RU2634247C2 - Способ стимуляции иммунного ответа и препарат для его осуществления - Google Patents
Способ стимуляции иммунного ответа и препарат для его осуществления Download PDFInfo
- Publication number
- RU2634247C2 RU2634247C2 RU2015141211A RU2015141211A RU2634247C2 RU 2634247 C2 RU2634247 C2 RU 2634247C2 RU 2015141211 A RU2015141211 A RU 2015141211A RU 2015141211 A RU2015141211 A RU 2015141211A RU 2634247 C2 RU2634247 C2 RU 2634247C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- acid
- mol
- dimethylaminopropylamide
- minutes
- stirred
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
Abstract
Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для получения препарата для стимуляции иммунного ответа. Препарат включает адъювант и инактивированный антигенный материал, при этом в качестве адъюванта применяют смесь жирной (C12-C22) кислоты и N,N-диметиламинопропиламида жирной (C12-C22) кислоты в мольном соотношении 1:1, и препарат включает следующие компоненты (вес.%): смесь жирной (C12-C22) кислоты и N,N-диметиламинопропиламида жирной (C12-C22) кислоты (в мольном соотношении 1:1) - 0,01-10; водный инактивированный антигенный материал в количестве, достаточном для индукции иммунного ответа - до 100. Группа изобретений включает также способ стимуляции иммунного ответа, включающий введение вышеуказанного препарата. Использование данной группы изобретений позволяет стимулировать иммунный ответ при использовании в качестве адъюванта смесь жирной (C12-C22) кислоты и N,N-диметиламинопропиламида жирной (C12-C22) кислоты. 2 н.п. ф-лы, 6 табл.
Description
Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к способам стимуляции иммунного ответа при вакцинации животных против различных вирусных и бактериальных болезней и препаратам для их осуществления.
Известен способ усиления иммунного ответа и препарат для его осуществления при вакцинации животных, основанный на применении адъюванта НАФ (неполный адъювант Фрейнда, состоящий из 3 частей легкого минерального масла, 1 части безводного ланолина и 1 части 0,15 М фосфатного буфера).
Известен способ усиления иммунного ответа и препарат для его осуществления, основанный на применения адъюванта Montanide ISA70, представляющий собой сочетание минерального масла с ПАВ (поверхностно-активного вещества) (Евстифеев В.В., Нигматуллина Д.И., Хусаинова Ф.М., Барбарова Л.А., «Ветеринарный врач», №1, 2014, с. 38-42).
Недостатком известных способов и адъювантов, как препаратов для осуществления способов, представляющих собой тип «вода в масле», является то, что эффективность применяемых эмульсионных адъювантов определяется следующими свойствами: способностью усиливать иммунный ответ, с одной стороны, и вязкостью - с другой стороны. Способность усиливать иммунный ответ возрастает с увеличением концентрации адъюванта в вакцине, но при этом возрастает и его вязкость, а значит и сложность практического использования, возрастает также и реактогенность препарата.
Цель изобретения - создание нового способа стимуляции иммунного ответа и препарата для его осуществления, лишенного данных недостатков.
Поставленная цель достигается тем, что препарат, применяемый для усиления иммунного ответа, состоит из смеси двух разноименно заряженных поверхностно-активных веществ (ПАВ). В качестве анионоактивного ПАВ используются жирные кислоты С12-С22, а в качестве катионоактивных ПАВ - амиды жирных кислот С12-С22, содержащие третичную аминогруппу. При смешивании двух разноименных ПАВ в мольном соотношении 1:1 антигенным материалом. Микроглобулы данной эмульсии несут на поверхности положительные и отрицательные заряды, что повышает тропность адсорбированного на их поверхности антигена к клеткам иммунной системы и, вследствие этого, усиливает иммунный ответ.
Примеры приготовления амидов жирных кислот
Амиды жирных кислот 1 синтезируются взаимодействием соответствующей жирной кислоты 2 и амина 3 по схеме:
Структурные формулы и молекулярные массы полученных амидов жирных кислот представлены в таблице 1.
Пример 1
3 - Диметиламинопропиламид лауриновой кислоты
Смесь 20,03 г (0,1 моль) лауриновой кислоты и 10,21 г (0,1 моль) амина 3 нагревают при 150-155°С в течение 4 часов с отгонкой легколетучих продуктов, затем при 170-175°С в течение 30 минут также с отгонкой легколетучих продуктов. Охлаждают и полученный продукт 1 очищают колоночной хроматографией на окиси алюминия в хлороформе. Выход 27,59 г (97%). Т.пл. 36-37°С. Спектр (CDCl3) ЯМР 1Н (δ, м.д.): 0.853-0.897 (3Н, триплет); 1.251-1.274 (16Н, мультиплет); 1.568-1.718 (4Н, мультиплет); 2.113-2.164 (2Н, триплет); 2.225 (6Н, синглет); 2.346-2.388 (2Н, триплет); 3.304-3.363 (2Н, квартет); 6. 928 (1Н, синглет). Найдено, %: С 71.30; Н 12.50; N 9.55. Вычислено, %: С 71.77; Н 12.76; N 9.85.
Пример 2
3 - Диметиламинопропиламид миристиновой кислоты
Синтезируют аналогично амиду лауриновой кислоты из 22.83 г (0,1 моль) миристиновой кислоты и 10.12 г (0.1 моль) амина 3. Выход 30.0 г (96%). Т.пл. 50-51°С. Спектр (CDCl3) ЯМР 1Н (δ, м.д.): 0.852-0.897 (2Н, триплет); 1.248-1.273 (20Н, мультиплет); 1.566-1.787 (4Н, мультиплет); 2.112-2.162 (2Н, триплет); 2.223 (6Н, синглет); 2.344-2.387 (2Н, триплет); 3.302-3.361 (2Н, квартет); 6.929 (1Н, синглет). Найдено, %: С 73.40; Н 12.50; N 8.60. Вычислено, %: С 73.02; Н 12.90; N 8.96.
Пример 3
3 - Диметиламинопропиламид пальмитиновой кислоты
Смесь 25.64 г (0.1 моль) пальмитиновой кислоты и 10.21 г (0.1 моль) амина 3 нагревают при 150-155°С в течение 4 часов с отгонкой легколетучих продуктов, затем при 170-175°С в течение 30 минут также с отгонкой легколетучих продуктов. Охлаждают и полученный продукт очищают колоночной хроматографией на окиси алюминия в хлороформе. Выход 33.37 г (98%), т.пл. 59-61°С.
Спектр ЯМР 1Н, CDCl3 (δ, м.д.): 0.854-0.898 (3Н, триплет); 1.248-1.273 (24Н, мультиплет); 1.567-1.681 (4Н, мультиплет); 2.112-2.163 (2Н,триплет); 2.225 (6Н, синглет); 2.346-2.388 (2Н, триплет); 3.304-3.363 (2Н, квартет); 6.927 (1Н, синглет). Найдено, %: С 74.40; Н 12.70; N 8.05. Вычислено, %: С 74.05; Н 13.02; N 8.22.
Пример 4
3 - Диметиламинопропиламид стеариновой кислоты
Синтезируют аналогично амиду пальмитиновой кислоты из 28.44 г (0.1 моль) стеариновой кислоты и 10.21 г (0.1 моль) амина 3. Выход 35.01 г (95%), т.пл. 63-64°С. Спектр ЯМР1 Н, CDCl3 (δ, м.д.): 0.854-0.898 (3Н, триплет); 1.186-1.249 (28Н, мультиплет); 1.568-1.712 (4Н, мультиплет); 2.113-2.164 (2Н, триплет); 2.225 (6Н, синглет); 2.346-2.388 (2Н, триплет); 3.304-3.363 (2Н, квартет); 6.928 (1Н, синглет). Найдено, %: С 74.60; Н 13.20; N 7.63.
Вычислено, %: С 74.93; Н 13.12; N 7.59.
Пример 5
3 - Диметиламинопропиламид олеиновой кислоты
Синтезируют аналогично амиду пальмитиновой кислоты из 28.24 г (0.1 моль) олеиновой кислоты и 10.21 г (0.1 моль) амина 3. Выход 35.19 г (96%), светло-желтое масло. Спектр ЯМР 1Н в CDCl3 (δ, м.д.): 0.854-0.898 (3Н, мультиплет); 1.264-1.299 (20Н, мультиплет); 1.572-1.681 (4Н, мультиплет); 1.994-2.053 (4Н, мультиплет); 2.112-2.163 (2Н, триплет); 2.225 (6Н, синглет); 2.347-2.389 (2Н, триплет); 3.304-3.363 (2Н, квартет; 5.320-5.357 (2Н, квартет); 6.928 (1Н, синглет). Найдено, %: С 75.00; Н 12.20; N 7.20. Вычислено, %: С 75.35; Н 12.64; N 7.64.
Пример 6
3 - Диметиламинопропиламид арахиновой кислоты
Готовят аналогично амиду стеариновой кислоты из 3,12 г арахиновой кислоты и 1,02 г 3-диметиламинопропиламина. Выход 96%. Воскообразная масса без четкой температуры плавления. Найдено, %: С 75,2; Н 13,00; N 7,22. Вычислено, %: С 75,69; Н 13,21; N 7,06.
Пример 7
3 - Диметиламинопропиламид бегеновой кислоты готовят аналогично амиду стеариновой кислоты из 3,40 г бегеновой кислоты и 1,02 3-димтиламинопропиламина. Выход 98%. Воскообразная масса без четкой температуры плавления. Найдено, %: С 76,00; Н 12,90; N 6,70. Вычислено,%: С 76,35; Н 13,29; N6,60.
Примеры приготовления стимуляторов иммунитета (адъювантов).
Пример 1. К 28,5 г N,N-диметиламинопропиламида лауриновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 20,0 г (0,1 моль) лауриновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 2. К 28,5 г N,N-диметиламинопропиламида лауриновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 22,8 г (0,1 моль) миристиновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 3. К 28,5 г N,N-диметиламинопропиламида лауриновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 25,6 г (0,1 моль) пальмитиновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 4. К 28,5 г N,N-диметиламинопропиламида лауриновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 28,5 г (0,1 моль) стеариновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 5. К 28,5 г N,N-диметиламинопропиламида лауриновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 28,2 г (0,1 моль) олеиновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 6. К 28,5 г N,N-диметиламинопропиламида лауриновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 31,3 г (0,1 моль) арахиновой (эйкозановой) кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 7. К 28,5 г N,N-диметиламинопропиламида лауриновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 34,1 г (0,1 моль) бегеновой (докозановой) кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 8. К 31,3 г 1 N,N-диметиламинопропиламида миристиновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 22,8 г (0,1 моль) миристиновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 9. К 31,3 г N,N-диметиламинопропиламида миристиновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 20,0 г (0,1 моль) лауриновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 10. К 31,3 г N,N-диметиламинопропиламида миристиновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 25,6 г (0,1 моль) пальмитиновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 11. К 31,3 г N,N-диметиламинопропиламида миристиновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 28,5 г (0,1 моль) стеариновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 12. К 31,3 г 1 N,N-диметиламинопропиламида миристиновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 28,2 г (0,1 моль) олеиновой кислоты (0,1 моль) и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 13. К 31,3 г N,N-диметиламинопропиламида миристиновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 31,3 г (0,1 моль) арахиновой (эйкозановой) кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 14. К 31,3 г N,N-диметиламинопропиламида миристиновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 34,1 г (0,1 моль) бегеновой (докозановой) кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 15. К 34,1 г N,N-диметиламинопропиламида пальмитиновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 25,6 г (0,1 моль) пальмитиновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 16. К 34,1 г N,N-диметиламинопропиламида пальмитиновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 20,0 г (0,1 моль) лауриновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 17. К 34,1 г N,N-диметиламинопропиламида пальмитиновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 22,8 г (0,1 моль) миристиновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 18. К 34,1 г N,N-диметиламинопропиламида пальмитиновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 28,5 г (0,1 моль) стеариновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 19. К 34,1 г N,N-диметиламинопропиламида пальмитиновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 28,2 г (0,1 моль) олеиновой кислоты (0,1 моль) и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 20. К 34,1 г 1 N,N-диметиламинопропиламида пальмитиновой кислоты
(0,1 моль) прибавляют в один прием 31,3. г (0,1 моль) арахиновой (эйкозановой) кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 21. К 34,1 г N,N-диметиламинопропиламида пальмитиновой кислоты
(0,1 моль) прибавляют в один прием 34,1 г (0,1 моль) бегеновой (докозановой) кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 22. К 36,9 г N,N-диметиламинопропиламида стеариновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 28,5 г (0,1 моль) стеариновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 23. К 36,9 г N,N-диметиламинопропиламида стеариновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 20,0 г (0,1 моль) лауриновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 24. К 36,9 г N,N-диметиламинопропиламида стеариновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 22,8 г (0,1 моль) миристиновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 25. К 36,9 г N,N-диметиламинопропиламида стеариновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 25,6 г (0,1 моль) пальмитиновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 26. К 36,9 г N,N-диметиламинопропиламида стеариновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 28,2 г (0,1 моль) олеиновой кислоты (0,1 моль) и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 27. К 36,9 г N,N-диметиламинопропиламида стеариновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 31,3 г (0,1 моль) арахиновой (эйкозановой) кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 28. К 36,9 г N,N-диметиламинопропиламида стеариновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 34,1 г (0,1 моль) бегеновой (докозановой) кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 29. К 36,6 г (0,1 моль) N,N-диметиламинопропиламида олеиновой кислоты прибавляют в один прием 28,2 г (0,1 моль) олеиновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут (условное название «стимулятор №1»).
Пример 30. К 36,6 г (0,1 моль) N,N-диметиламинопропиламида олеиновой кислоты прибавляют в один прием 20,0 г (0,1 моль) лауриновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 31. К 36,6 г (0,1 моль) N,N-диметиламинопропиламида олеиновой кислоты прибавляют в один прием 22,8 г (0,1 моль) миристиновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 32. К 36,6 г (0,1 моль) 1 N,N-диметиламинопропиламида олеиновой кислоты прибавляют в один прием 25,6 г (0,1 моль) пальмитиновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 33. К 36,6 г (0,1 моль) N,N-диметиламинопропиламида олеиновой кислоты прибавляют в один прием 28,4 г стеариновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут (условное название «стимулятор №2»).
Пример 34. К 36,6 г N,N-диметиламинопропиламида олеиновой кислоты прибавляют в один прием 31,3. г (0,1 моль) арахиновой (эйкозановой) кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 35. К 36,6 г N,N-диметиламинопропиламида олеиновой кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 34,1 г (0,1 моль) бегеновой (докозановой) кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 36. К 39,7 г N,N-диметиламинопропиламида арахиновой (эйкозановой) кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 31,3. г (0,1 моль) арахиновой (эйкозановой) кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 37. К 39,7 г N,N-диметиламинопропиламида арахиновой (эйкозановой) кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 20,0 г (0,1 моль) лауриновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 38. К 39,7 г N,N-диметиламинопропиламида арахиновой (эйкозановой) кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 22,8 г (0,1 моль) миристиновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 39. К 39,7 г N,N-диметиламинопропиламида арахиновой (эйкозановой) кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 25,6 г (0,1 моль) пальмитиновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 40. К 39,7 г N,N-диметиламинопропиламида арахиновой (эйкозановой) кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 28,5 г (0,1 моль) стеариновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 41. К 39,7 г N,N-диметиламинопропиламида арахиновой (эйкозановой) кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 28,2 г (0,1 моль) олеиновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 42. К 39,7 г 1 N,N-диметиламинопропиламида арахиновой (эйкозановой) кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 34,1 г (0,1 моль) бегеновой (докозановой) кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 43. К 42,5 г N,N-диметиламинопропиламида бегеновой (докозановой) кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 34,1 г (0,1 моль) бегеновой (докозановой) кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 44. К 42,5 г N,N-диметиламинопропиламида бегеновой (докозановой) кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 20,0 г (0,1 моль) лауриновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 45. К 42,5 г N,N-диметиламинопропиламида бегеновой (докозановой) кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 22,8 г (0,1 моль) миристиновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 46. К 42,5 г N,N-диметиламинопропиламида бегеновой (докозановой) кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 25,6 г (0,1 моль) пальмитиновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 47. К 42,5 г N,N-диметиламинопропиламида бегеновой (докозановой) кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 28,5 г (0,1 моль) стеариновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 48. К 42,5 г N,N-диметиламинопропиламида бегеновой (докозановой) кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 28,2 г (0,1 моль) олеиновой кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Пример 49. К 42,5 г N,N-диметиламинопропиламида бегеновой (докозановой) кислоты (0,1 моль) прибавляют в один прием 31,3. г (0,1 моль) арахиновой (эйкозановой) кислоты и перемешивают при температуре 40-45°С в течение 15 минут.
Примеры приготовления иммунизирующих составов (вакцины)
Пример 1. К 10 мл хламидиозного антигена прибавляют 50 мг олеината N,N-диметиламинопропиламида олеиновой кислоты (стимулятор №1) и интенсивно встряхивают в течение 1 минуты. В полученной композиции концентрация иммуностимулятора составляет 0,5%.
Пример 2. К 10 мл хламидиозного антигена прибавляют 50 мг стеарата N,N-диметиламинопропиламида олеиновой кислоты (стимулятор №2), предварительно нагретого до 45°С для придания жидкой консистенции. Полученную композицию встряхивают в течение 1 минуты. Концентрация иммуностимулятора в полученном образце составляет 0,5%.
Примеры осуществления способа стимуляции иммунного ответа
Пример 1. Осуществление способа стимуляции иммунного ответа на хламидиозный антиген при иммунизации морских свинок.
Для осуществления способа в качестве антигена была использована суспензия клеток фибробластов эмбрионов кур (ФЭК), инфицированных хламидиями штамма Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ «В-75» №18 и суспензия клеток ФЭК, инфицированных хламидиями штамма Chlamydia psittaci (var. suis) ВГНКИ «SR» №14 с титром не ниже 10-7 ТЦД50/мл в обоих случаях, т.е. в количестве достаточном для индукии иммунного ответа. В обоих образцах в качестве инактиватора использовался фенол 0,3-0,5 мас.%, а в качестве адъюванта - предлагаемый нами препарат с условным названием «стимулятор №1» и «стимулятор №2». На 50 мг стимулятора брали 10 мл водной суспензии антигенного материала. В качестве контроля использовалась вакцина культуральная инактивированная против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота (патент №2233174) и вакцина культуральная инактивированная против хламидиоза свиней (патент №2233670). Состав этих вакцин совпадает с составом опытных вакцин в части антигенов и инактиватора по наименованию и количеству, но в качестве адъюванта использован поливинилпирролидон 0,4-0,6 мас.%. Для испытания иммуногенности вакцины вводились морским свинкам массой 300-400 г по 0,3 см3 подкожно, двукратно через 3-5 дней. Напряженность иммунитета оценивалась в реакции связывания комплемента (РСК) с сыворотками крови иммунизированных свинок, взятой на 19-21 день после последнего введения. Результаты представлены в таблицах 2 и 3.
Из данных таблиц видно, что все образцы вакцин с предлагаемыми нами препаратами в качестве адъюванта вызывали существенно более высокий иммунный ответ по сравнению с контролем, где в качестве адъюванта использовался поливинилпирролидон.
Пример 2. Осуществление способа стимуляции иммунного ответа на хламидиозный антиген при иммунизации кроликов.
Для осуществления способа в качестве антигена была использована суспензия клеток фибробластов эмбрионов кур (ФЭК), инфицированных хламидиями штамма Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ «В-75» №18 и суспензия клеток ФЭК, инфицированных хламидиями штамма Chlamydia psittaci (var. suis) ВГНКИ «SR» №14 с тиром не ниже 10-7 ТЦД50/мл в обоих случаях, т.е. в количестве достаточном для индукции иммунного ответа. В обоих образцах в качестве инактиватора использовался фенол 0,3-0,5 мас.%, а в качестве адъюванта - предлагаемый нами препарат с условным названием «стимулятор №1» и «стимулятор №2». На 50 мг стимулятора брали 10 мл водной суспензии антигенного материала. Концентрация стимуляторов в вакцинирующих составах указана в таблицах. В качестве контроля использовалась вакцина культуральная инактивированная против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота (патент №2233174) и вакцина культуральная инактивированная против хламидиоза свиней (патент №2233670). Состав контрольных вакцин совпадает с составом опытных вакцин в части антигенов и инактиватора по наименованию и количеству, но в качестве адъюванта использован поливинилпирролидон 0,4-0,6 мас.%. Для испытания иммуногенности вакцины вводились кроликам массой 2-3 кг по 1 см3 подкожно, двукратно через 3-5 дней. Напряженность иммунитета оценивалась в реакции связывания комплемента (РСК) с сыворотками крови иммунизированных свинок, взятой на 19-21 день после последнего введения. Результаты представлены в таблицах 4 и 5.
Из данных таблиц видно, что все образцы вакцин с предлагаемыми нами препаратами в качестве адъюванта вызывали существенно более высокий иммунитет по сравнению с контролем, где в качестве адъюванта использовался поливинилпирролидон.
В серии опытов мы установили возможные пределы соотношения между антигенным материалом и иммуностимулятором, представляющим собой смесь жирной кислоты (С12-С22) и диметиламинопропиламида жирной кислоты (С12-С22) (в мольном соотношении 1:1). Результаты в таблице 6. Экспериментально установлено, что если количество стимулятора составляет менее 0,01 вес.%, то стимулирующий эффект не проявляется (титры антител в опытной и контрольной группах идентичны или ниже контроля). При содержании иммуностимулятора более 10 вес.% образуется смесь, обладающая высокой вязкостью, что препятствует ее введению.
Антигенный материал для осуществления предлагаемого способа берется в количестве, достаточном для индукции иммунного ответа.
Claims (4)
1. Препарат для стимуляции иммунного ответа, включающий адъювант и инактивированный антигенный материал, отличающийся тем, что в качестве адъюванта применяют смесь жирной (C12-C22) кислоты и N,N-диметиламинопропиламида жирной (C12-C22) кислоты в мольном соотношении 1:1, и препарат включает следующие компоненты (вес.%):
- смесь жирной (C12-C22) кислоты и N,N-диметиламинопропиламида жирной (C12-C22) кислоты (в мольном соотношении 1:1) - 0,01-10;
- водный инактивированный антигенный материал в количестве, достаточном для индукции иммунного ответа - до 100.
2. Способ стимуляции иммунного ответа, включающий введение препарата по п. 1.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015141211A RU2634247C2 (ru) | 2015-09-28 | 2015-09-28 | Способ стимуляции иммунного ответа и препарат для его осуществления |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015141211A RU2634247C2 (ru) | 2015-09-28 | 2015-09-28 | Способ стимуляции иммунного ответа и препарат для его осуществления |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2015141211A RU2015141211A (ru) | 2017-04-03 |
| RU2634247C2 true RU2634247C2 (ru) | 2017-10-24 |
Family
ID=58505787
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015141211A RU2634247C2 (ru) | 2015-09-28 | 2015-09-28 | Способ стимуляции иммунного ответа и препарат для его осуществления |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2634247C2 (ru) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014095943A1 (en) * | 2012-12-17 | 2014-06-26 | Eurocine Vaccines Ab | Vaccine composition for naive subjects |
| RU2526166C1 (ru) * | 2013-07-16 | 2014-08-20 | Государственное научное учреждение Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт (ГНУ СКЗНИВИ) Российской академии сельскохозяйственных наук | Способ лечения кокцидиоза птицы |
| RU2541389C1 (ru) * | 2013-07-16 | 2015-02-10 | Государственное научное учреждение Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт (ГНУ СКЗНИВИ) Российской академии сельскохозяйственных наук | Способ стимуляции роста птицы |
| EA021741B1 (ru) * | 2009-05-08 | 2015-08-31 | Псиоксус Терапьютикс Лимитед | Мультивалентная адъювантная конструкция |
-
2015
- 2015-09-28 RU RU2015141211A patent/RU2634247C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EA021741B1 (ru) * | 2009-05-08 | 2015-08-31 | Псиоксус Терапьютикс Лимитед | Мультивалентная адъювантная конструкция |
| WO2014095943A1 (en) * | 2012-12-17 | 2014-06-26 | Eurocine Vaccines Ab | Vaccine composition for naive subjects |
| RU2526166C1 (ru) * | 2013-07-16 | 2014-08-20 | Государственное научное учреждение Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт (ГНУ СКЗНИВИ) Российской академии сельскохозяйственных наук | Способ лечения кокцидиоза птицы |
| RU2541389C1 (ru) * | 2013-07-16 | 2015-02-10 | Государственное научное учреждение Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт (ГНУ СКЗНИВИ) Российской академии сельскохозяйственных наук | Способ стимуляции роста птицы |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| БОДРЯКОВА М.А. и др. Определение антибактериальной активности новых веществ из ряда амидов жирных кислот // Ветеринарная патология, 2014, N1, стр.55-58. АВДЕЕВА Ж.И. и др. Вацины с адъювантами. Доклинические исследования // Биопрепараты, 2015, N1 (53), стр. 15-20. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2015141211A (ru) | 2017-04-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Roozbehani et al. | Characterization of a multi-epitope peptide with selective MHC-binding capabilities encapsulated in PLGA nanoparticles as a novel vaccine candidate against Toxoplasma gondii infection | |
| JPS6310736A (ja) | 免疫学的アジュバント | |
| Henle et al. | Effect of Adjuvants on Vaccination of Human Beings Against Influenza. | |
| US6528058B1 (en) | Saponin adjuvant composition | |
| Blom et al. | Sucrose fatty acid sulphate esters as novel vaccine adjuvants: effect of the chemical composition | |
| US3632741A (en) | Diethylaminoethyl dextran as an adjuvant for vaccines for active immunization | |
| RU2634247C2 (ru) | Способ стимуляции иммунного ответа и препарат для его осуществления | |
| JP4842430B2 (ja) | 新規ワクチン組成物及び界面活性剤の免疫用アジュバントとしての使用 | |
| JP2016216471A (ja) | 三糖誘導体及びアジュバントとしてのその使用 | |
| EP2514438B1 (en) | ADJUVANT CONTAINING ß-HEMATIN | |
| US20230102247A1 (en) | Methods and compositions relating to ionic liquid adjuvants | |
| RU2587323C1 (ru) | Способ получения гипериммунной сыворотки против парагриппа-3 крупного рогатого скота | |
| RU2813771C1 (ru) | Способ профилактики эшерихиоза у телят | |
| RU1615918C (ru) | Адъювант | |
| RU2712750C1 (ru) | Амилоидный конъюгат, его применения и способы | |
| US11000579B2 (en) | Recombinant Eimeria maxima protein delivered as nanoparticles | |
| WO2023240278A2 (en) | Uses of glycolipids as a vaccine adjuvant and methods thereof | |
| RU2021817C1 (ru) | Способ получения вакцины против холеры | |
| BR102018073308A2 (pt) | Emulsificação de alfa toxina inativada de c. novyi formulado em emulsão água-óleo (w/o) 40/60 aplicável para fabricação de vacinas de múltiplos antígenos contra clostridioses | |
| RAWAT et al. | Immunomodulation of water-in-oil-in-water (w/o/w) emulsion vaccines of killed Pasteurella multocida (P52) whole cells grown under iron-regulated conditions | |
| EP3536338A1 (en) | Use of a growth hormone secretagogue peptide as a vaccine adjuvant | |
| CN115594770A (zh) | 一种针对人TNFα分子的类风湿关节炎治疗性疫苗的构建 | |
| US20020048587A1 (en) | Sugar ethers as adjuvants in immunization compositions | |
| NZ744411B2 (en) | Amyloid conjugate and uses and methods thereof | |
| EP3439690A2 (en) | Heartworm vaccine, methods and uses thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180106 |