly Lys Ala Met Thr Leu Asp Gln
100 105 110
Val Met Gln Leu Thr Asp His Gly Gln Ile Thr Leu Asn Asn Thr Leu
115 120 125
Tyr Ser Leu Tyr Pro Asp Pro Lys Ala Thr Gln Leu Gln Ile Pro Ser
130 135 140
Val Leu Cys Lys Ser Ile Asn Trp Asn Gly Pro Tyr Ala Asp Phe Ser
145 150 155 160
Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser Ile
165 170 175
Thr Arg Asp Pro Asp Gly Asn Met Arg Ser Ile Met Phe Thr Ser Glu
180 185 190
Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Thr Met Trp Asn Ile Asp Pro Gln Ala Val
195 200 205
Leu Gly Leu Tyr Lys Ala Tyr Val Asp Pro Gln Val Lys Ile Glu Asp
210 215 220
Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Ala Asn Gly Pro Thr Gly Lys Ala Gly Glu
225 230 235 240
Pro Val Leu Asp Pro Thr Thr Gly Gln Pro Ala Tyr Asp Thr Val Asn
245 250 255
Lys Trp Asn Ser Gly Thr Val Arg Ile Pro Gly Val Ser Gly Gly Ala
260 265 270
Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Ile Tyr Leu
275 280 285
Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Arg Pro Ile Lys Ser Ser Ala Asn Gln
290 295 300
Gln Ser Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn Ser
305 310 315 320
Asp Pro His Ile Gly Phe Ser Ala Asn Gln Glu Ala Val Lys Ala Leu
325 330 335
Ile Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Lys Ser
340 345 350
Phe Ser Thr Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Ser Tyr Trp
355 360 365
His Val Thr Arg Gly Thr Ala Gly Thr Gly Pro Asn Lys Ser Asp Gln
370 375 380
Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Gln Ser Ala Gly Phe Ser Ile
385 390 395 400
Asn Glu Ile Thr Ile Asn Gly Thr Pro Ile Asp Tyr Val Trp Val Ile
405 410 415
Ala Asn Glu Leu Ser Val Ala Leu Ser Val Thr Pro Ala Pro Leu Thr
420 425 430
Ala Thr Pro Glu Glu Cys Asp Cys Val Ala Ala Asn Thr Thr Asp Ala
435 440 445
Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Ile Asp Leu Phe Tyr Gly Gln
450 455 460
Ser Pro Ser Asp Leu Pro Ala Ser Phe Ala Pro Gly Ser Ser Gly Gln
465 470 475 480
Phe Val Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Pro Asn Thr Thr Ala Ala Asp
485 490 495
Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Ile Thr Ala Gln Val Thr Glu
500 505 510
Phe Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asp Ser Gly Gly
515 520 525
Thr Gln Gly Tyr Ile Met Thr Val Thr Val Ser Ser Asn Ala Val Pro
530 535 540
Gly Leu Val Ser Val Arg Ala Leu Asn Pro Ser Glu Ala Ala Asn Pro
545 550 555 560
Ser Ala Thr Gln His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val Pro Gly
565 570 575
Val
<210> 42
<211> 528
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas sp. R81
<400> 42
Met Asn Lys Trp Leu Arg Pro Leu Arg Arg Ala Arg Leu Ser Val Leu
1 5 10 15
Cys Trp Ile Pro Cys Ala Leu Leu Pro Leu Ala Pro Ala Pro Ala Ile
20 25 30
Ala Ala Ser Asp Ala Gln Ser Cys Val Ser Gln Leu Val Phe Asp Pro
35 40 45
Thr Ser Gly Gly Phe Leu Pro Val Asn Asn Phe Gly Thr Glu Gln Asp
50 55 60
Phe Leu Asn Cys Phe Gly Trp Gln Leu Phe Ile Ala Met Asn Trp Pro
65 70 75 80
Val Asn Pro Gly Trp Pro Ala Asp Pro Ser Leu Ala Gly Glu Pro Asp
85 90 95
Thr Gln Ser Thr Ala Ala Gln Phe Gly Val Pro Pro Thr Ser Gly Gln
100 105 110
Pro Met Gly Asn Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Ser Glu
115 120 125
Ile Phe Leu Pro Gly Ala Pro Lys Pro Ser Gly Trp Gly Val Glu Thr
130 135 140
Leu Val Pro Ser Asn Cys Thr Ala Thr Gly Asn Leu Lys Ala Phe Ala
145 150 155 160
Thr Gly Ala Arg Lys Phe Met Ala Ala Thr Ser Glu Ser Ala Ile Asn
165 170 175
Arg Lys His Arg Phe His Leu Ser Ser Gly Thr Gln Val Thr Leu Pro
180 185 190
Asp Ser Ile Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ser Gly
195 200 205
Asn Leu Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr
210 215 220
Ile Val Asp Asn Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Ile Val Ala
225 230 235 240
Gln Asn Ser Asp Asn Arg His Pro Ala Gly Leu Ser Leu Pro Ala Gly
245 250 255
Lys Leu Val Arg Glu Leu Pro Ala Lys Ala Leu Pro Gln Glu Glu Leu
260 265 270
Gly Ala Leu Glu Leu Lys Ala Ala Trp Arg Val Leu Thr Asn Lys Pro
275 280 285
Gln Leu Tyr Gly Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Gln Arg Pro
290 295 300
Asp Thr Leu Gln Cys Thr Gln Glu Val Val Gly Leu Val Gly Leu His
305 310 315 320
Ile Ile Asn Lys Thr Gln Thr Gln Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe
325 330 335
Glu Gln Val Asp Asn Val Pro Asp Asn Gly Thr Ala Ala Pro Glu Gly
340 345 350
Tyr Ser Phe Asn Asn Pro Thr Cys Thr Gly Asp Ala Cys Thr Pro Asn
355 360 365
Val Ala Arg Val Gln Cys Asp Ala Thr His Thr Pro Pro Asp Cys Thr
370 375 380
Pro Leu Asp Gln Pro Val Gln Ala Thr Arg Val Asn Ala Thr Pro Gln
385 390 395 400
Asp Leu Gln Met Leu Asn Thr Ala Val Gln Gln Thr Phe Ala Gln Lys
405 410 415
Thr Gln Gly Gln Ser Val Phe Gln Tyr Tyr Lys Leu Val Asn Val Leu
420 425 430
Trp Ser Lys Thr Pro Asn Ala Pro Asn Asp Pro Gly Pro Gly Pro Asn
435 440 445
Val Lys Val Pro Leu Ser Tyr Gly Pro Phe Val Ser Asp Gln Ser Val
450 455 460
Val Val Ala Asn Thr Thr Leu Glu Thr Tyr Val Gln Asn Lys Asn Cys
465 470 475 480
Asn Asp Cys His Gln Tyr Ala Ala Ile Ala Gly Thr Ser Gln Leu Thr
485 490 495
Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Gly Asn Ala Asp Ser Ala Lys Asn Ala
500 505 510
Arg Leu Ile Lys Arg Ile Glu Ala Phe Lys Thr Leu Lys Asp Ser Pro
515 520 525
<210> 43
<211> 577
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas libanensis
<400> 43
Met Ser Thr Pro Phe Thr Gln Phe Thr Ser Pro Ala Glu Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asn Gln Leu Pro Thr Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asn Val Thr Gly Trp Thr Gln Met Ser Val Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Asn Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Ile Glu Ser Gly Tyr Gly Thr Gln Thr Pro Val Thr Ile Thr
65 70 75 80
Trp Gln Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Ala Ala Val Val Pro Gln Leu Gly Gly Lys Ala Met Thr Leu Asp Gln
100 105 110
Val Met Gln Leu Thr Asp His Gly Gln Ile Thr Leu Asn Asn Thr Leu
115 120 125
Tyr Ser Leu Tyr Pro Asp Pro Lys Ala Thr Gln Leu Gln Ile Pro Ser
130 135 140
Val Leu Cys Lys Ser Ile Asn Trp Asn Gly Pro Tyr Ala Asp Phe Ser
145 150 155 160
Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser Ile
165 170 175
Thr Arg Asp Pro Asp Gly Asn Met Arg Ser Ile Met Phe Thr Ser Glu
180 185 190
Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Thr Met Trp Asn Ile Asp Pro Gln Ala Val
195 200 205
Leu Gly Leu Tyr Lys Ala Tyr Val Asp Pro Gln Val Lys Ile Glu Asp
210 215 220
Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Ala Asn Gly Pro Thr Gly Lys Ala Gly Asp
225 230 235 240
Pro Val Leu Asp Pro Thr Thr Gly Gln Pro Ala Tyr Asp Thr Val Asn
245 250 255
Lys Trp Asn Ser Gly Thr Val Arg Ile Pro Gly Val Ser Gly Gly Ala
260 265 270
Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Ile Tyr Leu
275 280 285
Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Arg Pro Leu Asn Ser Ser Arg Asn Gln
290 295 300
Gln Ser Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn Ser
305 310 315 320
Asp Pro His Ile Gly Tyr Ser Ala Asn Gln Glu Ala Val Lys Ala Leu
325 330 335
Ile Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Lys Ser
340 345 350
Phe Ser Thr Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Ser Tyr Trp
355 360 365
Arg Ile Thr Arg Gly Thr Ala Gly Thr Gly Pro Asn Asn Ser Asp Gln
370 375 380
Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Ala Ser Ala Gly Phe Ser Ile
385 390 395 400
Asn Asp Ile Thr Ile Asn Gly Thr Pro Ile Asp Tyr Val Trp Val Ile
405 410 415
Ala Asn Glu Leu Asn Val Ala Leu Ser Val Thr Pro Ala Pro Leu Ser
420 425 430
Gly Thr Pro Lys Glu Cys Asp Cys Val Ala Ala Asn Asn Thr Asp Ala
435 440 445
Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Ile Asp Leu Phe Tyr Gly Gln
450 455 460
Ser Pro Ser Asp Leu Pro Ala Ser Phe Ala Pro Gly Ser Ser Gly Gln
465 470 475 480
Phe Val Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Pro Asn Thr Thr Ala Ala Asp
485 490 495
Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Ile Thr Ala Gln Val Thr Gln
500 505 510
Phe Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asp Ser Gly Gly
515 520 525
Thr Gln Gly Tyr Ile Met Thr Val Thr Val Ser Ser Asn Ala Ala Pro
530 535 540
Gly Leu Val Ser Val Arg Ala Leu Asn Pro Ser Glu Ala Ala Asn Pro
545 550 555 560
Ser Ala Thr Gln His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val Pro Val
565 570 575
Ala
<210> 44
<211> 528
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas libanensis
<400> 44
Met Asn Gly Trp Leu Arg Pro Leu Arg Arg Ala Arg Leu Asn Val Leu
1 5 10 15
Cys Trp Ile Thr Cys Ala Leu Leu Pro Phe Ala Pro Ala Pro Val Ser
20 25 30
Ala Ala Ser Asp Ala Gln Ser Cys Val Ser Gln Leu Val Phe Asp Pro
35 40 45
Thr Ser Gly Gly Phe Leu Pro Val Asn Asn Phe Gly Thr Glu Gln Asp
50 55 60
Phe Leu Asn Cys Phe Gly Trp Gln Leu Phe Ile Ala Met Asn Trp Pro
65 70 75 80
Val Asn Pro Gly Trp Pro Ala Asn Pro Ser Leu Ala Gly Glu Pro Asp
85 90 95
Thr Gln Ser Thr Ala Ala Gln Phe Gly Val Pro Pro Thr Pro Gly Gln
100 105 110
Pro Met Ser Asn Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Ser Glu
115 120 125
Ile Phe Leu Pro Gly Ala Pro Lys Pro Ser Gly Trp Gly Val Glu Thr
130 135 140
Arg Val Pro Ser Asn Cys Thr Ala Thr Gly Asn Leu Lys Ala Phe Ser
145 150 155 160
Thr Gly Ala Arg Lys Phe Ile Thr Ala Thr Ser Glu Ser Ala Ile Asn
165 170 175
Arg Lys His Arg Phe His Leu Ser Ser Gly Thr Gln Val Thr Leu Pro
180 185 190
Asp Ser Ile Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ser Gly
195 200 205
Asn Leu Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr
210 215 220
Ile Val Asp Asn Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Ile Val Ala
225 230 235 240
Gln Asn Ser Asp Asn Arg His Pro Ala Gly Leu Ser Leu Pro Ala Gly
245 250 255
Lys Leu Val Arg Glu Leu Pro Ala Gln Ala Leu Pro Gln Glu Glu Leu
260 265 270
Gly Ala Leu Glu Leu Lys Ala Ala Trp Arg Val Leu Thr Asn Lys Pro
275 280 285
Glu Leu Tyr Gly Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Gln Arg Pro
290 295 300
Asp Thr Leu Gln Cys Thr Gln Glu Val Val Gly Leu Val Gly Leu His
305 310 315 320
Ile Ile Asn Lys Thr Gln Thr Gln Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe
325 330 335
Glu Gln Val Asp Asn Val Pro Asp Gly Gly Ala Thr Pro Pro Gly Gly
340 345 350
Tyr Ser Phe Asn Asn Pro Ala Cys Thr Gly Asp Thr Cys Thr Pro Asn
355 360 365
Val Ala Arg Val Gln Cys Asp Ala Thr His Thr Pro Pro Asn Cys Thr
370 375 380
Pro Leu Asp Gln Pro Val Gln Ala Thr Arg Val Asn Ala Thr Pro Gln
385 390 395 400
Asp Met Gln Ala Leu Asn Thr Ala Val Gln Gln Thr Phe Ala Gln Lys
405 410 415
Thr Gln Gly Gln Ser Val Phe Gln Tyr Tyr Lys Leu Val Asn Val Leu
420 425 430
Trp Ser Lys Thr Pro Asn Ala Pro Asn Asp Pro Gly Pro Gly Pro Asn
435 440 445
Val Lys Val Pro Leu Ser Tyr Gly Pro Phe Val Ser Asp Gln Ser Val
450 455 460
Val Val Ala Asn Thr Thr Met Glu Thr Tyr Val Gln Ser Asp Asn Cys
465 470 475 480
Asn Asp Cys His Gln Tyr Ala Thr Ile Ala Gly Gly Ser Lys Leu Ala
485 490 495
Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Gly Asn Ala Asp Ser Ala Lys Asn Thr
500 505 510
Arg Leu Ile Lys Arg Ile Glu Ala Phe Lys Thr Leu Lys Asp Asn Pro
515 520 525
<210> 45
<211> 576
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas asplenii
<400> 45
Met Ser Ile Pro Phe Thr Arg Phe Ser Pro Pro Ala Asn Gln Ala Gln
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Gln Lys Leu Gly Leu Glu Gln Gln Gln Ala Gln Phe Asp
20 25 30
Thr Asp Trp Ser Asn Asn Leu Ala Gly Trp Thr Glu Ala Ala Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Thr Gly Leu Asn Asp Ala Pro Arg Thr Gly Tyr Phe
50 55 60
Asn Pro Leu Ile Ser Gly Phe Gly Asp Ala Pro Pro Ala Val Ile Asp
65 70 75 80
Trp Thr Pro Phe Pro Asn Arg Leu Ile Thr Tyr Leu Thr Gln Ala Asp
85 90 95
Ser Ala Lys Asn Pro Gln Leu Gly Gly Lys Pro Leu Thr Met Asp Gln
100 105 110
Val Met Gln Leu Ala Asp Thr Gly Glu Ile Asp Ile Asn Gly Thr Pro
115 120 125
Leu Lys Leu Tyr Asp Pro Leu Gly Ser Asn Thr Leu Gln Leu Pro Ser
130 135 140
Ile Arg Cys Pro Gln Ile Asp Trp Thr Gly Pro Tyr Ala Ala Phe Thr
145 150 155 160
Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser Ile
165 170 175
Thr Leu Asp Ala Asn Gly Asn Met Arg Ser Val Met Phe Thr Cys Glu
180 185 190
Asn Pro Ala Tyr Tyr Leu Thr Met Trp Arg Ile Asp Pro Lys Ala Val
195 200 205
Leu Gly Leu Tyr Arg Met Tyr Ile Asp Ser Ala Val Gln Leu Glu Asp
210 215 220
Leu Tyr Leu Arg Tyr Pro Val Asp Gln Pro Thr Gly Lys Gln Gly Glu
225 230 235 240
Pro Val Ile Asp Pro Thr Thr Gly Leu Pro Ala Tyr Asp Val Thr Asn
245 250 255
Lys Trp Asn Ser Gly Thr Ala Arg Lys Pro Gly Leu Phe Gly Gly Ala
260 265 270
Leu His Leu Thr Ser Ala Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Ile Tyr Leu
275 280 285
Ala Gly Ala Ser Thr Ile Gln Arg Ser Asp Lys Ser Ser Glu Thr Pro
290 295 300
Gln Thr Leu Ile Cys Cys Ala Lys Tyr Gly Arg Asn Tyr Arg Asn Ser
305 310 315 320
Asp Pro His Ile Gly Tyr Val Ala Asn Gly Ile Ala Tyr Gly Asn Arg
325 330 335
Ile Ser Leu Thr Asp Pro Val Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Lys Asn
340 345 350
Phe Ser Lys Trp Lys Asp Pro Gln Gly Asn Ser Val Ser Gln Tyr Trp
355 360 365
Gln Ile Thr Arg Gly Thr Ala Gly Thr Gly Pro Leu Gly Ser Asp Gln
370 375 380
Ile Leu His Ala Val Phe Glu Val Pro Glu Gln Ala Gly Phe Ser Ile
385 390 395 400
Asn Asp Ile Thr Ile Asp Gly Gln Lys Ile Thr His Val Gly Val Ile
405 410 415
Ala Asn Gln Met Lys Val Ala Leu Ser Ala Ser Pro Leu Asp Ala Ile
420 425 430
Lys Pro Val Ile Gln Pro Cys Val Thr Asp Arg Ser Thr Gly Leu Gln
435 440 445
Pro Cys Pro Val Gln Leu Leu Pro Leu Ser Leu Phe Tyr Gly Leu Ser
450 455 460
Pro Ser Asp Leu Pro Ala Trp Leu Ala Pro Ser Ser Ser Asn Gln Phe
465 470 475 480
Ile Leu Leu Val Gln Gly Ser Asp Ala Ala Thr Thr Ala Ala Asn Ala
485 490 495
Arg Ile Gln Phe Ser Asn Pro Gly Val Lys Ala Gln Val Ile Glu Phe
500 505 510
Gln Thr Asn Ala Thr Pro Ile Ala Gly Thr Thr Asp Asn Ser Gly Thr
515 520 525
Gln Gly Tyr Ile Ile Thr Ile Thr Val Ala Ala Asn Ala Ala Pro Gly
530 535 540
Leu Val Gln Leu Arg Val Leu Asn Pro Asp Glu Pro Val Asn Pro Ser
545 550 555 560
Asp Thr Asp His Pro Trp Ala Ser Ser Leu Ala Ile Val Pro Ala Leu
565 570 575
<210> 46
<211> 518
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas asplenii
<400> 46
Met Phe Ser Leu Asp Cys Ser Arg Gly Asn Gly Arg Phe Cys Leu Pro
1 5 10 15
Pro Leu Leu Leu Ile Ile Trp Leu Leu Gly Ser Leu Val Ala Arg Asn
20 25 30
Ala Tyr Ala Leu Ser Asp Pro Glu Thr Pro Ala Gln Cys Val Gln Gln
35 40 45
Leu Val Phe Asp Pro Thr Asn Gly Ser Phe Leu Thr Ser Asp Thr Pro
50 55 60
Phe Val Ala Gln Gln Ala Thr Phe Asn Cys Tyr Ala Trp Gln Met Phe
65 70 75 80
Ile Ala Met Asn Trp Pro Val Asn Pro Gly Trp Pro Thr His Pro Glu
85 90 95
Leu Ala Gly Glu Pro Asp Thr Lys Ser Pro Ala Ala Gln Phe Gly Val
100 105 110
Pro Thr Ile Ala Asp Gln Pro Met Ser Val Ala Pro Val Trp Ala Ser
115 120 125
Tyr Lys Asp Ala Asn Asp Ile Phe Leu His Gly Ala Ala Ile Pro Thr
130 135 140
Ala Trp Gly Met Gln Pro Pro Glu Pro Val Gly Cys Gln Thr Lys Pro
145 150 155 160
Ser Leu Leu Ser Leu Arg Val Gly Ala Arg Lys Phe Met Thr Ala Thr
165 170 175
Ser Glu Ser Ala Val Asn Ala Lys His Arg Phe His Leu Ser Ser Ser
180 185 190
Thr Leu Val Thr Ala Ser Asp Pro Thr Leu Glu Ala Thr Gly Gly Trp
195 200 205
Leu Thr Asp Gln Ala Gly Lys Leu Val Tyr Phe Glu Arg Lys Val Gly
210 215 220
Lys Ala Glu Phe Asp Tyr Ile Val Ser Asn Glu Leu Tyr Asp Ala Ala
225 230 235 240
Asn Gln Leu Gln Val Ala Lys Asn Gln Gly Leu Ser Leu Pro Ala Gly
245 250 255
Ala His Phe Arg Ser Pro Pro Thr Ser Pro Ile Ala Gln Glu Lys Leu
260 265 270
Gly Ala Phe Glu Leu Lys Ala Ala Trp Arg Ile Leu Thr Asp Lys Pro
275 280 285
Gln Leu Tyr Asp Arg Tyr Leu Thr Thr Val Thr Trp Leu Lys His Pro
290 295 300
Glu Thr Gly Gln Cys Thr Gln Glu Val Val Gly Leu Val Gly Leu His
305 310 315 320
Ile Ile His Lys Thr Ala Ser Gln Pro Asp Phe Ile Trp Thr Thr Phe
325 330 335
Glu His Val Asp Asn Val Pro Asp Gly Gly Ser Thr Pro Thr Ala Gly
340 345 350
Tyr Thr Phe Asn Asn Pro Lys Cys Thr Gly Pro Asp Cys Thr Pro Asn
355 360 365
Gln Arg Arg Ile Thr Cys Thr Ala Leu Gly Cys Lys Asp Asn Tyr Pro
370 375 380
Arg Asn Glu Pro Val Gln Val Thr Arg Glu Asp Ser Val Pro Ser Thr
385 390 395 400
Ile Asn Asp Leu Asn Thr Val Val Gln Gln Ala Ile Ser Thr Lys Thr
405 410 415
Ala Gly Lys Ser Val Phe Gln Tyr Tyr Lys Leu Val Asn Val Leu Trp
420 425 430
Asp Ala Ser Pro His Ile Pro Asp Pro Glu Pro Gly Ala Asn Ala Thr
435 440 445
Val Pro Leu Val Tyr Gly Ser Phe Ser Ser Asp Gly Asn Asn Thr Pro
450 455 460
Val Ser Asn Thr Thr Met Glu Thr Tyr Ile Gln Asn Arg Ser Cys Asp
465 470 475 480
Phe Cys His Arg Asn Ala Lys Val Ala Gly Ser Lys Ser Leu Thr Ser
485 490 495
Asp Phe Ser Phe Leu Phe Glu Ser Ala Asp Ser Ser Lys Ile Pro Thr
500 505 510
Leu Ile Lys Lys Met Pro
515
<210> 47
<211> 580
<212> БЕЛОК
<213> Thalassospira xiamenensis
<400> 47
Met Ser Thr Pro Phe Ala Arg Phe Thr Ser Pro Ala His Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Lys Lys Leu Gly Met Glu Asn Glu Leu Ser Ala Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asn Val Ala Gly Trp Thr Glu Met Ala Ile Ile
35 40 45
Gly Asp Pro Trp Ser Asn Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ala Asp Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Thr Glu Gly Phe Gly Glu Ala Gly Asp Ala Val Ile Ser
65 70 75 80
Trp Thr Pro Phe Pro Asn Arg Leu Ile Ala Phe Leu Thr Pro Pro Glu
85 90 95
Ala Ser Asn Asn Pro Gln Leu His Arg Pro Leu Thr Met Asp Glu Val
100 105 110
Met Ser Leu Ala Asp Ser Gly Glu Ile Thr Val Asp Gly Thr Leu Tyr
115 120 125
Lys Leu Tyr Asp Pro Ser Gly Ser Ala Pro Ile Leu Lys Ile Pro Ala
130 135 140
Lys Arg Cys Pro Glu Ile Asp Trp Thr Gly Glu Tyr Val Asp Phe Ser
145 150 155 160
Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser Ile
165 170 175
Thr Tyr Asp Ala Ser Gly Ser Lys Met Gln Ser Val Met Phe Thr Cys
180 185 190
Glu Asn Pro Ala Tyr Tyr Leu Thr Met Trp Arg Ile Asn Pro Glu Ala
195 200 205
Val Leu Gly Leu Tyr Gln Met Tyr Val Asp Pro Ala Val Lys Leu Glu
210 215 220
Asp Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Val Asp Gln Pro Thr Gly Lys Lys Gly
225 230 235 240
Asp Pro Val Met Asp Pro Thr Thr Gly Arg Pro Ala Tyr Asp Val Thr
245 250 255
Asn Lys Trp Asn Arg Gly Thr Val Arg Val Pro Gly Gln Ser Gly Gly
260 265 270
Ala Leu His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Ile Tyr
275 280 285
Leu Ala Ala Ala Ala Thr Ile Gln Arg Pro Asp Leu Ser Ser Arg Asp
290 295 300
Pro Gln Ser Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn
305 310 315 320
Ser Asp Pro His Ile Gly Phe Ile Ala Asn Arg Ala Ala Ala Arg Tyr
325 330 335
Arg Ile Ser Leu Thr Asp Pro Val Gly Leu Tyr Ile Gln Gln Pro Gln
340 345 350
Asn Leu Ser Asn Trp Lys Gly Pro Asn Gly Glu Asp Ile Ser Gln Tyr
355 360 365
Trp Lys Ile Thr Arg Gly Thr Ala Gly Thr Gly Pro Asn Asn Ser Asp
370 375 380
Gln Ile Leu His Ala Val Phe Asp Ile Pro Pro Ser Ala Gly Phe Thr
385 390 395 400
Ile Asn Asp Cys Thr Ile Asn Gly Gln Lys Ile Ala His Ile Gly Asp
405 410 415
Ile Ala Asn Gln Met Lys Ile Ala Leu Ser Ala Thr Gln Met Thr Pro
420 425 430
Asn Gln Pro Leu Gln Ser Pro Met Lys Cys Val Ser Ser Arg Ser Ser
435 440 445
Gly Ser Met Gln Pro Trp Pro Val Gln Phe Val Pro Ile Asp Leu Phe
450 455 460
Tyr Gly Glu Ser Pro Thr Asp Leu Pro Ala Leu Met Val Pro Gly Thr
465 470 475 480
Val Asn Ser Phe Val Leu Ile Val Gln Gly Ala Asp Lys Asn Thr Thr
485 490 495
Ile Asp Asn Ala Arg Ile Glu Phe Ser Asn Pro Gly Ile Lys Ala Lys
500 505 510
Val Thr Lys Phe Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asp
515 520 525
Gly Gly Gly Thr Gln Gly Phe Ile Met Asp Val Ala Val Ser Ser Ser
530 535 540
Ala Lys Pro Gly Ser Val Ser Leu Arg Val Leu Asn Pro Asn Glu Pro
545 550 555 560
Ala Asn Pro Ser Asp Ala Asp His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Val
565 570 575
Ile Pro Ser His
580
<210> 48
<211> 539
<212> БЕЛОК
<213> Thalassospira xiamenensis
<400> 48
Met Asn Arg Leu His Leu Gly Ala Gly Cys Val Ile Ala Gly Phe Cys
1 5 10 15
Ile Leu Ala Ile Ala Gly Leu Leu Trp Val Ile Asp Val Pro Ala Gly
20 25 30
Arg Ala Asp Glu Ile Asn Ile Ser Arg Val Thr Glu Ile Ala Gln Ser
35 40 45
Ala Gln Gln Cys Pro Asp Gln Leu Val Phe Asp Pro Thr Ser Gly Ser
50 55 60
Phe Met Thr Ser Asp Asn Leu Phe Leu Pro Thr Gln Gln Gly Asn Asn
65 70 75 80
Cys Tyr Ala Trp Gln Met Phe Ile Ala Met Asn Trp Pro Val Ser Ser
85 90 95
Ser Trp Pro Gly Thr Pro Ser Ala Ala Gly Glu Pro Asp Gln Asn Val
100 105 110
Ser Val Glu Asn Trp Gly Val Pro Glu Asn Pro Thr Ser Pro Leu Thr
115 120 125
Ser Val Pro Val Trp Gly Ser Phe Lys Asp Ala Gln Ala Ile Phe Leu
130 135 140
Pro Asp Ala Ala Lys Pro Thr Asp Trp Gly Val Pro Gln Ala Val Pro
145 150 155 160
Ser Gly Cys Lys Ser Asp Lys Met Leu Leu Gly Tyr Pro Ala Gly Ser
165 170 175
Ala Lys Ile Leu Thr Thr Leu Ser Lys Asn Ala Val Asn Thr Ala His
180 185 190
Arg Phe His Leu Ser Ser Gly Thr Arg Asp Thr Gln Ser Asp Glu Ile
195 200 205
Met Glu Ala Thr Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Asn Gly Asn Leu Val
210 215 220
Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr Ile Met Asn
225 230 235 240
Asn Ala Leu Tyr Asp Ala Ala Tyr Gln Met Arg Val Ala Thr Asn Ala
245 250 255
Asp Gly Arg His Pro Ala Gly Leu Ser Leu Pro Ser Gly Lys Phe Leu
260 265 270
Arg Val Pro Pro Thr Glu Pro Gln Gly Gln Asp Ala Leu Gly Ala Phe
275 280 285
Glu Ile Lys Ala Ala Trp Arg Val Leu Thr Gly Gln Ser Asp Ile Tyr
290 295 300
Asp Arg Tyr Leu Thr Ser Val Ala Trp Leu Lys Arg Pro Asp Thr Gly
305 310 315 320
Glu Cys Ser Gln Glu Val Val Gly Leu Val Gly Leu His Ile Ile His
325 330 335
Lys Thr Asp Thr Phe Pro Asp Leu Ile Trp Ala Thr Phe Glu Gln Val
340 345 350
Asp Asn Val Pro Asp Gly Gln Ala Thr Leu Pro Pro Gly Gly Tyr Ser
355 360 365
Phe Asn Asn Pro Asn Cys Thr Gly Pro Asp Cys Lys Pro Asn Gln Pro
370 375 380
Arg Ile Asp Cys Asn Asp Gln Asn Gln Cys Lys Asp Leu Tyr Pro Arg
385 390 395 400
Asp Gln Pro Val Gln Val Thr Arg Glu Gln Ala Leu Thr Ser Glu Met
405 410 415
Asp Thr Leu Asn Ala Gly Val Ala Gln Lys Ile Ala Ser Gln Thr Gly
420 425 430
Gly Lys Ser Val Phe Gln Tyr Tyr Lys Leu Val Asn Val Leu Trp Asp
435 440 445
Gly Ser Pro Ser Pro Pro Val Met Glu Pro Gly Ala Asn Ala Ser Ile
450 455 460
Pro Leu Arg Tyr Gly Thr Phe Glu Ser Glu Gly Asn Leu Lys Val Ala
465 470 475 480
Asn Thr Thr Met Glu Thr Tyr Ile Gln Asp Gln Ser Cys Asp Phe Cys
485 490 495
His Ala Asn Ala Thr Ile Ala Gly Ser Asp Thr Leu Ala Ser Asp Phe
500 505 510
Ser Phe Ile Phe Arg Asp Ala Gly Ser Ala Lys Asn Pro Ser Leu Val
515 520 525
Glu Glu Val Lys Gln Phe Met Glu Gln Ala Gln
530 535
<210> 49
<211> 577
<212> БЕЛОК
<213> Paracoccus denitrificans
<400> 49
Met Thr Ile Phe Thr Glu Phe Ser Thr Pro Ala Gln Gln Gly Pro Lys
1 5 10 15
Asp Tyr Gln Leu Leu Gly Leu Pro Ala Ala Asp Leu Ala Ala Phe Glu
20 25 30
Ala Asp Trp Ser Ala Asn Ile Ala Gly Trp Thr Gln Met Ser Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Asn Leu Asn Asp Thr Pro Arg Asp Asn Tyr Tyr
50 55 60
Asp Pro Leu Val Glu Gly Met Gly Glu Ala Thr Ala Ala Val Ile Ser
65 70 75 80
Trp Pro Pro Phe Pro Asn Arg Leu Ile Gln Phe Leu Thr Asn Pro Gly
85 90 95
Ile Val Lys Gly Gly Gln Leu Thr Ala Pro Leu Ser Gln Asp Ala Val
100 105 110
Gln Glu Leu Ala Asp Ser Gly Arg Ile Thr Gln Gly Gly Thr Ser Phe
115 120 125
Val Leu Phe Asp Pro Glu Pro Gly Gln Val Leu Leu Lys Ile Pro Ala
130 135 140
Asp Arg Cys Pro Ala Ile Asp Trp Asp Gly Lys Tyr Val Asp Phe Ser
145 150 155 160
Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Gln Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser Ile
165 170 175
Leu Arg Asn Ala Gln Gly Lys Met Gln Ser Ile Ala Phe Thr Cys Glu
180 185 190
Asn Pro Ala Tyr Tyr Leu Thr Met Trp Arg Gln Asn Pro Lys Ala Val
195 200 205
Leu Gly Ile Tyr Gln Arg Tyr Ile Asp Pro Ala Val Gln Leu Glu Asp
210 215 220
Leu Phe Leu Arg Tyr Glu Tyr Asp Gln Pro Thr Gly Lys Lys Gly Asp
225 230 235 240
Pro Val Leu Asp Pro Thr Thr Gly Asn Pro Ala Tyr Asp Pro Thr Asn
245 250 255
Lys Trp Asn Arg Gly Pro Ala Arg Val Pro Gly Ser Phe Gly Gly Ala
260 265 270
Met His Leu Thr Ser Pro Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Ile Tyr Leu
275 280 285
Ala Ala Ala Ala Thr Ile Gln Arg Pro Ser Ser Val Asn Gly Asn Pro
290 295 300
Gln Ser Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Phe Arg Asn Ser
305 310 315 320
Asp Pro Asn Ile Gly Tyr Gly Ala Asn Val Ala Ala Arg Thr Ala Arg
325 330 335
Leu Thr Leu Thr Asp Pro Val Gly Leu Tyr Ile Gln Gln Pro Gln Asn
340 345 350
Phe Gln Gly Trp Ser Gly Pro Asn Gly Glu Asp Val Ser Gly Tyr Trp
355 360 365
Gln Ile Leu Arg Gly Thr Ala Gly Thr Gly Pro Asn Gly Ser Asp Gln
370 375 380
Ile Leu His Ala Val Phe Ala Ile Pro Glu Ser Ala Gly Tyr Ser Ile
385 390 395 400
Glu Asp Cys Thr Ile Tyr Gly Leu Pro Ile Ser His Val Gly Val Ile
405 410 415
Leu Asp Gln Met Lys Val Ala Leu Ala Val Thr Pro Asn Asn Ala Ala
420 425 430
Pro Asp Thr Thr Ala Phe Ala Cys Val Thr Asp Arg Thr Asp Gly Thr
435 440 445
Gln Pro Trp Pro Val Gln Met Val Pro Glu Ser Leu Phe Tyr Gly Glu
450 455 460
Ser Pro Ser Asp Leu Pro Ala Leu Leu Arg Pro Gly Ser Lys Phe Arg
465 470 475 480
Phe Val Leu Ile Val Gln Gly Ala Asp Glu Asn Thr Thr Pro Ala Thr
485 490 495
Ala Arg Val Glu Phe Ser Asp Pro Asn Ile Thr Val Thr Val Glu Gln
500 505 510
Phe Leu Lys Asn Ala Ser Ala Val Pro Gly Gln Thr Asn Gly Gly Gly
515 520 525
Thr Gln Gly Tyr Val Met Asp Ile Ala Val Gly Ala Asn Ala Gln Pro
530 535 540
Gly Pro Val Ser Val Arg Ala Leu Asn Pro Ser Glu Gly Pro Ala Pro
545 550 555 560
Thr Pro Glu Gln His Pro Trp Glu Ala Gly Leu Ala Val Ile Ser Ser
565 570 575
Arg
<210> 50
<211> 502
<212> БЕЛОК
<213> Paracoccus denitrificans
<400> 50
Met Arg Thr Gly Gln Ile Leu Ile Ala Leu Val Ala Gly Val Met Leu
1 5 10 15
Ala Phe Ala Ala Ser Gly Gly Lys Ala Gln Thr Ala Cys Ser Ala Met
20 25 30
Leu Ile Thr Asp Pro Thr Ser Ala Asp Phe Leu Thr Gly Asp Thr Pro
35 40 45
Phe Gly His Thr Gln Asp Gly Met Asn Cys Tyr Gly Trp Gln Met Phe
50 55 60
Leu Ser Leu Asn Trp Pro Ala Asp Pro Gly Trp Pro Gln Thr Pro Ala
65 70 75 80
Met Ala Gly Glu Pro Asp Arg Ser Ala Thr Ile Ala Asp Phe Gly Leu
85 90 95
Pro Gly Pro Ala Gly Gln Pro Met Gln Arg Pro Thr Val Trp Gln Ser
100 105 110
Phe Met Pro Ala Pro Glu Ile Phe Lys Pro Phe Ala Ala Met Pro Thr
115 120 125
Gly Trp Gly Glu Thr Ser Pro Pro Pro Ala Ser Cys Gly Ser Ala Ser
130 135 140
Leu Ala Ala Ser Ala Gly Ser Ile Arg Met Leu Asn Ala Val Ser Lys
145 150 155 160
Ser Ala Val Ser Pro Arg His Gly Phe Asn Leu Asp Thr Gly Thr Met
165 170 175
Ser Ser Ile Ser Asp Glu Ile Glu Glu Ala Thr Gly Gly Trp Leu Thr
180 185 190
Asp Gln Lys Gly Lys Leu Val Phe Phe Glu Arg Met Ile Gly Lys Ala
195 200 205
Glu Tyr Asp Tyr Ile Val Ala Lys Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln
210 215 220
Leu Lys Val Ala Thr Asn Ala Asp Gly Ala Thr Pro Glu Gly Leu Ser
225 230 235 240
Leu Pro Lys Gly Thr Pro Pro Gly Ser Ala Val Gln Asn Gln Asp Glu
245 250 255
Leu Gly Ala Phe Glu Leu Lys Ala Ala Trp Arg Asn Leu Thr Gly Leu
260 265 270
Asp Asp Leu Tyr Gly Arg Tyr Leu Thr Ser Thr Val Tyr Leu Leu Tyr
275 280 285
Pro Asp Gly Ser Cys Glu Lys Ala Val Val Gly Leu Val Gly Leu His
290 295 300
Ile Ile His Lys Thr Ala Ser Met Pro Asp Phe Val Trp Ser Thr Phe
305 310 315 320
Glu Gln Ile Asp Asn Val Pro Gly Ala Ser Ala Pro Glu Val Asp Phe
325 330 335
Ser Phe Asn Asn Pro Ala Ser Asn Ala Lys Pro Asn Gln Met Pro His
340 345 350
Cys Val Asn Gly Val Cys Asp Tyr Ser Leu Pro Ile Gln Val Thr Arg
355 360 365
Glu Val Ala Ile Pro Ala Gly Val Ala Gln Thr Asn Arg Asp Val Gln
370 375 380
Gln Leu Leu Ala Asp Arg Thr Gly Gly Lys Ser Val Phe Gln Tyr Tyr
385 390 395 400
Gln Leu Val Asn Val Leu Trp Asp Gly Ala Pro Thr Pro Pro Ser Pro
405 410 415
Glu Pro Gly Ala Asn Ala Gln Val Pro Leu Val Tyr Gly Thr Phe Gln
420 425 430
Thr Asp Gly Ser Val Pro Val Ala Asn Thr Thr Met Glu Thr Tyr Ala
435 440 445
Gln Gln Phe Thr Pro Gly Leu Gly Pro Ser Cys Thr Ala Cys His Lys
450 455 460
Gly Ala Thr Ile Ala Asn Ser Ala Thr Leu Ala Ser Asp Phe Ser Phe
465 470 475 480
Leu Phe Ser Thr Ala Ser Ser Ala Thr Lys Leu Pro Gly Leu Phe Ile
485 490 495
Ser Arg Asp Phe Val Pro
500
<210> 51
<211> 580
<212> БЕЛОК
<213> Cellvibrio japonicus
<400> 51
Met Ser Ala Phe Thr Phe Ser Thr Pro Ala Leu Ile Gln Asp Phe Ser
1 5 10 15
Asp Asn Pro Ser Leu Gln Gln Gln Leu Asn Gln Asn Trp Asp Leu Ala
20 25 30
Ile Asp Ala Tyr Thr Gln Ala Ala Leu Val Ser Asn Pro Trp Thr Val
35 40 45
Asp Tyr Gln Ala Pro Cys Asp Trp Tyr Val Asn Pro Lys Gln Ala Asp
50 55 60
Ile Thr Ala Ala Asn Pro Val Glu Pro Ile Phe Trp Thr Ala Phe Pro
65 70 75 80
Asn Arg Leu Lys Ile Tyr Phe Ser Ala Ala Glu Lys Ser Pro Tyr Gln
85 90 95
Met Ala Asn Ala Gln Val Phe Ala Leu Ala Asp Phe Gly Asn Val Pro
100 105 110
Gln Ser Lys Ala Phe Pro Thr Gly Leu Pro Phe Ile Ile Pro Ser Lys
115 120 125
Arg Cys Pro Asn Leu Asn Trp Gln Gln Ser Ile Ala Glu Trp Val Gln
130 135 140
Tyr Asp Pro Lys Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp
145 150 155 160
Ser Val Thr Arg Asn Ala Asp Gly Lys Ile Thr Lys Ile Ala Phe Thr
165 170 175
Cys Glu Asn Pro Glu Tyr Trp Phe Thr Leu Trp Gln Val Ser Pro Glu
180 185 190
Lys Val Leu Ala Leu Tyr Gln Gln Leu Val Ser Pro Asn Val Val Leu
195 200 205
Glu Asp Leu Gln Leu Pro Ser Ala Asp Gly Lys Gly Phe Val Ile Asp
210 215 220
Pro Thr Thr Gly Arg Pro Ala Tyr Asn Pro Leu Asn Lys Trp Asn Ser
225 230 235 240
Gly Thr Val Ala Thr Glu Thr Tyr Gly Gly Ala Val His Leu Thr Ser
245 250 255
Pro Pro Asn Thr Ile Gly Ala Glu Ile Met Leu Ala Ala Gln Ala Thr
260 265 270
Leu Leu Arg Asp Leu Pro Pro Asp Gln Tyr Asn Met Gln Arg Met Val
275 280 285
Cys Ala Gly Ala Tyr Gly Arg Ala Tyr Arg Asn Ser Asp Pro His Ile
290 295 300
Gly Leu Gln Ala Asn Gln Leu Val Lys Asn Leu Gly Val Lys Ile Thr
305 310 315 320
Leu Thr Asn Pro Val Gly Leu Tyr Leu Gln Arg Pro Asp Phe Ser Ser
325 330 335
Tyr Lys Thr Pro Asp Gly Lys Asp Ala Gly Gln Phe Tyr Lys Val Ile
340 345 350
Arg Gly Arg Thr Ala Gln Gln Ala Gly Thr Thr Tyr Asp Gln Ile Leu
355 360 365
His Ala Glu Phe Ser Val Pro Glu Glu Leu Gly Tyr Thr Val Ser Asp
370 375 380
Ile Leu Ile Gly Asn Ala Val Pro Gly Ser Ser Gln Val Pro Val Pro
385 390 395 400
Ile Leu Tyr Ala Gly Gln Ile Ala Glu Thr Phe His Val Cys Leu Ala
405 410 415
Gly Thr Ala Ile Ala Pro Ala Thr Gly Glu Pro Ser Gln Ala Phe Leu
420 425 430
Pro Pro Val Thr Asp Lys Thr Gly Asn Thr Asn Gly Gln Val Ser Met
435 440 445
Leu Leu Ala Asn Pro Val Leu Leu Ala Met Gln Ala Val Asn Pro Phe
450 455 460
Pro Pro Phe Val Gln Leu Pro Val Gln Ile Ala Gln Gly Gln Thr Leu
465 470 475 480
Thr Asn Met Ala Leu Gln Val Ser Tyr Ala Asn Asp Asn Phe Gln Glu
485 490 495
Ala Gln Ile Ala Phe Trp Asp Ala Gln Gly Asn Ser Glu Pro Gly Ile
500 505 510
Ser Val Thr Val Thr Ala Ile Glu Thr Ala Asp Gly Thr Pro Ala Gly
515 520 525
Lys Ser Ala Gly Gly Asp Gly Leu Phe Asn Tyr Ile Ile Ser Ile Ser
530 535 540
Val Ala Pro Gly Val Ser Pro Gly Phe Lys Gly Val Thr Val Arg Asn
545 550 555 560
Pro Ala Cys Asp Met Pro Leu Pro Leu Pro Gly Val Leu Phe Val Thr
565 570 575
Ala Lys Gly Asn
580
<210> 52
<211> 506
<212> БЕЛОК
<213> Cellvibrio japonicus
<400> 52
Met Lys His Thr Leu Leu Ile Gly Val Thr Thr Gly Leu Leu Val Ala
1 5 10 15
Ala Cys Gln Gln Pro Val Gln Glu Ser Ser Ala Ala Val Asp Ala Pro
20 25 30
Ala Val Ser Thr Val Ser Ser Ser Ser Ala Pro Ile Ser Phe Pro Cys
35 40 45
Leu Asn Lys Pro Ala Val Asn Tyr Asn Thr Pro Gly Asp Thr Pro Ile
50 55 60
Thr Ser Gln Asp Gly Val Asn Cys Phe Ala Trp Gln Thr Phe Ile Gly
65 70 75 80
Leu Asn Trp Pro Val Asp Ala Ser His Pro Gly Glu Pro Asp Lys Thr
85 90 95
Ala Ser Ala Ser Val Phe Gly Glu Pro Gly Leu His Gln Thr Ser Val
100 105 110
Trp Glu Thr Tyr Ala Asn Ser Lys Ser Val Phe Arg Ala Asn Ala Gln
115 120 125
Pro Pro Leu Pro Trp Gly His Thr Pro Asp Val Pro Ser Ser Cys Gln
130 135 140
Lys Ile Ser Gln Thr Leu Gly Leu Arg Val Met Gln Ala Ser Arg Met
145 150 155 160
Pro Gly Ser Phe Asn Met Ser Lys Glu Ala Ser Gln Ala Phe Pro Gly
165 170 175
Asn Asn Pro Asn Trp Leu Ala Asp Lys Ser Gly Asn Leu Val Tyr Tyr
180 185 190
Glu Ile Leu Ile Gly Lys Asp Glu Tyr Asp Tyr Ile Asn Asn Asn Gly
195 200 205
Leu Tyr Asn Ala Asn Thr Gln Ala Ala His Ile Gln Gln Asn Lys Asn
210 215 220
Ile Ala Met Pro Leu Gly His Asp Lys Val Leu Gly Gly Leu Glu Ile
225 230 235 240
Lys Ala Ala Trp Leu Ser Val Ser Asp Pro Gln Asn Pro Lys Trp Lys
245 250 255
Asn Tyr Lys Leu Ser Thr Ser Val Ile Tyr Asp Pro Val Ser Lys Asp
260 265 270
Cys His Ala Ser Thr Ile Ala Leu Val Gly Met His Ile Ile Arg Lys
275 280 285
Thr Ala Ser Gln Pro Gln Trp Ile Trp Ala Thr Phe Glu His Lys Asp
290 295 300
Asn Ala Pro Asp Thr Ala Ser Ile Lys Ser Asp Gly Thr Val Asp Gly
305 310 315 320
Asp Tyr Thr Phe Tyr Ser Asn Ser Cys Thr Val Lys Pro Val Pro Ala
325 330 335
Gly Cys Lys Ala Lys Val Glu Asn Gly Thr Ser Val Thr Gln Thr Ser
340 345 350
Cys His Val Asn Val Ser Pro Ala Tyr Tyr Leu Asp Thr Ser Gly Asn
355 360 365
Cys Pro Ala Tyr Pro Ile Gln Val Ser Arg Asp Phe Ala Ile Lys Asp
370 375 380
Ser Thr Asp Asn His Val Ala Ser Leu Asn Arg Ala Val Gln Gln Leu
385 390 395 400
Ile Ala Ser Ser Asn Ala Asp Ser Val Tyr Thr His Tyr Gln Leu Val
405 410 415
Asn Val Leu Trp Ser Ser Ala Ala Val Asn Asp Asn Ala Pro Pro Gly
420 425 430
Asn Pro Pro Leu Thr Pro Leu Ser Ile Ser Gly Glu Thr Pro Ser Leu
435 440 445
Asn Thr Val Pro Val Ala Asn Thr Met Leu Glu Thr Tyr Ala Gln Gly
450 455 460
Phe Asn Cys Leu Ser Cys His Ala Tyr Ala Ser Val Ala Arg Asp Ala
465 470 475 480
Arg Ala Gln Leu Gly Gly Lys Ala Tyr Ala Thr Asp Tyr Ser Phe Ile
485 490 495
Phe Ser Phe Ala Thr Ser Pro Ala Ala Lys
500 505
<210> 53
<211> 256
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas brenneri
<400> 53
Met Gly Ser Ile Thr Asp His Asn Gln Leu Leu Ala Trp Val Ala Ser
1 5 10 15
Leu Asp Ile Pro Glu Ala Ser Gly Val Lys Thr Arg Ser Arg Asn Val
20 25 30
Val Ala Arg Ala Asn Ala Glu Asp Glu Gly Ala Ala Val Val Arg Gly
35 40 45
Ser Ile Thr Ser Phe Val Thr Gly Leu Ser Gln Gln Ala Arg Asp Asp
50 55 60
Val Gln Asn Ser Thr Leu Leu Met Gln Leu Ala Ala Asp Lys Lys Phe
65 70 75 80
Asn Pro Glu Lys Gln Arg Glu Glu Trp Phe Lys Phe Tyr Thr Asp Gly
85 90 95
Leu Ala Asn Leu Gly Trp Gly Arg Val Ser Ser Tyr Tyr Gln Ser Tyr
100 105 110
Gln Pro Arg Asn Thr Asn Val Thr Met Asp Gln Val Val Leu Glu Val
115 120 125
Ile Ala Ala Val Val Gly Ala Asp Ser Ala Val Tyr Lys Val Thr Glu
130 135 140
Lys Thr Phe Ser Ser Leu Gln Asp Asn Pro Lys Asn Gln Ala Pro Leu
145 150 155 160
Lys Leu Phe Asp Ser Ser Ser Thr Arg Asp Ser Val Gly Thr Phe Gln
165 170 175
Ile Leu Pro Val Met Gln Asp Arg Asp Gly Asn Val Val Met Val Leu
180 185 190
Thr Thr Val Asn Ala Ser Thr Thr Val Gln Arg Gly Ser Phe Leu Phe
195 200 205
Trp Ser Trp Ser Lys Thr Thr Ala Trp Met Tyr Arg Ala Ala Gln Gln
210 215 220
Thr Val Leu Asn Glu Ser Val Tyr Ala Thr Val Arg Gln Ser Val Ile
225 230 235 240
Lys Lys Leu Gly Lys Asn Ala Glu Glu Phe Ile Asp Asp Leu Glu Ile
245 250 255
<210> 54
<211> 260
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas brenneri
<400> 54
Met Lys Leu Ser Ala Asp Glu Val Tyr Val Ile Ser Gly Asn Leu Leu
1 5 10 15
Ser Ala Thr Pro Ser Leu Thr Asp Pro Thr Val Leu Glu Asp Ile Ala
20 25 30
Asn Ser Asn Leu Leu Cys Gln Leu Ala Ala Asp Lys Asn Gln Gly Thr
35 40 45
Arg Phe Ile Asp Pro Ala Ala Trp Leu Asp Phe Tyr Arg Ser Ser Leu
50 55 60
Gly Arg Leu Phe Trp Arg Ile Ser Asn Ser Gly Thr Val Ser Tyr Ala
65 70 75 80
Ile Pro Gln Leu Val His Lys Ile Thr Val Lys Glu Val Leu Glu Lys
85 90 95
Thr Phe Tyr Lys Thr Leu Asp Arg Pro Gln Arg Ile Arg Val Glu Glu
100 105 110
Ser Ile Glu Leu Leu Gly Glu Gln Ser Ala Asp Ser Pro Ser Ala Thr
115 120 125
Leu Tyr Ser Leu Lys Thr Gln Val Asn Phe Asn Glu Thr Thr Ser Ser
130 135 140
Pro Gly Leu Leu Pro His Ser Ile Ser Ser Val Asn Leu Gln Leu Ser
145 150 155 160
Val Val His Ser Glu Thr Cys Ile Ser Val Cys Ser Val Tyr Phe Lys
165 170 175
Thr Ser Thr Arg Ile Gly Asp Asp Val Phe Asn Gln Lys Phe Pro Val
180 185 190
Lys Glu Leu Leu Gly Asn Val Ser Val Ser Thr Phe Glu Ala Lys Leu
195 200 205
Leu Glu Ser Ser Tyr Ala Gly Ile Arg Gln Ser Ile Ile Asp Lys Leu
210 215 220
Gly Glu Asp Asn Ile Arg Glu Asn Ile Leu Leu Val Pro Ala Val Ser
225 230 235 240
Pro Ser Leu Ser Asn Thr Arg His Ala Gly Ala Leu Gln Phe Val Gln
245 250 255
Glu Leu Asp Ile
260
<210> 55
<211> 260
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas gessardii
<400> 55
Met Lys Leu Ser Thr Asp Glu Val Tyr Val Ile Ser Gly Asn Leu Leu
1 5 10 15
Ser Ala Thr Pro Ser Leu Thr Asp Pro Ala Val Leu Glu Asp Ile Ala
20 25 30
Asn Ser Asn Leu Leu Cys Gln Leu Ala Ala Asp Lys Asn Gln Gly Thr
35 40 45
Arg Phe Ile Asp Pro Ala Ala Trp Leu Asp Phe Tyr Arg Asn Ser Leu
50 55 60
Gly Lys Leu Phe Trp Arg Ile Ser Asn Ser Gly Thr Val Ser Tyr Ala
65 70 75 80
Ile Pro Gln Leu Val His Lys Ile Thr Val Lys Glu Val Leu Glu Lys
85 90 95
Thr Phe Tyr Lys Asn Leu Asp Arg Pro Gln Arg Ile Arg Val Glu Asp
100 105 110
Ser Ile Glu Leu Leu Gly Glu Gln Ser Val Asp Ser Pro Ser Ala Thr
115 120 125
Leu Tyr Ser Leu Lys Thr Gln Val Asn Phe Asn Glu Thr Thr Ser Ser
130 135 140
Pro Gly Leu Leu Pro His Ser Val Ser Ser Val Asn Leu Gln Leu Ser
145 150 155 160
Val Val His Ser Glu Thr Cys Ile Ser Val Cys Ser Val Tyr Phe Lys
165 170 175
Thr Ser Thr Arg Ile Gly Asp Asp Val Phe Asn Gln Lys Phe Pro Val
180 185 190
Lys Glu Leu Leu Gly Asn Val Ser Val Ser Thr Phe Glu Ala Lys Leu
195 200 205
Leu Glu Ser Ser Tyr Ala Ser Ile Arg Gln Ser Ile Ile Asp Lys Leu
210 215 220
Gly Glu Asp Asn Ile Arg Glu Asn Ile Leu Leu Val Pro Ala Val Ser
225 230 235 240
Pro Ser Leu Ser Asn Ser Arg His Ala Gly Ala Arg Gln Phe Val Gln
245 250 255
Glu Leu Asp Ile
260
<210> 56
<211> 260
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 56
Met Gly Ser Ile Thr Asp His Gly Lys Leu Leu Ala Trp Val Glu Ser
1 5 10 15
Leu Asp Val Pro Lys Ser Thr Gly Asn Ala Asn Leu Lys Arg Ala Ser
20 25 30
Ala Val Leu Arg Ser Ala Ala Gln Asn Ser Asp Glu Asp Gly Ala Ala
35 40 45
Val Val Arg Gly Ser Ile Thr Ser Phe Val Thr Gly Leu Thr Pro Gln
50 55 60
Ala Arg Asp Asp Val Gln Asn Ser Thr Leu Leu Met Gln Leu Ala Ala
65 70 75 80
Asp Lys Lys Tyr Asn Pro Asp Thr Gln Arg Glu Glu Trp Phe Lys Phe
85 90 95
Tyr Thr Asp Gly Leu Ala Asn Leu Gly Trp Gly Arg Val Ser Ser Ala
100 105 110
Tyr Gln Lys Tyr Lys Pro Thr Asn Thr Asn Ala Thr Met Asp Gln Val
115 120 125
Val Leu Glu Ile Ile Ser Ser Val Val Ser Pro Glu Ser Ala Leu Tyr
130 135 140
Lys Val Thr Glu Lys Thr Phe Leu Ala Leu Lys Asn Asn Pro Asn Asn
145 150 155 160
Lys Asp Ala Leu Lys Leu Phe Asp Val Ser Ser Thr Arg Asn Asp Leu
165 170 175
Gly Thr Phe Gln Ile Leu Pro Val Met Gln Asp Lys Asp Gly Asn Val
180 185 190
Val Thr Val Leu Thr Cys Ile Asn Ala His Thr Glu Val Gln Lys Gly
195 200 205
Ser Phe Leu Phe Trp His Trp Ser Ser Thr Ser Ala Glu Met Tyr Arg
210 215 220
Ala Ala Gln Gln Val Val Leu Asn Gln Asn Val Tyr Ala Thr Val Arg
225 230 235 240
Gln Ser Val Leu Lys Lys Leu Gly Lys Asn Ala Glu Asp Phe Ile Asp
245 250 255
Gly Leu Asp Ile
260
<210> 57
<211> 259
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 57
Met Ser Phe Thr Ala Pro Glu Val His Val Val Ser Gly Asn Leu Ile
1 5 10 15
Ser Ala Met Pro Ser Val Asn Ser Pro Gln Val Leu Glu Asp Ile Leu
20 25 30
Glu Ser Asn Leu Leu Cys Gln Met Ala Ala Asp Lys Ser Leu Gly Ser
35 40 45
Arg Phe Asn Asn Pro Ala Ala Trp Leu Asp Phe Tyr Arg Asn Ser Leu
50 55 60
Gly Lys Leu Phe Trp Lys Ile Thr Asn Phe Asn Thr Val Ser Tyr Pro
65 70 75 80
Val Pro Ser Pro Thr Arg Ser Val Ser Val Met Gly Ile Leu Glu His
85 90 95
Thr Phe Phe Lys Val Leu Ala Gln Pro Leu Arg His Gln Ile Glu Ala
100 105 110
Asp Ile Glu Leu Leu Met Glu Leu Pro Leu Thr Ser Pro Ala Ser Gln
115 120 125
Leu Tyr Thr Ser Lys Thr His Val Glu Met Ser Thr Arg Ala Arg Ser
130 135 140
Ser Phe Asp Gly Arg Ser Glu Ser Val Ile Ser Leu Gln Ile Ser Val
145 150 155 160
Val His Ser Gly Ser Leu Ile Ser Val Cys Ser Val Tyr Phe Lys Thr
165 170 175
Ala Glu Pro Val Ala Ala Asp Val Phe Ser Gln Lys Phe Lys Val Arg
180 185 190
Asp Leu Leu Gly Asn Ile Ser Val Asn Ser Phe Glu Ala Asp Leu Leu
195 200 205
Glu Gly Ser Tyr Glu Gly Val Arg Gln Gln Ile Lys Thr Lys Leu Gly
210 215 220
Glu Ala Asn Ile Arg Glu Asn Ile Leu Leu Ile Ala Asp Asn Pro Ile
225 230 235 240
Pro Val Asp Glu Leu Pro His Ala Asn Ala His Gln Phe Leu Lys Gly
245 250 255
Leu Asp Ile
<210> 58
<211> 255
<212> БЕЛОК
<213> Alcaligenes faecalis
<400> 58
Met Ser Thr Ile Thr Asp His Lys Gln Val Leu Ala Trp Ile Asn Ala
1 5 10 15
Leu Asp Ile Pro Asp Ala Pro Ala Gly Gly Asn Arg Val Ala Ala Arg
20 25 30
Ala Thr Ser Ser Ala Asp Glu Asp Gly Ala Val Val Ala Lys Ala Ser
35 40 45
Ile Pro Cys Phe Val Ser Gly Leu Thr Glu Gln Ser Arg Ala Asp Val
50 55 60
Gln Asn Ser Thr Leu Leu Met Gln Leu Ala Ala Asp Lys Lys Tyr Pro
65 70 75 80
Asn Glu Asn Asp Arg Glu Lys Trp Phe Lys Phe Tyr Ser Asp Gly Leu
85 90 95
Thr Asn Leu Gly Trp Gly Ser Ser Ser Ser Phe Phe Glu Arg Phe Gln
100 105 110
Pro Lys Asn Thr Asp Val Thr Met Asp Gln Val Val Leu Glu Val Ile
115 120 125
Leu Thr Val Val Asn Asn Val Asn Asn Pro Leu Tyr Lys Ile Ala Gln
130 135 140
Glu Thr Phe Gly Ala Leu Asn Lys Pro Ala Asn Gln Lys Pro Met Lys
145 150 155 160
Leu Phe Asp His Ser Ser Thr Lys Glu Asp Arg Gly Lys Phe Gln Ile
165 170 175
Leu Pro Ala Gly Gln Asp Gln His Gly Thr Val Ser Met Val Leu Thr
180 185 190
Ala Ile Asn Ala Arg Thr Asp Ile Gln Ser Gly Ser Phe Leu Phe Trp
195 200 205
Lys Trp Ser Lys Ser Thr Ala Trp Leu Tyr Arg Ala Ala Asn Leu Ile
210 215 220
Val Leu Asn Glu Ser Val Tyr Ser Lys Val Arg Gln Ala Val Ile Asp
225 230 235 240
Lys Leu Gly Asp Asn Ala Val Asn Phe Val Leu Asp Leu Asp Ile
245 250 255
<210> 59
<211> 268
<212> БЕЛОК
<213> Alcaligenes faecalis
<400> 59
Met Ala Phe Ser Thr Glu Gln Thr Tyr Val Val Ser Gly Asn Leu Ile
1 5 10 15
Ser Ala Thr Thr Glu Asp Thr Asn Thr Leu Ser Tyr Glu Asp Phe Ile
20 25 30
His Ser Asn Leu Leu Ala Gln Met Gly Ala Asp Lys Lys Leu Gly Ser
35 40 45
Arg Phe Val Asp Pro Ala Gly Trp Leu Ser Phe Phe Lys Asn Thr Val
50 55 60
Gly Asn Leu Phe Trp Asn Leu Ser Glu Gln Gly Thr Ser Thr Leu Lys
65 70 75 80
Ile Ser Ala Gly Thr Ala Ser Ile Thr Val Gln Gln Ile Leu Glu Gln
85 90 95
Ser Phe Phe Lys Arg Leu Asn Gln Ala Gln Ile Asp Ser Ala Thr Ala
100 105 110
Ser Val Asp Leu Phe Ser Gln Leu Ser Glu Asp Asp Pro Ala Phe Ile
115 120 125
Leu Tyr Asn Ala Lys Ser His Ala Gln Ile Ser Thr Ala Thr Lys Val
130 135 140
Ile Lys Pro Pro Gln Lys Glu Thr Tyr Ser Val Asn Leu Gln Ile Ser
145 150 155 160
Ile Ala His Thr Gly Ser Glu Ile Ala Leu Cys Asn Ile Phe Phe Gln
165 170 175
Thr Ser Gln Ala Val Ser Asp Glu Leu Phe Thr Gln Lys Phe Ala Ile
180 185 190
Lys Asp Leu Ile Gly Asn Ile Asn Val Phe Tyr Leu Lys Ala Leu Leu
195 200 205
Ser Glu Thr Asn Tyr Gly His Ile Arg Gln Gln Val Ile Glu Lys Leu
210 215 220
Gly Glu Asn Ile Asn Thr Asn Ile Val Leu Val Ala Asp Asn Ser Asp
225 230 235 240
Lys Pro Ser Pro Pro Phe Ser His Arg Gly Ala Gln Phe His Thr Gln
245 250 255
Pro Glu Asn Leu Ile Gln Gln Arg Thr Gly Pro Pro
260 265
<210> 60
<211> 255
<212> БЕЛОК
<213> Alcaligenes faecalis
<400> 60
Met Ser Thr Ile Thr Asp His Lys Gln Val Leu Ala Trp Ile Asn Ala
1 5 10 15
Leu Asp Ile Pro Asp Ala Pro Ala Gly Gly Asn Arg Val Ala Ala Arg
20 25 30
Ala Ser Ser Ser Ala Asp Glu Asp Gly Ala Val Val Ala Lys Ala Ser
35 40 45
Ile Pro Cys Phe Val Ser Gly Leu Thr Glu Gln Ser Arg Ala Asp Val
50 55 60
Gln Asn Ser Thr Leu Leu Met Gln Leu Ala Ala Asp Lys Lys Tyr Pro
65 70 75 80
Asp Glu Asn Asp Arg Glu Lys Trp Phe Lys Phe Tyr Ser Asp Gly Leu
85 90 95
Thr Asn Leu Gly Trp Gly Ser Ser Ser Ser Phe Phe Glu Arg Phe Gln
100 105 110
Pro Lys Asn Thr Asp Val Thr Met Asp Gln Val Val Leu Glu Val Ile
115 120 125
Leu Thr Val Val Asn Asn Val Asn Asn Pro Leu Tyr Lys Ile Ala Gln
130 135 140
Glu Thr Phe Gly Ala Leu Asn Lys Pro Ala Asn Gln Lys Pro Met Lys
145 150 155 160
Leu Phe Asp His Ser Ser Thr Lys Glu Asp Arg Gly Lys Phe Gln Ile
165 170 175
Leu Pro Ala Gly Gln Asp Gln His Gly Thr Val Ser Met Val Leu Thr
180 185 190
Ala Ile Asn Ala Arg Thr Asp Ile Gln Ser Gly Ser Phe Leu Phe Trp
195 200 205
Lys Trp Ser Lys Ser Thr Ala Trp Leu Tyr Arg Ala Ala Asn Leu Ile
210 215 220
Val Leu Asn Glu Ser Val Tyr Ser Lys Val Arg Gln Ala Val Ile Asp
225 230 235 240
Lys Leu Gly Asp Asn Ala Val Asn Phe Val Leu Asp Leu Asp Ile
245 250 255
<210> 61
<211> 259
<212> БЕЛОК
<213> Alcaligenes faecalis
<400> 61
Met Ala Phe Ser Thr Glu Gln Thr Tyr Val Val Ser Gly Asn Leu Ile
1 5 10 15
Ser Ala Thr Thr Lys Asp Thr Asn Thr Leu Ser Tyr Glu Asp Phe Ile
20 25 30
His Ser Asn Leu Leu Ala Gln Met Gly Ala Asp Lys Lys Leu Gly Ser
35 40 45
Arg Phe Val Asp Pro Ala Gly Trp Leu Ser Phe Phe Lys Asn Thr Val
50 55 60
Gly Asn Leu Phe Trp Asn Leu Ser Glu Gln Gly Thr Ser Thr Leu Lys
65 70 75 80
Ile Ser Ala Gly Thr Ala Ser Ile Thr Val Leu Gln Ile Leu Glu Gln
85 90 95
Ser Phe Phe Lys Arg Leu Asn Gln Ala Gln Ile Asp Ser Ala Thr Ala
100 105 110
Ser Ile Asp Leu Phe Asp Gln Leu Pro Glu Asp Asp Pro Ala Phe Ile
115 120 125
Leu Tyr Asn Val Lys Ser His Ala Gln Ile Ser Ala Ala Ala Lys Ala
130 135 140
Ile Lys Pro Pro Gln Lys Ala Thr Tyr Ser Val Asn Leu Gln Ile Ser
145 150 155 160
Ile Ala His Thr Gly Ser Glu Ile Ala Leu Cys Asn Val Phe Phe Gln
165 170 175
Thr Ser Gln Ala Val Ser Asp Glu Leu Phe Thr Gln Lys Phe Ala Ile
180 185 190
Lys Asp Leu Ile Gly Asn Ile Asn Ile Phe Tyr Leu Lys Ala Gln Leu
195 200 205
Ser Glu Thr Asn Tyr Gly Gln Ile Arg Gln Gln Val Ile Glu Lys Leu
210 215 220
Gly Glu Asn Ile Asn Thr Asn Ile Leu Leu Val Ala Asp Asn Ser Glu
225 230 235 240
Thr Pro Ser Pro Pro Ser Pro Ala Glu Ala Arg Ser Phe Ile Arg Ser
245 250 255
Leu Lys Ile
<210> 62
<211> 255
<212> БЕЛОК
<213> Alcaligenes sp. HPC1271
<400> 62
Met Ser Thr Ile Thr Asp His Lys Gln Val Leu Ala Trp Ile Asn Ala
1 5 10 15
Leu Asp Ile Pro Asp Ala Pro Ala Gly Gly Asn Arg Val Thr Ala Arg
20 25 30
Ala Thr Ser Ser Ala Asp Glu Asp Gly Ala Val Val Ala Lys Ala Ser
35 40 45
Ile Pro Cys Phe Val Ser Gly Leu Thr Glu Gln Ser Arg Ala Asp Val
50 55 60
Gln Asn Ser Thr Leu Leu Met Gln Leu Ala Ala Asp Lys Lys Tyr Pro
65 70 75 80
Asn Glu Asn Asp Arg Glu Lys Trp Phe Lys Phe Tyr Ser Asp Gly Leu
85 90 95
Thr Asn Leu Gly Trp Gly Ser Ser Ser Ser Phe Phe Glu Arg Phe Gln
100 105 110
Pro Lys Asn Thr Asp Val Thr Met Asp Gln Val Val Leu Glu Val Ile
115 120 125
Leu Thr Val Val Asn Asn Val Asn Asn Pro Leu Tyr Lys Ile Ala Gln
130 135 140
Glu Thr Phe Gly Ala Leu Asn Lys Pro Ala Asn Gln Lys Pro Met Lys
145 150 155 160
Leu Phe Asp His Ser Ser Thr Lys Glu Asp Arg Gly Lys Phe Gln Ile
165 170 175
Leu Pro Ala Gly Gln Asp Gln His Gly Thr Val Ser Met Val Leu Thr
180 185 190
Ala Ile Asn Ala Arg Thr Asp Ile Gln Ser Gly Ser Phe Leu Phe Trp
195 200 205
Lys Trp Ser Lys Ser Thr Ala Trp Leu Tyr Arg Ala Ala Asn Leu Ile
210 215 220
Val Leu Asn Glu Ser Val Tyr Ser Lys Val Arg Gln Ala Val Ile Asp
225 230 235 240
Lys Leu Gly Asp Asn Ala Val Asn Phe Val Leu Asp Leu Asp Ile
245 250 255
<210> 63
<211> 259
<212> БЕЛОК
<213> Alcaligenes sp. HPC1271
<400> 63
Met Ala Phe Ser Thr Glu Gln Thr Tyr Val Val Ser Gly Asn Leu Ile
1 5 10 15
Ser Ala Thr Thr Glu Asp Thr Asn Thr Leu Ser Tyr Glu Asp Phe Ile
20 25 30
His Ser Asn Leu Leu Ala Gln Met Gly Ala Asp Lys Lys Leu Gly Ser
35 40 45
Arg Phe Val Asp Pro Ala Gly Trp Leu Ser Phe Phe Lys Asn Thr Val
50 55 60
Gly Asn Leu Phe Trp Asn Leu Ser Glu Gln Gly Thr Ser Thr Leu Lys
65 70 75 80
Ile Ser Ala Gly Thr Ala Ser Ile Thr Val Leu Gln Ile Leu Glu Gln
85 90 95
Ser Phe Phe Lys Arg Leu Asn Gln Ala Gln Ile Asp Ser Ala Thr Ala
100 105 110
Ser Val Asp Leu Phe Ser Gln Leu Ser Glu Asp Asp Pro Ala Phe Ile
115 120 125
Leu Tyr Asn Ala Lys Ser His Ala Gln Ile Ser Ala Ala Thr Lys Val
130 135 140
Ile Lys Pro Pro Gln Lys Glu Thr Tyr Ser Val Asn Leu Gln Ile Ser
145 150 155 160
Ile Ala His Thr Gly Ser Glu Ile Ala Leu Cys Asn Ile Phe Phe Gln
165 170 175
Thr Ser Gln Ala Val Ser Asp Glu Leu Phe Thr Gln Lys Phe Ala Ile
180 185 190
Lys Asn Leu Ile Gly Asn Ile Asn Val Phe Tyr Leu Lys Ala Leu Leu
195 200 205
Ser Glu Thr Asn Tyr Gly His Ile Arg Gln Gln Val Ile Glu Lys Leu
210 215 220
Gly Glu Asn Ile Asn Thr Asn Ile Val Leu Val Ala Asp Asn Ser Asp
225 230 235 240
Lys Pro Ser Pro Pro Ser Pro Thr Glu Ala Arg Ser Phe Ile Arg Ser
245 250 255
Leu Lys Ile
<210> 64
<211> 260
<212> БЕЛОК
<213> Enterobacter sp.
<400> 64
Met Asn Thr Asn Ala Leu Asp Phe Val Leu Lys Thr Pro Ile Glu Thr
1 5 10 15
Thr Ala Asp Leu Ala Pro Leu Leu Glu Arg Leu Lys Gly Val Pro Asp
20 25 30
His Gly Gln Ser Lys Arg Lys Thr Met Leu Thr Asp Asn Lys Val Ser
35 40 45
Ala Gln Val Asn Ala Gly Ser Leu Ile Ser Phe Thr Glu Arg Leu Asp
50 55 60
Gly Gln Asn Lys Gln Asp Val Gln Asn Ser Thr Leu Phe Ala Gln Leu
65 70 75 80
Ala Ala Asp Lys His Cys Asn Arg Tyr Thr Ala Pro Met Asp Trp Tyr
85 90 95
Arg Phe Tyr Val Asn Val Leu Gly Gln Ile Gly Trp Asn Gln Pro Ala
100 105 110
Phe Ala Phe Asp Thr Tyr Thr Ser Gly Ala Ser Thr Val Lys Leu Asp
115 120 125
Glu Ala Val Leu Gly Ile Ile Ala Gln Ile Ala Thr Val Gly Glu Val
130 135 140
Ala Leu Val Ala Ala Ala Met Lys Ala Leu Ser Ser Leu Ser Asp Thr
145 150 155 160
Ser Lys Gln Met Leu Ile Trp Asp Ala Lys Ser Asn Ser Glu Asn Thr
165 170 175
Gly Asn Phe Gln Ile Phe Pro Ala Asp Leu Leu Pro Asn Gly Asp Val
180 185 190
Val Met Met Leu Asp Gly Met Gln Phe Asp Ala Lys Arg Asn Glu Gly
195 200 205
Arg Phe Leu Trp Val Thr Trp Gln Ser Thr Ser Ile Lys Ile Gln Arg
210 215 220
Ala Ala Asn Lys Phe Val Leu Asn Glu Gly Val Tyr Lys Gly Val Arg
225 230 235 240
Gln Ala Val Ile Asp Lys Leu Gly Asp Arg Ala Ile Asp Met Ile Ala
245 250 255
Asn Ile Glu Ile
260
<210> 65
<211> 258
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 65
Met Ser Phe Glu Val Cys Asp Ser Ser Val Ala Ala Cys Val Ala Arg
1 5 10 15
Leu Glu Ser Tyr Asp Ile Tyr Pro Asp Ile Ser Pro Arg Ser Leu Tyr
20 25 30
Ser Gly Asp Ile Glu Pro Pro Ala Lys Gly Ser Val Val Gly Glu Gly
35 40 45
Ile Leu Ala Phe Ala Gly Gly Leu Ser Ser Gln His Gln Glu Asp Ala
50 55 60
Gln His Ala Phe Leu Phe Ala Ser Leu Val Ala Asn Arg Gln Tyr Pro
65 70 75 80
Leu Glu Ser Gln Gly Arg Glu Trp Tyr Tyr Lys Phe Val Glu Val Met
85 90 95
Thr Asn Ala Gly Trp Val Ala Thr Gln Arg Phe Tyr Asp Asp Leu Ser
100 105 110
Ile Ala Gly Asn Thr Val Arg Met Asp Lys Leu Val Leu Asp Ile Leu
115 120 125
Ala Ser Val Val Ser Gly Ile Ala Leu Gly Ser Ala Thr Ser Ala Leu
130 135 140
Leu Leu Arg Val Ala Asp Ser Ala Ile Thr Ala Leu Gln Lys Lys Glu
145 150 155 160
Lys Thr Leu Thr Leu Phe Glu Arg Asn Leu Leu Glu His Gly Val Gly
165 170 175
Gly Met Ala Ala Gly Thr Cys Val Glu Ile Asp Gly Glu Val Ser Met
180 185 190
Leu Leu Gly Thr Val Arg Phe Ile Arg Arg Asn Ser Ala Thr Gln Val
195 200 205
Leu Phe Ala Asp Trp Asn Ser Arg Glu Val Lys Leu Tyr Lys Gly Glu
210 215 220
Ser Val Phe Arg Lys Val Pro Ser Ile Val Glu Arg Thr Arg Gly Ile
225 230 235 240
Ile Ile Gly Arg Leu Gly Asn His Ala Val Ser Lys Ile Glu Glu Tyr
245 250 255
Glu Ile
<210> 66
<211> 242
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 66
Met Asp Lys Ala Tyr Ser Ile Phe Val Asn Ala Ala Ala Ile Val Leu
1 5 10 15
Val Ser Ser Thr Val Arg Gly Thr Gly Val Glu Asp Leu Met Asn Ser
20 25 30
Val Leu Leu Ala Gln Leu Val Ala Asn Lys Asn Leu Gln Arg Ile Pro
35 40 45
Ser Ala Asp Trp Tyr Ala Ser Tyr Met Asp Val Leu Ser Val Ala Trp
50 55 60
Val Ala Gly Ala Lys Arg Arg Lys Asp Leu Leu Pro Lys Gln Asp Ala
65 70 75 80
Ala Ser Ser Pro Val Glu Trp Val Thr Ala Ile Pro Leu Asp Asp Arg
85 90 95
Pro Asp Gln Gln Gln Gln Ile Met Ala Val Leu Asp Arg Val Ala Ala
100 105 110
Leu Pro Gly Ser Leu Pro Ala Leu Ser Ile Leu Arg Lys His Met Gln
115 120 125
Lys Pro Asn Glu Pro Glu Pro Thr Gln Ser Pro Ser Ala Ser Ser Pro
130 135 140
Val Arg Leu Leu Val Ile Val Ala His Ser Pro Val Ser Met Thr Gly
145 150 155 160
Ile Cys Leu Gln Phe Asn Thr Gly Lys Ala Ile Asn Ala Asn Pro Trp
165 170 175
Gly Gln Cys Phe Asp Gly Lys Asp Ile Asp Gly Cys Val Ser Ala Arg
180 185 190
Tyr Leu Arg Met Gln Leu Ser Glu Thr Leu Phe Ala Pro Ala Arg Glu
195 200 205
Val Ile Ala Arg Lys Val Gly Thr Val Val Gly Asp Asn Val Val Asp
210 215 220
Ile Thr Gly Ala Ile Glu Asp Ser Val Val Arg Pro Ala Glu Glu Val
225 230 235 240
Gly Arg
<210> 67
<211> 258
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas brassicacearum
<400> 67
Met Ser Phe Glu Met Cys Asp Ser Ala Val Ala Ala Cys Val Ala Arg
1 5 10 15
Leu Glu Ser Tyr Asp Ile Tyr Pro Asp Val Ser Pro Arg Ser Leu Tyr
20 25 30
Val Asp Asp Val Glu Pro Pro Ala Lys Gly Ser Val Val Gly Glu Gly
35 40 45
Ile Leu Ala Phe Ala Gly Gly Leu Ser Pro Gln His Gln Glu Asp Ala
50 55 60
Gln His Ala Phe Leu Phe Ala Ser Leu Val Ala Asn Arg Gln Tyr Pro
65 70 75 80
Leu Glu Ser Gln Gly Arg Glu Trp Tyr Tyr Lys Phe Val Glu Val Met
85 90 95
Thr Asn Ala Gly Trp Val Ala Thr Gln Arg Phe Tyr Asp Asp Leu Ser
100 105 110
Val Gly Gly Asn Thr Val Arg Met Asp Lys Leu Val Leu Asp Ile Leu
115 120 125
Ala Ser Val Val Ser Gly Ile Ala Leu Gly Ser Ala Thr Ser Ala Leu
130 135 140
Leu Leu Arg Val Val Asp Ser Ala Ile Thr Ala Leu Gln Lys Lys Glu
145 150 155 160
Glu Thr Leu Thr Leu Phe Glu Arg Asn Leu Leu Glu His Gly Val Gly
165 170 175
Gly Met Ala Ala Gly Thr Cys Val Glu Ile Asp Gly Glu Val Ser Met
180 185 190
Met Leu Gly Thr Val Arg Phe Ile Arg Arg Asn Ser Ala Thr Gln Val
195 200 205
Leu Phe Ala Asp Trp Asn Ser Arg Glu Val Lys Leu Tyr Lys Gly Glu
210 215 220
Ser Val Phe Arg Lys Val Pro Ser Val Val Glu Arg Thr Arg Asp Ile
225 230 235 240
Ile Ile Gly Arg Leu Gly Asn His Ala Val Ser Lys Ile Glu Glu Tyr
245 250 255
Glu Ile
<210> 68
<211> 242
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas brassicacearum
<400> 68
Met Asp Lys Glu Tyr Ser Val Phe Val Asn Ala Ala Ala Ile Val Leu
1 5 10 15
Ala Pro Cys Ala Leu Arg Arg Thr Glu Val Asp Asp Leu Met Asn Ser
20 25 30
Val Leu Leu Ala Gln Leu Val Ala Asp Lys Ser Leu Leu Arg Ala Pro
35 40 45
Ala Val Asp Trp Tyr Ala Thr Tyr Leu Glu Val Leu Ser Val Ala Trp
50 55 60
Ile Ser Ala Ala Lys Arg Arg Lys Asp Leu Gln Pro Gln Lys Glu Asp
65 70 75 80
Thr His Ser Pro Leu Glu Trp Val Ala Ala Ile Pro Leu Asp Asp Gln
85 90 95
Val Asp Gln Gln Gln Arg Ile Met Ala Val Met Glu Arg Ile Ala Ala
100 105 110
Leu Pro Gly Ser Leu Pro Ala Met Gly Ile Val Arg Lys His Val Gln
115 120 125
Lys Gln Tyr Glu Pro Asp Ala Ala Gln Ser Pro Ser Ser Ser Ser Pro
130 135 140
Val Arg Leu Leu Val Ile Val Ala Gln Ser Pro Val Ser Met Ala Gly
145 150 155 160
Val Tyr Leu Gln Phe Asn Thr Ala Lys Val Ile Glu Ala Asn Pro Trp
165 170 175
Arg Gln Cys Phe Asp Gly Lys Asp Ile Asp Gly Cys Val Thr Ala Arg
180 185 190
Tyr Phe Arg Thr Gln Leu Ser Glu Thr Leu Phe Ala Pro Ala Arg Glu
195 200 205
Val Ile Ala Arg Lys Val Ala Ala Ala Val Gly Asp Asn Ile Val Asp
210 215 220
Ile Thr Lys Ala Ile Asp Asp Ser Gly Val Leu Pro Ala Glu Glu Val
225 230 235 240
Cys Arg
<210> 69
<211> 263
<212> БЕЛОК
<213> Неустановленное
<220>
<223> Микробное сообщество ризосферы проса прутьевидного из Мичигана
<400> 69
Met Ser Val Asn Met Ile Asp Ser Ala Thr Val Ala Ala Cys Val Arg
1 5 10 15
Arg Leu Glu Ser Tyr Glu Ile Asp Glu Val Pro Val Val Arg Ser Arg
20 25 30
Ala Phe Ala Ala Ser Gly Ile Val Val Glu Glu Pro Ser Lys Gly Ala
35 40 45
Val Val Gly Glu Gly Ile Leu Ser Phe Val Gly Asn Leu Ser Glu Gln
50 55 60
Asn Gln Val Asp Ala Met His Ala Phe Leu Phe Ala Ser Leu Val Ala
65 70 75 80
Asn Lys Gln Phe Pro Tyr Glu Tyr Gln Gly Lys Glu Trp Tyr Tyr Lys
85 90 95
Phe Val Glu Val Met Thr Ser Ala Gly Trp Leu Thr Ser Gln Lys Tyr
100 105 110
Tyr Asn Asp Ile Glu Ile Ser Gly Asn Thr Val Arg Met Asp Gln Leu
115 120 125
Val Leu Glu Ile Leu Gly Ser Val Val Ala Gly Leu Ala Ile Pro Gly
130 135 140
Thr Ala Ser Ala Leu Met Leu Lys Val Ala Gly Asp Ala Ile Thr Ala
145 150 155 160
Leu Lys Lys Lys Glu Thr Ala Leu Thr Leu Tyr Glu Arg Asn Leu Leu
165 170 175
Glu His Gly Val Gly Gly Met Ala Ala Gly Thr Cys Thr Glu Val Asn
180 185 190
Gly Glu Val Thr Leu Ala Leu Gly Thr Val Arg Phe Ile Arg Lys Asn
195 200 205
Thr Ala Thr Gln Val Leu Phe Met Asp Trp Asp Ser Arg Asp Val Gln
210 215 220
Leu Tyr Lys Gly Glu Ser Val Phe Arg Lys Val Pro Tyr Ile Ala Asp
225 230 235 240
Gln Thr Arg Asp Leu Ile Arg Thr Lys Leu Gly Thr Asn Ala Val Ser
245 250 255
Lys Ile Glu Gly Tyr Glu Ile
260
<210> 70
<211> 242
<212> БЕЛОК
<213> Неустановленное
<220>
<223> Микробное сообщество ризосферы проса прутьевидного из Мичигана
<400> 70
Met Ala Arg Glu Tyr Ser Val Phe Val Asn Ala Ala Ala Ile Val Leu
1 5 10 15
Leu Pro Ser Asn Pro Val Glu Ser Ala Thr Asn Asp Leu Met Asn Ser
20 25 30
Val Leu Leu Ala Gln Leu Val Ala Asn Lys Arg Ala Glu Ala Thr Ser
35 40 45
Ala Val Asp Trp Tyr Glu Thr Tyr Val Gly Val Leu Gly Asp Phe Trp
50 55 60
Leu Thr Arg Ala Arg Ser Arg Gln Asp Ile Gln Pro Gly Lys Asp Asp
65 70 75 80
Thr Ala Ser Pro Leu Glu Trp Ile Ala Ala Val Leu Ala Ser Ser Thr
85 90 95
Glu Asp Glu Ala Arg Leu Val Thr Ala Leu Leu Lys Gly Ile Ala Arg
100 105 110
Leu Ser Asp Ser Leu Pro Ala Met Ser Leu Leu Arg Lys His Val Gln
115 120 125
Lys Glu Ser Asp Asp Glu Pro Ala Glu Ile Ser Leu Gln Ser Lys Pro
130 135 140
Val Arg Leu Val Val Ile Val Ala Gln Asp Asn Ala Ser Met Thr Ser
145 150 155 160
Val Cys Leu Gln Phe Lys Thr Arg Gln Met Leu Asp Pro Asn Pro Trp
165 170 175
Gly Gln Arg Phe His Val Glu Asp Met Glu Gly Cys Val Ser Ala His
180 185 190
Phe Phe His Ala His Leu Ser Glu Thr Leu Tyr Ala Pro Ala Arg Glu
195 200 205
Ala Val Ala Arg Lys Val Glu Gly Val Leu Ser Asp Asn Ile Val Asp
210 215 220
Ile Thr Glu Ala Ile Asp Ala Leu Ala Phe Leu Pro Thr Glu Glu Ala
225 230 235 240
Gly Thr
<210> 71
<211> 261
<212> БЕЛОК
<213> Неустановленное
<220>
<223> Микробное сообщество ризосферы мискантуса из Келлогга
<400> 71
Met Asn Val His Asp Val Glu Asp Cys Thr Val Ala Glu Cys Ile His
1 5 10 15
Arg Leu Glu Ser Tyr Glu Leu Asp Gly Ala Glu Val Met Arg Pro Arg
20 25 30
Ser Phe Ser Val Pro Val Val Asn Glu Pro Gly Lys Gly Ser Ile Val
35 40 45
Gly Glu Gly Ile Leu Ser Phe Thr Gly Asn Leu Ser Glu Gln Asn Arg
50 55 60
Glu Asp Val Gln His Ala Phe Leu Phe Ala Ser Leu Val Ala Asn Lys
65 70 75 80
Lys Tyr Pro Tyr Glu Tyr Gln Gly Lys Glu Trp Tyr Tyr Gln Phe Leu
85 90 95
Glu Val Met Thr His Ala Gly Trp Leu Pro Thr Ser Lys Tyr Tyr Asn
100 105 110
Asp Met Asn Ile Ser Gly Asn Thr Val Arg Met Asp Gln Leu Val Leu
115 120 125
Glu Ile Leu Gly Ser Val Val Ala Gly Leu Ala Val Pro Gly Ser Ala
130 135 140
Ser Val Leu Met Leu Lys Val Ala Gly Asp Ala Ile Thr Ala Leu Lys
145 150 155 160
Lys Arg Glu Thr Ala Leu Thr Leu Tyr Glu Arg Asn Met Leu Glu His
165 170 175
Gly Val Gly Gly Met Ala Ala Gly Thr Cys Thr Glu Val Asn Gly Glu
180 185 190
Val Thr Met Ala Leu Gly Thr Val Arg Phe Ile Arg Lys Asn Thr Ala
195 200 205
Lys Gln Val Leu Phe Met Asp Trp Asp Ser Arg Glu Val Lys Leu Tyr
210 215 220
Arg Gly Asp Ser Val Phe Arg Lys Val Pro Tyr Ile Val Glu Gln Thr
225 230 235 240
Arg Asp Thr Ile Arg Ala Lys Leu Gly Leu Asn Ala Lys Pro Lys Ile
245 250 255
Glu Asp Tyr Asp Ile
260
<210> 72
<211> 240
<212> БЕЛОК
<213> Неустановленное
<220>
<223> Микробное сообщество ризосферы мискантуса из Келлогга
<400> 72
Met Ser Tyr Glu Tyr Ser Val Leu Ile Val Gly Ala Cys Val Val Ile
1 5 10 15
Ile Pro Ala Ala Asp Gly Ala Ala Gln Tyr Thr Asp Leu Val Asn Ser
20 25 30
Val Leu Leu Ala Gln Leu Ile Ala Asn Lys Lys Ile Glu Lys Ala Pro
35 40 45
Glu Ile Asp Trp Tyr Asn Ala Tyr Val Glu Phe Leu Asp Asp Tyr Trp
50 55 60
Leu Arg Arg Thr Arg Ala Arg Gln Asp Trp Ser Ile Ala Gln Asp Arg
65 70 75 80
Val Glu Ser Val Ser Asp Trp Val Ile Ala Ala Ile Ser Gln Asp Ala
85 90 95
Val Asp Lys Gly Ser Ala Thr Ala Ala Thr Leu Gln Arg Leu Ala Arg
100 105 110
Leu Ser Gly Asn Glu Pro Ala Met Gly Leu Leu Arg Gly His Met Gln
115 120 125
Lys Ile Ser Thr Asp Glu Ser Gly Asp Val Leu Ala Pro Ala Lys Ala
130 135 140
Val Arg Leu Leu Val Val Ile Ala Gln Thr Pro Thr Ser Val Ala Ser
145 150 155 160
Val Tyr Ile Glu Leu Lys Thr Arg Gln Ile Ile Ser Ala Asn Pro Leu
165 170 175
Ala Gln Arg His Leu Ala Glu Asp Val Gln Gly Ser Val Cys Met Arg
180 185 190
Tyr Ala Ala Ala Asn Leu Ser Glu Thr Leu Tyr Ser Pro Val Arg Asp
195 200 205
Ala Ile Ala Leu Lys Val Arg Asp Lys Tyr Gln Asp Asn Val Ala Met
210 215 220
Leu Thr Leu Ser Asp Asp Ala Ser Ala Met Glu Ile Cys Ala Val Asp
225 230 235 240
<210> 73
<211> 555
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas rhodesiae
<400> 73
Met Ala Lys Leu Thr Gln Phe Ser Thr Pro Ala Asp Ile Gln Asp Phe
1 5 10 15
Ser Asp Ser Pro Ala Gln Gln Glu Arg Met Asn Ala Ala Trp Ser Gly
20 25 30
Asn Ile Asn Arg Trp Val Asn Ala Ala Leu Val Gly Asp Val Trp Asp
35 40 45
Leu Ile Asn Tyr Gly Pro Arg Pro Ala Phe Tyr Asn Pro Leu Asp Thr
50 55 60
Asp Thr Pro Ser Thr Ser Val Asn Ala Pro Ile Thr Trp Asn Ala Phe
65 70 75 80
Pro Gly Arg Ile Pro Ala Leu Phe Pro Asn Gln Ser Ala Asn Trp Leu
85 90 95
Gln Trp Ala Asp Gln Gly Val Pro Ala Asn Val Thr Thr Asn Leu Cys
100 105 110
Thr Gln Gln Ser Val Pro Pro Ala Pro Tyr Ser Pro Thr Gly Pro Arg
115 120 125
Gly Trp Gln Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser Val Thr Arg Asn Ala Ala
130 135 140
Gly Gln Ile Thr Ser Val Met Phe Thr Cys Glu Asn Pro Glu Tyr Trp
145 150 155 160
Met Thr Leu Trp Gln Val Asp Pro Gly Lys Val Leu Gln Arg Tyr Gln
165 170 175
Gln Leu Ile Asn Pro Ala Val Gln Leu Ala Asp Leu Ser Leu Lys Asp
180 185 190
Ala Gln Gly Gln Thr Val Ile Asp Pro Val Thr Gly Ala Pro Cys Tyr
195 200 205
Asn Pro Leu Asn Lys Trp Asn Ser Gly Thr Gln Thr Leu Pro Gly Ser
210 215 220
Gly Gly Ala Met His Leu Thr Ser Ser Pro Asn Thr Leu Gly Ala Glu
225 230 235 240
Tyr Asp Leu Ala Ala Ala Ala Thr Met Pro Arg Glu Leu Asn Asn Glu
245 250 255
Pro Val Thr Ser Ala Ser Gln Leu Val Cys Tyr Ala Arg Tyr Gly Arg
260 265 270
Ile Gly Arg His Ser Asp Pro Thr Ile Gly Gln Asn Val Asn Gln Tyr
275 280 285
Val Asn Tyr Thr Ser Gly Leu Thr Glu Val Arg Ala Thr Leu Thr Asn
290 295 300
Pro Pro Gly Leu Tyr Ile Gln Thr Pro Asp Phe Ser Gly Tyr Thr Thr
305 310 315 320
Pro Asp Gly Ser Pro Ala Ala Ala Cys Trp Thr Ile Asn Arg Gly His
325 330 335
Leu Ala Gln Thr Ser Asp Asp Ile Asp Arg Ile Leu His Ala Thr Phe
340 345 350
Ser Val Pro Ala Gly Lys Asn Phe Thr Val Ser Asp Ile Ser Ile Asn
355 360 365
Gly Ala Lys Ile Gln Tyr Ala Ser Gln Ile Ala Gly Thr Ile Thr Met
370 375 380
Gly Leu Met Ala Thr Val Phe Gly Asn Ser Gly Val Thr Gln Gln Pro
385 390 395 400
Val Ala Gly Thr Leu Asp Ser Asp Asn Pro Ser Pro Ser Val Ser Ala
405 410 415
Leu Gln Pro Leu Ser Val Phe Asn Ala Tyr Arg Ala Gln Glu Leu Ala
420 425 430
Ser Asn Glu Gln Ala Leu Ser Ile Pro Ile Leu Ala Leu Ala Ile Arg
435 440 445
Pro Gly Gln Gln Val Asp Asn Ile Ala Leu Leu Leu Asn Thr Ser Gln
450 455 460
Thr Pro Asn Gly Ala Ser Phe Ser Val Val Glu Gly Gly Val Ser Ile
465 470 475 480
Ser Ile Thr Gly Thr Gln Asp Leu Pro Gly Leu Asp Met Ser Leu Tyr
485 490 495
Leu Val Ser Ile Ser Ala Asp Ala Asn Ala Ala Pro Gly Asp Arg Thr
500 505 510
Val Leu Ala Ser Val Pro Gly Met Ala Ser Thr Gln Gln Ala Ala Ile
515 520 525
Gly Leu Leu Thr Val Gly Gly Pro Thr Leu Val Thr Ser Gln Thr Gly
530 535 540
Pro Ser Lys Pro Asn Phe Arg Arg Gly Arg Gly
545 550 555
<210> 74
<211> 451
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas rhodesiae
<400> 74
Met Arg Arg Arg Pro Thr Val Leu Leu Gly Leu Ala Leu Leu Leu Gly
1 5 10 15
Leu Pro Ala Thr Gln Ala Met Gly Ala Pro Leu Cys Gly Ser Pro Phe
20 25 30
Val Pro Ser Pro Thr Leu Gln Pro Thr Leu Ala Pro Pro Asn Phe Ser
35 40 45
Ala Ser Asp Ser Ala Val Asp Cys Phe Met Trp Gln Thr Met Val Tyr
50 55 60
Leu Asn Trp Pro Ala Thr Pro Gly Gln Arg Gly Val Pro Asn Ala Ala
65 70 75 80
Ala Ser Leu Gly Ser Pro Gly Pro Ser Val Trp Gln Thr Tyr Lys Asp
85 90 95
Tyr Asn Glu Leu Tyr Leu Pro Asn Gly Gln Gln Pro Pro Ala Trp Asn
100 105 110
Asp Asn Phe Leu Ser Val Gln Arg Leu Gln Thr Arg Gly Val Ala Arg
115 120 125
Ala Leu Pro Ser Ile Arg Leu Leu Asn Ser Thr Ser Lys Val Phe Arg
130 135 140
Ala Ala Asn Ala Asn Glu Ser Pro Ala Leu Arg Glu Ile Glu Gln Val
145 150 155 160
Gly Gly Gly Val Leu Tyr Asp Gln Ala Gly Ser Pro Val Tyr Tyr Glu
165 170 175
Met Leu Val Asn Glu Val Asn Phe Asp Phe Ile Tyr Asn Asn Gln Leu
180 185 190
Tyr Asn Pro Ala Gln Gln Asn Leu Tyr Ala Lys Gln Lys Gly Ile Val
195 200 205
Leu Pro Asn Asn Ser Ile Glu Ile Lys Ala Ala Trp Lys Val Leu Ser
210 215 220
Asp Pro Asp Asn Pro Gln Arg Phe Leu Thr Ala Gln Ala Leu Leu Pro
225 230 235 240
Gly Ser Ser Thr Pro Val Thr Val Gly Leu Val Gly Leu His Val Phe
245 250 255
Gln Met Pro Ser Ser Ala Phe Asn Gln Gly Phe Trp Ala Thr Phe Gln
260 265 270
Gln Leu Asp Asn Ala Pro Thr Val Ala Gly Ala Thr Pro Gly Ala His
275 280 285
Tyr Ser Phe Asn Asn Pro Gln Cys Ala Pro Ala Gln Cys Pro Pro Asn
290 295 300
Asp Lys Thr Ser Asn Pro Thr Gln Val Val Gln Asn Phe Pro Pro Thr
305 310 315 320
Pro Glu Ala Gln Asn Ile Asn His Tyr Met Gln Asn Leu Ile Ala Gln
325 330 335
Gln Ala Pro Gly Ser Ala Leu Gln Tyr Tyr Gln Leu Val Asp Val Gln
340 345 350
Trp Pro Thr Ser Pro Gln Ala Ile Gly Gln Pro Gly Ala Thr Ala Pro
355 360 365
Ala Pro Ser Gly Thr Pro Asn His Asp Thr Leu Ile Asn Pro Val Leu
370 375 380
Glu Thr Phe Leu Gln Ala Asn His Lys Ser Cys Leu Gly Cys His Val
385 390 395 400
Tyr Ala Ser Val Ala Ala Asp Gly Ser Asn Pro Pro Thr His Tyr Gln
405 410 415
Ala Ser Phe Ser Phe Leu Leu Gly His Ala Lys Ser Pro Ala Leu Gly
420 425 430
Ser Asn Leu Lys Ser Leu Ala Gln Gln Ile Glu Asp Ala Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Gln His
450
<210> 75
<211> 555
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas orientalis
<400> 75
Met Ala Lys Leu Thr Gln Phe Ser Thr Pro Ala Asp Ile Gln Asp Phe
1 5 10 15
Ser Asp Ser Pro Ala Gln Gln Glu Arg Met Asn Ala Ala Trp Ser Gly
20 25 30
Asn Ile Asn Arg Trp Val Asn Ala Ala Leu Val Gly Asp Val Trp Asp
35 40 45
Leu Ile Asn Tyr Gly Pro Arg Pro Ala Phe Tyr Asn Pro Leu Asp Thr
50 55 60
Asp Thr Pro Ser Thr Ser Val Asn Ala Pro Ile Thr Trp Asn Ala Phe
65 70 75 80
Pro Gly Arg Ile Pro Ala Leu Phe Pro Asn Gln Ser Ala Asn Trp Leu
85 90 95
Gln Trp Ala Asp Gln Gly Val Pro Ala Asn Val Thr Thr Asn Leu Cys
100 105 110
Thr Gln Gln Ser Ile Pro Ala Ala Pro Tyr Ser Pro Thr Gly Pro Arg
115 120 125
Gly Trp Gln Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser Val Thr Arg Asn Ala Ala
130 135 140
Gly Gln Ile Thr Ser Val Met Phe Thr Cys Glu Asn Pro Glu Tyr Trp
145 150 155 160
Met Thr Leu Trp Gln Val Asp Pro Gly Lys Val Leu Gln Arg Tyr Gln
165 170 175
Gln Leu Ile Asn Pro Ala Val Gln Leu Ala Asp Leu Ser Leu Lys Asp
180 185 190
Ala Gln Gly Gln Thr Val Ile Asp Pro Val Thr Gly Ala Pro Cys Tyr
195 200 205
Asn Pro Leu Asn Lys Trp Asn Ser Gly Thr Gln Thr Leu Pro Gly Ser
210 215 220
Gly Gly Ala Met His Leu Thr Ser Ser Pro Asn Thr Leu Gly Ala Glu
225 230 235 240
Tyr Asp Leu Ala Ala Ala Ala Thr Met Pro Arg Glu Leu Asn Asn Glu
245 250 255
Pro Val Thr Ser Ala Ser Gln Leu Val Cys Tyr Ala Arg Tyr Gly Arg
260 265 270
Ile Gly Arg His Ser Asp Pro Thr Ile Gly Gln Asn Val Asn Gln Tyr
275 280 285
Val Asn Tyr Thr Ser Gly Leu Thr Glu Val Arg Ala Thr Leu Thr Asn
290 295 300
Pro Pro Gly Leu Tyr Ile Gln Thr Pro Asp Phe Ser Gly Tyr Thr Thr
305 310 315 320
Pro Asp Gly Ser Pro Ala Ala Ala Cys Trp Thr Ile Asn Arg Gly His
325 330 335
Leu Ala Gln Thr Ser Asp Asp Ile Asp Arg Ile Leu His Ala Thr Phe
340 345 350
Ser Val Pro Ala Gly Lys Asn Phe Thr Val Ser Asp Ile Ser Ile Asn
355 360 365
Gly Ala Lys Ile Gln Tyr Ala Ser Gln Ile Ala Gly Thr Ile Thr Met
370 375 380
Gly Leu Met Ala Thr Val Phe Gly Asn Ser Gly Val Thr Gln Gln Pro
385 390 395 400
Val Ala Gly Thr Leu Asp Ser Asp Asn Pro Ser Pro Ser Val Ser Ala
405 410 415
Leu Gln Pro Leu Ser Val Phe Asn Ala Tyr Arg Ala Gln Glu Leu Ala
420 425 430
Ser Asn Glu Gln Ala Leu Ser Ile Pro Ile Leu Ala Leu Ala Ile Arg
435 440 445
Pro Gly Gln Gln Val Asp Asn Ile Ala Leu Leu Leu Asn Thr Ser Gln
450 455 460
Thr Pro Asn Gly Ala Ser Phe Ser Val Val Glu Gly Gly Val Ser Ile
465 470 475 480
Ser Ile Thr Gly Thr Gln Asp Leu Pro Gly Leu Asp Met Ser Leu Tyr
485 490 495
Leu Val Ser Ile Ser Ala Asp Ala Asn Ala Ala Pro Gly Asp Arg Thr
500 505 510
Val Leu Ala Ser Val Pro Gly Met Ala Ser Thr Gln Gln Ala Ala Ile
515 520 525
Gly Leu Leu Thr Val Gly Gly Pro Thr Leu Val Thr Ser Gln Thr Gly
530 535 540
Pro Ser Lys Pro Asn Phe Arg Arg Gly Arg Gly
545 550 555
<210> 76
<211> 451
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas orientalis
<400> 76
Met Arg Arg Arg Pro Thr Val Leu Leu Gly Leu Ala Leu Leu Leu Gly
1 5 10 15
Leu Pro Ala Thr Gln Ala Met Gly Ala Pro Leu Cys Gly Ser Pro Phe
20 25 30
Val Pro Ser Pro Thr Leu Gln Pro Thr Leu Ala Asn Pro Asn Phe Ser
35 40 45
Ala Ser Asp Ser Ala Val Asp Cys Phe Met Trp Gln Thr Met Val Tyr
50 55 60
Leu Asn Trp Pro Ala Thr Pro Gly Gln Arg Gly Val Pro Asn Ala Ala
65 70 75 80
Ala Ser Leu Gly Ser Pro Gly Pro Ser Val Trp Gln Thr Tyr Lys Asp
85 90 95
Tyr Asn Glu Leu Tyr Leu Pro Asn Gly Gln Gln Pro Pro Ala Trp Asn
100 105 110
Asp Asn Phe Leu Ser Val Gln Arg Leu Gln Thr Arg Gly Val Ala Arg
115 120 125
Ala Leu Pro Ser Ile Arg Leu Leu Asn Ser Thr Ser Lys Val Phe Arg
130 135 140
Ala Ala Asn Ala Asn Glu Ser Pro Ala Leu Arg Glu Ile Glu Gln Val
145 150 155 160
Gly Gly Gly Val Leu Tyr Asp Gln Ala Gly Ser Pro Val Tyr Tyr Glu
165 170 175
Met Leu Val Asn Glu Val Asn Phe Asp Phe Ile Tyr Asn Asn Gln Leu
180 185 190
Tyr Asn Pro Ala Gln Gln Asn Leu Tyr Ala Lys Gln Lys Gly Ile Val
195 200 205
Leu Pro Asn Asn Ser Ile Glu Ile Lys Ala Ala Trp Lys Val Leu Ser
210 215 220
Ala Pro Asp Asn Pro Gln Arg Phe Leu Thr Ala Gln Ala Leu Leu Pro
225 230 235 240
Gly Ser Ser Thr Pro Val Thr Val Gly Leu Val Gly Leu His Val Phe
245 250 255
Gln Met Pro Ser Ser Ala Phe Asn Gln Gly Phe Trp Ala Thr Phe Gln
260 265 270
Gln Leu Asp Asn Ala Pro Thr Val Ala Gly Ala Ser Pro Gly Ala His
275 280 285
Tyr Ser Phe Asn Asn Pro Gln Cys Ala Pro Ala Gln Cys Pro Pro Asn
290 295 300
Asp Lys Thr Ser Asn Pro Thr Gln Val Val Gln Asn Phe Pro Pro Thr
305 310 315 320
Pro Glu Ala Gln Asn Ile Asn Gln Tyr Met Gln Asn Leu Ile Ala Gln
325 330 335
Gln Ala Pro Gly Ser Ala Leu Gln Tyr Tyr Gln Leu Val Asp Val Gln
340 345 350
Trp Pro Thr Ser Pro Gln Ala Ile Gly Gln Pro Gly Ala Thr Ala Pro
355 360 365
Ala Pro Ser Gly Thr Pro Asn His Asp Thr Leu Ile Asn Pro Val Leu
370 375 380
Glu Thr Phe Leu Gln Thr Asn His Thr Ser Cys Leu Gly Cys His Val
385 390 395 400
Tyr Ala Ser Val Ala Ala Asp Gly Ser Lys Pro Ala Thr Asp Tyr Gln
405 410 415
Ala Ser Phe Ser Phe Leu Leu Gly His Ala Lys Ser Pro Ala Leu Gly
420 425 430
Ser Asn Leu Lys Ser Leu Ala Gln Gln Ile Glu Asp Ala Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Gln His
450
<210> 77
<211> 556
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas sp. PKRS11
<400> 77
Met Ala Lys Leu Ala Gln Phe Ser Pro Pro Ala Arg Ile Gln Asp Phe
1 5 10 15
Ser Asn Asp Pro Ala Gln Gln Glu Cys Leu Asn Ala Ala Trp Ser Gly
20 25 30
Asn Ile Asn Arg Trp Val Asn Ala Ala Leu Leu Gly Asp Val Trp Asp
35 40 45
Arg Ile Asn Tyr Gly Pro Arg Pro Ala Phe Tyr Asn Pro Leu Val Thr
50 55 60
Asp Thr Pro Asp Thr Ala Gly Asn Val Pro Ile Thr Trp Asn Ala Phe
65 70 75 80
Pro Gly Arg Leu Gln Ala Leu Phe Pro Asn Gln Gly Ala Ser Trp Gln
85 90 95
Gln Trp Ala Asp Gln Gly Val Pro Asp Lys Val Thr Thr Asp Leu Cys
100 105 110
Ser Gly Lys Pro Ile Asp Pro Ala Pro Tyr Ser Pro Thr Gly Pro Arg
115 120 125
Gly Trp Gln Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser Val Thr Arg Asn Gly Ala
130 135 140
Gly Gln Ile Thr Ser Val Met Phe Thr Cys Glu Asn Pro Glu Tyr Trp
145 150 155 160
Met Thr Leu Trp Gln Val Asp Pro Gly Lys Val Leu Gln Ile Tyr Gln
165 170 175
Gln Val Ile Asn Pro Ala Val Gln Leu Ser Asp Leu Cys Leu Lys Asp
180 185 190
Ser His Gly Gln Thr Val Asn Asp Pro Leu Thr Gly Gln Pro Cys Tyr
195 200 205
Asn Pro Leu Asn Lys Trp Asn Ser Gly Thr Arg Thr Leu Ala Asn Ser
210 215 220
Gly Gly Ala Met His Leu Thr Ser Ser Pro Asn Thr Leu Gly Ala Glu
225 230 235 240
Tyr Asp Leu Ala Ala Ala Ala Thr Met Pro Arg Glu Lys Asp His Asp
245 250 255
Pro Val Thr Ser Ala Ala Ala Leu Val Cys Phe Ala Arg Tyr Gly Arg
260 265 270
Ile Gly Arg His Ser Asp Pro Thr Ile Gly Gln Asn Val Asn Gln Tyr
275 280 285
Ala Asn Tyr Thr Pro Thr Leu Pro His Pro Gln Ala Thr Leu Ala Asp
290 295 300
Pro Pro Gly Leu Tyr Met Gln Thr Pro Gln Phe Ser Asp Tyr Val Thr
305 310 315 320
Pro Asp Asn Thr Pro Ala Gln Thr Phe Trp Thr Val Val Arg Gly Ser
325 330 335
Leu Lys Asp Pro Asn Thr Ser Glu Asp Ile Asp Arg Ile Leu His Ala
340 345 350
Thr Phe Ser Val Pro Pro Glu Leu Gly Tyr Thr Val Ser Asp Ile Lys
355 360 365
Ile Gly Asn Gln Pro Ile Arg Tyr Gly Ser Gln Ile Ala Ala Thr Ile
370 375 380
Thr Met Ala Leu Leu Ala Thr Ala Phe Pro Asn Ser Gly Val Val Gln
385 390 395 400
Thr Pro Val Gly Ala Thr Leu Asp Asn Ser Asn Pro Ser Pro Ser Val
405 410 415
Ser Ala Leu Gln Ala Leu Ala Val Phe Thr Ala Tyr Arg Ala Gln Glu
420 425 430
Leu Ala Ser Asn Glu Gln Pro Leu Ser Ile Pro Val Leu Ala Leu Ala
435 440 445
Val Ser Pro Gly Gln Gln Val Ser Asn Ile Ala Leu Leu Leu Asn Thr
450 455 460
Ser Asp Thr Pro Asp Gly Ala Val Phe Thr Val Pro Glu Gly Gly Val
465 470 475 480
Ser Ile Arg Ile Asp Gly Thr Gln Ala Leu Pro Asn Ala Glu Leu Ser
485 490 495
Leu Tyr Gln Val Thr Leu Cys Val Asp Ala Asn Ala Ala Ile Gly Asp
500 505 510
Arg Ser Ile Leu Ala Ser Val Pro Ser Met Pro Ala Thr Gln Gln Ala
515 520 525
Ala Ile Gly Leu Leu Thr Val Val Ala Pro Pro Gln Val Arg Leu Ala
530 535 540
Gly Gly Pro Arg Lys Pro His Ala Arg His Ser Arg
545 550 555
<210> 78
<211> 448
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas sp. PKRS11
<400> 78
Met Arg Ala Ile Leu Ala Leu Leu Leu Tyr Ala Gly Leu Ser Leu Ala
1 5 10 15
Pro Val Ala Ala Arg Ala Ala Gly Asn Pro Cys Gly Ser Pro Phe Ser
20 25 30
Pro Glu Pro Val Ile Gln Pro Val Leu Ala Asn Pro Gln Ile Ser Asn
35 40 45
Leu Asp Pro Ser Val Asp Cys Phe Met Trp Gln Thr Met Val Tyr Leu
50 55 60
Asn Trp Pro Ala Gln Ala Gly Gln Arg Gly Leu Pro Asn Thr Asp Ala
65 70 75 80
His Leu Gly Asp Pro Gly Pro Thr Val Trp Gln Thr Phe Lys Asp Phe
85 90 95
Asn Glu Leu Tyr Leu Pro Gly Gly Gln Arg Pro Ala Pro Trp Asn Asp
100 105 110
Asn Phe Leu Thr Met Gln Arg Leu Glu Leu Arg Gly Val Glu Arg Pro
115 120 125
Arg Pro Ser Ile Arg Leu Leu Asn Ser Thr Ser Lys Val Phe Arg Asn
130 135 140
Ala Asp Ala Ser Glu Gln Lys Ala Leu Asp Glu Phe Lys Gln Val Gly
145 150 155 160
Gly Gly Val Leu Tyr Asp Gln Asn Gly Gln Pro Val Tyr Tyr Glu Met
165 170 175
Leu Ile Asn Gln Ile Asn Phe Asp Tyr Ile Tyr Ser Asn Gln Leu Tyr
180 185 190
Asn Ala Ala Gln Gln Asn Leu His Ala Ala Lys Gln Gly Ile Val Leu
195 200 205
Pro Ser Asn Ser Ile Glu Leu Lys Ala Ala Trp Lys Val Leu Ser Pro
210 215 220
Gln Glu Ala Ala Pro Pro Leu Arg Phe Leu Thr Ala Gln Ala Leu Leu
225 230 235 240
Pro Gly Ser Gln Val Pro Val Thr Val Gly Leu Val Gly Leu His Val
245 250 255
Phe Gln Met Pro Ser Lys Asp Phe Ala Gln Gly Phe Trp Ala Thr Phe
260 265 270
Ser Gln Val Asp Asn Ala Pro Thr Leu Asn Thr Pro Gly Gln Ala His
275 280 285
Tyr Ser Phe Asn Asn Pro Gln Cys Ser Gln Cys Pro Val Asn Asp Leu
290 295 300
Gly Ser Lys Pro Thr Gln Val Val Gln Val Gln Ala Asn Ala Val Tyr
305 310 315 320
Ala Gln Ala Val Asn Gln Tyr Met Gln Ala Leu Ile Gln Gln Gln Ala
325 330 335
Pro Asn Ser Ala Leu Gln Tyr Tyr Gln Leu Ile Asn Val Gln Trp Pro
340 345 350
Asn Ser Ser Val Pro Ile Gly Gln Pro Gly Gln Pro Thr Pro Ala Pro
355 360 365
Thr Gly Ser Pro Ser Thr Asp Thr Leu Val Asn Pro Val Leu Glu Thr
370 375 380
Phe Met Gln Val Ser Asn Met Ser Cys Leu Gly Cys His Lys Ser Ala
385 390 395 400
Ser Val Ala Asp Asn Gly Thr Gln Pro Pro Ser Gly Tyr Gln Ala Ser
405 410 415
Tyr Ser Phe Leu Leu Gly His Ala Gln Asn Pro Pro Pro Gln Gly Ser
420 425 430
Leu Lys Ser Leu Ala Arg Gln Val Glu Glu Ala Ser Thr Ala Arg Gln
435 440 445
<210> 79
<211> 96
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas Antarctica
<400> 79
Met Lys Leu Ser Asn Val Leu Leu Leu Ser Ile Val Phe Ala Trp Gln
1 5 10 15
Gly Met Ala Phe Ala Asp Thr Gln Lys Ser Asn Ala Glu Thr Leu Leu
20 25 30
Ser Asn Asp Lys Pro Pro Leu Thr Gln Ala Ala Gln Glu Lys Glu Gln
35 40 45
Glu Asn Val Glu Ala Asp Arg Asn Glu Cys Trp Ser Ala Lys Asn Cys
50 55 60
Ser Gly Lys Ile Leu Asn Asn Lys Asp Ala His Asn Cys Lys Leu Ser
65 70 75 80
Gly Gly Lys Ser Trp Arg Ser Lys Thr Thr Gly Gln Cys Thr Asn Leu
85 90 95
<210> 80
<211> 96
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas orientalis
<400> 80
Met Lys Met Ser Ser Val Leu Leu Met Ser Ile Ala Phe Val Cys Gln
1 5 10 15
Gly Met Val Phe Ala Asp Thr Gln Lys Ser Asn Thr Glu Thr Leu Phe
20 25 30
Ser Asn Asp Lys Pro Pro Leu Ile Gln Thr Ala Gln Glu Gln Glu Gln
35 40 45
Lys Glu Val Glu Val Asp Arg Asn Gln Cys Trp Ser Ala Lys Asn Cys
50 55 60
Ser Gly Lys Ile Leu Asn Asn Lys Asp Ala His Asn Cys Lys Leu Ser
65 70 75 80
Gly Gly Lys Ser Trp Arg Ser Lys Thr Thr Gly Gln Cys Thr Asn Leu
85 90 95
<210> 81
<211> 95
<212> БЕЛОК
<213> Enterobacter asburiae
<400> 81
Met Lys Thr Leu Val Ile Ala Ile Leu Thr Ala Val Leu Cys Gln Gly
1 5 10 15
Met Ala Met Ala Asp Thr Gln Lys Pro Ala Thr Gly Ala Leu Pro Ala
20 25 30
Asn Glu Lys Pro Pro Leu Val Gln Pro Ala Asp Glu His Lys Thr Ser
35 40 45
Glu Ala Asn Ala Asn Arg Asn Glu Cys Trp Ser Ala Lys Asn Cys Thr
50 55 60
Gly Lys Ile Leu Asn Asn Lys Asp Ala His Asn Cys Lys Asn Ser Gly
65 70 75 80
Gly Lys Ser Trp Arg Ser Lys Thr Thr Gly Gln Cys Thr Asn Leu
85 90 95
<210> 82
<211> 95
<212> БЕЛОК
<213> Enterobacter sp.
<400> 82
Met Lys Thr Leu Val Ile Ala Ile Leu Thr Ala Val Leu Cys Gln Gly
1 5 10 15
Met Ala Met Ala Glu Thr Gln Gln Pro Ala Ser Gly Ala Leu Pro Ala
20 25 30
Asn Glu Lys Pro Pro Leu Val Leu Thr Ala Asp Glu Lys Lys Ala Ser
35 40 45
Glu Ala Asn Ala Asp Arg Asn Glu Cys Trp Ser Ala Arg Asn Cys Ser
50 55 60
Gly Lys Ile Leu Asn Asn Lys Asp Ala His Asn Cys Lys Asn Ser Gly
65 70 75 80
Gly Lys Ser Trp Arg Gly Lys Asn Ser Ser Gln Cys Thr Asn Leu
85 90 95
<210> 83
<211> 105
<212> БЕЛОК
<213> Acidovorax avenae
<400> 83
Met Lys Lys Leu Leu Leu Ile Ala Ser Leu Leu Val Ser Ile Ser Gly
1 5 10 15
Ala Asn Val Phe Ala Gln Ala Pro Ser Ser Gly Asp Ala Pro Ala Ala
20 25 30
Val Ala Gly Lys Gln Asp Gly Ala Ser His Lys Asp Thr Glu Gln Ala
35 40 45
Ala Asn Val Glu Cys Asp Val Asn Ala Thr Val Gln Gln Cys Cys Ser
50 55 60
Ala Ala Lys Cys Gln Gly Lys Val Leu Ser Asn Arg Asp Ala His Asn
65 70 75 80
Cys Lys Asp Lys Ser Lys Gly Lys Ser Trp His Ala Ala Ala Gln Gly
85 90 95
Gly Gln Pro Ala Ala Cys Gln Arg Met
100 105
<210> 84
<211> 94
<212> БЕЛОК
<213> Serratia plymuthica
<400> 84
Met Gln Cys Asn Gly Ala Ile Leu Lys Leu Leu Cys Ala Gln Arg Lys
1 5 10 15
Asp Gln Phe Met Asn Leu Arg Ile Arg Thr His Ala Met Lys Asn Leu
20 25 30
Ser Ile Leu Val Val Leu Ser Ser Cys Leu Leu Leu Pro Leu Thr Ala
35 40 45
Ser Ala Ala Ala Gly Thr Cys Tyr Ser Ala Lys Asn Cys Ser Gly Lys
50 55 60
Val Leu Ser His Arg Asp Ala His Asn Cys Lys Val Lys Asp Lys Gly
65 70 75 80
Lys Ser Trp Arg Ser Asp Ile Thr Asn Gln Cys Thr Asn Leu
85 90
<210> 85
<211> 93
<212> БЕЛОК
<213> Serratia liquefaciens
<400> 85
Met Arg Glu Glu Ala Ile Leu Lys Leu Leu Cys Ala Gln Arg Lys Asp
1 5 10 15
Gln Phe Met Asn Ser Arg Ile Arg Thr His Ala Met Lys Asn Leu Ser
20 25 30
Ile Leu Val Val Leu Ser Ser Cys Leu Leu Leu Pro Leu Thr Ala Ser
35 40 45
Ala Ala Ser Gly Lys Cys Tyr Ser Ala Lys Asn Cys Ser Gly Lys Val
50 55 60
Leu Ser Lys Arg Asp Ala His Asn Cys Lys Val Lys Asp Arg Gly Lys
65 70 75 80
Ser Trp Leu Ser Asp Val Thr Gly Lys Cys Thr Asn Leu
85 90
<210> 86
<211> 78
<212> БЕЛОК
<213> Serratia sp.
<400> 86
Met Lys Leu Lys Tyr Glu Arg Ile Arg Ile Tyr Val Met Lys Ser Leu
1 5 10 15
Ser Ile Val Ile Thr Leu Ala Ser Cys Leu Leu Leu Pro Leu Thr Ala
20 25 30
Ser Ala Ala Ala Gly Thr Cys Tyr Ser Ala Lys Asn Cys Ser Gly Lys
35 40 45
Val Leu Ser His Arg Asp Ala His Asn Cys Lys Val Lys Asp Lys Gly
50 55 60
Lys Ser Trp Arg Ser Asp Ile Thr Gly Gln Cys Thr Asn Leu
65 70 75
<210> 87
<211> 75
<212> БЕЛОК
<213> Serratia sp.
<400> 87
Met Asn Ser Arg Ile Arg Thr Tyr Ala Met Lys Asn Leu Ser Ile Leu
1 5 10 15
Val Val Leu Ser Ser Cys Leu Leu Leu Pro Leu Thr Ala Ser Ala Ala
20 25 30
Ala Gly Thr Cys Tyr Ser Ala Lys Asn Cys Ser Gly Lys Val Leu Ser
35 40 45
His Arg Asp Ala His Asn Cys Lys Val Lys Asp Lys Gly Lys Ser Trp
50 55 60
Arg Ser Asp Ile Thr Gly Lys Cys Thr Asn Leu
65 70 75
<210> 88
<211> 89
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas chlororaphis
<400> 88
Met Ser Ala Gln Glu Asn Phe Val Gly Gly Trp Thr Pro Tyr His Lys
1 5 10 15
Leu Thr Pro Lys Asp Gln Glu Val Phe Lys Glu Ala Leu Ala Gly Phe
20 25 30
Val Gly Val Gln Tyr Thr Pro Glu Leu Val Ser Thr Gln Val Val Asn
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Tyr Gln Ser Lys Ala Thr Leu Pro Gly Ser Ser
50 55 60
Glu Ser Trp Gln Ala Val Val Glu Ile Tyr Ala Pro Ile Lys Gly Lys
65 70 75 80
Pro His Ile Thr Gln Ile His Arg Ile
85
<210> 89
<211> 89
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas chlororaphis
<400> 89
Met Ser Ala Gln Glu Asn Phe Val Gly Gly Trp Thr Pro Tyr His Lys
1 5 10 15
Leu Thr Pro Lys Asp Gln Glu Val Phe Lys Glu Ala Leu Ala Gly Phe
20 25 30
Val Gly Val His Tyr Thr Pro Glu Gln Val Ser Thr Gln Val Val Asn
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Tyr Leu Ser Lys Ala Thr Val Pro Gly Ser Ser
50 55 60
Asp Ser Trp Gln Ala Val Val Glu Ile Tyr Ala Pro Ile Lys Gly Lys
65 70 75 80
Pro His Ile Thr Gln Ile His Arg Ile
85
<210> 90
<211> 89
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas brassicacearum
<400> 90
Met Ser Ala Gln Glu Asn Phe Val Gly Gly Trp Thr Pro Tyr His Glu
1 5 10 15
Leu Thr Pro Lys Asp Arg Glu Val Phe Lys Glu Ala Leu Ala Gly Phe
20 25 30
Val Gly Val Gln Tyr Thr Pro Glu Lys Val Ser Thr Gln Val Val Asn
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Tyr Leu Ser Lys Ala Thr Val Pro Gly Ser Ser
50 55 60
Asp Ser Trp Gln Ala Val Val Glu Ile Tyr Ala Pro Ile Lys Gly Lys
65 70 75 80
Pro His Ile Thr Gln Ile His Arg Ile
85
<210> 91
<211> 89
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas chlororaphis
<400> 91
Met Ser Ala Gln Glu Asn Phe Val Gly Gly Trp Thr Pro Tyr His Glu
1 5 10 15
Leu Thr Pro Lys Asp Arg Glu Val Phe Lys Glu Ala Leu Ala Gly Phe
20 25 30
Val Gly Val His Tyr Thr Pro Glu Lys Val Ser Thr Gln Val Val Asn
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Tyr Leu Ser Lys Ala Thr Val Pro Gly Ser Ser
50 55 60
Asp Ser Trp Gln Ala Val Val Glu Ile Tyr Ala Pro Ile Lys Gly Lys
65 70 75 80
Pro His Ile Thr Gln Ile His Arg Ile
85
<210> 92
<211> 89
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas chlororaphis
<400> 92
Met Ser Ala Gln Glu His Phe Val Gly Gly Trp Thr Pro Tyr His Glu
1 5 10 15
Leu Thr Pro Lys Asp Lys Glu Val Phe Lys Glu Ala Leu Ala Gly Phe
20 25 30
Val Gly Val His Tyr Thr Pro Glu Lys Val Ser Thr Gln Val Val Asn
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Tyr Leu Ser Lys Ala Thr Leu Pro Gly Ser Ser
50 55 60
Asp Ser Trp Gln Ala Val Val Glu Ile Tyr Ala Pro Ile Lys Gly Lys
65 70 75 80
Pro His Ile Thr Gln Ile His Arg Ile
85
<210> 93
<211> 89
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 93
Met Ser Ala Gln Glu Asn Leu Val Gly Gly Trp Thr Pro Tyr His Glu
1 5 10 15
Leu Thr Pro Lys Asp Gln Glu Val Phe Asp Glu Ala Leu Ala Gly Leu
20 25 30
Val Gly Val His Tyr Thr Ala Glu Leu Val Ser Thr Gln Val Val Asn
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Tyr Gln Thr Lys Ala Thr Gln Pro Gly Ser Ser
50 55 60
Asn Ser Trp Gln Ala Val Val Glu Ile Tyr Ala Pro Ile Asn Gly Lys
65 70 75 80
Pro His Ile Thr Gln Ile Ile Arg Ile
85
<210> 94
<211> 89
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 94
Met Ser Ala Gln Glu Asn Leu Val Gly Gly Trp Thr Pro Tyr His Glu
1 5 10 15
Leu Thr Pro Lys Asp Gln Glu Val Phe Asp Glu Ala Leu Ala Gly Leu
20 25 30
Val Gly Val His Tyr Thr Ala Glu Leu Val Ser Thr Gln Val Val Asn
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Tyr Gln Ala Lys Ala Thr Gln Pro Gly Ser Pro
50 55 60
Asn Ser Trp Gln Ala Val Val Glu Ile Tyr Ala Pro Ile Asn Gly Lys
65 70 75 80
Pro His Ile Thr Gln Ile Ile Arg Ile
85
<210> 95
<211> 89
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 95
Met Ser Ala Gln Glu Asn Leu Val Gly Gly Trp Thr Pro Tyr His Glu
1 5 10 15
Leu Thr Pro Lys Asp Gln Glu Val Phe Asp Glu Ala Leu Ala Gly Leu
20 25 30
Val Gly Val His Tyr Thr Ala Glu Leu Val Ser Thr Gln Val Val Asn
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Tyr Gln Ala Gln Ala Thr Gln Pro Gly Ser Pro
50 55 60
Asn Ser Trp Gln Ala Val Val Glu Ile Tyr Ala Pro Ile Asn Gly Lys
65 70 75 80
Pro His Ile Thr Gln Ile Ile Arg Ile
85
<210> 96
<211> 89
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 96
Met Ser Ala Gln Glu Asn Leu Val Gly Gly Trp Thr Pro Tyr His Glu
1 5 10 15
Leu Thr Pro Lys Asp Gln Glu Val Phe Asp Glu Ala Leu Ala Gly Leu
20 25 30
Val Gly Val His Tyr Thr Ala Glu Leu Val Ser Thr Gln Val Val Asn
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Tyr Gln Ala Lys Ala Thr Gln Pro Gly Ser Pro
50 55 60
Asn Ser Trp Gln Ala Val Val Glu Ile Tyr Ala Pro Ile Asn Gly Lys
65 70 75 80
Pro Tyr Val Thr Gln Ile Ile Arg Ile
85
<210> 97
<211> 89
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 97
Met Ser Ala Gln Glu Asn Leu Val Gly Gly Trp Thr Gly Tyr His Glu
1 5 10 15
Leu Thr Pro Lys Asp Lys Glu Val Phe Lys Glu Ala Leu Glu Gly Leu
20 25 30
Val Gly Val His Tyr Thr Pro Glu Leu Val Ser Ser Gln Ile Val Asn
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Tyr Gln Thr Lys Ala Thr Gln Pro Gly Ser Ser
50 55 60
Thr Ser Trp Gln Ala Ile Val Glu Ile Tyr Ala Pro Ile Lys Gly Lys
65 70 75 80
Pro His Ile Thr Gln Ile Ile Arg Ile
85
<210> 98
<211> 89
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas rhodesiae
<400> 98
Met Ser Ala Gln Glu Asn Leu Val Gly Gly Trp Thr Pro Tyr His Glu
1 5 10 15
Leu Thr Pro Lys Asp Gln Glu Val Phe Asp Val Ala Leu Ala Gly Leu
20 25 30
Val Gly Val His Tyr Thr Ala Glu Leu Val Ser Thr Gln Val Val Asn
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Tyr Gln Ala Lys Ala Thr Gln Pro Gly Ser Pro
50 55 60
Asn Ser Trp Gln Ala Val Val Glu Ile Tyr Ala Pro Ile Asn Gly Lys
65 70 75 80
Pro Tyr Val Thr Gln Ile Ile Arg Ile
85
<210> 99
<211> 89
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas-sp
<400> 99
Met Thr Ala Gln Glu His Leu Val Gly Gly Trp Thr Pro Tyr His Lys
1 5 10 15
Leu Thr Pro Lys Asp Gln Glu Val Phe Lys Glu Ala Leu Ala Gly Phe
20 25 30
Val Gly Val Ser Tyr Thr Pro Glu Glu Val Ser Ser Gln Val Val Asn
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Tyr Lys Ser Lys Ala Thr Leu Pro Gly Ser Pro
50 55 60
Asn Gly Trp Gln Ala Ile Val Glu Ile Tyr Ala Pro Thr Asn Gly Lys
65 70 75 80
Pro His Ile Thr Gln Ile His Arg Ile
85
<210> 100
<211> 91
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 100
Met Ser Ala Gln Glu Asn His Val Gly Val Gly Gly Trp Thr Ala Tyr
1 5 10 15
His Glu Leu Thr Pro Lys Asp His Ala Val Phe Lys Glu Ala Leu Glu
20 25 30
Gly Phe Val Gly Val Gln Tyr Thr Pro Glu Thr Val Ser Thr Gln Val
35 40 45
Val Ala Gly Thr Asn Tyr Arg Tyr His Ser Lys Ala Gln Gln Pro Gly
50 55 60
Ser Pro Ala Ile Trp Ala Ala Ile Val Glu Ile Tyr Ala Pro Leu Lys
65 70 75 80
Gly Lys Pro His Ile Thr Gln Ile Ile Arg Ile
85 90
<210> 101
<211> 92
<212> БЕЛОК
<213> Enterobacter-sp
<400> 101
Met Ser Glu Gln Gln Thr Leu Leu Pro Gly Gly Trp Thr Ala Tyr His
1 5 10 15
Pro Leu Thr Ala Gln Asp Arg Lys Val Phe Glu Glu Ala Leu Asn Gly
20 25 30
His Leu Gly Val Asp Tyr Glu Pro Gln Lys Val Lys Thr Gln Val Val
35 40 45
Ala Gly Thr Asn Tyr Arg Phe Leu Cys Glu Ala Ser Val Pro Pro Ser
50 55 60
Thr Ala Val Trp Glu Ala Ile Val Glu Ile Tyr Ala Pro Leu Pro Gly
65 70 75 80
Gln Gly Ala Pro His Ile Thr Gln Ile Ile Arg Ile
85 90
<210> 102
<211> 89
<212> БЕЛОК
<213> Shewanella denitrificans
<400> 102
Met Ser Asn Asn Glu Thr Ile Val Gly Gly Trp Thr Ala Tyr Asn Ala
1 5 10 15
Ile Thr Ser Ala Glu Arg Glu Ile Phe Asn Lys Ala Met Glu Gly Phe
20 25 30
Val Gly Val Ser Tyr Met Pro Glu Thr Val Ser Thr Gln Val Val Ala
35 40 45
Gly Met Asn Tyr Arg Phe Lys Cys Glu Ala Ser Met Pro Pro Ser Glu
50 55 60
Val Leu Trp Glu Ala Ile Val Glu Ile Tyr Gln Pro Leu Lys Gly Ile
65 70 75 80
Pro His Ile Thr Asn Ile Thr Lys Ile
85
<210> 103
<211> 90
<212> БЕЛОК
<213> Aeromonas diversa
<400> 103
Met Ser Asp Gln Ala Val Leu Val Gly Gly Trp Thr Ala Tyr His Arg
1 5 10 15
Leu Thr Ala Glu Asp Gln Ala Val Phe Gln Glu Ala Leu Lys Gly Phe
20 25 30
Val Gly Val Glu Tyr Lys Pro Phe Glu Val Ser Thr Gln Val Val Ala
35 40 45
Gly Met Asn Tyr Arg Tyr Lys Cys Lys Thr Thr Val Pro Leu Pro Thr
50 55 60
Pro Ile His Gly Glu Ala Val Val Gln Ile Phe Gln Ser Leu Asp Gly
65 70 75 80
Ser Ala His Ile Thr Ser Ile Thr Pro Ile
85 90
<210> 104
<211> 90
<212> БЕЛОК
<213> Aeromonas salmonicida
<400> 104
Met Ser Glu Gln Ala Val Leu Val Gly Gly Trp Thr Ala Tyr His Lys
1 5 10 15
Leu Thr Ala Glu Asp Gln Ala Val Phe Asp Gln Ala Leu Lys Gly Phe
20 25 30
Val Gly Val Gln Tyr Val Pro Phe Glu Val Cys Thr Gln Val Val Ala
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Phe Lys Cys Lys Ser Thr Val Pro Leu Ala Lys
50 55 60
Pro Ile His Gly Glu Ala Val Val Gln Ile Phe Gln Ser Leu Asp Gly
65 70 75 80
Ser Ala His Ile Thr Ser Ile Thr Pro Ile
85 90
<210> 105
<211> 90
<212> БЕЛОК
<213> Aeromonas veronii
<400> 105
Met Ser Glu Gln Ala Val Leu Val Gly Gly Trp Thr Ala Tyr His Lys
1 5 10 15
Leu Thr Ala Glu Asp Gln Ala Val Phe Asp Gln Ala Leu Lys Gly Phe
20 25 30
Val Gly Val Gln Tyr Val Pro Phe Glu Val Ser Thr Gln Val Val Ala
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Phe Lys Cys Lys Ser Thr Val Pro Leu Ala Lys
50 55 60
Pro Ile His Gly Glu Ala Val Val Gln Ile Phe Lys Ser Leu Asp Gly
65 70 75 80
Asp Ala His Ile Thr Ser Ile Thr Pro Ile
85 90
<210> 106
<211> 88
<212> БЕЛОК
<213> Aeromonas molluscorum
<400> 106
Met Ser Glu Gln Ala Val Leu Leu Gly Gly Trp Thr Ala Tyr His Lys
1 5 10 15
Leu Ser Ala Lys Asp Gln Ala Val Phe Asn Gln Ala Leu Glu Gly Phe
20 25 30
Val Gly Val Gln Tyr Thr Pro Phe Glu Val Ser Thr Gln Val Val Ala
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Phe Lys Cys Lys Ser Thr Val Pro Leu Pro Asn
50 55 60
Pro Ile His Gly Glu Ala Val Val Gln Ile Phe Gln Ala Leu Phe Pro
65 70 75 80
Lys Ser Met Gln Leu Glu Trp Asn
85
<210> 107
<211> 90
<212> БЕЛОК
<213> Aeromonas aquariorum
<400> 107
Met Ser Glu Gln Ala Val Leu Leu Gly Gly Trp Thr Ala Tyr His Lys
1 5 10 15
Leu Ser Ala Lys Asp Gln Ala Val Phe Asn Gln Ala Leu Glu Gly Phe
20 25 30
Val Gly Val Gln Tyr Thr Pro Phe Glu Val Ser Thr Gln Val Val Ala
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Phe Lys Cys Lys Thr Thr Val Pro Leu Pro Asn
50 55 60
Pro Ile His Gly Glu Ala Val Val Gln Ile Phe Gln Ser Leu Asp Gly
65 70 75 80
Ser Ala His Ile Thr Ser Ile Thr Pro Ile
85 90
<210> 108
<211> 1737
<212> ДНК
<213> Pseudomonas brenneri
<400> 108
atgagcacac ccttcaaaca attcacctcc cccgccgggc aagcccccaa ggactacaac 60
aagctgggcc tggaaaacca gctgccgcag tttgaaaccg actggaacaa tgacctcacc 120
ggctggaccc agtccgcgat catcggcaac ccgtggtcgg gcctcaatga cgcgccgcgc 180
tcgggctatt acaacccgct ggtggaaggc tacggcccca ccacgccgcc ggcgattacc 240
tgggcgccct tccccaatcg gctgtggacg ttcttctaca acaacggcac ggcggtgatt 300
ccgcaattgg gcggcaaggc catgtccctg caacaggtga tggagctgac cgacaacggc 360
cagattacga tcaacaacac cctgtacatg ctctacgacc cgaacaagca aggcaccctg 420
ctgcaactgc ccgtcacccg ctgcccgacc atcgactggc aaggcaagta caaggatttc 480
tcgccctcgg ggccccgtgg ctggcttgac gaatactgcg agtggtccat cgtgcgcgat 540
gccgacggca acatgcgcaa gatcaccttc acctgcgaaa acccggcgta tttcctggcc 600
atgtggcgca ttgatccaaa tgcagtgctg ggcctgtacc gcgactacat cgacccgcag 660
gtgcagctcg aagacctcta cctgcgctac accgccgact gtccgaccgg caaagcgggc 720
gatccggtca tcgaccctac caccggccaa ccggcctacg acacggtcaa caaatggaac 780
gccggcaccg cctgcgtacc cggccaatac ggcggggcga tgcacctgac ctccggcccc 840
aacaccctga gcgccgaggt gtacctggcc gccgcggcga ccatcctgcg tccactggcc 900
agcagccaga attcccaggc attgatctgc tgcgcgcaat acgggcagaa ctaccgcaac 960
tccgacccgc atatcggttt ctcggccaac agcgtggcgg tgaataaccg gctgtccctg 1020
accaatccca tcggccttta cctgcaacaa cccaccgatt tctcggcgtg gaaaggccct 1080
caaggccagg acgtcagcca gtactggaaa atcacccgtg gcaccgccaa gtccgccgcc 1140
aacggctccg accagatcct gcaagcggtg tttgaagtgc cggtcagcgc cgggttttcg 1200
atcaacgaca tcaccatcag tggccagccg atcgactatg tgtgggtgat tgcccagcag 1260
ttgctggtgg gcctgagtgt gacaaccacg cccatcagcc cgacgccgga ttcctgcccc 1320
tgcgtgaagg atcgggtcaa cggcgtgcaa ccctggccgg tgcaactgct gcccctggat 1380
ctgttctacg ggcagtcgcc taccgacctg ccggcctggc tggcacccgg caccagcgga 1440
cagttcgccc tggtggtgca aggcgccgat ctcaagacca ccgccgagac ggcgcgggtg 1500
caattttcca atcccggcgt gacggcgcag gtcacccagt tcctgccgga tgcctccgcc 1560
atccccgggc aaaccaactc cggcggcacc cagggctact tgctgaccat caccgtaagc 1620
cccactgccg ctccggggct ggtgacggtg cgcgcgctca acccgggcga agccgataac 1680
cccagcgcga cggaacaccc atgggaatcc ggattggcgc tggtgcctgg cgcctga 1737
<210> 109
<211> 1608
<212> ДНК
<213> Pseudomonas brenneri
<400> 109
atgtccaggt tacgcttaag tgttttatcg ctgctgacca gtgtggtgct gagcctgttc 60
gccatgcagg ccgcctacgc atcccccacg tccgacgccg acgcttgcgt gcagcaacag 120
ttggtgttca atccgaaaag cggcggtttc ctgccgatta acaacttcaa cgccaccggc 180
cagagcttta tgaattgctt tggctggcag ttgttcattg ccctgaactg gccggtgaat 240
cccggttggc cagccacgcc cgccctcgcg ggtgagccgg acatgaacag tacattggcg 300
caattcggtg taccgactgc ctccgggcag ccgatgagcg tggcgcccgt gtgggccagc 360
tacaaggatg ccaacgatat cttcctgccc ggcgcgcccg cgcccaccgg ctggggcgtg 420
caaaccctgg tgccgtccaa ttgcagcacc cagggcagcc tcagggcgat atcggtgggg 480
gcgcgcaagt tcatgaccgc cacctccgaa agcgcgatca acgcgcgtca tgggtttcac 540
ctgtccagcg gcaccctcgc ctcgattcca gacccgatca tggaagcctc cggcggctgg 600
ctgacggacc agtcgcagaa cctggtgttt tttgaacgca aggtgggcaa ggccgagttc 660
gactacatcg tcagcaaagg gctgtacgac gcagccaacc agctgacagt cgcgcagaac 720
ctcgacaacc agaacccggg cgggctgtct ctgcccatcg gtgaacccat gcgctcgctg 780
ccgcccaacc cggtgccgca ggagcaactg ggagcgctgg aggtcaaggc ggcgtggcgg 840
atccttaccg gcaaacccga gctctacggg cgttacctga ccaccgtcgc ctggctcaaa 900
aacccggcca ccttgcagtg cacccaacaa gtggtgggcc tggtgggcct gcatatcatc 960
aacaagaccc aagcctcgcc caacttcatc tggaccacct tcgagcaggt ggacaacgtg 1020
ccggaaccca accaggtgcc gccacaacag acgccgcccg acagctttgc cttcaacaac 1080
ccgaactgcg gcaccggccc cgaatgcacg ccgaacgtgg cgcgtatcca gtgcaaacag 1140
caccatcccg accgcgactg caccgagccg tttccacggg accaacccgt gcagaccacc 1200
cgggaacatc cgctgcccac tgaactgcag gcgcttaacg gcgcggtgca ggccaacttt 1260
gcccagcaga gccagggcaa gtcggtgttc cagtactaca aactgatcaa cgtactctgg 1320
accctcaccc ccaacccgcc cacccagccg gaaccgggtg tcagtgcgca agtgccgctg 1380
tcctacgggc cgtttatcag ccagggcaac gtaccggtgg ccaacaccac cctggagacc 1440
tacgtccagg gcgataactg caatgcctgt catcagtacg cgaccatcgc cggcagctcc 1500
accctggctt cggacttttc gttcctgttc aacagcgccg actcggccag caagaacagc 1560
ctggtcaagc gcgtgaaagc cttccagacc ctcaaggatc aaccgtga 1608
<210> 110
<211> 1737
<212> ДНК
<213> Pseudomonas sp. Ag1
<400> 110
atgagcacac ccttcaaaca attcacctct cccgccgggc aagctcccaa ggactacaac 60
aagctgggcc tggaaaacca gttgccgcag tttgaaaccg actggaacaa cgacctcacc 120
ggctggaccc agtccgcgat catcggcaac ccgtggtcgg gcctcaatga cgcgccgcgc 180
tcgggctatt acaacccact ggtggaaggc tacggcccca ccacgccgcc ggcgattacc 240
tgggcgccct tccccaatcg gctgtggacg tttttctaca acaacggcac ggcggtgatt 300
ccacagttgg gcggcaaggc catgtccatg caacaggtga tggagctgac cgacaacggc 360
cagattacga tcaacaacac cctgtacatg ctctacgacc cgaacaagca aggcaccctg 420
ctgcaactcc ccgtcactcg ctgcccgagc atcgactggc aaggcaagta caaggatttc 480
tcgccttcgg gcccccgtgg ctggcttgac gaatattgcg agtggtccat agtgcgcgat 540
gccgacggca acatgcgcaa gatcaccttc acttgcgaaa acccggcgta tttcctggcc 600
atgtggcgca tcgatccgac tgctgtactg gggctgtatc gcgactacat cgacccgcag 660
gtgcaactcg aagacctgta cctgcgctac accgccgact gcccgaccgg taaggccggc 720
gacccggtca tcgaccccac caccggtcaa ccggcctacg acaccgtcaa caaatggaac 780
gccggcaccg cctgtgtgcc aggccaatac ggcggtgcga tgcacctgac ctccggcccc 840
aacaccctga gcgccgaggt gtacctggct gccgcggcga ccatcctgcg gccattgagc 900
agcagccaga attcccaggc gttgatctgc tgcgcgcaat acgggcagaa ctaccgcaac 960
tccgatccgc atatcggttt ctcggccaac agcgtggcag tgaataaccg gctgtcgctg 1020
acgaacccca tcggcctgta cctgcaacaa cccaccgact tctcggcgtg gaaaggcccc 1080
cagggccagg acgtcagcca gtactggaaa atcacccgtg gcaccgccaa gtccgccgcc 1140
aacggctccg accagattct gcaagcggtg tttgaagtgc cggtcagcgc cgggttttcg 1200
atcaacgaga tcaccatcag cggccagccg atcgactacg tgtgggtgat tgcccagcag 1260
ttgctggtgg gcctgagtgt gacaaccacg cccatcagcc cgacgccgga ttcctgcccg 1320
tgcgtgacgg accgggtcaa cggcgtgcaa ccctggccgg tacagctgct gccgctggac 1380
ctgttctacg ggcagtcacc caccgacctg ccggcctggc tggcacccgg caccagcggg 1440
cagtttgccc tggtggtgca aggcgccgac ctcaagacca ccgccgagac ggcgcgggtg 1500
caattctcca atcctggggt gacggcgcag gtcacaaagt tcctgccgga tgcctcggcc 1560
atccccgggc aaaccaactc cggtggcacc cagggctacc tgctgaccat caccgtaagc 1620
cccactgccg caccggggct ggtgacagtg cgcgccctca acccgggcga agccgataac 1680
cccagcgcgg cggaacaccc atgggaatcc ggattggcgc tggtgcctgg cgcctga 1737
<210> 111
<211> 1611
<212> ДНК
<213> Pseudomonas sp. Ag1
<400> 111
atgtccaggt tacgcttgag tgttttatcg ctgctgacca gtgtggtgct gagcctgttc 60
gccatgcagg ccgcctacgc atcccccact tccgacgccg acgcttgcgt gcagcaacag 120
ttggtgttca acccgaaaag cggcggcttc ctgccgatca acaacttcaa cgccaccggc 180
cagagcttca tgaattgctt tggctggcag ttgttcattg ccctgaactg gccggtgaat 240
cccggttggc cagccacacc tgccctcgcg ggtgagccgg acatgaacag taccctggcg 300
caattcggcg taccgactgc ctccgggcag ccgatgagcg tggcgccggt atgggccagc 360
tacaaggacg ccaacgatat cttcctgccc ggcgcgcccg cgcccaccgg ctggggcgtg 420
caaaccctgg tgccgtccaa ttgcagcacc cagggcagcc tcagggcgat gtcggtgggg 480
gcgcgcaagt tcatgaccgc cacctccgaa agcgcgatca acgcgcggca tgggtttcac 540
ctgtccagcg gcaccctggc ctcgattccg gacccgatca tggaagcctc cggcggctgg 600
ctgacggacc agtcgcagaa cctggtgttt tttgaacgca aggtgggcaa ggccgagttc 660
gactacatcg tcagcaaagg gctgtacgac gcggccaacc agctgaaagt cgcgcagaac 720
ctcgacaacc agaaccccgg cgggctgtcc ttgcccatcg gtgaacccat gcgctcgctg 780
ccgcccaacc cggtgccgca ggagcaactg ggagctctgg aggtcaaggc agcatggcga 840
atcctcaccg gcaaacccga gctctacggg cgttacctga ccaccgtcgc ctggctcaaa 900
aacccggcca ccttgcagtg cacccagcaa gtggtgggcc tggtgggcct gcatatcatc 960
aacaagaccc aggcctcgcc caacttcatc tggaccacct tcgagcaggt agacaacgtg 1020
ccggaacccg accaggtgcc gccacaacaa acgccgcccg acagctttgc cttcaataac 1080
ccgaactgcg gcaccggccc cgaatgcacg ccgaacgtgg cgcgtatcca gtgcaagcag 1140
cagcatccgg accgcgactg caccgagccg tttccacggg accaacccgt gcagaccacc 1200
cgggaacatc cgctgcccac tgaactgcag gcgcttaacg gcgcggtgca ggccaatttt 1260
gcccagcaga gccagggcaa gtcggtgttc cagtactaca aactgatcaa cgtactctgg 1320
accctcaccc ccaacccgcc cacccagccg gaaccgggtg tcagtgcgca agtgccgctg 1380
tcctacgggc cgtttatcag ccagggcaac gtaccggtgg ccaacaccac cctggagacc 1440
tacgtccagg gcgataactg caatgcctgt catcagtacg cgaccatcgc cggcagctcg 1500
accctggcct cggacttttc gttcctgttc aacagtgccg attcggccag caagaaaagc 1560
ctggtcaagc gcgtaaaagc cttccagacc ctcaaggacg gttcaccctg a 1611
<210> 112
<211> 1740
<212> ДНК
<213> Pseudomonas sp. PAMC 25886
<400> 112
atgagcacac ccttcaatca attcacctcg cccgccgggc aagcccccaa ggactacaac 60
aagctgggcc tggaaaacca gttgccgcag tttgaaaccg actggaacaa cgacctcacc 120
ggctggaccc agtccgcgat catcggcaac ccgtggtcgg gcctcaatga cgcgccgcgc 180
tcgggctatt acaacccgct ggtggaaggc tacggcccca ccacgccacc ggcgatcacc 240
tgggcgccct tccccaaccg gctgtggacg ttcttctaca acaatggcac cgcggtgatt 300
ccgcaattgg gcggcaaggc catgacgttg cagcaggtga tggagctgac cgacaacggc 360
cagataaccc tcaacaacac cttgtacacg ctctacgatc cgaacaagca aggcaccctg 420
ctgcaactgc ccgtgacccg ctgcccgagc atcgactggc aaggcaagta caaggatttc 480
tcgccctcgg ggccccgtgg ctggctggac gaatattgcg agtggtcgat cgtgcgcgac 540
cccggtaccc agaacatgcg caagatcacc tttacctgcg aaaacccggc gtatttcctc 600
gccatgtggc gcatcgaccc gaacgcggtg ctgggcctgt atcgcgacta catcgacccg 660
caggtgcaac tcgaggacct gtacttgcga tacaccgccg actgcccgac cggcaacaaa 720
ggcgatccgg tcatggaccc caccaccggc caaccggcct atgacacggt caacaaatgg 780
aacgccggca ccgcctgcgt gcccggccaa tatggcgggg caatgcacct gacctccggc 840
cccaataccc tgagcgccga ggtgtacctg gcggccgcag caaccatcct gcgtccactg 900
gccagcagcc agaattccca ggcgttgatc tgctgcgcgc aatacgggca gaactaccgc 960
aactccgacc cgcatatcgg cttttcggcc aacagcgtgg cggtgaataa ccggctgtcc 1020
ctgaccaacc ccatcggcct gtacctgcaa caacccaccg acttctcggc gtggaaaggt 1080
cctcagggcc aggacgtcag ccagtactgg aaaatcaccc ggggcaccgc aaaatctgcg 1140
gccaacggct ccgaccagat cctgcaggcg gtgttcgaag tgccggtcag cgccgggttc 1200
tcgatcaacg acatcaccat cagcggccag tccatcgact acgtgtgggt gattgcccag 1260
caactgctgg tggggctgag cgtgaccacc acgcccatca gcccgacacc ggaatcctgc 1320
ccgtgcgtga ccgatcgggt caccggtgtg caaccctggc cggtacaact gctgccgctg 1380
gatctgttct acgggcagtc gcccaccgac ctgcccgcgt ggctggcacc cggtaccagc 1440
gggcagtttg ccctggtggt gcaaggcgcc gacctcaaga ccaccgccga gacggcgcgg 1500
gtgcagtttt ccaatcccgg cgtcacggcg gtggtcacga agttcctgcc cgacgcctcg 1560
gccatccccg ggcaaaccaa ctccggcggc acccagggct acctgctgac catcaccgtg 1620
agccccaccg ccgcaccggg gctggtgacg gtgcgcgcgc tcaacccggg cgaagccgat 1680
aaccccagcg cggcgcagca cccatgggaa tccgggttgg cgctggtgcc tggcgcctga 1740
<210> 113
<211> 1608
<212> ДНК
<213> Pseudomonas sp. PAMC 25886
<400> 113
atgtccaggt tacgcttgag tgttttatcg ctgctgacca gtgtggtgct gagcctgttt 60
gcggtgcagt cggcctatgc gacgccacaa tccgatgccg acgcctgcgt ccagcaacag 120
ttggtgttca acccggccag cggtggattc ctgccggtca ataacttcaa cgccaccggc 180
cagagcttta tgaactgctt cggctggcag ttgttcattg ccctgaactg gccggtgaat 240
cccggttggc cagccacgcc cgccctggcg ggtgagccgg acatgcacag cagcctcgcc 300
cagttcggcg tgccgcccgc ctccgggcag ccgatgaccg tggcgccggt gtgggccagt 360
tacaaggacg ccaacgatat cttcctgccc ggcgcccccg tgcccaccgg atggggcgtg 420
caaaccctgg taccgtccaa ttgcagcacc cagggcagcc tcaaggcgat ggcggtgggg 480
gcgcgcaagt tcatgaccgc cacctcggaa agcgcgatca acgcgcggca cgggtttcac 540
ctgtccagcg gcaccctggc ctcgattccg gacccgatca tggaagcctc cggcggctgg 600
ctgacggacc agtcgaagaa cctggtgttt tttgaacgca aggtcggcaa ggccgagttt 660
gactacatcg tcagcaaagg gctgtacgac gccgccaacc agctgacagt ggcgcagaac 720
ctcgacaacc agaacccggg cgggctgtcc ctgcccatcg gtgaacccat gcgctcgctg 780
ccgccagacc cggtgccgca ggagcaactc ggggccctgg aggtcaaggc cgcgtggcgg 840
atcctcaccg gtaaacccga gctctacggg cgctacctga ccaccgtcgc ctggctcaaa 900
aacccggcca cgttgcagtg cacccagcaa gtggtgggcc tggtgggcct gcacatcatc 960
aacaagaccc aggcttcgcc caacttcatc tggaccacct tcgagcaggt ggacaacgtg 1020
ccggaacccg accaggtgcc gccacagcag acaccgcccg acagctttgc cttcaacaac 1080
ccgaactgtg gcaccggccc cgaatgcacg ccgaacgtgg cgcgtatcca gtgcaaacag 1140
catcatcccg accgcgactg caccgagccg tatccacgtg accaaccggt gcaaaccacc 1200
cgggaacatc cgctgcccac tgagctgcag gccctgaacg gcgcggtgca ggccaacttc 1260
gctcagcaga gccagggcaa gtcggtgttc cagtactaca aactgatcaa cgtgctctgg 1320
accctcacgc ccaacccgcc cacccagccg gagccgggcg tcagcgcgca ggtgccgctg 1380
tcctacgggc cgtttatcag ccagggcaat gtgcccgtgg ccaacaccac cctggagacc 1440
tacgtccagg gcgacaactg caacgcctgt caccagtacg cgaccatcgc cggcagctcg 1500
accctggcct cggacttttc gttcctgttc aacagcgccg actcggccag caagaaaagc 1560
ctggtcaagc gggtgaaggc gttcgagacc ctcaaggacc agccctga 1608
<210> 114
<211> 1740
<212> ДНК
<213> Pseudomonas sp. PAMC 25886
<400> 114
atgagcacac ccttcaaaca gttcacctcg cccgccgggc aagcgcccaa ggactacaac 60
aagctgggcc tggaaaacca gttgccgcag tttgaaaccg actggaacaa cgacctcacc 120
ggctggaccc agtccgcgat catcggcaac ccgtggtcgg gcctcaatga cgcgccgcgt 180
tcgggctatt acaacccgct ggtggagggc tacggcccca ccacgccacc ggcgatcacc 240
tgggcgccct tccccaaccg gctgtggacg tttttctaca acaacggcac cgcggtgatt 300
ccgcagctgg gcggcaaggc catgacgttg cagcaggtga tggagctgac cgacaacggc 360
cagatcaccc tcaacaacac cctgtacacg ctctacgatc caaacaagca aggcaccctg 420
ctgcaactgc ccgtgacccg ctgcccgagc attgactggc aaggcaagta caaggatttc 480
tcgccctcgg gcccgcgcgg ctggctggac gaatactgcg agtggtcgat cgtgcgcgac 540
cccggtaccc agaacatgcg caagatcacc tttacctgcg aaaacccggc gtatttcctc 600
gccatgtggc gcatcgaccc gaacgcggta ctgggcctgt atcgcgacta catcgacccg 660
caggtgcaac tcgaggacct gtacttgcgc tacaccgccg actgcccgac cggcaacaag 720
ggcgacccgg tgatggaccc caccaccggc cagccagcct atgacacggt gaacaaatgg 780
aacgccggca ccgcctgcgt gcccggccaa tatggcggcg cgatgcacct gacctccggc 840
cccaacaccc tgagcgccga ggtgtacctg gcggccgcgg ccaccatcct gcggccgctg 900
agcagcagcc agaactccca ggcgctgatc tgctgcgcac aatacgggca gaactatcgc 960
aactccgacc cgcatatcgg tttttcggcc aacagcgtgg cggtgaataa ccggctgtcc 1020
ctgaccaacc ccatcggcct gtacctgcag caacccaccg acttctcggc gtggaaaggt 1080
ccacaaggcc aggacgtcag ccagtactgg aaaattaccc ggggcgccgc aaagtccgcc 1140
gccaacggct ccgaccagat cctgcaggcg gtgttcgagg tgccggtcag cgccgggttc 1200
tcgatcaacg acatcaccat cagcggccag tccatcgact acgtgtgggt gattgcccag 1260
caattgctgg tggggctgag cgtgaccacc acgcccatca gcccgacacc ggattcttgc 1320
ccgtgcgtga cggatcgggt caacggtgtg caaccctggc cggtacaact gctgccgctg 1380
gatctgttct acgggcagtc gcccaccgac ctgcccgcgt ggctggctcc cggtaccagc 1440
gggcagtttg ccctggtggt gcaaggcgcc gacctcaaga ccaccgccga gacggcgcgg 1500
gtgcagtttt ccaatcccgg cgtcacggcg gtggtcacga aattcctgcc cgacgcctcg 1560
gccatccccg ggcagaccaa ctccggcggc acccagggct acctgctgac catcactgtg 1620
agccccaccg ccgcaccggg gctggtgacg gtgcgcgcgc tcaacccggg cgaagccgat 1680
aaccccagcg cggcggagca cccatgggaa tccgggttgg cgctggtgcc tggcgcctga 1740
<210> 115
<211> 1608
<212> ДНК
<213> Pseudomonas sp. PAMC 25886
<400> 115
atgtccaggt tacgcttgag tgttttatcg ctgctggcca gtgtggtgct gagcctgttt 60
gcgctgcagt cggcctatgc aacaccccaa tccgatgccg acgcctgcgt gcagcaacag 120
ctggtgttca atccgaaaag cggcggcttc ctgccggtca acaacttcaa cgccaccggc 180
cagagcttca tgaactgctt tggctggcag ctgttcattg ccctgaactg gccggtgaac 240
cccggctggc cgaccaccgc cgccctggcg ggcgaaccgg acatgaacag cagcctggcg 300
cagttcggcg tgccgaccac cgccgggcaa ccgatgacgg tggcgccggt atgggccagc 360
tacaaggacg ccaacgatat cttcctgccg ggtgcgcctg tgccctcggg ctggggcgtg 420
caaaccctgg tgccgtccaa ttgcagcacc cagggcagcc tcaaggcgat gtcggtgggg 480
gcgcgcaagt tcatgactgc cacctcggaa agcgcgatca acgcccgcca cggtttccac 540
ttgtccagcg gcaccctggc gacgattccc gacccgatca tggaagcctc cggcggctgg 600
ctgacggatc aggcgggcca gctggtgttt tttgaacgca aagtcggcaa ggccgagttt 660
gattacatcg tcagcaaagg gctgtacgac gccgccaatc agttgaaggt ggcgcaaaac 720
ctcgacaacc agaacccggg cgggctgtcc ttgcccattg gcgaaccgat gcgctccctg 780
ccgccgaccc cggtgccaca ggaacaactc ggggcgctgg agctcaaggc cgcgtggcgc 840
attctcaccg gcaagcccga actctacgga cgctacctga ccaccgtcgc ctggctgaaa 900
aacccggcca ccttgcagtg cacccagcaa gtggtgggcc tggtgggcct gcatatcatc 960
aacaagaccc aagcctcgcc gaacttcatc tggaccacct tcgaacaggt ggacaacgtc 1020
ccggaaccca accagctgcc gccacagcag acgccgcccg acagctttgc cttcaacaac 1080
cccaactgcg gcaccggccc ggaatgcacg ccgaacgtgg cacgcatcca gtgccaacag 1140
caccatcccg atcgcgattg caccgagccg tacccacggg accaaccggt gcaaaccacc 1200
cgggaacatc cgctgcccac ggagctgcag gccctgaacg gcgcggtgca ggccaacttc 1260
gcccagcaga gccagggtaa atcggtgttc cagtactaca aactgatcaa cgtactctgg 1320
accctcaccc ccaacccgcc cgtccagccg gagccggggg tcagtgcggc ggtgccgctg 1380
tcctacgggc cgtttatcag ccagggcaat gtgccggtgg ccaacacgac cctggaaacc 1440
tatgtgcagg gcgataactg caacgcctgt caccagtacg cgaccatcgc cggcagctcg 1500
accctggcct cggacttttc attcctgttc aacagcgccg actcggccag caagaaaagc 1560
ctggtcaagc gggtgaaggc gtttgaaacc ctcaaggacc aaccctga 1608
<210> 116
<211> 1737
<212> ДНК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 116
atgagcacac ccttcaaaca attcacctct cccgccgggc aagctcccaa ggactacaac 60
aagctgggcc tggaaaacca gttgccgcag tttgaaaccg actggaacaa cgacctcacc 120
ggctggaccc agtctgcgat catcggcaac ccgtggtcgg gcctcaatga cgcgccgcgc 180
tcgggctatt acaacccact ggtggaaggc tacggcccca ccacgccgcc ggcgattacc 240
tgggcgccct tccccaatcg gctgtggacg tttttctaca acaacggcac ggcggtgatt 300
ccgcagttgg gcggcaaggc catgtccatg caacaggtga tggagctgac cgacaacggc 360
cagattacga tcaacaacac cctgtacatg ctctacgacc cgaagaagca aggcaccctg 420
ctgcaactcc ccgtcactcg ctgcccgagc atcgactggc aaggcaagta caaggatttc 480
tcgccctctg gcccccgtgg ctggcttgac gaatattgcg agtggtccat cgtgcgcgat 540
gccgacggca acatgcgcaa gatcaccttc acttgcgaaa acccggcgta tttcctggcc 600
atgtggcgca tcgatccgac tgctgtactg gggctgtatc gcgactacat cgacccacag 660
gtgcaactcg aagacctgta cctgcgctac accgccgact gcccgaccgg taaggccggc 720
gatccggtca tcgaccccac caccggtcaa ccggcctacg acaccgtcaa caaatggaac 780
gccggcaccg cctgtgtgcc tggccagtac ggcggtgcga tgcatctgac ctccggcccc 840
aacaccctga gcgccgaggt gtacctggct gccgcggcga ccatcctgcg gccattgagc 900
agcagccaga attcccaggc gttgatctgc tgtgcgcaat acgggcagaa ctaccgcaac 960
tccgatccgc atatcggttt ctcggccaac agcgtggcag tgaacaaccg gctgtcgctg 1020
accaacccca tcggcctgta cctgcaacaa cccaccgact tctcggcgtg gaaaggcccc 1080
cagggccagg acgtcagcca gtactggaaa atcacccgtg gcaccgccaa gtccgccgcc 1140
aacggctccg accagattct gcaagcggtg tttgaagtgc cggtcagcgc cgggttctcg 1200
atcaacgaca tcaccatcag cggccagccg atcgactacg tgtgggtgat tgcccagcag 1260
ttgctggtgg gcctgagtgt gacaaccacg cccatcagcc cgacgccgga ttcctgcccg 1320
tgcgtgacgg accgggtcaa cggtgtgcaa ccctggccgg tacagctgct gccgctggac 1380
ctgttctacg ggcagtcacc caccgacctg ccggcctggc tggcacccgg caccagcggg 1440
cagtttgccc tggtggtgca aggcgccgac ctcaagacca ccgccgagac ggcgcgggtg 1500
caattctcca atcctggggt gacggcgcag gtcacaaagt tcctgccgga tgcctcggcc 1560
atccccgggc aaaccaactc cggtggcacc cagggctacc tgctgaccat caccgtaagc 1620
cccactgccg caccggggct ggtgacagtg cgcgccctca acccgggcga agccgataac 1680
cccagcgcgg cggaacaccc atgggaatcc ggattggcgc tggtgcctgg cgcctga 1737
<210> 117
<211> 1611
<212> ДНК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 117
atgtccaggt tacgcttgag tgttttatcg ctgctgacca gtgtggtgct gagcctgttc 60
gccatgcagg ccgcctacgc atcccccact tccgacgccg acgcttgcgt gcagcaacag 120
ttggtgttca acccgaaaag cggcggcttc ctgccgatca acaacttcaa cgccaccggc 180
cagagcttca tgaattgctt tggctggcag ttgttcattg ccctgaactg gccggtgaat 240
cccggttggc cagccacgcc tgccctcgcg ggtgagccgg acatgaacag taccctggcg 300
caattcggcg taccgactgc ctccgggcag ccgatgagcg tggcgccggt atgggccagc 360
tacaaggacg ccaacgatat cttcctgccc ggcgcgcccg tgcccaccgg ctggggcgtg 420
caaaccctgg tgccgtccaa ttgcagcacc cagggcagcc tcagggcgat gtcggtgggg 480
gcgcgcaagt tcatgaccgc cacctccgaa agcgcgatca acgcgcggca tgggtttcac 540
ctgtccagcg gcaccctggc ctcgattccg gacccgatca tggaagcctc cggcggctgg 600
ctgacggacc agtcgcagaa cctggtgttt tttgaacgca aggtgggcaa ggccgagttc 660
gactacatcg tcagcaaagg gctgtacgac gcggccaacc agctgaaagt cgcgcagaac 720
ctcgacaacc agaaccccgg cgggctgtcc ttgcccatcg gtgaacccat gcgctcgctg 780
ccgcccaacc cggtgccgca ggagcaactg ggagctctgg aggtcaaggc agcatggcga 840
atcctcaccg gtaaacccga gctctacgga cgttacctga ccaccgtcgc ctggctcaaa 900
aacccggcca ccttgcagtg cacccagcag gtggtgggcc tggtgggcct gcatatcatc 960
aacaagaccc aggcctcgcc caacttcatc tggaccacct tcgagcaagt ggacaacgtg 1020
ccggaaccca accaggtgcc gccacaacaa acgccgcccg acagctttgc cttcaacaac 1080
ccgaactgcg gcaccggccc cgaatgcacg ccgaacgtgg cgcgtatcca gtgcaagcag 1140
cagcatccgg accgcgactg caccgagccg tttccacggg accaacccgt gcagaccacc 1200
cgggaacatc cgctgcccac tgaactgcag gcgcttaacg gcgcggtgca ggccaatttt 1260
gcccagcaga gccagggcaa gtcggtgttc cagtactaca aactgatcaa cgtactctgg 1320
accctcaccc ccaacccgcc cacccagccg gaaccgggtg tcagtgcgca agtgccgctg 1380
tcctacgggc catttatcag ccagggcaac gtaccggtgg ccaacaccac cctggagacc 1440
tacgtccagg gcgacaactg caatgcctgt catcagtacg cgaccatcgc cggcagctcg 1500
accctggcct cggacttttc gttcctgttc aacagtgccg attcggccag caagaaaagc 1560
ctggtcaagc gcgtaaaagc cttccagacc ctcaaggacg gttcaccctg a 1611
<210> 118
<211> 1737
<212> ДНК
<213> Pseudomonas sp. PAMC 26793
<400> 118
atgagcacac ccttcaaaca attcacctct cccgccgggc aagcacccaa ggactacaac 60
aagctgggcc tggaaaacca gctgccgcag tttgaaaccg actggaacaa cgacctcacc 120
ggctggaccc agtccgcaat catcggcaac ccgtggtcgg gcctcaatga cgcaccgcgc 180
tcgggctatt acaacccgct ggtggaaggc tacggcccca gcacgccgcc ggcgattacc 240
tgggcgccct tccccaatcg gctgtggacg ttcttctaca acaacggcac ggcggtgatt 300
ccgcaattgg gcggcaaggc catgtccatg caacaggtga tggaactgac cgacaacggc 360
cagattacga tcaacaacac cctgtacatg ctctacgacc cgaacaagca aggcaccctg 420
ctgcaactgc ccgtcacccg ctgcccgacc atcgactggc aaggcaagta caaggatttc 480
tcgccctcgg ggccccgtgg ctggcttgac gaatactgcg agtggtccat cgtgcgtgac 540
gccaatggca acatgcgcaa gatcaccttc acctgcgaaa acccggcgta tttcctggcc 600
atgtggcgca ttgatccaaa tgcagtgctg ggcctgtacc gcgactacat cgacccgcag 660
gtgcaactcg aagacctgta cttgcgctac accgccgact gcccgaccgg caaagccggc 720
gatccggtca tcgaccctac caccggccaa ccggcctacg acacggtcaa caaatggaac 780
gccggcaccg cctgcgtacc cggccaatac ggcggggcga tgcacctgac ctccggcccc 840
aacaccttga gcgccgaggt gtacctggcc gccgcagcga ccatcctgcg tccactggcc 900
agcagccaga attcccaggc attgatctgc tgcgcgcaat acgggcagaa ctaccgcaac 960
tctgacccgc atatcggttt ctcggccaac agcgtggcgg tgaataaccg gctgtccctg 1020
accaacccca tcggccttta cctgcaacaa cccaccgatt tctcggcgtg gaaaggccct 1080
caaggccagg acgtcagcca gtactggaaa atcacccgtg gcaccgccaa gtccgccgcc 1140
aacggctccg accagattct gcaagcggtg tttgaagtgc cggtcagcgc cgggttttcg 1200
atcaacgaca tcaccatcag tggccagccg atcaactatg tgtgggtgat tgcccagcag 1260
ttgctggtgg gcctgagtgt gacaaccacg cccatcagcc cgacgccgga ttcctgcccc 1320
tgcgtgacgg atcgggtcaa cggcgtgcaa ccctggccgg tgcaactgct gcccctggat 1380
ctgttctacg ggcagtcgcc taccgacctg ccggcgtggc tggcacccgg caccagcggg 1440
cagttcgctc tggtggtgca aggcgccgac ctcaagacca ccgccgagac ggcgcgggtg 1500
cagttttcca atcctagcgt gacggcgcag gtcacccagt tcctgccgga tgcctccgcc 1560
atcccagggc aaaccaactc cggtggcacc cagggctacc tgctgaccat caccgtaagc 1620
cccactgccg ctccgggact ggtgacggtg cgcgcgctca acccgggcga agccgataac 1680
cccagcgcga cggaacatcc atgggagtcc ggattggcgc tggtgcctgg cgcctga 1737
<210> 119
<211> 1608
<212> ДНК
<213> Pseudomonas sp. PAMC 26793
<400> 119
atgtccaggt tacgcttaag tgttttatcg ctgctgacca gtgtggtgct gagcctgttc 60
gccatgcagg ccgcctacgc atcccccact tccgacgccg acgcttgcgt gcagcaacag 120
ttggtgttca acccgaaaag cggcgggttc ctgccgatca acaacttcaa cgccaccggc 180
cagagcttta tgaattgctt tggctggcag ttgttcattg ccctgaactg gccggtgaat 240
cccggttggc cagccacgcc cgccctcgcg ggtgagccgg acatgaacag taccctggcg 300
caattcggtg tgccgcccgc ctccgggcag ccaatgagcg tcgcgccggt atgggccagc 360
tacaaggacg ccaacgatat cttcctgccc ggcgcccccg cgcccaccgg ctggggcgtg 420
caaaccctgg tgccgtccaa ttgcagcacc cagggcagcc tcagggcgat gtcggtgggg 480
gcgcgcaagt tcatgaccgc cacctccgaa agcgcgatca acgcccgcca tggttttcac 540
ctgtccagcg gcaccttggc ctcgattcca gacccgatca tggaagcctc cggcggctgg 600
ctgacggacc agtcgcagaa cctggtgttt tttgaacgca aggtgggcaa ggccgagttc 660
gactacatcg tcagcaaagg gctgtacgac gcagccaacc agctgaaagt cgcgcagaac 720
atcgacaacc agaacccggg cgggctgtcc ttgcccatcg gtgagcccat gcgctcgctg 780
ccgcccaacc cggtgccgca ggagcaactg ggagccctgg aggtcaaggc ggcgtggcgg 840
atcctcaccg gcaaacccga gctctacggg cgttacctga ccaccgtcgc ctggctcaaa 900
aacccggcca ccttgcagtg cacccagcaa gtggtgggcc tggtgggcct gcatatcatc 960
aacaagaccc aagcctcgcc caacttcatc tggaccacct tcgagcaggt ggacaacgtg 1020
ccggaaccca accaggtgcc gccacaacag acgccgcccg acagctttgc cttcaacaac 1080
ccgaactgcg gcaccggccc cgaatgcacg ccgaacgtgg cgcgtatcca gtgcaaacag 1140
caccatcccg accgcgactg caccgagccg tttccacggg accaacccgt gcagaccacc 1200
cgggaacatc cgctgcccac tgaactgcag gcgcttaacg gcgcggtgca ggccaacttc 1260
gcccagcaga gccagggcaa gtcggtgttc caatactaca aattgatcaa cgtactctgg 1320
accctcaccc ccaacccgcc cacccagccg gaaccgggtg tcagtgcgca agtgccactg 1380
tcctacgggc cgtttatcag ccagggcaac gtaccggtgg ccaacaccac cctggagacc 1440
tacgtccagg gcgataactg caatgcctgt catcagtacg caaccatcgc cggcagctcc 1500
accctggctt cggacttttc gttcctcttc aacagcgccg actcggccag caagaaaagc 1560
ctggtcaagc gcgtgaaagc cttccagacc ctcaaggatc aaccgtga 1608
<210> 120
<211> 1737
<212> ДНК
<213> Pseudomonas putida
<400> 120
atgagcacgc ccttcaagca gttcacctct cccgccggcc aagcccccaa ggactacaac 60
aagctgggcc tggaagacca gttgccgcag tttgaaaccg actggaacaa caacctcacc 120
ggctggaccg aatcgtcgat catcggcaac ccctggtcgg gcctgaacga cgccccccgc 180
tcgggttact acaacccgct ggtggaaggt ttcggcgacg tgaccgcccc ggcgatcacc 240
tgggcgccct tccccaaccg gctctggacg ttcttctaca acaacggtgc ggcggtcatt 300
ccccagctgg gtggcaaggc catgaccctg gaccaggtga tggaattgac cgaccacggc 360
cagatcaccc tcgacaacac cctctacatg ctctacgacc ccaacaagca aggtaccgtg 420
ctgcaactgc cggccaagcg ctgcccgagc atcgactgga acggcaaata cacggcgttc 480
tcgccttccg gcccgcgggg ctggctcgac gagtactgcg agtggtcgat cgtacgcgat 540
gccaacggca acatgcgcaa gatcaccttc acctgcgaaa accccgcgta cttcctgacc 600
atgtggcgca tcgacccgaa cgcagtactg gggctgtacc gcgactacat cgacccgaac 660
gtgcaactcg aagacctgta cctgcgctac accgtcgact gcccgaccgg caaggccggc 720
gacccggtca tcgaccccac caccggcaag ccggcctatg acaccgtcaa caaatggaac 780
gccggaacgg cctgtgtacc cggccagtac ggcggtgcga tgcacctgac ctccggcccc 840
aataccctca gcgccgaggt gtacctggcc gccgccgcca ccattctgcg cccggtgagc 900
agcagccaga acgcccagtc gttgatctgc tgcgcgcagt acgggcaaaa ctatcgcaac 960
tctgatccgc acatcggttt catggccaat accacggcag tgaacaaccg actgtcgctg 1020
accaacccca ttggcctgta cttgcagcag cccaccgatt tcagcgcctg gaagggcccg 1080
caaggccagg acgtgagcca gtattggcgc atcacgcgcg gtacggccaa gtcggctgcc 1140
aatggttccg accagatcct gcaggcggtg ttcgaggtgc cggaaagcgc cggcttctcg 1200
atcaatgaca tcaccatcaa caaccagaag gtcaactatg tgtgggtcat cgcccaacaa 1260
ctgctggtcg gcctgagtgt caccgtcaag ccgctcagcg ccacgcttca agcattccca 1320
tgcgtgcagg accgggtggc cggcctgcaa ccctggccag tgcaactgct gccgctggac 1380
ctgttctacg ggcaatcccc aaccgacctg cccgcctggc ttgcaccggg tagcagcaac 1440
cagttcgtgc tggtggtgca aggggccgac ccgactacca cggcgcagaa tgcaagggtg 1500
caattctcca accccggggt gacggcgcag gtcacccagt acctgcccga cgcgtcggcc 1560
attcccggcc agaccaactc gggcggcacc caggcctaca ttctgaccat cacggtcagc 1620
ccctccgcag cacccggcct ggtgacagtg cgtgccctca acccgggtga agatgtgaac 1680
gtgagcgcga cagaccaccc ttgggaatct ggcctggcgc tggtgccggg ggcctga 1737
<210> 121
<211> 1608
<212> ДНК
<213> Pseudomonas putida
<400> 121
atgatgtcca ggtcacgctt gagtcctctg tcgctgctgt gcggcattct actgtgcctg 60
tcgaccctgc aacccgccac ggcggccacg ctgtcggacg ccgatacctg tgtacagcag 120
caattggtgt tcaacccggc cagcggggga ttcctgccgg tcaacaactt caatgccacc 180
agccaggcgt tcatgaactg ctttggctgg caattgttca ttgccttgaa ctggccggtg 240
aaccccggtt ggccggccac cgccagcctg gcgggtgaac ccgacatgca aagcacgctg 300
gcgcagttcg gggtcccctc cgcaccgggt cagcccatga gcgtggcccc ggtatgggcc 360
agctacaagg acgccaacga catcttcctg cccggcgcac ccacgcccac cggctggggt 420
gtgcaaaccc tggtgccgtc cggctgcagc acccagggta gcctcaaggc gctcaaggtg 480
ggcgcacgca agttcatgaa cgccacctcc gaaggcgcga tcaatgcctt gcacggtttc 540
cacctgtcga ccgggacact tgcgtccatt cccgacccgg tcatggaggc gtccggcggc 600
tggctgacgg accaggcggg caaactggta ttttttgagc gcaaggtggg caaggccgag 660
ttcgactaca tcgtcgacaa ggggctctac gacgccgcca accagttgaa ggtcgcgcaa 720
aacctcgacg gccagacacc ggagggcctg tcgttgccca tcggcgaacc gatgcgctca 780
ctgccaacct ccccagtgcc acaggaacaa ctgggcgcga tcgagctcaa ggccgcctgg 840
cgggtgctga ccggcaaacc cgagctgttc ggccgctacc tgactaccgt cgcctggctc 900
aaacgccccg acacgctgga gtgcacccag gaggtggtgg ggctggtggg cctgcatatc 960
atcaacaaga cccaggcttc gcccaacttc atctggacca ccttcgagca ggtggacaac 1020
gtgcccgaac cggcccaggt cccgccgcaa caaaccccgc cgaacgggtt cgccttcaac 1080
aaccctgact gtggcgacgg ccccgagtgc acaccgaacc aagcccgtat ccagtgcaag 1140
caaacgcatc ccgacaagga ctgcaccgat ctcttcccac gcgaccagcc ggtacagacc 1200
acccgcgaac accccgtgcc cggcgacctg caagccctca acagcgcggt acaagccaac 1260
ttcgcgcagc acagccaagg caagtcggtg ttccagtact acaagctgat caacgtactc 1320
tggaccctcg ctcccaatcc gcccagcccg gaaccgggcg ccaacgcgca agtgccgctg 1380
tcgtacgggc ccttcatcag ccagggcaac gtgccggtgg ccaacaccac catggagacc 1440
tacgtgcagg gtgatgactg caatcagtgc catcagtacg cgacgattgc cggcagcccg 1500
tcattggcct cggatttctc tttcctgttc aacagtgccg gttccgccag caacaaaagc 1560
ctgatcaaaa gcgtcaaagc cttcgaaacc ctcaaggacc gtccctga 1608
<210> 122
<211> 1737
<212> ДНК
<213> Неустановленное
<220>
<223> Грибной сад комбинированный
<400> 122
atgagcacgc ccttcaagca gttcacctct cccgccggcc aagcccccaa ggactacaac 60
aagctgggcc tggaagacca gttgccgcag tttgaaaccg actggaacaa caacctcacc 120
ggctggaccg aatcgtcgat catcggcaac ccctggtcag gcctgaacga cgccccccgc 180
tcgggttact acaacccgct ggtggaaggt ttcggcgacg tgaccgcccc ggcgatcacc 240
tgggcgccct tccccaaccg gctctggacg ttcttctaca acaacggtgc ggcggtcatt 300
ccccagctag gtggcaaggc catgaccctg gaccaggtaa tggcgttgac cgaccacggc 360
cagatcaccc tcgacaacac cctctacatg ctctacgacc ccaacaagca aggtactgtg 420
ctgcaactgc cggccaagcg ctgcccgagc atcgactgga acggcaagta cacggcgttc 480
tcgccttccg ggcctcgggg ctggctcgac gagtactgcg agtggtcgat cgtacgcgat 540
gccaacggca acatgcgcaa gatcaccttc acctgcgaaa accccgcgta cttcctgacc 600
atgtggcgca tcgacccgaa cgcagtactg ggcctgtacc gcgactacat cgacccgaac 660
gtgcaactcg aagacctgta cctgcgctac accgtcgact gcccgaccgg caaagccggc 720
gacccggtca tcgaccccac caccggcaag ccggcctatg acaccgtcaa caaatggaac 780
gccggaacgg cctgtgtgcc cggccagtac ggcggtgcga tgcacctgac ctccggcccc 840
aataccctca gcgccgaggt gtacctggcc gccgccgcca ccatcctgcg cccggtgagc 900
agcagccaga acgcccagtc gttgatctgc tgcgcgcagt acgggcaaaa ctatcgcaac 960
tctgatccgc acatcggttt catggccaat accacggcag tgaacaaccg actgtcgctg 1020
accaacccca ttggcctgta cttgcaacag cccaccgatt tcagcgcctg gaagggcccg 1080
caaggccagg acgtgagcca gtactggcgc atcacgcgcg gtacggccaa gtcggctgcc 1140
aacggttccg accagatcct ccaggcggtg ttcgaggtgc cggaaagcgc tggtttctcg 1200
atcaatgaca tcaccatcaa caaccagaag gtcaactatg tgtgggtcat cgcccaacaa 1260
ctgctagtcg gcctgagcgt caccgtcaag ccgctcagca ccacgcctca agcgttccca 1320
tgcgtgcagg accgggtggc cggccggcaa ccctggccag tgcaactgct gccgctggac 1380
ctgttctacg ggcaatcccc caccgacctg cccgcctggc ttgcaccggg tagcagcaac 1440
cagttcgtgc tggtggtgca aggtgccgac ccgactacca cggcgcagaa tgcaagggtg 1500
caattctcca accctggggt gacggcgcag gtcacccagt acctgcccga cgcatcggcc 1560
attcctggcc agaccaactc gggcggcacc caggcctaca ttctgaccat cacggtcagc 1620
ccctccgcag cacccggctt ggtggcagtg cgtgccctca atccgggtga agacgttaac 1680
gtgagcgcga cagaccaccc ttgggagtct ggcctggcgc tggtgcctgg cgcctga 1737
<210> 123
<211> 1605
<212> ДНК
<213> Неустановленное
<220>
<223> Грибной сад комбинированный
<400> 123
atgtccaggt cacgcttgag tcttctgtcg ctgctgtgcg gcattctact gtgcctgtcg 60
accccgcaac ccgccacggc ggccacgctg tcggacgccg atacctgtgt acagcagcaa 120
ttggtgttca acccggccag cgggggattc ctgccggtca acaacttcaa tgccaccagc 180
caggcgttca tgaactgctt tggctggcaa ttgttcattg ccttgaactg gccggtgaac 240
cccggttggc cagccaccgc cagcctggcg ggtgaacccg acatgcaaag cacgctggcg 300
cagttcgggg tcccctccgc accgggtcag cccatgagcg tggccccggt atgggccagc 360
tacaaggacg ccaacgacat cttcctgccc ggcgcaccca cgcctaccgg ttggggcgtg 420
caaaccctgg tgccgtccgg ctgcagcacc cagggtaacc tcaaggcgct caaggtgggc 480
gcacgcaagt tcatgaacgc cacctccgaa ggcgcgatca atgccttgca cggtttccac 540
ctgtcgaccg ggacacttgc gtccattccc gacccggtca tggaggcgtc cggcggctgg 600
ctgacggacc aggcgggcaa gctggtgttt ttcgaacgca aggtgggcaa ggccgagttc 660
gactacatcg tcgacaaggg gctctacgac gcagccaacc agttgaaggt cgcgcaaaac 720
ctcgacggcc agacaccgga gggcctgtcg ctgcccatcg gcgaaccgat gcgctcactg 780
ccgacctccc cagtgccaca ggagcaactt ggcgcgatcg agctcaaggc cgcctggcgg 840
gtgctgaccg gcaaacccga gctgttcggg cgctacctga ctaccgtcgc ctggctcaaa 900
cgccccgaca cgctggagtg tacccaggag gtggtggggc tggtgggcct gcatatcatc 960
aacaagaccc aggcttcgcc caacttcatc tggaccacct tcgagcaggt ggacaacgtg 1020
cccgaaccgg cccaggtccc gccgcaacaa accccgccga acgggttcgc cttcaacaac 1080
cctgactgtg gcgacggccc cgagtgcaca ccgaaccaag cccgtatcca gtgcaagcaa 1140
acgcatcccg acaaggactg caccgatctc ttcccacgcg accagccggt acagaccacc 1200
cgcgaacacc ccgtgcccgg cgacctgcaa gccctcaaca gcgcggtaca agccaacttc 1260
gcgcagcaca gccaaggcaa gtcggtgttc cagtactaca agctgatcaa cgtactctgg 1320
accctcgccc ccaatccgcc cagcccggaa ccgggcgcca acgcgcaagt gccgttgtcg 1380
tacgggccgt tcatcagcca gggcaacgta ccggtggcca acaccaccat ggagacctac 1440
gtgcagggtg atgactgcaa tcagtgccat cagtacgcga cgattgccgg cagcccgtca 1500
ttggcctcgg atttctcttt cctgttcaac agtgccggct ccgccagcaa caaaagcctg 1560
atcaaaagcg tcaaagcctt cgaaaccctc aaggaccgcc cctga 1605
<210> 124
<211> 1734
<212> ДНК
<213> Pseudomonas monteilii
<400> 124
atgagcacgc ccttcaagca gttcacatct cccgccggcc aagcccccaa ggactacaac 60
aagctgggcc tggaagacca gttgccgcag tttgaaaccg actggaacaa caacctcacc 120
ggctggaccg aatcgtcgat catcggcaac ccctggtcgg gcctgaacga cgccccccgc 180
tcgggttact acaacccgct ggtggaaggt ttcggcgacg tgaccgcccc ggcgatcacc 240
tgggcgccct tccccaaccg gctctggacg ttcttctaca acaacggtgc agcggtcatt 300
ccccagctgg gtggcaaggc catgaccctg gaccaggtga tggagttgac cgaccacggc 360
cagatcaccc tcgataacac cctctacatg ctctacgacc ccaacaagca aggtaccgtg 420
ttgcaactgc cggccaagcg ctgcccgagc atcgactgga acggcaagta cacggcgttc 480
tcgccttccg ggcctcgggg ctggctcgac gagtactgcg agtggtcgat cgtacgcgat 540
gccaacggca acatgcgcaa gatcaccttc acctgcgaaa accccgcgta cttcctgacc 600
atgtggcgca tcgacccgaa cgcagtactg gggctgtacc gcgactacat cgacccgaac 660
gtgcaactcg aagacctgta cctgcgctac accgtcgact gcccgaccgg caaagccggc 720
gacccggtca tcgaccccac caccggcaag ccggcctatg acaccgtcaa caaatggaac 780
gccggaacgg cctgtgtgcc cggccagtat ggcggtgcga tgcacctgac ctccggcccc 840
aataccctca gcgccgaggt gtacctggcc gccgccgcca ccatcctgcg cccggtgagc 900
agcagccaga acgcccagtc gttgatctgc tgcgcgcagt acgggcaaaa ctatcgcaac 960
tctgatccgc acatcggttt catggccaat accacggcgg tgaacaaccg actgtcgctg 1020
accaacccca ttggcctgta cttgcaacag cccaccgatt tcagcgcctg gaagggccca 1080
caaggccagg acgtgagcca gtactggcgc atcacgcgcg gtacggccaa gtcggctgcc 1140
aacggttccg accagatcct gcaggcggtg ttcgaggtgc cggaaagcgc tggtttctcg 1200
atcaatgaca tcaccatcaa caaccagaag gtcaactatg tgtgggtcat cgcccaacaa 1260
ctgttggtcg gcctgagcgt caccgccaag ccgctcagcg ccacgcccca agcattccca 1320
tgcgtgcagg accgggtggc cggcctgcaa ccctggccag tgcaactgct gccgctggac 1380
ctgttctacg ggcaatcccc caccgacctg cccgcctggc ttgcaccggg tagcagcaac 1440
cagttcgtgc tggtggtgca aggtgccgac ccgactacca cggcgcagaa tgccagggtg 1500
caattctcca accccggggt gacggcgcag gtaacccagt acctgcccga cgcgtcggcc 1560
attcccggcc agaccaactc gggcggcacc caggcctaca ttctgaccat cacggtcagc 1620
ccctccgcag cacccggcct ggtggcattg cgtgccctca acccgggtga agatgtgaac 1680
gtgagcgcga cagaccaccc ttgggaatct ggcctggcgc tggtgcctgg cgcc 1734
<210> 125
<211> 1605
<212> ДНК
<213> Pseudomonas monteilii
<400> 125
atgatgtcca ggtcacgctt gagtcttctg tcgctgctgt gcggcattct actgtgcctg 60
tcgaccccgc aacccgccac ggcggccacg ctgtcggacg ccgatacctg tgtacagcag 120
caattggtgt tcaacccggc cagcggggga ttcctgccgg tcaacaactt caatgccacc 180
agccaggcgt tcatgaactg ctttggctgg cagttgttca ttgccttgaa ctggccggtg 240
aaccccggtt ggccggccac cgccagcctg gcgggcgaac ccgacatgca aagcacgctg 300
gcgcagttcg gggtcccctc cacaccgggt caacccatga gcgtggcccc ggtatgggcc 360
agctacaagg acgccaacga catcttcctg cccggcgccc ccacgcccac cggctggggc 420
gtgcaaaccc tggtaccgtc cgactgcagc acccaaggta gcctcaagac actcaaggtg 480
ggcgcgcgca agttcatgaa cgccacctcc gaaggcgcga tcaatgcctt gcacggtttc 540
cacctgtcga ccgggacact tgcctccatt cccgacccgg tcatggaagc gtccggcggc 600
tggctgacgg accaggcggg caaactggtg ttttttgaac gcaaggtggg caaggccgag 660
ttcgactaca tcgtcgacaa ggggctctac gacgccgcca accaattgaa ggtcgcgcga 720
aacctcgacg gccagacacc ggagggtctg tcactgccca tcggcgaacc gatgcgctca 780
ctgcctacct ccccagtgcc acaggagcaa ctgggcgcga tcgagctcaa ggccgcctgg 840
cgggtactga ctggcaaacc cgagctgttc gggcgctacc tgactaccgt cgcctggctc 900
aaacgtcccg acacgctgga gtgcacccag gaggtggtgg ggctggtggg cctgcatatc 960
atcaacaaga cccaggcttc gcccaacttc atctggacca ccttcgagca ggtggacaac 1020
gtgcccgaac cggcccaggt tccgccgcaa caaaccccgc caaacgggtt tgccttcaac 1080
aaccctgact gtggcaacgg ccccgagtgc acaccaaacc aagcccgtat ccagtgcaag 1140
caaacgcatc ccgacaagga ctgcaccgat ctcttcccgc gcgaccagcc ggtacagacc 1200
acccgcgaac accccgtgcc cggcgacctg caagccctca acagcgcggt acaagccaac 1260
ttcgcgcagc acagccaagg caagtcggtg ttccagtact acaagctggt caacgtactc 1320
tggaccctcg ctcccaaccc gcccagcccg gaaccgggcg ccaacgcgca agtgccgctg 1380
tcgtacgggc cgttcatcag ccaggggaac gtgccggtgg ccaacaccac catggagacc 1440
tacgtgcagg gtgataactg caatcagtgc catcagtacg cgacgattgc cggcagcccg 1500
tcattggcct cggatttctc ttttctgttc aacagtgccg gctccgccag caacaaaagc 1560
ctgatcaaaa gcgtcaaagc cttcgaaacc ctcaaggacc gcccc 1605
<210> 126
<211> 1738
<212> ДНК
<213> Pseudomonas monteilii
<400> 126
atgagcacac ccttcaaaca attcacctct cccgccggac aagcccccaa ggactacaac 60
aagctgggcc tggaagacca gttgccgcag tttgaaaccg actggaacaa caacctcacc 120
ggctggaccc aatcgtccat catcggcaac ccttggtcgg gcctgaacga cgctccccgc 180
tcgggctact acaacccgct cgtagagggc ttcggcgacg tgaccccacc cgcgatcacc 240
tgggcgccct tccccaaccg cctgtggacg ttcttctaca acaacggtgc ggcggtcatt 300
ccccagttgg gcggcaaggc catgaccctg gaccaggtga tggaattggc cgaccacggc 360
cagatcaccc tcgacaacac cctctacacg ctttacgacc cgaacaaaaa gggcactgtg 420
ctgcaactgc cggtcaagcg ctgccccagc atcgcctgga atggcacgta caaggatttc 480
acgccttccg gcccacgggg ctggctcgac gagtactgcg agtggtcgat cgtgcgcgat 540
gccaacggca acatgcgcaa gatcaccttc acctgtgaaa accccgcgta cttcctggcc 600
atgtggcgca tcgacccgaa cgcggtcctg ggcctgtacc gcgaatacat cgacccgagc 660
gtgcagctcg aagacctgta cctgcgctat gccgaagact gcccgaccgg caaggccggc 720
gatccggtca tggaccccac caccggcaag ccggcctatg acaccgtcaa caaatggaac 780
gccggaaccg cctgtgtgcc cggccagtac ggcggagcga tgcacctgac atccggcccc 840
aataccctca gtgccgaggt gtacctggcc gccgccgcca ccatcctgcg cccggtgagc 900
agcagccaga atgcccagtc gctgatctgc tgcgcgcagt acgggcagaa ctatcgcaac 960
tccgacccgc acatcggctt catggccaat accacggcgg tcaacaaccg actgtcgctg 1020
accaacccta ttggcctgta cttgcaacaa cccaccgact tcagcgcctg gaagggcccg 1080
caaggccagg acgtgagcca gtactggcgc atcacccgcg gtacggccaa gtcggccgcc 1140
aacggctccg accagatcct gcaggcggtg ttcgaggtgc cggaaagcgc cggcttctcg 1200
atcaatgaca tcaccatcaa caaccagaag gtcaactatg tgtgggtcat cgcccaacaa 1260
ctgttggtgg gcctgagcgt caccgtcaaa ccgctcagcg tcacacctca atccttccca 1320
tgcgtgcagg accgggtggc cggcctgcaa ccctggccgg tgcaactgct gccgctggac 1380
ctgttctacg ggaactcccc caccgacctg cccgcctggc ttgcaccggg cagcagcaat 1440
cagttcgtgc tggtggtgca aggcgccgac aagaccacca cggcgcagaa tgccagggtg 1500
caattctcca accccggggt taccgcgcag gtcacccagt acctgcccga cgcgtcggcc 1560
attcccggcc agaccaacgc cggcggcaca caggcctaca tcctgaccat cacggtcagc 1620
cccaccgcag cccccggcct ggtgacggtg cgtgcgctca atccggatga agacgtgaac 1680
gtgagcgcgg cagaccaccc ttgggaatcc ggcctggcgc tggtgcctgg cgcctgaa 1738
<210> 127
<211> 1605
<212> ДНК
<213> Pseudomonas monteilii
<400> 127
atgtccaggt cacgcttgag tcttctgtcg ctgctgtgcg gcattttact gtgcctgtcg 60
accccgcaac ccgccatggc agccacgctg tcggatgccg acgcctgtgt gcagcagcag 120
ttggtgttca acccggccag cgggggattc ctgccggtca acaacttcaa tgccaccagc 180
caggcgttca tgaactgctt tggctggcag ctgttcattg ccttgaactg gccggtgaac 240
cccggctggc cggccaccgc cagcctggcg ggcgaacccg acatgaacag cacgctggcg 300
cagttcggtg tcccctccgc accgggccaa cccatgagcg tggccccggt atgggccagc 360
tacaaggacg ccaatgacat cttcctgccc ggcgcgccca cgcccactgg ctggggcgta 420
caaaccctgg tgccgtccgg ttgcagcact cagggtagcc tcaagtcact caaggtaggc 480
gcacgcaagt tcatgaacgc cacctccgaa ggcgcgatca atgccttgca ccgattccac 540
ctgtctaccg gaacactcgc gtccattccc gacccggtca tggaagcgtc cggcggctgg 600
ttgacggacc agtctggcaa cctggtgttt tttgagcgca aggtaggcaa ggccgagttc 660
gactacatcg tcgacaaggg gctctacgac gccgccaacc agttgaaggt ggcgcaaaac 720
caggacggca agacaccgga ggggctgtcg ctgccaatcg gcgaaccgat gcgctcgctg 780
cctccgtccc ctgtcccgca ggagcagctg ggcgcgatcg agctcaaggc cgcctggcgg 840
gtgctgaccg gcaaacccga actgttcggg cgctacctga ccaccgtcgc ctggctcaaa 900
cgccccgata ccctgaactg cacccaggaa gtggtggggc tggtgggcct gcatatcatc 960
aacaagaccc aggcttcgcc caacttcatc tggaccactt tcgagcaggt cgacaacgtg 1020
cctgaaccgg cccaggcccc gccgcaacaa accccaccga acggttttgc cttcaacaac 1080
cctgactgtg gcagtggccc cgagtgcaca ccgaaccaag cccgtatcca gtgcaagcaa 1140
caccatcccg ataagcaatg caccgatctc ttcccacgcg accagccggt acagaccacc 1200
cgcgaacacc ccatacccag cgacctgcag gccctcaaca gcgcggtgca agccaacttc 1260
gcgcagcaca gtcaaggcca gtcggtgttc cagtactaca agctgatcaa cgtactctgg 1320
accctcgccc ccaatccgcc cagcccggaa ccgggcgcca acgcgcaagt gccgctgtcg 1380
tacgggccat tcatcagcca gggcaacgtg ccggtggcca acaccaccat ggagacttac 1440
gtacagggtg atgactgcaa ccagtgccat cagtacgcga cgattgccgg cagcccttcg 1500
ttggcctcgg acttctcttt cctgttcaac agtgccggtt ctgccagcac caaaagcctg 1560
atcaaaagcg tcaaagcctt ccagaccctc aaggatcaac cgtga 1605
<210> 128
<211> 1746
<212> ДНК
<213> Pseudomonas brenneri
<400> 128
atgagcacgc ccttcaagca attcacctcc cccgctgggc aagcgccaaa ggactacaac 60
aagctgggcc tggaagacca gttgccacaa ttcgaaaccg actggaacaa cgacataacc 120
ggctggaccg aagcggcgat catcggcaac ccctggtcgg gcctgtatga cgcgccccgc 180
tcggcctatt acaacccgct ggtcgaaggc tatggcgaca ccaccctgcc ggcgattacc 240
tggcaaccct ttcccaaccg gctgtggacc tttttctaca acaacggcac ggcggtgatt 300
ccccaactgg gcaacaaggc catgaccctg caacaggtca tggagctgac cgacaacggc 360
cagatcacca tcaacggcac cctgtacacc ctgtacgacc cggacaagaa aggcaccctg 420
ctgcaactgc ccgtaacccg ctgcccgact atcgactgga acggcaaata caaagacttc 480
tcaccctcgg ggccacgggg ctggctggac gaatactgcg agtggtcgat cgtgcgcgat 540
accaacggca acatgcgcaa gatcaccttt accagtgaaa acccggcgta cttcctggcc 600
atgtggcgca tcgatccgaa tgccgtgctg ggcttgtatc gcgactacat cgacccgaat 660
gtgcaactgc aagatctcta tctgcgctac accgccgact gcaagaccgg caaggccggt 720
gacccggtga ttgacccgac cacgggcctg ccggcctacg acacggtcaa caaatggaac 780
tccggcactg cctgcacccc cggccagttc ggcggcgcga tgcacctgac ctctgggccc 840
aacactctca gcgccgaggt gtacctggcg gcggcggcca ctatcatgcg gcccctgaaa 900
agcagccaga gcgcccaggc gctgatctgc tgcgcgcaat atgggcagaa ctatcgcaac 960
tccgacccgc atatcggctt tgcagccaac ggggcgacaa atgatggggc cacccccagc 1020
cggatttccc tgaccaaccc catcgccctg tacctgcaac agccgaccaa cttcaatgcc 1080
tggaaaggcc cccaaggcca ggatgtgagc cagtactggc gcatcacccg cggtaccgcc 1140
aaatcggcga tcaacggctc cgaccagatc ctgcaggcgg tgttcgaggt accggaaagt 1200
gccgggttct cgatcaacga catcaccatc aatggccagg cggtggacta tgtgtgggtg 1260
attgcccagc aattgctggt gggcctgagt gtcaccacca tgccgagcac cgcgcagcag 1320
caatcgcctt gcgtgcagga tcgggtcaat ggcctgcagc cctggccggt gcagttgttg 1380
ccgctggacc tgttctacgg ccagtcgccc accgacctgc cggcctggct ggccccaggt 1440
accagcgggc aattcgcgct ggtggtacaa ggcgcggacc tcaagaccac cgccgccacc 1500
gcacggatcc agttcaacaa ccccggggtc acggcgcagg tcacggagtt cctgcccgac 1560
gcctcggcca ttcccggcca gaccaatgcg ggcggcaccc agggctacat catgaccatc 1620
accgtcgcaa aagacgcggc gccgggactg gtgacagtgc gcgcgctcaa tccgggcgag 1680
gcggataacg tcagcgcggc ggaccaccct tgggagtccg ggctggcgct ggtgccatcc 1740
acttaa 1746
<210> 129
<211> 1602
<212> ДНК
<213> Pseudomonas brenneri
<400> 129
atgatgtaca gatttcgctt acgtggtctg ctgctggtcg gcacgctgct gtcgctgttt 60
ctcctgccca cggcccaggc atcggatgcc gatacctgcg tccagcagca gttggtgttc 120
gaccccaaca gcggcggttt tctacccgtc aacaatttca acaccactgg ccagagcttc 180
atgaactgtt ttggctggca gctgtttatt gccctgaact ggcccgtgga tcccggatgg 240
ccagccaatg cagccctcgc gggcgagccg aaccgcaaga tcagcatggc gcaatttggc 300
gtgccccagg tcgccgggca acccatgacc accgcgccgg tgtgggcaag ctttaaagac 360
gctaacgata tattcctgcc cggcgcccga ccgcccacag gctggggcgt gcagacattg 420
gtgccgtcca attgcagcag cgagggcagc ctcaaagcgt tgtcggtggg ggcgcgcaag 480
ttcatgaacg ccacctcgga aagcgcgacc aacgccaagc atcgcttcca cttgtccagc 540
ggtaccctgg cgtcgattcc cgacccgatc atggaagccg ccggtggctg gctgacggac 600
cagaccggca acctggtgta tttcgagcgc aaggtgggca aggccgagtt tgactatatc 660
gtcaagtacg ggctgtacga tgccgccaat caaatggtcg ttgcacaaaa cagcgatggc 720
aatcatccgg ccgggctgtc cctgcccgcc ggcgagctga tgcgctcgat gccggcgcaa 780
cccctgcccc aggagcaact gggcgccctg gaactcaagg ccgcctggcg tatcctcacc 840
ggcaagcccc agctctacgg gcgctacctg accaccgtgg cctggctcaa gaaccccgcc 900
accctgcagt gcacccaaca ggtggtgggc ctggtgggcc tgcatatcat caacaagacc 960
cagagttcac cgaactttat ctggaccaca ttcgagcaag tagacaacgt acaagagcca 1020
ggccaggtgc ccgcgcaaca gacaccgccc gacggtttta ccttctacaa ccccaattgc 1080
accggtggcc ctgacgtgtg cacgcccaac gtggcccgta tccagtgcca gcagcaccac 1140
cctgatcgcg aatgcaccga gccctatcca cgcaaccaac cggtccagac cactcgcgaa 1200
caccccctgc cttcggacat gcaggccctc aacggcgccg tgcaggctaa cttcgcccag 1260
cagaccaacg gccagtcggt gttccagtac tacaaactgg tcaatgtgct gtggatcacc 1320
gccccgaccg caccggaccc ggagccgggc gcgggtgcga aggtgcccct gtcctatggc 1380
gcctttatca gcgatagcaa cgtaccggtg gccaatacca ccatggagac ctacgtccag 1440
agcatggact gcaatgcctg ccatcagcag gcgacgattg ccggcagcag cagcctggcc 1500
tcggacttct cgttcctgtt caacaacgcc gattcggcca agcaaaaaag cctgatcaaa 1560
cgcgtaaatg ccttcgaaac cctcaaggat ggcccaccat ga 1602
<210> 130
<211> 1851
<212> ДНК
<213> Pseudomonas gessardii
<400> 130
atgcccgctg cctggcttta tcgcccaact ggtgtgggac gacccgcgcc agaccgttgc 60
cgaccctccc tcgagtgccg gttgctgctc cgtttctacc ccccatggag atctgacatg 120
agcacgccct tcaagcaatt cacctccccc gccgggcaag cgccaaagga ctacaacaag 180
ctgggcctgg aagaccagtt gccgcaattt gaaaccgact ggaacaacga cgtcaccggc 240
tggaccgaag cggcgatcat cggcaaccca tggtcgggcc tgtacgacgc gccacgctcg 300
ggctattaca acccgctggt cgagggctat ggcgacacca ccccgccggc gattacctgg 360
caaccctttc ccaaccggct gtggacgttt ttttatagca acggcacggc ggtgattccg 420
caactgggcg gcaaggccat gaccctgcaa caggtcatgg aactgaccga caatggccag 480
atcaccatca acgacaccct gtacaccctg tacgacccgg acaagaaagg caccctgctg 540
caactgccgg tgacccgttg cccgagtatc gactggaacg gcaagtacaa ggatttctca 600
ccctcgggcc cacggggctg gctggacgag tattgcgagt ggtcgattgt ccgcgatgcc 660
aatggcgaca tgcgcaaaat caccttcacc agtgaaaacc cggcgtattt cctggccatg 720
tggcgcatcg acccgaatgc cgtgctgggg ctgtatcgcg actacatcga cccgaacgtc 780
caactcgaag acctctacct gcgctatgcc accgactgcc cgaccggcaa tgccggggat 840
ccggtgattg acccgaccac gggcctgccc gcctacgaca ctgtcaacaa atggaacgcc 900
ggcaccgcct gtacgcccgg ccagttcggc ggcgcgatgc acctgacgtc cggccccaac 960
accctcagcg ccgaggtgta cctggcggcg gcggccacga tcatgcggcc cctgaaaagc 1020
agccagaacc ctcagtcgct gatctgctgc gcgcaatatg ggcagaacta tcgcaactcc 1080
gacccgcata tcggttttgc ggccaatgag gcggccatca gcaaccgtat ctccctgacc 1140
aatcccatcg ccctgtacct gcagcaaccg accaacttca gcgcgtggaa aggcccgcag 1200
ggccaggatg tgagtcagta ctggcgcatt acccgcggca ccgccaaatc ggcgatcaac 1260
ggctccgacc agatcctcca ggcggtgttc gaggtgccgc aaagcgcggg gttctcgatc 1320
aatgacatca ccatcaacgg ccaggccgtg gactatgtgt gggtgattgc ccagcaactg 1380
ctggtgggcc tgagtgtgac cgtcatgccg agcaccacgg cggcgccgtc tccttgcgta 1440
caagaccggg tcaatggcct gcaaccctgg ccggtgcagt tattgccgct ggacctgttc 1500
tacggccagt cgcctaccga cctgccggcc tggctggccc ctggcagcag cgggcagttt 1560
gtcctggtgg tgcaaggcgc cgatctgcag accaccgccg ccacggcgag gatccagttc 1620
agcaatcccg gggtgacggc acaggtcacg aagttcatgc ccgacgcctc ggccattccc 1680
ggccagacca acgcgggcgg cacccagggt tacatcatga ccatcagcgt cgcggcgaac 1740
gcggcgccgg gactggtgac ggtacgcgcg ctcaacccgg gcgaggcgga taacgtcagc 1800
gcggcggacc acccgtggga atccgggctg gcgctggtgc catccaccta a 1851
<210> 131
<211> 1602
<212> ДНК
<213> Pseudomonas gessardii
<400> 131
atgatgtcca ggtttcgctt gagtcgtctg ctgctggtca gcaccctgct gtcactgttt 60
atcctgccct tggcccacgc gtccgatgcc gataactgcg tccagcagca actggtgttc 120
aaccccaaga gcggcgggtt tatgccggtc aacaacttca acaccaccgg ccagagcttt 180
atgaattgct ttggctggca attgttcatc gccctgaact ggccggtgga ccccggctgg 240
ccggccaatg ccagcctggc gggcgagccg gacagaacca tcaccgtcgc gcaattcggc 300
gtgcccacca ccgccgggca gcccatgagc gtggcgccgg tatgggccag ctacaaagac 360
gccaatgaga ttttcctgcc cggtgcaccc aagcccagcg gttggggggt gcaaaccctg 420
gtgccgccca attgcagcag ccaggacagc ctccaggccc tgtcggtagg ggcgcgtaaa 480
ttcatgaatg ccacctcgga aagcgcgacc aacgccaagc atcgcttcca cttgtccagc 540
ggcaccctgg cgtcgattcc cgacccgatc atggaagccg ccggtggctg gctcacggac 600
cagaccggca acctggtgta tttcgaacgc aaggtgggca aggccgagtt cgactacatc 660
gtcgacaacg gtctgtacga tgccgccaat caactgatcg tcgcgcaaaa cagcgatggc 720
aaacacccgg ccggcctgtc gctgcccgcc ggtgagctga tgcgctcgat gcccaccacc 780
ccgctgcccc aggagcaact gggcgccctg gaactcaagg ccgcctggcg catcctcacc 840
ggccagcccc agctctacgg gcgctacctg accactgtgg cctggctcaa gaaccccgcc 900
accctgcaat gcacccaaca ggtggtgggc ctggtgggcc tgcatatcat caacaagacc 960
cagagctcac cgaactttat ctggaccacc ttcgagcacg tggacaacgt accggaaccg 1020
ggccaggtgc ccgcgcaaca gctgcccccg gacggctaca ccttcaacaa tcccaactgc 1080
accggcggcc ccgatgtgtg tacgccgaac gtggcgcgca tccagtgcaa acagcaccac 1140
ccggatcgcg aatgcaccga accctatcca cgggaccaac cggtgcagac cacccgcgaa 1200
cacccactgt cgtcggacat gcaggcgctc aacggcgcag tgcaggcaag cttcgcccaa 1260
cagaccaacg gccagtcggt gttccagtac tacaagctga tcaatgtgct gtggatcacc 1320
gccccgacgc cgcccgaccc cgagccgggc ccgaatgcga aggttcccct gtcctacggt 1380
gcttttatca gcgacagcaa cgtacccgtg gccaatacca ccctggagac gtacgtccag 1440
ggcatgaact gcaatgactg ccatcagcaa gcgaccattg ccggcagcgc caccctggcc 1500
tcggacttct cgttcctgtt caacaacgcc gattcggcca agcatacaag cctgatcaaa 1560
cgcgtacatg ccttcgaaac cctcaaggac ggccaaccat ga 1602
<210> 132
<211> 1737
<212> ДНК
<213> Pseudomonas putida
<400> 132
atgagcgcgc ccttcaagca gttcacctct cccgccggcc aagcccccaa ggactacaac 60
aagctgggcc tggaagacca gttgccgcag tttgaaaccg actggaacaa caacctcacc 120
ggctggaccg aatcgtcgat catcggcaac ccctggtcgg gcctgaacga cgccccccgc 180
tcgggttact acaacccgct ggtggaaggt ttcggcgacg tgaccgcccc ggcgatcacc 240
tgggcgccct tccccaaccg gctctggacg ttcttctaca acaacggtgc ggcggtcatt 300
ccccagctgg gtggcaaggc catgaccctg gaccaggtga tggcgttgac cgaccacggc 360
cagatcacgc tcgacaacac cctctacatg ctctacgacc ccaacaagca aggtactgtg 420
ctgcaactgc cggccaagcg ctgcccgagc atcgactgga acggcaagta cacggcgttc 480
tcgccttccg gcccgcgggg ctggctcgac gagtactgcg agtggtcgat cgtacgcgat 540
gccaacggca acatgcgcaa gatcaccttc acctgcgaaa accccgcgta cttcctgacc 600
atgtggcgca tcgacccgaa cgcagtgctg ggcctgtacc gcgactacat cgacccgaac 660
gtgcaactcg aagacctgta cctgcgctac accgtcgact gcccgaccgg caaggccggc 720
gacccggtca tcgaccccac caccggcaag ccggcctatg acaccgtcaa caaatggaac 780
gccggaacgg cctgtgtgcc cggccagtac ggcggtgcga tgcacctgac ctccggcccc 840
aataccctca gcgccgaggt gtacctggcc gccgccgcca ccatcctggg cccggtgagc 900
agcagtcaga acgcccagtc gttgatctgc tgcgcgcagt acgggcaaaa ctatcgcaac 960
tctgatccgc acatcggttt catggccaat accacggcag tgaacaaccg actgtcgctg 1020
accaacccca ttggcctgta cttgcagcag cccaccgatt tcagcgcctg gaagggcccg 1080
caaggccagg acgtgagcca gtactggcgc atcacgcgcg gtacggcgaa gtcggccgcc 1140
aatggttccg accagatcct gcaggcggtg ttcgaggtgc cggaaagcgc cggcttctcg 1200
atcaacgaca tcaccatcaa caaccagaag gtcaactatg tgtgggtcat cgcccaacaa 1260
ctgctggtcg gcctgagcgt caccgtcaag ccgctcagca ctgcgcctca agcgttccca 1320
tgcgtgcagg accgggtggc cggcctgcaa ccctggccag tgcaactgct gccgctggat 1380
ctgttctacg ggcaatcccc caccgacctg cccgcctggc ttgcaccggg tagcagcaac 1440
cagttcgtgc tggtggtgca aggtgccgac ccgactacca cggcgcagaa tgcaagggtg 1500
caattctcca accctggggt gacggcgcag gtcacccagt acctgcccga cgcatcggcc 1560
attcctagcc agaccaactc gggcggcacc caggcctaca ttctgaccat cacggtcagc 1620
ccctccgcag cacccggcct ggtggcagtg cgtgccctca acccgggtga agatgtgaac 1680
gtgagcgcga cagaccaccc ttgggaatct ggcctggcgc tggtgcctgg cgcctga 1737
<210> 133
<211> 1605
<212> ДНК
<213> Pseudomonas putida
<400> 133
atgtccaggt cacgcttgag tcttctgtcg ctgctgtgcg gcattctact gtgcctgtcg 60
accccgcaac ccgccacggc ggccacgctg tcggacgccg atacctgtgt acagaagcaa 120
ttggtgttca acccggccag cgggggattc ctgccggtca acaacttcaa tgccaccagc 180
caggcgttca tgaactgctt tggctggcag ttgttcattg ccttgaactg gccggtgaac 240
cccggttggc cagccaccgc cagcctggcg ggtgaacccg acatgcaaag cacgctggcg 300
cagttcgggg tcccctctgc accgggtcag cccatgagcg tggccccggt atgggccagc 360
tacaaggacg ccaacgacat cttcctgccc ggcgcaccca cgcctaccgg ctggggcgtg 420
gaaaccctgg tgccgtccgg ctgcagcacc cagggtagcc tcaaggcgct caaggtgggc 480
gcacgcaagt tcatgaacgc cacctccgaa ggcgcgatca atgccttgca cggtttccac 540
ctgtcgaccg ggacacttgc gtccattccc gacccggtca tggaggcgtc cggcggctgg 600
ctgacggacc aggcgggcaa actggtattt tttgagcgca aggtgggcaa ggccgagttc 660
gactacatcg tcgacaaggg gctctacgac gctgccaacc agttgaaggt cgcgcaaaac 720
ctcgacggcc agacaccgga gggcctgtcg ctgcccatcg gcgaaccgat gcgctcactg 780
ccgacctccc cagtgccaca ggagcaactg ggcgcgatcg agctcaaggc cgcctggcgg 840
gtgctgaccg gcaaacccga gctgttcggg cgctacctga ctaccgtcgc ctggctcaaa 900
cgccccgaca cgctggagtg cacccaggag gtggtggggc tggtgggcct gcatatcatc 960
aacaagaccc aggcttcgcc caacttcatc tggaccacct tcgagcaggt ggacaacgtg 1020
cccgaaccgg cccaggtccc gccgcaacaa accccgccaa acgggtttgc cttcaacaac 1080
cctgactgtg gcgacggccc cgagtgcaca ccgaaccaag cccgtatcca gtgcaagcaa 1140
acgcatcccg acaaggactg caccgatctc ttcccacgcg accagccggt acagaccacc 1200
cgcgtacacc ccgtgcccgg cgacctgcaa gccctcaaca gcgcggtaca agccaacttc 1260
gcgcagcaca gccaaggcaa gtcggtgttt cagtactaca agctgatcaa cgtactctgg 1320
accctcgccc ccaatccgcc cagcccggaa ccgggcgcca acgcgcaagt gccgctgtcg 1380
tacgggccgt tcatcagcca gggcaacgtg ccggtggcca acaccaccat ggagacctac 1440
gtgcagggtg atgactgcaa tcagtgccat cagtacgcga cgattgccgg cagcccgtca 1500
ttggcctcgg atttctcttt cctgttcaac agtgccggct ccgccagcaa caaaagcctg 1560
atcaaaagcg tcaaagcctt cgaaaccctc aaggaccgcc cctga 1605
<210> 134
<211> 1737
<212> ДНК
<213> Pseudomonas plecoglossicida
<400> 134
atgagcacgc ccttcaagca gttcacctct cccgccggcc aagcccccaa ggactacaac 60
aagctgggcc tggaagacca gttgccgcag tttgaaaccg actggaacaa caacctcacc 120
ggctggaccg aatcgtccat catcggcaac ccttggtcgg gcctgaacga cgccccccgc 180
tcgggttact acaacccgct ggtggaaggc ttcggcgacg tgaccgcccc ggcgatcacc 240
tgggcgccct tccccaaccg gctctggacc ttcttctaca acaacggtgc ggcggtcatt 300
ccccagttgg gtggcaaggc catgaccctg gaccaggtga tggagttgac cgaccacggc 360
cagatcaccc tcgacaacac cctctacatg ctctacgacc ccaacaaacg aggtaccgtg 420
ctgcaactgc cggccaagcg ctgcccgagc atcgactgga acggcaagta cacggcgttc 480
tcgccttccg gcccacgggg ctggctcgac gagtactgcg agtggtcgat cgtgcgcgat 540
gccaacggca acatgcgcaa gatcaccttc acctgcgaaa accccgcgta cttcctgacc 600
atgtggcgta tcgacccgaa cgcagtattg ggcctgtacc gcgactacat cgacccgaac 660
gtgcaactcg aagacctgta cctgcgctac accgccgacg gcccgaccgg caaggccggt 720
gacccggtca tcgaccccac caccggcaag ccggcctatg acaccgtcaa caaatggaac 780
gccggaacgg cctgtgtgcc cggccagttc ggcggtgcga tgcacctgac ctccggcccc 840
aataccctca gcgccgaggt gtacctggcc gccgccgcca ccatcctgcg cccggtgagc 900
agcagccaga acgcccagtc gttgatctgc tgcgcgcagt acgggcagaa ctatcgcaac 960
tctgatccgc acatcggttt catggccaat accacggcgg tgaacaaccg actgtcgctg 1020
accaacccca ttggcctgta cttgcaacag cccaccgact tcagcgcctg gaagggcccg 1080
caaggccagg acgtgagcca gtactggcgc atcacgcgtg gtacggccaa gtcggctgcc 1140
aacggttccg accagatcct gcaggcggtg ttcgaggtgc cggaaagcgc cggcttctcg 1200
atcaatgaca tcaccatcaa caaccagaag gtcaactatg tgtgggtcat cgcccaacaa 1260
ctgctggtcg gcctgagcgt caccgtcaag ccgctcagca ccacgcctca agcgttccca 1320
tgcgtgcagg accgggtggc cggcctgcaa ccctggccag tgcagctgct gccgctggac 1380
ctgttctacg ggcaatcccc aaccgacctg cccgcctggc ttgcaccggg cagcagcaac 1440
cagttcgtgc tggtggtgca aggcgccgac ccgactacca cggcgcagaa tgccagggtg 1500
caattctcca accctggggt gacggcgcag gtcacccagt acctgcccga cgcgtcggcc 1560
attcccggcc agaccaactc gggcggcacc caggcctaca ttctgaccat cacggtcagc 1620
ccctccgcag cacccggcct ggtgacagtg cgtgccctca acccgggtga agatgtgaac 1680
gtgagcgcga cagaccatcc ttgggaatct ggcctggcgc tggtgccggg ggcctga 1737
<210> 135
<211> 1605
<212> ДНК
<213> Pseudomonas plecoglossicida
<400> 135
atgtccaggt cacgcttgag tcttctgtcg ctgctgtgcg gcattctgct gtgcctgtcg 60
accctgcaac ccgccacggc ggccacgctg tcggacgccg atacctgtgt gcagcagcaa 120
ttggtgttca acccggccag cgggggattc ctgccggtca acaacttcaa tgccaccagc 180
caggcgttca tgaactgctt tggctggcag ctgttcattg ccttgaactg gccggtgaac 240
cccggttggc cggccaccgc cagcctggcg ggcgaacccg acatgcaaag cacgctggcg 300
cagttcgggg tcccctccgc accgggtcaa cccatgagcg tggccccggt atgggccagc 360
tacaaggacg ccaacgacat cttcctgccc ggcgcaccca cgcccaccgg ctggggcgtg 420
caaaccctgg tgccatccgg ctgcagcacc cagggtagcc tcaaggcact caaggtcggc 480
gcacgcaagt tcatgaacgc cacctccgaa ggcgcgatca atgccttgca cggtttccac 540
ctgtcgaccg ggacacttgc gtccattccc gacccggtca tggaggcgtc cggcggctgg 600
ctgacggacc aggcgggcaa actggtgttt ttcgaacgca aggtgggcaa ggccgagttc 660
gactacatcg tcgacaaggg gctctacgac gccgccaacc agttgaaggt cgcgcaaaac 720
ctcgacggcc agacaccgga gggcctgtcg ctgcccatcg gcgaaccgat gcgctcactg 780
ccgacctccc cagtgccaca ggagcaactg ggcgcgatcg agctcaaggc tgcctggcgg 840
gtactgaccg acaaacccga gctgttcggg cgctacctga ctaccgtcgc ctggctcaaa 900
cgccccgaca cgctggagtg tacccaggag gtggtggggc tggtgggcct gcatatcatc 960
aacaagaccc aggcttcgcc caacttcatc tggaccacct tcgagcaggt ggacaacgtg 1020
cccgaaccgg cccaggtccc gccgcaacaa accccgccga acgggtttgc cttcaacaac 1080
cctgactgtg gcaacggccc cgagtgcaca ccaaaccaag cccgtatcca gtgcaagcaa 1140
acgcatcccg acaaggactg caccgatctc ttcccacgcg accagccggt acagaccacc 1200
cgcgaacacc ccgtgcccgg cgacctgcaa gccctcaaca gcgcggtaca agccaacttc 1260
gcgcagcaca gccaaggcaa gtcggtgttc cagtactaca agctgatcaa cgtactctgg 1320
accctcgccc ccaatccgcc cagcccggaa ccgggcgcca acgcgcaagt gccgttgtcg 1380
tacgggccgt tcatcagcca gggcaatgtg ccggtggcca acaccaccat ggagacctac 1440
gtgcagggtg acgactgcaa ccagtgccat cagtacgcga cgattgccgg cagcccctcg 1500
ttggcctcgg acttctcctt cctgttcaac agtgccggct ccgccagcaa caaaagcctg 1560
atcaaaagcg tcaaagcctt cgaaaccctc aaggaccgcc cctga 1605
<210> 136
<211> 1737
<212> ДНК
<213> Pseudomonas putida
<400> 136
atgagcacgc ccttcaagca gttcacctct cccgccggcc aagcccccaa ggactacaac 60
aagctgggcc tggaagacca gttgccgcag tttgaaaccg actggaacaa caacctcacc 120
ggctggaccg aatcgtcgat catcggcaac ccctggtcgg gcctgaacga cgccccccgc 180
tcgggttact acaacccgct ggtggaaggt ttcggcgacg tgaccgcccc ggcgatcacc 240
tgggcgccct tccccaaccg gctctggacg ttcttctaca acaacggtgc ggcggtcatt 300
ccccagctgg gtggcaaggc catgaccctg gaccaggtga tggcgttgac cgaccacggc 360
cagatcacgc tcgacaacac cctctacatg ctctacgacc ccaacaagca aggtactgtg 420
ctgcaactgc cggccaagcg ctgcccgagc atcgactgga acggcaagta cacggcgttc 480
tcgccttccg gcccgcgggg ctggctcgac gagtactgcg agtggtcgat cgtacgcgat 540
gccaacggca acatgcgcaa gatcaccttc acctgcgaaa accccgcgta cttcctgacc 600
atgtggcgca tcgacccgaa cgcagtgctg ggcctgtacc gcgactacat cgacccgaac 660
gtgcaactcg aagacctgta cctgcgctac accgtcgact gcccgaccgg caaggccggc 720
gacccggtca tcgaccccac caccggcaag ccggcctatg acaccgtcaa caaatggaac 780
gccggaacgg cctgtgtgcc cggccagtac ggcggtgcga tgcacctgac ctccggcccc 840
aataccctca gcgccgaggt gtacctggcc gccgccgcca ccatcctgcg cccggtgagc 900
agcagtcaga acgcccagtc gttgatctgc tgcgcgcagt acgggcaaaa ctatcgcaac 960
tctgatccgc acatcggttt catggccaat accacggcag tgaacaaccg actgtcgctg 1020
accaacccca ttggcctgta cttgcagcag cccaccgatt tcagcgcctg gaagggcccg 1080
caaggccagg acgtgagcca gtactggcgc atcacgcgcg gtacggcgaa gtcggccgcc 1140
aatggttccg accagatcct gcaggcggtg ttcgaggtgc cggaaagcgc cggcttctcg 1200
atcaacgaca tcaccatcaa caaccagaag gtcaactatg tgtgggtcat cgcccaacaa 1260
ctgctggtcg gcctgagcgt caccgtcaag ccgctcagca ctgcgcctca agcgttccca 1320
tgcgtgcagg accgggtggc cggcctgcaa ccctggccag tgcaactgct gccgctggat 1380
ctgttctacg ggcaatcccc caccgacctg cccgcctggc ttgcaccggg tagcagcaac 1440
cagttcgtgc tggtggtgca aggtgccgac ccgactacca cggcgcagaa tgcaagggtg 1500
caattctcca accctggggt gacggcgcag gtcacccagt acctgcccga cgcatcggcc 1560
attcctggcc agaccaactc gggcggcacc caggcctaca ttctgaccat cacggtcagc 1620
ccctccgcag cacccggcct ggtggcagtg cgtgccctca acccgggtga agatgtgaac 1680
gtgagcgcga cagaccaccc ttgggaatct ggcctggcgc tggtgcctgg cgcctga 1737
<210> 137
<211> 1605
<212> ДНК
<213> Pseudomonas putida
<400> 137
atgtccaggt cacgcttgag tcttctgtcg ctgctgtgcg gcattctact gtgcctgtcg 60
accccgcaac ccgccacggc ggccacgctg tcggacgccg atacctgtgt acagaagcaa 120
ttggtgttca acccggccag cgggggattc ctgccggtca acaacttcaa tgccaccagc 180
caggcgttca tgaactgctt tggctggcag ttgttcattg ccttgaactg gccggtgaac 240
cccggttggc cggccaccgc cagcctggcg ggcgaacccg acatgcaaag cacgctggcg 300
cagttcgggg tcccctccac accgggtcaa cccatgagcg tggccccggt atgggccagc 360
tacaaggacg ccaacgacat cttcctgccc ggcgccccca cgcccaccgg ctggggcgtg 420
caaaccctgg taccgtccga ctgcagcacc caaggtagcc tcaagacact caaggtgggc 480
gcgcgcaagt tcatgaacgc cacctccgaa ggcgcgatca atgccttgca cggtttccac 540
ctgtcgaccg ggacacttgc ctccattccc gacccggtca tggaagcgtc cggcggctgg 600
ctgacggacc aggcgggcaa actggtgttt tttgaacgca aggtgggcaa ggccgagttc 660
gactacatcg tcgacaaggg gctctacgac gccgccaacc aattgaaggt cgcgcgaaac 720
ctcgacggcc agacaccgga gggtctgtca ctgcccatcg gcgaaccgat gcgctcactg 780
cctacctccc cagtgccaca ggagcaactg ggcgcgatcg agctcaaggc cgcctggcgg 840
gtactgactg gcaaacccga gctgttcggg cgctacctga ctaccgtcgc ctggctcaaa 900
cgtcccgaca cgctggagtg cacccaggag gtggtggggc tggtgggcct gcatatcatc 960
aacaagaccc aggcttcgcc caacttcatc tggaccacct tcgagcaggt ggacaacgtg 1020
cccgaaccgg cccaggttcc gccgcaacaa accccgccaa acgggtttgc cttcaacaac 1080
cctgactgtg gcaacggccc cgagtgcaca ccaaaccaag cccgtatcca gtgcaagcaa 1140
acgcatcccg acaaggactg caccgatctc ttcccgcgcg accagccggt acagaccacc 1200
cgcgaacacc ccgtgcccgg cgacctgcaa gccctcaaca gcgcggtaca agccaacttc 1260
gcgcagcaca gccaaggcaa gtcggtgttc cagtactaca agctggtcaa cgtactctgg 1320
accctcgctc ccaacccgcc cagcccggaa ccgggcgcca acgcgcaagt gccgctgtcg 1380
tacgggccgt tcatcagcca ggggaacgtg ccggtggcca acaccaccat ggagacctac 1440
gtgcagggtg ataactgcaa tcagtgccat cagtacgcga cgattgccgg cagcccgtca 1500
ttggcctcgg atttctcttt tctgttcaac agtgccggct ccgccagcaa caaaagtctg 1560
atcaaaagcg tcaaagcctt cgaaaccctc aaggaccgcc cctga 1605
<210> 138
<211> 1737
<212> ДНК
<213> Pseudomonas putida
<400> 138
atgagcacgc ccttcaagca gttcacctcg cccgccggcc aagcccccaa ggactacaac 60
aagctgggcc tagaagacca gctgccgcag ttcgaaaccg actggaacaa caacctcacc 120
ggctggaccg agtcgtcgat catcggcaac ccctggtcgg gcctgaacga tgcgccccgc 180
tcgggttact acaacccgct ggtggaaggc ttcggcgacg tgaccccgcc ggcaatcacc 240
tgggcgcctt tccccaaccg actgtggacg ttcttctaca acaatggcac ggcggtcatt 300
ccgcagctgg gtggcaaggc catgaccctg gaccaggtga tggagttggc cgaccatggc 360
cagatcagcc tcgacaacac cgtctacagg ctctatgacc cgaacaagca aggcaacctg 420
ctgcaactgc cggccaagcg ctgcccgagc atcgcctgga acggcccgta caaggatttc 480
tcgccttccg gcccacgggg ctggctcgac gaatactgcg agtggtccat cgtgcgcgat 540
ggcaacggca aaatgcgcaa gatcaccttc acctgtgaaa acccggcgta tttcctgacc 600
atgtggcgca tcgacccgaa tgcggtgctg ggcctgtacc gcgaatacat cgacccgaac 660
gtgcagctcg aagacctgta cctgcgctat accgaagacg gcccgaccgg caaggccggt 720
gagccggtca tcgatcccac caccggcaag ccggcgtacg acaccgtcaa caaatggaat 780
gccggcacgg tcagtgtgcc cggccagtat ggcggggcaa tgcacctgac ctccggcccc 840
aataccctca gtgccgaggt gtacctcgcc gccgccgcca ccatcctgcg accggtcagc 900
agcagccaga acgcccagtc gctgatctgc tgcgcgcagt acgggcagaa ctaccgcaac 960
tccgacccgc acatcggttt catggccaac agcacggcgg tgaacaaccg cctgtcgctg 1020
accaacccga ttggcctgta cttgcaacaa cccaccgact tcagtacctg gaagggcccg 1080
caaggccagg atgtgagcca gtactggcat atcacgcgcg gcgcggccaa gtccgcggcc 1140
aacggttccg accagatcct tcaggcggtg ttcgaaatac cggaaagcgc cggtttctcg 1200
atcaacgagg tcaccatcaa caaacaaccg gtcaaccatg tgtgggtcat cgcccaacag 1260
ttgctggtgg gcctgagcgt caccgtcaag ccactcgccg ccacgcctgc ttcctacccc 1320
tgcgtgcagg accgggtggc aggcctgcaa ccctggccgg tgcagctgct gccgttggac 1380
ctgttctacg gcaactcacc caccgacctg cccgcctggc ttgccccggg cagcagcaac 1440
caattcgtgc tggtggtgca aggcgccgac gagaacacca ccgcagagaa cgcccgggtg 1500
caattctcca accccggggt taccgcgcag gtcacccagt acctgcccga cgcaacggcc 1560
atacccggcc agaccaatac cggcggcacc caggcttaca tcctgacgat cacggtcagc 1620
cccactgccg cacccggcct ggtgacggta cgtgcgctca acccggacga agacgccaac 1680
gtgagcgcgg cagaccaccc ttgggaatcc ggcctggcgc tggtgcctgg cgcctga 1737
<210> 139
<211> 1605
<212> ДНК
<213> Pseudomonas putida
<400> 139
atgtccagcc tacgcttgag tcttctgtcg ctgctaagcg gcattctcct gtgcctgtcc 60
gcccagcaaa cagccacggc ggccacgcag tccgacgccg atagctgtgt gcagcagcaa 120
ctggtgttca acccggccag tggcgggttc ctgccggtca acaacttcaa tgccaccagc 180
caggcgttca tgaactgctt tgcctggcag ttgttcattg ccctgaactg gccggtgaac 240
ctcggttggc caggcactgc cagcctggcc ggggaacccg acctgaacag cagcctggcg 300
cagttcgggg tacctgccac accgggtcaa cccatgagcg tggcgccggt gtgggccagc 360
tacaaggacg ccaacgacat cttcctgccc ggcgcaccca cgcccagcgg ctggggcgtg 420
caaaccctgg taccggccaa ttgcagcacc cagggcagcc tcaaggcact caaggtcggc 480
gcgcgcaagt tcatgaacgc aacctccaag agcgcgatca acgtcttgca cggtttccac 540
ctgtccagcg ggacgctggc atccagcccc gacccgttca tggaggcgtc tggcggctgg 600
ctgacagacc agtcgggcaa cctggtgttt ttcgaacgca aggtgggcaa ggccgaattc 660
gactacatcg tcgacaacgg cctctacgac gcggccaacc agctgaaggt cgcgcaaaac 720
caggacggca agtccccggc ggggctgtcg ctgcccgccg gcgaaccgat gcgctccctg 780
cctgccgccc cggtcccgca ggagcaactg ggggcgatcg aagtcaaagc cgcctggcgg 840
gtgctgaccg gcaaacccga gctgttcggg cgctacctga ccaccgtcgc ctggctcaaa 900
cgccccgaca cgctggcctg cacccaggaa gtggttggcc tggtgggcct gcatatcatc 960
aacaagaccc aggcttcgcc caacttcatc tggaccacct tcgagcaggt ggacaacgtg 1020
cccgaaccgg cccaggcccc gccgcaacaa accccgccga acgggtttgc cttcaacaac 1080
cccgactgtg gcagcggccc cgagtgcaca ccgaaccagg cccgtatcca gtgcaagcaa 1140
caccaccccg acaaggactg caccgatcgc ttcccacgcg accagccggt acagaccacc 1200
cgcgaacacc ccgtgcccgg cgacctgcaa gcgctcaaca gcgcggtaca agccaacttc 1260
gcgcagcaca gccaaggcca gtcggtgttc cagtactaca agctgatcaa cgtactctgg 1320
accctcgccc ccaatccgcc cagcccggaa ccgggcgcca acgcgcaagt gccgctgtca 1380
tacgggccgt tcataagcca gggcaacgtg ccggtggcca ataccaccct ggagacctat 1440
gtacagggtg atgactgcaa ccagtgccac cagtacgcga cgattgccgg cagcccgtcg 1500
ttggcctcgg acttctcttt cctgttcaac agtgccgatt ccgccagcaa caaaagcctg 1560
atcaaaagcg tcaaagcctt cgaaaccctc aaggacctcc cctga 1605
<210> 140
<211> 1737
<212> ДНК
<213> Pseudomonas monteilii
<400> 140
atgagcacgc ccttcaacca gttcacttct cccgccgaac aagcacccaa ggactacaac 60
aagctgggcc tggaaaacca gctgccgcag ttcgagagcg actggaacaa ctacctcacc 120
ggctggaccg aatcgtccat catcggcaac ccgtggtcga gcctgtacga cgcgccgcgc 180
tcgggctact acaacccgct ggtggaaggt ttcggtgatg tggttgtgcc ggcgatcacc 240
tgggcgccct tccccaaccg gctatggacg ttcttttaca acaacggtgc cgcagtcatt 300
ccccagctgg gtggcaaagc catgaccctg caacaggtga tggagctggc cgactacggc 360
cagatcaccc tcaacgacac cctctacacg ctgtacgacc cggacaacaa aggcaccctg 420
ctgcaactgc cggccaaacg ctgccccagc atcgactgga acggcaagta caccgcgttc 480
tcgccctccg gcccacgcgg ctggcttgat gaatactgcg agtggtcgat cgtgcgcgac 540
gccaacggca acatgcgcaa gattaccttc acctgcgaaa acccggcgta ctacctggcc 600
atgtggcgca tcgacccgaa cgccgtgctg ggcctgtacc gtgaatacat cgaccccaac 660
gtgcagctcg aagacctgta cctgcgctac accgtcgatt gcccgaccgg caaggctggc 720
gacccggtca tcgaccccac caccggcctg ccggcctatg acacggtgaa caagtggaat 780
gccggcacgg cctgtgtgcc cggccaattt ggcggggcca tgcacctgac ctcaggcccc 840
aacaccctca gcgccgaggt gtacctggcc gccgccgcta ccatcctgcg cccggtgacc 900
agcagccaga acgcccagtc gctgatctgc tgcgcccagt atgggcagaa ctatcgcaac 960
tccgacccgc acatcggttt catggccaat tccaaggcag tgaacaaccg cttgtcactg 1020
accaatccga ttggcctgta cctgcagcag cccaccgact tcagcacctg gaaaggcccg 1080
caaggccagg atgtgagcca gtattggcgg gttacgcgcg gcactgccaa gtcggccgcc 1140
aacggctccg accaaatcct ccaggccgtg ttcgaagtgc cggaaagcgc aggcttctcg 1200
atcaacgaga tcacgatcaa caagcaaccg gttgactatg tgtgggtcat cgcccaacaa 1260
ctgctggtgg gcctgagcgt cagtgctcta ccgcccgcca ccacccctcc atccttcccc 1320
tgcgtgcagg accgggtgac gggcctgcag ccctggccgg tgcagttgct gccgctggac 1380
ctgttctacg gccagtcacc caccgacctg ccggcctgtc ttgcgccggg cagcagcaac 1440
cagttcgtgc tggtggtaca aggcgccgac ccgaacacca cggcgcagag tgccagggtg 1500
cagttctcca accctggcat cagcgcgcag gtcacccagt tcctgcctga cgcctcagcc 1560
attcccgggc agaccaatgc gggcggcacc caggcctaca tcctgaccat cacggtcagc 1620
cccagcgccg cccccggcct ggtgacggtg cgtgccctca atccgggcga agacgggaac 1680
gtgagcgcag cagaccaccc gtgggaatcc ggcctggcgc tggtacctgg cgcctga 1737
<210> 141
<211> 1605
<212> ДНК
<213> Pseudomonas monteilii
<400> 141
atgtccaggt tacgcttgag tcttctgtcg ctactaagcg gcatgctgct gtgcctgtcg 60
accctgccag ccgccacggc ggcgccaatg acggaggccg acgcctgtgt acagcaacag 120
ttggtgttca acccggccag cggcgggttc ctgccggtca acaacttcaa tgccagcaac 180
caggcgttca tgaactgttt tgcctggcag ctgttcattg ccctgaactg gccggtgaat 240
cccggctggc cagccaccgc cagcctggcc ggcgaacccg acatgaacag caccctggcg 300
cagttcggtg tgccctccga cccggggcaa ccgatgagcg tggcgccggt gtgggccagc 360
tacaaggacg ccaacgacat cttcctgccc ggcgccccca agcccagcgg ctggggcgtg 420
caaaccctgg tgccatccgg ttgcggcacc cagggcagcc tcaaggcgct caaggtgggg 480
gcacgcaagt tcatgaacgc cacctccgaa agcgcgatca acgccgtgca cggtttccac 540
ctgtccagcg ggacgctcgc atcccttccc gactcgatca tggaagcatc cggtggctgg 600
ctgaccgacc aggcgggcaa cctggtgttc ttcgagcgca aggtgggcaa ggccgagttc 660
gactacatcg tcggcaaggg gctgtacgac gccgccaacc agttgaaggt cgcgcaaaac 720
gccgacggca ctacaccgga ggggttgtcg ttgcccattg gcgagccgat gcgctcgctg 780
ccgccatccc cggtgccgca ggaacaactc ggcgcgatcg aactcaaggc cgcctggcgc 840
atactgaccg gcaaacccga actgttcggg cgctacctga ccaccgtcgc ctggctcaag 900
cgccccgaca cgctgacgtg tacccaggaa gtggtggggc tggtgggcct gcatatcatc 960
aacaagaccc aggcctcgcc gaacttcatc tggaccactt tcgagcaggt cgacaacgtg 1020
cccgagccgg gtcaggtacc gccgcaacaa accccgccga acggcttcgc cttcaacaac 1080
ccggactgcg gcagcggccc tgagtgtgaa ccgaaccagc cccgtatcca atgcaagcaa 1140
caccaccccg accgggactg caccgatctg ttcccacgcg accagccagt gcagaccacg 1200
cgcgagcatc ctgtgccgag cgacctgcaa gcgctgaacg gcgcagtgca agccaccttc 1260
gcgcagcaca gccagggcaa gtcggtgttc cagtactaca aactgatcaa cgtactctgg 1320
accctcgcgc ccaacccgcc cagcccggaa ccaggagcca acgcgccggt gccgttgtcg 1380
tacggggcgt acatcagcca gggcaatgtg ccggtggcca acaccaccct ggaaacctat 1440
gtgcagggtg atgactgcaa ccagtgccat cagtacgcga cgattgccgg cagcagttcg 1500
ctggcctcgg acttctcgtt cctgttcaac agtgccagct cagccagcaa gcacagcctg 1560
atcaagcgtg tccaagcctt cgaaacgctg aaggaccgtc gctga 1605
<210> 142
<211> 1734
<212> ДНК
<213> Pseudomonas poae
<400> 142
atgagcacac ccttcaccca attcacctcc cctgccgaac aagcgcccaa ggactacaac 60
aagttgggcc tggaggacca gttgccggcg ttcgaaaccg actggaacaa caacgtcacc 120
ggctggaccc agatgtcgat catcggcaac ccctggtcca acctcaacga tgcaccgcgc 180
tcgggctatt acaacccgct ggagagcggc tacggcacgc tgacgccaaa gaccatcacc 240
tggcagccct tccccaatcg gctgtggacg tttttctata acgagggcgc tgccgtggtc 300
ccgcaactgg gcggcaaggc catgaccctg gaccaggtga tgcaactgac cgaccacggc 360
cagatcaccc tcaacgacac cctctattcg ctgtacccgg accccaaggc cacccaactg 420
cagatcccca gcgtgctgtg caaatccatc aactggaacg gcccctacgc cgacttttcg 480
ccctcgggtc cacggggctg gctggacgaa tactgcgagt ggtcgatcac ccgcgacccc 540
gacggcaaca tgcgcagcat catgttcacc agcgagaacc cggcgtattt cctgaccatg 600
tggaacatcg acccgggtgc cgtgctgggc ctgtaccagg cgtatgtcga cccgcaggtg 660
aaactcgaag acctgtacct gcgctacacc gccgacggcc cgaccggcaa ggccggcgaa 720
ccggtactcg accccaccac cggccagccc gcctacgaca ccgtgaacaa atggaacagc 780
ggcaccgtgc gcataccggg cgtatcgggc ggcgcgatgc acctgacttc cggccccaat 840
accctgagtg ccgagatcta cctggcggcg gcggccacca tcctgcggcc actcaccagc 900
agccagaacc agcagagcct gatctgctgc gcgcaatacg ggcagaacta ccgcaactcc 960
gacccgcata tcgggttctc cgcgaaccag gcggcggtca acaacctgat ctcgttgacc 1020
aaccctatcg gcctgtacct gcagcaaccc aagtccttca gcacctggaa gggcccgcaa 1080
ggccaggatg tcagcagcta ctggcgcgtt acccgtggca ccgccggcac cggcccgaac 1140
aactccgacc agattctcca ggcggtcttc gaggtgccgg ccagcgcggg gttctcgatc 1200
aatgagatca ccatcaacgg cacgccgatc gactacgtgt gggtgatcgc caacgaactg 1260
aacgtggccc tcagcgtgac ccctgcgccg ctcacggccc agcccaagga gtgtgcctgc 1320
gtggcggcca acaccaccga tgcgcaaccc tggcccgtgc agttgctgcc gattgacctg 1380
ttctacggcc aatcccccag cgacttgccg gccagttttg cccccggcag ctcaggccag 1440
ttcgtattgg tggtacaagg cgccgacccg aacaccacgg cggcggatgc acgggtgcag 1500
ttctccaacc cgggcatcac ggcccaggtc acgcagttcc tgccggatgc ctcggcgatt 1560
cccggccaga ccgacggcgg cggcacccag ggctacatca tgaccatcac cgtcagcagc 1620
aacgcggcgc cggggctggt cagtgtgcgt gcgctgaacc ccagcgaagc ggccaacccg 1680
agtgcctccg agcacccctg ggaaagcggc ctggccctgg tgcccagcgc ctga 1734
<210> 143
<211> 1587
<212> ДНК
<213> Pseudomonas poae
<400> 143
atgaacggat ggcttcgccc gctgcgccgg gcacgcttgc gtattgcctg cgcaatcacc 60
tgcacccttc tcccactgct ggccgccaca ccggccaatg ccgcctcgga cgcccagagc 120
tgcgtcagcc agctggtgtt cgatcccacc agcggcggct tcctgccggt gaacaatttc 180
ggcaccgagc aggcttttct caattgtttc ggctggcagt tgttcatcgc catgaactgg 240
ccggtcaatc ccggctggcc ggccaaccca agcctggccg gtgagccgga cacccaaagc 300
agcgcggccc agttcggcgt gccgccaacc cccggccaac cgatgagcaa tgccccggtg 360
tgggccagct acaaggatgc cagcgaaatc ttcctgcccg gcgcggccaa gccgtccggc 420
tggggcgtgg aaaccctggt gccgtccaat tgcaccgcca ccggcaacct caaggcgttt 480
gccacggggg cgcgtaaatt catcaccgcc acctcggaaa gcgcgatcaa ccgcaagcac 540
cgcttccacc tgtccagcgg cacccaggtg accctgccgg attcgatcat ggaagcgtcc 600
ggcggctggc tcacggacca gtcgggcaac ctggtgtttt tcgagcgcaa ggtgggcaag 660
gccgagttcg actacatcgt cgacaacggt ttgtacgacg ccgccaacca actgatcgtg 720
gcgcaaaaca gcgacaaccg acaccccgcc ggcctgtcac tgccggccgg caagccggtg 780
cgcgagctgc cagccaaggc gctaccccag gaggagctgg gtgccctgga actcaaggcg 840
gcctggcgcg tgctcaccaa caagcccgac ttgtacgggc gctacctgac caccgtggcc 900
tggctgcaac gcccggacac gctgcaatgc acccaggaag tgataggcct ggtagggctg 960
catatcatca acaagaccca gacccagccg aacttcatct ggaccacctt cgagcagatc 1020
gacaacgtgc ccgatggcgg cgccgcccca ccccagggct acagcttcaa caaccccgag 1080
tgcaccggcg atgcctgcgc gccaaacgtc gcccgcgtgc agtgcgacgc cacccacacg 1140
ccgcccgact gcacgcccct ggaccagccg gtgcaggcca cccggctcaa cgccacgccc 1200
caggacatgc aggcgctgaa cacggcggtg cagcagacct tcgcccagca gacccagggc 1260
cagtcggtgt tccagtacta caaactggtg aacgtgctgt ggtccaagac gcccaacgcc 1320
cccaacgatc caggccctgg gccgaacgtg aaggtgccgc tgtcctatgg gccgtttgtc 1380
agcgaccaga gtgtcgtggt cgccaacacc acgatggaaa cctacgtgca gacagacaac 1440
tgcaatgact gccaccagta cgcggcgatt gccggcaaat ccgggctggc gtcggacttc 1500
tcgttcctgt tcggcaatgc cgactcggcg aaaaatacgc ggctgatcaa acgcatcgag 1560
tcgttcaaga ccctcaagga caacccg 1587
<210> 144
<211> 1734
<212> ДНК
<213> Неустановленное
<220>
<223> Микробные сообщества лубоеда сосны горной
<400> 144
atgagcacgc ccttcaccca attcacctcc cctgccgaac aagcccccaa ggactacaac 60
aagctgggcc tggagaacca actgcccacc ttcgaaacca actggaacaa caacgtcacc 120
ggctggaccc agatgtcggt gatcggcaac ccgtggtcca acctcaacga cgcaccgcgc 180
tcgggctact acaacccgct ggagagcggc tacggcacgc agacgccagt gaccatcacc 240
tggcagccct tccccaatcg gctgtggacg ttcttctaca acaacggcgc cgccgtggtc 300
ccgcaactgg gcggcaaggc catgaccctg gaccaggtga tgcagttgac tgaccatggc 360
cagatcaccc tgaacaacac cctctattcg ctgtacccgg accccaaggc aacccaactg 420
cagatcccca gcgtgctgtg caagtccatc aactggaacg gtccttacgc cgacttttca 480
ccctcgggcc cacggggctg gctggatgaa tactgcgagt ggtcgatcac ccgcgatccc 540
gacggcaaca tgcgcagcat catgttcacc agcgagaacc cggcgtactt cctgaccatg 600
tggaacatcg atccgcaggc cgtgctgggg ttgtacaagg cgtatgtcga cccgcaagtg 660
aagatcgaag acctgtacct gcgctacacc gccaacggcc cgaccggcca ggccggcgaa 720
ccggtgctcg accccaccac cggccagccc gcctatgaca cggtgaacaa atggaacagc 780
ggcaccgtgc gtatcccagg ggtgtcgggc ggcgccatgc acctgacctc cgggcccaat 840
accctgagtg ctgagatcta cctggcggcg gccgccacta tcctgcggcc gctcaacagc 900
agccgtaacc agcagagcct gatctgctgc gcgcagtacg ggcagaacta tcgcaactcc 960
gacccgcata tcggcttttc cgccaaccag gcggcggtca acaacctgat ctcattgacc 1020
aaccccatcg gcctgtacct gcaacagccg aaatccttca gcacctggaa aggcccgcaa 1080
ggccaggatg tcagcagcta ctggcgcgtc acccgtggca cggccggcac cggtccaaac 1140
aactccgacc agatcctgca ggcggtgttc gaggtgccac aaagcgcggg gttctcgatc 1200
aatgacatta ccatcaacgg cacgccgatc gactacgtgt gggtgatcgc caatgaattg 1260
aatgtggccc tgagcgtcac cccggcgccg ctccccgcac cgcccaagga atgcgattgc 1320
gtggcggcca acaacaccga tgcgcaaccc tggccggtgc agttgctgcc gatcgacctg 1380
ttctacggcc agtctcccag cgacttgccg gccagctttg cccccggcag ttccggccag 1440
ttcgtgctgg tggtgcaagg cgccgacccg aacaccacgg cggcggatgc gcgggtgcag 1500
ttttccaacc cagggattac cgcccaggtc acccagttct tgccggatgc gtcggccatt 1560
ccagggcaga ccgacagcgg cggcacccag ggctacatca tgacggtcac cgtcagcagc 1620
aacgcggcac cggggctggt cagcgtgcgt gcgctgaacc ccagcgaagg cgccaacccg 1680
agtgccaccc agcacccatg ggaaagcggc ctggccctgg tgcccgacgc ctga 1734
<210> 145
<211> 1590
<212> ДНК
<213> Неустановленное
<220>
<223> Микробные сообщества лубоеда сосны горной
<400> 145
atgaacggat ggcttcgccc gctgcgtcgg gcacgcttgc gtgtgttctg ctggatcacc 60
tgcgcccttc tcccactgct ggccccgtca ccggccaatg cggctaccga tgcccagagc 120
tgcgtcagcc agctggtgtt cgaccccacc agcggcggct tcctgccggt gaataacttc 180
ggcaccgagc aggactttct caattgtttc ggctggcagc tgttcatcgc catgaactgg 240
cccgtcaacc ctggctggcc ggccaacgcg agcctggccg gcgagccgga cacccaaagc 300
agcgtggccc aattcggcgt gccggcaaca cccggccagc caatgagcaa cgccccggtg 360
tgggccagct ataaggatgc cagcgagatc ttcctgcctg gtgcgcccaa accctctggc 420
tggggcttgg aaaccctggt gccgtccaat tgcaccgcca gcggcaacct caaggcctat 480
gccaccggcg cacgtaagtt catcaccgcc acctcggaaa gcgcgatcaa ccgcaagcac 540
cgtttccacc tgtccagcgg cacccaggtg accctgccgg actcgatcat ggaagcctcc 600
ggcggctggc tgacggacca gtcgggcaac ctggtgtttt tcgagcgcaa ggtcggcaaa 660
gccgagttcg actacatcgt cgataacggg ctgtacgacg ctgccaacca attgatcgtg 720
gcgcagaaca gcgacaaccg gcaccccgcc gggctgtcct tgcccgccgg caaactggtg 780
cgtgaactgc cagcccaggc actgccccaa gaggaattgg gcgccctgga gctgaaggcg 840
gcctggcgcg tactcaccaa caagcccgaa ttgtacgggc gctacctgac caccgtcgcg 900
tggctgcaac gcccggacac gctgcagtgc acccaggaag tggtgggcct ggtgggcctg 960
catatcatca acaagaccca gacccagccg aacttcatct ggaccacctt cgagcaggtc 1020
gacaacgtgc ccgacgccgg cccgacaccg ccccaaggct acagcttcaa caacccggca 1080
tgcagcggca ctgcctgcac gcccaacgtc gcccgcgtgc agtgcgacgc cacccacgcc 1140
ccgcccaact gcacgcccct ggatcagccg gtgcaggcca cgcgggtcaa tgccacgccc 1200
caggacctgc aggccttgaa tacggctgta cagcaaacct tcgcccagaa aacccagggc 1260
cagtcggtgt tccagtacta caaactggtg aatgtgctgt ggtccaagac gcccaatgcg 1320
cccaacgatc caggccctgg gcccaacgtg aaaacgccgc tgtcctacgg gccgtttgtc 1380
agcgaccaga gcgtcgtcgt cgccaatacc acgatggaaa cctacgtgca ggcagacaac 1440
tgcaacgact gtcaccagta cgcggcgatt gccggcaagt cgggcctggc atcagacttt 1500
tcgttcctgt tcggcaatgc cgattcggcg aagaacaccc gcctgatcaa acgcatcgag 1560
gggttcaaga ccctcaagga tgatcaatag 1590
<210> 146
<211> 1734
<212> ДНК
<213> Pseudomonas trivialis
<400> 146
atgagcacgc ccttcaccca attcacctcc cctgccgaac aagcgcccaa ggactacaac 60
aagctgggcc tggaggacca gctatcgacc ttcgaaacca attggaacaa caacgtcacc 120
ggctggaccc aaatgtcggt catcggcaac ccctggtcga acctcaatga cgcaccgcgt 180
tcgggctact acaacccgct ggaaagcggc tacggcacgc agacaccgct gaccattacc 240
tggcagccct tccccaatcg actgtggacg tttttctaca acaatggcgc cgccgtggtt 300
ccgcaactgg gcggcacggc catgaccctg gaccaggtga tgcagttgac cgatcacggc 360
cagatcaccc ttaacaacac gctttattcg ctgtacccgg acccggcggc aacccaactg 420
cagatcccca aagtgttgtg caagtccatc aactggcacg gcccctatgc cgatttttcg 480
ccctcgggtc cacggggctg gctggatgag tattgcgagt ggtccatcac ccgcgacccc 540
gacggcaaca tgcgcagcat catgttcacc agcgagaacc cggcctactt cctgaccatg 600
tggaacatcg acccaaatgc cgtgctgggg ctgtaccagg cgtacgtcga cccgcaggtg 660
aaactcgaag acctgtacct gcgctacacc gccaacggcc cgaccggcaa tgccggtgac 720
ccggtgatcg atgaaaccac cgggcggccc gcctatgaca ccgtcaacaa atggaacgcc 780
ggcaccgtgc gtataccggg cgtctcaggc ggcgcgatgc acctgacctc cgggcccaac 840
accctgagtg ccgagatcta cctggcggcc gcggctacca tccttcggcc gatccaaagc 900
agcggcaacc aacagaacct gatctgttgc gctcaatacg ggcagaacta tcgcaactcc 960
gacccgcata tcggcttttc cgccaaccag gctgcggtta aaaacctgat ctcgttgacc 1020
aatcccatcg gcctgtacct gcaacagccg aaatccttca gcacctggaa aggccctcaa 1080
ggccaggatg tgagcagcta ctggcgcgtc acccgtggca ctgccggcac cggcccgaac 1140
aactccgacc agatcttgca ggcggtgttc gaggtgccgc aaagcgcggg gttctcgatc 1200
aatgacatca ccatcaacgg cacaccgatc gactacgtgt gggtgattgc caacgaattg 1260
aatgtcgcct tgagcgtgac gccagcaccg ttgaccgcca cgcccaagga atgcgattgc 1320
gtggccgcca ataacaccga tgcccaaccc tggcccgtgc aactgctgcc attggacctg 1380
ttctacggcc agtcacccag tgacttgccg gccagttttg cacccggcag ctcagctcag 1440
ttcgtgctgg tggtgcaagg ggcagacccg aacaccaccg tggcggatgc gcgggtgcag 1500
ttttccaacc cggggatcag cgcccaggtc acgcagttct tgccggatgc ctcggcgatt 1560
cccgggcaga ccgacagtgg cggcacgcaa ggctacgtca tgaccgtcaa cgtcagcggc 1620
aacgctgcgc cggggctggt cagcgtgcgg gcgctgaacc ccagcgaagc cgccaacccc 1680
agcgcggccc aacacccatg ggaaagcggc cttgcgctgg tgccaggcgc ctga 1734
<210> 147
<211> 1587
<212> ДНК
<213> Pseudomonas trivialis
<400> 147
atgtacggat ggcctcgccc gctgtgtcgg gctcgcttga atgttttctc gttactggcc 60
ggcgccctgc tgtcactggt ggcgccgcca ccggccagcg cttcggacgc gcagacctgc 120
gtccagcaac tggtgttcga ccccgcaagt gggggcttcc tgccggtgaa caatttcggc 180
accgagcagg actttctcaa ttgtttcggc tggcaactgt tcatcgccat gaactggccg 240
gtcaatcccg gctggccggc cgacccgacc ctggcgggcg agccagacac gcaaagcagc 300
gctgcacagt tcggcgtgcc gcaaacgccc ggcaagccga tgagcaacgc gccggtgtgg 360
gccagctaca aggacgccaa cgacattttc ctgcccggtg cacccaaacc gaccggctgg 420
ggcgtggaaa ccctggtgcc gtccaattgc accgccaccg gcaacctgaa agcgctctcc 480
accggcgcgc gcaaattcat taccgccacg tcggaaagcg cgatcaaccg caagcaccgc 540
ttccacctgt ccagcggcac ccaggtgacc ctgcccgatt cgatcatgga agccgccggc 600
ggctggctga cggaccagtc gggcaacctg gtgtttttcg agcgcaaggt cggcaaggcc 660
gagttcgact acatcgtcaa taacggcttg tacgacgccg ccaatcaatt gatcgtggcg 720
cagaacagcg acaaccgaca ccccgccggc ctgtcgttgc ctgcgggcaa gctggtgcgt 780
gagctgccgg ccaaggcgct gccccaggaa gagttgggcg ccctggaact caaggcggcc 840
tggcgcgtcc tcacccacaa acccgagctg tacgcacgct acctgaccac cgtcgcctgg 900
ctgcaacgcc ctgacacgct gcaatgcacc caggaagtcg tgggtctggt gggcctgcat 960
atcatcaaca agacccagac ccagccgaac ttcatctgga ccacgttcga gcaggtcgac 1020
aacgtgcctg acggcggcgc tacaccgccg cagggctaca gcttcaacaa cccggcctgc 1080
accggtgatg cctgcacacc caacgtcgcc cgcgtgcaat gtgacgccac ccacacgccg 1140
cccaactgca cgccatttaa ccaaccggta caggccacac gggccaatgc cacgcctgag 1200
gacatgcaag cgttaaacac ggcggtgcag cagaccttcg cccagcagac ccagggccaa 1260
tcagtgttcc agtactacaa actggtgaac gtgctgtggt ctaaaacgcc caacgcacct 1320
aacgatccag gccctgggcc gaacgtgaag acgccgctgt cctatgggcc gtttgtcagc 1380
gatcaaagtg ttgccgtcgc caataccacc ctggaaacct atgtgcagac agagaactgc 1440
aacgactgcc accagtacgc ggccattgcc ggtggttcca aattggcgtc ggacttctcc 1500
ttcctgttcg gcagcgccga ctccgcgaag aacactcgcc tgatcaaacg catcgaggcg 1560
ttcaagaccc tcaaggatga tcattag 1587
<210> 148
<211> 1734
<212> ДНК
<213> Pseudomonas sp. R81
<400> 148
atgagcacgc ccttcaccca attcacctcg cctgccgagc aagcccccaa ggactacaac 60
aagctgggcc tggaaaacca gctgccgacc ttcgaaaccg actggaacaa caacgtcacc 120
ggctggaccc agatgtcggt gatcggcaac ccctggtcca acctcaatga cgcaccgcgt 180
tcgggctatt acaacccgct ggacagcgga tacggcacgc agacgccagt gaccatcacc 240
tggcagccct tccccaaccg gctgtggacg tttttctaca acgacggcgc cgccgtggtc 300
ccacaattgg gcggcaaggc catgaccctt gaccaggtga tgcagttgac cgaccacggt 360
cagatcacgc tcaacaacac cctgtattcg ctgtacccgg acccgaaagc gacccagctg 420
cagatcccca gcgtgctgtg caagtccatc aactggaacg gcccctacgc tgacttttca 480
ccctcgggcc cacggggctg gctggatgaa tattgcgagt ggtcgatcac ccgcgacccc 540
gacggcaaca tgcgcagcat catgttcacc agcgagaacc cggcctattt cctgaccatg 600
tggaacatcg acccgcaggc cgtgctcggg ctgtacaaag cgtacgtcga cccgcaagtg 660
aagatcgaag acctgtacct gcgctacacc gccaacggcc cgaccggcaa ggccggcgag 720
ccggtgcttg acccgaccac cggccagccc gcctacgaca ccgtgaacaa atggaacagc 780
ggcactgtgc gtataccggg cgtgtcgggc ggcgcgatgc acctgacctc cggccccaat 840
accttgagtg ccgagatcta cctcgcggcc gcggccacca tcctgcggcc gatcaagagc 900
agcgccaacc aacagagcct gatctgctgc gcccaatacg ggcagaacta ccgcaactcc 960
gatccgcata tcggtttctc cgctaaccag gaagccgtca aagccctgat ttcactgacc 1020
aaccccatcg gcctgtacct gcaacaaccg aaatccttca gcacctggaa aggccctcaa 1080
ggccaggatg tcagcagcta ctggcatgtc acccgaggca ctgctggcac cgggccgaac 1140
aagtccgacc agatcctgca agccgtcttc gaggtgcccc aaagcgcggg gttctcgatc 1200
aacgaaatca ccatcaacgg cacgccgatt gattacgtgt gggtgatcgc caacgagctg 1260
agtgtggccc tcagcgtcac cccggcaccg ctcaccgcca cgcccgagga atgcgattgc 1320
gtagcggcga acaccaccga tgcgcaaccc tggccggtgc agttgctgcc gattgacctg 1380
ttctacggac agtcccccag cgacttgccg gccagctttg cccccggcag ctcaggccag 1440
ttcgtgctgg tggtgcaagg ggccgatccg aataccactg cggcggatgc gcgggtgcag 1500
ttttccaatc cagggatcac tgcccaggtc acggaattcc tgccggatgc ctcggcgatt 1560
ccagggcaga ccgacagcgg cggcacccag ggctacatca tgaccgtcac cgtcagcagc 1620
aacgcggtgc cggggctggt cagcgtgcgc gcgcttaacc ccagcgaagc cgccaacccc 1680
agcgccaccc agcacccgtg ggaaagcggc ctggcgctgg tgcctggcgt ctga 1734
<210> 149
<211> 1587
<212> ДНК
<213> Pseudomonas sp. R81
<400> 149
atgaacaaat ggcttcgccc gctgcgtcgg gcacgcttga gtgtgttgtg ctggataccc 60
tgcgcccttc tccccctcgc ccccgcaccg gccattgcgg cctcggacgc ccagagctgc 120
gtcagtcaac tggtgttcga tcccaccagc ggcggcttcc tgccggtcaa caactttggc 180
accgagcagg actttctcaa ttgtttcggc tggcagttgt tcatcgccat gaactggccg 240
gtcaatcccg gctggccagc cgacccgagc ctggccggtg agccggacac gcaaagcacc 300
gcggcccagt tcggcgtacc gccaacgtcc ggccagccca tgggcaatgc cccggtgtgg 360
gccagctaca aggatgccag cgagatcttc ctgcccggcg cccccaaacc ctcgggttgg 420
ggcgtggaaa ccctggtgcc gtccaattgc accgccaccg gcaacctcaa ggcgtttgcc 480
acgggcgcgc gtaaattcat ggcggccacg tctgaaagcg cgatcaaccg caagcaccgt 540
ttccatttgt ccagcggcac ccaggtgacc ttgccggact cgatcatgga ggcttccggt 600
ggctggctta cggaccagtc gggcaacctg gtgtttttcg agcgcaaggt cggcaaggcc 660
gagttcgatt acatcgtcga taacgggctg tacgacgccg ccaaccaact gatcgtggcg 720
cagaacagcg acaaccggca ccccgccggc ctgtcattgc ccgccggcaa actggtgcgc 780
gagctgccgg ccaaagctct gccccaggaa gaactcggcg ccctggaact caaggcggcc 840
tggcgcgtac tcaccaacaa accccagctg tacgggcgtt atctgaccac cgtcgcctgg 900
ctgcagcgcc ccgacacgct gcagtgcacc caggaagtgg tggggctggt gggcttgcac 960
atcatcaaca agacccagac tcagccgaac ttcatctgga ccaccttcga gcaggtcgac 1020
aacgtgccgg acaacggcac ggctgcgccc gagggctaca gtttcaacaa cccgacctgc 1080
accggtgatg cctgcacgcc caacgtcgca cgggtgcaat gcgatgccac ccacacgccg 1140
cccgactgca cgccccttga tcagccggtg caggccacgc gggtcaatgc cacgccccag 1200
gacctgcaga tgctgaacac cgctgtgcag cagaccttcg cccaaaagac ccagggccaa 1260
tcggtgttcc agtactacaa actggtgaat gtgctgtggt ccaaaacgcc taacgcgccc 1320
aacgatccgg gccctgggcc caacgtgaag gtgccgctgt cctatggacc gtttgtcagc 1380
gaccagagtg tcgtcgtcgc caacaccacc ctcgaaacct acgtgcaaaa caagaactgc 1440
aacgactgcc accagtacgc ggcgattgcc ggcacctccc aactgacatc ggacttctcc 1500
ttcctgtttg gtaatgccga ttcggcgaag aacgcgcgcc tgatcaaacg catcgaggcg 1560
ttcaagaccc tcaaggacag cccgtaa 1587
<210> 150
<211> 1734
<212> ДНК
<213> Pseudomonas libanensis
<400> 150
atgagcacgc ccttcaccca attcacctcc ccggccgaac aagcccccaa ggactacaac 60
aagctaggcc tggaaaacca gttgccgacc ttcgaaaccg actggaacaa caacgtcacc 120
ggctggaccc agatgtcggt gatcggcaac ccctggtcca acctcaacga cgcaccacgc 180
tcgggctact acaacccgat cgaaagcggc tacggcacac agacgccagt gaccatcacc 240
tggcagccct tccccaaccg gctgtggacg tttttctata acaatggcgc cgccgtggtc 300
ccgcaactgg gtggcaaggc catgaccctg gaccaggtga tgcagttgac cgatcacggc 360
cagatcaccc tcaacaacac cctgtattcg ctctacccgg acccgaaggc gacccaactg 420
cagatcccca gcgtgctgtg caagtccatc aactggaacg gcccctacgc cgacttttca 480
ccttcgggcc caaggggctg gctggatgaa tactgcgagt ggtcgatcac ccgcgacccc 540
gacggcaaca tgcgcagcat catgttcacc agcgagaacc cggcgtattt cctgaccatg 600
tggaacatcg acccgcaggc cgtgctgggg ctgtacaaag cctatgtcga cccacaagtg 660
aagatcgaag acctgtacct gcgctacacc gccaacggcc cgaccggcaa ggccggtgac 720
ccggtgcttg accccaccac cggccagccc gcctacgaca ccgtgaacaa atggaattcc 780
ggcaccgtgc gtattcccgg cgtatcgggc ggcgcgatgc acctgacctc cggccccaat 840
accttgagtg ccgaaatcta cctggcagcg gcggcgacta tcttgcgccc gctcaacagc 900
agccgtaacc agcaaagcct gatctgctgc gcccagtacg ggcagaacta ccgcaactcc 960
gatccgcata tcggttattc cgccaaccag gaagccgtga aagccctgat ttccttgacc 1020
aaccccatcg gcctgtacct gcaacaaccc aagtccttca gcacctggaa aggcccgcaa 1080
ggccaggacg tgagcagcta ctggcgcatc acccgtggca ccgccggcac cgggccgaac 1140
aactccgacc agattctgca ggcggtgttc gaggtgccgg ccagcgcggg gttctcgatc 1200
aatgacatca ccatcaacgg cacgccgatt gactacgtgt gggtgatcgc caacgagctg 1260
aatgtggcct tgagcgtcac cccggcaccg ctcagcggca cgcccaagga gtgcgattgc 1320
gtggcggcca acaataccga tgcgcaaccc tggcccgtgc agttgctgcc gattgacctg 1380
ttctacggcc aatcccccag cgacttgccg gccagctttg cgcccggcag ctcaggccag 1440
ttcgtgctgg tggtgcaagg cgccgacccg aacaccacgg cggcggatgc acgggtgcag 1500
ttctccaacc caggcatcac ggcccaggtc acgcagtttc tgccggatgc ttcggcgatt 1560
cctgggcaga ccgacagcgg cggcacccag ggctacatca tgaccgtcac cgtcagcagc 1620
aacgcggcgc cggggctggt cagcgtgcgc gcgctgaacc ccagcgaagc cgccaacccc 1680
agcgccaccc agcacccatg ggaaagtggc ctggcgctgg tgcccgtcgc ctga 1734
<210> 151
<211> 1587
<212> ДНК
<213> Pseudomonas libanensis
<400> 151
atgaacggat ggcttcgccc gctgcgccgg gcacgcttga atgtgttgtg ctggatcacc 60
tgcgcccttc tccccttcgc acccgcaccg gtcagcgcgg cgtcagatgc ccagagctgc 120
gtcagtcagt tggtgttcga ccccaccagc ggcggcttcc tgccggtgaa caacttcggc 180
accgagcagg actttctcaa ctgtttcggc tggcagttgt tcatcgccat gaactggccg 240
gtcaaccccg gctggccagc caacccgagc ctggccgggg agccggacac gcaaagcacc 300
gcggcccagt tcggcgtgcc gccaacgccc ggccagccca tgagcaatgc cccggtgtgg 360
gccagctaca aggatgccag cgagatcttc ctgcccgggg cgcccaagcc ctccggctgg 420
ggcgtggaaa cccgggtgcc gtccaattgc accgccaccg gcaacctcaa ggcgttttcc 480
acgggcgcgc gtaaattcat cacggccact tccgaaagcg cgatcaaccg caaacaccgc 540
ttccacttgt ccagcggcac ccaggtgacc ttgccggatt cgatcatgga ggcttccggc 600
ggctggctca cggaccagtc gggcaacctg gtgtttttcg agcgcaaggt cggcaaggcc 660
gagttcgact acatcgtcga caacgggctg tacgacgccg ccaaccaact gatcgtggcg 720
cagaacagcg acaaccggca cccggccggc ctgtcactgc cggccggcaa actggtgcgc 780
gagctgccgg cccaggcgct gccccaggaa gaactcggcg ccctggaact caaggcggcc 840
tggcgcgtac tcaccaacaa acccgagctg tacgggcgtt acctgaccac cgtcgcctgg 900
ctgcaacgcc cggatacgct gcaatgcacc caggaagtgg tgggcctggt gggcctgcac 960
atcatcaaca agacccagac ccagccgaac ttcatctgga ccaccttcga gcaggtcgac 1020
aacgtgcccg acggcggcgc caccccgccc ggcggctaca gcttcaacaa cccggcctgc 1080
accggtgaca cgtgcacgcc caacgtcgca cgggtgcagt gcgatgccac ccacacaccg 1140
cccaactgca cgccccttga tcagccggtg caggccacgc gggtcaatgc cacgcctcag 1200
gacatgcaag cgctgaacac ggcggtgcag cagactttcg cgcagaagac ccagggccag 1260
tcggtgttcc agtactacaa actggtgaat gtgctgtggt ccaagacgcc caacgcgccc 1320
aacgatccag gccctgggcc caacgtgaag gtgccgctgt cctatgggcc gtttgtcagc 1380
gaccagagtg tcgtcgtcgc caacaccacg atggaaacct atgtgcagag cgacaactgc 1440
aacgactgcc atcagtacgc gacgattgcc ggcgggtcca aactggcgtc ggatttctcg 1500
ttcctgttcg gcaatgccga ctccgcgaaa aatacgcgcc tgatcaaacg catcgaggcg 1560
ttcaagaccc tcaaggacaa tccgtag 1587
<210> 152
<211> 1731
<212> ДНК
<213> Pseudomonas asplenii
<400> 152
atgagcatcc cgttcacacg attcagccca cccgccaatc aggctcagaa ggactaccag 60
aaactgggcc tggaacagca acaagcgcaa ttcgataccg actggagcaa caatctagca 120
ggctggaccg aagcagcaat cattggcaac ccatggaccg gcctgaacga cgcaccgcgc 180
acgggatact tcaacccgct gatttcgggc tttggtgatg cccctccagc ggtcatcgac 240
tggacgccgt tccccaatcg actgattacc tacctcacgc aagccgactc ggcaaaaaac 300
ccacaactgg gtggcaagcc actgaccatg gaccaggtca tgcaactggc cgataccggc 360
gaaatcgata tcaatggtac cccgctcaaa ctctacgacc cgctaggcag caacaccctg 420
cagttgcctt ccattcgctg cccccagatc gactggaccg gcccctacgc ggccttcacc 480
ccgtccggcc cacgcggatg gctggacgaa tactgcgagt ggtcgatcac cctcgacgcc 540
aacggcaaca tgcgcagtgt gatgttcacc tgcgagaacc cggcctacta cctgaccatg 600
tggcgcatcg accccaaggc ggtgttaggc ctgtaccgaa tgtacatcga ctcggccgtg 660
cagttggaag acctgtacct gcgctacccg gtcgaccagc cgaccggcaa gcagggcgaa 720
ccggtgatcg accctaccac tgggctgccc gcatacgacg tgaccaacaa gtggaactcg 780
ggtaccgcgc gcaagcccgg cctgtttgga ggtgccctgc accttacttc cgcccccaac 840
accctcagcg ccgagatcta cctggcgggt gcttcgacca tccagcgctc ggataagagt 900
agtgaaaccc cacagacgct gatctgctgc gctaagtacg ggcggaacta ccgtaactcc 960
gacccgcaca tcggctacgt cgccaacggg atagcctacg gcaaccgcat ttccctgacc 1020
gacccagtcg gtctgtacct gcaacagccc aagaacttca gcaaatggaa agacccgcag 1080
ggcaatagcg tcagccagta ctggcagatc acccgtggca ccgccggaac cgggccactg 1140
ggctccgacc agatcctgca tgccgtattc gaagtgcctg agcaggcagg tttctcgatc 1200
aacgacatta ccattgacgg tcagaagatc acccatgtcg gggtgatcgc caaccagatg 1260
aaggtcgccc tatcggcctc gcctctggac gccatcaagc ccgtcatcca gccttgcgtg 1320
acagaccgca gcacggggct gcagccatgt ccggttcaac tactgccgct ctcgctgttc 1380
tacggtctct cgcccagcga tctacccgcc tggctagcgc cgagcagcag caaccagttc 1440
atcctccttg tacagggttc ggatgctgcc accaccgctg ccaatgcgcg tatccagttc 1500
tccaacccgg gcgtgaaagc acaggtcatt gagttccaga ccaacgccac gccaattgcg 1560
ggcacgaccg acaacagcgg tacccagggc tacatcatca ccatcactgt ggcggccaat 1620
gctgcaccgg gcctggtgca gctgcgggtg ctcaaccccg acgagccggt caatccaagc 1680
gataccgatc acccatgggc cagttcactg gcgatcgtgc cagcgcttta g 1731
<210> 153
<211> 1557
<212> ДНК
<213> Pseudomonas asplenii
<400> 153
atgttctcac tcgattgttc ccgggggaat ggccggttct gcctgcctcc cttgttactg 60
atcatttggc tgctcggcag cctggtcgcc cgaaacgcct atgcgctatc cgaccccgaa 120
acaccggccc aatgcgtgca gcagttggtg ttcgacccaa ccaacggcag cttcctgacc 180
agcgacaccc cctttgtagc tcaacaggcc accttcaact gctatgcctg gcagatgttc 240
atcgccatga actggccggt gaacccgggc tggcccaccc acccagagct ggcgggcgaa 300
cccgatacca aaagcccggc cgcccagttc ggtgtgccga cgatagcgga ccagcccatg 360
agcgttgcac cggtctgggc cagctacaag gacgccaacg acatcttcct gcacggcgcg 420
gccattccta ccgcctgggg catgcagccc cctgagccgg tcggctgcca gacaaaaccc 480
tcgcttctgt ccctgcgggt cggggcacgc aagttcatga ccgccacctc agagagcgcg 540
gtgaacgcca aacatcgttt ccacctgtcc agcagtaccc tggtgaccgc ctccgacccg 600
accctggaag ccaccggcgg ctggctaacc gatcaggccg gtaagctggt ctatttcgag 660
cgcaaggtgg gaaaggccga gttcgactat atcgtaagca atgaactgta tgacgcggct 720
aaccagttgc aggtggcgaa gaaccagggg ctgtccctac ccgccggggc gcattttcgc 780
agcccgccga cgtcacccat tgcgcaggaa aaactcggcg catttgaact taaggcagcg 840
tggcgcatcc tcaccgacaa accccagctg tacgaccgtt acctgaccac cgtcacctgg 900
ctgaaacacc cggaaaccgg ccagtgcaca caggaagtgg taggcctagt ggggctgcat 960
atcattcaca agaccgccag ccaaccggac ttcatatgga ccacgtttga acacgtggac 1020
aacgtgccag atggcggttc tacacccacc gctggctata cgttcaacaa ccccaagtgc 1080
accggccctg attgcacgcc aaatcaacgg cgcatcactt gcacggcctt gggctgcaaa 1140
gacaactatc cccgcaacga gccggtgcag gttacccgtg aagattcagt acccagcact 1200
atcaacgacc tcaacactgt cgtgcagcaa gccatctcca ccaagaccgc cggtaagtcg 1260
gtgttccagt actacaaact ggtcaatgtg ctgtgggacg cctcaccaca cataccggac 1320
ccagaacccg gcgccaatgc aacagtgccg ctggtctacg gcagcttcag cagcgacggc 1380
aacaacacac ccgtgtccaa taccaccatg gagacctaca tccagaacag gtcgtgcgac 1440
ttctgccaca ggaatgccaa ggtagcgggg agcaagagcc tgacctcgga cttttcgttc 1500
ctgttcgaga gtgccgactc gtccaagata ccgacactga tcaagaagat gccctag 1557
<210> 154
<211> 1743
<212> ДНК
<213> Thalassospira xiamenensis
<400> 154
atgagcacac cctttgccag atttacgtcg cccgcccatc aggcacccaa ggattacaaa 60
aagcttggta tggaaaacga actgtcggct tttgaaaccg attggaacaa taatgttgcc 120
ggttggaccg agatggcgat cattggtgat ccgtggtcga acctgaatga tgcaccacgg 180
gcggattact ataacccgct gaccgaggga tttggtgaag ccggtgacgc agtcatcagt 240
tggaccccgt tcccgaaccg cttgatcgcc tttctgaccc cacccgaggc atccaacaac 300
ccgcaactgc atcgaccatt gaccatggat gaggttatga gccttgccga tagtggcgag 360
atcaccgtcg atggcacgct ttacaagctc tatgatccga gcggttcggc tccgatcctg 420
aaaatcccgg ccaaacggtg tccggagatc gactggaccg gggaatacgt tgatttctcg 480
ccatccggcc cacgtggctg gcttgatgaa tattgtgaat ggtcgattac ctatgatgcg 540
tcgggcagca agatgcaaag cgtcatgttt acctgcgaaa acccggccta ttacctgacg 600
atgtggcgga tcaatcccga ggcggtcctt ggcctttatc agatgtatgt tgatccggcg 660
gtcaagcttg aagaccttta tttgcgttac acggttgatc agccgaccgg taaaaaaggc 720
gatcctgtca tggatccgac caccggacgt ccggcctatg acgtgaccaa caagtggaac 780
cgcggcacgg tgcgggttcc cggccagtcg ggcggggcgc tgcatctgac gtcaggcccc 840
aatacgctga gtgctgaaat ttaccttgcc gcggcggcaa ccattcagcg tccggattta 900
agcagccgcg atccgcaaag cctgatttgt tgtgcgcaat acggtcagaa ctatcgtaat 960
tccgatccgc atatcggttt catcgccaac cgggctgcgg cacgttaccg tatttcactg 1020
accgatccgg tcgggcttta tatccagcag ccccagaacc tttcgaactg gaaggggccg 1080
aatggcgagg atatcagcca gtattggaaa atcacccgtg gcacggcggg aaccggtccg 1140
aacaattcgg accagatact gcatgcggtg tttgatattc cgccaagtgc cggtttcacg 1200
atcaatgact gcacgatcaa tggtcagaag attgctcata ttggcgatat cgccaaccag 1260
atgaaaattg ccctttcggc aacgcagatg actccgaacc aaccgttgca gtcaccgatg 1320
aaatgcgttt caagccgcag cagcggcagt atgcagccct ggccggttca gtttgtgccg 1380
attgatctgt tttatgggga atctccgacc gatcttccgg cattgatggt accgggaacg 1440
gtgaatagct ttgttctgat cgtgcaggga gcggataaaa acaccacgat cgacaacgcg 1500
cggattgagt tttccaaccc cgggatcaag gccaaagtga ccaagttcct gccagatgca 1560
tcggcgattc cgggccagac cgacggcggc ggtacgcagg gcttcattat ggatgttgct 1620
gtatcgtcat cggcaaagcc gggatccgtc agtctccggg ttctgaaccc gaatgaaccg 1680
gccaatccat cggatgctga tcatccgtgg gaaagtggtt tggcggttat tcccagtcat 1740
taa 1743
<210> 155
<211> 1620
<212> ДНК
<213> Thalassospira xiamenensis
<400> 155
atgaaccgat tacatttggg ggcaggctgt gtgattgcgg ggttttgtat cctggcgatt 60
gcgggacttc tttgggtgat tgatgttccg gctggcaggg cggatgaaat caatatcagc 120
cgggtgacgg aaatagccca atcggcacag caatgcccgg atcaactggt tttcgatccg 180
acaagcgggt cgttcatgac cagtgacaat ctgttcctgc caacccagca gggtaacaat 240
tgttatgcgt ggcaaatgtt catcgcgatg aactggccgg tcagcagttc atggccggga 300
acaccatcgg ccgcaggtga gccagatcaa aacgtttcgg tggaaaattg gggggtaccg 360
gaaaatccga cctcaccctt aaccagcgta ccggtctggg gcagtttcaa ggatgcgcag 420
gcgatcttcc tgcctgatgc ggccaagccg accgattggg gcgtgccgca agccgtgccg 480
tcgggatgta aaagtgacaa gatgttgctg ggttatccgg ctggttcggc aaagatttta 540
acaacgcttt caaaaaatgc ggtcaatact gcccatcggt tccatctttc aagtggtacg 600
cgtgataccc agtccgacga gatcatggaa gccaccggcg gatggttgac agatcagaac 660
ggcaatctgg tgtttttcga acgaaaggtc ggcaaggccg agttcgatta catcatgaac 720
aatgcgcttt atgacgctgc ctatcagatg cgggtcgcaa ccaatgctga tggtcgacat 780
ccggcgggat tgtccctgcc aagtggcaag ttcctgcgtg ttccaccgac ggaaccgcaa 840
ggtcaggatg cgcttggagc gttcgagatc aaggcagcgt ggcgggtcct gacagggcaa 900
agcgacattt atgaccggta tctgacatcg gttgcatggc tgaaacgtcc tgataccggt 960
gaatgcagcc aagaagttgt cggtttggtc gggcttcata tcattcacaa gaccgataca 1020
ttccccgatc tgatctgggc aaccttcgag caggtcgaca atgtgcccga cgggcaggca 1080
actttaccgc ctggcggata ttcctttaac aacccgaatt gtaccggacc ggattgcaaa 1140
cccaatcagc cgcgcattga ctgtaacgat cagaaccagt gcaaggatct ttatccccgc 1200
gatcagcccg tacaggttac gcgcgaacag gccctaacca gtgaaatgga tacgctaaat 1260
gccggtgttg cccaaaagat cgcatcgcaa accggcggga aatcggtgtt tcagtattac 1320
aagctggtca atgtgttgtg ggatggcagc ccaagccccc cagtcatgga gcccggtgcg 1380
aatgcatcga taccgctgcg ctatggcacc tttgagtccg agggtaatct gaaagtcgcc 1440
aatacaacca tggaaaccta catccaggat caatcctgcg atttttgtca tgccaatgcg 1500
acgattgctg gcagcgatac gctagcatcg gatttctcat tcattttccg cgatgccgga 1560
tcggcgaaaa acccgtcact ggtggaagag gtaaaacaat tcatggagca ggcacaatga 1620
<210> 156
<211> 1734
<212> ДНК
<213> Paracoccus denitrificans
<400> 156
atgaccatat tcacggaatt ttcgaccccc gcacagcagg gcccgaagga ttaccagctt 60
ctcggcctgc cagccgccga tctggccgcg ttcgaggcgg actggagcgc gaatatcgcc 120
ggctggaccc agatgtcgat catcggcaat ccctggtcca acctgaacga cacaccgcgc 180
gacaactact atgatccgct ggtcgagggg atgggcgagg ccacggcggc cgtcatcagc 240
tggccgccct ttccgaaccg gctgatccag ttcctaacca atcccggcat cgtcaagggc 300
gggcagttga cggcaccgct tagccaggat gcggtgcagg aactggccga tagcggccgg 360
atcacccagg gcgggacgag tttcgtgctg ttcgatccag aaccgggtca ggtattgctg 420
aagatccccg ccgaccgctg cccggccatc gattgggacg gcaagtatgt cgacttctcg 480
ccctcggggc cgcgcggctg gcaggacgaa tattgcgaat ggtcgatcct gcgcaatgcc 540
cagggaaaaa tgcagtccat cgccttcacc tgcgagaatc cggcctatta cctgaccatg 600
tggcggcaga acccgaaggc ggtgctgggc atctatcagc gctatatcga cccggcggtg 660
cagctggagg atctgttcct gcgctatgaa tacgatcagc cgacgggcaa gaagggcgat 720
ccggtccttg atccgacaac gggcaatccg gcctatgacc cgacgaacaa atggaacagg 780
ggccccgcac gggtgcccgg ttcgttcggg ggagcgatgc atctgacgtc gccgcccaat 840
acgctgtcgg cagagatcta tcttgccgcc gccgcgacga tccagcgccc ctcctcggtc 900
aatggcaatc cgcaatcgct gatctgctgc gcgcaatacg gccagaactt ccgcaactcg 960
gatcccaata tcggctatgg cgcgaatgtc gccgcgcgga ccgccaggct gacgctgacc 1020
gatccggtcg gcctctacat ccagcagccg cagaactttc agggttggag cggtccgaat 1080
ggcgaagatg tctcaggcta ttggcaaatc ctgcgcggga cggcgggcac cgggccgaac 1140
gggtccgacc agatcctgca cgcggtcttt gccatccccg aaagcgccgg ctattcgatc 1200
gaggattgca ccatctacgg cctgccgatt tcgcatgtcg gcgtcattct ggaccagatg 1260
aaggtcgcgc tggcggtcac gccgaacaat gccgccccgg acacgaccgc attcgcctgc 1320
gtgaccgacc gaaccgacgg cacacaaccc tggccggtgc agatggtgcc ggagagcctg 1380
ttctatggtg aatcaccctc ggatctgccg gcgcttctgc ggcccggaag caagttccgc 1440
tttgtcctga tcgtgcaggg ggcggatgag aacaccacgc ccgcaaccgc aagggtcgaa 1500
ttctccgatc cgaatatcac cgtcacggtc gagcagttcc tgaaaaacgc ctcggcagtg 1560
ccggggcaga ccaatggcgg cggcacgcag ggttatgtca tggacatcgc cgttggcgcg 1620
aacgcgcaac ccggtccggt ctcggttcgg gcgttgaacc cgtccgaagg gccggcgccg 1680
acgcccgagc agcacccctg ggaagcgggc cttgcggtca tctcgtctcg gtaa 1734
<210> 157
<211> 1509
<212> ДНК
<213> Paracoccus denitrificans
<400> 157
atgcgcacag gtcagatcct catcgcactg gtcgcaggcg tcatgcttgc ctttgccgca 60
tccggcggca aggcccagac cgcctgcagc gccatgctca tcaccgatcc gacctcggcc 120
gatttcctga ccggagacac gcccttcggc catacccagg acggaatgaa ctgctatgga 180
tggcagatgt tcctgtcgct gaactggccg gccgatcccg gatggccgca aacgcccgcc 240
atggccggcg agccggatcg cagcgcgaca atcgccgatt tcggcctgcc cggcccggcg 300
ggacagccga tgcagcgacc cacggtctgg caaagcttca tgccggcgcc cgagatattc 360
aagccctttg cggccatgcc gaccggctgg ggagaaacct cgccgccgcc cgccagttgc 420
ggctccgcct cgctggcagc ctcggccggg tcgatccgca tgctgaacgc ggtctccaaa 480
tccgccgtga gcccgcgtca cggcttcaac ctcgacaccg gaacgatgtc atccatatcg 540
gacgaaatcg aagaggctac gggtggctgg ctgaccgatc agaagggcaa gctggtgttt 600
ttcgaacgga tgatcggcaa ggccgaatac gactatatcg tcgcgaaggg cctgtatgac 660
gcggccaacc agttgaaagt ggcgaccaat gccgacggag ccacccccga aggcctgtcc 720
ctgcccaaag gcacgccacc gggatcggcc gttcagaacc aggatgagct tggcgccttc 780
gagctgaagg ccgcctggcg gaacctgacc gggctggatg acctttatgg ccgctatctg 840
acctccacgg tctatctgct gtatcccgac ggctcttgcg aaaaggctgt cgtcgggctg 900
gtcggtctcc atatcattca caagaccgcc tccatgccag atttcgtctg gtccaccttc 960
gagcagatcg acaatgttcc gggcgcgtcc gcgccggaag tggatttcag tttcaacaac 1020
ccggcctcga atgcgaagcc gaaccagatg ccgcactgtg tgaatggtgt ctgcgactat 1080
tccctcccca tccaggtcac gcgcgaagtc gcgatcccgg ccggtgtggc gcagaccaac 1140
cgcgacgtgc agcagttgct tgcggaccgg acggggggca agtcggtgtt ccagtactac 1200
cagctcgtga acgtgctgtg ggacggcgca ccgaccccgc cgtcaccgga acccggcgcg 1260
aatgcccagg ttccgctggt ctatggcacc ttccagacgg atggcagcgt gccggtcgcc 1320
aatacgacga tggagaccta tgcgcagcaa ttcacccccg gtctggggcc gtcctgcacc 1380
gcctgccaca agggcgccac catcgccaac agcgcaacgc tggcgtcgga tttttccttc 1440
ctgttctcga ccgcgtccag cgccacgaaa ctgccgggcc tgttcatatc ccgcgacttt 1500
gttccatga 1509
<210> 158
<211> 1743
<212> ДНК
<213> Cellvibrio japonicus
<400> 158
atgtcagcgt ttacattttc cactcctgca ttaattcagg atttcagcga caacccctcc 60
ctgcagcagc aactcaacca aaattgggat ttggcaattg atgcgtatac ccaggctgcc 120
ctggttagca atccctggac tgtggattac caggctccct gcgattggta tgtgaatccc 180
aaacaggcgg atattaccgc agctaatccg gttgaaccta ttttttggac ggcttttccc 240
aaccgcttga aaatttattt ttcggcggct gaaaaaagtc cttatcaaat ggcgaatgcg 300
caggtttttg cgctggcgga ttttggcaat gttccgcaat cgaaggcgtt tcccacaggt 360
ttgccgttta ttattcccag caagcgctgc cctaatttga attggcagca gtcgattgct 420
gagtgggtac agtacgatcc taaagggccg cgcggttggt tggatgaata ttgtgagtgg 480
tccgtgacgc gcaatgccga tggaaaaatt accaagattg cgtttacctg cgagaatccg 540
gagtactggt ttaccctgtg gcaggtttca ccggaaaaag tattggcgct ttaccagcaa 600
ttggtgagcc cgaatgtggt gctggaggat ttgcaattgc catcagccga tggcaaggga 660
tttgttatcg atccgacaac agggcgccct gcctataacc ccttgaataa atggaattcc 720
ggtacggtgg cgacagaaac ctatggcggt gctgtgcatc tcaccagccc accgaacacc 780
atcggtgcgg aaattatgtt ggcggcacag gcaaccctgt tgcgcgattt gccgccggac 840
cagtacaaca tgcagcgtat ggtatgcgcc ggtgcctatg gacgcgctta tcgcaacagt 900
gatccgcata tcggtttgca ggcaaaccag ttggtgaaaa acctgggtgt gaaaatcacc 960
ttaaccaacc cggtgggttt gtatttgcag cgcccggatt tcagcagcta taagacaccc 1020
gatggtaagg atgccggcca attctataag gtcattcgcg gtcgcaccgc ccaacaggca 1080
ggtacgactt acgaccagat attgcatgcg gaattttcag taccggaaga actgggttat 1140
accgtcagtg atattttgat tggcaacgcc gtgcccggca gttcccaggt gcctgtgccg 1200
attctctatg cgggtcaaat tgcagaaaca ttccatgtat gcctggcggg aacagcgatt 1260
gcccccgcta caggtgaacc ttcgcaagca tttttaccac cggtgactga taaaaccggt 1320
aataccaacg gccaggtgag catgctgttg gcaaacccgg tattgctggc catgcaggca 1380
gtgaacccct ttcccccgtt tgtgcaattg ccggtacaaa ttgcccaggg tcaaacactc 1440
accaatatgg ctttgcaggt cagttacgcc aatgacaatt tccaggaggc gcaaattgca 1500
ttctgggatg cacagggcaa tagcgagccg ggcatcagtg tgacagtaac ggccatagag 1560
actgctgatg ggacaccggc gggaaaaagc gccggtggtg atggactgtt taattacatt 1620
atcagcatca gtgtcgcgcc gggggtaagt cccggcttta aaggtgtgac ggtgcgcaac 1680
cccgcatgtg atatgccctt gccgttgccg ggtgtgttgt ttgtgactgc aaaaggaaac 1740
taa 1743
<210> 159
<211> 1521
<212> ДНК
<213> Cellvibrio japonicus
<400> 159
atgaagcata cattactgat aggggttacc accggtttgc tggtggctgc ctgccagcaa 60
ccggtacagg agtcatccgc agcggttgac gctcccgccg tgagcacggt gtccagcagc 120
agtgcgccaa tcagctttcc ctgcctgaat aaaccggcgg ttaattacaa cacaccgggg 180
gatacaccca tcacttcgca agatggtgtg aattgttttg cctggcaaac gtttattggc 240
ctgaactggc cggtcgatgc cagccatccg ggtgagccgg ataagacggc gtctgcgtct 300
gtgtttggtg agccgggttt gcaccaaacc tcggtgtggg aaacctatgc caatagcaag 360
agtgtatttc gtgcaaacgc ccaaccaccc ctgccctggg gacatacgcc cgatgtgcca 420
tccagctgtc aaaaaatatc ccagacactg ggcttgcgcg ttatgcaggc gagccgcatg 480
ccgggcagtt ttaatatgag taaggaggcc tcgcaggcat ttcccggcaa caatcccaat 540
tggctggcgg ataagagtgg caacctggtg tattacgaaa tcctgattgg caaggacgag 600
tacgattaca tcaataataa tggtttgtat aacgccaata cccaggctgc ccatatccag 660
cagaacaaga atattgccat gcccctgggc cacgacaagg tgctgggtgg gttggagatt 720
aaagcggcct ggctgagcgt gagcgatcca caaaatccca agtggaaaaa ttacaagctc 780
agtaccagtg tgatttacga tccggtttcc aaggattgcc acgcgagcac gattgcgtta 840
gtgggcatgc acattatccg caagaccgca tcgcaaccgc agtggatctg ggccacgttt 900
gagcacaagg acaatgcgcc ggatactgcc agtattaaaa gtgatggcac ggtggatggc 960
gattacacct tctatagcaa cagctgcacg gtcaaaccgg tgccggcggg ttgcaaggcc 1020
aaggttgaaa atggcacatc ggttacccaa acctcctgcc acgtgaatgt atcgcccgcg 1080
tattatctgg atactagcgg caactgtccg gcctatccca tccaggtgag ccgcgatttt 1140
gcgatcaagg attccaccga taaccacgtg gcctcgctca accgcgcagt acaacaactg 1200
attgccagca gcaatgccga ttcggtgtat acccattacc agctggtgaa tgtgctctgg 1260
tcatcggcgg cggtgaatga caatgcacca ccgggcaatc cgccgctgac gcccttatcg 1320
atcagcggtg aaacgccatc gctcaatacc gtgccggttg ccaataccat gctggaaacc 1380
tacgcacagg gttttaactg tttgtcctgc catgcctatg ccagtgtcgc gcgcgatgcc 1440
agggcacagc tgggcggtaa ggcttacgca acggattaca gttttatttt tagttttgcg 1500
acgtcacccg ctgccaaata g 1521
<210> 160
<211> 771
<212> ДНК
<213> Pseudomonas brenneri
<400> 160
atgggttcca ttactgatca taatcaactg ctggcctggg tagcatcctt ggatattccc 60
gaagcttccg gagtaaaaac ccgttcgcgt aatgtggttg cgcgtgctaa tgccgaggac 120
gaaggcgcgg cagtagtacg cggtagtatt acttcgtttg tgaccggcct gagtcaacaa 180
gcgcgtgatg acgtgcaaaa cagcacgttg ttgatgcagt tggctgcgga taaaaaattc 240
aatccggaaa aacaacggga agagtggttc aagttctata ccgatggcct tgctaacctg 300
ggctgggggc gtgttagctc gtattatcag agctatcagc cgcgtaatac caatgtcacc 360
atggaccagg tcgtacttga ggtgattgct gcagtcgtgg gcgctgacag cgctgtgtac 420
aaggtgactg aaaaaacctt ctcgtcactc caagacaatc cgaagaacca ggccccgctg 480
aaactgttcg acagtagcag cactcgggac agcgtgggca cgttccagat actcccagtg 540
atgcaggata gggacggaaa cgtggtaatg gtactgacta ccgtcaacgc cagtaccacg 600
gtacagcgag gcagcttcct gttctggagt tggagcaaga ccaccgcgtg gatgtatcgg 660
gctgcacagc agactgtgct caatgagtcg gtatatgcga ctgttcgcca atctgtcatc 720
aagaagctgg gcaaaaacgc cgaagaattc atcgatgatc tggaaattta a 771
<210> 161
<211> 783
<212> ДНК
<213> Pseudomonas brenneri
<400> 161
atgaaattgt ctgccgacga agtttatgtg atttcgggta acttgctatc cgcgacgcct 60
tcgctcaccg atcctacggt acttgaagat atcgccaatt caaacctttt gtgccagttg 120
gcagccgata agaatcaagg cacgcggttt atcgatccag ctgcgtggct ggacttctat 180
cgaagctcac taggtaggtt gttctggcgc atcagtaatt caggcacggt tagttatgct 240
ataccgcaac tcgtgcataa aattaccgtg aaagaagttt tggaaaaaac gttctacaag 300
actctggatc gcccccagcg catccgggtt gaagaaagta ttgaattgtt gggtgagcaa 360
tcagccgata gcccgtcggc gacattgtac agcctcaaga cccaggtcaa tttcaatgag 420
acgacatcat ctccaggtct cttgccccac tctatatcgt ccgttaactt gcaactcagt 480
gtggtgcaca gtgagacgtg catttcggtg tgcagtgttt acttcaaaac gtcgacccgg 540
atcggtgatg atgtattcaa tcagaagttc ccggtaaaag aactgctggg caatgttagt 600
gtgagtacgt tcgaagccaa gctgctggaa tcgagttatg ccggcataag gcagagcatc 660
atcgataagt tgggtgagga caatattcgc gagaacattc tgcttgtccc cgccgtttca 720
ccgtcgttgt ccaacacgcg ccacgcgggg gcgctgcagt tcgtgcagga actggatatt 780
tag 783
<210> 162
<211> 783
<212> ДНК
<213> Pseudomonas gessardii
<400> 162
atgaaattgt ctaccgacga agtttatgtg atttcgggta acttgctttc cgcgacgcct 60
tcgctcaccg atcctgcggt acttgaagat atcgccaatt caaacctttt gtgccagttg 120
gcagccgata agaatcaagg cacgcggttt atcgacccag ctgcgtggct ggacttctat 180
agaaactcac taggtaagtt gttctggcga atcagtaatt caggcacggt tagttatgct 240
ataccgcaac tcgtgcataa aattaccgtg aaagaagttc tggaaaaaac gttctacaag 300
aatctggacc gcccccagcg catccgggtt gaagatagta ttgaattatt gggtgagcaa 360
tcagtcgaca gtccgtcggc gacattgtac agcctcaaga cccaggtcaa tttcaatgag 420
acgacatcat ctccaggtct cttgccccac tctgtatcgt ccgttaactt gcaactcagt 480
gtggtgcaca gtgagacgtg catttcggtg tgcagtgttt acttcaaaac gtcgacccgg 540
atcggtgatg atgtattcaa tcagaagttc ccggtaaaag aactgctggg caatgttagt 600
gtgagtacgt tcgaagccaa gctgctggaa tcgagttatg ccagcataag gcagagcatc 660
atcgataagt tgggtgagga caatattcgc gagaacattc tgcttgtccc cgccgtttca 720
ccgtcgttgt ccaactcgcg ccacgcgggg gcgcggcagt tcgtgcagga actggatatt 780
tag 783
<210> 163
<211> 783
<212> ДНК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 163
atggggtcaa ttactgatca tggaaaactg ttggcttggg tcgagtcgct ggatgtaccc 60
aagtcgaccg gcaatgccaa cctcaagcgc gcttcggctg tgctgcgcag tgccgcgcag 120
aacagtgatg aagatggcgc cgcagtcgtg cgcggcagta tcacttcgtt tgtgaccggc 180
ctgacgcccc aggcacggga tgacgtgcaa aacagcacgt tgttgatgca attggcggcg 240
gacaagaaat acaacccgga tacacaacgg gaagagtggt tcaagttcta caccgatggt 300
ttggccaacc tgggttgggg acgtgtgtct tcggcgtacc agaaatacaa gccgaccaac 360
accaatgcca ccatggacca ggttgtgctt gaaatcatca gctccgtggt cagcccggaa 420
agcgcgctgt acaaggtgac tgaaaaaacc ttcctggcac tcaagaacaa cccgaacaac 480
aaagatgcgc tgaagctgtt cgatgtcagc agcacccgca acgacctggg caccttccag 540
atcttgccgg tgatgcagga caaggacggc aacgtggtca cggtgctgac ctgcatcaac 600
gcccataccg aggtacaaaa gggtagcttc ctgttctggc actggagctc gaccagtgcg 660
gaaatgtacc gcgccgcgca acaagttgta ctcaatcaga atgtgtacgc caccgtgcgc 720
cagtcggtat tgaagaagct tgggaaaaat gccgaagact tcattgatgg tctggacatc 780
taa 783
<210> 164
<211> 780
<212> ДНК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 164
atgagtttta ctgcccctga agttcatgtg gtttcaggca acctgatatc ggcgatgccg 60
tcggtcaaca gccctcaggt acttgaagat attcttgaat cgaatttgtt gtgccagatg 120
gcggcggata aaagtttggg ttcgcgattc aataatccgg ctgcctggct ggatttttat 180
cgcaactcgc tgggcaagct gttctggaaa atcaccaact tcaacacggt cagttatccc 240
gtgccgtcac ctacgcgttc cgtgagcgtc atgggcatac tggagcacac tttcttcaag 300
gtgttggcgc agccacttcg tcatcagata gaagcggata tcgagttgct gatggagctg 360
ccgctgacga gcccagcatc gcagctatac acctcaaaga cccatgtgga aatgagcacg 420
cgtgcgcgct caagttttga tgggcgctct gagtcggtga tcagcctgca aatcagcgtt 480
gtccacagcg ggtcgctgat ttcggtgtgc agtgtctact tcaagaccgc agagccggtg 540
gcagctgatg tgttcagtca gaagttcaag gtgagggatt tgctgggcaa catcagcgtc 600
aactcgttcg aggctgattt gttggagggt agttacgaag gcgttcgaca gcaaatcaag 660
acgaagctgg gtgaagccaa tatccgcgag aatatcctgt tgatcgctga caaccccatc 720
ccggtggacg aattgcccca cgcaaatgcc catcagtttc tcaaagggtt ggatatctga 780
<210> 165
<211> 768
<212> ДНК
<213> Alcaligenes faecalis
<400> 165
atgagcacga ttactgacca caagcaggta ttggcatgga ttaacgccct ggacattccc 60
gacgccccgg ccggcggcaa ccgtgtagcc gcacgagcga ccagcagtgc cgacgaagat 120
ggtgccgtcg ttgccaaagc cagcatccct tgctttgtca gcggactgac cgaacaatcc 180
cgcgccgacg tgcaaaacag caccttgttg atgcaactgg ccgctgacaa gaaatacccc 240
aacgaaaatg atcgcgaaaa atggttcaag ttttactccg atgggctgac caacctgggc 300
tggggtagca gcagcagctt ctttgaacgc ttccaaccca agaatacgga cgtcaccatg 360
gaccaggtcg tactggaggt gatactgaca gtggttaaca acgtcaataa tccgctatac 420
aaaatcgccc aggaaacatt cggcgccttg aacaagcctg ccaatcaaaa gcccatgaag 480
ctgtttgacc acagcagcac caaagaagac cgcggcaaat tccagattct gcctgctggc 540
caggaccagc acggcaccgt cagcatggtg ctgaccgcca tcaatgcacg gaccgacatc 600
caatccggca gcttcctgtt ctggaaatgg agcaaatcca ccgcttggct ctaccgcgca 660
gccaacctga ttgtgctcaa tgaatcggtg tactcgaagg tacgccaggc agtcatcgac 720
aagctcggcg ataacgctgt gaactttgtg ctggatctgg atatttaa 768
<210> 166
<211> 807
<212> ДНК
<213> Alcaligenes faecalis
<400> 166
atggcttttt ctactgagca aacctatgtg gtgtcaggca atctgatttc tgccaccaca 60
gaagacacca atacgctgag ctatgaagac tttatccatt ccaacctttt ggcccagatg 120
ggcgccgaca aaaaactggg ctcccgcttt gttgaccccg caggctggct gagttttttc 180
aagaatacag taggcaatct gttctggaac ctgagcgagc agggaaccag cacgttgaaa 240
atctcagccg gtaccgcaag catcaccgtg cagcaaatac tggagcagag ttttttcaaa 300
cggctcaacc aagcgcaaat cgatagcgcc acggcaagtg ttgatctgtt tagtcaactc 360
tctgaagatg atcctgcctt catcctctat aacgcgaaat cacatgccca gatctctacg 420
gctaccaagg tgatcaagcc accccaaaaa gagacttata gcgtcaactt gcaaatcagc 480
attgcccata cagggtcgga aatcgcactg tgcaatattt tcttccaaac cagccaggca 540
gtcagcgacg aattattcac acagaaattc gcaatcaaag atctgattgg aaacattaat 600
gtgttttatt taaaggctct actctccgag accaattacg gccacatcag gcaacaggtt 660
atcgaaaagc tgggtgagaa catcaacacc aatattgtgc tggtagccga taacagcgat 720
aagccctccc cccccttctc ccacagaggc gcgcagtttc atacgcagcc tgaaaatcta 780
atccagcaac gcacaggccc accatga 807
<210> 167
<211> 768
<212> ДНК
<213> Alcaligenes faecalis
<400> 167
atgagcacga ttactgatca caagcaggta ttggcatgga ttaacgccct ggacattccc 60
gacgctccgg ccggcggcaa ccgcgtcgcc gcacgagcaa gcagcagtgc cgacgaagat 120
ggtgccgtcg tcgccaaggc cagcatcccg tgctttgtca gcggactgac cgaacaatcc 180
cgcgccgacg tgcaaaacag caccttgttg atgcaactgg ccgctgacaa gaaatacccc 240
gacgaaaatg atcgggaaaa atggttcaag ttttactccg atgggctgac caacctgggc 300
tggggtagca gcagcagctt ctttgagcgc ttccaaccca agaacacgga cgtcaccatg 360
gaccaggtcg tactggaggt gatattgacg gtcgttaaca acgtcaataa tccgctgtac 420
aaaatcgccc aggaaacatt tggcgccctg aacaagcctg ccaatcaaaa gcccatgaag 480
ctgtttgacc acagcagcac caaagaagac cgcggcaaat tccagattct gcctgcaggc 540
caggaccagc acggcaccgt cagcatggtg ctgaccgcca tcaatgcacg gaccgacatc 600
caatccggca gcttcctgtt ctggaaatgg agcaaatcca ccgcttggct ctatcgcgcc 660
gccaacctga ttgtgctcaa tgaatcggtg tactcgaagg tacgtcaggc agtcatcgac 720
aagctcggcg ataacgccgt gaactttgtg ctggatctgg atatttaa 768
<210> 168
<211> 780
<212> ДНК
<213> Alcaligenes faecalis
<400> 168
atggcttttt ctactgagca aacctatgtg gtgtcaggca acctgatttc tgccaccacg 60
aaagatacca atacgctgag ctatgaagac tttattcatt ccaatctttt ggctcagatg 120
ggcgccgata aaaaactggg ttcccgcttt gttgaccccg caggctggct gagttttttc 180
aagaatacag taggcaatct gttctggaac ctgagcgagc aaggaaccag cacgctgaaa 240
atctcagccg gtaccgcaag catcaccgtg ctgcaaatac tggagcagag ttttttcaaa 300
cgactaaacc aagcacaaat cgatagcgcc acggcaagta ttgatctgtt tgatcaactc 360
cctgaagatg atcctgcctt catcctctat aacgtgaaat cacatgccca gatctctgcg 420
gctgccaagg caatcaagcc gccccaaaaa gcgacatata gcgtcaactt gcaaatcagc 480
attgcccata ccgggtctga aattgcactg tgcaacgttt tcttccaaac cagccaagcc 540
gtcagcgatg aactgttcac tcagaaattc gcaatcaaag atctgattgg caacatcaat 600
atcttttatt taaaggctca gctctccgag accaactacg gccaaatcag gcagcaggtt 660
atcgagaagc tgggtgagaa catcaacacc aatattttgc tggtagccga taacagcgaa 720
acgccctccc ctccttctcc tgcagaagcg cgcagtttca tacgcagcct gaaaatctaa 780
<210> 169
<211> 768
<212> ДНК
<213> Alcaligenes sp. HPC1271
<400> 169
atgagcacga ttactgacca caagcaggta ttggcatgga ttaacgccct ggacattccc 60
gacgccccgg ccggcggcaa ccgtgtaacc gcacgagcga ccagcagtgc cgacgaagat 120
ggtgccgtcg ttgccaaagc cagcatccct tgctttgtca gcggactgac cgaacaatcc 180
cgcgccgacg tgcaaaacag caccttgttg atgcaactgg ccgctgacaa gaaatacccc 240
aacgaaaatg atcgcgaaaa atggttcaag ttttactcgg atgggctgac caacctgggc 300
tggggtagca gcagtagctt ctttgaacgc ttccaaccca agaatacgga cgtcaccatg 360
gaccaggtcg tactggaggt gatactgaca gtggttaaca acgtcaataa tccgctatac 420
aaaatcgccc aggaaacatt cggcgccttg aacaagcctg ccaatcaaaa acccatgaag 480
ctgtttgacc acagcagcac caaagaagac cgcggcaaat tccagattct gcctgctggc 540
caggaccagc acggcaccgt cagcatggtg ctgaccgcca tcaatgcacg gaccgacatc 600
caatccggca gcttcctgtt ctggaaatgg agcaaatcca ccgcttggct ctaccgcgca 660
gccaacctga ttgtgctcaa tgaatcggtg tactcgaaag tacgccaggc agtcatcgac 720
aagctcggcg ataacgccgt gaactttgtg ctggatctgg atatttaa 768
<210> 170
<211> 780
<212> ДНК
<213> Alcaligenes sp. HPC1271
<400> 170
atggcttttt ctactgagca aacctatgtg gtgtcaggca atctgatttc tgccaccacg 60
gaagacacca atacgctgag ctatgaagac tttatccatt ccaacctttt ggcccagatg 120
ggcgccgata aaaaactggg ctcccgcttt gttgaccccg caggctggct gagttttttc 180
aaaaatacag taggcaatct gttctggaac ctgagcgagc agggaaccag cacgctgaaa 240
atctcagccg gtaccgcaag catcaccgtg ctgcaaatac tggagcagag ttttttcaaa 300
cggctcaacc aagcgcaaat cgatagcgcc acggcaagtg ttgatctgtt tagtcaactc 360
tctgaagatg atcctgcctt catcctctat aacgcgaaat cacatgccca gatctctgcg 420
gctaccaagg tgatcaaacc gccccaaaaa gagacttata gcgtcaactt gcaaatcagt 480
attgcccata cagggtcgga aatcgcactg tgcaatattt tcttccaaac cagccaggca 540
gtcagcgacg aattattcac acagaaattc gcaatcaaaa atctgattgg aaacattaat 600
gtgttttatt taaaggctct actctccgag accaattacg gccacatcag gcaacaagtt 660
atcgaaaagc tgggtgagaa catcaacacc aatattgtgc tggtagccga taacagcgat 720
aagccctccc ccccttcccc cacagaggcg cgcagtttca tacgcagcct gaaaatttaa 780
<210> 171
<211> 783
<212> ДНК
<213> Enterobacter sp.
<400> 171
atgaatacta acgctttgga ttttgtgctt aaaacaccga ttgaaaccac tgccgatctg 60
gcaccgttac tggaacgtct aaagggggta ccggatcatg gtcagtcaaa aagaaaaacc 120
atgctgactg ataataaagt atctgcacaa gtcaatgccg gcagcctcat ctcatttacc 180
gaacgtttgg atgggcagaa taaacaagat gtgcagaact caacactgtt cgctcaactg 240
gcggcggata aacactgcaa ccgttatact gcgcccatgg attggtatcg tttttatgtc 300
aatgtactgg gccaaattgg ctggaaccaa cctgctttcg cgtttgatac ctatacgtca 360
ggtgccagta ccgtaaaact ggatgaggct gtgttgggga tcattgcgca aatcgctact 420
gtcggtgagg ttgcattagt ggcagcggca atgaaggcgt tatccagcct gagcgatacc 480
tcaaagcaaa tgcttatctg ggacgcgaaa tcaaattcgg aaaacaccgg taattttcaa 540
attttcccgg cagatctgtt accaaatggc gatgtggtaa tgatgcttga tggtatgcaa 600
tttgatgcaa agcgcaatga ggggcgtttt ctgtgggtaa cctggcaatc cacctcgatc 660
aaaattcaac gcgcggcaaa taaattcgtc ttaaacgaag gtgtttataa gggggtgcgc 720
caggccgtta ttgataaact gggtgatcgg gcaatcgata tgattgcaaa tattgaaatc 780
tga 783
<210> 172
<211> 777
<212> ДНК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 172
atgagttttg aagtgtgtga cagcagcgtg gccgcctgtg tggcgcgtct ggaaagttat 60
gatatctatc cagatatcag tccccgctcg ttgtattcgg gtgatatcga gcctccggcg 120
aaggggtcgg ttgtcggtga aggtatcctg gccttcgccg gtggtctttc ttcgcaacac 180
caggaagatg cgcagcatgc ctttctcttt gcgtccctgg tcgccaacag gcagtaccct 240
ctcgaatccc aggggcgaga gtggtactac aagtttgttg aagtcatgac gaacgccggt 300
tgggtcgcca cgcagcgctt ctacgatgat ctgagcatcg ccggcaacac cgtgcgaatg 360
gacaagctgg tgttggacat cctcgcttcc gtagtgtcgg ggattgccct cggaagcgcg 420
acttcggcgt tgctattgag ggtcgccgac agtgcaatca cggccctgca gaagaaggaa 480
aagaccctga cccttttcga gcgaaacctg ctggaacatg gtgtgggcgg aatggcggcc 540
gggacctgtg ttgaaatcga cggtgaggtc agcatgctgc ttggcactgt gcgctttatc 600
cggcgcaaca gcgcgaccca ggtcttgttt gcagattgga acagtcgcga agtgaagttg 660
tataaaggtg agtcggtttt caggaaagtg ccgagtattg tcgagcgaac ccgaggcatc 720
attattggtc ggctgggtaa tcatgccgtc agcaagatcg aagagtacga aatctaa 777
<210> 173
<211> 729
<212> ДНК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 173
atggacaagg catattcgat ttttgttaac gcggcggcga ttgttttagt ttcctccact 60
gtgcggggaa caggggttga agacctgatg aattcggtct tgctcgcgca attggtggct 120
aacaagaatc tgcagcgcat accaagcgct gattggtacg ctagttatat ggacgtcctg 180
agtgtcgcct gggtagcggg tgccaaacgc cgaaaggacc tgctaccgaa acaagacgct 240
gccagctcgc cagtggagtg ggttacagca atacctttgg acgatcggcc ggaccagcaa 300
cagcagatca tggcggtgtt ggaccgtgtc gccgcgttac ccggctcgct gccggcgctg 360
agtatcctgc gcaagcatat gcaaaaacca aacgaacctg agccgacgca gagcccttca 420
gcgtccagcc ccgtgcgctt gttggtgatc gtagcgcaca gccccgtttc gatgaccggt 480
atctgtttgc aattcaacac agggaaagcg atcaatgcca acccttgggg gcaatgcttt 540
gatggaaagg acatcgacgg ttgtgtgtcg gcgcgttatt tgcgcatgca actgagcgaa 600
acattgttcg cgccggcccg tgaggttatc gcccgtaagg tagggactgt cgtgggcgac 660
aacgtggtgg atatcaccgg ggctatcgag gattcggttg ttcgtcctgc cgaggaggtc 720
gggcgatga 729
<210> 174
<211> 777
<212> ДНК
<213> Pseudomonas brassicacearum
<400> 174
atgagttttg aaatgtgtga tagcgctgta gccgcctgtg tggcgcggtt ggaaagttat 60
gatatttacc ctgatgtcag tcctcgttcg ttgtatgtgg acgatgttga gccaccggcg 120
aagggatcgg ttgtcggtga aggcatcctg gcgttcgccg gtggtctttc tccccagcat 180
caagaggatg cgcagcatgc ttttctcttt gcttccctgg tcgccaacag gcaataccct 240
ctcgaatccc aaggacgaga gtggtactac aagtttgttg aagtcatgac gaacgccggt 300
tgggtcgcta cgcagcgctt ctatgatgac ctgagcgtcg gcggtaacac cgtgcggatg 360
gacaagctgg tgttggacat cctcgcctcc gtagtgtcgg gtattgccct cggaagcgcg 420
acttcggcgt tgctgttgag ggtcgtcgac agtgcaatca ctgccttgca gaagaaggaa 480
gagaccctga ccctttttga gcgaaacctg ctggagcatg gggtaggcgg aatggcagcg 540
ggtacctgtg tcgaaattga cggtgaagtc agcatgatgc ttggcaccgt gcgctttatc 600
cggcgcaaca gcgcaaccca ggtcttgttt gcggattgga atagccgcga agtgaagtta 660
tataaaggcg agtcggtttt tcgaaaagtt ccaagtgttg tcgagcgaac tcgagatatc 720
attattgggc ggctgggtaa tcatgccgta agcaagatcg aagagtacga aatctaa 777
<210> 175
<211> 729
<212> ДНК
<213> Pseudomonas brassicacearum
<400> 175
atggataagg aatattcggt ttttgttaac gctgcggcga ttgttttagc gccctgcgca 60
ctacggcgca cggaagttga cgacctgatg aattcggtct tgctcgcaca actggttgct 120
gataagagtc tgctgcgtgc accagcggtt gattggtacg ccacttattt ggaggtcttg 180
agtgtcgcct ggatatcagc tgccaaaagg cgaaaggatc tgcagccgca aaaagaagat 240
acccattcgc cattggagtg ggtggcggcc atccccttgg atgatcaggt ggatcagcaa 300
cagcggatca tggcggtgat ggagcgtatc gcagcgttac ccggctcgct gcctgcgatg 360
gggattgtgc gcaagcatgt gcaaaaacaa tacgagcctg acgcggcaca gagcccgtca 420
tcttccagcc ccgtgcgctt gctggtgatc gtggcgcaaa gccctgtttc gatggctggt 480
gtctatttgc aattcaacac agcgaaagtg atcgaggcca atccttggag gcagtgcttt 540
gatggcaaag acatcgacgg ttgtgtgacg gcacgttatt tccgcacgca actgagcgaa 600
acattgttcg cgcctgcccg tgaggttatc gcccgtaagg tcgcggctgc cgtgggtgac 660
aacattgtcg atatcaccaa ggctatcgat gattcaggtg ttcttcctgc cgaagaggtc 720
tgcagatga 729
<210> 176
<211> 792
<212> ДНК
<213> Неустановленное
<220>
<223> Микробное сообщество ризосферы проса прутьевидного из Мичигана
<400> 176
atgagtgtaa atatgatcga tagtgctact gttgctgcct gtgtaaggcg tctggaaagt 60
tacgaaattg atgaagtgcc agttgtacgt tctcgtgcat ttgctgcaag tgggattgtt 120
gttgaggagc cttcgaaggg ggctgtcgtt ggcgaaggca ttttgtcctt cgtaggcaac 180
ctgtccgagc aaaatcaagt agatgcgatg cacgcctttc tttttgccag ccttgttgcg 240
aataagcaat ttccttacga gtatcagggc aaggaatggt actacaagtt tgtcgaagtt 300
atgacctccg ccggttggct gacgagccaa aaatattaca acgacattga aattagcgga 360
aataccgttc ggatggacca gttggtactg gaaatccttg gctcggtggt cgctggcctc 420
gctataccag gcactgcttc tgcactgatg ctgaaggttg ccggtgatgc cattaccgcc 480
ttgaaaaaga aagaaacggc tttaacgctg tatgaacgga atttgttgga acatggcgta 540
ggcggtatgg ctgcaggaac ctgtaccgaa gtcaatggtg aggtaaccct ggcactaggg 600
actgtacgtt ttattcgcaa aaatacagca acccaagtcc tgttcatgga ttgggatagt 660
cgtgatgtgc agctgtataa aggtgaatct gttttcagaa aggttcctta tatcgctgac 720
caaacccgag acctgattcg gacaaaactt gggacgaatg cagtcagtaa aatcgaaggc 780
tacgagatct ga 792
<210> 177
<211> 729
<212> ДНК
<213> Неустановленное
<220>
<223> Микробное сообщество ризосферы проса прутьевидного из Мичигана
<400> 177
atggcaaggg aatattcggt atttgttaat gccgctgcta tcgttttatt gccgagcaat 60
cccgtggagt cagcaactaa cgacctgatg aattcagtcc tgcttgcaca actggtcgcc 120
aataagcgtg ccgaagccac gagcgcggtc gattggtatg agacctatgt gggggtgctg 180
ggtgatttct ggttaacgag ggccagaagc aggcaagata tccagccggg aaaagacgat 240
accgcttcac cgcttgaatg gatcgctgcg gtgctggcaa gtagcactga ggatgaggcg 300
cggctggtga cggcgttgtt gaagggtatc gcacgactat ccgattcttt gcccgcgatg 360
agtttgctgc gcaagcatgt gcaaaaagag tccgatgatg aaccggcaga aatctccttg 420
cagtccaagc ctgttcgctt ggtcgtgatc gtggcccaag acaacgcttc gatgaccagc 480
gtctgcctcc aattcaaaac acggcaaatg cttgacccca atccctgggg gcagcgcttc 540
catgtcgagg atatggaggg ctgcgtttcg gcccattttt tccatgcgca cctgtccgag 600
acattgtacg cgcccgcccg tgaagcggtc gcccgcaagg ttgagggcgt tttgagcgac 660
aacatcgtgg atatcacgga ggccatcgat gctttggcct ttctgcccac tgaggaggct 720
ggcacatga 729
<210> 178
<211> 786
<212> ДНК
<213> Неустановленное
<220>
<223> Микробное сообщество ризосферы мискантуса из Келлогга
<400> 178
atgaatgttc atgatgtcga agattgcact gtagccgaat gtattcatcg tttggaaagt 60
tatgagctgg acggcgctga agttatgcgc cctcgcagtt tctcggtacc ggttgtcaat 120
gaacccggca aaggttccat cgtgggtgag ggcatcttgt cctttaccgg caacctgagt 180
gagcaaaatc gggaagatgt tcaacacgct tttctattcg cgagtctggt cgcaaacaaa 240
aagtacccgt atgagtatca gggtaaggaa tggtattacc agttcctgga agtcatgacc 300
catgcaggct ggctgccgac cagtaagtac tacaacgaca tgaacatcag cggtaacacc 360
gtacggatgg atcaattggt gctggagatc ctcggcagtg tggttgccgg gcttgccgtg 420
cctggctccg cctccgtcct gatgctgaag gtggcaggcg atgcaatcac cgcattgaaa 480
aaacgtgaaa ccgcgttgac cctgtatgag cgcaacatgc tggagcacgg tgtgggtggt 540
atggcggccg gcacctgcac cgaagtcaac ggtgaagtca ccatggcatt gggtactgtt 600
cgtttcatcc gcaagaacac cgcaaagcaa gtgctgttca tggattggga ctcccgcgag 660
gtgaaactgt atcgcggtga ctctgtcttc aggaaagtgc cttatatcgt cgagcaaacc 720
cgcgacacga ttcgtgcaaa acttggtttg aatgcgaaac caaagatcga agattacgac 780
atctga 786
<210> 179
<211> 723
<212> ДНК
<213> Неустановленное
<220>
<223> Микробное сообщество ризосферы мискантуса из Келлогга
<400> 179
atgagttacg aatattctgt attgatcgtt ggggcttgtg tcgtgattat tccggccgcg 60
gatggggcgg cccaatatac ggatctggtc aattccgtgt tgctggcgca actgattgcc 120
aataagaaga tcgaaaaagc tccggaaatt gactggtaca acgcttatgt agaatttctg 180
gatgattact ggctgcgacg tacaagagcg cgacaggatt ggtctatcgc ccaagacaga 240
gtcgagtctg tcagcgactg ggtcattgca gcgatttcac aagatgctgt ggataaagga 300
agcgctactg cggcaacatt gcagcggctg gcaaggttgt ccggcaacga gcctgcaatg 360
ggtttgctgc gcggtcacat gcagaaaata tccactgacg agtcgggtga tgtacttgcg 420
cccgcaaagg ctgtgcgttt gctggtggtt atcgcgcaga cgccgacatc ggtcgcaagc 480
gtctacatcg agcttaagac ccgccagatc atcagtgcca atccgctggc ccagcgacat 540
ctggctgagg atgtacaagg cagcgtttgc atgcgctacg ccgctgctaa cttgtccgaa 600
actctctaca gccctgtgcg cgacgccatt gccttgaagg tcagggacaa gtatcaggac 660
aacgtagcga tgttgacatt gagcgatgat gcttcggcca tggagatctg tgcggtagat 720
tga 723
<210> 180
<211> 1668
<212> ДНК
<213> Pseudomonas rhodesiae
<400> 180
atggccaaac tcacgcaatt ttccaccccc gccgacatcc aggacttcag tgacagcccc 60
gcccagcaag agcggatgaa cgccgcctgg agcggcaaca tcaatcgctg ggtcaacgca 120
gcactggtgg gcgacgtctg ggacctgatc aactacggcc cgcgcccggc cttctacaac 180
cctctggaca ccgacacccc gagcacctcg gtgaatgccc ccatcacctg gaacgccttc 240
cccgggcgca tccccgcgtt gttccccaac cagtcggcga actggctgca atgggccgac 300
cagggcgtgc cggccaacgt caccaccaac ctctgcaccc aacagagcgt ccccccggcg 360
ccctactcgc ccaccggccc ccggggctgg caggacgaat actgtgaatg gagcgtgacc 420
cgcaacgccg ccgggcagat caccagcgtg atgttcacct gtgagaaccc ggaatactgg 480
atgaccctgt ggcaagtgga cccgggcaaa gtgctgcagc gctaccagca gttgatcaac 540
ccggcggtgc aactggccga cctgagcctc aaggacgccc agggccaaac ggtgatcgac 600
ccggtgaccg gagcgccgtg ctacaacccg ctgaacaagt ggaacagcgg cacccagacc 660
ctgcccggca gcggcggcgc catgcacctg accagctcgc ccaacaccct gggtgccgag 720
tacgacctgg cagcggccgc gaccatgccc cgggagctga acaacgaacc ggtgacctcg 780
gcctcgcaac tggtgtgcta cgcccgttac gggcgcatcg gccgccacag cgacccgacc 840
atcggccaga acgtcaacca gtacgtcaac tacacctccg ggctgaccga ggtccgggcg 900
accctgacca acccgccggg tctgtacatc cagaccccgg acttcagcgg ctacaccacc 960
cccgacggca gcccggcggc ggcctgctgg accatcaacc gaggccacct ggcgcagacc 1020
tcggacgaca tcgaccgcat cctccacgcg accttcagcg tgcccgcggg caaaaacttc 1080
accgtcagcg acatcagcat caacggtgca aaaatccagt acgcctcgca gatcgccggc 1140
accatcacca tgggcttgat ggccacggtg tttggcaaca gcggcgtgac ccagcaaccg 1200
gtggccggca ccctggacag cgacaacccc agcccgtcgg tatcggcgct gcaaccgctg 1260
tcggtgttca acgcctaccg ggcccaggaa ctggccagca acgagcaggc gctgtcgatt 1320
ccaatcctgg ccctggccat ccgccccgga cagcaagtgg acaacatcgc cttgctgctc 1380
aacaccagcc agaccccgaa cggcgccagc ttcagcgtgg tcgaaggcgg cgtcagcatc 1440
agcatcaccg gcacccagga cctgccgggg ttggacatga gcctgtacct ggtgagcatc 1500
agcgccgacg ccaacgccgc cccgggggat cgcacggtcc tcgccagcgt gcctggcatg 1560
gccagcaccc aacaggcggc gatcggcctg ctgaccgtcg gcggcccaac cctggtcacc 1620
tcccagaccg gcccgagcaa gccgaacttc cgtcgcggtc gcggctga 1668
<210> 181
<211> 1356
<212> ДНК
<213> Pseudomonas rhodesiae
<400> 181
atgcgccgtc gtcccacggt gttactcggc ctggccctgc tactcggttt accggccacc 60
caggccatgg gcgcgccgct gtgcggcagc ccgttcgtcc cctcgccgac cctgcaaccg 120
acactcgccc cccccaattt cagcgccagc gacagcgcgg tggactgctt catgtggcaa 180
accatggtct acctcaactg gccggccacc ccaggccaac ggggcgtacc gaatgccgcc 240
gccagcctgg gcagcccggg ccccagcgtc tggcagacct acaaggatta caacgagctg 300
tacctgccca atggccagca accgccagcc tggaacgaca acttcctgtc ggtgcagcgc 360
ttgcagaccc gaggcgtggc acgggcgttg ccgtcgatcc gcctgcttaa cagcaccagc 420
aaggtctttc gcgccgccaa tgccaacgaa tccccggcgc tacgggaaat cgagcaggtc 480
ggcggcggcg tgctctacga ccaggccggc agcccggtgt actacgaaat gctggtgaat 540
gaggtcaact tcgacttcat ctacaacaac cagctgtaca accccgccca gcagaacctc 600
tatgccaagc aaaaaggcat cgtgctgccg aacaactcca tcgagatcaa ggccgcctgg 660
aaggtgctga gcgacccgga taacccccag cgctttctca ccgcccaagc gttgctgccc 720
ggcagcagca cgccggtgac cgtgggcctg gtcgggctgc atgtgttcca gatgccttcc 780
agcgcgttca accaggggtt ctgggcgacc ttccagcagc tcgacaacgc ccccacggtg 840
gccggcgcca ccccaggggc gcactactcg ttcaacaacc cgcagtgcgc gccggcccag 900
tgcccgccca atgacaaaac cagcaatccg acccaggtgg tgcagaactt cccgccgacg 960
ccagaggcgc agaacatcaa ccactacatg cagaacctga tcgcccagca ggccccgggc 1020
tccgcgttgc agtactacca gttggtggac gtgcaatggc cgacttcgcc acaagccatc 1080
ggtcagcccg gggccacggc gccggcgccc agtggcacgc cgaaccacga caccctgatc 1140
aacccggtgc tggaaacctt tctccaggcc aatcacaaga gctgcctggg ttgccatgtg 1200
tacgccagcg tggcggcgga cggcagcaac ccgcccaccc actaccaggc cagcttcagc 1260
ttcctgctgg gccacgccaa aagcccggcc ctgggaagca acctgaaaag cctggcgcaa 1320
cagatcgagg acgcgtccct gagcctgcaa cactga 1356
<210> 182
<211> 1668
<212> ДНК
<213> Pseudomonas orientalis
<400> 182
atggccaaac tcacgcaatt ttccaccccc gccgacatcc aggacttcag tgacagcccc 60
gcccagcaag agcggatgaa cgccgcctgg agcggcaaca tcaatcgctg ggtcaacgcg 120
gcactggtgg gcgacgtctg ggacttgatc aactacggcc cgcgcccggc cttctacaac 180
cctctggaca ccgacacccc gagcacttcg gtgaatgccc ccatcacctg gaacgccttc 240
cccgggcgca tccccgcgct gttccccaac cagtcggcga actggctgca atgggccgac 300
cagggcgtgc cggccaacgt caccaccaac ctctgcaccc agcagagcat ccccgcggcg 360
ccctactcgc ccaccggccc ccggggctgg caggacgaat actgtgaatg gagcgtgacc 420
cgcaacgccg ccgggcagat caccagcgtg atgttcacct gtgagaaccc ggaatactgg 480
atgaccctgt ggcaagtgga cccgggcaaa gtgctgcagc gctaccagca gttgatcaac 540
ccggcggtgc agttggccga cctgagcctc aaggatgccc agggacaaac ggtgatcgac 600
ccggtgaccg gagcgccgtg ctacaacccg ctgaacaagt ggaacagcgg cacccagacc 660
ctgcccggca gcggcggcgc catgcacctg accagctcgc ccaacaccct gggtgccgag 720
tacgacctgg cagcggccgc gaccatgccc cgggagctga acaacgaacc ggtgacctcg 780
gcctcgcaac tggtgtgcta cgcccgttac gggcgcatcg gccgccacag cgacccgacc 840
atcggccaga acgtcaacca gtacgtcaac tacacctccg ggctgaccga ggtccgggcg 900
accctgacca acccgccggg gctgtacatc cagaccccgg acttcagcgg ctacaccacc 960
cctgacggca gcccggcggc ggcctgctgg accatcaacc gaggccacct ggcgcagacc 1020
tcggacgaca tcgaccgcat cctccacgcg accttcagcg tgcccgcggg caaaaacttc 1080
accgtcagcg acatcagcat caacggtgca aaaatccagt acgcctcgca gatcgccggc 1140
accatcacca tgggcttgat ggccacggtg tttggcaaca gcggcgtgac ccagcaaccg 1200
gtggccggca ccctggacag cgacaacccc agcccgtcgg tatcggcact gcaaccgctg 1260
tcggtgttca acgcctaccg ggcccaggaa ctggccagca acgagcaggc actgtcgatt 1320
ccgatcctgg ccctggccat ccgccccggg cagcaagtgg acaacatcgc cttgctgctc 1380
aacaccagcc agaccccgaa cggcgccagc ttcagcgtgg tcgaaggcgg cgtcagcatc 1440
agcatcaccg gcacccagga cctgccgggg ctggacatga gcctgtacct ggtgagcatc 1500
agcgccgacg ccaacgccgc cccgggggat cgcacggttc tcgccagcgt gcctggcatg 1560
gccagcaccc aacaggcggc gatcggcctg ctgaccgtcg gcggcccaac cctggtcacc 1620
tcccagaccg gcccgagcaa gccgaacttc cgtcgcggtc gcggctga 1668
<210> 183
<211> 1356
<212> ДНК
<213> Pseudomonas orientalis
<400> 183
atgcgccgtc gtcctacggt gttactcggc ctggccctgc tactcggctt accggccacc 60
caggccatgg gcgcgccgct atgcggcagc ccgttcgtcc cctcgccaac cctgcaaccg 120
acactcgcca accccaattt cagcgccagc gacagcgcgg tggactgctt catgtggcaa 180
accatggtct acctcaactg gccggccacc ccaggccaac ggggcgtacc gaatgccgcc 240
gccagcctgg gcagcccggg ccccagcgtc tggcagacct acaaggatta caacgagctg 300
tacctgccca atggccagca accgccagcc tggaacgaca acttcctgtc ggtgcagcgc 360
ttgcagaccc gaggcgtggc acgggcgttg ccgtcgatcc gcctgcttaa cagcaccagc 420
aaggtctttc gcgccgccaa tgccaacgaa tccccggcgc tacgggaaat cgagcaggtc 480
ggcggcggcg tgctctacga ccaggccggc agcccggtgt actacgaaat gctggtgaat 540
gaggtcaact tcgacttcat ctacaacaac cagctgtaca accccgccca gcagaacctc 600
tatgccaagc aaaaaggcat cgtgctgccg aacaactcca tcgagatcaa ggccgcctgg 660
aaggtgctga gcgccccgga taacccccag cgctttctca ccgcccaagc gttgctgccc 720
ggcagcagca cgccggtgac cgtgggcctg gtcgggctgc atgtgttcca gatgccttcc 780
agcgccttca accagggatt ctgggcgacc ttccagcagc tcgacaacgc ccccacggtg 840
gccggcgcca gcccaggggc acactactcg ttcaacaacc cgcagtgcgc gccggcccag 900
tgcccgccca atgacaaaac cagcaatccg acccaggtgg tgcagaactt cccgccgacg 960
ccagaggcgc agaacatcaa ccaatacatg cagaacctga tcgcccaaca ggccccgggc 1020
tccgccttgc agtactacca gttggtggac gtgcaatggc cgacttcgcc acaagccatc 1080
ggtcagcccg gggccacggc accggcgccc agtggcacgc cgaaccacga caccctgatc 1140
aacccggtgc tggaaacctt cctccagacc aatcacacga gctgcctggg ttgccatgtg 1200
tacgccagcg tggcggcgga cggcagcaag ccggccaccg actaccaggc cagcttcagc 1260
ttcctgctgg gccacgccaa aagcccggcc ctgggcagca acctgaaaag cctggcgcaa 1320
cagatcgagg acgcgtccct gagcctgcaa cactga 1356
<210> 184
<211> 1671
<212> ДНК
<213> Pseudomonas sp. PKRS11
<400> 184
atggccaaac tcgcgcaatt ctcgcctccc gcccgtatcc aggacttcag caacgacccc 60
gcccagcagg agtgtttgaa cgctgcctgg agcggcaaca tcaatcgctg ggtcaacgcc 120
gccctgctgg gggacgtctg ggatcgaatc aattacggac cgcgcccggc gttctacaat 180
ccgttggtga ccgatacccc cgacaccgcg ggcaatgtgc cgatcacctg gaacgccttc 240
cccggccgcc tgcaagcgct gtttccgaac cagggcgcgt cgtggcaaca gtgggccgac 300
cagggcgtgc cggataaagt caccaccgac ctctgcagcg gcaagcccat tgacccggcc 360
ccctactcgc ccaccggtcc acggggctgg caggacgaat actgcgaatg gagcgtgacc 420
cgcaacggtg ccggacagat caccagcgtg atgttcacct gcgaaaaccc cgagtactgg 480
atgaccctgt ggcaggtcga tccgggcaag gtgctgcaga tctaccagca ggtgatcaac 540
ccggcggtgc aactgtcgga cctgtgcctg aaagacagcc atggccagac ggtcaacgat 600
ccgctcaccg gccagccgtg ctacaacccg ctgaacaaat ggaacagcgg cacccgcacc 660
ctggcgaaca gcggtggcgc catgcacctg accagctccc ccaataccct cggcgcggaa 720
tacgacctgg ccgccgcggc caccatgccg cgcgaaaagg accacgaccc ggtgacctcg 780
gccgcagccc tggtgtgctt tgcccgctat ggccggatcg gccgccacag cgatccgacc 840
attggccaga acgtcaacca gtacgccaac tacaccccga ccctaccgca tccccaggcc 900
accctcgccg accctccggg gctgtacatg cagaccccgc agttcagcga ctacgtcacc 960
cccgacaaca ccccggcgca gactttctgg accgtggtgc gtggcagcct gaaagacccg 1020
aatacgtccg aggacatcga tcgcatcctg cacgccacct tcagtgtccc tccggaactg 1080
ggctacaccg tcagcgacat caagatcggc aaccagccga tccggtacgg ctcgcagatc 1140
gccgccacca tcaccatggc cctgctggcc acggcctttc ccaacagtgg agtggtgcag 1200
accccggtcg gcgcgacgct cgacaactcg aaccccagcc cctcggtcag cgccctgcag 1260
gcacttgcgg tgttcaccgc gtaccgggcc caggagctgg ccagcaatga acaaccgctg 1320
tcgataccgg tactggctct ggccgtcagt ccggggcagc aggtgagcaa tatcgccctg 1380
ctgctcaaca ccagcgacac cccggatggc gcggtgttca cggtgcccga aggcggggta 1440
agcatccgta tcgacggcac ccaagcgcta cccaatgcgg agctgagcct gtatcaggtg 1500
acgctgtgcg tcgacgccaa tgccgccatc ggcgaccgca gcatcctggc cagcgtgccg 1560
agcatgccag ccacccaaca ggcggccatc ggcctgctga cggtcgtcgc cccgccccag 1620
gtccggcttg ccggcggacc gcgcaaacct cacgcccgtc acagtcgcta a 1671
<210> 185
<211> 1350
<212> ДНК
<213> Pseudomonas sp. PKRS11
<400> 185
atgcgtgcca ttctcgccct cttgctgtac gccggattgt cgctggcgcc ggtcgcggcc 60
cgggccgccg gcaatccctg tggcagcccc ttcagcccgg aaccggtcat ccagccggtc 120
ctggccaacc cgcagataag caacctggac ccgtcggtgg actgcttcat gtggcaaacc 180
atggtctacc tcaactggcc ggcccaggcc ggccagcgtg gtctccccaa taccgacgcg 240
cacctgggcg accccggccc cacggtctgg caaaccttca aggacttcaa cgaactctac 300
ctgcccggtg gccagcgccc ggccccctgg aacgacaact tcctcaccat gcaacgcctg 360
gaattgcgcg gcgtggagcg gccaaggcca tcgatccgcc tgctcaacag caccagcaag 420
gtgtttcgca atgccgatgc cagcgaacaa aaggccctgg acgaattcaa gcaagtgggc 480
ggcggcgtgc tctacgacca gaacggccag ccggtgtact acgagatgct gatcaaccag 540
atcaacttcg attacatcta cagcaatcag ctgtacaacg ctgcccagca gaatctccac 600
gccgccaagc agggcatcgt cctgcccagc aactccatcg aactcaaggc ggcctggaaa 660
gtcctcagcc cccaggaagc cgcgccgccc ttgcgctttc tcactgccca ggccctgctc 720
ccgggcagcc aggtgccggt taccgtcggc ctggtgggcc tgcacgtgtt ccagatgccc 780
tccaaggact tcgcccaggg cttctgggcg accttttccc aggtggacaa cgcccccacc 840
ctgaatacac ctggccaggc ccattactcg ttcaataacc cgcagtgcag ccagtgtccg 900
gtcaacgacc ttggcagcaa gccgacgcag gtggtgcagg tccaggccaa cgccgtctac 960
gcccaggccg tcaaccagta catgcaggcg ctgatccagc agcaggcgcc gaactcggcc 1020
ttgcagtatt accaactgat caacgtgcag tggcccaact catcggtacc catcggccag 1080
cccggccagc cgacacctgc gccaaccggc agcccgagca ccgacaccct ggtcaatccg 1140
gtgctggaaa cctttatgca ggtcagcaac atgagctgcc tgggttgcca caagtccgcc 1200
agcgttgccg acaatggcac gcagccgccc agcggctatc aggcaagcta cagtttcctc 1260
ctgggccacg cccagaaccc gccgccgcaa ggcagcctca agagccttgc gcgacaggtg 1320
gaagaagcct cgacagcccg tcaacggtag 1350
<210> 186
<211> 291
<212> ДНК
<213> Pseudomonas Antarctica
<400> 186
atgaaattat caaatgtctt actattgagt atcgtatttg cttggcaagg catggccttc 60
gccgatacac agaagtctaa tgccgaaacc ttgttatcta acgacaaacc accgctaaca 120
caggcggcgc aggagaagga acaagaaaat gttgaggctg accggaatga atgttggtcc 180
gctaagaatt gttctggaaa gatcctaaac aataaagatg cgcacaactg taaattatcc 240
ggcggtaagt catggcggag caagactaca gggcaatgca ctaatcttta a 291
<210> 187
<211> 291
<212> ДНК
<213> Pseudomonas orientalis
<400> 187
atgaaaatgt ccagcgtctt actgatgagt attgcgtttg tatgtcaagg catggtcttc 60
gctgatacac agaagtccaa tactgaaacc ttgttttcca acgacaagcc accgctgata 120
cagacggccc aagagcagga acaaaaagag gttgaggttg accgcaatca atgttggtcc 180
gccaagaatt gctctggaaa gatcctgaac aataaagatg cacataactg taagttgtcc 240
ggcggtaagt cttggcggag caagactaca gggcagtgca ccaatctgta g 291
<210> 188
<211> 288
<212> ДНК
<213> Enterobacter asburiae
<400> 188
atgaaaacac tcgttatcgc aattctcacc gctgttcttt gccagggcat ggcgatggct 60
gatacacaga aaccagcaac cggggctttg ccagcaaatg aaaaaccccc tctcgttcag 120
ccagctgacg aacataaaac gagcgaggca aatgccaatc gtaatgaatg ctggtcagca 180
aaaaattgta ccggaaaaat ccttaataat aaggatgcgc ataattgcaa aaactccggg 240
ggtaaatcat ggcggagtaa aaccaccgga cagtgtacca atctttga 288
<210> 189
<211> 288
<212> ДНК
<213> Enterobacter sp.
<400> 189
atgaaaacac tcgttatcgc aattcttacc gctgttctgt gccagggcat ggcgatggcc 60
gaaacgcagc aaccggcatc cggggctttg cctgccaatg aaaagccgcc cctggtgctg 120
acggccgacg aaaaaaaagc gagtgaggct aatgccgaca ggaatgaatg ctggtcggcc 180
agaaattgta gcgggaaaat ccttaataat aaggatgcgc ataactgcaa aaactccggg 240
ggtaaatcct ggcggggtaa aaactccagc cagtgcacca atctttaa 288
<210> 190
<211> 318
<212> ДНК
<213> Acidovorax avenae
<400> 190
atgaaaaagc tgttgctcat cgcttcgtta ctcgtttcca tttccggtgc gaatgtgttc 60
gcccaggcac cgtcatccgg cgatgctccc gcagccgtcg cgggcaagca ggatggggcc 120
tcgcacaaag acacggaaca ggcggccaat gtggaatgcg acgtcaatgc gaccgtccag 180
cagtgctgct ctgccgccaa atgccagggg aaagtgctca gcaatcgcga tgcccacaac 240
tgcaaggaca agtccaaggg caagagctgg catgcggcgg cgcaaggggg acagcccgct 300
gcgtgccagc ggatgtaa 318
<210> 191
<211> 285
<212> ДНК
<213> Serratia plymuthica
<400> 191
atgcagtgta atggggctat tttaaagttg ttgtgcgcgc aacgaaaaga ccaatttatg 60
aacttacgca taaggacaca tgctatgaaa aatttgtcga ttttagttgt tctatcttcc 120
tgcctcttac ttcctttaac cgcgtctgcg gctgctggta cgtgctatag tgcgaagaac 180
tgctccggta aagtgttaag ccatcgagat gcacataact gcaaggtcaa ggataagggt 240
aagtcttggc gcagtgatat cacaaatcaa tgtaccaacc tgtga 285
<210> 192
<211> 282
<212> ДНК
<213> Serratia liquefaciens
<400> 192
atgcgtgagg aggctatttt aaagttgttg tgcgcgcaac gaaaagacca atttatgaat 60
tcacgcataa ggacacatgc tatgaaaaat ttgtcgattt tagttgttct atcttcatgc 120
ctcttacttc ctctaactgc gtcggcggcg tccggtaagt gctacagtgc taagaactgt 180
tctggaaaag ttttaagcaa aagagacgcg cataactgca aggtcaagga tcggggcaaa 240
tcttggctta gtgatgtcac aggcaaatgt accaacctgt ga 282
<210> 193
<211> 237
<212> ДНК
<213> Serratia sp.
<400> 193
atgaaactta aatatgaacg aataaggata tatgttatga aaagtctatc gattgttatt 60
actctcgctt catgcttact gctacctctg actgcgtctg cggccgcagg cacatgttat 120
agcgcaaaga actgttccgg gaaggtgctt agccaccggg atgcccataa ctgcaaggtt 180
aaggacaaag gtaaatcctg gcgcagtgat attacaggcc aatgcacgaa tctttga 237
<210> 194
<211> 228
<212> ДНК
<213> Serratia sp.
<400> 194
atgaattcac gcataaggac atatgctatg aaaaatttgt cgattttagt tgtactatct 60
tcatgcctct tactccctct aaccgcttct gcagctgctg gcacatgcta tagcgcaaag 120
aactgctctg gaaaagtttt aagccatcga gacgcgcata actgcaaggt caaggacaag 180
ggtaaatctt ggcgcagtga tatcactggc aagtgtacca atctgtaa 228
<210> 195
<211> 270
<212> ДНК
<213> Pseudomonas chlororaphis
<400> 195
atgtcggctc aagagaactt tgttggcgga tggactcctt atcacaaact gaccccaaag 60
gatcaggaag tattcaaaga agccctggcc gggttcgtgg gtgtgcagta cacacctgaa 120
ctggtttcga cccaggtcgt caacggcacg aactatcgct atcaatcgaa agcgacgctg 180
cctggctcgt cggaaagttg gcaagcggta gtggaaatct acgcgcctat caaaggcaag 240
ccgcacatca cccagatcca ccggatctaa 270
<210> 196
<211> 270
<212> ДНК
<213> Pseudomonas chlororaphis
<400> 196
atgtcggctc aagagaactt tgttggcgga tggactcctt accacaaact gactccaaag 60
gatcaggaag tattcaaaga agccctggcc ggattcgtgg gtgtgcacta cacgcctgaa 120
caggtttcaa cccaggtcgt caacggtacg aactaccgtt atctgtcgaa agcaacggtg 180
cctggctcgt cggacagctg gcaagcggtc gtagaaatct acgcgcctat caagggcaag 240
ccgcacatca cccagatcca ccggatctaa 270
<210> 197
<211> 270
<212> ДНК
<213> Pseudomonas brassicacearum
<400> 197
atgtcggctc aagagaactt tgttggcgga tggactcctt accacgaact gactccaaag 60
gatcgggaag tattcaaaga ggccctggcc gggttcgtgg gtgtgcaata cacccctgaa 120
aaagtttcga cccaagtcgt caacggcacg aactatcgtt atctgtcgaa agcaacggtg 180
cctggctcgt cggacagctg gcaagccgta gtggaaatct acgcgcctat taaaggcaag 240
ccgcacatca cccagatcca ccggatctaa 270
<210> 198
<211> 270
<212> ДНК
<213> Pseudomonas chlororaphis
<400> 198
atgtcggctc aagagaactt tgttggcgga tggactcctt accacgaact gactccaaag 60
gatcgggaag tattcaaaga ggccctggcc gggttcgtgg gtgtgcacta cacccctgaa 120
aaagtttcga cccaagtcgt caacggcacg aactatcgct atctgtcgaa agcaacggtg 180
cctggctcgt cggacagctg gcaggccgta gtggaaatct acgcgcctat taaaggcaag 240
ccgcacatca cccagatcca ccggatctaa 270
<210> 199
<211> 270
<212> ДНК
<213> Pseudomonas chlororaphis
<400> 199
atgtcggctc aagaacattt tgttggcgga tggactcctt accacgaact gacgccaaag 60
gataaagaag tattcaagga agccctggcc gggttcgtgg gtgtgcacta cacccctgaa 120
aaggtttcga cccaggtcgt caacggcact aactaccgtt atctgtccaa agccacgctg 180
cctggctcct ctgacagctg gcaggcggta gtggaaatct acgcgccgat caaaggcaag 240
ccgcacatca cccagatcca tcggatctaa 270
<210> 200
<211> 270
<212> ДНК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 200
atgtcggctc aagaaaatct tgttggcgga tggactcctt accacgaact gactccaaag 60
gatcaggaag tattcgatga agccctggcc gggctcgtgg gtgtgcacta caccgccgag 120
ctggtttcga cccaggtcgt taacggcacc aactatcgtt atcagacgaa agcaacgcag 180
ccgggttcat caaacagctg gcaagcggtc gtggaaattt acgcgcctat taacggcaag 240
ccgcatatca cccagatcat tcggatctaa 270
<210> 201
<211> 270
<212> ДНК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 201
atgtcggctc aagaaaatct tgttggcgga tggactcctt accacgaact gactccaaag 60
gatcaggaag tattcgatga agccctggcc gggctcgtgg gtgtgcacta caccgctgag 120
ctggtttcga cccaggtcgt taacggtacc aactatcgtt atcaggctaa agcaacgcaa 180
cctggttcgc caaacagctg gcaagcggtc gtggaaattt acgcgcctat taacggcaag 240
ccgcatatca cccagatcat ccggatctaa 270
<210> 202
<211> 270
<212> ДНК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 202
atgtcggctc aagagaatct cgttggcgga tggactcctt atcacgaact gactccaaag 60
gatcaggaag tattcgatga agccctggcc gggctcgtgg gtgtgcacta cacggctgaa 120
ctggtttcca cccaggtcgt caacggcacc aactatcgtt atcaggcgca agcaacgcag 180
cctggttcgc caaacagctg gcaagcggtc gtggaaattt acgcgcctat taacggcaaa 240
ccgcacatca cccagatcat ccggatctaa 270
<210> 203
<211> 270
<212> ДНК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 203
atgtcggctc aagaaaatct cgttggcgga tggactcctt atcacgaact gactccaaag 60
gatcaggaag tattcgatga agccctggcc gggctcgtgg gtgtgcacta caccgctgag 120
ctggtttcga cccaggtcgt taacggtacc aactatcgtt atcaggcgaa agcaacgcag 180
cctggttcac caaacagctg gcaagcggtc gtggaaattt acgcgccgat taacggcaag 240
ccgtatgtca cccagatcat ccggatctaa 270
<210> 204
<211> 270
<212> ДНК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 204
atgtcggctc aagaaaacct cgttggcgga tggactggct accacgaact gactccaaaa 60
gataaggaag tattcaaaga agctctggag ggactcgtcg gtgtgcatta cacacctgaa 120
ctggtttcga gccagatcgt taatggcact aattatcgct atcaaactaa agcgacccag 180
ccaggctcgt caacgagctg gcaagccatc gtggaaattt acgcgcctat caagggcaag 240
ccgcatatca ctcagatcat ccggatctaa 270
<210> 205
<211> 270
<212> ДНК
<213> Pseudomonas rhodesiae
<400> 205
atgtcggctc aagaaaatct cgttggcgga tggactcctt atcacgaact gactccaaag 60
gatcaggaag tattcgatgt agctctggcc gggctcgtgg gtgtgcacta caccgctgag 120
ctggtttcga cccaggtcgt taacggtacc aactatcgtt atcaggcgaa agcaacgcag 180
cctggttcac caaacagctg gcaagcggtc gtggaaattt acgcgcctat caacggcaag 240
ccgtatgtca cccagatcat ccggatctaa 270
<210> 206
<211> 270
<212> ДНК
<213> Pseudomonas sp.
<400> 206
atgacagctc aagaacatct tgttggtgga tggacccctt accacaaact gactcccaag 60
gatcaggaag tcttcaaaga agcactggcc ggcttcgttg gcgtgagcta cacgcccgaa 120
gaggtttcca gccaagtcgt taatggcacc aactatcgct acaagtcgaa agccacgctt 180
ccgggttcgc caaacggctg gcaagcgatc gtagaaatct acgcgccaac taatggcaag 240
ccgcacatca ctcagatcca tcggatctaa 270
<210> 207
<211> 276
<212> ДНК
<213> Pseudomonas fluorescens
<400> 207
atgtcagctc aagaaaacca cgttggcgtt ggcggatgga ctgcttacca cgaactgacc 60
ccaaaggacc atgctgtatt caaagaggcc ttggaaggct ttgtgggggt gcaatacacc 120
cctgagacgg tttcgactca ggtcgtcgcc ggcacaaact atcgctatca ctcgaaagca 180
cagcagcctg gttcgccagc aatctgggca gcaatcgtgg aaatctacgc ccccctcaaa 240
ggtaaaccgc acatcaccca gatcatccgc atctaa 276
<210> 208
<211> 279
<212> ДНК
<213> Enterobacter-sp
<400> 208
atgtcggaac aacaaacgct gctgcctggc ggctggacgg cttatcatcc gctgactgct 60
caggaccgaa aagtgttcga agaggcgctc aacgggcatc tgggcgtgga ttacgagcca 120
caaaaggtaa aaacccaggt cgtggccgga acaaactacc gcttcctttg tgaggcttcg 180
gtcccgccgt ctacggccgt ctgggaagcg atagtggaaa tttatgcgcc attaccggga 240
cagggcgccc cgcatattac tcaaattatc agaatttag 279
<210> 209
<211> 270
<212> ДНК
<213> Shewanella denitrificans
<400> 209
atgtcaaata atgaaactat cgttggtggt tggacagctt acaacgcaat cacatctgct 60
gaaagagaaa ttttcaataa agccatggag ggttttgttg gtgtaagtta catgccagag 120
acggtttcaa cccaggttgt tgcgggaatg aattatcgtt ttaaatgcga agcgtctatg 180
ccaccatcag aagtgttatg ggaagcaatt gttgaaatat atcagccatt aaagggcatc 240
ccgcacatca caaacatcac aaaaatataa 270
<210> 210
<211> 273
<212> ДНК
<213> Aeromonas diversa
<400> 210
atgtcggatc aagctgtgct ggttggcgga tggactgcat atcacaggct gactgcggaa 60
gaccaagcgg tgtttcagga agcgctgaaa ggatttgttg gggtggagta taagcccttt 120
gaagtttcca cccaggtggt agcgggtatg aactaccgct acaagtgcaa gaccacggta 180
cccttgccga ctccgatcca tggcgaagcc gtggtacaga tcttccagtc gctggacggc 240
tctgcccata tcacctccat cactcccatc taa 273
<210> 211
<211> 273
<212> ДНК
<213> Aeromonas salmonicida
<400> 211
atgtcagaac aagcagtgtt ggtgggtgga tggaccgcat atcacaagct gaccgccgag 60
gatcaggcgg tatttgacca ggcgctgaaa ggatttgtcg gggtgcagta cgtacccttt 120
gaagtctgca cccaggtggt ggccggcacc aactaccgct tcaagtgcaa gagcacagtg 180
ccgcttgcca aaccgatcca tggcgaagcc gtggtgcaga tcttccagtc tctggatggc 240
tcggcccata tcacctccat taccccgatc tga 273
<210> 212
<211> 273
<212> ДНК
<213> Aeromonas veronii
<400> 212
atgtcagaac aagcagtgtt ggtgggtgga tggaccgcat atcacaagct gaccgccgag 60
gatcaggcgg tatttgatca ggcgctgaaa ggatttgtcg gggtgcagta cgtacccttt 120
gaagtctcca ctcaagtggt ggctggcacc aactaccgct tcaagtgcaa gagcactgtg 180
ccgcttgcca aaccgatcca tggcgaagcc gtggtacaga tcttcaaatc actggacggg 240
gatgcccata tcacctccat taccccgatc tga 273
<210> 213
<211> 267
<212> ДНК
<213> Aeromonas molluscorum
<400> 213
atgtcagaac aagcagtgct gttgggcgga tggactgcct accacaagct gagcgccaag 60
gatcaggcgg tattcaacca ggcgctggaa ggatttgtcg gggtgcagta cacacccttt 120
gaagtctcca cccaggtcgt cgccggtacc aactaccgct tcaaatgcaa gagcactgtg 180
ccgctgccca accccatcca cggggaagcc gtggtgcaga tcttccaggc gttgtttccc 240
aaatcgatgc agcttgaatg gaactaa 267
<210> 214
<211> 273
<212> ДНК
<213> Aeromonas aquariorum
<400> 214
atgtcagaac aagcagtgtt gttgggcgga tggactgcct accacaagct gagcgccaaa 60
gatcaggccg tattcaacca ggcgctggaa ggatttgtcg gggtgcagta cacccccttt 120
gaagtctcca cccaggtcgt cgccggcacc aactaccgtt tcaaatgcaa aactactgtg 180
ccgctgccta acccgatcca cggagaagcc gtagtgcaga tcttccagtc gctggatggc 240
tcggcccata tcacctccat taccccgatc tga 273
<210> 215
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Линкер расщепления
<400> 215
Glu Glu Lys Lys Asn
1 5
<210> 216
<211> 16
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> 16S-рибосомный праймер
<400> 216
taccttgtta cgactt 16
<210> 217
<211> 20
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> 16S-рибосомный праймер
<400> 217
agagtttgat cmtggctcag 20
<210> 218
<211> 1737
<212> ДНК
<213> Pseudomonas sp. VLB120
<400> 218
atgagcacgt ccttcacaca gttcacctcg cccgccggcc aagcccccaa ggactacaac 60
aagctgggcc tggaagacca gttgccgcag tttgaaaccg actggaacaa caacctcacc 120
ggctggaccc aatcgtccat catcggcaac ccctggtcca acctgaacga cgccccccgc 180
tcgggttact acaatccgct cgtcgaaggc ttcggtgacg tgactgtccc cgcgatcacc 240
tgggcgccct tccccaaccg gctctggacg tttttctaca acaacggtgc ggcgatcgtt 300
ccccaactgg gcggcaacgc catgactctg gagcaggtga tggaattggc cgatcacggc 360
cagatcaccc tcaacaacac cctctacaaa ctctacgatc ccgacaacca agggaccttg 420
ctgcaactgc cggccaagcg ctgccccagc atcgactgga aaggccagta cacggcgttc 480
tcgccctccg gcccacgggg ctggctcgac gagtactgcg agtggtccat cgtgcgcgat 540
accgacggca acatgcgcaa gatcacattc acctgcgaaa accccgccta tttcctggcc 600
atgtggcgca tcgatccgaa cgcggtactg ggcctgtacc gggactacat cgacccgaac 660
gtacaactcg aagacctgta cctgcgctat gccgtcgatt gcccgaccgg caaggccgga 720
gatccagtga tcgaccccac caccggccag ccggcctatg acacggtcaa caaatggaac 780
gccggtacgg cctgtgtacc cggccagtac ggcggcgcga tgcacctgac gtccggcccc 840
aacaccctca gtgccgaggt gtacctggct gccgccgcca ccctcctgcg accggtgagc 900
agcagccaga acgcccagtc gctgatctgc tgcgcgcagt acggacagaa ctatcgcaac 960
tccgacccgc acatcggctt catggccaat accaaggcgg tgaacaatcg gctgtcgctg 1020
accaacccca ttggcctgta cctgcaacag cccaccgatt tcagcgcctg gaaaggcccg 1080
cagggccagg acgtgagcca gtattggcgc atcacgcgcg gcacggccaa gtcggcggcc 1140
aacggctccg accagatcct gcaggcggtg ttcgaggttc cgcaaagcgc aggcttctcg 1200
atcaatgaca tcaccatcaa tggccaacgg gtcgactatg tgtgggtcat cgcccaacaa 1260
ctgctggtgg gcctgagcgt caccgccaag ccgatcaccg tcacaccccc gtcgttccct 1320
tgcgtacagg cgcgggttga ggggctgcaa ccctggccgg ttcaactgct gccagtagac 1380
ctgttctacg gacaatcacc caccgacctg cccgcctggc ttgcaccggg aagcagcaac 1440
tcgttcgtac tggtggtgca gggcgccgac ccgagcacca cgacgcagaa tgcacgggtg 1500
caattctcca accccggcat cacggcgcag gtcacccact acctgccaga cgcatccgcc 1560
attcccggac agaccaactc cggcggtacc caggcctaca tcctcaccat cacggtgagc 1620
ccgacggcag cacccggtct ggtcatggtg cgcgcgctca atccgggcga agacgcgaac 1680
gtgagcgcgg ccgatcaccc ttgggaggcc ggcctggcgc tggtgcccgg cgcctga 1737
<210> 219
<211> 1605
<212> ДНК
<213> Pseudomonas sp. VLB120
<400> 219
atgtccaggt cacgcttgag tctcatctcg ctgttgagcg gcatgttgct gtatctgtcg 60
gccctgcctc ccgctgcggc agccacgatg tcggatgccg acagctgtgt gcagcagcaa 120
ttggtgttca atccggccag tggagggttc ctgccggtca acaacttcaa tgccaccaac 180
caggcattca tgaactgttt tgcctggcag ttgttcatcg ccctgaattg gccggtcaat 240
cccggctggc ctgccaccgc cagcctggcg ggtgaacccg acatgaacag caccctggcg 300
caattcggag tgccctcttc cccggggcaa cccatgagcg tggcgcccgt gtgggccagc 360
tacaaagatg ccaacgacat cttcctgccc ggcgcgccca cgcccaccgg ttggggcgtg 420
caaaccatgg taccgtccgg ttgcagcacc cagggcagtc tgaaggccct gaaggtaggt 480
gcacgcaagt tcatgaatgc cacctcagaa ggcgcgatca acgccttgca tggtttccac 540
ctctcgaccg ggacggtcgc ttctattccc gaccccgtca tggaagcgtc cggcggctgg 600
ctgacggacc agtctggcaa cttggtgttc tttgaacgca aagtgggcaa ggccgagttc 660
gactacatcg tcgagaaggg gctctatgat gccgccaatc agttgaaggt cgcgcaaaac 720
ctcgatggca atacaccgga aggcctgtcg ctgcccctcg gcgagccaat gcgttcgctg 780
ccgccgaccc ctgtgccaca ggagcagctg ggcgcgcttg agctcaaggc cgcgtggcgt 840
gtgctgaccg gcaaacccga gctgttcggg cgctacctga ccaccgtcgc ctggctcaaa 900
cgccccgaca cactggagtg cacccaggaa gtggtggggc tggtgggcct gcatatcatc 960
aacaagaccc aggcgtcgcc caatttcatc tggaccacct tcgagcaggt ggacaacgtg 1020
cccgaaccgg accaggcccc gccgcaagga accccgccga acggtttctc tttcaacaac 1080
cccgactgtg ggagcggccc tgcgtgtgaa cccaatgtgg ctcgtatcca gtgcaagcaa 1140
taccaccccg acaaggactg caccgatctc tttccacgcg accagccggt acagaccacc 1200
cgtgagcacc ccgtccccag cgacctgcaa gccctgaaca gcgcggtgca atccaacttt 1260
gcacagcaga cccacggcca gtcggtgttc cagtactaca agctgatcaa cgtactgtgg 1320
accctcgcgc ccaatcctcc cagcccggag ccgggcgcca atgcccaggt gccgctgtca 1380
tacgggccgt tcatcagtca gggcaacgtg ccggtggcca acaccaccat ggagacttac 1440
gtacagggcg atgactgcaa caaatgccat cagtacgcga cgattgccgg cagcccctcc 1500
ttggcctcgg acttctcctt cctgttcaac agcgcgagtt ccgccggcca taaaagcctg 1560
atcaagcgcg tcaaagcctt cgaaacgctc aaggaccgcc cctga 1605
<210> 220
<211> 1734
<212> ДНК
<213> Pseudomonas putida
<400> 220
atgagcacgc ccttcaagca gttcacctct cccgctggcc aagcccccaa ggactacaac 60
aagctaggcc tggaggacca gttgcagcag tttgaaaccg actggaacaa cgacctcacc 120
ggctggaccg agtcgtcgat catcggcaac ccttggtcgg gccagaacga cgcgcctcgc 180
tctggctatt acaacccgct ggtggagggt ttcggtgaag tgaccccgcc cgcgatcacc 240
tgggcgccct tccccaaccg gctgtggacg ttcttctaca acaacggtgc agcggtcgtt 300
ccgcaacttg gcagagccat gaccctgaac caggtgatgg agctggccga ccgcggccag 360
atcaccctcg acaacaccct ctacacgcta tacgacccgg acaaacaggg caccctgctg 420
caactaccgg ccaagcgctg cccaagtatc gactggaacg gcaggtacac ggcgttctca 480
ccttccggcc cgcggggctg gctcgacgag tattgcgagt ggtcgatcgt acgcgatgcc 540
aacggcaaca tgcgcaagat caccttcacc tgcgaaaacc ccgcctactt cctggccatg 600
tggcgcatcg acccgcaggc agtattgggc ctgtaccgcg actacataga ccccagcgtg 660
caactcgagg acctgtacct gcgctacacc gtcgactgcc cgaccggcaa agccggcgat 720
ccggtcatcg acccgaccac tggccagccg gcctatgaca ccgtcaacaa atggaacgcc 780
ggcaccgcct gcgttcccgg gcaatacggt ggtgcgatgc acctgacctc cggccccaac 840
accctcagtg ccgaggtgta cctggccgcc gccgccacca tcctgcgccc ggtcagcagc 900
agccagaatg cccagtcgct gatctgctgc gcgcagtatg ggcagaacta ccgcaactcc 960
gacccgcaca tcggcttcat ggccaattcg acggcagtga aaaatcgcct gtcgctgacc 1020
aacccgattg gcctctacct gcagcaacct accgatttca gtggctggaa aggcccgcaa 1080
ggccaggacg taagccagta ctggcgcatc acccgcggca ccgccaagtc ggccgccaac 1140
gggtccgacc aaatcctgca ggcggtgttc gaagtcccag aaagcgccgg tttctcgatc 1200
aacgacatca ccatcaacaa ccagccggtc aactatgtgt gggtcatcgc ccagcaactg 1260
ttggtgggcc tgagcgtcac cgtcaagccg cttgctacca caccgccctc cttcccgtgc 1320
gtgcaggacc ggcagaccgg ccggcaaccc tggccggtgc agctgctgcc actggacttg 1380
ttctacgggc agtcccccac cgacctgccc gcctggctgg caccgggtag cagcaactcg 1440
ttcgtgcttg tggtgcaagg cgcagacgcc aacaccacgg cgcagaacgc cagggtgcaa 1500
ttctccaacc ctggggtgac ggcacaggtc acccagtacc tgcccgacgc gtcggcgatt 1560
cctggccaga ccaactctgg tggcactcaa gcctacatgc tgaccatcac ggtcagcccc 1620
aacgcagcac ccggcctggt gacggtgcgt gcactgaacc cgggcgaaga cgtgaacgta 1680
agcgcggcag accacccgtg ggaatccggc ctggcgctgg tgcctggcgc ctga 1734
<210> 221
<211> 1590
<212> ДНК
<213> Pseudomonas putida
<400> 221
atgatgtcca gcttacgcct gagccttctg tcgctgctca gcggcatcct gctttgcctg 60
cagaccctgc aacccgctgc tgcggccacg ctgtcggacg ccgatgcctg tgtgcagcaa 120
cagttggtgt tcaaccctgc gagcgggggg tttctgccgg tcaataactt caatgccacc 180
agccaggcgt tcatgaactg cttcggctgg caactgttca ttgccttgaa ctggccagta 240
aaccccggct ggccggccac ccccagcctg gcgggcgaac ccgacaggca aagcaccctg 300
gcgcagttcg gtgtgccgac cacggcgggt gaaccgatga gcgtggcccc ggtgtgggcc 360
agctacaagg acgccaacga tatctttctg ccaggcgcgc ccgcgcccac cggttggggg 420
gtacaaaccc tggtaccaag cagctgcaat agccagggta gcctgaaggc gctcaaggtg 480
ggtgcgcgca aattcatgaa cgctacctca gaaggcgcga tcaacgccct gcacgggttc 540
cacctgtcta ccgggacact ggcatccatt cccgacccgg tcatggaagc gtccggcggc 600
tggctgacgg atcagtcggg caacctggta tttttcgaac gcaaggtagg caaggccgaa 660
ttcgactaca tcgtcgagca tgggctatat gacgcggcca accagttgaa gctcgcccaa 720
accgaggggc tgtcgctgcc catcggtgaa gcgatgcgcg aactgccgcc gtcgcctgtg 780
ccgcaggagc aactgggcgc aatcgagctc aaggccgcct ggcgggtgct gactggcaaa 840
cccgaactgt tcggtcgcta cctcaccacc gtcgcctggc tcaagcgccc cgacaccctg 900
gcatgcaccc aggaagtggt gggcctggtg ggcctgcaca tcatcaacaa gacccaggct 960
tcgcccaact tcatctggac cacgttcgag caggtggaca acgtgcccga acctgcccag 1020
gtgccgccgc agcaaacccc gccgggcggt tttgcgttca acaaccccga atgtggcacc 1080
ggccccgagt gtaaaccgaa cgtggcccgt atccagtgca agcaacacca ccccgaccgc 1140
gactgcagcg acctcttccc gcgcgaccag ccggtacaga ccacccgtga ataccccgtg 1200
cccagtgccc tgcaggccct gaacagcgca gtgcaagcca acttcgcgca gcaaagccag 1260
ggccagtcgg tgttccagta ctacaagctg atcaatgtgc tgtggaccct tgcccccaac 1320
ccacccagcc cagaaccggg tgccaacgca caggtgccgt tgtcctacgg gccgttcatc 1380
agcgagggcc ccgtgccagt ggccaacacc accatggaaa cctacgtgca gggtgatgac 1440
tgcaaccagt gccatcagta cgcgaccatt gccggcagtc cctcgctggc ttcggacttc 1500
tcgttcctgt tcaacactgc cagctcggcc agccagaaaa gcctgatcaa gcgcgtcaaa 1560
gccttcgaga ccctcaagga ccggccctga 1590
<210> 222
<211> 1734
<212> ДНК
<213> Pseudomonas poae
<400> 222
atgagcacac ccttcaccca attcacctcc cctgccgaac aagcgcccaa ggactacaac 60
aagctcggcc tggaggacca attgccgacc ttcgagaccg actggaacaa caacgtcacc 120
ggctggaccc agatgtcgat catcggcaac ccctggtcca acctcaacga tgcaccgcgc 180
tcgggctatt acaacccgct ggagagcggc tacggcacgc tgacgccgaa gaccatcacc 240
tggcagccct ttcccaatcg cctctggacg ttcttctaca acaacggcgc cgccgtggtc 300
ccgcaactgg gcggcaaggc catgaccctg gaccaggtga tgcaactgac cgaccacggc 360
cagatcaccc tcaataacac cctgtattcg ctgtacccgg acccgcaggc gacccaactg 420
cagatcccca gcgtgctgtg caaatccatc aactggaacg gcccctacgc cgacttttcg 480
ccctctggcc cacggggctg gctggatgaa tactgcgagt ggtcgatcac ccgcgacccc 540
gacggcaaca tgcgcagcat catgttcacc agcgagaacc cggcgtactt cctgaccatg 600
tggaacatcg acccgggtgc cgtgctgggc ctgtaccagg cgtatgtcga cccgcaggtg 660
aaactcgaag acctgtacct gcgctacacc gccgacggcc cgaccggcaa ggccggcgaa 720
ccggtgctcg accccaccac cggccagccc gcctacgaca ccgtgaacaa atggaacagc 780
ggcaccgtgc gcataccggg cgtgtcgggc ggcgcgatgc acctgacctc cggccccaat 840
accctgagtg ccgagatcta cctggcggcg gccgccacca tcctgcggcc gctcagcagc 900
agccagaacc agcagagcct gatctgctgc gcgcagtacg ggcagaacta ccgcaactcc 960
gacccgcata tcgggttctc cgccaaccag gcggcggtca acaacctgat ctcgttgacc 1020
aaccccatcg gcctgtacct gcagcaaccc aagtccttca gcacctggaa aggcccgcaa 1080
ggcgaggatg tcagcagcta ctggcgcgtc acccgtggca ccgccggcac cggcccgaac 1140
aactccgacc agatcctcca ggcggtcttc gaagtgccgg ccagtgcagg gttctcgatc 1200
aatgacatca ccatcagcgg cacgccgatc gactacgtgt gggtgatcgc caacgaactg 1260
aatgtggccc tcagcgtgac cccggcaccg ctcaccgccc agcccaagga gtgcgcctgc 1320
gtggcggcca acaccaccga tgcgcagccc tggccggtgc agttgctgcc gattgacctg 1380
ttctacggcc aatcccccag cgacttgccg gccagctttg cgcccggcag ctcaagccag 1440
ttcgtgctgg tggtgcaagg cgccgacccg aacaccacgg cggcggatgc acgggtgcag 1500
ttctccaacc cgggcatcac ggcccaggtc acgcagttcc tgccggatgc ctcggcgatt 1560
cccgggcaga ccgacggcgg cggcacccag ggctacatca tgaccattac cgtcagcagc 1620
aacgcggcgc cggggctggt cagcgtgcgt gcgctcaacc ccaacgaagc ggccaacccg 1680
agtgccaccg agcacccatg ggaaagcggc ctggccctgg tgcccagcgc ctga 1734
<210> 223
<211> 1590
<212> ДНК
<213> Pseudomonas poae
<400> 223
atgaacggat ggcttcgccc gctgcgccgg gcacgcttgc gtattgtctg cacaatcacc 60
tgcgcccttc tcccgtggct ggcccccgca ccggcaagtg ccgcctcgga tgcccagagc 120
tgcgtcagcc agttggtgtt cgaccccacc agcggcggct tcctgccggt gaacaatttc 180
ggcaccgagc aggcttttct caattgtttc ggctggcagt tgttcatcgc catgaactgg 240
ccggtcaacc ccggctggcc cgccaacccg agcctggccg gtgagccgga tacgcaaagc 300
agcgcggccc agttcggcgt gccgccaacc ccaggccaac cgatgagcaa tgccccggtg 360
tgggccagct acaaggatgc cagcgagatc ttcctgcccg gcgcggccaa gccgtccggc 420
tggggcgtgg aaaccctggt gccgtccaat tgcaccgcca ccggcaatct caaggcgttt 480
gccacgggcg cgcgtaaatt catcaccgcc acctcggaaa gcgcgatcaa ccgcaagcac 540
cgcttccacc tgtccagcgg cacccaggtg accctgcccg attcgatcat ggaagcctcc 600
ggcggttggc taacggacca gtccggcaac ctggtgtttt tcgagcgcaa ggtgggcaag 660
gccgagttcg actacatcgt cgacaacggc ttgtacgacg ccgccaacca gctgatcgtg 720
gcgcagaaca gcgacaaccg gcaccccgcc ggcctgtcac tgccggccgg caagctggtg 780
cgtgaactgc cggccaaggc gctaccccag gaggaactcg gcgccctgga actcaaggcc 840
gcctggcgcg tgctcaccaa caagcccgcc ctatacgggc gctacctgac caccgtggcc 900
tggctgcaac gcccggacac gctgcaatgc acccaggaag tgattggcct ggtgggcctg 960
catatcatca acaagaccca gacccagccg aatttcatct ggaccacctt cgagcaggtc 1020
gacaacgtgc ctgacggtgg tgccgcgccg cccgagggct acagcttcaa caacccggca 1080
tgcaccggtg atgcctgcac gccgaatgtg ccccgcgtgc agtgcgacgc cacgcacacg 1140
ccgcccaact gcacgcccct cgaccagccg gtgcaggcca cccgcgccaa cgccacgccc 1200
caggacatgc aggcgctgaa caccgcggtg cagcagacct tcgcccagca gacccagggc 1260
cagtcggtat tccagtacta caaactggtg aatgtgctgt ggtccaagac gcccaatgcg 1320
cccaacgacc caggcccagg gccgaacgtg caggtaccgc tgtcctatgg gccgtttgtc 1380
agcgaccaga gtgtcgtcgt cgccaacacc accatggaaa cctacgtgca gaccgacaac 1440
tgcaacgact gccaccagta cgcggcgatt gccggaaaat ccgggctggc gtcggacttc 1500
tccttcctgt tcagcaatgc cgactcggcg aagaacacgc ggctgatcaa acgcatcgag 1560
tcgttcaaga ccctcaagga caacccgtaa 1590
<210> 224
<211> 771
<212> ДНК
<213> Pseudomonas entomophila
<400> 224
atgggttcta ttactgatca tgatcaactg atcgcttggg ttcaatcgct ggatattcct 60
gagcccacga aaagtattgc gcggtcacgc aatgcggtgg ttcgcgccag cagcgaagaa 120
gaaggagctg cggtggtgcg cggtagcgtg acatcgttcg ttactggatt gaaacagcaa 180
gcgcgcgatg atgtgcagaa cagtacgctg ctgatgcaac tggcggccga caagaaatat 240
aatcccgaca cgcaacggga ggagtggttc aagttctaca ccgatggctt agccaacctg 300
ggctgggggc gcgtcagttc gatttaccag aaatataacc cgcgtaatac caatgtcacc 360
atggatgaag tggtgctgga ggtgatcgct gcggttgtcg gtgctgacag tgccgtgtac 420
aaggtcaccg agaagacctt cgcggcgctg gaaagcaacc cgaagaatca gggggcgctg 480
aagctgttcg acagtaccac cactcgcgac gacatcggca cgttccagat ccttccggtc 540
atgcaggacc gggatggcaa cgtggtcatg gtactgacca cagtcaacgc cagcaccact 600
gtgcaaaagg gtagcttcct gttctggagc tggagcaaga ccacggcctg gatgtatcgg 660
gctgcgcagc agacggtgct caacgaatcg gtgtactcac gcgtgcgtga gtcggtgatc 720
cagaaattgg gcaagaatgc cgaagatttt attgatggtc tcgatatcta a 771
<210> 225
<211> 783
<212> ДНК
<213> Pseudomonas entomophila
<400> 225
atggcattat cagccgatga agtttatgtg gtttcgggca acctgctgtc tgcaatgccc 60
aagcttgttg atcctgtgat gttcgaagat tttgccaatt ccaatttgct ctgccaattg 120
gcggcggaca agaaccaagg cacgcggttt gttgatccgc ccgcctggct agacttctac 180
aggaatgcat tgggcaaggt gttctggagg atcagtaatt ccgggacggt cagttttaac 240
ataccgcctc tggttcgcag cataacgata aaggaagtgc tggagaagac gttctataaa 300
acactggatc atgaagtctc gctgcaatta gatagcagta tcgagcgttt ggaagagcag 360
ccagaagaga gtgctgctgc acgcttgtat cgtgcgaaga cccaggtcac ttacaagtcc 420
gccgtctcgg acctggccgt ccggccgcac cccatctcga ccattaatct gcagataagc 480
gcggtgcaga gtggaggtaa aatatcggtc tgtagtgtct attttacaac gtcggctgat 540
attgaaagtg atgtgttcaa ccagaagttt ctggtcagtc agctccgggg caatgtcagc 600
gtgagtacgt ttgatgcaaa attgctggag tcgagttacg cgggtatccg acagagcgtt 660
atcgaaaagt tggggcctga aaatatccgc gagaacatca tccaggtgtc agctgaggtg 720
ttctccctcg cgggcccgcg ccatgccggt gccaagcagt tcattcagga actggaaatc 780
tag 783
<210> 226
<211> 270
<212> ДНК
<213> Pseudomonas chlororaphis
<400> 226
atgtcggctc aagaaaactt tgttggcgga tggactcctt atcacgaact gactccaaag 60
gatcgggaag tattcaaaga ggccctggcc gggttcgtgg gtgtgaacta cacccctgaa 120
aaagtttcga cccaggtcgt caacggcacg aactatcgtt atctgtcgaa agcaacggtg 180
cctggctcct cggacagctg gcaagcggta gtggaaatct acgcgcctat caaaggcaag 240
ccgcacatca cccagatcca ccggatctaa 270
<210> 227
<211> 270
<212> ДНК
<213> Pseudomonas rhodesiae
<400> 227
atgtcggctc aagagaatct cgttggcgga tggactcctt atcacgaact gactccaaag 60
gatcaggaag tattcgatga agccctggcc gggctcgtgg gtgtgcacta caccgccgag 120
ttggtttcga cccaggtcgt taacggcacc aactatcgtt atcagacgaa agcaacgcag 180
ccgggttcat caaacagctg gcaagcgatc gtggaaattt acgcgccgat taatggcaag 240
ccacatatca cccagatcat ccggatctaa 270
<210> 228
<211> 270
<212> ДНК
<213> Pseudomonas rhodesiae
<400> 228
atgtcggctc aagaaaatct cgttggcgga tggactcctt atcacgtact gactccaaag 60
gatcaggaag tattcgatga agccctggcc gggctcgtgg gtgtgcacta caccgccgag 120
ctggtttcga cccaggtcgt taacggcacc aactatcgtt atcaggcgaa agccacgcag 180
cctggttcgc caaacagctg gcaagcggtc gtggaaattt acgcgccgat taacggcaag 240
ccgtatgtca cccagatcat ccggatctaa 270
<210> 229
<211> 273
<212> ДНК
<213> Aeromonas hydrophila
<400> 229
atgtcagaac aagcagtgtt gttgggtgga tggactgcct accacaagct gagcgccaag 60
gatcaggccg tattcaacca ggcgctggaa ggatttgtcg gggtgcagta cacacccttt 120
gaagtctcca cccaggtcgt cgccggcacc aactaccgtt tcaaatgcaa aagcactgtg 180
ccgctgccca acccgatcca cggggaagcc gtggtgcaga tcttccaatc cctggatggg 240
tcggcccata tcacctccat caccccgatt tga 273
<210> 230
<211> 273
<212> ДНК
<213> Aeromonas veronii
<400> 230
atgtcagaac aagcagtgtt ggtgggtgga tggaccgcat atcacaagct gaccgccgag 60
gatcaggcag tgttcaacca ggcgatgaaa ggatttgtcg gggtgcagta cgtacccttt 120
gaagtctcca ctcaagtggt ggctggcacc aactaccgct tcaagtgcaa gagcactgtg 180
ccgcttgcca aaccgatcca tggcgaagcc gtggtacaga tcttcaaatc actggacggg 240
gatgcccata tcacctccat taccccaatc tga 273
<210> 231
<211> 273
<212> ДНК
<213> Haemophilus piscium
<400> 231
atgtcagaac aagcagtgtt gttgggtgga tggaccgcat accacaagct gagcgcaaaa 60
gatcaggcgg tatttgacct ggcactgaaa ggatttgtcg gggtgcagta ccagccgttt 120
gaagtctcca cccaggtggt ggctggcacc aactaccgtt tcaaatgcaa aaccacggtg 180
ccgctgccca acccgatcca cggggaagcc gtggtgcaga tcttccagtc tctggatggc 240
tctgctcata tcacctccat caccccgatc tga 273
<210> 232
<211> 578
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas sp. VLB120
<400> 232
Met Ser Thr Ser Phe Thr Gln Phe Thr Ser Pro Ala Gly Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asp Gln Leu Pro Gln Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asn Leu Thr Gly Trp Thr Gln Ser Ser Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Asn Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Val Glu Gly Phe Gly Asp Val Thr Val Pro Ala Ile Thr
65 70 75 80
Trp Ala Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Ala Ala Ile Val Pro Gln Leu Gly Gly Asn Ala Met Thr Leu Glu Gln
100 105 110
Val Met Glu Leu Ala Asp His Gly Gln Ile Thr Leu Asn Asn Thr Leu
115 120 125
Tyr Lys Leu Tyr Asp Pro Asp Asn Gln Gly Thr Leu Leu Gln Leu Pro
130 135 140
Ala Lys Arg Cys Pro Ser Ile Asp Trp Lys Gly Gln Tyr Thr Ala Phe
145 150 155 160
Ser Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser
165 170 175
Ile Val Arg Asp Thr Asp Gly Asn Met Arg Lys Ile Thr Phe Thr Cys
180 185 190
Glu Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Ala Met Trp Arg Ile Asp Pro Asn Ala
195 200 205
Val Leu Gly Leu Tyr Arg Asp Tyr Ile Asp Pro Asn Val Gln Leu Glu
210 215 220
Asp Leu Tyr Leu Arg Tyr Ala Val Asp Cys Pro Thr Gly Lys Ala Gly
225 230 235 240
Asp Pro Val Ile Asp Pro Thr Thr Gly Gln Pro Ala Tyr Asp Thr Val
245 250 255
Asn Lys Trp Asn Ala Gly Thr Ala Cys Val Pro Gly Gln Tyr Gly Gly
260 265 270
Ala Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Val Tyr
275 280 285
Leu Ala Ala Ala Ala Thr Leu Leu Arg Pro Val Ser Ser Ser Gln Asn
290 295 300
Ala Gln Ser Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn
305 310 315 320
Ser Asp Pro His Ile Gly Phe Met Ala Asn Thr Lys Ala Val Asn Asn
325 330 335
Arg Leu Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Thr
340 345 350
Asp Phe Ser Ala Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Gln Tyr
355 360 365
Trp Arg Ile Thr Arg Gly Thr Ala Lys Ser Ala Ala Asn Gly Ser Asp
370 375 380
Gln Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Gln Ser Ala Gly Phe Ser
385 390 395 400
Ile Asn Asp Ile Thr Ile Asn Gly Gln Arg Val Asp Tyr Val Trp Val
405 410 415
Ile Ala Gln Gln Leu Leu Val Gly Leu Ser Val Thr Ala Lys Pro Ile
420 425 430
Thr Val Thr Pro Pro Ser Phe Pro Cys Val Gln Ala Arg Val Glu Gly
435 440 445
Leu Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Val Asp Leu Phe Tyr Gly
450 455 460
Gln Ser Pro Thr Asp Leu Pro Ala Trp Leu Ala Pro Gly Ser Ser Asn
465 470 475 480
Ser Phe Val Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Pro Ser Thr Thr Thr Gln
485 490 495
Asn Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Ile Thr Ala Gln Val Thr
500 505 510
His Tyr Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asn Ser Gly
515 520 525
Gly Thr Gln Ala Tyr Ile Leu Thr Ile Thr Val Ser Pro Thr Ala Ala
530 535 540
Pro Gly Leu Val Met Val Arg Ala Leu Asn Pro Gly Glu Asp Ala Asn
545 550 555 560
Val Ser Ala Ala Asp His Pro Trp Glu Ala Gly Leu Ala Leu Val Pro
565 570 575
Gly Ala
<210> 233
<211> 534
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas sp. VLB120
<400> 233
Met Ser Arg Ser Arg Leu Ser Leu Ile Ser Leu Leu Ser Gly Met Leu
1 5 10 15
Leu Tyr Leu Ser Ala Leu Pro Pro Ala Ala Ala Ala Thr Met Ser Asp
20 25 30
Ala Asp Ser Cys Val Gln Gln Gln Leu Val Phe Asn Pro Ala Ser Gly
35 40 45
Gly Phe Leu Pro Val Asn Asn Phe Asn Ala Thr Asn Gln Ala Phe Met
50 55 60
Asn Cys Phe Ala Trp Gln Leu Phe Ile Ala Leu Asn Trp Pro Val Asn
65 70 75 80
Pro Gly Trp Pro Ala Thr Ala Ser Leu Ala Gly Glu Pro Asp Met Asn
85 90 95
Ser Thr Leu Ala Gln Phe Gly Val Pro Ser Ser Pro Gly Gln Pro Met
100 105 110
Ser Val Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Asn Asp Ile Phe
115 120 125
Leu Pro Gly Ala Pro Thr Pro Thr Gly Trp Gly Val Gln Thr Met Val
130 135 140
Pro Ser Gly Cys Ser Thr Gln Gly Ser Leu Lys Ala Leu Lys Val Gly
145 150 155 160
Ala Arg Lys Phe Met Asn Ala Thr Ser Glu Gly Ala Ile Asn Ala Leu
165 170 175
His Gly Phe His Leu Ser Thr Gly Thr Val Ala Ser Ile Pro Asp Pro
180 185 190
Val Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ser Gly Asn Leu
195 200 205
Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr Ile Val
210 215 220
Glu Lys Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Lys Val Ala Gln Asn
225 230 235 240
Leu Asp Gly Asn Thr Pro Glu Gly Leu Ser Leu Pro Leu Gly Glu Pro
245 250 255
Met Arg Ser Leu Pro Pro Thr Pro Val Pro Gln Glu Gln Leu Gly Ala
260 265 270
Leu Glu Leu Lys Ala Ala Trp Arg Val Leu Thr Gly Lys Pro Glu Leu
275 280 285
Phe Gly Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Lys Arg Pro Asp Thr
290 295 300
Leu Glu Cys Thr Gln Glu Val Val Gly Leu Val Gly Leu His Ile Ile
305 310 315 320
Asn Lys Thr Gln Ala Ser Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe Glu Gln
325 330 335
Val Asp Asn Val Pro Glu Pro Asp Gln Ala Pro Pro Gln Gly Thr Pro
340 345 350
Pro Asn Gly Phe Ser Phe Asn Asn Pro Asp Cys Gly Ser Gly Pro Ala
355 360 365
Cys Glu Pro Asn Val Ala Arg Ile Gln Cys Lys Gln Tyr His Pro Asp
370 375 380
Lys Asp Cys Thr Asp Leu Phe Pro Arg Asp Gln Pro Val Gln Thr Thr
385 390 395 400
Arg Glu His Pro Val Pro Ser Asp Leu Gln Ala Leu Asn Ser Ala Val
405 410 415
Gln Ser Asn Phe Ala Gln Gln Thr His Gly Gln Ser Val Phe Gln Tyr
420 425 430
Tyr Lys Leu Ile Asn Val Leu Trp Thr Leu Ala Pro Asn Pro Pro Ser
435 440 445
Pro Glu Pro Gly Ala Asn Ala Gln Val Pro Leu Ser Tyr Gly Pro Phe
450 455 460
Ile Ser Gln Gly Asn Val Pro Val Ala Asn Thr Thr Met Glu Thr Tyr
465 470 475 480
Val Gln Gly Asp Asp Cys Asn Lys Cys His Gln Tyr Ala Thr Ile Ala
485 490 495
Gly Ser Pro Ser Leu Ala Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Asn Ser Ala
500 505 510
Ser Ser Ala Gly His Lys Ser Leu Ile Lys Arg Val Lys Ala Phe Glu
515 520 525
Thr Leu Lys Asp Arg Pro
530
<210> 234
<211> 577
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas putida
<400> 234
Met Ser Thr Pro Phe Lys Gln Phe Thr Ser Pro Ala Gly Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asp Gln Leu Gln Gln Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asp Leu Thr Gly Trp Thr Glu Ser Ser Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Gly Gln Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Val Glu Gly Phe Gly Glu Val Thr Pro Pro Ala Ile Thr
65 70 75 80
Trp Ala Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Ala Ala Val Val Pro Gln Leu Gly Arg Ala Met Thr Leu Asn Gln Val
100 105 110
Met Glu Leu Ala Asp Arg Gly Gln Ile Thr Leu Asp Asn Thr Leu Tyr
115 120 125
Thr Leu Tyr Asp Pro Asp Lys Gln Gly Thr Leu Leu Gln Leu Pro Ala
130 135 140
Lys Arg Cys Pro Ser Ile Asp Trp Asn Gly Arg Tyr Thr Ala Phe Ser
145 150 155 160
Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser Ile
165 170 175
Val Arg Asp Ala Asn Gly Asn Met Arg Lys Ile Thr Phe Thr Cys Glu
180 185 190
Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Ala Met Trp Arg Ile Asp Pro Gln Ala Val
195 200 205
Leu Gly Leu Tyr Arg Asp Tyr Ile Asp Pro Ser Val Gln Leu Glu Asp
210 215 220
Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Val Asp Cys Pro Thr Gly Lys Ala Gly Asp
225 230 235 240
Pro Val Ile Asp Pro Thr Thr Gly Gln Pro Ala Tyr Asp Thr Val Asn
245 250 255
Lys Trp Asn Ala Gly Thr Ala Cys Val Pro Gly Gln Tyr Gly Gly Ala
260 265 270
Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Val Tyr Leu
275 280 285
Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Arg Pro Val Ser Ser Ser Gln Asn Ala
290 295 300
Gln Ser Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn Ser
305 310 315 320
Asp Pro His Ile Gly Phe Met Ala Asn Ser Thr Ala Val Lys Asn Arg
325 330 335
Leu Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Thr Asp
340 345 350
Phe Ser Gly Trp Lys Gly Pro Gln Gly Gln Asp Val Ser Gln Tyr Trp
355 360 365
Arg Ile Thr Arg Gly Thr Ala Lys Ser Ala Ala Asn Gly Ser Asp Gln
370 375 380
Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Glu Ser Ala Gly Phe Ser Ile
385 390 395 400
Asn Asp Ile Thr Ile Asn Asn Gln Pro Val Asn Tyr Val Trp Val Ile
405 410 415
Ala Gln Gln Leu Leu Val Gly Leu Ser Val Thr Val Lys Pro Leu Ala
420 425 430
Thr Thr Pro Pro Ser Phe Pro Cys Val Gln Asp Arg Gln Thr Gly Arg
435 440 445
Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Leu Asp Leu Phe Tyr Gly Gln
450 455 460
Ser Pro Thr Asp Leu Pro Ala Trp Leu Ala Pro Gly Ser Ser Asn Ser
465 470 475 480
Phe Val Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Ala Asn Thr Thr Ala Gln Asn
485 490 495
Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Val Thr Ala Gln Val Thr Gln
500 505 510
Tyr Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asn Ser Gly Gly
515 520 525
Thr Gln Ala Tyr Met Leu Thr Ile Thr Val Ser Pro Asn Ala Ala Pro
530 535 540
Gly Leu Val Thr Val Arg Ala Leu Asn Pro Gly Glu Asp Val Asn Val
545 550 555 560
Ser Ala Ala Asp His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val Pro Gly
565 570 575
Ala
<210> 235
<211> 528
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas putida
<400> 235
Met Ser Ser Leu Arg Leu Ser Leu Leu Ser Leu Leu Ser Gly Ile Leu
1 5 10 15
Leu Cys Leu Gln Thr Leu Gln Pro Ala Ala Ala Ala Thr Leu Ser Asp
20 25 30
Ala Asp Ala Cys Val Gln Gln Gln Leu Val Phe Asn Pro Ala Ser Gly
35 40 45
Gly Phe Leu Pro Val Asn Asn Phe Asn Ala Thr Ser Gln Ala Phe Met
50 55 60
Asn Cys Phe Gly Trp Gln Leu Phe Ile Ala Leu Asn Trp Pro Val Asn
65 70 75 80
Pro Gly Trp Pro Ala Thr Pro Ser Leu Ala Gly Glu Pro Asp Arg Gln
85 90 95
Ser Thr Leu Ala Gln Phe Gly Val Pro Thr Thr Ala Gly Glu Pro Met
100 105 110
Ser Val Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Asn Asp Ile Phe
115 120 125
Leu Pro Gly Ala Pro Ala Pro Thr Gly Trp Gly Val Gln Thr Leu Val
130 135 140
Pro Ser Ser Cys Asn Ser Gln Gly Ser Leu Lys Ala Leu Lys Val Gly
145 150 155 160
Ala Arg Lys Phe Met Asn Ala Thr Ser Glu Gly Ala Ile Asn Ala Leu
165 170 175
His Gly Phe His Leu Ser Thr Gly Thr Leu Ala Ser Ile Pro Asp Pro
180 185 190
Val Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ser Gly Asn Leu
195 200 205
Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp Tyr Ile Val
210 215 220
Glu His Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Lys Leu Ala Gln Thr
225 230 235 240
Glu Gly Leu Ser Leu Pro Ile Gly Glu Ala Met Arg Glu Leu Pro Pro
245 250 255
Ser Pro Val Pro Gln Glu Gln Leu Gly Ala Ile Glu Leu Lys Ala Ala
260 265 270
Trp Arg Val Leu Thr Gly Lys Pro Glu Leu Phe Gly Arg Tyr Leu Thr
275 280 285
Thr Val Ala Trp Leu Lys Arg Pro Asp Thr Leu Ala Cys Thr Gln Glu
290 295 300
Val Val Gly Leu Val Gly Leu His Ile Ile Asn Lys Thr Gln Ala Ser
305 310 315 320
Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr Phe Glu Gln Val Asp Asn Val Pro Glu
325 330 335
Pro Ala Gln Val Pro Pro Gln Gln Thr Pro Pro Gly Gly Phe Ala Phe
340 345 350
Asn Asn Pro Glu Cys Gly Thr Gly Pro Glu Cys Lys Pro Asn Val Ala
355 360 365
Arg Ile Gln Cys Lys Gln His His Pro Asp Arg Asp Cys Ser Asp Leu
370 375 380
Phe Pro Arg Asp Gln Pro Val Gln Thr Thr Arg Glu Tyr Pro Val Pro
385 390 395 400
Ser Ala Leu Gln Ala Leu Asn Ser Ala Val Gln Ala Asn Phe Ala Gln
405 410 415
Gln Ser Gln Gly Gln Ser Val Phe Gln Tyr Tyr Lys Leu Ile Asn Val
420 425 430
Leu Trp Thr Leu Ala Pro Asn Pro Pro Ser Pro Glu Pro Gly Ala Asn
435 440 445
Ala Gln Val Pro Leu Ser Tyr Gly Pro Phe Ile Ser Glu Gly Pro Val
450 455 460
Pro Val Ala Asn Thr Thr Met Glu Thr Tyr Val Gln Gly Asp Asp Cys
465 470 475 480
Asn Gln Cys His Gln Tyr Ala Thr Ile Ala Gly Ser Pro Ser Leu Ala
485 490 495
Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Asn Thr Ala Ser Ser Ala Ser Gln Lys
500 505 510
Ser Leu Ile Lys Arg Val Lys Ala Phe Glu Thr Leu Lys Asp Arg Pro
515 520 525
<210> 236
<211> 577
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas poae
<400> 236
Met Ser Thr Pro Phe Thr Gln Phe Thr Ser Pro Ala Glu Gln Ala Pro
1 5 10 15
Lys Asp Tyr Asn Lys Leu Gly Leu Glu Asp Gln Leu Pro Thr Phe Glu
20 25 30
Thr Asp Trp Asn Asn Asn Val Thr Gly Trp Thr Gln Met Ser Ile Ile
35 40 45
Gly Asn Pro Trp Ser Asn Leu Asn Asp Ala Pro Arg Ser Gly Tyr Tyr
50 55 60
Asn Pro Leu Glu Ser Gly Tyr Gly Thr Leu Thr Pro Lys Thr Ile Thr
65 70 75 80
Trp Gln Pro Phe Pro Asn Arg Leu Trp Thr Phe Phe Tyr Asn Asn Gly
85 90 95
Ala Ala Val Val Pro Gln Leu Gly Gly Lys Ala Met Thr Leu Asp Gln
100 105 110
Val Met Gln Leu Thr Asp His Gly Gln Ile Thr Leu Asn Asn Thr Leu
115 120 125
Tyr Ser Leu Tyr Pro Asp Pro Gln Ala Thr Gln Leu Gln Ile Pro Ser
130 135 140
Val Leu Cys Lys Ser Ile Asn Trp Asn Gly Pro Tyr Ala Asp Phe Ser
145 150 155 160
Pro Ser Gly Pro Arg Gly Trp Leu Asp Glu Tyr Cys Glu Trp Ser Ile
165 170 175
Thr Arg Asp Pro Asp Gly Asn Met Arg Ser Ile Met Phe Thr Ser Glu
180 185 190
Asn Pro Ala Tyr Phe Leu Thr Met Trp Asn Ile Asp Pro Gly Ala Val
195 200 205
Leu Gly Leu Tyr Gln Ala Tyr Val Asp Pro Gln Val Lys Leu Glu Asp
210 215 220
Leu Tyr Leu Arg Tyr Thr Ala Asp Gly Pro Thr Gly Lys Ala Gly Glu
225 230 235 240
Pro Val Leu Asp Pro Thr Thr Gly Gln Pro Ala Tyr Asp Thr Val Asn
245 250 255
Lys Trp Asn Ser Gly Thr Val Arg Ile Pro Gly Val Ser Gly Gly Ala
260 265 270
Met His Leu Thr Ser Gly Pro Asn Thr Leu Ser Ala Glu Ile Tyr Leu
275 280 285
Ala Ala Ala Ala Thr Ile Leu Arg Pro Leu Ser Ser Ser Gln Asn Gln
290 295 300
Gln Ser Leu Ile Cys Cys Ala Gln Tyr Gly Gln Asn Tyr Arg Asn Ser
305 310 315 320
Asp Pro His Ile Gly Phe Ser Ala Asn Gln Ala Ala Val Asn Asn Leu
325 330 335
Ile Ser Leu Thr Asn Pro Ile Gly Leu Tyr Leu Gln Gln Pro Lys Ser
340 345 350
Phe Ser Thr Trp Lys Gly Pro Gln Gly Glu Asp Val Ser Ser Tyr Trp
355 360 365
Arg Val Thr Arg Gly Thr Ala Gly Thr Gly Pro Asn Asn Ser Asp Gln
370 375 380
Ile Leu Gln Ala Val Phe Glu Val Pro Ala Ser Ala Gly Phe Ser Ile
385 390 395 400
Asn Asp Ile Thr Ile Ser Gly Thr Pro Ile Asp Tyr Val Trp Val Ile
405 410 415
Ala Asn Glu Leu Asn Val Ala Leu Ser Val Thr Pro Ala Pro Leu Thr
420 425 430
Ala Gln Pro Lys Glu Cys Ala Cys Val Ala Ala Asn Thr Thr Asp Ala
435 440 445
Gln Pro Trp Pro Val Gln Leu Leu Pro Ile Asp Leu Phe Tyr Gly Gln
450 455 460
Ser Pro Ser Asp Leu Pro Ala Ser Phe Ala Pro Gly Ser Ser Ser Gln
465 470 475 480
Phe Val Leu Val Val Gln Gly Ala Asp Pro Asn Thr Thr Ala Ala Asp
485 490 495
Ala Arg Val Gln Phe Ser Asn Pro Gly Ile Thr Ala Gln Val Thr Gln
500 505 510
Phe Leu Pro Asp Ala Ser Ala Ile Pro Gly Gln Thr Asp Gly Gly Gly
515 520 525
Thr Gln Gly Tyr Ile Met Thr Ile Thr Val Ser Ser Asn Ala Ala Pro
530 535 540
Gly Leu Val Ser Val Arg Ala Leu Asn Pro Asn Glu Ala Ala Asn Pro
545 550 555 560
Ser Ala Thr Glu His Pro Trp Glu Ser Gly Leu Ala Leu Val Pro Ser
565 570 575
Ala
<210> 237
<211> 529
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas poae
<400> 237
Met Asn Gly Trp Leu Arg Pro Leu Arg Arg Ala Arg Leu Arg Ile Val
1 5 10 15
Cys Thr Ile Thr Cys Ala Leu Leu Pro Trp Leu Ala Pro Ala Pro Ala
20 25 30
Ser Ala Ala Ser Asp Ala Gln Ser Cys Val Ser Gln Leu Val Phe Asp
35 40 45
Pro Thr Ser Gly Gly Phe Leu Pro Val Asn Asn Phe Gly Thr Glu Gln
50 55 60
Ala Phe Leu Asn Cys Phe Gly Trp Gln Leu Phe Ile Ala Met Asn Trp
65 70 75 80
Pro Val Asn Pro Gly Trp Pro Ala Asn Pro Ser Leu Ala Gly Glu Pro
85 90 95
Asp Thr Gln Ser Ser Ala Ala Gln Phe Gly Val Pro Pro Thr Pro Gly
100 105 110
Gln Pro Met Ser Asn Ala Pro Val Trp Ala Ser Tyr Lys Asp Ala Ser
115 120 125
Glu Ile Phe Leu Pro Gly Ala Ala Lys Pro Ser Gly Trp Gly Val Glu
130 135 140
Thr Leu Val Pro Ser Asn Cys Thr Ala Thr Gly Asn Leu Lys Ala Phe
145 150 155 160
Ala Thr Gly Ala Arg Lys Phe Ile Thr Ala Thr Ser Glu Ser Ala Ile
165 170 175
Asn Arg Lys His Arg Phe His Leu Ser Ser Gly Thr Gln Val Thr Leu
180 185 190
Pro Asp Ser Ile Met Glu Ala Ser Gly Gly Trp Leu Thr Asp Gln Ser
195 200 205
Gly Asn Leu Val Phe Phe Glu Arg Lys Val Gly Lys Ala Glu Phe Asp
210 215 220
Tyr Ile Val Asp Asn Gly Leu Tyr Asp Ala Ala Asn Gln Leu Ile Val
225 230 235 240
Ala Gln Asn Ser Asp Asn Arg His Pro Ala Gly Leu Ser Leu Pro Ala
245 250 255
Gly Lys Leu Val Arg Glu Leu Pro Ala Lys Ala Leu Pro Gln Glu Glu
260 265 270
Leu Gly Ala Leu Glu Leu Lys Ala Ala Trp Arg Val Leu Thr Asn Lys
275 280 285
Pro Ala Leu Tyr Gly Arg Tyr Leu Thr Thr Val Ala Trp Leu Gln Arg
290 295 300
Pro Asp Thr Leu Gln Cys Thr Gln Glu Val Ile Gly Leu Val Gly Leu
305 310 315 320
His Ile Ile Asn Lys Thr Gln Thr Gln Pro Asn Phe Ile Trp Thr Thr
325 330 335
Phe Glu Gln Val Asp Asn Val Pro Asp Gly Gly Ala Ala Pro Pro Glu
340 345 350
Gly Tyr Ser Phe Asn Asn Pro Ala Cys Thr Gly Asp Ala Cys Thr Pro
355 360 365
Asn Val Pro Arg Val Gln Cys Asp Ala Thr His Thr Pro Pro Asn Cys
370 375 380
Thr Pro Leu Asp Gln Pro Val Gln Ala Thr Arg Ala Asn Ala Thr Pro
385 390 395 400
Gln Asp Met Gln Ala Leu Asn Thr Ala Val Gln Gln Thr Phe Ala Gln
405 410 415
Gln Thr Gln Gly Gln Ser Val Phe Gln Tyr Tyr Lys Leu Val Asn Val
420 425 430
Leu Trp Ser Lys Thr Pro Asn Ala Pro Asn Asp Pro Gly Pro Gly Pro
435 440 445
Asn Val Gln Val Pro Leu Ser Tyr Gly Pro Phe Val Ser Asp Gln Ser
450 455 460
Val Val Val Ala Asn Thr Thr Met Glu Thr Tyr Val Gln Thr Asp Asn
465 470 475 480
Cys Asn Asp Cys His Gln Tyr Ala Ala Ile Ala Gly Lys Ser Gly Leu
485 490 495
Ala Ser Asp Phe Ser Phe Leu Phe Ser Asn Ala Asp Ser Ala Lys Asn
500 505 510
Thr Arg Leu Ile Lys Arg Ile Glu Ser Phe Lys Thr Leu Lys Asp Asn
515 520 525
Pro
<210> 238
<211> 256
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas entomophila
<400> 238
Met Gly Ser Ile Thr Asp His Asp Gln Leu Ile Ala Trp Val Gln Ser
1 5 10 15
Leu Asp Ile Pro Glu Pro Thr Lys Ser Ile Ala Arg Ser Arg Asn Ala
20 25 30
Val Val Arg Ala Ser Ser Glu Glu Glu Gly Ala Ala Val Val Arg Gly
35 40 45
Ser Val Thr Ser Phe Val Thr Gly Leu Lys Gln Gln Ala Arg Asp Asp
50 55 60
Val Gln Asn Ser Thr Leu Leu Met Gln Leu Ala Ala Asp Lys Lys Tyr
65 70 75 80
Asn Pro Asp Thr Gln Arg Glu Glu Trp Phe Lys Phe Tyr Thr Asp Gly
85 90 95
Leu Ala Asn Leu Gly Trp Gly Arg Val Ser Ser Ile Tyr Gln Lys Tyr
100 105 110
Asn Pro Arg Asn Thr Asn Val Thr Met Asp Glu Val Val Leu Glu Val
115 120 125
Ile Ala Ala Val Val Gly Ala Asp Ser Ala Val Tyr Lys Val Thr Glu
130 135 140
Lys Thr Phe Ala Ala Leu Glu Ser Asn Pro Lys Asn Gln Gly Ala Leu
145 150 155 160
Lys Leu Phe Asp Ser Thr Thr Thr Arg Asp Asp Ile Gly Thr Phe Gln
165 170 175
Ile Leu Pro Val Met Gln Asp Arg Asp Gly Asn Val Val Met Val Leu
180 185 190
Thr Thr Val Asn Ala Ser Thr Thr Val Gln Lys Gly Ser Phe Leu Phe
195 200 205
Trp Ser Trp Ser Lys Thr Thr Ala Trp Met Tyr Arg Ala Ala Gln Gln
210 215 220
Thr Val Leu Asn Glu Ser Val Tyr Ser Arg Val Arg Glu Ser Val Ile
225 230 235 240
Gln Lys Leu Gly Lys Asn Ala Glu Asp Phe Ile Asp Gly Leu Asp Ile
245 250 255
<210> 239
<211> 260
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas entomophila
<400> 239
Met Ala Leu Ser Ala Asp Glu Val Tyr Val Val Ser Gly Asn Leu Leu
1 5 10 15
Ser Ala Met Pro Lys Leu Val Asp Pro Val Met Phe Glu Asp Phe Ala
20 25 30
Asn Ser Asn Leu Leu Cys Gln Leu Ala Ala Asp Lys Asn Gln Gly Thr
35 40 45
Arg Phe Val Asp Pro Pro Ala Trp Leu Asp Phe Tyr Arg Asn Ala Leu
50 55 60
Gly Lys Val Phe Trp Arg Ile Ser Asn Ser Gly Thr Val Ser Phe Asn
65 70 75 80
Ile Pro Pro Leu Val Arg Ser Ile Thr Ile Lys Glu Val Leu Glu Lys
85 90 95
Thr Phe Tyr Lys Thr Leu Asp His Glu Val Ser Leu Gln Leu Asp Ser
100 105 110
Ser Ile Glu Arg Leu Glu Glu Gln Pro Glu Glu Ser Ala Ala Ala Arg
115 120 125
Leu Tyr Arg Ala Lys Thr Gln Val Thr Tyr Lys Ser Ala Val Ser Asp
130 135 140
Leu Ala Val Arg Pro His Pro Ile Ser Thr Ile Asn Leu Gln Ile Ser
145 150 155 160
Ala Val Gln Ser Gly Gly Lys Ile Ser Val Cys Ser Val Tyr Phe Thr
165 170 175
Thr Ser Ala Asp Ile Glu Ser Asp Val Phe Asn Gln Lys Phe Leu Val
180 185 190
Ser Gln Leu Arg Gly Asn Val Ser Val Ser Thr Phe Asp Ala Lys Leu
195 200 205
Leu Glu Ser Ser Tyr Ala Gly Ile Arg Gln Ser Val Ile Glu Lys Leu
210 215 220
Gly Pro Glu Asn Ile Arg Glu Asn Ile Ile Gln Val Ser Ala Glu Val
225 230 235 240
Phe Ser Leu Ala Gly Pro Arg His Ala Gly Ala Lys Gln Phe Ile Gln
245 250 255
Glu Leu Glu Ile
260
<210> 240
<211> 89
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas chlororaphis
<400> 240
Met Ser Ala Gln Glu Asn Phe Val Gly Gly Trp Thr Pro Tyr His Glu
1 5 10 15
Leu Thr Pro Lys Asp Arg Glu Val Phe Lys Glu Ala Leu Ala Gly Phe
20 25 30
Val Gly Val Asn Tyr Thr Pro Glu Lys Val Ser Thr Gln Val Val Asn
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Tyr Leu Ser Lys Ala Thr Val Pro Gly Ser Ser
50 55 60
Asp Ser Trp Gln Ala Val Val Glu Ile Tyr Ala Pro Ile Lys Gly Lys
65 70 75 80
Pro His Ile Thr Gln Ile His Arg Ile
85
<210> 241
<211> 89
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas rhodesiae
<400> 241
Met Ser Ala Gln Glu Asn Leu Val Gly Gly Trp Thr Pro Tyr His Glu
1 5 10 15
Leu Thr Pro Lys Asp Gln Glu Val Phe Asp Glu Ala Leu Ala Gly Leu
20 25 30
Val Gly Val His Tyr Thr Ala Glu Leu Val Ser Thr Gln Val Val Asn
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Tyr Gln Thr Lys Ala Thr Gln Pro Gly Ser Ser
50 55 60
Asn Ser Trp Gln Ala Ile Val Glu Ile Tyr Ala Pro Ile Asn Gly Lys
65 70 75 80
Pro His Ile Thr Gln Ile Ile Arg Ile
85
<210> 242
<211> 89
<212> БЕЛОК
<213> Pseudomonas rhodesiae
<400> 242
Met Ser Ala Gln Glu Asn Leu Val Gly Gly Trp Thr Pro Tyr His Val
1 5 10 15
Leu Thr Pro Lys Asp Gln Glu Val Phe Asp Glu Ala Leu Ala Gly Leu
20 25 30
Val Gly Val His Tyr Thr Ala Glu Leu Val Ser Thr Gln Val Val Asn
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Tyr Gln Ala Lys Ala Thr Gln Pro Gly Ser Pro
50 55 60
Asn Ser Trp Gln Ala Val Val Glu Ile Tyr Ala Pro Ile Asn Gly Lys
65 70 75 80
Pro Tyr Val Thr Gln Ile Ile Arg Ile
85
<210> 243
<211> 90
<212> БЕЛОК
<213> Aeromonas hydrophila
<400> 243
Met Ser Glu Gln Ala Val Leu Leu Gly Gly Trp Thr Ala Tyr His Lys
1 5 10 15
Leu Ser Ala Lys Asp Gln Ala Val Phe Asn Gln Ala Leu Glu Gly Phe
20 25 30
Val Gly Val Gln Tyr Thr Pro Phe Glu Val Ser Thr Gln Val Val Ala
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Phe Lys Cys Lys Ser Thr Val Pro Leu Pro Asn
50 55 60
Pro Ile His Gly Glu Ala Val Val Gln Ile Phe Gln Ser Leu Asp Gly
65 70 75 80
Ser Ala His Ile Thr Ser Ile Thr Pro Ile
85 90
<210> 244
<211> 90
<212> БЕЛОК
<213> Aeromonas veronii
<400> 244
Met Ser Glu Gln Ala Val Leu Val Gly Gly Trp Thr Ala Tyr His Lys
1 5 10 15
Leu Thr Ala Glu Asp Gln Ala Val Phe Asn Gln Ala Met Lys Gly Phe
20 25 30
Val Gly Val Gln Tyr Val Pro Phe Glu Val Ser Thr Gln Val Val Ala
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Phe Lys Cys Lys Ser Thr Val Pro Leu Ala Lys
50 55 60
Pro Ile His Gly Glu Ala Val Val Gln Ile Phe Lys Ser Leu Asp Gly
65 70 75 80
Asp Ala His Ile Thr Ser Ile Thr Pro Ile
85 90
<210> 245
<211> 90
<212> БЕЛОК
<213> Haemophilus piscium
<400> 245
Met Ser Glu Gln Ala Val Leu Leu Gly Gly Trp Thr Ala Tyr His Lys
1 5 10 15
Leu Ser Ala Lys Asp Gln Ala Val Phe Asp Leu Ala Leu Lys Gly Phe
20 25 30
Val Gly Val Gln Tyr Gln Pro Phe Glu Val Ser Thr Gln Val Val Ala
35 40 45
Gly Thr Asn Tyr Arg Phe Lys Cys Lys Thr Thr Val Pro Leu Pro Asn
50 55 60
Pro Ile His Gly Glu Ala Val Val Gln Ile Phe Gln Ser Leu Asp Gly
65 70 75 80
Ser Ala His Ile Thr Ser Ile Thr Pro Ile
85 90
<---

Claims (55)

1. Инсектицидный полипептид, выбранный из:
a) полипептида PIP-45-1, содержащего аминокислотную последовательность, которая более чем на 80% идентична последовательности при сравнении с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 1;
b) полипептида PIP-45-1, содержащего аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 234 и SEQ ID NO: 236;
c) полипептида PIP-45-2, содержащего аминокислотную последовательность, которая более чем на 80% идентична последовательности при сравнении с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 2;
d) полипептида PIP-45-2, содержащего аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 235 или SEQ ID NO: 237;
e) полипептида PIP-64-1, содержащего аминокислотную последовательность, которая более чем на 80% идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 53;
f) полипептида PIP-64-1, содержащего аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 58 или SEQ ID NO: 238;
g) полипептида PIP-74-1, содержащего аминокислотную последовательность, которая более чем на 75% идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 73;
h) полипептида PIP-74-1, содержащего аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 75 или SEQ ID NO: 77;
i) полипептида PIP-74-2, содержащего аминокислотную последовательность, которая более чем на 80% идентична последовательности при сравнении с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 74;
j) полипептида PIP-74-2, содержащего аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 76 или SEQ ID NO: 78;
k) полипептида PIP-75, содержащего аминокислотную последовательность, которая более чем на 80% идентична последовательности при сравнении с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 79;
l) полипептида PIP-75, содержащего аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86 или SEQ ID NO: 87;
m) полипептида PIP-77, содержащего аминокислотную последовательность, которая более чем на 80% идентична последовательности при сравнении с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 88; и
n) полипептида PIP-77, содержащего аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242 или SEQ ID NO: 245,
где полипептид обладает инсектицидной активностью против западного кукурузного жука (WCRW).
2. Инсектицидная композиция, содержащая инсектицидно эффективную концентрацию полипептида PIP-45-1 по п. 1, полипептида PIP-45-2 по п. 1 и приемлемый с точки зрения сельского хозяйства носитель, где инсектицидная активность направлена против западного кукурузного жука (WCRW).
3. Инсектицидная композиция, содержащая инсектицидно эффективную концентрацию полипептида PIP-64-1 по п. 1 и приемлемый с точки зрения сельского хозяйства носитель, где инсектицидная активность направлена против западного кукурузного жука (WCRW).
4. Инсектицидная композиция, содержащая инсектицидно эффективную концентрацию полипептида PIP-74-1 по п. 1, полипептида PIP-74-2 по п. 1 и приемлемый с точки зрения сельского хозяйства носитель, где инсектицидная активность направлена против западного кукурузного жука (WCRW).
5. Инсектицидная композиция, содержащая инсектицидно эффективную концентрацию полипептида PIP-75 по п. 1 и приемлемый с точки зрения сельского хозяйства носитель, где инсектицидная активность направлена против западного кукурузного жука (WCRW).
6. Инсектицидная композиция, содержащая инсектицидно эффективную концентрацию полипептида PIP-77 по п. 1 и приемлемый с точки зрения сельского хозяйства носитель, где инсектицидная активность направлена против западного кукурузного жука (WCRW).
7. Рекомбинантный полинуклеотид, кодирующий инсектицидный полипептид, выбранный из:
a) полипептида PIP-45-1, содержащего аминокислотную последовательность, которая более чем на 80% идентична последовательности при сравнении с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 1;
b) полипептида PIP-45-1, содержащего аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 234 и SEQ ID NO: 236;
c) полипептида PIP-45-2, содержащего аминокислотную последовательность, которая более чем на 80% идентична последовательности при сравнении с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 2;
d) полипептида PIP-45-2, содержащего аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 235 или SEQ ID NO: 237;
e) полипептида PIP-64-1, содержащего аминокислотную последовательность, которая более чем на 80% идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 53;
f) полипептида PIP-64-1, содержащего аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 58 или SEQ ID NO: 238;
g) полипептида PIP-74-1, содержащего аминокислотную последовательность, которая более чем на 75% идентична последовательности при сравнении с последовательностью под SEQ ID NO: 73;
h) полипептида PIP-74-1, содержащего аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 75 или SEQ ID NO: 77;
i) полипептида PIP-74-2, содержащего аминокислотную последовательность, которая более чем на 80% идентична последовательности при сравнении с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 74;
j) полипептида PIP-74-2, содержащего аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 76 или SEQ ID NO: 78;
k) полипептида PIP-75, содержащего аминокислотную последовательность, которая более чем на 80% идентична последовательности при сравнении с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 79;
l) полипептида PIP-75, содержащего аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86 или SEQ ID NO: 87;
m) полипептида PIP-77, содержащего аминокислотную последовательность, которая более чем на 80% идентична последовательности при сравнении с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 88; и
n) полипептида PIP-77, содержащего аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 242 или SEQ ID NO: 245,
где полипептид обладает инсектицидной активностью против западного кукурузного жука (WCRW).
8. Рекомбинантный полинуклеотид по п. 7, где рекомбинантный полинуклеотид выбран из:
a) полинуклеотида с SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 124, SEQ ID NO: 126, SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 136, SEQ ID NO: 138, SEQ ID NO: 140, SEQ ID NO: 142, SEQ ID NO: 146, SEQ ID NO: 150, SEQ ID NO: 152, SEQ ID NO: 220 или SEQ ID NO: 222;
b) полинуклеотида с SEQ ID NO: 109, SEQ ID NO: 125, SEQ ID NO: 127, SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 137, SEQ ID NO: 139, SEQ ID NO: 141, SEQ ID NO: 143, SEQ ID NO: 147, SEQ ID NO: 151, SEQ ID NO: 153, SEQ ID NO: 221 или SEQ ID NO: 223;
c) полинуклеотида с SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 165 или SEQ ID NO: 224;
d) полинуклеотида с SEQ ID NO: 180, SEQ ID NO: 182 и SEQ ID NO: 184;
e) полинуклеотида с SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 183 и SEQ ID NO: 185;
f) полинуклеотида с SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 187, SEQ ID NO: 188, SEQ ID NO: 191, SEQ ID NO: 192, SEQ ID NO: 193 и SEQ ID NO: 194 и
g) полинуклеотида с SEQ ID NO: 195, SEQ ID NO: 196, SEQ ID NO: 197, SEQ ID NO: 199, SEQ ID NO: 200, SEQ ID NO: 201, SEQ ID NO: 202, SEQ ID NO: 203, SEQ ID NO: 204, SEQ ID NO: 205, SEQ ID NO: 207, SEQ ID NO: 227, SEQ ID NO: 228 и SEQ ID NO: 231.
9. Инсектицидная ДНК-конструкция, содержащая рекомбинантный полинуклеотид по п. 7 или 8 и гетерологичную регуляторную последовательность, функционально связанную с рекомбинантным полинуклеотидом, где инсектицидная активность направлена против западного кукурузного жука (WCRW).
10. Устойчивое к вредителям трансгенное растение, содержащее ДНК-конструкцию по п. 9.
11. Способ ингибирования роста или уничтожения популяции насекомых, являющихся сельскохозяйственными вредителями, предусматривающий приведение популяции насекомых-вредителей в контакт с инсектицидно эффективным количеством полипептида PIP-45-1 по п. 1 и полипептида PIP-45-2 по п. 1.
12. Способ ингибирования роста или уничтожения насекомого, являющегося сельскохозяйственным вредителем, предусматривающий приведение насекомого-вредителя в контакт с инсектицидно эффективным количеством полипептида PIP-64-1 по п. 1.
13. Способ ингибирования роста или уничтожения насекомого-вредителя, предусматривающий приведение насекомого-вредителя в контакт с инсектицидно эффективным количеством полипептида PIP-74-1 по п. 1 и полипептида PIP-74-2 по п. 1.
14. Способ ингибирования роста или уничтожения насекомого-вредителя, предусматривающий приведение насекомого-вредителя в контакт с инсектицидно эффективным количеством полипептида PIP-75 по п. 1.
15. Способ ингибирования роста или уничтожения насекомого-вредителя, предусматривающий приведение насекомого-вредителя в контакт с инсектицидно эффективным количеством полипептида PIP-77 по п. 1.
16. Способ контроля заражения трансгенного растения насекомыми и обеспечения управления устойчивостью насекомых, предусматривающий экспрессию в растении полинуклеотида по п. 7 или 8.
17. Способ по любому из пп. 11-16, где насекомое-вредитель или популяция насекомых-вредителей устойчивы к Bt-токсину.
18. Применение по меньшей мере одного инсектицидного полипептида по п. 1 для ингибирования роста или уничтожения насекомого или популяции насекомых.
RU2017128859A 2015-01-15 2016-01-07 Инсектицидные белки и способы их применения RU2740312C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201562103787P 2015-01-15 2015-01-15
US62/103,787 2015-01-15
PCT/US2016/012473 WO2016114973A1 (en) 2015-01-15 2016-01-07 Insecticidal proteins and methods for their use

Publications (3)

Publication Number Publication Date
RU2017128859A RU2017128859A (ru) 2019-02-20
RU2017128859A3 RU2017128859A3 (ru) 2019-09-30
RU2740312C2 true RU2740312C2 (ru) 2021-01-13

Family

ID=56406237

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2017128859A RU2740312C2 (ru) 2015-01-15 2016-01-07 Инсектицидные белки и способы их применения

Country Status (12)

Country Link
US (6) US10231460B2 (ru)
EP (1) EP3244727A4 (ru)
CN (2) CN107635396B (ru)
AR (1) AR103411A1 (ru)
AU (2) AU2016207026B2 (ru)
BR (1) BR112017015341A2 (ru)
CA (1) CA2972912A1 (ru)
MX (2) MX369475B (ru)
PH (1) PH12017501282A1 (ru)
RU (1) RU2740312C2 (ru)
UA (1) UA126544C2 (ru)
WO (1) WO2016114973A1 (ru)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014071182A1 (en) 2012-11-01 2014-05-08 Massachusetts Institute Of Technology Directed evolution of synthetic gene cluster
WO2017011602A1 (en) 2015-07-13 2017-01-19 Pivot Bio, Inc. Methods and compositions for improving plant traits
WO2017062412A1 (en) 2015-10-05 2017-04-13 Massachusetts Institute Of Technology Nitrogen fixation using refactored nif clusters
EP4050021A1 (en) 2016-11-01 2022-08-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal proteins and methods for their use
CA3044404A1 (en) 2016-12-14 2018-06-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal proteins and methods for their use
UY37566A (es) 2017-01-12 2018-07-31 Pivot Bio Inc Métodos y composiciones para mejorar características en plantas
MX2020003414A (es) * 2017-10-02 2020-07-20 Syngenta Participations Ag Proteinas pesticidas modificadas y metodos para controlar las plagas de plantas.
KR20200088342A (ko) 2017-10-25 2020-07-22 피벗 바이오, 인크. 질소를 고정하는 유전자조작 미생물을 개선하는 방법 및 조성물
WO2019165245A1 (en) 2018-02-22 2019-08-29 Zymergen Inc. Method for creating a genomic library enriched for bacillus and identification of novel cry toxins
CA3088011A1 (en) 2018-03-02 2019-09-06 Zymergen Inc. Insecticidal protein discovery platform and insecticidal proteins discovered therefrom
CA3092078A1 (en) * 2018-03-14 2019-09-19 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal proteins from plants and methods for their use
JP2021523944A (ja) * 2018-05-15 2021-09-09 フラッグシップ パイオニアリング イノベーションズ シックス,エルエルシー 有害生物防除組成物及びその使用
MX2020013875A (es) 2018-06-27 2021-08-11 Pivot Bio Inc Composiciones agricolas que comprenden microbios remodelados de fijacion de nitrogeno.
MX2021002290A (es) 2018-08-29 2021-04-28 Pioneer Hi Bred Int Proteinas insecticidas y metodos para su uso.
CN112771068A (zh) * 2018-09-11 2021-05-07 先锋国际良种公司 杀昆虫蛋白及其使用方法
BR112021011370A2 (pt) 2018-12-14 2021-08-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Produtos biológicos e seu uso em plantas
EP3708669A1 (en) 2019-03-13 2020-09-16 Genective Pesticidal genes and methods of use
WO2021076346A1 (en) 2019-10-18 2021-04-22 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Maize event dp-202216-6 and dp-023211-2 stack
TW202142114A (zh) 2020-02-04 2021-11-16 美商陶氏農業科學公司 具有殺有害生物效用之組成物及與其相關之方法
CA3186978A1 (en) 2020-07-14 2022-01-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal proteins and methods for their use
CA3189603A1 (en) 2020-08-10 2022-01-17 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Plant regulatory elements and methods of use thereof
TW202345696A (zh) 2022-05-18 2023-12-01 美商科迪華農業科技有限責任公司 具有殺有害生物效用之組成物及與其相關的方法
CN116004426B (zh) * 2022-08-23 2023-10-20 安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所 用于防治烟草花叶病毒病的阿氏肠杆菌av1及其应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20070208168A1 (en) * 2000-09-12 2007-09-06 Guzov Victor M Insect inhibitory Bacillus thuringiensis proteins, fusions, and methods of use therefor
US7332594B2 (en) * 1999-09-15 2008-02-19 Monsanto Technology Llc Lepidopteran-active Bacillus thuringiensis δ-endotoxin polynucleotides, compositions, and methods of use
US20130074403A1 (en) * 2008-07-14 2013-03-28 Syngenta Participations Ag Plant regulatory sequence
RU2012129906A (ru) * 2009-12-16 2014-01-27 ДАУ АГРОСАЙЕНСИЗ ЭлЭлСи КОМБИНИРОВАННОЕ ПРИМЕНЕНИЕ БЕЛКОВ Cry1Da И Cry1Fa ДЛЯ ВЫРАБАТЫВАНИЯ РЕЗИСТЕНТНОСТИ К НАСЕКОМЫМ
EA020327B1 (ru) * 2008-06-25 2014-10-30 Атеникс Корпорейшн Гены токсинов и способы их применения

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7033781B1 (en) * 1999-09-29 2006-04-25 Diversa Corporation Whole cell engineering by mutagenizing a substantial portion of a starting genome, combining mutations, and optionally repeating
WO2007147068A2 (en) * 2006-06-14 2007-12-21 Ceres, Inc. Increasing uv-b tolerance in plants
US7772465B2 (en) * 2007-06-26 2010-08-10 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Bacillus thuringiensis gene with lepidopteran activity
US8129594B2 (en) * 2008-06-11 2012-03-06 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Bacillus thuringiensis gene with lepidopteran activity
US8130107B2 (en) 2008-08-19 2012-03-06 Timothy Meyer Leak detection and control system and method
WO2010091353A2 (en) * 2009-02-06 2010-08-12 University Of Tennessee Research Foundation Novel herbicide resistance gene
GB201102576D0 (en) 2011-02-15 2011-03-30 Go Science Ltd Seismic sensor node with serrated annular skirt
GB201105418D0 (en) * 2011-03-31 2011-05-18 Univ Durham Pesticide
US9688730B2 (en) * 2012-07-02 2017-06-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal proteins and methods for their use
US9403881B2 (en) * 2013-03-14 2016-08-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal proteins and methods of use

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7332594B2 (en) * 1999-09-15 2008-02-19 Monsanto Technology Llc Lepidopteran-active Bacillus thuringiensis δ-endotoxin polynucleotides, compositions, and methods of use
US20070208168A1 (en) * 2000-09-12 2007-09-06 Guzov Victor M Insect inhibitory Bacillus thuringiensis proteins, fusions, and methods of use therefor
EA020327B1 (ru) * 2008-06-25 2014-10-30 Атеникс Корпорейшн Гены токсинов и способы их применения
US20130074403A1 (en) * 2008-07-14 2013-03-28 Syngenta Participations Ag Plant regulatory sequence
RU2012129906A (ru) * 2009-12-16 2014-01-27 ДАУ АГРОСАЙЕНСИЗ ЭлЭлСи КОМБИНИРОВАННОЕ ПРИМЕНЕНИЕ БЕЛКОВ Cry1Da И Cry1Fa ДЛЯ ВЫРАБАТЫВАНИЯ РЕЗИСТЕНТНОСТИ К НАСЕКОМЫМ

Also Published As

Publication number Publication date
US20190387749A1 (en) 2019-12-26
US10820596B2 (en) 2020-11-03
RU2017128859A3 (ru) 2019-09-30
CA2972912A1 (en) 2016-07-21
US20210007361A1 (en) 2021-01-14
AU2022201132A1 (en) 2022-03-17
EP3244727A4 (en) 2018-10-31
RU2017128859A (ru) 2019-02-20
CN107635396A (zh) 2018-01-26
AU2016207026A1 (en) 2017-07-13
AU2016207026B2 (en) 2021-12-02
WO2016114973A1 (en) 2016-07-21
MX369475B (es) 2019-11-08
PH12017501282A1 (en) 2018-01-15
US10448648B2 (en) 2019-10-22
US20220056082A1 (en) 2022-02-24
UA126544C2 (uk) 2022-11-02
CN107635396B (zh) 2021-12-24
US11780891B2 (en) 2023-10-10
MX2019013214A (es) 2020-01-20
MX2017009255A (es) 2017-10-11
US20170367349A1 (en) 2017-12-28
CN114075267A (zh) 2022-02-22
US20240018194A1 (en) 2024-01-18
US10231460B2 (en) 2019-03-19
US11203619B2 (en) 2021-12-21
BR112017015341A2 (pt) 2018-01-09
EP3244727A1 (en) 2017-11-22
AR103411A1 (es) 2017-05-10
US20190142013A1 (en) 2019-05-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11697821B2 (en) PHI-4 polypeptides and methods for their use
US11325949B2 (en) Insecticidal proteins and methods for their use
US11780891B2 (en) Insecticidal proteins and methods for their use
US10563221B2 (en) Insecticidal proteins and methods for their use
RU2747978C2 (ru) Инсектицидные белки и способы их применения
RU2762832C2 (ru) Инсектицидные белки растительного происхождения и способы их применения
RU2733898C2 (ru) Инсектицидные белки и способы их применения
US11208440B2 (en) Structure based methods for modification of PIP-72 polypeptides and PIP-72 polypeptides derived therefrom
RU2666914C2 (ru) Новые инсектицидные белки и способы их применения