RU2722290C2

RU2722290C2 - Контейнер, предварительно заполненный ботулиновым токсином

Info

Publication number: RU2722290C2
Application number: RU2017125279A
Authority: RU
Inventors: Маркус ФОГТ
Original assignee: Мерц Фарма Гмбх Унд Ко. Кгаа
Priority date: 2015-02-03
Filing date: 2015-12-22
Publication date: 2020-05-28
Also published as: JP6813492B2; JP7053751B2; KR20170109051A; JP2021041173A; KR102627068B1; IL253429B; CA2974450C; MX2017009380A; BR112017016759B1; CA2974450A1; AR103244A1; SG11201706247VA; WO2016124213A1; AU2015381351A1; US10406290B2; EP3253364A1; AU2015381351B2; BR112017016759A2; JP2018506351A; US20180015225A1

Abstract

Группа изобретений относится к области медицины и косметологии. Предварительно заполненный пластиковый шприц содержит водную композицию ботулинового токсина, цилиндр шприца, имеющий проксимальный конец, дистальный конец и проходящую между ними цилиндрическую стенку, причем цилиндр шприца имеет дистально выступающую канюлю с проходящим через нее каналом для жидкости, сообщающимся с просветом цилиндра, цилиндрическая стенка имеет внутреннюю поверхность, покрытую барьерным слоем; укупорочное устройство, имеющее выходную крепежную часть, которая герметично соединяется и закрывает дистальный открытый выходной конец шприца, при этом выходная крепежная часть изготовлена из эластомерного материала с необязательно нанесенным на ее поверхность покрытием, и узел штока поршня, который проходит в проксимальный конец цилиндра шприца и включает уплотнитель поршня, находящийся в скользящем непроницаемом для жидкости соединении с цилиндрической стенкой просвета цилиндра, при этом уплотнитель поршня изготовлен из эластомерного материала с покрытием, нанесенным на, по меньшей мере, участок уплотнителя поршня, контактирующий с водной композицией ботулинового токсина в процессе хранения и/или инъекции. Эластомерный материал выходной крепежной части выбирают из изопренового каучука (IS), бутадиенового каучука (BR), бутилового каучука, галогенированного бутилового каучука, бутадиен-стирольного каучука и их смесей, и эластомерный материал уплотнителя поршня выбирают из изопренового каучука (IS), бутадиенового каучука (BR), бутилового каучука, галогенированного бутилового каучука, бутадиен-стирольного каучука и их смесей, и барьерный слой цилиндра шприца представляет собой силиконовый слой, а покрытие на уплотнителе поршня представляет собой поперечно-сшитое силиконовое покрытие или фторполимерное покрытие. Также раскрывается набор, содержащий предварительно заполненный пластиковый шприц, варианты применения предварительно заполненного пластикового шприца при лечении и для косметического применения, способ лечения заболевания, а также способ косметической обработки кожи. Группа изобретений обеспечивает стабильность водной композиции ботулинового токсина в течение длительного времени. 6 н. и 7 з.п. ф-лы, 4 табл., 1 ил.

Description

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к предварительно заполненному пластиковому контейнеру, такому как предварительно заполненный пластиковый шприц, содержащему водную композицию ботулинового токсина. Водная композиция ботулинового токсина в предварительно заполненном пластиковом контейнере стабильна в течение продолжительного периода времени. Более того, настоящее изобретение относится к набору, содержащему предварительно заполненный пластиковый контейнер, и к применению предварительно заполненного пластикового контейнера в терапевтических и косметических целях.

Уровень техники

Ботулиновый токсин (BoNT) представляет собой один из наиболее мощных известных токсинов, действующих путем блокирования высвобождения ацетилхолина в периферических холинергических нейронах. BoNT синтезируют в виде нейротоксического полипептида-предшественника массой 150 кДа и активируют путем избирательного протеолитического расщепления с получением активной двухцепочечной формы BoNT, состоящей из тяжелой цепи 100 кДа (НС; содержит домен транслокации и домен связывания рецептора) и легкой цепи 50 кДа (LC; содержит каталитический домен), соединенных дисульфидной связью и нековалентными взаимодействиями. Существуют восемь гомологичных серотипов (А, В, C₁, C₂, D, Е, F и G) ботулинового токсина, продуцируемых бактерией Clostridium botulinum в форме комплекса, состоящего из нейротоксического полипептида и других (нетоксичных) клостридиальных белков (т.е. различных гемагглютининов и нетоксичного негемагглютинирующего белка).

Осторожное введение очень малых доз токсина может ограничить его действие местным проявлением для уменьшения чрезмерной активности мышц и экзокринных желез. Следовательно, в настоящее время ботулиновый токсин применяют при лечении широкого спектра изнуряющих нервно-мышечных заболеваний (например, шейной дистонии, блефароспазма и спастичности), чрезмерной активности экзокринных желез (например, гипергидроза и повышенного слюноотделения) и других заболеваний, а также в косметических целях (например, для лечения морщин на лице).

Для ботулиновых токсинов характерна нестабильность, и, в частности, они очень нестабильны при щелочном pH и термолабильны. Кроме того, известно, что разведение изолированного токсинового комплекса от миллиграммовых количеств до гораздо более низких концентраций токсина, используемых в растворах для инъекций (порядка нанограмма на миллилитр), связано с существенными трудностями вследствие быстрой потери специфической токсичности при таком большом разведении. Это приводит к утрате биологической активности в процессе производства, растворения и/или хранения содержащих белок фармацевтических композиций. Такие проблемы, наблюдаемые в случае белков, могут быть обусловлены химической нестабильностью, приводящей к образованию связей или расщеплению (например, гидролизу, окислению, рацемизации, β-элиминированию и дисульфидному обмену), и/или физической нестабильностью вторичной структуры или структуры высшего порядка белков без модификации с разрывом ковалентных связей (например, денатурация, адсорбция на поверхностях и нековалентное самоагрегирование).

Однако стабильность фармацевтических продуктов очень важна для обеспечения безопасного и эффективного использования в течение достаточно длительного периода времени. Поскольку водные композиции ботулинового токсина особенно подвержены деградации, коммерческие препараты ботулинового токсина часто поставляют в виде высушенного под вакуумом или лиофилизированного материала. К примерам относятся, например, Botox^® (онаботулинумтоксинА; Allergan, Inc.) и Dysport^® (абоботулинумтоксинА; Ipsen Ltd.), оба из которых содержат комплекс токсина С.botulinum типа А. Другим примером является Xeomin^® (инкоботулинумтоксин; Merz Pharma GmbH & Co. KGaA), который содержит чистый нейротоксический компонент серотипа А (т.е. нейротоксический полипептид массой 150 кДа), очищенный от всех других белков токсинового комплекса Clostridium botulinum (т.е. различных гемагглютининов и нетоксичного негемагглютинирующего белка).

Однако, хотя лиофилизированный материал обладает повышенной стабильностью, перед использованием его, как правило, необходимо восстанавливать в фармацевтически приемлемой жидкости (например, в физрастворе). Следовательно, лиофилизированные фармацевтические продукты считаются менее удобными по сравнению с другими дозированными формами. Кроме того, процесс восстановления сопровождается риском совершения неправильных действий, что приводит к неточному дозированию или проблемам со стерильностью. Кроме того, процесс лиофилизации требует времени и приводит к дополнительным затратам.

Другой недостаток восстановленных растворов ботулинового токсина заключается в том, что они часто используются не полностью, поскольку не каждому пациенту и не по каждому показанию требуется одинаковая доза. К сожалению, вследствие нестабильности восстановленный раствор токсина можно хранить и повторно использовать лишь в течение относительно небольшого периода времени. Например, после разведения нормальным физраствором перед использованием Botox^® и Dysport^® рекомендуется использовать в течение 6 часов и 4 часов соответственно. Аналогично на вкладыше в упаковке Xeomin^® указано, что после хранения в течение более 24 часов восстановленный раствор Xeomin использовать не следует.

Медицинской дозированной формой, позволяющей преодолеть большинство из этих недостатков, является формат предварительно заполненного шприца, который становится все более популярным в последние годы в качестве устройства для доставки лекарственных средств. Однако если в качестве активных ингредиентов используются белки, ограниченная стабильность белков часто существенно затрудняет для составителей композиций использование формата предварительно заполненных шприцев. В частности, это применимо к сильно разбавленным водным растворам ботулинового токсина.

Для повышения стабильности твердых или жидких фармацевтических композиций ботулинового токсина к ним часто добавляют стабилизирующие белки, такие как человеческий сывороточный альбумин (HSA). Также известно добавление небелковых стабилизирующих агентов, например, поверхностно-активных веществ (ПАВ), поливинилпирролидона (ПВП), дисахаридов, многоатомных спиртов и т.п. Однако стабильность жидких композиций ботулинового токсина все еще является неудовлетворительной и/или достигается применением нежелательных для инъекций людям веществ (см., например, WO 01/58472, WO 2006/005910 и WO 2007/041664).

Более того, в WO 00/15245 описана жидкая композиция высококонцентрированного ботулинового токсина типа В (приблизительно 2500 ЕД/мл), стабильная при хранении в стеклянных флаконах при 5°C в течение периода времени до 30 месяцев. Однако эта стабильность достигается только путем использования флаконов из стекла и буферизации pH раствора до значения кислого pH в диапазоне от 5 до 6, что приводит к болезненности при инъекции.

Несмотря на достижения в данной области, по-прежнему отсутствует пригодная для инъекций форма ботулинового токсина, которая не только стабильна в течение длительного периода, чтобы обеспечивать достаточно долгий срок хранения, но также удобна и проста для применения, уменьшает ошибки в применении препарата и сводит к минимуму риск загрязнения.

Раскрытие изобретения

В свете вышеизложенного, целью настоящего изобретения является получение стабильной медицинской дозированной формы для введения ботулинового токсина удобным, безопасным и простым способом.

Вышеуказанная цель достигается путем получения предварительно заполненного ботулиновым токсином пластикового контейнера (например, шприца, флакона, карпулы или ампулы). Жидкая композиция ботулинового токсина в предварительно заполненном пластиковом контейнере (например, шприце, флаконе, карпуле или ампуле) является стабильной при 2-8°C в течение длительного периода времени и обеспечивает достаточно долгий срок хранения (по меньшей мере приблизительно 12-24 месяца).

В первом аспекте в настоящем изобретении предложен предварительно заполненный пластиковый контейнер (например, шприц, флакон, карпула или ампула), содержащий водную композицию ботулинового токсина, в которой активность токсина не снижается более чем на 25% относительно исходной активности токсина после хранения предварительно заполненного контейнера в течение: (а) 12 месяцев при 5°C; или (b) 3 месяцев при 25°C.

Стабильность водной композиции ботулинового токсина в предварительно заполненном контейнере (например, шприце, флаконе, карпуле или ампуле) с точки зрения количества (числа) невидимых частиц, размер которых равен или превышает 10 мкм, также является превосходной и, как правило, составляет менее 1000/мл в процессе хранения в течение 6-24 месяцев (например, 6, 9, 12, 15, 18 или 24 месяцев) при 2-25°C (например, при 5 С или 25°C). Более того, водная композиция ботулинового токсина в предварительно заполненном контейнере демонстрирует прекрасную стабильность в отношении pH, на что указывает значение pH, которое по существу не растет и не снижается более чем на 10% относительно исходного значения pH в процессе хранения предварительно заполненного контейнера (например, шприца, флакона, карпулы или ампулы) в течение 6-24 месяцев (например, 6, 9, 12, 15, 18 или 24 месяцев) при 2-25°C (например, при 5°C или 25°C).

В другом аспекте в настоящем изобретении предложен набор, содержащий предварительно заполненный пластиковый контейнер (например, шприц, флакон, карпулу или ампулу) в соответствии с первым аспектом изобретения и необязательно инструкции по использованию указанного предварительно заполненного пластикового контейнера.

В дополнительном аспекте в настоящем изобретении предложен предварительно заполненный пластиковый контейнер (например, шприц, флакон, карпула или ампула) в соответствии с первым аспектом настоящего изобретения для применения в терапии. Например, предварительно заполненный пластиковый контейнер (например, шприц, флакон, карпула или ампула) можно использовать для лечения заболевания или состояния, вызванного или связанного с гиперактивной холинергической иннервацией мышц или экзокринных желез у пациента, включая, без ограничений, дистонию, спастичность, паратонию, дискинезию, очаговый спазм, страбизм, тремор, тик, мигрень, сиалорею и гипергидроз.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к применению предварительно заполненного пластикового контейнера (например, шприца, флакона, карпулы или ампулы) в соответствии с первым аспектом изобретения в косметологии, таком как для лечения морщин на коже или асимметрий лица, например межбровных складок, гусиных лапок, морщин верхней части лица и полос платизмы.

В еще одном аспекте в настоящем изобретении предложен способ лечения заболевания или состояния, вызванного или связанного с гиперактивной холинергической иннервацией мышц или экзокринных желез у пациента, причем способ включает местное введение путем инъекции эффективного количества ботулинового токсина в мышцу или экзокринную железу пациента с применением предварительно заполненного пластикового контейнера (например, шприца, флакона, карпулы или ампулы) в соответствии с первым аспектом изобретения.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к способу косметической обработки кожи, например, для лечения морщин на коже и лицевых асимметрий, причем способ включает местное введение эффективного количества ботулинового токсина пациенту путем внутридермальной, субдермальной или подкожной инъекции с применением предварительно заполненного пластикового контейнера (например, шприца, флакона, карпулы или ампулы) в соответствии с первым аспектом настоящего изобретения.

В прилагаемых зависимых пунктах формулы изобретения представлены дополнительные варианты осуществления настоящего изобретения. Настоящее изобретение можно лучше понять, обратившись к приведенному ниже подробному описанию изобретения, примерам и прилагаемым рисункам.

Краткое описание чертежей

На ФИГ. 1 представлена стабильность жидкой композиции ботулинового токсина в конфигурациях А (•) и В

предварительно заполненных шприцев при 5°C в виде зависимости эффективности токсина от времени.

Осуществление изобретения

Настоящее изобретение основано на неожиданном открытии того, что жидкая композиция ботулинового токсина в пластиковом контейнере (например, в форме шприца, флакона, карпулы или ампулы) демонстрирует превосходную долгосрочную стабильность при пониженных температурах (например, 2-8°C). Даже после хранения при температуре окружающей среды (например, 25°C) предварительно заполненный ботулиновым токсином контейнер демонстрирует неожиданно высокую стабильность.

Соответственно, предварительно заполненный жидкой композицией ботулинового токсина контейнер настоящего изобретения, в частности предварительно заполненный ботулиновым токсином шприц настоящего изобретения, не только обеспечивает достаточно долгий срок хранения (по меньшей мере приблизительно 12-24 месяца), но и предоставляет несколько дополнительных преимуществ по сравнению с другими формами введения, например, простоту и удобство использования, сниженный риск ошибок в применении препарата, высокую точность дозирования, низкий риск загрязнения, повышенную гарантию стерильности и высокую безопасность при введении.

Более того, использование пластиковых материалов для контейнеров (например, шприцев) дает преимущества по сравнению со стеклянными контейнерами (например, стеклянными шприцами) в отношении устойчивости к разрушению, меньшего веса, повышенной адаптивности к новым формам первичных контейнеров, более точных размерных допусков и отсутствия нежелательных веществ (например, адгезивов).

Пластиковые материалы содержат различные вещества и добавки (например, пластификаторы), обычно называемые продуктами выщелачивания/экстракции, которые, по имеющимся данным, легко дестабилизируют белки, в частности, если белки по своей природе нестабильны и/или используются в таких низких концентрациях, как нейротоксины (например, ботулиновый токсин). Следовательно, жидкие фармацевтические композиции нейротоксинов традиционно вводят с использованием стеклянных шприцев. Однако неожиданно было обнаружено, что предварительно заполненный пластиковый контейнер (например, шприц) в соответствии с настоящим изобретением обеспечивает стабильность водной композиции ботулинового токсина в течение долгого времени хранения (по меньшей мере приблизительно 12-24 месяца) при 2-8°C и, следовательно, обеспечивает достаточно долгий срок хранения.

При использовании в настоящем документе термин «предварительно заполненный контейнер» означает любое устройство, имеющее частично или полностью закрытое пространство, которое герметизировано или может быть герметизировано и которое можно использовать для заключения в него, хранения и/или транспортировки жидких композиций. «Предварительно заполненный контейнер» в рамках настоящего изобретения представляет собой предпочтительно закрытый (или герметизированный) контейнер, частично или преимущественно изготовленный из пластика (например, органических полимеров), и включает, например, контейнеры в форме (i) шприца, (ii) флакона, (iii) карпулы или (iv) ампулы.

Предварительно заполненные шприцы и карпулы имеют два отверстия, которые герметизируют для предотвращения утечки содержимого (например, водных композиций). В случае предварительно заполненного шприца проксимальный конец герметизируют уплотнителем поршня, а дистальный конец герметизируют укупорочным устройством, как более подробно описано ниже в настоящем документе. В случае пластиковой карпулы, которая представляет собой по существу пластиковый цилиндр, стерильно заполненный лекарственной композицией, проксимальный конец обычно герметизируют каучуковым уплотнителем. На этот каучуковый уплотнитель можно нажимать, как на плунжер в цилиндре, прилагая давление к штоку карпульного шприца. Дистальный конец обычно герметизирован прокалываемой мембраной. Для выполнения инъекции прокалываемую мембрану протыкают.

В рамках настоящего изобретения «флакон» представляет собой сосуд, который обычно имеет трубчатую форму или бутылкообразную форму с горлышком и подходит для заключения в себе, хранения и/или транспортировки лекарственных композиций. Единственное отверстие герметизируют при помощи различных систем закрытия флакона. Например, флаконы можно закрывать завинчивающейся крышкой (завинчивающиеся флаконы), пробкой из коры пробкового дуба, пластика или резины (флаконы с входной кромкой и закатываемые флаконы) и другими системами закрытия, такими как откидные или защелкивающиеся крышки. В рамках настоящего изобретения «флакон» предпочтительно означает пластиковый сосуд, имеющий отверстие, герметизируемое системой закрытия флакона.

Ниже представлено более подробное описание настоящего изобретения. Хотя в подробном описании изобретения используется термин «предварительно заполненный шприц», «предварительно заполненный пластиковый шприц», «шприц» или «пластиковый шприц», следует отметить, что он не предполагает ограничения изобретения (пластиковым) шприцем в качестве конкретного варианта осуществления (пластикового) контейнера. Фактически, если не указано иное, любая приведенная в настоящем документе ссылка на «предварительно заполненный шприц», «предварительно заполненный пластиковый шприц», «шприц», «пластиковый шприц» или т.п.должна пониматься как ссылка на «контейнер» или «пластиковый контейнер» и его описание, а также включает или описывает «флакон» или «пластиковый флакон», «карпулу» или «пластиковую карпулу» или «ампулу» или «пластиковую ампулу».

В первом аспекте настоящее изобретение относится к предварительно заполненному пластиковому шприцу, содержащему ботулиновый токсин в водной композиции, причем активность токсина не снижается более чем на 25% относительно исходной активности токсина после хранения предварительно заполненного шприца в течение: (а) 12 месяцев при стандартных температурах холодильника (т.е. 2-8 С, например, 5°C); или (b) 3 месяцев при 25 С. Предпочтительно активность токсина не снижается более чем на 20%, 15%, 10% или 5% относительно исходной активности токсина после хранения предварительно заполненного шприца в течение 12 месяцев при 2-8°C (например, 5°C) или не снижается более чем на 20% относительно исходной активности токсина после хранения предварительно заполненного шприца в течение 3 месяцев при 25°C. Также предпочтительно активность токсина не снижается более чем на 15%, 10% или 5% относительно исходной активности токсина после хранения предварительно заполненного шприца в течение 6 месяцев при 2-8°C (например, 5 С).

Неожиданно было обнаружено, что водная композиция ботулинового токсина в предварительно заполненном шприце также стабильна в течение еще более долгих сроков хранения до 24 месяцев. Например, после хранения в течение периода времени до 24 месяцев (например, 15, 18 или 24 месяцев) при 2-8°C (например, 5°C) активность токсина предпочтительно не снижается более чем на 30% или 25%, более предпочтительно не более чем на 20%, в частности не более чем на 15%, особенно предпочтительно не более чем на 10%, а наиболее предпочтительно не более чем на 5% относительно исходной активности токсина.

В рамках настоящего изобретения термин «эффективность токсина» в широком смысле относится к показателю активности лекарственного средства (например, ботулинового токсина), выраженном в виде количества, необходимого для получения эффекта заданной интенсивности. Термин «активность» или «активность токсина» при использовании в настоящем документе означает биологическую активность ботулинового токсина, причем «биологическая активность» может относиться к: (а) связыванию с рецептором; (b) интернализации; (с) транслокации через эндосомальную мембрану в цитозоль; и/или (d) эндопротеолитическому расщеплению белков, участвующих в слиянии с мембраной синаптического пузырька. Например, любой домен легкой цепи (LC-домен), проявляющий протеолитическую активность более 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% и до 100% соответствующей активности LC-домена дикого типа в анализе SNAP-25, можно считать «биологически активным» или «проявляющим протеолитическую активность» в рамках объема настоящего изобретения. Более того, любой домен тяжелой цепи (НС-домен), способный связываться с клеточным рецептором НС-домена, в частности со своим природным рецептором НС-домена, и способный вызывать транслокацию присоединенного к нему LC-домена, считается «биологически активным».

В настоящем документе биологическая активность обычно выражается в мышиных единицах (MU). При использовании в настоящем документе 1 MU представляет собой такое количество нейротоксического компонента, которое убивает 50% указанной популяции мышей после внутрибрюшинной инъекции, т.е. мышиная внутрибрюшинная доза LD₅₀, измеренная по способу Schantz и Kauter (Schantz and Kauter, J. Assoc. Off. Anal. Chem. 1978, 61: 96-99). Термины «MU» и «единица», или «ЕД», в настоящем документе используются на взаимозаменяемой основе.

К подходящим анализам для определения эффективности или биологической активности относится мышиный гемидиафрагмальный анализ (МНА), описанный Pearce et al. (Toxicol. Appl. Pharmacol. 128: 69-77, 1994) и

et al. (Exp. Neurol. 147: 96-10, 1997), мышиный диафрагмальный анализ (MDA) согласно Dressier et al. (Mov. Disord. 20: 1617-1619, 2005), протеазный анализ SNAP-25 (например, «анализ GFP-SNAP25 с высвобождением флуоресценции», описанный в WO 2006/020748, или «усовершенствованный эндопептидазный иммуноанализ SNAP25», описанный в публикации Jones et al., J. Immunol. Methods 329: 92-101, 2008), электрохемилюминесцентный (ECL) сэндвич-ИФА, описанный в WO 2009/114748, и клеточные анализы, например, описанные в WO 2009/114748, WO 2004/029576, WO 2013/049508 и WO 2014/207109.

При использовании в настоящем документе термин «исходная активность токсина» или «исходная эффективность токсина» по существу означает активность ботулинового токсина в начале периода хранения, т.е. после производства готового шприца, предварительно заполненного ботулиновым токсином, например, через неделю или менее после производства. Кроме того, термин «после хранения» при использовании в настоящем документе должен означать «после или в конце хранения в течение заданного периода времени». Кроме того, термин «в процессе хранения» по существу означает «на протяжении всего периода хранения».

Помимо высокой стабильности в отношении эффективности токсина водная композиция ботулинового токсина также обладает высокой стабильностью в отношении количества невидимых частиц. «Невидимая частица» в рамках настоящего изобретения обычно представляет собой частицу диаметром менее 100 мкм. В соответствии с настоящим изобретением количество невидимых частиц, более конкретно число (или количество) частиц, размер которых равен или превышает 10 мкм, в водной композиции ботулинового токсина, как правило, составляет менее 1000/мл, предпочтительно менее 600/мл, а более предпочтительно менее 200/мл в процессе хранения в течение 6-24 месяцев (например, 6, 9, 12, 15, 18 или 24 месяцев) при 2-25°C (например, при 5°C или 25 С).

Измерения количества частиц можно проводить разными способами, такими как визуализация микропотока (MFI), резонансное измерение масс (RMM) и анализ с отслеживанием наночастиц (NTA). Измерения частиц обычно проводят в соответствии со статьей <788> Фармакопеи США (USP). В контексте настоящего изобретения предпочтительно использование способа визуализации микропотока. Этот способ измерения можно выполнить, например, с использованием системы анализа частиц DPA-5200 (ProteinSimple, г. Санта-Клара, штат Калифорния, США), оснащенной покрытой силаном проточной ячейкой с высоким разрешением для частиц 100 мкм. Как правило, образцы анализируют без разведения.

Альтернативно для определения количества частиц можно использовать резонансное измерение масс (RMM), например, с применением метрологической системы для частиц ARCHIMEDES (Affinity Biosensors, г. Санта-Барбара, штат Калифорния, США), оснащенной микросенсором (диапазон размеров 0,3-4 мкм), откалиброванным по полистироловым стандартам на 1 мкм. Все образцы обычно анализируют без разведения. Результаты можно анализировать с использованием программного обеспечения ParticleLab (v1.8.570) с шагом размерной категории 10 нм. В качестве еще одной альтернативы для определения количества частиц можно использовать анализ с отслеживанием наночастиц (NTA), например, с применением системы NanoSight LM20 (NanoSight, г. Эймсбери, Великобритания). Образцы обычно измеряют без разведения. Движения частиц в образцах можно записывать как видео по 60 секунд при температуре окружающей среды и анализировать с использованием подходящего программного обеспечения (например, программного обеспечения NTA 2.3).

Более того, водная композиция ботулинового токсина демонстрирует высокую стабильность по pH в том смысле, что значение pH является по существу стабильным в процессе хранения предварительно заполненного шприца. Предпочтительно значение pH не увеличивается или не уменьшается более чем на 10%, 8% или 6% относительно исходного значения pH после хранения предварительно заполненного шприца в течение 6-24 месяцев (например, 6, 9, 12, 15, 18 или 24 месяцев) при 2-25°C (например, при 5°C или 25°C), например в течение 18 месяцев при 25°C или в течение 24 месяцев при 25°C. Значение pH можно измерить по стандартизованному способу тестирования <791> Фармакопеи США, в котором описаны измерения pH для множества фармацевтических продуктов. Можно использовать любой подходящий pH-метр, например pH-метр Lab 870 производства Schott Instruments.

При использовании в настоящем документе термин «предварительно заполненный шприц» означает шприц, заполненный лекарственной композицией (т.е. водной композицией ботулинового токсина) перед отправкой конечному пользователю, который будет вводить лекарственное средство пациенту. Термин «водная композиция» при использовании в настоящем документе должен означать водный раствор, суспензию, дисперсию или эмульсию и предпочтительно означает водный раствор. Как правило, предварительно заполненный шприц обычно имеет вмещающий лекарственное средство контейнер, образующий часть корпуса шприца (т.е. цилиндра шприца), поршень для герметизации проксимального отверстия шприца и выталкивания лекарственного средства и герметизирующее устройство (например, колпачок-наконечник или колпачок иглы) на выходном конце шприца (например, открытом конце канюли шприца или предварительно установленной иглы (канюли)) для герметизации дистального выходного отверстия. Термин «предварительно заполненный пластиковый шприц» в контексте настоящего изобретения означает предварительно заполненный шприц, по меньшей мере цилиндр которого изготовлен из пластика.

В рамках настоящего изобретения предварительно заполненный шприц представляет собой предпочтительно шприц с люэровским наконечником для надевания (Luer-Slip) или люэровским наконечником для навинчивания (Luer-Lock), оснащенным колпачком-наконечником (если отсутствует предварительно установленная игла) или колпачком иглы (если имеется предварительно установленная игла). В контексте настоящего изобретения «шприц с люэровским наконечником для надевания» представляет собой шприц, позволяющий надавливанием надеть иглу на наконечник, а «шприц с люэровским наконечником для навинчивания» представляет собой шприц, на который иглу можно навинтить и затем зафиксировать на месте. Это обеспечивает надежное соединение и предотвращает случайное отсоединение игл для инъекции жидкостей.

Предварительно заполненный пластиковый шприц в соответствии с настоящим изобретением является, как правило, стерилизованным (например, посредством гамма-облучения, обработки этиленоксидом (ЕТО) или влажным жаром (например, автоклавированием)). Стерилизацию можно проводить до асептического заполнения водной композицией ботулинового токсина или после заполнения водной композицией ботулинового токсина. Полученный предварительно заполненный пластиковый шприц является готовым к применению. Кроме того, предварительно заполненный шприц, описанный в настоящем документе, обычно предназначен для однократного применения и должен быть одноразовым. Перед стерилизацией внутреннюю поверхность пластикового цилиндра шприца обычно покрывают смазкой для облегчения скольжения уплотнителя поршня и выталкивания содержимого шприца.

В соответствии с настоящим изобретением водная композиция ботулинового токсина в предварительно заполненном пластиковом шприце содержит ботулиновый токсин в концентрации, например, от 1 ЕД/мл до 3000 ЕД/мл или от 10 ЕД/мл до 1000 ЕД/мл. Предпочтительно ботулиновый токсин присутствует в концентрации от приблизительно 10 ЕД/мл до 400 ЕД/мл, более предпочтительно от приблизительно 25 ЕД/мл до 200 ЕД/мл, а наиболее предпочтительно от приблизительно 40 ЕД/мл до 150 ЕД/мл (например, 50 ЕД/мл, 75 ЕД/мл или 100 ЕД/мл).

Термин «ботулиновый токсин» при использовании в настоящем документе в широком смысле относится к любой форме или типу ботулинового токсина. Более конкретно, ботулиновый токсин можно выбирать из ботулинового токсина типов А, В, C1, С2, D, Е, F, G или их смесей. Предпочтительно ботулиновый токсин относится к серотипу А, В или С1, в частности к серотипу А.

Более того, термин «ботулиновый токсин» должен включать как комплекс ботулинового токсина («токсиновый комплекс»), так и нейротоксический компонент ботулинового токсина (комплекса). При использовании в настоящем документе термин «комплекс ботулинового токсина» или «токсиновый комплекс» означает имеющий высокую молекулярную массу комплекс, содержащий нейротоксический компонент массой приблизительно 150 кДа и, кроме того, нетоксичные белки Clostridium botulinum, включая гемагглютининовые и негемагглютининовые белки. Комплекс ботулинового токсина серотипа А доступен в продаже, например, под марками Botox^® (Allergan, Inc.) или Dysport^® (Ipsen, Ltd.).

Термин «нейротоксический компонент» при использовании в настоящем документе относится к нейротоксическому полипептиду из токсинового комплекса (полипептиду 150 кДа, обычно в двухцепочечной форме) без каких-либо связанных нетоксических белков. Например, чистый нейротоксический компонент доступен в продаже под торговыми наименованиями Xeomin^® и Bocouture^® (Merz Pharmaceuticals GmbH). Предпочтительно термин «ботулиновый токсин» означает нейротоксический компонент комплекса ботулинового токсина данного серотипа (например, серотипа А, В или С1, в частности серотипа А). Иными словами, водная композиция ботулинового токсина, содержащаяся в предварительно заполненном пластиковом шприце, предпочтительно содержит (только) указанный нейротоксический компонент и не содержит каких-либо других белков токсинового комплекса Clostridium botulinum.

Кроме того, предполагается, что настоящее изобретение охватывает функциональные (т.е. биологически активные) изоформы, гомологи, ортологи, паралоги и фрагменты ботулинового токсина, демонстрирующие идентичность последовательности по меньшей мере 50%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 90% и до 60%, до 70%, до 80%, до 90% или до 99% с аминокислотной последовательностью ботулинового токсина дикого типа, например ботулинового токсина дикого типа А или нейротоксического компонента ботулинового токсина серотипа А1, внесенного в базу данных GenBank под номером доступа ААА23262. Идентичность последовательности можно вычислить при помощи любого алгоритма, подходящего для получения надежных результатов, например алгоритма FASTA (W.R. Pearson & D.J. Lipman, PNAS 85: 2444-2448, 1988). Идентичность последовательности можно вычислить путем сравнения двух полипептидов или двух доменов, таких как два LC-домена или их фрагменты.

Модифицированные и рекомбинантные ботулиновые токсины также входят в объем настоящего изобретения. Для подходящих мутантов дана ссылка на WO 2006/027207, WO 2009/015840, WO 2006/114308, WO 2007/104567, WO 2010/022979, WO 2011/000929 и WO 2013/068476, все из которых включены в настоящий документ путем ссылки. Кроме того, настоящее изобретение также относится к ботулиновым токсинам, подвергнутым химической модификации, например пегилированию, гликозилированию, сульфатированию, фосфорилированию или любой другой модификации, в частности одной или более поверхностных или подвергающихся действию растворителя аминокислот. Модифицированные формы, рекомбинантные формы, изоформы, гомологи, ортологи, паралоги, фрагменты и мутанты, подходящие для использования в рамках настоящего изобретения, являются биологически активными, т.е. способны к транслокации в цитозоль пресинаптических холинергических нейронов и расщеплять белки комплекса SNARE (например, VAMP/синтаксин, синаптобревин и SNAP-25), обеспечивая ингибирующие ацетилхолин эффекты.

В контексте настоящего изобретения водная композиция ботулинового токсина может содержать различные другие фармацевтически приемлемые вещества, например соли (например, хлорид натрия), стабилизирующие белки (например, альбумин, желатин), сахара (например, глюкозу, фруктозу, галактозу, трегалозу, сахарозу и мальтозу), углеводные полимеры (например, гиалуроновую кислоту или поливинилпирролидон (ПВП)), многоатомные спирты (например, глицерин и сахарные спирты, такие как маннит, инозит, лактит, изомальт, ксилит, эритрит, сорбит), аминокислоты, витамины (например, витамин С), цинк, магний, анестезирующие агенты (например, местные анестезирующие агенты, такие как лидокаин), ПАВ, регуляторы тоничности и т.п. Термин «фармацевтически приемлемый» при использовании в настоящем документе означает те соединения или вещества, которые подходят для приведения в контакт с тканями млекопитающих, особенно людей.

Кроме того, термин «содержит» при использовании в настоящем документе должен включать как неограничивающий термин «включает», так и ограничивающий термин «состоит (из)». Термин «изготовлен из» при использовании в настоящем документе должен в широком смысле означать «произведен из», в частности «в основном произведен из», и по существу означает «содержащий» (с указанием на то, что другие вещества или материалы могут быть включены в некоторых количествах). Также он может означать «состоящий из».

В соответствии с настоящим изобретением pH водной композиции ботулинового токсина в предварительно заполненном шприце в процессе хранения предпочтительно находится в диапазоне от 6,0 до 7,5, от 6,5 до 7,5, от 6,1 до 7,3 или от 6,2 до 7,2, более предпочтительно в диапазоне от 6,3 до 7,1, а наиболее предпочтительно в диапазоне от 6,5 до 7,0. Преимущество pH в указанном диапазоне 6,1-7,3 заключается в том, что инъекции таких по существу нейтральных или лишь слабокислых растворов являются гораздо менее болезненными, чем инъекции кислых растворов с pH ниже 6.

Термин «водная композиция» или «водная композиция ботулинового токсина» при использовании в настоящем документе не ограничен конкретной реализацией и может относиться к водной суспензии, водной дисперсии, водной эмульсии, а предпочтительно представляет собой водный раствор.

Предпочтительно водная композиция ботулинового токсина не содержит буфера, например фосфатного буфера, фосфатно-цитратного буфера, лактатного буфера, ацетатного буфера и т.п. Термин «буфер» при использовании в настоящем документе означает фармацевтически приемлемый эксципиент, который стабилизирует pH фармацевтического препарата. Кроме того, водная композиция ботулинового токсина может не содержать аминокислот (например, метионина), и/или ПАВ (например, полисорбатов, таких как полисорбат 80), и/или белков животного происхождения (например, человеческого сывороточного альбумина (HSA) или бычьего сывороточного альбумина (BSA)).

Предпочтительная водная композиция ботулинового токсина для использования в настоящем изобретении содержит воду, ботулиновый токсин (например, нейротоксический компонент ботулинового токсина, предпочтительно серотипа А) в концентрации, например, от 10 до 150 ЕД/мл, соль (например, хлорид натрия) в концентрации, например, от 0,5% до 1,5% вес./об., сахар (например, моно- или дисахарид, такой как глюкоза, фруктоза, галактоза, трегалоза, сахароза и мальтоза) в концентрации, например, от 0,1% до 2% вес./об. и стабилизирующий белок (например, альбумин) в концентрации, например, менее 4%, 3%, 2% или 1% вес./об., например от 0,01% до 1% вес./об.

Особенно предпочтительная водная композиция ботулинового токсина для использования в настоящем документе по существу состоит из воды, ботулинового токсина (например, нейротоксического компонента ботулинового токсина типа А), хлорида натрия, сахарозы и альбумина (например, человеческого сывороточного альбумина; HSA). Концентрации упомянутых ингредиентов могут находиться в следующих диапазонах: от 10 до 200 ЕД/мл, предпочтительно от 30 до 125 ЕД/мл (ботулиновый токсин), от 0,5% до 1,5% вес./об., предпочтительно от 0,7% до 1,1% вес./об. (хлорид натрия), от 0,1% до 2% вес./об., предпочтительно от 0,2% до 1% вес./об. (сахароза), от 0,01% до 1% вес./об., предпочтительно от 0,05% до 0,5% вес./об. (HSA). Другая особенно предпочтительная композиция ботулинового токсина для использования в настоящем изобретении представляет собой раствор Xeomin^®, например раствор Xeomin^®, разведенный физиологическим раствором (0,9%) хлорида натрия), который содержит от 20 до 150 ЕД/мл нейротоксического компонента ботулинового токсина типа А.

Термин «по существу состоит из» при использовании в настоящем документе должен означать, что вещества, не входящие в указанный перечень, содержатся лишь в следовых количествах, например, неизбежные примеси, содержащиеся в компонентах, использованных при приготовлении водной композиции ботулинового токсина, или примеси, входящие в изолированный ботулиновый токсин (например, нейротоксический компонент ботулинового токсина типа А) в очень небольших количествах вследствие процедуры очистки (например, очень небольшие остаточные количества буферов, хелатирующих агентов и т.п.).

В соответствии с настоящим изобретением конфигурация предварительно заполненного пластикового шприца не имеет конкретных ограничений и обычно включает цилиндр для приема жидкости, который после заполнения разъемно закрывают укупорочным устройством для герметичного закрытия дистального конца шприца (например, при помощи «колпачка-наконечника», который перед использованием снимают и меняют на иглу, или средство герметизации имеет вид колпачка иглы в случае предварительно заполненного шприца со съемной или несъемной иглой), а с проксимального конца закрывают поршнем или другим средством, обеспечивающим непроницаемое для жидкости соединение с внутренней стенкой цилиндра. Для использования предварительно заполненного шприца колпачок-наконечник, колпачок иглы или укупорочное устройство другого типа удаляют, необязательно присоединяют иглу (если она еще отсутствует), а наконечник поршня или плунжер продвигают в цилиндр, выполняя инъекцию содержимого (т.е. водной композиции ботулинового токсина) цилиндра в тело пациента.

Предварительно заполненный пластиковый шприц в соответствии с настоящим изобретением предпочтительно содержит:

(a) цилиндр пластикового шприца, имеющий проксимальный конец, дистальный конец и проходящую между ними по существу цилиндрическую стенку, образующую просвет цилиндра, причем цилиндр шприца имеет дистально выступающую канюлю с проходящим через нее каналом для жидкости, сообщающимся с просветом цилиндра, при этом по существу цилиндрическая стенка имеет внутреннюю поверхность, необязательно покрытую барьерным слоем;

(b) укупорочное устройство, имеющее выходную крепежную часть, которая герметично соединяется и закрывает дистальный открытый выходной конец шприца, при этом выходная крепежная часть изготовлена из эластомерного материала с необязательно нанесенным на ее поверхность покрытием; и

(с) узел штока поршня, который проходит в проксимальный конец цилиндра шприца и включает уплотнитель поршня, находящийся в скользящем непроницаемом для жидкости соединении с цилиндрической стенкой просвета цилиндра, при этом уплотнитель поршня изготовлен из эластомерного материала с покрытием, необязательно нанесенным на по меньшей мере участок уплотнителя поршня, контактирующий с водной композицией ботулинового токсина в процессе хранения и/или инъекции.

Материалы предварительно заполненного шприца, обладающие потенциалом взаимодействия с водной композицией ботулинового токсина в предварительно заполненном шприце, по существу выбирают так, чтобы свести к минимуму или ограничить количество продуктов экстракции/выщелачивания, способных загрязнить водную композицию ботулинового токсина и нарушить стабильность, например, в отношении биологической активности или эффективности ботулинового токсина.

При использовании в настоящем документе термины «продукт(-ы) экстракции» и «продукт(-ы) выщелачивания» означают химические вещества, которые могут высвобождаться из контейнера или компонента материала предварительно заполненного пластикового шприца и/или которые мигрировали из материалов шприца в водную композицию ботулинового токсина при нормальных условиях использования или хранения. Способы идентификации продуктов экстракции/выщелачивания известны в данной области и основаны на рекомендованных отраслевых практиках и руководствах Международной конференции по гармонизации (International Conference for Harmonisation, ICH) (см., например, руководство Федерального агентства по контролю за пищевыми продуктами и лекарственными средствами США (FDA) «Системы закрытия контейнеров для упаковки медицинских лекарственных средств и биологических препаратов» (Container Closure Systems for Packaging Human Drugs and Biologies)). К примерам способов относятся, например, жидкостная хроматография/масс-спектрофотометрия (ЖХ/МС), газовая хроматографическая спектроскопия/масс-спектрофотометрия (ГХ/МС), способ с индуктивно-связанной плазмой (ИСП или ICP) и инфракрасный способ (ИК).

В контексте настоящего изобретения внутренняя поверхность пластикового цилиндра может иметь покрытие или может не иметь покрытия. Однако ее обычно покрывают барьерным слоем для целей смазывания (который далее также называется «слоем смазки»). Слой смазки должен не только обеспечивать высокую смазываемость, которая позволяет поршню легко скользить по цилиндру, но он также должен быть совместим с водной композицией ботулинового токсина и должен обеспечивать срок ее хранения. В контексте настоящего изобретения слой смазки может представлять собой слой не содержащей силикона смазки или слой силиконовой смазки.

Аналогично внутренняя поверхность пластиковой емкости, которая является частью флакона, внутренняя поверхность пластикового цилиндра карпулы, внутренняя поверхность пластиковой ампулы могут быть необязательно покрыты барьерным слоем и, в частности, не содержащим силикона слоем или силиконовым слоем. Таким образом, все приведенные ниже комментарии в отношении не содержащего силикона слоя смазки и слоя силиконовой смазки пластикового шприца в равной мере применимы к не содержащему силикона слою и силиконовому слою соответственно пластикового флакона, пластиковой карпулы и пластиковой ампулы.

Подходящие не содержащие силикона фторполимерные смазочные слои могут быть изготовлены из материалов, описанных ниже применительно к необязательно имеющимся покрытиям укупорочного устройства (или, более конкретно, выходной крепежной части) и уплотнителя поршня. Предпочтительные не содержащие силикона слои смазки включают фторполимерные (фторуглеродные) слои, в частности слои из этилентетрафторэтилена (ETFE) и слои на основе перфторполиэфира (PFPE) (например, TriboGlide^®), а также покрытия из диоксида кремния, наносимые на стекло способом плазмохимического газофазного осаждения (ПХГФО).

Такие фторполимерные слои можно получить известным в данной области способом, например путем напыления на пластиковые цилиндры шприцев перфторполиэфирного масла для получения тонкого слоя смазки на внутренней поверхности шприца, с последующим воздействием на внутренние полости отведенным потоком плазмы инертного газа (например, аргона или гелия). Плазменная обработка приводит к сшиванию перфторполиэфира, в результате чего покрытие иммобилизуется и снижается его склонность к смещению с целевой поверхности, следствием чего является меньшее количество частиц, способных повлиять на стабильность/эффективность лекарственного средства ботулинового токсина. Пример производственного процесса описан в публикации WO 2014/014641 А1, содержание которой включено в настоящий документ путем ссылки. Кроме того, не содержащее силикона барьерное покрытие, особенно подходящее для использования в настоящем изобретении, известно в данной области под названием TriboGlide^® (перфторполиэфирное покрытие, сшитое посредством плазменной обработки).

Слой силиконовой смазки, подходящий для использования в настоящем изобретении, можно получить способом силиконизации, который выбирают, без ограничений, из способов на основе силиконового масла (например, силиконизации напылением или силиконизации горячей сушкой) и способов осаждения из газовой фазы (например, плазмохимического газофазного осаждения (ПХГФО)). Предпочтительно слой силиконовой смазки формируют путем силиконизации напылением или более предпочтительно путем силиконизации горячей сушкой.

В способе силиконизации напылением силиконовое масло (например, DOW CORNING^® 360 с вязкостью 1000 мм²/с (1000 сСт)) распыляют в шприце (т.е. в цилиндре), например, с использованием плавающей или стационарной форсунки, с получением тонкого слоя силиконового масла. Хотя силиконовое масло является прекрасной смазкой, излишки силиконового масла могут приводить к образованию нежелательных видимых и невидимых частиц силиконового масла. В частности, в случае лекарственных средств на основе белков эти частицы силиконового масла могут приводить к нежелательным взаимодействиям с белковыми лекарственными средствами. Например, считается, что невидимые частицы силиконового масла способствуют агрегации белков. Следовательно, процессы силиконизации способом горячей сушки, которые приводят к образованию меньшего числа невидимых и видимых частиц силиконового масла, особенно предпочтительны для использования в настоящем изобретении. Такой процесс включает нанесение силиконового масла в виде эмульсии (например, эмульсии для силиконизации DOW CORNING^® 365), которую затем спекают с пластиковой поверхностью при определенной температуре в течение определенного периода времени.

Конструкция пластикового цилиндра шприца не имеет конкретных ограничений и обычно имеет внутренний диаметр, рассчитанный на определенный объем заполнения, например, 0,5 см³, 1,0 см³, 1,5 см³ или 2,0 см³. Как правило, цилиндр шприца имеет градуировочные отметки, показывающие объем жидкости в шприце. Кроме того, цилиндр шприца может иметь фланцеобразный соединитель. Конструкция фланца может быть, например, совместима со стандартом ISO11040. Фланцеобразный соединитель может дополнительно быть совместим с рукояткой, присутствие которой необязательно.

Канюля шприца обычно выполнена (например, сформована) как единое целое с пластиковым цилиндром шприца. Предпочтительно цилиндр шприца имеет выполненную как единое целое канюлю люэровского типа для навинчивания (Luer-Lock) или выполненную как единое целое канюлю люэровского типа для надевания (Luer-Slip). Канюлю формируют со встроенным каналом, проходящим в осевом направлении через канюлю и сообщающимся с камерой для подачи содержимого цилиндра шприца. Канюля может иметь по существу форму усеченного конуса, сходящегося от дистального выходного конца цилиндра шприца к выходному концу канюли. Альтернативно канюлю можно охарактеризовать как расходящуюся (т.е. расширяющуюся от меньшего диаметра к большему). Кроме того, канюля обычно расположена по центру по отношению к корпусу шприца (концентрическая канюля шприца), но также может быть расположена со смещением к краю корпуса (эксцентрическая канюля шприца).

Что касается материала пластикового цилиндра шприца, этот пластиковый материал предпочтительно представляет собой циклоолефиновый полимер (СОР), циклоолефиновый сополимер (СОС) или их смесь. Материалы типа СОС получают путем полимеризации циклических мономеров, таких как норборнен, с этаном, а материалы типа СОР получают путем дециклизирующей реакции обмена циклических мономеров с последующей гидрогенизацией. Материалы типа СОС, СОС и СОР/СОС демонстрируют ряд желательных характеристик, включая высокую прозрачность, низкую плотность, прекрасные гидроизолирующие свойства и устойчивость к водным и полярным органическим средам. К конкретным примерам относятся СОС Topas^® и Zenith^® Daikyo Crystal.

Пластиковые флаконы, карпулы и ампулы могут быть изготовлены из пластиковых материалов, описанных выше применительно к пластиковому цилиндру шприца, полиэтилена (РР, например, HDPE, LDPE), полиэфира, полиэтилентерефталата (PET), полиамидов и их смесей. Также подразумевается, что пластиковые флаконы, карпулы и ампулы имеют многослойную структуру, в которой один слой изготовлен из одного из указанных материалов, а другой(-ие) слой(-и) изготовлен(-ы) из одного (или более) других материалов.

В соответствии с настоящим изобретением «укупорочное устройство» в широком смысле означает любое средство закрытия и герметизации дистального открытого выходного конца шприца. В рамках настоящего изобретения термин «открытый выходной конец» или «дистальный открытый выходной конец» означает любой дистальный открытый конец шприца, находящийся в жидкостном соединении с просветом цилиндра. Укупорочное устройство обычно имеет канал с закрытым концом и открытым концом, размеры которого позволяют вводить в него и эффективно герметизировать открытый выходной конец шприца для предотвращения утечки.

В случае предварительно заполненного пластикового шприца без предварительно установленной иглы укупорочное устройство представляет собой укупорочное средство, обычно называемое «колпачком-наконечником». Колпачок-наконечник образует непроницаемое для жидкости соединение с канюлей шприца, эффективно закрывая цилиндр шприца и предотвращая утечку содержимого цилиндра шприца. Колпачок-наконечник обычно разъемно соединен с канюлей шприца или с люэровской манжетой. Люэровская манжета окружает верхнюю часть цилиндра шприца (например, канюлю шприца). Предпочтительно люэровская манжета имеет внутреннюю резьбу, а колпачок-наконечник имеет внешнюю резьбу, соответствующую указанной внутренней резьбе указанной люэровской манжеты для соединения колпачка-наконечника с цилиндром шприца. В случае предварительно заполненного пластикового шприца настоящего изобретения люэровская манжета по существу выполнена как единое целое (например, сформована заодно) с цилиндром шприца. Перед использованием наконечник можно снять и после этого канюлю иглы (игольный узел) можно надежно соединить с канюлей шприца.

В случае если предварительно заполненный пластиковый шприц имеет съемную или несъемную (т.е. постоянную) канюлю или канюлю иглы (также называемую «иглой» или «игольным узлом»), проходящую от канюли шприца для подачи водной композиции ботулинового токсина из указанного шприца, то укупорочное устройство может называться «колпачком иглы». Указанный колпачок иглы по существу имеет канал с закрытым концом и открытым концом, размеры которого позволяют вводить в него и соединять с канюлей (иглой), установленной на канюле шприца. Как правило, (заостренный) конец канюли проникает в закрытый конец канала в колпачке иглы для герметизации открытого конца канюли.

Укупорочное устройство (например, колпачок-наконечник или колпачок иглы) может представлять собой единый элемент, который обычно изготавливают из гибкого и упругого полимерного материала (например, эластомера), или может иметь наружный колпачок, изготовленный из жесткого пластикового материала, соединенный с гибким и упругим внутренним колпачком или материалом, содержащим эластомер или изготовленным, например, из эластомера, по меньшей мере участок которого входит в контакт и герметизирует дистальное отверстие шприца. Как правило, по меньшей мере выходную крепежную часть, контактирующую с дистальным отверстием канюли с образованием непроницаемого для жидкости соединения, изготавливают из гибкого и/или упругого материала (например, эластомера) и, поскольку крепежная часть входит в контакт с водной композицией ботулинового токсина в процессе хранения и/или использования, ее предпочтительно изготавливают из материала, имеющего сниженный потенциал образования нежелательных продуктов экстракции/выщелачивания. Чтобы дополнительно уменьшить количество продуктов экстракции и/или выщелачивания и увеличить совместимость с водной композицией ботулинового токсина, на выходной крепежной части может иметься покрытие.

К подходящим гибким и/или упругим материалам укупорочного устройства, в частности выходной крепежной части, относятся эластомеры, которые не взаимодействуют с водной композицией ботулинового токсина и обеспечивают долгосрочное хранение. В частности, для той части герметизирующего устройства, которая контактирует или выполнена с возможностью контакта с водной композицией ботулинового токсина (т.е. выходной крепежной части), должны быть характерны низкие уровни образования продуктов экстракции/выщелачивания в процессе длительного хранения водной композиции ботулинового токсина. При использовании в настоящем документе термин «эластомер» или «эластомерный материал» означает главным образом поперечно-сшитые термореактивные резиноподобные полимеры, которые деформируются легче пластиков, но которые разрешены для использования с жидкостями фармацевтического класса и слабо подвержены выщелачиванию или миграции газов.

Предпочтительно эластомерный материал, пригодный для использования в настоящем изобретении, выбирают из изопренового каучука (IS), бутадиенового каучука (полибутадиена, BR), бутилового каучука (сополимера изобутилена и изопрена, IIR), галогенированного бутилового каучука (например, хлорбутилового каучука, CIIR, и бромбутилового каучука, BIIR), бутадиен-стирольного каучука (сополимера стирола и бутадиена, SBR) и их смесей. Предпочтительно эластомерный материал представляет собой бутиловый каучук или галогенированный бутиловый каучук, в частности бромбутиловый каучук или хлорбутиловый каучук, или их смесь. Эластомерный материал также может быть армирован инертным минеральным материалом. Кроме того, он может быть отвержден (например, органическим пероксидом, фенольными смолами и т.д.).

Подходящие покрытия, которые могут необязательно присутствовать на выходной крепежной части, изготовленной, например, из вышеупомянутых эластомерных материалов, по существу изготовлены из материала, который не вступает в нежелательное взаимодействие с водной композицией ботулинового токсина и для которого характерны низкие уровни выделения продуктов экстракции/выщелачивания. К покрытиям для использования в настоящем изобретении относятся, без ограничений, полипропилен, полиэтилен, парилен (например, парилен N, парилен С и парилен НТ), поперечно-сшитый силикон и предпочтительно фторполимерные покрытия. К примерам подходящих поперечно-сшитых силиконовых покрытий относятся покрытие В2 (Daikyo Seiko) или Xsi™ (Becton Dickinson).

К фторполимерным покрытиям относятся, без ограничений, фторированные этиленпропиленовые сополимеры (например, сополимер тетрафторэтилена и гексафторпропилена (FEP)), фторированные этиленэтиленовые сополимеры (например, сополимер этилена и тетрафторэтилена (ETFE), например FluroTec^®), PVA (сополимер тетрафторэтилена (TFE) и перфторпропилвиниловый эфир (PPVE)), сополимеры тетрафторэтилена и перфторэтилена, поливинилиденфторид (PVDF), поливинилфторид (PVF), политетрафторэтилен (PTFE) и их смеси. Предпочтительно покрытие изготовлено из ETFE и, в частности, представляет собой покрытие FluroTec^®.

В случае карпулы настоящего изобретения дистальный конец герметизируют прокалываемой мембраной. Прокалываемая мембрана может быть образована из тонкой резины или силикона, тонкого пластика/полимера, пленки, например Mylar, полиолефина, такого как полиэтилен или полипропилен, металлической фольги, такой как алюминиевая фольга, и т.д. Мембрана может иметь толщину от приблизительно 0,001 до 2,0 мм, обычно от 0,002 мм до 0,65 мм. Кроме того, мембрана может быть изготовлена из эластомерного материала и необязательно может иметь покрытие, описанное выше применительно к укупорочному устройству предварительно заполненного пластикового шприца.

В отношении флакона настоящего изобретения система закрытия флакона (например, колпачок), в особенности те участки системы закрытия флакона, которые входят в контакт или потенциально могут входить в контакт с флаконом и/или герметизируют его (например, септа), могут быть изготовлены из эластомерного материала, в частности термопластичного эластомерного материала, более конкретно стиролового блок-сополимерного термопластического эластомера, или эластомерного материала, описанного выше применительно к укупорочному устройству предварительно заполненного пластикового шприца настоящего изобретения. Другим подходящим материалом является силиконовый материал. Более того, указанные материалы могут иметь необязательное покрытие, в частности фторполимерное покрытие, описанное выше применительно к укупорочному устройству предварительно заполненного пластикового шприца.

В соответствии с настоящим изобретением предварительно заполненный шприц обычно включает узел штока поршня, который проходит в проксимальный конец цилиндра шприца. Узел штока поршня может включать шток (также называемый «толкателем») с уплотнителем поршня на конце (также называемым «поршнем»), который находится в скользящем непроницаемом для жидкости соединении с цилиндрической стенкой просвета цилиндра. Поршень образует проксимальное герметичное соединение, и за счет динамической герметизации осуществляется выталкивание жидкой композиции ботулинового токсина. Уплотнитель поршня контактирует с водной композицией ботулинового токсина в процессе хранения и/или введения. Следовательно, уплотнитель поршня должен быть совместим с водной композицией ботулинового токсина и не должен нарушать ее долгосрочную стабильность. В частности, уплотнитель поршня должен быть предпочтительно выполнен с возможностью сводить к минимуму количество продуктов экстракции/выщелачивания при долгом хранении.

В рамках настоящего изобретения уплотнитель поршня предпочтительно изготовлен из эластомерного материала с покрытием, необязательно нанесенным на по меньшей мере участок уплотнителя поршня, который контактирует или способен контактировать с водной композицией ботулинового токсина в процессе хранения и/или использования. К подходящим для применения в настоящем изобретении эластомерным материалам уплотнителя поршня относятся, без ограничений, изопреновый каучук (IS), бутадиеновый каучук (полибутадиен, BR), бутиловый каучук (сополимер изобутилена и изопрена, IIR), галогенированный бутиловый каучук (например, хлорбутиловый каучук, CIIR; и бромбутиловый каучук, BIIR), бутадиен-стирольный каучук (сополимер стирола и бутадиена, SBR) и их смеси. Предпочтительно материал уплотнителя поршня представляет собой бутиловый каучук, или галогенированный бутиловый каучук, или их смеси, в частности бромбутиловый каучук или хлорбутиловый каучук. Эластомерный материал также может быть армирован инертным минеральным материалом. Кроме того, он может быть отвержден (например, органическим пероксидом, фенольными смолами и т.д.).

Предпочтительно уплотнитель поршня содержит покрытие, выполняющее роль барьерной пленки. Покрытие обычно наносят на по меньшей мере герметизирующие поверхности, включая участок поверхности уплотнителя поршня, обращенный к просвету цилиндра и контактирующий с водной композицией ботулинового токсина в процессе хранения и/или использования. Покрытие служит для целей обеспечения хороших смазывающих свойств при сведении к минимуму взаимодействия между уплотнителем поршня и жидкой композицией ботулинового токсина.

Подходящие покрытия уплотнителя поршня по существу изготовлены из материала, который не вступает в нежелательные взаимодействия с водной композицией ботулинового токсина и для которого характерны низкие уровни продуктов экстракции/выщелачивания. К таким покрытиям относятся, без ограничений, полипропилен, полиэтилен, парилен (например, парилен N, парилен С и парилен НТ), поперечно-сшитый силикон и предпочтительно фторполимерные покрытия. К примерам подходящих поперечно-сшитых силиконовых покрытий относятся покрытие В2 (Daikyo Seiko) или Xsi™ (Becton Dickinson).

Конструкция уплотнителя поршня не имеет конкретных ограничений, и он может представлять собой вложенный или инкапсулированный уплотнитель. Более того, соединение со штоком может иметь резьбу, чтобы шток можно было установить после стерилизации. Альтернативно соединение со штоком может быть выполнено в виде конструкции с защелкиванием. Шток, как и уплотнитель поршня, по существу выполнен с возможностью выдерживать стерилизацию, но не имеет каких-либо других конкретных ограничений. Как правило, шток изготовлен из пластикового материала, такого как этиленвинилацетатный сополимер (EVA) или полипропилен.

Каучуковый уплотнитель карпулы настоящего изобретения может содержать или может быть изготовлен из тех же эластомерных материалов, которые описаны выше применительно к уплотнителю поршня пластикового шприца. Кроме того, каучуковый уплотнитель карпулы может иметь такое же необязательное покрытие, которое описано выше применительно к покрытию на уплотнителе поршня. Дополнительно покрытие может быть нанесено на по меньшей мере тот участок каучукового уплотнителя, который контактирует с водной композицией ботулинового токсина в процессе хранения и/или использования.

В рамках настоящего изобретения предварительно заполненный пластиковый шприц, содержащий укупорочное устройство, цилиндр шприца и узел поршня, до и после стерилизации (например, путем гамма-облучения, обработки этиленоксидом или автоклавирования) удовлетворяет или превышает требования стандартов по экстрагируемым веществам при определении согласно Фармакопее Японии, издание 14, №61, «Способы тестирования пластиковых контейнеров» (Test Methods for Plastic Containers, 2001), а также стандартов Фармакопеи Японии, издание 14, №59, «Тестирование каучуковой системы закрытия водных инфузионных растворов» (Test for Rubber Closure for Aqueous Infusions). Более того, полимерная композиция укупорочного устройства и уплотнителя поршня после стерилизации удовлетворяет требованиям тестов на горение в статье №61 Фармакопеи Японии, «Способы тестирования пластиковых контейнеров» (Test Methods for Plastic Containers, 2001), а также допустимым пределам по экстрагируемым веществам, которые определяются в тесте на вспенивание, pH-тесте, тесте на вещества, восстанавливающие перманганат калия, тесте на УФ-спектр и тесте на наличие остатка после испарения согласно Фармакопее Японии, №61, «Способы тестирования пластиковых контейнеров» (Test Methods for Plastic Containers, 2001).

В другом аспекте настоящее изобретение относится к набору, содержащему предварительно заполненный пластиковый контейнер (например, шприц, флакон, карпулу или ампулу) в соответствии с настоящим изобретением и необязательно инструкции по использованию указанного предварительно заполненного пластикового контейнера.

В дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к предварительно заполненному пластиковому контейнеру (например, шприцу, флакону, карпуле или ампуле) в соответствии с настоящим изобретением для использования в терапии. В частности, предварительно заполненный пластиковый контейнер в соответствии с настоящим изобретением можно использовать для лечения заболевания или состояния, которое вызвано или связано с гиперактивной холинергической иннервацией мышц или экзокринных желез у пациента.

В контексте настоящего изобретения в том случае, если контейнер не является шприцем (например, флакон, карпула или ампула), содержимое этих контейнеров «нешприцевого типа» (т.е. водную композицию ботулинового токсина) по существу вводят в намеченный целевой участок с использованием подходящего инъекционного устройства (например, шприца) таким же образом, как описано в настоящем документе применительно к предварительно заполненному пластиковому шприцу. Карпулы вставляют в карпульное инъекционное устройство, как известно специалистам в данной области. Содержимым флаконов и ампул по существу асептически заполняют шприц, а затем его вводят путем инъекции в целевой участок с использованием подходящего инъекционного устройства (например, шприца) таким же образом, как описано в настоящем документе применительно к предварительно заполненному пластиковому шприцу.

Термин «гиперактивная холинергическая иннервация» при использовании в настоящем документе относится к синапсу, который характеризуется необычно высоким выбросом ацетилхолина в синаптическую щель. Термин «необычно высокий» означает увеличение, например, до 25%, до 50% или более, относительно эталонной активности, которое можно получить, например, путем сравнения выброса с выбросом в синапсе того же типа, но без нахождения в гиперактивном состоянии, причем показателем гиперактивного состояния может быть мышечная дистония. «До 25%» означает, например, от приблизительно 1% до приблизительно 25%. Способы выполнения необходимых измерений известны в данной области.

В рамках настоящего изобретения к заболеванию или состоянию, вызванному или связанному с гиперактивной холинергической иннервацией мышц, относятся, без ограничений, дистонии (например, блефароспазм, спастическая кривошея, дистония конечностей и специфичные для определенного вида деятельности дистонии, например графоспазм), спастичности (например, постинсультная спастичность, спастичность, вызванная церебральным параличом), паратония, дискинезии (например, отсроченная дискинезия), очаговые спазмы (например, гемифасциальный спазм), (детский) церебральный паралич (например, спастический, дискинезический или атаксический церебральный паралич), страбизм, боль (например, нейропатическая боль), осложнения заживления ран, треморы, тики и мигрень.

Предварительно заполненный ботулиновым токсином контейнер (например, шприц, флакон, карпула или ампула) настоящего изобретения особенно полезен при лечении мышечной дистонии. К примерам дистоний относятся, без ограничений, дистонии, которые выбирают из группы, состоящей из: (1) черепной дистонии, включая блефароспазм и оромандибулярную дистонию открыточелюстного или закрыточелюстного типа; (2) цервикальной дистонии, включая антеколлис, ретроколлис, латероколлис и тортиколлис; (3) глоточной дистонии; (4) гортанной дистонии, включая спастическую дисфонию; (5) дистонии конечностей, включая дистонию верхних конечностей, например дистонии, специфичные для определенных видов деятельности (например, графоспазм), дистонию нижних конечностей, аксиальную дистонию, сегментную дистонию; и (6) других дистоний.

Термин «гиперактивная экзокринная железа» при использовании в настоящем документе не имеет конкретных ограничений и распространяется на любую экзокринную железу с гиперактивностью. Таким образом, предусматривается, что настоящее изобретение можно применять в лечении, затрагивающем любые железы, упомянутые в публикации Sobotta, Johannes, Atlas der Anatomie des Menschen, 22. Auflage, Band 1 und 2, Urban & Fischer, 2005, которая включена в настоящий документ путем ссылки. Предпочтительно гиперактивная железа представляет собой автономную экзокринную железу. Композицию ботулинового токсина предпочтительно вводят в гиперактивную экзокринную железу или поблизости от нее.

В рамках настоящего изобретения к гиперактивным экзокринным железам относятся, без ограничений, потовая железа, слезная железа, слюнная железа и слизистая железа. Более того, гиперактивная железа также может быть связана с заболеванием или состоянием, которое выбирают из группы, состоящей из синдрома Фрея, синдрома крокодиловых слез, подмышечного гипергидроза, ладонного гипергидроза, подошвенного гипергидроза, гипергидроза головы и шеи, гипергидроза тела, ринореи или относительно повышенного слюноотделения у пациентов с инсультом, болезнью Паркинсона и боковым амиотрофическим склерозом. В частности, заболевание или состояние, вызванное или связанное с гиперактивной холинергической иннервацией экзокринных желез, может включать слюнотечение изо рта (усиленное слюноотделение, сиалорею) и чрезмерное потоотделение (гипергидроз).

Введение не ограничено какой-либо конкретной схемой, режимом, формой, дозой или интервалом введения. Как известно специалистам в данной области, вводимое количество или доза ботулинового токсина зависит от формы введения, типа заболевания, веса пациента, возраста, пола, состояния здоровья, а также от того, какие целевые ткани выбирают для введения. Композицию ботулинового токсина обычно вводят местно, например, путем подкожной или внутримышечной инъекции в целевые ткани (например, мышцы, кожу, экзокринные железы) или поблизости от них.

Для разных мышц, в зависимости от их размера, по существу требуются разные дозы. Подходящая доза может находиться в диапазоне от 10 до 2000 ЕД, предпочтительно от 50 до 500 ЕД, а более предпочтительно от 100 до 350 ЕД ботулинового токсина. Для лечения экзокринных желез доза обычно находится в диапазоне от 10 до 500 ЕД, предпочтительно от 20 до 200 ЕД, а более предпочтительно от 30 до 100 ЕД. Такие суммарные количества можно вводить в один день или на следующий день лечения. Например, в первый сеанс лечения можно вводить первую часть дозы. Оставшуюся часть суммарной дозы можно вводить в течение одного или более сеансов лечения. Кроме того, частота введения не имеет конкретных ограничений, и подходящие интервалы введения могут составлять три месяца или менее (например, 4 или 8 недель) или более трех месяцев.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к применению предварительно заполненного пластикового контейнера (например, шприца, флакона, карпулы или ампулы) в соответствии с настоящим изобретением для косметических целей, например для лечения лицевых асимметрий и морщин/складок на коже (например, лицевых складок и лицевых морщин), включая морщины верхней части лица, полосы платизмы, межбровные складки, горизонтальные лобные складки, носогубные складки, складки на подбородке, двойной подбородок, тревожные морщины, морщины марионетки, щечные комиссуры, околоротовые морщины, морщины «гусиные лапки» и линии подбородка. Предпочтительно предварительно заполненный ботулиновым токсином контейнер настоящего изобретения (например, шприц, флакон, карпулу или ампулу) используют для инъекций в межбровные складки, гусиные лапки, околоротовые морщины и/или полосы платизмы.

Количества ботулинового токсина, вводимые в косметических целях, обычно находятся в диапазоне от 1 до 5 ЕД, от 5 до 10 ЕД, от 10 до 20 ЕД или от 20 до 50 ЕД. Такие суммарные количества можно вводить в один день или на следующий день лечения. Например, в первый сеанс лечения можно вводить первую часть дозы. Эта первая часть представляет собой предпочтительно субоптимальную часть, т.е. часть, полностью не устраняющую морщины или кожные складки. Оставшуюся часть суммарной дозы можно вводить в течение одного или более сеансов лечения. В отношении дополнительных деталей введения дана ссылка на представленное выше описание, связанное с терапевтическим применением.

В дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения заболевания или состояния, вызванного или связанного с гиперактивной холинергической иннервацией мышц или экзокринных желез у пациента, включающему местное введение эффективного количества ботулинового токсина в мышцу или экзокринную железу пациента с использованием предварительно заполненного пластикового контейнера (например, шприца, флакона, карпулы или ампулы) в соответствии с настоящим изобретением.

При использовании в настоящем документе термин «эффективное количество» означает количество ботулинового токсина, достаточное для получения благоприятного эффекта или желательного терапевтического, косметического или анестезирующего результатов. Термин «пациент» при использовании в настоящем документе по существу относится к человеку, имеющему заболевание или состояние, вызванное или связанное с гиперактивной холинергической иннервацией мышц или экзокринных желез, или к человеку, нуждающемуся в косметическом или анестезирующем воздействии. При использовании в настоящем документе термин «пациент» может применяться на взаимозаменяемой основе с термином «субъект» или «индивид».

Термин «местное введение» в рамках настоящего изобретения относится предпочтительно к подкожной или внутримышечной инъекции в целевые ткани (например, мышцы, кожу, экзокринные железы) или поблизости от них. В отношении введения (например, схемы, режима, формы, дозировки и интервала) и заболевания или состояний, лечение которых осуществляется, применяются те же комментарии, которые изложены выше в отношении использования стеклянного контейнера (например, предварительно заполненного ботулиновым токсином шприца) для косметических и терапевтических сфер применения.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к способу косметической обработки кожи, например, для лечения морщин на коже и лицевых асимметрий, включающему местное введение эффективного количества ботулинового токсина пациенту путем внутридермальной, субдермальной или подкожной инъекции с применением предварительно заполненного пластикового контейнера (например, шприца, флакона, карпулы или ампулы) в соответствии с настоящим изобретением.

К примерам косметических областей применения относятся области, упомянутые выше. Что касается значения или определения терминов «эффективное количество», «пациент», введения (например, схемы, режима, формы, дозы и интервала) и заболеваний или состояний, лечение которых осуществляется, то при отсутствии особых указаний аналогичным образом применяются комментарии, приведенные выше применительно к другим аспектам настоящего изобретения.

Настоящее изобретение будет дополнительно проиллюстрировано ниже с помощью следующих не имеющих ограничительного характера примеров.

ПРИМЕРЫ

Приведенные ниже примеры показывают, что в противоположность ожиданиям и общему представлению в данной области водная композиция ботулинового токсина, хранящаяся в системе предварительно заполненного шприца, демонстрирует превосходную стабильность в течение длительного периода времени (например, в течение 9-12 месяцев) при стандартной температуре холодильника (2-8°C). Более того, экстраполяция измеренных данных по стабильности показывает, что предварительно заполненный ботулиновым токсином шприц обеспечивает высокую стабильность в течение по меньшей мере от 12 до 24 месяцев при 2-8°C.

Соответственно, форму выпуска ботулинового токсина можно изменить с флакона с лиофилизатом на формат предварительно заполненного пластикового шприца, что соответствует требованиям врачей и пациентов, которым требуются более легкие, более безопасные и более точные способы введения.

МАТЕРИАЛЫ И СПОСОБЫ

Водную жидкую композицию ботулинового токсина готовили, растворив 1,0 мг человеческого сывороточного альбумина (HSA), 4,7 мг сахарозы и инкоботулинум-токсинА в 0,9% физрастворе в концентрации 50 ЕД/мл. Затем композицию заливали в пластиковый цилиндр шприца с системой закрытия люэровского типа с навинчиванием (Luer-Lock), содержащей адаптер Luer-Lock и колпачок-наконечник, который после установки входил в контакт с отверстием дистальной канюли шприца и герметизировал цилиндр шприца. После этого уплотнитель поршня вставляли в проксимальный концевой участок цилиндра, чтобы закрыть проксимальное отверстие. Затем полученный предварительно заполненный пластиковый шприц хранили при температурах 5°C или 25°C. После этого оценивали стабильность водной композиции ботулинового токсина через t=0, 1, 3, 6, 9 и 12 месяцев, определяя остаточную эффективность токсина, значение pH и количество невидимых частиц.

Эффективность токсина определяли, используя мышиный гемидиафрагмальный анализ (HDA) согласно публикации

et al. (Exp.Neurol. 147: 96-102, 1997). Вкратце, анализ проводили, инкубируя мышиный нервно-мышечный препарат в ванночке для органов, содержащей 4 мл среды. Мышцу присоединяли к динамометрическому датчику и электрически стимулировали через диафрагмальный нерв с получением изометрической силы сокращения, которая оставалась постоянной в течение более 180 мин, если токсин не добавляли. При добавлении токсина в ванночку для органов амплитуда сокращения стимулированной через нерв мышцы постепенно падала. Амплитуду сокращения диафрагмы отслеживали в зависимости от времени. В качестве показаний регистрировали время, за которое достигалась половинная величина от исходной силы сокращения и которое обозначали как «время паралича». Увеличение значений времени по сравнению с исходными значениями отражало меньшие количества активного токсина и потерю эффективности токсина соответственно.

Измерения pH проводили в соответствии со стандартизованным способом тестирования по статье <791> Фармакопеи США, в котором описаны измерения pH для многих фармацевтических продуктов, с использованием pH-метра (Lab 870, Schott Instruments).

Измерения частиц выполняли по способу визуализации микропотока (MFI) с использованием системы анализа частиц DPA-5200 (ProteinSimple, г. Санта-Клара, штат Калифорния, США), оснащенной покрытой силаном проточной ячейкой с высоким разрешением для частиц 100 мкм. Образцы анализировали без разведения. При выполнении измерений использовали программное обеспечение MFI View System Software (MVSS) версии 2-R2-6.1.20.1915, а при анализе образцов использовали программное обеспечение MFI View Analysis Suite (MVAS) версии 1.3.0.1007.

Исследовали две разные системы предварительно заполненных пластиковых шприцев (далее конфигурации А и В), которые отличались друг от друга уплотнителем поршня. Подробные данные об исследованных конфигурациях шприцев представлены в таблице 1.

1 = Gerresheimer

2 = силиконизирован жидкостью Dow Corning Medical Fluid 360 (вязкость 12500 мм²/с (12500 сСт))

3 = стерилизован гамма-облучением согласно ISO 11137

РЕЗУЛЬТАТЫ

Результаты измерений стабильности в отношении остаточной эффективности токсина для конфигураций А и В представлены в таблице 2 ниже.

* исходная абсолютная активность токсина в единицах в диапазоне от 50 ЕД до 54 ЕД

** н/о = не обнаружено

Как показано в таблице 2, токсин со временем по существу сохраняет свою исходную эффективность при температуре 2-8°C, т.е. по существу не наблюдается потери эффективности в течение не менее 18 месяцев (потеря эффективности <10% после хранения в течение 18 месяцев). Даже при комнатной температуре (т.е. 25°C) стабильность остается приемлемой, на что указывает потеря эффективности не более чем приблизительно 20% через 3 месяца.

Экстраполяция данных по стабильности для конфигураций А и В при 2-8°C до времени хранения 24 месяца графически представлена на ФИГ. 1. Как видно, оценочная ожидаемая максимальная потеря биологической активности через 24 месяца составляет приблизительно 10% и, следовательно, является по существу такой же, как потеря биологической активности, измеренная через 12 месяцев.

Более того, измерения pH показали, что значение pH оставалось исключительно стабильным в течение периода до 18 месяцев. Не было отмечено каких-либо тенденций в сторону увеличения или уменьшения, и все измеренные значения pH оставались в пределах ±0,4 исходного pH (см. таблицу 3).

Более того, измерения частиц по способу визуализации микропотока показали низкое общее количество частиц и не выявили существенного увеличения количества частиц (см. таблицу 4).

Как показано в таблице 4, количество частиц остается намного ниже 1000/мл, а в большинстве случаев - даже ниже 250/мл. Аналогичным образом, измерения частиц по способу резонансного измерения масс (RMM) (с использованием методологической системы для частиц ARCHIMEDES; Affinity Biosensors, г. Санта-Барбара, штат Калифорния, США) и анализ с отслеживанием наночастиц (с использованием системы NanoSight LM20; NanoSight, г. Эймсбери, Великобритания) дали аналогичные результаты и не выявили существенного количества частиц.

В заключение, представленные выше результаты показывают, что жидкие композиции ботулинового токсина в предварительно заполненных пластиковых шприцах являются стабильными в течение длительного времени хранения (например, 12-24 месяцев) при температурах 2-8°C. Эти данные были весьма неожиданными, учитывая лабильную природу ботулинового токсина, для которого известна высокая термолабильность и нестабильность при щелочных pH. Это было еще более удивительно, поскольку концентрации ботулинового токсина в предварительно заполненных шприцах являются очень низкими и, следовательно, минимальные абсолютные потери количества активного токсина будут приводить к большим процентным изменениям.

Соответственно, вышеописанные результаты показывают, что ботулиновый токсин может быть приготовлен в формате предварительно заполненного пластикового шприца, обеспечивающего преимущества перед стеклянными шприцами в отношении устойчивости к разрушению, уменьшения веса, повышенной адаптивности к новым формам первичных контейнеров, более точных размерных допусков и отсутствия нежелательных веществ (например, адгезивов). Более того, по сравнению с другими формами ботулинового токсина формат предварительно заполненных шприцев повышает удобство и простоту обращения, снижает вероятность ошибок при применении препарата, повышает точность дозирования, сводит к минимуму риск загрязнения, обеспечивает стерильность и повышает безопасность при введении.

Claims

1. Предварительно заполненный пластиковый шприц, содержащий водную композицию ботулинового токсина, причем пластиковый шприц содержит

(a) цилиндр пластикового шприца, имеющий проксимальный конец, дистальный конец и проходящую между ними по существу цилиндрическую стенку, образующую просвет цилиндра, причем цилиндр шприца имеет дистально выступающую канюлю с проходящим через нее каналом для жидкости, сообщающимся с просветом цилиндра, при этом по существу цилиндрическая стенка имеет внутреннюю поверхность, покрытую барьерным слоем;

(b) укупорочное устройство, имеющее выходную крепежную часть, которая герметично соединяется и закрывает дистальный открытый выходной конец шприца, при этом выходная крепежная часть изготовлена из эластомерного материала с необязательно нанесенным на ее поверхность покрытием, и

(c) узел штока поршня, который проходит в проксимальный конец цилиндра шприца и включает уплотнитель поршня, находящийся в скользящем непроницаемом для жидкости соединении с цилиндрической стенкой просвета цилиндра, при этом уплотнитель поршня изготовлен из эластомерного материала с покрытием, нанесенным на, по меньшей мере, участок уплотнителя поршня, контактирующий с водной композицией ботулинового токсина в процессе хранения и/или инъекции,

в котором эластомерный материал выходной крепежной части выбирают из изопренового каучука (IS), бутадиенового каучука (BR), бутилового каучука, галогенированного бутилового каучука, бутадиен-стирольного каучука и их смесей, и

эластомерный материал уплотнителя поршня выбирают из изопренового каучука (IS), бутадиенового каучука (BR), бутилового каучука, галогенированного бутилового каучука, бутадиен-стирольного каучука и их смесей, и в котором барьерный слой цилиндра шприца представляет собой силиконовый слой, а покрытие на уплотнителе поршня представляет собой поперечно-сшитое силиконовое покрытие или фторполимерное покрытие,

причем активность токсина не снижается более чем на 25% относительно исходной активности токсина после хранения предварительно заполненного пластикового шприца в течение 12 месяцев при 5°С или 3 месяцев при 25°С.

2. Предварительно заполненный пластиковый шприц по п. 1, в котором количество частиц довидимого диапазона, размер которых равен или превышает 10 мкм, составляет менее 1000/мл в процессе хранения от 6 до 24 месяцев при температуре от 2 до 25°С.

3. Предварительно заполненный пластиковый шприц по п. 1 или 2, в котором значение рН не увеличивается или не уменьшается более чем на 10% относительно исходного значения рН в процессе хранения предварительно заполненного пластикового шприца в течение 6-24 месяцев при температуре от 2 до 25°С, или в котором значение рН водной композиции ботулинового токсина в процессе хранения поддерживается в диапазоне 6,1-7,3.

4. Предварительно заполненный пластиковый шприц по любому из пп. 1-3, в котором ботулиновый токсин присутствует в водной композиции в концентрации от 10 до 1000 ЕД/мл.

5. Предварительно заполненный пластиковый шприц по любому из пп. 1-4, в котором водная композиция ботулинового токсина в предварительно заполненном пластиковом шприце не содержит буфера.

6. Предварительно заполненный пластиковый шприц по любому из пп. 1-5, в котором необязательное покрытие на выходной крепежной части представляет собой поперечно-сшитое силиконовое покрытие или фторполимерное покрытие.

7. Набор, содержащий предварительно заполненный пластиковый шприц по любому из пп. 1-6 и необязательно инструкции по использованию указанного предварительно заполненного пластикового шприца.

8. Применение предварительно заполненного пластикового шприца по любому из пп. 1-6 в терапии при лечении заболевания или состояния, вызванного или связанного с гиперактивной холинергической иннервацией мышц или экзокринных желез у пациента, включая дистонию, спастичность, паратонию, дискинезию, очаговый спазм, страбизм, боль, осложнение заживления ран, тремор, тик, мигрень, сиалорею и гипергидроз.

9. Применение предварительно заполненного пластикового шприца по любому из пп. 1-6 для косметического применения.

10. Применение п. 9, в котором косметическое применение представляет собой коррекцию морщин на коже и лицевых асимметрий.

11. Способ лечения заболевания или состояния, вызванного или связанного с гиперактивной холинергической иннервацией мышц или экзокринных желез у пациента, включающий местное введение эффективного количества ботулинового токсина в мышцу или экзокринную железу пациента путем инъекции с применением предварительно заполненного пластикового шприца по любому из пп. 1-6.

12. Способ косметической обработки кожи, включающий местное введение эффективного количества ботулинового токсина пациенту путем внутридермальной, субдермальной или подкожной инъекции с применением предварительно заполненного пластикового шприца по любому из пп. 1-6.

13. Способ по п. 12, в котором косметическую обработку кожи проводят для коррекции морщин на коже или лицевых асимметрий.