RU2639557C1 - ШТАММ БАКТЕРИИ Xanthomonas campestris - ПРОДУЦЕНТ КСАНТАНА - Google Patents
ШТАММ БАКТЕРИИ Xanthomonas campestris - ПРОДУЦЕНТ КСАНТАНА Download PDFInfo
- Publication number
- RU2639557C1 RU2639557C1 RU2017133633A RU2017133633A RU2639557C1 RU 2639557 C1 RU2639557 C1 RU 2639557C1 RU 2017133633 A RU2017133633 A RU 2017133633A RU 2017133633 A RU2017133633 A RU 2017133633A RU 2639557 C1 RU2639557 C1 RU 2639557C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- xanthan
- xanthomonas campestris
- strain
- medium
- producer
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/04—Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds
- C12P19/06—Xanthan, i.e. Xanthomonas-type heteropolysaccharides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/64—Xanthomonas
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии. Штамм Xanthomonas campestris 2017, обладающий способностью продуцировать ксантан, депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под регистрационным номером ВКПМ В-12968. Штамм может быть использован в медицине, пищевой, косметической и фармацевтической промышленности. Изобретение позволяет повысить выход ксантана. 1 ил., 6 пр.
Description
Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано в медицине, пищевой, косметической и фармацевтической промышленности.
Ксантан представляет собой экзополисахарид микробного происхождения, полученный при использовании встречающейся в природе бактерии Xanthomonas campestris. Это биополимер, широко используемый в пищевой и фармацевтической отраслях промышленности. Его также используют и во многих других сферах, таких как добыча нефти, чистка линий трубопроводов, добыча нефти вторичными способами, печатание на текстильных материалах и их окрашивание, работа с глазурями, суспензионными взрывчатыми веществами и сфера косметики. Его используют для целей загущения, суспендирования, стабилизации и гелеобразования (RU 2324711, МПК C08L 5/00, опубл. 20.05.2008).
Известен штамм Xanthomonas campestris NRRL В-1459 (ВКПМ В-6720), широко используемый в промышленности в качестве активного продуцента ксантана (RU 2252033, МПК A61K 47/36, C12P 19/06, опубл. 2004; RU 2323005, МПК A61K 47/00, C12P 19/06, опубл. 27.04.2008; RU 2559553, МПК C12N 1/20, C12P 19/06, C12R 1/64, опубл. 10.08.2015).
Известный штамм Xanthomonas campestris NRRL В 1459 (ВКПМ В-6720) согласно паспорту ВКПМ синтезирует ксантан в количестве 6,1 г/л. Недостатком известного штамма является низкая продуктивность.
Технический результат заключается в создании нового мутантного штамма бактерии Xanthomonas campestris, используемого для получения ксантана, обеспечивающего высокий выход полисахарида.
Для достижения указанного технического результата предложено использовать штамм бактерии Xanthomonas campestris 2017 (ВКПМ В-12968) - продуцент ксантана.
Заявляемый штамм получен на основе известного промышленного штамма бактерии Xanthomonas campestris NRRL В 1459 (ВКПМ В-6720) - продуцента ксантана путем многоступенчатой селекции с использованием эффективных методов мутагенеза.
Штамм бактерии Xanthomonas campestris 2017 продуцирует экзополисахарид - ксантан и депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под регистрационным номером штамм Xanthomonas campestris 2017 ВКПМ В-12968.
Штамм бактерии Xanthomonas campestris 2017 идентифицирован по культурально-морфологическим и физиолого-биохимическим свойствам и генетическим характеристикам и имеет следующие признаки.
Культурально-морфологические свойства. Клетки одиночные грамотрицательные подвижные палочки с закругленными концами. Спор не образуют. На агаризованной среде следующего состава (г/л): сахароза - 20,0; дрожжевой экстракт - 10,0; пептон - 10,0; агар - 17,0; вода дистиллированная - 1,0 л, образуют круглые, с ровным краем, однородной маслянистой консистенции, блестящие колонии выпуклой формы желтого цвета.
Физиолого-биохимические свойства. Культура каталазоположительная и оксидазоотрицательная, разжижает желатин, пептонизирует молоко, не восстанавливает нитраты, гидролизует крахмал. Продуцирует кислоту из глюкозы, галактозы, мальтозы, сахарозы, раффинозы. Аэроб. Оптимальная температура роста 28°C. Оптимальное значение рН среды 6,0.
Генетические характеристики. Штамм идентифицирован до вида с помощью анализа 16S РНК. При секвенировании вариабельных участков генов, кодирующих 16S рРНК, получена собранная нуклеотидная последовательность для штамма. Последовательности были выровнены с соответствующими последовательностями ближайших видов бактерий, доступными из базы данных GenBank. По данным анализа генов, кодирующих 16S рРНК, построено филогенетическое дерево Xanthomonas campestris 2017 с гомологичными штаммами, представленное на фигуре. По результатам проведенного анализа секвенсов вариабельных участков генов, кодирующих 16S рРНК, штамм наиболее близок к виду Xanthomonas campestris.
Штамм бактерии Xanthomonas campestris 2017 предназначен для получения ксантана путем глубинного культивирования на ферментационных средах.
При глубинном культивировании штамма бактерии Xanthomonas campestris 2017 в динамических условиях на качалке при 200 об/мин и температуре 28°C на среде следующего состава (г/л): сахароза - 20,0, дрожжевой экстракт - 3,0, K2HPO4 - 2,0, KH2PO4 - 2,0, MgSO4×7H2O - 0,1, количество ксантана, образующегося на третьи сутки, составляет 9,5 г/л. На среде с мелассой образуется 12,2 г/л ксантана. На среде с кукурузным крахмалом - 13,2 г/л ксантана.
При глубинном культивировании штамма бактерии Xanthomonas campestris 2017 в динамических условиях на качалке при 200 об/мин и температуре 28°C на среде следующего состава (г/л): сахароза - 20, MgSO4×7H2O - 0,2, (NH4)2SO4 - 3,0, Н3ВО3 - 0,006, FeCl3 - 0,0024, KH2PO4 - 2,0, CaCO3 - 0,002, ZnO - 0,006, лимонная кислота - 2,0, количество ксантана, образующегося на третьи сутки, составляет 3,6 г/л. На среде с мелассой образуется 9,5 г/л ксантана. На среде с кукурузным крахмалом - 15,6 г/л ксантана.
Изобретение характеризуется следующими примерами.
Пример 1. Штамм бактерии Xanthomonas campestris 2017 культивируют в течение 72 часов в динамических условиях на шейкере-инкубаторе при 200 об/мин и температуре 28°C в колбах на 250 мл, содержащих 50 мл среды следующего состава (г/л): сахароза - 20,0, дрожжевой экстракт - 3,0, K2HPO4 - 2,0, KH2PO4 - 2,0, MgSO4×7H2O - 0,1, рН среды 6,0. Режим стерилизации 121°C в течение 20 минут. Ферментационную питательную среду засевают посевным материалом культуры в количестве 5%, выращенным при 28°C в течение 48 часов. Полученную культуральную жидкость центрифугируют в течение 30 минут при 8000 об/мин 4°C. Для осаждения ксантана в супернатант добавляют этиловый спирт в соотношении 1:2, затем смесь выдерживают в холодильнике при 4°C в течение 24 часов. Далее осажденный ксантан высушивают при 80°C до постоянной массы. Количество ксантана определяют весовым методом. Выход сухого ксантана составляет 9,5 г/л.
Пример 2. Штамм бактерии Xanthomonas campestris 2017 культивируют в течение 72 часов в динамических условиях на шейкере-инкубаторе при 200 об/мин и температуре 28°C в колбах на 250 мл, содержащих 50 мл среды следующего состава (г/л): меласса - 45,0, дрожжевой экстракт - 3,0, K2HPO4 - 2,0, KH2PO4 - 2,0, MgSO4×7H2O - 0,1, рН среды 6,0. Режим стерилизации 121°C в течение 20 минут. Ферментационную питательную среду засевают посевным материалом культуры в количестве 5%, выращенным при 28°C в течение 48 часов. Полученную культуральную жидкость центрифугируют в течение 30 минут при 8000 об/мин 4°C. Для осаждения ксантана в супернатант добавляют этиловый спирт в соотношении 1:2, затем смесь выдерживают в холодильнике при 4°C в течение 24 часов. Далее осажденный ксантан высушивают при 80°C до постоянной массы. Количество ксантана определяют весовым методом. Выход сухого ксантана составляет 12,2 г/л.
Пример 3. Штамм бактерии Xanthomonas campestris 2017 культивируют в течение 72 часов в динамических условиях на шейкере-инкубаторе при 200 об/мин и температуре 28°C в колбах на 250 мл, содержащих 50 мл среды следующего состава (г/л): кукурузный крахмал - 20,0, дрожжевой экстракт - 3,0, K2HPO4 - 2,0, KH2PO4 - 2,0, MgSO4×7H2O - 0,1, рН среды 6,0. Режим стерилизации 121°C в течение 20 минут. Ферментационную питательную среду засевают посевным материалом культуры в количестве 5%, выращенным при 28°C в течение 48 часов. Полученную культуральную жидкость центрифугируют в течение 30 минут при 8000 об/мин 4°C. Для осаждения ксантана в супернатант добавляют этиловый (или изопропиловый) спирт в соотношении 1:2, затем смесь выдерживают в холодильнике при 4°C в течение 24 часов. Далее осажденный ксантан высушивают при 80°C до постоянной массы. Количество ксантана определяют весовым методом. Выход сухого ксантана составил 13,2 г/л.
Пример 4. Штамм бактерии Xanthomonas campestris 2017 культивируют в течение 72 часов в динамических условиях на шейкере-инкубаторе при 200 об/мин и температуре 28°C в колбах на 250 мл, содержащих 50 мл среды следующего состава (г/л): сахароза - 20, MgSO4×7H2O - 0,2, (NH4)2SO4 - 3,0, Н3ВО3 - 0,006, FeCl3 - 0,0024, KH2PO4 - 2,0, CaCO3 - 0,002, ZnO - 0,006, лимонная кислота - 2,0, рН среды 6,0. Режим стерилизации 121°C в течение 20 минут. Ферментационную питательную среду засевают посевным материалом культуры в количестве 5%, выращенным при 28°C в течение 48 часов. Полученную культуральную жидкость центрифугируют в течение 30 минут при 8000 об/мин 4°C. Для осаждения ксантана в супернатант добавляют этиловый спирт в соотношении 1:2, затем смесь выдерживают в холодильнике при 4°C в течение 24 часов. Далее осажденный ксантан высушивают при 80°C до постоянной массы. Количество ксантана определяют весовым методом. Выход сухого ксантана составляет 3,6 г/л.
Пример 5. Штамм бактерии Xanthomonas campestris 2017 культивируют в течение 72 часов в динамических условиях на шейкере-инкубаторе при 200 об/мин и температуре 28°C в колбах на 250 мл, содержащих 50 мл среды следующего состава (г/л): меласса - 45,0, MgSO4×7H2O - 0,2, (NH4)2SO4 - 3,0, Н3ВО3 - 0,006, FeCl3 - 0,0024, KH2PO4 - 2,0, CaCO3 - 0,002, ZnO - 0,006, лимонная кислота - 2,0, рН среды 6,0. Режим стерилизации 121°C в течение 20 минут. Ферментационную питательную среду засевают посевным материалом культуры в количестве 5%, выращенным при 28°C в течение 48 часов. Полученную культуральную жидкость центрифугируют в течение 30 минут при 8000 об/мин 4°C. Для осаждения ксантана в супернатант добавляют этиловый спирт в соотношении 1:2, затем смесь выдерживают в холодильнике при 4°C в течение 24 часов. Далее осажденный ксантан высушивают при 80°C до постоянной массы. Количество ксантана определяют весовым методом. Выход сухого ксантана составляет 9,5 г/л.
Пример 6. Штамм бактерии Xanthomonas campestris 2017 культивируют в течение 72 часов в динамических условиях на шейкере-инкубаторе при 200 об/мин и температуре 28°C в колбах на 250 мл, содержащих 50 мл среды следующего состава (г/л): кукурузный крахмал - 20, MgSO4×7H2O - 0,2, (NH4)2SO4 - 3,0, Н3ВО3 - 0,006, FeCl3 - 0,0024, KH2PO4 - 2,0, CaCO3 - 0,002, ZnO - 0,006, лимонная кислота - 2,0, рН среды 6,0. Режим стерилизации 121°C в течение 20 минут. Ферментационную питательную среду засевают посевным материалом культуры в количестве 5%, выращенным при 28°C в течение 48 часов. Полученную культуральную жидкость центрифугируют в течение 30 минут при 8000 об/мин 4°C. Для осаждения ксантана в супернатант добавляют этиловый спирт в соотношении 1:2, затем смесь выдерживают в холодильнике при 4°C в течение 24 часов. Далее осажденный ксантан высушивают при 80°C до постоянной массы. Количество ксантана определяют весовым методом. Выход сухого ксантана составляет 15,6 г/л.
По сравнению с известным решением предлагаемое обеспечивает высокий выход полисахарида (на среде с мелассой образуется 9,5 г/л ксантана, на среде с кукурузным крахмалом - 15,6 г/л) за счет использования штамма бактерии Xanthomonas campestris 2017 (ВКПМ В-12968)
Claims (1)
- Штамм бактерии Xanthomonas campestris ВКПМ В-12968 - продуцент ксантана.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2017133633A RU2639557C1 (ru) | 2017-09-27 | 2017-09-27 | ШТАММ БАКТЕРИИ Xanthomonas campestris - ПРОДУЦЕНТ КСАНТАНА |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2017133633A RU2639557C1 (ru) | 2017-09-27 | 2017-09-27 | ШТАММ БАКТЕРИИ Xanthomonas campestris - ПРОДУЦЕНТ КСАНТАНА |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2639557C1 true RU2639557C1 (ru) | 2017-12-21 |
Family
ID=63857500
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2017133633A RU2639557C1 (ru) | 2017-09-27 | 2017-09-27 | ШТАММ БАКТЕРИИ Xanthomonas campestris - ПРОДУЦЕНТ КСАНТАНА |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2639557C1 (ru) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2714638C1 (ru) * | 2019-10-09 | 2020-02-18 | Виктор Васильевич Ревин | Штамм бактерии Xanthomonas theicola - продуцент ксантана |
RU2746229C1 (ru) * | 2020-07-24 | 2021-04-09 | Общество с ограниченной ответственностью «Газпромнефть Научно-Технический Центр» (ООО «Газпромнефть НТЦ») | Способ получения ксантановой камеди |
RU2748947C1 (ru) * | 2020-09-15 | 2021-06-02 | Общество С Ограниченной Ответственностью Научно-Технический Центр "Биотех" | Способ получения полисахаридной добавки на основе пищевой ксантановой камеди |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2252033C1 (ru) * | 2004-04-19 | 2005-05-20 | Научно-производственный реабилитационный центр "Ресхил" | Способ получения ксантанового загустителя "сараксан" или "сараксан-т" |
RU2323005C1 (ru) * | 2006-12-12 | 2008-04-27 | ООО "РесурсМетод" | Способ получения ксантанового загустителя "сараксан" или "сараксан-т" |
RU2559553C1 (ru) * | 2014-07-22 | 2015-08-10 | Маргарита Анатольевна Иванова | Способ получения ксантана |
-
2017
- 2017-09-27 RU RU2017133633A patent/RU2639557C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2252033C1 (ru) * | 2004-04-19 | 2005-05-20 | Научно-производственный реабилитационный центр "Ресхил" | Способ получения ксантанового загустителя "сараксан" или "сараксан-т" |
RU2323005C1 (ru) * | 2006-12-12 | 2008-04-27 | ООО "РесурсМетод" | Способ получения ксантанового загустителя "сараксан" или "сараксан-т" |
RU2559553C1 (ru) * | 2014-07-22 | 2015-08-10 | Маргарита Анатольевна Иванова | Способ получения ксантана |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2714638C1 (ru) * | 2019-10-09 | 2020-02-18 | Виктор Васильевич Ревин | Штамм бактерии Xanthomonas theicola - продуцент ксантана |
RU2746229C1 (ru) * | 2020-07-24 | 2021-04-09 | Общество с ограниченной ответственностью «Газпромнефть Научно-Технический Центр» (ООО «Газпромнефть НТЦ») | Способ получения ксантановой камеди |
WO2022019807A1 (ru) * | 2020-07-24 | 2022-01-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Газпромнефть Научно-Технический Центр" (ООО "Газпромнефть НТЦ") | Способ получения ксантановой камеди |
RU2748947C1 (ru) * | 2020-09-15 | 2021-06-02 | Общество С Ограниченной Ответственностью Научно-Технический Центр "Биотех" | Способ получения полисахаридной добавки на основе пищевой ксантановой камеди |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2639557C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИИ Xanthomonas campestris - ПРОДУЦЕНТ КСАНТАНА | |
CN106399199B (zh) | 一种土壤类芽孢杆菌及其应用 | |
RU2464307C1 (ru) | Штамм бактерии cluconacetobacter hansenii gh-1/2008 - продуцент бактериальной целлюлозы | |
CN108048373B (zh) | 一株枯草芽孢杆菌ah1005及其应用 | |
KR101778436B1 (ko) | 우수한 초산 생성능을 가지는 신규한 아세토박터속 slv-7 균주 및 이의 용도 | |
CN1932007A (zh) | γ-聚谷氨酸产生菌及利用该菌株制备γ-聚谷氨酸的方法 | |
CN105670964B (zh) | 萎缩芽孢杆菌BsR05菌株及其应用 | |
WO2021012959A1 (zh) | 一种褐藻胶裂解酶及其应用 | |
RU2714638C1 (ru) | Штамм бактерии Xanthomonas theicola - продуцент ксантана | |
Gomashe et al. | Optimization and production of xanthan gum by Xanthomonas campestris NRRL-B-1449 from sugar beet molasses | |
CN112410261B (zh) | 一株暹罗芽孢杆菌mc2-1及其应用 | |
CN103911315A (zh) | 一株产褐藻胶裂解酶的菌株及其应用 | |
CN111621435B (zh) | 一株粘细菌及其应用 | |
RU2523606C1 (ru) | ШТАММ Gluconacetobacter sucrofermentans -ПРОДУЦЕНТ БАКТЕРИАЛЬНОЙ ЦЕЛЛЮЛОЗЫ | |
CN110964676A (zh) | 一种侧孢短芽孢杆菌的高菌量发酵液的培养方法 | |
Song et al. | Optimal production of exopolysaccharide by Bacillus licheniformis KS-17 isolated from kimchi | |
RU2744107C1 (ru) | Штамм бактерий Xanthomonas fuscans - продуцент ксантановой камеди | |
CN112195137B (zh) | 拮抗稻瘟病菌和产γ-聚谷氨酸的贝莱斯芽孢杆菌及其应用 | |
CN111534471B (zh) | 一种粘细菌培养基及培养方法 | |
JP6611715B2 (ja) | オーランチオキトリウム(Aurantiochytrium)属藻類の低塩分濃度条件順化方法 | |
CN114015612A (zh) | 一株无色素黄单胞菌及其在发酵生产无色素黄原胶中的应用 | |
CN113337403A (zh) | 一种球毛壳菌hjf 13菌株及其应用 | |
RU2748947C1 (ru) | Способ получения полисахаридной добавки на основе пищевой ксантановой камеди | |
RU2675503C1 (ru) | Способ получения биологического препарата для стимуляции роста и защиты растений от заболеваний | |
KR20110107076A (ko) | 엔테로박터 속 sd 255 균주 및 이로부터 세포외다당류를 생산하는 방법 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20190928 |