RU2652336C1 - Способ оценки степени окислительного стресса по содержанию карбонилированного тиоредоксина в клетках - Google Patents
Способ оценки степени окислительного стресса по содержанию карбонилированного тиоредоксина в клетках Download PDFInfo
- Publication number
- RU2652336C1 RU2652336C1 RU2017118700A RU2017118700A RU2652336C1 RU 2652336 C1 RU2652336 C1 RU 2652336C1 RU 2017118700 A RU2017118700 A RU 2017118700A RU 2017118700 A RU2017118700 A RU 2017118700A RU 2652336 C1 RU2652336 C1 RU 2652336C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- carbonylated
- thioredoxin
- proteins
- oxidative stress
- degree
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57484—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites
Abstract
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для количественной оценки степени окислительного стресса в клетках. Для этого на первом этапе проводят инкубацию 0,25 мл лизированных 1% раствором тритона Х-100 клеток с 0,5 мл 10 мМ раствора 2,4-динитрофенилгидразина в 2 М НСl, связывающегося с карбонильными группами белков. Затем пробы инкубируют при комнатной температуре в течение 1 ч, добавляют 0,5 мл 20% ТХУ и центрифугируют при 11000 g 10 мин. Осадок промывают 3 раза 1 мл раствора этанол: этилацетат (1:1) для экстракции избытка 2,4-динитрофенилгидразина, затем высушивают и ресуспендируют. Далее 0,25 мл клеточного лизата, содержащего связанные с 2,4-динитрофенилгидразином карбонилированные белки, инкубируют с 0,5 мл магнитных частиц, нагруженных антителами к 2,4-динитрофенолу, при 25°C и непрерывном перемешивании в течение 3 ч. Магнитные частицы со связавшимся комплексом антиген-антитело собирают с помощью магнитного штатива, трижды отмывают 0,5 мл 0,01 М натрий-фосфатным буфером и инкубируют в термостате 10 мин при 95°C. На втором этапе освободившиеся от карбонилированных белков магнитные частицы собирают в магнитном штативе. Далее для полученного раствора суммарных модифицированных белков проводят вестерн-блоттинг с антителами к тиоредоксину, что обеспечивает выделение только карбонилированного тиоредоксина и его количественную оценку. Степень окислительного стресса считают высокой при достижении уровня карбонилированного тиоредоксина более 0,52 условных единиц. Изобретение обеспечивает расширение ассортимента маркеров для количественной оценки степени окислительного стресса в биохимической лабораторной диагностике. 1 пр.
Description
Изобретение относится к области медицины, может быть использовано в биохимической лабораторной диагностике.
В настоящее время среди основных направлений исследований особое место занимает изучение патологий, сопровождающихся активацией свободно-радикального окисления, таких как сердечно-сосудистые, нейро-дегенеративные, воспалительные, онкологические заболевания. Активные формы кислорода, гиперпродукция которых регистрируется при окислительном стрессе, наряду с продуктами окислительной модификации липидов, вызывают и окислительную модификацию белков, приводящую к патологическим изменениям их структуры, свойств и функций [Stadtman E.R., Levine R.L. Protein oxidation. // Annals of N.Y. Academy of Sciences, 2000, 899: 191-208]. Окислительная модификация белков в клетках затрагивает аминокислотные остатки, третичную структуру, вызывает агрегацию и денатурацию протеинов, что приводит к нарушению или исчезновению многообразной функциональной активности белков (ферментативной, регуляторной, участие в синтезах ДНК, РНК, транспорте ионов и липидов) при окислительном стрессе. При окислительной модификации белков в них образуются карбонильные группы - альдегидные и кетоновые группы аминокислотных остатков, повышенный уровень которых, наряду с гидроперекисями липидов, является показателем-маркером окислительного стресса [Зенков Н.К., Панкин В.З., Меньшикова Е.Б. Окислительный стресс: биохимический и патофизиологический аспекты // М.: МАИК «Наука/Интерпериодика», 2001, 343 с.; Дубинина Е.Е. Продукты метаболизма кислорода в функциональной активности клеток (жизнь и смерть, созидание и разрушение). Физиологические и клинико-биохимические аспекты // СПб.: Медицинская пресса, 2006, 400 с.].
Согласно современным представлениям окислительной модификации могут подвергаться все остатки аминокислот в белках, но наиболее чувствительными являются остатки триптофана, тирозина, гистидина и цистеина [Дубинина Е.Е. Продукты метаболизма кислорода в функциональной активности клеток (жизнь и смерть, созидание и разрушение). Физиологические и клинико-биохимические аспекты. // СПб.: Медицинская пресса, 2006, 400 с.]. Поскольку тиоредоксин содержит несколько аминокислотных остатков цистеина, он способен подвергаться окислительной модификации с образованием карбонилированных форм белка.
Процессы окислительной модификации белков имеют место при различных свободно-радикальных патологиях. Поскольку тиоредоксин является одним из внутриклеточных антиоксидантов, защищающих клетки от повреждения активными формами кислорода, в то же время выступает коферментом для работы рибонуклеотидредуктазы, необходимой для синтеза ДНК, а следовательно, деления клеток, принимает участие в восстановлении других антиоксидантных молекул, то большой интерес на сегодняшний день представляется определение окислительной модификации тиоредоксина в клетках. Поскольку концентрация тиоредоксина является диагностически значимым маркером состояния антиоксидантной системы клеток в условиях окислительного стресса при различных патологиях, сопровождающихся активацией свободно-радикального окисления [Калинина Е.В., Чернов Н.Н., Саприн А.Н. Участие тио-, перокси- и глутаредоксинов в клеточных редокс-зависимых процессах // Успехи биологической химии, 2008, 48, 319-358.; Shan W., Zhong W., Zhao R., Oberley T.D. Thioredoxin 1 as a subcellular biomarker of redox imbalance in human prostate cancer progression // Free Radic. Biol. Med., 2010, 49 (12), 2078-2087.; Lu J., Holmgren A. The thioredoxin antioxidant system // Free Radic. Biol. Med., 2014, (66), 75-87], то его окислительная модификация еще в большей степени может способствовать развитию и свободно-радикального окисления, нарушению внутриклеточных процессов.
На сегодняшний день исследования и разработки в области рассматриваемой научной проблемы носят приоритетный характер и входят в перечень приоритетных направлений развития науки, технологий и техники Российской Федерации - науки о жизни, относятся к критической технологии Российской Федерации - биомедицинские и ветеринарные технологии и поддержаны грантом президента Российской Федерации для государственной поддержки молодых российских ученых «Карбонилирование редокс-белков как способ управления пролиферацией при персонифицированном подходе к диагностике и терапии опухолей молочной железы» (Договор №14.W01.17.1742-MK от 22.02.17). В рамках указанного научного исследования и на основании имеющегося научного задела проведена разработка заявляемого изобретения.
Известны способы оценки уровня свободно-радикального окисления в биологических жидкостях (патенты RU 2200320 С1 от 10.03.2003, «Способ оценки окислительного стресса в головном мозге при реперфузионном синдроме травматического и нетравматического генеза», RU 2226276 С2 от 27.03.2004 «Способ интегральной оценки окислительного стресса при неотложных состояниях», RU 2140633 С1 от 27.10.1999 «Способ оценки состояния свободно-радикального окисления в ротовой жидкости при воспалительных заболеваниях пародонта»). В этих патентах описано использование хемилюминисценции в крови, показателей свободно-радикальных реакций (диеновых конъюгатов, малонового диальдегида, степени окисленности общих липидов) в сыворотке крови, хемилюминисценции в ротовой жидкости.
Недостатком данных способов оценки уровня свободно-радикального окисления является ограниченная область применения ввиду невозможности их использования для определения степени окислительной модификации белков, являющихся важным компонентом антиоксидантной защиты клеток и играющих ключевую роль в защите от окислительных повреждений.
Новый технический результат - расширение ассортимента маркеров для количественной оценки степени окислительного стресса.
Для достижения нового технического результата в способе оценки степени окислительного стресса по содержанию карбонилированного тиоредоксина в клетках определяют содержание карбонилированного тиоредоксина до и после развития окислительного стресса, для чего на первом этапе проводят инкубацию 0,25 мл лизированных 1% раствором тритона Х-100 клеток с 0,5 мл 10 мМ раствора 2,4-динитрофенилгидразина в 2 М HCl, связывающегося с карбонильными группами белков, инкубируют пробу при комнатной температуре в течение 1 ч, добавляют 0,5 мл 20% ТХУ и центрифугируют при 11000 g 10 минут, осадок промывают 3 раза 1 мл раствора этанол: этилацетат (1:1) для экстракции избытка 2,4-динитрофенилгидразина, не прореагировавшего с карбонильными группами окисленных белков, осадок высушивают и ресуспендируют. Затем клеточный лизат 0,25 мл, содержащий карбонилированные белки, связанные с 2,4-динитрофенилгидразином, инкубируют с 0,5 мл магнитных частиц («Силекс», Россия), нагруженных антителами к 2,4-динитрофенолу («Sigma-Aldrich», США), в течение 3 ч при 25°C и непрерывном перемешивании. Используемое количество магнитных частиц, длительность инкубации и температура нами были определены после серии экспериментов как оптимальные для возможности использования полученных белков для последующей количественной оценки модифицированного белка методом вестерн-блоттинга. Связывание антител с молекулами 2,4-динитрофенилгидразина, соединенных с карбонильными группами белков, является специфичным и обеспечивает присутствие в растворе окисленных модифицированных суммарных белков. Магнитные частицы со связавшимся комплексом антиген-антитело собирают с помощью магнитного штатива и трижды отмывают 0,5 мл 0,01 М натрий-фосфатным буфером, инкубируют в термостате 10 мин при 95°C, после чего перемешивали. Эта процедура необходима для отделения карбонилированных белков от магнитных частиц. На втором этапе, освободившиеся от карбонилированных белков магнитные частицы собирают в магнитном штативе, а белковый надосадок используют для проведения вестерн-блоттинга [Protocol Western Blotting Transfer and Detection Procedure MitoSciences http://www.mitosciences.com/PDF/western.pdf] с антителами к тиоредоксину («Thermo Scientific)), США), обеспечивающими выделение из суммарного количества модифицированных белков только карбонилированный тиоредоксин и количественную его оценку. Содержание модифицированного тиоредоксина выражали в условных единицах. И при достижении уровня карбонилированного тиоредоксина более 0,52 условных единиц степень окислительного стресса считали высокой.
Для исследований использовали культуры клеток эпителия молочной железы линии HBL-100, содержащихся без пероксида водорода и в присутствии 0,3 мМ пероксида водорода, индуцирующего окислительный стресс. Концентрация пероксида водорода была подобрана из диапазона 0,1-1,0 мМ в результате серии экспериментов как наиболее эффективно вызывающих свободно-радикальное окисление с сохранением наибольшего количества жизнеспособных клеток. Проводили 10 раз количественное определение карбонилированного тиоредоксина в клетках линии HBL-100, содержащихся в отсутствии или присутствии пероксида водорода.
Результаты исследования подвергали статистической обработке с использованием пакета программ SPSS vl1.0 с определением медианы (Me), первого и третьего квартилей (Q1-Q3). Достоверность различий независимых выборок оценивали с помощью непараметрических критериев для малых групп Манна-Уитни.
При оценке окислительной модификации тиоредоксина концентрация карбонилированного тиоредоксина в лизатах клеток линии HBL-100, содержащихся в отсутствии пероксида водорода, составило 0,18 (0,09-0,14) условных единиц, в лизированных клетках эпителия молочной железы линии HBL-100, содержащихся в присутствии пероксида водорода, - 0,52 (0,38-0,73) условных единиц. Таким образом, концентрация карбонилированного тиоредоксина в лизатах клеток эпителия молочной железы линии HBL-100, содержащихся в присутствии пероксида водорода, в 2,9 раза (р<0,01) была выше значений показателя в клетках линии HBL-100, содержащихся в отсутствии пероксида водорода.
Полученные результаты объективно отражают высокий уровень окислительного стресса, поскольку степень окислительной модификации тиоредоксина при действии пероксида водорода, показывает интенсивные необратимые повреждения внутриклеточных белков-компонентов антиоксидантной системы клеток, что в дальнейшем приведет к несостоятельности защиты клеток от свободно-радикальных процессов, прогрессированию повреждений внутриклеточных структур и потенциированию патологического процесса, сопровождающегося окислительным стрессом.
Преимуществом данного способа является определение уровня окислительной модификации отдельного белка - тиоредоксина. Кроме того, предлагаемый способ является высокоинформативным и диагностически значимым в отношении свободно-радикального окисления, карбонилирование тиоредоксина усугубляет снижение резерва антиоксидантной защиты, компонентом которой является тиоредоксин, и сопровождается утратой этим белком способности участвовать в антиоксидантной защите клеток от повреждений при окислительном стрессе, что является важным аспектом патогенеза свободно-радикальных патологий.
Существенные признаки, характеризующие изобретение, проявили в заявляемой совокупности новые свойства, явным образом не вытекающие из уровня техники в данной области, и не являются очевидными для специалиста.
Идентичной совокупности признаков не обнаружено при изучении патентной и научно-медицинской литературы.
Данное изобретение может быть использовано в медицинской практике для оценки степени окислительного стресса по содержанию карбонилированного тиоредоксина, ключевого компонента антиоксидантной системы при патологиях сопровождающихся развитием окислительного стресса. Таким образом, следует считать предлагаемое изобретение соответствующим условиям патентоспособности: «новизна», «изобретательский уровень», «промышленная применимость».
Заявляемый способ является информативным и диагностически значимым, так как позволяет количественно оценить степень свободно-радикального окисления по содержанию карбонилированного тиоредоксина - одного из ключевых белков антиоксидантной системы клеток в условиях окислительного стресса.
Предлагаемое изобретение в техническом исполнении достаточно простое и работа осуществляется одним врачом-лаборантом, для его выполнения требуется ограниченный набор недорогостоящего оборудования: камера для вестерн-блоттинга с источником питания, шейкер, термостат и необходимые реактивы. В связи с этим заявляемое изобретение может использоваться в условиях клинических биохимических лабораторий для оценки уровня свободно-радикального окисления в клетках.
Claims (1)
- Способ оценки степени окислительного стресса по содержанию карбонилированного тиоредоксина в клетках до и после развития окислительного стресса, включающий инкубацию 0,25 мл лизированных 1% раствором тритона Х-100 клеток с 0,5 мл 10 мМ раствора 2,4-динитрофенилгидразина в 2 М HCl, связывающегося с карбонильными группами белков, инкубацию пробы при комнатной температуре в течение 1 ч, добавление 0,5 мл 20% ТХУ и центрифугирование при 11000 g 10 минут, промывание осадка 3 раза 1 мл раствора этанол : этилацетат (1:1) для экстракции избытка 2,4-динитрофенилгидразина, не прореагировавшего с карбонильными группами окисленных белков, высушивание осадка и ресуспендирование, отличающийся тем, что клеточный лизат 0,25 мл, содержащий карбонилированные белки, связанные с 2,4-динитрофенилгидразином, инкубируют с 0,5 мл магнитных частиц, нагруженных антителами к 2,4-динитрофенолу, в течение 3 ч при 25°C и непрерывном перемешивании, далее магнитные частицы со связавшимся комплексом антиген-антитело собирают с помощью магнитного штатива и трижды отмывают 0,5 мл 0,01 М натрий-фосфатным буфером, инкубируют в термостате 10 мин при 95°C, после чего перемешивают, далее освободившиеся от карбонилированных белков магнитные частицы собирают в магнитном штативе, а из надосадка, содержащего карбонилированные белки, с помощью вестерн-блоттинга с антителами к тиоредоксину обеспечивали выделение из суммарного количества модифицированных белков только карбонилированный тиоредоксин и количественную оценку его содержания, и при достижении уровня карбонилированного тиоредоксина более 0,52 условных единиц степень окислительного стресса считали высокой.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2017118700A RU2652336C1 (ru) | 2017-05-29 | 2017-05-29 | Способ оценки степени окислительного стресса по содержанию карбонилированного тиоредоксина в клетках |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2017118700A RU2652336C1 (ru) | 2017-05-29 | 2017-05-29 | Способ оценки степени окислительного стресса по содержанию карбонилированного тиоредоксина в клетках |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2652336C1 true RU2652336C1 (ru) | 2018-04-25 |
Family
ID=62045833
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2017118700A RU2652336C1 (ru) | 2017-05-29 | 2017-05-29 | Способ оценки степени окислительного стресса по содержанию карбонилированного тиоредоксина в клетках |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2652336C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2798309C1 (ru) * | 2022-12-29 | 2023-06-21 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Приволжский исследовательский медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ оценки уровня окислительного стресса у пациентов с ожогами |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2200320C1 (ru) * | 2001-07-20 | 2003-03-10 | Садритдинов Марсель Амирович | Способ оценки окислительного стресса в головном мозге при реперфузионном синдроме травматического и нетравматического генеза |
JP2003310621A (ja) * | 2002-04-19 | 2003-11-05 | Nikken Foods Co Ltd | 酸化ストレス特性の診断分析図、これを用いた酸化ストレス特性の診断方法及び機能性食品の評価・開発方法並びに酸化ストレス特性の改善に用いられる機能性食品 |
RU2226276C2 (ru) * | 2002-03-05 | 2004-03-27 | Московский городской научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского | Способ интегральной оценки окислительного стресса при неотложных состояниях |
RU2236008C1 (ru) * | 2003-07-28 | 2004-09-10 | Павлюченко Иван Иванович | Способ диагностики окислительного стресса организма человека |
-
2017
- 2017-05-29 RU RU2017118700A patent/RU2652336C1/ru active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2200320C1 (ru) * | 2001-07-20 | 2003-03-10 | Садритдинов Марсель Амирович | Способ оценки окислительного стресса в головном мозге при реперфузионном синдроме травматического и нетравматического генеза |
RU2226276C2 (ru) * | 2002-03-05 | 2004-03-27 | Московский городской научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского | Способ интегральной оценки окислительного стресса при неотложных состояниях |
JP2003310621A (ja) * | 2002-04-19 | 2003-11-05 | Nikken Foods Co Ltd | 酸化ストレス特性の診断分析図、これを用いた酸化ストレス特性の診断方法及び機能性食品の評価・開発方法並びに酸化ストレス特性の改善に用いられる機能性食品 |
RU2236008C1 (ru) * | 2003-07-28 | 2004-09-10 | Павлюченко Иван Иванович | Способ диагностики окислительного стресса организма человека |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
ARMSTRONG D. Oxidative Stress Biomarkers and Antioxidant Protocols, Methods in molecular biology, Humana Press Inc., 2002, pp. 57-67, найдено в Интернете 23.01.2018 [on-line] на сайте http://imm-project.narod.ru/bible/books/Ox.pdf. * |
NAITO Y. et al. Oxidative Stress Markers, Anti-Aging Medicine 7 (5) : 36-44, 2010, pp. 36-44, найдено в Интернете 23.01.2018 [on-line] на сайте http://anti-aging.gr.jp/english/pdf/2010/oxidative_stress_markers.pdf. * |
КАЛИНИНА Е.В. и др. Участие тио-перовки- и глутаредоксинов в клеточных редокс-зависимых процессах, Успехи биологической химии, 2008, 48, стр. 319-358, найдено в Интернете 29.01.2018 [on-line] на сайте http://www.fbras.ru/wp-content/uploads/2017/10/Kalinina-1.pdf. * |
КАЛИНИНА Е.В. и др. Участие тио-перовки- и глутаредоксинов в клеточных редокс-зависимых процессах, Успехи биологической химии, 2008, 48, стр. 319-358, найдено в Интернете 29.01.2018 [on-line] на сайте http://www.fbras.ru/wp-content/uploads/2017/10/Kalinina-1.pdf. ARMSTRONG D. Oxidative Stress Biomarkers and Antioxidant Protocols, Methods in molecular biology, Humana Press Inc., 2002, pp. 57-67, найдено в Интернете 23.01.2018 [on-line] на сайте http://imm-project.narod.ru/bible/books/Ox.pdf. NAITO Y. et al. Oxidative Stress Markers, Anti-Aging Medicine 7 (5) : 36-44, 2010, pp. 36-44, найдено в Интернете 23.01.2018 [on-line] на сайте http://anti-aging.gr.jp/english/pdf/2010/oxidative_stress_markers.pdf. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2798309C1 (ru) * | 2022-12-29 | 2023-06-21 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Приволжский исследовательский медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ оценки уровня окислительного стресса у пациентов с ожогами |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Neri et al. | Molecular mechanisms contributing to mesenchymal stromal cell aging | |
Somashekar et al. | Comparative sperm protein profiling in bulls differing in fertility and identification of phosphatidylethanolamine‐binding protein 4, a potential fertility marker | |
Mishra et al. | Influence of induced heat stress on HSP70 in buffalo lymphocytes | |
WO2017180909A1 (en) | Sample collection and preservation devices, systems and methods | |
Selvam et al. | The effect of oxidative and reductive stress on semen parameters and functions of physiologically normal human spermatozoa | |
Holtkötter et al. | Forensic differentiation between peripheral and menstrual blood in cases of alleged sexual assault—validating an immunochromatographic multiplex assay for simultaneous detection of human hemoglobin and D-dimer | |
Williamson et al. | Altered nutrient response of mTORC1 as a result of changes in REDD1 expression: effect of obesity vs. REDD1 deficiency | |
Masson et al. | Assessment of metabolic and mitochondrial dynamics in CD4+ and CD8+ T cells in virologically suppressed HIV-positive individuals on combination antiretroviral therapy | |
Watzlawik et al. | Sensitive ELISA-based detection method for the mitophagy marker p-S65-Ub in human cells, autopsy brain, and blood samples | |
Hu et al. | Discovering the secret of diseases by incorporated tear exosomes analysis via rapid-isolation system: iTEARS | |
Lee et al. | CD4+ T Cell–Derived NGAL Modifies the Outcome of Ischemic Acute Kidney Injury | |
Lin et al. | Avian reovirus S1133-induced DNA damage signaling and subsequent apoptosis in cultured cells and in chickens | |
JP6908785B2 (ja) | Gcc2遺伝子又はタンパク質を過発現するエクソソーム基盤肺癌診断又は予後予測用マーカー組成物 | |
Ortega et al. | Patients with incompetent valves in chronic venous insufficiency show increased systematic lipid peroxidation and cellular oxidative stress markers | |
Monnet‐Tschudi et al. | Methods to assess neuroinflammation | |
Ulrich et al. | Uterine smooth muscle S-nitrosylproteome in pregnancy | |
Al-Shobaili et al. | Mitochondrial DNA acquires immunogenicity on exposure to nitrosative stress in patients with vitiligo | |
Neves et al. | Development of an in vitro dendritic cell-based test for skin sensitizer identification | |
Zhang et al. | Exosome-derived galectin-9 may be a novel predictor of rejection and prognosis after liver transplantation | |
Anderson et al. | Whole blood interleukin-2 release test to detect and characterize rare circulating gluten-specific T cell responses in coeliac disease | |
Chen et al. | Cancer-derived small extracellular vesicles PICKER | |
Capelle et al. | Identification of VIMP as a gene inhibiting cytokine production in human CD4+ effector T cells | |
RU2652336C1 (ru) | Способ оценки степени окислительного стресса по содержанию карбонилированного тиоредоксина в клетках | |
Zhou et al. | Saliva biomarkers in oral disease | |
RU2651765C1 (ru) | Способ определения окислительной модификации тиоредоксина |