RU2710368C2 - Способ получения и концентрирования микроРНК-содержащих экзосом мультипотентных мезенхимально-стромальных клеток для применения в косметических и лекарственных средствах для стимуляции регенеративных процессов и замедления процессов старения - Google Patents
Способ получения и концентрирования микроРНК-содержащих экзосом мультипотентных мезенхимально-стромальных клеток для применения в косметических и лекарственных средствах для стимуляции регенеративных процессов и замедления процессов старения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2710368C2 RU2710368C2 RU2018119843A RU2018119843A RU2710368C2 RU 2710368 C2 RU2710368 C2 RU 2710368C2 RU 2018119843 A RU2018119843 A RU 2018119843A RU 2018119843 A RU2018119843 A RU 2018119843A RU 2710368 C2 RU2710368 C2 RU 2710368C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- exosomes
- cells
- culture
- medium
- stromal cells
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/28—Bone marrow; Haematopoietic stem cells; Mesenchymal stem cells of any origin, e.g. adipose-derived stem cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к биотехнологии, и может быть использовано для получения и концентрирования микроРНК-содержащих экзосом мультипотентных мезенхимально-стромальных клеток. Способ включает выработку мезенхимально-стромальных клеток пуповины, жировой ткани и пульпы зуба, последующее культивирование и сбор культуральной жидкости, обогащенной экзосомами, концентрацию экзосом и обеднение крупномолекулярными белками с целью снижения сенсибилизации, заморозку или высушивание полученного концентрата для долгосрочного хранения. В качестве источника экзосом используют мультипотентные мезенхимально-стромальные клетки (ММСК) от 1 до 4 пассажа, полученные от тестированных доноров, при этом источниками клеток являются пульпа зуба, жировая ткань, костный мозг, пуповина, для накопления экзосом ММСК культивируют в среде альфа-МЕМ или ДМЕМ с низким содержанием глюкозы, 5 мМ Л-аланил-глютамина и активированной тромбоцитарной плазмой пуповинной крови (UCPRP), культивирование клеток в вышеописанной среде осуществляют до 80-100% монослоя культуры, причем культивирование может быть статичным или проточным: при статичном культивировании клетки помещают в культуральную посуду типа флакон, чашка Петри. При достижении 80-100% монослоя культуральную жидкость меняют каждые 24 часа, собранную культуральную среду сохраняют для выделения экзосом, при этом с одной культуры производят 5-7 съемов обогащенной среды, а при проточном культивировании клетки помещают в инкубатор проточного типа на клеточные носители, в качестве которых используют микрочастицы, половолоконные структуры, при достижении клетками монослоя культуральную среду полностью меняют на новую, после чего производят стандартное культивирование в течение 7 дней. При получении обогащенной экзосомами среды производится ее концентрирование с удалением белковой фракции свыше 100 кДа, за счет использования системы тангенциальной фильтрации для удаления крупных частиц и концентрирования: сначала культуральную среду центрифугируют 30 минут при 2000g или фильтруют фильтром на 1-10 мкм для удаления крупных остатков клеток, далее надосадочную жидкость фильтруют тангенциальным фильтром с порами 100 кДа или 500 кДа. В результате фильтрации объем жидкости уменьшают, а экзосомы концентрируются в диафильтрате, последний далее фильтруют ультрафильтрацией для удаления микровезкул и других крупных частиц с использованием фильтров с размерами 0.22 мкм и 0.1 мкм, полученный фильтрат содержит экзосомы, которые измеряют с помощью проточной цитометрии и измерения уровня РНК или другими доступными методами. Полученные экзосомы могут быть использованы в течение 2 недель в неизменном виде для производства косметических или лекарственных форм, могут быть заморожены при -20°С, -40°С, -60°С и -80°С и храниться на протяжении 6 месяцев, или подвергнуты лиофилизации для долгосрочного хранения: до 1 года при комнатной температуре и более 2 лет при отрицательных температурах или +4°С. Использование данного способа позволяет получить и концентрировать микроРНК-содержащие экзосомы мультипотентных мезенхимально-стромальных клеток для применения в средствах для стимуляции регенеративных процессов.
Description
Способ получения и концентрирования микроРНК-содержащих экзосом мультипотентных мезенхимально-стромальных клеток для применения в косметических и лекарственных средствах для стимуляции регенеративных процессов и замедления процессов старения.
Предлагаемое изобретение относится к биотехнологиям, а более конкретно к способам получения и концентрирования микроРНК-содержащих экзосом мультипотентных мезенхимально-стромальных клеток для применения в косметических и лекарственных средствах для стимуляции регенеративных процессов и замедления процессов старения.
Регуляторные микроРНК вырабатываются практически всеми клетками организма и выделяются во внеклеточное пространство в виде экзосом. Экзосомы образуются из эндосомальных мультивезикулярных телец и состоят из двухслойного липидного слоя, включая керамиды, холестерол, сфинголипиды, фосфоглицериды и белки-рецепторы (Tkach, Mercedes et al. Communication by Extracellular Vesicles: Where We Are and Where We Need to Go. Cell, Volume 164, Issue 6, 1226-1232. DOI: https://doi.org/10.1016/j.cell.2016.01.043). Экзосомы являются универсальным транспортом микроРНК, обеспечивая их защиту и проникновение в клетки. В большинстве случаев высокоспециализированные клетки, такие как гепатоциты, альвеоциты, кардиомиоцты синтезируют свой, уникальный спектр микроРНК, свойственный для своего микроокружения (Chen-Rong Tsao et al. Mesenchymal Stem Cell Derived Exosomes: A New Hope for the Treatment of Cardiovascular Disease? Acta Cardiol Sin 2014; 30:395-400). Например, гепатоциты вырабатывают те микроРНК, действие которых приводит к пролиферации гепатоцитов, регкрутингу их предшественников, повышению синтетической активности (Herrera Sanchez et al. Extracellular vesicles from human liver stem cells restore argininosuccinate synthase deficiency. Stem Cell Research & Therapy (2017) 8:176, DOI 10.1186/s 13287-017-0628-9).
Таким образом, использование микроРНК в практике ограничивается их составом и происхождением.
Согласно данным литературы, стволовые клетки участвуют в стимуляции регенеративных процессов практически при любой патологии. Согласно современным данным, это отчасти зависит и от их синтетической активности (Lu et al. Exosomes as potential alternatives to stem cell therapy for intervertebral disc degeneration: in-vitro study on exosomes in interaction of nucleus pulposus cells and bone marrow mesenchymal stem cells Stem Cell Research & Therapy (2017) 8:108, DOI 10.1186/s 13287-017-0563-9).
Основной регенеративный эффект стволовых клеток обусловлен за счет экспрессии специфических микроРНК, активирующих пролиферативные и другие необходимые для регенерации процессы. Поэтому особенно важно разработать способ, позволяющий эффективно выделять из культуры стволовых клеток экзосомы, обогащать их и использовать для разработки лекарственных и косметических средств.
Известен способ получения экзосом (Processes for producing stable exosome formulations US 20160158291 A1 Номер заявки US 14/958,804, Дата публикации 9 июня 2016): в котором экзосомы получают из другого типа клеток (кардиосфер). Выделение экзосом проводится с помощью фильтрации и ультрафильтрации.
Недостатком известного способа является сложность и длительность процесса обогащения экзосом в культуральной жидкости.
Известен также способ получения экзосом (Method of purifying exosomes WO 2012087241 A1 (Номер заявки PCT/SG2011/000441, Дата публикации 28 июня 2012): в котором используются мезенхимально-стромальные клетки, а для получения экзосом использованы ионнообменные колонны.
Недостатком способа является его сложность.
Известен также способ получения экзосом (Methods and compositions for exosome isolation US 20130273544 A1 Номер заявки US 13/765,677,
Дата публикации 17 окт 2013): данный способ использует полимеры для разделения экзосом.
Недостатком метода является невысокая эффективность.
Известен метод получения экзосом из клеток плаценты и жира, (Exosome compositions and methods for preparation and use thereof for regulating and conditioning skin and hair WO 2017023690 A1 Номер заявки PCT/US2016/044458 Дата публикации 9 фев 2017): Данный патент описывает получение экзосом из клеток плаценты и жира, для выделения экзосом используется ультрацентрифугирование, а для получения экзосом с повышенным содержанием белка используют «тепловой шок».
Известен способ производства крема (Skin cream WO 2015009325 A1 (Номер заявки PCT/US2013/051394, Дата публикации 22 янв 2015), содержащего экзосомы и цитокины. В качестве клеток - продуцентов экзосом используются трансформированные и обычные фибробласты, а для выделения экзосом использована химическая преципитация и ультрацентрифугирование.
Известна кондиционная среда, предназначенная для лечения повреждений нормальных тканей (коржи и слизистых), вызванных ожогом. Она содержит минеральные соли, антибиотики и питательные вещества, достаточные для поддержания жизнеспособности и роста мезенхимальных стволовых клеток (МСК) костного мозга человека, включая продукты их жизнедеятельности. Кондиционную среду получают на стадии стационарного роста культуры стабильной клеточной линии мезенхимальных стволовых клеток, находящихся в Go периоде клеточного цикла, а затем среду собирают, (патент RU 2292212 (Заявка: 2005116811/15, 02.06.2005, Опубликовано: 27.01.2007):
Недостатком известной кондиционной среды является ее использование только для лечения ожогов.
Наиболее близким к заявляемому способу (прототипом) является метод получения экзосом из клеток плаценты и жира, (Exosome compositions
and methods for preparation and use thereof for regulating and conditioning skin and hair WO 2017023690 Al Номер заявки PCT/US2016/044458 Дата публикации 9 фев 2017), в котором получают экзосомы из клеток плаценты и жира, для выделения экзосом используется ультрацентрифугирование, а для получения экзосом с повышенным содержанием белка используют «тепловой шок».
Недостатком известного способа является то, что экзосомы получают только из клеток плаценты и жира, из-за чего количество получаемых экзосом ограничено и не позволяет получать экзосомы в необходимых количествах.
Задачей изобретения является создание эффективного и производительного способа получения и концентрирования микроРНК содержащих экзосом мультипотентных мезенхимально-стромальных клеток для применения в косметических и лекарственных средствах для стимуляции регенеративных процессов и замедления процессов старения.
Поставленная задача решается предлагаемым способом получения и концентрирования микроРНК-содержащих экзосом мультипотентных мезенхимально-стромальных клеток, содержащий выработку мезенхимально-стромальных клеток пуповины, жировой ткани и пульпы зуба, последующее культивирование и сбор культуральной жидкости, обогащенной экзосомами, концентрацию экзосом и обеднение крупномолекулярными белками с целью снижения сенсибилизации, заморозку или высушивание полученного концентрата для долгосрочного хранения, в котором в качестве источника экзосом используют мультипотентные мезенхимально-стромальные клетки (ММСК) от 1 до 4 пассажа, полученные от тестированных доноров, при этом источниками клеток являются пульпа зуба, жировая ткань, костный мозг, пуповина, для накопления экзосом ММСК культивируют в среде альфаМЕМ или ДМЕМ с низким содержанием глюкозы, 5 мМ Л-аланил-глютамина и активированной тромбоцитарной плазмой пуповинной крови (UCPRP), культивирование клеток в вышеописанной среде осуществляют до 80-100%
монослоя культуры, причем культивирование может быть статичным, или проточным: при статичном культивировании клетки помещают в культуральную посуду типа флакон, чашка Петри, и при достижении 80-100% монослоя культуральную жидкость меняют каждые 24 часа, собранную культуральную среду сохраняют для выделения экзосом, при этом с одной культуры производят 5-7 съемов обогащенной среды, а при проточном культивировании клетки помещают в инкубатор проточного типа на клеточные носители, в качестве которых используют микрочастицы, половолоконные структуры, при достижении клетками монослоя, культуральную среду полностью меняют на новую, после чего производят стандартное культивирование в течение 7-и дней, при получении обогащенной экзосомами среды производится ее концентрирование с удалением белковой фракции свыше 100 кДа, за счет использования системы тангенциальной фильтрации для удаления крупных частиц и концентрирования: сначала культуральную среду центрифугируют 30 минут при 2000g или фильтруют фильтром на 1-10 мкм для удаления крупных остатков клеток, далее надосадочную жидкость фильтруют тангенциальным фильтром с порами 100 кДа или 500 кДа, в результате фильтрации объем жидкости уменьшают, а экзосомы концентрируются в диафильтрате, последний далее фильтруют ультрафильтрацией для удаления микровезкул и других крупных частиц с использованием фильтров с размерами 0.22 мкм и 0.1 мкм, полученный фильтрат содержит экзосомы, которые измеряют с помощью проточной цитометрии и измерения уровня РНК или другими доступными методами, далее полученные экзосомы могут быть использованы в течении 2-х недель в неизменном виде для производства косметических или лекарственных форм, могут быть заморожены при -20°С, -40°С, -60°С и -80°С и храниться на протяжении 6-ти месяцев, или подвергнуты лиофилизации для долгосрочного хранения: до 1 года при комнатной температуре и более 2-х лет при отрицательных температурах или +4°C.
Способ основан на выработке мезенхимально-стромальных клеток пуповины, жировой ткани и пульпы зуба, последующим культивированием и сбором культуральной жидкости, обогащенной экзосомами. В дальнейшем, производится концентрация экзосом и обеднение крупномолекулярными белками с целью снижения сенсибилизации. Полученный концентрат замораживается или высушивается для долгосрочного хранения.
Преимущества способа заключаются в источнике экзосом, их особенности получения, концентрировании и хранении.
Способ осуществляется следующим образом.
В качестве источника экзосом используют мультипотентные мезенхимально-стромальные клетки (ММСК) от 1 до 4 пассажа, полученные от тестированных доноров, при этом источниками клеток являются пульпа зуба, жировая ткань, костный мозг, пуповина, для накопления экзосом ММСК культивируют в среде альфаМЕМ или ДМЕМ с низким содержанием глюкозы, 5 мМ Л-аланил-глютамина и активированной тромбоцитарной плазмой пуповинной крови (UCPRP), культивирование клеток в вышеописанной среде осуществляют до 80-100% монослоя культуры, причем культивирование может быть статичным, или проточным: при статичном культивировании клетки помещают в культуральную посуду типа флакон, чашка Петри, и при достижении 80-100% монослоя культуральную жидкость меняют каждые 24 часа, собранную культуральную среду сохраняют для выделения экзосом, при этом с одной культуры производят 5-7 съемов обогащенной среды, а при проточном культивировании клетки помещают в инкубатор проточного типа на клеточные носители, в качестве которых используют микрочастицы, половолоконные структуры, при достижении клетками монослоя, культуральную среду полностью меняют на новую, после чего производят стандартное культивирование в течение 7-и дней, при получении обогащенной экзосомами среды производится ее концентрирование с удалением белковой фракции свыше 100 кДа, за счет использования системы тангенциальной фильтрации для удаления крупных
частиц и концентрирования: сначала культуральную среду центрифугируют 30 минут при 2000g или фильтруют фильтром на 1-10 мкм для удаления крупных остатков клеток, далее надосадочную жидкость фильтруют тангенциальным фильтром с порами 100 кДа или 500 кДа, в результате фильтрации объем жидкости уменьшают, а экзосомы концентрируются в диафильтрате, последний далее фильтруют ультрафильтрацией для удаления микровезкул и других крупных частиц с использованием фильтров с размерами 0.22 мкм и 0.1 мкм, полученный фильтрат содержит экзосомы, которые измеряют с помощью проточной цитометрии и измерения уровня РНК или другими доступными методами, далее полученные экзосомы могут быть использованы в течении 2-х недель в неизменном виде для производства косметических или лекарственных форм, могут быть заморожены при -20°С, -40°С, -60°С и -80°С и храниться на протяжении 6-ти месяцев, или подвергнуты лиофилизации для долгосрочного хранения: до 1 года при комнатной температуре и более 2-х лет при отрицательных температурах или +4°С.
Процесс лиофилизации проводится в лиофильной сушке в два этапа. Предварительно экзосомальный концентрат замораживают в соответствующей посуде для сушки до -70°С в морозильной камере, затем проводится сушка в лиофильной камере по схеме:
Первичная сушка
Шаг 1 - охлаждение до -40°С и выдержка 90 минут, давление 100 mT
Шаг 2 - охлаждение до -30°С и выдержка 600 минут, давление 100 mT
Шаг 3 - охлаждение до -10°С и выдержка 300 минут, давление 100 mT
Шаг 4 - охлаждение до 0°С и выдержка 120 минут, давление 100 mT
Шаг 5 - нагрев до +10°С и выдержка 120 минут, давление 100 mT
Вторичная сушка проводится при +20°С минимум 120 минут при 100 mT
Концентрат экзосом, полученный предлагаемым способом, может быть использован для добавления в косметическую продукцию с целью замедления процессов старения кожи, стимуляции синтеза внеклеточного матрикса и улучшения состояния кожи. Так же, экзосомы могут быть использованы для создания кремов и гелей для стимуляции регенерации поверхностных и глубоких повреждений или для создания инъекционных препаратов, стимулирующих восстановление утраченных функций. Предлагаемый способ эффективен и имеет высокую производительность
Claims (1)
- Способ получения и концентрирования микроРНК-содержащих экзосом мультипотентных мезенхимально-стромальных клеток, содержащий выработку мезенхимально-стромальных клеток пуповины, жировой ткани и пульпы зуба, последующее культивирование и сбор культуральной жидкости, обогащенной экзосомами, концентрацию экзосом и обеднение крупномолекулярными белками с целью снижения сенсибилизации, заморозку или высушивание полученного концентрата для долгосрочного хранения, в котором в качестве источника экзосом используют мультипотентные мезенхимально-стромальные клетки (ММСК) от 1 до 4 пассажа, полученные от тестированных доноров, при этом источниками клеток являются пульпа зуба, жировая ткань, костный мозг, пуповина, для накопления экзосом ММСК культивируют в среде альфа-МЕМ или ДМЕМ с низким содержанием глюкозы, 5 мМ Л-аланил-глютамина и активированной тромбоцитарной плазмой пуповинной крови (UCPRP), культивирование клеток в вышеописанной среде осуществляют до 80-100% монослоя культуры, причем культивирование может быть статичным или проточным: при статичном культивировании клетки помещают в культуральную посуду типа флакон, чашка Петри, и при достижении 80-100% монослоя культуральную жидкость меняют каждые 24 часа, собранную культуральную среду сохраняют для выделения экзосом, при этом с одной культуры производят 5-7 съемов обогащенной среды, а при проточном культивировании клетки помещают в инкубатор проточного типа на клеточные носители, в качестве которых используют микрочастицы, половолоконные структуры, при достижении клетками монослоя культуральную среду полностью меняют на новую, после чего производят стандартное культивирование в течение 7 дней, при получении обогащенной экзосомами среды производится ее концентрирование с удалением белковой фракции свыше 100 кДа, за счет использования системы тангенциальной фильтрации для удаления крупных частиц и концентрирования: сначала культуральную среду центрифугируют 30 минут при 2000g или фильтруют фильтром на 1-10 мкм для удаления крупных остатков клеток, далее надосадочную жидкость фильтруют тангенциальным фильтром с порами 100 кДа или 500 кДа, в результате фильтрации объем жидкости уменьшают, а экзосомы концентрируются в диафильтрате, последний далее фильтруют ультрафильтрацией для удаления микровезкул и других крупных частиц с использованием фильтров с размерами 0.22 мкм и 0.1 мкм, полученный фильтрат содержит экзосомы, которые измеряют с помощью проточной цитометрии и измерения уровня РНК или другими доступными методами, далее полученные экзосомы могут быть использованы в течение 2 недель в неизменном виде для производства косметических или лекарственных форм, могут быть заморожены при -20°С, -40°С, -60°С и -80°С и храниться на протяжении 6 месяцев или подвергнуты лиофилизации для долгосрочного хранения: до 1 года при комнатной температуре и более 2 лет при отрицательных температурах или +4°С.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018119843A RU2710368C2 (ru) | 2018-05-29 | 2018-05-29 | Способ получения и концентрирования микроРНК-содержащих экзосом мультипотентных мезенхимально-стромальных клеток для применения в косметических и лекарственных средствах для стимуляции регенеративных процессов и замедления процессов старения |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018119843A RU2710368C2 (ru) | 2018-05-29 | 2018-05-29 | Способ получения и концентрирования микроРНК-содержащих экзосом мультипотентных мезенхимально-стромальных клеток для применения в косметических и лекарственных средствах для стимуляции регенеративных процессов и замедления процессов старения |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2018119843A3 RU2018119843A3 (ru) | 2019-11-29 |
RU2018119843A RU2018119843A (ru) | 2019-11-29 |
RU2710368C2 true RU2710368C2 (ru) | 2019-12-26 |
Family
ID=68834111
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2018119843A RU2710368C2 (ru) | 2018-05-29 | 2018-05-29 | Способ получения и концентрирования микроРНК-содержащих экзосом мультипотентных мезенхимально-стромальных клеток для применения в косметических и лекарственных средствах для стимуляции регенеративных процессов и замедления процессов старения |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2710368C2 (ru) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN114317400A (zh) * | 2021-11-18 | 2022-04-12 | 宁波甬恒瑶瑶智能科技有限公司 | 外泌体分离纯化检测方法及装置 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110003008A1 (en) * | 2008-02-22 | 2011-01-06 | Agency For Science, Technology And Research (A*Star) | Mesenchymal stem cell particles |
RU2548816C1 (ru) * | 2013-12-16 | 2015-04-20 | Мамонтова Марина Васильевна | Способ выделения микрорнк из биологических жидкостей |
RU2608509C1 (ru) * | 2016-02-11 | 2017-01-18 | Елена Сергеевна Кастарнова | Способ получения экзосом из крови |
WO2017023689A1 (en) * | 2015-07-31 | 2017-02-09 | Zen-Bio, Inc. | Exosome compositions and use thereof for soft tissue repair |
-
2018
- 2018-05-29 RU RU2018119843A patent/RU2710368C2/ru active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110003008A1 (en) * | 2008-02-22 | 2011-01-06 | Agency For Science, Technology And Research (A*Star) | Mesenchymal stem cell particles |
RU2548816C1 (ru) * | 2013-12-16 | 2015-04-20 | Мамонтова Марина Васильевна | Способ выделения микрорнк из биологических жидкостей |
WO2017023689A1 (en) * | 2015-07-31 | 2017-02-09 | Zen-Bio, Inc. | Exosome compositions and use thereof for soft tissue repair |
RU2608509C1 (ru) * | 2016-02-11 | 2017-01-18 | Елена Сергеевна Кастарнова | Способ получения экзосом из крови |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2018119843A3 (ru) | 2019-11-29 |
RU2018119843A (ru) | 2019-11-29 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7249693B2 (ja) | 誘導されたエキソソームを含む皮膚再生及び創傷治癒用組成物 | |
JP2010538681A (ja) | 人または動物胚から間葉系幹細胞を抽出及びその分泌物を抽出する方法 | |
US11291689B2 (en) | Methods and devices for the production and delivery of beneficial factors from adipose-derived stem cells | |
US20230092739A1 (en) | Stem cell compositions and methods of producing stem cells for therapeutic applications | |
US10072248B2 (en) | Method for differentiating pluripotent stem cell induced from mesenchymal stem cell into hepatocyte | |
EP3064574B1 (en) | Method for differentiating pluripotent stem cell induced from mesenchymal stem cell into chondrocyte | |
US20160272939A1 (en) | Method for Differentiating Pluripotent Stem Cell Induced from Mesenchymal Stem Cell Into Neuron | |
JP7478227B2 (ja) | 細胞老化抑制剤、生体組織修復促進剤、遺伝子発現調節剤及び製造方法 | |
RU2710368C2 (ru) | Способ получения и концентрирования микроРНК-содержащих экзосом мультипотентных мезенхимально-стромальных клеток для применения в косметических и лекарственных средствах для стимуляции регенеративных процессов и замедления процессов старения | |
AU2014396937A1 (en) | Method for manufacturing induced pluripotent stem cells from adipose-derived mesenchymal stem cells and induced pluripotent stem cells manufactured by same method | |
US10053669B2 (en) | Method for differentiating pluripotent stem cell induced from mesenchymal stem cell into osteoblast | |
US10494603B2 (en) | Method for differentiating a pluripotent stem cell induced from a mesenchymal stem cell into an adipocyte | |
RU2662172C2 (ru) | Способ получения регенеративного ветеринарного препарата на основе экстракта мезенхимальных стволовых клеток и кондиционной среды | |
RU2620981C2 (ru) | Способ получения культуры мезенхимных стволовых клеток человека из периваскулярного пространства вены пупочного канатика | |
EP3064572B1 (en) | Method for producing induced pluripotent stem cell from mesenchymal stem cell and induced pluripotent stem cell produced by the method | |
Muniandy et al. | Proliferation rate and cell size analyses of human peripheral blood suspension stem cells from three culturing terms populations | |
JP2023118035A (ja) | エキソソーム及びその調製プロセス及びその使用 | |
Ramanauskaitė et al. | Skin extracellular matrix components accelerate the regenerative potential of Lin− cells | |
Asadollahi et al. | Effect of Mouse Liver Extract on in Vitro Differentiation of Amniotic Membrane Stem Cells into Hepatocyte-Like Cells. |