RU2674086C1 - Способ моделирования нейродегенеративного заболевания у половозрелых лабораторных крыс - Google Patents
Способ моделирования нейродегенеративного заболевания у половозрелых лабораторных крыс Download PDFInfo
- Publication number
- RU2674086C1 RU2674086C1 RU2018110503A RU2018110503A RU2674086C1 RU 2674086 C1 RU2674086 C1 RU 2674086C1 RU 2018110503 A RU2018110503 A RU 2018110503A RU 2018110503 A RU2018110503 A RU 2018110503A RU 2674086 C1 RU2674086 C1 RU 2674086C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- capsaicin
- days
- changes
- day
- solution
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 title claims description 16
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 title claims description 7
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 title 1
- YKPUWZUDDOIDPM-SOFGYWHQSA-N capsaicin Chemical compound COC1=CC(CNC(=O)CCCC\C=C\C(C)C)=CC=C1O YKPUWZUDDOIDPM-SOFGYWHQSA-N 0.000 claims abstract description 40
- 229960002504 capsaicin Drugs 0.000 claims abstract description 20
- 235000017663 capsaicin Nutrition 0.000 claims abstract description 20
- 241000700159 Rattus Species 0.000 claims abstract description 16
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 9
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 claims description 12
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 claims description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 238000002695 general anesthesia Methods 0.000 abstract 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 9
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 210000001152 parietal lobe Anatomy 0.000 description 6
- 210000001652 frontal lobe Anatomy 0.000 description 5
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 4
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 4
- 206010018341 Gliosis Diseases 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 3
- 230000002518 glial effect Effects 0.000 description 3
- 230000007387 gliosis Effects 0.000 description 3
- 230000000215 hyperchromic effect Effects 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 3
- ANRHNWWPFJCPAZ-UHFFFAOYSA-M thionine Chemical compound [Cl-].C1=CC(N)=CC2=[S+]C3=CC(N)=CC=C3N=C21 ANRHNWWPFJCPAZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 3
- 241000021559 Dicerandra Species 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010050789 Hypochromasia Diseases 0.000 description 2
- 235000010654 Melissa officinalis Nutrition 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 210000004720 cerebrum Anatomy 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 210000005153 frontal cortex Anatomy 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 239000000865 liniment Substances 0.000 description 2
- 230000002025 microglial effect Effects 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 230000001936 parietal effect Effects 0.000 description 2
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 208000032544 Cicatrix Diseases 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 102000006386 Myelin Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010083674 Myelin Proteins Proteins 0.000 description 1
- IUJDSEJGGMCXSG-UHFFFAOYSA-N Thiopental Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=S)NC1=O IUJDSEJGGMCXSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010053648 Vascular occlusion Diseases 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 230000006726 chronic neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 230000001447 compensatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005786 degenerative changes Effects 0.000 description 1
- 201000002491 encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- 210000000609 ganglia Anatomy 0.000 description 1
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 1
- 230000001744 histochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 210000003657 middle cerebral artery Anatomy 0.000 description 1
- 230000004776 neurological deficiency Effects 0.000 description 1
- 210000000578 peripheral nerve Anatomy 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 1
- 230000037387 scars Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- 229960003279 thiopental Drugs 0.000 description 1
- 208000021331 vascular occlusion disease Diseases 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G09—EDUCATION; CRYPTOGRAPHY; DISPLAY; ADVERTISING; SEALS
- G09B—EDUCATIONAL OR DEMONSTRATION APPLIANCES; APPLIANCES FOR TEACHING, OR COMMUNICATING WITH, THE BLIND, DEAF OR MUTE; MODELS; PLANETARIA; GLOBES; MAPS; DIAGRAMS
- G09B23/00—Models for scientific, medical, or mathematical purposes, e.g. full-sized devices for demonstration purposes
- G09B23/28—Models for scientific, medical, or mathematical purposes, e.g. full-sized devices for demonstration purposes for medicine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Mathematical Analysis (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Algebra (AREA)
- Computational Mathematics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Mathematical Optimization (AREA)
- Mathematical Physics (AREA)
- Pure & Applied Mathematics (AREA)
- Business, Economics & Management (AREA)
- Educational Administration (AREA)
- Educational Technology (AREA)
- Theoretical Computer Science (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной медицине. Вводят раствор капсаицина. Раствор капсаицина вводят под наркозом внутрибрюшинно, в суммарной дозе от 100 до 110 мг капсаицина на 1 кг массы животного, за три раза: в 1-е и 2-е сутки по 25-35 мг/кг, а на 3-и сутки - 40-45 мг/кг. Способ позволяет смоделировать у половозрелых крыс длительно текущий нейродистрофический процесс, сходный с таковым у человека, что необходимо для разработки способов лечения и оценки их эффективности. 2 пр., 1 табл.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии и фармакологии, и предназначено для моделирования нейродегенеративных процессов на лабораторных животных.
Известен способ моделирования нейродегенерации путем окклюзии средних мозговых артерий (аналог) (Tamura A, Graham DI, McCulloch J, Teasdale GM., 1981; Lopez MS, Vemuganti R., 2018), при котором окклюзия приводит к гибели части нейронов в результате инсульта, развитию глиальных реакций и рубцов, длительному состоянию неврологического дефицита. Недостатками этого способа являются: дороговизна оборудования для окклюзии сосудов, малая эффективность модели - достижение результата возможно только у 30-40% животных (остальные гибнут во время операции).
Известна модель нейродегенерации (энцефаломиелита) у мышей путем введения основного белка миелина (аналог) (Sun D.M. et al., 2001; 
B.A. et al., 2004), при которой повреждается часть нейронов, формируются специфические очаги, наблюдается диффузный нейродистрофический процесс. К недостаткам этого способа можно отнести: высокую стоимость препаратов для провокации нейродегенерации, малая эффективность модели: нейродегенеративные изменения исчезают через 2-3 недели, распределение очагов поражения непредсказуемо.
Наиболее близким аналогом к предлагаемому способу (прототипом) является способ моделирования деафферентации путем введения раствора капсаицина подкожно новорожденным крысятам (Levine JD, 1990; Mione МС, 1992). В этом способе описаны изменения в клетках чувствительных ганглиев и в миелоархитектонике периферических нервов. Введение раствора капсаицина на 3-5 сутки жизни крысы позволяет избирательно разрушить часть чувствительных нейронов.
Недостатком способа является избирательность и ограниченность использования, т.к., во-первых, дегенеративные изменения исчезают через 30-40 суток из-за компенсаторных возможностей растущего организма или медленного всасывания препарата при подкожном введении; а, во-вторых, моделируемое избирательное повреждение не имеет аналогичного нейродегенеративного заболевания у человека.
Целью предлагаемого способа моделирования нейродегенеративного заболевания у половозрелых лабораторных крыс является повышение эффективности и надежности за счет длительности сохранения вызываемых нейродегенеративных изменений.
Поставленная цель достигается тем, что раствор капсаицина вводят под наркозом внутрибрюшинно, в суммарной дозе от 100 до 110 мг капсаицина на 1 кг массы животного, за три раза: в 1-е и 2-е сутки по 25-35 мг/кг, а на 3-й сутки - 40-45 мг/кг.
Новизна предлагаемого технического решения заключается в том, что раствор капсаицина вводят под наркозом, внутрибрюшинно, в суммарной дозе от 100 до 110 мг капсаицина на 1 кг массы животного, за три раза: в 1-е и 2-е сутки по 25-35 мг/кг, а на 3-й сутки - 40-45 мг/кг.
Технические решения, имеющие признаки, совпадающие с отличительными признаками предлагаемого нами способа, не выявлены, что позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого способа критерию «изобретательский уровень».
Предлагаемый способ моделирования нейродегенеративного заболевания у половозрелых лабораторных крыс осуществляют следующим образом:
В 1-ый день лабораторной половозрелой белой крысе массой под наркозом (эфирным ингаляционным или внутримышечным) вводят внутрибрюшинно раствор, содержащий капсаицин в дозе 25-35 мг на кг массы. На 2-ой день повторно под наркозом внутрибрюшинно вводят раствор капсаицина в той же дозе: 25-35 мг/кг. На 3-ий день дозировку капсаицина повышают до 40-45 мг/кг и также вводят его раствор внутрибрюшинно под наркозом.
Исследование было выполнено на 30 белых крысах самцах линии Вистар массой 220-250 г, возраст 90-120 суток. Крыс разделяли на 3 группы: в первой группе (10 животных) материал забирали на 30 сутки после введения капсаицина, во второй группе (10 животных) материал забирали на 60 сутки, в третьей группе (10 животных) материал забирали на 90 сутки. Проводили гистологическое исследование на парафиновых срезах стандартных участков лобной и теменной долей, а также островка и гиппокампа, окрашенных тионином по Нисслю.
Через 30 суток в лобной, в теменной доле и в островке мозга крыс первой группы отмечаются очаги выраженного глиоза, нейроны в разных фазах дистрофии от обратимых изменений: вакуолизация цитоплазмы, гипохроматоз, перинуклеарное сгущение тигроида, до необратимых: гиперхромные безъядерные клетки, клетки-тени. Вовлечения в процесс оболочек не отмечается. Эти изменения характерны для хронического нейродегенеративного процесса.
Через 60 суток во всех исследованных зонах изменения сохраняются: в лобной доле, в теменной доле и в меньшей степени в островке есть признаки глиоза, разной степени дистрофии нейронов, от обратимых до необратимых.
Через 90 суток дистрофические изменения нейронов и глиоз наблюдались в коре лобной и теменной долей, в коре островка изменения отмечены лишь у 4 из 10 крыс экспериментальной группы (см. табл. 1).
Предлагаемый способ моделирования нейродегенеративного заболевания у половозрелых лабораторных крыс иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1
Лабораторной белой крысе, линии Вистар, массой 250 г, в возрасте 92 суток, под эфирным ингаляционным наркозом внутрибрюшинно вводили раствор капсаицина: в первые и вторые сутки - по 30 мг капсаицина на кг массы крысы. Затем, на третьи сутки - 40 мг/кг. Таким образом, суммарная доза капсаицина составила 100 мг/кг.
Через 30 суток для подтверждения наличия нейродегенеративного процесса под наркозом проводили интракардиальную перфузию физраствором и 4% нейтральным формалином, забирали полушария конечного мозга, фиксировали в 4% формалине 5 дней, заливали в парафин. Изготавливали срезы полушарий толщиной 7 мкм, депарафинировали, окрашивали тионином, заключали в бальзам. Полученные препараты микроскопировали. При патогистологической оценке в разных отделах полушария выявлялись группы нейронов вакуолизацией цитоплазмы, гипохромией, смещением ядер, безъядерные гиперхромные, клетки-тени (погибшие нейроны), вокруг них определялась глиальная реакция - скопление ядер микроглии. Очаги гибнущих клеток распределялись диффузно, наиболее выраженные изменения отмечались в коре лобной и теменной долей, наименее выраженные - в коре островка. При количественной оценке процент клеток с необратимыми изменениями составил в коре лобной доли 4% и с обратимыми изменениями - 16%, в коре теменной доли 8% и 15%, в коре островка - 7% и 7% соответственно. Описанные изменения характерны для нейродегенеративного процесса.
Пример 2
Лабораторной белой крысе линии Вистар массой 280 г, возраст 100 суток, под внутримышечным наркозом (тиопентал 0,1 мг/кг) вводили внутрибрюшинно в первые сутки 25 мг/кг капсаицина в 1,0 мл раствора (8 мл физ. раствора, 1 мл твин 80 и 1 мл 96 этилового спирта), на вторые сутки под наркозом 35 мг/кг, на третьи сутки под наркозом вводили 40 мг/кг. Суммарная доза 100 мг/кг
Через 60 суток под наркозом проводили интракардиальную перфузию физраствором и 4% нейтральным формалином, забирали полушария конечного мозга, фиксировали в 4% формалине 5 дней, заливали в парафин. Изготавливали срезы полушарий толщиной 7 мкм, депарафинировали, окрашивали тионином, заключали в бальзам. Полученные препараты микроскопировали.
При патогистологической оценке в разных отделах полушария выявлялись группы нейронов вакуолизацией цитоплазмы, гипохромией, смещением ядер, безъядерные гиперхромные, клетки-тени (погибшие нейроны), вокруг них определялась глиальная реакция - скопление ядер микроглии. Очаги гибнущих клеток распределялись диффузно, наиболее выраженные изменения отмечались в коре лобной и теменной долей, наименее выраженные - в коре островка. При количественной оценке процент клеток с необратимыми изменениями составил в коре лобной доли 1% и с обратимыми изменениями - 11%, в коре теменной доли 4% и 14%, в коре островка - 2% и 7% соответственно. Описанные изменения являются нейродистрофическими.
Предлагаемый способ моделирования нейродегенеративного заболевания у половозрелых лабораторных крыс осуществлен в межкафедральной гистохимической лаборатории ФГБОУ ВО ЯГМУ Минздрава России
Claims (1)
- Способ моделирования нейродегенеративного заболевания у половозрелых лабораторных крыс, заключающийся в том, что вводят раствор капсаицина, отличающийся тем, что раствор капсаицина вводят под наркозом внутрибрюшинно, в суммарной дозе от 100 до 110 мг капсаицина на 1 кг массы животного, за три раза: в 1-е и 2-е сутки по 25-35 мг/кг, а на 3-и сутки - 40-45 мг/кг.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018110503A RU2674086C1 (ru) | 2018-03-23 | 2018-03-23 | Способ моделирования нейродегенеративного заболевания у половозрелых лабораторных крыс |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018110503A RU2674086C1 (ru) | 2018-03-23 | 2018-03-23 | Способ моделирования нейродегенеративного заболевания у половозрелых лабораторных крыс |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2674086C1 true RU2674086C1 (ru) | 2018-12-04 |
Family
ID=64603779
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018110503A RU2674086C1 (ru) | 2018-03-23 | 2018-03-23 | Способ моделирования нейродегенеративного заболевания у половозрелых лабораторных крыс |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2674086C1 (ru) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4313958A (en) * | 1980-10-24 | 1982-02-02 | The Procter & Gamble Company | Method of producing analgesia |
-
2018
- 2018-03-23 RU RU2018110503A patent/RU2674086C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4313958A (en) * | 1980-10-24 | 1982-02-02 | The Procter & Gamble Company | Method of producing analgesia |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| ARNOLD G. et al. The effect of capsicain on the thermal and metabolic responses of men exposed to 38 C for 120 minutes. Wilderness and Environmental Medicine. 2000, 11, P.152-156. * |
| ПОРСЕЕВА В.В. Влияние деафферентации капсаицином на интернейроны глубокой области дормального спинного мозга белой крысы. 20 Международный междисциплинарный конгресс "Нейронаука для медицины и психологии." Судак, Крым, Россия, 1-11 июня 2016, с.326. * |
| ПОРСЕЕВА В.В. Характеристика афферентных нейронов узла спинномозгового нерва, чувствительных к капсаицину. Цитология, 2012, Т.54(12), с.887-891. * |
| ПОРСЕЕВА В.В. Характеристика афферентных нейронов узла спинномозгового нерва, чувствительных к капсаицину. Цитология, 2012, Т.54(12), с.887-891. СПИРИДОНОВ В.К. и др. Капсаицин-чувствительные нервы и окислительный процесс. Бюллетень СО РАМН, 2010, Т.30(4), с.76-81. ARNOLD G. et al. The effect of capsicain on the thermal and metabolic responses of men exposed to 38 C for 120 minutes. Wilderness and Environmental Medicine. 2000, 11, P.152-156. * |
| СПИРИДОНОВ В.К. и др. Капсаицин-чувствительные нервы и окислительный процесс. Бюллетень СО РАМН, 2010, Т.30(4), с.76-81. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Goa et al. | Ivermectin: a review of its antifilarial activity, pharmacokinetic properties and clinical efficacy in onchocerciasis | |
| CN105744932B (zh) | 用于治疗神经障碍的包含托拉塞米和巴氯芬的组合物 | |
| Davoody et al. | Conditioned place preference reveals tonic pain in an animal model of central pain | |
| Tobaldini et al. | Pain inhibits pain: an ascending-descending pain modulation pathway linking mesolimbic and classical descending mechanisms | |
| AT9895U1 (de) | Verfahren zur behandlung von viszeralem schmerz | |
| Pobbe et al. | The lateral habenula regulates defensive behaviors through changes in 5-HT-mediated neurotransmission in the dorsal periaqueductal gray matter | |
| EA037187B1 (ru) | Способ и композиция для лечения когнитивного расстройства | |
| Brown et al. | High frequency stimulation of the subthalamic nucleus acutely rescues motor deficits and neocortical movement representations following 6-hydroxydopamine administration in rats | |
| Zhang et al. | Acupuncture alleviates the affective dimension of pain in a rat model of inflammatory hyperalgesia | |
| RU2674086C1 (ru) | Способ моделирования нейродегенеративного заболевания у половозрелых лабораторных крыс | |
| RU2642961C1 (ru) | Способ профилактики ишемии головного мозга | |
| Kimura et al. | Early exposure to environmental enrichment protects male rats against neuropathic pain development after nerve injury | |
| EP1283047B1 (de) | Methode zur herstellung einer bioaktiven substanz aus blutserum | |
| CN108738345A (zh) | 试验方法 | |
| KR102009384B1 (ko) | 추간판 손상 동물모델 | |
| RU2311193C1 (ru) | Средство, обладающее ноотропной и адаптогенной активностью | |
| CN1329056C (zh) | 一种治疗肾阳不足、精血亏虚的中药组合物 | |
| Strus et al. | Study of the toxicity of drugs with sapropel extracts and the testing of the cream effectiveness | |
| JP2011511769A (ja) | 大網及びその用途 | |
| KR20110105265A (ko) | 뇌종양 영상 진단을 위한 뇌종양 유발 방법 및 그에 의한 동물 모델 | |
| FI129856B (en) | Pharmaceutical composition for treating skin burns | |
| KR102619489B1 (ko) | 폴마콕시브 및 트라마돌을 포함하는 급, 만성 통증 치료용 약제학적 조성물 | |
| Carvalho et al. | Effects of menthol on aggressive behavior in Siamese fighting fish (Betta splendens). | |
| Roth | Tamoxifen Influences on Behavior and Mood in Female Rats | |
| Qiu et al. | Combination treatment of motion sickness with scopolamine-loaded soluble microneedle patch and conventional training |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200324 |