RU2702238C2 - Лиофилизат для приготовления радиофармацевтического препарата - Google Patents
Лиофилизат для приготовления радиофармацевтического препарата Download PDFInfo
- Publication number
- RU2702238C2 RU2702238C2 RU2017137800A RU2017137800A RU2702238C2 RU 2702238 C2 RU2702238 C2 RU 2702238C2 RU 2017137800 A RU2017137800 A RU 2017137800A RU 2017137800 A RU2017137800 A RU 2017137800A RU 2702238 C2 RU2702238 C2 RU 2702238C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- solution
- radiopharmaceutical
- peptide
- lyophilizate
- nodaga
- Prior art date
Links
- 239000012217 radiopharmaceutical Substances 0.000 title claims abstract description 24
- 229940121896 radiopharmaceutical Drugs 0.000 claims abstract description 23
- 230000002799 radiopharmaceutical effect Effects 0.000 claims abstract description 23
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 17
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 16
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 15
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 7
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims abstract description 7
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims abstract description 7
- GYHNNYVSQQEPJS-YPZZEJLDSA-N Gallium-68 Chemical compound [68Ga] GYHNNYVSQQEPJS-YPZZEJLDSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims abstract description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 206010029113 Neovascularisation Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 11
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 238000009206 nuclear medicine Methods 0.000 abstract description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 18
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 9
- 238000002600 positron emission tomography Methods 0.000 description 9
- IYMAXBFPHPZYIK-BQBZGAKWSA-N Arg-Gly-Asp Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O IYMAXBFPHPZYIK-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 7
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 7
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 description 5
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 5
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 4
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- KRHYYFGTRYWZRS-BJUDXGSMSA-N ac1l2y5h Chemical compound [18FH] KRHYYFGTRYWZRS-BJUDXGSMSA-N 0.000 description 3
- 108010072041 arginyl-glycyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052733 gallium Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- VZVYOBLEVYIWBA-ZIILNSDKSA-N 2-[(2S,5R,8S,11S)-5-benzyl-11-[3-(diaminomethylideneamino)propyl]-8-[4-[[(2S,3R,4R,5R,6S)-6-[(2-(18F)fluoranylpropanoylamino)methyl]-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carbonyl]amino]butyl]-3,6,9,12,15-pentaoxo-1,4,7,10,13-pentazacyclopentadec-2-yl]acetic acid Chemical compound CC([18F])C(=O)NC[C@@H]1O[C@@H]([C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O)C(=O)NCCCC[C@@H]1NC(=O)[C@@H](Cc2ccccc2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC1=O VZVYOBLEVYIWBA-ZIILNSDKSA-N 0.000 description 2
- JHALWMSZGCVVEM-UHFFFAOYSA-N 2-[4,7-bis(carboxymethyl)-1,4,7-triazonan-1-yl]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 JHALWMSZGCVVEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 description 2
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 description 2
- GYHNNYVSQQEPJS-UHFFFAOYSA-N Gallium Chemical compound [Ga] GYHNNYVSQQEPJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 2
- 201000008274 breast adenocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 150000002739 metals Chemical group 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- YYQUWEHEBOMRPH-NYUBLWNDSA-N 2-[(2s,5r,8s,11s)-5-benzyl-11-[3-(diaminomethylideneamino)propyl]-3,6,9,12,15-pentaoxo-8-propan-2-yl-1,4,7,10,13-pentazacyclopentadec-2-yl]acetic acid Chemical compound N1C(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1CC1=CC=CC=C1 YYQUWEHEBOMRPH-NYUBLWNDSA-N 0.000 description 1
- NTEJDFWMDRHQJE-UHFFFAOYSA-N 2-[1,2,8-tris(carboxymethyl)-1,2,5,8-tetrazecan-5-yl]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)N(CC(O)=O)CC1 NTEJDFWMDRHQJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001494 2-propynyl group Chemical group [H]C#CC([H])([H])* 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 108010022425 Platelet Glycoprotein GPIIb-IIIa Complex Proteins 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GKLVYJBZJHMRIY-OUBTZVSYSA-N Technetium-99 Chemical compound [99Tc] GKLVYJBZJHMRIY-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N Tetraxetan Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000001174 ascending effect Effects 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 108010050963 cyclo(arginyl-glycyl-aspartyl-phenylalanyl-valyl) Proteins 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- -1 gallium ions Chemical class 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 238000012792 lyophilization process Methods 0.000 description 1
- 150000002678 macrocyclic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000001991 scapula Anatomy 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 210000003699 striated muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 201000004595 synovitis Diseases 0.000 description 1
- 229940056501 technetium 99m Drugs 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000010415 tropism Effects 0.000 description 1
- 230000036326 tumor accumulation Effects 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к ядерной медицине и может быть использовано для приготовления радиофармацевтического препарата, содержащего галлий-68, для обнаружения очагов неоваскуляризации. Предложен лиофилизат, содержащий пептид NODAGA-RGD2 и ацетат натрия. При этом для приготовления лиофилизата используют раствор, содержащий 0,002 г пептида NODAGA-RGD2 и 1,64 г ацетата натрия в 100 мл воды для инъекций, при этом раствор для лиофилизации фасуют по 1 мл во флаконы, и при добавлении раствора Ga-68 в виде 2 мл элюата генератора 68Ge/68Ga в 0,1 М HCl к одному флакону лиофилизата получают радиофармпрепарат с высокой радиохимической чистотой в виде изотонического раствора. Изобретение обеспечивает получение радиофармацевтического лекарственного препарата высокой радиохимической чистоты в виде изотонического раствора с кислотностью, позволяющей проводить внутривенное введение пациенту. 4 ил., 1 табл., 5 пр.
Description
Изобретение относится к ядерной медицине, а именно к лиофилизату для приготовления радиофармпрепарата с галлием-68 для обнаружения очагов неоваскуляризации в организме методом позитронно-эмиссионной томографии (ПЭТ).
Несмотря на серьезные успехи, достигнутые в диагностике и лечении онкологических заболеваний в последнее время, смертность от них остается на одном из первых мест. Для успешного лечения злокачественных новообразований крайне важно своевременно обнаружить эту патологию, поэтому во всем мире ведется поиск новых мишеней для обнаружения очагов злокачественного роста. Одной из таких мишеней является интегрин αVβ3, экспрессирующийся в процессе роста новых кровеносных сосудов, который сопровождает рост злокачественного новообразования и практически не происходит во взрослом здоровом организме.
Для обнаружения таких зон роста используется прежде всего ПЭТ, поскольку она способны обнаруживать раковую опухоль или ее метастазы очень малых размеров (до 2 мм) независимо от места локализации патологии.
В качестве вектора для связывания с интегрином αVβ3, чаще всего используют пептиды, содержащие аминокислотную последовательность аргинин-глицин-аспарагиновая кислота (RGD) в открытой или циклической форме. Основная масса работ направлена на создание препаратов с фтором-18. Первый из них - [18F]галакто-RGD был исследован на людях в 2005 году. В этом исследовании, препарат показал высокую изменчивость накопления опухоли (стандартизированный уровень накопления (СУН) составил 1.2-10.0) у девяти пациентов с меланомой, саркомой, раком почки и виллезонодулярным синовитом. Было обнаружено, что препарат хорошо переносится, и никаких побочных эффектов от применения [18F]галакто-RGD не было зарегистрировано. За прошедшие годы были исследованы десятки соединений, меченных фтором-18. Еще два из них ((2 - [18F] фторпропиламид-цикло(RGDfK) и [18F]-Fluciclatid) в настоящее время проходит клинические исследования. Все эти соединения получаются обычно с недостаточно высоким выходом и требуют стадию очистки методом ВЭЖХ. Также жесткая привязка к циклотрону приводит к достаточно высокой стоимости этих соединений и ограничивает их дальнейшее клиническое применение. В качестве альтернативы препаратам с фтором-18 активно исследуются соединения, содержащие в качестве позитрон-излучающего радионуклида генераторные изотопы Cu-64 и Ga-68.
Линейный пептид с аминокислотной последовательностью RGD склонен к разложению в физиологических условиях [2], а также обладает невысокой аффинностью (IC50>100 nM) и селективностью по отношению к интегрину αvβ3. Поэтому Кесслер и его сотрудники [21, 22] разработали методику циклизации линейного пептида RGD с добавлением двух аминокислот и удлинением до пентапептида: цикло(-Arg-Gly-Asp-D-Phe-Val-) или c-(RGDfV). Причем одна из двух добавленных аминокислот присутствует в неестественной D-конфигурации (D-Phe). Полученное соединение позволило достигнуть очень высокой активности и специфичности (по отношению к интегрину тромбоцитов αIIbβ3). Циклическая структура и включение D-аминокислоты в дополнение к очень хорошим связующим свойствам гарантирует высокую стабильность соединения против ферментативного расщепления in vivo. Впоследствии было показано, что циклический пептид, при условии сохранения рецептор-связывающей конформации, показывает большую селективность и аффинность. Пентапептиды показывают наивысший эффект, при этом 5-ая аминокислота практически не влияет на связывание с рецепторами. В научных публикациях по исследованию RGD-пептидов для целей ядерной медицины на сегодняшний день наиболее часто встречается
Для связывания радионуклидов с RGD-пептидами в состав молекулы вводят специальные простетические (для связывания фтора-18) или хелатирующие (для связывания радиометаллов) группы. Для введения этих групп чаще всего используют свободную аминогруппу 5-ой аминокислоты циклического пептида (обычно это лизин), которая находится далеко от ключевой последовательности и не влияет на взаимодействии с интегрином. В ряде случаев в пептидную цепь вводились другие функциональные группы (карбоксильная, пропаргиловая). Для связывания радиометаллов используют хелаторы, образующие с ними прочные комплексы. В случае галлия это обычно такие макроциклические соединения как DOTA (1,4,7,10-тетраазациклодекан-1,4,7,10-тетрауксусная кислота) или NOTA (1,4,7-триазациклононан-1,4,7-триуксусная кислота), NODAGA (1,4,7-триазациклононан-N-глутаминовая кислота-N',N''-диуксусная кислота) (А.А. Ларенков и др., 2011).
В работе (Knetsch et al., 2011), наиболее близкой к настоящему изобретению, описывается получение, мечение и in vitro изучение [68Ga]NODAGA-RGD. Реакцию мечения проводили следующим образом: к 10 мкл раствора NODAGA-RGD в воде добавляли 60 мкл 1,9 М раствора ацетата натрия, а затем 300 мкл раствора элюата генератора 68Ge/68Ga. Реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 15 мин. Для биологического тестирования ее пропускали через колонку Sep-Pak С18 cartridge, промывали 2 мл изотонического раствора, меченный пептид смывали 0,5 мл 95% этанола. Затем \этанол удаляли током аргона при 70°C и остаток перерастворяли в 125 мкл натрий-фосфатного буфера (PBS).
Основным недостатком этого метода является то, что препарат получают из жидких реагентов, причем в зависимости от необходимого конечного объема препарата количество исходных реагентов разное. Это создает трудности в рутинном приготовлении РФП. Также пептид в растворе обладает ограниченным сроком годности - даже в замороженном виде не более 1-2 месяцев. Поэтому задачей данного изобретения является разработка состава лиофилизата для приготовления РФП, аналогичного по способу использования с наборами для приготовления РФП с технецием-99м, широко используемым в клинической практике. Помимо этого, в качестве векторной молекулы используется димер, т.е. в состав пептида входит 2 последовательности цикло-RGD (NODAGA-RGD2).
Поставленная задача решается тем, что был разработан состав лиофилизата, который позволяет стабильно получать РФП в клиническом учреждении. При этом срок годности лиофилизата составляет не менее 1 года.
Техническим результатом заявленного изобретения является состав лиофилизата, при добавлении в который 2 мл элюата генератора 68Ge/68Ga получают радиофармацевтический лекарственный препарат с высокой радиохимической чистотой (более 90%), при этом раствор имеет приемлемую кислотность и является изотоническим. РФП накапливается в очагах роста опухолей и может быть использован для обнаружения злокачественных новообразований.
Сущность изобретения поясняется на представленных структурах и изображениях:
ФИГ. 1. Структура пептидов RGD (слева) и цикло-RGD (справа)
ФИГ. 2. Структура пептида NODAGA-.
ФИГ. 3. ПЭТ-изображение мыши с перевитой глиобластомой U-87 MG.
ФИГ. 4. ПЭТ-изображение мыши с перевитой аденокарциномой молочной железы Са755.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
ПРИМЕР 1. Получение лиофилизата.
Приготовление набора реагентов: навеску пептида NODAGA-RGD2 (0,002 г) растворяют в 100 мл воды для инъекций. Затем в колбу вносят 1,64 г ацетата натрия и перемешивают до полного растворения. Полученный раствор фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм. Полученный фильтрат фасуют во флаконы для лекарственных средств порциями по 1,0 мл. Флаконы с раствором реагентов помещают в предварительно охлажденную камеру лиофильной сушки и проводят лиофильную сушку. По окончании процесса лиофилизации камеру лиофильной сушки заполняют аргоном, затем укупоривают флаконы резиновыми пробками и герметизируют алюминиевыми колпачками.
ПРИМЕР 2. Приготовление радиофармацевтического препарата в ручном режиме.
Во флакон с лиофилизатом вносят 2 мл элюата генератора 68Ge/68Ga в 0,1 М HCl, помещают в защитный свинцовый контейнер и нагревают на кипящей водяной бане в течении 10-15 мин. После охлаждения проводят анализ препарата.
Вариантом состава радиофармацевтического препарата является следующий (на 2 мл):
| Радионуклид галлий-68 | 37-740 МБк |
| Пептид NODAGA-RGD2 | 0,02 мг |
| Натрия ацетат | 16,4 мг |
| рН раствора РФП | 3,8-6,8 |
Радиохимическую чистоту композиции проверяют методом быстрой тонкослойной хроматографии (ITLC). На полоску хроматографической бумаги пластины ITLC-SG, представляющую собой стекловолокно, импрегнированное силикагелем, наносят препарат в количестве 0,001-0,005 мл и проводят хроматографирование восходящим методом, используя в качестве элюента 0,05М лимонную кислоту. В указанном режиме хроматографирования Rf меченного пептида составляет 0,0±0,05, а Rf свободных ионов галлия составляет 0,95±0,05. Радиохимическая чистота (РХЧ) составляет 96,2%. Кислотность раствора определенная с помощью рН-метра, составила 5,2. Изотоничность раствора контролируют измерением осмомоляльности раствора на приборе ОСКР-1М. Она составляет 280 ммоль/кг Н2ОРФП на основе
ПРИМЕР 3. Приготовление радиофармацевтического препарата с использованием автоматизированного модуля синтеза.
РФП из лиофилизата может быть также приготовлен с использованием автоматизированного модуля синтеза РФП на основе отечественного генератора 68Ge/68Ga, производства ООО НПФ «Позитом-Про» (Москва). В этом случае значительно снижается радиационная нагрузка на персонал.
Синтез проводится в соответствии с инструкцией производителя. Анализ полученного препарата проводят также, как и в примере 2.
Пример 4. Изучение повеления радиофармацевтического препарата в организме лабораторных животных с модельными опухолями.
Показателем функциональной пригодности радиофармацевтического препарата для визуализации очагов злокачественного роста является его повышенное накопление в опухоли по сравнению нормальными органами/тканями. Эксперименты были проведены на животных с перевитой глиобластомой U-87 MG. Данная обухоль характеризуется агрессивным ростом и высокой степенью неоваскулярмзации. Опухоль перевивались опухолевым материалом, взятым от животного-донора, для чего опухоль извлекали, продавливали через мелкое сито для отделения от стромы. Полученную массу взвешивались. Далее добавляли питательную среду Хэнкса в соотношении 1:6. Полученную суспензию гомогенизировали при помощи стеклянной ступки и пестика. При таком разбавлении получали 10-15 млн клеток в мл. Животным опухолевые клетки перевивали подкожно по лопатку по 0,2 мл. Радиофармацевтический препарат вводили мышам с опухолью глиобластомы U-87 MG внутривенно в хвостовую вену в объеме 0,1 мл, введенная активность препарата составила 2,30 МБк на одно животное. Мыши были разбиты на 5 групп (по 3 особи) для каждого временного интервала исследования. Через 15, 30, 60, 90, 120 минут после инъекции РФП животных умерщвляли частичной декапитацией. Для радиометрии отбирали следующие органы и ткани:
- кровь (~0,5 мл);
- щитовидная железа;
- легкие;
- сердце;
- желудок с содержимым;
- печень;
- почки;
- мочевой пузырь;
- тонкий кишечник с содержимым;
- толстый кишечник с содержимым;
- поперечнополосатая мышца (~1,0 г);
Радиометрия проб проведена с использованием автоматического гамма-счетчика Wizard 2480 (PerkinElmer, USA). Полученные результаты представлены в таблице 1. Выраженная тропность препарата РФП «Васкуляр, 68Ga» к опухолевому очагу глиобластомы и удержание в нем на фоне других мягких тканей подтверждается значениями коэффициента дифференциального накопления опухолевый очаг/мышца. Иная картина динамики изменения КДН наблюдается в отношении крови - значение опухолевый очаг /кровь будет варьироваться в небольших значениях в течение 120 минут, что подтверждает целесообразность визуализации патологии на ПЭТ на протяжении 120 минут после введения РФП.
Пример 5. Визуализация опухоли в организме животного методом ПЭТ.
Возможность использования РФП, полученного из лиофилизата, была подтверждена в следующем эксперименте. Радиофармацевтический препарат был введен мыши с перевитой глиобластомой U-87 MG внутривенно, в объеме 0,1 мл с активностью около 20 МБк/мл. Через 15, 35 минут после введения животных помещали в камеру с газовой анестезией (изофлуран/кислород, 1:1), затем сканировали на ПЭТ-томографе для лабораторных животных Genisys4 PET/X-RAY (SofieBiosciences, USA) в статическом режиме в течение 10 минут. После получали выходной файл формата *.dicom с его последующей обработкой в программе VivoQuant версии 2.5 и получением изображений с фильтром NIH rainbow. Полученный результат показан на рис. 3. Для сравнения на рис. 4 показано ПЭТ-изображение мыши с аденокарциномой молочной железы Са755, не экспрессирующей интегрины. Видно, что в этом случае накопление препарата в опухоли не превышает фоновых значений.
Claims (1)
- Лиофилизат для приготовления радиофармацевтического препарата, содержащего галлий-68, для обнаружения очагов неоваскуляризации, отличающийся тем, что он содержит пептид NODAGA-RGD2 и ацетат натрия, при этом для приготовления лиофилизата используют раствор, содержащий 0,002 г пептида NODAGA-RGD2 и 1,64 г ацетата натрия в 100 мл воды для инъекций, при этом раствор для лиофилизации фасуют по 1 мл во флаконы, и при добавлении раствора Ga-68 в виде 2 мл элюата генератора 68Ge/68Ga в 0,1 М HCl к одному флакону лиофилизата получают радиофармпрепарат с высокой радиохимической чистотой в виде изотонического раствора.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017137800A RU2702238C2 (ru) | 2017-10-30 | 2017-10-30 | Лиофилизат для приготовления радиофармацевтического препарата |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017137800A RU2702238C2 (ru) | 2017-10-30 | 2017-10-30 | Лиофилизат для приготовления радиофармацевтического препарата |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2017137800A3 RU2017137800A3 (ru) | 2019-05-06 |
| RU2017137800A RU2017137800A (ru) | 2019-05-06 |
| RU2702238C2 true RU2702238C2 (ru) | 2019-10-07 |
Family
ID=66430165
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017137800A RU2702238C2 (ru) | 2017-10-30 | 2017-10-30 | Лиофилизат для приготовления радиофармацевтического препарата |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2702238C2 (ru) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2464043C1 (ru) * | 2011-09-26 | 2012-10-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный медицинский биофизический центр имени А.И. Бурназяна" | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РАСТВОРОВ 68Ga ВЫСОКОЙ ЧИСТОТЫ |
| RU2522892C1 (ru) * | 2013-01-09 | 2014-07-20 | Российская Федерация, от имени которой выступает Государственная корпорация по атомной энергии "Росатом" | Способ получения активной фармацевтической субстанции для синтеза препаратов галлия-68 |
-
2017
- 2017-10-30 RU RU2017137800A patent/RU2702238C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2464043C1 (ru) * | 2011-09-26 | 2012-10-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный медицинский биофизический центр имени А.И. Бурназяна" | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РАСТВОРОВ 68Ga ВЫСОКОЙ ЧИСТОТЫ |
| RU2522892C1 (ru) * | 2013-01-09 | 2014-07-20 | Российская Федерация, от имени которой выступает Государственная корпорация по атомной энергии "Росатом" | Способ получения активной фармацевтической субстанции для синтеза препаратов галлия-68 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| A.A. LARENKOV et al. Preparation of High-Purity 68Ga Solutions by Ion Exchange in Mixed Acetone-Hydrochloric Acid Medium // Radiochemistry, 2014, Vol 56, N 1, pp. 57-65. * |
| В.Б. БУБЕНЩИКОВ и др. Исследование комплексов производных RGD-пептитов с 68Ga // Радиохимия, 2016, т.58, N 5, с. 437-442. * |
| В.Б. БУБЕНЩИКОВ и др. Исследование комплексов производных RGD-пептитов с 68Ga // Радиохимия, 2016, т.58, N 5, с. 437-442. A.A. LARENKOV et al. Preparation of High-Purity 68Ga Solutions by Ion Exchange in Mixed Acetone-Hydrochloric Acid Medium // Radiochemistry, 2014, Vol 56, N 1, pp. 57-65. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2017137800A3 (ru) | 2019-05-06 |
| RU2017137800A (ru) | 2019-05-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Hoffend et al. | Gallium-68-DOTA-albumin as a PET blood-pool marker: experimental evaluation in vivo | |
| Guo et al. | Comparison of three dimeric 18F-AlF-NOTA-RGD tracers | |
| AU2011290856B2 (en) | Peptide radiotracer compositions | |
| WO2020065045A1 (en) | Labeled inhibitors of prostate specific membrane antigen (psma), their use as imaging agents and pharmaceutical agents for the treatment of psma-expressing cancers | |
| Tsiapa et al. | Biological evaluation of an ornithine-modified 99mTc-labeled RGD peptide as an angiogenesis imaging agent | |
| Liu et al. | Development of RGD-based radiotracers for tumor imaging and therapy: translating from bench to bedside | |
| KR101200049B1 (ko) | 테크네튬-99엠 트리카보닐 표지 글리신 단량체 또는 올리고머 활용 생리활성분자를 이용한 프로브의 제조방법 및 이를 포함하는 영상제 조성물 | |
| CN109414514A (zh) | Pet成像免疫调节剂 | |
| Tolmachev et al. | Evaluation of a maleimido derivative of NOTA for site-specific labeling of affibody molecules | |
| Zhao et al. | Comparison of biological properties of 99mTc-labeled cyclic RGD Peptide trimer and dimer useful as SPECT radiotracers for tumor imaging | |
| CN107019807A (zh) | 一种gpc3受体靶向的多肽放射性诊断或治疗药物 | |
| Mansour et al. | Evaluation of a novel GRPR antagonist for prostate cancer PET imaging:[64Cu]-DOTHA2-PEG-RM26 | |
| Huang et al. | Automated radiosynthesis and preclinical evaluation of Al [18F] F-NOTA-P-GnRH for PET imaging of GnRH receptor-positive tumors | |
| Chakraborty et al. | Tracer level radiochemistry to clinical dose preparation of 177Lu-labeled cyclic RGD peptide dimer | |
| MX2007010116A (es) | Complejos de galio radiomarcados, metodos para sintesis y uso para la formacion de imagenes de tomografia de emision de positron (pet) de la expresion del receptor de factor de crecimiento epidermico (egfr) en tumores malignos. | |
| JP2008510680A (ja) | 安定化され凍結乾燥された放射性薬剤 | |
| Zhao et al. | 68Ga-labeled dimeric and trimeric cyclic RGD peptides as potential PET radiotracers for imaging gliomas | |
| RU2702238C2 (ru) | Лиофилизат для приготовления радиофармацевтического препарата | |
| Zhao et al. | Radiosynthesis and Preliminary Biological Evaluation of 18F‐Fluoropropionyl‐Chlorotoxin as a Potential PET Tracer for Glioma Imaging | |
| US10016521B2 (en) | Spect radionuclide-labeled trimeric cycle RGD peptide, preparation method thereof and imaging method thereof | |
| JP7166512B2 (ja) | 炎症のイメージングのための分子標識としてのＣＤ３１ｓｈｅｄ | |
| Xu et al. | Iminodiacetic acid as bifunctional linker for dimerization of cyclic RGD peptides | |
| Kondo et al. | Radioiodinated bicyclic RGD peptide for imaging integrin αvβ3 in cancers | |
| CN101597323A (zh) | 一种用于肿瘤显像的放射性同位素标记多肽 | |
| JP2008503493A (ja) | 腫瘍を破壊するための安定化され凍結乾燥された放射性薬剤 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20191031 |