RU2726196C1 - N,n'-бис(3-аминопропил)бутан-1,4-диаминопроизводные фузидовой кислоты, проявляющие широкий спектр противомикробной активности - Google Patents

N,n'-бис(3-аминопропил)бутан-1,4-диаминопроизводные фузидовой кислоты, проявляющие широкий спектр противомикробной активности Download PDF

Info

Publication number
RU2726196C1
RU2726196C1 RU2019131780A RU2019131780A RU2726196C1 RU 2726196 C1 RU2726196 C1 RU 2726196C1 RU 2019131780 A RU2019131780 A RU 2019131780A RU 2019131780 A RU2019131780 A RU 2019131780A RU 2726196 C1 RU2726196 C1 RU 2726196C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
amino
aminopropyl
butane
bis
fusidic acid
Prior art date
Application number
RU2019131780A
Other languages
English (en)
Inventor
Елена Викторовна Салимова
Елена Валерьевна Третьякова
Людмила Вячеславовна Парфенова
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Уфимский федеральный исследовательский центр Российской академии наук
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Уфимский федеральный исследовательский центр Российской академии наук filed Critical Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Уфимский федеральный исследовательский центр Российской академии наук
Priority to RU2019131780A priority Critical patent/RU2726196C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2726196C1 publication Critical patent/RU2726196C1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/575—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of three or more carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, ergosterol, sitosterol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
    • C07J41/0033—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005
    • C07J41/0055—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005 the 17-beta position being substituted by an uninterrupted chain of at least three carbon atoms which may or may not be branched, e.g. cholane or cholestane derivatives, optionally cyclised, e.g. 17-beta-phenyl or 17-beta-furyl derivatives

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Изобретение относится к N,N'-бис(3-аминопропил)бутан-1,4-диаминопроизводным фузидовой кислоты формулы (1) и (2): (2Z)-2-((3β,4α,8α,11α,14β,16β)-16-(ацетилокси)-3-{[3-({4-[(3-аминопропил)амино]бутил}амино)пропил]амино}-11-гидрокси-4,8,10,14-тетраметилгонан-17-илиден)-6-метилгепт-5-еновая кислота (1) и метил (2Z)-2-((3β,4α,8α,11α,14β,16β)-16-(ацетилокси)-3-{[3-({4-[(3-аминопропил)амино]бутил}амино)пропил]амино}-11-гидрокси-4,8,10,14-тетраметилгонан-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноат (2). Изобретение также относится к применению N,N'-бис(3-аминопропил)бутан-1,4-диаминопроизводных фузидовой кислоты. Технических результат: получены новые соединения, проявляющие противомикробную активность в отношении штаммов грамположительных бактерий Staphylococcus aureus и патогенных грибковых культур Cryptococcus neoformans. 2 н.п. ф-лы, 2 табл., 2 пр.

Description

Изобретение относится к области медицинской химии, а именно к азотсодержащим производным фузидовой кислоты представляющим собой (2Z)-2-((3β,4α,8α,11α,14β,16β)-16-(ацетилокси)-3-{[3-({4-[(3-аминопропил)амино]бутил}амино)пропил]амино}-11-гидрокси-4,8,10,14-тетраметилгонан-17-илиден)-6-метилгепт-5-еновую кислоту (1) и метил (2Z)-2-((3β,4α,8α,11α,14β,16β)-16-(ацетилокси)-3-{[3-({4-[(3-аминопропил)амино]бутил}амино)пропил]амино}-11-гидрокси-4,8,10,14-тетраметилгонан-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноат (2), проявляющим широкий спектр противомикробной активности по отношению к грамположительным и грамотрицательным микроорганизмам.
Figure 00000001
Известны производные фузидовой кислоты, содержащие разветвленный полиаминовый фрагмент в 3 положении молекулы (3)-(6) (схема 1). Изучение антибактериальной активности полученных производных в отношении грамположительных и грамотрицательных бактерий (Staphylococci, Streptococci, Corynebacteriae, Mycobacteriae, Proteus, Propionibacterium, Pseudomonas, Neisseriae, E.coli), а также грибковых штаммов (Candida, Aspergillus) показало, что они не обладают антимикробным и фунгицидным действием по отношению к штаммам возбудителей бактериальных и грибковых инфекций человека и животных ([1] Т. Duvold. Blanched polyamine steroid derivatives. Patent WO 03/087121 A1, 2003; [2] T. Duvold. Novel fusidic acid derivatives. Patent WO 02/077007 A2, 2002).
Figure 00000002
Известны производные фузидовой кислоты, содержащие N,N'-бис(3-аминопропил)бутан-1,4-диаминовый заместитель в 21 положении молекулы (7)-(14) (схема 2). Изучение биологической активности полученных производных показало, что соединения (10), (13) и (14) проявляют антибактериальное действие в отношении штаммов грамположительных (Staphylococci, Streptococci, Corynebacterium, Propionibacterium) и грамотрицательных (E.coli, Pseudomonas aeruginosa) микроорганизмов, а также ингибируют рост грибковых культур Saccharomyces cerevisiae, Candida albicans и Aspergillus niger [Т. Duvold. Novel fusidic acid derivatives. Patent WO 02/077007 A2, 2002].
Figure 00000003
Таким образом, синтез и антибактериальные свойства N,N'-бис(3-аминопропил)бутан-1,4-диаминопроизводных фузидовой кислоты (1) и (2) в литературе не описаны.
Задачей предлагаемого изобретения является синтез и изучение антибактериальной и фунгицидной активности in vitro (2Z)-2-((3β,4α,8α,11α,14β,16β)-16-(ацетилокси)-3-{[3-({4-[(3-аминопропил)амино]бутил}амино)пропил]амино}-11-гидрокси-4,8,10,14-тетраметилгонан-17-илиден)-6-метилгепт-5-еновой кислоты (1) и метил (2Z)-2-((3β,4α,8α,11α,14β,16β)-16-(ацетилокси)-3-{[3-({4-[(3-аминопропил)амино]бутил}амино)пропил]амино}-11-гидрокси-4,8,10,14-тетраметилгонан-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноата (2) в отношении 5 различных видов бактерий: Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa и Staphylococcus aureus, и двух разновидностей грибков: Candida albicans и Cryptococcus neoformans.
Синтез заявленных соединений осуществляли по реакции восстановительного аминирования, описанной в работе [E.V. Salimova, A.G. Mamaev, E.V. Tretyakova, О.S. Kukovinets, L.V. Parfenova. Mediterr. J. Chem. 2018, 7 (3), P. 198-203]. Дикетон фузидовой кислоты (15) или ее метилового эфира (16) вовлекали во взаимодействие с 3 экв. N,N'-бис(3-аминопропил)бутан-1,4-диамина (спермина) в среде сухого метанола в присутствии катализатора Ti(Oi-Pr)4 с последующим восстановлением смеси 2 экв. NaBH4 (схема 3). В результате реакции выделяли производные (1) и (2) с выходами 75 и 80%, соответственно.
Figure 00000004
Сущность изобретения поясняется следующими примерами.
Пример 1. Смесь дикетона (15) (0.28 г, 0.5 ммоль), изопропоксида титана(IV) (0.06 г, 0.15 ммоль) и N,N'-бис(3-аминопропил)бутан-1,4-диамина (0.3 г, 1.5 ммоль) в 5 мл абсолютного метанола перемешивали в атмосфере аргона при комнатной температуре 2 часа. Реакционную массу охлаждали до -70°С и добавляли NaBH4 (0.04 г, 1.0 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение 0.5 часа при -70°С, после чего температуру постепенно повышали до комнатной и добавляли в реакционную массу 5 мл воды. Выпавший осадок отфильтровывали, промывали метанолом. Маточный раствор концентрировали в вакууме, получая сырой амин, который очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя метанолом.
(2Z)-2-((3β,4α,8α,11α,14β,16β)-16-(Ацетилокси)-3-{[3-({4-[(3-аминопропил) амино]бутил}амино)пропил]амино}-11-гидрокси-4,8,10,14-тетраметил-гонан-17-илиден)-6-метилгепт-5-еновая кислота (1). Желтый порошок; выход 75%; т.пл. 253-255°С; [α]20 D +9.2° (с 1.110, МеОН). Спектр ЯМР 1Н (CD3OD, δ, м.д.): 5.91 (1Н, д, J=7.5 Hz, Н-16), 5.16 (1Н, д, J=6.0 Hz, Н-24), 4.24-4.36 (1Н, м, Н-11), 3.26-3.33 (2Н, м, Н-3'), 3.23-3.34 (2Н, м, Н-8'), 3.15 (2Н, т, J=7.0 Hz, Н-7'), 3.09 (2Н, д, J=10.0 Hz, Н-10'), 3.02-3.13 (3Н, м, Н-4', Н-13), 2.95-3.03 (2Н, м, Н-1'), 2.78-2.90 (1Н, м, Н-3), 2.47-2.59 (1Н, м, H-9'a), 2.35-2.44 (1Н, м, H-9'b), 2.28-2.37 (1Н, м, Н-12а), 2.11-2.23 (1Н, м, Н-1а), 2.07-2.23 (1Н, м, Н-2а), 2.05-2.15 (3Н, м, Н-15а, Н-2'), 2.02-2.35 (2Н, м, Н-22), 1.97 (3Н, с, O-С(O)CH 3, 1.92-2.02 (1Н, м, Н-1b), 1.81-1.92 (4Н, м, Н-5', Н-6'), 1.80-1.89 (1Н, м, Н-12b), 1.74-1.81 (1H, м, Н-5), 1.73-2.22 (2Н, м, Н-23), 1.73-1.87 (1Н, м, Н-7а), 1.71-1.79 (1Н, м, Н-4), 1.69 (3Н, с, Н-26), 1.65-1.72 (1Н, м, Н-2b), 1.64 (3Н, с, Н-27), 1.55-1.69 (1H, м, Н-9), 1.35 (3Н, с, Н-30), 1.25-1.31 (1Н, м, Н-6а), 1.23-1.31 (1Н, м, Н-15b), 1.14-1.23 (1Н, м, Н-6b), 1.13-1.24 (1Н, м, Н-7b), 1.07 (6Н, уш.с, Н-19, Н-28), 0.97 (3Н, с, Н-18). Спектр ЯМР 13С (CD3OD, δ, м.д.): 172.3 (С, С-21, O-С(O)СН3), 136.8 (С, С-17), 132.1 (С, С-20), 131.4 (С, С-25), 123.8 (СН, С-24), 74.6 (СН, С-16), 66.9 (СН, С-11), 63.1 (СН, С-3), 53.8 (СН2, С-3'), 48.8 (СН, С-9), 48.5 (С, С-14), 47.1 (СН2, С-4'), 45.1 (СН2, С-7'), 44.7 (СН2, C-l'), 43.1 (СН, С-13), 42.8 (СН, С-5), 41.8 (СН2, С-8'), 39.1 (С, С-8), 38.86 (СН2, С-15), 36.76 (СН2, С-10'), 36.13 (СН2, С-12), 35.86 (С, С-10), 34.97 (СН, С-4), 33.4 (СН2, С-1), 31.7 (СН2, С-7), 29.3 (СН2, С-22), 27.8 (СН2, С-23), 24.5 (СН3, С-26), 24.2 (СН2, С-2'), 24.0 (СН2, С-9'), 23.5 (СН2, С-2), 23.4 (СН2, С-5'), 23.1 (СН2, С-6'), 22.5 (СН3, С-30), 22.2 (СН3, С-19), 21.1 (СН2, С-6), 19.9 (СН3, O-С(O)СН3), 16.6 (СН3, С-27, С-18), 14.4 (СН3, С-28). Масс-спектр (MALDI TOF/TOF), m/z (Iотн., %): 701.405 [М] (100). Вычислено для C41H72N4O5: С, 70.24; Н, 10.35; N, 7.99%. Найдено: С, 70.29; Н, 10.31; N, 8.01%.
Пример 2. Смесь дикетона (16) (0.26 г, 0.5 ммоль), изопропоксида титана(IV) (0.055 г, 0.15 ммоль) и N,N'-бис(3-аминопропил)бутан-1,4-диамина (0.3 г, 1.5 ммоль) в 5 мл абсолютного метанола перемешивали в атмосфере аргона при комнатной температуре 2 часа. Реакционную массу охлаждали до -70°С и добавляли NaBH4 (0.04 г, 1.0 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение 0.5 часа при -70°С, после чего температуру постепенно повышали до комнатной и добавляли в реакционную массу 5 мл воды. Выпавший осадок отфильтровывали, промывали метанолом. Маточный раствор концентрировали в вакууме, получая сырой амин, который очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя метанолом.
Метил (2Z)-2-((3β,4α,8α,11α,14β,16β)-16-(ацетилокси)-3-{[3-({4-[(3-аминопропил)амино]бутил}амино)пропил]амино}-11-гидрокси-4,8,10,14-тетраметилгонан-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноат (2). Желтый порошок; выход 80%; т.пл. 245-247°С; [α]20 D +8.9° (с 1.137, МеОН). Спектр ЯМР 1Н (CD3OD, δ, м.д.): 5.83 (1Н, д, J=3.2 Hz, Н-16), 5.12 (1Н, т, J=7.0 Hz, Н-24), 4.24-4.37 (1H, м, Н-11), 3.64 (3Н, с, С(O)ОСН 3), 3.20-3.31 (2Н, м, Н-8'), 3.08-3.13 (2Н, м, Н-3'), 3.01-3.11 (2Н, м, Н-10'), 3.01-3.07 (1Н, м, Н-13), 3.00-3.16 (2Н, м, Н-7'), 2.90-3.01 (2Н, м, Н-4'), 2.73-2.83 (1Н, м, Н-3), 2.58-2.64 (1Н, м, H-1'a), 2.52-2.62 (1Н, м, Н-22а), 2.43-2.46 (1Н, м, H-1'b), 2.37-2.47 (1Н, м, Н-22b), 2.33 (1Н, дт, J=3.5, 13.5 Hz, Н-12а), 2.12-2.20 (1Н, м, Н-1а), 2.11-2.45 (1Н, м, Н-15а), 2.01-2.16 (2Н, м, Н-23), 2.00-2.35 (2Н, м, Н-2'), 1.99-2.18 (2Н, м, Н-9'), 1.96 (3Н, с, О-С(О)СН 3), 1.90-1.96 (1H, м, Н-1b), 1.80 (1Н, т, J=3.2 Hz, Н-5), 1.77-1.91 (Ш, м, Н-12b), 1.76-2.02 (2Н, м, Н-2), 1.74-1.91 (4Н, м, Н-5', 6'), 1.73-1.83 (1Н, м, Н-7а), 1.68-1.75 (1Н, м, Н-4), 1.68 (3Н, с, Н-26), 1.61 (3Н, с, Н-27), 1.56-1.78 (1Н, м, Н-6а), 1.35 (3Н, с, Н-30), 1.25 (1Н, д, J=7.3 Hz, H-15b), 1.10-1.20 (1Н, м, H-7b), 1.06 (3Н, с, Н-19), 1.04 (3Н, д, J=9.5 Hz, Н-28), 0.93 (3Н, с, Н-18), 0.91-0.97 (1Н, м, Н-6b). Спектр ЯМР l3C (CD3OD, δ, м.д.): 171.0 (С, С-21), 170.8 (С, O-С(O)СН3), 148.8 (С, С-17), 132.2 (С, С-25), 130.2 (С, С-20), 122.8 (СН, С-24), 74.4 (СН, С-16), 66.8 (СН, С-11), 63.1 (СН, С-3), 50.7 (СН3, С(О)ОСН3), 48.8 (СН, С-9), 48.5 (С, С-14), 47.2 (СН2, С-4'), 45.9 (СН2, С-7'), 45.0 (СН2, С-1'), 43.9 (СН, С-13), 42.9 (СН, С-5), 42.8 (СН2, С-8'), 42.6 (СН2, С-3'), 39.1 (С, С-8), 38.7 (СН2, С-15), 37.2 (СН2, С-10'), 36.0 (СН2, С-12), 35.8 (С, С-10), 35.2 (СН, С-4), 33.4 (СН2, С-1), 31.7 (СН2, С-7), 28.4 (СН2, С-22), 27.9 (СН2, С-23), 24.9 (СН2, С-9'), 24.6 (СН3, С-26), 24.4 (СН2, С-2'), 24.2 (СН2, С-2), 24.1 (СН2, С-5'), 23.7 (СН2, С-6'), 23.0 (СН3, С-30), 22.3 (СН3, С-19), 21.1 (СН2, С-6), 19.6 (СН3, O-С(O)СН3), 16.6 (СН3, С-18), 16.5 (СН3, С-27), 14.6 (СН3, С-28). Масс-спектр (MALDI TOF/TOF), m/z (Iотн., %): 738.646 [M+Na] (100). Вычислено для С42Н74О5: С, 70.55; Н, 10.43; N, 7.84%. Найдено: С, 70.47; Н, 10.39; N, 7.81%.
Контроль реакции осуществляли методом ТСХ на пластинах Sorbfil (Сорбпо-лимер, Краснодар, Россия), проявляли 10%) раствором серной кислоты. Для колоночной хроматографии использовали силикагель L (50-160 мкм) марки КСКГ. Температура плавления определена на приборе РНМК 80/2617. Спектры ЯМР ID (1Н, 13С) и 2D (COSY, NOESY, HSQC, НМВС) сняты на спектрометре Bruker Avance 500 (125.78 МГц для 13С и 500.17 МГц для 1Н) с использованием стандартных импульсных последовательностей фирмы Bruker, внутренний стандарт Me4Si, растворитель - CD3OD. Оптические углы измерены на поляриметре Perkin-Elmer 341. Масс-спектры MALDI TOF/TOF получены на спектрометре Bruker Autoflex ТМ III Smartbeam с использованием матрицы 3-(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)проп-2-еновой кислоты (синапиновая кислота).
Противомикробный скрининг соединений (1) и (2) проводили в CO-ADD (The Community for Antimicrobial Drug Discovery), финансируемым Wellcome Trust (Великобритания) и Университетом Квинсленда (Австралия), на пяти бактериальных штаммах: Escherichia coli (Е. coli) АТСС 25922, Klebsiella pneumoniae (K. pneumoniae) АТСС 700603, Acinetobacter baumannii (A. baumannii) АТСС 19606, Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) ATCC 27853 и Staphylococcus aureus (S. aureus) ATCC 43300. Противогрибковую активность определяли на двух грибковых штаммах: Candida albicans (С. albicans) АТСС 90028 и Cryptococcus neoformans (С. neoformans) АТСС 208821.
Первичный скрининг противомикробной активности проводился путем тестов на ингибирование размножения клеток, используя образцы в одной (32 мкг/мл) концентрации. Аликвоту каждого образца в ДМСО помещали в 384-луночный планшет и обрабатывали соответствующей бактериальной культурой. Ингибирование роста бактерий определяли спектрофотометрически при 600 нм на монохромном микропланшетном ридере Tecan M1000 Pro. Процент ингибирования роста рассчитывали для каждой лунки с использованием отрицательного контроля (только для среды) и положительного контроля (бактерии без ингибиторов) на той же пластинке. В случае если один или оба раза наблюдалось ингибирование роста ≥80%, соединение считалось активным (Таблица 1).
Figure 00000005
При первичном скрининге было выявлено наличие широкого спектра противомикробной и фунгицидной активности у N,N'-бис(3-аминопропил)бутан-1,4-диаминопроизводных фузидовой кислоты (1) и (2) в отношении штаммов грамположительных (Staphylococcus aureus) и грамотрицательных (Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter baumannii) микроорганизмов, а также грибковых культур Cryptococcus neoformans и Candida albicans.
Для соединения (1) и (2) была определена минимальная ингибирующая концентрация в отношении вышеуказанных культур, а также изучена цитотоксическая и гемолитическая активности.
Минимальную ингибирующую концентрацию (MIC; мкг/мл) устанавливали в соответствии с рекомендациями Института клинических и лабораторных стандартов (Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), США), определяя наименьшую концентрацию, при которой было обнаружено полное ингибирование бактерий или грибов. Скрининг проводился методом серийных разведений. Образцы готовились в ДМСО в тестовой концентрации 32 мкг/мл. Все бактерии культивировались на агаре Мюллера Хинтона при 37°С в течение ночи. Образец каждой культуры затем разбавлялся в 40 раз и инкубировался при 37°С в течение 1,5-3 ч. Полученные культуры добавлялись в каждую лунку 384-луночного планшета, содержащую исследуемый образец (плотность клеток 5×105 КОЕ / мл и общий объем 50 мкл). Все планшеты накрывались и инкубировались при 37°С в течение 18 ч без встряхивания. Ингибирование роста бактерий определялось измерением поглощения при 600 нм с использованием монохромного микропланшетного ридера Tecan M1000 Pro. Процент ингибирования роста рассчитывался для каждой лунки с использованием отрицательного контроля (только для среды) и положительного контроля (бактерии без ингибиторов) на той же пластине. Значения ингибирования определялись с помощью модифицированных Z-показателей, рассчитанных с использованием медианы и медианного абсолютного отклонения (MAD) образцов (без контроля) на той же пластине. Образцы с величиной ингибирования выше 80% и Z-оценкой выше 2,5 для обеих реплик классифицировались как активные вещества. Образцы с показателями ингибирования от 50 до 80% и Z-оценкой выше 2,5 для обеих реплик классифицировались как частично активные.
Тесты проводились в двойном повторе. Максимальный процент ингибирования роста обозначался как DMax. Хиты были классифицированы при MIC ≤ 16 мкг/мл или MIC ≤ 10 мкМ в любой реплике (n=2 на разных пластинах).
Цитотоксическое действие определяли на клеточной линии эмбриональных почек человека HEK293 путем определения концентрации, вызывающей гибель 50% клеток (Hk СС50). Ингибирование роста клеток HEK293 определяли, измеряя флуоресценцию после добавления 5 мкл 25 мкг/мл резазурина (конечная концентрация 2.3 мкг/мл) и после инкубации в течение еще 3 ч при 37°С в 5% CO2. Интенсивность флуоресценции измеряли с использованием монохромного микропланшетного ридера Tecan M1000 Pro с использованием автоматического вычисления коэффициента усиления. Максимальный процент цитотоксичности обозначали как DMax. Соединение считалось токсичным при СС50 ≤ 32 мкг/мл или СС50 ≤ 10 мкМ. Кроме того, образцы были отмечены как частичные цитотоксические, если DMax ≥50%, даже при СС50 выше максимальной тестируемой концентрации.
Гемолитическую активность (Hm НС10 и НС50 - концентрация при 10% и 50% гемолизе, соответственно) определяли путем измерения поглощения при 405 мм супернатанта - надосадочной жидкости, образованной после инкубации в течение 1 ч при 37°С планшетов, содержащих образцы соединений с добавленными к ним промытыми клетками крови человека, и последующего центрифугирования при 1000 об/мин в течение 10 мин. Абсорбцию измеряли с использованием монохромного микропланшетного ридера Tecan M1000 Pro.
Максимальный процент гемолиза представлен как DMax. Низкое значение DMax при НС10 > 32 мкг/мл (максимально испытанная концентрация) указывает на образцы без гемолитической активности. Образцы, обладающие гемолитической активностью, были охарактеризованы при НС10 ≤ 32 мкг/мл. Кроме того, образцы были помечены как частично гемолитические, если DMax ≥ 50%, даже при НС10 > максимальной тестируемой концентрации.
«Колистин» и «Ванкомицин» были использованы в качестве положительных стандартов бактериального ингибирования для грамотрицательных и грамположительных бактерий, соответственно. «Флуконазол» использовали в качестве стандартного ингибитора гриба для С. albicans и С. neoformans. «Тамоксифен» использовали в качестве положительного стандарта цитотоксичности. «Мелиттин» использовали в качестве положительного гемолитического стандарта.
Методика тестирования противомикробной, фунгицидной, цитотокси-ческой и гемолитической активности in vitro соединений приведена также на сайте http://www.co-add.org.
Образцы (2Z)-2-((3β,4α,8α,11α,14β,l6β)-16-(ацетилокси)-3-{[3-({4-[(3-аминопропил)амино]бутил}амино)пропил]амино}-11-гидрокси-4,8,10,14-тетраметилгонан-17-илиден)-6-метилгепт-5-еновой кислоты (1) и метил (2Z)-2-((3β,4α,8α,11α,14β,16β)-16-(ацетилокси)-3-{[3-({4-[(3-аминопропил)амино]бутил}амино)пропил]амино}-11-гидрокси-4,8,10,14-тетраметилгонан-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноата (2) в концентрации 4.0 и 2.0 мкг/мл, соответственно, показали высокую противомикробную активность, ингибируя рост и размножение > 98% грамположительных бактерий Staphylococcus aureus. Соединение (2) в концентрации 1.0 мкг/мл проявило высокую фунгицидную активность по отношению к грибковой культуре Cryptococcus neoformans, подавляя рост > 86% данного патогенного микроорганизма. В концентрации 32.0 мкг/мл соединения (1) и (2) ингибируют размножение > 95% грамотрицательных бактерий Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa и Acinetobacter baumannii, а также грибковых культур Cryptococcus neoformans и Candida albicans, что, по критериям CO-ADD, является слабовыраженной противомикробной активностью. Цитотоксичность производных (1) и (2) выше таковой у фузидовой кислоты в 2.5 раза, а гемолитическая активность не превышает 15% при максимально тестируемой концентрации >32 мкг/мл, что сравнимо с аналогичной активностью нативного антибиотика.
Таким образом, N,N'-бис(3-аминопропил)бутан-1,4-диаминопроизводные фузидовой кислоты (1) и (2) проявляют антибактериальную активность в отношении патогенных микроорганизмов Staphylococcus aureus и грибковой культуры Cryptococcus neoformans, обладая минимальным гемолитическим действием при максимально тестируемой концентрации, проявляя высокую цитотоксическую активность в отношении клеточной линии эмбриональных почек человека HEK293.
Figure 00000006

Claims (3)

1. N,N'-бис(3-аминопропил)бутан-1,4-диаминопроизводные фузидовой кислоты формулы (1) и (2): (2Z)-2-((3β,4α,8α,11α,14β,16β)-16-(ацетилокси)-3-{[3-({4-[(3-аминопропил)амино]бутил}амино)пропил]амино}-11-гидрокси-4,8,10,14-тетраметилгонан-17-илиден)-6-метилгепт-5-еновая кислота (1) и метил (2Z)-2-((3β,4α,8α,11α,14β,16β)-16-(ацетилокси)-3-{[3-({4-[(3-аминопропил)амино]бутил}амино)пропил]амино}-11-гидрокси-4,8,10,14-тетраметилгонан-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноат (2):
Figure 00000007
2. Применение N,N'-бис(3-аминопропил)бутан-1,4-диаминопроизводных фузидовой кислоты по п. 1 в качестве средств с антибактериальной активностью для борьбы с заболеваниями человека и животных, вызванными грамположительными бактериями Staphylococcus aureus и патогенными грибковыми культурами Cryptococcus neoformans.
RU2019131780A 2019-10-08 2019-10-08 N,n'-бис(3-аминопропил)бутан-1,4-диаминопроизводные фузидовой кислоты, проявляющие широкий спектр противомикробной активности RU2726196C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019131780A RU2726196C1 (ru) 2019-10-08 2019-10-08 N,n'-бис(3-аминопропил)бутан-1,4-диаминопроизводные фузидовой кислоты, проявляющие широкий спектр противомикробной активности

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019131780A RU2726196C1 (ru) 2019-10-08 2019-10-08 N,n'-бис(3-аминопропил)бутан-1,4-диаминопроизводные фузидовой кислоты, проявляющие широкий спектр противомикробной активности

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2726196C1 true RU2726196C1 (ru) 2020-07-09

Family

ID=71510613

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2019131780A RU2726196C1 (ru) 2019-10-08 2019-10-08 N,n'-бис(3-аминопропил)бутан-1,4-диаминопроизводные фузидовой кислоты, проявляющие широкий спектр противомикробной активности

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2726196C1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2784215C1 (ru) * 2022-07-13 2022-11-23 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Уфимский федеральный исследовательский центр Российской академии наук (1-Бензил-1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил (Z)-2-((3S,4S,8S,10S,11R,14S,16S)-16-ацетокси-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгексадекагидро-17H-циклопента[a]фенантрен-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноат, проявляющий антибактериальную и фунгицидную активность

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002077007A2 (en) * 2001-03-21 2002-10-03 Leo Pharma A/S Novel polyaminated fusidic acid derivatives
RU2334758C2 (ru) * 2002-04-05 2008-09-27 Лео Фарма А/С Производные разветвленного полиаминостероида
RU2353622C2 (ru) * 2003-07-16 2009-04-27 Лео Фарма А/С Новые производные фузидовой кислоты

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002077007A2 (en) * 2001-03-21 2002-10-03 Leo Pharma A/S Novel polyaminated fusidic acid derivatives
RU2334758C2 (ru) * 2002-04-05 2008-09-27 Лео Фарма А/С Производные разветвленного полиаминостероида
RU2353622C2 (ru) * 2003-07-16 2009-04-27 Лео Фарма А/С Новые производные фузидовой кислоты

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
E.V. Salimova et al. "Reductive amination of fusidane triterpenoid ketones" Mediterranean Journal of Chemistry, 7(3), 2018, 198-203. *
E.V. Salimova et al. "Reductive amination of fusidane triterpenoid ketones" Mediterranean Journal of Chemistry, 7(3), 2018, 198-203. А.Г. Мамаев и др. "Аминопропилтритерпеноиды фузиданового ряда" Международный юбилейный конгресс, посвященный 60-летию Иркутского института химии им. А.Е. Фаворского СО РАН "Фаворский-2017" Сборник тезисов докладов, 2017, 193. *
А.Г. Мамаев и др. "Аминопропилтритерпеноиды фузиданового ряда" Международный юбилейный конгресс, посвященный 60-летию Иркутского института химии им. А.Е. Фаворского СО РАН "Фаворский-2017" Сборник тезисов докладов, 2017, 193. *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2784215C1 (ru) * 2022-07-13 2022-11-23 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Уфимский федеральный исследовательский центр Российской академии наук (1-Бензил-1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил (Z)-2-((3S,4S,8S,10S,11R,14S,16S)-16-ацетокси-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгексадекагидро-17H-циклопента[a]фенантрен-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноат, проявляющий антибактериальную и фунгицидную активность
RU2807924C1 (ru) * 2023-03-17 2023-11-21 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт элементоорганических соединений им. А.Н. Несмеянова Российской академии наук (ИНЭОС РАН) N-ЗАМЕЩЕННЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ 6α-ПИПЕРАЗИНОМЕТИЛАНДРОСТ-4-ЕН-3,17-ДИОНА, ОБЛАДАЮЩИЕ АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТЬЮ, И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Azebaze et al. Prenylated Xanthone Derivatives with Antiplasmodial Activity from Allanblackia Monticola S TANER LC
Hodge et al. Verrucofortine, a major metabolite of Penicillium verrucosum var. cyclopium, the fungus that produces the mycotoxin verrucosidin
Jardosh et al. Design and synthesis of biquinolone–isoniazid hybrids as a new class of antitubercular and antimicrobial agents
EP0282507B1 (en) Discorhabdin compositions and their methods of use
US20100004480A1 (en) Methods and compositions for inhibiting biofilms
Shou et al. Antibacterial anthranilic acid derivatives from Geijera parviflora
TRAXLER et al. Papulacandins-synthesis and biological activity of papulacandin B derivatives
Lagu et al. Synthesis. antibacterial, antifungal antitubercular activities and molecular docking studies of nitrophenyl derivatives
JPS59501950A (ja) ゼノ−ルハブデイン抗生物質
EP1909912B1 (en) Use of collismycin A as oxidative stress inhibitor
Chakkaravarthi et al. Synthesize, spectral, antimicrobial and antioxidant studies of diamide mannich base derivatives
RU2726196C1 (ru) N,n'-бис(3-аминопропил)бутан-1,4-диаминопроизводные фузидовой кислоты, проявляющие широкий спектр противомикробной активности
US4859782A (en) Misakinolide compositions and their derivatives
KR20180024002A (ko) 신규한 바이사이클릭 리포란티펩티드, 제조 및 항균제로서의 용도
RU2746947C2 (ru) НОВЫЕ НАФТО[2,1-b]КАРБАЗОЛПРОИЗВОДНЫЕ ФУЗИДОВОЙ КИСЛОТЫ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА
RU2730604C1 (ru) (2Z)-2-[(3β, 4α, 8α, 11α, 14β, 16β)-16-(АЦЕТИЛОКСИ)-3-({ 3-[(4-АМИНОБУТИЛ)АМИНО]ПРОПИЛ} АМИНО)-11-ГИДРОКСИ-4,8,10,14-ТЕТРАМЕТИЛГОНАН-17-ИЛИДЕН]-6-МЕТИЛГЕПТ-5-ЕНОВАЯ КИСЛОТА С ПРОТИВОМИКРОБНОЙ И ФУНГИЦИДНОЙ АКТИВНОСТЬЮ И СПОСОБ ЕЁ ПОЛУЧЕНИЯ
Smirnova et al. Evaluation on antimicrobial potential of dipterocarpol and dammarenolic acid derivatives from Dipterocarpus alatus
Tribak et al. N-alkylation methods, Characterization and Evaluation of antibacterial activity of some Novel 5-Chloroisatin Derivatives
Rabbani et al. Synthesis and Characterization of Some NH-Analogues of Ciprofloxacin on Antibacterial, Antifungal, and Cytotoxic Activities.
Zani et al. Hybrid molecules between benzenesulfonamides and active antimicrobial benzo [d] isothiazol-3-ones
RU2726122C1 (ru) (2Z)-2-[(4α, 5α, 8α, 9β, 13α, 14β, 16β)-16-(АЦЕТИЛОКСИ)-3(Z),11(E)-БИС(ГИДРОКСИИМИНО)-4,8,10,14-ТЕТРАМЕТИЛГОНАН-17-ИЛИДЕН]-6-МЕТИЛГЕПТ-5-ЕНОВАЯ КИСЛОТА, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА
RU2780014C1 (ru) ПРОП-2-ИН-1-ИЛ-(2Z)-2-[(3-альфа, 4-альфа, 8-альфа, 11-альфа, 14-бета, 16-бета)-16-(АЦЕТИЛОКСИ)-3,11-ДИГИДРОКСИ-4,8,10,14-ТЕТРАМЕТИЛГОНАН-17-ИЛИДЕН]-6-МЕТИЛГЕПТ-5-ЕНОАТ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА
US20060100291A1 (en) Antibacterial compounds
Onanuga et al. Two new biologically active steroids from Costus lucanusianus (Costaceae)
Sriram et al. Synthesis of zidovudine prodrugs with broad-spectrum chemotherapeutic properties for the effective treatment of HIV/AIDS