RU2780014C1 - ПРОП-2-ИН-1-ИЛ-(2Z)-2-[(3-альфа, 4-альфа, 8-альфа, 11-альфа, 14-бета, 16-бета)-16-(АЦЕТИЛОКСИ)-3,11-ДИГИДРОКСИ-4,8,10,14-ТЕТРАМЕТИЛГОНАН-17-ИЛИДЕН]-6-МЕТИЛГЕПТ-5-ЕНОАТ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА - Google Patents
ПРОП-2-ИН-1-ИЛ-(2Z)-2-[(3-альфа, 4-альфа, 8-альфа, 11-альфа, 14-бета, 16-бета)-16-(АЦЕТИЛОКСИ)-3,11-ДИГИДРОКСИ-4,8,10,14-ТЕТРАМЕТИЛГОНАН-17-ИЛИДЕН]-6-МЕТИЛГЕПТ-5-ЕНОАТ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА Download PDFInfo
- Publication number
- RU2780014C1 RU2780014C1 RU2021127051A RU2021127051A RU2780014C1 RU 2780014 C1 RU2780014 C1 RU 2780014C1 RU 2021127051 A RU2021127051 A RU 2021127051A RU 2021127051 A RU2021127051 A RU 2021127051A RU 2780014 C1 RU2780014 C1 RU 2780014C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- alpha
- prop
- methylhept
- enoate
- ylidene
- Prior art date
Links
- 230000000845 anti-microbial Effects 0.000 title description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 229960004675 Fusidic Acid Drugs 0.000 claims abstract description 8
- IECPWNUMDGFDKC-MZJAQBGESA-N Fusidic acid Chemical compound O[C@@H]([C@@H]12)C[C@H]3\C(=C(/CCC=C(C)C)C(O)=O)[C@@H](OC(C)=O)C[C@]3(C)[C@@]2(C)CC[C@@H]2[C@]1(C)CC[C@@H](O)[C@H]2C IECPWNUMDGFDKC-MZJAQBGESA-N 0.000 claims abstract description 8
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 claims abstract description 8
- YORCIIVHUBAYBQ-UHFFFAOYSA-N Propargyl bromide Chemical compound BrCC#C YORCIIVHUBAYBQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 206010041925 Staphylococcal infection Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims abstract description 5
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims abstract description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 17
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims 1
- 230000002949 hemolytic Effects 0.000 abstract description 11
- 229940076185 Staphylococcus aureus Drugs 0.000 abstract description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 7
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 7
- 230000002194 synthesizing Effects 0.000 abstract description 7
- 230000000844 anti-bacterial Effects 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 239000005445 natural product Substances 0.000 abstract description 3
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 abstract 2
- 150000000475 acetylene derivatives Chemical class 0.000 abstract 1
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 abstract 1
- -1 diterpene acetylenes Chemical class 0.000 description 16
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 13
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 6
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 6
- 125000001494 2-propynyl group Chemical group [H]C#CC([H])([H])* 0.000 description 5
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 5
- 241000221204 Cryptococcus neoformans Species 0.000 description 5
- 230000001580 bacterial Effects 0.000 description 5
- 230000001472 cytotoxic Effects 0.000 description 5
- 241000588626 Acinetobacter baumannii Species 0.000 description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 description 4
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 4
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 4
- 230000001717 pathogenic Effects 0.000 description 4
- 244000052769 pathogens Species 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 230000000843 anti-fungal Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 3
- 229930004069 diterpenes Natural products 0.000 description 3
- 238000000074 matrix-assisted laser desorption--ionisation tandem time-of-flight detection Methods 0.000 description 3
- 150000002966 pentacyclic triterpenoids Chemical class 0.000 description 3
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 2
- PCMORTLOPMLEFB-ONEGZZNKSA-N Sinapinic acid Chemical compound COC1=CC(\C=C\C(O)=O)=CC(OC)=C1O PCMORTLOPMLEFB-ONEGZZNKSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor Effects 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000004141 diterpene derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 238000004362 fungal culture Methods 0.000 description 2
- 230000000855 fungicidal Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- RSWGJHLUYNHPMX-HNBVOPMISA-N Abietic acid Natural products C([C@H]12)CC(C(C)C)=CC1=CC[C@@H]1[C@]2(C)CCC[C@@]1(C)C(O)=O RSWGJHLUYNHPMX-HNBVOPMISA-N 0.000 description 1
- RSWGJHLUYNHPMX-ONCXSQPRSA-N Abietic acid Chemical compound C([C@@H]12)CC(C(C)C)=CC1=CC[C@@H]1[C@]2(C)CCC[C@@]1(C)C(O)=O RSWGJHLUYNHPMX-ONCXSQPRSA-N 0.000 description 1
- 206010060945 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 210000000601 Blood Cells Anatomy 0.000 description 1
- 229940095731 Candida albicans Drugs 0.000 description 1
- 108010078777 Colistin Proteins 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- RFHAOTPXVQNOHP-UHFFFAOYSA-N Fluconazole Chemical compound C1=NC=NN1CC(C=1C(=CC(F)=CC=1)F)(O)CN1C=NC=N1 RFHAOTPXVQNOHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N HCl Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 1
- 206010073071 Hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 229940045505 Klebsiella pneumoniae Drugs 0.000 description 1
- 241000588747 Klebsiella pneumoniae Species 0.000 description 1
- 206010024324 Leukaemias Diseases 0.000 description 1
- 102100011960 MIR7-3HG Human genes 0.000 description 1
- 101710008473 MIR7-3HG Proteins 0.000 description 1
- 206010025650 Malignant melanoma Diseases 0.000 description 1
- 108010036176 Melitten Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 208000002154 Non-Small-Cell Lung Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108009000071 Non-small cell lung cancer Proteins 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- TVDSBUOJIPERQY-UHFFFAOYSA-N Propargyl alcohol Chemical compound OCC#C TVDSBUOJIPERQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940055023 Pseudomonas aeruginosa Drugs 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- PLXBWHJQWKZRKG-UHFFFAOYSA-N Resazurin Chemical compound C1=CC(=O)C=C2OC3=CC(O)=CC=C3[N+]([O-])=C21 PLXBWHJQWKZRKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N Tamoxifen Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN(C)C)=CC=1)/C1=CC=CC=C1 NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 1
- 229960001603 Tamoxifen Drugs 0.000 description 1
- CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)C CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N VANCOMYCIN Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C2C=C3C=C1OC1=CC=C(C=C1Cl)[C@@H](O)[C@H](C(N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H]3C(=O)N[C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](C3=CC(O)=CC(O)=C3C=3C(O)=CC=C1C=3)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)O2)=O)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC)[C@H]1C[C@](C)(N)[C@H](O)[C@H](C)O1 MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N 0.000 description 1
- 229960003165 Vancomycin Drugs 0.000 description 1
- 108010059993 Vancomycin Proteins 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 150000001345 alkine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000005591 charge neutralization Effects 0.000 description 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229960003346 colistin Drugs 0.000 description 1
- XDJYMJULXQKGMM-RVYUQJQSSA-N colistin A Chemical compound CC[C@@H](C)CCCCC(=O)N[C@@H](CCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]1CCNC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCN)NC1=O XDJYMJULXQKGMM-RVYUQJQSSA-N 0.000 description 1
- 238000005100 correlation spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding Effects 0.000 description 1
- 201000007336 cryptococcosis Diseases 0.000 description 1
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N deuterated chloroform Substances [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 1
- 238000007876 drug discovery Methods 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 229960004884 fluconazole Drugs 0.000 description 1
- 238000003260 fluorescence intensity Methods 0.000 description 1
- 230000002538 fungal Effects 0.000 description 1
- 239000000417 fungicide Substances 0.000 description 1
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 1
- 238000005570 heteronuclear single quantum coherence Methods 0.000 description 1
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- VDXZNPDIRNWWCW-JFTDCZMZSA-N melittin Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(N)=O)CC1=CNC2=CC=CC=C12 VDXZNPDIRNWWCW-JFTDCZMZSA-N 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000006011 modification reaction Methods 0.000 description 1
- 229930014626 natural products Natural products 0.000 description 1
- 230000001264 neutralization Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005580 one pot reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- BZKBCQXYZZXSCO-UHFFFAOYSA-N sodium hydride Inorganic materials [H-].[Na+] BZKBCQXYZZXSCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003595 spectral Effects 0.000 description 1
- 230000002588 toxic Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к области синтеза биологически активных аналогов природных соединений, а именно к получению нового представителя ацетиленовых производных фузидовой кислоты - проп-2-ин-1-ил-(2Z)-2-[(3α, 4α, 8α, 11α, 14β, 16β)-16-(ацетилокси)-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгонан-17-илиден]-6-метилгепт-5-еноата, обладающего высокой антибактериальной активностью по отношению к Staphylococcus aureus (MRSA) при низкой токсичности, проявляющего минимальное гемолитическое действие при максимально тестируемой концентрации. Проп-2-ин-1-ил-(2Z)-2-[(3α, 4α, 8α, 11α, 14β, 16β)-16-(ацетилокси)-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгонан-17-илиден]-6-метилгепт-5-еноат получен на основе фузидовой кислоты взаимодействием с эквимолярным количеством пропаргилбромида в среде ацетона при кипячении в течение 2 часов с использованием K2СО3 в качестве основания. Выход проп-2-ин-1-ил-(2Ζ)-2-[(3α, 4α, 8α, 11α, 14β, 16β)-16-(ацетилокси)-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгонан-17-илиден]-6-метилгепт-5-еноата составил 99%. 3 н.п. ф-лы, 2 пр., 1 табл.
Description
Изобретение относится к области синтеза биологически активных аналогов природных соединений, а именно к получению проп-2-ин-1-ил-(2Ζ)-2-[(3α, 4α, 8α, 11α, 14β, 16β)-16-(ацетилокси)-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгонан-17-илиден]-6-метилгепт-5-еноата формулы (1),
обладающего высокой активностью по отношению к Staphylococcus aureus (MRSA):
Известны терминальные дитерпеновые ацетилены (2-4), полученные взаимодействием хлорангидридов малеопимаровой и дигидрохинопимаровой кислот с пропаргиловым спиртом в хлороформе при комнатной температуре или реакцией абиетиновой кислоты с пропаргилбромидом при нагревании в среде ДМФА в присутствии основания K2CO3 [Ε.V. Tret'yakova, G.F. Zakirova, Ε.V. Salimova, О.S. Kukovinets, V.N. Odinokov, L.V. Parfenova. Convenient one-pot synthesis of resin acid Mannich bases as novel anticancer and antifungal agents. Medicinal Chemistry Research. 2018, 27(9), P. 2199-2213] (схема 1).
Изучение антибактериальной активности полученных соединений in vitro в отношении грамположительных (S. aureus) и грамотрицательных (Е. coli, K. Pneumoniae, A. baumannii, P. aeruginosa) микроорганизмов, а также двух грибковых культур (С.albicans, С.neoformans) показало, что дитерпеновые пропаргиловые эфиры неактивны в отношении исследуемых патогенов.
Известны терминальные пропаргильные производные дитерпеноидов (6) и (8), полученные взаимодействием дитерпеновых спиртов (5) и (7) с пропаргилбромидом при кипячении в среде ДМФА в присутствии NaH в качестве основания [Ε. V. Tret'yakova, Ε. V. Salimova, L.V. Parfenova.
Synthesis, modification, and biological activity of propargylated methyl dihydroquinopimarates. Natural Product Research. Published online: 12 May 2020, doi.org/10.1080/14786419.2020.1762187] (схема 2).
Скрининг биологической активности in vitro полученных соединений показал, что они проявляют высокую противоопухолевую активность, полностью подавляя рост клеточных линий лейкемии (CCRF-CEM и SR), немелкоклеточного рака легкого (NCI-H522), меланомы (LOX IMVI и MALME-3M), клеток рака яичников (IGROV1) и рака почки (786-0, UO-31). Изучение антибактериальнго действия in vitro в отношении грамположительных (S. aureus) и грамотрицательных (Е. coli, K. Pneumoniae, A. baumannii, P. aeruginosa) микроорганизмов, а также двух грибковых культур (С.albicans, С.neoformans) установило, что полученные пропаргильные производные не проявляют противомикробного действия в отношении указанных патогенов.
Известны терминальные ацетиленовые производные пентациклических тритерпеноидов (9-12), полученные этерификацией соответствующих тритерпеновых кислот с пропаргилбромидом в ДМФА с использованием K2CO3 в качестве основания [Е.Yu. Yamansarov, I.V. Saltykova, S.V. Kovalev, R.A. Petrov, D.O. Shkil', Ε.I. Seleznev, Ε.K. Beloglazkina, A.G. Majouga. Synthesis and cytotoxicity of new alkyne derivatives of pentacyclic triterpenoids. Russian Chemical Bulletin, International Edition. 2019, 68(4), P. 855-861] (схема 3).
Скрининг противоопухолевой активности полученных соединений in vitro в отношении клеток гепатоцеллюлярной карциномы (HepG2 и Huh7) и рака простаты (РС3) показал, что алкильные производные (6-8) проявляют умеренное цитотоксическое действие в отношении указанных клеточных линий. Изучение антибактериальной активности не проводилось.
Таким образом, синтез пропаргилового эфира фузидовой кислоты (1) в литературе не описан.
Антимикробное и противогрибковое действие данного соединения на штаммах возбудителей бактериальных и грибковых инфекций человека и животных изучено не было.
Задачей предлагаемого изобретения является разработка способа получения нового соединения - проп-2-ин-1-ил-(2Z)-2-[(3α, 4α, 8α, 11α, 14β, 16β)-16-(ацетилокси)-3,11 -дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгонан-17-илиден]-6-метилгепт-5-еноата (1), а также исследование in vitro его антимикробных и противогрибковых свойств.
Синтез заявленного соединения (1) осуществляли следующим образом: фузидовую кислоту (13) вовлекали во взаимодействие с эквимолярным количеством пропаргилбромида в среде ацетона при кипячении в течение 2 часов с использованием K2CO3 в качестве основания (схема 4). После выделения получали пропаргилфузидат (1) с количественным выходом, который представлял собой порошок белого цвета (т.пл. 118-120°С), 
Структура соединения (1) установлена с помощью 1D и 2D спектроскопии ЯМР Ή и Си масс-спектрометрии MALDI TOF/TOF.
Преимущества предлагаемого способа.
В известном способе для получения пропаргильных производных в качестве растворителя используется ДМФА. Очистка реакционной смеси от данного растворителя представляет собой трудоемкий процесс, включающий в себя промывание реакционной массы раствором HCl и последующую нейтрализацию органического экстракта.
В отличие от известного, в предлагаемом способе синтез пропаргильного производного проводится в ацетоне, использование которого в качестве растворителя многократно упрощает процесс выделения и, как следствие, приводит к увеличению выхода конечного продукта.
Сущность изобретения поясняется следующими примерами.
Пример 1. К смеси 0.5 г (0.95 ммоль) фузидовой кислоты (13) и 0.19 г (0.72 ммоль) свежепрокаленного K2CO3 в 30 мл сухого ацетона добавляли по каплям 0.075 мл (0.95 ммоль) пропаргилбромида. Реакционную массу кипятили 2 часа, затем охлаждали. Смесь выливали в ледяную Н2О, выпавший осадок фильтровали, промывали на фильтре 50 мл Н2О и сушили на воздухе. Выход 0.53 г (99%), порошок белого цвета. Т.пл. 118-120°С.
Спектральные характеристики проп-2-ин-1-ил (2Ζ)-2-[(3α, 4α, 8α, 11α, 14β, 16β)-16-(ацетилокси)-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгонан-17-илиден]-6-метилгепт-5-еноата (1)1.
Спектр ЯМР 1Н (CDCl3), δ, м.д.: 0.91 с (3Н, Н18), 0.92 д (3Н, Н28, 3J 7,1 Гц), 0.98 с (3Н, Н19), 0.99-1.17 м (1Н, Н6), 1.05-1.19 м (1Н, Н7), 1.26-1.39 м (1Н, Н15), 1.38 c (3H,H30), 1.45-1.61 м (1Н, Η5), 1.50 д (1Н, Н1, 2J 12.1 Гц), 1.51-1.59 м (1Н, Н9), 1.53-1.71 м (1Н, Н6), 1.61 с (3Н, Н27), 1.63-1.78 м (1Н, Н7), 1.65-1.79 м (1Н, Н2), 1.68 с (3Н, Н26), 1.76-1.88 м (1Н, Н12), 1.80-1.93 м (1Н, Н2), 1.98 с (3Н, ОСОСН 3), 2.02-2.24 м (2Н, Н23), 2.03-2.16 м (1Н, Н4), 2.09-2.21 м (1Н, Н1), 2.14-2.26 м (1Н, Н15), 2.32 д (1Н, Н12, 2J 13.0 Гц), 2.40-2.72 м (2Н, Н22), 2.43-2.51 м (1Н, Н3'), 3.06 д (1Н, Н13, 3J 11.5 Гц), 3.68-3.77 м (1Н, Н3), 4.29-4.38 м (1Η, Η11), 4.60 дд (1Н, Н1', 3J 1.3 Гц, 2J 15.5 Гц), 4.71 дд (1Н, Н1', 3J 1.3 Гц, 2J 15.5 Гц), 5.10 т (1Н, Н24, 3J6.5 Гц), 5.86 д (1Н, Н16, 3J8.5 Гц).
Спектр ЯМР 13С (CDCl3), δ, м.д.: 15.96 (С28), 17.77 (С27), 17.79 (С18), 20.87 (С6), 21.08 (ОСОСНз), 23.04 (С19), 23.88 (С30), 25.74 (С26), 28.36 (С23), 28.92 (С22), 29.88 (С2), 30.12 (С1), 32.06 (С7), 35.54 (С12), 35.88 (С4), 36.42 (С5), 36.89 (С10), 38.99 (С15), 39.45 (С8), 44.19 (С13), 48.67 (С14), 49.28 (С9), 51.71 (С1'), 68.21 (С11), 71.42 (С3), 74.40 (С16), 74.87 (С2'), 77.62 (С3'), 122.98 (С24), 129.57 (С20), 132.69 (С25), 149.79 (С17), 169.07 (С21), 170.33 (ОСОСН3).
Масс-спектр (MALDI TOF/TOF), m/z (Ioтн, %): 577 (63.9) [M+Na]+, 593 (100) [М+K]+.
1Контроль реакции осуществляли методом ТСХ на пластинах Sorbfil (Сорбполимер, Краснодар, Россия), проявляли 10% раствором серной кислоты. Температура плавления определена на приборе РНМК 80/2617. Спектры ЯМР 1D (1H, 13С) и 2D (COSY, NOESY, HSQC, НМВС) сняты на спектрометре Bruker Avance 500 (125.78 МГц для 13С и 500.17 МГц для 1Н) с использованием стандартных импульсных последовательностей фирмы Bruker, внутренний стандарт Me4Si, растворитель - CDCI3. Оптические углы измерены на поляриметре Perkin-Elmer 341. Масс-спектры MALDI TOF/TOF получены на спектрометре Bruker Autoflex ТМ III Smartbeam с использованием матрицы 3-(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)проп-2-еновой кислоты (синапиновая кислота).
Пример 2. Противомикробный скрининг соединения (1) проводили в CO-ADD (The Community for Antimicrobial Drug Discovery), финансируемым Wellcome Trust (Великобритания) и Университетом Квинсленда (Австралия), на пяти бактериальных штаммах: Escherichia coli (Е. coli) АТСС 25922, Klebsiella pneumoniae (К. pneumoniae) АТСС 700603, Acinetobacter baumannii (A. baumannii) АТСС 19606, Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) ATCC 27853 и Staphylococcus aureus (S. aureus (MRSA)) ATCC 43300. Противогрибковую активность определяли на двух грибковых штаммах: Candida albicans (С.albicans) ATCC 90028 и Cryptococcus neoformans (C. neoformans) ATCC 208821.
Первичный скрининг противомикробной активности проводился путем тестов на ингибирование размножения клеток, используя образцы в одной (32 мкг/мл) концентрации. Аликвоту каждого образца в ДМСО помещали в 384-луночный планшет и обрабатывали соответствующей бактериальной культурой. Ингибирование роста бактерий определяли измерением поглощения при 600 нм (OD600) с использованием монохромного микропланшетного ридера Tecan M1000 Pro. Процент ингибирования роста рассчитывали для каждой лунки с использованием отрицательного контроля (только для среды) и положительного контроля (бактерии без ингибиторов) на той же пластинке. Все тесты продублированы. В случае если один или оба раза наблюдалось ингибирование роста ≥ 80%, соединение считалось активным.
При первичном скрининге было выявлено наличие противомикробной активности у проп-2-ин-1-ил-(2Z)-2-[(3α, 4α, 8α, 11α, 14β, 16β)-16-(ацетил-окси)-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгонан-17-илиден]-6-метилгепт-5-еноата (1) в отношении культуры бактерий Staphylococcus aureus (MRSA). Для соединения (1) была определена минимальная ингибирующая концентрация в отношении вышеуказанной культуры, а также изучена цитотоксическая и гемолитическая активности.
Минимальную ингибирующую концентрацию (MIC; мкг/мл) определяли в соответствии с рекомендациями Института клинических и лабораторных стандартов (CLSI, https://clsi.org/), определяя самую низкую концентрацию, при которой было обнаружено полное ингибирование бактерий или грибов. Тесты проводились в двойном повторе. Максимальный процент ингибирования роста обозначался как Dmax. Хиты были классифицированы при MIC ≤ 16 мкг/мл или MIC ≤ 10 мкМ в любой реплике (n=2 на разных планшетах).
Цитотоксическое действие (Hk; СС50 (мкг/мл)) определяли на клеточной линии эмбриональных почек человека HEK293 путем определения концентрации, вызывающей гибель 50% клеток. Ингибирование роста клеток НЕК293 определяли, измеряя флуоресценцию после добавления 5 мкл 25 мкг / мл резазурина (конечная концентрация 2.3 мкг/мл) и после инкубации в течение еще 3 ч при 37°С в 5% СО2. Интенсивность флуоресценции измеряли с использованием монохромного микропланшетного ридера Tecan Μ1000 Pro с использованием автоматического вычисления коэффициента усиления. Максимальный процент цитотоксичности обозначали как Dmax. Соединение считалось токсичным при СС50 ≤ 32 мкг / мл или СС50 ≤ 10 мкМ. Кроме того, образцы были отмечены как частичные цитотоксические, если Dmax ≥ 50%, даже при СС50 выше максимальной тестируемой концентрации.
Гемолитическую активность (Hm; НС50 (мкг/мл)) определяли путем измерения поглощения при 405 мм супернатанта - надосадочной жидкости, образованной после инкубации в течение 1 ч при 37°С планшетов, содержащих образцы соединений с добавленными к ним промытыми клетками крови человека, и последующего центрифугирования при 1000 об/мин в течение 10 мин. Абсорбцию измеряли с использованием монохромного микропланшетного ридера Tecan Μ1000 Pro. Максимальный процент гемолиза представлен как Dmax. Низкое значение Dmax при НС50 ≥ 32 мкг/мл (максимально испытанная концентрация) указывает на образцы без гемолитической активности. Образцы, обладающие гемолитической активностью, были охарактеризованы при НС50 ≤ 32 мкг/мл. Кроме того, образцы были помечены как частично гемолитические, если Dmax ≥ 50%, даже при НС50 > максимальной тестируемой концентрации.
«Колистин» и «Ванкомицин» использованы в качестве положительных стандартов оценки бактериального ингибирования для грамотрицательных и грамположительных бактерий, соответственно. «Флуконазол» использован в качестве стандартного фунгицидного средства для С.albicans и С.neoformans. «Тамоксифен» и «Мелиттин» использованы в качестве положительного стандарта оценки цитотоксичности и гемолитического эффекта, соответственно. Методики тестирования противомикробной, фунгицидной, цитотоксической и гемолитической активности in vitro соединений приведены на сайте http://www.co-add.org.
Образец проп-2-ин-1-ил-(2Z)-2-[(3α, 4α, 8α, 11α, 14β, 16β)-16-(ацетил-окси)-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгонан-17-илиден]-6-метилгепт-5-еноата (1) в концентрации 0.25 мкг/мл показал противомикробную активность, ингибируя рост и размножение>80% грамположительных бактерий Staphylococcus aureus (MRSA). Гемолитическая активность соединения (1) не превышает 7% даже при максимально тестируемой концентрации 32 мкг/мл, что ниже таковой у фузидовой кислоты в 1.5 раза. Цитотоксичность соединения (1) сравнима с аналогичным показателем у фузидовой кислотой (Таблица 1).
Таким образом, соединение (1) проявляет противомикробную активность в отношении патогенных микроорганизмов Staphylococcus aureus (MRSA) при низкой токсичности и обладает минимальным гемолитическим действием при максимально тестируемой концентрации.
Claims (4)
1. Проп-2-ин-1-ил-(2Z)-2-[(3α, 4α, 8α, 11α, 14β, 16β)-16-(ацетилокси)-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгонан-17-илиден]-6-метилгепт-5-еноат (1)
2. Способ получения проп-2-ин-1-ил-(2Z)-2-[(3α, 4α, 8α, 11α, 14β, 16β)-16-(ацетилокси)-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгонан-17-илиден]-6-метилгепт-5-еноата (1), заключающийся во взаимодействии фузидовой кислоты с эквимолярным количеством пропаргилбромида в среде ацетона при кипячении в течение 2 часов с использованием K2СО3 в качестве основания.
3. Применение соединения формулы (1) в качестве средства с антибактериальной активностью для борьбы с заболеваниями человека и животных, вызванными грамположительными бактериями Staphylococcus aureus (MRSА).
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2780014C1 true RU2780014C1 (ru) | 2022-09-19 |
Family
ID=
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2819293C1 (ru) * | 2023-06-22 | 2024-05-16 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Уфимский федеральный исследовательский центр Российской академии наук | Применение оснований Манниха на основе фузидовой кислоты в качестве соединений с противоопухолевой активностью |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002077007A2 (en) * | 2001-03-21 | 2002-10-03 | Leo Pharma A/S | Novel polyaminated fusidic acid derivatives |
| RU2334758C2 (ru) * | 2002-04-05 | 2008-09-27 | Лео Фарма А/С | Производные разветвленного полиаминостероида |
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002077007A2 (en) * | 2001-03-21 | 2002-10-03 | Leo Pharma A/S | Novel polyaminated fusidic acid derivatives |
| RU2334758C2 (ru) * | 2002-04-05 | 2008-09-27 | Лео Фарма А/С | Производные разветвленного полиаминостероида |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| E.V. Salimova et al. "Reductive amination of fusidane triterpenoid ketones" Mediterranean Journal of Chemistry, 7(3), 2018, 198-203. А.Г. Мамаев и др. "Аминопропилтритерпеноиды фузиданового ряда" Международный юбилейный конгресс, посвященный 60-летию Иркутского института химии им. А.Е. Фаворского СО РАН "Фаворский-2017" Сборник тезисов докладов, 2017, 193. * |
| Salimova E.V., Mamaev A.G., Tret’yakova E.V., Kukovinets O.S., Mavzyutov A.R., Shvets K.Y., et al. Synthesis and Biological Activity of Cyanoethyl Derivatives of Fusidic Acid. Russ. J. Org. Chem. 54, 2018, 1411-1418. 10.1134/S1070428018090245. Salimova E.V., Tret’yakova E.V., Parfenova L.V. Synthesis and Cytotoxic Activity of 3-amino Substituted Fusidane Triterpenoids. Med. Chem. Res. 28, 2019,2171-2183. 10.1007/s00044-019-02445-y. Salimova E.V., Magafurova A.A., Tretyakova E.V., Kukovinets O.S., Parfenova L.V. Indole Derivatives of Fusidane Triterpenoids: Synthesis and the Antibacterial Activity. Chem. Heterocycl Comp. 56, 2020, 800-804. 10.1007/s10593-020-02733-1. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2819293C1 (ru) * | 2023-06-22 | 2024-05-16 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Уфимский федеральный исследовательский центр Российской академии наук | Применение оснований Манниха на основе фузидовой кислоты в качестве соединений с противоопухолевой активностью |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Hryniewicka et al. | Synthesis and antimicrobial properties of steroid-based imidazolium salts | |
| Tatipamula et al. | Antimicrobial and anti tubercular activities of isolates and semi synthetic derivatives of lichen Ramalina leiodea (Nyl.) Nyl. | |
| EA038460B1 (ru) | Антисептическое лекарственное средство | |
| Lagu et al. | Synthesis. antibacterial, antifungal antitubercular activities and molecular docking studies of nitrophenyl derivatives | |
| RU2780014C1 (ru) | ПРОП-2-ИН-1-ИЛ-(2Z)-2-[(3-альфа, 4-альфа, 8-альфа, 11-альфа, 14-бета, 16-бета)-16-(АЦЕТИЛОКСИ)-3,11-ДИГИДРОКСИ-4,8,10,14-ТЕТРАМЕТИЛГОНАН-17-ИЛИДЕН]-6-МЕТИЛГЕПТ-5-ЕНОАТ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА | |
| CN109762034B (zh) | 新型对苯二甲醛缩d-氨基葡萄糖席夫碱的制备方法 | |
| US20070154574A1 (en) | Fungicides compositions comprising the extract of Chloranthus henryi and a novel sesquiterpene compound isolated from them | |
| Yaqub et al. | Synthesis, antibacterial, and antifungal activities of novel pyridazino carbazoles | |
| RU2746947C2 (ru) | НОВЫЕ НАФТО[2,1-b]КАРБАЗОЛПРОИЗВОДНЫЕ ФУЗИДОВОЙ КИСЛОТЫ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА | |
| RU2312104C1 (ru) | 4-метокси-5-нитро-6-тиоцианопиримидин, обладающий фунгицидной активностью, и способ его получения | |
| RU2726122C1 (ru) | (2Z)-2-[(4α, 5α, 8α, 9β, 13α, 14β, 16β)-16-(АЦЕТИЛОКСИ)-3(Z),11(E)-БИС(ГИДРОКСИИМИНО)-4,8,10,14-ТЕТРАМЕТИЛГОНАН-17-ИЛИДЕН]-6-МЕТИЛГЕПТ-5-ЕНОВАЯ КИСЛОТА, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА | |
| RU2784215C1 (ru) | (1-Бензил-1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил (Z)-2-((3S,4S,8S,10S,11R,14S,16S)-16-ацетокси-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгексадекагидро-17H-циклопента[a]фенантрен-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноат, проявляющий антибактериальную и фунгицидную активность | |
| Ma et al. | Synthesis and antifungal activities of drimane-amide derivatives from sclareol | |
| IL24814A (en) | N',n'-disubstituted-thiono carbamyl thiolo-imides and process for their preparation | |
| Smirnova et al. | Evaluation on antimicrobial potential of dipterocarpol and dammarenolic acid derivatives from Dipterocarpus alatus | |
| RU2726196C1 (ru) | N,n'-бис(3-аминопропил)бутан-1,4-диаминопроизводные фузидовой кислоты, проявляющие широкий спектр противомикробной активности | |
| Selm et al. | Cytotoxic and antimicrobial activities of two new triterpenoids from the peels of local egyptian malus domestica L. | |
| US20120129882A1 (en) | Method for producing benzazoloquinolium (BQs) salts, using the composition as cellular markers, and using the biological activity of the composition | |
| RU2702648C1 (ru) | 5,7-Ди(трет-бутил)-2-(4,7-дихлор-8-метил-5-нитрохинолин-2-ил)-4-нитро-1,3-трополон, обладающий цитотоксической активностью | |
| RU2730604C1 (ru) | (2Z)-2-[(3β, 4α, 8α, 11α, 14β, 16β)-16-(АЦЕТИЛОКСИ)-3-({ 3-[(4-АМИНОБУТИЛ)АМИНО]ПРОПИЛ} АМИНО)-11-ГИДРОКСИ-4,8,10,14-ТЕТРАМЕТИЛГОНАН-17-ИЛИДЕН]-6-МЕТИЛГЕПТ-5-ЕНОВАЯ КИСЛОТА С ПРОТИВОМИКРОБНОЙ И ФУНГИЦИДНОЙ АКТИВНОСТЬЮ И СПОСОБ ЕЁ ПОЛУЧЕНИЯ | |
| Ahamed et al. | Synthesis and biological evaluation of some novel heterocyclic Chalcone derivatives | |
| BENNAMARA et al. | Alkaloids 8-Hydroxyquinoline derivatives: Synthesis and biological activities | |
| Tunc | Synthesis and antimicrobial study of new benzimidazole Schiff bases bearing p-toluene sulfonamide moiety | |
| Li et al. | Synthesis and characterization of novel N-phenylacetamide bearing 1, 2, 4-triazole derivatives as potential antimicrobial agents | |
| Palchikov et al. | Synthesis and plant growth regulatory activity of 3-sulfolene derivatives |