RU2706548C1 - Способ диагностики стадий вич-инфекции - Google Patents
Способ диагностики стадий вич-инфекции Download PDFInfo
- Publication number
- RU2706548C1 RU2706548C1 RU2019102805A RU2019102805A RU2706548C1 RU 2706548 C1 RU2706548 C1 RU 2706548C1 RU 2019102805 A RU2019102805 A RU 2019102805A RU 2019102805 A RU2019102805 A RU 2019102805A RU 2706548 C1 RU2706548 C1 RU 2706548C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- stage
- hiv infection
- stages
- triglycerides
- serum
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/92—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving lipids, e.g. cholesterol, lipoproteins, or their receptors
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным болезням, и может быть использовано для диагностики стадий ВИЧ-инфекции. В плазме или сыворотке крови определяют соотношение содержания общего холестерина к триглицеридам (ОХ/ТГ). При его цифровых значениях ниже 5,7 диагностируют третью стадию болезни, в пределах 6,5-8,5 - 4А стадию, в пределах 9,0-11,0 - 4Б стадию и более 11 - 4В стадию. Способ обеспечивает диагностику стадий ВИЧ-инфекции согласно Российской классификации с меньшими материальными затратами за счет упрощения, удешевления и более широкой доступности для мониторинга инфекционного процесса. 4 пр.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к биохимии и инфекционным болезням и может быть использовано для диагностики стадий ВИЧ-инфекции.
В настоящее время существует Российская и Международная классификации ВИЧ-инфекции. Российская утверждена приказом Минздравсоцразвития РФ от 17.03.2006 №166 «Об утверждении Инструкции по заполнению годовой формы федерального государственного статистического наблюдения №61 «Сведения о контингентах больных ВИЧ-инфекцией» (https://studfiles. net/preview/1818585/page:3/). В ней представлена диагностика стадий ВИЧ-инфекции по клиническим признакам, которые многообразны и могут «переходить» из одной стадии в другую. Например, характерный признак 3-й стадии болезни генерализованная лимфоаденопатия может «отмечаться и на более поздних стадиях ВИЧ-инфекции» (https://studfiles. net/preview/1818585/page:3/).
В методическом письме «Правила постановки диагноза ВИЧ-инфекция», утвержденном Заместителем Министра здравоохранения и социального развития Российской Федерации Р.А. Хальфиным от 10 августа 2007 года №5922-РХ (http://docs.cntd.ru/document/420261061) помимо клинических признаков стадий ВИЧ-инфекции указывается, что в третьей стадии «отмечается постепенное снижение уровня CD4-лимфоцитов в среднем со скоростью 0,05-0,07×109 / в год. Обычно стадия 4А развивается у пациентов с уровнем CD4-лимфоцитов ниже 0,5×109/л. Стадия 4Б развивается у пациентов с уровнем CD4-лимфоцитов менее 0,35×109/л. Стадия 4В развивается у пациентов с уровнем CD4 лимфоцитов менее 0,2×109/л. Для стадии 5 типично снижение количества CD4-клеток ниже 0,05×109/л». Методика определения CD4-лимфоцитов описана В.В. Покровским и соавт. в книге «Клиническая диагностика и лечение ВИЧ-инфекции». - М.: ГОУ ВУНМЦ РФ, 2001. - С. 11 (аналог).
К недостаткам данного способа можно отнести сложность его реализации. В частности, результаты данного теста могут быть объективными лишь в специализированных центрах регионального масштаба, что значительно усложняет возможность оценки стадий ВИЧ-инфекции. В первую очередь из-за того, что анализ основан на характеристике рецепторов жизнеспособных клеток крови, поэтому исследование ограничено временными рамками - интервал между забором крови и ее тестированием не должен превышать 3-4 часов. Методику усложняют и дополнительные анализы - определение формулы крови и общего числа лейкоцитов с целью подсчета основного критерия - абсолютного числа CD4-лимфоцитов периферической крови. Для аналога характерна недостаточная информативность из-за лабильности показателей, не связанной непосредственно с фактором инфицирования ВИЧ. Изменения числа CD4-лимфоцитов весьма неспецифичны и могут наблюдаться при других заболеваниях.
Существуют и другие лабораторные способы диагностики ВИЧ-инфекции.
Способ лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции (патент №2123187 опубликован в БИ №34) предусматривает -ионобменную хромотографию сыворотки с последующим ИФА определением уровня "скрытых" антител. Данный метод, имеющий значение в прогнозе течения ВИЧ-инфекции, не ориентирован на определение ее стадий.
Способ определения антител к вирусу иммунодефицита человека (пат. №2032907 опубликован в БИ №10) может быть использован при установлении факта инфицирования ВИЧ, но не связан с определением стадии инфекции.
Способ твердофазного иммуноферментного определения антител к вирусу иммунодефицита человека (пат. 53296/30-13, БИ №45) имеет целью повышение чувствительности способа определения антител к ВИЧ, но также не может быть использован для диагностики стадии инфекционного процесса.
Известен способ оценки стадий ВИЧ-инфекции (Клиническая иммунология и аллергология под ред. Г. Лолора-младшего. - М., Практика, 2000. - С. 585-587), заключающийся в определении уровня сывороточного (β2-микроглобулина. Увеличение концентрации этого белка, определяемого с помощью диагностических наборов иммуноферментного анализа, соответствует прогрессии ВИЧ-инфекции. Между тем, данные изменения неспецифичны, поскольку подобная динамика β2-микроглобулина возможна не только при ВИЧ-инфекции, но и при опухолевых процессах, циррозе печени, лимфопролиферативных заболеваниях. Таким образом, этот метод недостаточно информативен для оценки стадий ВИЧ-инфекции ввиду своей неспецифичности (А. Ройт, Дж. Бристофф Иммунология. Мир, 2000. - с. 411).
Наиболее близким по технической сущности к заявленному способу является способ диагностики стадий ВИЧ-инфекции путем исследования крови, отличающейся тем, что тестируют сыворотку крови методом иммуноферментного анализа, определяют оптическую плотность - ОП исходного образца сыворотки и оптическую плотность исходного образца сыворотки, инкубированного в течение 10 минут со 100 мкл 3.5 М раствора изотиоционата натрия - NaSCN и при снижении ОП на 40% и менее диагностируют стадию А - генерализованной лимфаденопатии, при снижении ОП в интервале 40-60% диагностируют стадию В - пре-СПИД, а при снижении ОП на 60% и более диагностируют стадию С - СПИД (Патент РФ №2251701 (прототип)).
Недостаток данного способа заключается в том, что диагностика стадий ВИЧ-инфекции представлена по международной классификации CDC (ru/wikipedia.org/wiki/ВИЧ-инфекция), где «пациенту диагностируют ВИЧ- инфекцию, либо терминальную стадию СПИД, лица, которые подпадают под критерии категорий A3, В3, С2 и С3 подлежат учету, как больные СПИД». Данная классификация создана в 1993 году, т.е. значительно устарела. По сравнению с Российской классификацией стадий ВИЧ-инфекции данная международная классификация лишена необходимой детализации патологического процесса, что весьма затрудняет ее применение в практическом здравоохранении. Имеет всего три стадии, а Российская - 5 с подразделами А, Б и В. Это позволяет врачу лучше ориентироваться в определении прогрессирования заболевания и оценки результатов лечения. Кроме того, способ требует дорогостоящих реактивов и аппаратуры.
При проведении анализа имеющейся научной и патентной информации не обнаружено сведений, относящихся к использованию данных по содержанию общего холестерина и триглицеридов сыворотки крови для разграничения стадий ВИЧ-инфекции.
При создании изобретения решалась задача расширения арсенала способов диагностики стадий ВИЧ-инфекции.
Техническим результатом предлагаемого способа является диагностика стадий ВИЧ-инфекции согласно Российской классификации с меньшими материальными затратами, упрощение, удешевление и более широкая доступность для мониторинга инфекционного процесса.
Указанный технический результат достигается тем, что в способе диагностики стадий ВИЧ-инфекции, включающим исследования крови, определяют соотношение содержания общего холестерина (ОХ) к триглицеридам (ТГ) и при его цифровых значениях ниже 5,7, диагностируют третью стадию болезни, в пределах 6,5-8,5 - 4А стадию, в пределах 9,0-11,0 - 4Б стадию и более 11 - 4В стадию.
Новыми, ранее неизвестными признаками заявленного способа диагностики стадий ВИЧ-инфекции являются:
1. выбор простого, доступного объективного лабораторного теста для диагностики стадий ВИЧ-инфекции;
2. использование дешевого оборудования;
3. разработка установление предельных значений коэффициента (ОХ/ТГ) для пациентов с разными стадиями ВИЧ-инфекции;
4. установление цифровых значений коэффициента (ОХ/ТГ) для стадий ВИЧ-инфекции в соответствии с Российской классификацией.
Нами были исследованы показатели общего холестерина и триглицеридов плазмы или сыворотки крови с последующим определением коэффициента ОХ/ТГ у 50 больных в третьей, 30 больных в стадии 4А, 30 больных в стадии 4Б и 30 больных в стадии 4В ВИЧ-инфекции.
Было установлено, что у больных ВИЧ-инфекцией с третьей стадии болезни коэффициент ОХ/ТГ не превышает 5,7, со стадией 4А находится в пределах 6,5-8,5, со стадией 4Б находится в пределах 9,0-11,0 и со стадий 4В - более 11.
Предлагаемый СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СТАДИЙ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ осуществляют в следующей последовательности. Уровень холестерина и триглицеридов определяют унифицированным методом (http://studopedia.ru/13_95023_unifitsirovanniy-metod-opredeleniya-obshchego-holesterina-po-reaktsii-s-hlornim-zhelezom-metod-zlatkis-zaka.html) и определяют соотношение содержания общего холестерина к триглицеридам и при его цифровых значениях ниже 5,7, диагностируют третью стадию болезни, в пределах 6,5-8,5 - 4А стадию, в пределах 9,0-11,0 - 4Б стадию и более 11 - 4В стадию.
Определение общего холестерина по Ильку.
Ход определения: К 1,3 мл уксусной кислоты осторожно добавляют 0,05 мл плазмы или сыворотки крови без гемолиза, перемешивают, а затем добавляют 1 мл цветного реактива, хорошо перемешивают встряхиванием и оставляют на 30 мин при комнатной температуре, после чего фотометрируют при длине волны 530 нм в кювете с длиной оптического пути 1 см против холостого опыта, в который берут 1,3 мл уксусной кислоты, 0,05 мл исследуемой сыворотки или плазмы и 1 мл концентрированной серной кислоты.
Для приготовления калибровочного графика вместо исследуемого материала берут 0,05-0,2 мл калибровочного раствора, к которому добавляют уксусную кислоту до суммарного объема 1,35 мл, а затем добавляют 1 мл цветного реактива. Проба, в которую взяли 0,05 мл калибровочного реактива по окраске соответствует опытной пробе с содержанием холестерина в исследуемом материале 3 ммоль/л; проба, в которую взяли 0,1 мл калибровочного раствора, соответствует содержанию холестерина 6 ммоль/л и т.д. Расчет проводят по калибровочному графику.
Принцип метода: Содержащийся в плазме или сыворотке крови свободный и эфирносвязанный холестерин окисляется хлорным железом в присутствии уксусной, серной и фосфорной кислот с образованием ненасыщенных продуктов, окрашенных в красно-фиолетовый цвет. Фосфорная кислота повышает стойкость реактива, содержащего хлорное железо.
Унифицированный метод определения триглицеридов.
Ход определения: К 0,5 мл сыворотки или плазмы добавляют 2 мл гептана, 3,5 мл изопропилового спирта и 1 мл 0,08Н серной кислоты, перемешивают и через 5 мин центрифугируют. Из верхнего (гептанового) слоя отбирают 0,4 мл, добавляют 2 мл изопропилового спирта и 1 каплю 6,25Н КОН. Перемешивают, нагревают на водяной бане 10 мин при 70°С. После охлаждения добавляют 0,2 мл перйодатного реактива и 1 мл ацетил ацетонового реактива, после перемешивания вновь нагревают 10 мин при 70°С. Развивается желто-зеленое окрашивание, интенсивность которого измеряют при длине волны 425 нм в кюветах с длиной оптического пути 0,5 см против холостой пробы, которую ставят так же, как и опытную, но вместо исследуемого материала берут 0,5 мл воды.
Калибровочную пробу ставят так же, как и опытную, но вместо сыворотки или плазмы берут 0,5 мл калибровочного раствора и 0,5 мл воды: развивающаяся окраска соответствует окраске опытной пробы, в которую взята плазма с содержанием триглицеридов 2 ммоль/л.
Нормальные величины триглицеридов в плазме крови считают 0,55-1,65 ммоль/л (50-150 мг в 100 мл).
Принцип метода: триглицериды экстрагируются смесью гептана и изопропилового спирта, в которую переходят только неполярные липиды, а более полярные фосфолипиды остаются в водной фазе. Триглицериды омыляются (гидролизуются) щелочью, глицерин окисляется йодной кислотой до формальдегида, который определяется по цветной реакции с ацетил ацетоном.
Пример 1. Больной А., 28 лет, наблюдается в ГБУЗ Тверской области «Областной центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями» с диагнозом: ВИЧ инфекция, стадия 3.
Уровень общего холестерина составил 3,5 ммоль/л, триглицеридов 0,74 ммоль/л. Коэффициент ОХ/ТГ=4,7.
Значение коэффициента ОХ/ТГ менее 5,7, что позволило диагностировать 3-ю стадию ВИЧ-инфекции.
Пример 2. Больной Б., 56 лет, наблюдается в ГБУЗ Тверской области «Областной центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями» с диагнозом: ВИЧ инфекция, стадия 4А. Уровень общего холестерина составил 8,2 ммоль/л, триглицеридов 1,2 ммоль/л. Коэффициент ОХ/ТГ=6,8.
Значение коэффициента ОХ/ТГ находится в пределах менее 6,5-8,5, что позволило диагностировать 4А стадию ВИЧ-инфекции.
Пример 3. Больной И., 40 лет, наблюдается в ГБУЗ Тверской области «Областной центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями» с диагнозом: ВИЧ инфекция, стадия 4Б.
Уровень общего холестерина составил 9,8 ммоль/л, триглицеридов 1,0 ммоль/л. Коэффициент ОХ/ТГ=9,8.
Значение коэффициента ОХ/ТГ находится в пределах 9-11, что позволило диагностировать 4Б стадию ВИЧ-инфекции.
Пример 4. Больной С, 38 лет, наблюдается в ГБУЗ Тверской области «Областной центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями» с диагнозом: ВИЧ инфекция, стадия 4В.
Уровень общего холестерина составил 9,2 ммоль/л, триглицеридов 0,8 ммоль/л. Коэффициент ОХ/ТГ=11,5.
Значение коэффициента ОХ/ТГ больше 11,0, что позволило диагностировать 4В стадию ВИЧ-инфекции.
Использование заявленного способа диагностики стадий ВИЧ-инфекции позволяет врачу проводить мониторинг инфекционного процесса, определиться с вопросом необходимости или коррекции антиретровирусной терапии. Способ прост в исполнении, дешев, не требует дорогостоящего оборудования, дает прямой экономический эффект. В рамках обязательного медицинского страхования, может быть применен для пациентов в центральных районных больницах, а не только в областных СПИД центрах.
Claims (1)
- Способ диагностики стадий ВИЧ-инфекции, заключающийся в исследовании крови, отличающийся тем, что в плазме или сыворотке крови определяют соотношение содержания общего холестерина к триглицеридам (ОХ/ТГ) и при его цифровых значениях ниже 5,7 диагностируют третью стадию болезни, в пределах 6,5-8,5 - 4А стадию, в пределах 9,0-11,0 - 4Б стадию и более 11 - 4В стадию.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2019102805A RU2706548C1 (ru) | 2019-01-31 | 2019-01-31 | Способ диагностики стадий вич-инфекции |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2019102805A RU2706548C1 (ru) | 2019-01-31 | 2019-01-31 | Способ диагностики стадий вич-инфекции |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2706548C1 true RU2706548C1 (ru) | 2019-11-19 |
Family
ID=68579714
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2019102805A RU2706548C1 (ru) | 2019-01-31 | 2019-01-31 | Способ диагностики стадий вич-инфекции |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2706548C1 (ru) |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2251701C1 (ru) * | 2004-06-07 | 2005-05-10 | Сизякина Людмила Петровна | Способ диагностики стадий вич-инфекции |
US8815519B2 (en) * | 2006-12-22 | 2014-08-26 | Hvidovre Hospital | Method for predicting cancer and other diseases |
RU2666223C1 (ru) * | 2017-09-29 | 2018-09-06 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Тверской государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования эффективности антиретровирусной терапии при ко-инфекции туберкулёз и вич-инфекция |
-
2019
- 2019-01-31 RU RU2019102805A patent/RU2706548C1/ru active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2251701C1 (ru) * | 2004-06-07 | 2005-05-10 | Сизякина Людмила Петровна | Способ диагностики стадий вич-инфекции |
US8815519B2 (en) * | 2006-12-22 | 2014-08-26 | Hvidovre Hospital | Method for predicting cancer and other diseases |
RU2666223C1 (ru) * | 2017-09-29 | 2018-09-06 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Тверской государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования эффективности антиретровирусной терапии при ко-инфекции туберкулёз и вич-инфекция |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
ДОЦЕНКО М. и др. Холестерин и иммунитет: клинико-иммунологические параллели. Наука и инновации, 2015, 4(146), стр.58-64. WANG Q. et al. Lipids profile among ART-naïve HIV infected patients and men who have sex with men in China: a case control study. Lipids Health Dis. 2016, 15(1):149, doi: 10.1186/s12944-016-0297-1. KOHLI R. et al. Cholesterol Levels in HIV and/or HCV-Infected Drug Users Living in Argentina. J Int Assoc Provid AIDS Care. 2016, 15(5), p.400-405. * |
ДОЦЕНКО М. и др. Холестерин и иммунитет: клинико-иммунологические параллели. Наука и инновации, 2015, 4(146), стр.58-64. WANG Q. et al. Lipids profile among ART-naïve HIV infected patients and men who have sex with men in China: a case * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
AU2009247039B2 (en) | Device and method for separating and analyzing blood | |
JP4523587B2 (ja) | A型及びb型急性大動脈解離と急性心筋梗塞の鑑別方法及び鑑別用キット | |
RU2666223C1 (ru) | Способ прогнозирования эффективности антиретровирусной терапии при ко-инфекции туберкулёз и вич-инфекция | |
JP2019060880A (ja) | 移植拒絶反応、神経変性疾患又はうつ病と特に関連する潜在的炎症のインビトロ早期検出方法 | |
Robinson et al. | Population screening for colorectal cancer: comparison between guaiac and immunological faecal occult blood tests | |
RU2706548C1 (ru) | Способ диагностики стадий вич-инфекции | |
Sauer et al. | Critical role of the sample matrix in a point-of-care protein chip for sepsis | |
DE102016015060A1 (de) | Verfahren zum Nachweis von Tumormarkern im Stuhl zur Erkennung gastrointestinaler Tumore | |
KR101138343B1 (ko) | 알츠하이머 질병의 진단을 위한 신속한 시험법 | |
US6818181B2 (en) | Kit and method for detecting food allergies | |
Trares et al. | Association of F2-isoprostane levels with Alzheimer’s disease in observational studies: A systematic review and meta-analysis | |
KR20200102886A (ko) | 항-cyfra21-1 자가항체-항원 결합체 및 cyfra21-1 항원 마커의 검출방법 및 이들 마커의 비율을 이용한 폐암 진단키트 | |
WO2010058412A1 (en) | A new rapid thrombochek test kit based on whole blood screening test to detect platelet hyperaggregation at a temparature of 37°c in the clinical laboratory | |
RU2618404C1 (ru) | Способ скрининговой диагностики острого клеточного отторжения трансплантированного сердца | |
CN108267594A (zh) | 一种基于双分子荧光互补技术的st2检测试剂盒、制备及使用方法 | |
US20100279319A1 (en) | Detection of plasmodium falciparum histidine-rich protein II in saliva malaria patients | |
CN110716054A (zh) | 一种血清亲细胞性免疫球蛋白e的定量检测试剂盒 | |
Chapman | Lateral flow tests for allergy diagnosis: point-of-care or point of contention? | |
RU2246115C1 (ru) | Способ диагностики лямблиоза и его течения | |
CN114660135B (zh) | 一种pd-l1外泌体电化学传感器及其制备方法和应用 | |
CA2929810A1 (en) | Improved early prediction of preeclampsia | |
AU2021105747A4 (en) | Application of diagnostic kit and MAK16 in preparation of reagent for early diagnosis of systemic lupus erythematosus | |
RU2633749C1 (ru) | Способ диагностики пищевой аллергии | |
RU93660U1 (ru) | Тест-полоска для диагностики нефропатии | |
JP2014505859A (ja) | Ape1/ref−1を含有する膀胱癌診断用組成物、及びこれを利用した膀胱癌診断キット |