RU2654230C2

RU2654230C2 - Способы лечения поведенческих симптомов неврологических и психических расстройств

Info

Publication number: RU2654230C2
Application number: RU2014130165A
Authority: RU
Inventors: Джоан М. ФАЛЛОН; Мэттью Ф. ХЕЙЛ; Джеймс СЗИГЕТИ; Кеннет НАНУС; Джеймс Дж. ФАЛЛОН
Original assignee: КЬЮАМАРК, ЮЭс ЭлЭлСи
Priority date: 2012-01-03
Filing date: 2013-01-03
Publication date: 2018-05-17
Also published as: KR20190109564A; NZ716627A; HK1201731A1; IL233372A0; NZ737957A; EP2800581A1; WO2013103746A1; GB201411821D0; MX2014008156A; JP2019006788A; KR102315761B1; DK2800581T3; GB2511713B; AU2017232048A1; GB2511713A; KR20200113029A; AU2013206890A1; KR20140107665A; EP2800581B1; IL233372B

Abstract

Изобретение относится к медицине и раскрывает применение пищеварительных ферментных препаратов для лечения субъектов с расстройством аутистического спектра, проявляющих сниженное усвоение питательных веществ. Пищеварительные ферменты содержат протеазу, амилазу и липазу и вводятся два и более раз в день с пищей в течение, по меньшей мере, 12 недель. Изобретение позволяет восполнить недостаточность питательных веществ, возникшую у субъектов с расстройством аутистического спектра в результате самоограничения диеты. 15 з.п. ф-лы, 58 ил., 23 табл., 12 пр.

Description

По данной заявке испрашивается приоритет по предварительной патентной заявке США №61/582813, поданной 3 января 2012 года и предварительной патентной заявке США №61/600110, поданной 17 февраля 2012 года, содержание каждой из которых включено в настоящий документ путем отсылки в полном объеме.

Сведения о предшествующем уровне техники

Аутизм представляет собой расстройство неизвестного происхождения, сопровождающее человека на протяжении всей жизни. Расстройство характеризуется отклонениями в поведении, развитии, неврологическими и сенсорными отклонениями (Американская психиатрическая ассоциация, American Psychiatric Association, 1994) и, как правило, диагностируется в возрасте от 3 до 10 лет с максимальной частотой заболеваемости, наблюдаемой у детей в возрасте 5-8 лет.

Несмотря на то, что ведутся дискуссии относительно того, имеет ли аутизм пре- или постнатальное происхождение, общепризнанно, что симптомы и патология продолжают существовать на протяжении всей жизни субъекта.

Ничего из представленного в разделе сведений о предшествующем уровне техники не должно рассматриваться как признание предшествующего уровня техники.

Краткое описание изобретения

В одном аспекте обеспечен способ лечения субъекта с расстройством аутистического спектра (ASD), которое включает первазивные расстройства развития (PDD), такие как аутизм или аутистическое расстройство, нуждающегося в этом, с помощью фармацевтической композиции, включающей терапевтическую композицию, содержащую протеазы, амилазы и/или липазы, а также вспомогательное вещество: введение указанной фармацевтической композиции, содержащей один или более пищеварительных панкреатических ферментов, указанному субъекту, при этом указанный субъект имеет аномальный уровень фекального химотрипсина или pH стула, и при этом указанный субъект показывает уменьшение тяжести или частоты проявления одного или более симптомов, связанных с расстройством аутистического спектра, после введения указанной фармацевтической композиции.

В другом аспекте обеспечен способ лечения субъекта с синдромом дефицита внимания (ADD) и/или синдромом дефицита внимания с гиперактивностью (ADHD), нуждающегося в этом, с помощью фармацевтической композицией, включающей терапевтическую композицию, содержащую протеазы, амилазы и/или липазы, а также вспомогательное вещество: введение указанной фармацевтической композиции, содержащей один или более пищеварительных панкреатических ферментов, указанному субъекту, при этом указанный субъект имеет аномальный уровень фекального химотрипсина или pH стула, и при этом указанный субъект показывает уменьшение тяжести или частоты проявления одного или более симптомов, связанных с расстройством аутистического спектра, после введения указанной фармацевтической композиции.

В другом варианте осуществления один или более симптомов, связанных с расстройством аутистического спектра и/или ADD или ADHD, включают раздражительность, ажитацию, социальную самоизоляцию, заторможенность, невнимательность, гиперактивность, некомплаентность, стереотипию или неадекватную речь. В другом варианте осуществления один или более симптомов включают заторможенность и гиперактивность, и/или реципрокность симптомов, связанных друг с другом. В другом варианте осуществления симптомы измеряют по шкале Aberrant Behavior Checklist (ABC) (Поведенческий опросник для диагностики аутизма). В другом варианте осуществления для оценки изменений в аутистической симптоматике применяют другие показатели, как видно при использовании поведенческих и когнитивных показателей, таких как Conners test (Тест Коннерса), Expressive Vocabulary Test (EVT-2) (Тест активного словарного запаса, второе издание), Peabody Picture Vocabulary Test (PPVT-4) (Словарный тест Пибоди в картинках, четвертое издание), Social Communication Questionnaire (SCQ) (Опросник для оценки социальных взаимодействий), Autism Diagnostic Interview-Revised (ADI-R) (Опросник для диагностики аутизма, адаптированный вариант), American Psychiatric Association's Diagnostic and Statistical Manual-IV (DSM-IV) (Руководство по диагностике и статистической классификации психических расстройств, опубликованное Американской психиатрической ассоциацией), любой другой тест, описанный в настоящем документе или общепризнанный в данной области. В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция, описанная здесь, не вызывает седативного эффекта, нарастания неврологических симптомов, таких как головокружение, дистония, акатизия, сонливость, утомляемость, экстрапирамидные расстройства, тремор, слюнотечение, или других симптомов, наблюдаемых при лечении поведенческих расстройств лекарственными средствами, таких как набор веса и т.д. В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция, описанная здесь, не вызывает каких-либо седативных побочных эффектов в соответствии со стандартами FDA (например, на уровне больше, чем около 5%).

В другом варианте осуществления субъекту вводят фармацевтическую композицию, описанную здесь, в течение, по меньшей мере, 12 недель. В одном неограничивающем примере субъекту вводят фармацевтическую композицию, описанную здесь, три раза в день в течение, по меньшей мере, 12 недель. В другом варианте осуществления субъект показал указанное уменьшение тяжести или частоты проявления одного или более симптомов после введения фармацевтической композиции, описанной здесь, в течение, по меньшей мере, 12 недель.

Возраст субъекта, подлежащего лечению с помощью способов, описанных здесь, может составлять 1-18 лет. В другом варианте осуществления возраст субъекта составляет 2-16 лет. В другом варианте осуществления возраст субъекта составляет 1-10 лет. В другом варианте осуществления возраст субъекта составляет 3-8 лет. В другом варианте осуществления субъект проживает в любом географическом местоположении на земле.

В другом варианте осуществления субъект имеет слабые и/или умеренные уровни заторможенности, гиперактивности, социальной самоизоляции или раздражительности до введения. В другом варианте осуществления субъект имеет высокие уровни заторможенности, гиперактивности, социальной самоизоляции или раздражительности до введения.

В другом варианте осуществления субъект показал улучшение в рецептивной и/или экспрессивной речи после введения фармацевтической композиции, описанной здесь. В другом варианте осуществления улучшение измерено с помощью теста Expressive Vocabulary Test - EVT и/или теста Peabody Picture Vocabulary Test. В другом варианте осуществления субъект имеет аутизм и афазию или другое отсутствие экспрессивной или рецептивной речи.

В другом варианте осуществления субъект проявляет одно или более улучшений речи, соответствующую возрасту грамматическую структуру и/или словарный запас после введения фармацевтической композиции, описанной здесь. В другом варианте осуществления субъект показал указанное проявление без кривой научения. В другом варианте осуществления субъект показал улучшение по всем шкалам развития, увеличенные максимальные уровни ответов на вопросы или снижение частоты ошибок. В другом варианте осуществления субъект продемонстрировал улучшенную кратковременную память и/или подвижное мышление после введения фармацевтической композиции, описанной здесь. В другом варианте осуществления субъект имел уменьшенную гиперактивность после введения фармацевтической композиции, описанной здесь. В другом варианте осуществления изменения гиперактивности наблюдались в тесте Conners-3TR. В другом варианте осуществления один или более симптомов включают невнимательность, проблемы с обучением, исполнительное функционирование, агрессию, гиперактивность, импульсивность, расстройство поведения или оппозиционно-вызывающее расстройство. В другом варианте осуществления субъект имел улучшенный показатель отношения со сверстниками. В другом варианте осуществления симптомы измеряли по шкале Conners DSM-IV.

В другом варианте осуществления субъект имеет увеличения в балансированном потреблении пищи, усвоении белков, усвоении овощей, усвоении мяса, холестерина, витамина K, кальция или улучшения в гликемической нагрузке после введения или после лечения с помощью фармацевтической композиции, описанной здесь, по сравнению с субъектом такого же возраста без ASD или ADHD, или по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо. В другом варианте осуществления субъект имеет более низкое общее усвоение калорий по сравнению с субъектом такого же возраста без ASD или ADHD, или по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо. В другом варианте осуществления субъект имеет такое же общее усвоение калорий после лечения с помощью фармацевтической композиции, описанной здесь, но увеличенное усвоение белков и жиров по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо. В другом варианте осуществления субъект такого же возраста без ASD, ADD или ADHD, или получавший лечение плацебо, имел сидячий образ жизни или активный образ жизни. В другом варианте осуществления субъект имеет меньшее количество переломов после введения фармацевтической композиции, описанной здесь, по сравнению с субъектом такого же возраста без ASD или ADHD, или по сравнению с субъектом, получавшим плацебо.

В другом варианте осуществления субъект проявляет улучшенное общее состояние здоровья после введения фармацевтической композиции, описанной здесь, по сравнению с субъектом такого же возраста без ASD или ADHD, или по сравнению с субъектом, получавшим плацебо. В другом варианте осуществления субъект проявляет улучшенное состояние желудочно-кишечного тракта (например, улучшение констипации и/или диареи) после введения фармацевтической композиции, описанной здесь, по сравнению с субъектом такого же возраста без ASD или ADHD, или по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо. В другом варианте осуществления субъект проявляет уменьшение числа и/или тяжести припадков (например, припадок эпилепсии «Grand Mal», кратковременная потеря сознания, миоклонические, тонические, клонические или атонические) после введения фармацевтической композиции, описанной здесь, по сравнению с субъектом такого же возраста без ASD или ADHD, или по сравнению с субъектом, получавшим плацебо.

В другом варианте осуществления аномальные уровни фекального химотрипсина указывают на то, что указанный субъект имеет физиологическую недостаточность питания. В другом варианте осуществления субъект, имеющий поведенческое, неврологическое или психическое расстройство, потребляет меньшее количество калорий, жиров, белков или углеводов, чем субъект с нормальным уровнем фекального химотрипсина. В другом варианте осуществления введение фармацевтической композиции, описанной здесь, изменяет в обратном направлении потерю усвоения калорий потребляемых белков и жиров; в некоторых случаях такое усвоение возникает, когда общее усвоение калорий не отличается от такового у субъекта, получавшего лечение плацебо. В другом варианте осуществления субъект представляет собой субъект мужского пола. В другом варианте осуществления субъект представляет собой субъект женского пола. В другом варианте осуществления pH стула субъекта, получавшего лечение с помощью фармацевтической композиции, описанной здесь, становится более щелочным.

Субъект может иметь уменьшение усвоения цельного зерна после введения фармацевтической композицией, описанной здесь. Субъект может также иметь уменьшение общего усвоения углеводов после введения фармацевтической композицией, описанной здесь. В другом варианте осуществления уменьшение составляет, по меньшей мере, 5%. В другом варианте осуществления уменьшение составляет, по меньшей мере, 10%. В другом варианте осуществления уменьшение составляет, по меньшей мере, 15%. В другом варианте осуществления уменьшение составляет, по меньшей мере, 20%. В другом варианте осуществления уменьшение составляет, по меньшей мере, 25%. В другом варианте осуществления уменьшение составляет, по меньшей мере, 30%. В другом варианте осуществления уменьшение составляет, по меньшей мере, 35%. В другом варианте осуществления уменьшение составляет, по меньшей мере, 40%. В другом варианте осуществления уменьшение составляет, по меньшей мере, 50%. В другом варианте осуществления уменьшение составляет, по меньшей мере, 60%. В другом варианте осуществления уменьшение составляет, по меньшей мере, 70%. В другом варианте осуществления уменьшение составляет, по меньшей мере, 80%. В другом варианте осуществления уменьшение составляет, по меньшей мере, 90%. В другом варианте осуществления уменьшение составляет, по меньшей мере, 95%.

В другом варианте осуществления введение фармацевтической композиции, описанной здесь, осуществляют в течение 4-недельного периода. В другом варианте осуществления введение фармацевтической композиции, описанной здесь, осуществляют в течение 8-недельного периода. В другом варианте осуществления введение фармацевтической композиции, описанной здесь, осуществляют в течение 12-недельного периода. В другом варианте осуществления введение фармацевтической композиции, описанной здесь, осуществляют в течение 16-недельного периода. В другом варианте осуществления введение фармацевтической композиции, описанной здесь, осуществляют в течение 20-недельного периода. В другом варианте осуществления введение фармацевтической композиции, описанной здесь, осуществляют в течение 6-месячного периода. В другом варианте осуществления введение фармацевтической композиции, описанной здесь, осуществляют в течение 1 года. В другом варианте осуществления указанное введение фармацевтической композиции, описанной здесь, осуществляют на регулярной, повторяющейся основе. Фармацевтическую композицию, описанную здесь, можно вводить один, два или три раза в день в течение периода лечения. Фармацевтическую композицию, описанную здесь, можно вводить вместе с пищей.

В другом варианте осуществления субъект увеличивает общее усвоение белка после введения фармацевтической композиции, описанной здесь. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 5%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 10%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 15%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 20%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 25%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 30%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 35%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 40%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 50%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 60%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 80%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 90%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 100%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 150%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 200%.

В другом варианте осуществления субъект увеличивает общее усвоение жиров после введения фармацевтической композиции, описанной здесь. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 5%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 10%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 15%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 20%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 25%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 30%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 35%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 40%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 50%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 60%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 80%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 90%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 100%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 150%. В другом варианте осуществления увеличение составляет, по меньшей мере, 200%. В другом варианте осуществления субъект имеет историю одной или более аллергических реакций.

В другом варианте осуществления субъект с указанной историей одной или более аллергических реакций имеет большее усвоение волокон, калорий, жиров, белков и углеводов после введения фармацевтической композиции, описанной здесь, чем субъект, который не имеет аллергических реакций. В другом варианте осуществления субъект имеет увеличение потребления B6, B12, A, C, E, K, меди, железа, холестерина, никотиновой кислоты, рибофлавина, тиамина или цинка после введения фармацевтической композиции, описанной здесь. В другом варианте осуществления субъект имеет увеличение уровней B6, B12, A, C, E, K, меди, железа, холестерина, никотиновой кислоты, рибофлавина, тиамина или цинка в крови после введения фармацевтической композиции, описанной здесь. В другом варианте осуществления субъект дополнительно имеет недостаточность витамина K. В другом варианте осуществления недостаточность витамина K измеряют путем определения уровней гамма-карбоксилированных белков в крови. В другом варианте осуществления способ дополнительно включает проведение усиливающей глутамат терапии у указанного субъекта. В другом варианте осуществления способ дополнительно включает введение витамина K.

В другом аспекте в настоящем документе раскрыт способ лечения субъекта с ASD, ADD или ADHD, нуждающегося в этом, с помощью фармацевтической композиции, описанной здесь, включающий: введение указанной фармацевтической композиции, содержащей один или более пищеварительных панкреатических ферментов указанному субъекту, при этом указанный субъект имеет недостаточность витамина K, и при этом указанный субъект показывает уменьшение тяжести или частоты проявления одного или более симптомов, связанных с ASD, ADD или ADHD, после введения указанной фармацевтической композиции. В одном варианте осуществления ASD представляет собой аутизм. В другом варианте осуществления недостаточность витамина K измеряют путем определения уровней гамма-карбоксилированных белков в крови.

В другом аспекте способ представляет собой способ лечения субъекта с ASD, ADD или ADHD, нуждающегося в этом, с помощью фармацевтической композиции, описанной здесь, включающий: введение указанной фармацевтической композиции, содержащей: 1) один или более пищеварительных панкреатических ферментов; 2) усиливающую глутамат терапию, и/или 3) витамин K, указанному субъекту, при этом указанный субъект имеет недостаточность витамина K или аномальный уровень фекального химотрипсина, и при этом указанный субъект показывает уменьшение тяжести или частоты проявления одного или более симптомов, связанных с ASD, ADD или ADHD, после введения указанной фармацевтической композиции. В одном варианте осуществления ASD представляет собой аутизм. В другом варианте осуществления недостаточность витамина K измеряют путем определения уровней гамма-карбоксилированных белков в крови. В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция, описанная здесь, уменьшает частоту или тяжесть диареи, газов, вздутия, спазмов, метеоризма, тошноты или боли в животе у указанного субъекта. В другом варианте осуществления субъект имеет задержку в росте, белковокалорийную недостаточность, истощение, недостаточность минералов и витаминов, аномальные уровни альбумина, аномальные уровни преальбумина, аномальные уровни холестерина, аномальные уровни эластазы или аномальные уровни трипсина.

В настоящем документе обеспечен способ лечения субъекта с ASD, ADD или ADHD, нуждающегося в этом, с помощью фармацевтической композиции, описанной здесь, включающий: введение указанной фармацевтической композиции, содержащей один или более пищеварительных ферментов, указанному субъекту, при этом указанный субъект имеет аномальный уровень фекальных ферментов, и при этом указанный субъект показывает уменьшение тяжести или частоты проявления одного или более симптомов, связанных с ASD, ADD или ADHD, после введения указанной фармацевтической композиции. В одном аспекте ASD представляет собой аутизм.

Один или более симптомов, которые могут быть улучшены, включают, но без ограничения, раздражительность, ажитацию, социальную самоизоляцию, заторможенность, гиперактивность, стереотипию и/или неадекватную речь. В одном варианте осуществления один или более симптомов включают заторможенность и гиперактивность.

Симптомы могут быть измерены, например, с использованием шкалы Aberrant Behavior Checklist (ABC), любого другого теста, описанного здесь, и/или любого другого признанного, известного в данного области теста.

В этих способах фармацевтическая композиция, описанная здесь, не вызывает седативного эффекта, увеличения неврологических симптомов, таких как головокружение, симптомы болезни Паркинсона, дистония, акатизия, сонливость, усталость, экстрапирамидное расстройство, тремор, слюнотечение, набор веса тела или их комбинация. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция, описанная здесь, не вызывает каких-либо седативных побочных эффектов в соответствии со стандартами FDA (например, на уровне больше, чем 5%).

В другом варианте осуществления субъекту вводят фармацевтическую композицию, описанную здесь, в течение, по меньшей мере, 4 недель. В одном неограничивающем примере субъект показывает уменьшение тяжести или частоты проявления одного или более симптомов после введения указанной фармацевтической композиции в течение, по меньшей мере, 4 недель.

Субъекты, подлежащие лечению с помощью таких способов, включают детей. В одном варианте осуществления ребенок является мужского пола. В другом варианте осуществления ребенок является женского пола.

Субъект, подлежащий лечению с помощью таких способов, может быть из любого географического местоположения на земле. В одном варианте осуществления субъект, подлежащий лечению, является жителем Азии, жителем Северной Америки, жителем Южной Америки, жителем Евразии, жителем Австралии, жителем Европы, жителем Африки или их комбинации.

В одном варианте осуществления субъект, подлежащий лечению, проявляет слабые или умеренные уровни заторможенности, гиперактивности, гиперчувствительности, социальной самоизоляции и/или раздражительности до введения фармацевтической композиции, описанной здесь.

В другом варианте осуществления субъект, подлежащий лечению, проявляет высокие уровни заторможенности, гиперактивности, гиперчувствительности, социальной самоизоляции и/или раздражительности до введения фармацевтической композиции, описанной здесь.

В одном варианте осуществления субъект показывает улучшение рецептивной и/или экспрессивной речи после введения фармацевтической композиции, описанной здесь. Такие улучшения могут быть измерены, например, с помощью теста Expressive Vocabulary Test (EVT) и/или теста Peabody Picture Vocabulary Test. Субъектов можно оценивать до, во время и после лечения с помощью любого описанного здесь теста.

В одном варианте осуществления субъект, подлежащий лечению с помощью таких способов, имеет аутизм и афазию, или другое отсутствие экспрессивной речи.

Субъект, получивший лечение с помощью фармацевтической композиции, описанной здесь, может проявлять одно или более улучшений речи, соответствующую возрасту грамматическую структуру и/или словарный запас после введения фармацевтической композиции, описанной здесь. В одном варианте осуществления субъект может показать проявление без кривой научения. В другом варианте осуществления субъект показывает улучшение по всем шкалам развития, увеличенные максимальные уровни ответов на вопросы или уменьшение частоты ошибок. В другом варианте осуществления субъект демонстрирует улучшенную кратковременную память и/или подвижное мышление после введения фармацевтической композиции, описанной здесь. Такие улучшения могут быть измерены с использованием Stanford Binet Test (Теста по Станфорду-Бинету). В другом варианте осуществления субъект имеет уменьшенную гиперактивность после введения фармацевтической композиции, описанной здесь. Такие изменения показателя гиперактивности могут наблюдаться в тесте Conners-3TR.

В другом аспекте симптомы, подлежащие лечению с помощью таких способов, включают, но без ограничения, невнимательность, проблемы с обучением, исполнительное функционирование, агрессию, импульсивность, гиперактивность, расстройство поведения или оппозиционно-вызывающее расстройство или их комбинацию. В одном варианте осуществления субъект имеет улучшенные отношения со сверстниками. Такие симптомы могут быть измерены, например, по шкале Conners DSM-IV Scale.

В другом аспекте субъект проявляет увеличения в сбалансированном потреблении пищи, усвоении белков, усвоении овощей, усвоении мяса, холестерина, витамина K, кальция и/или улучшения в гликемической нагрузке после введения фармацевтической композиции, описанной здесь. В одном варианте осуществления субъект имеет более низкое общее усвоение калорий по сравнению с субъектом такого же возраста без ASD или ADHD; при этом, в некоторых случаях, субъект такого же возраста без ASD, ADD или ADHD ведет сидячий образ жизни или активный образ жизни. В другом варианте осуществления субъект имеет меньшее количество переломов после введения фармацевтической композиции, описанной здесь.

Аномальные уровни фекальных ферментов могут указывать на то, что субъект имеет физиологическую недостаточность питания. В некоторых случаях аномальный уровень фекальных ферментов представляет собой аномальный уровень фекального химотрипсина (FCT). Уровни фекальных ферментов можно контролировать во времени.

Количество пищеварительных ферментов, вводимых субъекту, может быть основано на одном или более критериях, включая, но без ограничения: вес тела указанного субъекта, исходный уровень фекального химотрипсина указанного субъекта, мгновенный уровень фекального химотрипсина указанного субъекта, усредненный по времени уровень фекального химотрипсина указанного субъекта, изменение уровня химотрипсина указанного субъекта, изменение уровня химотрипсина за единицу времени, скорость изменения уровня фекального химотрипсина за единицу времени (2-е производное), суммарная доза пищеварительных ферментов, введенная указанному субъекту на данный момент, усредненное по времени дозирование в течение заданного периода времени, скорость изменения дозирования в зависимости от скорости изменения уровня фекального химотрипсина, или производное скорости изменения дозирования в зависимости от скорости изменения уровня фекального химотрипсина.

В одном варианте осуществления уровень фекального химотрипсина используется для подбора количества пищеварительных ферментов, подлежащих введению субъекту.

Изменение уровней фекального химотрипсина после введения фармацевтической композиции, описанной здесь, содержащей один или более пищеварительных ферментов, может быть использовано для определения, когда введение фармацевтической композиции, содержащей один или более пищеварительных ферментов, может быть уменьшено, увеличено или прекращено. В одном варианте осуществления субъект, подлежащий лечению, имеет низкий уровень фекального химотрипсина до лечения. В одном варианте осуществления низкий уровень фекального химотрипсина коррелирует с повышенной тяжестью, по меньшей мере, одного симптома аутизма. В другом варианте осуществления понижение уровней фекального химотрипсина напрямую коррелирует с увеличение тяжести, по меньшей мере, одного симптома аутизма. В еще другом варианте осуществления улучшения уровней химотрипсина относительно исходного уровня напрямую коррелируют с улучшением, по меньшей мере, одного симптома у субъекта.

У субъекта, подлежащего лечению с помощью таких способов, может быть диагностирован аутизм, неврологическое или психическое расстройство, описанное здесь. В одном варианте осуществления субъект имеет более значительное улучшение, по меньшей мере, одного симптома, чем аналогичный субъект с более высоким уровнем фекального химотрипсина до лечения. В другом варианте осуществления субъект имеет более значительное улучшение уровней фекального химотрипсина после лечения, чем аналогичный субъект с более высоким уровнем фекального химотрипсина до лечения. Уровень фекального химотрипсина может быть измерен и использован для подбора количества пищеварительных ферментов, подлежащих введению субъекту.

В одном аспекте pH стула субъекта восстанавливается до нормального или близкого к нормальному значению после лечения фармацевтической композицией, описанной здесь. В другом аспекте pH стула субъекта и уровень фекального химотрипсина субъекта восстанавливаются до нормального или близкого к нормальному значению после лечения композицией, описанной здесь.

В другом аспекте субъект проявляет улучшение общего состояния здоровья после лечения фармацевтической композицией, описанной здесь. В одном варианте осуществления улучшение представляет собой уменьшение частоты или тяжести инфекции. В другом варианте осуществления улучшение представляет собой уменьшение числа или тяжести аллергических реакций, которые могут включать дыхательные, дерматологические и/или желудочно-кишечные аллергические реакции.

В одном аспекте терапевтическая композиция, описанная здесь, содержит амилазу, протеазу или липазу. В другом аспекте терапевтическая композиция, раскрытая здесь, содержит две из: амилазы, протеазы и липазы. В другом аспекте терапевтическая композиция, раскрытая здесь, содержит амилазу, протеазу и липазу.

В одном аспекте субъект определен или диагностирован как имеющий, по меньшей мере, один симптом ASD с использованием скрининга, включающего тест DSM-IV, SCQ или ADI-R. В другом варианте осуществления субъект определен как имеющий ASD с использованием скрининга, включающего тест DSM-IV, SCQ или ADI-R. В одном варианте осуществления субъект получает лечение с помощью фармацевтической композиции, описанной здесь. В одном варианте осуществления ASD представляет собой аутизм. В одном варианте осуществления субъект представляет собой ребенка. В одном варианте осуществления возраст ребенок составляет 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или 18 лет.

В другом варианте осуществления скрининг субъекта проводят с использованием ADI-R и определяют возможность рандомизации для участия в клиническом исследовании с использованием, по меньшей мере, одного или более из следующих тестов: ADI-R, DSM-IV и SCQ.

В другом варианте осуществления субъект, по меньшей мере, с одним симптомом ASD и уровнем химотрипсина в замороженном образце стула <12.6 Ед/г является пригодным для лечения с помощью фармацевтической композиции, описанной здесь.

В другом варианте осуществления субъект, по меньшей мере, с одним симптомом ASD и уровнем химотрипсина в замороженном образце стула <9 Ед/г является пригодным для лечения с помощью фармацевтической композиции, описанной здесь.

В другом варианте осуществления клиническое исследование с участием субъектов, имеющих аутизм, включает подгруппу субъектов, имеющих аномальные уровни химотрипсина.

В другом варианте осуществления субъект, которому вводили фармацевтическую композицию, раскрытую здесь, продемонстрировал более высокие уровни фекального химотрипсина в течение курса, состоящего из 12 недель введения.

В еще другом варианте осуществления фармацевтическая композиция доставляла химотрипсин субъекту, которому вводили фармацевтическую композицию.

В другом варианте осуществления имелось статистически значимое различие между субъектами, которым вводили фармацевтическую композицию (Препарат 1), и субъектами, которым вводили плацебо.

В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция включает терапевтическую композицию, которая содержит протеазы, амилазы и/или липазы, и/или вспомогательное вещество. В одном варианте осуществления терапевтическая композиция содержит протеазы, амилазы и липазы. В одном варианте осуществления терапевтическая композиция представляет собой панкреатин. В одном варианте осуществления терапевтическая композиция покрыта вспомогательным веществом. В одном варианте осуществления покрытие представляет собой липидное или полимерное покрытие. В одном варианте осуществления покрытие представляет собой соевое липидное покрытие, такое как покрытие на основе соевого масла. Покрытие может необязательно содержать эмульгатор. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция представлена в виде таблетки, капсулы или гранул. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция обладает протеазной активностью, составляющей не меньше чем 156 USP единиц/мг. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция представлена в виде гранул. В одном варианте осуществления примерно от 1.1 до 0.8 мг фармацевтической композиции обеспечено на дозу. В другом варианте осуществления доза обеспечена в пакетиках/саше. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция представляет собой Препарат 1.

В другом варианте осуществления измерение pH стула проводят после лечения субъекта с помощью фармацевтической композиции, раскрытой здесь, имеющего симптомы ASD, например, аутизма. В одном варианте осуществления у субъекта диагностирован аутизм до введения фармацевтической композиции, раскрытой здесь. В одном варианте осуществления pH стула становится более щелочным после лечения субъекта с помощью фармацевтической композиции, раскрытой здесь.

В другом варианте осуществления pH стула измеряют для определения состояния желудочно-кишечного тракта субъекта с симптомом ASD, например, аутизмом. В другом варианте осуществления pH стула измеряют для определения способности субъекта с симптомом ASD, например, аутизмом, переваривать белок.

В другом варианте осуществления субъект, которому вводили фармацевтическую композицию, описанную здесь, проявил значительно большее изменение pH стула, чем субъект, которому вводили плацебо. В другом варианте осуществления субъект, которому вводили фармацевтическую композицию, описанную здесь, проявил положительное изменение pH стула, демонстрируя большее изменение своего стула в щелочную сторону, тогда как субъект, которому вводили плацебо, проявил изменение своего стула в кислую сторону. В другом варианте осуществления субъект, которому вводили фармацевтическую композицию, описанную здесь, проявил изменение в щелочную сторону своего стула, которое начиналось приблизительно через 4 недели после начала введения фармацевтической композиции.

В одном варианте осуществления тест ABC применяют для измерения изменений по одному или более симптомам ASD у субъекта, которому вводили фармацевтическую композицию, описанную здесь, по сравнению с субъектом, которому вводили плацебо. В другом варианте осуществления общий тест ABC применяют для оценки эффективности лечения субъекта с помощью фармацевтической композиции, описанной здесь. В одном варианте осуществления субъектом является ребенок. В одном варианте осуществления общий тест ABC обеспечивает общую шкалу ABC. В другом варианте осуществления общий тест ABC можно применять в случае, когда соединение не оказывает седативного эффекта. В другом варианте осуществления общую шкалу ABC можно применять в случае, когда шкала гиперактивности/некомплаентности и шкала заторможенности/социальной самоизоляции не являются реципрокными. В другом варианте осуществления общую шкалу ABC или индивидуальные подшкалы ABC можно применять для определения конечных результатов экспериментальных наблюдений у детей с аутизмом. В другом варианте осуществления шкалу ABC можно применять в сочетании с ADI-R для определения уровня аутизма и возможности изменения исходя из уровня аутизма. В одном варианте осуществления один или более симптомов включают раздражительность, ажитацию, социальную самоизоляцию, заторможенность, гиперактивность, некомплаентность, стереотипию или неадекватную речь. В другом варианте осуществления один или более симптомов включают заторможенность и гиперактивность, которые являются реципрокными симптомами по отношению друг к другу.

В другом варианте осуществления общую шкалу ABC применяют для измерения изменения в аутистической симптоматике. В другом варианте осуществления симптомы измеряют по шкале Aberrant Behavior Checklist (ABC). В другом варианте осуществления другие показатели используют для оценки изменений в аутистической симптоматике, как видно с использованием поведенческих и когнитивных показателей, таких как тест Conners, Тест EVT-2, Тест PPVT-4, Опросник Social Communication Questionnaire, Тест ADI-R, Тест DSM-IV, любой другой тест, описанный здесь или признанный в данной области.

В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция, описанная здесь, не вызывает седативного эффекта, увеличения неврологических симптомов, таких как головокружение, симптомы болезни Паркинсона, дистония, акатизия, сонливость, усталость, экстрапирамидные расстройства, тремор, слюнотечение, или других симптомов, наблюдаемых в случае лекарственных средств для лечения поведенческих расстройств.

В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция, описанная здесь, не вызывает каких-либо седативных побочных эффектов в соответствии со стандартами FDA.

В другом варианте осуществления субъекту вводят фармацевтическую композицию, описанную здесь, в течение, по меньшей мере, 12 недель. В другом варианте осуществления субъект показал указанное уменьшение тяжести или частоты проявления одного или более симптомов после введения указанной фармацевтической композиции в течение, по меньшей мере, 12 недель. В другом варианте осуществления субъекту вводят указанную фармацевтическую композицию в течение 24, 48 или более недель.

В другом варианте осуществления баллы на неделе 12 с поправкой на плацебо продемонстрировали значительное различие между субъектом, которому вводили фармацевтическую композицию, описанную здесь, и субъектом, которому вводили плацебо, выраженное в виде большего процентного (%) изменения от исходного уровня (то есть до введения фармацевтической композиции, описанной здесь). В одном варианте осуществления субъектом является ребенок.

В другом варианте осуществления это изменение, продемонстрированное непрерывным увеличением % изменения от исходного уровня на 24 и 48 неделях, указывает на непрерывное улучшение во времени у субъекта, которому вводили фармацевтическую композицию, описанную здесь. В одном варианте осуществления субъектом является ребенок.

В еще другом варианте осуществления изменения, наблюдаемые у субъекта, которому вводили фармацевтическую композицию, описанную здесь, измеренные по ABC, представляют собой как положительные, так и негативные симптомы аутизма, измеренные по ABC: положительные симптомы (дополнительные симптомы) гиперактивности, раздражительности, ажитации, стереотипии и/или неадекватной речи. И негативные симптомы (симптомы, которые исключают поведение): социальная самоизоляция и заторможенность.

В одном варианте осуществления возраст субъекта, получавшего лечение фармацевтической композицией, описанной здесь, составляет от 1 до 18 лет. В другом варианте осуществления возраст субъекта, получавшего лечение фармацевтической композицией, описанной здесь, составляет от 2 до 16 лет. В другом варианте осуществления возраст субъекта, получавшего лечение фармацевтической композицией, описанной здесь, составляет от 9 до 12 лет. В другом варианте осуществления возраст субъекта, получавшего лечение фармацевтической композицией, описанной здесь, составляет от 1 и 10 лет. В одном варианте осуществления субъектом является ребенок. В другом варианте осуществления субъект может быть из любого географического местоположения на земле.

В другом варианте осуществления субъект имеет слабые и/или умеренные уровни заторможенности, гиперактивности, социальной самоизоляции и/или раздражительности до введения. В другом варианте осуществления субъект имеет высокие уровни заторможенности, гиперактивности, социальной самоизоляции и/или раздражительности до введения.

В другом варианте осуществления субъект имеет слабые и/или умеренные уровни гиперактивности и/или некомплаентности до введения. В другом варианте осуществления субъект имеет высокие уровни гиперактивности и/или некомплаентности до введения.

В другом варианте осуществления субъект имеет слабые и/или умеренные уровни неадекватной речи до введения. В другом варианте осуществления субъект имеет высокие уровни неадекватной речи до введения.

В другом варианте осуществления субъект имеет слабые и/или умеренные уровни стереопатии до введения. В другом варианте осуществления субъект имеет высокие уровни стереопатии до введения.

В одном варианте осуществления PPVT и EVT (версия A или версия В) применяют для оценки словарного запаса в способе лечения субъекта (например, ребенка) с помощью фармацевтической композиции, описанной здесь. В одном варианте осуществления субъект имеет аутизм. В другом варианте осуществления оба, PPVT и EVT, применяют для устранения доэкспериментальной-послеэкспериментальной ошибки из исследования.

В другом варианте осуществления использование PPVT в сочетании с EVT применяют для измерения изменения у субъекта экспрессивной и рецептивной речи. В другом варианте осуществления изменение измеряют до введения субъекту фармацевтической композиции, описанной здесь. В другом варианте осуществления изменение измеряют после введения субъекту фармацевтической композиции, описанной здесь.

В другом варианте осуществления количество ошибок, наблюдаемых в тесте PPVT у субъекта, которому вводили фармацевтическую композицию, описанную здесь, меньше, чем у субъекта, которому вводили плацебо.

В другом варианте осуществления баллы по шкале развития, наблюдаемые в тесте PPVT у субъекта, которому вводили фармацевтическую композицию, описанную здесь, выше, чем у субъекта, которому вводили плацебо.

В другом варианте осуществления максимальные баллы с учетом количества ошибок, наблюдаемых в тесте PPVT (максимальный балл минус (-) ошибки), выше для субъекта, которому вводили фармацевтическую композицию, описанную здесь.

В другом варианте осуществления имеется более значительное изменение у субъекта, которому вводили фармацевтическую композицию, описанную здесь, балла по шкале развития для EVT по сравнению с баллом по PPVT, демонстрируя более значительные успехи в экспрессивной речи.

В другом варианте осуществления число ошибок, наблюдаемых в тесте EVT у субъекта, которому вводили фармацевтическую композицию, описанную здесь, меньше, чем у субъекта, которому вводили плацебо.

В другом варианте осуществления баллы по шкале развития, наблюдаемые в тестах EVT у субъекта, которому вводили фармацевтическую композицию, описанную здесь, выше, чем у субъекта, которому вводили плацебо.

В другом варианте осуществления максимальный балл с учетом ошибок, наблюдаемый в тесте EVT (максимальный балл минус (-) ошибки) выше у субъекта, которому вводили Препарат 1, демонстрируя улучшенные характеристики.

В одном варианте осуществления анкету «Block Food Screener» применяют для изучения усвоения питательных веществ из продуктов питания у субъекта, которому вводили фармацевтическую композицию, описанную здесь, или субъекта, которому вводили плацебо. В другом варианте осуществления анкета «Block Food Screener» измеряет количественный и качественный показатель усвоение пищи на ежедневной основе. В другом варианте осуществления показатели «Block Food Screener» количественного и качественного усвоения пищи можно сравнить с изменениями в поведении, когнитивными или другими физиологическими показателями у субъектов с ASD, например, аутизмом, или другими неврологическими расстройствами. В одном варианте осуществления изменения, измеренные по «Block Food Screener», могут быть использованы для определения статуса питания субъекта до, после или во время введения фармацевтической композиции, описанной здесь. В еще другом варианте осуществления, как измерено по «Block Food Screener», так как конечное количество калорий, потребляемых в день, на неделе 12 увеличилось, имеется большее улучшение баллов по общей шкале ABC. В еще другом варианте осуществления, так как общее количество калорий, потребляемых в день субъектом, достигло 800+ калорий, измеренное по «Block Food Screener», общие баллы по ABC для субъекта, которому вводили плацебо, ухудшились, в то время как общий балл по ABC для субъекта, которому вводили фармацевтическую композицию, описанную здесь, значительно улучшился.

В другом варианте осуществления имеется улучшение общих баллов по ABC, наблюдаемое у субъекта, которому вводили фармацевтическую композицию, описанную здесь, в противоположность субъекту, которому вводили плацебо, при всех уровнях усвоения белка.

В другом варианте осуществления при увеличении усвоения белка в день, составляющем приблизительно 2+ грамма, измеренном по «Block Food Screener», субъект, которому вводили фармацевтическую композицию, описанную здесь, имеет большее улучшение по меньшей мере одного симптома ASD, тогда как субъект, которому вводили плацебо, имеет ухудшение по меньшей мере одного симптома ASD.

В другом варианте осуществления ухудшение симптомов по общей шкале ABC у субъекта, которому вводили плацебо, является показателем отсутствия фермента для переваривания белка.

В еще другом варианте осуществления имеется улучшение общих баллов по ABC, наблюдаемое у субъектов, которым вводили фармацевтическую композицию, описанную здесь, в противоположность субъектам, которым вводили плацебо, при всех уровнях усвоения белка, измеренных через 12 недель после первого введения фармацевтической композиции или плацебо.

В еще другом варианте осуществления при общем усвоении в день приблизительно 35 + грамм белка, измеренном по «Block Food Screener» на 12 неделе, у субъектов, которым вводили фармацевтическую композицию, описанную здесь, улучшение начало возрастать, а у субъектов, которым вводили плацебо, началось ухудшение, по меньшей мере, одного симптома ASD.

В еще другом варианте осуществления ухудшение симптомов по общему ABC у субъектов, которым вводили плацебо, является показателем отсутствия фермента для переваривания белка.

В одном варианте осуществления имеется улучшение общих баллов по шкале ABC у субъекта, которому вводили фармацевтическую композицию, описанную здесь, в противоположность субъекту, которому вводили плацебо, при всех уровнях изменения усвоения углеводов, измеренного по «Block Food Screener».

В еще другом варианте осуществления при уровне изменения усвоения углеводов, составляющем 5 + грамм, измеренном с помощью «Вlоск Food Screener», субъект, которому вводили плацебо, начинал показывать ухудшение, и субъект, которому вводили фармацевтическую композицию, начинал показывать улучшение с большей скоростью. В другом варианте осуществления ухудшение симптомов, измеренное по общей шкале ABC у субъекта, которому вводили плацебо, обусловлено отсутствием фермента для переваривания белковой части углеводов (такого как белок глиадин).

В настоящем документе обеспечен способ лечения субъекта с одним или более симптомами ASD, включающий: введение субъекту фармацевтической композиции, содержащей одно или более вспомогательных веществ, и терапевтической композиции, при этом терапевтическая композиция содержит протеазу, амилазу и/или липазу, при этом субъект проявляет улучшение по одному или более симптомам ASD, включающим в себя: (а) усвоение белка, усвоение жира, усвоение углеводов, усвоение витаминов, диарею, констипацию, припадки и/или переломы костей; и/или (b) гиперактивность, раздражительность, ажитацию, обсессивно-компульсивное поведение, зрительный контакт, речь, заторможенность, гиперчувствительность, стереотипию, приучение к горшку, некомплаентность, невнимательность и/или социальную самоизоляцию, и при этом субъект имеет более значительное улучшение по одному или более симптомам ASD после введения фармацевтической композиции, чем субъект с одним или более симптомами ASD, которому вводили плацебо.

Улучшение одного или более симптомов ASD может представлять собой, по меньшей мере, однократно большее улучшение по сравнению с субъектом с одним или более симптомами ASD, которому вводили плацебо.

Улучшение одного или более симптомов ASD может представлять собой, по меньшей мере, больше чем 2-, 3-, 4- или 5-кратное улучшение по сравнению с субъектом с одним или более симптомами ASD, которому вводили плацебо.

Субъект может проявлять улучшение примерно на 10% или больше по одному или более симптомам ASD после введения фармацевтической композиции по сравнению с показателем до введения фармацевтической композиции субъекту.

Субъект может проявлять улучшение больше, чем примерно на 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%» или 100% по одному или более симптомам ASD после введения фармацевтической композиции.

Общее ежедневное усвоение (по массе) субъектом белков, жиров и углеводов и/или витаминов может увеличиться после введения фармацевтической композиции по сравнению с усвоением белков, жиров, углеводов и/или витаминов субъектом до введения фармацевтической композиции.

Общее ежедневное усвоение (по массе) углеводов субъектом может уменьшиться после введения фармацевтической композиции по сравнению с усвоением углеводов субъектом до введения фармацевтической композиции.

Субъект может проявлять более значительное увеличение ежедневного усвоения (по массе) белков, жиров, углеводов и/или витаминов после введения фармацевтической композиции по сравнению с субъектом с одним или более симптомами ASD после введения плацебо.

Чем выше степень ежедневного усвоения (по массе) белков, жиров, углеводов и/или витаминов, потребляемых субъектом после введения фармацевтической композиции, тем больше улучшение у субъекта одного или более симптомов ASD. В одном варианте осуществления ежедневное усвоение (по массе) белков, жиров и углеводов, и/или витаминов, потребляемых субъектом, может быть измерено до введения субъекту фармацевтической композиции, и примерно через 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 24, 36, 48 или 52 недели после начала введения фармацевтической композиции.

Субъект может проявлять более значительное увеличение ежедневного усвоения (по массе) витаминов после введения фармацевтической композиции по сравнению с субъектом с одним или более симптомами ASD после введения плацебо.

Субъект может проявлять более значительное увеличение ежедневного усвоения (по массе) углеводов после введения фармацевтической композиции по сравнению с субъектом с одним или более симптомами ASD после введения плацебо.

Общее количество ежедневных калорий, потребляемых субъектом, может увеличиться после введения фармацевтической композиции по сравнению с общим ежедневным количеством калорий, потребляемых субъектом до введения фармацевтической композиции. Чем больше ежедневных калорий субъект потребляет после введения фармацевтической композиции, тем больше улучшение у субъекта по одному или более симптомам ASD.

Общее количество ежедневных калорий, потребляемых субъектом, может быть измерено до введения субъекту фармацевтической композиции, и примерно через 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 24, 36, 48 или 52 недели после начала введения фармацевтической композиции.

В одном варианте осуществления субъект может потреблять, по меньшей мере, 800 килокалорий в день после примерно 12 недель введения фармацевтической композиции.

Субъект может дополнительно проявлять улучшение симптома, включающего в себя диарею, констипацию, припадки, переломы костей, гиперактивность, раздражительность, ажитацию, обсессивное компульсивное поведение, зрительный контакт, речь, заторможенность, гиперчувствительность, стереотипию, приучение к горшку, некомплаентность, агрессию, импульсивность, расстройство поведения или оппозиционно-вызывающее расстройство, и/или социальную самоизоляцию.

Улучшение у субъекта по одному или более симптомам ASD может быть измерено по шкале Aberrant Behavior Checklist (ABC).

Улучшение у субъекта по одному или более симптомам ASD может быть измерено в виде балла по общему тесту Aberrant Behavior Checklist (ABC).

Ежедневное усвоение белка субъекта может быть более высоким после начала введения фармацевтической композиции по сравнению с усвоением белка субъектом до введения фармацевтической композиции.

Ежедневное усвоение белка субъекта может быть более высоким после начала введения фармацевтической композиции по сравнению с усвоением белка субъектом, которому вводили плацебо.

Ежедневное усвоение белка субъекта может быть более высоким через 12 недель после начала введения фармацевтической композиции по сравнению с усвоением белка субъектом до введения фармацевтической композиции.

Ежедневное усвоение белка субъекта может быть более высоким через 12 недель после начала введения фармацевтической композиции по сравнению с усвоением белка субъектом до введения фармацевтической композиции

Ежедневное усвоение белка субъекта может быть примерно на 2 грамма выше через 12 недель после начала введения фармацевтической композиции по сравнению с ежедневным усвоением белка субъектом до введения фармацевтической композиции.

Субъект может потреблять от примерно 30 до примерно 50 грамм белка в день через 12 недель после начала введения фармацевтической композиции.

Субъект может потреблять примерно 35 грамм или более белка в день через 12 недель после начала введения фармацевтической композиции.

Улучшение субъекта по одному или более симптомам ASD может быть измерено по шкале Aberrant Behavior Checklist (ABC).

Улучшение субъекта по одному или более симптомам ASD может быть измерено в виде балла по общей шкале Aberrant Behavior Checklist (ABC).

Общее количество ежедневных калорий, потребляемых субъектом, которому вводили фармацевтическую композицию, может быть примерно таким же, какое субъект потреблял до введения фармацевтической композиции.

Общее количество ежедневных калорий, потребляемых субъектом, которому вводили фармацевтическую композицию, может быть примерно таким же, как у субъекта, которому вводили плацебо в течение такого же периода времени.

Субъект может проявлять улучшение усвоения углеводов, которое составляет, по меньшей мере, 3-10 грамм в день.

Субъект может проявлять улучшение усвоения углеводов, которое составляет, по меньшей мере, 5 грамм в день.

«Block Food Screener» можно применять для измерения усвоения пищи и/или для измерения усвоения питательных веществ.

«Block Food Screener»можно применять для измерения количества усвоения пищи и/или для измерения качества усвоения пищи.

Субъект может проявлять улучшение по гиперактивности через 12 недель после введения фармацевтической композиции по сравнению с субъектом, которому вводили плацебо.

Гиперактивность может быть измерена по тесту Conners.

Субъект, которому вводили фармацевтическую композицию, может показать увеличенное усвоение углеводов на 12 неделе по сравнению с усвоением углеводов до введения фармацевтической композиции.

Субъект может проявлять улучшение внимания через 12 недель после введения фармацевтической композиции по сравнению с субъектом, которому вводили плацебо.

Внимание можно измерить по тесту Conners.

Субъект может иметь более щелочной pH стула после введения фармацевтической композиции, чем до введения фармацевтической композиции.

Субъект может иметь более щелочной pH стула после, по меньшей мере, четырех недель введения фармацевтической композиции, чем до введения фармацевтической композиции.

Субъект может иметь более щелочной pH стула после введения фармацевтической композиции, чем субъект, которому вводили плацебо.

Субъект может иметь аномальный уровень фекального химотрипсина до введения фармацевтической композиции.

Субъект может иметь уровень фекального химотрипсина меньше, чем 13 Ед/г, измеренный в замороженном образце стула до введения фармацевтической композиции.

Субъект может иметь уровень фекального химотрипсина меньше, чем 12.6 Ед/г, измеренный в замороженном образце стула до введения фармацевтической композиции.

Субъект может иметь уровень фекального химотрипсина меньше, чем 10 Ед/г, измеренный в замороженном образце стула до введения фармацевтической композиции.

Субъект может иметь уровень фекального химотрипсина меньше, чем 9 Ед/г, измеренный в замороженном образце стула до введения фармацевтической композиции.

Субъект может иметь увеличенные уровни фекального химотрипсина после введения фармацевтической композиции.

Субъект может иметь увеличенные уровни фекального химотрипсина после, по меньшей мере, 12 недель введения фармацевтической композиции.

Улучшение по одному или более симптомам ASD может включать увеличение усвоения белка, усвоения жира, усвоения углеводов и/или усвоения витаминов у субъекта.

Улучшение по одному или более симптомам ASD может включать уменьшение усвоения углеводов.

Улучшение по одному или более симптомам ASD может включать уменьшение числа случаев или тяжести диареи, констипации, припадков и/или переломов костей у субъекта.

Улучшение по одному или более симптомам ASD может включать уменьшение числа случаев или тяжести гиперактивности, раздражительности, ажитации, обсессивного компульсивного поведения, заторможенности, гиперактивности, стереотипии, некомплаентности, агрессии, импульсивности, расстройства поведения или оппозиционно-вызывающего расстройства и/или социальной самоизоляции у субъекта.

Улучшение по одному или более симптомам ASD может включать увеличение числа случаев или продолжительности зрительного контакта.

Улучшение по одному или более симптомам ASD может включать улучшение речевой артикуляции или словарного запаса субъекта.

Улучшение по одному или более симптомам ASD может включать улучшение в приучении к горшку.

Улучшение может проявляться субъектом, которому вводили фармацевтическую композицию, и может быть больше, чем у субъекта, которому вводили плацебо.

Субъект, которому вводили фармацевтическую композицию, может дополнительно иметь улучшение общего состояния здоровья.

Субъект может иметь уменьшение числа или тяжести инфекций или уменьшение числа или тяжести случаев аллергических реакций после введения фармацевтической композиции по сравнению с таковыми до введения субъекту фармацевтической композиции.

Субъект может иметь уменьшение числа или тяжести инфекций, или уменьшение числа или тяжести случаев аллергических реакций после введения фармацевтической композиции по сравнению с субъектом, которому вводили плацебо.

Субъект может быть диагностирован как имеющий ASD до введения фармацевтической композиции.

Субъект может быть диагностирован как имеющий ASD с помощью теста DSM-IV, SCQ или ADI-R.

Субъект может быть диагностирован как имеющий ASD с помощью теста DSM-IV, SCQ или ADI-R до введения фармацевтической композиции.

Субъект может быть диагностирован как имеющий PDD, ADD или ADHD.

Субъект может быть диагностирован как имеющий аутизм.

Один или более симптомов ASD могут быть измерены у субъекта с использованием шкалы Aberrant Behavior Checklist (ABC), теста Conners, Теста Expressive Vocabulary Test (EVT), теста Peabody Picture Vocabulary Test (PPVT), опросника Social Communication Questionnaire (SCQ), теста ADI-R или теста DSM-IV. В одном варианте осуществления EVT может представлять собой тест EVT-2. В другом варианте осуществления PPVT может представлять собой тест PPVT-4.

Гиперактивность может быть измерена с помощью теста Conners.

В одном варианте осуществления тест Conners может представлять собой тест Conners-3.

Гиперактивность может быть измерена путем сравнения результатов теста Conners-3 с результатами по гиперактивности, измеренными по шкале ABC.

Один или более симптомов ASD могут быть измерены до введения фармацевтической композиции.

Один или более симптомов ASD могут быть измерены после или во время введения фармацевтической композиции.

Один или более симптомов ASD могут быть измерены один или более раз после введения фармацевтической композиции в течение примерно 1, 2, 3,4, 8, 12, 16, 20, 24, 28, 32, 36, 40, 44, 48, 52, 56, 60, 64, 70, 74, 78, 82, 86 или 90 недель.

Улучшение может наблюдаться после введения субъекту фармацевтической композиции в течение, по меньшей мере, 1, 2, 3, 4, 8, 12, 16, 20, 24, 28, 32, 36, 40, 44, 48, 52, 56, 60, 64, 70, 74, 78, 82, 86 или 90 недель.

Улучшение может наблюдаться после введения субъекту фармацевтической композиции в течение, по меньшей мере, одной недели.

Фармацевтическую композицию можно вводить субъекту вместе с пищей.

Фармацевтическую композицию можно вводить субъекту ежедневно. Фармацевтическую композицию можно вводить субъекту 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12 раз в день.

Фармацевтическую композицию можно вводить субъекту один раз в день, два раза в день или три раза в день.

Фармацевтическую композицию можно вводить субъекту в течение, по меньшей мере, 12 недель.

Фармацевтическую композицию можно вводить субъекту в течение, по меньшей мере, 3-6 месяцев, 6-12 месяцев, 12-18 месяцев или 18-24 месяцев.

Фармацевтическую композицию можно вводить субъекту в течение, по меньшей мере, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 лет.

Терапевтическая композиция может содержать протеазы, амилазы и липазы.

В одном варианте осуществления протеазы включают в себя трипсин и/или химотрипсин.

В другом варианте осуществления терапевтическая композиция может представлять собой панкреатин.

В другом варианте осуществления терапевтическая композиция может представлять собой панкреатин в твердой форме.

В другом варианте осуществления терапевтическая композиция может представлять собой панкреатин в кристаллической форме.

В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция не вызывает седативного эффекта, увеличения головокружения, симптомов болезни Паркинсона, дистонии, акатизии, сонливости, усталости, экстрапирамидных расстройств, тремора или слюнотечения.

В другом варианте осуществления терапевтическая композиция содержит покрытие.

Покрытие может представлять собой энтеросолюбильное покрытие.

Покрытие может содержать липид, смесь липидов, смесь липида и эмульгаторов, или полимер.

В одном варианте осуществления покрытие содержит соевый липид.

Покрытие может маскировать вкус и/или запах терапевтической композиции.

В другом варианте осуществления энтеросолюбильное покрытие содержит гипромеллозы фталат, диметикон 1000, дибутилфталат или их комбинацию.

Покрытие может дополнительно содержать эмульгатор.

Одно или более вспомогательных веществ могут включать в себя целлюлозу.

Терапевтическая композиция может высвобождаться в проксимальном отделе тонкой кишки после введения субъекту.

Терапевтическая композиция может высвобождаться в двенадцатиперстной кишке или тощей кишке тонкого кишечника после введения субъекту.

Терапевтическая композиция может высвобождаться в подвздошной кишке тонкого кишечника после введения субъекту.

Фармацевтическую композицию можно вводить перорально.

Фармацевтическую композицию можно вводить напрямую в желудочно-кишечную систему.

Фармацевтическую композицию можно вводить посредством назогастрального зонда (NG Tube) или гастростомической трубки (G-tube).

Субъект, которому ввели фармацевтическую композицию, может проявлять улучшение по двум, трем, четырем, пяти, шести или более симптомам ASD.

Возраст субъекта может составлять 1-18 лет. Возраст субъекта может составлять 2-16 лет. Возраст субъекта может составлять 1-10 лет. Возраст субъекта может составлять 3-8 лет. Возраст субъекта может составлять 9-12 лет.

Субъект может проявлять улучшение усвоения витаминов (по массе) B6, B12, A, C, E, K, меди, железа, холестерина, никотиновой кислоты, рибофлавина, тиамина или цинка после введения фармацевтической композиции.

Субъект может проявлять увеличение усвоения одного или более из растительного витамина А, каротиноидов (альфа- и бета-каротин), витамина K, витамина E, витамина C, селена, меди, фолата, лютеина, ликопина, магния, калия, фосфора, натрия, полиненасыщенных жирных кислот, мононенасыщенных жирных кислота, насыщенных жиров, холестерина, витамина E, витамина K и/или теобромина.

Увеличение усвоения витаминов у субъекта может представлять собой увеличение по сравнению с усвоением до начала введения субъекту фармацевтической композиции.

Увеличение усвоения витаминов у субъекта может представлять собой увеличение по сравнению с усвоением у субъекта, которому вводили плацебо.

Субъект может проявлять увеличение уровней B6, B12, A, C, E, K, меди, железа, холестерина, никотиновой кислоты, рибофлавина, тиамина или цинка в крови после введения фармацевтической композиции.

Субъект может проявлять увеличение фекальных уровней растительного витамина А, каротиноидов (альфа- и бета-каротина), витамина K, витамина E, витамина C, селена, меди, фолата, лютеина, ликопина, магния, калия, фосфора, натрия, полиненасыщенных жирных кислот, мононенасыщенных жирных кислот, насыщенных жиров, холестерина, витамина E, витамина K и/или теобромина.

Увеличение уровней в крови или фекальных уровней у субъекта может представлять собой увеличение по сравнению с таковыми до начала введения субъекту фармацевтической композиции.

Увеличение уровней в крови или фекальных уровней у субъекта, которому вводили фармацевтическую композицию, может представлять собой увеличение по сравнению с таковыми у субъекта, которому вводили плацебо.

В другом варианте осуществления субъект дополнительно имеет недостаточность витамина K.

Недостаточность витамина K может быть измерена путем определения уровней гамма-карбоксилированных белков в крови.

В одном варианте осуществления способ дополнительно включает проведение усиливающей глутамат терапии у субъекта.

В другом варианте осуществления способ дополнительно включает введение витамина K.

В настоящем документе обеспечен способ улучшения навыков экспрессивной и/или рецептивной речи у субъекта с симптомом ASD, включающий введение фармацевтической композиции, содержащей одно или более вспомогательных веществ, и терапевтической композиции, при этом терапевтическая композиция содержит протеазу, амилазу и/или липазу.

Субъект может проявлять улучшение навыков экспрессивной и/или рецептивной речи после введения фармацевтической композиции по сравнению с таковыми до введения субъекту фармацевтической композиции.

Субъект может проявлять большее улучшение навыков экспрессивной и/или рецептивной речи после введения фармацевтической композиции, чем субъект с симптомом ASD, которому вводили плацебо.

Навыки экспрессивной и/или рецептивной речи могут быть измерены с помощью теста Expressive Vocabulary Test (EVT) и/или теста Peabody Picture Vocabulary Test (PPVT).

В одном варианте осуществления тест EVT может представлять собой тест EVT-А или EVT-B.

В одном варианте осуществления тест PPVT может представлять собой тест PPVT-A или PPVT-B.

Субъект, которому вводили фармацевтическую композицию, может проявлять большее улучшение навыков экспрессивной речи, чем навыков рецептивной речи.

В настоящем документе обеспечен способ лечения субъекта с одним или более симптомами ASD, включающий: введение субъекту фармацевтической композиции, содержащей одно или более вспомогательных веществ, и терапевтической композиции, при этом терапевтическая композиция содержит протеазу, амилазу и/или липазу, при этом субъект проявляет улучшение по одному или более симптомам ASD, включающим: (а) усвоение белков, усвоение жиров, усвоение углеводов, усвоение витаминов, припадки и/или переломы костей; и/или (b) раздражительность, ажитацию, заторможенность, гиперактивность, некомплаентность, агрессию, импульсивность, расстройство поведения или оппозиционно-вызывающее расстройство и/или социальную самоизоляцию, и при этом субъект имеет улучшение, по меньшей мере, на 10% или больше по одному или более симптомам ASD после введения фармацевтической композиции.

Субъект может проявлять увеличение общего усвоения (по массе) жиров, составляющее, по меньшей мере, 10% после введения фармацевтической композиции.

Субъект может проявлять увеличение общего усвоения (по массе) белков, составляющее, по меньшей мере, 10% после введения фармацевтической композиции.

Субъект может проявлять увеличение общего усвоения (по массе) углеводов, составляющее, по меньшей мере, 10% после введения фармацевтической композиции.

В настоящем документе обеспечен способ увеличения массы тела или физического роста у субъекта с симптомом ASD, включающий введение фармацевтической композиции, содержащей одно или более вспомогательных веществ, и терапевтической композиции, при этом терапевтическая композиция содержит протеазу, амилазу и/или липазу.

Один или более симптомов ASD могут быть измерены у субъекта с использованием шкалы Aberrant Behavior Checklist (ABC), теста Conners, теста Expressive Vocabulary Test (EVT), теста Peabody Picture Vocabulary Test (PPVT), опросника Social Communication Questionnaire (SCQ), теста ADI-R или теста DSM-IV. В одном варианте осуществления EVT может представлять собой тест EVT-2. В другом варианте осуществления PPVT может представлять собой тест PPVT-4. Гиперактивность может быть измерена с помощью теста Conners.

В другом варианте осуществления тест Conners может представлять собой тест Conners-3.

Улучшение может наблюдаться у субъекта, которому вводили фармацевтическую композицию, через 12 недель или более после начала введения фармацевтической композиции.

Субъект, которому вводили фармацевтическую композицию, может проявлять большее улучшение балла по EVT, чем балла по PPVT.

Субъект, которому вводили фармацевтическую композицию, может проявлять большее улучшение балла по EVT или PPVT, и субъект может проявлять увеличенное усвоение белка после начала введения субъекту фармацевтической композиции.

Улучшение может наблюдаться через 12 или более недель после начала введения субъекту фармацевтической композиции.

Субъект может проявлять улучшение, составляющее больше чем 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% или 100% по одному или более дополнительным симптомам ASD после введения фармацевтической композиции.

Общее ежедневное усвоение (по массе) белков, жиров, углеводов и/или витаминов у субъекта может увеличиться после введения фармацевтической композиции по сравнению с усвоением белков, жиров, углеводов и/или витаминов субъектом до введения фармацевтической композиции.

Общее ежедневное усвоение (по массе) углеводов у субъекта может уменьшиться после введения фармацевтической композиции по сравнению с усвоением углеводов субъектом до введения фармацевтической композиции.

Чем выше степень ежедневного усвоения (по массе) белков, жиров, углеводов и/или витаминов, потребляемых субъектом после введения фармацевтической композиции, тем больше улучшение у субъекта по одному или более симптомам ASD.

Ежедневное усвоение (по массе) белков, жиров, углеводов и/или витаминов, потребляемых субъектом, может быть измерено до введения фармацевтической композиции субъекту и примерно через 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 24, 36, 48 или 52 недель после начала введения фармацевтической композиции.

Субъект может иметь более значительное увеличение ежедневного усвоения (по массе) витаминов после введения фармацевтической композиции по сравнению с субъектом с одним или более симптомами ASD после введения плацебо.

Субъект может иметь более значительное увеличение ежедневного усвоения (по массе) углеводов после введения фармацевтической композиции по сравнению с субъектом с одним или более симптомами ASD после введения плацебо.

Общее количество ежедневных калорий, потребляемых субъектом, может увеличиться после введения фармацевтической композиции по сравнению с общим ежедневным количеством калорий, потребляемых субъектом до введения фармацевтической композиции.

Чем больше ежедневных калорий субъект потребляет после введения фармацевтической композиции, тем больше улучшение у субъекта по одному или более симптомам ASD.

Общее количество ежедневных калорий, потребляемых субъектом, может быть измерено до введения субъекту фармацевтической композиции и примерно через 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 24, 36, 48 или 52 недели после начала введения фармацевтической композиции.

Субъект может потреблять, по меньшей мере, 800 килокалорий в день после 12 недель введения фармацевтической композиции.

Субъект может дополнительно проявлять улучшение симптома, включающего в себя диарею, констипацию, припадки, переломы костей и/или гиперактивность.

Субъект может дополнительно иметь улучшение одного или более дополнительных симптомов ASD.

Один или более симптомов ASD могут быть измерены один или более раз после введения фармацевтической композиции в течение 1, 2, 3, 4, 8, 12, 16, 20, 24, 28, 32, 36, 40, 44, 48, 52, 56, 60, 64, 70, 74, 78, 82, 86 или 90 недель.

Субъекту можно вводить фармацевтическую композицию в пищей.

Субъекту можно вводить фармацевтическую композицию ежедневно.

Субъекту можно вводить фармацевтическую композицию 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12 раз в день.

Субъекту можно вводить фармацевтическую композицию один раз в день.

Субъекту можно вводить фармацевтическую композицию в течение, по меньшей мере, 12 недель.

Субъекту можно вводить фармацевтическую композицию в течение, по меньшей мере, 3-6 месяцев, 6-12 месяцев, 12-18 месяцев или 18-24 месяцев.

Субъекту можно вводить фармацевтическую композицию в течение, по меньшей мере 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 лет.

В одном варианте осуществления терапевтическая композиция содержит протеазы, амилазы и липазы.

В другом варианте осуществления протеазы включают в себя трипсин и/или химотрипсин.

В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция не вызывает седативного эффекта, увеличения головокружения, симптомов болезни Паркинсона, дистонии, акатизии, сонливости, усталости, экстрапирамидных расстройств, тремора или слюнотечения.

Терапевтическая композиция может содержать покрытие.

В одном варианте осуществления энтеросолюбильное покрытие содержит гипромеллозы фталат, диметикон 1000, дибутилфталат или их комбинацию.

В любом из таких вариантов осуществления, описанных здесь, одно или более вспомогательных веществ включает в себя целлюлозу.

Терапевтическая композиция может высвобождаться в подвздошной кишке тонкого кишечника после введения субъекта.

Субъект, которому вводили фармацевтическую композицию, может проявлять улучшение по двум, трем, четырем, пяти, шести или более симптомам ASD.

Субъект может проявлять увеличение усвоения витаминов (по массе) B6, B12, A, C, E, K, меди, железа, холестерина, никотиновой кислоты, рибофлавина, тиамина или цинка после введения фармацевтической композиции.

Субъект может проявлять увеличение усвоения одного или более из растительного витамина А, каротиноидов (альфа- и бета-каротина), витамина K, витамина E, витамина C, селена, меди, фолата, лютеина, ликопина, магния, калия, фосфора, натрия, полиненасыщенных жирных кислот, мононенасыщенных жирных кислот, насыщенных жиров, холестерина, витамина E, витамина K и/или теобромина.

Увеличение усвоения витаминов у субъекта может представлять собой увеличение по сравнению с таковым до начала введения фармацевтической композиции субъекту.

Увеличение усвоения витаминов у субъекта может представлять собой увеличение по сравнению с таковым у субъекта, которому вводили плацебо.

Субъект может проявлять увеличение фекальных уровней витамина А, каратеноидов (альфа- и бета-каротин), витамина K, витамина E, витамина C, селена, меди, фолата, лютеина, ликопина, магния, калия, фосфора, натрия, полиненасыщенных жирных кислот, мононенасыщенных жирных кислот, насыщенных жиров, холестерина, витамина E, витамина K и/или теобромина.

Увеличение уровней в крови или фекальных уровней у субъекта может представлять собой увеличение по сравнению с таковыми до начала введения фармацевтической композиции субъекту.

Увеличение уровней в крови или фекальных уровней у субъекта, которому вводили фармацевтическую композицию, может представлять собой увеличение по сравнению таковыми у субъекта, которому вводили плацебо.

В настоящем документе обеспечен способ лечения субъекта с PDD, ADD или ADHD, нуждающегося в этом, с помощью фармацевтической композиции, включающий: введение фармацевтической композиции, содержащей один или более пищеварительных панкреатических ферментов, субъекту, при этом субъект показывает уменьшение тяжести или частоты проявления одного или более симптомов, связанных с PDD, ADD или ADHD, после введения фармацевтической композиции.

В настоящем документе обеспечен способ лечения субъекта с PDD, ADD или ADHD, нуждающегося в этом, с помощью фармацевтической композиции, включающий: введение фармацевтической композиции, содержащей один или более пищеварительных панкреатических ферментов субъекту, при этом субъект имеет дефицит витамина K, и при этом субъект показывает уменьшение тяжести или частоты проявления одного или более симптомов, связанных с ASD, ADD или ADHD, после введения фармацевтической композиции.

ASD может представлять собой аутизм.

В настоящем документе обеспечен способ лечения субъекта с ASD, ADD или ADHD, нуждающегося в этом, с помощью фармацевтической композиции, включающий: введение фармацевтической композиции, содержащей: 1) один или более пищеварительных панкреатических ферментов; 2) усиливающую глутамат терапию; и/или 3) витамин К, субъекту, при этом субъект имеет недостаточность витамина K или аномальный уровень фекального химотрипсина, и при этом субъект показывает уменьшение тяжести или частоты проявления одного или более симптомов, связанных с ASD, ADD или ADHD, после введения фармацевтической композиции.

ASD может представлять собой аутизм.

В настоящем документе обеспечен способ лечения субъекта с ASD, ADD или ADHD, нуждающегося в этом, с помощью фармацевтической композиции, включающий: введение фармацевтической композиции, содержащей один или более пищеварительных панкреатических ферментов субъекту, при этом субъект имеет недостаточность витамина K, и при этом субъект показывает уменьшение тяжести или частоты проявления одного или более симптомов, связанных с ASD, ADD или ADHD, после введения фармацевтической композиции.

В настоящем документе обеспечен способ лечения субъекта с одним или более симптомами ASD, включающий: введение субъекту фармацевтической композиции, содержащей одно или более вспомогательных веществ, и терапевтической композиции, при этом терапевтическая композиция содержит протеазу, амилазу и/или липазу, при этом субъект проявляет улучшение по одному или более симптомам ASD, при этом субъект имеет одну или более аллергических реакций и имеет большее усвоение волокон, калорий, жиров, белков и углеводов после введения фармацевтической композиции, чем субъект, который не имеет аллергических реакций.

Включение путем отсылки

Все публикации, патенты и заявки на патенты, упоминаемые в настоящем описании, включены в него в полном объеме путем отсылки, как если бы каждая отдельная публикация, патент или заявка на патент была особо и отдельно указана как включенная путем отсылки. Публикация Fallon и Heil США No. 2010-0260857 A1 (USSN 12/386051) включена путем отсылки в полном объеме.

Краткое описание чертежей

Новые отличительные признаки вариантов осуществления представлены далее более подробно в прилагаемой формуле изобретения. Лучшее понимание отличительных признаков и преимуществ настоящих вариантов осуществления будет получено из следующего подробного описания иллюстративных вариантов осуществления, в которых использованы принципы вариантов осуществления, и из сопроводительных чертежей, на которых:

На Фигуре 1 показана гистограмма % активности липазы в частицах сырьевых пищеварительных ферментов и после инкапсулирования, для покрытых ферментных препаратов, содержащих 70%, 80% и 90% пищеварительных ферментов по массе;

На Фигуре 2 представлена гистограмма % высвобождения ферментов для ферментных препаратов, содержащих 70%, 80% и 90% пищеварительных ферментов по массе, в моменты времени, указанные по оси у;

На Фигуре 3 показана гистограмма распределений по размерам частиц сырьевых пищеварительных ферментов по сравнению с распределениями частиц по размерам в покрытых ферментных препаратах, содержащих 70% или 80% пищеварительных ферментов по массе;

На Фигуре 4 показана схема технологического процесса, который может применяться для инкапсулирования частиц пищеварительных ферментов;

На Фигуре 5 показана хроматограмма площади пика (mAU) в зависимости от времени для рабочего стандартного образца (верхняя линия), разбавителя (линия, которая начинается третьей сверху в момент времени 4 минуты), подвижной фазы, используемой в HPLC (нижняя линия в момент времени 4 минуты) и плацебо (вторая от верхней линии в момент времени 4 минуты), которая демонстрирует отсутствие наложения с пиком стандартного трипсина.

На Фигуре 6 показаны уровни FCT, измеренные у 26 субъектов с симптомами аутизма.

На Фигуре 7 показаны уровни FCT, измеренные у 46 субъектов. Из них 25 субъектов имели симптомы аутизма, тогда как 21 субъект не имели симптомов аутизма.

На Фигуре 8 показаны уровни фекального химотрипсина, измеренные у 320 подобранных по возрасту субъектов. Темно-синяя линия (в градации серого, верхняя, черная линия) показывает уровни FCT у субъектов с известными заболеваниями (генетическими и другими заболеваниями). Бордовая линия (в градации серого, верхняя, темно-серая линия) показывает уровни FCT у нормальных субъектов без какого-либо известного заболевания. Голубая линия (в градации серого, нижняя, средняя серая линия) показывает уровни FCT у субъектов с аутизмом. Розовая линия (в градации серого, нижняя, темно-серая линия), показывает измерения FCT для субъектов с ADHD. Желтая линия (в градации серого, нижняя, светло-серая линия) показывает измерения FCT для субъектов с ADD.

Фигура 9 иллюстрирует аномальные уровни химотрипсина у различных популяций субъектов.

На Фигуре 10 представлены иллюстративные результаты самоограничения диеты, наблюдаемые у субъектов с аутизмом.

На Фигуре 11 показаны уровни фекального химотрипсина.

На Фигуре 12 показаны уровни фекального химотрипсина.

На Фигуре 13 представлены иллюстративные главные протеазы.

Фигура 14 иллюстрирует репрезентативное движение белка по организму человека после усвоения.

На Фигуре 15 показаны изменения уровней фекального химотрипсина от исходного уровня у субъектов, которым вводили Препарат 1, в сравнении с субъектами, которым вводили плацебо.

Фигура 16 иллюстрирует изменение pH у субъектов, которые получали лечение Препаратом 1, в сравнении с плацебо в течение 12 недель клинического испытания.

На Фигуре 17 показаны баллы по шкале развития для PPVT для субъектов, получавших Препарат 1, которые превышают таковые для субъектов, получавших плацебо. В баллы по шкале развития внесена поправка на возраст и стандартизацию баллов по всему исследованию.

На Фигуре 18 показано, что баллы по EVT демонстрируют большое различие между субъектами, которым вводили Препарат 1, и субъектами, которым вводили плацебо.

Фигура 19 иллюстрирует изменение среднего стандартного балла по EVT как функцию усвоения белка (г) на неделе 12.

Фигура 20 иллюстрирует анализ медианы общего балла по ABC и изменение от исходного уровня общего балла по ABC в течение 12-недельного исследования.

Фигура 21 иллюстрирует изменение показателя раздражительности по ABC как функцию фекального химотрипсина на неделе 12. На неделе 12 имеется статистически значимое различие между субъектами, получавшими плацебо и Препарат 1, по баллам раздражительности по ABC, независимо от их уровня фекального химотрипсина на неделе 12.

Фигура 22 иллюстрирует изменение балла раздражительности по ABC у тех субъектов, у которых раздражительность на исходном уровне находится выше медианы по ABC. У субъектов, у которых раздражительность на исходном уровне находится выше медианы по подшкале раздражительности ABC, Препарат 1 показал значительно большее улучшение по сравнению с Плацебо.

Фигура 23 иллюстрирует изменение показателя раздражительности по ABC как функцию изменения усвоения белка на неделе 12. Имеется различие между субъектами, которые получали Препарат 1, и субъектами, получавшими плацебо, в отношении изменений показателя раздражительности по ABC во время исследования. Субъекты, получавшие Препарат 1, имели более значительное изменение по сравнению с субъектами, получавшими плацебо, независимо от изменения усвоения белка в течение курса исследования. Следует отметить, что при увеличении примерно до 4 г + усвоения белка в день, изменение показателя раздражительности по ABC продолжает улучшаться у субъектов, получавших Препарат 1, и ухудшается у субъектов, получавших плацебо.

Фигура 24 иллюстрирует изменение показателя раздражительности по ABC как функцию усвоения белка (г) на неделе 12. Имеется различие между субъектами, получавшими Препарат 1, и субъектами, получавшими плацебо, в отношении изменений показателя раздражительности по ABC во время клинического исследования. Субъекты, получавшие Препарат 1, имели более значительное улучшение баллов раздражительности по ABC, по сравнению с субъектами, получавшими плацебо, независимо от усвоения белка на неделе 12. Следует отметить, что при общем усвоении белка примерно 40 г+, изменение показателя раздражительности по ABC остается относительно постоянным у субъектов, получавших Препарат 1, и ухудшается у субъектов, получавших плацебо. У субъектов, получавших Препарат 1, при увеличении усвоения белка на неделе 12 баллы раздражительности по ABC являются неизменными, тогда как у субъектов, получавших плацебо, чем больше усвоение белка на неделе 12, тем хуже показатели у субъектов по шкале раздражительности ABC, и изменение баллов снижается.

Фигура 25 иллюстрирует изменение показателя раздражительности по ABC как функцию изменения усвоения углеводов. Независимо от изменения усвоения углеводов во время испытания, субъекты, которым вводили Препарат 1, значительно улучшили показатели (нижнее число) по сравнению с субъектами, получавшими плацебо. Кроме того, у субъектов, получавших плацебо, наблюдалось ухудшение, так как уровни углеводов (СНО) повысились выше 25 + грамм.

Фигура 26 иллюстрирует изменение показателя раздражительности по ABC как функцию усвоения килокалорий на неделе 12. Улучшение изменения показателя раздражительности по ABC было больше у субъектов, получавших Препарат 1, независимо от уровней усвоения калорий, измеренных на неделе 12. Изменение показателя раздражительности в сторону улучшения в группе, получавшей Препарат 1, оставалось устойчивым, независимо от уровня усвоения калорий, измеренного на неделе 12. Группа, получавшая плацебо, ухудшила изменение своего показателя раздражительности, так как измеренный уровень калорий был повышенным. Это особенно заметно при общем усвоении калорий 800+. Важно отметить, что указанные уровни ниже 1200 калорий все являются аномальными уровнями усвоения калорий.

Фигура 27 иллюстрирует измерение показателя заторможенности по ABC как функцию усвоения килокалорий на неделе 12. Субъекты, получавшие Препарат 1, имели более значительное улучшение показателя социальной самоизоляции/заторможенности по сравнению с субъектами, получавшими плацебо, независимо от степени усвоения калорий. Субъекты, получавшие плацебо, после достижения усвоения приблизительно 800+ калорий в день начинали показывать ухудшение.

Фигура 28 иллюстрирует изменение показателя заторможенности по ABC как функцию изменения усвоения белка. Субъекты, получавшие Препарат 1, имели более значительное улучшение показателя заторможенности/социальной изоляции по сравнению с субъектами, получавшими плацебо, независимо от усвоения белка. Субъекты, получавшие плацебо, которые имели изменение 2 + грамм, продолжали ухудшение при увеличении изменения в потреблении белков от исходного уровня.

Фигура 29 иллюстрирует изменение показателя заторможенности по ABC как функцию фекального химотрипсина на неделе 12. Субъекты, получавшие Препарат 1, имели большее улучшение показателя заторможенности/социальной самоизоляции по сравнению с субъектами, получавшими плацебо, независимо от своих фекальных уровней химотрипсина на неделе 12. Субъекты, которые имели уровень фекального химотрипсина 8+ единиц/г или больше на неделе 12 и получали Препарат 1, показали большее улучшение, чем субъекты, получавшие плацебо, которые имели уровни фекального химотрипсина 8+ Ед/г. Субъекты, которые получали плацебо, показали дальнейшее ухудшение с увеличением уровней FCT в конце испытания.

Фигура 30 иллюстрирует изменение показателя гиперактивности по ABC как функцию усвоения килокалорий на неделе 12.

Фигура 31 иллюстрирует изменение показателя гиперактивности по ABC как функцию усвоения белка (г) на неделе 12.

Фигура 32 иллюстрирует изменение показателя гиперактивности по ABC как функцию фекального химотрипсина на неделе 12.

Фигура 33 иллюстрирует изменение показателя стереотипии по ABC как функцию усвоения килокалорий на неделе 12.

Фигура 34 иллюстрирует изменение показателя стереотипии по ABC как функцию усвоения белка (г) на неделе 12.

Фигура 35 иллюстрирует изменение показателя речи по ABC как функцию усвоения килокалорий на неделе 12.

Фигура 36 иллюстрирует изменение показателя неадекватной речи по ABC как функцию усвоения белка на неделе 12.

Фигура 37А-В иллюстрирует анализ медианы общих баллов по ABC на исходном уровне: изменение общих баллов по ABC в течение 12-недельного испытания. Общий показатель изменения по ABC продемонстрировал, что субъекты выше медианы на исходном уровне отвечают лучше на Препарат 1 по сравнению с субъектами, получавшими лечение плацебо. Результаты ниже медианы показаны на Фигуре 37А; результаты выше медианы показаны на Фигуре 37В.

Фигура 38 иллюстрирует изменение общих баллов по ABC как функцию усвоения килокалорий на неделе 12.

Фигура 39 иллюстрирует изменение общих баллов по ABC как функцию усвоения белка на неделе 12.

Фигура 40 иллюстрирует изменение общих баллов по ABC как функцию усвоения белка (г) на неделе 12.

Фигура 41 иллюстрирует изменение общих баллов по ABC как функцию фекального химотрипсина на неделе 12. Имеется значительное различие между субъектами, получавшими Препарат 1 и субъектами, получавшими плацебо, в отношении изменения их общих баллов по ABC, независимо их уровня фекального химотрипсина на неделе 12. Можно сделать предположение, что не только уровни химотрипсина воздействуют на процесс изменения в результате введения ферментной композиции.

Фигура 42 иллюстрирует изменение общих баллов по ABC как функцию усвоения углеводов на неделе 12.

Фигура 43 иллюстрирует изменение килокалорий как функцию изменения усвоения углеводов. Субъекты, получавшие лечение с помощью Препарата 1, во время исследования имели более значительное изменение в их потреблении килокалорий по сравнению с субъектами, получавшими плацебо, независимо от уровня увеличения изменения в потреблении углеводов (СНО). Продолжает сохраняться расхождение между субъектами, получавшими Препарат 1, и субъектами, получавшими плацебо, во время курса лечения.

Фигура 44 иллюстрирует изменение усвоения белков как функцию изменения усвоения углеводов. Независимо от изменения в усвоении белка во время исследования или усвоения СНО, продолжает сохраняться расхождение между двумя группами. Кроме того, независимо от изменения усвоения белка, общее усвоение белка больше у субъектов, получавших лечение Препаратом 1, по сравнению с субъектами, получавшими лечение плацебо, независимо от изменения в потреблении СНО.

Фигура 45 иллюстрирует усвоение белка на неделе 12 как функцию изменения усвоения углеводов. Абсолютное количество белка, переваренного субъектами на неделе 12 исследования, было больше у субъектов, получавших Препарат 1, по сравнению с субъектами, получавшими плацебо. На изменение усвоения СНО во время исследования не влияет количество белка, которое субъекты потребляли на неделе 12. И вновь наблюдалось, что изменения возникали у субъектов, получавших лекарственное средство, по сравнению с субъектами, получавшими плацебо. Следует отметить, что при изменении усвоения СНО во время исследования, составляющем 20 г+, имелось более значительное расхождение между субъектами, получавшими Препарат 1 и плацебо.

Фигура 46 иллюстрирует изменение белка как функцию изменения усвоения углеводов. Изменение усвоения белка во время курса исследования было больше у субъектов, получавших Препарат 1, чем у субъектов, получавших плацебо, независимо от уровня изменения усвоения СНО во время курса исследования. На увеличения в усвоении белка у субъектов, которым вводили лекарственное средство, не влияло усвоение СНО.

Фигура 47 иллюстрирует изменение килокалорий как функцию изменения усвоения углеводов. График демонстрирует, что субъекты, получавшие лечение с помощью Препарата 1, имеют большее изменение килокалорий по всем увеличениям в приеме СНО во время исследования. Субъекты, получавшие лечение с помощью Препарата 1, проявившие увеличения в приеме СНО во время исследования, также имели большее изменение килокалорий по сравнению с субъектами, получавшими плацебо. Это демонстрирует, что прием углеводов во время клинического исследования, даже большие изменения до 30+ г/день, не влияют на увеличения в потреблении килокалорий во время 12 недель испытания.

Фигура 48 иллюстрирует средний уровень фекального химотрипсина на неделе 12 как функцию изменения усвоения углеводов (г): субъекты, получавшие лечение с помощью Препарата 1, и субъекты, получавшие плацебо, проявили сходство средних значений на исходном уровне. Среднее значение абсолютного содержания фекального химотрипсина на неделе 12 близки к «нормальному пороговому значению» химотрипсина (12.6 в замороженном стуле), независимо от увеличения в усвоении СНО в течение курса исследования. У субъектов, получавших плацебо, уровень химотрипсина продолжал оставаться аномальным на неделе 12, независимо от роста изменения СНО в течение курса исследования.

Фигура 49 иллюстрирует изменение фекального химотрипсина как функцию изменения усвоения углеводов: имеется значительное различие между субъектами, которые получали заместительную терапию химотрипсином в исследовании (т.е. субъектами, которым вводили Препарат 1), и субъектами, которым вводили плацебо. Это изменение возникает независимо от степени увеличения в усвоении углеводов в течение курса 12-недельного исследования. Важно отметить, что усвоение пищи, в данном случае СНО, не индуцировало образование природного химотрипсина у субъектов, получавших плацебо. По-видимому, углеводы изменяются во время клинического исследования, так как субъекты, которым вводили Препарат 1 и плацебо, могут иметь увеличение усвоения углеводов по причине различающихся потребностей в калориях.

Фигура 50 иллюстрирует изменение усвоения витамина K как функцию фекального химотрипсина на неделе 12. Уровни усвоения витамина K у субъектов, которым вводили плацебо, колеблются между -3 и 1.5 г на неделе 12. У субъектов, которым вводили плацебо, имеющим уровень фекального химотрипсина в нормальном диапазоне на неделе 12, усвоение витамина K изменяется от 0 до -3 г. У субъектов, которым вводили Препарат 1, усвоение витамина K изменяется от -0.1 до 4 г. Для субъектов с FCT в нормальном диапазоне на неделе 12 усвоение витамина K изменяется от 3.5 до 4 грамм. Начиная с 8.0 Ед/г активности химотрипсина, изменение происходит от 0.8 до 4.

Фигура 51 иллюстрирует изменение альфа-каротина как функцию фекального химотрипсина на неделе 12.

Фигура 52 иллюстрирует изменение показателя гиперактивности по родительской оценочной шкале Коннерса как функцию изменения усвоения углеводов. Субъекты, получавшие Препарат 1, имели большее изменение в сторону улучшения (отрицательное «-» является улучшением) баллов по родительской оценочной шкале по сравнению с субъектами, получавшими плацебо. Кроме того, после изменения в усвоении СНО, составляющего 20 г+, изменение у субъектов, получавших Препарат 1, остается постоянным, и изменение у субъектов, получавших плацебо, показывает ухудшение симптомов (положительное «+» изменение по шкале).

Фигура 53 иллюстрирует изменение показателя гиперактивности по шкале Conners как функцию изменения усвоения углеводов на неделе 12.

Фигура 54 иллюстрирует изменение показателя невнимательности по шкале Conners как функцию изменения усвоения углеводов.

Фигура 55 иллюстрирует изменение показателя расстройства поведения по шкале Conners как функцию фекального химотрипсина на неделе 12.

Фигура 56 иллюстрирует изменение оппозиционно-вызывающего расстройства по шкале Conners как функцию фекального химотрипсина на неделе 12.

Фигура 57 иллюстрирует изменение среднего балла по шкале развития для PPVT как функцию фекального химотрипсина на неделе 12.

Фигура 58 иллюстрирует изменение среднего балла по шкале развития для EVT как функцию изменения фекального химотрипсина на неделе 12.

Подробное описание изобретения

Пищеварительные ферменты вырабатываются слюнными железами, железами желудка, поджелудочной железой и железами тонкой кишки. Например, пищеварительные ферменты, вырабатываемые поджелудочной железой и секретируемые в желудок и тонкий кишечник, способствуют пищеварению. Пищеварительные ферменты, вырабатываемые поджелудочной железой, секретируются в двенадцатиперстную кишку и верхние отделы тонкого кишечника, где pH должно составлять приблизительно от 5 до 6.6, тем самым ферменты могут способствовать перевариванию компонентов пищи, в том числе углеводов, липидов, белков и нуклеиновых кислот, и других компонентов пищи. После приема пища подвергается воздействию среды с высокой кислотностью в желудке (pH 1-2). После частичного переваривания в желудке пища поступает в проксимальный отдел тонкого кишечника (двенадцатиперстную кишку). Присутствие пищи в двенадцатиперстной кишке (механорецепторы) и высокое кислое значение pH (1-2) сигнализирует поджелудочной железе секретировать предшественники ферментов (проферменты, также известные как зимогены) наряду с бикарбонатными ионами. Пища затем подвергается воздействию проферментов, секретируемых поджелудочной железой, наряду с бикарбонатными ионами, которые изменяют pH среды двенадцатиперстной кишки с pH 1-2 до pH 5-6.5. Проферменты затем активируются из их неактивного зимогенного состояния в активную форму (например, трипсиноген превращается в трипсин, и химотрипсиноген превращается в активный химотрипсин).

Пищеварительные ферменты вводили млекопитающим для лечения дефицита ферментов, вызванного состояниями, оказывающими воздействие на поджелудочную железу, такими как панкреатит и дефицит панкреатических ферментов, или недостаточность. Панкреатические ферменты, вводимые человеку, обычно имеют свиное происхождение. Производители ферментных препаратов также используют энтеросолюбильные покрытия для композиций у субъектов, которым требуется введение липаз. Перорально вводимые ферментные препараты, которые состоят из предварительно активированных ферментов, подвергаются воздействию высококислых условий в желудке с pH около 1-2, а также желудочных протеаз, которые денатурируют и расщепляют ферменты; в особенности липазная часть ферментной смеси, которая обладает высокой чувствительностью к воздействию воды, воздуха и расщеплению протеазами.

В препаратах, предназначенных для доставки липаз, применяется энтеросолюбильное покрытие, содержащее, например, гипромеллозы фталат, диметикон 1000 и дибутилфталат.

Некоторые способы покрытия чувствительных биологически активных веществ были описаны. В патенте США №6262613, принадлежащем Narayanaswamy et al., раскрыты частицы, которые могут включать в себя дрожжи, покрытые оболочкой из жира в бета-прим форме (т.е. кристаллы триглицеридов, имеющие блочную симметрию). Материал покрытия может дополнительно содержать эмульгаторы, такие как эмульгаторы, обнаруживаемые в гидрогенизированном растительном масле. Однако покрытие обеспечивает высвобождение дрожжей только в ограниченном температурном интервале от примерно 40°C до примерно 55°C. В патенте США №6251478, принадлежащем Pacifico et al., раскрыты некоторые чувствительные вещества, в том числе некоторые биологически активные соединения, инкапсулированные в липидный материал.

В настоящем документе описаны варианты осуществления для покрытых пищеварительных ферментных препаратов, фармацевтических композиций и систем доставки ферментов, в том числе покрытых препаратов пищеварительных ферментов, которые являются полезными для лечения субъектов с аутизмом, ADD, ADHD, другими неврологическими и поведенческими заболеваниями или состояниями.

Аутизм или аутическое расстройство является наиболее распространенным состоянием в группе расстройств развития, известной как расстройство аутического спектра (ASD). Аутизм характеризуется нарушенным социальным взаимодействием, проблемами с вербальной и невербальной коммуникацией, и необычными, повторяющимися или весьма ограниченными активностями и интересами. Другие ASD включают синдром Аспергера, синдром Ретта, дезинтегративное расстройство детского возраста и первазивное расстройство развития не уточненное (как правило, называемое PDD-NOS). Было установлено, что 1 из 88 субъектов в США имеет некоторую форму аутизма. Количество по всему миру может изменяться от 1 из 32 до 2-3 из 1000. В одном варианте осуществления композиции, описанные здесь, способны лечить как основные, так и неосновные симптомы аутизма.

Неосновные симптомы аутизма включают следующие: эпилепсию, нарушения сенсорной интеграции, желудочно-кишечные расстройства, проприоцептивные нарушения, такие как нарушение равновесия, и другие симптомы.

Синдром гиперактивности с дефицитом внимания (ADHD) представляет собой нейроповеденческое расстройство, которым страдают 3-5 процентов всех субъектов в США. Аналогичное число случаев может быть обнаружено по всему миру. ADHD препятствует способности человека концентрироваться на задачах и осуществлять соответствующую возрасту деятельность (только когнитивные или когнитивные и поведенческие). Некоторые диагностические признаки ADHD включают неспособность прислушиваться к инструкциям, неспособности организовывать себя и школьную работу, нервное перебирание руками и ногами, говорить слишком много слов, отказываться от планов, работы по дому и не выполнять домашние задания, и иметь проблемы с концентрацией внимания на деталях и реагирования на них. Дисфагия и расторможенность являются дополнительными симптомами, обнаруживаемыми в ADHD. Существует несколько типов ADHD: преимущественно невнимательный подтип, преимущественно гиперактивно-импульсивный подтип и комбинированный подтип. ADHD обычно диагностируется в детском возрасте, хотя состояние может продолжаться и в зрелом возрасте. В настоящее время ADHD представляет собой заболевание, которое известно как синдром дефицита внимания (ADD) и в то же время как синдром гиперактивности с дефицитом внимания (ADHD).

Критерии неврологических или психических расстройств

Руководство по диагностике и статистической классификации психических расстройств, IV редакция, Американской психиатрической ассоциации (American Psychiatric Association's Diagnostic and Statistical Manual-IV Text Revision (DSM-IV-TR) 1 обеспечивает стандартизированные критерии для помощи в диагностике расстройств аутистического спектра (ASD).

Психиатрические диагнозы классифицируются с помощью Руководства по диагностике и статистической классификации психических расстройств, 4-я редакция (Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, 4th. Edition). Больше известное как DSM-IV, руководство опубликовано Американской ассоциацией психиатров и охватывает все психические расстройства, как для субъектов, так и для взрослых. Оно также включает перечень известных причин этих расстройств, статистические данные в разрезе пола, возраста на момент начала, и прогноз, а также некоторое исследование, касающееся оптимальных подходов к лечению.

Специалисты по психическому здоровью используют это руководство при работе с субъектами для лучшего понимания их болезненного состояния и возможного лечения, а также для помощи плательщикам третьей стороны (например, страховка) понять потребности субъекта. Данная книга обычно рассматривается как «библия» для любого специалиста, который ставит психиатрические диагнозы в США и многих других странах. Значительная часть диагностической информации на этих страницах взята из DSM IV.

DSM IV опубликована Американской ассоциацией психиатров. Значительная часть информации кратко сформулирована из страниц Психических расстройств. При возникновении любых вопросов, связанных с несоответствием или неточной информацией, всегда можно обратиться к DSM как основному руководству по психическим расстройствам.

DSM использует многоосевой или многоплановый подход к диагностике, так как редко другие факторы в жизни человека не влияют на его психическое здоровье.

Первазивные (общие) расстройства развития можно классифицировать по классификации DSM-IV-TR как аутистическое расстройство, синдром Аспергера, PDD-NOS (включая атипичный аутизм), синдром Ретта и дезинтегративное расстройство детского возраста. Организации психического здоровья в настоящее время готовы к переводу их классификаций всех диагностических критериев психического здоровья с DSM-IV на DSM-V. Оба представлены ниже. Критерии DSM-V включают PDD-NOS и синдром Аспергера, и также включают дисфункцию сенсорной интеграции как часть для диагностического критерия.

Диагностические критерии расстройства аутистического спектра по DSM-IV

Субъект должен отвечать критериям А, В, С и D:

A. Устойчивые дефициты в социальной коммуникации и социальном взаимодействии в различных контекстах, которые не описываются общей задержкой развития и проявляются во всех 3 пунктах из следующих:

А1) Дефициты в социально-эмоциональной взаимности; в диапазоне от аномалий в социальном сближении и неудач с нормальным поддержанием диалога через снижение разделения интересов, эмоций, а также воздействия и реагирования, до полного отсутствия инициирования социальных взаимодействий;

А2) Дефициты в невербальном коммуникативном поведении, используемом в социальном взаимодействии; в диапазоне от плохой интегрированности вербальной и невербальной коммуникации через аномалии зрительного контакта и языка тела или дефициты в понимании и использовании невербальной коммуникации, до полного отсутствия мимики или жестов; и

A3) Дефициты в установлении и поддержании взаимоотношений, соответствующих уровню развития (кроме как с лицами, осуществляющими уход); в диапазоне от трудностей с участием в играх, в которых задействовано воображение, и с приобретением друзей, до видимого отсутствия интереса к людям.

B. Ограниченность, повторяемость в структуре поведения, интересах или деятельности, что проявляется, по меньшей мере, в двух из следующих:

B1) Стереотипные или повторяющиеся речь, моторные движения или использование объектов (как, например, простые моторные стереотипии, эхолалия, повторяющееся использование объектов или идиосинкратические фразы).

B2) Чрезмерная приверженность к распорядку, ритуализованным формам вербального или невербального поведения, либо чрезмерное сопротивление изменениям (как, например, моторные ритуалы, настаивание на неизменном маршруте или еде, повторяющиеся вопросы или крайний стресс при небольших изменениях).

B3) Сильно ограниченные, фиксированные интересы, которые аномальны по интенсивности или направленности (как, например, сильная заинтересованность или занятия необычными объектами, чрезмерно ограниченные или устойчивые интересы).

B4) Избыточная или недостаточная реакция на входную сенсорную информацию или необычный интерес к сенсорным аспектам окружающей среды (как, например, видимое безразличие к боли/теплу/холоду, негативная реакция на определенные звуки или текстуры, излишнее обнюхивание или трогание предметов, зачарованность источниками света или вращающимися объектами).

C. Симптомы должны присутствовать в раннем детстве (однако могут не проявиться в полной мере, пока социальные требования не превысят ограниченные возможности).

D. Симптомы совместно ограничивают и нарушают повседневное функционирование.

Диагностические критерии первазивного (общего) расстройства развития неуточненного (включая атипичный аутизм) по DSM-IV

Эта категория должна применяться, когда имеется тяжелое и первазивное (общее) нарушение развития реципрокального социального взаимодействия, связанное с нарушением либо вербальных или невербальных коммуникационных способностей или присутствием стереотипного поведения, интересов и деятельности, но критерии не подходят под критерии специфического общего расстройства развития, шизофрении, шизотипического расстройства личности или избегающего расстройства личности. Например, эта категория включает «атипичный аутизм» - проявления, которые не подходят под критерии аутического расстройства из-за возраста начала, атипичной симптоматологии или подпороговой симптоматологии, или всех указанных.

Диагностические критерии DSM-IV для синдрома Ретта (Rett's Disorder)

A. Все критерии из нижеследующих:

А1) явно нормальное развитие в пренатальном и перинатальном периодах;

А2) явно нормальное психомоторное развитие в течение первых 5 месяцев после рождения; и

A3) нормальная окружность головы на момент рождения.

B. Возникновение всех симптомов из нижеследующих после периода нормального развития:

B1) замедление роста головы в возрасте от 5 и 48 месяцев.

B2) утрата ранее приобретенных навыков произвольного движения руками в возрасте от 5 до 30 месяцев с последующим развитием стереотипных движений рук (например, заламывание рук или «мытье» рук);

B3) утрата социальной вовлеченности на раннем этапе (хотя часто социальное взаимодействие развивается позднее);

B4) нарушение координации походки или движений туловища; и

B5) значительное нарушение в развитии экспрессивной и рецептивной речи со значительной задержкой психомоторного развития.

Диагностические критерии DSM-IV для дезинтегративного расстройства детского возраста (Childhood Disintegrative Disorder)

A. Явно нормальное развитее в течение, по меньшей мере, первых 2 лет после рождения, проявляющееся наличием соответствующих возрасту навыков вербального и невербального общения, социальных отношений, игры и адаптивного поведения.

B. Клинически значимая утрата приобретенных ранее навыков (в возрасте до 10 лет), по меньшей мере, в 2 из следующих областей:

B1) экспрессивная или рецептивная речь;

B2) социальные навыки или адаптивное поведение;

B3) контроль за деятельностью кишечника и мочевого пузыря;

B4) игра; и

B5) моторные навыки.

C. Отклонения в функционировании, по меньшей мере, в 2 из следующих областей:

С1) качественные нарушения в сфере социального взаимодействия {например, нарушение способности к невербальному общению, невозможность установить отношения со сверстниками, отсутствие социальной или эмоциональной взаимности);

С2) качественные нарушения в сфере общения {например, задержка в развитии навыков разговорной речи или их отсутствие, неспособность начинать или поддерживать разговор, стереотипное или повторяющееся использование речевых оборотов, невозможность играть в игры, основанные на воображении); и

С3) ограниченные повторяющиеся и стереотипные модели поведения, интересов и видов деятельности, включая моторные стереотипии и ужимки.

D. Нарушение нельзя отнести на счет другого специфического общего расстройства развития или шизофрении.

Диагностические критерии для синдрома Аспергера

А. Качественное нарушение социального взаимодействия, проявляющееся, по меньшей мере, в двух из следующих:

А1) заметное нарушение в использовании невербального поведения, такого как взгляд глаза-в-глаза, выражений лица, поз тела и жестов, регулирующих социальное взаимодействие;

А2) неспособность развития отношений со сверстниками, соответствующих уровню развития;

A3) отсутствие спонтанного поиска разделения радости, интересов или достижений с другими людьми (например, выражается отсутствием показа, принесения или указывания на объекты интереса другим людям); и

А4) отсутствие социальной или эмоциональной взаимности.

B. Ограниченны повторяющееся и стереотипные поведение, интересы и деятельность, проявляющиеся, по меньшей мере, в одном из следующих:

B1) деятельность по одному или более стереотипному или ограниченному интересу, который является нарушенным или по интенсивности, или по направлению;

B2) явная жесткая приверженность к специфическому и нефункциональному распорядку или ритуалу;

B3) стереотипные и повторяющиеся моторные движения (например, размахивание руками, выкручивание рук или пальцев, или комплекс движений всем телом); и

B4) постоянные действия с частями объектов.

C. Нарушение, являющееся причиной клинически значимой дисфункции в социальной деятельности или в других важных видах деятельности.

D. Отсутствие клинически значимой общей задержки речи (например, отдельные слова используются по достижении возраста 2 лет, связные фразы к 3 годам).

E. Отсутствие клинически значимого отставания в развитии мышления или в развитии навыков самообслуживания, соответствующих возрасту адаптации (исключая социальные взаимодействия) и в развитии любознательности об окружающем мире в детские годы;

F. Критерии не подходят под другое специфическое первазивное расстройство развития или шизофрению.

Дополнительные тесты, которые могут быть использованы для оценки субъектов, включают, но без ограничения: EVT, PPVT, ADI-R, DSM-IV, SCQ, Block food screener, опросник ABC и тест Conners.

Диагностические критерии аутического расстройства по DSM-V

А. Шесть или более показателей из (1), (2) и (3), по меньшей мере с двумя из (1) и, по одному из (2) и (3):

A1) качественное нарушение в социальном взаимодействии, представленное, по меньшей мере, двумя показателями из следующих:

A14a) заметное нарушение в использовании многообразных невербальных типов поведения, таких как взгляд глаза-в-глаза, выражениях лица, позах и жестах тела в целях регуляции социального взаимодействия;

A1b) неспособность развития отношений со сверстниками, соответствующих уровню развития;

А1с) отсутствие спонтанного поиска обмена радостью, интересами или достижениями с другими людьми (например, показа, принесения или указывающих жестов на интересующие объекты другим людям); и

A1d) отсутствие социальной или эмоциональной взаимности.

А2) качественные нарушения коммуникации, представленное, по меньшей мере, одним из следующих:

А2а) отставание или полное отсутствие развития разговорной речи (не сопровождающееся попыткой компенсации через такие альтернативные модели коммуникации, как жесты или мимика);

А2b) у субъектов с адекватной речью заметное нарушение способности инициировать или поддерживать разговор с другими;

А2с) стереотипное и повторяющееся использование языка или идиосинкразическая речь; и

A2d) отсутствие разнообразной, спонтанной игры или игры по социальной имитации, соответствующей уроню развития.

A3) ограниченные, повторяющиеся и стереотипные формы поведения, интересов и деятельности, представленные, по меньшей мере, одним из следующих:

A3а) активная деятельность по одному или нескольким стереотипным или ограниченным типам интересов, которая является нарушенной либо по интенсивности, либо по направлению;

A3b) явно негибкое поддерживание специфических нефункциональных распорядка или ритуалов;

A3с) стереотипные и повторяющиеся механические действия (например, размахивание или скручивание рук или пальцев, или комплекс движений всем телом); и

A3d) постоянные действия с частями предметов.

В. Отставание или нарушенное функционирование, по меньшей мере, в одной из следующих областей, начавшееся до 3-х лет: (1) социальные взаимодействия, (2) речь при использовании в целях социальной коммуникации, или (3) символическая или творческая игра.

С. Отклонение в большей степени не относится к расстройству Ретта или детскому дезинтегративному расстройству.

Дальнейшее рассмотрение в отношении уровней тяжести ASD представлены в следующей таблице:

Диагностическое тестирование и оценка тяжести аутизма

Для диагностики аутизма, а также тяжести аутизма могут быть использованы оценочные инструменты для диагностического тестирования. Двумя наиболее полными методами тестирования являются ADOS (Шкала наблюдения для диагностики аутизма) и опросник для диагностики аутизма, адаптированный вариант (Autism Diagnostic Interview-Revised, ADI-R). Оба являются полными и рассматриваются в качестве специфического диагностического инструмента для определения тяжести аутизма. ADI-R имеет дополнительное преимущество в необходимости обучения лиц, проводящих тестирование. Это обучение является стандартизированным, что обеспечивает стандартизацию множества клинических областей, например, в клиническом исследовании.

Опросник для диагностики аутизма, адаптированный вариант (Autism Diagnostic Interview-Revised, ADI-R).

Тест ADI-R может быть использован в способах, описанных здесь, для оценки аутизма у субъектов и взрослых людей, и был описан Anne Le Couteur, Catherine Lord, and Michael Rutter, (Western Psychological Services, 2003).

Опросник для диагностики аутизма, адаптированный вариант (Autism Diagnostic Interview-Revised, ADI-R) представляет собой инструмент клинической диагностики для оценки аутизма у субъектов и взрослых людей. ADI-R обеспечивает алгоритм диагностики аутизма, описанный в ICD-10 и DSM-IV. Инструмент сфокусирован на поведение в трех основных областях: качественные нарушения реципрокного социального взаимодействия; общение и речь; и ограниченные и повторяющиеся стереотипные формы поведения и интересов. ADI-R подходит для субъектов и взрослых в ментальном возрасте от примерно 18 месяцев и старше.

ADI-R (Lord et al, 1994; Rutter, LeCouteur, et al., 2003) представляет собой комплексное интервью с родителями для выявления симптомов аутизма. Интервью проводится обученным клиницистом с использованием полуструктурированного формата интервью. Исследование или длинная версия ADI-R занимает приблизительно 3 часа (ч) для проведения и оценки.

Во время ADI-R получают информацию от родителя о текущем поведении и истории развития. ADI-R тесно связан с диагностическими критериями, изложенными в DSM-IV-TR и International Classification of Diseases-10. ADI-R является очень полезным инструментом, но имеет некоторые ограничения. Он не является чувствительным к различиям между субъектами в ментальном возрасте младше 20 месяцев или имеющими IQ ниже 20 (Сох et al, 1999; Lord, 1995) и не рекомендован для применения у таких субъектов. В частности, его чувствительность к более умеренным ASD (AS и PDDNOS) является низкой для возраста 2 года, но становится хорошей по достижении возраста 3.5 года. ADI-R не разработан для оценки изменения посредством повторных проведений, и лучше всего подходит для подтверждения начального диагноза аутизма (Arnold et ah, 2000). В заключение, и возможно самое важное, ADI-R является трудоемким и требует много времени для проведения, которое не все практикующие врачи могут выделить.

ADI-R представляет собой стандартизированный полуструктурированный клинический опросник для лиц, осуществляющих уход за субъектами и взрослыми. Интервью содержит 93 пункта и сфокусировано на формы поведения в трех областях или сферах: качество социального взаимодействия (например, эмоциональное сопереживание, предложение и поиск поддержки, социальная улыбка и способность отвечать другим субъектам); общение и речь (например, стереотипные высказывания, перестановка местоимения, социальное использование языка), и повторяющиеся, ограниченные и стереотипные интересы и поведение (например, необычная озабоченность, манеризм рук и пальцев, необычные сенсорные интересы). Измерение также включает другие признаки, необходимые для планирования лечения, такие как нанесение себе повреждений и чрезмерная активность. Ответы оцениваются клиницистом на основании описания поведения ребенка лицами, осуществляющими уход. Вопросы сгруппированы по предметным областям, и представлены определения всех поведенческих проявлений. В разделе «Коммуникации», например, «Задержка или полное отсутствие речи, не компенсированное жестами» дополнительно подразделяется на специфические поведенческие проявления: указывающие на проявление интереса, условные жесты, кивание головой и мотание головой. Аналогично, в разделе «Реципрокное социальное взаимодействие» отсутствие социально-эмоциональной взаимности и модуляции поведения в соответствии с социальным контекстом включают следующие формы поведения: использование языка мимики и жестов другого человека, предложение поддержки, неадекватное выражение лица, качество социальных инициатив и адекватность социального ответа.

Интервью начинают с вводного вопроса, за которым следуют вопросы, касающиеся раннего развития субъекта. Следующие 41 вопросов охватывают вербальное и невербальное общение. Вопросы с 50 по 66 касаются социального развития и игры. Следующие 13 вопросов касаются интересов и форм поведения. Заключительные 14 вопросов касаются «общего поведения», включая вопросы о способностях к запоминанию, моторных навыках, чрезмерной активности и головокружении.

Интервью ADI-R генерирует баллы в каждой из трех предметных областей (т.е. общение и речь, социальное взаимодействие и ограниченные, повторяющиеся формы поведения). Повышенные баллы указывают на проблемное поведение в конкретной области. Баллы основаны на заключении клинициста после получения информации от лица, осуществляющего уход, о поведении и развитии ребенка. Каждый пункт клиницист оценивает баллом в интервале от 0 до 3. Балл 0 присваивается, когда «поведение типа, указанного в кодировании, не присутствует», балл 1 присваивают, когда «поведение указанного типа присутствует в аномальной форме, но не является достаточно тяжелым или частым для того, чтобы отвечать критерию для балла 2»; балл 2 указывает на «определенное аномальное поведение», отвечающее указанным критериям; и балл 3 служит для «максимально высокой тяжести» указанного поведения. (Лица, проводящие интервью, записывают 3 как 2 при обработке алгоритма). Имеются также баллы 7 («определенные отклонения в общей области кодирования, но неуказанного типа»), 8 («данные отсутствуют»), и 9 («неизвестно или не было вопроса»), принимающиеся во внимание в определенных обстоятельствах, все из которых переводятся в 0 при обработке алгоритма.

Этот инструмент на основе интервью требует значительного уровня обучения для проведения и оценки. Высоко обученный клиницист может провести ADI-R с родителем ребенка в возрасте 3 или 4 лет, у которого предполагается аутизм, приблизительно за 90 минут. Для проведения интервью у родителей субъектов более старшего возраста или взрослых может потребоваться большее количество времени. Обучение можно пройти в США, а также в других странах. ADI-R и сопутствующие материалы доступны у Western Psychological Services.

Межэкспертная и ретестовая надежность, а также внутренняя надежность были продемонстрированы для ADI-R. Подробную библиографию (с выдержками), описывающую психометрические свойства ADI-R, можно найти на веб-сайте University of Michigan Autism Communication and Disorders Center.

Опросник для оценки социальных коммуникаций (Social Communication Questionnaire)

Опросник для оценки социальных коммуникаций (Social Communication Questionnaire - SCQ; Rutter, Bailey, & Lord, 2003), ранее известный как Скрининговый опросник для диагностики аутизма (Autism Screening Questionnaire - ASQ), изначально был разработан как сопутствующая система скрининга для Autism Diagnostic Interview-Revised (ADI-R, Rutter, Le Couteur & Lord). SCQ представляет собой измерение сразу в нескольких измерениях симптоматики ASD родителем/лицом, осуществляющим уход, подходящее для субъектов любого биологического возраста старше четырех лет. Он может быть заполнен информантом менее чем за 10 минут.

Опросник для оценки социальных коммуникаций (Social Communication Questionnaire) представляет собой опросник на основе ADI-R, заполняемый родителями. Он содержит много вопросов, включенных в алгоритм ADI-R, представлен в краткой форме, в формате да/нет, который родители могут заполнить самостоятельно.

Первичные данные стандартизации для SCQ были получены от 200 субъектов, которые принимали участие в предыдущих исследованиях ASD. SCQ доступен в двух формах: «в течение жизни» и «на текущий момент»; каждая форма содержит 40 вопросов, представленных в формате «да» или «нет». Баллы по опроснику обеспечивают индекс тяжести симптомов и указывают на вероятность того, что субъект имеет ASD. Вопросы включают признаки в сфере реципрокного социального взаимодействия (например, «Имеет ли она/он каких-либо конкретных друзей или лучшего друга?», в сфере общения (например, «Можете ли вы обмениваться репликами с ним/ней, которые включают введенные обороты или построение, касающееся того, что вы сказали?») и ограниченные, повторяющиеся и стереотипные модели в сфере поведения (например, Проявляла ли она/он когда-либо заинтересованность в частях игрушки или предмета [например, вращении колес машины] в большей степени, чем в использовании предмета по назначению?»).

По сравнению с показателями других скринирующих опросников, SCQ последовательно продемонстрировал свою эффективность в прогнозировании ASD по сравнению с состоянием без ASD во множестве исследований. Было обнаружено, что шкала обладает хорошей дискриминантной валидностью и может применяться для эффективного скрининга имеющих риск групп субъектов школьного возраста. Максимальная первичная оценка >15 рекомендована для сведения к минимуму риска ложноотрицательного результата и указывает на необходимость комплексной оценки. Сравнивая аутизм с другими диагнозами (исключая умственную отсталость), эта максимальная оценка обусловливает величину чувствительности.96 и величину специфичности.80 в большой популяции субъектов с аутизмом и другими нарушениями развития. Положительная прогностическая значимость составляет.93 при этом максимальном значении. Авторы рекомендовали использовать различные максимальные оценки для различных целей и популяций (например, максимальную оценку 22 при дифференциации аутизма от других ASD, и максимальную оценку 15 при дифференциации ASD от не-ASD). В некоторых исследованиях (Allen et al., 2007; Eaves et al., 2006) было сделано предположение о том, что максимальное значение 11 может быть более полезным с клинической точки зрения (Norris & Lecavalier, 2010).

SCQ является одним из наиболее изученных ASD-специфических инструментов оценки, и может быть рекомендован для скрининга и как часть комплексной оценки развития для ASD (Norris & Lecavalier, 2010; Wilkinson, 2010, 2011). SCQ является эффективным инструментом скрининга для идентификации субъектов с возможным ASD для более глубокой оценки. Для клинических целей практикующие врачи могут применять многоступенчатую оценку, начиная с SCQ с последующей комплексной оценкой развития (Wilkinson, 2011). Однако может потребоваться корректировка максимальных оценок в зависимости от популяции, в которой он применяется. Данные также указывают на то, что хотя SCQ подходит для широкого возрастного диапазона, он является менее эффективным при применении у более молодых популяций (например, субъектов от двух до трех лет). SCQ разработан для субъектов старше четырех лет и, по-видимому, лучше всего выполняется у субъектов старше семи лет.

Согласованность SCQ с более трудоемким ADI-R по диагностической категоризации является высокой (Bishop & Norbury, 2002) и, таким образом, SCQ является эффективным путем получения диагностической информации или скрининга на симптомы аутизма. Существуют две доступные версии: одна для поведения «в настоящий момент» и одна для поведения «в течение жизни». Версия «в течение жизни» является полезной для скрининга и диагностических целей, тогда как версия «в настоящий момент» больше подходит для оценки изменения с течением времени у субъекта. Максимальная оценка 15 дифференцирует ASD от других диагнозов для субъектов в возрасте 4 лет и старше, тогда как максимальная оценка 22 отделяет субъектов с аутистическим расстройством субъектов с другими ASD (PDDNOS или AS). С использованием этих максимальных оценок чувствительность 0.85 и специфичность 0.75 были отмечены в большой группе субъектов и взрослых с аутизмом, и другими расстройствами развития (Berumentetal, 1999).

Опросники ADI-R, SCQ и ADOS по критериям DSM-IV и DSM-V являются, например, показателями присутствия и, в некоторых случаях, тяжести аутизма. Опросники, которые измеряют тяжесть, например, ADI-R, ADOS и SCQ, не могут применяться в качестве критериев эффективности для повторного тестирования субъектов с аутизмом при проведении вмешательства. Их применение и валидация строго регулированы на диагностику. Отсутствует проверка на надежность опросников методом повторного тестирования, и указанные опросники не предназначены для изучения изменения, наблюдаемого у субъектов с аутизмом.

Оценки поведения

Поведенческое тестирование может применяться для изучения изменений у субъектов с аутизмом, которым проводили вмешательство. Формат доэкспериментального послеэкспериментального тестирования не может применяться с диагностическими критериями, но может быть использован со многими оценками поведения.

Опросник аберрантного поведения

Шкала оценки неадекватного поведения (Aberrant Behavior Checklist - ABC) представляет собой стандартизированный набор вопросов, используемых для оценки субъектов, и представлена, например, в 1994 Slosson Educational Publications, Inc. (Aman et al.), и оценка служит в качестве стандарта для оценки субъектов. Поведенческие признаки оцениваются следующим образом: 0 = совсем не проблема; 1 = поведение является проблемой, но незначительная по степени; 2 = проблема является умеренно серьезной; или 3 = проблема является серьезной по степени.

Факторы (подшкалы) шкалы ABC представляют собой следующие: (I) раздражительность, ажитация, плаксивость; (II) заторможенность, социальная самоизоляция; (III) стереотипное поведение; (IV) гиперактивность, некомплаентность; и (V) неадекватная речь. Серии вопросов задаются по каждой шкале, и каждый оценивается баллом 0-3.

Три шкалы имеют значительное количество пунктов и валидизированы: Раздражительность / Ажитация (неосновные), первичные; Заторможенность / Социальная самоизоляция (основные), вторичные; и Гиперактивность (неосновной, высокая заболеваемость). Две отрицательные шкалы представляют собой: Стереотипное поведение и Неадекватную речь. Ряд вопросов по каждой подшкале представляют собой следующие: 1) Раздражительность, ажитация, плаксивость (15 пунктов); 2) Заторможенность, социальная самоизоляция (16 пунктов); 3) Стереотипное поведение (7 пунктов); 4) Гиперактивность, некомплаентность (16 пунктов); и 5) Неадекватная речь (4 пункта).

Вопросы по тесту ABC представляют собой следующие:

ABC использовали в клинических исследованиях лекарственных средств для лечения аутизма, так как ABC имеет характеристики валидности, надежности и чувствительности к лекарственным средствам. Все три характеристики необходимы для того, чтобы сделать ABC применимым в качестве критерия эффективности для клинических исследований лекарственных средств для лечения аутизма. ABC является прогностическим фактором неадаптивного поведения. Экстенсивная психометрическая оценка ABC указывает на то, что его подшкалы имеют высокую внутреннюю согласованность, адекватную надежность и доказанную валидность.

Тест EVT-2

Тест EVT-2 использует преимущества, которые несет EVT, состоящие в краткости и легкости проведения; оценка EVT-2 была разработана таким образом, чтобы согласовываться с тестом PPVT^тм-4 (Peabody Picture Vocabulary Test, Fourth Edition). Взятые вместе, эти инструменты обеспечивают комплексную систему для сравнения рецептивного и экспрессивного словарного запаса.

В отличие от некоторых других показателей словарного запаса, EVT-2 предлагает две эквивалентные формы теста, которые содержат различные пункты словаря - для уверенности в том, что субъект не «выучил» тест. Одну форму можно использовать до вмешательства для оценю! знания словаря субъектом и альтернативную форму можно использовать для повторного тестирования для оценки и документирования прогресса. EVT-2 также включает индивидуальную оценочную шкалу развития (Growth Scale Value, GSV), которая является чувствительной к незначительным изменениям во времени.

Пользователи и применение.

Тест EVT-2 проводится индивидуально и является нормативно-ориентированным. Тест EVT-2 отвечает потребностям широкого круга специалистов для содействия: (1) Быстрой оценке экспрессивного словарного запаса с помощью теста, который не требует чтения или письма; (2) Оценке овладения словарным составом изучающими английский язык (English Language Learners - ELL) как универсального показателя их знания английских слов; (3) Проведению сравнений с рецептивным словарным запасом для точного определения сильных/слабых сторон студента и идентификации возможных проблем с воспроизведением слов; (4) Немедленному переходу к основанным на доказательствах вмешательствам с использованием непосредственно встроенного и связанного программного обеспечения ASSIST (SAS; www.sas.com/products/assist/index.html); (5) Оценке устной речи как основы навыков письменного изложения; и (5) Измерению прогресса с использованием одной или обеих параллельных форм.

Признаки и преимущества теста EVT-2 включают, например, две параллельные формы для облегчения мониторинга прогресса; идентичные процедуры проведения и оценки для EVT; более широкое и более смешанное использование обозначающих слов и синонимов; пять уровней диагностического анализа; и новую оценочную шкалу развития (Growth Scale Value, GSV) для измерения прогресса во времени.

Разработанный за пятилетний период, тест EVT-2 был совместно нормирован с тестом PPVT-4 с отечественной выборкой субъектов в возрасте 2:6-90+. Более 5500 субъектов было протестировано; данные, полученные от приблизительно 3500 субъектов, использовали для нормативных баллов. Остальные данные содействовали исследованиям валидации. Образец жестко контролировали и подгоняли к переписи U.S. Census по полу, расе/этнической принадлежности, региону, социально-экономическому статусу (SES) и клиническому диагнозу или уровню образования. Тест EVT-2 обеспечивает максимально надежные баллы с коэффициентами надежности 0.90с почти для любого возраста или возрастной группы. Кроме того, тест PPVT-4 предлагает много улучшений в оценке словарного запаса, который был признан за 50 лет. Это последнее издание было совместно нормировано с Тестом Expressive Vocabulary Test, Second Edition (EVT^тм-2), обеспечивая прямое сравнение между характеристиками рецептивного и экспрессивного словарного запаса.

Тест PPVT-2

В отличие от некоторых других показателей словарного запаса, PPVT-2 предлагает две эквивалентные формы теста, которые содержат различные пункты словаря, тем самым способствуя гарантии того, что субъект не «выучил» текст. Одну форму можно использовать перед вмешательством для оценки знания словарного запаса субъектами и альтернативную форму можно использовать для повторного тестирования для оценки и документирования прогресса. PPVT-2 также включает индивидуальную оценочную шкалу развития (Growth Scale Value, GSV), которая является чувствительной к незначительным изменениям во времени.

Тест PPVT-4 проводится индивидуально и является нормативно-ориентированным. PPVT-4 может быть использован для быстрой оценки рецептивного словарного запаса с помощью теста, который не требует чтения или письма; мониторинга прогресса с использованием двух параллельных форм; прямого сравнения рецептивного и экспрессивного словарного запаса при проведении также EVT-2; немедленного перехода к основанным на доказательствах вмешательствам с использованием непосредственно встроенного или соединенного программного обеспечения ASSIST; и отвечает требованиям руководства по универсальному скринингу, идентификации сильных и слабых сторон, и диагностического тестирования в условиях RTI.

У нормально развивающихся субъектов EVT и PPVT должны продемонстрировать сходный рост. Шкалы развития, наблюдаемые в течение 12-месячного периода, должны идти в ногу друг с другом. В случае неврологического или иного нарушения у субъектов, шкалы часто не будут идти в ногу друг с другом.

Тест Connors

Изменения показателя гиперактивности могут быть измерены в Conners' 3, который является золотым стандартом для диагностики, а также корректировки утвержденных лекарственных препаратов для синдрома дефицита внимания и синдрома гиперактивности с дефицитом внимания. Connors' 3 можно проводить в соответствии с общепризнанными методами и оценивать согласно нормам Т-показателя. Оцениваемые признаки включают: беспокойство или сверхактивное поведение; возбудимость и импульсивность; неспособность выполнить задачи до конца; невнимательность и легкая отвлекаемость; приступы гнева; беспокойство; беспокойство других субъектов; требования должны выполняться немедленно и легкость фрустрации; легкость и частота плаксивости; и быстрые и резкие изменения настроения. Каждый признак оценивается по шкале 0-3, где 0 = никогда, редко; 1 = периодически; 2 = часто, слишком часто; и 3 = очень часто; очень часто встречаются.

Block Food Screeners для возраста 2-17 лет

Данные скрининги разработаны для оценки усвоения субъектом группы продуктов питания с конечными результатами, измеряемыми числом порций. В одной версии задается вопрос о пище, употребленной «вчера», и во второй версии о пище, употребленной «на прошлой неделе». Эти инструменты сфокусированы на усвоение фруктов и фруктовых соков, овощей, картофеля (включая картофель фри), цельных зерновых, мяса/птицы/рыбы, молочных продуктов, бобовых, насыщенных жиров, «добавленных Сахаров» (в подслащенных зерновых продуктах, безалкогольных напитках и сладостях), гликемическую нагрузку и гликемический индекс. Вторичный анализ дает прогноз по усвоению сахарных напитков (килокалории и частоту). Задается вопрос о размерах индивидуальной порции. Этот опросник был разработан для самостоятельного проведения субъектами с помощью родителя или лица, осуществляющего уход, при необходимости.

«Вlock food screener» и «block food screener» «на прошлой неделе» использовали в клинических исследованиях, а также USDA для изучения усвоения пищи у различных популяций, включая субъектов.

Тесты валидизированы и имеют отличную внутреннюю и внешнюю валидность. Опросники оценивают на компьютере, и усвоение определяют с помощью серий вопросов, которые разработаны для рассмотрения типов продуктов, а также порций для определения усвоения питательных веществ.

Ферментные препараты и их применение

Пищеварительные ферменты, подлежащие использованию в композициях и способах, описанных здесь, включают, например, панкреатические ферменты. Существует два типа панкреатических ферментов, которые имеют обозначения по U.S.P.: панкреатин и панкреалипаза. Панкреатин представляет собой вещество, содержащее ферменты, главным образом амилазу, липазу и протеазу, полученные из поджелудочной железы свиньи Sus scrofa Linne var. domesticus Gray (Fam. Suidae) или ox Bos Taurus Linne (Fam. Bocidae). Панкреатин содержит, в каждом мг, не менее 25 USP единиц активности амилазы, не менее 2 USP единиц активности липазы и не менее 25 USP активности протеазы. Больше информации по панкреатину представлено в Примере 1 ниже. В противоположность этому, панкреалипаза USP относится к аморфному порошку кремового цвета, имеющему слабый характерный (мясной), но не неприятный запах, который содержит липазу в количестве не меньше, чем 24 USP Единиц/мг; протеазу в количестве не меньше, чем 100 USP Единиц/мг; и амилазу в количестве не меньше, чем 100 USP Единиц/мг; с не больше, чем 5% жира и не больше, чем 5% потери в массе при сушке.

Ферментные препараты с нелипидными энтеросолюбильными покрытиями использовали для доставки липаз субъектам, нуждающимся в ферментной терапии, которым требовалось введение липаз. Кроме того, Fallon описал некоторые способы и ферментные композиции для применения в лечении субъектов, а также других субъектов с аутизмом, ADD, ADHD и другими неврологическими заболеваниями или состояниями, например, патенты США №№7138123, 660831; 6632429; 6534063, включенные путем отсылки в настоящий документ в полном объеме.

Природа пищеварительного тракта человека создает трудности для доставки пищеварительных ферментов субъекту с неврологическими и поведенческими состояниями, восприимчивыми к лечению пищеварительными ферментами. Множество изменений температуры и pH в пищеварительном тракте затрудняют специфическую доставку. Например, значение pH в желудке составляет до 1, но быстро увеличивается до более основного значения pH 5-6 в проксимальном отделе тонкого кишечника посредством добавления бикарбонатных ионов, секретируемых поджелудочной железой. Например, обычно pH в желудке равно приблизительно 1.2; pH в двенадцатиперстной кишке равно примерно от 5.0 до 6.5; pH в двенадцатиперстной кишке равно примерно 6.8, и pH равно примерно 7.2 в проксимальном отделе подвздошной кишки, и примерно 7.5 в дистальном отделе подвздошной кишки. Низкое pH в желудке, которое быстро изменяется до более основного pH, равного 5-6 в проксимальном отделе тонкого кишечника, требует специфического способа доставки в зависимости от того, в какое место должен быть доставлен фермент.

Например, наблюдалось, что субъекты с аутизмом, которые нуждаются в лечении протеазами, получают благоприятный эффект от доставки этих ферментов в проксимальный отдел тонкого кишечника.

Доставка пищеварительных ферментов может быть также затруднена по причине быстрого разрушения и денатурирования ферментов при комнатной температуре, а также усиленного разрушения и денатурирования, которое может возникать при высокой температуре, давлении, влажности и/или воздействии света. Влага и тепло, взятые вместе, могут быстро дестабилизировать ферменты, снижая их эффективность, и сократить срок хранения, что приводит к неточному дозированию. Денатурирование или дестабилизация ферментов может снизить их эффективность путем уменьшения дозы активных ферментов до количества, меньшего, чем требуется для эффективного лечения. Альтернативно, попытка компенсировать денатурирование или дестабилизацию путем увеличения дозы для обеспечения эффективного уровня активных ферментов может вызвать риск превышения дозы или превышения заполнения капсулы, или другой лекарственной формы. Для защиты и стабилизации панкреатических/пищеварительных ферментов от неблагоприятных условий, таких как проницаемость, разложение, панкреатические/пищеварительные ферменты (ядро) могут быть покрыты или инкапсулированы в непрерывное покрытие, содержащее эмульгируемый липид. В другом аспекте в настоящем документе обеспечены новые покрытые ферментные препараты с улучшенным сроком хранения.

В одном варианте осуществления композиция, обеспеченная здесь, содержит главные протеазы, показанные на Фигуре 15. Композиции, обеспеченные здесь, являются безопасными для введения человеческим субъектам, включая субъектов.

Композиции могут быть представлены в любой форме, подходящей для введения субъекту, включая, но без ограничения, частицы, множество покрытых частицы, порошок, таблетки, мини-таблетки, капсулы и т.п.

Производители ферментных препаратов используют энтеросолюбильные покрытия для доставки липаз субъектам, которым требуется введение липаз. Так как свиные ферменты доставляются в смеси с протеазами, липазами и амилазами, и так как эти композиции, предназначенные для потребления человеком, приготовлены для доставки липаз, применение этих энтеросолюбильных покрытий, которые включают такие вещества как гипромеллозы фталат, диметикон 1000 и дибутилфталат, препятствуют доставке протеаз в нужное место в пищеварительном тракте. Все другие ферментные препараты, присутствующие в настоящее время на рынке, содержат, по меньшей мере, одно из этих веществ энтеросолюбильного покрытия и/или другие добавки в препарате. Некоторые добавки, которые содействуют изготовлению, такие как добавки, улучшающие скользящие свойства, могут в дальнейшем подвергнуть риску реакционную способность или чувствительность субъекта к ферментному препарату.

Использование фталатов, которые в течение некоторого времени представляли собой известный уровень техники в отношении доставки ферментов, использовали для доставки липаз для панкреатита. Фталаты вовлечены в ряд заболеваний, включая рак и аутизм. Энтеросолюбильные покрытия на основе фталатов не использовали в данном препарате по причине возможных побочных эффектов.

FDA выпустил проект руководства по применению фталатов и потребовал, чтобы все фармацевтические препараты, в которых используются фталаты, были повторно формулированы для исключения фталатов из всех фармацевтических препаратов.

В одном варианте осуществления описанная композиция включает покрытый пищеварительный ферментный препарат и/или композит, который в некоторых вариантах осуществления представляет собой инкапсулированный панкреатический/пищеварительный ферментный препарат. В других аспектах, изобретение включает системы доставки ферментов и фармацевтические композиции, включающие в себя покрытые панкреатические/пищеварительные ферментные препараты. Эти покрытые или инкапсулированные ферментные препараты содержат ядра, состоящие из частиц панкреатических или пищеварительных ферментов, и покрытие, состоящее из эмульгируемого липида.

Покрытия в пищеварительных/панкреатических препаратах создают барьер против разрушения и денатурирования, и обеспечивают достижение более точных уровней активных ферментов у субъектов. Липидное покрытие по данному изобретению обеспечивает существенный барьер против влаги, тепла, влажности и воздействия света путем обеспечения физического барьера, а также барьера, который предотвращает и/или уменьшает гидролиз. Покрытые ферментные препараты подвергаются меньшему гидролизу в результате защиты от влаги окружающей среды с помощью липидного покрытия. В результате настоящее изобретение обеспечивает панкреатические/пищеварительные ферменты, которые могут выдерживать условия хранения (например, влагу, тепло, кислород и т.п.) в течение длительного времени, обеспечивая, таким образом, расширенный срок хранения. Покрытие инкапсулированного ферментного препарата защищает фермент от окружающей среды и обеспечивает эмульгирование в растворителе без ослабления стойкости к истиранию покрытия. Изобретение, таким образом, дополнительно относится к более стабильным ферментным препаратам.

Покрытые ферментные препараты, следовательно, уменьшают превышение дозировки фермента и усиливают доставку более точных доз фермента субъектам с аутизмом, ADD, ADHD и другими неврологическими или поведенческими состояниями или заболеваниями, чувствительными к лечению панкреатическими или пищеварительными ферментами.

Кроме того, так как субъекты и другие субъекты с аутизмом и другими состояниями часто являются чувствительными к пище, добавкам, красителям и другим носителям, вспомогательным веществам или веществам, используемым в формулировании лекарственных средств, существует проблема в создании системы доставки ферментов, которая не использует аллергены и другие носители, вспомогательные вещества, наполнители, красители и т.п., которые могут способствовать неблагоприятным симптомам или осложнениям у субъектов. Кроме того, для очень молодых субъектов особенно важной является система доставки ферментов, обеспечивающая легкость и переносимость. Система доставки в форме саше для этих ферментных препаратов также до настоящего времени не была достигнута.

Другим аспектом настоящего изобретения является применение ферментного препарата, который приготовлен без наполнителей, красящих веществ, красителей, веществ, препятствующих слеживанию и комкованию, и других добавок, для уменьшения возможных аллергических реакций и других чувствительных реакций у субъектов и других проходящих лечение субъектов. Было обнаружено, что в некоторых вариантах осуществления пищеварительные ферменты могут быть неожиданным образом инкапсулированы с одним липидным вспомогательным веществом для улучшения сохранения ферментной активности, облегчения введения, переносимости и безопасности введения, помимо других свойств. Ранее было обнаружено, что частицы пищеварительных ферментов, содержащие липазы, могут быть успешно инкапсулированы с помощью покрытия, состоящего в основном только из гидрогенизированного соевого масла.

Кроме того, свиные панкреатические/пищеварительные ферменты обладают значительным запахом и вкусом, аналогично салу/копченой свинине. Этот вкус может быть сильным и неприятным для некоторых субъектов, получающих заместительную ферментную терапию, и в особенности для субъектов. Добавление липидного покрытия обеспечивает значительную маскировку вкуса ферментного препарата, что позволяет переносить вкус, поскольку липидное покрытие не имеет запаха и вкуса. Применение этого способа маскировки вкуса, который не включает использование красящих веществ, красителей, ароматизирующих веществ, вспомогательных веществ или других веществ, является предпочтительным для введения лекарственных препаратов, которые имеют неприятный или нежелательный вкус и запах. В других вариантах осуществления данное изобретение относится к покрытым пищеварительным ферментным препаратам с улучшенным вкусом и запахом.

В некоторых вариантах осуществления покрытия на ядрах частиц пищеварительных ферментов, предпочтительно представляют собой непрерывные покрытия. Под «непрерывные» поднимается, что панкреатический/пищеварительный фермент является равномерно защищенным. Непрерывное покрытие полностью окружает или инкапсулирует панкреатические/пищеварительные ферменты. Инкапсулирование обеспечивает защиту панкреатического/пищеварительного фермента от условий, таких как влага, температура, и условий, встречающихся во время хранения.

Кроме того, инкапсулирование также обеспечивает контролируемое высвобождение панкреатического/пищеварительного фермента. Эмульгирующие свойства покрытия в растворителе обеспечивают контролируемое высвобождение фермента в желудочно-кишечной системе, предпочтительно области ЖК тракта, где ферменты используются. Покрытие инкапсулированного композита защищает фермент от окружающей среды и обеспечивает эмульгирование в растворителе без снижения прочности на истирание покрытия. Например, для состояний, требующих лечения протеазами, высвобождение протеазной части ферментов необходимо в проксимальном отделе тонкого кишечника, вызывая, таким образом, необходимость липидного инкапсулирования, которое имеет профиль растворения в интервале 30-90 минут. Профиль растворения может составлять примерно 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85 или 90 минут. Профиль растворения также может быть улучшен с помощью такого способа до включенных более длинных или более коротких профилей растворения. Профили растворения могут быть получены с использованием способов и условий, известных специалистам в данной области. Например, профили растворения могут быть определены при различных значениях pH, включая pH 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10.

Скорость высвобождения биологически активного вещества можно также контролировать путем добавления добавок, описанных ниже. Когда препарат подвергается воздействию растворителя, растворитель взаимодействует с размягчаемым липидом в покрытии и вызывает эмульгирование покрытия и высвобождение биологически активного вещества.

Используемый здесь термин «инкапсулировать» означает, что покрытие полностью окружает панкреатический/пищеварительный фермент. В популяции инкапсулированных частиц инкапсулированные ферментные препараты могут включать загрязняющие или незначительные количества частиц по существу с непрерывным покрытием до тех пор, пока профили высвобождения инкапсулированных частиц значительно не изменяются. Покрытая или инкапсулированная частица может содержать одну или более частиц пищеварительных ферментов, заключенных в одно покрытие с формированием одной покрытой или инкапсулированной частицы пищеварительного фермента в покрытом или инкапсулированном пищеварительном ферментном препарате.

Композиции, описанные здесь, можно применять для лечения неврологических или поведенческих расстройств, которые имеют пересекающуюся симптоматику. В дополнение к аутизму и заболеванию аутистического спектра ADD, ADHD, а также другим поведенческим или неврологическим состояниям или заболеваниям, восприимчивым к лечению панкреатическими или пищеварительными ферментами, или с пересекающейся симптоматикой, под термином «восприимчивые к лечению панкреатическими или пищеварительными ферментами» понимается, что один или более симптомов заболевания или состояния могут быть частично сняты, излечены или уменьшены путем введения эффективного количества панкреатических или пищеварительных ферментов.

Часто наблюдается множество сопутствующих симптомов в поведенческих или неврологических состояниях. Например, гиперактивность на 60% сопутствует аутизму. Другие симптомы, которые часто наблюдаются во многих неврологических состояниях, включают эпилепсию. Таким образом, эпилепсия обычно встречается у субъектов с аутизмом.

Композиции, описанные здесь, можно применять для лечения, например, заболеваний желудочно-кишечного тракта (например, констипации и/или диареи), связанных с неврологическим расстройством, припадков (например, генерализованных тонико-клонических судорог «Grand Mal», малого эпилептического припадка, миоклонических судорог, тонических судорог, клонических судорог и/или атонического припадка), сенсорных нарушений (например, зрения, звука, стереотипии, вкуса, касания и/или запаха), нарушений речи, таких как экспрессивная (например, стереотипная и повторяющаяся) и/или рецептивная речь, нарушений социализации (например, заторможенности, социальной реципрокности, невербального общения и/или отношения со сверстниками), проявлений обсессивно-компульсивного расстройства, таких как навязчивые состояния (например, мысли, импульсы и/или мысленные образы) и компульсивности (например, психической и/или поведенческой), раздражительности, синдрома фрагильной Х-хромосомы, гиперсенсорных расстройств или их комбинации.

Ранее было обнаружено, что выбранные покрытые ферментные препараты могут быть изготовлены путем покрытия частиц пищеварительных ферментов липидами, ранее не применявшимися в покрытых препаратах пищеварительных ферментов. Особые смеси эмульгируемых липидов и ферментов могут осуществлять доставку определенных компонентов панкреатических/пищеварительных ферментов в выбранные участки, и/или в выбранные моменты времени во время прохождения по ЖК тракту. В некоторых аспектах представлены способы доставки пищеварительных ферментов человеку на основе профилей растворения.

Эмульгируемый липид может представлять собой любой липид, липидную смесь или смесь липида и эмульгаторов, которые подвергаются эмульгированию при воздействии растворителя, и имеет температуру плавления, которая позволяет липиду оставаться в твердом состоянии при обычных температурах хранения. Эмульгируемый липид может иметь растительное или животное происхождение. В некоторых вариантах осуществления эмульгируемый липид по существу состоит или содержит один или более моноглицеридов, диглицеридов или триглицеридов, или другие компоненты, включая, например, эмульгаторы, обнаруживаемые в гидрогенизированных растительных маслах. В другом варианте осуществления липид представляет собой неполярный липид.

Используемые здесь липиды животного и/или растительного «происхождения» могут включать жиры и масла, происходящие из растительных или животных источников и/или тканей, и/или полученные синтетически на основе структур жиров или масел, происходящих из растительных или животных источников. Липидный материал может быть перегнан, экстрагирован или очищен с помощью известных химических или механических способов. Определенные жирные кислоты, присутствующие в липидах, называемые незаменимыми жирными кислотами, должны присутствовать в диете млекопитающего. В некоторых вариантах осуществления липид может содержать растительное масло USP-Национальный формуляр, Тип I.

Пищеварительные ферменты, используемые в способах по настоящему изобретению, могут представлять собой любую комбинацию пищеварительных ферментов типа, вырабатываемого поджелудочной железой, включая, но без ограничения, пищеварительные ферменты из панкреатического источника или других источников. Ферменты не ограничиваются панкреатическими ферментами свиного происхождения, и могут иметь другое животное или растительное происхождение, а также могут быть получены синтетическим путем. Пищеварительные ферменты могут быть получены из источника, относящегося к млекопитающему, например, пищеварительные ферменты, полученные из свиньи. Ферменты могут включать один или более ферментов, и могут также иметь растительное происхождение, могут быть получены синтетическим путем, получены рекомбинантными способами в клетках микробов, дрожжей или млекопитающих, и могут включать смесь ферментов из одного или более источников. Пищеварительные ферменты могут включать, например, один или более ферментов из одного или более источников, смешанных вместе. Это включает, например, добавление пищеварительных ферментов одного вида в пищеварительные ферменты, полученные из панкреатических источников, для обеспечения надлежащих уровней специфических ферментов, которые обеспечивают эффективное лечение выбранного заболевания или состояния. Один источник пищеварительных ферментов может быть получен, например, из Scientific Protein Laboratories. Пищеварительный фермент может представлять собой, например, сложную композицию панкреатического экстракта. В одном варианте осуществления пищеварительные ферменты будут содержать или состоять в основном из 25 USP единиц/мг протеазы, 2 USP Единиц/мг липазы и 25 USP Единиц/мг амилазы. Термин «пищеварительный фермент» может относиться к одному или более ферментам типа, вырабатываемого поджелудочной железой.

Частицы пищеварительных ферментов, используемые в качестве ядер в настоящем изобретении, включают частицы пищеварительных ферментов, при этом примерно 90% частиц имеют размер в диапазоне примерно от #40 до #140 USSS меш, или примерно от 105 до 425 мкм, или при этом по меньшей мере примерно 75% частиц имеют размер в диапазоне примерно от #40 до #80 меш, или размер примерно от 180 до 425 мкм. Частицы с размером между #40 и #140 меш проходят через #40 меш, но не проходят через #140 меш. Покрытые или инкапсулированные частицы пищеварительных ферментов в одном варианте осуществления могут содержать меньше чем примерно 35, 30, 25, 20, 15 или 10% частиц, которые могут быть пропущены через #100 (150 мкм). В некоторых вариантах осуществления термин «неаэрозолируемый» относится к покрытому или инкапсулированному ферментному препарату, в котором меньше чем примерно 20% или меньше чем примерно 15% частиц может проходить через #100 меш (150 мкм). Инкапсулированные препараты пищеварительных ферментов могут представлять собой инкапсулированный пищеварительный ферментный композит, в котором частицы пищеварительных ферментов содержат два или более ферментов.

Минимальное количество панкреатического фермента, присутствующего в ядре, составляет, по меньшей мере, примерно 5% активных ферментов по массе покрытого ферментного препарата, но в других вариантах осуществления может составлять, по меньшей мере, примерно 30%, или, по меньшей мере, примерно 50% по массе. Максимальное количество панкреатического/пищеварительного фермента, присутствующего в композите, составляет примерно 95% по массе и в других вариантах осуществления почти примерно 90%, 85%, 80%, 75% или 70% покрытого ферментного препарата. В других вариантах осуществления количество панкреатического фермента, присутствующего в композите, составляет примерно 10%, 15%, 20%, 25%, 35%, 40%, 45%, 55%, 60%, 65%, 70%, 72.5%, 75%, 77.5%, 80%, 82.5%, 87.5% или 92.5% по массе или любое значение между ними.

Процентное содержание (%) фермента, которое составляет «по меньшей мере, примерно» или «не больше, чем примерно», может включать процентное содержание, которое равно или равно примерно этому процентному содержанию (%). Термин «примерно» используется для указания величины, которая учитывает экспериментальную ошибку в данном измерении. Термин «примерно», используемый в отношении размера частиц, может относиться к плюс или минус 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1%, или любому значению между ними. Термин «примерно», используемый в отношении % частиц, которые могут быть пропущены через экран, может относиться к плюс или минус 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1%, или любому значению между ними.

Композиция, которая содержит инкапсулированный пищеварительный ферментный препарат или композит, может быть доставлена в виде множества покрытых частиц (sprinkle), порошка, капсулы, таблетки, гранулы, каплет или другой формы. Упаковка инкапсулированных ферментных препаратов в виде системы доставки ферментов, которая, кроме того, содержит однократную дозу препаратов в виде множества покрытых частиц (sprinkle), помещенных в саше, обеспечивает легкость доставки и точное дозирование фермента путем обеспечения доставки определенного количества фермента при каждом дозировании. Обеспечение специфической стандартной дозы ферментного препарата, которая сохраняет активность ферментов в пределах определенных параметров стабильности, является предпочтительным по сравнению с другими препаратами (sprinkle) в виде лекарственной формы для многократного введения, которая позволяет воздуху, влаге и теплу разрушать и денатурировать ферментный препарат. В предпочтительном варианте осуществления порошок или саше помещен в пакетик из трехслойной фольги или аналогичный барьер для предохранения от влаги и защиты ферментного препарата от вредных факторов окружающей среды. Изобретение дополнительно относится к улучшению стабильности за счет уменьшения гидролиза благодаря липидному инкапсулированию.

Кроме того, метод липидного инкапсулирования уменьшает аэрозолирование ферментного препарата, который может быть едким для ребенка при вдыхании через легкие или нос. В другом варианте осуществления изобретение включает доставку пищеварительных ферментов с улучшенной безопасностью введения путем уменьшения степени аэрозолирования фермента. Липидное инкапсулирование уменьшает аэрозолирование и вероятность ожога едким веществом, аспирации и/или аспирационной пневмонии у субъектов и лиц, осуществляющих введение ферментного препарата, снижая тем самым вероятность заболевания у субъектов, уже имеющих нарушение, и обеспечивая более безопасное введение.

Используемый здесь термин «не-аэрозолируемый» относится к покрытому или инкапсулированному ферментному препарату, в котором в основном все частицы являются достаточно крупными для устранения или уменьшения аэрозолирования при засыпании покрытого ферментного препарата по сравнению с непокрытыми ферментными частицами. Например, термин «не-аэрозолируемый» может относиться к покрытому или инкапсулированному ферментному препарату, в котором по меньшей мере около 90% частиц имеют размер между примерно #40 и #140 меш, или между примерно 106 и 425 мкм, или в котором по меньшей мере около 75% частиц имеют размер между примерно #40 и #80 меш, или примерно от 180 до 425 мкм. Термин «не-аэрозолируемый» может также относиться к покрытому или инкапсулированному ферментному препарату, в котором меньше чем около 35, 30, 25, 20, 15 или 10% частиц может проходить через экран #100 меш (150 мкм). В некоторых вариантах осуществления термин «не-аэрозолируемый» относится к покрытому или инкапсулированному ферментному препарату, в котором меньше чем около 20%, или меньше чем около 15% частиц могут проходить через экран #100 (150 мкм).

Как описано и называется в настоящем документе, пригодные панкреатические/пищеварительные ферменты и пригодные покрытия могут применяться в композициях и способах по данному изобретению. При выборе пригодных ферментов и пригодных липидных покрытий, в том числе при выборе типа или количества ферментов или покрытия, руководствуются потребностями субъектов в специфических ферментах, и выбранными заболеваниями, подлежащими лечению. Инкапсулированные ферментные препараты, которые представляют собой один аспект данного изобретения, не были ранее описаны.

Некоторые варианты осуществления относятся к специфическим смесям ферментов и липидов, выбранным для доставки субъектам с ADD, ADHD, аутизмом и другими неврологическими и поведенческими расстройствами, восприимчивым к лечению пищеварительными/панкреатическими ферментами, на основании времени прохождения в желудочно-кишечном тракте человека. Кроме того, выбор может быть основан на потребностях субъекта, подлежащего лечению, в различных компонентах пищеварительных ферментов. Кроме того, в настоящем документе обеспечены варианты осуществления, которые относятся к улучшению доставки пищеварительных ферментов человеку, основанные, в частности, на времени, требуемом для доставки, и профилях растворимости.

Несмотря на то, что общие способы покрытия некоторых чувствительных биологических веществ были описаны, смотри, например, патент США №6251478, включенный в настоящий документ в виде отсылки, инкапсулированное биологически активное вещество по настоящему изобретению представляет собой ферментный препарат, который состоит из ядра, содержащего пищеварительные ферменты, включающие в себя или состоящие из множества протеаз, липаз и амилаз, и покрытия, которое включает в себя или состоит преимущественно из эмульгируемого липида.

Добавки могут быть смешаны с эмульгируемым липидом. Выбор липида(ов) и добавок будет контролировать скорость высвобождения биологически активного вещества. В отношении пищеварительных и/или панкреатических ферментов, липидное покрытие должно выбираться индивидуально для того, чтобы высвобождение биологически активного вещества происходило в выбранной области пищеварительного тракта для оптимизации лечения.

Кроме того, изобретение относится к введению покрытого и/или инкапсулированного ферментного препарата в виде препарата в саше или мешочке для облегчения доставки субъектам и взрослым. В некоторых вариантах осуществления изобретение, в частности, относится к введению препарата, состоящего из покрытых частиц ферментов, помещенных в саше или мешочек. Это содействует введению, включая, но без ограничения, введение вместе пищей или напитками, непосредственное введение в ротовую полость, или введение непосредственно в ЖК систему через назогастральный зонд, гастростомическую трубку или другие ЖК входные устройства или системы доставки.

В некоторых вариантах осуществления каждая доза содержит примерно от 100 до 1500 мг покрытого или инкапсулированного ферментного препарата, и каждая доза содержит примерно 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 950, 1000, 1050, 1100, 1150, 1200, 1250, 1300, 1350, 1400, 1450 или 1500 мг покрытого или инкапсулированного ферментного препарата. «Примерно» может включать от 80 до 125% указанного препарата. Каждая доза также может составлять плюс или минус 10% от указанной массы. В одном варианте осуществления каждая доза будет обладать протеазной активностью, составляющей не меньше чем примерно 156 USP единиц/мг ± 10%. Протеазная активность может также составлять не меньше чем примерно 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195 или 200 USP единиц/мг.

В других вариантах осуществления, по меньшей мере, две дозы композиции, содержащей терапевтически эффективное количество покрытых пищеварительных ферментных препаратов, можно вводить с помощью способов, описанных здесь. В определенных вариантах осуществления около 80% фермента высвобождается примерно через 30 минут в тесте на растворимость, выполняемом при pH 6.0. В другом варианте осуществления около 80% фермента высвобождается примерно через 30 минут после достижения покрытых пищеварительных ферментных препаратов тонкого кишечника.

Доставка ферментов человеку может быть улучшена путем сокращения использования вспомогательных веществ, наполнителей и растворителей, используемых в настоящее время в препаратах для доставки пищеварительных ферментов человеку. Например, инкапсулированный ферментный препарат может содержать только одно вспомогательное вещество, которое повышает безопасность введения путем уменьшения вероятности аллергической реакции. В одном варианте осуществления вспомогательным веществом является гидрогенизированное соевое масло.

Ввиду того, что в некоторых вариантах осуществления способ липидного инкапсулирования не требует обработки ферментного препарата растворителями, наполнителям и вспомогательными веществами для содействия скольжению или улучшения стабильности, один аспект изобретения включает «чистый» препарат, состоящий из веществ GRAS (в целом признанных безвредными), подлежащий введению. Сокращение использования растворителей, наполнителей, вспомогательных веществ и других добавок, обеспеченное способами по данному изобретению, позволяет уменьшить подвергание субъектов, получающих заместительную ферментную терапию, воздействию потенциальных аллергенов и в результате получить гипоаллергенный ферментный препарат с расширенным возможным применением для лечения субъектов, которые в ином случае могут развивать аллергическую реакцию на лечение. Введение покрытых ферментных препаратов по данному изобретению может, таким образом, уменьшить подвергание воздействию потенциальных токсических веществ, а будет также уменьшать вероятность возникновения аллергических реакций. Соответственно, в некоторых вариантах осуществления инкапсулированный пищеварительный ферментный препарат является гипоаллергенным.

Пищеварительные ферменты могут быть безопасно введены. Липидное покрытие добавляет массу ферментному препарату, что уменьшает вероятность аэрозолирования. Предшествующие непокрытые ферменты, как было показано, становились аэрозолированными и могли, таким образом, вдыхаться и контактировать с полостью носа или легкими, вызывая повреждение слизистой оболочки тех, кто принимал ферментный препарат, и тех, кто производил его введение.

Препараты в форме саше могут быть улучшены для доставки субъектам. В настоящем документе обеспечены средства для введения покрытого пищеварительного ферментного препарата, помещенного в саше, которые обеспечивают конкретные типы введения, включая, но без ограничения, введение вместе с пищей, напитками или непосредственное введение в ротовую полость, или непосредственно в ЖК систему через назогастральный зонд, гастростомическую трубку или другие ЖК входные устройства или системы доставки. Саше, которые представляют стандартную дозу или множественные дозы на один день, представляют единичную стандартную дозу. Саше из трехслойной фольги позволяет ферментному/липидному порошку оставаться стабильным и обеспечивает легкость введения.

В другом варианте осуществления скорость высвобождения панкреатического/пищеварительного фермента из инкапсулированного ферментного препарата можно контролировать путем подвергания воздействию растворителя. В некоторых аспектах способ включает смешение эмульгируемого липида с некоторым количеством одной или более добавок с получением липидной смеси; и покрытие частиц пищеварительного фермента смесью с формированием инкапсулированного пищеварительного ферментного препарата, содержащего частицы, состоящие из ядра, которое содержит фермент, и покрытия, которое содержит липид. В некоторых вариантах осуществления эмульгируемый липид представляет собой смесь, при этом эмульгируемый липид и добавка не являются одинаковыми, и скорость высвобождения фермента из инкапсулированного композита при воздействии растворителя уменьшается по мере увеличения количества добавки. В альтернативном варианте, скорость высвобождения фермента из инкапсулированного композита под воздействием растворителя увеличивается по мере уменьшения количества добавки.

Неожиданно оказалось, что липидное покрытие не уменьшается или не разрушается под действием HCl (соляной кислоты), присутствующей в желудке, защищая, таким образом, фермент от расщепления после введения до тех пор, пока он не достигнет своего целевого участка в ЖК тракте. Кроме того, липидное покрытие уменьшает подвергание фермента воздействию воды, уменьшая, таким образом, гидролиз, и дополнительно защищая пищеварительный фермент от расщепления. В одном варианте осуществления вспомогательное вещество, содержащее только липид, можно применять для покрытия или инкапсулирования частиц пищеварительного фермента, содержащих липазу.

Применение пищеварительных ферментов для лечения специфических мишеней заболевания можно сделать возможным путем приготовления инкапсулированного пищеварительного ферментного композита, имеющего различные характеристики высвобождения. Так как различные неврологические и поведенческие заболевания могут влиять на желудочно-кишечную систему человека различными путями, применение специфических ферментных препаратов и последующее инкапсулирование могут изменить участок и длительность доставки ферментного препарата.

В случае введения субъектам, когда для эффективного лечения требуется доставка липаз, профиль растворения пищеварительных ферментов, покрытых энтеросолюбильной оболочкой, должен обеспечить более длительную задержку высвобождения ферментов, а также доставку лекарственной формы с высоким содержанием липаз.

В одном варианте осуществления при лечении субъектов с аутизмом, которым для эффективного лечения требуется доставка ферментов протеаз, липидное инкапсулирование может быть модифицировано для доставки протеазы в самом начале интервала времени транзита в проксимальный отдел тонкого кишечника для оптимизации переваривания белка. В другом примере для субъектов с медленным прохождением по ЖКТ по причине дизавтономной природы их неврологического заболевания, еще один профиль высвобождения требуется для доставки ферментов для эффективного лечения. Выбор липидов и/или добавок будет сделан для получения высвобождения фермента в более поздние моменты времени после введения.

Время прохождения пищеварительных ферментов через пищеварительную систему можно контролировать путем наслоения липидов или посредством инкапсулирования с помощью липидов специфических типов. В определенных аспектах в настоящем документе обеспечено применение композиции, содержащей выбранную смесь ферментов и липидов для доставки субъектам, восприимчивым к лечению панкреатическими/пищеварительными ферментами на основе времени прохождения в желудочно-кишечных системах человека.

Улучшенные свойства скольжения могут способствовать упаковке покрытых пищеварительных ферментных препаратов, например, в мешочки или саше.

В одном аспекте липидное инкапсулирование можно применять для изготовления покрытого пищеварительного ферментного препарата для доставки в течение определенных интервалов времени в желудочно-кишечный тракт человека для лечения определенного заболевания или состояния. Это заболевание или состояние может быть вызвано или может характеризоваться недостаточным пищеварением, лечение которого можно проводить путем введения пищеварительных ферментов в соответствующую область ЖК тракта. Неврологическое или поведенческое заболевание или состояние представляет собой заболевание или состояние, которое обычно не связано с пищеварительной системой, при этом лечение одного или более симптомов можно проводить путем введения эффективного количества панкреатического и/или пищеварительного ферментного препарата.

Таким образом, в настоящем документе обеспечено липидное инкапсулирование определенных ферментов, нацеленных на применение в лечении определенных заболеваний, при этом способ инкапсулирования включает количество и тип липидов, используемых в способах, описанных здесь, для приготовления инкапсулированного пищеварительного ферментного композита. Настоящие варианты осуществления также относятся к способам изготовления ферментных препаратов с помощью липидного покрытия и/или инкапсулирования панкреатических и/или пищеварительных ферментов. Способы включают обеспечение эмульгируемого липида и покрытие частиц панкреатического/пищеварительного фермента липидом, при этом панкреатические/пищеварительные ферменты содержат 5-90% покрытых ферментных препаратов по массе. В некоторых аспектах непокрытые частицы панкреатических/пищеварительных ферментов имеют размер в диапазоне примерно 105-425 мкм.

В одном варианте осуществления в настоящем документе описан способ приготовления инкапсулированного пищеварительного ферментного препарата, при этом способ включает а) пропускание через экран непокрытых частиц пищеварительных ферментов с получением частиц подходящего для инкапсулирования размера; и b) покрытие пропущенных через экран частиц пищеварительных ферментов эмульгируемым липидом с формированием покрытых инкапсулированных пищеварительных ферментов, состоящих из ядра, которое содержит панкреатический/пищеварительный фермент, и покрытия, которое содержит эмульгируемый липид. В некоторых вариантах осуществления инкапсулированный пищеварительный ферментный препарат представляет собой пищеварительный ферментный препарат с контролируемым высвобождением, который может улучшать свойства скольжения.

Пропускание через экран частиц может включать стадии контроля качества для улучшения активности, внешнего вида или размера частиц пищеварительного фермента. Например, частицы могут быть проанализированы для определения активности ферментов и/или визуализированы с использованием хроматографических, микроскопических или других аналитических способов. Частицы могут быть пропущены через экран для получения частиц подходящего размера для инкапсулирования путем удаления частиц слишком малого или крупного размера. Например, частицы могут быть пропущены через экран для получения частиц подходящего размера или частиц с размером, лежащим в более однородном диапазоне, для инкапсулирования. В качестве дополнительного примера, частицы могут быть пропущены через экран USSS #40 меш и через экран USSS #140 меш. Частицы, которые проходят через экран #40 меш, но задерживаются экраном #140 меш, имеют размер в подходящем диапазоне для покрытия или инкапсулирования. Частицы также могут быть пропущены через экран путем пропускания через экран USSS #140, #120, #100, #80, #70, #60, #50, #45 или #40 меш, или любой их комбинации.

Ферментные препараты, поставляемые поставщиком API, могут быть обеспечены в виде частиц, имеющих неправильную форму, и частиц с разным размером, с неровными краями и большими сращениями, и содержащие частицы некоторых кристаллических солей (данные не показаны). Неоднородность размеров частиц и формы ухудшает скользящие свойства и препятствует упаковке. К тому же, засыпание непокрытого фермента в ротовую полость субъекта будет затруднено и может вызвать чрезмерную или недостаточную доставку фермента. В одном варианте осуществления обработка частиц пищеварительных ферментов в соответствии со способами, описанными здесь, позволяет получить непыльный сыпучий препарат, состоящий из множества частиц, пригодный для упаковки в саше и для засыпания в пищу или напитки. Кроме того, как описано в настоящем документе, использование липидного инкапсулирования для предотвращения аэрозолирования и, следовательно, повышения безопасности, для улучшения скользящих свойств, которые улучшают изготовление фармацевтических препаратов, является вариантом осуществления, описанным здесь.

В иллюстративном сырьевом ферментном препарате может быть определено распределение частиц по размерам (данные не показаны). Крупные частицы (>40 меш) и очень маленькие частицы (<140 меш) обычно не пригодны для надлежащего инкапсулирования, и могут быть удалены путем пропускания через экран. Для улучшения скользящих свойств инкапсулированного панкреатического ферментного препарата частицы пищеварительных ферментов могут быть пропущены через экран для удаления тонких и сверхкрупных частиц, например, путем включения только частиц с размерами 40-140 меш, или примерно от 105 до 425 микрон. В некоторых вариантах осуществления покрытый пищеварительный ферментный препарат, содержащий 80% пищеварительного фермента по массе, изготовлен путем покрытия пропущенных через экран частиц панкректических ферментов гидрогенизированным растительным маслом с использованием 20 lbs частиц ферментов и 5 lbs гидрогенизированного растительного масла.

В некоторых вариантах осуществления температура липида или липидной смеси поддерживается между 100°F и 120°F перед нанесением на пищеварительные ферменты, которые не являются нагретыми.

В некоторых вариантах осуществления липид должен присутствовать в препарате в минимальном количестве примерно 5% по массе инкапсулированного композита, предпочтительно примерно 30% и более предпочтительно примерно 50% по массе инкапсулированного композита. Максимальное количество панкреатического/пищеварительного фермента, присутствующего в инкапсулированном композите, составляет примерно 95% по массе композита, предпочтительно примерно 90%, и более предпочтительно примерно 85% инкапсулированного композита. Эмульгируемый липид может представлять собой любой липид или материал на липидной основе, который эмульгирует или создает эмульсию, имеющую температуру плавления, которая позволяет эмульгируемому липиду оставаться в твердом состоянии при обычных температурах хранения, например, 23°C.

Используемые здесь «эмульгируемые липиды» означают липиды, которые содержат, по меньшей мере, одну гидрофильную группу и, по меньшей мере, одну гидрофобную группу, и имеют структуру, способную к формированию гидрофильной и гидрофобной поверхности раздела. Эти указанные выше химические и/или физические свойства эмульгируемого липида обеспечивают эмульгирование. Примеры поверхностей раздела включают, например, мицеллы и бислои. Гидрофильная группа может представлять собой полярную группу и может быть заряженной или незаряженной.

Эмульгируемый липид может иметь животное или растительное происхождение, такое как, например, пальмоядровое масло, соевое масло, хлопковое масло, каноловое масло и птичий жир, включая гидрогенизированные растительные масла типа I. В некоторых вариантах осуществления липид является гидрогенизированным. Липид может быть также насыщенным или частично насыщенным. Примеры эмульгируемых липидов включают, но без ограничения, моноглицериды, диглицериды, жирные кислоты, сложные эфиры жирных кислот, фосфолипиды, их соли и их комбинации.

Эмульгируемый липид предпочтительно представляет собой пищевой эмульгируемый липид. Некоторые примеры пищевых эмульгируемых липидов включают сорбитмоностеараты, сорбиттристеараты, стеароиллактилаты кальция и стеароиллактилаты кальция. Примеры пищевых сложных эфиров жирных кислот, которые являются эмульгируемыми липидами, включают сложные эфиры моно- и диглицеридов уксусной кислоты, сложные эфиры моно- и диглицеридов лимонной кислоты, моно- и диглицериды молочной кислоты, полиглицериновые эфиры жирных кислот, сложные эфиры пропиленгликоля и жирных кислот и сложные эфиры моно- и диглицеридов диацетилвинной кислоты. Липиды могут включать, например, гидрогенизированное соевое масло.

Любой эмульгируемый липид можно применять в способах и продуктах, раскрытых здесь. В определенных вариантах осуществления в результате использования эмульгируемого липида будут получены неагломерирующиеся, неаэрозолирующиеся частицы ферментного препарата.

В других вариантах осуществления способ относится к приготовлению инкапсулированного ферментного пищеварительного препарата с контролируемым высвобождением с улучшенными скользящими свойствами, при этом способ включает: а) смешение эмульгируемого липида с одной или более добавками с получением смеси; и b) покрытие пропущенного через экран пищеварительного фермента смесью с образованием инкапсулированного пищеварительного фермента, состоящего из ядра, которое содержит пищеварительный фермент, и покрытия, которое содержит смесь эмульгируемого липида.

Покрытие фермента липидом обеспечивает однородность фермента по размеру и по форме, при этом уменьшает зубчатые края, связанные с сырьевым ферментом, и обеспечивает легкость введения и изготовления, так как скользящие свойства, связанные с покрытым ферментом, будут обеспечивать более легкое наполнение саше/мешочки ферментом и уменьшать чрезмерное или недостаточное наполнение саше. Упаковка в виде единичной дозы уменьшает способность ребенка открывать банки/коробки или другой контейнер, содержащий множество доз. Мешочек или саше из трехслойной фольги дополнительно уменьшает способность субъекта открывать саше/мешочек, и использовать фермент в чрезмерном количестве.

В другом варианте осуществления в настоящем документе обеспечен способ контроля скорости высвобождения пищеварительного фермента из инкапсулированного препарата с помощью использования липидной смеси для покрытия пищеварительного фермента. Способ включает смешение эмульгируемого липида с одной или более добавками с получением смеси, и покрытие пищеварительного фермента смесью с образованием инкапсулированного пищеварительного фермента, состоящего из ядра, которое содержит пищеварительный фермент, и покрытия, которое содержит смесь эмульгируемого липида. Скорость высвобождения фермента из инкапсулированного препарата под воздействием растворителя уменьшается по мере увеличения количества добавки. В альтернативном случае скорость высвобождения фермента из инкапсулированного композита под воздействием растворителя увеличивается по мере уменьшения количества добавки. Таким образом, природа покрытия дает возможность контролировать высвобождение фермента из инкапсулированного препарата.

Неэмульгируемые липиды не обладают химическими и/или физическими свойствами, относящимися к эмульгированию, как описано выше, и включают любой липид, материал на основе липида, воски, сложные органические эфиры или их комбинации. Неэмульгируемые липиды обычно не являются самоэмульгирующимися. Неэмульгируемые липиды могут применяться в качестве добавок, если свойства покрытия и составляющие липиды допускают эмульгирование. Неэмульгируемые липиды, такие как, например, триглицериды, могут быть смешаны с эмульгируемым липидом, раскрытым здесь. Неэмульгируемый липид может иметь животное, растительное, минеральное или синтетическое происхождение. Неэмульгируемый липид предпочтительно является гидрогенизированным и может быть насыщенным или частично насыщенным, и включает, но без ограничения, триглицериды. В предпочтительном варианте осуществления покрытие содержит смесь моноглицеридов и триглицеридов, наносимую на панкреатический/пищеварительный фермент.

Включение одной или более добавок с эмульгируемым липидом, раскрытым здесь, применяется для контроля эмульгирования покрытия и высвобождения фермента. Например, добавка, триглицерид, может быть смешана с моноглицеридами (например, эмульгируемым липидом) для контроля эмульгирования покрытия и, таким образом, контроля (например, уменьшения) скорости высвобождения фермента из композита. В качестве дополнительного примера, одна или более добавок, таких как диглицерид и триглицерид, могут быть смешаны с эмульгируемым липидом для контроля скорости высвобождения фермента. Гидрогенизированные растительные масла могут содержать эмульгирующие агенты, такие как соевый лецитин или другие компоненты.

Свойства, в том числе механическая прочность, температура плавления и гидрофобность, могут быть рассмотрены при выборе подходящего липидного покрытия для пищеварительного фермента. Липиды, имеющие более низкие температуры плавления, и более полярные гидрофильные свойства, оказались в целом менее подходящими для инкапсулирования, так как полученный продукт спекался в условиях ускоренного хранения. Ферментные препараты, изготовленные с использованием, например, гидрогенизированного соевого масла, гидрогенизированного касторового воска и карнаубского воска, все продемонстрировали хорошее засыпание и отсутствие спекания.

Воск может представлять собой парафиновый воск; минеральный воск, такой как озокерит, церезин или монтанный воск; растительный воск, такой как, например, camuba воск, воск, полученный из ягод восковницы (bayberry), льняной воск; животный воск, такой как, например, спермацет; или воск насекомых, такой как пчелиный воск.

Кроме того, восковый материал может представлять собой сложный эфир жирной кислоты, содержащий от 12 до 31 атомов углерода, и жирный спирт, содержащий от 12 до 31 атомов углерода, сложный эфир, содержащий от 24 до 62 атомов углерода, или их смесь. Примеры включают мирицилпальмитат, цетилпальмитат, миристилцеротат, цетилмиристат, церилпальмитат, церилцертат, мирицилмелиссат, стеарилпальмитат, стеарилмиристат и лауриллаурат.

В дополнительном варианте осуществления в настоящем документе раскрыт способ контроля скорости высвобождения панкреатического/пищеварительного фермента из инкапсулированного композита под воздействием растворителя. Способ включает покрытие фермента количеством эмульгируемого липида с формированием инкапсулированного композита панкреатического ферментного вещества, при этом скорость высвобождения фермента из инкапсулированного композита уменьшается по мере увеличения количества эмульгируемого липида на основе общей массы инкапсулированного композита. В альтернативном варианте скорость высвобождения панкреатического фермента из инкапсулированного композита увеличивается по мере уменьшения количества эмульгируемого липида на основе общей массы инкапсулированного композита. Эмульгируемый липид, полезный в этом варианте осуществления, может состоять в основном из одного или более моноглицеридов.

Растворитель, в котором липид эмульгируется, может представлять собой водный растворитель. Водный растворитель взаимодействует с гидрофильными группами, присутствующими в эмульгируемом липиде, и нарушает непрерывность покрытия, приводя к образованию эмульсии между водным растворителем и липидами в покрытии, высвобождая, таким образом, биологически активное вещество из композитов.

Ниже обеспечены способы применения ядер инкапсулированных панкреатических или пищеварительных ферментов для лечения неврологических состояний или расстройств для достижения конкретных целей. В настоящем документе обеспечены способы липидного инкапсулирования лекарственных препаратов, предназначенных для применения человеком, которые имеют характеристики лекарственного препарата с медленным высвобождением, и в которых используется липидное инкапсулирование для обеспечения стабильности. Ниже описаны способы приготовления инкапсулированных ферментных препаратов, содержащих покрытие из эмульгируемого липида и пищеварительный фермент, подходящий для время-специфического безводного/или сайт-специфического направленного высвобождения по ЖК тракту.

Аспекты и варианты осуществления данных вариантов обусловлены удивительным и неожиданным открытием того, что определенные фармацевтические дозированные препараты, содержащие покрытие из эмульгируемого липида и пищеварительный фермент, могут обладать новой повышенной активностью и неожиданными благоприятными профилями высвобождения и растворения, и кинетическими параметрами абсорбции в различных отделах ЖК тракта. Эти характеристики полезны для формулирования специфического биологически активного фермента для сайт-специфического направленного высвобождения по ЖК тракту.

В некоторых случаях определение, нуждается ли субъект в лечении эффективным количеством пищеварительных ферментов, может быть основано на установлении того, что у субъекта имеется ферментная недостаточность. В других случаях определение того, нуждается ли субъект в лечении эффективным количеством пищеварительных ферментов, может быть основано на установлении того, что у субъекта имеется аномальный уровень химотрипсина, измеренный в ЖК тракте, непосредственно или в конце ЖК тракта в качестве показателя фекального химотрипсина. В еще других случаях определение того, нуждается ли субъект в лечении эффективным количеством пищеварительных ферментов, может быть основано на установлении того, что у субъекта имеется аномальный уровень pH стула. В еще других случаях определение того, нуждается ли субъект в лечении эффективным количеством пищеварительных ферментов, может быть основано на установлении того, что у субъекта имеются аномальные уровни FCT и pH стула.

Уровни аминокислот, которые представляют собой продукты расщепления протеаз, могут быть измерены также для определения необходимости в заместительной ферментной терапии. Низкий уровень протеаз или их отсутствие будет приводить к нехватке аминокислот, и пул аминокислот в организме будет изменен и последующее определение необходимости в ферментах для расщепления белков может быть произведено путем измерения уровней аминокислот в крови.

Заместительная ферментная терапия может быть необходима, когда ферменты, такие как протеазы, секретируются в недостаточном количестве, в нормальных количествах, которые затем разлагаются в непригодной окружающей среде в тонком кишечнике, или когда фермент, например протеазы, секретируется в дефектной или неактивной форме, все это будет вызывать необходимость экзогенной заместительной ферментной терапии.

Кроме того, pH стула будет низким или аномально низким в отсутствие расщепления белка, и может означать необходимость в заместительной терапии протеазами. Таким образом, аномальное значение pH крови или стула может указывать на необходимость ферментной заместительной терапии.

Кроме того, исследование усвоения питательных веществ и переваривания питательных веществ может также указывать на необходимость ферментной заместительной терапии, и/или аномальное усвоение витаминов, таких как витамин K, может являться потенциальным показателем аутизма или формирования симптоматики аутизма, или другого сопутствующего заболевания.

В одном аспекте описанный здесь способ включает использование ферментных препаратов, раскрытых здесь, для лечения субъектов, а также других субъектов с аутизмом, которые также имеют ферментную недостаточность. Ферментная недостаточность может быть определена с помощью любого способа, используемого для определения или диагностики ферментной недостаточности. В одном аспекте определение или диагностика могут быть проведены путем оценки симптомов, включая привычки в питании, самоограничения в диете, а также симптомов нарушения питания и/или нарушений со стороны желудочно-кишечного тракта. В других аспектах определение может быть проведено на основе биохимического анализа для выявления, например, уровней или активностей секретируемых, экскретируемых или присутствующих в ЖК тракте ферментов, и/или путем определения присутствия мутации в гене или аберрантной экспрессии гена, кодирующего один или более пищеварительных ферментов. Ферментная недостаточность также может быть определена, например, путем выявления мутации или аберрантной экспрессии гена, кодирующего продукт, регулирующий или иным образом оказывающий воздействие на экспрессию или активность одного или более пищеварительных ферментов.

В другом аспекте определение поведенческих симптомов и улучшения симптомов может быть произведено путем введения ферментов и, в частности, протеаз для улучшения аспекта поведения. Формы поведения включают, но без ограничения: раздражительность, ажитацию, агрессию, плаксивость; заторможенность, социальную самоизоляцию; социальную изоляцию, стереотипное поведение, в том числе нервную самостимуляцию (аутистическую стереопатию) и обесессивные компульсивные формы поведения, гиперактивность, некомплаентность; неадекватную речь. Кроме того, формы поведения могут охватывать отсутствие экспрессивной или рецептивной речи, ограниченный словарный запас, отсутствие или низкие уровни исполнительной функции, а также ограниченные и повторяющиеся движения, и другие проприоцептивные признаки, которые проявляются в аутизме, а также других неврологических заболеваниях.

В некоторых аспектах субъект, подлежащий лечению, может иметь симптомы аутизма или другие сопутствующие неврологические или поведенческие проявления, либо иметь сопутствующие заболевания, имеющие генетическую основу. Кроме того, оценка необходимости ферментной заместительной терапии может также выявить необходимость в лечении системами доставки ферментов, описанными здесь. В определенных аспектах субъекты, у которых выявлен аутизм на основе клинических симптомов, но не сопутствующее заболевание, такое как генетическое сопутствующее заболевание, проходят лечение с помощью систем доставки ферментов, описанных здесь. Однако субъектов, у которых выявлен аутизм на основе клинических симптомов и сопутствующее заболевание, а также выявлен аномально низкий уровень FCT или положительный с использованием другого показателя патогенов ЖК и/или низкая активность или экспрессия пищеварительных ферментов, можно также лечить с помощью систем доставки ферментов, раскрытых здесь.

Необходимость в ферментной заместительной терапии на основе симптоматики является полезной, так как расщепление определенных ферментов затрудняет тестирование. Прямой маркер, такой как измерение фекального химотрипсина, а также вторичный или суррогатный маркер, например такой, который наблюдается при низкой циркуляции аминокислот, может быть использован, например, для определения необходимости в ферментных препаратах, описанных здесь.

В одном аспекте определение ферментной недостаточности может быть проведено с помощью анализа уровней фекального химотрипсина. Способы, такие как PCR или другая амплификация, детекция SNP, секвенирование и/или комбинг ДНК могут быть использованы для выявления присутствия мутации или присутствия последовательностей коротких РНК, которые препятствуют экспрессии одного или более генов, кодирующих пищеварительный фермент. Например, мутация может быть в гене, кодирующем пищеварительный фермент, которая снижает или устраняет активность фермента. В качестве еще одного примера, мутация может представлять собой мутацию в гене МЕТ, гене, кодирующем плеотропную МЕТ рецепторную тирозинкиназу. Смотри Campbell et al., PNAS 103(46), 16834-39 (2006). Эти мутации могут включать, например, С аллельный вариант rs1858830 промотора МЕТ и/или мутации в МЕТ сигнальном пути, такие как гаплотип гена SERPINE1, или Т аллельный вариант rs344781 промотора PLAUR.

Ферментные препараты, раскрытые здесь, являются пригодными для использования в доставке пищеварительных ферментов субъектам с аутизмом, расстройствами аутистического спектра, ADD, ADHD и другими неврологическими заболеваниями или состояниями, требующими ферментной терапии. Сопутствующие симптомы других неврологических или поведенческих состояний могут также поддаваться лечению указанным ферментным препаратом, описанным здесь.

Fallon описал некоторые способы и композиции ферментов для применения в лечении субъектов и других субъектов с аутизмом, например, в патентах США №№7138123, 6660831, 6632429, 6534063, содержание которых включено здесь путем отсылки в полном объеме.

В описанных здесь экспериментах раскрыто ряд факторов, которые обеспечивают неожиданную повышенную/усиленную эффективность и ценность. Например, было открыто, что определенные инкапсулированные ферментные препараты, содержащие соевое масло, проявляют определенные удивительные свойства, которые вызывают улучшения сайт-специфической активности, профиля высвобождения/растворения и легкость изготовления, упаковки и хранения. Без привязки к какой-либо конкретной теории, специалист в данной области будет понятно, что другие способы приготовления и/или формулирования образца, которые могут также обеспечить эти желательные параметры, также предусмотрены настоящим документом.

Инкапсулирование фермента, как описано в настоящем документе, в сущности, не влияет на свойства, проявляемые по настоящему изобретению. Например, стабильность продукта в течение более 36 месяцев в стандартных и нестандартных условиях не была нарушена в процессе инкапсулирования. Свойства фермента, выраженные в виде соотношения, описанного здесь, не могут изменить защитные качества объединенного комплекса фермент-инкапсулирующий материал.

Концентрация пищеварительных ферментов в фармацевтической композиции будет зависеть от скоростей расщепления, инактивации и экскреции ферментов, физико-химических свойств ферментов, схемы дозирования, лекарственной формы и введенного количества, а также других факторов, известных специалистам в данной области.

Фармацевтическую композицию можно вводить однократно или можно разделить на ряд меньших доз для введения через определенные интервалы времени. Следует понимать, что точная доза и длительность лечения являются функцией поражения и могут быть определены эмпирически с помощью известных протоколов тестирования или путем экстраполяции из результатов in vivo или in vitro тестирования. Следует также понимать, что для любого конкретного субъекта конкретные режимы дозирования должны быть скорректированы по времени в соответствии с потребностями субъекта и профессионального мнения лица, осуществляющего введение или наблюдающего за введением композиций, и что диапазоны дозировок, указанные в настоящем документе, являются только иллюстративными и не предназначены для ограничения объема или практики заявленных композиций. В некоторых вариантах осуществления композиции представлены в стандартных лекарственных формах, подходящих для однократного введения, или многократного введения точной дозы.

Дозу следует давать вместе с пищей для способствования абсорбции питательных веществ и содействия распаду. Изобретение предполагает высвобождение фермента в течение некоторого периода времени и это может быть расширено до лекарственной формы с медленным высвобождением, при этом воздействия, действующие один раз в день, или другие более длительные воздействия могут быть получены в результате введения фермента.

Композиции можно вводить либо отдельно или, как правило, в комбинации с обычным фармацевтическим носителем, вспомогательным веществом или тому подобным. Термин «вспомогательное вещество» используется здесь для описания любого компонента, отличного от соединения(й) (ферментов), используемого в композиции, описанной здесь, и известное в данной области. Липидное инкапсулирование представляет собой предпочтительный вариант осуществления, но для доставки ферментного препарата могут быть использованы другие носители и вспомогательные вещества.

Способы приготовления таких лекарственных форм известны или будут очевидным специалистам в данной области, например, смотри Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Edition (Lippincott Williams & Wilkins. 2005).

Соответствующие дозы будут зависеть от субъекта (вида, возраста, веса тела, здоровья и т.п.), тяжести состояния, типа лекарственной формы и других факторов, известных специалистам в данной области. Следует учесть, что концентрации и дозы могут различаться в зависимости от тяжести состояния, веса тела субъекта, количества и типов потребленной пищи и других факторов, определенных курирующим лечащим врачом. Кроме того, следует понимать, что для любого конкретного субъекта специфические режимы дозирования должны быть скорректированы по времени в соответствии с потребностью субъекта и профессионального заключения лица, осуществляющего введение или наблюдающего за введением композиций.

В одном варианте осуществления композицию можно вводить 1 или более раз в день, например 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 раз в день, предпочтительно вместе с пищей. Определенные лекарственные формы или препараты с замедленным высвобождением можно вводить без пищи. В другом варианте осуществления композицию можно вводить перорально 3 раза в день с пищей или без нее, или при каждом плотном приеме пищи. Композиция может быть представлена в форме таблетки, капсулы, гранулы, множества покрытых частиц, или содержать маскирующие вкус вещества для облегчения доставки субъектам. Композиция может быть упакована в упаковку, содержащую дозу на один прием лекарственного средства, которое остается стабильным в течение 30 месяцев.

В Эксперименте 1 исследовали изменения, наблюдаемые у субъектов, которым вводили Препарат 1, описанный здесь, при сравнении с субъектами, которые получали плацебо. Препарат 1 представляет собой лекарственный продукт, соевый липидный инкапсулированный гранулированный панкреатин, который обладает протеазной активностью не менее 156 USP единиц/мг. Однократная доза Препарата 1 обеспечена в мешочке или саше, составляющая примерно 900 мг. Субъектам в возрасте 3-8 лет, у которых диагностирован аутизм, вводили композицию формулы 1 или плацебо. Хотя известно, что субъекты женского пола обычно имеют более тяжелые случаи аутизма, авторы настоящего изобретения сделали одно удивительное открытие, что у девочек было обнаружено большее улучшение, чем у мальчиков после лечения композициями, описанными здесь. У мальчиков также было выявлено улучшение одного или более симптомов аутизма. Кроме того, у субъектов с более тяжелыми случаями аутизма улучшение в целом было больше по сравнению с субъектами с менее тяжелыми случаями аутизма при лечении композициями, описанными здесь. В настоящем документе обеспечен способ лечения детей с аутизмом, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, композиции, описанной здесь. В одном варианте осуществления субъект, подлежащий лечению с помощью таких способов, имеет аутизм. В другом варианте осуществления субъект, подлежащий лечению, представляет собой субъект женского пола. В еще другом варианте осуществления субъект, подлежащий лечению, представляет собой субъект мужского пола. Субъекту можно вводить однократную дозу или множественные дозы композиций. В другом варианте осуществления субъект, получивший лечению с помощью таких способов, проявляет улучшение аутизма, составляющее, по меньшей мере, примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

Факторы (подшкалы) шкалы Aberrant Behavior Checklist (ABC) представляют собой следующие: (I) раздражительность, ажитация, плаксивость; (II) заторможенность, социальная самоизоляция; (III) стереотипное поведение; (IV) гиперактивность, некомплаентность; и (V) неадекватная речь.

При предельном уровне FCT, составляющем 6.0 Единиц/грамм (свежего) или 9.0 (замороженного) кала, или выше, дополнительные улучшения, наблюдаемые после лечения с помощью описанных здесь композиций, включают массу тела, стереотипное поведение по ABC, гиперактивность по ABC, раздражительность по ABC, заторможенность/социальную самоизоляцию по ABC.

При предельном уровне FCT, составляющем 6.0 Единиц/грамм (свежего) или 9.0 (замороженного) кала, или выше, вместе с FCT 3.5 или выше на исходном уровне, авторы настоящего изобретения определили, что имелось статистически значимое улучшение по всем 4 шкалам ABC - раздражительность, гиперактивность, заторможенность/социальная самоизоляция и стереотипное поведение.

Авторы настоящего изобретения обнаружили, что субъекты, получавшие лечение с помощью композиций, описанных здесь, продемонстрировали большее общее улучшение по сравнению с лечением арипипразолом (Abilify®) по шкале раздражительности ABC. В целом, субъекты женского пола, которые испытывают увеличение FCT, имеют улучшение, наблюдаемое по четырем шкалам ABC: стереотипное поведение по ABC, гиперактивность по ABC, раздражительность по ABC, заторможенность/социальная самоизоляция по ABC.

В настоящем документе обеспечен способ улучшения по всем четырем подшкалам шкалы ABC у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, композиции, описанной здесь. В одном варианте осуществления субъект, подлежащий лечению с помощью таких способов, имеет аутизм. В другом варианте осуществления субъект, подлежащий лечению, представляет собой субъект женского пола. В еще другом варианте осуществления субъект, подлежащий лечению, представляет собой субъект мужского пола. В другом варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет улучшение по всем четырем подшкалам шкалы ABC, составляющее по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

В одном варианте осуществления субъекты, получавшие лечение композицией, описанной здесь, проявляют улучшение раздражительности и/или ажитации по шкале ABC. В настоящем документе обеспечен способ лечения раздражительности и/или ажитации у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, композиции, описанной здесь. Субъекту можно вводить однократную дозу или множественные дозы композиций. В другом варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет улучшение по раздражительности и/или ажитации, составляющее по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

В другом варианте осуществления субъекты, получавшие лечение с помощью композиции, описанной здесь, проявляют значительное улучшение социальной самоизоляции и/или заторможенности по шкале ABC. В настоящем документе обеспечен способ улучшения социальной самоизоляции и/или заторможенности у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, композиции, описанной здесь. Субъекту можно вводить однократную дозу или множественные дозы композиций. В другом варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет улучшение по социальной самоизоляции и/или заторможенности, составляющее по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

В одном варианте осуществления субъекты, получавшие лечение с помощью композиции, описанной здесь, проявляют значительное улучшение гиперактивности по шкале ABC. В настоящем документе обеспечен способ уменьшения гиперактивности у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, описанной здесь композиции. Субъекту можно вводить однократную дозу или множественные дозы композиций. В другом варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет улучшение (то есть уменьшение) гиперактивности, составляющее по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

В настоящем документе обеспечен способ улучшения стереотипного поведения у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, описанной здесь композиции. В одном варианте осуществления субъект, подлежащий лечению с помощью таких способов, имеет аутизм. Субъекту можно вводить однократную дозу или множественные дозы композиций. В другом варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет улучшение по стереотипному поведению, составляющее, по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

Авторы настоящего изобретения выявили, что имелась корреляция между улучшением всех поведенческих показателей после лечения с помощью способов по настоящему изобретению и улучшением уровней FCT.

В настоящем документе обеспечен способ улучшения одной или более форм поведения у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, описанной здесь композиции. В одном варианте осуществления субъект, подлежащий лечению с помощью таких способов, имеет аутизм. Субъекту можно вводить однократную дозу или множественные дозы композиций. В другом варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет улучшение по одной или более формам поведения, составляющее по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%», примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

В настоящем документе обеспечен способ улучшения показателя неадекватной речи у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, описанной здесь композиции. Субъекту можно вводить однократную дозу или множественные дозы композиций. В другом варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет улучшение (то есть уменьшение) показателя неадекватной речи, составляющее по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%), примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

В еще другом варианте осуществления субъекты, получавшие лечение композицией, описанной здесь, проявляют улучшение по всем 5 подшкалам, которые включают три, описанные выше, а также стереотипию и неадекватную речь.

В настоящем документе обеспечен способ улучшение по одной, двум, трем, четырем или пяти подшкалам шкалы ABC у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, описанной здесь композиции. Субъекту можно вводить однократную дозу или множественные дозы композиций. В другом варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет улучшение, составляющее по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

В одном варианте осуществления заторможенность и гиперактивность по обеим шкалам уменьшились, при этом, как правило, они представляют собой шкалы обратных величин - то есть улучшение по заторможенности также вызывает увеличение по гиперактивности, и наоборот.

В настоящем документе обеспечен способ улучшения заторможенности и гиперактивности у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, описанной здесь композиции. Субъекту можно вводить однократную дозу или множественные дозы композиций. В другом варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет улучшение по заторможенности и гиперактивности, составляющее по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

Способы по настоящему изобретения являются эффективными в отношении субъектов, которые имеют умеренные или слабые уровни заторможенности, гиперактивности, социальной самоизоляции и раздражительности.

Способы по настоящему изобретения являются даже более эффективными для субъектов с повышенными уровнями заторможенности, гиперактивности, социальной самоизоляции и раздражительности.

Композиции, описанные здесь, в определенных вариантах осуществления, действуют как частичный агонист допаминового рецептора.

В одном варианте осуществления композиции, описанные здесь, достигают данного результата без седативного эффекта или увеличения неврологических симптомов (таких как головокружение, паркинсонизм, дистония, акатизия, сонливость, усталость, экстрапирамидные расстройства, тремор и слюнотечение) по сравнению с другими утвержденными лекарственными средствам для лечения аутизма. В одном варианте осуществления лечение субъекта с помощью таких способов не вызывает седативного эффекта. В другом варианте осуществления лечение субъекта с помощью таких способов не вызывает увеличения одного или более неврологических симптомов, при этом неврологическими симптомами являются головокружение, паркинсонизм, дистония, акатизия, сонливость, усталость, экстрапирамидные нарушения, тремор и слюнотечение.

В одном варианте осуществления улучшение состояния по одному или более симптомам у субъектов после лечения композицией, описанной здесь, достигается без набора веса тела.

Кроме того, эти положительные изменения по подшкалам могут быть достигнуты/встречены без каких-либо побочных эффектов в соответствии со стандартами FDA (показатель больше, чем 5%).

В настоящем документе обеспечен способ лечения субъекта, проявляющего один или более симптомов по подшкалам ABC: (I) раздражительность, ажитация, плаксивость; (II) заторможенность, социальная самоизоляция; (III) стереотипное поведение; (IV) гиперактивность, некомплаентность; и (V) неадекватная речь, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, композиции, описанной здесь, при этом побочные эффекты лечения не представляют собой какие-либо побочные эффекты в соответствии со стандартами FDA (показатель больше, чем 5%).

В некоторых вариантах осуществления изменения, которые возникают по подшкалам, возникают на 4 неделе и далее продолжают улучшаться. Среди субъектов в возрасте от 3 до 8 лет отсутствует эффект возраста, то есть композиции в равной степени являются эффективными среди всех возрастных групп. Не наблюдалось географической корреляции у субъектов, получавших лечение композициями, описанными здесь.

Улучшения наблюдались как в рецептивной, так и экспрессивной речи, оцененные с помощью теста Expressive Vocabulary Test (EVT) и теста Peabody Picture Vocabulary Test.

Тест экспрессивного словарного запаса (Expressive Vocabulary Test, EVT) представляет собой субъективно проводимый, нормативно-ориентированный тест экспрессивного словарного запаса и воспроизведения слов. Для 38 пунктов врач, проводящий исследование, указывает на картинку или часть тела и задает вопрос. По 152 пунктам синонимов проводящий исследование врач показывает картинку и произносит неполное высказывание. Испытуемый должен ответить на каждый пункт одним словом. Все стимулирующие картинки выполнены в цвете, тщательно сбалансированы в отношении пола и этнической принадлежности. Результаты оцениваются с помощью стандартных баллов на основе распределения по возрасту и стадии обучения (Age- and Grade-Based Standard Scores), процентилей, шкалы эквивалента нормальной кривой (Normal Curve Equivalents, NCEs), стенайнов, шкалы Age and Grade Equivalents, Growth Scale Value (GSV).

Лексический тест Пибоди в картинках (Peabody Picture Vocabulary Test) измеряет рецептивный (воспринимаемый на слух) словарный запас стандартного американского варианта английского языка (Standard American English) и обеспечивает быструю оценку их вербальной способности или способностей к обучению. Проводящий тестирование представляет серии картинок каждому участнику. На странице представлено четыре картинки и каждая имеет номер. Проводящий тестирование произносит слово, описывающее одну из картинок, и просит субъекта указать или сказать номер картинки, которая наилучшим образом иллюстрирует значение слова-стимула. Пункты ответов могут быть также представлены в виде множественного выбора в зависимости от возраста субъекта. Общий балл может быть переведен в процентиль, умственный возраст или IQ балл стандартного отклонения.

В настоящем документе обеспечен способ улучшения рецептивной и экспрессивной речи у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, описанной здесь композиции. Субъекту можно вводить однократную дозу или множественные дозы композиций. В одном варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет улучшение в рецептивной и экспрессивной речи, составляющее по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

Субъекты с аутизмом, которые имели афазию и другие возможно неизвестные причины, которые присутствуют в виде отсутствия экспрессивной речи, удивительным образом проявляют улучшения речи с соответствующей возрасту грамматической структурой и словарным запасом без кривой научения. В настоящем документе обеспечен способ улучшения грамматической структуры и словарного запаса, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, описанной здесь композиции. Субъекту можно вводить однократную дозу или множественные дозы композиций. В одном варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет улучшение грамматической структуры и словарного запаса, составляющее по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

В настоящем документе обеспечен способ улучшения по всем шкалам развития, а также увеличения скорости ответов на вопросы до максимального уровня и уменьшения частоты ошибок у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, описанной здесь композиции. Субъекту можно вводить однократную дозу или множественные дозы композиций. В одном варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет улучшение по всем шкалам развития, составляющее по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо. В другом варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет увеличение скорости ответов на вопросы и уменьшение частоты ошибок, составляющее, по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

Изменения гиперактивности также наблюдали в тесте Conners' 3-teacher report (3-TR), который является «золотым стандартом» для диагностики, а также корректировки утвержденных лекарственных препаратов для синдрома дефицита внимания и синдрома гиперактивности с дефицитом внимания. Тест Connors' 3-TR можно проводить в соответствии с общепринятыми способами и оценивать в соответствии с руководством для Т-показателя. Оцениваемые признаки включают: возбужденное или сверхактивное поведение; возбудимость и импульсивность; неспособность завершить выполнение задач; невнимательность и легкая отвлекаемость; приступы гнева; беспокойство; выведение из равновесия других субъектов; требования, которые должны выполняться немедленно и легкость расстройства; легкая и частая плаксивость; и быстрые и резкие смены настроения. Каждый признак оценивается по шкале 0-3, где 0 = никогда, редко; 1 = иногда; 2 = часто, достаточно часто; и 3 = очень часто; очень высокая частота.

Введение композиций, описанных здесь, приводит к значительному уменьшению гиперактивности и улучшению глобального индекса (Global Index) теста Conners.

В настоящем документе обеспечен способ лечения субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, композиции, описанной здесь, при этом лечение уменьшает гиперактивность, что приводит к улучшению невнимательности, проблем с обучением, исполнительного функционирования, агрессии и отношений со сверстниками. Субъекту можно вводить однократную дозу или множественные дозы композиций. В одном варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет улучшение невнимательности, проблем с обучением, исполнительных функций, агрессии и отношений со сверстниками, составляющее по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

Персуазивные расстройства развития (Persuasive development disorders) могут быть классифицированы по классификации DSM-IV-TR как аутическое расстройство, синдром Аспергера, PDD-NOS (включая атипический аутизм), синдром Ретта и дезинтегративное расстройство детского возраста. В другом варианте осуществления лечение улучшает один или более признаков по шкале Conners' DSM-IV Scale в соответствии с общепризнанной оценкой. Шкалы Conners' ADHD/DSM-IV Scales (CADS) состоят из пунктов CRS-R, которые лучше дифференцируют субъектов с дефицитом внимания/расстройством, связанным с гиперактивностью, от неклинических субъектов. Шкалы симптомов DSM-IV^тм Symptom Scales напрямую соответствуют критерию DSM-IV для диагноза ADHD с формами, заполняемыми родителями (CAD-P), учителем (CADS-T) и самостоятельно (CADS-A). Отдельные оценки невнимательности, гиперактивности, импульсивности, расстройства поведения, оппозиционно-вызывающего расстройства, общего впечатления в отношении ADHD проводили после лечения композициями, описанными здесь, с такими же результатами, демонстрирующими наблюдаемое улучшение. В одном варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет улучшение одного или более признаков по шкале Conners' DSM-IV Scale в соответствии с общепринятой оценкой, составляющее по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

Композиции, обеспеченные здесь, уменьшают возникновение диареи, по меньшей мере, у популяции аутистических субъектов и по всей вероятности у субъектов в целом в отношении определенных типов желудочно-кишечных нарушений. В настоящем документе обеспечен способ уменьшения случаев возникновения диареи у субъектов, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, описанной здесь композиции. В одном варианте осуществления у ребенка имеется аутизм. В другом варианте осуществления ребенок не является аутистическим. В еще другом варианте осуществления введение данных композиций снижает возникновение диареи по меньшей мере примерно на 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

Большинство субъектов с аутизмом повсеместно страдают синдромом мальабсорбции белка и, таким образом, не получают достаточного количества питательных веществ. Авторы данного изобретения обнаружили, что уровень FCT до лечения, составляющий в среднем 15.5 (в замороженном образце) во всей исследуемой популяции указывает на то, что субъекты повсеместно страдают синдромом мальабсорбции белка и, таким образом, не получают достаточного количества питательных веществ. Это касается всех субъектов, которые имеют предельную концентрацию химотрипсина выше 12.6 единиц/грамм (в замороженном образце) в исследовании.

Также, наблюдалось, что описанные здесь композиции улучшают диету и вес тела у субъектов. По мере достижения относительно нормальных уровней химотрипсина повышается сбалансированное потребление пищи, усвоение белка, усвоение овощей, усвоение мяса, холестерина, витамина K, кальция, улучшается гликемическая нагрузка и улучшаются показатели раздражительности, социальной самоизоляции/заторможенности и гиперактивности по ABC.

В настоящем документе обеспечен способ нормализации уровней химотрипсина у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, описанной здесь композиции. В одном варианте осуществления такое лечение повышает сбалансированное потребление пищи, усвоение белка, усвоение овощей, усвоение мяса, холестерина, витамина K, кальция, улучшает гликемическую нагрузку. В другом варианте осуществления такое лечение улучшает показатели раздражительности, социальной самоизоляции/заторможенности и гиперактивности по ABC.

При предельном уровне FCT 6.0 Единиц/г (свежего) или 9.0 (замороженного) кала, или выше, авторы изобретения выявили улучшение в отношении ряда минералов и витаминов после лечения: растительный витамин А, каротиноиды (альфа- и бета-каротин), витамин К, витамин Е, витамин С, селен, медь, пищевой фталат, лютеин, ликопен, магний, влагосодержание пищи, калий, фосфор, натрий, полиненасыщенные жирные кислоты, мононенасыщенные жирные кислоты, насыщенные жиры, холестерин, витамин E, витамин К, наряду с предпочтительным снижением треобромина. Улучшений в отношении кальция и железа (оба положительные 2-зарядные ионы) и витамина А животного происхождения не наблюдалось.

В целом, у субъектов, которые получали лечение с помощью описанной здесь композиции и которые имели уровень 40 миллиграмм или больше ежедневного усвоения меди, и одновременно уровень FCT 6.0 Единиц/грамм (свежего) или 9.0 (замороженного) кала, или выше, наблюдалось улучшение по четырем шкалам ABC: стереотипное поведение по ABC, гиперактивность по ABC, раздражительность по ABC, заторможенность/социальная самоизоляция по ABC.

В целом, у субъектов, получавших лечение с помощью описанной здесь композиции, и имевших уровень 2000 микрограмм или больше ежедневного усвоения ликопина, и одновременно уровень ежедневного усвоения лютеина 500 микрограмм или больше, наблюдалось улучшение по четырем шкалам ABC: стереотипное поведение по ABC, гиперактивность по ABC, раздражительность по ABC, заторможенность/социальная самоизоляция по ABC.

В целом, субъекты, получавшие лечение с помощью композиции, описанной здесь, и которые имели уровень 40 микрограмм или больше ежедневного усвоения селена, имели улучшение по четырем шкалам ABC: стереотипное поведение по ABC, гиперактивность по ABC, раздражительность по ABC, заторможенность/социальная самоизоляция по ABC.

В целом, при увеличении альфа- и одновременно бета-каротина улучшение наблюдается по четырем шкалам ABC: стереотипное поведение по ABC, гиперактивность по ABC, раздражительность по ABC, заторможенность/социальная самоизоляция по ABC, после лечения композицией, описанной здесь (данные не показаны).

Гликемический индекс (GI) является показателем воздействия углеводов на уровни сахара в крови. Углеводы, которые быстро разрушаются во время переваривания и высвобождают быстро глюкозу в кровоток, имеют высокий GI; углеводы, которые разрушаются более медленно, высвобождая глюкозу постепенно в кровоток, имеют низкий GI. Более низкий гликемический индекс предполагает более медленные скорости переваривания и абсорбции углеводов пищи и может также указывать на большую экстракцию из печени и периферии продуктов переваривания углеводов. Более низкий гликемический ответ может быть приравнен к более низкой потребности в инсулине в некоторых случаях, и может улучшать длительный контроль глюкозы и липидов в крови. Индекс инсулина также является полезным для обеспечения прямого показателя ответа инсулина на пищу.

Гликемический индекс пищи определяют как площадь под кривой двухчасового содержания глюкозы в крови (AUC) в ответ на фиксированную порцию доступных углеводов (обычно 50 г). AUC тестируемой пищи делится на AUC стандарта (глюкозы или белого хлеба, с получением двух различных определений) и умножается на 100. Среднее значение GI рассчитывается из данных, полученных у 10 субъектов-людей. Стандартная и тестируемая пища должна содержать равное количество доступного углевода. Результаты дают относительное упорядочение для каждой тестированной пищи.

В общепризнанных способах глюкоза используется в качестве эталонного продукта, гликемический индекс которой приравнивается к 100 по определению. Это дает преимущества, состоящие в универсальности и получении максимальных значений GI, равных приблизительно 100. Белый хлеб также можно использовать в качестве эталонного продукта, с получением отличающегося набора значений GI (если белый хлеб = 100, то глюкоза = 140).

Значения GI можно интерпретировать интуитивно в виде процентов по абсолютной шкале и обычно интерпретируются следующим образом:

Авторы изобретения выявили, что обычно у субъектов, получавших лечение с помощью описанной здесь композиции, и имеющих гликемический индекс меньше чем 55 и уровень FCT 6.0 Единиц/грамм (свежего) или 9.0 (замороженного) кала, или выше, улучшение наблюдается по четырем шкалам ABC после лечения: стереотипное поведение по ABC, гиперактивность по ABC, раздражительность по ABC, заторможенность/социальная самоизоляция по ABC (данные не показаны).

При предельном уровне FCT 6.0 Единиц/грамм (свежего) или 9.0 (замороженного) кала, или выше, после лечения имеется увеличение усвоения калорий, усвоения белков, мяса, птицы, рыбы, потребления фруктов, потребления овощей, потребления бобовых, потребления углеводов вместе с предпочтительным понижением гликемического индекса.

Понижения гликемического индекса в высокой степени коррелируют с улучшениями в показателях заторможенности, измеренных по шкале ABC.

В одном варианте осуществления гликемический индекс субъекта, получавшего лечение с помощью описанной здесь композиции, снижается по меньшей мере примерно на 5%, примерно на 10%, примерно на 15%, примерно на 20%, примерно на 25%, примерно на 30%, примерно на 35%, примерно на 40%, примерно на 45%, примерно на 50%, примерно на 55%, примерно на 60%, примерно на 65%, примерно на 70%, примерно на 75%, примерно на 80%, примерно на 85%, примерно на 90%, примерно на 95% или примерно на 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо. Кроме того, в другом варианте осуществления субъект испытывает уменьшение по показателям заторможенности, измеренным по шкале ABC. Такое уменьшение может составлять примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

В настоящем документе обеспечен способ улучшения усвоения одного или более витаминов и/или минералов у детей с аутизмом, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, описанной здесь композиции. В одном варианте осуществления субъект, подлежащий лечению с помощью таких способов, является аутичным. В другом варианте осуществления субъект, подлежащий лечению, представляет собой субъект женского пола. В еще другом варианте осуществления субъект представляет собой субъект мужского пола. В другом варианте осуществления усвоение одного или более из витамина А растительного происхождения, каротиноидов (альфа- и бета-каротин), витамина K, витамина E, витамина C, селена, меди, пищевого фолата, лютеина, ликопина, магния, влагосодержания пищи, калия, фосфора, натрия, полиненасыщенных жирных кислот, мононенасыщенных жирных кислот, насыщенных жиров, холестерина, витамина E, витамина K и теобромина является улучшенным по меньшей мере примерно на 5%, примерно на 10%, примерно на 15%, примерно на 20%, примерно на 25%, примерно на 30%, примерно на 35%, примерно на 40%, примерно на 45%, примерно на 50%, примерно на 55%, примерно на 60%, примерно на 65%, примерно на 70%, примерно на 75%, примерно на 80%, примерно на 85%, примерно на 90%, примерно на 95% или примерно на 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

В другом аспекте в настоящем документе обеспечен способ улучшения качества питания аутичного ребенка путем увеличения тринадцати основных витаминов и минералов: витаминов В6, В12, А (растительного происхождения), С, Е, К, наряду с медью, железом, холестерином, никотиновой кислотой, рибофлавином, тиамином и цинком, путем введения ребенку описанной здесь композиции. В исследованиях, проведенных авторами данного изобретения, увеличение содержания этих витаминов и минералов было статистически значимым (данные не показаны).

Биомаркер химотрипсин также может быть хорошим индикатором субъектов с физиологической недостаточностью питательных веществ. В настоящем документе обеспечен способ контроля физиологической недостаточности питательных веществ у субъекта, включающий измерение концентраций химотрипсина в одной или более жидкостях организма или тканях, и сравнение этих уровней с исходной концентрацией или с уровнями у одного или более здоровых субъектов.

Наблюдалось, что все аутичные субъекты на исходном уровне имеют более низкое общее усвоение калорий по сравнению с субъектами соответствующей возрастной группы или субъектами, ведущими сидячий образ жизни, или активный образ жизни. В настоящем документе обеспечен способ улучшения усвоения калорий у аутичных субъектов, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, описанной здесь композиции. В одном варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет улучшенное усвоение калорий по меньшей мере примерно на 5%, примерно на 10%, примерно на 15%, примерно на 20%, примерно на 25%, примерно на 30%, примерно на 35%, примерно на 40%, примерно на 45%, примерно на 50%, примерно на 55%, примерно на 60%, примерно на 65%, примерно на 70%, примерно на 75%, примерно на 80%, примерно на 85%, примерно на 90%, примерно на 95% или примерно на 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

Композиции, описанные здесь, можно применять для предупреждения или уменьшения числа переломов у субъектов с аномальной флорой в их кишечнике (например, аутичных субъектов), и у других популяций субъектов, таких как, например, субъекты, которые принимают антибиотики, имеют болезнь Крона и имеют нарушения тонкого и толстого кишечника в результате повреждающего воспалительного некроза или заболевания. Предупреждение или уменьшение числа переломов может составлять по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

Нарушения, связанные с повышенной свертываемостью крови, у аутичных и других субъектов наблюдались по причине недостаточности витамина K и дефицита транспорта серотонина от тромбоцитов. В настоящем документе обеспечен способ лечения нарушения свертываемости крови у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, описанной здесь композиции. В одном варианте осуществления свертываемость изменялась по меньшей мере примерно на 5%, примерно на 10%, примерно на 15%, примерно на 20%, примерно на 25%, примерно на 30%, примерно на 35%, примерно на 40%, примерно на 45%, примерно на 50%, примерно на 55%, примерно на 60%, примерно на 65%, примерно на 70%, примерно на 75%, примерно на 80%, примерно на 85%, примерно на 90%, примерно на 95% или примерно на 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

Возможные измеряемые уровни гамма-карбоксилированных белков в крови как показатель дефицита витамина K могут представлять собой новый биомаркер для аутизма и других дефицитов, связанных с недостаточностью питательных веществ. Так как субъекты с аутизмом продемонстрировали повышенное усвоение витамина K, карбоксилирование определенных глутаматных остатков может быть важным для аутизма. В настоящем документе обеспечен способ снижения усвоения витамина K у аутичных субъектов, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, описанной здесь композиции. В одном варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет пониженное усвоение витамина K, составляющее по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

Также, в настоящем документе обеспечен способ уменьшения карбоксилирования глутаматных остатков, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, описанной здесь композиции. В одном варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет пониженное карбоксилирование глутаматных остатков, составляющее по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

Оказалось, что субъекты с аутизмом обладают длительной потерей общего усвоения калорий, а также усвоения калорий жиров, белков и углеводов. Ферментная заместительная терапия изменяет в обратном направлении потерю усвоения калорий белков и жиров.

В настоящем документе обеспечен способ изменения в обратном направлении потери усвоения калорий белков и жиров у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, описанной здесь композиции. В одном варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет пониженную потерю усвоения калорий белков, составляющую по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

В целом, субъекты женского пола, которые получали лечение с помощью описанной здесь композиции, которые испытывают увеличение потребления белков, имеют улучшение по четырем шкалам ABC: стереотипное поведение по ABC, гиперактивность по ABC, раздражительность по ABC, заторможенность/социальная самоизоляция по ABC. В одном варианте осуществления в настоящем документе обеспечен способ увеличения потребления белков у аутичных детей женского пола, включающий введение индивидуумам женского пола, нуждающимся в этом, описанной здесь композиции. В одном варианте осуществления индивидуумы женского пола, получавшие лечение с помощью таких способов, проявляют улучшение по четырем шкалам АБС, составляющее по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

Авторы изобретения обнаружили, что общее потребление полиненасыщенных жирных кислот улучшилось у популяции субъектов, получавших лечение с помощью описанной здесь композиции, когда исследуемые участники достигли уровня FCT больше, чем 6.0 единиц/грамм (незамороженного) или 9.0 единиц/грамм (замороженного) кала (данные не представлены). В одном варианте осуществления в настоящем документе обеспечен способ увеличения потребления полиненасыщенных жирных кислот у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту описанной здесь композиции. В одном варианте осуществления потребление полиненасыщенных жирных кислот увеличилось по меньшей мере примерно на 5%, примерно на 10%, примерно на 15%, примерно на 20%, примерно на 25%, примерно на 30%, примерно на 35%, примерно на 40%, примерно на 45%, примерно на 50%, примерно на 55%, примерно на 60%, примерно на 65%, примерно на 70%, примерно на 75%, примерно на 80%, примерно на 85%, примерно на 90%, примерно на 95% или примерно на 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

Авторы изобретения также обнаружили, что субъекты, получавшие лечение с помощью описанной здесь композиции, проявили повышенное потребление белков и жиров, что, по-видимому, коррелирует предпочтительно с улучшениями показателей раздражительности и гиперактивности по шкале ABC. В одном варианте осуществления в настоящем документе обеспечен способ увеличения потребления полиненасыщенных жирных кислот у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту описанной здесь композиции. В одном варианте осуществления потребление белков и жиров увеличилось по меньшей мере примерно на 5%, примерно на 10%, примерно на 15%, примерно на 20%, примерно на 25%, примерно на 30%, примерно на 35%, примерно на 40%, примерно на 45%, примерно на 50%, примерно на 55%, примерно на 60%, примерно на 65%, примерно на 70%, примерно на 75%, примерно на 80%, примерно на 85%, примерно на 90%, примерно на 95% или примерно на 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

Оказалось, что жители Азии улучшили даже до большей степени показатели по ABC, усвоению калорий и в основном по всему в целом. В настоящем документе обеспечен способ лечения субъекта из Азии для улучшения показателей по одной или более подшкалам шкалы ABC, улучшения усвоения калорий, предупреждения или уменьшения количества переломов у субъектов с аномальной флорой в их кишечнике (например, аутичных субъектов) и у других популяций субъектов, таких как, например, субъекты, которые принимают антибиотики, имеют болезнь Крона и расстройство тонкого или толстого кишечника в результате повреждения, воспаления, некроза или заболевания, улучшения диеты или веса тела, улучшения одного или более признаков по Connor's DSM-IV, или любого другого из описанных здесь состояний/признаков, включающий введение субъекту из Азии, нуждающемуся в этом, описанной здесь композиции.

Девочки отвечают лучше на заместительную ферментную терапию, так как имеют тенденцию к более тяжелым случаям аутизма. В настоящем документе обеспечен способ лечения аутизма у индивидуума женского пола, включающий введение индивидууму женского пола, нуждающемуся в этом, композиции, описанной здесь. В одном варианте осуществления индивидуум женского пола, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет уменьшение одного или более симптомов аутизма, составляющее по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

В одном варианте осуществления у аутичных субъектов может присутствовать состояние белково-калорийной недостаточности. Форма белково-энергетической недостаточности у аутичной популяции обусловлена выбором неправильно сбалансированной диеты из-за самоограничения, вызванного неспособностью переваривать белок. Признаки недостаточности питания у аутичной популяции, которые могут служить в качестве частичного маркера аутизма (который будет подтвержден дополнительно с помощью теста ABC или других маркеров), включают, например: один или более из Антропометрии (например: соответствующий возрасту рост (например, хроническая недостаточность питания, остановка в росте и т.п.), соответствующий возрасту вес тела (например, белково-энергетическая недостаточность), соответствующий росту вес тела (например, острая питательная недостаточность, кахексия и т.п.), окружность середины плеча, расстояние между кончиками средних пальцев двух рук, вытянутых в стороны перпендикулярно полу (arm span), и половина от указанного расстояния (demi-span), высота колен (knee height), высота в положении сидя, толщина кожной складки, окружность головы, отечность и индекс массы тела); недостаточность в основных витаминах и минералах (отличных от витамина K); питательные микроэлементы; биохимический анализ (например, альбумин, преальбумин и/или холестерин); контроль перорального приема; недостаточность других ферментов, таких как эластаза и трипсин, наряду с другими ферментами.

Субъекты с аутизмом, которые получают заместительную ферментную терапию, имеют статистически значимые уменьшения усвоения цельного зерна, а также приблизительно на 20% уменьшенное усвоение общих углеводов в результате ферментной заместительной терапии в течение 12-недельного периода. В настоящем документе обеспечен способ уменьшения усвоения цельного зерна и/или усвоения углеводов у аутичных детей, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, композиции, описанной здесь. В одном варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет уменьшение одного или более симптомов аутизма, составляющее по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

В одном варианте осуществления композиции, описанные здесь, можно применять для лечения аутичных субъектов, так как было обнаружено, что многие аутичные субъекты избегают употребления белка. Общее усвоение белка удваивается с помощью заместительной ферментной терапии, и потребление жира увеличивается приблизительно на 15% по сравнению с субъектами, не получавшими ферментную терапию в течение 12-недельного периода. В настоящем документе обеспечен способ увеличения усвоения белка у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, композиции, описанной здесь. В одном варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью таких способов, проявляет уменьшение одного или более симптомов аутизма, составляющее по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо.

В одном варианте осуществления субъекты, имеющие историю аллергических реакций и получавшие заместительную ферментную терапию, имели большее усвоение волокон, калорий, жиров, белков и углеводов, чем аутичные субъекты, получавшие заместительную ферментную терапию, которые не имели аллергических реакций. Способы, описанные здесь, могут быть модифицированы при необходимости в зависимости от того, имеет ли подлежащий лечению субъект аллергические реакции или нет.

У аутичного субъекта, получавшего заместительную ферментную терапию, увеличенное усвоение калорий не вызывает аномального увеличения веса тела за счет общего улучшения качества их питания. Повышение качества их питания имело статистически значимые изменение по тринадцати основным витаминам и минералам, которые представляют собой витамины В6, В12, А, С, Е и K, наряду с медью, железом, холестерином, никотиновой кислотой, рибофлавином, тиамином и цинком. Таким образом, в одном варианте осуществления субъект, получавший лечение с помощью любого описанного здесь способа, проявляет улучшение в усвоении калорий без вызывания аномального увеличения веса тела или ожирения.

Композиции, описанные здесь, можно вводить вместе с одним или более дополнительными агентами. Например, в одном неограничивающем варианте осуществления в настоящем документе обеспечен способ лечения аутизма у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, композиции, описанной здесь, со стимулирующей терапией на основе глутамата.

В настоящем документе обеспечен способ лечения аутизма у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, композиции, содержащей витамин K в сочетании со стимулирующей терапией на основе глутамата, при этом указанный способ может стать новой терапией аутизма. Лечение может дополнительно включать ферментную композицию, описанную здесь.

Субъект, подлежащий лечению с помощью способа, описанного здесь, включает субъекта в возрасте от около 1 года до около 25 лет. В некоторых вариантах осуществления возраст субъекта составляет от около 5 лет до около 20 лет, от около 2 лет до около 10 лет, от около 3 лет до около 8 лет, от около 10 лет до около 15 лет, от около 10 лет до около 20 лет, или любой возраст в указанных диапазонах.

В настоящем документе обеспечен способ контроля уровня фекального химотрипсина для выбора дозы композиции, описанной здесь, для лечения субъектов с аутизмом. Концентрация фекального химотрипсина может быть измерена с использованием любого традиционного анализа. В одном варианте осуществления способ включает измерение концентрации химотрипсина в образце, полученном от аутичного ребенка, сравнение концентрации с одним или более контрольными величинами, и определение необходимости дополнительного лечения. В одном варианте осуществления контрольная концентрация может представлять собой концентрацию у субъекта, о котором известно, что он не является аутичным. В другом варианте осуществления контрольная концентрация может представлять собой концентрацию у субъекта, о котором известно, что он является аутичным.

Уровень фекального химотрипсина можно использовать для подбора дозы для индивидуального дозирования для оптимального ответа субъекта путем оценки величин фекального химотрипсина и разницы между концентрацией, определенной у субъекта, по сравнению с одним или более контролями (то есть разницу между исходными и конечными значениями).

Дозирование может быть скорректировано на основе одного или более из следующего: веса тела, исходного уровня химотрипсина, моментного уровня химотрипсина, усредненного во времени уровня химотрипсина, изменения уровня химотрипсина, изменения уровня химотрипсина за единицу времени, скорости изменения уровня химотрипсина за единицу времени (2-е производное), кумулятивной дозы на данный момент, усредненного во времени дозирования в течение заданного промежутка времени, скорости изменения дозирования в зависимости от скорости изменения уровня химотрипсина, производного скорости изменения дозирования в зависимости от скорости изменения уровня химотрипсина.

Уровни фекального химотрипсина могут быть определены на часовой, ежедневной, недельной, двухнедельной, месячной, двухмесячной или годовой основе.

Другие ферменты, секретируемые в стуле, которые могут представлять собой эквивалентные или даже менее эффективные маркеры, могут быть также измерены для оценки состояния субъекта и определения наилучшего курса лечения.

Авторы изобретения выявили, что чем более тяжелый аутизм диагностируется, тем ниже исходный уровень фекального химотрипсина обнаруживается.

Более того, чем ниже исходный уровень фекального химотрипсина, тем большее улучшение уровня фекального химотрипсина наблюдается и соответствующее большее улучшение заболевания после лечения с помощью описанной здесь композиции (данные не показаны).

В одном варианте осуществления предельный уровень FCT 6.0 Единиц/грамм (свежего) или 9.0 (замороженного) кала, или выше, одновременно с FCT 3.5 или выше на исходном уровне, указывает на улучшение у субъекта, проходящего лечение.

В одном варианте осуществления уровень гиперактивности и другие симптомы ADHD могут быть определены с помощью теста Conners-3.

В еще другом варианте осуществления подшкалы оценки гиперактивности по Conners-3 можно сравнить с подшкалами оценки гиперактивности по ABC.

В еще другом варианте осуществления шкалу Conners можно использовать для определения, возникло ли изменение в поведении у субъектов с ADHD и аутизмом в силу того, что гиперактивность является сопутствующим симптомом, обнаруженным в аутизме.

В другом варианте осуществления признаки, которые можно оценить с использованием Conners-3 у субъектов с аутизмом, представляют собой следующие: возбуждение или сверхактивное поведение; гиперактивность; беспокойство и импульсивность; неспособность завершить задания; невнимательность и легкая отвлекаемость; приступы гнева; беспокойство; нарушение спокойствия других субъектов; требования должны быть выполнены немедленно и легкость фрустрации; легкость и частота плаксивости; быстрые и резкие смены настроения. Каждый признак оценивают по шкале 0-3, где 0 = никогда, редко; 1 = иногда; 2 = часто, достаточно часто; и 3 = очень часто, достаточно часто.

В одном варианте осуществления сравнение изменения в усвоении углеводов, измеренного с использованием отборочной анкеты (скринера) «Block Food Screener» и теста Conners в отношении изменения показателя гиперактивности, показало, что при всех уровнях изменения усвоения углеводов субъекты, которым вводили описанную здесь композицию, улучшили свои баллы по тесту Conners по сравнению с субъектами, которым вводили плацебо в течение 12-недельного курса.

В еще другом варианте осуществления изменения показателя гиперактивности в сторону улучшения у субъектов, которым вводили ферментную композицию, могут быть обусловлены улучшением переваривания углеводов.

В еще другом варианте осуществления изменения показателя гиперактивности в сторону улучшения у субъектов, которым вводили ферментный препарат, могут быть обусловлены улучшением переваривания белков, которое подтверждается улучшением белковых компонентов углеводов.

В еще другом варианте осуществления ферментный препарат содержит протеазы, амилазы и липазы, таким образом, субъекты, которым вводили ферментную композицию, демонстрируют улучшение по сравнению с субъектами, которым ферментную композицию не вводили.

В одном варианте осуществления сравнение изменения в усвоении углеводов, измеренного с использованием отборочной анкеты (скринера) «Block Food Screener» и теста Conners в отношении изменения невнимательности, показало, что при всех уровнях изменения усвоения углеводов субъекты, которым вводили композицию, описанную здесь, улучшили свои баллы по тесту Conners по сравнению с субъектами, которым вводили плацебо в течение 12-недельного курса.

В еще другом варианте осуществления изменения показателя невнимательности в сторону улучшения у субъектов, которым вводили ферментный препарат, могут быть обусловлены улучшением переваривания углеводов.

В еще другом варианте осуществления изменения показателя невнимательности в сторону улучшения у субъектов, которым вводили ферментный препарат, могут быть обусловлены улучшением переваривания белка, которое подтверждается улучшением белковых компонентов углеводов.

В еще другом варианте осуществления ферментный препарат содержит протеазы, амилазы и липазы, таким образом, субъекты, которым вводили фермент, продемонстрировали улучшение по сравнению с субъектами, которым фермент не вводили.

В еще другом варианте осуществления снижение показателя невнимательности наблюдается у субъектов, которым фермент не вводили, так как их усвоение углеводов увеличивается. У субъектов, которым вводили плацебо, показатель невнимательности увеличивается, так как увеличивается усвоение углеводов.

В еще другом варианте осуществления увеличение усвоения углеводов без сопутствующей заместительной ферментной терапии обеспечивает ухудшение показателя невнимательности, вероятнее всего обусловленное неспособностью переваривать белок в углеводах (глиадин).

В еще другом варианте осуществления, так как потребление углеводов увеличивается, наблюдалось, что показатель невнимательности снижается у тех, кому вводили Препарат 1, и наблюдается увеличение у субъектов, которым не вводили лекарственной препарат (например, композицию Препарата 1).

В еще другом варианте осуществления на оба теста, PPVT и EVT, оказывал влияние объем усвоения белка после введения композиции, описанной здесь. Изменения баллов по оценочным шкалам развития в тестах PPVT и EVT является показателем степени общего изменения показателя рецептивной и экспрессивной речи, скорректированного на возраст ребенка.

В одном варианте осуществления баллы по оценочным шкалам развития для обоих тестов, EVT и PPVT, увеличивались, демонстрируя улучшение у субъектов, которым вводили ферментный препарат.

В еще другом варианте осуществления после истечения 12 недель показатель баллов по оценочной шкале развития по PPVT и EVT тех, кому вводили описанную здесь композицию, оставался значительно лучше, чем субъектов, которым вводили плацебо.

В еще другом варианте осуществления в обоих тестах, EVT и PPVT, субъекты, которым вводили плацебо, проявили ухудшение по своим баллам, так как количество белка, которое субъекты переваривали в день, увеличилось на 12 неделе.

В еще другом варианте осуществления улучшение баллов наблюдается в тесте PPVT у субъектов, которым вводили описанную здесь композицию, так как количество переваренного белка в день увеличилось на 12 неделе.

В еще другом варианте осуществления баллы по EVT остаются неизменными, демонстрируя значительные улучшения при всех уровнях усвоения белка в день на 12 неделе.

В еще другом варианте осуществления данные представляют введение препарата с высоким содержанием протеаз, при этом на 12 неделе продемонстрировано значительное улучшение баллов по оценочной шкале развития по обоим тестам, PPVT и EVT.

Улучшение любого из симптомов или результатов может быть оценено в соответствии с любым из тестов, описанных здесь, или общепризнанных в данной области. Например, улучшение может составлять по меньшей мере примерно 5%, примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо (плацебо). В другом примере улучшение может быть, по меньшей мере, примерно 2-кратным, примерно 3-кратным, примерно 5-кратным, примерно 10-кратным, примерно 15-кратным, примерно 20-кратным, примерно 25-кратным, примерно 30-кратным, примерно 35-кратным, примерно 40-кратным, примерно 45-кратным, примерно 50-кратным, примерно 55-кратным, примерно 60-кратным, примерно 65-кратным, примерно 70-кратным, примерно 75-кратным, примерно 80-кратным, примерно 85-кратным, примерно 90-кратным, примерно 95-кратным или примерно 100-кратным по сравнению с субъектом, получавшим лечение плацебо (плацебо).

Примеры

Следующие эксперименты описывают иллюстративные способы в соответствии с изобретением. Следует понимать, что эти эксперименты и соответствующие результаты представлены только в иллюстративных целях и ничего в настоящем документе не должно рассматриваться как ограничение общего объема изобретения. С помощью примера эти исследования демонстрируют некоторые неожидаемые улучшения, реализуемые иллюстративными инкапсулированными ферментными препаратами по настоящему изобретению.

Пример 1: Увеличенные скользящие свойства и сыпучесть иллюстративного инкапсулированного пищеварительного ферментного препарата

До применения иллюстративных способов и препаратов по настоящему изобретению исследование необработанного сырьевого ферментного препарата (Scientific Protein Laboratories (SPL) of Wanakee, WI) выявило, что он имеет значительную изменчивость по размеру частиц и 20 нерегулярных морфологии, как показано на электронном микроснимке частиц (данные не показаны). Также, видимы частицы некоторых кристаллических солей. Сырьевой фермент не засыпают, так как он комкуется и трудно произвести измерения по причине неровных поверхностей и зубчатых границ. Сырьевой препарат также не пригоден для липидного инкапсулирования без дополнительной обработки, так как сырьевой продукт содержит частицы как крупные, так и слишком маленькие для надлежащего инкапсулирования. Пропущенный через экран фермент, несмотря на большую однородность по размеру, продолжает проявлять неровность поверхностей и комкование при засыпании.

Покрытый ферментный препарат может быть получен после пропускания через экран и покрытия липидом сырьевого материала (данные не показаны). В этом примере морфология частиц значительно улучшается, с получением более круглых поверхностей. Это приводит к получению непыльного продукта с хорошей текучестью и органолептическими свойствами.

Морфология фермента в этом случае значительно улучшается благодаря скруглению поверхностей, обеспечивая получение продукта, который является менее пыльным, не аэрозолируется и имеет хорошие скользящие свойства и улучшенные органолептические свойства.

В сырьевом ферментном препарате определяют распределение частиц по размерам. В целом, крупные частицы (>40 меш) и очень маленькие частицы (<140 меш) не пригодны для надлежащего инкапсулирования. Для улучшения скользящих свойств инкапсулированного панкреатического ферментного препарата частицы сырьевого фермента пропускают через экран с включением только частиц с размером 40-140 меш или примерно от 106 до 425 микрон.

Пример 2: Стабильность иллюстративного инкапсулированного пищеварительного ферментного препарата: температура хранения

В дополнительном иллюстративном варианте осуществления для покрытия пропущенных через экран ферментных ядер использовали липиды различных типов и массового процентного содержания. При выборе пригодного липидного покрытия для панкреатического фермента учитывались свойства, в том числе механическая прочность, температура плавления и гидрофобность. Примеры различных исследованных липидных покрытий приведены ниже, и их физические свойства были изучены при температуре до 25°C и при 40°C. Соответственно, физические свойства липидов, такие как механическая прочность, температура плавления и гидрофобность, оценивали в отношении покрытия панкреатических ферментов. В этом примере было обнаружено, что уменьшение температуры плавления или увеличение гидрофобности покрытий не подходило для инкапсулирования, так как это приводило к получению продукта, спекающегося в ускоренных условиях стабильности хранения. Пропущенные через экран инкапсулированные ферментные препараты, изготовленные с использование гидрогенизированного соевого масла, гидрогенизированного касторового воска и карнаубского воска, все продемонстрировали хорошие свойства засыпания и отсутствие спекания.

Оба, гидрогенизированные моноглицериды и соевое масло/моноглицеридные смеси продемонстрировали спекание при более высокой температуре. Таким образом, понятно, что легкоплавкие или более гидрофильные покрытия не подходят для инкапсулирования, так как они приводят к получению продукта, который будет спекаться в условиях длительного хранения, что подтверждено тестом на условия ускоренного хранения при 40 градусах по Цельсию.

Оба, гидрогенизированные моноглицериды и моноглицеридные смеси продемонстрировали спекание при более высокой температуре. Таким образом, понятно, что понижение температуры плавления или увеличение гидрофильности покрытий будет непригодным для инкапсулирования, так как они приводят к получению продукта, который будет спекаться в условиях длительного хранения, что подтверждено тестом в условиях ускоренного хранения при 40 градусах по Цельсию.

Пример 3: Иллюстративный инкапсулированный пищеварительный ферментный препарат, пригодный для панкреатических ферментов: активность ферментов, измеренная как функция стабильности.

В дополнительном варианте осуществления стабильность ферментов определяли согласно следующему способу: Для ускоренного тестирования использовали руководство ICH: покрытые препараты помещали в пластиковый контейнер, который хранили в камере с контролируемой влажностью при 40°C и относительной влажность 75%. Активность ферментов измеряли путем измельчения покрытых ферментных препаратов, диспергирования в соответствующих буферах и тестирования на активность липаз.

Оказалось, что из всех липидов 80% соевое масло придавало самую высокую стабильностью, эффект, который удивительным образом был выше для ферментных препаратов, хранящихся в закрытых контейнерах, чем и не закрытых контейнерах. Испытания ферментных препаратов на стабильность в условиях относительной влажности 75%, хранящихся при 40°C в открытых емкостях, не показали значительных различий в стабильности между покрытыми и не покрытыми препаратами.

Пример 4: Иллюстративный инкапсулированный пищеварительный ферментный препарат, пригодный для панкреатических ферментов: активность фермента и скорость высвобождения инкапсулированного в соевое масло панкреатического фермента, состоящего из множества частиц

В дополнительном варианте осуществления инкапсулированные препараты готовили согласно способам, описанным ниже. Сырьевой ферментный материал пропускали через экран для получения частиц меньше чем 40 меш, но больше, чем 140 меш для удаления тонких частиц и получения более однородной смеси, пригодной для энтеросолюбильного покрытия.

Готовили следующие препараты: (1) 70% активного фермента по массе со стандартным устойчивым соевым покрытием; (2) 80% активного фермента по массе со стандартным устойчивым соевым покрытием; и (3) 90% активного фермента по массе со стандартным устойчивым соевым покрытием.

Активность в каждом инкапсулированном ферментном препарате измеряли путем измельчения инкапсулированных препаратов, диспергирования измельченного материала в соответствующих буферах и тестирования на активность липаз.

Как показано на Фигуре 1, активность ферментов в покрытых препаратах не показывает какой-либо значительной потери активности при покрытии (уменьшение активности от 110 до 100%, нормализованное к установленной активности ферментов сырьевого ферментного материала).

Высвобождение ферментов измеряли путем суспендирования каждого инкапсулированного препарата на оборудовании для определения скорости растворения при pH 6.0 буфера в течение 30, 60 и 90 минут (100 об/мин согласно руководству USP). Как показано на Фигуре 2, все инкапсулированные препараты показали 80-90% высвобождения при 30 и 60 минутах. При 90 минутах измеренная активность ферментов, полученная с этими препаратами, уменьшалась. Пример 5: Иллюстративный инкапсулированный пищеварительный ферментный препарат, пригодный для панкреатических ферментов: размер частиц инкапсулированных в соевое масло панкреатического фермента, состоящего из множества частиц

В дополнительном варианте осуществления препараты, содержащие 70% или 80% активного панкреатического фермента по массе, инкасулированного с помощью соевого масла, сравнивали с сырьевым панкреатическим ферментным материалом в отношении размера частиц, как показано на Фигуре 3.

Все уровни липида демонстрируют влияние размера частиц. 80% РЕС демонстрирует наибольшую однородность, поскольку ничего не возникает при уровне 200 меш.

Пример 6: Иллюстративный инкапсулированный пищеварительный ферментный препарат, пригодный для панкреатических ферментов: запах и вкус

Исследование иллюстративных инкапсулированных ферментных препаратов, содержащих 70%, 80% и 90% фермента по массе, выполняли для определения их вкуса и запаха в сравнении с Sucanat^тм и коричневым сахаром, а также в сравнении с сырьевым ферментом. Результаты показаны в таблице ниже. Sucanat™ представляет собой органический подсластитель для любых пищевых продуктов.

Пример 7: Иллюстративный инкапсулированный пищеварительный ферментный препарат, пригодный для панкреатических ферментов: изготовление

Технологическая схема, представляющая процесс изготовления, полезная в изготовлении ферментного препарата, показана на Фигуре 4.

Ингредиенты, используемые в изготовлении партии иллюстративного панкреатического ферментного препарата, включали 20.0 lbs (фунтов) пропущенного через экран фермента и 5.0 lbs (фунтов) гидрогенизированного растительного масла, например, соевого масла.

Концентрат панкреатического фермента сначала пропускали через экран 40 USSS, и материал, который проходил через ячейки, сохраняли. Сохраненный материал затем пропускали через экран 140 USSS (или эквивалент), и материал, который не проходил через ячейки, сохраняли в качестве просеянного панкреатического ферментного материала или частиц.

В процессе инкапсулирования надлежащий покрывающий материал загружали в тигель для плавления, после чего температуру доводили и поддерживали при 110°F для процесса распыления. Во время процесса распыления можно использовать любую температуру, которая будет обеспечивать нужную консистентность. В некоторых вариантах осуществления температуру дополнительно выбирали на основе температуры плавления липидов, используемых в покрытии, и/или таким образом, чтобы после приведения в контакт пропущенного через экран панкреатического ферментного материала или частиц с покрытием активность ферментного препарата оставалась примерно такой же.

Жидкий материал покрытия взвешивали и переносили в емкость для распыления. Пропущенный через экран панкреатический фермент добавляли в сосуд для инкапсулирования. Частицы панкреатического фермента инкапсулировали с помощью материала покрытия до выбранного уровня покрытия.

Инкапсулированный материал пропускали через экран 14 USSS (или эквивалентный) и материал, который проходил через экран, сохраняли. После просеивания материал собирали, и образцы отбирали для контроля качества (QC).

В случае необходимости смешения двух подпартий, загруженный пропущенный через экран материал добавляют в подходящий смеситель и перемешивают в течение от 7 до 10 минут. Образцы получают для тестирования готового продукта. Инкапсулированный материал упаковывают в крупные партии и помещают на карантин для обязательного тестирования. При достижении критериев приемочного контроля готовый продукт выпускается Группой контроля. После чего продукт может отгружаться в соответствии с предписанием.

Образцы собирают для тестирования готового продукта, включая аналитическое тестирование и микробиологические анализы, которые могут проводиться в течение продолжительного периода.

Пример 8: Иллюстративный инкапсулированный пищеварительный ферментный препарат, пригодный для панкреатических ферментов: упаковка

В еще другом дополнительном варианте осуществления стабильность фермента отчасти обусловлена инкапсулированием и отчасти трехслойной упаковкой из фольги. Далее представлен способ упаковки однократной дозы саше/пакетиков.

Сначала, после изготовления продукт распределяют в чистые мешки из пищевого полиэтилена, вложенные в барабаны, и барабаны герметично запечатывают. В случае соответствия критериям спецификации, партия затем выпускается из карантина, и материал затем отгружается соответствующей компании, занимающейся упаковкой, для распределения в саше для индивидуального дозирования субъекту.

Например, для упаковки используется мешочек PD-73272 Printed Child Resistant (CR) Pouch, состоящий из 26# C1S бумага/7.5# LDPE/.0007" Алюминиевая фольга/15# с вакуумной упаковкой Surlyn. Предпочтительно, чтобы предварительно напечатанная пленка/фольга, внешняя надпись имели метку приводки одного цвета на белом заднем плане, тогда как поточная печать номера партии, срока годности и кода продута были также выполнены в одном цвете, черном. Общий размер саше составляет: W 2.50"×Н 3.50". Размер саше рассчитан на содержание 900 мг гранул панкреатического липидного инкапсулированного лекарственного средства с переносимостью ±10% на единичную дозу пакетика/саше. Конечный продукт будет обладать протеазной активностью не менее чем 156 USP единиц/мг.

Пример 9: Иллюстративный инкапсулированный пищеварительный ферментный препарат, пригодный для панкреатических ферментов: растворение

Эффект высвобождения комплекса панкреатического экстракта из липидных инкапсулированных частиц с соевым маслом исследовали с использованием частиц с различными уровнями липидного покрытия (выраженными как % липидного покрытия на общую массу частицы). Уровень покрытия изменялся от 10% до 30%. Отсутствовало значительное влияние липидного покрытия в этом диапазоне на высвобождение комплекса панкреатического экстракта в водной среде из частиц в течение периода 60 минут. Все лекарственные формы высвобождают более 80% фермента в течение первых 30 минут после инициирования растворения. Максимальное высвобождение для 90%, 80% и 70% частиц составило 85%, 88% и 83%, соответственно через 60 минут.

Выбор 70%-90% инкапсулированного панкреатического ферментного препарата (активного фермента по массе) был сделан на основе его профиля высвобождения, подходящего для высвобождения фермента в проксимальном отделе тонкого кишечника, где будет происходить переваривание белка протеазным компонентом.

Соевое масло было выбрано в качестве липидного покрытия по причине отсутствия у него белковых компонентов и соответствующего отсутствия антигенных свойств, для сведения к минимуму или устранения возможности аллергической реакции на липидное покрытие у получающих лечение субъектов и субъектов с аутизмом.

Использование 70-90% препарата увеличивает текучесть и скользящие свойства при уменьшении аэрозолирования, что позволяет использовать систему доставки в форме саше или мешочков.

Добавление трехслойной упаковки из фольги обеспечивает стабильность, транспортабельность препарата в виде покрытых частиц и доставку с помощью единичной стандартной дозы.

Препараты с низким содержанием липаз обеспечивают также безопасность путем уменьшения вероятности стриктуры толстой кишки, и усиливают использование протеазной части.

Пример 10: Биохимические биомаркеры и поведенческие основные и неосновные симптомы

Корреляцию между дефицитами пищеварительных ферментов у аутичных субъектов определяли у субъектов, у которых был диагностирован аутизм на основе клинических (поведенческих) симптомов. Эту корреляцию также исследовали у субъектов, у которых был диагностирован аутизм и генетическая сопутствующая патология. После первоначального открытия того, что аутичные субъекты проявляют добровольное ограничение белковой диеты, были проведены исследования, которые показали, что аномально низкие уровни фекального химотрипсина (FCT) являются полезными в качестве биомаркера аутизма.

Уровень фекального химотрипсина можно оценить с использованием общепризнанных способов, включая, но без ограничения, описанные здесь, и коммерчески доступных наборов (например, Monotest Chymotrypsin; Boehringer, Mannheim).

Кал новорожденных собирали таким образом, чтобы он не содержал загрязнение мочой, и смешивали с водой с получением смеси масса/масса (масса/масса) (например, 1:4 масса/масса). Эту смесь затем тщательно перемешивали с получением гомогенной суспензии путем гомогенизации или обработки ультразвуком. Фекальную массу затем разбавляли реакционным буфером, описанным ниже, с получением концентрации фекальной массы, которая при добавлении в протеазный субстрат гидролизует субстрат в течение от 5 до 60 минут. С использованием такого способа можно измерить, например, содержание химотрипсина в кале.

Для анализа фекального химотрипсина у субъектов собирают образец стула. Анализ каждого образца стула можно проводить с использованием ферментативного спектрофотометрического анализа для определения уровня фекального химотрипсина; в некоторых случаях анализ проводят при 30°C, смотри, например, патент США №6660831, включенный здесь путем отсылки. Альтернативно, другие способы, такие как колориметрический метод, использование субстратов, использование анализов и/или другие подходящие способы могут быть использованы для измерения уровней фекального химотрипсина. Уровни фекального химотрипсина в образцах субъектов, у которых предполагается или диагностирован аутизм, сравнивают с уровнями фекального химотрипсина у субъектов, у которых не предполагается или не диагностирован аутизм, для определения, проявляют ли тестируемые субъекты более низкие значения фекального химотрипсина, и для определения, будут ли субъекты иметь благоприятный эффект от введения композиции, описанной здесь.

Кроме того, также определяли число аутичных субъектов, отвечающих на панкреатическое ферментное замещение, на основе измерений биомаркеров и клинических симптомов. Исследовали изменения в желудочно-кишечной системе, а также изменение основных симптомов аутизма.

Первичные наблюдения основывались на наблюдении самоограничения диеты почти всеми субъектами с аутизмом. Затем выполняли множество исследований для оценки способности аутичных субъектов переваривать белок. Исследование физиологии переваривания белка привело к изучению каскада пищеварительных ферментов желудочно-кишечной системы, в особенности тех, которые вовлечены в распад белка, таких как химотрипсин. В качестве показателя дисфункции было определено, что уровни фекального химотрипсина (FCT) у субъектов, страдающих аутизмом, были аномально низкими.

Исследование 1

Данное первичное исследование представляет собой поисковое исследование для определения, будет ли в действительности небольшая когорта субъектов с аутизмом иметь аномально низкие уровни (<9.0) фекального химотрипсина (FCT).

Все 9 субъектов с аутизмом подтвердили аномально низкий уровень FCT ниже 7 Единиц/грамм (Норма≥9.0). Это наблюдение в небольшой группе субъектов привело к дальнейшему изучению вероятности физиологической связи с аутизмом, которая до настоящего времени не была исследована.

Исследование 2

Исследование 2 проводили для определения, испытывала ли более крупная когорта субъектов (26 субъектов) с аутизмом также аномально низкие уровни FCT. Кроме того, определяли уровни фекальной эластазы-1, другого панкреатического пищеварительного фермента, присутствующего в низких количествах при недостаточности поджелудочной железы. И в этом случае уровни FCT были аномально низкими у 25 из 26 субъектов, составляющие 8 Ед/г или ниже. Один ребенок имел уровень FCT 9 Ед/г. С другой стороны, все субъекты имели нормальные уровни фекальной эластазы-1.

Исследование 3

В Исследовании 3 уровни FCT определяли у 46 субъектов в возрасте от 2 до 14 лет, 25 с аутизмом и 21 без аутизма. Данные показали, что субъекты с аутизмом имели аномально низкие уровни FCT, и субъекты, у которых не было аутизма, имели нормальные уровни FCT, составляющие 12 Ед/г или выше. Результаты обобщены на Фигуре 7. Верхняя линия на Фигуре 7 показывает уровни FCT у субъектов, которые не имели аутизма, тогда как нижняя линия показывает уровни FCT у субъектов, которые имели аутизм.

Исследование 4

В Исследовании 4 уровни FCT определяли для 463 субъектов в возрасте от 2 лет до 8 лет, 266 диагностированных с аутизмом и 197 диагностированных без аутизма, в исследовании, проводимом врачом частной практики. Данные показали, что субъекты с аутизмом имели аномально низкие уровни фекального химотрипсина, и субъекты, которые не имели аутизма, имели нормальные уровни фекального химотрипсина.

Данные обобщены в таблице ниже.

Химотрипсин представляет собой фермент поджелудочной железы. Химотрипсин представляет собой сериновую протеазу и является уникальным в том смысле, что он расщепляет только незаменимые аминокислоты во время процесса пищеварения. В частности, химотрипсин расщепляет пептидную связь на карбоксильной стороне ароматических аминокислот. Отсутствие переваривания белка, подтвержденное аномальными уровнями FCT, приводит ребенка в состояние недостаточности аминокислот, доступных для нового белкового синтеза. Без достаточных уровней незаменимых аминокислот новые белки, необходимые для различных функций организма, не могут быть синтезированы. Например, недостаточность или отсутствие белков, вовлеченных в неврологические процессы, может в дальнейшем вызвать развитие симптомов аутизма.

Химотрипсин расщепляет определенные аминокислоты, которые не расщепляются другими протеазами. В частности, химотрипсин расщепляет незаменимые аминокислоты: триптофан, метионин, фенилаланин и лейцин, и частично незаменимую аминокислоту тирозин. Две другие главные протеазы не расщепляют эти незаменимые аминокислоты и, следовательно, отсутствие активности химотрипсина в тонком кишечнике, независимо от причины его низкого уровня, будет приводит субъекта в состояние отсутствия этих аминокислот. Другие очень низкие по уровню содержания протеазы, карбоксипептидаза A и B, расщепляют незначительные количества некоторых из этих аминокислот, но в недостаточной степени, чтобы компенсировать разницу.

Исследование 5

В Исследовании 5 уровни FCT определяли для 320 субъектов в возрасте от 2 лет до 18 лет, 64 с аутизмом, 64 без аутизма, 64 с ADD, 64 с ADHD, 64 с неизвестными генетическими заболеваниями и 64 нормальных (отсутствие известных заболеваний). Данные показали, что субъекты с аутизмом, ADD и ADHD проявили аномально низкие уровни FCT по сравнению с субъектами с известными генетическими заболеваниями и нормальными субъектами. Данные по FCT собирали во время исследования, проводимого врачами частной практики, подобранных по возрасту субъектов с множеством заболеваний. На Фигуре 8 показаны уровни FCT в отдельных группах субъектов в возрасте от 6 лет до 18 лет, которые имеют аутизм, ADHD (синдром гиперактивности с дефицитом внимания), ADD (синдром дефицита внимания), известные генетические нарушения, также диагностированные с аутизмом, или у которых отсутствуют известные заболевания (нормальных).

Две верхние линии на Фигуре 8 соответствуют уровням FCT у субъектов без какого-либо известного заболевания и субъектов с известными сопутствующими заболеваниями (генетическими и другими). Три нижние линии соответствуют уровням FCT у субъектов с аутизмом, ADD и ADHD.

Субъекты с аутизмом, ADD и ADHD имели значительно более низкие уровни FCT, чем субъекты без каких-либо известных заболеваний, или субъекты с известным генетическим сопутствующим или травматическим заболеванием (p<0.01).

Исследование 6

В Исследовании 6 42 подобранных по возрасту субъекта, 25 с аутизмом и 17 без аутизма или другого сопутствующего заболевания, исследовали с использованием анализа стула на присутствие множества патогенов, а также маркеров желудочно-кишечной дисфункции, включая уровни FCT. Субъекты с аутизмом имели большее число присутствующих в стуле патогенов, а также аномально низкие уровни FCT.

Данное небольшое пилотное исследование проводили для изучения желудочно-кишечной флоры субъектов с аутизмом по сравнению с субъектами без аутизма. Множество маркеров состояния желудочно-кишечного тракта изучали для определения присутствия аномальной картины в желудочно-кишечном тракте у этих субъектов.

Сорок два (42) подобранных по возрасту субъекта, 25 с аутизмом и 17 без аутизма или другого сопутствующего заболевания, исследовали с использованием анализа стула на присутствие множества патогенов, а также маркеров желудочно-кишечной дисфункции. Другие патогены ЖК или маркеры стула, известные специалистам в данной области, также могут быть испытаны в качестве маркера дисфункции ЖК. В приведенной ниже таблице показано число случаев присутствия патогена ЖК или другого маркера стула.

Присутствие положительных маркеров стула у субъектов с аутизмом, в том числе низкие уровни фекального химотрипсина указывают на дополнительные желудочно-кишечные проблемы у субъектов с аутизмом.

Пример 11: Рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование ферментного препарата с высоким содержанием протеаз у субъектов с аутизмом

У субъектов, подлежащих лечению (Препарат 1 или плацебо), диагностировали аутизм. Субъектам вводили Препарат 1 (содержащий панкреатин) или плацебо в виде порошка, принимаемого три раза в день с пищей.

Клиническое исследование представляет собой интервенционное исследование с параллельной оценкой, которое является рандомизированным. Первичные точки эффективности включают подтверждение изменений по шкалам поведения и физических симптомов аутизма на исходном уровне, через 14 дней, 30 дней, 60 дней и 90 дней после начала лечения.

Вторичные точки эффективности: другие ключевые показатели поведения и качества жизни, связанные с аутизмом, оценивали на исходном уровне, через 14 дней, 30 дней, 60 дней и 90 дней после начала лечения.

Сто восемьдесят два субъекта было включено в исследование. Исследование с двумя параллельными группами представляло собой следующее:

Критерии отбора участников исследования

Субъекты, заинтересованные в лечении, проходили анкетирование и тестирование для определения природы и тяжести аутизма.

Критерии включения для субъектов, подлежащих включению в исследование, требуют, чтобы субъект отвечал общепринятым диагностическим критериям «Диагностического и статистического руководства по психическим расстройствам» (Diagnostic and Statistical Manual for Mental Disorders - DSM-IV-TR) для аутического расстройства (AD).

Критерии исключения для субъектов, подлежащих исключению из исследования, включают следующие параметры:

1. Вес тела субъекта меньше, чем (<) 11 кг (24.2 фунтов);

2. Продемонстрированная ранее аллергия на свиные (свинина) продукты;

3. Предшествующая история тяжелой травмы головы или апоплексического инсульта, припадки в течение одного года до начала исследования или неконтролируемое системное заболевание;

4. Диагноз: ВИЧ, церебральный паралич, эндокринное заболевание, заболевание поджелудочной железы;

5. В течение 30 дней до начала исследования определенное ограничение на определенные добавки, хелатирующую терапию и диету (для включения потребуется 30-дневный отмывочный период);

6. Применение любого стимулирующего лекарственного препарата должно быть прекращено за 5 дней до начала исследования; и

7. Субъекты должны иметь стабильную дозу SSRI в течение, по меньшей мере, 30 дней.

Места проведения: Клинические испытания проводили в 19 местах на территории США.

Пример 12: Клиническое исследование Препарата 1 у субъектов с аутизмом

Аутизм в настоящее время является важной причиной инвалидности у педиатрической популяции. Препарат 1 основан на наблюдении того, что многие субъекты с аутизмом не переваривают белок. Препарат 1 представляет собой ферментную композицию, которая разработана в виде порошка, принимаемого три раза в день. Препарат 1 представляет собой композицию, описанную в Примере 8, при этом композиция содержит гранулы панкреатина, покрытые соевым маслом, содержащие, по меньшей мере, 156 USP единиц на мг. Композицию вводят в USP Единицах на 900 мг дозы. Композиция формулирована таким образом, чтобы высвобождение происходило в тонком кишечнике для усиления переваривания белка, увеличивая, таким образом, доступность незаменимых аминокислот. Целью данного исследования является определение эффективности Препарата 1 при лечении основных симптомов аутизма.

У субъектов, подлежащих лечению (Препаратом 1 или плацебо), диагностировали аутизм. Субъектам вводят Препарат 1 или плацебо.

Клиническое исследование представляет собой интервенционное исследование с параллельной оценкой, которое является рандомизированным. Классификация точек клинической эффективности, оцениваемых во время испытания, служит для определения эффективности лечения субъектов Препаратом 1.

Первичные точки эффективности, подлежащие оценке, включают подтверждение изменений по шкалам поведения, связанным с основными симптомами аутизма, на исходном уровне, после 4, 8, 12, 16, 20, 24, 36, 60, 72, 84, 96, 108, 120, 132, 144, 156, 168 и 180 недель лечения.

Вторичные точки эффективности, подлежащие оценке, включают другие ключевые показатели поведения и качества жизни, связанные с аутизмом, на исходном уровне, после 4, 8, 12, 16, 20, 24, 36, 60, 72, 84, 96, 108, 120, 132, 144, 156, 168 и 180 недель лечения.

Сто семьдесят (170) субъектов было включено в исследование и проведено лечение в соответствии со следующими группами:

Критерии отбора участников исследования

Субъекты, которые заинтересованы в лечении, проходили анкетирование и тестирование для определения природы и тяжести аутизма.

Критерии включения для субъектов, подлежащих включению в исследование, включают следующие параметры:

1. Отвечают диагностическим критериям «Диагностического и статистического руководства по психическим расстройствам» (Diagnostic and Statistical Manual for Mental Disorders -DSM-IV-TR) для аутического расстройства (AD).

2. Текущий Протокол 00102 требует завершения Протокола 00101.

3. Набор на данный момент субъектов непосредственно на Протокол 00102.

1. Для текущего исследования требуются, чтобы субъекты в возрасте 3-8 лет имели вес тела <11 кг (24.2 фунтов), и достигшие возраста 9-12 лет имели вес тела 22 кг (48.4 фунтов).

2. Новые набранные субъекты должны находиться в возрасте между 9-12 годами с весом тела <22 кг (48.4 фунтов).

3. Продемонстрированная ранее аллергия на свиные (свинина) продукты.

4. Предшествующая история тяжелой травмы головы или апоплексического инсульта, припадков в течение одного года до момента вступления в исследование или неконтролируемое системное заболевание.

5. Диагноз: ВИЧ, церебральный паралич, эндокринное заболевание, заболевание поджелудочной железы;

6. В течение 30 дней до начала исследования определенное ограничение на добавки, хелатирующую терапию и диету (для включения потребуется 30-дневный отмывочный период);

7. Применение любых психотропных лекарственных препаратов, стимуляторов или SSRI должно быть прекращено за 30 дней до вступления в исследование.

Места проведения: клинические испытания будут проведены в 19 местах на территории США.

Исследование 1А

Двести девяносто восемь (298) субъектов проходили скрининг на аутизм по критериям DMS-IY, а также с помощью диагностических тестов SCQ и ADI-R. После выявления аутизма субъектов тестировали на их уровни фекального химотрипсина.

После выявления наличия аутизма с помощью указанных выше тестов и обнаружения низких уровней FCT (<12.6 Ед/г замороженного стула) субъектов рандомизировали и распределяли на две параллельные лечебные группы: одной вводили ферментную композицию с высоким содержанием протеазы (Препарат 1), описанную здесь, или плацебо.

Для текущего исследования требовалось, чтобы субъекты были в возрасте 3-8 лет с весом тела >11 кг (24.2 фунтов).

Препарат 1 или плацебо вводили три раза в день с пищей. Препарат 1 описан здесь как ферментная композиция (лекарственный препарат) с высоким содержанием протеаз.

Сто восемьдесят два (182) субъекта рандомизировали. Клиническое исследование представляет собой интервенционное исследование с параллельной оценкой, которое является рандомизированным и слепым. Классификация точек клинической эффективности, оцениваемых во время испытания, служит для определения эффективности лечения субъектов ферментным продуктом с высоким содержанием протеаз, описанным здесь (лекарственный препарат) в сравнении с субъектами, которым вводили плацебо.

В данном исследовании измеряли изменения уровней фекального химотрипсина от исходного уровня между неделей 0 (исходный уровень) и неделей 12. Субъекты, которым вводили лекарственный препарат, получали дополнительно активный химотрипсин, и субъекты, которым вводили плацебо, не получали дополнительно химотрипсин.

На Фигуре 15 показаны изменения уровней фекального химотрипсина от исходного уровня у субъектов, которым вводили лекарственное средство в сравнении с субъектами, которым вводили плацебо.

Уровни химотрипсина значительно улучшились за 12 недель заместительной терапии во время исследования. Изменение 1, продемонстрированное плацебо, находится в пределах стандартного отклонения теста.

Субъекты, получавшие плацебо, которые не получали заместительной терапии химотрипсином, не показали значительного улучшения во время испытания. Величина p<0.03 демонстрирует значимость за 12-недельный период.

Это демонстрирует, что уровень химотрипсина был восстановлен у субъектов, которые получали лекарственный препарат, и что те, кто получал плацебо, не получили восстановления.

Исследование 2А

В Исследовании 2А использовали такую же когорту субъектов, которая указана в исследовании 1А. Проводили скрининг субъектов на аутизм. Лекарственный препарат или плацебо вводили три раза в день с пищей. Лекарственный препарат описан здесь в виде фермента с высоким содержанием протеазы (Препарат 1).

Изменения pH стула измеряли у субъектов, которым вводили лекарственный препарат, и у субъектов, которым вводили плацебо.

Возникновение роста pH (более щелочной) является характерным признаком увеличения переваривания белков. Так как основные компоненты присутствуют в виде побочного продукта переваривания белка, это делает стул более щелочным.

У субъектов, которым вводили лекарственный препарат, pH стула увеличился до среднего значения 0.03, и у субъектов, которым вводили плацебо, pH стула фактически уменьшился на 0.16. Графическое изображение изменений представлено на Фигуре 16. Изменения pH за время исследования увеличились у субъектов, которые получали заместительную ферментную терапию, и у субъектов, получавшие плацебо, изменения pH ухудшились.

В следующей таблице представлены корреляции уровней pH на неделе 12 с кальцием, медью и витамином С. Присутствуют положительные устойчивые корреляции между субъектами, которым вводили Препарат 1, и всасыванием витамина C.

Исследование 3А

Такую же когорту субъектов, которая указана в исследовании 1А, использовали в Исследовании 3А. Субъекты проходили скрининг на аутизм. Лекарственное средство

или плацебо вводили три раза в день с пищей. Лекарственное средство описано здесь в виде ферментной композиции с высоким содержанием протеазы (Препарат 1).

Сто восемьдесят два (182) субъекта рандомизировали. Клиническое исследование представляет собой интервенционное исследование с параллельной оценкой, которое является рандомизированным и слепым. Классификация конечных точек клинической эффективности, оцениваемых во время испытания, служит для определения эффективности лечения субъектов с помощью описанной здесь ферментной композиции с высоким содержанием протеазы.

Оцениваемыми первичными конечными точками эффективности являются указанные ранее подшкалы Aberrant Behavior Checklist. Кроме того, оценивали общий балл по ABC. Оценки проводили на неделях 12, 24 и 48. В период с 0 по 12 неделю проводили сравнение лекарственного препарата с плацебо, и недели с 24 по 48 представляли изменения от исходного уровня, когда все субъекты получали лекарственный препарат.

Конечным результатом данного исследования является улучшение от исходного уровня по 5 подшкалам ABC Aberrant Behavior Checklist, наблюдаемое у субъектов, получавших лечение Препаратом 1, по сравнению с плацебо.

Таблица демонстрирует изменения общего балла по ABC от исходного уровня на неделях 12, 24 и 48 во время исследования.

Каждый момент времени характеризуется процентным изменением от исходного уровня. В момент времени «неделя 12» процентное изменение представлено в виде конечного результата с поправкой на плацебо, при этом изменение, вызванное приемом плацебо, вычитается из изменения оценки у субъекта, которому вводили лекарственный препарат.

Для специалистов в данной области измерения изменений от исходного уровня с поправкой на плацебо являются стандартными способами оценки изменения между двумя группами: лекарственного препарата по сравнению с плацебо. Когда имеется положительное изменение (знак положительный), лекарственное средство имеет большее влияние на изменение конечного результата, чем плацебо. Если изменение является отрицательным, конечный результат лучше у плацебо.

Через 12 недель стало очевидным, что субъекты, которым вводили лекарственный препарат, имели улучшение по сравнению с теми, кому вводили плацебо.

Оказалось, что улучшение продолжалось до недели 48. У субъектов, чьи симптомы никогда не изменялись на протяжении их жизни, не ожидалось наблюдать эту степень изменения.

Следует отметить, что подшкалы показателей социальной самоизоляции/заторможенности и гиперактивности/некомплаентности известны как шкалы обратных величин. Когда показатель гиперактивности повышается, показатель социальной самоизоляции и заторможенности снижается. Противоположное также верно. Тот факт, что показатели по обеим подшкалам являются сниженными, представляется важным, так как изменения демонстрируют, что имеется неседативный эффект лекарственного препарата и неседативный подход к проблеме.

Кроме того, следует отметить тот факт, что по всем подшкалам имеется значительное улучшение на 12, 24 и 48 неделях. Это является неожиданным улучшением, состоящим в том, что улучшение имеется по всем подшкалам и общего балла по ABC.

Исследование 4А

Тесты PPVT и EVT проводили у субъектов, принимавших участие в исследовании. У той же самой когорты субъектов, которая указана в исследовании 1А.

Субъекты проходили скрининг на аутизм. Лекарственный препарат или плацебо вводили три раза в день с пищей. Лекарственный препарат описан здесь в виде ферментного препарата с высоким содержанием фермента протезы (Препарат 1).

Сто восемьдесят два (182) субъекта рандомизировали. Клиническое исследование представляет собой интервенционное исследование с параллельной оценкой, которое является рандомизированным и слепым. Классификация конечных точек клинической эффективности служит для определения эффективности лечения субъектов с помощью описанной здесь ферментной композицией с высоким содержанием фермента протеазы (Препарат 1) по сравнению с субъектами, которым вводили плацебо.

У нормально развивающихся субъектов EVT и PPVT должны демонстрировать сходный рост. Оценочные шкалы развития, наблюдаемые в течение 12-месячного периода, должны идти в ногу друг с другом. В случае неврологического или иного нарушения у субъектов шкалы часто не будут соответствовать друг другу.

Кроме того, степень развития (баллы по оценочным шкалам развития), продемонстрированная в течение 12-месячного периода, должна изменяться на 8-10 пунктов по обеим шкалам EVT и PPVT в зависимости от возраста. Для возраста 3-8 лет балл по шкале развития должен быть равен приблизительно 8.

В этих результатах теста PPVT баллы по шкале развития у субъектов, получавших лекарственный препарат, лучше, чем у субъектов, получавших плацебо. Баллы по шкале развития скорректированы на возраст и на стандартизацию баллов по всему исследованию (Смотри Фигуру 17).

Кроме того, субъекты, получавшие лекарственный препарат, сделали меньшее количество ошибок; тогда как субъекты, получавшие плацебо, сделали значительно больше ошибок. Это увеличение частоты ошибок может означать увеличение гиперактивности или увеличение невнимательности по сравнению с субъектами, получавшими композицию Препарата 1.

Тест EVT проводили в той же самой группе субъектов, что и тест PPVT. Баллы по EVT демонстрируют большое различие между субъектами, которым вводили лекарственный препарат и субъектами, которым вводили плацебо. (Смотри Фигуру 18).

Имелось также сокращение количества ошибок у субъектов, которым вводили лекарственный препарат по сравнению с субъектами, которым вводили плацебо.

Баллы по шкале развития демонстрируют широкое улучшение у субъектов, которым вводили лекарственный препарат в противоположность субъектам, которым вводили плацебо.

Следует отметить, что показатели по шкале развития, наблюдаемые у субъектов, которым вводили лекарственный препарат, на 12 неделе составляют больше половины от показателя, который ожидается у нормально развивающихся субъектов на 52 неделе. Это увеличение показателя экспрессивной речи является глубоким изменением у субъекта с аутизмом.

Также, следует отметить тот факт, что имеется больший рост баллов по шкале развития в тесте EVT, наблюдаемый у субъектов, которым вводили лекарственный препарат по сравнению с субъектами, которым вводили лекарственный препарат, в тесте PPVT. Это обычно не наблюдается у нормально развивающихся субъектов.

Исследование 6А

У субъектов, принимавших участие в исследовании, проводили анкетирование «Block food screener». В данном исследовании оценивали такую же когорту субъектов, которая указана в исследовании 1А. Проводили скрининг субъектов на аутизм. Лекарственный препарат или плацебо вводили три раза в день с пищей. Лекарственный препарат описан здесь как ферментная композиция с высоким содержанием протеаз (Препарат 1).

Сто восемьдесят два (182) субъекта рандомизировали. Клиническое исследование представляет собой интервенционное исследование с параллельной оценкой, которое является рандомизированным и слепым. Классификация конечных точек клинической эффективности служит для определения эффективности лечения субъектов с помощью ферментной композиции с высоким содержанием протеаз, описанной здесь (Препарат 1) по сравнению с субъектами, которым вводили плацебо.

Анкетирование «Food screener» проводили в исходном состоянии, на неделях 2, 4, 8 и 12.

Далее представлены различные корреляции, наблюдаемые между усвоением пищи и изменениями, наблюдаемыми по различным шкалам.

Фигура 19 иллюстрирует среднее изменение балла по стандартной шкале EVT как функцию усвоения белка (г) на неделе 12.

Вторичные точки эффективности, подлежащие оценке, включали другие важные показатели поведения и качества жизни, связанные с аутизмом, в исходном состоянии, после 4, 8, 12, 16, 20, 24, 36, 48, 60, 72, 84, 96, 108, 120, 132, 144, 156, 168 и 180 недель лечения.

Процентные изменения показателя неадекватной речи по ABC по неделям представлены в следующей таблице:

Изменение подшкалы ABC как функция субъектов, потребляющих 50 г+ ежедневного белка на неделе 12, представлено в следующей таблице:

Изменение углеводов по подшкалам Conners (г) >0 на неделе 12:

В случае увеличения количества переваренных углеводов >0 г, имеется большее улучшение у субъектов, которым вводили лекарственное средство по сравнению с субъектами, которым вводили плацебо.

Следующие наблюдения были сделаны в течение курса испытаний:

Изменение фекального химотрипсина коррелировало с изменениями витамина K и лютеина.

Несмотря на то, что здесь были показаны и описаны предпочтительные варианты осуществления, специалистам в данной области будет очевидно, что такие варианты осуществления представлены только в качестве примера. Многочисленные вариации, изменения и замещения будут возникать для специалистов в данной области. Следует понимать, что могут быть использованы различные альтернативы вариантам осуществления, описанным здесь. Предполагается, что следующая далее формула изобретения определяет объем вариантов осуществления, и что способы и структуры, входящие в объем данной формулы изобретения, а также их эквиваленты, охвачены данным изобретением.

Claims

1. Применение фармацевтической композиции, содержащей пищеварительные ферменты, в формулировании лекарственного средства для лечения недостаточности питательных веществ в результате самоограничения диеты у субъекта с расстройством аутистического спектра (ASD), проявляющего сниженное усвоение жиров, сниженное усвоение углеводов, сниженное усвоение витаминов или повышенную хрупкость костей по сравнению с субъектом, не имеющим ASD; при этом фармацевтическая композиция предназначена для введения два или более раз в день вместе с пищей в течение, по меньшей мере, 12 недель, при этом пищеварительные ферменты содержат протеазу, амилазу и липазу.

2. Применение по п. 1, в котором субъект проявляет повышенное улучшение в усвоении жиров, усвоении углеводов, усвоении витаминов или уменьшение хрупкости костей, составляющее 10% или большее, после введения лекарственного средства по сравнению с показателями до введения лекарственного средства субъекту.

3. Применение по п. 1, в котором чем выше степень ежедневного усвоения жиров, углеводов и/или витаминов (по массе), потребляемых субъектом после введения лекарственного средства, тем больше улучшение у субъекта по одному или более симптомам ASD.

4. Применение по п. 1, в котором субъект дополнительно проявляет улучшение по одному или более симптомам, выбранным из гиперактивности, внимания, раздражительности, ажитации, обсессивно-компульсивного поведения, заторможенности, гиперчувствительности, стереотипии, некомплаентности, агрессии, импульсивности, расстройства поведения, или оппозиционно-вызывающего расстройства, социальной самоизоляции и их комбинации.

5. Применение по п. 4, в котором улучшение включает в себя уменьшение числа случаев или тяжести симптомов.

6. Применение по п. 4, в котором улучшение измеряют по шкале Aberrant Behavior Checklist (ABC).

7. Применение по п. 1, в котором субъект проявляет увеличение витаминного усвоения (по массе) витамина В6, витамина В12, витамина А, витамина С, витамина Е, меди, железа, холестерина, никотиновой кислоты, рибофлавина, тиамина или цинка при введении лекарственного средства субъекту.

8. Применение по п. 1, в котором субъект проявляет увеличение витаминного усвоения одного или более из растительного витамина А, каротиноидов (альфа- и бета-каротин), витамина Е, витамина С, селена, меди, фолата, лютеина, ликопина, магния, калия, фосфора, натрия, полиненасыщенных жирных кислот, мононенасыщенных жирных кислот, насыщенных жиров, холестерина и/или теобромина при введении лекарственного средства субъекту.

9. Применение по п. 1, причем пищеварительные ферменты содержат одну или более протеазу, включая трипсин, химотрипсин или их комбинацию.

10. Применение по п. 1, причем пищеварительный фермент представляет собой панкреатин.

11. Применение по п. 10, причем пищеварительный фермент представляет собой панкреатин в твердой форме.

12. Применение по п. 10, причем пищеварительный фермент представляет собой панкреатин в кристаллической форме.

13. Применение по п. 1, причем субъект, которому вводили лекарственное средство, дополнительно имеет уменьшение числа или тяжести случаев аллергических реакций после введения лекарственного средства по сравнению с субъектом до введения лекарственного средства.

14. Применение по п. 1, причем субъект с ASD дополнительно проявляет пониженное карбоксилирование глутаматных остатков, следующее за введением лекарственного средства.

15. Применение по п. 1, причем лекарственное средство формулировано для перорального введения.

16. Применение по п. 1, причем субъект с ASD, подлежащий лечению, дополнительно проявляет недостаток навыков экспрессивной речи, недостаток рецептивной речи или их комбинации.