RU2624061C1 - Штамм Arthrobacter rhombi ARC 15 ВКПМ Ас-1989 деструктор нефти и нефтепродуктов - Google Patents
Штамм Arthrobacter rhombi ARC 15 ВКПМ Ас-1989 деструктор нефти и нефтепродуктов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2624061C1 RU2624061C1 RU2016110704A RU2016110704A RU2624061C1 RU 2624061 C1 RU2624061 C1 RU 2624061C1 RU 2016110704 A RU2016110704 A RU 2016110704A RU 2016110704 A RU2016110704 A RU 2016110704A RU 2624061 C1 RU2624061 C1 RU 2624061C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- oil
- strain
- vkpm
- oil products
- salinity
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B09—DISPOSAL OF SOLID WASTE; RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
- B09C—RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
- B09C1/00—Reclamation of contaminated soil
- B09C1/10—Reclamation of contaminated soil microbiologically, biologically or by using enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
- C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/06—Arthrobacter
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Environmental & Geological Engineering (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Hydrology & Water Resources (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Soil Sciences (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии, микробиологии, экологии, охране окружающей среды. Штамм бактерий Arthrobacter rhombi ARC 15 обладает способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов. Штамм Arthrobacter rhombi депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под регистрационным номером ВКПМ Ас-1989. Штамм может быть использован для очистки акваторий водоемов, береговой линии, загрязненных нефтью и нефтепродуктами, при температуре от +4 до +20°C и солености 30 г/л. Изобретение позволяет повысить эффективность очистки акваторий водоемов, береговой линии от нефти и нефтепродуктов при температуре от +4 до +20°C и солености 30 г/л. 3 пр.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к области биотехнологии, микробиологии, экологии, охране окружающей среды и представляет собой новый бактериальный штамм Arthrobacter rhombi ARC 15 ВКПМ Ас-1989, обладающий способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов. Штамм может быть использован для очистки акваторий водоемов, береговой линии, загрязненных нефтью и нефтепродуктами, при температуре от +4 до +20°C и солености 30 г/л.
Уровень техники
Из уровня техники известен штамм Rhodococcus sp. - деструктор нефтяных углеводородов (патент РФ №2518349, приоритет 11.04.2013, опубл. 10.06.2014). Данный штамм показал высокую степень деструкции углеводородов при температуре +30°C. Однако данный штамм не способен производить утилизацию углеводородов при низких температурах.
Известен штамм Pseudomonas alcaligenes В-1, способный утилизировать нефть, мазут, керосин, нафталин, пентадекан, тетрадекан, гексадецен, фенилдекан, пристан уже на 5 день при 20-30°C. Штамм эффективно осуществляет биодеградацию углеводородов в широком диапазоне концентраций (патент РФ 2133770, приоритет 25.03.1998, опубл. 27.07.1999). Недостатком данного штамма также является то, что он не утилизирует нефтезагрязнения при низких температурах.
Известен штамм Exiguobacterium mexicanum ВКПМ В-11011, обладающий способностью быстро утилизировать нефть, дизельное топливо, масло моторное, газовый конденсат и используемый для очистки почв и водоемов, загрязненных нефтью и нефтепродуктами, в широком диапазоне температур от +4 до +37°C (патент РФ №2523584, приоритет 2013-03-27, опубл. 20.07.2014). Недостатком штамма является то, что он не способен утилизировать нефтезагрязнения при высокой солености воды до 30 г/л.
Наиболее близким аналогом является штамм Rhodococcus erythropolis, депонирован под регистрационным номером ВКМ Ac-2613D, применяемый для очистки пресноводных, солоноватоводных и морских объектов и донных отложений и обеспечивающий деструкцию нефти в водных объектах при температуре от +2 до +25°C и солености до 2,7% (патент РФ 2553336, 20.08.2013, опубл. 10.06.2015). Недостатком изобретения является то, что штамм утилизирует углеводороды в условиях, богатых по питательным веществам (в состав среды входит пептон 5 г/л и сахароза 15 г/л). В реальных условиях утилизации углеводородных загрязнений количество питательных веществ значительно снижены.
Раскрытие изобретения
Задачей настоящего изобретения является получение бактериального штамма, способного осуществлять деструкцию нефти и нефтепродуктов при температуре от +4 до +20°C и солености 30 г/л.
Поставленная задача решается тем, что получен штамм Arthrobacter rhombi ARC 15 ВКПМ Ас-1989, способный осуществлять деструкцию нефти и нефтепродуктов в водной среде, который может быть использован для очистки акваторий водоемов, береговой линии, загрязненных нефтью и нефтепродуктами, при температуре от +4 до +20°C и солености 30 г/л.
Штамм выделен из портовой зоны города Мурманск 3 июня 2014 года. Штамм депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов ФГУП ГосНИИгенетика (ВКПМ, Москва, 1-й Дорожный пр., д.1) под регистрационным номером ВКПМ АС-1989.
Идентификация штамма была осуществлена на основании изучения его культурально-морфологических и физиолого-биохимических характеристик, а также на основании изучения последовательности гена 16S рРНК.
Полученный штамм характеризуется следующими признаками.
Культурально-морфологические признаки
Колонии ярко-оранжевые, округлые, блестящие, гладкие, выпуклые, с ровным краем, однородной структуры, мягкой консистенции. Размеры колонии до 1,2-1,5 мм. Мелкие подвижные палочки, размер 0,8-1,2×1,0-2,5 мкм. Окраска по Граму положительная.
Физиолого-биохимические признаки
Штамм растет при температуре от +4 до +20°C, в аэробных условиях. Оптимум роста от +4 до +10°C. Растет при рН 4,0-8,0. Растет на плотных и жидких питательных средах с содержанием NaCl 30 г/л. Способен расти в жидкой среде с углеводородами в качестве единственного источника углерода и энергии.
Штамм поддерживается пересевами 1 раз в 14 дней на плотной питательной среде modPCA следующего состава (г/л): K2HPO4 - 1,5; KH2PO4 - 0,75; MgSO4 - 1,0; (NH4)2SO4 - 4,0; NaCl - 30; гидролизат казеина - 5,0; дрожжевой экстракт - 2,5; D-глюкоза - 1,0; агар - 14; рН 7,0 или жидкой питательной среде №1 следующего состава (г/л): K2HPO4 - 1,5; KH2PO4 - 0,75; MgSO4 - 1,0; (NH4)2SO4 - 4,0; NaCl - 30; гидролизат казеина - 0,5; дрожжевой экстракт - 0,1; рН 7,0. В жидкой питательной среде в качестве углеводородного субстрата использовали смесь товарной нефти Возейского месторождения (плотность 37,9°API, сернистость 0,66%, характеризуется как тяжелая, вязкая, с высоким содержанием смол и асфальтенов) и дизельного топлива в соотношении 1:1 по объему.
Также штамм может храниться при +6±2°C в лиофилизированном состоянии с использованием сухого обезжиренного молока в качестве защитной среды.
Осуществление изобретения
Пример 1. Выделение и культивирование штамма Arthrobacter rhombi ARC 15 ВКПМ Ас-1989
Штамм выделен из образцов грунта береговой линии порта города Мурманск 3 июня 2014 года. Образец грунта массой 5±2 г вносили в 100 мл питательной среды №1. Культивирование проводили при температуре +4°C, на орбитальном шейкере (130 об/мин). Время культивирования 7 суток. Полученную накопительную культуру вносили в количестве 10 мл в 100 мл питательной среды №1. Было проведено не менее 30 пассажей накопительной культуры. Выделение штамма из накопительной культуры проводили на среде modPCA, полученную чистую культуру далее культивировали на среде №1.
Пример 2. Исследование нефтеокисляющей активности штамма Arthrobacter rhombi ARC 15 ВКПМ Ас-1989
Штамм, выращенный на жидкой питательной среде №1, вносили в качестве инокулята в 100 мл питательной среды №1. В качестве контроля была использована питательная среда без добавления культуры. После проведения культивирования при температуре +4°C, 130 об/мин в течение 7 суток проводилась экстракция углеводородов гексаном согласно ГОСТ 31953-2012, хроматографическая оценка убыли углеводородов проводилась на приборе DSA 100 , оснащенном микрокапиллярной колонкой DB-1ms, газ-носитель - гелий, расход газа - 39 мл/мин, детектор - ПИД, температура детектора - 320°C. Измерения проводили в условиях температурного градиента в термостате от 60 до 320°C. Результаты анализа были обработаны при помощи программного обеспечения OpenLAB CDS (Agilent).
Суммарная убыль для среднекипящей и высококипящей фракции составляла не менее 50% за 7 суток культивирования при температуре +4°C и солености среды 30 г/л.
Пример 3. Способ производства препарата на основе штамма Arthrobacter rhombi ARC 15 ВКПМ Ас-1989
Штамм Arthrobacter rhombi ARC 15 ВКПМ Ас-1989, выращенный на среде PCA при температуре +4°C в течение 7 суток, вносят в жидкую питательную среду следующего состава (г/л) (г/л): K2HPO4 - 1,5; KH2PO4 - 0,75; MgSO4 - 1,0; (NH4)2SO4 - 4,0; NaCl - 30; гидролизат казеина - 5,0; дрожжевой экстракт - 2,5; D-глюкоза - 1,0; рН 7,0. Далее культивируют при температуре +10°C на орбитальном шейкере в течение 3 суток до конечного титра 109 КОЕ/мл. В полученную суспензию клеток в питательной среде вносят защитную среду (сухое обезжиренное молоко в количестве 10%). Далее полученную жидкую биомассу замораживают и обезвоживают методом лиофилизации. Полученную сухую биомассу штамма Arthrobacter rhombi ARC 15 ВКПМ Ас-1989 смешивают с питательным премиксом (сухое обезжиренное молоко) в соотношении 1:10.
Таким образом, получен штамм, способный осуществлять деструкцию нефти и нефтепродуктов при температуре от +4°C до +20°C и солености 30 г/л, способного расти в среде с углеводородами в качестве единственного источника углерода и энергии.
Claims (1)
- Штамм Arthrobacter rhombi ARC 15 ВКПМ Ac-1989 для деструкции нефти и нефтепродуктов в водной среде при температуре от +4 до +20°С и солености 30 г/л.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016110704A RU2624061C1 (ru) | 2016-03-23 | 2016-03-23 | Штамм Arthrobacter rhombi ARC 15 ВКПМ Ас-1989 деструктор нефти и нефтепродуктов |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016110704A RU2624061C1 (ru) | 2016-03-23 | 2016-03-23 | Штамм Arthrobacter rhombi ARC 15 ВКПМ Ас-1989 деструктор нефти и нефтепродуктов |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2624061C1 true RU2624061C1 (ru) | 2017-06-30 |
Family
ID=59312315
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2016110704A RU2624061C1 (ru) | 2016-03-23 | 2016-03-23 | Штамм Arthrobacter rhombi ARC 15 ВКПМ Ас-1989 деструктор нефти и нефтепродуктов |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2624061C1 (ru) |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2133770C1 (ru) * | 1998-03-25 | 1999-07-27 | Государственный научный центр прикладной микробиологии | Штамм бактерий pseudomonas alcaligenes b-1, используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов |
RU2142997C1 (ru) * | 1999-06-17 | 1999-12-20 | Научно-техническое объединение "ИТИН" Инженерной академии РФ | Штамм arthrobacter sp. для разложения сырой нефти и нефтепродуктов |
RU2299101C1 (ru) * | 2005-11-15 | 2007-05-20 | ОАО "Биохиммаш" | Биопрепарат для очистки почвы от нефти и нефтепродуктов |
RU2523584C1 (ru) * | 2013-03-27 | 2014-07-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт проблем нефти и газа Сибирского отделения Российской академии наук | ШТАММ БАКТЕРИЙ Exiguobacterium mexicanum - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ |
RU2553336C2 (ru) * | 2013-08-20 | 2015-06-10 | Открытое акционерное общество "Нефтяная компания "ЛУКОЙЛ" | ШТАММ Rhodococcus erythropolis ДЛЯ ОЧИСТКИ СОЛОНОВАТОВОДНЫХ И МОРСКИХ ЭКОСИСТЕМ ОТ НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ |
-
2016
- 2016-03-23 RU RU2016110704A patent/RU2624061C1/ru active
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2133770C1 (ru) * | 1998-03-25 | 1999-07-27 | Государственный научный центр прикладной микробиологии | Штамм бактерий pseudomonas alcaligenes b-1, используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов |
RU2142997C1 (ru) * | 1999-06-17 | 1999-12-20 | Научно-техническое объединение "ИТИН" Инженерной академии РФ | Штамм arthrobacter sp. для разложения сырой нефти и нефтепродуктов |
RU2299101C1 (ru) * | 2005-11-15 | 2007-05-20 | ОАО "Биохиммаш" | Биопрепарат для очистки почвы от нефти и нефтепродуктов |
RU2523584C1 (ru) * | 2013-03-27 | 2014-07-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт проблем нефти и газа Сибирского отделения Российской академии наук | ШТАММ БАКТЕРИЙ Exiguobacterium mexicanum - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ |
RU2553336C2 (ru) * | 2013-08-20 | 2015-06-10 | Открытое акционерное общество "Нефтяная компания "ЛУКОЙЛ" | ШТАММ Rhodococcus erythropolis ДЛЯ ОЧИСТКИ СОЛОНОВАТОВОДНЫХ И МОРСКИХ ЭКОСИСТЕМ ОТ НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
REDDY G.S.N., et.al., Arthrobacter flavus sp. nov. a psychrophilic bacterium isolated from a pond in McMurbo dry Valley, Antarctica, International journal of systematic and evolutionary microbiology, 2000, 50, p. 1553-1531. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2624067C2 (ru) | Штамм Nocardia coeliaca ARC12 ВКПМ Ас-1990 - деструктор нефти и нефтепродуктов | |
CN102994428B (zh) | 一株海洋产表面活性剂菌株lhod-1及其应用 | |
RU2624065C1 (ru) | Штамм Psychrobacter cibarius ARC 13 ВКПМ В-12351 - деструктор нефти и нефтепродуктов | |
RU2624055C2 (ru) | Штамм Psychrobacter fozii ARC 5 ВКПМ В-12345 - деструктор нефти и нефтепродуктов | |
RU2624053C2 (ru) | Штамм Psychrobacter maritimus ARC 7 ВКПМ В-12347 - деструктор нефти и нефтепродуктов | |
RU2699977C1 (ru) | ШТАММ Psychrobacter cibarius ARC 35 ВКПМ В-13081 ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ | |
RU2694610C1 (ru) | ШТАММ Pseudomonas extremaustralis ARC 38 ВКПМ В-13084 - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ | |
RU2624052C2 (ru) | Штамм Arthrobacter rhombi ARC 8 ВКПМ Ас-1987 - деструктор нефти и нефтепродуктов | |
RU2624054C2 (ru) | Штамм Leucobacter aridicollis ARC 6 ВКПМ Ас-1992 деструктор нефти и нефтепродуктов | |
CN104711205A (zh) | 一种降解石油类污染物的生物方法 | |
RU2624059C2 (ru) | Штамм Cobetia marina ARC 11 ВКПМ В-12350 - деструктор нефти и нефтепродуктов | |
RU2624058C2 (ru) | Штамм Nocardia coeliaca ARC 1 ВКПМ Ас-1991 - деструктор нефти и нефтепродуктов | |
RU2624051C2 (ru) | Штамм Psychrobacter cibarius ARC 9 ВКПМ В-12348 - деструктор нефти и нефтепродуктов | |
RU2691689C1 (ru) | ШТАММ Yarrowia lipolytica -ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ | |
RU2624061C1 (ru) | Штамм Arthrobacter rhombi ARC 15 ВКПМ Ас-1989 деструктор нефти и нефтепродуктов | |
RU2624063C1 (ru) | Штамм Arthrobacter rhombi ARC 16 ВКПМ Ас-1988 - деструктор нефти и нефтепродуктов | |
RU2624069C1 (ru) | Штамм Salinibacterium amurskyense ARC 14 ВКПМ Ас-1993 - деструктор нефти и нефтепродуктов | |
RU2624050C2 (ru) | Штамм Cobetia marina ARC 10 ВКПМ В-12349 - деструктор нефти и нефтепродуктов | |
RU2624056C2 (ru) | Штамм Halomonas boliviensis ARC 3 ВКПМ В-12344 - деструктор нефти и нефтепродуктов | |
RU2299101C1 (ru) | Биопрепарат для очистки почвы от нефти и нефтепродуктов | |
RU2699990C1 (ru) | ШТАММ Arthrobacter psychrochitiniphilus ARC 42 ВКПМ Ас-2076 - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ | |
RU2700078C1 (ru) | Штамм Yarrowia lipolytica ARC 49 ВКПМ Y-4348 деструктор нефти и нефтепродуктов | |
RU2694199C1 (ru) | ШТАММ Paeniglutamicibacter antarcticus ARC 43 ВКПМ Ас-2077 - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ | |
RU2699962C1 (ru) | ШТАММ Psychrobacter cryohalolentis ARC 36 ВКПМ В-13082 - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ | |
RU2699988C1 (ru) | ШТАММ Marinomonas rhizoma ARC 45 ВКПМ В-13091 - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ |