RU2653476C1 - Способ микроскопической оценки цитотоксичности компонентов материалов скаффолдов - Google Patents
Способ микроскопической оценки цитотоксичности компонентов материалов скаффолдов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2653476C1 RU2653476C1 RU2017116313A RU2017116313A RU2653476C1 RU 2653476 C1 RU2653476 C1 RU 2653476C1 RU 2017116313 A RU2017116313 A RU 2017116313A RU 2017116313 A RU2017116313 A RU 2017116313A RU 2653476 C1 RU2653476 C1 RU 2653476C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cytotoxicity
- components
- red blood
- blood cells
- scaffold
- Prior art date
Links
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 title claims abstract description 20
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 title claims abstract description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 239000000463 material Substances 0.000 title claims abstract description 18
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 30
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 6
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 2
- 238000007431 microscopic evaluation Methods 0.000 claims 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 abstract description 5
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 3
- 230000007547 defect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 abstract description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 abstract description 2
- 230000008439 repair process Effects 0.000 abstract description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 17
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 17
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 17
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000004753 textile Substances 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 210000002163 scaffold cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/5014—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing toxicity
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, биологии, биотехнологии, фармакологии и может быть использовано для оценки цитотоксичности компонентов, входящих в состав скаффолдов, используемых в тканевой инженерии, а именно при пластике или замещении дефектов тканей организма с обеспечением стимуляции их регенерации. Для этого из крови выделяют эритроциты, промывают их и инкубируют с компонентами материалов скаффолдов при 37оС в течение 30 мин. Затем эритроциты смешивают с аутологичной плазмой крови, помещают каплю на предметное стекло и проводят микрофотосъемку с объективом 100х. Цитотоксичность компонентов скаффолдов оценивают по изменению морфологии эритроцитов и их агрегатов в аутологичной плазме крови. Изобретение позволяет оценивать цитотоксичность компонентов скаффолдов быстрым и доступным способом с высокой чувствительностью. 4 ил., 2 пр.
Description
Предлагаемое изобретение относится к медицине, биологии, биотехнологии, фармакологии и может быть использовано для микроскопической оценки цитотоксичности компонентов, входящих в состав скаффолдов, используемых в тканевой инженерии, а именно при пластике или замещении дефектов тканей организма с обеспечением стимуляции их регенерации.
В настоящее время в связи с увеличивающимся объемом разработок новых материалов и скаффолдов из них важное значение приобретает разработка методов оценки цитотоксичности компонентов скаффолдов, на заселение клетками которых влияет множество факторов, в частности цитотоксичность материалов скаффолда.
Известен способ оценки токсичности продукции из полимерных и текстильных материалов, включающий биосенсор на основе кислородного электрода, иммобилизацию целых клеток бактерий E.coliK-12 на поверхность кислородного электрода. После иммобилизации измеряют дыхательную активность микроорганизмов в присутствии пробы и стандартных образцов положительного и отрицательного контроля. Далее рассчитывают индекс токсичности (см. Пономарева О.Н. и др. Способ оценки токсичности продукции из полимерных и текстильных материалов. Патент 2518306 РФ, 2012).
Метод достаточно сложен, трудоемок, длителен и требует специального оборудования.
В настоящее время доказано, что эритроцит можно рассматривать как универсальную модель для изучения изменений цитоплазматических мембран и метаболизма клеток.
В качестве прототипа выбран способ определения цитотоксичности малорастворимых производственных пылей, включающий инкубацию эритроцитов человека с равными дозами различных пылей, регистрацию измерения в эталонном водном растворе окислительно-восстановительного потенциала (ОВП), где в качестве показателя цитотоксичности при действии определенной дозы на эритроциты является выраженное в процентах повышение среднего за период инкубации уровня ОВП в активированной эталонной воде при воздействии контрольной эритроцитарной суспензии без пыли (см. Петров С.Б., Петров Б.А. Способ определения цитотоксичности малорастворимых производственных пылей. Патент 2480751 РФ, 2013).
Однако этот способ является сложным, трудоемким и требует длительного времени.
Задача предлагаемого изобретения - усовершенствование способа.
Технический результат - упрощение и сокращение времени процесса определения цитотоксичности компонентов материалов скаффолдов.
Технический результат достигается за счет того, что в способе, включающем выделение эритроцитов из крови, их промывание и инкубирование с компонентами материалов скаффолдов, эритроциты смешивают с аутологичной плазмой крови, помещают на предметное стекло, опускают в каплю смеси объектив 100х, проводят микрофотосъемку. Оценивают цитотоксичность компонентов материалов скаффолдов по изменению морфологии эритроцитов и их агрегатов в аутологичной плазме крови.
Способ микроскопической оценки цитотоксичности компонентов материалов скаффолдов осуществляют следующим образом. Кровь от здоровых добровольцев забирают в вакуумные пробирки, содержащие 3.8% цитрат натрия (9:1). Пробирки центрифугируют при 3000 об/мин в течение 20 мин. Бестромбоцитарную плазму и клетки белой крови убирают, а эритроциты трижды промывают физиологическим раствором. К 1 мл забуференного физиологического раствора (10 мМ трис-HCI; 150 мМ NaCI) с pH, доведенной до 7,4, добавляют 50 мкл промытых эритроцитов и 0.1 мл исследуемого материала. Инкубируют при 37°C в течение 30 мин, центрифугируют при 3000 об/мин в течение 5 мин. Супернатант убирают, после чего бестромбоцитарную плазму смешивают с эритроцитами в соотношении 2:1, каплю смеси помещают на предметное стекло, опускают в нее объектив (100х) светового микроскопа и после достижения фокуса (×1000) проводят микрофотосъемку. После этого изучают морфологию клеток и их агрегатов.
Одним из наиболее часто используемых материалов, входящих в скаффолды, является коллаген, составляющий основу соединительной ткани организма и обеспечивающий ее прочность и эластичность. Коллаген имеет несколько преимуществ, которые позволяют использовать данный материал для получения скаффолдов в тканевой инженерии: биосовместимость, волокнистая структура, хорошая сочетаемость с другими материалами, биодеградируемость. Кроме того, коллаген обладает свойствами, обуславливающими высокую клеточную адгезию скаффолда.
Используя разные виды коллагена, проводилась проверка эффективности предполагаемого способа оценки цитотоксичности.
Способ микроскопической оценки цитотоксичности компонентов материалов скаффолдов поясняется следующими чертежами.
Фиг. 1 - Морфология эритроцитов и их агрегация при исследовании на цитотоксичность коллагена №1.
Фиг. 2 - Морфология эритроцитов и их агрегация при исследовании на цитотоксичность коллагена №2.
Фиг. 3 - ДФЧ в скаффолде с коллагеном №1, (6 сутки инкубации; ×100).
Фиг.4 - ДФЧ в скаффолде с коллагеном №2, (6 сутки инкубации; ×100).
Способ поясняется следующими примерами.
Пример 1. Промытые эритроциты здоровых людей инкубировали с образцом коллагена №1 в течение 30 мин при 37°C. Далее суспензию эритроцитов центрифугировали 5 мин при 3000 об/мин. Супернатант убирали, плазму крови смешивали с эритроцитами в соотношении 2:1, каплю смеси помещали на предметное стекло, опускали в нее объектив 100х и проводили микрофотосъемку. На фиг.1 видно, что коллаген №1 обладает токсическим действием на эритроциты. Об этом свидетельствует появление большого количества патологических форм эритроцитов (эхиноцитов). При этом наблюдается нарушение образования монетных столбиков в аутологичной плазме крови.
Пример 2. Промытые эритроциты здоровых людей инкубировали с образцом коллагена №2 в течение 30 мин при 37°C. Далее суспензию эритроцитов центрифугировали 5 мин при 3000 об/мин. Супернатант убирали, плазму крови смешивали с эритроцитами в соотношении 2:1, каплю смеси помещали на предметное стекло, опускали в нее объектив 100х и проводили микрофотосъемку. На фиг. 2 видно, что коллаген №2 не оказывает токсического действия на эритроциты. Об этом свидетельствует незначительное количество измененных эритроцитов. При этом сохраняется образование монетных столбиков в аутологичной плазме крови.
Для дополнительной проверки точности и чувствительности предложенного способа проводилось исследование заселения скаффолдов, в состав которых входили различные виды коллагена и дермальные фибробласты. Для этого уксуснокислый коллаген с pH, доведенной до 7,4, смешивали с плазмой крови. В полученный композитный раствор вводили суспензию фибробластов в культуральной среде DMEM, содержащей 10% эмбриональной телячьей сыворотки в объеме 0,5 мл. Количество клеток в суспензии составляло от 400 до 600 тыс. Композитный раствор, содержащий суспензию клеток, в объеме 2,5 мл заливали в форму для скаффолда. После завершения манипуляций к композитному раствору, содержащему суспензию клеток, немедленно добавляли тромбин-кальциевую смесь. Выдерживали полученный скаффолд в форме в течение 20 мин (для более полной полимеризации фибрина), затем перемещали его в пластиковую чашку Петри и заливали 5 мл культуральной среды DMEM, содержащей 10% эмбриональной телячьей сыворотки. Помещали чашку Петри с полученным скаффолдом в клеточный инкубатор с 5% содержанием CO2 и температурой 37°C. В течение последующих 3 часов происходила полная полимеризация содержащегося в скаффолде коллагена. Наблюдали формирование развития клеточной сети с 3D-структурой. В этих условиях установлено, что при использовании коллагена №1 заселение клетками скаффолда и развитие клеточной сети происходило значительно хуже (Фиг. 3), чем при использовании коллагена №2 (Фиг. 4).
Способ позволяет вести оценку цитотоксичности материалов различного происхождения по изменению морфологии эритроцитов и их агрегатов в аутологичной плазме. Подтверждается высокая чувствительность предлагаемого способа, его доступность, информативность и быстрота выполнения.
Claims (1)
- Способ микроскопической оценки цитотоксичности компонентов материалов скаффолдов, включающий выделение эритроцитов из крови, их промывание и инкубирование, отличающийся тем, что промытые эритроциты инкубируют с компонентами материалов скаффолдов в течение 30 мин при 37°С, центрифугируют 5 мин при 3000 об/мин, супернатант удаляют, бестромбоцитарную плазму крови смешивают с эритроцитами в соотношении 2:1, помещают на предметное стекло, опускают в каплю смеси объектив 100х, проводят микрофотосъемку, оценивают цитотоксичность компонентов материалов скаффолдов по изменению морфологии эритроцитов и их агрегатов в аутологичной плазме крови.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017116313A RU2653476C1 (ru) | 2017-05-10 | 2017-05-10 | Способ микроскопической оценки цитотоксичности компонентов материалов скаффолдов |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017116313A RU2653476C1 (ru) | 2017-05-10 | 2017-05-10 | Способ микроскопической оценки цитотоксичности компонентов материалов скаффолдов |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2653476C1 true RU2653476C1 (ru) | 2018-05-08 |
Family
ID=62105748
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017116313A RU2653476C1 (ru) | 2017-05-10 | 2017-05-10 | Способ микроскопической оценки цитотоксичности компонентов материалов скаффолдов |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2653476C1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2696849C1 (ru) * | 2018-07-05 | 2019-08-06 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Апто-Фарм" | Способ оценки цитотоксичности аптамера |
| RU2776455C2 (ru) * | 2020-12-30 | 2022-07-21 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Национальный исследовательский Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского» | Способ in vitro определения биосовместимости скаффолдов для нейротрансплантации |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2480751C1 (ru) * | 2011-10-07 | 2013-04-27 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Кировская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГБОУ ВПО Кировская ГМА Минздравсоцразвития России) | Способ определения цитотоксичности малорастворимых производственных пылей |
| RU2518306C1 (ru) * | 2012-12-13 | 2014-06-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Тульский государственный университет" (ТулГУ) | Способ оценки токсичности продукции из полимерных и текстильных материалов |
-
2017
- 2017-05-10 RU RU2017116313A patent/RU2653476C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2480751C1 (ru) * | 2011-10-07 | 2013-04-27 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Кировская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГБОУ ВПО Кировская ГМА Минздравсоцразвития России) | Способ определения цитотоксичности малорастворимых производственных пылей |
| RU2518306C1 (ru) * | 2012-12-13 | 2014-06-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Тульский государственный университет" (ТулГУ) | Способ оценки токсичности продукции из полимерных и текстильных материалов |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ВЛАСОВА Н. В., Методы клинических лабораторных исследований, 15.09.2014, стр. 1-8, найдено 17.01.2018 в Интернете [on-line] на сайте http://ignorik.ru/docs/index-2123133.html?page=12. ТЕПЛЫЙ Д. Д., Особенности морфофизиологических показателей эритроцитов белых крыс на этапах онтогенеза в норме и при оксидативном стрессе, автореф кбн, Астрахань, 2011, стр. 4-6, найдено 17.01.2018 в Интернете [on-line] на сайте http://earthpapers.net/preview/345993/a#?page=1. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2696849C1 (ru) * | 2018-07-05 | 2019-08-06 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Апто-Фарм" | Способ оценки цитотоксичности аптамера |
| RU2776455C2 (ru) * | 2020-12-30 | 2022-07-21 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Национальный исследовательский Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского» | Способ in vitro определения биосовместимости скаффолдов для нейротрансплантации |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP7560050B2 (ja) | 三次元組織体及びその製造方法、並びに、三次元組織体の形成剤 | |
| CN106750377A (zh) | 水凝胶、用于制备水凝胶的组合物及水凝胶制备方法 | |
| WO2012093173A1 (en) | Tumour cell and tissue culture | |
| Ajalik et al. | Human organ-on-a-chip microphysiological systems to model musculoskeletal pathologies and accelerate therapeutic discovery | |
| WO2017146122A1 (ja) | スフェロイド形成促進方法 | |
| JP2023155406A (ja) | 異常拍動心筋モデル及びその製造方法、異常拍動心筋モデルの形成剤並びに心疾患治療薬の薬効評価方法 | |
| RU2653476C1 (ru) | Способ микроскопической оценки цитотоксичности компонентов материалов скаффолдов | |
| Phillips | Monitoring neuron and astrocyte interactions with a 3D cell culture system | |
| Gulati et al. | Mini-MEndR: a miniaturized 96-well predictive assay to evaluate muscle stem cell-mediated repair | |
| JP2020156421A (ja) | 脳血管モデル及びデバイス | |
| JP6599310B2 (ja) | シート状細胞培養物の品質評価方法 | |
| Mills et al. | Cryoinjury model for tissue injury and repair in bioengineered human striated muscle | |
| CN107746804A (zh) | 针对添加肝素血液样本的凝血及血小板功能检测试剂盒及其应用 | |
| Patel et al. | Mouse Metanephric Mesenchymal Cell–Derived Angioblasts Undergo Vasculogenesis in Three-Dimensional Culture | |
| RU2362997C2 (ru) | Способ выявления нарушения функции фагоцитов при развитии рецидивирующих инфекционных процессов | |
| US20240166723A1 (en) | Mechanochemical generation of novel collagen gel architectures and scaffolds | |
| Zhu et al. | On-chip construction of a fully structured scaffold-free vascularized renal tubule | |
| RU2808738C1 (ru) | Способ оценки процесса формирования сосудистой сети на хориоаллантоисной мембране куриного эмбриона | |
| Schmiedinger | Advanced Tissue Culture Approaches for in-vitro Studies of Epithelial Cells | |
| US20230212510A1 (en) | Methods for organoids production | |
| CN207581822U (zh) | 针对添加肝素血液样本的凝血及血小板功能检测试剂盒 | |
| Ekström | The influence of viscoelastic properties of bioinks on 3D bioprinted tissue models-A study of cell behaviour and printability | |
| SU1076441A1 (ru) | Способ определени адгезивных свойств бактерий | |
| Rajendran et al. | Engineering Three-Dimensional Spheroid Culture for Enrichment of Proangiogenic miRNAs in Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells and Promotion of Angiogenesis | |
| JPH01120277A (ja) | 細胞付着量測定方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20190511 |