RU2746947C2 - НОВЫЕ НАФТО[2,1-b]КАРБАЗОЛПРОИЗВОДНЫЕ ФУЗИДОВОЙ КИСЛОТЫ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА - Google Patents

НОВЫЕ НАФТО[2,1-b]КАРБАЗОЛПРОИЗВОДНЫЕ ФУЗИДОВОЙ КИСЛОТЫ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА Download PDF

Info

Publication number
RU2746947C2
RU2746947C2 RU2019131784A RU2019131784A RU2746947C2 RU 2746947 C2 RU2746947 C2 RU 2746947C2 RU 2019131784 A RU2019131784 A RU 2019131784A RU 2019131784 A RU2019131784 A RU 2019131784A RU 2746947 C2 RU2746947 C2 RU 2746947C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
naphtho
fusidic acid
compound
synthesis
new
Prior art date
Application number
RU2019131784A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2019131784A3 (ru
RU2019131784A (ru
Inventor
Елена Викторовна Салимова
Елена Валерьевна Третьякова
Людмила Вячеславовна Парфенова
Усеин Меметович Джемилев
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Уфимский федеральный исследовательский центр Российской академии наук
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Уфимский федеральный исследовательский центр Российской академии наук filed Critical Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Уфимский федеральный исследовательский центр Российской академии наук
Priority to RU2019131784A priority Critical patent/RU2746947C2/ru
Publication of RU2019131784A3 publication Critical patent/RU2019131784A3/ru
Publication of RU2019131784A publication Critical patent/RU2019131784A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2746947C2 publication Critical patent/RU2746947C2/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/58—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids containing heterocyclic rings, e.g. danazol, stanozolol, pancuronium or digitogenin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J71/00—Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton is condensed with a heterocyclic ring

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Изобретение относится к нафто[2,1-b]карбазолпроизводному фузидовой кислоты, выбранному из соединения формулы (1) или соединения формулы (2), способу его получения и его применению в медицине:.Предложенный способ заключается во взаимодействии соответствующего 3,11-диоксопроизводного фузидовой кислоты с 3 экв. фенилгидразина в среде сухого этанола при кипячении в течение 2 часов в условиях реакции Фишера. Предложено новое нафто[2,1-b]карбазолпроизводное фузидовой кислоты, эффективное в качестве средства с антибактериальной активностью для борьбы с заболеваниями человека и животных, вызванными грамположительными бактериями Staphylococcus aureus, а также новый эффективный способ его получения. 3 н.п. ф-лы, 2 табл., 2 пр.

Description

Изобретение относится к области синтеза биологически активных аналогов природных соединений, а именно к получению (3αS,4αS,4βS,7S,13αS)-4α,4β,7,13α-тетраметил-1-(4-метилпент-3-ен-1-ил)-3α,4,4α,4β,5,6,6α,7,8,13,13α,13β,15,15α-тетрадекагидрофуро[3'',2'':3',4']циклопента[1',2':5,6]нафто[2,1-b]карбазол-2,14-диона (1) и метил (2Z)-2-[(2S,3αS,3βS,6S,12αS)-2-(ацетилокси)-3α,3β,6,12α-тетраметил-13-оксо-3,3α,3β,4,5,5α,6,7,12,12α,12β,13,14,14α-тетрадекагидроциклопента[5,6]нафто[2,1-b]карбазол-1(2H)-илиден]-6-метилгепт-5-еноата (2), обладающих высокой активностью по отношению к Staphylococcus aureus (MRSA):
Figure 00000001
Известны 1Н-дибензо[а, с]карбазолпроизводные дегидроабиетиновой кислоты с различными заместителями в ароматическом ядре (3а-l) [W. Gu, S. Wang. Synthesis and antimicrobial activities of novel lH-dibenzo[a,c]carbazoles from dehydroabietic acid. Eur. J. Med. Chem. 2010, 45, P. 4692-4696] и N-замещенные 1Н-дибензо[а,с]карбазолпроизводные дегидроабиетиновой кислоты, содержащие аминные или гетероциклические группы в боковой алкильной цепи (4a-m) [W. Gu, С. Qiao, S.F. Wang, Y. Нао, Т.Т. Miao. Synthesis and biological evaluation of novel N-substituted lH-dibenzo[a,c]carbazole derivatives of dehydroabietic acid as potential antimicrobial agents. BMC Lett. 2014, 24, P. 328-331] (схема 1).
Схема 1.
Figure 00000002
Изучение антибактериальной активности синтезированных производных in vitro в отношении штаммов грамположительных (Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus) и грамотрицательных (Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens) микроорганизмов, а также трех грибковых культур (Candida albicans, Candida tropicalis и Aspergillus niger) показало, что соединения (3d), (3е), (3l), а также производные, содержащие пиперазиновые (4f), (4g) или азольные гетероциклические фрагменты, соединенные гибкими этильными цепями (4j) - (4m), обладали широким спектром антимикробной активностью по отношению ко всем исследованным штаммам при МИК от 0,9 до 15,6 мкг/мл.
Известны [2,1-b]карбазольные производные урсоловой кислоты (5a-h) (схема 2). Скрининг антибактериальной активности данных соединений в отношении грамположительных (Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus) и грамотрицательных (Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens) бактерий, а также грибковых культур (Candida albicans, Candida tropicalis и Aspergillus niger) показал, что производное с фториндольным фрагментом и N-(диметиламино)пропиламидной боковой цепью (5b) проявило выраженную антибактериальную активность в отношении всех исследованных бактерий [W. Gu, Y. Нао, G. Zhang, S.F. Wang, Т.Т. Miao, K.Р. Zhang. Synthesis, in vitro antimicrobial and cytotoxic activities of new carbazole derivatives of ursolic acid. BMC Lett. 2015, 25, P. 554-557].
Схема 2.
Figure 00000003
Таким образом, синтез и антибактериальные свойства нафто[2,1-b]карбазолпроизводных фузидовой кислоты (1) и (2) в литературе не описаны.
Задачей предлагаемого изобретения является синтез и изучение противомикробной активности in vitro (3αS,4αS,4βS,7S,13αS)-4α,4β,7,13α-тетраметил-1-(4-метилпент-3-ен-1-ил)-3α,4,4α,4β,5,6,6α,7,8,13,13α,13β,15,15α-тетрадекагидро-фуро[3'',2'':3',4']циклопента[1',2':5,6]нафто[2,1-b]карбазол-2,14-диона (1) и метил (2Z)-2-[(2S,3αS,3βS,6S,12αS)-2-(ацетилокси)-3α,3β,6,12α-тетраметил-13-оксо-3,3α,3β,4,5,5α,6,7,12,12α,12β,13,14,14α-тетрадекагидро-циклопента[5,6]нафто[2,1-b]карбазол-1(2H)-илиден]-6-метилгепт-5-еноата (2) в отношении 5 различных видов бактерий: Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa и Staphylococcus aureus, и двух разновидностей грибков: Candida albicans и Cryptococcus neoformans.
Синтез заявленных индолов осуществляли по реакции Фишера, используя в качестве исходных соединений 3,11-диоксопроизводное фузидовой кислоты (6) или ее метилового эфира (7). Дикетоны (6) или (7) вовлекали во взаимодействие с 3 экв. фенилгидразина в смеси сухого этанола и ледяной уксусной кислоты. Реакционную массу нагревали в течение 2 часов и обрабатывали ледяной водой (схема 3). В результате реакции выделяли производные (1) и (2) с выходами 75 и 80%, соответственно.
Схема 3.
Figure 00000004
Сущность изобретения поясняется следующими примерами.
Пример 1. Дикетон (6) (0.2 г, 0.32 ммоль) растворили в 5 мл сухого этанола, добавили фенилгидразин (0.1 г, 0.96 ммоль) и 0.5 мл ледяной уксусной кислоты. Смесь нагревали при 78°С в течение 2 часов. Реакционную массу охладили и добавили 30 мл ледяной воды. Продукт реакции экстрагировали хлороформом (3×30 мл), объединенные органические экстракты промывали раствором соли и сушили над CaCl2. Растворитель упаривали при пониженном давлении, получая сырой продукт, который очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью петролейный эфир / этилацетат, 1:1.
(3αS,4αS,4βS,7S,13αS)-4α,4β,7,13α-Тетраметил-1-(4-метилпент-3-ен-1-ил)-3α,4,4α,4β,5,6,6α,7,8,13,13α,13β,15,15α-тетрадекагидрофуро[3'',2'':3',4']циклопента[1',2':5,6]нафто[2,1-b]карбазол-2,14-дион (1). Порошок коричневого цвета; выход 75%; т.пл. 194-196°С, [α] 20 D +31.2° (с 0.855, CHCl3). Спектр ЯМР 1Н (CDCl3, δ, м.д.): 1.03 (3Н, с, Н-19), 1.14 (3Н, с, Н-18), 1.19-1.22 (1Н, м, Н-6а), 1.28-1.36 (1Н, м, Н-7а), 1.33 (3Н, д, J = 6.5 Гц, Н-28), 1.38 (3Н, с, Н-30), 1.49 (1Н, д, J = 7.1 Гц, Н-15а), 1.63 (3Н, с, Н-27), 1.72 (3Н, с, Н-26), 1.74-1.91 (1Н, м, Н-5), 1.75-1.87 (1H, м, Н-6b), 2.04-2.14 (1H, м, Н-7b), 2.21-2.31 (2Н, м, Н-23), 2.25-2.39 (1Н, м, Н-15b), 2.37-2.48 (2Н, м, Н-22), 2.61 (1H, с, Н-9), 2.64-2.73 (1Н, м, Н-4), 2.74-2.88 (2Н, м, Н-12), 2.75-2.82 (1Н, м, Н-1а), 3.37 (1Н, дд, J = 5.0, 13.0 Гц, Н-13), 3.77 (1Н, д, J = 16.0 Гц, Н-1b), 5.02 (1Н, дд, J = 4.5, 10.5 Гц, Н-16), 5.13 (1Н, т, J = 6.0 Гц, Н-24), 7.09 (1Н, ддд, J3'-2' = 7.5 Гц, J3'-4' = 7.5 Гц, J3'-5' = 1.4 Гц, Н-4'), 7.15 (1Н, ддд, J4'-2' = 1.4 Гц, J4'-3' = 7.5 Гц, J4'-5' = 7.1 Гц, Н-3'), 7.32 (1Н, ддд, J5'-2' = 0.1 Гц, J5'-4' = 7.1 Гц, J5'-3' = 1.4 Гц, Н-5'), 7.55 (1Н, ддд, J2'-5' = 0.1 Гц, J2'-3' = 7.5 Гц, J2'-4' = 1.4 Гц, Н-2').
Спектр ЯМР 13С (CDCl3, δ, м.д.): 17.18 (СН3, С-28), 17.83 (СН3, С-27), 19.73 (СН3, С-18), 20.34 (СН2, С-6), 20.60 (СН3, С-19), 24.12 (СН2, С-22), 25.68 (СН3, С-30), 25.72 (СН3, С-26), 27.16 (СН2, С-23), 29.80 (СН, С-4), 30.96 (СН2, С-1), 33.64 (СН2, С-7), 33.73 (СН2, С-15), 37.47 (С, С-10), 40.50 (СН2, С-12), 40.79 (СН, С-13), 41.60 (С, С-8), 47.51 (СН, С-5), 54.52 (С, С-14), 58.60 (СН, С-9), 81.65 (СН, С-16), 110.19 (С, С-2), 110.44 (СН, С-5'), 118.18 (СН, С-2'), 119.19 (СН, С-3'), 121.18 (СН, С-4'), 122.86 (СН, С-24), 125.42 (С, С-20), 128.42 (С, С-1'), 133.32 (С, С-25), 136.06 (С, С-6'), 137.36 (СН, С-3), 166.89 (С, С-17), 175.85 (С, С-21), 208.54 (С, С-11). Масс-спектр (MALDI TOF/TOF), m/z (Iотн., %): 525.416 [М] (100), 548.903 [M+Na] (49). Вычислено для C35H43NO3: С, 79.96; Н, 8.24; N, 2.66%. Найдено: С, 79.79; Н, 8.21; N, 2.68%.
Пример 2. Дикетон (7) (0.1 г, 0. 21 ммоль) растворили в 5 мл сухого этанола, добавили фенилгидразин (0.07 г, 0.63 ммоль) и 0.5 мл ледяной уксусной кислоты. Смесь нагревали при 78°С в течение 2 часов. Реакционную массу охладили и добавили 30 мл ледяной воды. Продукт реакции экстрагировали хлороформом (3×30 мл), объединенные органические экстракты промывали раствором соли и сушили над CaCl2. Растворитель упаривали при пониженном давлении, получая сырой продукт, который очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью петролейный эфир / этилацетат, 2:1.
Метил (2Z)-2-[(2S,3αS,3βS,6S,12αS)-2-(ацетилокси)-3α,3β,6,12α-тетраметил-13-оксо-3,3α,3β,4,5,5α,6,7,12,12α,12β,13,14,14α-тетрадекагидроциклопента[5,6]нафто[2,1-b]карбазол-1(2H)-илиден]-6-метилгепт-5-еноат (2).
Порошок коричневого цвета; выход 80%; т.пл. 185-187°С, [α] 20 D +78.5° (с 0.923, CHCl3). Спектр ЯМР 1Н (CDCl3, δ, м.д.): 1.03 (3Н, с, Н-19), 1.15-1.23 (1Н, м, Н-6а), 1.18-1.28 (1Н, м, Н-7а), 1.22 (3Н, с, Н-30), 1.25 (3Н, с, Н-18), 1.32 (3Н, д, J = 6.7 Гц, Н-28), 1.47 (1Н, д, J = 14.3 Гц, Н-15а), 1.64 (3Н, с, Н-27), 1.71 (3Н, с, Н-26), 1.72-1.79 (1Н, м, Н-6b), 1.72-1.82 (1H, м, Н-5), 2.04-2.21 (2Н, м, Н-23), 2.05 (3Н, с, O-С(O)СН 3), 2.06-2.13 (1H, м, Н-7b), 2.40-2.47 (2Н, м, Н-22), 2.60-2.69 (1Н, м, Н-4), 2.71 (1Н, с, Н-9), 2.72-2.81 (1Н, м, Н-12а), 2.81 (1Н, д, J = 15.9 Гц, Н-1а), 2.93-3.01 (1Н, м, Н-13), 2.96-3.05 (1Н, м, Н-12b), 3.70 (3Н, с, С(О)ОСН 3), 3.77 (1Н, д, J = 15.9 Гц, Н-1b), 5.12 (1Н, т, J = 6.5 Гц, Н-24), 5.95 (1Н, д, J = 8.3 Гц, Н-16), 7.14 (1Н, ддд, J4'-2' = 1.5 Гц, J4'-3' = 7.5 Гц, J4'-5' = 7.0 Гц, Н-4'), 7.10 (1Н, ддд, J3'-2' = 7.4 Гц, J3'-4' = 7.5 Гц, J3'-5' = 1.5 Гц, Н-3'), 7.31 (1Н, ддд, J5'-2' = 0.1 Гц, J5'-4' = 7.0 Гц, J5'-3' = 1.5 Гц, Н-5'), 7.55 (1Н, ддд, J2'-5' = 0.1 Гц, J2'-3' = 7.4 Гц, J2'-4' = 1.5 Гц, Н-2').
Спектр ЯМР 13С (CDCl3, δ, м.д.): 16.95 (СН3, С-18), 17.17 (СН3, С-28), 17.78 (СН3, С-27), 20.64 (СН2, С-6), 20.87 (СН3, С-19), 20.97 (СН3, O-С(O)СН3), 24.22 (СН3, С-30), 25.76 (СН3, С-26), 27.89 (СН2, С-23), 29.03 (СН2, С-22), 29.80 (СН, С-4), 30.96 (СН2, С-1), 33.90 (СН2, С-7), 37.27 (С, С-10), 38.20 (СН2, С-15), 40.56 (С, С-8), 44.60 (СН2, С-12), 46.53 (СН, С-13), 47.44 (СН, С-5), 48.74 (С, С-14), 51.57 (СН3, С(O)ОСН3), 57.64 (СН, С-9), 74.28 (СН, С-16), 110.30 (С, С-2), 110.41 (СН, С-5'), 118.20 (СН, С-2'), 119.12 (СН, С-3'), 121.08 (СН, С-4'), 122.60 (СН, С-24), 128.49 (С, С-1'), 131.80 (С, С-20), 133.10 (С, С-25), 136.08 (С, С-6'), 137.47 (СН, С-3), 145.68 (С, С-17), 170.06 (С, С-21), 170.28 (С, O-С(O)СН3), 210.12 (С, С-11). Масс-спектр (MALDI TOF/TOF), m/z (Iотн., %): 599.354 [М] (100), 638.297 [М+К] (63). Вычислено для C38H49NO5: С, 76.09; Н, 8.23; N, 2.34%. Найдено: С, 76.13; Н, 8.20; N, 2.32%.
Контроль реакции осуществляли методом ТСХ на пластинах Sorbfil (Сорбполимер, Краснодар, Россия), проявляли 10% раствором серной кислоты. Для колоночной хроматографии использовали силикагель L (50-160 мкм) марки КСКГ. Температура плавления определена на приборе РНМК 80/2617. Спектры ЯМР 1D (1Н, 13С) и 2D (COSY, NOESY, HSQC, НМВС) сняты на спектрометре Bruker Avance 500 (125.78 МГц для 13С и 500.17 МГц для 1Н) с использованием стандартных импульсных последовательностей фирмы Bruker, внутренний стандарт Me4Si, растворитель - CDCl3. Оптические углы измерены на поляриметре Perkin-Elmer 341. Масс-спектры MALDI TOF/TOF получены на спектрометре Bruker Autoflex ТМ III Smartbeam с использованием матрицы 3-(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)проп-2-еновой кислоты (синапиновая кислота).
Противомикробный скрининг соединений (1) и (2) проводили в CO-ADD (The Community for Antimicrobial Drug Discovery), финансируемым Wellcome Trust (Великобритания) и Университетом Квинсленда (Австралия), на пяти бактериальных штаммах: Escherichia coli (Е. coli) АТСС 25922, Klebsiella pneumoniae (K. pneumoniae) ATCC 700603, Acinetobacter baumannii (A. baumannii) ATCC 19606, Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) ATCC 27853 и Staphylococcus aureus (S. aureus) ATCC 43300. Противогрибковую активность определяли на двух грибковых штаммах: Candida albicans (С. albicans) ATCC 90028 и Cryptococcus neoformans (С. neoformans) ATCC 208821.
Первичный скрининг противомикробной активности проводился путем тестов на ингибирование размножения клеток, используя образцы в одной (32 мкг/мл) концентрации. Аликвоту каждого образца в ДМСО помещали в 384-луночный планшет и обрабатывали соответствующей бактериальной культурой. Ингибирование роста бактерий определяли спектрофотометрически при 600 нм на монохромном микропланшетном ридере Tecan M1000 Pro. Процент ингибирования роста рассчитывали для каждой лунки с использованием отрицательного контроля (только для среды) и положительного контроля (бактерии без ингибиторов) на той же пластинке. В случае если один или оба раза наблюдалось ингибирование роста ≥80%, соединение считалось активным (Таблица 1).
Figure 00000005
При первичном скрининге было выявлено наличие противомикробной активности у нафто[2,1-b]карбазолпроизводных фузидовой кислоты (1) и (2) в отношении культуры бактерий Staphylococcus aureus. Для соединений (1) и (2) была определена минимальная ингибирующая концентрация в отношении вышеуказанной культуры, а также изучена цитотоксическая и гемолитическая активности.
Минимальную ингибирующую концентрацию (MIC; мкг/мл) устанавливали в соответствии с рекомендациями Института клинических и лабораторных стандартов (Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), США), определяя наименьшую концентрацию, при которой было обнаружено полное ингибирование бактерий или грибов. Скрининг проводился методом серийных разведений. Образцы готовились в ДМСО в тестовой концентрации 32 мкг/мл. Все бактерии культивировались на агаре Мюллера Хинтона при 37°С в течение ночи. Образец каждой культуры затем разбавлялся в 40 раз и инкубировался при 37°С в течение 1,5-3 ч. Полученные культуры добавлялись в каждую лунку 384-луночного планшета, содержащую исследуемый образец (плотность клеток 5×105 КОЕ/мл и общий объем 50 мкл). Все планшеты накрывались и инкубировались при 37°С в течение 18 ч без встряхивания. Ингибирование роста бактерий определялось измерением поглощения при 600 нм с использованием монохромного микропланшетного ридера Tecan M1000 Pro. Процент ингибирования роста рассчитывался для каждой лунки с использованием отрицательного контроля (только для среды) и положительного контроля (бактерии без ингибиторов) на той же пластине. Значения ингибирования определялись с помощью модифицированных Z-показателей, рассчитанных с использованием медианы и медианного абсолютного отклонения (MAD) образцов (без контроля) на той же пластине. Образцы с величиной ингибирования выше 80% и Z-оценкой выше 2,5 для обеих реплик классифицировались как активные вещества. Образцы с показателями ингибирования от 50 до 80% и Z-оценкой выше 2,5 для обеих реплик классифицировались как частично активные.
Тесты проводились в двойном повторе. Максимальный процент ингибирования роста обозначался как DMax. Хиты были классифицированы при MIC≤16 мкг/мл или MIC≤10 мкМ в любой реплике (n=2 на разных пластинах).
Цитотоксическое действие определяли на клеточной линии эмбриональных почек человека HEK293 путем определения концентрации, вызывающей гибель 50% клеток (Hk СС50). Ингибирование роста клеток HEK293 определяли, измеряя флуоресценцию после добавления 5 мкл 25 мкг/мл резазурина (конечная концентрация 2.3 мкг/мл) и после инкубации в течение еще 3 ч при 37°С в 5% CO2. Интенсивность флуоресценции измеряли с использованием монохромного микропланшетного ридера Tecan M1000 Pro с использованием автоматического вычисления коэффициента усиления. Максимальный процент цитотоксичности обозначали как DMax. Соединение считалось токсичным при СС50≤32 мкг/мл или СС50≤10 мкМ. Кроме того, образцы были отмечены как частичные цитотоксические, если DMax≥50%, даже при СС50 выше максимальной тестируемой концентрации.
Гемолитическую активность (Hm НС10 и НС50 - концентрация при 10% и 50% гемолизе, соответственно) определяли путем измерения поглощения при 405 мм супернатанта - надосадочной жидкости, образованной после инкубации в течение 1 ч при 37°С планшетов, содержащих образцы соединений с добавленными к ним промытыми клетками крови человека, и последующего центрифугирования при 1000 об/мин в течение 10 мин. Абсорбцию измеряли с использованием монохромного микропланшетного ридера Tecan M1000 Pro.
Максимальный процент гемолиза представлен как DMax. Низкое значение DMax при НС10>32 мкг/мл (максимально испытанная концентрация) указывает на образцы без гемолитической активности. Образцы, обладающие гемолитической активностью, были охарактеризованы при НС10≤32 мкг/мл. Кроме того, образцы были помечены как частично гемолитические, если DMax≥50%, даже при НС10>максимальной тестируемой концентрации.
«Колистин» и «Ванкомицин» были использованы в качестве положительных стандартов бактериального ингибирования для грамотрицательных и грамположительных бактерий, соответственно. «Флуконазол» использовали в качестве стандартного ингибитора гриба для С. albicans и С. neoformans. «Тамоксифен» использовали в качестве положительного стандарта цитотоксичности. «Мелиттин» использовали в качестве положительного гемолитического стандарта.
Методика тестирования противомикробной, фунгицидной, цитотоксической и гемолитической активности in vitro соединений приведена также на сайте http://www.co-add.org.
Образцы (3αS,4αS,4βS,7S,13αS)-4α,4β,7,13α-тетраметил-1-(4-метилпент-3-ен-1-ил)-3α,4,4α,4β,5,6,6α,7,8,13,13α,13β,15,15α-тетрадекагидрофуро[3'',2'':3',4']цикло-пента[1',2':5,6]нафто[2,1-b]карбазол-2,14-диона (1) и метил (2Z)-2-[(2S,3αS,3βS,6S,12αS)-2-(ацетилокси)-3α,3β,6,12α-тетраметил-13-оксо-3,3α,3β,4,5,5α,6,7,12,12α,12β,13,14,14α-тетрадекагидроциклопента[5,6]нафто[2,1-b]карбазол-1(2H)-илиден]-6-метилгепт-5-еноата (2) в концентрации <=0.25 мкг/мл показали противомикробную активность, ингибируя рост и размножение >100% грамположительных бактерий Staphylococcus aureus. Гемолитическая активность производных (1) и (2) не превышает 2.7% даже при максимально тестируемой концентрации >32 мкг/мл, что ниже таковой у фузидовой кислоты в 3.5 раза. Цитотоксичность соединения (1) сравнима с фузидовой кислотой, а соединение (2) в 2.8 раз менее токсично по сравнению с нативным антибиотиком (Таблица 2).
Таким образом, нафто[2,1-b]карбазолпроизводные фузидовой кислоты (1) и (2) проявляют антибактериальную активность в отношении патогенных микроорганизмов Staphylococcus aureus, сравнимую с активностью нативного антибиотика, при низкой токсичности и обладая минимальным гемолитическим действием при максимально тестируемой концентрации.
Figure 00000006

Claims (4)

1. Нафто[2,1-b]карбазолпроизводное фузидовой кислоты формулы (1) или (2)
Figure 00000007
.
2. Способ получения нафто[2,1-b]карбазолпроизводного фузидовой кислоты по п. 1, выбранного из соединения (1) или соединения (2), заключающийся во взаимодействии соответствующего 3,11-диоксопроизводного фузидовой кислоты с 3 экв. фенилгидразина в среде сухого этанола при кипячении в течение 2 часов в условиях реакции Фишера.
3. Применение нафто[2,1-b]карбазолпроизводного фузидовой кислоты по п. 1, выбранного из соединения (1) или соединения (2), в качестве средства с антибактериальной активностью для борьбы с заболеваниями человека и животных, вызванными грамположительными бактериями Staphylococcus aureus.
RU2019131784A 2019-10-08 2019-10-08 НОВЫЕ НАФТО[2,1-b]КАРБАЗОЛПРОИЗВОДНЫЕ ФУЗИДОВОЙ КИСЛОТЫ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА RU2746947C2 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019131784A RU2746947C2 (ru) 2019-10-08 2019-10-08 НОВЫЕ НАФТО[2,1-b]КАРБАЗОЛПРОИЗВОДНЫЕ ФУЗИДОВОЙ КИСЛОТЫ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019131784A RU2746947C2 (ru) 2019-10-08 2019-10-08 НОВЫЕ НАФТО[2,1-b]КАРБАЗОЛПРОИЗВОДНЫЕ ФУЗИДОВОЙ КИСЛОТЫ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА

Publications (3)

Publication Number Publication Date
RU2019131784A3 RU2019131784A3 (ru) 2021-04-08
RU2019131784A RU2019131784A (ru) 2021-04-08
RU2746947C2 true RU2746947C2 (ru) 2021-04-22

Family

ID=75345936

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2019131784A RU2746947C2 (ru) 2019-10-08 2019-10-08 НОВЫЕ НАФТО[2,1-b]КАРБАЗОЛПРОИЗВОДНЫЕ ФУЗИДОВОЙ КИСЛОТЫ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2746947C2 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2807924C1 (ru) * 2023-03-17 2023-11-21 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт элементоорганических соединений им. А.Н. Несмеянова Российской академии наук (ИНЭОС РАН) N-ЗАМЕЩЕННЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ 6α-ПИПЕРАЗИНОМЕТИЛАНДРОСТ-4-ЕН-3,17-ДИОНА, ОБЛАДАЮЩИЕ АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТЬЮ, И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115819322B (zh) * 2023-02-14 2023-04-25 成都摩诃大龙医药科技有限公司 一种抗微生物的咔唑衍生物及其制备方法和用途

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2353622C2 (ru) * 2003-07-16 2009-04-27 Лео Фарма А/С Новые производные фузидовой кислоты

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2353622C2 (ru) * 2003-07-16 2009-04-27 Лео Фарма А/С Новые производные фузидовой кислоты

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
W. Gu, et al, Bioorganic Med. Chem. Lett., 2014, 24, стр. 328-331. W. Gu et al, Bioorganic Med. Chem. Lett., 2015, 25, стр. 554-557. W. Gu et al, Eur. J. Med. Chem. 2010, 45, стр. 4692-4696. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2807924C1 (ru) * 2023-03-17 2023-11-21 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт элементоорганических соединений им. А.Н. Несмеянова Российской академии наук (ИНЭОС РАН) N-ЗАМЕЩЕННЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ 6α-ПИПЕРАЗИНОМЕТИЛАНДРОСТ-4-ЕН-3,17-ДИОНА, ОБЛАДАЮЩИЕ АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТЬЮ, И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ

Also Published As

Publication number Publication date
RU2019131784A3 (ru) 2021-04-08
RU2019131784A (ru) 2021-04-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Shridhar et al. Synthesis and biological activities of Bis alkyl 1, 3, 4-oxadiazole incorporated azo dye derivatives
Carté et al. Defensive metabolites from three nembrothid nudibranchs
van Klink et al. Triketones active against antibiotic-resistant bacteria: synthesis, structure–activity relationships, and mode of action
Al-Footy et al. Rare pyrane-based cembranoids from the Red Sea soft coral Sarcophyton trocheliophorum as potential antimicrobial–antitumor agents
Hryniewicka et al. Synthesis and antimicrobial properties of steroid-based imidazolium salts
Carta et al. Quinoxalin-2-ones: Part 5. Synthesis and antimicrobial evaluation of 3-alkyl-, 3-halomethyl-and 3-carboxyethylquinoxaline-2-ones variously substituted on the benzo-moiety
Li et al. 6-Bromoindolglyoxylamido derivatives as antimicrobial agents and antibiotic enhancers
Prajuli et al. Synthesis of some pyrazolone derivatives and evaluation of its antibacterial and cytotoxic activity
Sjögren et al. Antifouling activity of synthesized peptide analogs of the sponge metabolite barettin
WO2006132594A1 (en) Novel dipodazine compounds and applications
Bieleszová et al. New fluorescently labeled auxins exhibit promising anti-auxin activity
Liu et al. Chalcone‐Benzotriazole Conjugates as New Potential Antimicrobial Agents: Design, Synthesis, Biological Evaluation and Synergism with Clinical Drugs
RU2746947C2 (ru) НОВЫЕ НАФТО[2,1-b]КАРБАЗОЛПРОИЗВОДНЫЕ ФУЗИДОВОЙ КИСЛОТЫ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА
Ibrahima et al. Synthesis of Some New Chalcone and 4, 5-Dihydro-1H-PyrazoleDerivatives as Potential Antimicrobial Agents
Gaur et al. Synthesis, characterization, and antifungal activity of biaryl-based bis (1, 2, 3-triazoles) using click chemistry
Ni et al. Synthesis and application of indole esters derivatives containing acrylamide group as antifouling agents
Srinivas Synthesis and Antimicrobial Activity of Bis [4-methoxy-3-(6-aryl-7H-[1, 2, 4] triazolo [3, 4-b][1, 3, 4] thiadiazin-3-yl) phenyl] methanes and Bis [(triazolo [3, 4-b] thiadiazepin-3-yl) phenyl] methanes.
Lad et al. Synthesis of modified pyridine and bipyridine substituted coumarins as potent antimicrobial agents
Sabour Synthesis of some thymol derivatives for enhanced antibacterial activity
Panchamukhi et al. Synthesis, characterization, antibacterial and antifungal activity of thienopyrimidines and triazolothienopyrimidines
RU2726122C1 (ru) (2Z)-2-[(4α, 5α, 8α, 9β, 13α, 14β, 16β)-16-(АЦЕТИЛОКСИ)-3(Z),11(E)-БИС(ГИДРОКСИИМИНО)-4,8,10,14-ТЕТРАМЕТИЛГОНАН-17-ИЛИДЕН]-6-МЕТИЛГЕПТ-5-ЕНОВАЯ КИСЛОТА, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА
Abd El-Aal et al. Synthesis and antimicrobial activity of certain novel monomethine cyanine dyes
BENNAMARA et al. Alkaloids 8-Hydroxyquinoline derivatives: Synthesis and biological activities
RU2780014C1 (ru) ПРОП-2-ИН-1-ИЛ-(2Z)-2-[(3-альфа, 4-альфа, 8-альфа, 11-альфа, 14-бета, 16-бета)-16-(АЦЕТИЛОКСИ)-3,11-ДИГИДРОКСИ-4,8,10,14-ТЕТРАМЕТИЛГОНАН-17-ИЛИДЕН]-6-МЕТИЛГЕПТ-5-ЕНОАТ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА
RU2726196C1 (ru) N,n&#39;-бис(3-аминопропил)бутан-1,4-диаминопроизводные фузидовой кислоты, проявляющие широкий спектр противомикробной активности