RU2657819C1 - Средство, обладающее иммуномодулирующей активностью - Google Patents
Средство, обладающее иммуномодулирующей активностью Download PDFInfo
- Publication number
- RU2657819C1 RU2657819C1 RU2017102857A RU2017102857A RU2657819C1 RU 2657819 C1 RU2657819 C1 RU 2657819C1 RU 2017102857 A RU2017102857 A RU 2017102857A RU 2017102857 A RU2017102857 A RU 2017102857A RU 2657819 C1 RU2657819 C1 RU 2657819C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- water
- grass
- hours
- tnf
- production
- Prior art date
Links
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 title description 5
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims abstract description 42
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims abstract description 42
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims abstract description 42
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 claims abstract description 25
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 claims abstract description 25
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 claims abstract description 19
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 18
- 244000207740 Lemna minor Species 0.000 claims abstract description 17
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims abstract description 15
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 claims abstract description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 claims abstract description 12
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 claims abstract description 11
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000008213 purified water Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims abstract description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 4
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims abstract description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims abstract description 3
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 claims abstract 4
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims abstract 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims abstract 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims abstract 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 6
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 claims 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 claims 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 abstract description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 9
- 235000006439 Lemna minor Nutrition 0.000 abstract description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 8
- 235000001855 Portulaca oleracea Nutrition 0.000 abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 abstract description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 15
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 15
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 14
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 14
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 13
- 108010042708 Acetylmuramyl-Alanyl-Isoglutamine Proteins 0.000 description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 9
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 9
- BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N muramyl dipeptide Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H]1NC(C)=O BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N 0.000 description 9
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 8
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 8
- 241000339987 Lemna valdiviana Species 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 238000011161 development Methods 0.000 description 7
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 5
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 3
- 206010053613 Type IV hypersensitivity reaction Diseases 0.000 description 3
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000010287 polarization Effects 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 230000005951 type IV hypersensitivity Effects 0.000 description 3
- 208000027930 type IV hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 3
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 230000029662 T-helper 1 type immune response Effects 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 1,4-bis(2-ethylhexyl) sulfosuccinate Chemical compound CCCCC(CC)COC(=O)CC(S(O)(=O)=O)C(=O)OCC(CC)CCCC HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N D-glucopyranuronic acid Chemical compound OC1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 102000014154 Interleukin-12 Subunit p35 Human genes 0.000 description 1
- 108010011301 Interleukin-12 Subunit p35 Proteins 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 102000013967 Monokines Human genes 0.000 description 1
- 108010050619 Monokines Proteins 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 206010062106 Respiratory tract infection viral Diseases 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000005809 anti-tumor immunity Effects 0.000 description 1
- 230000006023 anti-tumor response Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000037893 chronic inflammatory disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229940097043 glucuronic acid Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 229940117681 interleukin-12 Drugs 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 210000002414 leg Anatomy 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007505 plaque formation Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 210000000457 tarsus Anatomy 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
- A61K36/888—Araceae (Arum family), e.g. caladium, calla lily or skunk cabbage
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Botany (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к применению комплекса водорастворимых полисахаридов с молекулярной массой 1151, 615 и 41 кДа, выделенных из травы водного растения ряски малой, в качестве средства для избирательной активации иммунологических реакций Th1-типа, стимуляции продукции Th1 специфических цитокинов ИЛ-12, ФНО-α и ИФН-γ. Применение комплекса водорастворимых полисахаридов с молекулярной массой 1151, 615 и 41 кДа, выделенных из травы водного растения ряски малой, в качестве средства для избирательной активации иммунологических реакций Th1-типа, стимуляции продукции Th1 специфических цитокинов ИЛ-12, ФНО-α и ИФН-γ, полученного путем экстракции травы раствором очищенной воды и концентрированной HCl pH 4,0 при нагревании на кипящей водяной бане и периодическом перемешивании, фильтровании и упаривании на роторном испарителе до 1/5 от исходного объема, при добавлении трехкратного объема 96% этанола и отстаивании с последующей фильтрацией осадка через бумажный фильтр и растворении в очищенной воде, при перемешивании на магнитной мешалке, отделении нерастворившегося остатка центрифугированием, диализировании надосадка через полупроницаемую мембрану и перемешивании на магнитной мешалке с дальнейшим замораживанием получившегося раствора и лиофильным его высушиванием при определенных условиях. Вышеописанный комплекс водорастворимых полисахаридов является эффективным в качестве средства для избирательной активации иммунологических реакций Th1-типа, стимуляции продукции Th1 специфических цитокинов ИЛ-12, ФНО-α и ИФН-γ. 7 табл., 3 пр.
Description
Изобретение относится к медицине, конкретно к фармакологии, и может быть использовано для коррекции нарушений в иммунной системе при патологических состояниях, связанных с недостаточностью Th1-зависимого типа иммунного ответа (хронические, вялотекущие и рецидивирующие инфекционные, а также онкологические заболевания).
Известно, что для развития адекватного противомикробного и противоопухолевого ответа необходима активация системы иммунитета по типу Th1 поляризации, основными характеристиками которой являются: с одной стороны, синтез характерного набора цитокинов (ИЛ-12 и ИФН-γ), а с другой, формирование характерных признаков - активация NK-клеток, продукция В-лимфоцитами антител класса IgG2a, усиление реакции гиперчувствительности замедленного типа, элиминация опухолевых клеток и защита от внутриклеточных патогенов. Основным цитокином, ответственным за формирование реакции организма в ответ на интервенцию инфекционного агента является ИЛ-12, экспрессия которого регулирует цепь врожденных реакций и определяет тип адаптивных иммунных реакций. ИЛ-12 индуцирует продукцию ИФН-γ, дифференцировку CD4+ Т-клеток в Т-хелперов 1 типа (Th1) [7]. Основными клетками-продуцентами ИЛ-12 являются дендритные клетки и макрофаги, которые также способны синтезировать и ИЛ-10 - альтернативный по функциональным свойствам цитокин, подавляющий Th1 иммунного ответа, способный угнетать воспаление и создавать условия для развития толерантности на антиген. Баланс этих двух цитокинов (ИЛ-12 и ИЛ-10) является определяющим для направления поляризации по Th1 или Th2 типу. Кроме ИЛ-12 в раннюю фазу противомикробного ответа макрофаги вырабатывают важнейший провоспалительный цитокин - фактор некроза опухоли альфа (ФНО-α). Таким образом, ИЛ-12 и ФНО-α, которые вырабатываются антигенпрезентирующими клетками, являются необходимым условием эффективного противомикробного и противоопухолевого иммунитета [9].
Одним из бурно развивающихся в последние годы направлений фармакологии является разработка таргетных фармпрепаратов, целенаправленно влияющих на те или иные звенья иммунной системы [5], что обусловило разработку большого количества препаратов. Для терапии заболеваний, обусловленных недостаточностью Th1 типа иммунного ответа, уже используются препараты, имеющие своей мишенью макрофагальные клетки. Как правило, это препараты микробного происхождения - лизаты (Бронхо-мунал, Имудон, ИРС-19) или отдельные компоненты микроорганизмов (Рибомунил, Продигиозан, Пирогенал, Нуклеинат натрия); биологически активные фрагменты клеточной стенки бактерий (Ликопид), которые могут обладать рядом нежелательных побочных эффектов [3, 6]. Поэтому создание новых совершенных препаратов, которые будут более эффективными и безопасными, чем имеющиеся средства, является важной задачей. Иммуномодуляторы растительного происхождения обладают рядом преимуществ, как то: минимальное количество побочных эффектов и противопоказаний, возможность применения в педиатрии, а также у пожилых лиц со сниженной реактивностью иммунной системы, при хронических воспалительных заболеваниях [1].
Задачей данного изобретения является расширение арсенала иммуномодулирующих средств растительного происхождения, повышение их эффективности путем избирательной стимуляции продукции макрофагами интерлейкина-12, фактора некроза опухоли-альфа и лимфоцитами интерферона-гамма.
Поставленная задача решается путем применения водорастворимых полисахаридов (ПС) с молекулярной массой 1151, 615 и 41 кДа, полученных из травы водного растения ряски малой (Lemna minor, L.), в качестве стимулятора продукции макрофагами ИЛ-12 и ФНО-α, следствием чего является активация Th1 - зависимого типа иммунного ответа.
Принципиально новым в предлагаемом изобретении является применение в качестве иммуномодулирующего средства водорастворимых ПС с молекулярными массами 1151, 615 и 41 кДа с относительным содержанием 44,11; 11,37 и 44,52% соответственно, выделенных из травы водного растения ряски малой.
Новое свойство водорастворимых ПС с молекулярной массой 1151, 615 и 41 кДа, полученных из травы водного растения ряски малой, было обнаружено в результате экспериментальных исследований и для специалиста явным образом не вытекает из уровня техники и описание этих свойств не обнаружено авторами в патентной и научно-медицинской литературе.
Поскольку известно, что полисахариды могут связываться практически со всеми рецепторами антиген-презентирующих клеток [10], в качестве иммуномодулирующего средства мы предлагаем использовать водорастворимые ПС с молекулярной массой 1151, 615 и 41 кДа, выделенные из травы водного растения ряски малой, обладающие способностью избирательной стимуляции продукции ИЛ-12, ФНО-α и ИФН-γ для коррекции нарушений в иммунной системе при патологических состояниях, связанных с недостаточностью Th1-зависимого типа иммунного ответа (хронические, вялотекущие и рецидивирующие инфекционные, а также онкологические заболевания). Кроме того, в ряде работ показано, что полисахариды растительного или микробного происхождения могут оказывать влияние на поляризацию лимфоцитов через соответствующую активацию антиген-презентирующих клеток, при этом полисахариды могут способствовать как развитию Th1, так и Th2 - зависимого иммунного ответа.
Таким образом, предлагаемое техническое решение соответствует критериям изобретения, а именно «новизна», «изобретательский уровень» и «промышленная применимость».
Изобретение будет понятно из следующего описания. Траву водного растения ряски малой заготавливали в местах естественного произрастания в середине вегетационного сезона (июнь-июль). Стандартизацию сырья проводили по общетехническим характеристикам: зольность и содержание экстрактивных веществ. Водорастворимые полисахариды выделяли из травы водного растения ряски малой по следующей методике: 20,0 г травы экстрагировали раствором 400 мл очищенной воды и 2 мл концентрированной HCl (pH4,0) при соотношении сырье : экстрагент - 1:20, при нагревании на кипящей водяной бане и периодическом перемешивании в течение 3-4 ч. После отделения частиц сырья путем фильтрования через многослойный тканевый фильтр фильтрат упаривали на роторном испарителе при температуре не более 50°C до 1/5 от исходного объема. К полученному раствору добавляли трехкратный объем 96% этанола и отстаивали 24 ч при температуре 2-4°C, затем осадок отфильтровывали через бумажный фильтр и растворяли в 100 мл очищенной воды при перемешивании на магнитной мешалке в течение 3 ч при комнатной температуре. Не растворившийся остаток, представляющий собой мельчайшие частицы сырья и денатурированный белок, отделяли центрифугированием (4000 об/мин, в течение 30 мин). Надосадок диализировали через полупроницаемую мембрану с диаметром пор 15 кДа в течение 48 ч в 50-кратном объеме очищенной воды при комнатной температуре и перемешивании на магнитной мешалке, меняя воду через 24 ч. После диализа раствор замораживали и лиофильно высушивали. Полученные образцы ПС были стандартизованы по содержанию углеводов, белка и нуклеиновых кислот (Таблица 1).
Хроматограмма силилированного образца гидролизата, полученного из травы водного растения ряски малой, показала, что полисахаридный комплекс является глюкоуронаном, состоящим из глюкозы - 35,07%, галактозы - 10,56%, ксилозы - 12,60%, глюкуроновой кислоты - 41,77%. Разделение проводили на газовом хроматографе Agilent 7890А (США): колонка 1 MS 30 м, внутренний диаметр капилляра 0,25 мкм, скорость потока газа-носителя (Не) 1 мл/мин, в градиенте температур: 70°C - 2 минуты, далее 10°C в минуту (до 300°C), температура инжектора 280°C. Дальнейшее детектирование осуществляли на масс-спектрометре Agilent 5975S (США): ионизация электронным ударом, сканирование m/z 33-600, температура ионного источника 120°C.
Анализ молекулярно-массового распределения проводили на жидкостном хроматографе Ultimate 3000 (Германия, «Dionex»), используя калибровочную прямую по растворам декстранов молекулярной массой 1000, 17000, 40000, 250000, 500000, 1200000 Да, построенную на колонке TSK GMPWXL, 300×78 мм, 13 μm, подвижная фаза - вода, скорость потока 1 мл/мин, рефрактометрическое детектирование, температура ячейки детектора 40°C. Спектр исследуемого образца водного растения ряски малой показал, что полученное вещество представляет собой смесь трех полисахаридов разных молекулярных масс - 1151, 615 и 41 кДа с относительным содержанием 44,11; 11,37 и 44,52% соответственно.
Биологическую активность ПС оценивали на линейных мышах C57BL/6 [4]. Животные в возрасте 8-10 недель были получены из отдела экспериментальных биологических моделей НИИФиРМ им. Е.Д. Гольдберга, Томский НИМЦ РАН (ветеринарное свидетельство 270 №0008633 15 июля 2015 г.). Все процедуры (содержание, введение исследуемых веществ, умерщвление) были проведены в соответствии с Директивой 2010/63/EU Европейского Парламента и Совета ЕС по охране животных используемых в научных целях. В качестве контроля в экспериментах in vivo использовали ликопид, in vitro - мурамилдипептид.
Макрофаги получали из суспензии перитонеальных клеток, для чего животных забивали дислокацией шейного отдела позвоночника, брюшную полость промывали ледяным изотоническим раствором хлорида натрия (ФР), клетки осаждали, ресуспендировали в культуральной среде и оценивали их жизнеспособность в тесте с 0,1% трипановым синим. В экспериментах использовали суспензии, содержащие не менее 95% жизнеспособных клеток. Далее клетки (1,5-2,0×106/мл) помещали в пластиковые чашки Петри, культивировали 2 ч при 37°C (в атмосфере 5% CO2 и абсолютной влажности) в среде (RPMI 1640 («Sigma»), 10% ЭТС («Hyclone»), 20 мМ HEPES («Sigma»), 0,05 мМ 2-меркаптоэтанол («Sigma»), 50 мкг/мл гентамицин («Sigma»), 2 мМ L-глютамин («Sigma»)). Полученные после прилипания макрофаги, переносили в плоскодонные 96-луночные планшеты (2,5-3,0×106 клеток/мл) и культивировали в указанных выше условиях в присутствии полисахарида ряски малой (20 мкг/мл); 1 мкг/мл ЛПС (серотип O111:В4, «Sigma»); 10 мкг/мл мурамилдипептида (МДП) (N-ацетилмурамил-L-аланил-D-изоглютамин, «Calbiochem»). Через 24 ч от начала культивирования собирали из лунок надосадок и замеряли в нем концентрацию цитокинов твердофазным иммуноферментным методом при помощи тест-систем согласно прилагаемым протоколам: ИЛ-12 и ИЛ-10 («eBioscience»).
Количество цитокинов, вырабатываемых мононуклеарами периферической крови человека, определяли в супернатантах клеток, получаемых следующим образом. Жидкость для сепарации клеток «Histopaque-1077» («Sigma-Aldrich») с плотностью 1,077 помещали в пробирки, затем осторожно наслаивали цельную кровь здоровых доноров с добавлением гепарина (10 ЕД/мл). После 15-минутного центрифугирования при 400 g собирали клетки, сформировавшие кольцо на градиенте плотности, трижды отмывали их холодным ФР, ресуспендировали в культуральной среде, оценивали жизнеспособность и, далее, проводили фракционирование клеточной взвеси адгезией (см. получение макрофагов) для получения моноцитов - прилипающая и лимфоцитов - не прилипающая фракция. Моноциты (1×106 клеток/мл) или лимфоциты (2,5-3,0×106 клеток/мл) помещали в 96-луночный планшет и вносили изучаемые растительные полисахариды (10 мкг/мл), продукцию монокинов стимулировали добавлением ЛПС (1 мкг/мл). Через 24 ч инкубации собирали бесклеточный супернатант, в котором иммуноферментным методом при помощи тест-систем определяли количество цитокинов согласно прилагаемым протоколам: ИЛ-12, ИЛ-10 и ИФН-γ («R@D Systems»); ФНО-α - («Вектор-Бэст»).
Водорастворимые полисахариды вводили мышам ежедневно внутрибрюшинно в течение 10 дней. В предварительных экспериментах in vivo было выявлено, что для проявления иммуномодулирующего эффекта оптимальной суточной дозой ПС, полученных из травы ряски малой, является концентрация 10 мг/кг массы тела и ликопида - 2 мг/кг (рекомендованная терапевтическая суточная доза). Для индукции Th1-зависимого типа иммунного ответа через 5 дней от начала введения ПС животных иммунизировали внутрибрюшинной инъекцией эритроцитов барана (1×108).
Для оценки действия исследуемого вещества на клеточное звено иммунитета использовали реакцию гиперчувствительности замедленного типа [4]. Для этого на 5-е сутки после иммунизации животным проводили вторую (разрешающую) инъекцию эритроцитов барана в подушечку задней лапы - «опытная лапа» (108 эритроцитов барана в 0,02 мл изотонического раствора хлорида натрия). В контрлатеральную лапу вводили 0,02 мл стерильного изотонического раствора хлорида натрия («контрольная лапа»). Через 24 часа животных забивали, обе лапы отрезали по выступу кости ниже сочленения мало- и большеберцовой кости и выше пяточного сустава, местную воспалительную реакцию оценивали по разнице массы опытной и контрольной лап.
Влияние ПС на гуморальное звено иммунитета оценивали по количеству антителообразующих клеток (АОК) в селезенке, для чего животных, получавших курс ПС, забивали на 5-е сутки после иммунизации эритроцитами барана (на пике IgM-AOК и IgG-АОК, соответственно) [4, 8].
Количество цитокинов в бесклеточных супернатантах клеток мышей определяли иммуноферментным методом после 24 часовой инкубации при помощи тест-систем согласно прилагаемым протоколам - ИЛ-10 и ИЛ-12 («eBioscience»).
Полученные данные обрабатывали статистически с помощью программного обеспечения Statistics 6.0. Для всех выборок проверена гипотеза нормальности распределения по величине коэффициента асимметрии и коэффициента эксцесса [2]. Для каждой выборки вычисляли среднее значение величины признака X и стандартную ошибку средней m. Проверка гипотезы о равенстве средних проводилась с использованием t-критерия Даннета. Допустимым уровнем значимости принималось p<0,05.
Пример 1
ПС водного растения ряски малой, представляющие собой смесь водорастворимых полисахаридов с молекулярной массой 1151, 615 и 41 кДа, при прямом действии на макрофаги вызывали резкое усиление продукции ИЛ-12 - ключевого цитокина, ответственного за эффективность Т-клеточного иммунного ответа (Таблица 2). При культивировании макрофагов без добавления каких-либо стимуляторов (среда) сколько-нибудь значимых количеств данного цитокина в супернатанте обнаружено не было. Мурамилдипептид (МДП) также существенно не изменял уровень ИЛ-12, при этом изучаемая сумма полисахаридов повышала продукцию ИЛ-12 в 4,7 раза с 0,581±0,581 в контроле до 2,710±0,138 пг/мл в опыте.
В отсутствие каких-либо стимуляторов макрофаги продуцировали ИЛ-10 - 17,562±2,234 мг/мл. При добавлении стандартного активатора макрофагов ЛПС концентрация ИЛ-10 в супернатанте увеличилась в 7,4 раза до 130,270±1,758 пг/мл. ПС ряски малой не влияли на ЛПС-стимулированный уровень цитокина, а МДП, при этом, в 1,5 раза усиливал его продукцию как относительно инкубации с ЛПС, так и в 1,3 раза относительно ПС ряски малой (Таблица 3).
На модели моноцитов периферической крови человека показано (Таблица 4), что водорастворимые полисахариды травы водного растения ряски малой с молекулярной массой 1151, 615 и 41 кДа усиливали продукцию ИЛ-12 в 6,6 раза с 0,297±0,043 до 1,950±0,340 пг/мл, а МДП в 3,3 раза до 0,975±0,042 пг/мл. Концентрация ФНО-α увеличивалась, практически, на два порядка с 1,49±0,92 пг/мл в контроле до 146,15±6,81 пг/мл как при культивировании с ПС, так и при активации МДП до 151,07±11,26 пг/мл. Данное активирующее действие сохранялось и при оценке влияния изучаемых ПС на продукцию ИФН-γ лимфоцитами: его концентрация увеличивалась в 64,6 раза с 0,042±0,007 до 2,712±0,596 пг/мл.
Оценка влияния исследуемых ПС на секрецию ИЛ-10 на модели воспаления (ЛПС-стимуляция) выявила, что МДП и ПС ряски малой не оказывают влияния продукцию цитокина (Таблица 5).
Таким образом, экспериментально установлено, что ПС с молекулярной массой 1151, 615 и 41 кДа, выделенные из травы водного растения ряски малой, стимулируют выработку антигенпрезентирующими клетками ключевых цитокинов ИЛ-12, ФНО-α и ИФН-γ лимфоцитами. Следует отметить, что по своему ИЛ-12-стимулирующему действию изученные полисахариды значительно превосходят препарат сравнения МДП.
Пример 2
Курсовое введение суммы водорастворимых полисахаридов с молекулярной массой 1151, 615 и 41 кДа, выделенных из травы водного растения ряски малой, животным на фоне развития у них Th1-зависимого иммунного ответа, индуцированного введением эритроцитов барана, привело к усилению маркерной реакции клеточного Th1 иммунного ответа (Таблица 6). ПС ряски малой и ликопид соизмеримо в 2,6 раза усиливали величину реакции гиперчувствительности замедленного типа.
Пример 3
Влияние исследуемых веществ на гуморальное звено Th1-зависимого иммунного ответа оценивали по количеству АОК. Показано, что курсовое введение водорастворимых полисахаридов с молекулярной массой 1151, 615 и 41 кДа, выделенных из травы водного растения ряски малой, животным на фоне развития у них Th1-зависимого иммунного ответа, приводило к достоверному увеличению числа АОК (Таблица 7). Показатель увеличивался как у мышей, получавших ПС ряски малой в 2,3 раза, так и ликопид в 2,8 раза.
Таким образом, экспериментально установлено, что полисахариды с молекулярной массой 1151, 615 и 41 кДа, выделенные из травы водного растения ряски малой, усиливают протекание иммунного ответа, стимулируют продукцию провоспалительных цитокинов ИЛ-12, ФНО-α и IFN-γ и, следовательно, являются активаторами Th1-зависимого типа иммунного ответа, а также воспалительных свойств макрофагов, и могут расширить арсенал средств растительного происхождения, способных стимулировать иммунный ответ при инфекционно-воспалительных процессах и онкологической болезни.
Литература
1. Горностаева Ю.А. Профилактика ОРВИ у пациентов с неспецифическими заболеваниями легких. Медицинский совет. 2014. №7. С. 8-11.
2. Гмурман В.Е. Теория вероятностей и математическая статистика // Учебн. пособие для вузов. Изд. 7-е, стер. М.: Высш. шк., 2001. 479 с.
3. Мирошник О.А., Редькин Ю.В. Иммуномодуляторы в России: Справочник. 2-е издание исправленное и дополненное. Омск: Изд-во ГП «Омская областная типография». 2006. 432 с.
4. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Ч.1. М.: Гриф и К. 2013. С. 64-79.
5. Сепиашвили Р.И. От иммунотерапии к персонализированной таргетной иммуномодулирующей терапии и иммунореабилитации // Аллергология и иммунология. 2015. Том 16. №4. С. 323-327.
6. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Современные иммуномодуляторы. Классификация, механизм действия. Рос. аллергол. журн. 2005; 4: 30-43. или Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Иммуномодуляторы: механизм действия и клиническое применение // Иммунология. 2003. №3. С. 199.
7. Hamza Т., Barnett J.B., Li В. Interleukin 12 a key immunoregulatory cytokine in infection applications. // International Journal of Molecular Sciences. 2010. Т. 11. Is. 3. P. 789-806
8. Ierne N.K., Nordin A.A. Plaque formation in agar by single antibody production cells // Science. 1963. Vol. 140. №3565. P. 405-408.
9. Ma X. TNF-α and IL-12: a balancing act in macrophage functioning. // Microbes and Infection. 2001. Vol. 3. P. 121-129.].
10. Schepetkin I.A., Quinn M.T. Botanical polysaccharides: macrophage immunomodulation and therapeutic potential // Int. Immunopharmacol. 2006. Vol. 6, №3. P. 317-733.]
Claims (1)
- Применение комплекса водорастворимых полисахаридов с молекулярной массой 1151, 615 и 41 кДа, выделенных из травы водного растения ряски малой, в качестве средства для избирательной активации иммунологических реакций Th1-типа, стимуляции продукции Th1 специфических цитокинов ИЛ-12, ФНО-α и ИФН-γ, полученного путем экстракции 20,0 г травы раствором 400 мл очищенной воды и 2 мл концентрированной HCl pH 4,0 в соотношении сырье : экстрагент - 1:20, при нагревании на кипящей водяной бане и периодическом перемешивании в течение 3-4 ч, фильтровании и упаривании при температуре 50°C на роторном испарителе до 1/5 от исходного объема, при добавлении трехкратного объема 96% этанола и отстаивании 24 ч при температуре 2-4°C с последующей фильтрацией осадка через бумажный фильтр и растворении в 100 мл очищенной воды, при перемешивании на магнитной мешалке в течение 3 ч при комнатной температуре, отделении нерастворившегося остатка центрифугированием при 4000 об/мин в течение 30 минут, диализировании надосадка через полупроницаемую мембрану с диаметром пор 15 кДа и перемешивании на магнитной мешалке в течение 48 ч в 50-кратном объеме очищенной воды при комнатной температуре со сменой воды через 24 ч, с дальнейшим замораживанием получившегося раствора и лиофильным его высушиванием.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017102857A RU2657819C1 (ru) | 2017-01-27 | 2017-01-27 | Средство, обладающее иммуномодулирующей активностью |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017102857A RU2657819C1 (ru) | 2017-01-27 | 2017-01-27 | Средство, обладающее иммуномодулирующей активностью |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2657819C1 true RU2657819C1 (ru) | 2018-06-15 |
Family
ID=62620386
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017102857A RU2657819C1 (ru) | 2017-01-27 | 2017-01-27 | Средство, обладающее иммуномодулирующей активностью |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2657819C1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2697526C1 (ru) * | 2018-10-22 | 2019-08-15 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Средство, обладающее иммуномодулирующей активностью |
| RU2734420C1 (ru) * | 2019-06-13 | 2020-10-16 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Средство, обладающее иммуномодулирующей активностью |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2149642C1 (ru) * | 1999-08-09 | 2000-05-27 | Институт физиологии Коми научного центра Уральского отделения РАН | Способ получения из растительного сырья полисахаридов, обладающих иммуностимулирующим действием |
| RU2190666C2 (ru) * | 2000-07-11 | 2002-10-10 | Институт физиологии Коми научного центра Уральского отделения РАН | Способ получения d-апиозы из полисахарида ряски малой lemna minor |
-
2017
- 2017-01-27 RU RU2017102857A patent/RU2657819C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2149642C1 (ru) * | 1999-08-09 | 2000-05-27 | Институт физиологии Коми научного центра Уральского отделения РАН | Способ получения из растительного сырья полисахаридов, обладающих иммуностимулирующим действием |
| RU2190666C2 (ru) * | 2000-07-11 | 2002-10-10 | Институт физиологии Коми научного центра Уральского отделения РАН | Способ получения d-апиозы из полисахарида ряски малой lemna minor |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| POPOV SV et all. Characterisation of the oral adjuvant effect of lemnan, a pectic polysaccharide of Lemna minor L //Vaccine., 2006 Jun 29, 24(26):5413-9. * |
| ГОЛОВЧЕНКО В.В. Структурно-химическая характеристика физиологически активных пектиновых полисахаридов //Авто диссертации на соискание ученой степени доктора химических наук, Сыктывкар-2013. * |
| ГОЛОВЧЕНКО В.В. Структурно-химическая характеристика физиологически активных пектиновых полисахаридов //Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора химических наук, Сыктывкар-2013. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2697526C1 (ru) * | 2018-10-22 | 2019-08-15 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Средство, обладающее иммуномодулирующей активностью |
| RU2734420C1 (ru) * | 2019-06-13 | 2020-10-16 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Средство, обладающее иммуномодулирующей активностью |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2687498C2 (ru) | Экстракт водорослей для использования в качестве иммуномодулирующего агента | |
| US8617567B2 (en) | Fungus polyose composition with immunity enhancing effect and application thereof | |
| Yang et al. | Optimization of the fermentation process of Cordyceps sobolifera Se-CEPS and its anti-tumor activity in vivo | |
| CN106148282B (zh) | 一种自然杀伤细胞的培养方法 | |
| JP4010768B2 (ja) | アンジェリカ・ギガス・ナカイから精製した新規のペクチン質多糖類とその精製方法およびその免疫刺激剤としての使用 | |
| RU2657819C1 (ru) | Средство, обладающее иммуномодулирующей активностью | |
| US5565200A (en) | Pharmaceutical preparations derived from korean mistletoe | |
| Büssing | Immune modulation using mistletoe (Viscum album L.) extracts Iscador | |
| CN103948910A (zh) | 免疫调节多肽zl-1在制备抗肿瘤药物中的用途 | |
| US5547674A (en) | Pharmaceutical preparations derived from European mistletoe | |
| JP2746532B2 (ja) | イザリア型虫草を主成分とする免疫強化食品 | |
| AU3420689A (en) | Method and means for immuno-stimulating blood treatment with a mitogen | |
| Lei et al. | EPSAH, an exopolysaccharide from Aphanothece halophytica GR02, improves both cellular and humoral immunity as a novel polysaccharide adjuvant | |
| RU2697526C1 (ru) | Средство, обладающее иммуномодулирующей активностью | |
| JP2003146888A (ja) | 炎症性腸疾患予防治療剤 | |
| US20130274177A1 (en) | Mammalian colostrum derived nanopeptides for broadspectrum viral and recurrent infections with a method of isolation thereof | |
| KR20050006533A (ko) | 해조류로부터 항암 및 면역활성 추출물을 추출하는 방법 | |
| WO2009064155A1 (en) | Immunopotentiating composition from labisia pumila extract | |
| RU2329821C1 (ru) | Средство, обладающее иммуномодулирующей активностью | |
| HRP20140247T1 (hr) | Cjepivo protiv raka | |
| RU2421232C1 (ru) | Средство, обладающее иммуномодулирующей активностью | |
| JPH11302191A (ja) | ハタケシメジ抽出物を活性成分とする免疫賦活剤及び抗腫瘍剤 | |
| RU2470656C1 (ru) | Средство, обладающее иммуномодулирующей активностью | |
| RU2756353C1 (ru) | Иммуномодулирующее гуминовое средство | |
| CN110522762A (zh) | 一种具有预防和治疗炎症的生物多糖及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200128 |