RU2624059C2 - Штамм Cobetia marina ARC 11 ВКПМ В-12350 - деструктор нефти и нефтепродуктов - Google Patents

Штамм Cobetia marina ARC 11 ВКПМ В-12350 - деструктор нефти и нефтепродуктов Download PDF

Info

Publication number
RU2624059C2
RU2624059C2 RU2015152283A RU2015152283A RU2624059C2 RU 2624059 C2 RU2624059 C2 RU 2624059C2 RU 2015152283 A RU2015152283 A RU 2015152283A RU 2015152283 A RU2015152283 A RU 2015152283A RU 2624059 C2 RU2624059 C2 RU 2624059C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
oil
strain
arc
vkpm
cobetia marina
Prior art date
Application number
RU2015152283A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2015152283A (ru
Inventor
Андрей Иннокентьевич Шестаков
Илья Николаевич Сережкин
Яна Александровна Ламова
Маргарита Константиновна Князюк
Виктория Николаевна Федоренко
Николай Вячеславович Шабалин
Оксана Олеговна Шестакова
Татьяна Ивановна Митрофанова
Артем Игоревич Исаченко
Original Assignee
Общество С Ограниченной Ответственностью "Арктический Научно-Проектный Центр Шельфовых Разработок"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество С Ограниченной Ответственностью "Арктический Научно-Проектный Центр Шельфовых Разработок" filed Critical Общество С Ограниченной Ответственностью "Арктический Научно-Проектный Центр Шельфовых Разработок"
Priority to RU2015152283A priority Critical patent/RU2624059C2/ru
Publication of RU2015152283A publication Critical patent/RU2015152283A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2624059C2 publication Critical patent/RU2624059C2/ru

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C02TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02FTREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F3/00Biological treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F3/34Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205Bacterial isolates
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Hydrology & Water Resources (AREA)
  • Environmental & Geological Engineering (AREA)
  • Water Supply & Treatment (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Magnetic Resonance Imaging Apparatus (AREA)
  • Lubricants (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области биотехнологии. Штамм Cobetia marina ARC 11 обладает нефтеокисляющей способностью. Штамм Cobetia marina депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под регистрационным номером ВКПМ В-12350. Штамм может быть использован для очистки акваторий водоемов, береговой линии, загрязненных нефтью и нефтепродуктами, при температуре от +4 до +20°С и солености 30 г/л. Изобретение позволяет повысить степень деструкции нефти в водоемах с повышенной соленостью при широких диапазонах температур. 3 пр.

Description

Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к области биотехнологии, микробиологии, экологии, охране окружающей среды и представляет собой новый бактериальный штамм Cobetia marina ARC 11 ВКПМ В-12350, обладающий способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов. Штамм может быть использован для очистки акваторий водоемов, береговой линии, загрязненных нефтью и нефтепродуктами, при температуре от +4 до +20°С и солености 30 г/л.
Уровень техники
Известен штамм Rhodococcus sp. - деструктор нефтяных углеводородов (патент РФ №2518349, приоритет 11.04.2013, опубл. 10.06.2014). Данный штамм показал высокую степень деструкции углеводородов при температуре +30°С. Однако данный штамм не способен производить утилизацию углеводородов при низких температурах.
Известен штамм Pseudomonas alcaligenes В-1 (патент РФ 2133770, приоритет 25.03.1998, опубл. 27.07.1999). Недостатком данного штамма также является то, что он не утилизирует нефтезагрязнения при низких температурах.
Известен штамм Exiguobacterium mexicanum ВКПМ В-11011 (патент РФ №2523584, приоритет 2013-03-27, опубл. 20.07.2014). Штамм может быть использован для очистки почв и водоемов, загрязненных нефтью и нефтепродуктами, в широком диапазоне температур от +4 до +37°С. Недостатком штамма является то, что он не способен утилизировать нефтезагрязнения при высокой солености воды до 30 г/л.
Наиболее близким аналогом является штамм Rhodococcus erythropolis, депонирован под регистрационным номером ВКМ Ac-2613D (патент РФ 2553336, 20.08.2013, опубл. 10.06.2015). Штамм используется для очистки пресноводных, солоноватоводных и морских объектов и донных отложений. Микроорганизм обеспечивает деструкцию нефти в водных объектах при температуре от +2 до +25°C и солености до 2,7%. Недостатком изобретения является то, что штамм утилизирует углеводороды в условиях, богатых по питательным веществам (в состав среды входит пептон 5 г/л и сахароза 15 г/л). В реальных условиях утилизации углеводородных загрязнений количество питательных веществ значительно снижено.
Раскрытие изобретения
Задачей настоящего изобретения является получение бактериального штамма, способного осуществлять деструкцию нефти и нефтепродуктов при температуре от +4 до +20°С и солености 30 г/л.
Поставленная задача решается тем, что получен штамм Cobetia marina ARC 11 ВКПМ В-12350, способный осуществлять деструкцию нефти и нефтепродуктов, который может быть использован для очистки акваторий водоемов, береговой линии, загрязненных нефтью и нефтепродуктами, при температуре от +4 до +20°С и солености 30 г/л.
Штамм выделен из портовой зоны города Мурманск 3 июня 2014 года. Штамм депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов ФГУП ГосНИИгенетика (ВКПМ, Москва, 1-й Дорожный пр., д.1) под регистрационным номером ARC 11 ВКПМ В-12350.
Идентификация штамма была осуществлена на основании изучения его культурально-морфологических и физиолого-биохимических характеристик, а также на основании изучения последовательности гена 16S рРНК.
Полученный штамм характеризуется следующими признаками.
Культурально-морфологические признаки
Колонии светло-желтые, округлые, блестящие, гладкие, выпуклые, с ровным краем, однородной структуры, мягкой консистенции, слизистые, размеры до 2,5 мм. Клетки подвижные, короткие палочки. Окраска по Граму отрицательная.
Физиолого-биохимические признаки
Штамм растет при температуре от +4 до +20°С, в аэробных условиях. Оптимум роста от +4 до +10°С. Растет при рН 4,0-8,0. Растет на плотных и жидких питательных средах с содержанием NaCl 30 г/л. Способен расти в жидкой среде с углеводородами в качестве единственного источника углерода и энергии.
Штамм поддерживается пересевами 1 раз в 14 дней на плотной питательной среде modPCA следующего состава (г/л): K2НРO4 - 1,5; KН2РO4 - 0,75; MgSO4 - 1,0; (NH4)2SO4 - 4,0; NaCl - 30; гидролизат казеина - 5,0; дрожжевой экстракт - 2,5; D-глюкоза - 1,0; агар -14; pH 7,0 или жидкой питательной среде №1 следующего состава (г/л): K2НРO4 - 1,5; KН2РO4 - 0,75; MgSO4 - 1,0; (NH4)2SO4 - 4,0; NaCl - 30; гидролизат казеина - 0,5; дрожжевой экстракт - 0,1; рН 7,0. В жидкой питательной среде в качестве углеводородного субстрата использовали смесь товарной нефти Возейского месторождения (плотность 37,9° API, сернистость 0,66%, характеризуется как тяжелая, вязкая, с высоким содержанием смол и асфальтенов) и дизельного топлива в соотношении 1:1 по объему.
Также штамм может храниться при +6±2°С в лиофилизированном состоянии с использованием сухого обезжиренного молока в качестве защитной среды.
Осуществление изобретения
Пример 1. Выделение и культивирование Cobetia marina ARC 11 ВКПМ В-12350
Штамм выделен из образцов грунта береговой линии порта города Мурманск 3 июня 2014 года. Образец грунта массой 5±2 г вносили в 100 мл питательной среды №1. Культивирование проводили при температуре +4°С, на орбитальном шейкере (130 об/мин). Время культивирования 7 суток. Полученную накопительную культуру вносили в количестве 10 мл в 100 мл питательной среды №1. Было проведено не менее 30 пассажей накопительной культуры. Выделение штамма из накопительной культуры проводили на среде modPCA, полученную чистую культуру далее культивировали на среде №1.
Пример 2. Исследование нефтеокисляющей активности Cobetia marina ARC 11 ВКПМ В-12350
Штамм, выращенный на жидкой питательной среде №1, вносили в качестве инокулята в 100 мл питательной среды №1. В качестве контроля была использована питательная среда без добавления культуры. После проведения культивирования при температуре +4°C, 130 об/мин в течение 7 суток проводилась экстракция углеводородов гексаном согласно ГОСТ 31953-2012, хроматографическая оценка убыли углеводородов проводилась на приборе DSA 100
Figure 00000001
, оснащенном микрокапиллярной колонкой DB-1ms, газ-носитель - гелий, расход газа - 39 мл/мин, детектор - ПИД, температура детектора - 320°С. Измерения проводили в условиях температурного градиента в термостате от 60 до 320°С. Результаты анализа были обработаны при помощи программного обеспечения OpenLAB CDS (Agilent).
Суммарная убыль для среднекипящей и высококипящей фракции составляла не менее 50% за 7 суток культивирования при температуре +4°С и солености среды 30 г/л.
Пример 3. Способ производства препарата на основе Cobetia marina ARC 11 ВКПМ В-12350
Штамм Cobetia marina ARC 11 ВКПМ В-12350, выращенный на среде РСА при температуре +4°С в течение 7 суток, вносят в жидкую питательную среду следующего состава (г/л): K2НРO4 - 1,5; KН2РO4 - 0,75; MgSO4 - 1,0; (NH4)2SO4 - 4,0; NaCl - 30; гидролизат казеина -5,0; дрожжевой экстракт - 2,5; D-глюкоза - 1,0; рН 7,0. Далее культивируют при температуре +10°С на орбитальном шейкере в течение 3 суток до конечного титра 109 КОЕ/мл. В полученную суспензию клеток в питательной среде вносят защитную среду (сухое обезжиренное молоко в количестве 10%). Далее полученную жидкую биомассу замораживают и обезвоживают методом лиофилизации. Полученную сухую биомассу штамма Cobetia marina ARC 11 ВКПМ В-12350 смешивают с питательным премиксом (сухое обезжиренное молоко) в соотношении 1:10.
Таким образом, получен штамм, способный осуществлять деструкцию нефти и нефтепродуктов при температуре +4°С и солености 30 г/л.

Claims (1)

  1. Штамм Cobetia marina ARC 11 ВКПМ В-12350 для деструкции нефти и нефтепродуктов в водной среде при температуре от +4 до +20°С и солености 30 г/л.
RU2015152283A 2015-12-07 2015-12-07 Штамм Cobetia marina ARC 11 ВКПМ В-12350 - деструктор нефти и нефтепродуктов RU2624059C2 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015152283A RU2624059C2 (ru) 2015-12-07 2015-12-07 Штамм Cobetia marina ARC 11 ВКПМ В-12350 - деструктор нефти и нефтепродуктов

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015152283A RU2624059C2 (ru) 2015-12-07 2015-12-07 Штамм Cobetia marina ARC 11 ВКПМ В-12350 - деструктор нефти и нефтепродуктов

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2015152283A RU2015152283A (ru) 2017-06-13
RU2624059C2 true RU2624059C2 (ru) 2017-06-30

Family

ID=59067953

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2015152283A RU2624059C2 (ru) 2015-12-07 2015-12-07 Штамм Cobetia marina ARC 11 ВКПМ В-12350 - деструктор нефти и нефтепродуктов

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2624059C2 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2697380C1 (ru) * 2018-11-15 2019-08-13 Общество С Ограниченной Ответственностью "Арктический Научно-Проектный Центр Шельфовых Разработок" Штамм Pseudoalteromonas nigrifaciens для деструкции нефти и нефтепродуктов

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2133770C1 (ru) * 1998-03-25 1999-07-27 Государственный научный центр прикладной микробиологии Штамм бактерий pseudomonas alcaligenes b-1, используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов
WO2012164508A1 (es) * 2011-05-31 2012-12-06 Universidad De Valparaiso Cepa de cobetia marina y extracto biosurfactante obtenido a partir de ella
RU2518349C1 (ru) * 2013-04-11 2014-06-10 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Кубанский государственный университет" (ФГБОУ ВПО "КубГТУ") ШТАММ Rhodococcus sp.-ДЕСТРУКТОР НЕФТЯНЫХ УГЛЕВОДОРОДОВ
RU2523584C1 (ru) * 2013-03-27 2014-07-20 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт проблем нефти и газа Сибирского отделения Российской академии наук ШТАММ БАКТЕРИЙ Exiguobacterium mexicanum - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ
RU2553338C2 (ru) * 2013-08-20 2015-06-10 Открытое акционерное общество "Нефтяная компания "ЛУКОЙЛ" ШТАММ Pseudomonas azotoformans ДЛЯ ОЧИСТКИ МОРСКИХ ВОДОЕМОВ И ПРИБРЕЖНОЙ ЗОНЫ МОРСКИХ ОБЪЕКТОВ ОТ НЕФТИ В УСЛОВИЯХ ВЫСОКИХ ШИРОТ
RU2553336C2 (ru) * 2013-08-20 2015-06-10 Открытое акционерное общество "Нефтяная компания "ЛУКОЙЛ" ШТАММ Rhodococcus erythropolis ДЛЯ ОЧИСТКИ СОЛОНОВАТОВОДНЫХ И МОРСКИХ ЭКОСИСТЕМ ОТ НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2133770C1 (ru) * 1998-03-25 1999-07-27 Государственный научный центр прикладной микробиологии Штамм бактерий pseudomonas alcaligenes b-1, используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов
WO2012164508A1 (es) * 2011-05-31 2012-12-06 Universidad De Valparaiso Cepa de cobetia marina y extracto biosurfactante obtenido a partir de ella
RU2523584C1 (ru) * 2013-03-27 2014-07-20 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт проблем нефти и газа Сибирского отделения Российской академии наук ШТАММ БАКТЕРИЙ Exiguobacterium mexicanum - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ
RU2518349C1 (ru) * 2013-04-11 2014-06-10 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Кубанский государственный университет" (ФГБОУ ВПО "КубГТУ") ШТАММ Rhodococcus sp.-ДЕСТРУКТОР НЕФТЯНЫХ УГЛЕВОДОРОДОВ
RU2553338C2 (ru) * 2013-08-20 2015-06-10 Открытое акционерное общество "Нефтяная компания "ЛУКОЙЛ" ШТАММ Pseudomonas azotoformans ДЛЯ ОЧИСТКИ МОРСКИХ ВОДОЕМОВ И ПРИБРЕЖНОЙ ЗОНЫ МОРСКИХ ОБЪЕКТОВ ОТ НЕФТИ В УСЛОВИЯХ ВЫСОКИХ ШИРОТ
RU2553336C2 (ru) * 2013-08-20 2015-06-10 Открытое акционерное общество "Нефтяная компания "ЛУКОЙЛ" ШТАММ Rhodococcus erythropolis ДЛЯ ОЧИСТКИ СОЛОНОВАТОВОДНЫХ И МОРСКИХ ЭКОСИСТЕМ ОТ НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2697380C1 (ru) * 2018-11-15 2019-08-13 Общество С Ограниченной Ответственностью "Арктический Научно-Проектный Центр Шельфовых Разработок" Штамм Pseudoalteromonas nigrifaciens для деструкции нефти и нефтепродуктов

Also Published As

Publication number Publication date
RU2015152283A (ru) 2017-06-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2624067C2 (ru) Штамм Nocardia coeliaca ARC12 ВКПМ Ас-1990 - деструктор нефти и нефтепродуктов
RU2624055C2 (ru) Штамм Psychrobacter fozii ARC 5 ВКПМ В-12345 - деструктор нефти и нефтепродуктов
RU2624065C1 (ru) Штамм Psychrobacter cibarius ARC 13 ВКПМ В-12351 - деструктор нефти и нефтепродуктов
RU2624053C2 (ru) Штамм Psychrobacter maritimus ARC 7 ВКПМ В-12347 - деструктор нефти и нефтепродуктов
RU2484130C1 (ru) ШТАММ БАКТЕРИЙ Pseudomonas panipatensis ВКПМ В-10593 - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ
CN110551662B (zh) 节杆菌菌株zj-h及其应用
RU2624054C2 (ru) Штамм Leucobacter aridicollis ARC 6 ВКПМ Ас-1992 деструктор нефти и нефтепродуктов
RU2624052C2 (ru) Штамм Arthrobacter rhombi ARC 8 ВКПМ Ас-1987 - деструктор нефти и нефтепродуктов
RU2699977C1 (ru) ШТАММ Psychrobacter cibarius ARC 35 ВКПМ В-13081 ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ
RU2694610C1 (ru) ШТАММ Pseudomonas extremaustralis ARC 38 ВКПМ В-13084 - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ
RU2624059C2 (ru) Штамм Cobetia marina ARC 11 ВКПМ В-12350 - деструктор нефти и нефтепродуктов
CN104711205A (zh) 一种降解石油类污染物的生物方法
RU2624058C2 (ru) Штамм Nocardia coeliaca ARC 1 ВКПМ Ас-1991 - деструктор нефти и нефтепродуктов
RU2624051C2 (ru) Штамм Psychrobacter cibarius ARC 9 ВКПМ В-12348 - деструктор нефти и нефтепродуктов
RU2691689C1 (ru) ШТАММ Yarrowia lipolytica -ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ
RU2624050C2 (ru) Штамм Cobetia marina ARC 10 ВКПМ В-12349 - деструктор нефти и нефтепродуктов
RU2624063C1 (ru) Штамм Arthrobacter rhombi ARC 16 ВКПМ Ас-1988 - деструктор нефти и нефтепродуктов
RU2624056C2 (ru) Штамм Halomonas boliviensis ARC 3 ВКПМ В-12344 - деструктор нефти и нефтепродуктов
RU2624061C1 (ru) Штамм Arthrobacter rhombi ARC 15 ВКПМ Ас-1989 деструктор нефти и нефтепродуктов
RU2624069C1 (ru) Штамм Salinibacterium amurskyense ARC 14 ВКПМ Ас-1993 - деструктор нефти и нефтепродуктов
RU2299101C1 (ru) Биопрепарат для очистки почвы от нефти и нефтепродуктов
RU2699990C1 (ru) ШТАММ Arthrobacter psychrochitiniphilus ARC 42 ВКПМ Ас-2076 - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ
RU2700078C1 (ru) Штамм Yarrowia lipolytica ARC 49 ВКПМ Y-4348 деструктор нефти и нефтепродуктов
RU2699962C1 (ru) ШТАММ Psychrobacter cryohalolentis ARC 36 ВКПМ В-13082 - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ
RU2699987C1 (ru) ШТАММ Pseudoalteromonas prydzensis ARC 46 ВКПМ В-13104 - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ