RU2700092C2 - Комбинированная терапия на основе афукозилированного антитела к cd20 в сочетании с конъюгатом антитело к cd22 - лекарственное средство - Google Patents
Комбинированная терапия на основе афукозилированного антитела к cd20 в сочетании с конъюгатом антитело к cd22 - лекарственное средство Download PDFInfo
- Publication number
- RU2700092C2 RU2700092C2 RU2015151455A RU2015151455A RU2700092C2 RU 2700092 C2 RU2700092 C2 RU 2700092C2 RU 2015151455 A RU2015151455 A RU 2015151455A RU 2015151455 A RU2015151455 A RU 2015151455A RU 2700092 C2 RU2700092 C2 RU 2700092C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antibody
- antibodies
- amino acid
- seq
- hvr
- Prior art date
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims description 142
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title claims description 130
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 title claims description 35
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 title abstract description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 14
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 127
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 88
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 claims abstract description 67
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 claims abstract description 66
- 101000884305 Homo sapiens B-cell receptor CD22 Proteins 0.000 claims abstract description 50
- 102100038080 B-cell receptor CD22 Human genes 0.000 claims abstract description 46
- 229960003347 obinutuzumab Drugs 0.000 claims abstract description 32
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 43
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 35
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 32
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 claims description 28
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 claims description 26
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 26
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 claims description 22
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 claims description 20
- 208000003747 lymphoid leukemia Diseases 0.000 claims description 12
- 208000028018 Lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 claims description 11
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 claims description 10
- 230000005865 ionizing radiation Effects 0.000 claims description 8
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 4
- 229940049595 antibody-drug conjugate Drugs 0.000 abstract description 124
- 239000000611 antibody drug conjugate Substances 0.000 abstract description 109
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 abstract description 92
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 28
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 6
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 187
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 132
- 238000000034 method Methods 0.000 description 117
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 70
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 69
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 69
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 67
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 60
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 60
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 57
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 51
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 47
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 46
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 46
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 45
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 43
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 42
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 42
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 41
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 41
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 40
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 40
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 38
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 34
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 34
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 33
- -1 glycosyltransferase Chemical compound 0.000 description 33
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 31
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 29
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 29
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 28
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 25
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 25
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 25
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 21
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 21
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 21
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 20
- 102100035360 Cerebellar degeneration-related antigen 1 Human genes 0.000 description 19
- 101710117290 Aldo-keto reductase family 1 member C4 Proteins 0.000 description 18
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 17
- 229960005558 mertansine Drugs 0.000 description 17
- ANZJBCHSOXCCRQ-FKUXLPTCSA-N mertansine Chemical compound CO[C@@H]([C@@]1(O)C[C@H](OC(=O)N1)[C@@H](C)[C@@H]1O[C@@]1(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](C)N(C)C(=O)CCS)CC(=O)N1C)\C=C\C=C(C)\CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 ANZJBCHSOXCCRQ-FKUXLPTCSA-N 0.000 description 16
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 15
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 15
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 15
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 15
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 15
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 15
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 15
- JJAHTWIKCUJRDK-UHFFFAOYSA-N succinimidyl 4-(N-maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate Chemical compound C1CC(CN2C(C=CC2=O)=O)CCC1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O JJAHTWIKCUJRDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 14
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 14
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 14
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 14
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 14
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 14
- 229940125644 antibody drug Drugs 0.000 description 13
- 108010044540 auristatin Proteins 0.000 description 13
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 13
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 13
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 13
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 13
- 238000011160 research Methods 0.000 description 13
- QWPXBEHQFHACTK-KZVYIGENSA-N (10e,12e)-86-chloro-12,14,4-trihydroxy-85,14-dimethoxy-33,2,7,10-tetramethyl-15,16-dihydro-14h-7-aza-1(6,4)-oxazina-3(2,3)-oxirana-8(1,3)-benzenacyclotetradecaphane-10,12-dien-6-one Chemical compound CN1C(=O)CC(O)C2(C)OC2C(C)C(OC(=O)N2)CC2(O)C(OC)\C=C\C=C(C)\CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 QWPXBEHQFHACTK-KZVYIGENSA-N 0.000 description 12
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 12
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 12
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 12
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 12
- 230000006870 function Effects 0.000 description 12
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 12
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 12
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 12
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 12
- BQWBEDSJTMWJAE-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-[(2-iodoacetyl)amino]benzoate Chemical compound C1=CC(NC(=O)CI)=CC=C1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O BQWBEDSJTMWJAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 11
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 11
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 11
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 11
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 11
- HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N calicheamicin Chemical compound C1[C@H](OC)[C@@H](NCC)CO[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@@H]2C\3=C(NC(=O)OC)C(=O)C[C@](C/3=C/CSSSC)(O)C#C\C=C/C#C2)O[C@H](C)[C@@H](NO[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](SC(=O)C=3C(=C(OC)C(O[C@H]4[C@@H]([C@H](OC)[C@@H](O)[C@H](C)O4)O)=C(I)C=3C)OC)[C@@H](O)C2)[C@@H]1O HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N 0.000 description 11
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 11
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 11
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 11
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 11
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 11
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 11
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 11
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 10
- 229930195731 calicheamicin Natural products 0.000 description 10
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 10
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 10
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 10
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 10
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 10
- MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N (2s)-2-[[(2r,3r)-3-methoxy-3-[(2s)-1-[(3r,4s,5s)-3-methoxy-5-methyl-4-[methyl-[(2s)-3-methyl-2-[[(2s)-3-methyl-2-(methylamino)butanoyl]amino]butanoyl]amino]heptanoyl]pyrrolidin-2-yl]-2-methylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound CN[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N 0.000 description 9
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 9
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 9
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 9
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 9
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 9
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 9
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 9
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 9
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 9
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 9
- 230000004044 response Effects 0.000 description 9
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 9
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 9
- 208000028564 B-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 8
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 8
- 208000031671 Large B-Cell Diffuse Lymphoma Diseases 0.000 description 8
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 description 8
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 8
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 8
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 8
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 8
- WOWDZACBATWTAU-FEFUEGSOSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-(dimethylamino)-3-methylbutanoyl]amino]-n-[(3r,4s,5s)-1-[(2s)-2-[(1r,2r)-3-[[(1s,2r)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-n,3-dimethylbutanamide Chemical compound CC(C)[C@H](N(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)C1=CC=CC=C1 WOWDZACBATWTAU-FEFUEGSOSA-N 0.000 description 7
- AGGWFDNPHKLBBV-YUMQZZPRSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-amino-3-methylbutanoyl]amino]-5-(carbamoylamino)pentanoic acid Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=O AGGWFDNPHKLBBV-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 7
- QWPXBEHQFHACTK-UHFFFAOYSA-N Maytansinol Natural products CN1C(=O)CC(O)C2(C)OC2C(C)C(OC(=O)N2)CC2(O)C(OC)C=CC=C(C)CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 QWPXBEHQFHACTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 7
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 7
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 7
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 7
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 description 7
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 7
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 7
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 7
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 7
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 7
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 7
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 7
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 7
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 7
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- OMNVYXHOSHNURL-WPRPVWTQSA-N Ala-Phe Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 OMNVYXHOSHNURL-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 6
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 6
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 6
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 6
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 6
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 6
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 6
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 6
- 108010011559 alanylphenylalanine Proteins 0.000 description 6
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 6
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 6
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 6
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 6
- WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N maytansine Chemical compound CO[C@@H]([C@@]1(O)C[C@](OC(=O)N1)([C@H]([C@@H]1O[C@@]1(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](C)N(C)C(C)=O)CC(=O)N1C)C)[H])\C=C\C=C(C)\CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N 0.000 description 6
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 6
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 6
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 6
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 6
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 6
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N tioguanine Chemical compound N1C(N)=NC(=S)C2=C1N=CN2 WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 6
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- 208000011691 Burkitt lymphomas Diseases 0.000 description 5
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 5
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 5
- 101000917839 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Proteins 0.000 description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 5
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 5
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 5
- 229930126263 Maytansine Natural products 0.000 description 5
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 5
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 5
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 5
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 description 5
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 5
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 description 5
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 5
- 230000036541 health Effects 0.000 description 5
- 102000044389 human CD22 Human genes 0.000 description 5
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 5
- 239000002596 immunotoxin Substances 0.000 description 5
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 5
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N monopropylene glycol Natural products CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 5
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 5
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 5
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 5
- RTQWWZBSTRGEAV-PKHIMPSTSA-N 2-[[(2s)-2-[bis(carboxymethyl)amino]-3-[4-(methylcarbamoylamino)phenyl]propyl]-[2-[bis(carboxymethyl)amino]propyl]amino]acetic acid Chemical compound CNC(=O)NC1=CC=C(C[C@@H](CN(CC(C)N(CC(O)=O)CC(O)=O)CC(O)=O)N(CC(O)=O)CC(O)=O)C=C1 RTQWWZBSTRGEAV-PKHIMPSTSA-N 0.000 description 4
- VPFUWHKTPYPNGT-UHFFFAOYSA-N 3-(3,4-dihydroxyphenyl)-1-(5-hydroxy-2,2-dimethylchromen-6-yl)propan-1-one Chemical compound OC1=C2C=CC(C)(C)OC2=CC=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VPFUWHKTPYPNGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 4
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 4
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 4
- 102220606761 Gap junction beta-1 protein_N30V_mutation Human genes 0.000 description 4
- 102100041003 Glutamate carboxypeptidase 2 Human genes 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101000892862 Homo sapiens Glutamate carboxypeptidase 2 Proteins 0.000 description 4
- 101000917858 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 4
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 4
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 4
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- 102100029185 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Human genes 0.000 description 4
- 230000004988 N-glycosylation Effects 0.000 description 4
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 4
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 4
- 102220558444 Proteinase-activated receptor 2_N30A_mutation Human genes 0.000 description 4
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 4
- RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N actinomycin D Natural products CC1OC(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)C2CCCN2C(=O)C(C(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)NC4C(=O)NC(C(N5CCCC5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)C(C(C)C)C(=O)OC4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 4
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 4
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 4
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 4
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 4
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 4
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 4
- 206010012818 diffuse large B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 4
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 4
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 4
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 4
- 230000033581 fucosylation Effects 0.000 description 4
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 4
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 4
- 229960003297 gemtuzumab ozogamicin Drugs 0.000 description 4
- 229960001001 ibritumomab tiuxetan Drugs 0.000 description 4
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 4
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 4
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 4
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 4
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 4
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 4
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 4
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N phenylalanine group Chemical group N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 4
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 4
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 4
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 4
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 4
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 4
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 4
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 4
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 4
- 238000012552 review Methods 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M sodium periodate Chemical compound [Na+].[O-]I(=O)(=O)=O JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 4
- 102000035160 transmembrane proteins Human genes 0.000 description 4
- 108091005703 transmembrane proteins Proteins 0.000 description 4
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 4
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N valeric acid Chemical compound CCCCC(O)=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 4
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 4
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VILFTWLXLYIEMV-UHFFFAOYSA-N 1,5-difluoro-2,4-dinitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+]([O-])=O)=C(F)C=C1F VILFTWLXLYIEMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000003950 B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 3
- DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N Carmustine Chemical compound ClCCNC(=O)N(N=O)CCCl DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical group OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 3
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102220472268 Eukaryotic translation initiation factor 4E transporter_N28V_mutation Human genes 0.000 description 3
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101100495232 Homo sapiens MS4A1 gene Proteins 0.000 description 3
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 3
- 101000851376 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Proteins 0.000 description 3
- 102100026120 IgG receptor FcRn large subunit p51 Human genes 0.000 description 3
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 3
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 description 3
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 description 3
- ZCYVEMRRCGMTRW-AHCXROLUSA-N Iodine-123 Chemical compound [123I] ZCYVEMRRCGMTRW-AHCXROLUSA-N 0.000 description 3
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 3
- 208000025205 Mantle-Cell Lymphoma Diseases 0.000 description 3
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 3
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 3
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 3
- 231100000742 Plant toxin Toxicity 0.000 description 3
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 description 3
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 description 3
- 102100036857 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Human genes 0.000 description 3
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001793 Wilcoxon signed-rank test Methods 0.000 description 3
- VWQVUPCCIRVNHF-OUBTZVSYSA-N Yttrium-90 Chemical compound [90Y] VWQVUPCCIRVNHF-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 3
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 3
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 3
- 125000000613 asparagine group Chemical group N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 3
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 3
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 3
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 230000034994 death Effects 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 3
- 125000005442 diisocyanate group Chemical group 0.000 description 3
- ZWIBGKZDAWNIFC-UHFFFAOYSA-N disuccinimidyl suberate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCCCCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O ZWIBGKZDAWNIFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N dolastatin Chemical class CC(C)C(N(C)C)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)N(C)C(C(C)C)C(OC)CC(=O)N1CCCC1C(OC)C(C)C(=O)NC(C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OFDNQWIFNXBECV-VFSYNPLYSA-N dolastatin 10 Chemical compound CC(C)[C@H](N(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 OFDNQWIFNXBECV-VFSYNPLYSA-N 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 3
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 3
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 3
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 3
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 3
- 150000002463 imidates Chemical class 0.000 description 3
- 230000002637 immunotoxin Effects 0.000 description 3
- 229940051026 immunotoxin Drugs 0.000 description 3
- 231100000608 immunotoxin Toxicity 0.000 description 3
- 230000008676 import Effects 0.000 description 3
- APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N indium-111 Chemical compound [111In] APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 3
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 3
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 3
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 3
- 125000005439 maleimidyl group Chemical group C1(C=CC(N1*)=O)=O 0.000 description 3
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 3
- 229960001428 mercaptopurine Drugs 0.000 description 3
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 3
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 3
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003123 plant toxin Substances 0.000 description 3
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 3
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 3
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 3
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 3
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 3
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 3
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 3
- 229960001052 streptozocin Drugs 0.000 description 3
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- CNHYKKNIIGEXAY-UHFFFAOYSA-N thiolan-2-imine Chemical compound N=C1CCCS1 CNHYKKNIIGEXAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960003087 tioguanine Drugs 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- JWDFQMWEFLOOED-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-(pyridin-2-yldisulfanyl)propanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCSSC1=CC=CC=N1 JWDFQMWEFLOOED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IEUUDEWWMRQUDS-UHFFFAOYSA-N (6-azaniumylidene-1,6-dimethoxyhexylidene)azanium;dichloride Chemical compound Cl.Cl.COC(=N)CCCCC(=N)OC IEUUDEWWMRQUDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N (E)-dacarbazine Chemical compound CN(C)\N=N\c1[nH]cnc1C(N)=O FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N 0.000 description 2
- MQLACMBJVPINKE-UHFFFAOYSA-N 10-[(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)methylidene]anthracen-9-one Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC=C1C=C1C2=CC=CC=C2C(=O)C2=CC=CC=C21 MQLACMBJVPINKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PNDPGZBMCMUPRI-HVTJNCQCSA-N 10043-66-0 Chemical compound [131I][131I] PNDPGZBMCMUPRI-HVTJNCQCSA-N 0.000 description 2
- YBBNVCVOACOHIG-UHFFFAOYSA-N 2,2-diamino-1,4-bis(4-azidophenyl)-3-butylbutane-1,4-dione Chemical compound C=1C=C(N=[N+]=[N-])C=CC=1C(=O)C(N)(N)C(CCCC)C(=O)C1=CC=C(N=[N+]=[N-])C=C1 YBBNVCVOACOHIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OTLLEIBWKHEHGU-UHFFFAOYSA-N 2-[5-[[5-(6-aminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy]-3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-4-phosphonooxyhexanedioic acid Chemical group C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C(C(C1O)O)OC1COC1C(CO)OC(OC(C(O)C(OP(O)(O)=O)C(O)C(O)=O)C(O)=O)C(O)C1O OTLLEIBWKHEHGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FZDFGHZZPBUTGP-UHFFFAOYSA-N 2-[[2-[bis(carboxymethyl)amino]-3-(4-isothiocyanatophenyl)propyl]-[2-[bis(carboxymethyl)amino]propyl]amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)C(C)CN(CC(O)=O)CC(N(CC(O)=O)CC(O)=O)CC1=CC=C(N=C=S)C=C1 FZDFGHZZPBUTGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 3,4-dihydroxy-15-(4-hydroxy-18-methoxycarbonyl-5,18-seco-ibogamin-18-yl)-16-methoxy-1-methyl-6,7-didehydro-aspidospermidine-3-carboxylic acid methyl ester Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GANZODCWZFAEGN-UHFFFAOYSA-N 5-mercapto-2-nitro-benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(S)=CC=C1[N+]([O-])=O GANZODCWZFAEGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 2
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 2
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 2
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 2
- 208000010839 B-cell chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 2
- 208000037914 B-cell disorder Diseases 0.000 description 2
- 231100000699 Bacterial toxin Toxicity 0.000 description 2
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710158575 Cap-specific mRNA (nucleoside-2'-O-)-methyltransferase Proteins 0.000 description 2
- GAGWJHPBXLXJQN-UORFTKCHSA-N Capecitabine Chemical compound C1=C(F)C(NC(=O)OCCCCC)=NC(=O)N1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O1 GAGWJHPBXLXJQN-UORFTKCHSA-N 0.000 description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 2
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 2
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 2
- 108700032819 Croton tiglium crotin II Proteins 0.000 description 2
- XZMCDFZZKTWFGF-UHFFFAOYSA-N Cyanamide Chemical compound NC#N XZMCDFZZKTWFGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 2
- 230000004568 DNA-binding Effects 0.000 description 2
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 description 2
- WEAHRLBPCANXCN-UHFFFAOYSA-N Daunomycin Natural products CCC1(O)CC(OC2CC(N)C(O)C(C)O2)c3cc4C(=O)c5c(OC)cccc5C(=O)c4c(O)c3C1 WEAHRLBPCANXCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 2
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 2
- OFDNQWIFNXBECV-UHFFFAOYSA-N Dolastatin 10 Natural products CC(C)C(N(C)C)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)N(C)C(C(C)CC)C(OC)CC(=O)N1CCCC1C(OC)C(C)C(=O)NC(C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 OFDNQWIFNXBECV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 229910052693 Europium Inorganic materials 0.000 description 2
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N Fluorine atom Chemical compound [F] YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JRZJKWGQFNTSRN-UHFFFAOYSA-N Geldanamycin Natural products C1C(C)CC(OC)C(O)C(C)C=C(C)C(OC(N)=O)C(OC)CCC=C(C)C(=O)NC2=CC(=O)C(OC)=C1C2=O JRZJKWGQFNTSRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700004714 Gelonium multiflorum GEL Proteins 0.000 description 2
- 102000051366 Glycosyltransferases Human genes 0.000 description 2
- 108700023372 Glycosyltransferases Proteins 0.000 description 2
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 2
- 101710177940 IgG receptor FcRn large subunit p51 Proteins 0.000 description 2
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N Lomustine Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)NC1CCCCC1 GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 2
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 2
- 244000302512 Momordica charantia Species 0.000 description 2
- 235000009811 Momordica charantia Nutrition 0.000 description 2
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 2
- CZCIKBSVHDNIDH-NSHDSACASA-N N(alpha)-methyl-L-tryptophan Chemical group C1=CC=C2C(C[C@H]([NH2+]C)C([O-])=O)=CNC2=C1 CZCIKBSVHDNIDH-NSHDSACASA-N 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 2
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 description 2
- 230000004989 O-glycosylation Effects 0.000 description 2
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 206010033661 Pancytopenia Diseases 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Natural products OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 2
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 2
- NBBJYMSMWIIQGU-UHFFFAOYSA-N Propionic aldehyde Chemical compound CCC=O NBBJYMSMWIIQGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 2
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 2
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 2
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 238000011579 SCID mouse model Methods 0.000 description 2
- 241000277331 Salmonidae Species 0.000 description 2
- 108010029157 Sialic Acid Binding Ig-like Lectin 2 Proteins 0.000 description 2
- 108010032838 Sialoglycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000007365 Sialoglycoproteins Human genes 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N Tamoxifen Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN(C)C)=CC=1)/C1=CC=CC=C1 NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 2
- 101710183280 Topoisomerase Proteins 0.000 description 2
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 2
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 2
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 2
- 240000001866 Vernicia fordii Species 0.000 description 2
- 229940122803 Vinca alkaloid Drugs 0.000 description 2
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 2
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N actinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- 238000012867 alanine scanning Methods 0.000 description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 239000000688 bacterial toxin Substances 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 238000002725 brachytherapy Methods 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 125000000837 carbohydrate group Chemical group 0.000 description 2
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 2
- YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N catechol Chemical compound OC1=CC=CC=C1O YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N chlorambucil Chemical compound OC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 2
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 2
- 208000024389 cytopenia Diseases 0.000 description 2
- 229960000640 dactinomycin Drugs 0.000 description 2
- 230000017858 demethylation Effects 0.000 description 2
- 238000010520 demethylation reaction Methods 0.000 description 2
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 2
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 2
- 150000004662 dithiols Chemical class 0.000 description 2
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 2
- 108010045524 dolastatin 10 Proteins 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 238000009510 drug design Methods 0.000 description 2
- 108010028531 enomycin Proteins 0.000 description 2
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 2
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 2
- 201000003444 follicular lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 2
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 2
- QTQAWLPCGQOSGP-GBTDJJJQSA-N geldanamycin Chemical compound N1C(=O)\C(C)=C/C=C\[C@@H](OC)[C@H](OC(N)=O)\C(C)=C/[C@@H](C)[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H](C)CC2=C(OC)C(=O)C=C1C2=O QTQAWLPCGQOSGP-GBTDJJJQSA-N 0.000 description 2
- 230000036252 glycation Effects 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000009277 hairy cell leukemia Diseases 0.000 description 2
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 2
- 125000001188 haloalkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 229940022353 herceptin Drugs 0.000 description 2
- 229920001519 homopolymer Polymers 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Chemical class O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 2
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 2
- 229940055742 indium-111 Drugs 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- GURKHSYORGJETM-WAQYZQTGSA-N irinotecan hydrochloride (anhydrous) Chemical compound Cl.C1=C2C(CC)=C3CN(C(C4=C([C@@](C(=O)OC4)(O)CC)C=4)=O)C=4C3=NC2=CC=C1OC(=O)N(CC1)CCC1N1CCCCC1 GURKHSYORGJETM-WAQYZQTGSA-N 0.000 description 2
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 2
- 229960004338 leuprorelin Drugs 0.000 description 2
- 238000001325 log-rank test Methods 0.000 description 2
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 2
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 2
- 210000003519 mature b lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N melphalan Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 229960001924 melphalan Drugs 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 2
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 2
- 231100000324 minimal toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 2
- 230000001293 nucleolytic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 2
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 2
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 108010076042 phenomycin Proteins 0.000 description 2
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 2
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 2
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 2
- 208000017805 post-transplant lymphoproliferative disease Diseases 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 210000001948 pro-b lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000023958 prostate neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N resorcinol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1 GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 2
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N thiourea Chemical compound NC(N)=S UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 2
- 229950001353 tretamine Drugs 0.000 description 2
- IUCJMVBFZDHPDX-UHFFFAOYSA-N tretamine Chemical compound C1CN1C1=NC(N2CC2)=NC(N2CC2)=N1 IUCJMVBFZDHPDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- UGGWPQSBPIFKDZ-KOTLKJBCSA-N vindesine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(N)=O)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1N=C1[C]2C=CC=C1 UGGWPQSBPIFKDZ-KOTLKJBCSA-N 0.000 description 2
- 229960004355 vindesine Drugs 0.000 description 2
- 229920003169 water-soluble polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 2
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FLCQLSRLQIPNLM-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 2-acetylsulfanylacetate Chemical compound CC(=O)SCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O FLCQLSRLQIPNLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKHVDAUOODACDU-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)propanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCN1C(=O)C=CC1=O JKHVDAUOODACDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PVGATNRYUYNBHO-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)butanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCN1C(=O)C=CC1=O PVGATNRYUYNBHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMJWDPGOWBRILU-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-[4-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)phenyl]butanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCC(C=C1)=CC=C1N1C(=O)C=CC1=O PMJWDPGOWBRILU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VLARLSIGSPVYHX-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)hexanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCCCN1C(=O)C=CC1=O VLARLSIGSPVYHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WCMOHMXWOOBVMZ-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-[3-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)propanoylamino]hexanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCCCNC(=O)CCN1C(=O)C=CC1=O WCMOHMXWOOBVMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IHVODYOQUSEYJJ-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-[[4-[(2,5-dioxopyrrol-1-yl)methyl]cyclohexanecarbonyl]amino]hexanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCCCNC(=O)C(CC1)CCC1CN1C(=O)C=CC1=O IHVODYOQUSEYJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LGNCNVVZCUVPOT-FUVGGWJZSA-N (2s)-2-[[(2r,3r)-3-[(2s)-1-[(3r,4s,5s)-4-[[(2s)-2-[[(2s)-2-(dimethylamino)-3-methylbutanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]-methylamino]-3-methoxy-5-methylheptanoyl]pyrrolidin-2-yl]-3-methoxy-2-methylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound CC(C)[C@H](N(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 LGNCNVVZCUVPOT-FUVGGWJZSA-N 0.000 description 1
- XMQUEQJCYRFIQS-YFKPBYRVSA-N (2s)-2-amino-5-ethoxy-5-oxopentanoic acid Chemical compound CCOC(=O)CC[C@H](N)C(O)=O XMQUEQJCYRFIQS-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KYBXNPIASYUWLN-WUCPZUCCSA-N (2s)-5-hydroxypyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound OC1CC[C@@H](C(O)=O)N1 KYBXNPIASYUWLN-WUCPZUCCSA-N 0.000 description 1
- FPVKHBSQESCIEP-UHFFFAOYSA-N (8S)-3-(2-deoxy-beta-D-erythro-pentofuranosyl)-3,6,7,8-tetrahydroimidazo[4,5-d][1,3]diazepin-8-ol Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NCC2O)=C2N=C1 FPVKHBSQESCIEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 1
- GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 1,2-phenylenediamine Chemical compound NC1=CC=CC=C1N GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FJQZXCPWAGYPSD-UHFFFAOYSA-N 1,3,4,6-tetrachloro-3a,6a-diphenylimidazo[4,5-d]imidazole-2,5-dione Chemical compound ClN1C(=O)N(Cl)C2(C=3C=CC=CC=3)N(Cl)C(=O)N(Cl)C12C1=CC=CC=C1 FJQZXCPWAGYPSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WNXJIVFYUVYPPR-UHFFFAOYSA-N 1,3-dioxolane Chemical compound C1COCO1 WNXJIVFYUVYPPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DIYPCWKHSODVAP-UHFFFAOYSA-N 1-[3-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)benzoyl]oxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonic acid Chemical compound O=C1C(S(=O)(=O)O)CC(=O)N1OC(=O)C1=CC=CC(N2C(C=CC2=O)=O)=C1 DIYPCWKHSODVAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CULQNACJHGHAER-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[(2-iodoacetyl)amino]benzoyl]oxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonic acid Chemical compound O=C1C(S(=O)(=O)O)CC(=O)N1OC(=O)C1=CC=C(NC(=O)CI)C=C1 CULQNACJHGHAER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VSNHCAURESNICA-NJFSPNSNSA-N 1-oxidanylurea Chemical compound N[14C](=O)NO VSNHCAURESNICA-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- QXLQZLBNPTZMRK-UHFFFAOYSA-N 2-[(dimethylamino)methyl]-1-(2,4-dimethylphenyl)prop-2-en-1-one Chemical compound CN(C)CC(=C)C(=O)C1=CC=C(C)C=C1C QXLQZLBNPTZMRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000979 2-amino-2-oxoethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C(=O)N([H])[H] 0.000 description 1
- BMUXBWLKTHLRQC-UHFFFAOYSA-N 2-azanylethanoic acid Chemical compound NCC(O)=O.NCC(O)=O.NCC(O)=O BMUXBWLKTHLRQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940117976 5-hydroxylysine Drugs 0.000 description 1
- VVIAGPKUTFNRDU-UHFFFAOYSA-N 6S-folinic acid Natural products C1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2N(C=O)C1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 VVIAGPKUTFNRDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YXHLJMWYDTXDHS-IRFLANFNSA-N 7-aminoactinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=C(N)C=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 YXHLJMWYDTXDHS-IRFLANFNSA-N 0.000 description 1
- 108700012813 7-aminoactinomycin D Proteins 0.000 description 1
- MHUWZNTUIIFHAS-XPWSMXQVSA-N 9-octadecenoic acid 1-[(phosphonoxy)methyl]-1,2-ethanediyl ester Chemical compound CCCCCCCC\C=C\CCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCC\C=C\CCCCCCCC MHUWZNTUIIFHAS-XPWSMXQVSA-N 0.000 description 1
- 102220491086 ADP-ribosylation factor 6_N28A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 241000186046 Actinomyces Species 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 102100021266 Alpha-(1,6)-fucosyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 206010061424 Anal cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010002412 Angiocentric lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 208000007860 Anus Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000237373 Aplysia sp. Species 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Natural products OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 1
- 108010024976 Asparaginase Proteins 0.000 description 1
- 102000015790 Asparaginase Human genes 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 206010003571 Astrocytoma Diseases 0.000 description 1
- 208000032568 B-cell prolymphocytic leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 230000003844 B-cell-activation Effects 0.000 description 1
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 206010004593 Bile duct cancer Diseases 0.000 description 1
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 1
- 206010005949 Bone cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 206010006143 Brain stem glioma Diseases 0.000 description 1
- 102100024217 CAMPATH-1 antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010065524 CD52 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 102100025221 CD70 antigen Human genes 0.000 description 1
- KLWPJMFMVPTNCC-UHFFFAOYSA-N Camptothecin Natural products CCC1(O)C(=O)OCC2=C1C=C3C4Nc5ccccc5C=C4CN3C2=O KLWPJMFMVPTNCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- GAGWJHPBXLXJQN-UHFFFAOYSA-N Capecitabine Natural products C1=C(F)C(NC(=O)OCCCCC)=NC(=O)N1C1C(O)C(O)C(C)O1 GAGWJHPBXLXJQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-OUBTZVSYSA-N Carbon-13 Chemical compound [13C] OKTJSMMVPCPJKN-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 208000017897 Carcinoma of esophagus Diseases 0.000 description 1
- 102000011727 Caspases Human genes 0.000 description 1
- 108010076667 Caspases Proteins 0.000 description 1
- 108090000712 Cathepsin B Proteins 0.000 description 1
- 102000004225 Cathepsin B Human genes 0.000 description 1
- 108090000267 Cathepsin C Proteins 0.000 description 1
- 102000003902 Cathepsin C Human genes 0.000 description 1
- 108090000258 Cathepsin D Proteins 0.000 description 1
- 102000003908 Cathepsin D Human genes 0.000 description 1
- 102220645934 Cell surface A33 antigen_N28Q_mutation Human genes 0.000 description 1
- 206010007953 Central nervous system lymphoma Diseases 0.000 description 1
- JWBOIMRXGHLCPP-UHFFFAOYSA-N Chloditan Chemical compound C=1C=CC=C(Cl)C=1C(C(Cl)Cl)C1=CC=C(Cl)C=C1 JWBOIMRXGHLCPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PTOAARAWEBMLNO-KVQBGUIXSA-N Cladribine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC(Cl)=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 PTOAARAWEBMLNO-KVQBGUIXSA-N 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 description 1
- 102100021906 Cyclin-O Human genes 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 102000007260 Deoxyribonuclease I Human genes 0.000 description 1
- 108010008532 Deoxyribonuclease I Proteins 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 241000237378 Dolabella auricularia Species 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- 108010024212 E-Selectin Proteins 0.000 description 1
- 102100023471 E-selectin Human genes 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108010055334 EphB2 Receptor Proteins 0.000 description 1
- 102100031968 Ephrin type-B receptor 2 Human genes 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 241001524679 Escherichia virus M13 Species 0.000 description 1
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 1
- 206010073306 Exposure to radiation Diseases 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 108010088842 Fibrinolysin Proteins 0.000 description 1
- 241000724791 Filamentous phage Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 229910052688 Gadolinium Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010015133 Galactose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 239000001828 Gelatine Substances 0.000 description 1
- 201000010915 Glioblastoma multiforme Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 1
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 208000002250 Hematologic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108010068250 Herpes Simplex Virus Protein Vmw65 Proteins 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 101000819490 Homo sapiens Alpha-(1,6)-fucosyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 1
- 101000934356 Homo sapiens CD70 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000897441 Homo sapiens Cyclin-O Proteins 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine Chemical compound ON AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N Idarubicin Chemical compound C1[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2C[C@@](O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N 0.000 description 1
- XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N Idarubicin Natural products C1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2CC(O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010053574 Immunoblastic lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 102000012745 Immunoglobulin Subunits Human genes 0.000 description 1
- 108010079585 Immunoglobulin Subunits Proteins 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- 208000025814 Inflammatory myopathy with abundant macrophages Diseases 0.000 description 1
- 238000012695 Interfacial polymerization Methods 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 206010061252 Intraocular melanoma Diseases 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N L-citrulline Chemical compound NC(=O)NCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 125000000510 L-tryptophano group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2N([H])C([H])=C(C([H])([H])[C@@]([H])(C(O[H])=O)N([H])[*])C2=C1[H] 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 108010000817 Leuprolide Proteins 0.000 description 1
- 208000031422 Lymphocytic Chronic B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 206010052178 Lymphocytic lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 1
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 1
- 239000004907 Macro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001441512 Maytenus serrata Species 0.000 description 1
- 208000000172 Medulloblastoma Diseases 0.000 description 1
- XOGTZOOQQBDUSI-UHFFFAOYSA-M Mesna Chemical compound [Na+].[O-]S(=O)(=O)CCS XOGTZOOQQBDUSI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010027406 Mesothelioma Diseases 0.000 description 1
- 229940122255 Microtubule inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 229930192392 Mitomycin Natural products 0.000 description 1
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 1
- 101100370002 Mus musculus Tnfsf14 gene Proteins 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N N-Acetyl-D-Galactosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N N-acetyl-D-galactosamine Natural products CC(=O)NC(C=O)C(O)C(O)C(O)CO MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N N-acetyl-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- WTBIAPVQQBCLFP-UHFFFAOYSA-N N.N.N.CC(O)=O.CC(O)=O.CC(O)=O.CC(O)=O.CC(O)=O Chemical compound N.N.N.CC(O)=O.CC(O)=O.CC(O)=O.CC(O)=O.CC(O)=O WTBIAPVQQBCLFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N Ndelta-carbamoyl-DL-ornithine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=O RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000187654 Nocardia Species 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 101100081884 Oryza sativa subsp. japonica OSA15 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 101150082245 PSAG gene Proteins 0.000 description 1
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- 208000000821 Parathyroid Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 208000002471 Penile Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000007913 Pituitary Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 201000005746 Pituitary adenoma Diseases 0.000 description 1
- 206010061538 Pituitary tumour benign Diseases 0.000 description 1
- 208000007452 Plasmacytoma Diseases 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 208000006994 Precancerous Conditions Diseases 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035416 Prolymphocytic B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 1
- GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N Propylene oxide Chemical compound CC1CO1 GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102000004278 Receptor Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000873 Receptor Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 108010084592 Saporins Proteins 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 102000001613 Sialic Acid Binding Ig-like Lectin 2 Human genes 0.000 description 1
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000021712 Soft tissue sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N Streptozotocin Natural products O=NN(C)C(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- GKLVYJBZJHMRIY-OUBTZVSYSA-N Technetium-99 Chemical compound [99Tc] GKLVYJBZJHMRIY-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Natural products NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000023915 Ureteral Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010046458 Urethral neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 201000005969 Uveal melanoma Diseases 0.000 description 1
- 201000003761 Vaginal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 1
- 206010047741 Vulval cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000016025 Waldenstroem macroglobulinemia Diseases 0.000 description 1
- 208000033559 Waldenström macroglobulinemia Diseases 0.000 description 1
- IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N [4-[[(2S)-5-(carbamoylamino)-2-[[(2S)-2-[6-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)hexanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]pentanoyl]amino]phenyl]methyl N-[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-3-[[(1S,2R)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-methylamino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]-N-methylcarbamate Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H]([C@@H](CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)c1ccccc1)OC)N(C)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)OCc1ccc(NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCCN2C(=O)CCC2=O)C(C)C)cc1)C(C)C IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 150000001263 acyl chlorides Chemical class 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004423 acyloxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005042 acyloxymethyl group Chemical group 0.000 description 1
- 208000024447 adrenal gland neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229940009456 adriamycin Drugs 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000009824 affinity maturation Effects 0.000 description 1
- 229960005310 aldesleukin Drugs 0.000 description 1
- 108700025316 aldesleukin Proteins 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 230000002152 alkylating effect Effects 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- LXQXZNRPTYVCNG-YPZZEJLDSA-N americium-241 Chemical compound [241Am] LXQXZNRPTYVCNG-YPZZEJLDSA-N 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical group 0.000 description 1
- JKOQGQFVAUAYPM-UHFFFAOYSA-N amifostine Chemical compound NCCCNCCSP(O)(O)=O JKOQGQFVAUAYPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003432 anti-folate effect Effects 0.000 description 1
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 description 1
- 230000001905 anti-neuroblastoma Effects 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940127074 antifolate Drugs 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 description 1
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 description 1
- 229940045988 antineoplastic drug protein kinase inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 201000011165 anus cancer Diseases 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229960003272 asparaginase Drugs 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-M asparaginate Chemical compound [O-]C(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N aspartic acid group Chemical group N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 1
- VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N azanide;cyclobutane-1,1-dicarboxylic acid;platinum(2+) Chemical compound [NH2-].[NH2-].[Pt+2].OC(=O)C1(C(O)=O)CCC1 VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 description 1
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 238000002306 biochemical method Methods 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 238000005460 biophysical method Methods 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N bis(2-chloroethyl) sulfide Chemical compound ClCCSCCCl QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HUTDDBSSHVOYJR-UHFFFAOYSA-H bis[(2-oxo-1,3,2$l^{5},4$l^{2}-dioxaphosphaplumbetan-2-yl)oxy]lead Chemical compound [Pb+2].[Pb+2].[Pb+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O HUTDDBSSHVOYJR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 1
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 229960002092 busulfan Drugs 0.000 description 1
- DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N but-3-enoic acid;ethene Chemical compound C=C.OC(=O)CC=C DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N butyl alcohol Substances CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- ZTQSAGDEMFDKMZ-UHFFFAOYSA-N butyric aldehyde Natural products CCCC=O ZTQSAGDEMFDKMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940127093 camptothecin Drugs 0.000 description 1
- VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N camptothecin Chemical compound C1=CC=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 1
- 229960004117 capecitabine Drugs 0.000 description 1
- 102000023852 carbohydrate binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091008400 carbohydrate binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002041 carbon nanotube Substances 0.000 description 1
- 229910021393 carbon nanotube Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 229960005243 carmustine Drugs 0.000 description 1
- 238000012219 cassette mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000012054 celltiter-glo Methods 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 208000025997 central nervous system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 1
- TVFDJXOCXUVLDH-RNFDNDRNSA-N cesium-137 Chemical compound [137Cs] TVFDJXOCXUVLDH-RNFDNDRNSA-N 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 229960004630 chlorambucil Drugs 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000013477 citrulline Nutrition 0.000 description 1
- 229960002436 cladribine Drugs 0.000 description 1
- 238000005354 coacervation Methods 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-YPZZEJLDSA-N cobalt-57 Chemical compound [57Co] GUTLYIVDDKVIGB-YPZZEJLDSA-N 0.000 description 1
- 201000010276 collecting duct carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 1
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-AKLPVKDBSA-N copper-67 Chemical compound [67Cu] RYGMFSIKBFXOCR-AKLPVKDBSA-N 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000030381 cutaneous melanoma Diseases 0.000 description 1
- NZNMSOFKMUBTKW-UHFFFAOYSA-N cyclohexanecarboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1CCCCC1 NZNMSOFKMUBTKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N cyclohexanol Chemical compound OC1CCCCC1 HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N cysteamine Chemical compound NCCS UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000684 cytarabine Drugs 0.000 description 1
- 229960003901 dacarbazine Drugs 0.000 description 1
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 description 1
- 229940107841 daunoxome Drugs 0.000 description 1
- 229940026692 decadron Drugs 0.000 description 1
- 238000006298 dechlorination reaction Methods 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N delta-DL-hydroxylysine Natural products NCC(O)CCC(N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000000779 depleting effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 125000000118 dimethyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 125000002228 disulfide group Chemical group 0.000 description 1
- 150000002019 disulfides Chemical class 0.000 description 1
- VSJKWCGYPAHWDS-UHFFFAOYSA-N dl-camptothecin Natural products C1=CC=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)C5(O)CC)C4=NC2=C1 VSJKWCGYPAHWDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 description 1
- 229940115080 doxil Drugs 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 210000000750 endocrine system Anatomy 0.000 description 1
- 201000003914 endometrial carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000006862 enzymatic digestion Effects 0.000 description 1
- 239000002532 enzyme inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229950009760 epratuzumab Drugs 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N erythro-5-hydroxy-L-lysine Chemical compound NC[C@H](O)CC[C@H](N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N 0.000 description 1
- 229920001038 ethylene copolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000005038 ethylene vinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 229940098617 ethyol Drugs 0.000 description 1
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000011347 external beam therapy Methods 0.000 description 1
- 201000001343 fallopian tube carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 230000004992 fission Effects 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 229960000390 fludarabine Drugs 0.000 description 1
- GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N fludarabine phosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC(F)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N 0.000 description 1
- 150000002222 fluorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000004052 folic acid antagonist Substances 0.000 description 1
- 150000002224 folic acids Chemical class 0.000 description 1
- VVIAGPKUTFNRDU-ABLWVSNPSA-N folinic acid Chemical compound C1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2N(C=O)C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 VVIAGPKUTFNRDU-ABLWVSNPSA-N 0.000 description 1
- 235000008191 folinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011672 folinic acid Substances 0.000 description 1
- 230000003325 follicular Effects 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 229960004279 formaldehyde Drugs 0.000 description 1
- 235000019256 formaldehyde Nutrition 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000000855 fungicidal effect Effects 0.000 description 1
- UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N gadolinium atom Chemical compound [Gd] UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 229960005277 gemcitabine Drugs 0.000 description 1
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 description 1
- 229940020967 gemzar Drugs 0.000 description 1
- 238000012637 gene transfection Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000004554 glutamine Nutrition 0.000 description 1
- 108010067216 glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-OUBTZVSYSA-N gold-198 Chemical compound [198Au] PCHJSUWPFVWCPO-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000009422 growth inhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 125000005179 haloacetyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- 238000005734 heterodimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000014304 histidine Nutrition 0.000 description 1
- 102000053350 human FCGR3B Human genes 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001600 hydrophobic polymer Polymers 0.000 description 1
- 125000002349 hydroxyamino group Chemical group [H]ON([H])[*] 0.000 description 1
- 229920003063 hydroxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229940031574 hydroxymethyl cellulose Drugs 0.000 description 1
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 description 1
- 229960000908 idarubicin Drugs 0.000 description 1
- 229960001101 ifosfamide Drugs 0.000 description 1
- HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N ifosfamide Chemical compound ClCCNP1(=O)OCCCN1CCCl HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002466 imines Chemical class 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000005917 in vivo anti-tumor Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 229950004101 inotuzumab ozogamicin Drugs 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 229950000038 interferon alfa Drugs 0.000 description 1
- 230000007154 intracellular accumulation Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- GKOZUEZYRPOHIO-IGMARMGPSA-N iridium-192 Chemical compound [192Ir] GKOZUEZYRPOHIO-IGMARMGPSA-N 0.000 description 1
- 229960004768 irinotecan Drugs 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000000468 ketone group Chemical group 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- TYQCGQRIZGCHNB-JLAZNSOCSA-N l-ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(O)=C(O)C1=O TYQCGQRIZGCHNB-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229960001691 leucovorin Drugs 0.000 description 1
- 229940063725 leukeran Drugs 0.000 description 1
- GFIJNRVAKGFPGQ-LIJARHBVSA-N leuprolide Chemical compound CCNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 GFIJNRVAKGFPGQ-LIJARHBVSA-N 0.000 description 1
- RGLRXNKKBLIBQS-XNHQSDQCSA-N leuprolide acetate Chemical compound CC(O)=O.CCNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 RGLRXNKKBLIBQS-XNHQSDQCSA-N 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 239000012280 lithium aluminium hydride Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 229960002247 lomustine Drugs 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 1
- FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N maleic anhydride Chemical compound O=C1OC(=O)C=C1 FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000026037 malignant tumor of neck Diseases 0.000 description 1
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 201000007924 marginal zone B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000021937 marginal zone lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 230000000873 masking effect Effects 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N mechlorethamine Chemical compound ClCCN(C)CCCl HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004961 mechlorethamine Drugs 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 229960001786 megestrol Drugs 0.000 description 1
- RQZAXGRLVPAYTJ-GQFGMJRRSA-N megestrol acetate Chemical compound C1=C(C)C2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@@](C(C)=O)(OC(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RQZAXGRLVPAYTJ-GQFGMJRRSA-N 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 206010027191 meningioma Diseases 0.000 description 1
- 229960003151 mercaptamine Drugs 0.000 description 1
- 229960004635 mesna Drugs 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000008880 microtubule cytoskeleton organization Effects 0.000 description 1
- 231100000782 microtubule inhibitor Toxicity 0.000 description 1
- CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N mithramycin Chemical compound O([C@@H]1C[C@@H](O[C@H](C)[C@H]1O)OC=1C=C2C=C3C[C@H]([C@@H](C(=O)C3=C(O)C2=C(O)C=1C)O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H](C)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]3O[C@H](C)[C@@H](O)[C@@](C)(O)C3)C2)C1)[C@H](OC)C(=O)[C@@H](O)[C@@H](C)O)[C@H]1C[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O1 CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N 0.000 description 1
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 description 1
- 229960000350 mitotane Drugs 0.000 description 1
- KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001156 mitoxantrone Drugs 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 108010093470 monomethyl auristatin E Proteins 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 229940051866 mouthwash Drugs 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 229940090009 myleran Drugs 0.000 description 1
- JMUPMJGUKXYCMF-IWDIICGPSA-N n-[(2s,3r,4r,5s,6r)-2-[(2s,3s,4s,5s,6r)-2-[[(2r,3r,4s,5s,6s)-6-[(2r,3s,4r,5r,6s)-5-acetamido-6-[(2r,3s,4r,5r)-5-acetamido-1,2,4-trihydroxy-6-oxohexan-3-yl]oxy-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxy-4-[(2r,3s,4s,5s,6r)-3-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-4-h Chemical group O[C@@H]1[C@@H](NC(C)=O)[C@H](O[C@@H]([C@H](O)[C@H](C=O)NC(=O)C)[C@H](O)CO)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)O1 JMUPMJGUKXYCMF-IWDIICGPSA-N 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- OWIUPIRUAQMTTK-UHFFFAOYSA-M n-aminocarbamate Chemical compound NNC([O-])=O OWIUPIRUAQMTTK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002088 nanocapsule Substances 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 108010068617 neonatal Fc receptor Proteins 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 208000007538 neurilemmoma Diseases 0.000 description 1
- 150000002829 nitrogen Chemical class 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-OUBTZVSYSA-N nitrogen-15 Chemical compound [15N] QJGQUHMNIGDVPM-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical class CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000002575 ocular melanoma Diseases 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 229960001756 oxaliplatin Drugs 0.000 description 1
- DWAFYCQODLXJNR-BNTLRKBRSA-L oxaliplatin Chemical compound O1C(=O)C(=O)O[Pt]11N[C@@H]2CCCC[C@H]2N1 DWAFYCQODLXJNR-BNTLRKBRSA-L 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 150000002923 oximes Chemical class 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N p-hydroxybenzoic acid methyl ester Natural products COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000002990 parathyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 229960001744 pegaspargase Drugs 0.000 description 1
- 108010001564 pegaspargase Proteins 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 229960002340 pentostatin Drugs 0.000 description 1
- FPVKHBSQESCIEP-JQCXWYLXSA-N pentostatin Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(N=CNC[C@H]2O)=C2N=C1 FPVKHBSQESCIEP-JQCXWYLXSA-N 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N periodic acid Chemical compound OI(=O)(=O)=O KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 108700010839 phage proteins Proteins 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 208000021310 pituitary gland adenoma Diseases 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 229940063179 platinol Drugs 0.000 description 1
- 229960003171 plicamycin Drugs 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 229920000191 poly(N-vinyl pyrrolidone) Polymers 0.000 description 1
- 229920001308 poly(aminoacid) Polymers 0.000 description 1
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 229920003229 poly(methyl methacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 108010054442 polyalanine Proteins 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 229920002338 polyhydroxyethylmethacrylate Polymers 0.000 description 1
- 239000004926 polymethyl methacrylate Substances 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 235000021395 porridge Nutrition 0.000 description 1
- 229940124606 potential therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 1
- 208000016800 primary central nervous system lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 201000006037 primary mediastinal B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 230000000861 pro-apoptotic effect Effects 0.000 description 1
- CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N procarbazine Chemical compound CNNCC1=CC=C(C(=O)NC(C)C)C=C1 CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000624 procarbazine Drugs 0.000 description 1
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 1
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000003909 protein kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000000163 radioactive labelling Methods 0.000 description 1
- 229940051022 radioimmunoconjugate Drugs 0.000 description 1
- 239000012217 radiopharmaceutical Substances 0.000 description 1
- 229940121896 radiopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 230000002799 radiopharmaceutical effect Effects 0.000 description 1
- 229910052705 radium Inorganic materials 0.000 description 1
- HCWPIIXVSYCSAN-UHFFFAOYSA-N radium atom Chemical compound [Ra] HCWPIIXVSYCSAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920005604 random copolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000001275 rectum cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 201000007444 renal pelvis carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000005132 reproductive cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000006845 reticulosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 208000029922 reticulum cell sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 102220206292 rs1057521851 Human genes 0.000 description 1
- 102220217823 rs138107415 Human genes 0.000 description 1
- 102220043272 rs143261167 Human genes 0.000 description 1
- 102220085523 rs146276662 Human genes 0.000 description 1
- 102220289729 rs1555407418 Human genes 0.000 description 1
- 102220008795 rs193922245 Human genes 0.000 description 1
- 102220062170 rs748793974 Human genes 0.000 description 1
- 102220021854 rs80357031 Human genes 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 206010039667 schwannoma Diseases 0.000 description 1
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000004017 serum-free culture medium Substances 0.000 description 1
- 208000002491 severe combined immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 238000007493 shaping process Methods 0.000 description 1
- 208000013220 shortness of breath Diseases 0.000 description 1
- 108091006024 signal transducing proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000034285 signal transducing proteins Human genes 0.000 description 1
- 230000003007 single stranded DNA break Effects 0.000 description 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000003708 skin melanoma Diseases 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 108010047846 soblidotin Proteins 0.000 description 1
- DZMVCVHATYROOS-ZBFGKEHZSA-N soblidotin Chemical compound CC(C)[C@H](N(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)NCCC1=CC=CC=C1 DZMVCVHATYROOS-ZBFGKEHZSA-N 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229940047047 sodium arsenate Drugs 0.000 description 1
- MKNJJMHQBYVHRS-UHFFFAOYSA-M sodium;1-[11-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)undecanoyloxy]-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonate Chemical compound [Na+].O=C1C(S(=O)(=O)[O-])CC(=O)N1OC(=O)CCCCCCCCCCN1C(=O)C=CC1=O MKNJJMHQBYVHRS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- ULARYIUTHAWJMU-UHFFFAOYSA-M sodium;1-[4-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)butanoyloxy]-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonate Chemical compound [Na+].O=C1C(S(=O)(=O)[O-])CC(=O)N1OC(=O)CCCN1C(=O)C=CC1=O ULARYIUTHAWJMU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- VUFNRPJNRFOTGK-UHFFFAOYSA-M sodium;1-[4-[(2,5-dioxopyrrol-1-yl)methyl]cyclohexanecarbonyl]oxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonate Chemical compound [Na+].O=C1C(S(=O)(=O)[O-])CC(=O)N1OC(=O)C1CCC(CN2C(C=CC2=O)=O)CC1 VUFNRPJNRFOTGK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- MIDXXTLMKGZDPV-UHFFFAOYSA-M sodium;1-[6-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)hexanoyloxy]-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonate Chemical compound [Na+].O=C1C(S(=O)(=O)[O-])CC(=O)N1OC(=O)CCCCCN1C(=O)C=CC1=O MIDXXTLMKGZDPV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 208000037959 spinal tumor Diseases 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000012289 standard assay Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000011272 standard treatment Methods 0.000 description 1
- SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M stearalkonium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 201000000498 stomach carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001603 tamoxifen Drugs 0.000 description 1
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 1
- 150000004579 taxol derivatives Chemical class 0.000 description 1
- RCINICONZNJXQF-XAZOAEDWSA-N taxol® Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(CC(C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3(C21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-XAZOAEDWSA-N 0.000 description 1
- 229940063683 taxotere Drugs 0.000 description 1
- 229960001278 teniposide Drugs 0.000 description 1
- NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N teniposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@@H](OC[C@H]4O3)C=3SC=CC=3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N 0.000 description 1
- 229960005353 testolactone Drugs 0.000 description 1
- BPEWUONYVDABNZ-DZBHQSCQSA-N testolactone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(OC(=O)CC4)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 BPEWUONYVDABNZ-DZBHQSCQSA-N 0.000 description 1
- SRVJKTDHMYAMHA-WUXMJOGZSA-N thioacetazone Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(\C=N\NC(N)=S)C=C1 SRVJKTDHMYAMHA-WUXMJOGZSA-N 0.000 description 1
- 125000000101 thioether group Chemical group 0.000 description 1
- ATGUDZODTABURZ-UHFFFAOYSA-N thiolan-2-ylideneazanium;chloride Chemical compound Cl.N=C1CCCS1 ATGUDZODTABURZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000025366 tissue development Effects 0.000 description 1
- YONPGGFAJWQGJC-UHFFFAOYSA-K titanium(iii) chloride Chemical compound Cl[Ti](Cl)Cl YONPGGFAJWQGJC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- RUELTTOHQODFPA-UHFFFAOYSA-N toluene 2,6-diisocyanate Chemical compound CC1=C(N=C=O)C=CC=C1N=C=O RUELTTOHQODFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 229960000303 topotecan Drugs 0.000 description 1
- UCFGDBYHRUNTLO-QHCPKHFHSA-N topotecan Chemical compound C1=C(O)C(CN(C)C)=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 UCFGDBYHRUNTLO-QHCPKHFHSA-N 0.000 description 1
- 229960005267 tositumomab Drugs 0.000 description 1
- 230000007888 toxin activity Effects 0.000 description 1
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 1
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 1
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 102000027257 transmembrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 108091008578 transmembrane receptors Proteins 0.000 description 1
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000626 ureter Anatomy 0.000 description 1
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 229910052720 vanadium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000004862 vasculogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- 201000004916 vulva carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000013013 vulvar carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 235000012431 wafers Nutrition 0.000 description 1
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-OUBTZVSYSA-N water-17o Chemical compound [17OH2] XLYOFNOQVPJJNP-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 229940053867 xeloda Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
- A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
- A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
- A61K47/68031—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being an auristatin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
- A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
- A61K47/6811—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a protein or peptide, e.g. transferrin or bleomycin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2851—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the lectin superfamily, e.g. CD23, CD72
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2887—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against CD20
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
- A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/40—Immunoglobulins specific features characterized by post-translational modification
- C07K2317/41—Glycosylation, sialylation, or fucosylation
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Mycology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии. Описана комбинация обинутузумаба с конъюгатом CD22 антитело - лекарственное средство, который представляет собой анти-CD22-MC-vc-PAB-MMAE, для лечения CD20 экспрессирующего рака, где анти-CD22 антитело в указанном конъюгате содержит вариабельный домен легкой цепи SEQ ID NO: 50 и вариабельный домен тяжелой цепи SEQ ID NO: 51. Изобретение расширяет арсенал средств, предназначенных для лечения рака, прежде всего комбинированная терапия для лечения видов рака, при которых происходит экспрессия CD20. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 4 ил., 6 табл.
Description
В настоящей заявке испрашивается приоритет по дате подачи предварительной заявки на патент США №61/818810, зарегистрированной 2 мая 2013 г., полное содержание которой включено в настоящее описание в качестве ссылки.
В настоящем изобретении предложена комбинированная терапия на основе афукозилированного антитела к CD20 в сочетании с конъюгатом антитело к СD22-лекарственное средство для лечения рака.
Предпосылки создания изобретения
Афукозилированные антитела
Опосредованные клеткой эффекторные функции моноклональных антител можно усиливать путем конструирования их олигосахаридного компонента согласно методу, описанному у и др., Nature Biotechnol. 17, 1999, cc. 176-180 и в US №6602684. Антитела IgG1-типа, представляющие собой антитела, наиболее часто используемые в иммунотерапии рака, являются гликопротеинами, которые имеют консервативный N-связанный сайт гликозилирования в положении Asn297 в каждом СН2-домене. Два сложных биантенных олигосахарида, которые присоединены к Asn297, размещаются между СН2-доменами, образуя обширные контакты с каркасом полипептида, и их наличие является существенным для способности антитела опосредовать эффекторные функции, такие как антитело-обусловленная клеточнозависимая цитотоксичность (ADCC) (Lifely M.R. и др., Glycobiology, 5, 1995, cc. 813-822; Jefferis R. и др., Immunol. Rev., 163, 1998, cc. 59-76; Wright А. и Morrison S.L., Trends Biotechnol., 15, 1997, cc. 26-32). У и др., Nature Biotechnol. 17, 1999, cc. 176-180 и в WO 1999/54342 продемонстрировано, что сверхэкспрессия в клетках яичника китайского хомячка (СНО) β(1,4)-N-ацетилглюкозаминилтрансферазы III («GnTIII»), т.е. гликозилтрансферазы, которая катализирует образование бисекционных олигосахаридов, существенно повышает ADCC-активность антител in vitro. Изменение состава связанного с N297 углевода или его элиминация оказывают также воздействие на связывание Fc с FcγR и C1q ( и др., Nature Biotechnol. 17,1999, cc. 176-180; Davies J. и др., Biotechnol. Bioeng. 74, 2001, cc. 288-294; Mimura Y. и др., J. Biol. Chem. 276, 2001, cc. 45539-45547; Radaev S. и др., J. Biol. Chem. 276, 2001, cc. 16478-16483; Shields R.L. и др., J. Biol. Chem. 276, 2001, cc. 6591-6604; Shields R.L. и др., J. Biol. Chem. 277, 2002, cc. 26733-26740; Simmons L.C. и др., J. Immunol. Methods 263, 2002, cc. 133-147).
Опубликованы исследования, в которых обсуждается активность афукозилированных и фукозилированных антител, включая антитела к CD20 (см., например, Iida S. и др., Clin. Cancer Res. 12, 2006, cc. 2879-2887; Natsume A. и др., J. Immunol. Methods 306, 2005, cc. 93-103; Satoh M. и др., Expert Opin. Biol. Ther. 6, 2006, cc. 1161-1173; Kanda Y., и др., Biotechnol. Bioeng. 94, 2006, cc. 680-688; Davies J. и др., Biotechnol. Bioeng. 74, 2001, cc. 288-294). CD20 и антитела к CD20
Молекула CD20 (которую называют также эволюционно консервативным дифференцировочным антигеном человеческих В-лимфоцитов или Вр35) представляет собой широко известный гидрофобный трансмембранный белок, локализованный на пре-В и зрелых В-лимфоцитах (Valentine М.А. и др., J. Biol. Chem. 264, 1989, сс.11282-11287; и Einfeld D.A. и др., EMBO J. 7, 1988, сс.711-717; Tedder T.F. и др., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 85, 1988, cc. 208-212; Stamenkovic I. и др., J. Exp.Med. 167, 1988, cc. 1975-1980; Tedder T.F. и др., J. Immunol. 142, 1989, cc. 2560-2568). При неходжкинских лимфомах (HXЛ) CD20 экспрессируется на поверхности более 90% В-клеток (Anderson K.С.и др., Blood 63, 1984, сс.1424-1433), но он не выявлен на гематопоэтических стволовых клетках, про-В-клетках, здоровых плазматических клетках или в других здоровых тканях (Tedder T.F. и др., J. Immunol. 135, 1985, сс.973-979).
Существуют два различных типа антител к CD20, которые существенно отличаются механизмом связывания CD20 и биологической активностью (Cragg M.S. и др., Blood 103, 2004, сс.2738-2743; и Cragg M.S. и др., Blood, 101, 2003, сс.1045-1052). Антитела типа I, такие, например, как ритуксимаб (не афукозилированное антитело с содержанием фукозы 85% или более), обладают сильной опосредуемой комплементом цитотоксичностью.
Антитела типа II, такие, например, как тозитумомаб (Bl), 11 В8, АТ80 или гуманизированные антитела B-Ly1, эффективно инициируют гибель клеток-мишеней посредством независимого от каспазы апоптоза при сопутствующей обработке фосфатидилсерином.
Конъюгаты антитело к СD22-лекарственное средство Другие В-клеточные антигены, такие как CD19, CD22 и CD52, представляют собой мишени, имеющие потенциальное терапевтическое значение для лечения лимфомы (Grillo-Lopez A.J. и др., Curr Pharm Biotechnol, 2, 2001, сс.301-311). CD22 представляет собой сиалогликопротеин с молекулярной массой 135 кДа, присутствующий только на В-клетках, который экспрессируется на поверхности В-клеток только на зрелых стадиях дифференцировки (Dorken В. и др., J. Immunol. 136, 1986, сс.4470-4479). Превалирующей формой CD22 является СD22бета, которая содержит во внеклеточном домене семь доменов суперсемейства иммуноглобулинов (Wilson G.L. и др., J. Exp.Med. 173, 1991, сс.137-146). В вариантной форме, т.е. СD22-альфа, отсутствуют домены 3 и 4 суперсемейства иммуноглобулинов (Stamenkovic I. и Seed В., Nature 345, 1990, сс.74-77). Установлено, что связывание лигандов с человеческим CD22 ассоциировано с доменами 1 и 2 суперсемейства иммуноглобулинов (которые обозначают также как эпитопы 1 и 2) (Engel Р. и др., J. Exp.Med. 181, 1995, сс.1581-1586).
При В-клеточной НХЛ уровни экспрессии CD22 составляют от 91% до 99% в популяциях с агрессивной и индолентной формой заболевания соответственно (Cesano А. и др.,, Blood 100, 2002, с. 350а)). CD22 может функционировать и как компонент комплекса В-клеточной активации (Sato S. и др., Semin. Immunol. 10, 1998, сс.287-296), и как молекула адгезии (Engel Р. и др., J. Immunol. 150, 1993, сс.4719-4732). В-клетки мышей с дефицитом CD22 имеют укороченную продолжительность жизни и отличаются повышенным уровнем апоптоза, это позволяет предположить, что этот антиген играет ключевую роль в выживаемости В-клеток (Otipoby K.L. и др., Nature (Lond) 384, 1996, сс.634-637). После связывании с его встречающимся(имися) в естественных условиях лигандом(ами) или антителами CD22 быстро интернализуется, обеспечивая сильный костимулирующий сигнал в первичных В-клетках и проапоптозные сигналы в неопластических В-клетках (Sato S. и др., Immunity 5, 1996, сс.551-562).
Антитела к CD22 изучены в качестве потенциальных терапевтических средств для В-клеточных видов рака и других В-клеточных пролиферативных заболеваний. Указанные антитела к CD22 включают RFB4 (Mansfield Е. и др., Blood 90, 1997, сс.2020-2026), СМС-544 (DiJoseph J.F., Blood 103, 2004, сс.1807-1814) и LL2 (Pawlak-Byczkowska E.J. и др., Cancer Res. 49, 1989, сс.4568-4577)). Антитело LL2 (прежнее название НРВ-2) представляет собой мышиное моноклональное антитело IgG2a-изотипа, направленное против антигена CD22 (Pawlak-Byczkowska E.J. и др., 1989, выше). Иммуногистологические оценки in vitro продемонстрировали наличие реактивности антитела LL2 в отношении 50 из 51 протестированного образца В-клеточной НХЛ, но не в отношении других злокачественных или здоровых нелимфоидных тканей (Pawlak-Byczkowska, 1989, выше; Stein R. и др., Cancer Immunol. Immunother. 37, 1993, сс.293-298).
Применение конъюгатов антитело-лекарственное средство для местной доставки цитотоксических или цитостатических агентов, т.е. лекарственных средств для уничтожения или ингибирования опухолевых клеток при лечении различных видов рака (Syrigos и Epenetos, Anticancer Research 19, 1999, сс.605-614; Niculescu-Duvaz и Springer Adv. Drg Del. Rev. 26, 1997, cc. 151-172; US №4975278), позволяет осуществлять направленное введение фрагмента, представляющего собой лекарственное средство, к опухолям и внутриклеточное накапливание в них, в случаях, когда системное введение указанных неконъюгированных лекарственных средств может приводить к неприемлемым уровням токсичности в отношении здоровых клеток, наряду с опухолевыми клетками, подлежащими элиминации (Baldwin и др., Lancet, 14 марта 1986 г., сс.603-605; Thorpe, «Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In Cancer Therapy: A Review», в: Monoclonal Antibodies '84: Biological And Clinical Applications, под ред. A. Pinchera и др., 1986, сс.475-506). При этом ожидается сочетание максимальной эффективности с минимальной токсичностью. Известны как поликлональные антитела, так и моноклональные антитела, которые можно применять в этих стратегиях (Rowland и др., Cancer Immunol. Immunother., 21, 1986, сс.183-187). Лекарственные средства, применяемые в этих методах, включают дауномицин, доксорубицин, метотрексат и виндесин (Rowland и др., Cancer Immunol. Immunother. 21, 1986, сс.183-187). Токсины, применяемые в конъюгатах антитело-токсин, включают бактериальные токсины, такие как дифтерийный токсин, растительные токсины, такие как рицин, низкомолекулярные токсины, такие как гелданамицин (Kerr и др., Bioconjugate Chem. 8(6), 1997, сс.781-784; Mandler и др., Journal of the Nat. Cancer Inst. 92(19), 2000, cc. 1573-1581; Mandler и др., Bioorganic & Med. Chem. Letters 10, 2000, cc. 1025-1028; Mandler и др., Bioconjugate Chem. 13, 2002, cc. 786-791), майтанзиноиды (ЕР 1391213; Liu и др., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93, 1996, cc. 8618-8623) и калихеамицин (Lode и др., Cancer Res. 58, 1998, с. 2928; Hinman и др., Cancer Res. 53, 1993, cc. 3336-3342). Токсины могут проявлять свои цитотоксические и цитостатические действия посредством таких механизмов, как связывание тубулина, связывание ДНК или ингибирование топоизомераз (Meyer D.L. и Senter P.D. «Recent Advances in Antibody Drug Conjugates for Cancer Тhегару» в: Annual Reports in Medicinal Chemistry, т.38, глава 23, 2003, cc. 229-237). Некоторые цитотоксические лекарственные средства имеют тенденцию к потере или снижению активности при их конъюгации с крупными антибиотиками или белковыми лигандами рецепторов.
ZEVALIN® (ибритумомаба тиуксетан, фирма Biogen/Idec) представляет собой конъюгат антитело-радиоизотоп, состоящий из мышиного моноклонального антитела IgGl каппа, направленного против антигена CD20,
находящегося на поверхности здоровых и злокачественных В-лимфоцитов, и радиоизотопа IIIIn или 90Y, связанного с помощью тиомочевинного линкера-хелатора (Wiseman и др., Eur. Jour. Nucl. Med. 27(7), 2000, cc. 766-77; Wiseman и др., Blood 99(12), 2002, cc. 4336-4342; Witzig и др., J. Clin. Oncol. 20(10), 2002, cc. 2453-2463; Witzig и др., J. Clin. Oncol. 20(15), 2002, cc. 3262-3269). Хотя зевалин обладает активностью, направленной против В-клеточной неходжкинской лимфомы (НХЛ), его введение приводит к тяжелым и продолжительным цитопениям у большинства пациентов. MYLOTARG™ (гемтузумаба озогамицин, фирма Wyeth Pharmaceuticals), конъюгат антитело-лекарственное средство, состоящий из антитела hu-CD33, связанного с калихеамицином, разрешен в 2000 г. для лечения острого миелоидного лейкоза посредством инъекции (Drugs of the Future 25(7), 2000, с. 686; US №№4970198, 5079233, 5585089, 5606040, 5693762, 5739116, 5767285, 5773001). Кантузумаба мертанзин (фирма Immunogen, Inc.), конъюгат антитело-лекарственное средство, состоящий из антитела huC242, связанного посредством дисульфидного линкера SPP с компонентом в виде майтанзиноидного лекарственного средства, DM1, разработан для лечения видов рака, которые экспрессируют антиген CanAg, таких как рак ободочной кишки, поджелудочной железы, желудка и другие виды. MLN-2704 (фирмы Millennium Pharm., BZL Biologies, Immunogen Inc.), конъюгат антитело-лекарственное средство, состоящий из моноклонального антитела против специфичного для простаты мембранного антигена (PSMA), связанного с компонентом в виде майтанзиноидного лекарственного средства, DM1, разрабатывается в качестве кандидата для лечения опухолей предстательной железы. Фрагмент, представляющий собой это майтанзиноидное лекарственное средство, DM1, соединяли через линкер, не представляющий собой дисульфид, такой как SMCC, с мышиным моноклональным антителом ТА.1 (Chari и др., Cancer Research 52, 1992, cc. 127-131). Установлено, что этот конъюгат обладает в 200 раз более низкой активностью по сравнению с соответствующим конъюгатом, связанным дисульфидным линкером. Таким образом, SMCC-линкер рассматривается как «нерасщепляемый».
Несколько коротких пептидных соединений выделено из морского моллюска Dolabella auricularia (морской заяц), и установлено, что они обладают биологической активностью (Pettit и др., Tetrahedron 49, 1993, с. 9151; Nakamura и др., Tetrahedron Letters 36, 1995, сс.5059-5062; Sone и др., Journal Org Chem. 60, 1995, с. 4474). Были получены также аналоги указанных соединений и установлено, что некоторые из них обладают биологической активностью (см. обзор Pettit и др., Anti-Cancer Drug Design 13, 1998, сс.243-277). Например, ауристатин Е (US №5635483) является синтетическим аналогом встречающегося в естественных условиях морского продукта доластатина 10, агента, который ингибирует полимеризацию тубулина посредством связывания с тем же сайтом на тубулине, что и противораковое лекарственное средство винкристин (G. R. Pettit, Prog. Chem. Org. Nat. Prod. 70, 1997, cc. 1-79). Доластатин 10, ауристатин РЕ и ауристатин Е представляют собой линейные пептиды, имеющие 4 аминокислоты, три из которых являются уникальными для класса доластатиновых соединений, и С-концевой амид.
Ауристатиновые пептиды, ауристатин Е (АЕ) и монометилауристатин (ММАЕ), синтетические аналоги доластатина, конъюгировали с I) химерными моноклональными антителами cBR96 (специфическими в отношении антигена Y Льюиса на карциномах); II) сАС10 (специфическим в отношении CD30 на гематологических злокачественных новообразованиях) (Klussman и др., Bioconjugate Chemistry 15(4), 2004, сс.765-773; Doronina и др., Nature Biotechnology 21(7), 2003, сс.778-784; «Monomethylvaline Compounds Capable of Conjugation to Ligands»; Francisco и др., Blood 102(4), 2003, cc. 1458-1465; US №2004/0018194; (III) антителами к CD20, такими как Rituxan® (ритуксимаб) (WO 04/032828), для лечения экспрессирующих CD20 видов рака и иммунных нарушений; (IV) антителами к EphB2 2Н9 и к IL-8 для лечения колоректального рака (Мао и др., Cancer Research 64(3), 2004, сс.781-788); (V) антителом к Е-селектину (Bhaskar и др., Cancer Res. 63, 2003, сс.6387-6394); и (VI) другими антителами к CD30 (WO 03/043583). Монометилауристатин (ММАЕ) конъюгировали также с 2Н9, антителом к EphB2R, который представляет собой тирозинкиназный рецептор типа 1 ТМ, который обладает высоким уровнем гомологии у мышей и человека и сверхэкспрессируется в клетках колоректального рака (Мао и др., Cancer Res. 64, 2004, сс.781-788).
Установлено, что монометилауристатин MMAF, вариант ауристатина Е (ММАЕ) с фенилаланином на С-конце (US №5767237; US №6124431), является менее активным, чем ММАЕ, но становится более активным после конъюгации с моноклональными антителами (Senter и др., Proceedings of the American Association for Cancer Research, т.45, номер реферата 623 от 28 марта 2004 г. ). Фенилендиамин ауристатина F (AFP); фенилаланиновый вариант ММАЕ, связывали с МАт к CD70, 1F6, через С-конец 1F6 посредством фенилендиаминового спейсера (Law и др., Proceedings of the American Association for Cancer Research, т.45, номер реферата 625 от 28 марта 2004 г.).
Конъюгаты антитело к CD22-tokcиh изучены в качестве потенциальных терапевтических соединений. Например, в более ранних работах описаны содержащие цепь А рицина иммунотоксины, направленные против CD22, в качестве потенциальных противораковых агентов (May R.D. и др., Chemical Abstracts 106(21):168656х,1987, сс.35-36; Ghetie М.А. и др., Cancer Research 48, 1988, сс.2610-2617; и Amlot P.L. и др., Blood 82(9), 1993, сс.2624-2633). Когда токсин представлял собой радиоизотоп, эпратузумаб, гуманизированная (с трансплантированным CDR) IgG1 -версия LL2, получены доказательства терапевтической активности радиоиммуноконъюгата (Juweid М.Е. и др., Clin. Cancer Res. 5 (приложение 10), 1999, сс.3292-3303; Griffiths G.L. и др., J. Nucl. Med. 44, 2003, cc. 77-84; Linden О. и др., Clin. Cancer Res. 5 (приложение 10), 1999, cc. 3287-3291).
Конъюгат антитело-лекарственное средство (ADC) aнти-CD22-vc-MMAE разработан фирмой Genentech, и уже доказана его очень высокая эффективность на различных моделях ксенотрансплантатов (Polson A.G., Williams М. и др., Anti-CD22-MCC-DM1: an antibody-drug conjugate with a stable linker for the treatment of non-Hodgkin's lymphoma. Leukemia 24(9), сентябрь 2010 г., cc. 1566-1573. Epub, 1 июля 2010 г. ). Монометилауристатин E (ММАЕ), синтетический аналог встречающегося в естественных условиях продукта доластина 10, является ингибитором микротрубочек. Указанное цитотоксическое лекарственное средство конъюгировали с антителом к CD22. После связывания ADC с опухолевой клеткой он интернализовывался и расщеплялся с высвобождением ММАЕ и таким образом индуцировал гибель клеток.
В данной области существует необходимость в дополнительных лекарственных средствах для лечения различных связанных с В-клетками видов рака, таких как лимфомы, например, неходжкинские лимфомы и другие В клеточные пролиферативные нарушения. Наиболее ценные лекарственные средства для этой цели включают конъюгаты антитело к СD22-лекарственное средством, мишенями которых являются В-клетки, они обладают существенно более низкой токсичностью, сохраняя при этом приемлемую терапевтическую эффективность. Эти и другие известные ранее ограничения и проблемы решаются с помощью настоящего изобретения.
Упоминание какой-либо ссылки в настоящей заявке не предполагает, что эта ссылка является прототипом настоящей заявки. Все процитированные в настоящем описании ссылки, включая патенты, заявки на патент и публикации, полностью включены в него в качестве ссылки. Краткое изложение сущности изобретения При создании изобретения было установлено, что комбинация афукозилированного антитела к CD20 с конъюгатом антитело к CD22-лекарственное средство обладает значительно более сильными антипролиферативными действиями.
Одним из объектов изобретения является афукозилированное антитело к CD20, в котором содержание фукозы составляет 60% или менее от общего количества олигосахаридов (сахаров) на Asn297, предназначенное для лечения рака в сочетании с конъюгатом антитело к СD22-лекарственное средство.
Другим объектом изобретения является применение афукозилированного антитела к CD20, в котором содержание фукозы составляет 60% или менее от общего количества олигосахаридов (сахаров) на Asn297, для приготовления лекарственного средства для лечения рака в сочетании с конъюгатом антитело к СD22-лекарственное средство.
Другим объектом изобретения является способ лечения пациента, страдающего раком, заключающийся в том, что вводят пациенту, который нуждается в таком лечении, афукозилированное антитело к CD20, в котором содержание фукозы составляет 60% или менее от общего количества олигосахаридов (сахаров) на Asn297, в сочетании с конъюгатом антитело к СD22-лекарственное средство.
В одном из вариантов осуществления изобретения содержание фукозы составляет от 40% до 60% от общего количества олигосахаридов (сахаров) на Asn297. Согласно другому варианту осуществления изобретения содержание фукозы составляет 0% от общего количества олигосахаридов (сахаров) на Asn297.
Согласно одному из вариантов осуществления изобретения афукозилированное антитело к CD20 представляет собой антитело изотипа IgG1. В другом варианте осуществления изобретения указанный рак представляет рак, при котором происходит экспрессия CD20, предпочтительно лимофому или лимфоцитарный лейкоз. В одном из вариантов осуществления изобретения указанное афукозилированное антитело к CD20 представляет собой гуманизированное антитело B-Ly1. В конкретном варианте осуществления изобретения антитело к CD20 представляет собой обинутузумаб (рекомендованное INN, WHO Drug Information, т.26, №4, 2012, с. 453). В контексте настоящего описания обинутузумаб является синонимом GA101 или RO5072759. Это название заменяет все предыдущие версии (например, т.25, №1, 2011, с. 75-76), и предыдущее название афутузумаб (рекомендованное INN, WHO Drug Information, т.23, №2, 2009, с. 176; т.22, №2, 2008, с. 124).
В одном из вариантов осуществления изобретения антитело к CD22 в конъюгате антитело к СD22-лекарственное средство содержит (a) HVR-L1, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 9, 10, 19-23, 32 и 33, и (б) и по меньшей мере один, два, три, четыре или пять HVR, выбранных из:
(1) HVR-H1, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2;
(2) HVR-H2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4;
(3) HVR-H3, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6;
(4) HVR-L2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; и
(5) HVR-L3, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14.
В одном из вариантов осуществления изобретения конъюгат антитело к CD22-лекарственное средство имеет формулу Ab-(L-D)p, b которой
(а) Аb обозначает антитело к CD22, представленное в настоящем описании;
(б) L обозначает линкер;
(в) D обозначает фрагмент, представляющий собой лекарственное средство.
В одном из вариантов осуществления изобретения в конъюгате антитело к СD22-лекарственное средство, имеющем формулу Ab-(L-D)p, L выбирают из 6-малеимидокапроила (МС), малеимидопропаноила (MP), валин-цитруллина (val-cit), аланин-фенилаланина (ala-phe), пара-аминобензилоксикарбонила (РАВ), N-сукцинимидил-4-(2-пиридилтио)пентоата (SPP), М-сукцинимидил-4-(N-малеимидометил)циклогексан-1-карбоксилата (SMCC) и N-сукцинимидил-(4-йодацетил)аминобензоата (SIAB).
В одном из вариантов осуществления изобретения в конъюгате антитело к CD22-лекарственное средство, имеющем формулу Ab-(L-D)p, D выбирают из группы, состоящей из ауристатина, долостатина, DM1, DM3, DM4, ММАЕ и MMAF.
В одном из вариантов осуществления изобретения указанный конъюгат антитело к CD22-лекарственное средство представляет собой анти-CD22-MC-vc-РАВ-ММАЕ. В конкретном варианте осуществления изобретения антитело к CD22 в указанном конъюгате представляет собой 10F4.v3.
Согласно одному из вариантов осуществления изобретения связывание афукозилированного антитела к CD20 с CD20 характеризуется значением KD, составляющим от 10-8 М до 10-13 М.
Одним из вариантов осуществления изобретения является композиция, содержащая афукозилированное антитело к CD20, в котором содержание фукозы составляет 60% или менее от общего количества олигосахаридов (сахаров) на Asn297 (в одном из вариантов осуществления изобретения афукозилированное гуманизированное антитело B-Ly1), и конъюгат антитело к СD22-лекарственное средство. В одном из вариантов композиции, предлагаемой в настоящем изобретении, указанное антитело к CD20 представляет собой обинутузумаб. В одном из вариантов композиции, предлагаемой в настоящем изобретении, указанное антитело к CD22 в конъюгате антитело к СD22-лекарственное средство содержит (a) HVR-L1, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 9, 10, 19-23, 32 и 33, и (б) и по меньшей мере один, два, три, четыре или пять HVR, выбранных из:
(1) HVR-H1, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2;
(2) HVR-H2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4;
(3) HVR-H3, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6;
(4) HVR-L2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; и
(5) HVR-L3, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14.
В одном из вариантов композиции, предлагаемой в изобретении, указанное антитело к CD22 связывается с тем же самым эпитопом, что и антитело, выбранное из антитела, которое имеет регистрационный номер АТСС РТА-7621 (10F4.4.1).
В одном из вариантов композиции, предлагаемой в изобретении, применяют один или несколько дополнительных других цитотоксических, химиотерапевтических или противораковых агентов или соединения или ионизирующее излучение, которые усиливают действия указанных агентов.
В одном из вариантов композиции, предлагаемой в изобретении, конъюгат антитело к CD22-лекарственное средство имеет формулу Ab-(L-D)p, в которой
(а) Аb обозначает антитело к CD22, представленное в настоящем описании;
(б) L обозначает линкер;
(в) D обозначает фрагмент, представляющий собой лекарственное средство. В одном из вариантов композиции, предлагаемой в изобретении, конъюгат
антитело к СD22-лекарственное средство имеет формулу Ab-(L-D)p, в которой L выбран из 6-малеимидокапроила (МС), малеимидопропаноила (MP), валин-цитруллина (val-cit), аланин-фенилаланина (ala-phe), пара-аминобензилоксикарбонила (РАВ), N-сукцинимидил 4-(2-пиридилтио)пентоата (SPP), N-сукцинимидил-4-(N-малеимидометил)циклогексан-1-карбоксилата (SMCC) и N-сукцинимидил-(4-йодацетил)аминобензоата (SIAB).
В одном из вариантов композиции, предлагаемой в изобретении, конъюгат антитело к СD22-лекарственное средство имеет формулу Ab-(L-D)p, в которой D выбран из группы, состоящей из ауристатина, долостатина, DM1, DM3, DM4, ММАЕ и MMAF.
В одном из вариантов композиции, предлагаемой в изобретении, конъюгат антитело к СD22-лекарственное средство представляет собой анти-CD22-MC-vc-РАВ-ММАЕ, предназначенный для лечения рака. В конкретном варианте осуществления изобретения антитело к CD22 в указанном конъюгате представляет собой 10F4.v3. Афукозилированное антитело к CD20, в котором содержание фукозы составляет 60% или менее от общего количества олигосахаридов (сахаров) на Asn297, предназначено для лечения рака в сочетании с конъюгатом антитело к CD22-лекарственное средство.
Одним из вариантов осуществления изобретения является способ лечения пациента, который страдает раком, заключающийся в том, что вводят афукозилированное антитело к CD20, в котором содержание фукозы составляет 60% или менее от общего количества олигосахаридов (сахаров) на Asn297, в сочетании с конъюгатом антитело к СD22-лекарственное средство пациенту, который нуждается в таком лечении.
В одном из вариантов осуществления изобретения способ отличается тем, что указанный рак представляет собой рак, при котором происходит экспрессия CD20.
В одном из вариантов осуществления изобретения способ отличается тем, что указанный рак, при котором происходит экспрессия CD20, представляет собой лимфому или лимфоцитарный лейкоз.
В одном из вариантов осуществления изобретения способ отличается тем, что указанное антитело к CD20 представляет собой гуманизированное антитело B-Ly1.
В одном из вариантов осуществления изобретения способ отличается тем, что указанное антитело к CD20 представляет собой обинутузумаб.
В одном из вариантов осуществления изобретения способ отличается тем, что применяют один или несколько дополнительных других цитотоксических, химиотерапевтических или противораковых агентов или соединения или ионизирующее излучение, которые усиливают действия указанных агентов.
В одном из вариантов осуществления изобретения способ отличается тем, что указанное антитело к CD22 в конъюгате антитело к СD22-лекарственное средство содержит (a) HVR-L1, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 9, 10, 19-23, 32 и 33, и (б) и по меньшей мере один, два, три, четыре или пять HVR, выбранных из:
(1) HVR-H1, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2;
(2) HVR-H2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4;
(3) HVR-H3, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6;
(4) HVR-L2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; и
(5) HVR-L3, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14.
В одном из вариантов осуществления изобретения способ отличается тем, что указанное антитело к CD22 связывается с тем же самым эпитопом, что и антитело, выбранное из антитела, которое имеет регистрационный номер АТСС РТА-7621 (10F4.4.1).
В одном из вариантов осуществления изобретения способ отличается тем, что конъюгат антитело к СD22-лекарственное средство имеет формулу Ab-(L-D)p, в которой
(а) Аb обозначает антитело к CD22, представленное в настоящем описании;
(6) L обозначает линкер;
(в) D обозначает фрагмент, представляющий собой лекарственное средство.
В одном из вариантов осуществления изобретения способ отличается тем, что конъюгат антитело к СD22-лекарственное средство имеет формулу Ab-(L-D)p, в которой L выбран из 6-малеимидокапроила (МС), малеимидопропаноила (MP), валин-цитруллина (val-cit), аланин-фенилаланина (ala-phe), пара-аминобензилоксикарбонила (РАВ), N-сукцинимидил 4-(2-пиридилтио)пентоата (SPP), N-cyKциHимидил-4-(N-малеимидометил)циклогексан-1-карбокси лата (SMCC) и N-сукцинимидил-(4-йодацетил)аминобензоата (SIAB).
В одном из вариантов осуществления изобретения способ отличается тем, что конъюгат антитело к СD22-лекарственное средство имеет формулу Ab-(L-D)p, в которой D выбран из группы, состоящей из ауристатина, долостатина, DM1, DM3, DM4, ММАЕ и MMAF.
В одном из вариантов осуществления изобретения способ отличается тем, что конъюгат антитело к СD22-лекарственное средство представляет собой анти-CD22-MC-vc-PAB-MMAE.
В одном из вариантов осуществления изобретения способ отличается тем, антитело к CD22 в указанном конъюгате антитело к CD22 -лекарственное средство представляет собой 10F4.v3.
Одним из вариантов осуществления изобретения является применение афукозилированного антитела к CD20, в котором содержание фукозы составляет 60% или менее от общего количества олигосахаридов (сахаров) на Asn297, для приготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения рака в сочетании с конъюгатом антитело к СD22-лекарственное средство.
В одном из вариантов осуществления изобретения применение, предлагаемое в изобретении, отличается тем, что указанный рак представляет собой рак, при котором происходит экспрессии CD20.
В одном из вариантов осуществления изобретения применение, предлагаемое в изобретении, отличается тем, что указанный рак, при котором происходит экспрессии CD20, представляет собой лимфому или лимфоцитарный лейкоз.
В одном из вариантов осуществления изобретения применение, предлагаемое в изобретении, отличается тем, что указанное антитело к CD20 представляет собой гуманизированное антитело B-Ly1.
В одном из вариантов осуществления изобретения применение, предлагаемое в изобретении, отличается тем, что указанное антитело к CD20 представляет собой обинутузумаб.
В одном из вариантов осуществления изобретения применение, предлагаемое в изобретении, отличается тем, что применяют один или несколько дополнительных других цитотоксических, химиотерапевтических или противораковых агентов или соединения или ионизирующее излучение, которые усиливают действия указанных агентов.
В одном из вариантов осуществления изобретения применение, предлагаемое в изобретении, отличается тем, что указанное антитело к CD22 в конъюгате антитело к СD22-лекарственное средство содержит (a) HVR-L1, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 9, 10, 19-23, 32 и 33, и (б) и по меньшей мере один, два, три, четыре или пять HVR, выбранных из:
(1) HVR-H1, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2;
(2) HVR-H2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4;
(3) HVR-H3, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6;
(4) HVR-L2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; и
(5) HVR-L3, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14.
В одном из вариантов осуществления изобретения применение, предлагаемое в изобретении, отличается тем, что указанное антитело к CD22 связывается с тем же самым эпитопом, что и антитело, выбранное из антитела, которое имеет регистрационный номер АТСС РТА-7621 (10F4.4.1).
В одном из вариантов осуществления изобретения применение, предлагаемое в изобретении, отличается тем, что конъюгат антитело к CD22-лекарственное средство имеет формулу Ab-(L-D)p, в которой
(а) Аb обозначает антитело к CD22, представленное в настоящем описании;
(6) L обозначает линкер;
(в) D обозначает фрагмент, представляющий собой лекарственное средство.
В одном из вариантов осуществления изобретения применение, предлагаемое в изобретении, отличается тем, что конъюгат антитело к CD22-лекарственное средство имеет формулу Ab-(L-D)p, в которой L выбран из 6-малеимидокапроила (МС), малеимидопропаноила (MP), валин-цитруллина (val-cit), аланин-фенилаланина (ala-phe), пара-аминобензилоксикарбонила (РАВ), N-сукцинимидил 4-(2-пиридилтио)пентоата (SPP), N-сукцинимидил-4-(N-малеимидометил)циклогексан-1-карбоксилата (SMCC) и N-сукцинимидил-(4-йодацетил)аминобензоата (SIAB).
В одном из вариантов осуществления изобретения применение, предлагаемое в изобретении, отличается тем, что конъюгат антитело к CD22-лекарственное средство имеет формулу Ab-(L-D)p, в которой D выбран из группы, состоящей из ауристатина, долостатина, DM1, DM3, DM4, ММАЕ и MMAF.
В одном из вариантов осуществления изобретения применение, предлагаемое в изобретении, отличается тем, что конъюгат антитело к CD22-лекарственное средство представляет собой анти-CD22-MC-vc-PAB-MMAE.
В одном из вариантов осуществления изобретения применение, предлагаемое в изобретении, отличается тем, что антитело к CD22 в указанном конъюгате антитело к СD22-лекарственное средство представляет собой 10F4.V3.
В одном из вариантов осуществления изобретения применение, предлагаемое в изобретении, отличается тем, что применяют один или несколько дополнительных других цитотоксических, химиотерапевтических или противораковых агентов или соединения или ионизирующее излучение, которые усиливают действия указанных агентов.
Описание чертежей
На чертежах показано:
на фиг. 1 - воздействие обинутузумаба (GA101), ритуксимаба, анти-СD22-ADC и комбинаций анти-CD22-ADC с GA101 или ритуксимабом, изученное на модели лимфомы WSU-DLCL2, созданной в SCID-мышах, трансгенных по FcgR3a;
на фиг. 2 - результаты статистического анализа данных, представленных на фиг.1, с помощью парного теста Вилкоксона и парного логрангового теста;
на фиг. 3 - (3А-3Б): фиг 3А - аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи мышиного антитела к CD22 10F4, предлагаемого в изобретении (m10F4), выровненная с гуманизированной версией 1 антитела 10F4 (h10F4v1) и выровненная с человеческой последовательностью подгруппы III. HVR обозначены прямоугольниками (HVR-Н1, HVR-H2, HVR-H3). Последовательности, фланкирующие HVR, представляют собой последовательности каркасных участков (FR-H1-FR-H4). Последовательности пронумерованы согласно нумерации Кэбота. Над выделенными прямоугольниками HVR указаны CDR согласно их определению по Кэботу, Хотиа и контактирующие CDR. На фиг. 3Б - аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи мышиного антитела к CD22 10F4, предлагаемого в изобретении (m10F4), выровненная с гуманизированной версией 1 антитела 10F4 (h10F4v1) и выровненная с человеческой последовательностью каппа I. Версии 2 и 3 гуманизированного антитела 10F4 (h10F4v2 и h10F4v3) имеют аминокислотные последовательности, соответствующие секретируемой зрелой форме. Антитела h10F4v2 и h10F4v3 отличаются от h10F4v1 аминокислотой в положении 28 HVR-L1 (N28V). HVR обозначены прямоугольниками. Последовательности FR-L1, FR-L2, FR-L3 и FR-L4 фланкируют HVR (HVR-L1, HVR-L2, HVR-L3). Последовательности пронумерованы согласно нумерации Кэбота. Над обозначенными прямоугольниками HVR указаны CDR согласно их определению по Кэботу, Хотиа и контактирующие CDR;
на фиг. 4 -полноразмерные аминокислотные последовательности (вариабельные и константные области) легкой и тяжелой цепей гуманизированного антитела к CD22 10F4v2, изотипа IgG1. Подчеркнутые участки соответствуют константным доменам.
Подробное описание изобретения
В изобретении предложено афукозилированное антитело к CD20 IgG1 - или IgG3-изотипа, в котором содержание фукозы составляет 60% или менее от общего количества олигосахаридов (сахаров) на Asn297, предназначенное для лечения рака в сочетании с конъюгатом антитело к СD22-лекарственное средство.
В изобретении предложено применение афукозилированного антитела к CD20 IgG1 - или IgG3-изотипа, в котором содержание фукозы составляет 60% или менее от общего количества олигосахаридов (сахаров) на Asn297, для приготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения рака в сочетании с конъюгатом антитело к СD22-лекарственное средство.
Согласно одному из вариантов осуществления изобретения содержание фукозы составляет от 40% до 60% от общего количества олигосахаридов (сахаров) на Asn297.
Понятие «антитело» относится к различным формам антител, включая (но, не ограничиваясь только ими) полные антитела, человеческие антитела, гуманизированные антитела и созданные с помощью генной инженерии антитела, такие как моноклональные антитела, химерные антитела или рекомбинантные антитела, а также фрагменты указанных антител, если они сохраняют отличительные признаки антител, предлагаемых в изобретении. Понятия «моноклональное антитело» или «композиция моноклонального антитела» в контексте настоящего описания относятся к препарату, содержащему молекулы антитела, которые имеют одинаковый аминокислотный состав. Соответственно понятие «человеческое моноклональное антитело» относится к антителам, обладающим одинаковой специфичностью связывания, которые имеют вариабельную и константную области, полученные из последовательностей иммуноглобулина человеческой зародышевой линии. Согласно одному из вариантов осуществления изобретения человеческие моноклональные антитела получают с помощью гибридомы, которая включает В-клетку, полученную из трансгенного животного кроме человека, например, трансгенной мыши, имеющей геном, который содержит трансген человеческой тяжелой цепи и трансген человеческой легкой цепи, слитую с иммортализованной клеткой.
Понятие «химерное антитело» относится к моноклональному антителу, содержащему вариабельную область, т.е. связывающую область, выведенную из одного источника или вида, и по меньшей мере часть константной области, выведенную из другого источника или вида, которое, как правило, получают методами рекомбинантной ДНК. Наиболее предпочтительными являются химерные антитела, содержащие мышиную вариабельную область и человеческую константную область. Такие мышиные/человеческие химерные антитела являются продуктом экспрессируемых генов иммуноглобулина, содержащих сегменты ДНК, которые кодируют мышиные вариабельные области иммуноглобулина, и сегменты ДНК, которые кодируют человеческие константные области иммуноглобулина. Другими формами «химерных антител», подпадающих под объем настоящего изобретения, являются антитела, в которых класс или подкласс модифицирован или изменен по сравнению с исходным антителом. Такие «химерные» антитела называют также «антителами переключенного класса». Методы получения химерных антител основаны на общепринятых методиках рекомбинантной ДНК и методиках генной трансфекции, и в настоящее время являются хорошо известными в данной области (см., например, Morrison S.L. и др., Proc. Natl. Acad Sci. USA 81, 1984, сс.6851-6855; US №5202238 и US №5204244).
Понятие «гуманизированное антитело» относится к антителам, в которых каркасный участок или «гипервариабельные участки» (CDR) модифицированы таким образом, что они содержат CDR иммуноглобулина другой специфичности по сравнению с родительским иммуноглобулином. В предпочтительном варианте осуществления изобретения мышиный CDR трансплантируют в каркасный участок человеческого антитела, в результате чего образуется «гуманизированное антитело» (см., например, Riechmann L. и др., Nature 332, 1988, сс.323-327; и Neuberger M.S. и др., Nature 314, 1985, сс.268-270). Наиболее предпочтительные CDR соответствуют CDR, которые имеют последовательности, распознающие антигены, указанные выше для химерных и бифункциональных антител.
Подразумевается, что в контексте настоящего описания понятие «человеческое антитело» включает антитела, имеющие вариабельную и константную области, происходящие из последовательностей иммуноглобулина человеческой зародышевой линии. Человеческие антитела хорошо известны в данной области (van Dijk М.А. и van de Winkel J.G., Curr. Opin. Chem. Biol. 5, 2001, cc. 368-374). На основе указанной технологии можно получать человеческие антитела к широкому разнообразию мишеней. Примеры человеческих антител описаны у Kellermann S.A. и др., Curr Opin Biotechnol. 13, 2002, сс.593-597.
Подразумевается, что понятие «рекомбинантное человеческое антитело» в контексте настоящего описания включает все человеческие антитела, которые получают, экспрессируют, создают или выделяют методами рекомбинации, такие как антитела, выделенные из клетки-хозяина, такой как NS0- или СНО-клетка, или из животного (например, из мыши), которое является трансгенным по генам человеческого иммуноглобулина, или антитела, экспрессируемые с помощью рекомбинантного экспрессионного вектора, которым трансфектируют клетку-хозяина. Такие рекомбинантные человеческие антитела имеют вариабельную и константную области, происходящие из последовательностей иммуноглобулина человеческой зародышевой линии, в преобразованной форме. Рекомбинантные человеческие антитела, предлагаемые в изобретении, подвергали in vivo соматической гипермутации. Так, аминокислотные последовательности VH- и VL-областей рекомбинантного антитела представляют собой последовательности, которые, хотя и происходят из последовательностей VH- и VL-областей человеческой зародышевой линии и являются родственными им, но могут не встречаться в существующем в естественных условиях in vivo спектре зародышевых линий человеческого антитела.
В контексте настоящего описания понятие «связывается (связывание)» или «специфически связывается (специфическое связывание)» относится к связыванию антитела с эпитопом опухолевого антигена по данным анализа in vitro, предпочтительно по данным анализа методом поверхностного плазмонного резонанса (BIAcore, фирма GE-Healthcare, Уппсала, Швеция) при использовании очищенного антигена дикого типа. Аффинность связывания определяют в понятиях ка (константа скорости ассоциации антитела при образовании комплекса антитело/антиген), ко (константа диссоциации) и KD (kD/ka). Считается, что имеет место связывание или специфическое связывание, если аффинность связывания (KD) составляет 10-8 М или менее, предпочтительно от 10-8 М до 10-13 М (в одном из вариантов осуществления от 10-9 М до 10-13 М). Таким образом, афукозилированное антитело, предлагаемое в изобретении, специфически связывается с опухолевым антигеном, что характеризуется аффинностью связывания (KD), составляющей 10-8 моля/л или менее, предпочтительно от 10-8 М до 10-13 М (в одном из вариантов осуществления изобретения от 10-9 М до 10-13 М).
Подразумевается, что понятие «молекула нуклеиновой кислоты» в контексте настоящего описания относится к молекулам ДНК и молекулам РНК. Молекула нуклеиновой кислоты может быть одноцепочечной или двухцепочечной, но предпочтительно она представляет собой двухцепочечную ДНК.
«Константные домены» не участвуют непосредственно в связывании антитела с антигеном, но они участвуют в эффекторных функциях (таких как ADCC, связывание комплемента и CDC).
Понятия «вариабельная область» (вариабельная область легкой цепи (VL), вариабельная область тяжелой цепи (VH)) в контексте настоящего описания обозначают области каждой из пар легких и тяжелых цепей, которые принимают непосредственное участие в связывании антитела с антигеном. Домены человеческих вариабельных легкой и тяжелой цепей имеют одинаковую общую структуру, и каждый домен содержит четыре каркасных участка (FR), последовательности которых в значительной степени являются консервативными, соединенные тремя «гипервариабельными участками» (или определяющими комплементарность участками, CDR). Каркасные участки адоптированы к β-складчатой конформации, и CDR могут образовывать петли, соединяющие β-складчатую структуру. CDR в каждой цепи поддерживают свою трехмерную структуру с помощью каркасных участков и образуют вместе с CDR из другой цепи антигенсвязывающий сайт.
Понятия «гипервариабельный участок» или «антигенсвязывающий участок антитела» в контексте настоящего описания относятся к аминокислотным остаткам антитела, которые ответственны за связывание с антигеном. Гипервариабельный участок содержит аминокислотные остатки из «определяющих комплементарность участков» или «CDR». «Каркасные» или «FR»-участки представляют собой участки вариабельного домена, отличные от остатков гипервариабельного участка, как он определен в настоящем описании. Таким образом, легкая и тяжелая цепи антитела содержат в направлении от N- к С-концу следующие домены: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 и FR4. CDR3 тяжелой цепи представляет собой участок, который вносит основной вклад в связывание с антигеном. CDR- и FR-участки определяют согласно стандартной номенклатуре Kabat и др., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5-e изд., изд-во Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD., 1991) и/или как участки из «гипервариабельной петли».
Понятие «афукозилированное антитело» относится к антителу изотипа IgG1 или IgG3 (предпочтительно изотипа IgG1) с измененной схемой гликозилирования в Fc-области в положении Asn297, которое имеет пониженное количество остатков фукозы. Гликозилирование человеческих IgG1 или IgG3 имеет место в положении Asn297, оно обусловлено присутствием корового фукозилированного биантенного сложного олигосахарида в сайте гликозилирования, имеющего на конце вплоть до 2 остатков Gal. Эти структуры обозначают как G0-, G1- (α1,6 или α1,3) или G2-гликановые остатки в зависимости от количества концевых остатков Gal (Raju T.S., BioProcess Int. 1, 2003, сс.44-53). СНО-тип гликозилирования Fc-областей антител описан, например, у Routier F.H., Glycoconjugate J. 14, 1997, сс.201-207. Антитела, полученные в результате рекомбинантной экспрессии в клетках-хозяевах СНО, не имеющих модификации гликозилирования (гликомодификация), как правило, имеют уровень фукозилирования в положении Asn297, составляющий по меньшей мере 85%. Очевидно, что в контексте настоящего описания понятие афукозилированное антитело включает также и антитело, у которого в его схеме гликозилирования фукоза отсутствует. Хорошо известно, что обычное положение гликозилированного остатка в антителе соответствует аспарагину в положении 297 согласно системе нумерации EU («Asn297»).
«Систему нумерации EU» или «EU-индекс», как правило, применяют для обозначения положения остатка в константной области тяжелой цепи иммуноглобулина (например, EU-индекс описан у Kabat и др., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5-е изд., изд-во Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD., 1991, публикация специально включена в настоящее описание в качестве ссылки).
Таким образом, афукозилированное антитело, предлагаемое в настоящем изобретении, представляет собой антитело изотипа IgG1 или IgG3 (предпочтительно изотипа IgG1), в котором содержание фукозы составляет 60% или менее от общего количества олигосахаридов (сахаров) на Asn297 (это означает, что по меньшей мере 40% или более олигосахаридров на Asn297 в Fc-области являются афукозилированными). В одном из вариантов осуществления изобретения содержание фукозы составляет от 40% до 60% от количества олигосахаридов на Asn297 в Fc-области. В другом варианте осуществления изобретения содержание фукозы составляет 50% или менее, а в следующем варианте осуществления изобретения содержание фукозы составляет 30% или менее от количества олигосахаридов на Asn297 в Fc-области. Согласно изобретению «содержание фукозы» означает количество указанного олигосахарида (фукозы) в олигосахаридной (сахарной) цепи на Asn297 относительно суммы всех олигосахаридов (сахаров), присоединенных к Asn 297 (например, сложных, гибридных и имеющих высокое содержание маннозы структур), измеренное с помощью MALDI-TOF-масс-спектрометрии и рассчитанное в виде среднего значения (подробный метод определения количества фукозы описан, например, в WO 2008/077546). Согласно еще одному варианту осуществления изобретения олигосахариды Fc-области являются бисекционными. Афукозилированное антитело, предлагаемое в изобретении, можно экспрессировать в гликомодифицированной клетке-хозяине, сконструированной с целью экспрессии по меньшей мере одной нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид, который обладает GnTIII-активностью, в количестве, достаточном для частичного фукозилирования олигосахаридов в Fc-области. Согласно одному из вариантов осуществления изобретения, полипептид, обладающий GnTIII-активностью, представляет собой слитый полипептид. В альтернативном варианте α1,6-фукозилтрансферазную активность клетки-хозяина можно снижать или элиминировать согласно методу, описанному в №US 6946292, с получением гликомодифицированных клеток-хозяев. Уровень фукозилирования антитела можно предопределять, например, либо путем изменения условий ферментации (например, продолжительности ферментации), либо путем объединения по меньшей мере двух антител с различным уровнем фукозилирования. Указанные афукозилированные антитела и соответствующие методы гликоинженерии описаны в WO 2005/044859, WO 2004/065540, WO 2007/031875, у Umana Р. и др., Nature Biotechnol. 17, 1999, cc. 176-180), WO 1999/54342, WO 2005/018572, WO 2006/116260, WO 2006/114700, WO 2005/011735, WO 2005/027966, WO 97/028267, US №2006/0134709, US №2005/0054048, US №2005/0152894, WO 2003/035835, WO 2000/061739. Указанные антитела, полученные с помощью методов гликоинженерии, обладают повышенной ADCC. Другие методы гликоинженерии, которые позволяют получать афукозилированные антитела, предлагаемые в изобретении, описаны, например, у Niwa R. и др., J. Immunol. Methods 306, 2005, cc. 151-160; Shinkawa Т. и др., J. Biol. Chem. 278, 2003, cc. 3466-3473; WO 03/055993 или US №2005/0249722.
Таким образом, одним из объектов изобретения является афукозилированное антитело к CD20 изотипа IgG1 или IgG3 (предпочтительно изотипа IgG1), которое специфически связывается с CD20, и в котором содержание фукозы составляет 60% или менее от общего количества олигосахаридов (сахаров) на Asn297, предназначенное для лечения рака в сочетании с конъюгатом антитело к CD22-лекарственное средство. Другим объектом изобретения является применение афукозилированного антитела к CD20 изотипа IgG1 или IgG3 (предпочтительно изотипа IgG1), которое специфически связывается с CD20, и в котором содержание фукозы составляет 60% или менее от общего количества олигосахаридов (сахаров) на Asn297, для приготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения рака в сочетании с конъюгатом антитело к СD22-лекарственное средство. Согласно одному из вариантов осуществления изобретения содержание фукозы составляет от 60% до 20% от общего количества олигосахаридов (сахаров) на Asn297. Согласно одному из вариантов осуществления изобретения содержание фукозы составляет от 60% до 40% от общего количества олигосахаридов (сахаров) на Asn297. Согласно одному из вариантов осуществления изобретения содержание фукозы составляет 0% от общего количества олигосахаридов (сахаров) на Asn297.
CD20 (который называют также В-лимфоцитарным антигеном CD20, В-лимфоцитарным поверхностным антигеном B1, Leu-16, Вр35, ВМ5 и LF5; последовательность представлена в базе данных SwissProt под номером Р11836) представляет собой гидрофобный трансмембранный белок с молекулярной массой примерно 35 кДа, локализованный на пре-В и зрелых В-лимфоцитах (Valentine М.А. и др., J. Biol. Chem. 264, 1989, сс.11282-11287; Tedder T.F. и др., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 85, 1988, cc. 208-212; Stamenkovic I. и др., J. Exp.Med. 167, 1988, cc. 1975-1980; Einfeld D.A. и др., EMBO J. 7, 1988, cc. 711-717; Tedder T.F. и др., J. Immunol. 142, 1989, cc. 2560-2568). Соответствующий человеческий ген представляет собой имеющий 4 трансмембранных домена представитель 1 подсемейства А, известный также как MS4A1. Этот ген кодирует представителя семейства трансмембранных генов 4А. Представители этого нового семейства белков отличаются общими структурными особенностями и сходными интрон/экзонными сочленениями (границы сплайсинга) и отличаются уникальными схемами экспрессии для гематопоэтических клеток и нелимфоидных тканей. Этот ген кодирует поверхностную молекулу В-лимфоцитов, которая играет роль в развитии и дифференцировке В-клеток в плазматические клетки. Этот представитель семейства локализован на 11ql2 в кластере представителей семейства. Альтернативный сплайсинг этого гена приводит к образованию двух транскрипционных вариантов, которые кодируют один и тот же белок.
Понятия «CD20» и «антиген CD20» в контексте настоящего описания используют взаимозаменяемо, и они включают любые варианты, изоформы и видовые гомологи человеческого CD20, которые в естественных условиях экспрессируются клетками или экспрессируются на клетках, трансфектированных геном CD20. Связывание антитела, предлагаемого в изобретении, с антигеном CD20 опосредует цитолиз клеток, экспрессирующих CD20 (например, опухолевой клетки), путем инактивации CD20. Цитолиз клеток, экспрессирующих CD20, может происходить посредством одного или нескольких из следующих механизмов: индукция клеточной гибели/апоптоза, ADCC и CDC.
Синонимами CD20, принятыми в данной области, являются антиген CD20 В-лимфоцитов, поверхностный антиген В-лимфоцитов B1, Leu-16, Вр35, ВМ5 и LF5.
Понятие «антитело к CD20», предлагаемое в изобретении, относится к антителу, которое специфически связывается с антигеном CD20. В зависимости от характеристик связывания и биологической активности антитела к CD20 в отношении антигена CD20 можно различать два типа антител к CD20 (антитела к CD20 типа I и типа II) согласно Cragg M.S. и др., Blood 103, 2004, сс.2738-2743; и Cragg M.S. и др., Blood 101, 2003, сс.1045-1052 (см. таблицу 1).
Примерами антител к CD20 типа II являются, например, гуманизированное антитело B-Ly1 изотипа IgG1 (химерное гуманизированное антитело изотипа IgG1, описанное в WO 2005/044859), 11 В8 IgG1 (описанное в WO 2004/035607) и АТ80 IgG1. Как правило, антитела к CD20 типа II изотипа IgG1 обладают характерными CDC-свойствами. Антитела к CD20 типа II обладают пониженной CDC (если относятся к изотипу IgG1) по сравнению с антителами типа I изотипа IgG1.
Примерами антител к CD20 типа I являются, например, ритуксимаб, HI47 IgG3 (ЕСАСС, гибридома), 2С6 IgG1 (описанное в WO 2005/103081), 2F2 IgG1 (описанное в WO 2004/035607 и WO 2005/103081) и 2Н7 IgG1 (описанное в WO 2004/056312).
Согласно одному из вариантов осуществления изобретения афукозилированные антитела к CD20, предлагаемые в изобретении, представляют собой антитело к CD20 типа II, а согласно другому варианту осуществления изобретения представляет собой афукозилированное гуманизированное антитело B-Ly1.
Афукозилированные антитела к CD20, предлагаемые в изобретении, обладают повышенной антитело-обусловленной клеточнозависимой цитотоксичностью (ADCC) по сравнению с антителами к CD20, у которых не снижено содержание фукозы.
К «афукозилированному антителу к CD20 с повышенной антитело-обусловленной клеточнозависимой цитотоксичностью (ADCC)» относится афукозилированное антитело к CD20, как оно определено в настоящем описании, обладающее повышенной ADCC по данным оценки с помощью любого приемлемого метода, известного обычному специалисту в данной области. Один из приемлемых методов анализа in vitro ADCC заключается в том, что:
1) в анализе используют клетки-мишени, для которых известно, что они экспрессируют антиген-мишень, распознаваемый антигенсвязывающей областью антитела;
2) в качестве эффекторных клеток в анализе используют мононуклеарные клетки периферической крови человека (РВМС), выделенные из крови произвольно выбранного здорового донора;
3) анализ осуществляют согласно следующему протоколу:
I) выделяют РВМС с помощью стандартных процессов центрифугирования в градиенте плотности и суспендируют из расчета 5*106 клеток/мл в RPMI-среде для культивирования клеток;
II) выращивают клетки-мишени с помощью стандартных методов культивирования тканей, собирают клетки на экспоненциальной фазе роста, жизнеспособность которых превышает 90%, отмывают в RPMI-среде для культивирования клеток, метят 51Сr (100 мкКи), отмывают дважды в среде для культивирования клеток и ресуспендируют в среде для культивирования клеток с плотностью 105 клеток/мл;
III) осуществляют трансфекцию, используя по 100 мкл указанной выше конечной суспензии клеток-мишеней на каждую лунку 96-луночного титрационного микропланшета;
IV) осуществляют серийное разведение антитела от 4000 до 0,04 нг/мл в среде для культивирования клеток и добавляют по 50 мкл образовавшихся растворов антитела к клеткам-мишеням в 96-луночном титрационном микропланшете, оценивают антитело в различных концентрациях, охватывающих весь диапазон указанных выше концентраций, в трех повторностях;
V) для контроля максимального высвобождения (MR) в 3 дополнительные лунки в планшете, содержащие меченые клетки-мишени, вносят по 50 мкл 2%-ного (VN) водного раствора неионогенного поверхностно-активного вещества (Nonidet, фирма Sigma, Сент-Луис) вместо раствора антитела (пункт IV, выше);
VI) для контроля спонтанного высвобождения (SR) в 3 дополнительные лунки в планшете, содержащие меченые клетки-мишени, вносят по 50 мкл RPMI-среды для культивирования клеток вместо раствора антитела (пункт IV, выше);
VII) затем 96-луночный титрационный микропланшет центрифугируют при 50 × g в течение 1 мин и инкубируют в течение 1 ч при 4°С;
VIII) добавляют по 50 мкл суспензии РВМС (пункт I, выше) в каждую лунку для обеспечения соотношения эффекторная клетка:клетка-мишень 25:1, и планшеты помещают в инкубатор в атмосферу, содержащую 5% СО2, на 4 ч при 37°С;
IX) собирают бесклеточный супернатант из каждой лунки и количественно оценивают высвободившуюся в эксперименте радиоактивность (ER) с помощью гамма-счетчика;
X) рассчитывают процент удельного лизиса для каждой концентрации антитела с помощью формулы (ER-MR)/(MR-SR) × 100, где ER представляет собой среднюю радиоактивность (см. пункт IX, выше), определенную для указанной концентрации антитела, MR представляет собой среднюю радиоактивность (см. пункт IX, выше), определенную для MR-контролей (см. пункт V, выше), a SR представляет собой среднюю радиоактивность (см. пункт IX, выше), определенную для SR-контролей (см. пункт VI, выше);
4) считают, что имеет место «повышенный уровень ADCC», если установлено: или повышение максимального процента удельного лизиса, обнаруженного в указанном выше диапазоне концентраций антитела, и/или снижение концентрации антитела, требуемой для достижения половины от максимального процента специфического лизиса, обнаруженного в указанном выше диапазоне концентраций антитела. Повышение уровня ADCC определяют относительно уровня ADCC, измеренного с помощью описанного выше анализа, опосредуемого таким же антителом, полученным с использованием такого же типа клеток-хозяев, с использованием таких же стандартных методов получения, приготовления форм и хранения, которые хорошо известны специалистам в данной области, но которое не получено с использованием клеток-хозяев, сконструированных так, что они сверхэкспрессируют GnTIII.
Указанную «повышенную (повышенный уровень) ADCC» можно получать с помощью модификации указанных антител методами гликоинженерии, что означает повышение встречающихся в естественных условиях опосредуемых клеткой эффекторных функций моноклональных антител путем конструирования их олигосахаридного компонента согласно методу, описанному у Umana, Р. и др., Nature Biotechnol. 17, 1999, cc. 176-180 и в US №6602684.
Понятие «комплементзависимая цитотоксичность (CDC)» относится к лизису человеческих опухолевых клеток-мишеней антителом, предлагаемым в изобретении, в присутствии комплемента. CDC предпочтительно оценивают путем обработки препарата экспрессирующих CD20 клеток антителом к CD20, предлагаемым в изобретении, в присутствии комплемента. Считается, что имеет место CDC, если антитело при его использовании в концентрации 100 нМ индуцирует лизис (гибель клеток) 20% или большего количества опухолевых клеток в течение 4 ч. Анализ предпочтительно осуществляют с помощью меченных 51Сr или Еu опухолевых клеток и оценивают высвобождение 51Сr или Еu. В качестве контроля опухолевые клетки-мишени инкубируют с комплементом без антитела.
Антитело «ритуксимаб» (референс-антитело; пример антитела к CD20 типа I) представляет собой созданное с помощью генетической инженерии химерное человеческое/мышиное содержащее человеческую гамма-1 константную область моноклональное антитело к человеческому антигену CD20. Химерное антитело содержит человеческие гамма-1 константные области и оно идентифицировано под названием «С2 В8» в US №5736137 (Anderson K.С.и др.), выданном 17 апреля 1998 г. на имя фирмы IDEC Pharmaceuticals Corporation. Ритуксимаб разрешен для лечения пациентов, страдающих рецидивирующей или рефрактерной, низкой степени злокачественности или фолликулярной, CD20-позитивной, В-клеточной неходжкинской лимфомой. Изучение механизма действия в опытах in vitro продемонстрировало, что ритуксимаб обладает зависимой от человеческого комплемента цитотоксичностью (CDC) (Reff М.Е. и др., Blood 83(2), 1994, сс.435-445). Кроме того, он обладает выраженной активностью в анализах по оценке антитело-обусловленной клеточнозависимой цитотоксичности (ADCC).
Ритуксимаб не является афукозилированным.
Понятие «гуманизированное антитело В-Ly1» относится к гуманизированному антителу B-Ly1, описанному в WO 2005/044859 и WO 2007/031875, которое получали из мышиного моноклонального антитела к CD20 B-Ly1 (вариабельная область мышиной тяжелой цепи (VH): SEQ ID NO: 28; вариабельная область мышиной легкой цепи (VL): SEQ ID NO: 29 (см. Poppema S. и Visser L., Biotest Bulletin 3, 1987, cc. 131-139) путем химеризации с использованием человеческой константной области из IgG1 и последующей гуманизации (см. WO 2005/044859 и WO 2007/031875). Эти «гуманизированные антитела В-Ly1» описаны подробно в WO 2005/044859 и WO 2007/031875.
Согласно одному из вариантов осуществления изобретения «гуманизированное антитело В-Ly1» имеет вариабельную область тяжелой цепи (VH), выбранную из SEQ ID NO: 30 - SEQ ID NO: 46 (B-HH2 - B-HH9 и B-HL8 -B-HL17, которые описаны в WO 2005/044859 и WO 2007/031875). В одном из конкретных вариантов осуществления изобретения указанный вариабельный домен выбирают из группы, состоящей из SEQ ID NO: 30, 31, 34, 36, 38, 40 и 42 (В-НН2, ВНН-3, В-НН6, В-НН8, B-HL8, B-HL11 и B-HL13 в WO 2005/044859 и WO 2007/031875). В предпочтительном варианте осуществления изобретения «гуманизированное антитело В-Ly1» имеет вариабельную область легкой (VL) SEQ ID NO: 47 (B-KV1 в WO 2005/044859 и WO 2007/031875). Согласно одному из конкретных вариантов осуществления изобретения «гуманизированное антитело В-Ly1» имеет вариабельную область тяжелой цепи (VH) SEQ ID NO: 34 (В-НН6 в WO 2005/044859 и WO 2007/031875), и имеет вариабельную область легкой цепи (VL) SEQ ID NO: 47 (B-KV1 в WO 2005/044859 и WO 2007/031875). Кроме того, в одном из вариантов осуществления изобретения гуманизированное антитело B-Ly1 предпочтительно представляет собой антитело изотипа IgG1. Указанные афукозилированные гуманизированные антитела B-Ly1, предлагаемые в изобретении, созданы с помощью гликоинженерии (GE) в Fc-области согласно методам, описанным в WO 2005/044859, WO 2004/065540, WO 2007/031875, у Umana Р. и др., Nature Biotechnol. 17, 1999, сс.176-180 и WO 99/154342. Согласно одному из вариантов осуществления изобретения афукозилированное созданное с помощью гликоинженерии гуманизированное антитело B-Ly1 представляет собой В-НН6-B-KV1 GE. В одном из вариантов осуществления изобретения антитело к CD20 представляет собой обинутузумаб (рекомендованное INN, WHO Drug Information, т.26, №4, 2012, с. 453). В контексте настоящего описания обинутузумаб является синонимом GA101 или RO5072759. Это название заменяет все предыдущие версии (например, т. 25, №1, 2011, с. 75-76), и предыдущее название афутузумаб (рекомендованное INN, WHO Drug Information, т. 23, №2, 2009, с. 176; т. 22, №2, 2008, с. 124).
Указанные созданные с помощью гликоинженерии гуманизированные антитела B-Ly1 имеют измененную схему гликозилирования в Fc-области, предпочтительно имеют пониженный уровень остатков фукозы. Согласно одному из вариантов осуществления изобретения содержание фукозы составляет 60% или менее от общего количества олигосахаридов на Asn297 (в одном из вариантов осуществления изобретения содержание фукозы составляет от 40% до 60%, в другом варианте осуществления изобретения содержание фукозы составляет 50% или менее и еще в одном варианте осуществления изобретения содержание фукозы составляет 30% или менее). Согласно другому варианту осуществления изобретения олигосахариды Fc-области предпочтительно являются бисекционными. Эти созданные с помощью гликоинженерии гуманизированные антитела B-Ly1 обладают повышенной ADCC.
«CD22» в контексте настоящего описания представляет собой имеющий молекулярную массу 135 кДа сиалогликопротеин, присутствие которого ограничено В-клетками, экспрессируемый на поверхности В-клеток только на зрелых стадиях дифференцировки (Dorken В. и др., J. Immunol. 136, 1986, сс. 4470-4479). Предоминантной формой CD22 является CD226eтa, который содержит семь доменов суперсемества иммуноглобулинов во внеклеточном домене (Wilson G.L. и др., J. Exp.Med. 173, 1991, сс.137-146). В вариантной форме, СD22-альфа, отсутствуют домены 3 и 4 суперсемейства иммуноглобулинов (Stamenkovic I. и Seed В., Nature 345, 1990, сс.74-77). Установлено, что связывание лигандов с человеческим CD22 ассоциировано с доменами 1 и 2 суперсемейства иммуноглобулинов (которые обозначают также как эпитопы 1 и 2) (Engel Р. и др., J. Exp.Med. 181, 1995, сс.1581-1586).
Понятие «антитело к CD22» относится к антителу, которое ингибирует CD22.
Одним из объектов изобретения является антитело, которое связывается с CD22, входящее в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, где антитело содержит по меньшей мере один, два, три, четыре, пять или шесть HVR, выбранных из:
(1) HVR-H1, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2;
(2) HVR-H2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4;
(3) HVR-H3, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6;
(4) HVR-L1, который содержит аминокислотную последовательность SEQ IDNO: 10;
(5) HVR-L2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ IDNO: 12; и
(6) HVR-L3, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14.
Согласно другому объекту изобретения антитело, которое связывается с CD22, входящее в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, содержит (a) HVR-L1, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, и (б) по меньшей мере один, два, три, четыре или пять HVR, выбранных из:
(1) HVR-H1, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2;
(2) HVR-H2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4;
(3) HVR-H3, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6;
(4) HVR-L2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ IDNO: 12; и
(5) HVR-L3, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14.
Согласно другому объекту изобретения антитело, которое связывается с CD22, входящее в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, содержит (a) HVR-L1, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9, и (б) по меньшей мере один, два, три, четыре или пять HVR, выбранных из:
(1) HVR-H1, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2;
(2) HVR-H2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4;
(3) HVR-L1, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9;
(4) HVR-L2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; и
(5) HVR-L3, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14.
Согласно другому объекту изобретения антитело, которое связывается с CD22, входящее в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, содержит (а) HVR-H3, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, и (б) по меньшей мере один, два, три, четыре или пять HVR, выбранных из:
(1) HVR-H1, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2;
(2) HVR-H2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4;
(3) HVR-H3, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9;
(4) HVR-L2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; и
(5) HVR-L3, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID N0:14.
Согласно другому объекту изобретения антитело, которое связывается с CD22, входящее в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, содержит (а) HVR-H3, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 6, и (б) по меньшей мере один, два, три, четыре или пять HVR, выбранных из:
(1) HVR-H1, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2;
(2) HVR-H2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4;
(3) HVR-L1, который содержит аминокислотную последовательность SEQ IDNO: 10;
(4) HVR-L2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ IDNO: 12; и
(5) HVR-L3, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14.
В одном из вариантов осуществления изобретения антитело содержит HVR-L1, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10. В одном из вариантов осуществления изобретения антитело содержит также HVR-Н1, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и HVR-H2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4. В одном из вариантов осуществления изобретения антитело содержит также HVR-L2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ NO: 12, и HVR-L3, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14.
В некоторых вариантах осуществления изобретения любое из указанных выше антител содержит дополнительно по меньшей мере один каркасный участок, выбранный из консенсусного каркасного участка VH подгруппы III и консенсусного каркасного участка VL подгруппы I.
Одним из объектов изобретения является антитело, которое связывается с CD22, входящее в указанный конъюгат антитело-лекарственное средства, где антитело содержит вариабельный домен тяжелой цепи, последовательность которого по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 16. В одном из вариантов осуществления изобретения антитело содержит последовательность вариабельного домена тяжелой цепи SEQ ID NO: 16.
В одном из вариантов осуществления изобретения антитело содержит дополнительно вариабельный домен легкой цепи, последовательность которого по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 17. В одном из вариантов осуществления изобретения антитело содержит последовательность вариабельного домена легкой цепи SEQ ID NO: 17.
В одном из вариантов осуществления изобретения антитело содержит дополнительно вариабельный домен легкой цепи, последовательность которого по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID N0:18.
В одном из вариантов осуществления изобретения антитело содержит последовательность вариабельного домена легкой цепи SEQ ID NO: 18.
В одном из вариантов осуществления изобретения антитело содержит вариабельный домен тяжелой цепи, последовательность которого по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% или на 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 16, и вариабельный домен легкой цепи, последовательность которого по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% или на 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 17. В одном из вариантов осуществления изобретения антитело содержит вариабельный домен тяжелой цепи, последовательность которого по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% или на 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 16, и вариабельный домен легкой цепи, последовательность которого по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% или на 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 18. В одном из вариантов осуществления изобретения антитело содержит последовательность вариабельного домена тяжелой цепи SEQ ID NO: 16 и вариабельного домена легкой цепи SEQ ID NO: 17. В одном из вариантов осуществления изобретения антитело содержит последовательность вариабельного домена тяжелой цепи SEQ ID NO: 16 и вариабельного домена легкой цепи SEQ ID NO: 18.
Одним из объектов изобретения является антитело к CD22, которое содержит (а) один, два или три HVR VH, выбранных из представленных на фиг. 2А, и/или (б) один, два или три HVR VL, выбранных из указанных на фиг. 2Б. Одним из объектов изобретения является антитело к CD22, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, выбранный из представленных на фиг. 2А, и вариабельный домен легкой цепи, выбранный из представленных на фиг. 2Б.
В некоторых вариантах осуществления изобретения предложен полинуклеотид, кодирующий любое из указанных выше антител. Одним из объектов изобретения является вектор, содержащий полинуклеотид. Одним из объектов изобретения является клетка-хозяин, содержащая вектор. В одном из вариантов осуществления изобретения клетка-хозяин представляет собой эукариотическую клетку. В одном из вариантов осуществления изобретения клетка-хозяин представляет собой клетку яичника китайского хомячка (СНО). Одним из вариантов осуществления изобретения является способ получения антитела к CD22, заключающийся в том, что культивируют клетку-хозяина в условиях, пригодных для экспрессии полинуклеотида, который кодирует антитело, и выделяют антитело.
Одним из объектов изобретения является антитело, которое связывается с CD22, экспрессируемым на клеточной поверхности, которое входит в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении. В одном из вариантов осуществления изобретения антитело связывается с эпитопом в области человеческого или мышиного CD22, которая содержит домен 1 или домен 2, или домены 1 и 2. В одном из вариантов осуществления изобретения клетка представляет собой клетку млекопитающего. В одном из вариантов осуществления изобретения клетка представляет собой человеческую клетку. В одном из вариантов осуществления изобретения клетка представляет собой раковую клетку. В одном из вариантов осуществления изобретения клетка представляет собой В-клетку. В одном из вариантов осуществления изобретения раковая клетка представляет собой В-клетку.
В некоторых вариантах осуществления изобретения любое из указанных выше антител представляет собой моноклональное антитело. В одном из вариантов осуществления изобретения антитело представляет собой фрагмент антитела, выбранный из Fab-, Fab'-SH-, Fv-, scFv- или (Раb')2-фрагмента. В одном из вариантов осуществления изобретения антитело является гуманизированным. В одном из вариантов осуществления изобретения антитело является человеческим.
Согласно одному из объектов изобретения антитела, предлагаемые в изобретении, включают сконструированные с помощью цистеина антитела, в которых одна или несколько аминокислот родительского антитела заменена(ы) на цистеин в виде свободной аминокислоты, описанные в WO 2006/034488 (которая полностью включена в настоящее описание в качестве ссылки). Таким образом, можно подвергать инженерии, т.е. изменять посредством мутации, любую форму антитела к CD22. Например, Fab-фрагмент родительского антитела можно подвергать инженерии с получением сконструированного с помощью цистеина Fab, обозначенного в контексте настоящего описания как «тиoFab». Аналогично этому, можно подвергать инженерии родительское моноклональное антитело с получением «тиоМАт». Следует отметить, что один сайт мутации в тиоFab позволяет встраивать посредством инженерии один остаток цистеина, в то время как один сайт мутации в тиоМАт позволяет встраивать посредством инженерии два остатка цистеина из-за димерной природы антитела в виде IgG. Сконструированные с помощью цистеина антитела к CD22, предлагаемые в изобретении, включают моноклональные антитела, гуманизированные или химерные моноклональные антитела и антигенсвязывающие фрагменты антител, слитые полипептиды и аналоги, которые, прежде всего, связываются с ассоциированными с клетками полипептидами CD22. Альтернативно этому, созданное с помощью цистеина антитело может представлять собой антитело, которое содержит цистеин в положении, указанном в настоящем описании, в антителе или Fab, полученном в результате конструирования последовательности и/или селекции антитела, без необходимости в изменении родительского антитела, например, с помощью создания и селекции антител методом фагового дисплея или путем создания de novo последовательностей каркасных участков легкой цепи и/или тяжелой цепи и константных областей. Созданное с помощью цистеина антитело содержит один или большее количество остатков цистеина в виде свободной аминокислоты, имеющих значение тиольной реакционноспособности, составляющее от 0,6 до 1,0; от 0,7 до 1,0 или от 0,8 до 1,0. Цистеин в виде свободной аминокислоты представляет собой остаток цистеина, который создан (встроен) в родительском антителе и не является частью дисульфидного мостика. Сконструированные с помощью цистеина антитела можно применять для присоединения цитотоксических и/или визуализирующих соединений в сайт встроенного с помощью инженерии цистеина, например, через малеимид или галоацетил. Нуклеофильная реакционная способность тиольной функциональности остатка Cys в отношении малеимидной группы приблизительно в 1000 раз выше по сравнению с функциональностью любой другой аминокислоты в белке, например, аминогруппы остатков лизина или N-концевой аминогруппы. Тиолспецифическая функциональность в йодоацетильных и малеимидных реагентах может вступать в реакцию с аминогруппами, но для этого требуется более высокое значение рН (>9,0) и более продолжительное время реакции (Garman, Non-Radioactive Labelling: А Practical Approach, изд-во Academic Press, London, 1997).
В одном из вариантов осуществления изобретения сконструированное с помощью цистеина антитело к CD22, входящее в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, содержит встроенный с помощью инженерии цистеин в любом одном из следующих положений, где положение в легкой цепи имеет номер, определенный согласно номенклатуре Кэбота с соавторами (см. Kabat и др., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5-ое изд., изд-во Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD, 1991), а положение в тяжелой цепи (включая Fc-область) имеет номер, определенный согласно EU-нумерации (см. Kabat и др., 1991, выше), где константная область легкой цепи начинается с положения 108 (нумерация по Кэботу) и константная область тяжелой цепи начинается с положения 118 (EU-нумерация). Положение можно обозначать также по положению в последовательно пронумерованных аминокислотах полноразмерной легкой цепи или тяжелой цепи. Согласно одному из вариантов осуществления изобретения антитело к CD22, входящее в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, содержит встроенный с помощью инженерии цистеин в LC-V205C (номер по Кэботу: Val 205; а последующее положение, сконструированное так, чтобы в этом положении находился Cys, имеет номер 210,). Согласно одному из вариантов осуществления изобретения антитело к CD22 содержит встроенный с помощью инженерии цистеин в HCA118C (EU-номер: Ala 118; а последующее положение, сконструированное так, чтобы в этом положении находился Cys, имеет номер 121). Согласно одному из вариантов осуществления изобретения антитело к CD22 содержит встроенный с помощью инженерии цистеин в Fc-S400C (EU-номер: Ser 400; а последующее положение, сконструированное так, чтобы в этом положении находился Cys, имеет номер 403) В других вариантах осуществления изобретения встроенный с помощью инженерии цистеин тяжелой цепи (включая Fc-область) находится в любом одном из следующих положений (согласно EU-нумерации): 41, 88, 116, 118, 120, 171, 282, 375 или 400. Таким образом, аминокислотные замены в этих положениях родительского антитела к CD22, предлагаемого в изобретении, представляют собой: А41С, А88С, S116C, А118С, Т120С, А171С, V282C, S375C или S400C. В других вариантах осуществления изобретения встроенный с помощью инженерии цистеин легкой цепи находится в любом одном из следующих положений (нумерация согласно Кэботу): 15, 43, 110, 144, 168, 205. Таким образом, аминокислотные замены в этих положениях родительского антитела к CD22, предлагаемые в изобретении, представляют собой: V15C, А43С, VI ЮС, А144С, S168C или V205C.
Сконструированное с помощью цистеина антитело к CD22 в указанном конъюгате антитело-лекарственное средство, предлагаемом в изобретении, содержит один или несколько цистеинов в виде свободной аминокислоты, где сконструированное с помощью цистеина антитело к CD22 связывается с полипептидом CD22 и его получают с помощью способа, заключающегося в том, что заменяют один или несколько аминокислотных остатков родительского антитела к CD22 на цистеин, где родительское антитело содержит по меньшей мере одну последовательность HVR, выбранную из:
Конкретными объектами изобретения является сконструированное с помощью цистеина антитело к CD22 в указанном конъюгате антитело-лекарственное средство, предлагаемом в изобретении, которое содержит аминокислотную последовательность, идентичную по меньшей мере примерно на 80% аминокислотной последовательности, в альтернативном варианте идентичную по меньшей мере примерно на 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% аминокислотной последовательности сконструированного с помощью цистеина антитела, которое имеет полноразмерную аминокислотную последовательность, представленную в настоящем описании, или аминокислотной последовательности сконструированного с помощью цистеина антитела, представленного в настоящем описании, лишенной сигнального пептида.
Следующим объектом изобретения является выделенное сконструированное с помощью цистеина антитело к CD22 в указанном конъюгате антитело-лекарственное средство, предлагаемом в изобретении, содержащее аминокислотную последовательность, которая кодируется нуклеотидной последовательностью, гибридизующейся с комплементом молекулы ДНК, которая кодирует (а) сконструированное с помощью цистеина антитело, имеющее полноразмерную аминокислотную последовательность, указанную в настоящем описании, (б) аминокислотную последовательность сконструированного с помощью цистеина антитела, лишенную сигнальную пептида, указанную в настоящем описании, (в) внеклеточный домен трансмембранного белка сконструированного с помощью цистеина антитела с сигнальным пептидом, указанным в настоящем описании, или без него, (г) аминокислотную последовательность, которая кодируется любой из нуклеотидных последовательностей, указанных в настоящем описании, или (д) любой другой специально определенный фрагмент полноразмерной аминокислотной последовательности сконструированного с помощью цистеина антитела, указанного в настоящем описании.
Конкретным объектом изобретения является выделенное сконструированное с помощью цистеина антитело к CD22 в указанном конъюгате антитело-лекарственное средство, предлагаемом в изобретении, без N-концевой сигнальной последовательности и/или без инициирующего метионина и кодируемое нуклеотидной последовательностью, которая кодирует указанную аминокислотную последовательность, представленную в настоящем описании. В настоящем описании представлен также способы их получения, где указанные способы заключаются в том, что культивируют клетку-хозяина, содержащую вектор, который содержит соответствующую молекулу кодирующей нуклеиновой кислоты, в условиях, пригодных для экспрессии сконструированного с помощью цистеина антитела, и выделяют сконструированное с помощью цистеина антитело из клеточной культуры.
Другим объектом изобретения является выделенное сконструированное с помощью цистеина антитело к CD22 в указанном конъюгате антитело-лекарственное средство, предлагаемом в изобретении, в котором либо удален трансмембранный домен, либо инактивирован трансмембранный домен. В настоящем описании представлены также способы его получения, где указанные способы заключаются в том, что культивируют клетку-хозяина, содержащую вектор, который содержит соответствующую молекулу кодирующей нуклеиновой кислоты, в условиях, пригодных для экспрессии сконструированного с помощью цистеина антитела, и выделяют сконструированное с помощью цистеина антитело из клеточной культуры.
Другими вариантами осуществления изобретения являются выделенные химерные сконструированные с помощью цистеина антитела к CD22 в указанном конъюгате антитело-лекарственное средство, предлагаемом в изобретении, который содержит любое указанное в настоящем описании сконструированное с помощью цистеина антитело, слитое с гетерологичным (не представляющим собой CD22) полипептидом. Приведенные в качестве примера указанные химерные молекулы содержат любое из указанных в настоящем описании сконструированных с помощью цистеина антител, слитое с гетерологичным полипептидом, таким, например, как последовательность эпитопа-метки или Fc-область иммуноглобулина.
Сконструированное с помощью цистеина антитело к CD22 в указанном конъюгате антитело-лекарственное средство, предлагаемом в изобретении, может представлять собой моноклональное антитело, фрагмент антитела, химерное антитело, гуманизированное антитело, одноцепочечное антитело или антитело, которое конкурентно ингибирует связывание полипептида антитела к CD22 с соответствующим эпитопом антигена. Антитела, предлагаемые в настоящем изобретении, необязательно можно конъюгировать с ингибирующим рост агентом или цитотоксическим агентом, таким как токсин, включая, например, ауристатин, антибиотик, радиоактивный изотоп, нуклеолитический фермент или т.п. Антитела, предлагаемые в настоящем изобретении, необязательно можно получать в СНО-клетках или бактериальных клетках, и они предпочтительно ингибируют рост или пролиферацию или индуцируют гибель клетки, с которой они связаны. Для диагностических целей антитела, предлагаемые в настоящем изобретении, можно метить выявляемой меткой, присоединять к твердой подложке или т.п.
Другими вариантами осуществления настоящего изобретения являются векторы, содержащие ДНК, которая кодирует любое из представленных в настоящем описании антител к CD22, входящее в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, и сконструированные с помощью цистеина антитела к CD22, входящие в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении. Предложены также клетки-хозяева, содержащие любой указанный вектор. Например, клетки-хозяева могут представлять собой СНО-клетки, клетки Е. coli или клетки дрожжей.
Предложен также способ получения любого из представленных в настоящем описании полипептидов, заключающийся в том, что культивируют клетки-хозяева в условиях, пригодных для экспрессии требуемого полипептида, и выделяют требуемый полипептид из клеточной культуры.
Сконструированные с помощью цистеина антитела могут найти применение для лечения рака, и они включают антитела, специфические в отношении находящихся на клеточной поверхности и трансмембранных рецепторов и ассоциированных с опухолями антигенов (ТАА). Указанные антитела можно применять в виде «оголенных» антител (не конъюгированных с лекарственным средством или применяемым в качестве метки фрагментом) или в виде конъюгатов антитело-лекарственное средство (ADC). Сконструированные с помощью цистеина антитела, предлагаемые в изобретении, могут быть сайтспецифическими и могут быть эффективно сшиты с вступающим во взаимодействие с тиолом реагентом. Вступающий во взаимодействие с тиолом реагент может представлять собой многофункциональный линкерный реагент, захватывающий метку реагент, флуорофор или промежуточный продукт лекарственное средство-линкер. Сконструированное с помощью цистеина антитело можно метить выявляемой меткой, иммобилизовать на твердой подложке и/или конъюгировать с фрагментом, представляющим собой лекарственное средство. Тиольную реакционную способность можно придавать любому антителу путем замены аминокислот на реакционноспособную аминокислоту цистеин в положениях в легкой цепи, выбранных из следующего диапазона аминокислотных положений: L-10 - L-20; L-38 - L-48; L-105 - L-115; L-139 - L-149; L-163 - L-173; и в положениях тяжелой цепи, выбранных из следующего диапазона аминокислотных положений: Н-35 - Н-45; Н-83 - Н-93; Н-114 - Н-127 и Н-170 - Н-184, и в Fc-области в положениях тяжелой цепи, выбранных из следующего диапазона положений: Н-268 - Н-291; Н-319 - Н-344; Н-370 - Н-380 и Н-395 - Н-405, где нумерация аминокислотных положений начинается с положения 1 согласно системе нумерации Кэбота (Kabat и др., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5-ое изд., из-во Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD, 1991) и последовательно продолжается за этим положением, как описано в WO 2006/034488. Тиольную реакционную способность можно придавать также определенным доменам антитела, таким как константный домен легкой цепи (CL) и константные домены тяжелой цепи, CH1, СН2 и СН3. Замены на цистеин, обеспечивающие значение тиольной реакционноспособности, составляющее 0,6 и выше, можно осуществлять в константных доменах тяжелой цепи α, δ, ε, γ и μ интактных антител: IgA, IgD, IgE, IgG и IgM соответственно, включая подклассы IgG: IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA и IgA2. Указанные антитела и их применения описаны в WO 2006/034488.
Сконструированные с помощью цистеина антитела, предлагаемые в изобретении, предпочтительно сохраняют антигенсвязывающую способность, присущую антителам дикого типа, т.е. их копий, представляющих собой родительское антитело. Так, сконструированные с помощью цистеина антитела обладают способностью связываться, предпочтительно специфически, с антигенами. Указанные антигены включают, например, ассоциированные с опухолями антигены (ТАА), белки рецепторов клеточной поверхности и другие молекулы клеточной поверхности, трансмембранные белки, сигнальные белки, факторы, регулирующие выживание клеток, факторы, регулирующую клеточную пролиферацию, молекулы, ассоциированные с развитием или дифференцировкой тканей (например, для которых известно или ожидается, что они принимают функциональное участие в этих процессах), лимфокины, цитокины, молекулы, участвующие в регуляции клеточного цикла, молекулы, участвующие в васкулогенезе, и молекулы, ассоциированные с ангиогенезом (например, для которых известно или ожидается, что они принимают функциональное участие в ангиогенезе). Ассоциированный с опухолью антиген может представлять собой фактор дифференцировочного кластера (т.е. CD-белок, включая (но, не ограничиваясь только им) CD22). Сконструированные с помощью цистеина антитела к CD22, предлагаемые в изобретении, сохраняют антигенсвязывающую способность их родительского антитела к CD22. Так, сконструированные с помощью цистеина антитела, предлагаемые в изобретении, обладают способностью связываться, предпочтительно специфически, с антигенами CD22, включая изоформы бета и/или альфа человеческого CD22, в том числе, в случае, когда указанные антигены экспрессируются на поверхности клеток, в том числе (но, не ограничиваясь только ими) В-клеток.
Ниже представлено подробное описание приведенных в качестве примеров антител к CD22 в виде компонента конъюгата антитело-лекарственное средство, предлагаемого в изобретении, в комбинации с антителом к CD20:
Конкретные варианты антител к CD22
Одним из объектов изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит по меньшей мере один, два, три, четыре, пять или шесть HVR, выбранных из: (a) HVR-H1, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2; (б) HVR-H2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4; (в) HVR-H3, который содержит аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 6; (г) HVR-L1, который содержит аминокислотную последовательность, выбранную из любой из SEQ ID NO: 9, 10, 19, 20, 21, 22, 23; (д) HVR-L2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; и (е) HVR-L3, который содержит аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 14.
Одним из объектов изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит по меньшей мере один, по меньшей мере два или все три HVR-последовательности VH, выбранные из (a) HVR-H1, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2; (б) HVR-H2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4; (в) HVR-H3, который содержит аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 6. Одним из объектов изобретения является антитело к CD22, входящее в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит HVR-H1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2. Одним из объектов изобретения является антитело к CD22, входящее в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит HVR-H2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4. Одним из объектов изобретения является антитело к CD22, входящее в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит HVR-H3, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 6.
Одним из объектов изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит HVR-H3, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 6, и HVR-H1, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 2.
Одним из объектов изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит HVR-H3, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 6, и HVR-H1, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 4.
Одним из объектов изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит HVR-H1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и HVR-H2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4.
Одним из объектов изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит HVR-H1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2; HVR-H2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4 и HVR-H3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:6.
Одним из объектов изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит по меньшей мере один, по меньшей мере два или все три HVR-последовательности VL, выбранные из: (a) HVR-L1, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9 или SEQ ID NO: 10; (б) HVR-L2, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; и (в) HVR-L3, который содержит аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 14. Одним из объектов изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, содержащим HVR-L1, который содержит аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 9. Одним из объектов изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, содержащим HVR-L1, который содержит аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 10. Одним из объектов изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 19-23. В одном из объектов изобретения HVR-L1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9, в которой N28 заменена на V (аминокислотная замена N28V, приводящая к получению SEQ ID NO: 10). В одном из объектов изобретения HVR-L1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9, в которой N28 заменен на А (аминокислотная замена N28А, приводящая к получению SEQ ID NO: 19). В одном из объектов изобретения HVR-L1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9, в которой N28 заменен на Q (аминокислотная замена N28Q, приводящая к получению SEQ ID NO: 20). В одном из объектов изобретения HVR-L1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9, в которой N28 заменен на S (аминокислотная замена N28S, приводящая к получению SEQ ID NO: 21). В одном из объектов изобретения HVR-L1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9, в которой N28 заменен на D (аминокислотная замена N28D, приводящая к получению SEQ ID NO: 22). В одном из объектов изобретения HVR-L1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9, в которой N28 заменен на I (аминокислотная замена N28I, приводящая к получению SEQ ID NO: 23). Одним из объектов изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит HVR-L1, содержащий любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 9, 10, 19, 20, 21, 22, 23. В одном из объектов изобретения HVR-L1 имеет любую из SEQ ID NO: 9, 10, 19, 20, 21, 22 или 23, и аминокислота в положении N30 (аспарагин в положении 30) заменена на А (аминокислотная замена N30A). В одном из объектов изобретения HVR-L1 имеет любую из SEQ ID NO: 9, 10, 19, 20, 21, 22 или 23, и аминокислота в положении N30 (аспарагин в положении 30) заменена на Q (аминокислотная замена N30Q).
Одним из объектов изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит (а) HVR-H3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, и (б) HVR-L3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14. В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к CD22, входящее в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, дополнительно содержит (a) HVR-H1, содержащий SEQ ID NO: 2, и HVR-H2, содержащий SEQ ID NO: 4.
Одним из объектов изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит (а) HVR-H3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, и (б) HVR-L2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12. В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к CD22, входящее в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, дополнительно содержит (a) HVR-H1, содержащий SEQ ID NO: 2, и HVR-H2, содержащий SEQ ID NO: 4.
Одним из объектов изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит (а) HVR-H3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, и (б) HVR-L1, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 9, 10, 19, 20, 21, 22 и 23. В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к CD22 дополнительно содержит (a) HVR-H1, содержащий SEQ ID NO: 2, и HVR-H2, содержащий SEQ ID NO: 4. В некоторых вариантах осуществления изобретения аминокислотная последовательность SEQ ID NO: 9, 10, 19, 20, 21, 22 или 23 содержит аминокислотную замену N30A или N30Q. В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к CD22, входящее в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретения, содержит дополнительно HVR-L2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12. В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к CD22, входящее в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретения, содержит дополнительно HVR-L3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14.
Одним из объектов изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит (a) HVR-H1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2; (б) HVR-H2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4; (в) HVR-H3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6; (г) HVR-L1, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из: SEQ ID NO: 9, 10, 19, 20, 21, 22, 23; (д) HVR-L2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; и HVR-L3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14. Кроме того, в некоторых вариантах осуществления изобретения аминокислотная последовательность SEQ ID NO: 9, 10, 19, 20, 21, 22 или 23, выбранная в качестве HVR-L1, является модифицированной с помощью аминокислотной замены N30A или N30Q.
Одним из объектов изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит вариабельный домен тяжелой, содержащий SEQ ID NO: 16 (см. фиг. 2А, h10F4v1). Одним из объектов изобретения является антитело к CD22, входящее в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит вариабельный домен легкой цепи, содержащий SEQ ID NO: 17 (см. фиг. 2Б, h10F4v1). Одним из объектов изобретения является антитело к CD22, входящее в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит вариабельный домен легкой цепи, содержащий SEQ ID NO: 18 (см. Фиг. 2B, h10F4v3).
Одним из объектов изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит тяжелую цепь, содержащую SEQ ID NO: 26 (см. фиг. 2А, m10F4). Одним из объектов изобретения является антитело к CD22, входящее в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит легкую цепь, содержащую SEQ ID NO: 27 (см. фиг. 2Б, m10F4).
Одним из объектов изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит 1, 2, 3, 4, 5 или 6 HVR-последовательностей антитела 10F4.4.1, полученного с помощью гибридомы, которая депонирована в АТСС и имеет регистрационный номер РТА-7621.
Одним из объектов изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит 1, 2, 3, 4, 5 или 6 HVR-последовательностей антитела 5Е8.1.8 полученного с помощью гибридомы, которая депонирована в АТСС и имеет регистрационный номер РТА-7620.
Антитело к CD22 в указанном конъюгате антитело-лекарственное средство, предлагаемом в изобретении, которое предназначено для объединения с антителом к CD20, указанном в настоящем описании, может содержать последовательность любого приемлемого каркасного участка вариабельного домена при условии, что антитело сохраняет способность связываться с CD22. Например, в некоторых вариантах осуществления изобретения антитела к CD22 в указанном конъюгате антитело-лекарственное средство, предлагаемом в изобретении, содержит консенсусную последовательность каркасного участка тяжелой цепи человеческой подгруппы III. В одном из вариантов указанных антител консенсусная последовательность каркасного участка тяжелой цепи несет замену(ы) в положении(ях) 71, 73 и/или 78. В одном из вариантов указанных антител положение 71 соответствует А, положение 73 соответствует Т и/или положение 78 соответствует А. В одном из вариантов осуществления изобретения указанные антитела содержат последовательность каркасного участка вариабельного домена тяжелой цепи антитела huMAb4D5-8, например, SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7 (FR-H1, FR-H2, FR-H3, FR-H4 соответственно). huMAb4D5-8 представляет собой известное антитело к HER2, поступающее в продажу под названием HERCEPTIN® фирмы Genentech, Inc., Южный Сан-Франциско, шт. Калифорния, США; упомянутое также в US №№6407213 и 5821337 и у Lee и др., J. Mol. Biol., 340(5), 2004, сс.1073-1093. В одном из указанных вариантов осуществления изобретения указанные антитела содержат, кроме того, консенсусную последовательность каркасного участка человеческой легкой κI-цепи. В одном из указанных вариантах осуществления изобретения указанные антитела содержат последовательность каркасного участка вариабельного домена легкой цепи антитела huMAb4D5-8, например, SEQ ID NO: 8, 11, 13, 15 (FR-L1, FR-L2, FR-L3, FR-L4 соответственно).
В одном из вариантов осуществления изобретения антитело к CD22 в указанном конъюгате антитело-лекарственное средство, предлагаемом в изобретении, которое предназначено для объединения с антителом к CD20, указанном в настоящем описании, содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий каркасную последовательность и гипервариабельные области, в котором каркасная последовательность содержит последовательности FR-H1-FR-Н4 SEQ ID NO:l, 3, 5 и 7 соответственно; HVR-H1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2; HVR-H2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:4 и HVR-H3 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 6. В одном из вариантов осуществления изобретения антитело к CD22 содержит вариабельный домен легкой цепи, содержащий каркасную последовательность и гипервариабельные участки, в котором каркасная последовательность содержит последовательности FR-L1-FR-L4 SEQ ID NO: 8, 11, 13 и 15 соответственно; HVR-L1 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 9, 10, 19, 20, 21, 22 и 23, где любая из SEQ ID NO: 9-10 или 19-23 может содержать аминокислотную замену N30А или N30Q; HVR-L2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12 и HVR-L3 содержит аминокислотную последовательность выбранную из SEQ ID NO: 14. В одном из вариантов указанных антител вариабельный домен тяжелой цепи содержит SEQ ID NO: 16 и вариабельный домен легкой цепи содержит SEQ ID NO: 17 или 18.
Некоторыми вариантами осуществления изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, последовательность которой по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 16. В некоторых вариантах осуществления изобретения аминокислотная последовательность, идентичная по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99%, содержит замены, инсерции или делеции относительно референс-последовательности, но антитело, которое содержит указанную аминокислотную последовательность, сохраняет способность связываться с CD22. В некоторых вариантах осуществления изобретения в целом от 1 до 10 аминокислот заменено, встроено или удалено путем делеции в SEQ ID NO: 16. В некоторых вариантах осуществления изобретения замены, инсерции или делеции затрагивают области вне HVR (т.е. затрагивают FR). В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к CD22 в указанном конъюгате антитело-лекарственное средство, предлагаемом в изобретении, которое предназначено для объединения с антителом к CD20, указанном в настоящем описании, содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 16.
Некоторыми вариантами осуществления изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, представленный ниже.
В некоторых вариантах осуществления изобретения последовательности HVR и FR тяжелой цепи содержат следующие последовательности:
Некоторыми вариантами осуществления изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит вариабельный домен легкой цепи, представленный ниже.
В некоторых вариантах осуществления изобретения последовательности HVR легкой цепи содержат следующие последовательности:
В некоторых вариантах осуществления изобретения последовательности FR легкой цепи содержат следующие последовательности:
Одним из объектов изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 17 или 18. В некоторых вариантах осуществления изобретения аминокислотная последовательность, идентичная по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99%, содержит замены, инсерции или делеции относительно референс-последовательности, но антитело, которое содержит указанную аминокислотную последовательность, сохраняет способность связываться с CD22. В некоторых вариантах осуществления изобретения в целом от 1 до 10 аминокислот заменено, встроено или удалено путем делеции в последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 17 или 18. В некоторых вариантах осуществления изобретения замены, инсерции или делеции затрагивают области вне HVR (т.е. затрагивают FR). В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к CD22 в указанном конъюгате антитело-лекарственное средство, предлагаемом в изобретении, предназначенное для объединения с антителом к CD20, указанном в настоящем описании, содержит вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 17 или 18.
Одним из объектов изобретения является комбинация антитела к CD20, указанного в настоящем описании, с антителом к CD22, входящим в указанный конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, которое содержит (а) вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, которая идентична по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% аминокислотной последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 16; и (б) вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, которая идентична по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% аминокислотной последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 17 или 18. В некоторых вариантах осуществления изобретения аминокислотная последовательность, идентичная по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99%, содержит замены, инсерции или делении относительно референс-последовательности, но антитело, которое содержит указанную аминокислотную последовательность, сохраняет способность связываться с CD22. В некоторых вариантах осуществления изобретения в целом от 1 до 10 аминокислот заменено, встроено или удалено путем делеции в последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 17 или 18. В некоторых вариантах осуществления изобретения замены, инсерции или делеции затрагивают области вне HVR (т.е. затрагивают FR). В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к CD22 в указанном конъюгате антитело-лекарственное средство, предлагаемом в изобретении, предназначенное для объединения с антителом к CD20, указанном в настоящем описании, содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 18.
В одном из объектов изобретения антитело к CD22 в указанном конъюгате антитело-лекарственное средство, предлагаемое в изобретении, содержит 1, 2, 3, 4, 5 или 6 гипервариабельных участков антитела 5Е8.1.8, полученного с помощью гибридомы, которая депонирована в АТСС и имеет регистрационный № РТА-7620.
Фрагменты антител
Под объем настоящего изобретения подпадают фрагменты антител. Фрагменты антител можно создавать традиционными методами, такими как ферментативное расщепление, или методами рекомбинации. В некоторых ситуациях применение ферментов антител обладает преимуществами по сравнению с применением полных антител. Меньший размер фрагментов обусловливает их быстрый клиренс и может облегчать их доступ к солидным опухолям. Обзор некоторых фрагментов антител см. у Hudson и др., Nat. Med. 9, 2003, cc. 129-134.
Для получения фрагментов антител разработаны различные методики. Традиционно эти фрагменты получали с помощью протеолитического расщепления интактных антител (см., например, Morimoto и др., Journal of Biochemical and Biophysical Methods 24, 1992, cc. 107-117 и Brennan и др., Science, 229, 1985, с. 81). Однако в настоящее время такие фрагменты можно получать непосредственно с помощью рекомбинантных клеток-хозяев. Fab-, Fv- и ScFv-фрагменты антител все можно экспрессировать в Е. coli и секретировать из указанных клеток, что облегчает производство указанных фрагментов в больших количествах. Фрагменты антител можно выделять из фаговых библиотек антител, описанных выше. Альтернативно этому, Fab'-SH-фрагменты можно непосредственно выделять из Е. coli и химически сшивать с получением F(аb')2-фрагментов (Carter и др., Bio/Technology 10, 1992, сс. 163-167). Согласно другому подходу F(аb')2-фрагменты можно выделять непосредственно из культуры рекомбинантных клеток-хозяев. Fab- и F(аb')2-фрагменты с удлиненным временем полужизни in vivo, которые содержат остатки эпитопа, связывающегося с рецептором спасения, описаны в US №5869046. Другие методики получения фрагментов антител должны быть очевидны практикующему специалисту в данной области. В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело представляет собой одноцепочечный Fv-фрагмент (scFv) (см. WO 93/16185; US №№5571894 и 5587458). К Fv и scFv относятся только фрагменты с интактными антигенсвязывающими центрами, лишенные константных областей; по этой причине их можно применять для снижения неспецифического связывания при применении in vivo. Слитые белки scFv можно конструировать для создания слияния эффекторного белка либо на амино-, либо на карбоксиконце scFv (см. Antibody Engineering, под ред. Borrebaeck, выше). Фрагмент антитела может представлять собой также «линейное антитело», например, описанное, например, в US №5641870. Указанные линейные антитела могут быть моноспецифическими или биспецифическими.
Гуманизированные антитела
Под объем изобретения подпадают также гуманизированные антитела. В данной области известны различные методы гуманизации нечеловеческих антител. Например, гуманизированное антитело может иметь один или несколько встроенных в него аминокислотных остатков, полученных из источника, отличного от антитела человека. Эти полученные из источника, отличного от антитела человека, аминокислотные остатки часто называют «импортными» остатками, поскольку их обычно получают из «импортного» вариабельного домена. Гуманизацию в целом можно осуществлять согласно методу Winter с соавторами (Jones и др., Nature, 321, 1986, сс. 522-525; Riechmann и др., Nature, 332, 1988, сс. 323-327; Verhoeyen и др., Science, 239, 1988, сс. 1534-1536) путем замены последовательностей гипервариабельного участка на соответствующие последовательности человеческого антитела. Таким образом, «гуманизированные» антитела представляют собой химерные антитела (US №4816567), в которых участок, существенно меньший, чем интактная человеческая вариабельная область, заменен соответствующей последовательностью, полученной из антитела видов кроме человека. На практике гуманизированные антитела представляют собой, как правило, человеческие антитела, в которых часть остатков гипервариабельного участка и возможно часть остатков FR заменены остатками из аналогичных участков антител грызунов.
Выбор человеческих вариабельных доменов как легкой, так и тяжелой цепи, предназначенных для получения гуманизированных антител, может быть важен для снижения антигенности. Согласно так называемому методу «наилучшего подбора» последовательность вариабельного домена антитела грызунов подвергают скринингу относительно полной библиотеки известных последовательностей человеческих вариабельных доменов. Человеческую последовательность, которая наиболее близка к последовательности из организма грызунов, затем применяют в качестве человеческого каркасного участка для гуманизированного антитела (Sims и др., J. Immunol., 151, 1993, с. 2296); Chothia и др., J. Mol. Biol., 196, 1987, с. 901). В другом методе используют определенный каркасный участок, полученный из консенсусной последовательности определенной подгруппы легких или тяжелых цепей всех человеческих антител. Один и тот же каркасный участок можно применять для нескольких различных гуманизированных антител (Carter и др., Proc. Natl. Acad. Sci. USA: 89, 1992, с. 4285; Presta и др., J. Immunol., 151, 1993, с. 2623).
Важно также, чтобы антитела были гуманизированы с сохранением высокой связывающей способности к антигену и других важных биологических свойств. Для решения этой задачи согласно одному из методов гуманизированные антитела получают с помощью анализа родительских последовательностей и различных гуманизированных продуктов с использованием умозрительных трехмерных моделей родительских и гуманизированных последовательностей. Трехмерные модели иммуноглобулинов общедоступны и хорошо известны специалистам в данной области. Известны компьютерные программы, которые иллюстрируют и отображают возможные трехмерные конформационные структуры выбранных перспективных последовательностей (последовательности-«кандидаты») иммуноглобулинов. Изучение этих изображений позволяет осуществлять анализ возможной роли остатков в функции перспективной последовательности иммуноглобулина, т.е. анализ остатков, которые влияют на способность перспективного иммуноглобулина (иммуноглобулин-«кандидат») связываться с его антигеном. Таким путем можно выбирать остатки в FR и объединять с реципиентными и импортными последовательностями для достижения требуемых характеристик антитела, таких как повышенная аффинность к антигену(ам)-мишени(ням). Как правило, остатки гипервариабельного участка оказывают непосредственное и наиболее существенное влияние на связывание антигена.
Человеческие антитела
Человеческие антитела к CD22, предлагаемые в изобретении, можно конструировать путем объединения последовательности(ей) вариабельных доменов Fv-клона, выбранной(ых) из человеческих фаговых дисплейных библиотек, с известной(ыми) последовательностью(ями) человеческих константных доменов, описанных выше. Альтернативно этому, человеческие моноклональные антитела к CD22, предлагаемые в изобретении, можно создавать с помощью метода гибридом. Описаны клеточные линии человеческой миеломы и мышиной-человеческой гетеромиеломы, предназначенные для получения человеческих моноклональных антител (см., например, Kozbor D., J. Immunol. 133, 1984, с. 3001; Brodeur B.R. и др., Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications, изд-во Marcel Dekker, Inc., New York, 1987, cc. 51-63 и Boerner P. и др., J. Immunol. 147, 1991, c. 86).
В настоящее время можно получать трансгенных животных (например, мышей), которые могут после иммунизации продуцировать полный спектр человеческих антител в отсутствии производства эндогенного иммуноглобулина. Например, было описано, что гомозиготная делеция области стыка гена тяжелой цепи (JH) в химерной и зародышевой линии мутантных мышей приводит к полному ингибированию производства эндогенных антител. Перенос массива генов иммуноглобулинов человеческой зародышевой линии в указанную мутантную зародышевую линию мышей может приводить к получению человеческих антител после контрольного заражения антигеном (см., например, Jakobovits и др., Ргос. Natl. Acad. Sci USA, 90, 1993, с. 2551; Jakobovits и др., Nature, 362, 1993, с. 255; Bruggermann и др., Year in Immunol., 7, 1993, с. 33).
Можно применять также перестановку генов для получения человеческих антител из нечеловеческих антител, например, антител грызунов, если человеческое антитело обладает сходными аффинностями и специфичностями с исходным нечеловеческим антителом. Согласно этому методу, который называют «эпитопный импринтинг», ген V-домена тяжелой или легкой цепи антител грызунов, полученный методами, основанными на фаговом дисплее, указанными в настоящем описании, заменяют спектром человеческих генов V-доменов, создавая популяцию химер scFv или Fab, содержащих нечеловеческую цепь/человеческую цепь. Селекция в отношении антигена приводит к выделению вариабельных областей химерных scFv или Fab, содержащих нечеловеческую цепь/человеческую цепь, в которых человеческая цепь способна восстанавливать антигенсвязывающий центр, разрушенный при удалении соответствующей нечеловеческой цепи в первичном экспонируемом фагом клоне, т.е. эпитоп обусловливает выбор человеческой цепи в качестве партнера (осуществляет импринтинг). Когда процесс повторяют, чтобы заменить оставшуюся нечеловеческую цепь, получают человеческое антитело (см. публикацию РСТ WO 93/06213, опубликованную 1 апреля 1993 г.). В отличие от традиционной гуманизации нечеловеческих антител посредством трансплантации CDR, такой метод обеспечивает получение полностью человеческих антител, которые не имеют остатков FR или CDR нечеловеческого происхождения.
Биспецифические антитела
Биспецифические антитела представляют собой моноклональные антитела, обладающие связывающими специфичностями в отношение по меньшей мере двух различных антигенов. В некоторых вариантах осуществления изобретения биспецифические антитела представляют собой человеческие или гуманизированные антитела. В некоторых вариантах осуществления изобретения одна из связывающих специфичностей связывается с CD22, а другая с любым другим антигеном. В некоторых вариантах осуществления изобретения биспецифические антитела могут связываться с двумя различными эпитопами CD22. Биспецифические антитела можно применять также для локализации цитотоксических агентов в клетках, которые экспрессируют CD22. Эти антитела несут связывающее CD22 плечо и плечо, которое связывается с цитотоксическим агентом, таким, например, как сапорин, антитело против интерферона-α, алкалоид барвинка, цепь А рицина, метотрексат или гаптен, меченный радиоактивным изотопом. Биспецифические антитела можно получать в виде полноразмерных антител или фрагментов антител (например, биспецифические антитела в виде F(ab')2).
Методы создания биспецифических антител известны в данной области. Традиционно рекомбинантное получение биспецифических антител базируется на совместной экспрессии двух пар тяжелых-легких цепей иммуноглобулина, в которых две тяжелые цепи обладают различными специфичностями (Milstein и Cuello, Nature, 305, 1983, с. 537). Из-за случайного выбора тяжелых и легких цепей иммуноглобулина указанные гибридомы (квадромы) продуцируют потенциальную смесь из 10 различных молекул антител, из которых только одна обладает правильной биспецифической структурой. Очистка правильной молекулы, которую, как правило, осуществляют с использованием стадий аффинной хроматографии, является довольной сложной, а выходы продукта являются небольшими. Аналогичные процедуры описаны в WO 93/08829, опубликованной 13 мая 1993 г., и у Traunecker и др., EMBO J., 10, 1991, с. 3655.
Согласно другому подходу вариабельные домены антитела с требуемыми связывающими специфичностями (центры связывания антитела-антигена) сливают с последовательностями константных доменов иммуноглобулина. Слияние, например, имеет место в константном домене тяжелой цепи иммуноглобулина, содержащем по меньшей мере часть шарнирной области, СН2- и СН3-участки. В некоторых вариантах осуществления изобретения по меньшей мере в одном из слияний присутствует первый участок константной области тяжелой цепи (СН1), содержащий сайт, необходимый для связывания легкой цепи. ДНК, кодирующие несущие слияния тяжелых цепей иммуноглобулина и при необходимости легкую цепь иммуноглобулина, встраивают в различные экспрессионные векторы и совместно трансфектируют ими приемлемый организм-хозяин. Это обеспечивает большую гибкость регулирования взаимных пропорций трех полипептидных фрагментов в вариантах осуществления изобретения, в которых неравные соотношения трех применяемых в конструкции полипептидных цепей приводят к получению оптимальных выходов. Однако можно встраивать кодирующие последовательности двух или всех трех полипептидных цепей в один экспрессионный вектор, когда экспрессия по меньшей мере двух полипептидных цепей в равных соотношениях позволяет получать высокие выходы или когда соотношения не играют особенно значимой роли.
Согласно одному из вариантов такого подхода биспецифические антитела состоят из гибридной тяжелой цепи иммуноглобулина с первой связывающей специфичностью в одном плече и гибридной пары тяжелая цепь - легкая цепь иммуноглобулина (которая обеспечивает вторую связывающую специфичность) в другом плече. Установлено, что указанная асимметричная структуру облегчает отделение требуемого биспецифического соединения от нежелательных комбинаций иммуноглобулиновых цепей, поскольку присутствие легкой цепи иммуноглобулина только в одной половине биспецифической молекулы обеспечивает простой путь отделения. Указанный подход описан в WO 94/04690. Дополнительные подробности, касающиеся создания биспецифических антител, см., например, у Suresh и др., Methods in Enzymology, 121, 1986, с. 210.
Согласно другому подходу можно конструировать поверхность раздела между парой молекул антител для повышения до максимума процента гетеродимеров, которые выделяют из культуры рекомбинантных клеток. Поверхность раздела содержит по меньшей мере часть СH3-домена константного домена антитела. Согласно этому методу одну или несколько аминокислот с меньшими боковыми цепями из поверхности раздела первой молекулы антитела заменяют на аминокислоты с более крупными боковыми цепями (например, тирозин или триптофан). На поверхности раздела второй молекулы антитела создают компенсирующие «полости», размер которых идентичен или соответствует размеру крупной(ых) боковой(ых) цепи(ей), путем замены аминокислот с крупными боковыми цепями на аминокислоты с меньшими боковыми цепями (например, аланин или треонин). Это является механизмом повышения выхода гетеродимера относительно других нежелательных конечных продуктов, таких как гомодимеры.
К биспецифическим антителам относятся перекрестносшитые антитела или «гетероконъюгаты». Например, одно из антител в гетероконъюгате может быть сшито с авидином, а другое с биотином. Указанные антитела, например, могут найти применение для направленного переноса клеток иммунной системы к нежелательным клеткам (US №4676980) и для лечения ВИЧ-инфекции (WO 91/00360, WO 92/00373 и ЕР 03089). Гетероконъюгаты антител можно создавать с использованием любого соответствующего метода перекрестного сшивания. Приемлемые перекрестносшивающие агенты хорошо известны в данной области и описаны в US №4676980, наряду с рядом методов перекрестного сшивания.
Методики создания биспецифических антител из фрагментов антител также описаны в литературе. Например, биспецифические антитела можно получать путем химического связывания. Brennan и др., Science, 229, 1985, с. 81 описали процедуру, при которой интактные антитела подвергали протеолитическому расщеплению с получением F(аb')2-фрагментов. Указанные фрагменты восстанавливали в присутствии образующего комплекс с дитиолом арсената натрия для стабилизации соседних дитиолов и предупреждения образования межмолекулярного дисульфида. Созданные Fab'-фрагменты затем превращают в тионитробензоатные (TNB) производные. Одно из производных Fab'-TNB затем повторно конвертируют в Fab'-тиол путем восстановления с помощью меркаптоэтиламина и смешивают с эквимолярным количеством другого производного Fab'-TNB с получением биспецифического антитела. Полученные биспецифические антитела можно применять в качестве агентов для селективной иммобилизации ферментов.
Достигнутый в настоящее время прогресс облегчил непосредственное выделение Fab'-SH-фрагментов из Е. coli, которые можно подвергать химическому связыванию с получением биспецифических антител. Shalaby и др., J. Exp.Med., 17, 1992, сс.217-225 описали получение полностью гуманизированного биспецифического антитела в виде молекулы F(ab')2. Каждый Fab-фрагмент по отдельности секретировали из Е. coli и подвергали непосредственному химическому связыванию in vitro с получением биспецифического антитела. Полученное таким образом биспецифическое антитело обладало способностью связываться с клетками, сверхэкспрессирующими HER2-рецептор, и здоровыми человеческими Т-клетками, а также запускать литическую активность человеческих цитотоксических лимфоцитов против мишеней, представляющих собой человеческие клетки опухоли молочной железы.
Описаны также различные методики создания и выделения фрагментов биспецифического антитела непосредственно из культуры рекомбинантных клеток. Например, биспецифические антитела можно получать с использованием «лейциновых молний» (Kostelny и до., J. Immunol., 148(5), 1992, сс. 1547-1553). Пептиды «лейциновых молний» из белков Fos и Jun связывали с Fab'-участками двух различных антител посредством слияния генов. Гомодимеры антител восстанавливали в шарнирной области с получением мономеров и затем повторно окисляли с образованием гетердимеров антител. Указанный метод можно применять также для получения гомодимеров антител. Технология создания димерных антител («диабоди»), описанная Hollinger и др., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90, 1993, cc. 6444-6448, представляет собой альтернативный механизм создания фрагментов биспецифических антител. Фрагменты содержат вариабельный домен тяжелой цепи (VH), соединенный с вариабельным доменом легкой цепи (VL) с помощью линкера, который является слишком коротким для того, чтобы позволять осуществлять спаривание между двумя доменами на одной и той же цепи. Таким образом, VH- и VL-домены одного фрагмента должны спариваться с комплементарными VL- и VH-доменами другого фрагмента, образуя тем самым два антигенсвязывающих центра. Описана также другая стратегия создания фрагментов биспецифических антител, основанная на применение одноцепочечных димеров Fv (sFv) (см. Gruber и др., J. Immunol., 152, 1994, с. 5368).
Изобретение относится к антителам, имеющим более двух валентностей. Например, можно получать триспецифические антитела (Tutt и др., J. Immunol. 147, 1991, с. 60).
Многовалентные антитела
Многовалентное антитело может интернализоваться (и/или подвергаться катаболизму) быстрее, чем двухвалентное антитело клеткой, экспрессирующей антиген, с которой связываются антитела. Антитела, предлагаемые в настоящем изобретении, могут представлять собой многовалентные антитела (отличные от IgM-класса) с тремя или большим количеством антигенсвязывающих центров (например, четырехвалентные антитела), которые легко можно получать с помощью рекомбинантной экспрессии нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептидные цепи антитела. Многовалентное антитело может содержать домен димеризации и три или большее количество антигенсвязывающих центров. В некоторых варрантах осуществления изобретения домен димериазции содержит Fc-область и шарнирную область (или состоит из них). В этом случае антитело может содержать Fc-область и три или большее количество антигенсвязывающих центров на аминоконце относительно Fc-области. В некоторых вариантах осуществления изобретения многовалентное антитело содержит от трех до примерно восьми антигенсвязывающих центров (или состоит из них). В одном из указанных вариантов осуществления изобретения многовалентное антитело содержит четыре антигенсвязывающих центра (или состоит из них). Многовалентное антитело содержит по меньшей мере одну полипептидную цепь (например, две полипептидные цепи), при этом полипептидная(ые) цепь(и) содержит(ат) два или большее количество вариабельных доменов. Например, полипептидная(ые) цепь(и) может(гут) может содержать VD1-(X1)n -VD2-(X2)n -Fc, где VD1 обозначает первый вариабельный домен, VD2 обозначает второй вариабельный домен, Fc обозначает одну полипептидную цепь Fc-области, X1 и Х2 обозначают аминокислоту или полипептид и n обозначает 0 или 1. Например, полипептидная(ые) цепь(и) может(гут) может содержать: цепь VH-CH1-гибкий линкер-VH-CH1-Fc-область или цепь VH-CH1-VH-CH1-Fc-область. Многовалентное антитело, представленное в настоящем описании, может дополнительно содержать по меньшей мере два (например, четыре) полипептида вариабельного домена легкой цепи. Многовалентное антитело, представленное в настоящем описании, может, например, содержать от примерно двух до примерно восьми полипептидов вариабельного домена легкой цепи. Полипептиды вариабельных доменов легкой цепи, рассматриваемые в настоящем описании, содержат вариабельный домен легкой цепи и необязательно дополнительно содержат CL-домен.
Однодоменные антитела
В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело, предлагаемое в изобретении, представляет собой однодоменное антитело. Однодоменное антитело представляет собой одну полипептидную цепь, содержащую весь вариабельный домен тяжелой цепи антитела или его часть или весь вариабельный домен легкой цепи антитела или его часть. В некоторых вариантах осуществления изобретения однодоменное антитело представляет собой человеческое однодоменное антитело (фирма Domantis, Inc., Валтам, шт. Массачусетс; см., например, US №6248516 В1). В одном из вариантов осуществления изобретения однодоменное антитело состоит из всего вариабельного домена тяжелой цепи антитела или его части.
Варианты антител
Некоторые варианты осуществления изобретения относятся к модификации(ям) аминокислотных последовательностей антител, представленных в настоящем описании. Например, может требоваться повышать аффинность связывания и/или другие биологические свойства антитела. Варианты аминокислотных последовательностей антитела можно получать путем интродукции соответствующих модификаций в нуклеотидную последовательность, кодирующую антитело, или путем синтеза пептидов. Указанные модификации включают, например, делеции и/или инсерции, и/или замены остатков в аминокислотных последовательностях антитела. Для получения конечной конструкции можно использовать любую комбинацию делеции, инсерции и замен, при условии, что конечная конструкция обладает требуемыми характеристиками, например, способностью связываться с антигеном. Аминокислотные изменения можно интродуцировать в рассматриваемую аминокислотную последовательность в процессе создания указанной последовательности.
Ценным методом идентификации конкретных остатков или областей антитела, которые можно подвергать мутагенезу, является так называемый «аланин-сканирующий мутагенез», описанный у Cunningham B.C. и Wells J.A., Science 244, 1989, сс. 1081-1085. При осуществлении этого метода остаток или группу остатков-мишеней (например, заряженные остатки, такие как arg, asp, his, lys и glu) идентифицируют и заменяют на нейтральную или отрицательно заряженную аминокислоту (например, аланин или полиаланин) для решения вопроса о том, будет ли это влиять на взаимодействие аминокислот с антигеном. Затем те аминокислотные положения, для которых продемонстрирована функциональная чувствительность к заменам, уточняют путем интродукции дополнительных или других вариантов в сайты замены. Таким образом, в то время как сайт для интродукции вариации аминокислотной последовательности является предопределенным, природа самой мутации не является предопределенной. Например, для анализа эффективности мутации в данном сайте осуществляют ala-сканирующий или неспецифический мутагенез в кодоне-мишени или области-мишени и экспрессируемые иммуноглобулины подвергают скринингу в отношении требуемой активности.
Инсерции в аминокислотные последовательности включают амино- и/или карбоксиконцевые слияния, варьирующие по длине от одного остатка до полипептидов, содержащих сто или большее количество остатков, а также инсерции одного или нескольких аминокислотных остатков внутрь последовательности. Примером результата осуществления концевых инсерции является антитело с N-концевым метионильным остатком. Другие инсерционные варианты молекул антител включают слияние N- или С-концов антитела с ферментом (например, для ADEPT (антитело-направляемый фермент пролекарственной терапии) или полипептидом, который удлиняет время полужизни антитела в сыворотке.
В некоторых варианта осуществления изобретения антитело, предлагаемое в изобретении, изменяют с целью повышения или понижения степени гликозилирования антитела. Гликозилирование полипептидов, как правило, является либо N-связанным, либо О-связанным. N-связанное гликозилирование относится к присоединению углеводного остатка к боковой цепи аспарагинового остатка. Трипептидные последовательности аспарагин-Х-серин и аспарагин-Х-треонин, в которых X обозначает любую аминокислоту кроме пролина, представляют собой распознаваемые последовательности для ферментативного присоединения углеводного остатка к боковой цепи аспарагина. Таким образом, присутствие любой из указанных трипептидных последовательностей в полипептиде создает потенциальный сайт гликозилирования. О-связанное гликозилирование относится к присоединению одного из таких сахаров, как N-ацетилгалактозамин, галактоза или ксилоза, к гидроксиаминокислоте, чаще всего серину или треонину, хотя для присоединения можно использовать также 5-гидроксипролин или 5-гидроксилизин.
Добавление или делению сайтов гликозилирования в антителе удобно осуществлять путем такого изменения аминокислотной последовательности, при котором создают или удаляют одну или несколько указанных выше трипептидных последовательностей (для N-связанных сайтов гликозилирования). Изменение можно осуществлять также путем добавления, делеции или замены одного или нескольких остатков серина или треонина в последовательности исходного антитела (для О-связанных сайтов гликозилирования).
Если антитело содержит Fc-область, то можно изменять присоединенный к ней углевод. Например, антитела со зрелой углеводной структурой, в которой отсутствует фукоза, присоединенная к Fc-области антитела, описаны в заявке на патент US №2003/0157108 (на имя Presta L.) (см. также US №2004/0093621 (на имя фирмы Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd). Антитела с бисекционирующим N-ацетилглюкозамином (GlcNAc) в углеводе, присоединенном к Fc-области антитела, описаны в WO 2003/011878 на имя Jean-Mairet с соавторами и в US №6602684 на имя Umana с соавторами. Антитела по меньшей мере с одним галатозным остатком в олигосахариде, присоединенном к Fc-области антитела, описаны в WO 1997/30087 на имя Patel с соавторами (см. также, WO 1998/58964 (на имя Raju S.) и WO 1999/22764 (на имя Raju S.) описание антител с измененным углеводом, присоединенном к его Fc-области; см. также в US №2005/0123546 (на имя Umana с соавторами) описание антигенсвязывающих молекул с модифицированным гликозилированием).
В некоторых вариантах осуществления изобретения вариант гликозилирования содержит Fc-область, в которой углеводная структура, присоединенная к Fc-области, лишена фукозы. Указанные варианты обладают улучшенной ADCC-функцией. Необязательно Fc-область дополнительно содержит одну или несколько аминокислотных замен, которые дополнительно улучшают ADCC, например, замены в положениях 298, 333 и/или 334 Fc-области (Eu-нумерация остатков). Примеры публикаций, касающихся «дефукозилированных» или «с дефицитом фукозы» антител, включают:
US №2003/0157108; WO 2000/61739; WO 2001/29246; US 2003/0115614; US №2002/0164328; US №2004/0093621; US №2004/0132140; US №2004/0110704; US №2004/0110282; US №2004/0109865; WO 2003/085119; WO 2003/084570; WO 2005/035586; WO 2005/035778; WO2005/053742; Okazaki и др., J. Mol. Biol. 336, 2004, cc. 1239-1249; Yamane-Ohnuki и др., Biotech. Bioeng. 87, 2004, c. 614. Примерами клеточных линий, которые обладают способностью продуцировать дефукозилированные антитела, являются Lec13 СНО-клетки с дефицитом белкового фукозилирования (Ripka и др., Arch. Biochem. Biophys. 249, 1986, cc. 533-545; заявка на патент США №2003/0157108 А1 на имя Presta L. и WO 2004/056312 А1, на имя Adams с соавторами, прежде всего описанные в примере 11) и клеточные линии с «выключенным» геном, например, СНО-клетки с «выключенным» геном альфа- 1,6-фукозилтрансферазы, FUT8 (см., например, Yamane-Ohnuki и др., Biotech. Bioeng. 87, 2004, с. 614).
В одном из вариантов осуществления изобретения антитело изменяют для удлинения его времени полужизни в сыворотке. Для удлинения времени полужизни антитела в сыворотке в антитело можно включать эпитоп, связывающийся с рецептором спасения (прежде всего во фрагмент антитела), например, описанный в US №5739277. В контексте настоящего описания понятие «эпитоп, связывающийся с рецептором спасения» относится к эпитопу Fc-области IgG-молекулы (например, IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4), который ответствен за удлинение времени полужизни in vivo в сыворотке IgG-молекулы (US №2003/0190311, US №6821505; US №6165745; US №5624821; US №5648260; US №6165745; US №5834 597).
Другим типом варианта является вариант, включающий аминокислотную замену. Эти варианты содержат по меньшей мере один аминокислотный остаток в молекуле антитела, который заменен на другой остаток. Представляющие интерес сайты для обусловливающего замены мутагенеза включают гипервариабельные участки, но изменения могут затрагивать также FR. Консервативные замены представлены ниже в таблице 3 под заголовком «предпочтительные замены». Если указанные замены приводят к требуемому изменению биологической активности, то можно интродуцировать более значительные замены, обозначенные как «приведенные в качестве примера замены» в таблице 3, или дополнительно описанные ниже со ссылкой на класс аминокислот, и продукты подвергать скринингу.
Для получения существенных модификаций биологических свойств антитела отбирают замены, которые существенно отличаются по их воздействию на поддержание (а) структуры полипептидного каркаса в области замены, например, пластинчатой (складчатой) или спиральной конформации, (б) заряда или гидрофобности молекулы в сайте-мишени, или (в) объема боковой цепи. Аминокислоты можно группировать на основе сходства свойств их боковых цепей (см. у A. L. Lehninger в: Biochemistry, 2-е изд., изд-во Worth Publishers, New York, 1975, cc. 73-75):
(1) неполярные: Ala (A), Val (V), Leu (L), Ile (I), Pro (P), Phe (F), Trp (W), Met (M),
(2) незаряженные полярные: Gly (G), Ser (S), Thr (T), Cys (С), Tyr (Y), Asn (N), Gln (Q),
(3) кислотные: Asp (D), Glu (E),
Альтернативно этому, встречающиеся в естественных условиях остатки можно разделять на группы на основе общих свойств боковых цепей:
(1) гидрофобные: норлейцин, Met, Ala, Val, Leu, Ile;
(2) нейтральные гидрофильные: Cys, Ser, Thr, Asn, Gln;
(3) кислотные: Asp, Glu;
(4) основные: His, Lys, Arg;
(5) остатки, влияющие на ориентацию цепи: Gly, Pro;
(6) ароматические: Trp, Tyr, Phe.
Под неконсервативными заменами подразумевают замену представителя одного из указанных классов на представителя из другого класса. Указанные заменяющие остатки можно интродуцировать также в сайты консервативных замен или в оставшиеся (неконсервативные) сайты.
Один тип полученного в результате замены варианта включает замену одного или нескольких остатков гипервариабельного участка родительского антитела (например, гуманизированного или человеческого антитела). Как правило, полученный(ые) в результате вариант(ы), отобранный(ые) для дополнительного исследования, должен(ы) иметь модификации (например, улучшения) биологических свойств относительно родительского антитела, из которого он(и) получен(ы). Удобным подходом к созданию указанных получаемых в результате замены вариантов является процесс созревания аффинности с использованием фагового дисплея. В целом, метод состоит в следующем: несколько сайтов в гипервариабельном участке (например, 6-7 сайтов) подвергают мутации для создания всех возможных аминокислотных замен в каждом сайте. Созданные таким образом антитела экспонируют на частицах нитчатого фага в виде слияний по меньшей мере с частью оболочечного белка фага (например, продукта гена III фага М13), упакованного в каждую частицу. Затем экспонируемые на фаге варианты подвергают скринингу в отношении их биологической активности (например, аффинности связывания). Для идентификации в гипервариабельном участке сайтов-кандидатов для модификации, можно осуществлять сканирующий мутагенез (например, аланин- сканирующий) с целью идентификации остатков в гипервариабельном участке, вносящих существенный вклад в связывание с антигеном. В альтернативном или дополнительном варианте может оказаться важным изучать кристаллическую структуру комплекса антиген-антитело для идентификации точек контакта между антителом и антигеном. Указанные контактирующие остатки и соседние остатки можно рассматривать в качестве кандидатов для замены с помощью методик, известных в данной области, включая разработанные при создании настоящего изобретения. Согласно одному из разработанных вариантов панель вариантов подвергают скринингу с использованием методик, известных в данной области, включая указанные в настоящем описании, и антитела с улучшенными свойствами по данным одного или нескольких соответствующих анализов можно отбирать для дальнейшей разработки.
Молекулы нуклеиновых кислот, которые кодируют варианты аминокислотных последовательностей антител, получают различными методами, известными в данной области. Эти методы включают (но не ограничиваясь только ими) выделение из встречающегося в естественных условиях источника (в случае вариантов встречающихся в естественных условиях аминокислотных последовательностей) или получение опосредуемого олигонуклеотидами (или сайт-направленного) мутагенеза, ПЦР-мутагенеза и кассетного мутагенеза ранее полученной вариантной или невариантной версии антитела.
Может оказаться желательным интродуцировать одну или несколько аминокислотных модификаций в Fc-область антител, предлагаемых в изобретении, создавая тем самым вариант Fc-области. Вариант Fc-области может содержать последовательность человеческой Fc-области (например, Fc-области человеческого IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4), содержащей аминокислотную модификацию (например, замену) в одном или нескольких аминокислотных положениях, включая входящий в шарнир цистеин.
Согласно настоящему описанию и существующему уровню техники подразумевается, что в некоторых вариантах осуществления изобретения антитело, предлагаемое в изобретении, может содержать одно или несколько изменений по сравнению с копией дикого типа антитела, например, в Fc-области. Указанные антитела тем не менее, должны сохранять практически такие же характеристики, требуемые для терапевтического применения, что и их копия дикого типа. Например, подразумевается, что в Fc-области можно осуществлять определенные изменения, результатом которых должно являться изменение (т.е. либо повышение, либо понижение) способности связывать C1q и/или комплементзависимой цитотоксичности (CDC), что описано, например, в WO 99/51642 (см. также Duncan и Winter Nature 322, 1988, cc. 738-740; US №5648260; US №5624821 и WO 94/29351, в которых описаны другие примеры вариантов Fc-области). В WO 00/42072 (на имя Presta) и WO 2004/056312 (на имя Lowman) описаны варианты антител с повышенной или пониженной способностью связываться с FcR. Содержание указанных патентных публикаций специально включено в настоящее описание в качестве ссылки (см. также Shields и др., J. Biol. Chem. 9(2), 2001, сс. 6591-6604). Антитела с удлиненным временем полужизни и повышенной способностью связываться с неонатальным Fc-рецептором (FcRn), который ответствен за перенос материнских IgG плоду (Guyer и др., J. Immunol. 117, 1976, с. 587 и Kim и др., J. Immunol. 24, 1994, с. 249), описаны в US №2005/0014934А1 (на имя Hinton с соавторами). Указанные антитела содержат Fc-область с одной или несколькими заменами в ней, которые повышают способность Fc-области связываться с FcRn. Варианты полипептидов с измененными аминокислотными последовательностями Fc-области и повышенной или пониженной способностью связываться с C1q описаны в US №6194551B1, WO 99/51642. Содержание указанных патентных публикаций специально включено в настоящее описание в качестве ссылки (см. также Idusogie и др., J. Immunol. 164, 2000, сс. 4178-4184).
Одним из объектов изобретения являются антитела, которые содержат модификации в поверхности раздела Fc-полипептидов, содержащих Fc-область, где модификации облегчают и/или усиливают гетеродимеризацию. Эти модификации включают интродукцию выпуклости в первый полипептид Fc и полости во второй полипептид Fc, где выпуклость может помещаться в полость, что усиливает комлексообразование первого и второго полипептидов Fc. Методы создания антител с указанными модификациями известны в данной области, например, описаны US №5731168.
Производные антител
Антитела, предлагаемые в настоящем изобретении, можно дополнительно модифицировать таким образом, чтобы они содержали дополнительные небелковые фрагменты, известные в данной области и легко доступные. Предпочтительно фрагменты, пригодные для дериватизации антитела, представляют собой водорастворимые полимеры. Примерами водорастворимых полимеров являются (но не ограничиваясь только ими) полиэтиленгликоль (ПЭГ), сополимеры этиленгликоля/пропиленгликоля, карбоксиметилцеллюлоза, декстран, поливиниловый спирт, поливинилпирролидон, поли-1,3-диоксолан, поли-1,3,6-триоксан, сополимер этилена/малеинового ангидрида, полиаминокислоты (либо гомополимеры, либо статистические сополимеры) и декстран- или поли(н-винилпиролидон)полиэтиленгликоль, гомополимеры пропиленгликоля, сополимеры пропиленоксида/этиленоксида, полиоксиэтилированные полиолы (например, глицерин), поливиниловый спирт и их смеси. Полиэтиленгликольпропиональдегид может иметь преимущество при производстве благодаря его стабильности в воде. Полимер может иметь любую молекулярную массу и может быть разветвленным или неразветвленным. Количество полимеров, присоединенных к антителу, может варьироваться и, если присоединено более одного полимера, то они могут представлять собой одинаковые или различные молекулы. В целом, количество и/или тип полимеров, применяемых для дериватизации, можно определять с учетом таких особенностей (но не ограничиваясь только ими), как конкретные свойства или функции антитела, подлежащие усовершенствованию, предполагается ли применение производного антитела в терапии в определенных условиях, и т.д.
Другим вариантом осуществления изобретения являются конъюгаты антитела и небелкового фрагмента, которые можно избирательно нагревать, воздействуя на него излучением. В одном из вариантов осуществления изобретения небелковый фрагмент представляет собой углеродную нанотрубку (Kam и др., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 102, 2005, cc. 11600-11605). Излучение может иметь любую длину волны, включая (но не ограничиваясь только ими) длины волн, которые не повреждают обычные клетки, но которые нагревают небелковый фрагмент до температуры, при которой уничтожаются клетки, ближайшие к конъюгату антитело-небелковый фрагмент.
Согласно изобретению понятие «конъюгат антитело к СD22-лекарственное средство» относится к агентам, имеющим формулу Ab-(L-D)p, в которой
(а) Аb обозначает антитело к CD22, представленное в настоящем описании;
(б) L обозначает линкер;
(в) D обозначает фрагмент, представляющий собой лекарственное средство.
В одном из вариантов способа, предлагаемого в изобретении, конъюгат антитело к CD22-лекарственное средство представляет собой анти-СD22-МС-vc-PAB-MMAE.
Конъюгаты антитело-лекарственное средство
Другим объектом изобретения являются иммуноконъюгаты или конъюгаты антитело-лекарственное средство (ADC), которые содержат антитело, конъюгированное с цитотоксическим агентом, таким как химиотерапевтический агент, лекарственное средство, ингибирующий рост агент, токсин (например, обладающий ферментативной активностью токсин бактериального, грибного, растительного или животного происхождения или их фрагменты) или радиоактивный изотоп (т.е. радиоконъюгат). Другим объектом изобретения являются также способы применения иммуноконъюгатов. В одном из объектов изобретения иммуноконъюгат содержит любое из указанных выше антител к CD22, ковалентно связанное с цитотоксическим агентом или выявляемым агентом, и он предназначен для объединения с антителом к CD20, указанным в настоящем описании.
Применение конъюгатов антитело-лекарственное средство для местного введения цитотоксических или цитостатических агентов, т.е. лекарственных средств, предназначенных для уничтожения или ингибирования опухолевых клеток при лечении рака (Syrigos и Epenetos, Anticancer Research 19,1999, сс. 605-614; Niculescu-Duvaz и Springer, Adv. Drug Del. Rev. 26, 1997, cc. 151-172; US №4975278), позволяет осуществлять направленное введение фрагмента, представляющего собой лекарственное средство, в опухоли и накапливать его внутри клеток, в то время как системное введение таких лекарственных агентов в неконъюгированном виде может приводить к неприемлемым уровням токсичности в отношении здоровых клеток, а не только к токсичности в отношении опухолевых клеток, которые требуется элиминировать (Baldwin и др., Lancet, 15 марта 1986, сс. 603-605; Thorpe, «Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In Cancer Therapy: A Review» в Monoclonal Antibodies '84: Biological And Clinical Applications, под ред. Pinchera и др., 1985, cc. 475-506). Тем самым обеспечивается максимальная эффективность при минимальной токсичности. Опубликованы данные о том, что в этих стратегиях можно применять как поликлональные антитела, так и моноклональные антитела (Rowland и др., Cancer Immunol. Immunother., 21, 1986, сс. 183-187). В качестве лекарственных средств в этих методах применяли дауномицин, доксорубицин, метотрексат и виндесин (Rowland и др., 1986, выше). Токсины, применяемые в конъюгатах антитело-токсин, включают бактериальные токсины, такие как дифтерийный токсин, растительные токсины, такие как рицин, низкомолекулярные токсины, такие как гелданамицин (Mandler и др., J. of the Nat. Cancer Inst. 92(19), 2000, cc. 1573-1581; Mandler и др., Bioorganic & Med. Chem. Letters 10, 2000, cc. 1025-1028; Mandler и др. Bioconjugate Chem. 13, 2002, cc. 786-791), майтанзиноиды (ЕР 1391213; Liu и др., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93, 1996, cc. 8618-8623) и калихеамицин (Lode и др. Cancer Res. 58, 1998, с. 2928; Hinman и др. Cancer Res. 53, 1993, cc. 3336-3342). Токсины могут проявлять свое действие посредством цитотоксической и цитостатической активности с помощью механизмов, включающих связывание тубулина, связывание ДНК или ингибирование топоизомеразы. Некоторые цитотоксические лекарственные средства имеют тенденцию инактивироваться или обладать пониженной активностью при конъюгировании с крупными антителами или белковыми лигандами рецепторов.
ZEVALIN® (ибритумомаба тиуксетан, фирма Biogen/Idec) представляет собой конъюгат антитело-радиоизотоп, состоящий из мышиного моноклонального антитела IgG1 каппа, направленное против антигена CD20, находящегося на поверхности здоровых и злокачественных В-лимфоцитов и радиоизотопа 111In или 90Y, связанного с помощью тиомочевинного линкера-хелатора (Wiseman и др., Eur. Jour. Nucl. Med. 27(7), 2000, cc. 766-77; Wiseman и др., Blood 99(12), 2002, cc. 4336-4342; Witzig и др., J. Clin. Oncol. 20(10), 2002, cc. 2453-2463; Witzig и др., J. Clin. Oncol. 20(15), 2002, cc. 3262-3269). Хотя зевалин обладает активностью, направленной против В-клеточной неходжкинской лимфомы (НХЛ), введение приводит к тяжелым и продолжительным цитопениям у большинства пациентов. MYLOTARG™ (гемтузумаба озогамицин, фирма Wyeth Pharmaceuticals), конъюгат антитело-лекарственное средство, состоящий из антитела к hu-CD33, связанного с калихеамицином, одобрен в 2000 году для лечения острого миелоидного лейкоза посредством инъекции (Drugs of the Future 25(7), 2000, с. 686; US №№4970198, 5079233, 5585089, 5606040, 5693762, 5739116, 5767285, 5773001). Кантузумаба мертанзин (фирма Immunogen, Inc.), конъюгат антитело-лекарственное средство, состоящий из антитела к huC242, связанного посредством дисульфидного линкера SPP с компонентом в виде мейтанзиноидного лекарственного средства, DM1, разработан для лечения видов рака, которые экспрессируют антиген CanAg, таких как рак ободочной кишки, поджелудочной железы, желудка и другие виды. MLN-2704 (фирмы Millennium Pharm., BZL Biologies, Immunogen Inc.), конъюгат антитело-лекарственное средство, состоящий из моноклонального антитела против специфичного для простаты мембранного антигена (PSMA), связанного с компонентом в виде майтанзиноидного лекарственного средства, DM1, разрабатывается в качестве кандидата для лечения опухолей предстательной железы. Ауристатиновые пептиды, ауристатин Е (АЕ) и монометилауристатин (ММАЕ), синтетические аналоги доластатина, конъюгировали с химерными моноклональными антителами cBR96 (специфическими в отношении антигена Y Льюиса на карциномах) и с сАС10 (специфическим в отношении CD30 на гематологических злокачественных новообразованиях) (Doronina и др., Nature Biotechnology 21(7), 2003, сс. 778-784), и они находятся в разработке в качестве терапевтических агентов. Химиотерапевтические агенты, которые можно применять для получения таких иммуноконъюгатов, указаны в настоящем описании. Обладающие ферментативной активностью токсины и их фрагменты, которые можно применять, включают цепь А дифтерийного токсина, несвязывающиеся активные фрагменты дифтерийного токсина, цепь А экзотоксина (из Pseudomonas aeruginosa), цепь А рицина, цепь А абрина, цепь А модеццина, альфа-сарцин, белки Aleurites fordii, белки диантина, белки Phytolaca americana (PAPI, РАРП и PAP-S), ингибитор из Momordica charantia, курцин, кротин, ингибитор из Sapaonaria officinalis, гелонин, митогеллин, рестриктоцин, феномицин, эномицин и трикотецены (см., например, WO 93/21232, опубликованную 28 октября 1993 г.). Различные радиоактивные изотопы можно применять для получения радиоконъюгатов антител. Их примерами являются 212Bi, 131I, 131In, 90Y, 186Re. Конъюгаты, включающие антитело и цитоксический агент, можно создавать с использованием целого ряда бифункциональных связывающих белки агентов, таких как N-сукцинимидил-3-(2-пиридилдитиол)пропионат (SPDP), иминотиолан (IT), бифункциональные производные сложных имидоэфиров (такие как диметиладипимидат-HCl), активные сложные эфиры (такие как дисукцинимидилсуберат), альдегиды (такие как глутаровый альдегид), бисазидосоединения (такие как бис(пара-азидобензоил)гександиамин), производные бисдиазония (такие как бис(пара-диазонийбензоил)этилендиамин), диизоцианаты (такие как толуол-2,6-диизоцианат) и бис-активные соединения фтора (такие как 1,5-дифтор-2,4-динитробензол). Например, иммунотоксин рицина можно получать согласно методу, описанному у Vitetta и др., Science, 238, 1987, с. 1098). Меченная с помощью С14 1-изотиоцианатобензил-3-метилдиэтилентриаминпентауксусная кислота (MX-DTPA) является примером хелатирующего агента для конъюгации радионуклеотида с антителом (см. WO 94/11026).
Под объем изобретения подпадают также конъюгаты антитела и одного или нескольких низкомолекулярных токсинов, таких как калихеамицин, майтанзиноиды, долостатины, ауростатины, трихотен и СС1065 и производных этих токсинов, которые обладают активностью токсинов.
Майтанзин и майтанзиноиды
В некоторых вариантах осуществления изобретения иммуноконъюгат содержит антитело (полноразмерное или фрагменты), предлагаемое в изобретении, которое конъюгировано с одной или несколькими молекулами майтанзиноида.
Майтанзиноиды представляют собой ингибиторы митоза, которые проявляют действие посредством ингибирования полимеризации тубулина. Майтанзин впервые был выделен из восточно-африканского кустарника Maytenus serrata (US №3896111). Далее было установлено, что определенные микроорганизмы также продуцируют майтанзиноиды, такие как майтанзинол и сложные С-3-эфиры майтанзинола (US №4151042). Синтетический майтанзинол и его производные и аналоги описаны, например в US №№. 4137230; 4248870; 4256746; 4260608; 4265814; 4294757; 4307016; 4308268; 4308269;4309428; 4313946;4315929; 4317821; 4322348; 4331598; 4361650; 4364866; 4424219; 4450254; 4362663 и 4371533.
Фрагменты, представляющие собой майтанзиноидные лекарственные средства, являются привлекательными компонентами в качестве лекарственных средств, входящих в конъюгаты антитела и лекарственного средства, поскольку они: (I) относительно легко могут быть получены путем ферментации или химической модификации, дериватизации продуктов ферментации, (II) применимы для дериватизации с помощью функциональных групп, пригодных для конъюгации с антителами через линкеры, отличные от дисульфидных мостиков, (III) стабильны в плазме и (IV) эффективны в отношении различных линий опухолевых клеток.
Производные майтанзина, которые можно применять в качестве фрагментов, представляющих собой майтанзиноидные лекарственные средства, хорошо известны в данной области, и их можно выделять из природных источников с помощью известных методов, получать с помощью методик генетической инженерии (см. Yu и др., PNAS 99, 2002, сс. 7968-7973), или майтанзинол и аналоги майтанзинола можно получать синтетически с помощью известных методов.
Примеры фрагментов, представляющих собой майтанзиноидные лекарственные средства, включают соединения, имеющие модифицированное ароматическое кольцо, такие как: С-19-дехлор (US №4256746) (получали путем восстановления анзамитоцина Р2 алюмогидридом лития); С-20-гидрокси (или С-20-деметил)+/-С-19-дехлор (US №№4361650 и 4307016) (получали деметилированием с использованием Streptomyces или Actinomyces или дехлорированием с помощью LAH); и С-20-деметокси, С-20-ацилокси (-OCOR),+/-дехлор (US №4294757) (получали ацилированием с помощью ацилхлоридов), и имеющие модификации в других положениях.
Примеры фрагментов, представляющих собой майтанзиноидные лекарственные средства, включают также соединения, имеющие следующие модификации: C-9-SH (US №4424219) (получали путем взаимодействия майтанзинола с H2S или P2S5); С-14-алкоксиметил(деметокси/СН2OR)(US №4331598); С-14-гидроксиметил- или ацилоксиметил (СН2ОН или СН2ОАс) (US №4450254) (получали из Nocardia); С-15-гидрокси/ацилокси (US №4364866) (получали путем конверсии майтанзинола в Streptomyces); С-15-метокси (US №№4313946 и 4315929) (выделяли из Trewia nudlflora); С-18-N-диметил (US №№4362663 и 4322348) (получали деметилированием майтанзинола в Streptomyces); и 4,5-дезокси (US №4371533) (получали путем восстановления с помощью трихлорида титана/LAH майтанзинола).
Примерами фрагментов, представляющих собой майтанзиноидные лекарственные средства, являются: DM1; DM и DM4, которые имеют следующие структуры:
в которых волнистой линией показано ковалентное соединение атома серы лекарственного средства с линкером (L) конъюгата антитело-лекарственное средство. Описано лекарственное средство HERCEPTIN® (трастузумаб, антитело к HER2), связанное с помощью SMCC с DM1 (WO 2005/037992, которая специально полностью включена в настоящее описание в качестве ссылки). Конъюгат антитело-лекарственное средство, предлагаемый в настоящем изобретении, можно получать с использованием представленных в настоящем описании процедур.
Другие примеры конъюгатов майтанзиноидных лекарственных средств и антител имеют следующие структуры и сокращенные названия (где Аb обозначает антитело и р обозначает число от 1 до примерно 8):
Приведенные в качестве примера конъюгатов антитело-лекарственное средство, в которых DM1 связан через ВМРЕО-линкер с тиольной группой антитела, имеют следующую структуру и сокращенные названия:
где Аb обозначает антитело; n обозначает 0, 1 или 2; и p обозначает 1, 2, 3 или 4.
Содержащие майтанзиноиды иммуноконъюгаты, методы их получения и их терапевтическое применение описаны, например, в US №№5208020, 5416064 и ЕР 0425235 В1, содержание которых специально включено в настоящее описание в качестве ссылки. У Liu и др., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93, 1996, cc. 8618-8623 описаны иммуноконъюгаты, которые содержат майтанзиноид, обозначенный как DM1, сцепленный с моноклональным антителом С242 против человеческого колоректального рака. Установлено, что конъюгат обладает высокой цитотоксичностью в отношении клеток рака ободочной кишки в культуре и противоопухолевой активностью in vivo при анализе роста опухоли. У Chari и др., Cancer Research 52, 1992, сс. 127-131 описаны иммуноконъюгаты, в которых майтанзиноид конъюгирован через дисульфидный линкер с мышиным антителом А7, связывающимся с антигеном, который находится на клетках человеческой линии рака ободочной кишки, или с другим мышиным моноклональным антителом ТА.1, которое связывается с онкогеном HER-2/neu. Цитотоксичность конъюгата TA.l-майтансоноид тестировали in vitro с использованием человеческой линии клеток рака молочной железы SK-BR-3, в которой уровень экспрессии составляет 3×105 поверхностного антигена HER-2 на клетку. При использовании конъюгата с лекарственным средством была достигнута цитотоксичность, аналогичная токсичности лекарственного средства, содержащего свободный майтанзиноид, которую можно повышать, увеличивая количество молекул майтанзиноида на молекулу антитела. Установлено, что конъюгат А7-майтанзиноид обладает пониженной системной цитотоксичностью в отношении мышей.
Конъюгаты антитело к СD22-майтанзиноид, предназначенные для объединения с антителом к CD20, указанным в настоящем описании, получали путем химического сшивания антитела с молекулой майтанзиноида без заметного снижения биологической активности и антитела, и молекулы майтанзиноида (см., например, US №5208020, описание которого специально включено в настоящее описание в качестве ссылки). Установлено, что конъюгирование в среднем 3-4 молекул майтанзиноида с молекулой антитела позволяет эффективно повышать цитотоксичность в отношении клеток-мишеней без отрицательного воздействия на функцию или растворимость антитела, хотя, как ожидается, применение даже одной молекулы токсина/молекулу антитела должно приводить к повышению цитотоксичности по сравнению с использованием «оголенного» антитела. Майтанзиноиды хорошо известны в данной области и их можно синтезировать с помощью известных методов или выделять из природных источников. Пригодные майтанзиноиды описаны, например, в US №5208020, а также в других патентах и в непатентных публикациях, процитированных выше. Предпочтительными майтанзиноидами являются майтанзинол и аналоги майтанзинола, модифицированные в ароматическом кольце или в других положениях молекулы майтанзинола, например, различные сложные эфиры майтанзинола.
В данной области известно много линкерных групп, пригодных для создания конъюгатов антитело-майтанзиноид, в том числе, например, группы, описанные в US №№5208020, 6441163 или ЕР 0425235 В1, у Chari и др., Cancer Research 52, 1992, сс. 127-131 и US №2005/0169933 А1, описание которых специально включено в настоящее описание в качестве ссылки. Конъюгаты антитело-майтанзиноид, которые содержат в качестве линкера SMCC, можно получать согласно методу, описанному в заявке на патент US №11/141344, зарегистрированной 31 мая 2005 г., озаглавленной «Конъюгаты антитело-лекарственное средство и способы получения». Линкерные группы включают дисульфидные группы, тиоэфирные группы, неустойчивые в кислой среде группы, фотолабильные группы, чувствительные к действию пептидаз группы или чувствительные к действию эстераз группы, которые описаны в вышеперечисленных патентах. Известны и другие линкерные группы, и они приведены в качестве примеров в настоящем описании.
Конъюгаты антитела и майтанзиноида можно создавать с помощью разнообразных бифункциональных сшивающих белки агентов, таких как N-сукцинимидил-3-(2-пиридилдитио)пропионат (SPDP), сукцинимидил-4-(N-малеимидометил)циклогексан-1-карбоксилат, иминотиолан (IT), бифункциональные производные сложных имидоэфиров (такие как диметиладипимидат-HCl), активные сложные эфиры (такие как дисукцинимидилсуберат), альдегиды (такие как глутаровый альдегид, бисазидопроизводные (такие как бис(пара-азидобензоил)гександиамин), производные бисдиазония (такие как бис(пара-диазонийбензоил)этилендиамин), диизоцианаты (такие как толуол-2,6-диизоциант), и активные бис-соединения фтора (такие как 1,5-дифтор-2,4-динитробензол). Особенно предпочтительными сшивающими агентами, которые участвуют в образовании дисульфидного мостика, являются М-сукцинимидил-3-(2-пиридилдитио)пропионат (SPDP) (Carlsson и др, Biochem. J. 173, 1978, сс.723-737) и N-сукцинимидил-4-(2-пиридилтио)пентаноат (SPP).
Линкер можно присоединять к молекуле майтанзиноида в различных положениях в зависимости от типа связи. Например, сложноэфирную связь можно получать путем взаимодействия с гидроксильной группой с использованием общепринятых методов сочетания. Реакция может иметь место в положении С-3, несущем гидроксильную группу, в положении С-14, которое модифицировано гидроксиметилом, в положении С-15, которое модифицировано гидроксильной группой, и в положении С-20, несущем гидроксильную группу. В предпочтительном варианте осуществления изобретения связь создают в положении С-3 майтанзинола или аналога майтанзинола.
В одном из вариантов осуществления изобретения любое из антител, предлагаемых в изобретении (полноразмерное или фрагмент), конъюгируют с одной или несколькими молекулами майтанзиноида. В одном из вариантов иммуноконъюгата цитотоксический агент D представляет собой майтанзиноид DM1. В одном из вариантов иммуноконъюгата линкер представляет собой SMCC. В одном из вариантов конъюгата антитело-линкер-лекарственное средство, предназначенного для объединения с антителом к CD20, представленном в настоящем описании, конъюгат антитело-линкер-лекарственное средство, антитело представляет собой антитело к CD22, представленное в настоящем описании, с которым ковалентно связан цитотоксический агент DM1 через линкер SMCC.
Ауристатины и долостатины
В некоторых вариантах осуществления изобретения иммуноконъюгат содержит антитело, предлагаемое в изобретении, конъюгированное с долостатинами или пептидными аналогами и производными долостатина, ауристатинами (US №№5635483; 5780588). Установлено, что долостатины и ауристатины оказывают воздействие на динамику микротрубочек, гидролиз ГТФ и деление ядер и клеток (Woyke и др. Antimicrob. Agents and Chemother. 45(12), 2001, cc. 3580-3584) и обладают противораковой (US №5663149) и фунгицидной активностью (Pettit и др. Antimicrob. Agents Chemother. 42, 1998, cc. 2961-2965). Фрагмент, представляющий собой долостатиновое или ауристатиновое лекарственное средство, можно присоединять к антителу через N-(амино)-конец или С-(карбоксильный)-конец пептидного фрагмента лекарственного средства (WO 02/088172).
Приведенные в качестве примера варианты ауристатина включают связанные на N-конце монометилауристатиновые фрагменты лекарственных средств DE и DF, описанные у Senter и др., Proceedings of the American Association for Cancer Research, т.45, реферат №623, презентация от 28 марта 2004 г., публикация специально полностью включена в настоящее описании в качестве ссылки.
Приведенным в качестве примера вариантом ауристатина является ММАЕ (в формуле волнистой линией обозначена ковалентная связь с линкером (L) конъюгата антитело-лекарственное средство).
Другим приведенным в качестве примера вариантом ауристатина является MMAF (в формуле волнистой линией обозначена ковалентная связь с линкером (L) конъюгата антитело-лекарственное средство, US №2005/0238649):
Другие приведенные в качестве примера варианты, содержащие ММАЕ или MMAF и различные линкерные компоненты (указанные ниже в настоящем описании), имеют следующие структуры и сокращенные названия (в которых Аb обозначает антитело и р обозначает число от 1 до примерно 8):
Как правило, пептидные фрагменты лекарственной субстанции можно получать путем образования пептидной связи между двумя или большим количеством аминокислот и/или пептидных фрагментов. Такие пептидные связи можно получать, например, согласно методу синтеза в жидкой фазе (см. «The Peptides», изд-во Academic Press, т. 1, 1965, cc. 76-136), который хорошо известен в области химии пептидов. Фрагменты ауристатиновых/долостатиновых лекарственных средств можно получать с помощью методов, описанных в: US №5635483; US №5780588; у Pettit и др. J. Am. Chem. Soc. 111, 1989, cc. 5463-5465; Pettit и др. Anti-Cancer Drug Design 13, 1998, cc. 243-277; Petti, G.R. и др. Synthesis, 1996, cc. 719-725; Pettit и др. J. Chem. Soc. Perkin Trans. 15, 1996, cc. 859-863 и DoroninaNat Biotechnol 21(7), 2003, cc. 778-784.
Калихеамицин
В других вариантах осуществления изобретения иммуноконъюгат содержит антитело, предлагаемое в изобретении, конъюгированное с одной или несколькими молекулами калихеамицина. Представители семейства калихеамициновых антибиотиков в субпикомолярных концентрациях обладают способностью вызывать двухцепочечные разрывы ДНК. Получение конъюгатов калихеамицина описано в US №№5712374, 5714586, 5739116, 5767285, 5770701, 5770710, 5773001, 5877296 (все на имя фирмы American Cyanamid Company). Структурные аналоги калихеамицина, которые можно применять, включают (но не ограничиваясь ими) γ1 1, α2 1, α3 1, N-ацетил-γ1 1, PSAG и θ1 1 (Hinman и др., Cancer Research 53, 1993, сс. 3336-3342; Lode и др., Cancer Research 58, 1998, сс. 2925-2928 и перечисленные выше патенты США на имя фирмы American Cyanamid). Другим противоопухолевым лекарственным средством, которое можно включать в конъюгаты с антителом, является QFA, представляющий собой антифолат. Как калихеамицин, так и QFA, имеют внутриклеточные сайты действия и плохо проникают через плазматическую мембрану. Таким образом, проникновение этих агентов в клетку в результате опосредуемой антителом интернализации значительно повышает их цитотоксическое действие.
Другие цитотоксические агенты
Другие противоопухолевые агенты, которые можно конъюгировать с антителами, предлагаемыми в изобретении, представляют собой BCNU, стрептозоцин, винкристин и 5-фторурацил, семейство агентов, известных под общим названием LL-Е33288-комплекс, которые описаны в US №№5053394, 5770710, а также эсперамицины (US №5877296).
Обладающие ферментативной активностью токсины и их фрагменты, которые можно применять, включают цепь А дифтерийного токсина, несвязывающиеся активные фрагменты дифтерийного токсина, цепь А экзотоксина (из Pseudomonas aeruginosa), цепь А рицина, цепь А абрина, цепь А модеццина, альфа-сарцин, белки Aleurites fordii, белки диантина, белки Phytolaca americana (PAPI, РАРП и PAP-S), ингибитор из Momordica charantia, курцин, кротин, ингибитор из Sapaonaria officinalis, гелонин, митогеллин, рестриктоцин, феномицин, эномицин и трикотецены (см., например, WO 93/21232, опубликованную 28 октября 1993 г. ).
Настоящее изобретение также относится к иммуноконъюгату, включающему антитело и соединение, обладающее нуклеолитической активностью (например, рибонуклеазу или ДНК-эндонуклеазу, такую как дезоксирибонуклеаза; ДНКаза).
Для избирательного разрушения опухоли антитело может содержать атом с высоким уровнем радиоактивности. Для создания радиоконъюгированных антител можно применять широкое разнообразие радиоактивных изотопов. Их Аt211, I131, I125, Y90, Re186, Re188, Sm153, Bi212, P32, Pb212 и радиоактивные изотопы Lu. Когда конъюгат применяют для диагностики, он может содержать радиоактивный атом, применямый для сцинтиграфических исследований, например, Тс99m или I123, или спиновую метку для визуализации с использованием ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (который называют также ЯМР-томография), такую как тот же йод-123, йод-131, индий-111, фтор-19, углерод-13, азот-15, кислород-17, гадолиний, марганец или железо.
Радиоактивные или другие метки можно включать в конъюгат с использованием известных методов. Например, пептид можно получать путем биосинтеза или синтезировать посредством химического аминокислотного синтеза с использованием приемлемых аминокислотных предшественников, которые, например, содержат фтор-19 вместо водорода. Такие метки, как Тс99m или I123, Re186, Re188 и In111, можно присоединять к пептиду через остаток цистеина. Иттрий-90 можно присоединять через остаток лизина. Для включения йода-123 можно применять IODOGEN-метод (Fraker и др., Biochem. Biophys. Res. Commun. 80, 1978, cc. 49-57). В руководстве «Monoclonal Antibodies in Immunoscintigraphy» (Chatal, изд-во CRC Press, 1989) подробно описаны другие методы.
Конъюгаты, содержащие антитело и цитотоксический агент, можно создавать с помощью различных бифункциональных связывающих белки веществ, таких как N-сукцинимидил-3-(2-пиридилдитио)пропионат (SPDP), сукцинимидил-4-(N-малеимидометил)циклогексан-1-карбоксилат (SMCC), иминотиолан (IT), бифункциональные производные сложных имидоэфиров (такие как диметиладипимидат-HCl), активные сложные эфиры (такие как дисукцинимидилсуберат), альдегиды (такие как глутаровый альдегид), бисазидопроизводные (такие как бис(лара-азидобензоил)гександиамин), производные бисдиазония (такие как бис(иора-диазонийбензоил)этилендиамин), диизоцианаты (такие как толуол-2,6-диизоциант), и активные бис-соединения фтора (такие как 1,5-дифтор-2,4-динитробензол). Например, иммунотоксин рицин можно получать согласно методу, описанному у Vitetta и др., Science 238, 1987, с. 1098). Меченная с помощью С-14 1-изотиоцианатобензил-3-метилдиэтилентриаминопентауксусная кислота (MX-DTPA) является примером хелатирующего агента, который можно применять для конъюгации радиоактивного нуклеотида с антителом (см. WO 94/11026). Линкер может представлять собой «расщепляемый линкер», который облегчает высвобождение цитотоксического лекарственного средства в клетке. Например, можно применять неустойчивый в кислой среде линкер, чувствительный к действию пептидаз линкер, фотолабильный линкер, диметильный линкер или содержащий дисульфидную связь линкер (Chari и др., Cancer Research, 52, 1992, сс. 127-131; US №5208020).
К соединениям, предлагаемым в изобретении, относятся, прежде всего (но не ограничиваясь только ими), ADC, полученные с помощью следующих кросс-линкеров: BMPS, EMCS, GMBS, HBVS, LC-SMCC, MBS, МРВН, SBAP, SIA, SIAB, SMCC, SMPB, SMPH, сульфо-EMCS, сульфо-GMBS, сульфо-KMUS, сульфо-MBS, сульфо-SIAB, сульфо-SMCC и сульфо-SMPB и SVSB (сукцинимидил(4-винилсульфон)бензоат), которые имеются в продаже (например, поставляются фирмой Pierce Biotechnology, Inc., Рокфорд, шт. Иллинойс, США) (см. Справочник по применению и каталог (Applications Handbook and Catalog) 2003-2004 гг., cc. 467-498).
Получение конъюгатов антител и лекарственных средств
В конъюгатах антитело-лекарственное средство (ADC), предлагаемых в изобретении, антитело (Аb) конъюгировано с помощью линкера (L) с одним или несколькими фрагментами, представляющими собой лекарственное средство (D), так что на одно антитело приходится, например от примерно 1 до примерно 20 фрагментов, представляющих собой лекарственное средство. ADC, имеющие формулу I, можно получать несколькими путями с использованием реакций органической химии, условий и реагентов, известных специалистам в данной области, включая: (1) взаимодействие нуклеофильной группы антитела с двухвалентным линкером с образованием Ab-L с помощью ковалентной связи и последующее взаимодействие с фрагментом, представляющим собой лекарственное средство D; и (2) взаимодействие нуклеофильной группы фрагмента, представляющего собой лекарственное средство, с двухвалентным линкером с образованием D-L с помощью ковалентной связи и последующее взаимодействие с нуклеофильной группой антитела. В настоящем описании представлены другие методы получения ADC.
Линкер может содержать один или несколько линкерных компонентов. Примерами линкерных компонентов являются 6-малеимидокапроил («МС»), малеимидопропаноил («МР»), валин-цитруллин («val-cit»), аланин-фенилаланин («ala-phe»), пара-аминобензилоксикарбонил («РАВ»), N-сукцинимидил-4-(2-пиридилтио)пентаноат («SPP»), гЧ-сукцинимидил-4-(М-
малеимидометил)циклогексан-1-карбоксилат («SMCC») и N-сукцинимидил-(4-йодацетил)аминобензоат («SIAB»). В данной области известны другие линкерные компоненты, и некоторые из них представлены в настоящем описании.
В некоторых вариантах осуществления изобретения линкер может содержать аминокислотные остатки. Примерами аминокислотных линкерных компонентов являются дипептид, трипептид, тетрапептид или пентапептид. Примерами дипептидов являются: валин-цитруллин (vc или val-cit), аланин-фенилаланин (af или ala-phe). Примерами трипептидов являются: глицин-валин-цитруллин (gly-val-cit) и глицин-глицин-глицин (gly-gly-gly). Аминокислотные остатки, которые представляют собой аминокислотный линкерный компонент, включают встречающиеся в естественных условиях аминокислоты, а также минорные аминокислоты и не встречающиеся в естественных условиях аминокислотные аналоги, такие как цитруллин. Аминокислотные линкерные компоненты можно конструировать и оптимизировать с точки зрения их избирательного расщепления конкретными ферментами, например, ассоциированной с опухолью протеазой, катепсином В, С и D, или плазминовой протеазой.
Ниже приведены примеры структуры линкерного компонента (в которых волнистыми линиями обозначены сайты ковалентного связывания с другими компонентами ADC):
Дополнительные примеры структуры линкерного компонента и их сокращенные названия представлены ниже (на которых представлены антитело (Аb) и линкер и р обозначает число от 1 до примерно 8):
Нуклеофильные группы антител включают (но не ограничиваясь только ими): (I) N-концевые аминогруппы, (II) аминогруппы боковых цепей, например, лизина, (III) тиольные группы боковых цепей, например, цистеина, и (IV) гидроксильные группы или аминогруппы Сахаров, когда антитело гликозилировано. Аминогруппа, тиольная и гидроксильная группы являются нуклеофильными и обладают способностью взаимодействовать с образованием ковалентных связей с электрофильными группами на линкерных фрагментах и линкерах, включая: (I) активные сложные эфиры, такие как сложные NHS-эфиры, сложные HOBt-эфиры, галоформиаты и галоидангидриды; (II) галоидные алкилы и бензилы, такие как галоацетамиды; (III) альдегидные, кетоновые, карбоксильные и малеимидные группы. Некоторые антитела имеют восстанавливаемые межцепочечные дисульфиды, т.е. цистеиновые мостики. Антитела можно сделать реакционноспособными в отношении конъюгации с линкерами путем обработки восстановителем, таким как ДТТ (дитиотреитол). Таким образом, теоретически каждый цистеиновый мостик может образовывать два реакционноспособных тиольных нуклеофила. В антитело можно интродуцировать дополнительные нуклеофильные группы путем взаимодействия лизинов с 2-иминотиоланом (реагент Траута), приводящего к превращению амина в тиольную группу. Реакционноспособные тиольные группы можно интродуцировать в антитело (или его фрагмент) путем встраивания одного, двух, трех, четырех или большего количества остатков цистеина (например, с получением мутантных антител, содержащих один или несколько ненативных цистеиновых аминокислотных остатков).
Конъюгаты антитело-лекарственное средство, предлагаемые в изобретении, предназначенные для объединения с антителом к CD20, указанным в настоящем описании, можно получать также путем модификации антитела с помощью интродукции электофильных фрагментов, которые могут взаимодействовать с нуклеофильными заместителями на линкере или лекарственном средстве. Сахара гликозилированных антител можно окислять, например, с помощью перйодатных окислителей, с образованием альдегидных или кетоновых групп, которые могут взаимодействовать с аминогруппой линкеров или фрагментов лекарственного средства. Образовавшиеся группы, представляющие собой иминовые основания Шиффа, могут образовывать стабильную связь, или их можно восстанавливать, например, борогидридными реагентами, с образованием стабильных аминных связей. В одном из вариантов осуществления изобретения взаимодействие углеводного фрагмента гликозилированного антитела либо с галактозооксидазой, либо с мета-перйодатом натрия может приводить к образованию карбонильных (альдегидных и кетоновых) групп в белке, которые могут взаимодействовать с соответствующими группами на лекарственном средстве (Hermanson, фирма Bioconjugate Techniques). В другом варианте осуществления изобретения белки, содержащие N-концевые сериновые или треониновые остатки, можно подвергать взаимодействию с мета-перйодатом натрия с образованием альдегида на месте первой аминокислоты (Geoghegan и Stroh, Bioconjugate Chem. 3, 1992, сс. 138-146; US №5362852). Такой альдегид может вступать во взаимодействие с фрагментом, представляющим собой лекарственное средство, или линкерным нуклеофилом.
Кроме того, нуклеофильные группы на фрагменте, представляющем собой лекарственное средство, включают (но не ограничиваясь только ими): аминогруппу, тиольную, гидроксильную, гидразидную, оксимовую, гидразиновую, тиосемикарбазоновую, гидразинкарбоксилатную и арилгидразидную группы, которые обладают способностью взаимодействовать с образованием ковалентных связей с электрофильными группами на линкерных фрагментах и линкерах, включая: (I) активные сложные эфиры, такие как сложные NHS-эфиры, сложные HOBt-эфиры, галоформиаты и галоидангидриды; (II) галоидные алкилы и бензилы, такие как галоацетамиды; (III) альдегидные, кетоновые, карбоксильные и малеимидные группы.
Согласно следующему объекту изобретения антитело имеет один или несколько остатков лизина, которые можно химически модифицировать для интродукции одной или нескольких сульфгидрильных групп. Компонент, представляющий собой антитело, связывается с компонентом, представляющим собой линкер, через атом серы сульфгидрильной группы. Реагенты, которые можно применять для модификации лизина, включают (но не ограничиваясь только ими) N-сукцинимидил-S-ацетилтиоацетат (SATА) и гидрохлорид 2-иминотиолана (реагент Траута).
В другом варианте осуществления изобретения антитело может иметь одну или несколько углеводных групп, которые можно химически модифицировать так, чтобы оно имело одну или несколько сульфгидрильных групп. Компонент, представляющий собой антитело, связывается с компонентом, представляющим собой линкер, таким как удлиняющий компонент, через атом серы сульфгидрильной группы, указанной в настоящем описании.
В следующем варианте осуществления изобретения антитело может иметь одну или несколько углеводных групп, которые могут окисляться с образованием альдегидной (-СНО) группы (см., например, Laguzza и др., J. Med. Chem. 32(3), 1989, сс. 548-555). Соответствующий альдегид может образовывать связь с реакционноспособным сайтом на удлиняющем компоненте. Реакционноспособные сайты на удлиняющем компоненте могут взаимодействовать с карбонильной группой на антителе, включающей (но не ограничиваясь только ими) гидразин и гидроксиламин. Другие протоколы модификации белков с целью присоединения компонента, представляющего собой лекарственное средство, или ассоциации с ним описаны у Coligan и др., Current Protocols in Protein Science, т. 2, изд-во John Wiley & Sons, 2002, публикация включена в настоящее изобретение в качестве ссылки.
Методы конъюгации компонентов, фрагментов, представляющих собой линкер-лекарственное средство, с белками, направленными против клеток, такими как антитела, иммуноглобулины или их фрагменты, описаны, например, в US №5208020; US №6441163; WO 2005/037992; WO 2005/081711 и WO 2006/034488, которые все специально полностью включены в настоящее описание в качестве ссылки.
В альтернативном варианте слитый белок, содержащий антитело и цитотоксический агент, можно создавать, например, методами рекомбинации или пептидным синтезом. Участок ДНК может содержать соответствующие области, кодирующие две части конъюгата, которые либо являются смежными друг с другом, либо разделены областью, кодирующей линкерный пептид, которая не вызывает нарушение требуемых свойств конъюгата.
Еще в одном варианте осуществления изобретения антитело можно конъюгировать с «рецептором» (таким как стрептавидин) для того, чтобы использовать при осуществлении предварительного направленного переноса в опухоль, когда конъюгат антитело-рецептор вводят в организм пациента, после чего удаляют несвязанный конъюгат из кровотока с использованием агента, способствующего клиренсу, и затем вводят «лиганд» (например, авидин), который конъюгируют с цитотоксическим агентом (например, радионуклеотидом).
В одном из вариантов иммуноконъюгата, цитотоксический агент, D, представляет собой ауристатин формулы De или Dp
и в котором R2 и R6 каждый обозначает метил, R3 и R4 каждый обозначает изобутил, R7 обозначает втор-бутил, R8 каждый независимо друг от друга выбран из СН3, О-СН3, ОН и Н; R9 обозначает Н; R10 обозначает; Z обозначает -О- или -NH-; R11 обозначает Н, С1-С8алкил или -(СН2)2-О-(СН2)2-О-(СН2)2-О-СН3; и R18 обозначает -C(R8)2-C(R8)2-apил; и
(d) р имеет значение, находящееся в диапазоне примерно от 1 до 8.
Следующими вариантами осуществления изобретения являются также) любые из описанных выше иммуноконъюгатов. В одном из вариантов осуществления изобретения иммуноконъюгат обладает in vitro или in vivo цитолитической активностью. В одном из вариантов осуществления изобретения линкер присоединяют к антителу через тиольную группу антитела. В одном из вариантов осуществления изобретения линкер может расщепляться протеазой. В одном из вариантов осуществления изобретения линкер содержит дипептид val-cit. В одном из вариантов осуществления изобретения линкер содержит пара-аминобензильное звено. В одном из вариантов осуществления изобретения пара-аминобензильное звено расположено между лекарственным средством и сайтом расщепления протеазой в линкере. В одном из вариантов осуществления изобретения wopa-аминобензильное звено представляет собой пара-аминобензилоксикарбонил (РАВ). В одном из вариантов осуществления изобретения линкер содержит 6-малеимидокапроил. В одном из вариантов осуществления изобретения 6-малеимидокапроил расположен между антителом и сайтом расщепления протеазой в линкере. Указанные выше варианты осуществления изобретения могут присутствовать индивидуально или в любой комбинации друг с другом.
В одном из вариантов осуществления изобретения лекарственное средство выбирают из ММАЕ и MMAF. В одном из вариантов осуществления изобретения иммуноконъюгат имеет формулу
в которой Ab обозначает любое из указанных выше антител к CD22, S обозначает атом серы и р имеет значение в диапазоне от 2 до 5. В одном из вариантов осуществления изобретения иммуноконъюгат имеет формулу
в которой Аb обозначает любое из указанных выше антител к CD22, S обозначает атом серы и р имеет значение, составляющее от примерно 1 до примерно 6, от примерно 2 до примерно 5, от примерно 2 до примерно 6, от примерно 2 до примерно 4, от примерно 2 до примерно 3, от примерно 3 до примерно 4, от примерно 3 до примерно 5, от примерно 3 до примерно 6 или от примерно 4 до примерно 6.
Анализ активности in vitro, основанный на определении IC50 конъюгата антитело к CD22-лекарственное средство, предлагаемого в изобретении
«IC50» означает концентрацию конкретного соединения, требуемую для ингибирования на 50% конкретной измеряемой активности. IC50 агентов, которые ингибируют взаимодействие с CD22, можно измерять, среди прочего, согласно описанному ниже методу.
Понятие «цитотоксическая активность» относится к цитолитическому, цитостатическому или ростингибирующему действию конъюгата антитело-лекарственное средство или внутриклеточного метаболита конъюгата антитело-лекарственное средство. Цитотоксическую активность можно выражать в виде величины IC50, которая представляет собой концентрацию (молярную или массовую) на единицу объема, при которой выживает половина клеток.
Поверхностная экспрессия человеческого CD22 на нескольких клеточных линиях лимфом
Девятнадцать клеточных линий лимфом, экспрессирующих различные уровни CD22 на их поверхности, культивировали и собирали на логарифмической фазе роста. Клетки ресуспендировали в отмывочном FACS-буфере (ЗФР; 0,5% бычьего сывороточного альбумина; 0,1% азида натрия), содержащего по 100 мкг/мл нормального мышиного IgG и нормального человеческого IgG и сохраняли на льду. Примерно 1×106 клеток/100 мкл окрашивали антителом к huCD22, конъюгированным с АРС (mIgG1, клон RFB4, фирма Southern Biotech, №9361-11) или мышиным антителом IgG1-изотипа, конъюгированным с АРС (фирма BD Pharmingen, №555751), в течение 30 мин на льду. Мертвые клетки окрашивали 7-AAD (фирма BD Pharmingen, №559925). Данные получали с использованием проточного питометра BD FacsCalibur™ и анализировали с помощью программы Flow Jo™. Определяли IC50 для hul0F4v3-SMCC-DM1 или каждого свободного лекарственного средства (DM1, MMAF или ММАЕ) путем культивирования, как указано выше, клеток лимфомы, сбора культивированных клеток на логарифмической фазе роста и посева 5000 клеток в 90 мкл культуральной среды на лунку 96-луночного планшета. ADC и свободное лекарственное средство серийно разводили в диапазоне, соответствующем диапазону обнаружения (начиная с 300 мкг/мл для ADC или 90нМ для свободного лекарственного средства и осуществляя разведение до достижения практически нулевого значения в отношении анализируемой мишени). Аликвоты по 10 мкл разведенного ADC или свободного лекарственного средства добавляли с дублированием в лунки, содержащие клетки, и инкубировали в течение 3 дней при 37°С. В каждую лунку добавляли по 100 мкл реагента CellTiter Glo™ инкубировали в течение 30 мин. Определяли хемилюминисценцию и данные анализировали с помощью программы Prism™.
Олигосахаридный компонент может оказывать существенное воздействие на свойства, связанные с эффективностью терапевтического гликопротеина, включая физическую стабильность, устойчивость к действию протеаз, взаимодействия с иммунной системой, фармакокинетические свойства и специфическая биологическая активность. Указанные свойства могут зависеть не только от присутствия или отсутствия, но также от специфических структур олигосахаридов. Можно сделать некоторые обобщения зависимости между олигосахаридной структурой и функцией гликопротеина. Например, некоторые олигосахаридные структуры опосредуют быстрый клиренс гликопротеина из кровотока посредством взаимодействий со специфическими углеводсвязывающими белками, в то время как другие могут связываться антителами и запускать нежелательные иммунные реакции (Jenkins N. и др., Nature Biotechnol. 14, 1996, сс. 975-981).
Клетки млекопитающих являются предпочтительными хозяевами для производства терапевтических гликопротеинов благодаря их способности гликозилировать белки с получением наиболее приемлемой для применения на человеке формы (Cumming D.A. и др., Glycobiology 1, 1991, сс. 115-130; Jenkins N. и др., Nature Biotechnol. 14, 1996, сс. 975-981). Бактерии очень редко гликозилируют белки, и подобно другим типам обычных хозяев, таких как клетки дрожжей, нитчатых грибов, насекомых и растений, обеспечивают схемы гликозилирования, ассоциированные с быстрым клиренсом из кровотока, нежелательными иммунными взаимодействиями и в некоторых случаях пониженной биологической активностью. Среди клеток млекопитающих клетки яичника китайского хомячка (СНО) нашли наиболее широкое применение в течение двух последних десятилетий. Помимо обеспечения приемлемых схем гликозилирования эти клетки позволяют устойчиво получать генетически стабильные, высокопродуктивные клональные клеточные линии. Их можно культивировать, достигая высокой плотности, в простых биореакторах с использованием бессывороточных сред, и на их основе можно разрабатывать безопасные и воспроизводимые биопроцессы. Другими обычно применяемыми клетками животных являются клетки почки детеныша хомяка (ВНК), клетки мышиной миеломы NS0 и SP2/0. В последние годы изучали также возможность их производства в организме трансгенных животных (Jenkins N. и др., Nature Biotechnol. 14, 1996, сс. 975-981).
Все антитела содержат углеводные структуры в консервативных положениях в константных областях тяжелой цепи, при этом каждый изотип характеризуется различной организацией N-связанных углеводных структур, которые оказывают различное действие на сборку, секрецию и функциональную активность белка (Wright А. и Morrison S.L., Trends Biotech. 15, 1997, сс. 26-32).Структура присоединенного N-связанного углевода значительно варьируется в зависимости от степени процессирования и может включать имеющие высокое содержание маннозы, множество разветвлений, а также биантенные сложные олигосахариды (Wright А. и Morrison S.L., Trends Biotech. 15, 1997, сс. 26-32). Как правило, имеет место гетерогенный процессинг коровых олигосахаридных структур, присоединенных в конкретном сайте гликозилирования, в результате чего даже моноклональные антитела существует в виде нескольких гликоформ. Было установлено также, что основные различия в гликозилировании антител имеют место между клеточными линиями, и даже при выращивании данной клеточной линии в других условиях культивирования имеют место небольшие различия (Lifely M.R. и др., Glycobiology 5(8), 1995, сс. 813-22).
Одним из путей достижения значительного повышения эффективности при сохранении простого процесса производства и возможности избежать значительных нежелательных побочных действий является усиление природных опосредуемых клеткой эффекторных функций моноклональных антител путем конструирования олигосахаридного компонента согласно методу, описанному у Umana Р. и др., Nature Biotechnol., 17, 1999, сс. 176-180 и в US №6602684. Антитела IgG1-типа, представляющие собой антитела, наиболее часто используемые в иммунотерапии рака, являются гликопротеинами, которые имеют консервативный N-связанный сайт гликозилирования в положении Asn297 в каждом СН2-домене. Два сложных биантенных олигосахарида, которые присоединены к Asn297, размещаются между СН2-доменами, образуя обширные контакты с каркасом полипептида, и их наличие является существенным для способности антитела опосредовать эффекторные функции, такие как антитело-обусловленная клеточнозависимая цитотоксичность (ADCC) (Lifely M.R. и др., Glycobiology, 5, 1995, сс. 813-822; Jefferis R. и др., Immunol. Rev., 163, 1998, сс. 59-76; Wright А. и Morrison S.L., Trends Biotechnol., 15, 1997, сс. 26-32).
Ранее было установлено, что сверхэкспрессия в клетках яичника китайского хомячка (СНО) β(1,4)-N-ацетилглюкозаминилтрансферазы III («GnTIII»), гликозилтрансферазы, катализирующей образование бисекционных олигосахаридов, существенно повышает ADCC-активность in vitro антинейробластомного химерного моноклонального антитела (chCE7), продуцируемого сконструированными клетками СНО (см. Umafia Р. и др., Nature Biotechnol., 17, 1999, сс. 176-180; и WO 1999/54342, полное содержание указанных документов включено в настоящее описание в качестве ссылки). Антитело chCE7 относится к большому классу неконыогированных моноклональных антител, которые обладают высокой аффинностью и специфичностью в отношении опухолей, но имеют слишком низкую эффективность для клинического применения при их получении в стандартных промышленных клеточных линиях, в которых отсутствует фермент GnTIII (Umana Р. и др., Nature Biotechnol., 17, 1999, сс. 176-180). Это исследование было первым, в котором установлено, что существенных повышений ADCC-активности можно достигать путем конструирования продуцирующих антитело клеток, которые экспрессируют GnTIII, что приводит также к повышению относительного содержания ассоциированных с константной областью (Fc) бисекционных олигосахаридов, включая бисекционные нефукозилированные олигосахариды, по сравнению с уровнями, характерными для встречающихся в естественных условиях антител.
Понятие «рак» в контексте настоящего описания относится к таким видам рака, как лимфомы, лимфолейкозы, рак легкого, немелкоклеточный рак легкого (NSCL), бронхоальвеолярно-клеточный рак легкого, рак кости, рак поджелудочной железы, рак кожи, рак головы или шеи, кожная или внутриглазная меланома, рак матки, рак яичника, ректальный рак, рак анальной области, рак желудка, гастральный рак, рак ободочной кишки, рак молочной железы, карцинома фаллопиевых труб, карцинома эндометрия, карцинома шейки матки, карцинома влагалища, карцинома вульвы, болезнь Ходжкина, рак пищевода, рак тонкого кишечника, рак эндокринной системы, рак щитовидной железы, рак паращитовидной железы, рак надпочечника, саркома мягкой ткани, рак мочеиспускательного канала, рак пениса, рак предстательной железы, рак мочевого пузыря, рак почки или мочеточника, почечно-клеточная карцинома, карцинома почечных лоханок, мезотелиома, печеночно-клеточный рак, билиарный рак, неоплазмы центральной нервной системы (ЦНС), опухоль позвоночника, глиома ствола головного мозга, мультиформная глиобластома, астроцитомы, шванномы, эпендимомы, медуллобластомы, менингиомы, плоскоклеточные карциномы, аденома гипофиза, в том числе устойчивые варианты любого из указанных выше видов рака или комбинации одного или нескольких из указанных выше видов рака. Согласно одному из вариантов осуществления изобретения понятие рак относится к раку, при котором происходит экспрессия CD20.
Подразумевается, что понятие «экспрессия антигена CD20» относится к значимому уровню экспрессии антигена CD20 в клетке, предпочтительно на клеточной поверхности Т- или В-клетки, более предпочтительно В-клетки опухоли или рака соответственно, предпочтительно опухоли, которая не относится к солидным опухолям. Пациентов, которые имеют «рак, при котором происходит экспрессия CD20», можно выявлять с помощью стандартных анализов, известных в данной области. Например, экспрессию антигена CD20 можно оценивать иммуногистохимическим (ИГХ) методом, FACS или путем выявления соответствующей мРНК с помощью ПЦР.
Понятие «рак, при котором происходит экспрессия СD20» в контексте настоящего описания относится ко всем видам раковых клеток, для которых характерна экспрессия антигена CD20. В контексте настоящего описания рак, при котором происходит экспрессия CD20, предпочтительно относится к лимфомам (предпочтительно В-клеточным неходжкинским лимфомам (НХЛ)) и лимфолейкозам. Указанные лимфомы и лимфолейкозы включают, например, а) фолликулярные лимфомы, б) мелкоклеточые с нерасщепленными ядрами лимфомы/лимфому Беркитта (включая эндемическую лимфому Беркитта, спорадическую лимфому Беркитта и не-беркиттовскую лимфому), в) лимфомы маргинальной зоны (включая экстранодальную В-клеточную лимфому маргинальной зоны (лимфомы лимфоидной ткани слизистых оболочек, MALT), нодальную В-клеточную лимфому маргинальной зоны и лимфому маргинальной зоны селезенки), г) лимфому из клеток зоны мантии (MCL), д) крупноклеточную лимфому (включая В-клеточную диффузную крупноклеточную лимфому (DLCL), диффузную смешанно-клеточную лимфому, иммунобластную лимфому, первичную медиастинальную В-клеточную лимфому, ангиоцентрическую лимфому-легочную В-клеточную лимфому), е) волосковоклеточный лейкоз, ж) лимфоцитарную лимфому, Вальденстрема макроглобулинемию, з) острый лимфобластный лейкоз (ALL), хронический лимфолейкоз (СLL)/мелкоклеточный лимфолейкоз (SLL), В-клеточный пролимфоцитарный лейкоз, и) неоплазмы из плазматических клеток, миеломы из плазматических клеток, множественную миелому, плазмацитому, к) болезнь Ходжкина.
Согласно одному из вариантов осуществления изобретения рак, при котором происходит экспрессия CD20, представляет собой В-клеточные неходжкинские лимфомы (НХЛ)). Согласно другому варианту осуществления изобретения рак, при котором происходит экспрессия CD20, представляет собой лимфому из клеток зоны мантии (MCL), острый лимфобластный лейкоз (ALL), хронический лимфолейкоз (CLL), В-клеточную диффузную крупноклеточную лимфому (DLCL), лимфому Беркитта, волосковоклеточный лейкоз, фолликулярную лимфому, множественную миелому, лимфому маргинальной зоны, пост-трансплантационное лимфопролиферативное нарушение (PTLD), ассоциированную с ВИЧ лимфому, Вальденстрема макроглобулинемию или первичную лимфому ЦНС.
Понятие «метод лечения» или его эквивалент применительно, например, к раку, относится к процедуре или протоколу лечения, которую/который разрабатывают с целью снижения или устранения некоторого количества раковых клеток в организме пациента или для облегчения симптомов рака. «Метод лечения» рака или другого пролиферативного нарушения не обязательно подразумевает, что раковые клетки или другие нарушения должны быть фактически элиминированы, что количество клеток или уровень нарушения фактически должны быть снижены, или что другие симптомы рака или другого нарушения фактически должны быть облегчены. Часто метод лечения рака можно осуществлять даже с небольшой вероятностью успеха, но он с учетом истории болезни пациента и оцененной перспективы выживаемости, тем не менее, как предполагается, может оказывать общее благоприятное воздействие.
Понятия «совместное применение» «введение в сочетании (комбинации)» относятся к введению указанного афукозилированного антитела к CD20 и указанного конъюгата антитело к СD22-лекарственное средство в виде двух различных препаративных форм (или в виде одной индивидуальной препаративной формы). Совместное применение может быть одновременным или последовательным в любом порядке, при этом предпочтительно существует период времени, в течение которого оба действующих вещества (или все действующие вещества) одновременно проявляют свое биологическое действие. Указанное афукозилированное антитело к CD20 и указанный конъюгат антитело к СD22-лекарственное средство совместно вводят либо одновременно, либо последовательно (например, внутривенно (i.v.) с помощью непрерывной инфузии (одной для антитела к CD20 и, как правило, еще одной для указанного конъюгата антитело к СD22-лекарственное средство; или антитело к CD20 вводят внутривенно (i.v.) с помощью непрерывной инфузии и указанный конъюгат антитело к СD22-лекарственное средство вводят орально). Когда оба терапевтических агента совместно вводят последовательно, то вводимую дозу применяют либо в один и тот же день в виде двух различных введений, либо один из агентов вводят в день 1, а второй совместно применяемый агент вводят в день 2-7, предпочтительно день 2-4. Таким образом, понятие «последовательно» означает в пределах 7 дней после введения дозы первого компонента (антитело к CD20 или конъюгат антитело к СD22-лекарственное средство), предпочтительно в пределах 4 дней после введения дозы первого компонента; а понятие «одновременно» означает в одно и то же время. Понятие «совместное применение» касательно поддерживающих доз указанного афукозилированного антитела к CD20 и конъюгата антитело к СD22-лекарственное средство означает, что поддерживающие дозы можно совместно вводить одновременно, если цикл лечения обоими лекарственными средствами пригоден для этого, например, каждую неделю. Или конъюгат антитело к СD22-лекарственное средство, вводят, например, каждый первый-третий день, а указанное афукозилированное антитело вводят каждую неделю. Или поддерживающие дозы применяют совместно последовательно либо в один день, либо в пределах нескольких дней.
Очевидно, что антитела вводят пациенту в «терапевтически эффективном количестве» (или просто в «эффективном количестве»), которое представляет собой количество соответствующего соединения или комбинации, вызывающее биологический или медицинский ответ ткани, системы, животного или человека, ожидаемый исследователем, ветеринаром, лечащим врачом или другим клиницистом.
Количество вводимых совместно афукозилированного антитела к CD20 и указанного конъюгата антитело к СD22-лекарственное средство и время совместного введения должны зависеть от типа (вид, пол, возраст, вес и т.д.) и состояния пациента, подлежащего лечению, и серьезности подлежащего лечению заболевания или состояния. Предпочтительно указанное афукозилированное антитело к CD20 и конъюгат антитело к CD22-лекарственное средство следует вводить пациенту один раз или в виде серий обработок, например, в один и тот же день или день спустя.
Если введение является внутривенным, то продолжительность начальной инфузии указанного афукозилированного антитела к CD20 и конъюгата антитело к СD22-лекарственное средство может быть длиннее, чем продолжительности последующих инфузий, например, может составлять примерно 90 мин для начальной инфузии и примерно 30 мин для последующих инфузий (если начальная инфузия хорошо переносится).
В зависимости от типа и серьезности заболевания начальная возможная доза при совместном применении обоих лекарственных средств пациенту может составлять примерно от 1 мкг/кг до 50 мг/кг (например, 0,1-20 мг/кг) для указанного афукозилированного антитела к CD20; и от 1 мкг/кг до 50 мг/кг (например, 0,1-20 мг/кг) для указанного конъюгата антитело к CD22-лекарственное средство. Согласно одному из вариантов осуществления изобретения предпочтительная доза указанного афукозилированного антитела к CD20 (предпочтительно афукозилированного гуманизированного антитела В-Ly1) должна составлять от примерно 0,05 до примерно 30 мг/кг. Так, для совместного применения пациенту можно использовать одну или несколько из следующих доз: примерно 0,5, 2,0, 4,0, 10 или 30 мг/кг (или любую их комбинацию). Согласно одному из вариантов осуществления изобретения предпочтительная доза указанного конъюгата антитело к СD22-лекарственное средство должна составлять от примерно 0,05 примерно 30 мг/кг. Так, пациенту можно вводить совместно одну или несколько доз, составляющих примерно 0,5, 2,0, 4,0, 10 или 30 мг/кг (или любую их комбинацию).
Согласно одному из вариантов осуществления изобретения для лечения указанных видов рака указанный конъюгат антитело к CD22-лекарственное средство вводят путем внутривенной инфузии, указанной выше. Вводимая путем инфузии доза составляет от примерно 1 до примерно 10000 мкг/м на дозу, как правило, из расчета одна доза в неделю, при этом в общей сложности вводят одну, две, три или четыре дозы. Альтернативно этому, дозы составляют от примерно 1 до примерно 1000 мкг/м2, примерно от 1 до примерно 800 мкг/м2, примерно от 1 до примерно 600 мкг/м2, примерно от 1 до примерно 400 мкг/м2, примерно от 10 до примерно 500 мкг/м2, примерно от 10 до примерно 300 мкг/м2, примерно от 10 до примерно 200 мкг/м2 и примерно от 1 до примерно 200 мкг/м2. Дозу можно вводить 1 раз в день, 1 раз в неделю, несколько раз в неделю, но реже, чем 1 раз в день, несколько раз в месяц, но реже, чем 1 раз в день, несколько раз в месяц, но реже, чем 1 раз в неделю, один раз в месяц или прерывисто для ослабления или облегчения симптомов заболевания. Введение может продолжаться в течение любого из указанных интервалов вплоть до достижения ремиссии опухоли или симптомов лимфомы, лейкоза, подлежащих лечению. Лечение можно продолжать после достижения ремиссии или уменьшения симптомов, если указанная ремиссия или указанное облегчение пролонгируются с помощью такого продолжающегося лечения.
В зависимости от типа (вид, пол, возраст, вес и т.д.) и состояния пациента и от типа афукозилированного антитела к CD20 доза и схема введения указанного афукозилированного антитела к CD20 может отличаться от указанных для конъюгата антитела к СD22-лекарственное средство. Например, указанное афукозилированное антитело к CD20 можно вводить, например, каждые 1-3 недели, и указанный конъюгат антитело к СD22-лекарственное средство можно вводить ежедневно или каждые 2-10 дней. Можно применять начальную более высокую ударную дозу, после чего применять одну или несколько более низких доз.
Согласно одному из вариантов осуществления изобретения предпочтительная доза указанного афукозилированного антитела к CD20 (предпочтительно афукозилированного гуманизированного антитела B-Ly1), применяемого в сочетании с указанным конъюгатом антитело к CD22-лекарственное средство, предлагаемым в изобретении, должна составлять от 800 до 1600 мг (в одном из вариантов осуществления изобретения от 800 до 1200 мг) в день 1, 8, 15 при осуществлении 3-6-недельных циклов дозирования, затем доза должна составлять от 400 до 1200 мг (в одном из вариантов осуществления изобретения от 800 до 1200 мг) в день 1 при осуществлении вплоть до девяти 3-4-недельных циклов дозирования. Наиболее предпочтительно доза представляет собой постоянную дозу 1000 мг, которую применяют для трехнедельной схемы дозирования, с возможностью применения дополнительного цикла с использованием постоянной дозы 1000 мг на второй неделе.
В следующем варианте осуществления изобретения доза указанного конъюгата антитело к СD22-лекарственное средство, применяемого в комбинации с афукозилированным антителом к CD20, предлагаемым в изобретении, составляет от примерно 1,5 до примерно 3 мг/кг при трехнедельной схеме дозирования, предпочтительно от примерно 1,7 до примерно 2,5 мг/кг, наиболее предпочтительно примерно 1,8 или примерно 2,4 мг/кг. Указанные наиболее предпочтительные дозы в настоящее время проходят испытания в клинических опытах, в которых конъюгат антитело к CD22-лекарственное средство применяют в режиме монотерапии.
В следующем варианте осуществления изобретения доза афукозилированного антитела к CD20, применяемого в комбинации с указанным конъюгатом антитело к СЭ22-лекарственное средство, предлагаемым в изобретении, представляет собой постоянную дозу, составляющую примерно 1000 мг, в день 1 (цикл 1, день 1 (C1D1)), другую постоянную дозу, составляющую примерно 1000 мг, в день 8 (C1D8) и следующую постоянную дозу, составляющую примерно 1000 мг, в день 15 (C1D15), за которой следует еще шесть постоянных доз по примерно 1000 мг указанного афукозилированного антитела к CD20 (цикл 2) каждые три недели: день 22 (C2D1), день 43 (C2D2), день 64 (C2D3), день 85 (C2D4), день 106 (C2D5) и день 127 (C2D6). В указанном варианте осуществления изобретения доза конъюгата антитело к СD22-лекарственное средство, применяемого в комбинации с афукозилированным антителом к CD20, предлагаемым в изобретении, составляет примерно 2,4 мг/кг каждые три недели или в альтернативном варианте 1,8 мг/кг каждые три недели. В указанном варианте осуществления изобретения дозирование указанного конъюгата антитело к CD22-лекарственное средство, применяемого в комбинации с афукозилированным антителом к CD20, предлагаемым в изобретении, осуществляют в день 1 (C1D1), день 22 (C2D1), день 43 (C2D2), день 64 (C2D3), день 85 (C2D4), день 106 (C2D5) и день 127 (C2D6).
Предпочтительно в описанных выше режимах дозирования афукозилированное антитело к CD20 представляет собой обинутузумаб или GA101. Предпочтительно также в описанных выше режимах дозирования указанный конъюгат антитело к СD22-лекарственное средство представляет собой анти-CD22-MC-vc-PAB-MMAE.
В изобретении предложен также способ облегчения аутоиммунного заболевания, заключающийся в том, что вводят пациенту, страдающему аутоиммунным заболеванием, в терапевтически эффективном количестве указанное афукозилированное антитело к CD20, представленное в настоящем описании, и указанный конъюгат гуманизированное антитело 10F4-лекарственное средство по одному из предыдущих вариантах осуществления изобретения. В предпочтительных вариантах осуществления изобретения антитело вводят внутривенно или подкожно. Конъюгат антитело-лекарственное средство вводят внутривенно в дозе, составляющей от примерно 1 мкг/м2 до примерно 100 мг/м2 на дозу, и в конкретном варианте осуществления изобретения доза составляет от 1 до примерно 500 мкг/м2. Дозу можно вводить один раз в день, один раз в неделю, несколько раз в неделю, но реже чем 1 раз в день, несколько раз в месяц, но реже, чем один раз в день, несколько раз в месяц, но реже, чем один раз в неделю, один раз в месяц или прерывисто, для ослабления или облегчения заболевания. Введение может продолжаться в течение любого из указанных интервалов вплоть до достижения ремиссии опухоли или ослабления симптомов аутоиммунного заболевания, подлежащего лечению. Лечение можно продолжать после достижения ремиссии или ослабления симптомов, если указанная ремиссия или указанное ослабление пролонгируются с помощью такого продолжающегося лечения.
В изобретении предложен также способ лечения В-клеточного нарушения, заключающийся в том, что вводят пациенту, страдающему В-клеточным нарушением, таким как В-клеточное пролиферативное нарушение (включая (но не ограничиваясь только ими) лимфому и лейкоз), или аутоиммунным заболеванием, в терапевтически эффективном количестве указанное афукозилированное антитело к CD20, представленное в настоящем описании, и гуманизированное антитело 10F4 по одному из предыдущих вариантах осуществления изобретения, где антитело не конъюгировано с цитотоксической молекулой или выявляемой молекулой. Антитело, как правило, следует вводить в дозах, составляющих от примерно 1 мкг/м2 до примерно 1000 мг/м2.
Рекомендованная доза может варьироваться в зависимости от того, осуществляют ли дополнительное совместное введение химиотерапевтического средства, и в зависимости от типа химиотерапевтического средства.
В одном из предпочтительных вариантов осуществления изобретения лекарственное средство можно применять для предупреждения или снижения метастазов или дальнейшей их диссеминации у пациента, страдающего раком, предпочтительно раком, при котором происходит экспрессия CD20. Лекарственное средство можно применять для удлинения продолжительности жизни указанного пациента, удлинения продолжительности жизни до прогрессирования болезни у указанного пациента, удлинения продолжительности ответа, что приводит к статистически значимому и клинически заметному улучшению состояния подвергнутого лечению пациента при оценке по продолжительности жизни, продолжительности жизни до прогрессирования болезни, уровню ответа или продолжительности ответа. В предпочтительном варианте осуществления изобретения лекарственное средство можно применять для повышения уровня ответа у группы пациентов.
В контексте настоящего изобретения для лечения рака можно применять дополнительные другие цитотоксические, химиотерапевтические или противораковые средства или соединения, повышающие эффективность указанных средств (например, цитокины), в комбинации с афукозилированным антителом к CD20 и указанным конъюгатом антитело к СD22-лекарственное средство. Указанные молекулы должны присутствовать в комбинации в количествах, эффективных для поставленных целей. Согласно одному из вариантов осуществления изобретения лечение с использованием указанного афукозилированного антитела к CD20 в комбинации с указанным конъюгатом антитело к СD22-лекарственное средство осуществляют без применения указанных дополнительных цитотоксических, химиотерапевтических или противораковых средств или соединений, повышающих эффективность указанных средств.
Такие средства представляют собой, например, алкилирующие агенты или агенты, обладающие алкилирующей активностью, такие как циклофосфамид (СТХ; например, Cytoxan®), хлорамбуцил (CHL; например, leukeran®), цисплатин (CisP; например, platinol®), бусульфан (например, myleran®), мелфалан, кармустин (BCNU), стрептозотоцин, триэтиленмеламин (ТЕМ), митомицин С, и т.п.; антиметаболиты, такие как метотрексат (МТХ), этопозид (VP16; например, vepesid®), 6-меркаптопурин (6МР), 6-тиогуанин (6TG), цитарабин (Ara-C), 5-фторурацил (5-FU), капецитабин (например, Xeloda®), дакарбазин (DTIC) и т.п.; антибиотики, такие как актиномицин D, доксорубицин (DXR; например, adriamycin®), даунорубицин (дауномицин), блеомицин, митрамицин и т.п.; алкалоиды, такие как алкалоиды барвинка, такие как винкристин (VCR), винбластин и т.п.; и другие противоопухолевые агенты, такие как паклитаксел (например, taxol®) и производные паклитаксела, цитостатические агенты, глюкокортикоиды, такие как дексаметазон (DEX; например, decadron®) и кортикостероиды, такие как преднизон, ингибиторы нуклеозидных ферментов, такие как гидроксимочевина, истощающие аминокислоты ферменты, такие как аспарагиназа, лейковорин и другие производные фолиевой кислоты, и аналогичные другие противоопухолевые агенты. В качестве дополнительных средств можно применять также следующие агенты: арнифостин (например, ethyol®), дактиномицин, мехлоретамин (азотный аналог горчичного газа), стрептозоцин, циклофосфамид, ломустин (CCNU), доксорубицин липо (например, doxil®), гемцитабин (например, gemzar®), даунорубицин липо (например, daunoxome®), прокарбазин, митомицин, доцетаксел (например, taxotere®), альдеслейкин, карбоплатин, оксалиплатин, кладрибин, камптотецин, СРТ 11 (иринотекан), 10-гидрокси-7-этилкамптотецин (SN38), флоксуридин, флударабин, ифосфамид, идарубицин, месну, интерферон бета, интерферон альфа, митоксантрон, топотекан, леупролид, мегестрол, мелфалан, меркаптопурин, пликамицин, митотан, пэгаспаргазу, пентостатин, пипоброман, пликамицин, тамоксифен, тенипозид, тестолактон, тиогуанин, тиотепу, урациловый аналог горчичного газа, винорелбин, хлорамбуцил. В одном из вариантов осуществления изобретения комбинированное лечение с использованием афукозилированного антитела к CD20 и указанного конъюгата антитело к СБ22-лекарственное средство осуществляют без указанных дополнительных средств.
Применение цитотоксических и противораковых средств, описанных выше, а также антипролиферативных мишеньспецифических противораковых лекарственных средств типа ингибиторов протеинкиназ, в химиотерапевтических схемах, как правило, хорошо охарактеризовано в области лечения рака, и в данном случае при их применении следует учитывать аналогичные положения касательно мониторинга толерантности и эффективности и контроля путей введения и доз с определенными корректировками. Например, фактические дозы цитотоксических агентов можно изменять в зависимости от ответа культивируемых клеток пациента, определенного с использованием методов на основе гистокультур. Как правило, дозы должны быть ниже по сравнению с количеством, в котором указанное средство применяют в отсутствии других дополнительных агентов.
Типичные дозы эффективного цитотоксического средства могут находиться в диапазонах, рекомендованных производителем, и с учетом ответов in vitro или ответов, полученных на созданных на животных моделях, их концентрацию или количество можно снижать на величину, составляющую примерно вплоть до одного порядка. Так, фактическая доза должна зависеть от рекомендаций лечащего врача, состояния пациента и эффективности терапевтического метода, определенного на основе чувствительности in vitro первичных культур злокачественных клеток или образца ткани из гистокультуры, или ответов, обнаруженных на соответствующих созданных на животных моделях.
В контексте настоящего изобретения эффективное количество ионизирующего излучения и/или радиофармацевтических средств можно применять в дополнение к комбинированному лечению рака, при котором происходит экспрессия CD20, с использованием афукозилированного антитела к CD20 и указанного конъюгата антитело к СD22-лекарственное средство. Источник излучения может быть внутренним или внешним относительно пациента, подлежащего лечению. Когда источник является внешним относительно пациента, то терапию называют наружной лучевой терапией (EBRT). Когда источник излучения является внутренним относительно пациента, то лечение обозначают как брахитерапия (ВТ). Радиоактивные атомы, которые можно применять согласно настоящему изобретению, можно выбирать из группы, включающей (но не ограничиваясь только ими) радий, цезий-137, иридий-192, америций-241, золото-198, кобальт-57, медь-67, технеций-99, йод-123, йод-131 и индий-111. Можно также метить антитело соответствующими радиоактивными изотопами. В одном из вариантов осуществления изобретения комбинированную терапию с использованием афукозилированного антитела к CD20 и указанного конъюгата антитело к CD22-лекарственное средство применяют без ионизирующего излучения.
Лучевая терапия является стандартным средством лечения для контроля нерезектабельных или неоперабельных опухолей и/или метастазов опухолей. Улучшенные результаты были получены, когда лучевую терапию объединяли с химиотерапией. Лучевая терапия основана на принципе, что высокая доза излучения, поставляемая к области-мишени, может приводить к гибели репродуктивных клеток как в опухоли, так и в здоровых тканях. Схема введения излучения, как правило, определяют в понятиях абсорбированной дозы излучения (Гр), времени и фракционирования, и ее должен тщательно подбирать онколог. Количество излучения, полученное пациентом, должно зависеть от различных обстоятельств, но двумя наиболее важными являются локализация опухоли относительно других имеющих решающее значение структур или органов в организме и степень распространения опухоли. Типичный курс лечения пациента, подвергающегося лучевой терапии, представляет собой схему лечения в течение периода времени, составляющего от 1 до 6 недель, при этом общую дозу от 10 до 80 Гр вводят пациенту в виде однократной суточной фракционированной дозы, составляющей от 1,8 до 2,0 Гр, 5 дней в неделю. В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения имеет место синергизм, когда опухоли у больных людей подвергают комбинированной терапии, предлагаемой в изобретении, и излучению. Другими словами, ингибирование роста опухолей с помощью агентов, входящих в комбинацию, предлагаемую в изобретении, повышается при объединении с излучением, необязательно в сочетании с дополнительными химиотерапевтическими или противораковыми средствами. Параметры вспомогательной лучевой терапии описаны, например, в WO 1999/60023.
Афукозилированные антитела к CD20 и/или конъюгат антитело к CD22-лекарственное средство, предлагаемый в изобретении, вводят пациенту с помощью известных методов с использованием внутривенного введения в виде болюса или непрерывной инфузии в течение определенного периода времени, с помощью внутримышечного, внутрибрюшинного, спинномозгового, подкожного, внутрисуставного, интрасиновиального или подоболочечного пути введения. В одном из вариантов осуществления изобретения антитело вводят внутривенно или подкожно.
В контексте настоящего описания понятие «фармацевтически приемлемый носитель» включает любой и все материалы, пригодные для фармацевтического введения, включая растворители, дисперсионные среды, покрытия, антибактериальные и противогрибковые агенты, придающие изотоничность и замедляющие абсорбцию агенты и другие материалы и соединения, которые являются пригодными для фармацевтического введения. За исключением случая, когда они являются несовместимыми с действующим веществом, в композициях, предлагаемых в изобретении, можно применять любые общепринятые среды или агенты. В композиции можно включать также дополнительные действующие вещества.
Фармацевтические композиции
Фармацевтические композиции можно получать обработкой антитела к CD20 и/или конъюгата антитело к СD22-лекарственное средство, предлагаемого в настоящем изобретении, в сочетании с фармацевтически приемлемыми неорганическими или органическими носителями. В качестве носителей, например, для таблеток, таблеток с покрытием, драже и твердых желатиновых капсул, можно применять лактозу, кукурузный крахмал или его производные, тальк, стеариновые кислоты или их соли и т.п. Пригодными носителями для мягких желатиновых капсул являются, например, растительные масла, воски, жиры, полутвердые и жидкие полиолы и т.п. Однако в зависимости от природы действующего вещества, как правило, для мягких желатиновых капсул носители не требуются. Приемлемыми носителями для приготовления растворов и сиропов являются, например, вода, полиолы, глицерин, растительное масло и т.п. Приемлемыми носителями для суппозиториев являются, например, встречающиеся в естественных условиях или гидрогенизированные масла, воски, жиры, полутвердые или жидкие полиолы и т.п.
Кроме того, в состав фармацевтических композиций могут входить консерванты, солюбилизаторы, стабилизаторы, смачивающие агенты, эмульгаторы, подслащивающие вещества, красители, корригенты, соли для изменения осмотического давления, буферы, маскирующие вещества или антиоксиданты. Они могут содержать также другие терапевтически эффективные субстанции.
Одним из вариантов осуществления изобретения является композиция, содержащая как указанное афукозилированное антитело к CD20 с содержанием фукозы, составляющим 60% или менее (предпочтительно афукозилированное гуманизированное антитело B-Ly1), так и конъюгат антитело к CD22-лекарственное средство, предназначенная для применения при лечении рака, прежде всего рака, при котором происходит экспрессия CD20 (предпочтительно лимфомы или лимфоцитарного лейкоза, например, В-клеточной неходжкинской лимфомы (НХЛ)).
Указанная фармацевтическая композиция может содержать также один или несколько фармацевтически приемлемых носителей.
Настоящее изобретение относится также к фармацевтической композиции, которую применяют, в частности, при раке, содержащей (I) в эффективном количестве афукозилированное антитело к CD20 с содержанием фукозы, составляющим 60% или менее (предпочтительно афукозилированное гуманизированное антитело B-Ly1), и (II) в эффективном количестве конъюгат антитело к CD22-лекарственное средство. Указанная композиция необязательно содержит фармацевтически приемлемые носители и/или эксципиенты.
Фармацевтические композиции, содержащие только афукозилированное антитело к CD20, которые применяют согласно настоящему изобретению, приготавливают для хранения путем смешения антитела, имеющего требуемую степень чистоты, необязательно в сочетании с фармацевтически приемлемыми носителями, экципиентами или стабилизаторами (Remington's Pharmaceutical Sciences, под ред. Osol А.Е., 16-е изд., 1980), в форме лиофилизированных препаративных форм или водных растворов. Пригодные носители, эксципиенты или стабилизаторы являются нетоксичными для реципиентов в применяемых дозах и концентрациях и включают буферы, такие как фосфатный, нитратный и буферы на основе других органических кислот; антиоксиданты, включая аскорбиновую кислоту и метионин; консерванты (такие как октадецилдиметилбензиламмонийхлорид; гексаметонийхлорид; бензалконийхлорид, бензетонийхлорид; фенол, бутиловый или бензиловый спирт; алкилпарабены, такие как метил- или пропилпарабен; катехол; резорцинол; циклогексанол; 3-пентанол; и мета-крезол); низкомолекулярные (состоящие менее чем примерно из 10 остатков) полипептиды; белки, такие сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины; гидрофильные полимеры, такие как поливинилпирролидон; аминокислоты, такие как глицин, глутамин, аспарагин, гистидин, аргинин или лизин; моносахариды, дисахариды и другие углеводы, включая глюкозу, маннозу или декстрины; хелатирующие агенты, такие как ЭДТК; сахара, такие как сахароза, маннит, трегалоза или сорбит; образующие соли противоионы, такие как натрий; комплексы с металлами (например, комплексы Zn-белок); и/или неионогенные поверхностно-активные вещества, такие как TWEEN™, PLURONICS™ или полиэтиленгликоль (ПЭГ).
Фармацевтические композиции конъюгатов антитело к СD22-лекарственное средство могут быть сходными с описанными выше для афукозилированного антитела к CD20.
Фармацевтические композиции низкомолекулярного конъюгата антитело к CD22-лекарственное средство включают композиции, пригодные для орального, назального, местного (включая трансбуккальное и подъязычное), ректального, вагинального и/или парентерального введения. Предпочтительно композиции могут представлять собой стандартную дозу лекарственного средства и их можно приготавливать с помощью любых методов, хорошо известных в области фармации. Количество действующего вещества, которое можно объединять с материалом носителя, с получением однократной лекарственной формы должно зависеть от хозяина, подлежащего лечению, а также конкретного пути введения. Количество действующего вещества, которое можно объединять с материалом носителя, с получением однократной лекарственной формы должно, как правило, представлять собой количество соединения формулы I, которое обеспечивает терапевтическое действие. Как правило, в пересчете на 100% указанное количество должно находиться в диапазоне от примерно 1% до примерно 99% действующего вещества, предпочтительно от примерно 5% до примерно 70%, наиболее предпочтительно от примерно 10% до примерно 30%. Методы получения указанных композиций включают стадию приведения в контакт конъюгата антитело к CD22-лекарственное средство с носителем и необязательно одним или несколькими вспомогательными ингредиентами. Как правило, фармацевтические композиции конъюгата антитело к CD22-лекарственное средство получают путем тщательного и равномерного смешения конъюгата антитело к СD22-лекарственное средство с жидкими носителями или тонко измельченными твердыми носителями или с обоими типами носителей, при необходимости с приданием продукту формы. Композиции, пригодные для орального введения, могут иметь форму капсул, облаток, саше, пилюль, таблеток, лепешек (полученных с использованием, корригентной основы, как правило, сахарозы и гуммиарабика или трагаканта), порошков, гранул или представлять собой растворы или суспензии в воде или не представляющей собой воду жидкости, или представляют собой жидкую эмульсию типа масло-вводе или вода-в-масле, или представляют собой эликсир или сироп, или представляют собой пастилки (полученные с использованием инертной основы, такой как желатин и глицерин или сахароза и гуммиарабик), и/или средство для полоскания полости рта и т.п., которые в каждом случае содержат предварительно определенное количество соединения, предлагаемого в настоящем изобретении в качестве действующего вещества. Соединение, предлагаемое в настоящем изобретении, можно вводить также в виде болюса, электуария (лекарственная кашка) или пасты.
Согласно одному из дополнительных вариантов осуществления изобретения афукозилированное антитело к CD20 и конъюгат антитело к CD22 -лекарственное средство приготавливают в виде двух различных фармацевтических композиций.
Действующие вещества можно включать в микрокапсулы, полученные, например, методом коацервации или межфазной полимеризации, например, гидроксиметилцеллюлозы, или в желатиновые микрокапсулы и поли(метилметакрилатные) микрокапсулы соответственно, в коллоидные системы для введения лекарственных средств (например, липосомы, альбуминовые микросферы, микроэмульсии, наночастицы и нанокапсулы) или в макроэмульсии. Указанные методы описаны в Remington's Pharmaceutical Sciences, под ред. Osol А.Е., 16-е изд., 1980.
Можно приготавливать препараты с замедленным высвобождением. Приемлемыми примерами препаратов с замедленным высвобождением являются полупроницаемые матрицы из твердых гидрофобные полимеров, содержащих антитело, указанные матрицы имеют форму изделий определенной конфигурации, например, пленок или микрокапсул. Примерами матриц с замедленным высвобождением являются сложные полиэфиры, гидрогели (например, поли(2-гидроксиэтилметакрилат) или поли(виниловый спирт)), полилактиды (US №3773919), сополимеры L-глутаминовой кислоты и гамма-этил-L-глутамата, неразложимый этиленвинилацетат, разложимые сополимеры молочной кислоты-гликолевой кислоты, такие как LUPRON DEPOT™ (инъецируемые микросферы, состоящие из сополимера молочной кислоты-гликолевой кислоты и леупролидацетата), и поли-D-(-)-3-гидроксимасляная кислота.
Препаративные формы, предназначенные для введения in vivo, должны быть стерильными. Для этой цели можно применять фильтрацию через стерильные фильтрующие мембраны.
Одним из вариантов осуществления изобретения является композиция, содержащая гуманизированное антитело B-Ly1, которое является афукозилированным с содержанием фукозы, составляющим 60% или менее относительно общего количества олигосахаридов (сахара) на Asn297, и конъюгат антитело к СD22-лекарственное средство, представленный в настоящем описании, которая предназначена для лечения рака.
Настоящее изобретение относится также в способу лечения рака, заключающемуся в том, что вводят пациенту, который нуждается в таком лечении, (I) в эффективном первом количестве афукозилированное антитело к CD20 с содержанием фукозы, составляющим 60% или менее (предпочтительно афукозилированное гуманизированное антитело B-Ly1), и (II) в эффективном втором количестве конъюгат антитело к СD22-лекарственное средство.
В одном из вариантов осуществления изобретение фукоза присутствует в количестве от 40% до 60%.
Предпочтительно рак представляет собой рак, при котором происходит экспрессия CD20.
Предпочтительно рак, при котором происходит экспрессия CD20, представляет собой лимфому или лимфоцитарный лейкоз.
Предпочтительно указанное афукозилированное антитело к CD20 представляет собой антитело к CD20 типа П.
Предпочтительно антитело представляет собой гуманизированное антитело B-Ly1. Предпочтительно указанное гуманизированное антитело B-Ly1 представляет собой обинутузумаб.
Предпочтительно указанный конъюгат антитело к СD22-лекарственное средство представляет собой анти-CD22-MC-vc-PAB-MMAE.
Предпочтительно указанное афукозилированное антитело к CD20 представляет собой гуманизированное антитело B-Ly1 и указанный конъюгат антитело к CD22-лекарственное средство представляет собой анти-СD22-МС-vc-РАВ-ММАЕ, и указанный рак представляет собой рак, при котором происходит экспрессия CD20, предпочтительно лимфому или лимфоцитарный лейкоз.
В контексте настоящего описания понятие «пациент» предпочтительно относится к человеку, который нуждается в лечении с использованием афукозилированного антитела к CD20 (например, к пациенту, страдающему раком, при котором происходит экспрессия CD20), для любой цели, и наиболее предпочтительно к человеку, который нуждается в указанном лечении рака или предракового состояния или повреждения. Однако понятие «пациент» можно относить также к животным кроме человека, предпочтительно млекопитающим, среди прочего, таким как собаки, кошки, лошади, коровы, свиньи, овцы и приматы кроме человека.
Изобретение относится также к афукозилированному антителу к CD20 с содержанием фукозы, составляющим 60% или менее, и конъюгату антитело к СD22-лекарственное средство, предназначенным для применения при лечении рака.
Предпочтительно указанное афукозилированное антитело к CD20 представляет собой гуманизированное антитело B-Ly1.
Предпочтительно указанный конъюгат антитело к СD22-лекарственное средство в одном из вариантов способа, предлагаемого в изобретении, представляет собой анти-CD22-MC-vc-PAB-MMAE.
Предпочтительно указанное афукозилированное антитело к CD20 представляет собой гуманизированное антитело B-Ly1 и указанный конъюгат антитело к СD22-лекарственное средство представляет собой анти-CD22-MC-vc-РАВ-ММАЕ.
Предпочтительно указанный рак представляет собой рак, при котором происходит экспрессия CD20, предпочтительно лимфому или лимфоцитарный лейкоз.
Приведенные ниже примеры и чертежи представлены с целью пояснения настоящего изобретения, истинный объем которого представлен в прилагаемой формуле изобретения. Очевидно, что в указанные процедуры можно вносить модификации без отклонения от сущности изобретения.
Экспериментальные процедуры
Основной задачей исследования было изучение действия GA101 (обинутузумаб, указанный в настоящем описании) в комбинации с конъюгатом антитело к СD22-лекарственное средство (CD22-ADC) на созданной с помощью ксенотрансплантата модели диссеминированной диффузной большой В-клеточной лимфомы (DLBCL) линии WSU-DLCL2 на трансгенных по человеческому CD16 SCID-мышах, в сравнении с монотерапией GA101, с монотерапией ритуксимабомом и терапией с использованием комбинации ритуксимаба и CD22-ADC. План опыта представлен в таблице 4.
Культивирование клеток и применение клеток
Клетки человеческой диффузной большой В-клеточной лимфомы линии WSU-DLCL исходно получали из государственного университета Уэйна (Wayne-State University) и после размножения депонировали во внутреннем банке клеток фирмы Roche Glycart. Линию опухолевый клеток культивировали общепринятым методом в среде DMEM, содержащей 10% FCS (фирма Gibco), при 37°С в насыщенной водяным паром атмосфере, содержащей 5% СО2. Пассаж 15 использовали для трансплантации в трансгенных по человеческому CD016 Scid-мышей. По 5×106 клеток, жизнеспособность которых составляла 96%, на животное инъецировали i.v. в хвостовую вену в 200 мкл среды для культивирования клеток Aim V (фирма GIBCO). Экспрессию CD20 и CD22 на клетках лимфомы линии WSU-DLCL2 подтверждали с помощью FACS. Для этой цели 0,2 млн клеток окрашивали в трех повторностях антителом к человеческому CD20, конъюгированному с РЕ (фирма BD Bioscience, №555623), антителом к человеческому CD22, конъюгированному с РЕ (фирма BD Bioscience, №337899), или применяемыми в качестве контролей изотипов мышиным IgG1 (фирма BD Bioscience, №555749) или мышиным IgG2b (фирма BD Bioscience, №555743). Измеряли средний уровень флуоресценции с помощью протокола для планшет-ридеров FACS CantoII (программа FACS Diva).
Животные
Шестьдесят самок мышей с тяжелым комбинированным иммунодефицитом с врожденным отсутствием естественных клеток-киллеров (мыши SCID CD16 tg), возраст которых при их поступлении составлял 7-8 недель (покупали у фирмы Charles River), содержали в среде, в которой отсутствовали специфические патогены, с суточным циклом 12 ч света/12 ч темноты согласно прилагаемым руководствам (GV-Solas; Felasa; TierschG). Протокол экспериментального исследования был проверен и утвержден местным ветеринарным органом, лицензия №Р2008016. После доставки животных их выдерживали в течение 1 недели, давая пройти акклиматизацию к новым условиям окружающей среды, и для обследования. Постоянный мониторинг состояния здоровья проводили на регулярной основе.
Обработка
Животных произвольно разделяли на группы при среднем уровне экспрессии CD16 на мышиных NK-клетках, составляющем 70%. Обработку начинали через 12 дней после трансплантации клеток. Терапевтические антитела GA101 и ритуксимаб и соответствующий наполнитель вводили i.v. в дни опыта 12, 19 и 26 в дозе 30 мг/кг в виде индивидуальных агентов. CD22-ADC вводили в день опыта 12 в дозе 4 мг/кг. Использовали свежеприготовленные непосредственно перед введением разведения антител из маточного раствора. Опыт завершали в день 273.
Мониторинг, критерии окончания и аутопсия
У животных ежедневно контролировали клинические симптомы и выявляли нежелательные явления. Критериями окончания опыта были видимые проявления заболевания: неопрятная шерсть, вздутый бок, затрудненное дыхание, нарушенная локомоция, HLP (паралич задней лапы). Когда удовлетворялся критерий окончания, мышей умерщвляли.
Статистическая обработка
Данные о выживаемости статистически анализировали с помощью парного теста Вилкоксона и парного логрангового теста.
Результаты
Клетки человеческой диффузной большой В-клеточной лимфомы линии WSU-DLCL2 инокулировали (5×106 клеток) в хвостовую вену трансгенных по человеческому CD16 Scid-мышей. Мышей произвольно разделяли на группы с одинаковым уровнем экспрессии CD16 на NK-клетках и обработку начинали через 12 дней после трансплантации. Конъюгат антитело к СD22-лекарственное средство вводили в день 12 в дозе 4 мг/кг, a GA101, ритуксимаб и соответствующий наполнитель вводили i.v. в дни опыта 12, 19 и 26 в дозе 30 мг/кг. Животных в контрольной группе обрабатывали ЗФР. У всех животных ежедневно контролировали клинические симптомы и выявляли нежелательные явления и умерщвляли согласно указанным критериям окончания. Опыт завершали в день 273. Данные о выживаемости представлены в виде кривой выживаемости (фиг. 1) и их статистический анализ осуществляли с использованием парного теста Вилкоксона и парного логрангового теста (фиг. 2). Для величин, обозначенных символом * на фиг. 2, характерно значимое различие. Величины медианной и общей выживаемости в разных группах обработки представлены в таблице 4 и таблице 5. При применении комбинации GA101 + CD22-ADC и ритуксимаб + CD22-ADC медианная выживаемость не была достигнута. Установлено, что все животные, которые оставались живыми в день 273, когда эксперимент завершали, не имели опухолей по данным биопсии.
Для всех групп с помощью парного теста Вилкоксона обнаружено значимое различие с обработанной наполнителем группы за исключением GA101, хотя для GA101 и ритуксимаба не обнаружено значимое различие. Для обеих комбинаций GA101 плюс CD22-ADC, а также ритуксимаб плюс CD22-ADC, с помощью парного теста Вилкоксона обнаружено существенное повышение выживаемости по сравнению с соответствующими монотерапиями. С помощью логрангового теста для комбинаций не выявлено существенное различие с монотерипией анти-CD22-ADC, однако при использовании обеих комбинаций медианная выживаемость во всех группах не была достигнута и ее не удалось проанализировать, поскольку в обработанных комбинациями GA101 плюс CD22-ADC и ритуксимаб плюс CD22-ADC группах у 6 из 10 животных не обнаружены опухоли в момент окончания эксперимента. В противоположность этому, в группах, обработанных GA101, ритуксимабом и анти-CD22-ADC в виде монотерапий, только 1, 2 и 3 животных соответственно не имели опухолей в конце эксперимента. Таким образом, комбинация GA101 и CD22-ADC и комбинация ритуксимаб и CD22-ADC обладали более высокой эффективностью по сравнению с применением соответствующих агентов в виде монотерапии с позиций общей выживаемости.
Claims (5)
1. Комбинация обинутузумаба с конъюгатом CD22 антитело - лекарственное средство, который представляет собой анти-CD22-MC-vc-PAB-MMAE, для лечения CD20 экспрессирующего рака, где анти-CD22 антитело в указанном конъюгате содержит вариабельный домен легкой цепи SEQ ID NO: 50 и вариабельный домен тяжелой цепи SEQ ID NO: 51.
2. Комбинация по п. 1, характеризующаяся тем, что CD20 экспрессирующий рак представляет собой лимфому или лимфоцитарный лейкоз.
3. Комбинация по п. 1 или 2, характеризующаяся тем, что применяют один или более дополнительных других цитотоксических, химиотерапевтических или противораковых агентов или соединения или ионизирующее излучение, которые усиливают действие таких агентов.
4. Применение комбинации обинутузумаба и конъюгата антитело к CD22 - лекарственное средство, который представляет собой анти-CD22-MC-vc-PAB-ММАЕ, для лечения CD20 экспрессирующего рака, где анти-CD22 антитело в указанном конъюгате содержит вариабельный домен легкой цепи SEQ ID NO: 50 и вариабельный домен тяжелой цепи SEQ ID NO: 51.
5. Применение комбинации по п. 4, характеризующееся тем, что применяют один или более дополнительных других цитотоксических, химиотерапевтических или противораковых агентов или соединения или ионизирующее излучение, которые усиливают действие таких агентов.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201361818810P | 2013-05-02 | 2013-05-02 | |
US61/818,810 | 2013-05-02 | ||
PCT/EP2014/058831 WO2014177617A1 (en) | 2013-05-02 | 2014-04-30 | Combination therapy of an afucosylated cd20 antibody with a cd22 antibody-drug conjugate |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2015151455A RU2015151455A (ru) | 2017-06-07 |
RU2700092C2 true RU2700092C2 (ru) | 2019-09-12 |
Family
ID=50678173
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2015151455A RU2700092C2 (ru) | 2013-05-02 | 2014-04-30 | Комбинированная терапия на основе афукозилированного антитела к cd20 в сочетании с конъюгатом антитело к cd22 - лекарственное средство |
Country Status (20)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20150010540A1 (ru) |
EP (1) | EP2992015B1 (ru) |
JP (1) | JP6207721B2 (ru) |
KR (1) | KR101817409B1 (ru) |
CN (1) | CN105143268A (ru) |
AR (1) | AR096184A1 (ru) |
AU (1) | AU2014261456B2 (ru) |
BR (1) | BR112015027474A8 (ru) |
CA (1) | CA2904040A1 (ru) |
ES (1) | ES2693370T3 (ru) |
HK (1) | HK1211962A1 (ru) |
IL (1) | IL242161B (ru) |
MX (1) | MX370829B (ru) |
MY (1) | MY192404A (ru) |
NZ (1) | NZ711867A (ru) |
PL (1) | PL2992015T3 (ru) |
RU (1) | RU2700092C2 (ru) |
SG (1) | SG11201509026VA (ru) |
WO (1) | WO2014177617A1 (ru) |
ZA (1) | ZA201506512B (ru) |
Families Citing this family (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2929565A1 (en) | 2013-12-16 | 2015-06-25 | Genentech, Inc. | 1-(chloromethyl)-2,3-dihydro-1h-benzo[e]indole dimer antibody-drug conjugate compounds, and methods of use and treatment |
CN116196414A (zh) * | 2015-05-11 | 2023-06-02 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 治疗狼疮性肾炎的组合物和方法 |
EP4252629A3 (en) | 2016-12-07 | 2023-12-27 | Biora Therapeutics, Inc. | Gastrointestinal tract detection methods, devices and systems |
EP3600416B1 (en) | 2017-03-30 | 2023-06-07 | Biora Therapeutics, Inc. | Treatment of a disease of the gastrointestinal tract with an immune modulatory agent released using an ingestible device |
CA3057749A1 (en) * | 2017-04-20 | 2018-10-25 | Adc Therapeutics Sa | Combination therapy |
US20230009902A1 (en) | 2018-06-20 | 2023-01-12 | Progenity, Inc. | Treatment of a disease or condition in a tissue orginating from the endoderm |
WO2019246312A1 (en) | 2018-06-20 | 2019-12-26 | Progenity, Inc. | Treatment of a disease of the gastrointestinal tract with an immunomodulator |
KR20210095165A (ko) | 2018-11-19 | 2021-07-30 | 프로제너티, 인크. | 바이오의약품으로 질환을 치료하기 위한 방법 및 디바이스 |
CN115666704A (zh) | 2019-12-13 | 2023-01-31 | 比奥拉治疗股份有限公司 | 用于将治疗剂递送至胃肠道的可摄取装置 |
Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2011018225A1 (en) * | 2009-08-14 | 2011-02-17 | Roche Glycart Ag | Combination therapy of an afucosylated cd20 antibody with fludarabine and/or mitoxantrone |
RU2422157C2 (ru) * | 2002-05-02 | 2011-06-27 | Уайт Холдингз Корпорейшн | Конъюгаты "производное калихеамицина-носитель" |
WO2011134899A1 (en) * | 2010-04-27 | 2011-11-03 | Roche Glycart Ag | Combination therapy of an afucosylated cd20 antibody with a mtor inhibitor |
RU2436796C2 (ru) * | 2006-05-30 | 2011-12-20 | Дженентек, Инк. | Антитела и иммуноконъюгаты и их применения |
WO2012022747A1 (en) * | 2010-08-17 | 2012-02-23 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Combination therapy of an afucosylated cd20 antibody with an anti-vegf antibody |
RU2448117C2 (ru) * | 2003-11-06 | 2012-04-20 | Сиэтл Дженетикс, Инк. | Монометилвалиновые соединения, способные образовывать конъюгаты с лигандами |
RU2010148740A (ru) * | 2008-04-30 | 2012-06-10 | Иммьюноджен, Инк. (Us) | Высокоэффективные конъюгаты и гидрофильные сшивающие агенты (линкеры) |
WO2012109624A2 (en) * | 2011-02-11 | 2012-08-16 | Zyngenia, Inc. | Monovalent and multivalent multispecific complexes and uses thereof |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1299128A2 (en) * | 2000-06-20 | 2003-04-09 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Cold anti-cd20 antibody/radiolabeled anti-cd22 antibody combination |
US8420086B2 (en) * | 2002-12-13 | 2013-04-16 | Immunomedics, Inc. | Camptothecin conjugates of anti-CD22 antibodies for treatment of B cell diseases |
RS58420B1 (sr) * | 2003-11-05 | 2019-04-30 | Roche Glycart Ag | Cd20 antitela sa povećanim afinitetom za vezivanje fc receptora i efektornom funkcijom |
AU2011255647A1 (en) * | 2010-05-18 | 2012-11-15 | Cerulean Pharma Inc. | Compositions and methods for treatment of autoimmune and other diseases |
-
2014
- 2014-04-30 NZ NZ711867A patent/NZ711867A/en not_active IP Right Cessation
- 2014-04-30 SG SG11201509026VA patent/SG11201509026VA/en unknown
- 2014-04-30 BR BR112015027474A patent/BR112015027474A8/pt not_active Application Discontinuation
- 2014-04-30 PL PL14721825T patent/PL2992015T3/pl unknown
- 2014-04-30 MY MYPI2015703897A patent/MY192404A/en unknown
- 2014-04-30 WO PCT/EP2014/058831 patent/WO2014177617A1/en active Application Filing
- 2014-04-30 EP EP14721825.9A patent/EP2992015B1/en active Active
- 2014-04-30 KR KR1020157031017A patent/KR101817409B1/ko active IP Right Grant
- 2014-04-30 AR ARP140101795A patent/AR096184A1/es unknown
- 2014-04-30 RU RU2015151455A patent/RU2700092C2/ru active
- 2014-04-30 US US14/265,857 patent/US20150010540A1/en not_active Abandoned
- 2014-04-30 CA CA2904040A patent/CA2904040A1/en not_active Abandoned
- 2014-04-30 CN CN201480023315.6A patent/CN105143268A/zh active Pending
- 2014-04-30 AU AU2014261456A patent/AU2014261456B2/en not_active Ceased
- 2014-04-30 JP JP2016511055A patent/JP6207721B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2014-04-30 ES ES14721825.9T patent/ES2693370T3/es active Active
- 2014-04-30 MX MX2015014501A patent/MX370829B/es active IP Right Grant
-
2015
- 2015-09-04 ZA ZA2015/06512A patent/ZA201506512B/en unknown
- 2015-10-19 IL IL242161A patent/IL242161B/en active IP Right Grant
- 2015-12-31 HK HK15112884.7A patent/HK1211962A1/xx unknown
-
2017
- 2017-03-07 US US15/452,577 patent/US20170306040A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2422157C2 (ru) * | 2002-05-02 | 2011-06-27 | Уайт Холдингз Корпорейшн | Конъюгаты "производное калихеамицина-носитель" |
RU2448117C2 (ru) * | 2003-11-06 | 2012-04-20 | Сиэтл Дженетикс, Инк. | Монометилвалиновые соединения, способные образовывать конъюгаты с лигандами |
RU2436796C2 (ru) * | 2006-05-30 | 2011-12-20 | Дженентек, Инк. | Антитела и иммуноконъюгаты и их применения |
RU2010148740A (ru) * | 2008-04-30 | 2012-06-10 | Иммьюноджен, Инк. (Us) | Высокоэффективные конъюгаты и гидрофильные сшивающие агенты (линкеры) |
WO2011018225A1 (en) * | 2009-08-14 | 2011-02-17 | Roche Glycart Ag | Combination therapy of an afucosylated cd20 antibody with fludarabine and/or mitoxantrone |
WO2011134899A1 (en) * | 2010-04-27 | 2011-11-03 | Roche Glycart Ag | Combination therapy of an afucosylated cd20 antibody with a mtor inhibitor |
WO2012022747A1 (en) * | 2010-08-17 | 2012-02-23 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Combination therapy of an afucosylated cd20 antibody with an anti-vegf antibody |
WO2012109624A2 (en) * | 2011-02-11 | 2012-08-16 | Zyngenia, Inc. | Monovalent and multivalent multispecific complexes and uses thereof |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
формула. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2016519125A (ja) | 2016-06-30 |
MX2015014501A (es) | 2016-02-09 |
ZA201506512B (en) | 2017-03-26 |
US20150010540A1 (en) | 2015-01-08 |
EP2992015A1 (en) | 2016-03-09 |
SG11201509026VA (en) | 2015-12-30 |
KR20150139883A (ko) | 2015-12-14 |
KR101817409B1 (ko) | 2018-01-10 |
MY192404A (en) | 2022-08-19 |
CA2904040A1 (en) | 2014-11-06 |
CN105143268A (zh) | 2015-12-09 |
HK1211962A1 (en) | 2016-06-03 |
JP6207721B2 (ja) | 2017-10-04 |
MX370829B (es) | 2020-01-08 |
US20170306040A1 (en) | 2017-10-26 |
PL2992015T3 (pl) | 2019-01-31 |
ES2693370T3 (es) | 2018-12-11 |
RU2015151455A (ru) | 2017-06-07 |
NZ711867A (en) | 2020-07-31 |
AR096184A1 (es) | 2015-12-16 |
EP2992015B1 (en) | 2018-08-29 |
BR112015027474A2 (pt) | 2017-12-05 |
AU2014261456B2 (en) | 2018-10-04 |
AU2014261456A1 (en) | 2015-09-24 |
WO2014177617A1 (en) | 2014-11-06 |
BR112015027474A8 (pt) | 2018-01-23 |
IL242161B (en) | 2019-08-29 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US11419945B2 (en) | Antigen binding proteins | |
US20210138065A1 (en) | COMBINATION THERAPY OF AN AFUCOSYLATED CD20 ANTIBODY WITH A CD79b ANTIBODY-DRUG CONJUGATE | |
RU2700092C2 (ru) | Комбинированная терапия на основе афукозилированного антитела к cd20 в сочетании с конъюгатом антитело к cd22 - лекарственное средство | |
TWI644924B (zh) | Bcma結合蛋白、其免疫偶聯物及包含其之醫藥組合物 | |
KR102357173B1 (ko) | 암을 치료하기 위한 ly75에 대한 접합 항체 | |
TW201605905A (zh) | 抗體 | |
NZ616433B2 (en) | Bcma (cd269/tnfrsf17) -binding proteins |