RU2664709C2 - Способ выделения биологически активных проантоцианидинов - Google Patents
Способ выделения биологически активных проантоцианидинов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2664709C2 RU2664709C2 RU2016147208A RU2016147208A RU2664709C2 RU 2664709 C2 RU2664709 C2 RU 2664709C2 RU 2016147208 A RU2016147208 A RU 2016147208A RU 2016147208 A RU2016147208 A RU 2016147208A RU 2664709 C2 RU2664709 C2 RU 2664709C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- proanthocyanidins
- isolation
- biologically active
- methanol
- evaporated
- Prior art date
Links
- 229920002770 condensed tannin Polymers 0.000 title claims abstract description 29
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 10
- 238000002955 isolation Methods 0.000 title abstract description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 235000003095 Vaccinium corymbosum Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 235000017537 Vaccinium myrtillus Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 235000021014 blueberries Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims abstract description 4
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims abstract description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 244000077233 Vaccinium uliginosum Species 0.000 claims abstract 4
- 235000011720 Vaccinium uliginosum Nutrition 0.000 claims abstract 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract 2
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Chemical compound C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 6
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 abstract description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 abstract 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 abstract 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 abstract 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 abstract 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 abstract 1
- 229960001866 silicon dioxide Drugs 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 12
- 244000078534 Vaccinium myrtillus Species 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 4
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001536628 Poales Species 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- XMOCLSLCDHWDHP-IUODEOHRSA-N epi-Gallocatechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@H]2O)=CC(O)=C(O)C(O)=C1 XMOCLSLCDHWDHP-IUODEOHRSA-N 0.000 description 3
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 3
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N (+)-catechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N 0.000 description 2
- PFTAWBLQPZVEMU-ZFWWWQNUSA-N (+)-epicatechin Natural products C1([C@@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-ZFWWWQNUSA-N 0.000 description 2
- PFTAWBLQPZVEMU-UKRRQHHQSA-N (-)-epicatechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-UKRRQHHQSA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000756998 Alismatales Species 0.000 description 2
- 241000208828 Caprifoliaceae Species 0.000 description 2
- 241000134884 Ericales Species 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XMOCLSLCDHWDHP-UHFFFAOYSA-N L-Epigallocatechin Natural products OC1CC2=C(O)C=C(O)C=C2OC1C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 XMOCLSLCDHWDHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000011613 Pinus brutia Nutrition 0.000 description 2
- 235000004789 Rosa xanthina Nutrition 0.000 description 2
- 244000071378 Viburnum opulus Species 0.000 description 2
- 235000019013 Viburnum opulus Nutrition 0.000 description 2
- 241000219094 Vitaceae Species 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 235000021028 berry Nutrition 0.000 description 2
- ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N catechin Natural products OC1Cc2cc(O)cc(O)c2OC1c3ccc(O)c(O)c3 ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000005487 catechin Nutrition 0.000 description 2
- 229950001002 cianidanol Drugs 0.000 description 2
- LPTRNLNOHUVQMS-UHFFFAOYSA-N epicatechin Natural products Cc1cc(O)cc2OC(C(O)Cc12)c1ccc(O)c(O)c1 LPTRNLNOHUVQMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000012734 epicatechin Nutrition 0.000 description 2
- DZYNKLUGCOSVKS-UHFFFAOYSA-N epigallocatechin Natural products OC1Cc2cc(O)cc(O)c2OC1c3cc(O)c(O)c(O)c3 DZYNKLUGCOSVKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 2
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 2
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- XMOCLSLCDHWDHP-SWLSCSKDSA-N (+)-Epigallocatechin Natural products C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@@H]2O)=CC(O)=C(O)C(O)=C1 XMOCLSLCDHWDHP-SWLSCSKDSA-N 0.000 description 1
- JPFCOVZKLAXXOE-XBNSMERZSA-N (3r)-2-(3,5-dihydroxy-4-methoxyphenyl)-8-[(2r,3r,4r)-3,5,7-trihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-3,4-dihydro-2h-chromen-4-yl]-3,4-dihydro-2h-chromene-3,5,7-triol Chemical compound C1=C(O)C(OC)=C(O)C=C1C1[C@H](O)CC(C(O)=CC(O)=C2[C@H]3C4=C(O)C=C(O)C=C4O[C@@H]([C@@H]3O)C=3C=CC(O)=CC=3)=C2O1 JPFCOVZKLAXXOE-XBNSMERZSA-N 0.000 description 1
- HIXDQWDOVZUNNA-UHFFFAOYSA-N 2-(3,4-dimethoxyphenyl)-5-hydroxy-7-methoxychromen-4-one Chemical compound C=1C(OC)=CC(O)=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC=C(OC)C(OC)=C1 HIXDQWDOVZUNNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001133760 Acoelorraphe Species 0.000 description 1
- 244000144730 Amygdalus persica Species 0.000 description 1
- 241000123640 Arecales Species 0.000 description 1
- 244000223760 Cinnamomum zeylanicum Species 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 235000009917 Crataegus X brevipes Nutrition 0.000 description 1
- 235000013204 Crataegus X haemacarpa Nutrition 0.000 description 1
- 235000009685 Crataegus X maligna Nutrition 0.000 description 1
- 235000009444 Crataegus X rubrocarnea Nutrition 0.000 description 1
- 235000009486 Crataegus bullatus Nutrition 0.000 description 1
- 235000017181 Crataegus chrysocarpa Nutrition 0.000 description 1
- 235000009682 Crataegus limnophila Nutrition 0.000 description 1
- 240000000171 Crataegus monogyna Species 0.000 description 1
- 235000004423 Crataegus monogyna Nutrition 0.000 description 1
- 235000002313 Crataegus paludosa Nutrition 0.000 description 1
- 235000009840 Crataegus x incaedua Nutrition 0.000 description 1
- 241000218691 Cupressaceae Species 0.000 description 1
- HBQJTBXZMPSVBP-UHFFFAOYSA-N Cyanidine Natural products OC1=CC(=C2/Oc3cc(O)cc(O)c3C=C2O)C=CC1=O HBQJTBXZMPSVBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000618813 Dilleniales Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241001247262 Fabales Species 0.000 description 1
- 241000219427 Fagales Species 0.000 description 1
- OEIJRRGCTVHYTH-UHFFFAOYSA-N Favan-3-ol Chemical compound OC1CC2=CC=CC=C2OC1C1=CC=CC=C1 OEIJRRGCTVHYTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- 241000218194 Laurales Species 0.000 description 1
- 241000234269 Liliales Species 0.000 description 1
- 241000234435 Lilium Species 0.000 description 1
- 241001570521 Lonicera periclymenum Species 0.000 description 1
- 244000070406 Malus silvestris Species 0.000 description 1
- 241000134886 Myrtales Species 0.000 description 1
- 241000123637 Pandanales Species 0.000 description 1
- 241000218641 Pinaceae Species 0.000 description 1
- 241000218633 Pinidae Species 0.000 description 1
- 235000008331 Pinus X rigitaeda Nutrition 0.000 description 1
- 241000018646 Pinus brutia Species 0.000 description 1
- 244000038697 Potentilla palustris Species 0.000 description 1
- 235000016553 Potentilla palustris Nutrition 0.000 description 1
- 229920001991 Proanthocyanidin Polymers 0.000 description 1
- CWEZAWNPTYBADX-UHFFFAOYSA-N Procyanidin Natural products OC1C(OC2C(O)C(Oc3c2c(O)cc(O)c3C4C(O)C(Oc5cc(O)cc(O)c45)c6ccc(O)c(O)c6)c7ccc(O)c(O)c7)c8c(O)cc(O)cc8OC1c9ccc(O)c(O)c9 CWEZAWNPTYBADX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000124 Prodelphinidin Chemical group 0.000 description 1
- 229930182448 Prodelphinidin Chemical group 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000617410 Proteales Species 0.000 description 1
- 244000007021 Prunus avium Species 0.000 description 1
- 235000010401 Prunus avium Nutrition 0.000 description 1
- 235000013992 Prunus padus Nutrition 0.000 description 1
- 235000013647 Prunus pensylvanica Nutrition 0.000 description 1
- 235000006040 Prunus persica var persica Nutrition 0.000 description 1
- 241000245165 Rhododendron ponticum Species 0.000 description 1
- 241000220317 Rosa Species 0.000 description 1
- 241000109329 Rosa xanthina Species 0.000 description 1
- 241000220222 Rosaceae Species 0.000 description 1
- 241000220221 Rosales Species 0.000 description 1
- 241000134968 Sapindales Species 0.000 description 1
- 240000006394 Sorghum bicolor Species 0.000 description 1
- 235000011684 Sorghum saccharatum Nutrition 0.000 description 1
- 241000218636 Thuja Species 0.000 description 1
- 240000003243 Thuja occidentalis Species 0.000 description 1
- 235000008109 Thuja occidentalis Nutrition 0.000 description 1
- 240000001717 Vaccinium macrocarpon Species 0.000 description 1
- 241000219095 Vitis Species 0.000 description 1
- 235000009392 Vitis Nutrition 0.000 description 1
- KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N acetic acid trimethyl ester Natural products COC(C)=O KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000012675 alcoholic extract Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 230000002009 allergenic effect Effects 0.000 description 1
- 229930014669 anthocyanidin Natural products 0.000 description 1
- 235000008758 anthocyanidins Nutrition 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 235000021016 apples Nutrition 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 235000017803 cinnamon Nutrition 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 235000021019 cranberries Nutrition 0.000 description 1
- VEVZSMAEJFVWIL-UHFFFAOYSA-O cyanidin cation Chemical group [O+]=1C2=CC(O)=CC(O)=C2C=C(O)C=1C1=CC=C(O)C(O)=C1 VEVZSMAEJFVWIL-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical group 0.000 description 1
- DRNBLNIUGKCELA-UHFFFAOYSA-N ethenol hydrochloride Chemical compound C=CO.Cl DRNBLNIUGKCELA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000005835 flavan-3,4-diols Chemical class 0.000 description 1
- 229930182497 flavan-3-ol Natural products 0.000 description 1
- 125000004387 flavanoid group Chemical group 0.000 description 1
- NWKFECICNXDNOQ-UHFFFAOYSA-N flavylium Chemical compound C1=CC=CC=C1C1=CC=C(C=CC=C2)C2=[O+]1 NWKFECICNXDNOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 235000021021 grapes Nutrition 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 1
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 235000021018 plums Nutrition 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 229920002414 procyanidin Polymers 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 230000003639 vasoconstrictive effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
- A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/45—Ericaceae or Vacciniaceae (Heath or Blueberry family), e.g. blueberry, cranberry or bilberry
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D11/00—Solvent extraction
- B01D11/02—Solvent extraction of solids
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Botany (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Pyrane Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
Abstract
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой способ выделения биологически активных проантоцианидинов, характеризующийся тем, что измельченные листья голубики (Vaccinium uliginosum) экстрагируют метанолом в течение 3-х часов при температуре 30-35°С, упаривают спиртовой раствор до 1/10 первоначального объема, разбавляют 4-кратным количеством воды и экстрагируют последовательно хлороформом, эфиром и этилацетатом, после чего полученный водный раствор упаривают и хроматографируют на колонке с силикагелем с размером частиц 0,040-0,063 мм, используя в качестве элюента смесь хлористого метилена с метанолом, взятых в соотношении 1:1, и выделяют биологически активную фракцию с Rf 0,29. Изобретение позволяет усовершенствовать метод выделения определенной фракции проантоцианидинов, обладающих биологической активностью. 1 ил., 1 пр.
Description
Изобретение относится к способам выделения биологически активных веществ из растительного сырья, конкретно для получения проантоцианидинов, обладающих различной биологической активностью, и может быть использовано в медицинской, косметической и пищевой промышленности.
Проантоцианидины, известные так же, как процианидины, олигомерные проантоцианидины, лейкоцианидины, лейкоантоцианидины и конденсированные танины принадлежат к семейству флавоноидов и представляют собой олигомеры флаван-3-олов и/или флаван-3,4-диолов. В порядке возрастания степени полимеризации проантоцианидины представляют собой мономеры (катехин, эпикатехин), а также их эфиры по положению 3, олигомеры со степенью полимеризации от двух до пяти и полимеры со степенью полимеризации более шести. Проантоцианидины могут содержать в среднем от двух до 30 флаваноидных мономеров, так называемых полигидроксифлаван-3-олов, которые включают катехин, эпикатехин, галлокатехин, эпигаллокатехин и им подобные, связанные интерфлаваноидными связями между C4 и C6 или между C4 и C8. Полимеры включают димеры, тримеры, тетрамеры, пентамеры, олигомеры и длинные полимеры из флавоноидных мономерных единиц до тех пор, пока эти полимеры проявляют указанную активность.
Известно большое количество растений, содержащих проантоцианидины, и любое из этих растений может быть использовано для их получения. Проантоцианидин-содержащие растения входят в класс Coniferiae, включая растения из разряда Coniferales из семейства Pinacea (включая сосны); члены семейства Filices (включая пальмы); однодольные растения, образующие класс Arecales, включая членов семейств Pandanales, Arales, Najadales, Restonales, Poales (включая зерновые, такие как сорго, ячмень и др.), Juncalaes, Cyperales (включая кипарис), Typhales, Zingiverales, Liliales (включая лилии); двудольные растения из отрядов Laurales (включая лавровый лист, корицу), Fagales (включая дуб), Casual-males, Dilleniales, Malviales (включая хлопок), Salicales, Ericales (включая клюкву, голубику, рододендрон), Ebenales, Resales (включая розы, боярышник, шиповник, черемуху, ежевику и другие аналогичные ягоды, яблоки, персики, сливы), Fabales (включая бобовые), Myrtales, Proteales, Rhamnales (включая виноград), Sapindales, Caprifoliaceae (включая калину, жимолость и другие аналогичные ягоды). В настоящее время в качестве растительного источника для получения проантоцианидинов используют, как правило, Caprifoliaceae, включающие виды Viburnum, Rosaceae и Vitaceae, которые включают виды Vitis и хвойные семейства Pinaceae, как содержащие наибольшее количество проантоцианидинов.
В основном олигомерные проантоцианидины применяют как природные антиоксиданты, обладающие широким спектром биологической активности. Они являются не только мощными антиоксидантами и ловушками свободных радикалов (US 4797421), но еще и обладают антибактериальной (US 6210681), противоопухолевой, антивоспалительной, антиаллергенной и сосудорасслабляющей активностью. Доказана противовирусная активность проантоцианидинов, выделенных из сабельника болотного Comarum palustre L. и туи западной Thuja occidentalis L. (Вестник ВГМУ 2015, т. 14, №2, с. 107-112). Проантоцианидины ингибируют процессы перекисного окисления липидов, агрегацию тромбоцитов, снижают хрупкость и проницаемость капилляров (US 6294190), а также влияют на активность ряда ферментных систем, способствуя предотвращению или уменьшению стресс-индуцированного повреждения желудка (US 6291517). Показано, что такими свойствами обладают как индивидуальные проантоцианидины, так и их смеси, а также экстракты их содержащие, при этом использование проантоцианидинов осуществляют в различной форме в виде фармацевтической композиции, пищевых добавок и пищевых продуктов, а также напитков.
Обычно получение проантоцианидинов основано на процессе их экстракции из растительного сырья, хотя возможно получение олигомерных проантоцианидинов и путем синтеза входящих в их состав органических соединений (RU 2281943). Экстракция проантоцианидинов из растительного материала проводится различными известными методами. Например, исходный растительный материал измельчается и экстрагируется растворителем, одним или несколькими. Гидрофильные или липофильные растворители могут быть использованы отдельно, последовательно или в комбинации. Предпочтительными из таких растворителей являются вода, спирты (этанол, метанол, изопропанол), кетоны (ацетон, метилэтилкетон) и эфиры (метилацетат и этилацетат). Температура экстракции в общем от 0 до 100°C, предпочтительнее от 10 до 55°C (СА 2302743, US 5912363, US 6440471, RU 2435579, RU 2375070).
Для выделения более узких фракций олигомерных проантоцианидинов используют метод флэш-хроматографии и ВЭЖХ (US 2006073220, JAgricFoodChem, 55(17), 2007, 6970) или, например, ультрафильтрацию через поры определенного размера (US 20150313267).
В работе Takeshita М. et al. (JBiolChem, 284(3.2), 2009, 21165-21176) на примере выделения проантоцианидинов из листьев голубики показано, что методом ВЭЖХ при трехкратной последовательной хроматографии можно добиться увеличения эффективности вытяжек проантоцианидинов.
Задачей данного изобретения является усовершенствование метода выделения определенных фракций проантоцианидинов, обладающих биологической активностью. Данная задача решена применением дополнительной экстракции спиртовой вытяжки помимо хлороформа так же этилацетатом и эфиром, и подбором элюента для хроматографировании на колонке с силикагелем с размером частиц 0,040-0,063 мм.
Пример 1.
В круглодонную колбу на 1 литр загружают 50 г сухих листьев голубики измельченных до размера частиц 1-3 мм, заливают 500 мл метанола и перемешивают при температуре 30-35°C в течение 3 часов. Отфильтровывают от осадка, маточник концентрируют на РВИ до объема 50 мл, и разбавляют 200 мл воды. Полученную суспензию экстрагируют последовательно 100 мл хлороформа, 50 мл этилового эфира и 50 мл этилацетата. Отделяют взвесь на центрифуге и маточник упаривают на РВИ. Получают 9.1 г коричневого осадка, который хроматографируют на колонке 300 г силикагеля с размером частиц 0,040-0,063 мм, например, выпускаемом фирмой Merck. Выбор данного сорбента объясняется как его высокими хроматографическими свойствами, так и экономичностью использования за счет возможности его эффективной регенерации. В качестве элюента используют смесь хлористого метилена с метанолом, взятых в соотношении 1:1 (схема).
Получают 4,53 г фракции с Rf 0,29 (пластинки Merck TLC Silica gel 60 F254, элюент хлористый метилен-метанол 1:1).
Выделенная фракция идентична по Rf биологически активной фракции LC3, полученной по методике из работы Takeshita М. et al. (JBiolChem, 284(32), 2009, 21165-21176).
Подтверждением того, что выделены именно проантоцианидины, является характерная для них реакция образования антоцианидинов. Нагревание проантоцианидинов в кислых растворах (этиловый спирт, содержащий 4-7% соляной кислоты) приводит к образованию цианидина, продельфинидины соответственно образуют дельфинидин (М.Н. Запрометов. Фенольные соединения. Распространение, метаболизм и функции в растениях. Москва. «Наука», 1993. - 272 с.).
Таким образом, предложенный способ выделения проантоцианидинов позволяет получать определенную биологически активную фракцию проантоцианидинов.
Claims (1)
- Способ выделения биологически активных проантоцианидинов, характеризующийся тем, что измельченные листья голубики (Vaccinium uliginosum) экстрагируют метанолом в течение 3-х часов при температуре 30-35°С, упаривают спиртовой раствор до 1/10 первоначального объема, разбавляют 4-кратным количеством воды и экстрагируют последовательно хлороформом, эфиром и этилацетатом, после чего полученный водный раствор упаривают и хроматографируют на колонке с силикагелем с размером частиц 0,040-0,063 мм, используя в качестве элюента смесь хлористого метилена с метанолом, взятых в соотношении 1:1, и выделяют биологически активную фракцию с Rf 0,29.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016147208A RU2664709C2 (ru) | 2016-12-01 | 2016-12-01 | Способ выделения биологически активных проантоцианидинов |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016147208A RU2664709C2 (ru) | 2016-12-01 | 2016-12-01 | Способ выделения биологически активных проантоцианидинов |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2016147208A3 RU2016147208A3 (ru) | 2018-06-06 |
| RU2016147208A RU2016147208A (ru) | 2018-06-06 |
| RU2664709C2 true RU2664709C2 (ru) | 2018-08-21 |
Family
ID=62557579
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016147208A RU2664709C2 (ru) | 2016-12-01 | 2016-12-01 | Способ выделения биологически активных проантоцианидинов |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2664709C2 (ru) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999012541A1 (en) * | 1997-09-09 | 1999-03-18 | Rutgers, The State University Of New Jersey | Plant proanthocyanidin extract effective at inhibiting adherence of bacteria with p-type fimbriae to surfaces |
| RU2220172C1 (ru) * | 2002-07-17 | 2003-12-27 | Государственное образовательное учреждение Воронежская государственная технологическая академия | Способ получения антоцианового красителя из цветочного сырья |
| RU2400246C2 (ru) * | 2005-07-29 | 2010-09-27 | Индена С.П.А. | Экстракты из виноградных косточек, получаемые фракционированием на смоле |
-
2016
- 2016-12-01 RU RU2016147208A patent/RU2664709C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999012541A1 (en) * | 1997-09-09 | 1999-03-18 | Rutgers, The State University Of New Jersey | Plant proanthocyanidin extract effective at inhibiting adherence of bacteria with p-type fimbriae to surfaces |
| RU2220172C1 (ru) * | 2002-07-17 | 2003-12-27 | Государственное образовательное учреждение Воронежская государственная технологическая академия | Способ получения антоцианового красителя из цветочного сырья |
| RU2400246C2 (ru) * | 2005-07-29 | 2010-09-27 | Индена С.П.А. | Экстракты из виноградных косточек, получаемые фракционированием на смоле |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| MASAHIKO TAKESHITA "Proanthocyanidin from blueberry leaves suppresses expression of subgenomic hepatitis C virus RNA", The Journal of biological chemistry, 2009, V.284, N.32, стр.21165-21176. * |
| MASAHIKO TAKESHITA "Proanthocyanidin from blueberry leaves suppresses expression of subgenomic hepatitis C virus RNA", The Journal of biological chemistry, 2009, V.284, N.32, стр.21165-21176. ZHANG HUA "Extraction and purification of anthocyanins from the fruit residues of vaccinium uliginosum Linn", Journal Chromat. Separation Techniq.", 2013, V.4, Is.2, стр.1-5. * |
| ZHANG HUA "Extraction and purification of anthocyanins from the fruit residues of vaccinium uliginosum Linn", Journal Chromat. Separation Techniq.", 2013, V.4, Is.2, стр.1-5. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2016147208A3 (ru) | 2018-06-06 |
| RU2016147208A (ru) | 2018-06-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR101366187B1 (ko) | 프로안토시아니딘 올리고머의 제조방법 | |
| WO2007098471A2 (en) | Parthenolide free bioactive ingredients from feverfew (tanacetum parthenium) and processes for their production | |
| RU2472502C2 (ru) | Новая стандартизованная композиция, способ ее получения и применение в регрессии рнк-вирусной инфекции | |
| EA017501B1 (ru) | Способ получения экстракта клюквы, обогащенного проантоцианидинами | |
| EA030607B1 (ru) | Способ получения экстракта из растений семейства норичниковых рода пикрориза и его применение для профилактики и лечения заболеваний, вызванных днк-вирусами | |
| Azmi et al. | Purification of Xanthine oxidaseinhibitor from carica papaya leaves using reversed phase flash column chromatography (RPFCC)-high performance thin layer chromatography (HPTLC) | |
| US20090042975A1 (en) | Process For The Production Of Botanic Extracts | |
| RU2664709C2 (ru) | Способ выделения биологически активных проантоцианидинов | |
| US12011471B2 (en) | Extracts enriched with polyphenolic compounds and related methods | |
| Eo et al. | Antioxidant and anticancer activities of leaves extracts from Acer tegmentosum | |
| KR20150124140A (ko) | 뇌질환 예방 또는 치료용 조성물 및 꾸지뽕나무 유래의 신규 화합물 | |
| Shalini et al. | In-vitro antioxidant activities, phytoconsituent and toxicity evaluation of local Bougainvillea glabra bract (bunga kertas) | |
| Santos-Tierno et al. | Flavonoid content and antioxidant potential of leaf extracts of Passiflora setacea cv BRS Pérola do Cerrado, a new wild passion fruit cultivar. | |
| KR101823769B1 (ko) | 인삼 경엽 추출물의 제조 방법 | |
| Samanci et al. | Efficacy and toxicity of Anatolian propolis on healthy nasal epithelial cells. | |
| Wulansari et al. | Arginase inhibitory and antioxidant activities of Caesalpinia coriaria (Jacq.) Willd. bark extract | |
| KR101208566B1 (ko) | 산겨릅나무 추출물을 포함하는 조성물 | |
| KR20210124975A (ko) | 캐나비스 사티바(Cannabis sativa) 세포 배양물로부터 유래된 추출물의 화장용, 의약용 및 건강기능용 용도 | |
| KR20140123658A (ko) | 홍화싹 추출물을 유효성분으로 하는 항산화 및 항염증 기능성 조성물 | |
| de Freitas et al. | Bioactive proteins from Plectranthus barbatus and detection by RP-HPLC-PDA | |
| KR101328619B1 (ko) | 옻나무와 갈근 혼합추출물을 함유한 알러지 질환 예방, 치료 및 개선을 위한 조성물 | |
| Mungmee et al. | Xanthones and biphenyls from Garcinia schomburgkiana wood and their cytotoxicity | |
| Satti et al. | GC-MS analysis, antioxidant and antibacterial activity of acetone fractions obtained from Guiera Senegalensis leaves and Quercus Infectoria Nutgalls extracts | |
| TWI627279B (zh) | Method for cultivating plant callus rich in stilbene | |
| Ripon et al. | A Possible Cytoprotectivity Triggering Anti-Atherothrombosis Activity of Lantana Camera L. Methanol Extract |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20191202 |