RU2622746C2 - Method for hyperimmune serum preparation for farm animals necrobacillosis treatment and prevention - Google Patents

Method for hyperimmune serum preparation for farm animals necrobacillosis treatment and prevention Download PDF

Info

Publication number
RU2622746C2
RU2622746C2 RU2015147811A RU2015147811A RU2622746C2 RU 2622746 C2 RU2622746 C2 RU 2622746C2 RU 2015147811 A RU2015147811 A RU 2015147811A RU 2015147811 A RU2015147811 A RU 2015147811A RU 2622746 C2 RU2622746 C2 RU 2622746C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
antigen
taken
viev
fusobacterium necrophorum
inguinal lymph
Prior art date
Application number
RU2015147811A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2015147811A (en
Inventor
Анатолий Яковлевич Самуйленко
Николай Васильевич Мельник
Светлана Анатольевна Гринь
Роман Николаевич Мельник
Евгений Владимирович Сусский
Артур Яшарович Дадасян
Артур Викторович Беленко
Сергей Николаевич Ярцев
Original Assignee
Федеральное казенное предприятие "Армавирская биологическая фабрика" (ФКП "Армавирская биофабрика")
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности" (ФГБНУ ВНИТИБП)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное казенное предприятие "Армавирская биологическая фабрика" (ФКП "Армавирская биофабрика"), Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности" (ФГБНУ ВНИТИБП) filed Critical Федеральное казенное предприятие "Армавирская биологическая фабрика" (ФКП "Армавирская биофабрика")
Priority to RU2015147811A priority Critical patent/RU2622746C2/en
Publication of RU2015147811A publication Critical patent/RU2015147811A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2622746C2 publication Critical patent/RU2622746C2/en

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02Bacterial antigens
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

FIELD: biotechnology.
SUBSTANCE: method involves hyperimmunization of producer-oxen with a formalin-inactivated antigen isolated from the Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV production strain. The antigen is obtained by cultivation of the Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV production strain. Further, the culture liquid is subjected to ultrafiltration with a pore size of 13-20 kDa, 8-10% of Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV strain bacterial mass is added to the ultrafiltrate to Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV content of 1.5-2.0 billion of cells in 1 cm3, sodium salt of succinate chitosan is added at a final weight concentration of 0.5-1.5%. Inactivation is perfomed using with formalin, taken at a final concentration of 0.3-0.4% for 12-14 days at 37-38°C. Then, the resulting antigen is sorbed on 10-15% aluminium hydroxide in a glycol buffer with pH of 8.4-8.6, taken at a final concentration of 1.8-2.0%. Hyperimmunization of producer-oxen is first carried out with a vaccine to prevent farm animals necrobacteriosis at a dose of 0.4-0.6 ml/animal, then 4-5 weeks later - with the antigen obtained by the method described above at the rate of 1.5-2.0 ml of antigen per 100 kg of animal body weight, at first once, intradermically to the pre-laryngeal inguinal lymph node, together with the oil adjuvant, taken at a weight ratio of 1:0.8-1.0 to the antigen. Then twice with an interval of 5-7 days 0.5-0.6 ml of antigen per 100 kg of animal body weight is injected intradermally, first to the right pre-lobular and left inguinal lymph nodes, then to the left progloidal and right inguinal lymph nodes.
EFFECT: method allows to obtain high quality serum foranimals necrobacillosis prevention and treatment.
4 ex

Description

Изобретение относится к ветеринарной биотехнологии и микробиологии, в частности к получению сыворотки для профилактики и лечения некробактериоза животных.The invention relates to veterinary biotechnology and microbiology, in particular to the production of serum for the prevention and treatment of animal necrobacteriosis.

Некробактериоз широко распространен во всех странах мира и характеризируется гнойно-некротическим распадом кожи, слизистых оболочек, паренхиматозных органов и конечностей. В процессе переболевания некробактериозом животные теряют 30-40% живой массы тела и до одной тонны молока. Особенно большой экономический ущерб наносит некробактериоз северному оленеводству, где в год заболевает до 50-70 тыс оленей, при этом погибает, как правило, 30-35% животных.Necrobacteriosis is widespread in all countries of the world and is characterized by purulent-necrotic decay of the skin, mucous membranes, parenchymal organs and limbs. In the process of recovering from necrobacteriosis, animals lose 30-40% of live body weight and up to one ton of milk. Especially great economic damage is caused by necrobacillosis of reindeer herding, where up to 50-70 thousand deer get sick annually, and as a rule, 30-35% of animals die.

Известен препарат для лечения некробактериоза, содержащий сульфадиметоксин, хинозол, фурацилин, диметилсульфоксид, ацетон, глицерин, твин 40 или 80 и спирт этиловый (патент RU 1524224, опубл. 27.08.1995, А61K 31/00). Однако известный препарат не дает полного лечебного эффекта, имеет узкий спектр действия и сравнительно длительные сроки лечения.Known drug for the treatment of necrobacteriosis, containing sulfadimethoxine, chinosol, furatsilin, dimethyl sulfoxide, acetone, glycerin, tween 40 or 80 and ethyl alcohol (patent RU 1524224, publ. 27.08.1995, A61K 31/00). However, the well-known drug does not give a full therapeutic effect, has a narrow spectrum of action and a relatively long duration of treatment.

Известен также препарат для профилактики некробактериоза сельскохозяйственных животных, содержащий антибиотик окситетрациклин, активированный иммуностимулятором (патент RU 2112546, опубл. 10.06.98). Однако этот препарат не всегда надежно защищает животных от заболевания.Also known is a drug for the prevention of necrobacteriosis of farm animals, containing the antibiotic oxytetracycline activated by an immunostimulant (patent RU 2112546, publ. 10.06.98). However, this drug does not always protect animals from disease.

Наиболее близким аналогом является способ получения гипериммунной сыворотки для лечения и профилактики некробактериоза сельскохозяйственных животных путем гипериммуннизации волов-продуцентов инактивированным формалином антигеном, выделенным из производственного штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ (патент RU 2329828, опубл. 27.07.2008, МПК А61K 39/02).The closest analogue is the method of obtaining hyperimmune serum for the treatment and prevention of necrobacteriosis of farm animals by hyperimmunization of oxen-producers with inactivated formalin antigen isolated from the production strain Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV (patent RU 2329828, publ. 07.27.2008, IPC A61K 39 39 / 02).

Однако известная сыворотка недостаточна эффективна и требует двукратного введения.However, the known serum is insufficiently effective and requires a double administration.

Задачей изобретения является повышение эффективности целевого продукта.The objective of the invention is to increase the efficiency of the target product.

Технический результат изобретения достигается в способе получения гипериммунной сыворотки для лечения и профилактики некробактериоза сельскохозяйственных животных путем гипериммуннизации волов-продуцентов инактивированным формалином антигеном, выделенным из производственного штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ, тем, что антиген получают культивированием производственного штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ, далее культуральную жидкость подвергают ультрафильтрации с размером пор 13-20 кДа, к ультрафильтрату добавляют 8-10% бактериальной массы штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ до содержания Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ 1,5-2,0 млрд клеток в 1 см3, добавляют натриевую соль сукцината хитозана, взятую в конечной весовой концентрации 0,5-1,5%, проводят инактивацию формалином, взятым в конечной концентрации 0,3-0,4%, в течение 12-14 суток при 37-38°С, затем полученный антиген сорбируют на 10-15% гидроокиси алюминия в гликолевом буфере с рН 8,4-8,6, взятой в конечной концентрации 1,8-2,0%, а гипериммунизацию волов-продуцентов проводят вначале вакциной для профилактики некробактериоза сельскохозяйственных животных в дозе 0,4-0,6 мл/животное, затем через 4-5 недель антигеном, полученным способом, описанным выше, из расчета 1,5-2,0 мл антигена на 100 кг веса тела животного вначале однократно внутрикожно в предлопаточный паховый лимфоузел совместно с масляным адъювантом, взятым в весовом соотношении к антигену как 1:0,8-1,0, затем дважды с интервалом 5-7 дней внутрикожно вводят 0,5-0,6 мл антигена на 100 кг веса тела животного вначале в правый предлопаточный и левый паховый лимфоузлы, затем - в левый предлопаточный и правый паховый лимфоузлы.The technical result of the invention is achieved in a method for producing hyperimmune serum for the treatment and prophylaxis of necrobacteriosis of farm animals by hyperimmunization of oxen-producers with inactivated formalin antigen isolated from the production strain Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV, in that the antigen is obtained by culturing the production strain Fusobacterum 0 nec -1 "VIEV, then the culture fluid is subjected to ultrafiltration with a pore size of 13-20 kDa, to the ultrafiltrate add 8-10% of the bacterial mass amma Fusobacterium necrophorum "0-1" to a content VIEV Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV 1.5-2.0 billion cells per 1 cm 3, was added sodium succinate chitosan, taken at a final concentration by weight of 0.5-1, 5%, inactivation is carried out with formalin, taken in a final concentration of 0.3-0.4%, for 12-14 days at 37-38 ° C, then the resulting antigen is sorbed on 10-15% aluminum hydroxide in glycol buffer with pH 8 , 4-8.6, taken in a final concentration of 1.8-2.0%, and hyperimmunization of the producing oxen is carried out first with a vaccine for the prevention of necrobacteriosis of farm animals in doses 0.4-0.6 ml / animal, then after 4-5 weeks, the antigen obtained by the method described above, at the rate of 1.5-2.0 ml of antigen per 100 kg of animal body weight, first once intracutaneously into the prepulatory inguinal lymph node together with an oil adjuvant taken in a weight ratio to the antigen as 1: 0.8-1.0, then 0.5-0.6 ml of antigen per 100 kg of the animal’s body weight is first injected intracutaneously into the right prepuce twice with an interval of 5-7 days and the left inguinal lymph nodes, then - into the left prepopular and right inguinal lymph nodes.

Известна вакцина против некробактериоза животных (патент RU 2329828, опубл. 27.07.2008, Бюл. №21, МПК А61K 39/02, А61Р 31/04).Known vaccine against necrobacteriosis of animals (patent RU 2329828, publ. 07/27/2008, Bull. No. 21, IPC A61K 39/02, A61P 31/04).

Известен способ получения натриевой соли сукцината хитозана (Патент RU 2144040, МПК С08В 37/08, A61K 31/722, опубликовано 10.01.2000), который может быть использован в ветеринарии, медицине и косметике в качестве пленкообразователя, гидранта или эмульгатора.A known method of producing sodium salt of chitosan succinate (Patent RU 2144040, IPC С08В 37/08, A61K 31/722, published January 10, 2000), which can be used in veterinary medicine, medicine and cosmetics as a film former, hydrant or emulsifier.

В патентной и научно-технической литературе не известны технические решения, содержащие режимы способа получения гипериммунной сыворотки для лечения и профилактики некробактериоза сельскохозяйственных животных, аналогичные заявляемому, т.е. предложение соответствует критерию «новизны».In the patent and scientific and technical literature, technical solutions are not known containing modes of the method for producing hyperimmune serum for the treatment and prevention of necrobacteriosis of farm animals, similar to the claimed, i.e. the proposal meets the criterion of "novelty."

Все режимы способа осуществимы в промышленных условиях, направлены на решение реальной технической задачи, т.е. предложение «промышленно применимо».All modes of the method are feasible in an industrial environment, aimed at solving a real technical problem, i.e. the proposal is “industrially applicable”.

Впервые предложен способ получения гипериммунной сыворотки для лечения и профилактики некробактериоза сельскохозяйственных животных, где некробактериозный антиген получают культивированием производственного штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ, далее культуральную жидкость подвергают ультрафильтрации, к ультрафильтрату добавляют бактериальную массу штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ и натриевую соль сукцината хитозана, проводят инактивацию формалином, затем полученный антиген сорбируют на гидроокиси алюминия при определенных условиях, т.е. предложение соответствует критериям «новизна» и «изобретательский уровень».For the first time, a method is proposed for producing hyperimmune serum for the treatment and prevention of necrobacteriosis in farm animals, where a necrobacteriose antigen is obtained by culturing the production strain Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV, then the culture fluid is ultrafiltered, the bacterial mass of the strain Fusobacterium necrophorum "0-1" is added to the ultrafiltrate and chitosan succinate sodium salt, they are inactivated with formalin, then the resulting antigen is sorbed on aluminum hydroxide under certain conditions, i.e. the proposal meets the criteria of "novelty" and "inventive step".

Изобретение иллюстрируется на следующих примерах.The invention is illustrated by the following examples.

Пример 1. Сыворотку получают путем гипериммунизации животных антигеном возбудителя некробактериоза.Example 1. Serum is obtained by hyperimmunization of animals with an antigen of the causative agent of necrobacteriosis.

Для получения некробактериозного антигена берут производственный штамм Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ, культивируют, отделяют бакмассу от культуральной жидкости центрифугированием, из культуральной жидкости выделяют экзотоксин ультрафильтрацией на полых волокнах с размером пор 13-20 кДа, к ультрафильтрату добавляют 10% бактериальной массы штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ до содержания Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ 2,0 млрд клеток в 1 см3, добавляют натриевую соль сукцината хитозана, взятую в конечной весовой концентрации 1,5%, проводят инактивацию формалином, взятым в конечной концентрации 0,4%, в течение 14 суток при 38°С, затем полученный антиген сорбируют на 15% гидроокиси алюминия в гликолевом буфере с рН 8,6, взятой в конечной концентрации 2,0%, а гипериммунизацию волов-продуцентов проводят вначале вакциной для профилактики некробактериоза сельскохозяйственных животных в дозе 0,6 мл/животное, затем через 5 недель антигеном, полученным способом, описанным выше, из расчета 2,0 мл антигена на 100 кг веса тела животного вначале однократно внутрикожно в предлопаточный паховый лимфоузел совместно с масляным адъювантом, взятым в весовом соотношении к антигену как 1:0,8, затем дважды с интервалом 7 дней внутрикожно вводят 0,6 мл антигена на 100 кг веса тела животного вначале в правый предлопаточный и левый паховый лимфоузлы, затем - в левый предлопаточный и правый паховый лимфоузлы.To obtain a necrobacteric antigen, the production strain Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV is taken, cultivated, the back mass is separated from the culture fluid by centrifugation, exotoxin is isolated from the culture fluid by ultrafiltration on hollow fibers with a pore size of 13-20 kDa, 10% of the bacterial mass of the strain is added to the ultrafiltrate Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV to the content of Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV 2.0 billion cells in 1 cm 3 add sodium salt of chitosan succinate, taken in a final weight concentration of 1.5%, carry out inactivation with formalin, taken at a final concentration of 0.4%, for 14 days at 38 ° C, then the resulting antigen is sorbed on 15% aluminum hydroxide in glycol buffer with a pH of 8.6, taken at a final concentration of 2.0%, and hyperimmunization of the producing oxen first, a vaccine is carried out for the prevention of necrobacteriosis of farm animals at a dose of 0.6 ml / animal, then after 5 weeks the antigen obtained by the method described above, at the rate of 2.0 ml of antigen per 100 kg of animal body weight, is first once intracutaneously in the prepulatory inguinal lymph node together with butter m adjuvant, taken in a weight ratio to the antigen as 1: 0.8, then twice with an interval of 7 days, 0.6 ml of antigen per 100 kg of animal body weight is injected intradermally, first in the right prepopular and left inguinal lymph nodes, then in the left prepopular and right inguinal lymph nodes.

После этого проводят контроль бактериологический, физико-химический и активности сыворотки. Сыворотка содержит антитела к F. necrophorum в титре не ниже 1:128 (в РА). За период наблюдения в течение 10 дней все животные оставались здоровыми. На месте введения изменений нет.After that, bacteriological, physico-chemical and serum activity are monitored. Serum contains antibodies to F. necrophorum in a titer of at least 1: 128 (in RA). During the observation period of 10 days, all animals remained healthy. There are no changes at the place of introduction.

Пример 2. Сыворотку получают путем гипериммунизации животных антигеном возбудителя некробактериоза.Example 2. Serum is obtained by hyperimmunization of animals with an antigen of the pathogen necrobacteriosis.

Для получения некробактериозного антигена берут производственный штамм Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ, культивируют, отделяют бакмассу от культуральной жидкости центрифугированием, из культуральной жидкости выделяют экзотоксин ультрафильтрацией на полых волокнах с размером пор 13-20 кДа, к ультрафильтрату добавляют 8% бактериальной массы штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ до содержания Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ 1,5 млрд клеток в 1 см3, добавляют натриевую соль сукцината хитозана, взятую в конечной весовой концентрации 0,5%, проводят инактивацию формалином, взятым в конечной концентрации 0,3%, в течение 12 суток при 37°С, затем полученный антиген сорбируют на 10% гидроокиси алюминия в гликолевом буфере с рН 8,4, взятой в конечной концентрации 1,8%, а гипериммунизацию волов-продуцентов проводят вначале вакциной для профилактики некробактериоза сельскохозяйственных животных в дозе 0,4 мл/животное, затем через 4 недель антигеном, полученным способом, описанным выше, из расчета 1,5 мл антигена на 100 кг веса тела животного вначале однократно внутрикожно в предлопаточный паховый лимфоузел совместно с масляным адъювантом, взятым в весовом соотношении к антигену как 1:1, затем дважды с интервалом 5 дней внутрикожно вводят 0,5 мл антигена на 100 кг веса тела животного вначале в правый предлопаточный и левый паховый лимфоузлы, затем - в левый предлопаточный и правый паховый лимфоузлы.To obtain a necrobacteric antigen, a production strain of Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV is taken, cultivated, the back mass is separated from the culture fluid by centrifugation, exotoxin is isolated from the culture fluid by ultrafiltration on hollow fibers with a pore size of 13-20 kDa, 8% of the bacterial mass of the strain is added to the ultrafiltrate Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV to the content of Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV 1.5 billion cells in 1 cm 3 add sodium salt of chitosan succinate taken in a final weight concentration of 0.5%, carry out inactivation with formalin, taken in a final concentration of 0.3% for 12 days at 37 ° C, then the resulting antigen is sorbed on 10% aluminum hydroxide in glycol buffer with a pH of 8.4, taken in a final concentration of 1.8%, and hyperimmunization of the producing oxen First, a vaccine is carried out for the prevention of necrobacteriosis of farm animals at a dose of 0.4 ml / animal, then after 4 weeks the antigen obtained by the method described above, at the rate of 1.5 ml of antigen per 100 kg of animal body weight, is first once intracutaneously in the prepulatory inguinal lymph node together with oily m adjuvant, taken in a weight ratio to the antigen as 1: 1, then twice with an interval of 5 days, 0.5 ml of antigen per 100 kg of the animal’s body weight is injected intradermally, first in the right pre-scapular and left inguinal lymph nodes, then in the left pre-scapular and right inguinal lymph nodes.

После этого проводят контроль бактериологический, физико-химический и активности сыворотки. Сыворотка содержит антитела к F. necrophorum в титре не ниже 1:128 (в РА). За период наблюдения в течение 10 дней все животные оставались здоровыми. На месте введения изменений нет.After that, bacteriological, physico-chemical and serum activity are monitored. Serum contains antibodies to F. necrophorum in a titer of at least 1: 128 (in RA). During the observation period of 10 days, all animals remained healthy. There are no changes at the place of introduction.

Пример 3. Полученную по примерам 1-2 сыворотку применяют для клинического испытания в хозяйстве.Example 3. Obtained in examples 1-2 serum is used for a clinical trial on the farm.

В опыт берут 150 оленей с первой стадией заболевания, которая характеризовалась покраснением и отеком области межкопытной щели, венчика и сгибательной поверхности пута, серозным выделением у отдельных животных, которое высыхало, образуя на коже корку. Температура тела повышалась до 40° и выше. Животные были угнетены, у них прекращалась жвачка, резко снижались удои. Эта группа была поделена на три группы по 50 животных. 1-я группа (опытная) подвергалась лечению гипериммунной сывороткой, полученной по примеру 1, 2-я группа (опытная) подвергалась лечению гипериммунной сывороткой, полученной по примеру 2, 3-я группа получила лечение гипериммунной сывороткой, полученной по известному техническому решению (прототипу).150 deer with the first stage of the disease, which was characterized by redness and swelling of the area of the inter-experimental gap, corolla and flexor surface of the put, serous excretion in individual animals, which dried out, forming a crust on the skin, were taken into the experiment. Body temperature increased to 40 ° and above. Animals were oppressed, their chewing gum ceased, and milk yield sharply decreased. This group was divided into three groups of 50 animals. The 1st group (experimental) was treated with hyperimmune serum obtained in example 1, the 2nd group (experimental) was treated with hyperimmune serum obtained in example 2, the 3rd group was treated with hyperimmune serum obtained by a known technical solution (prototype )

Перед применением гипериммунных сывороток производят расчистку и обрезку копыт, туалет раневой поверхности, удаляют омертвевшие ткани. Всем животным, получающих лечение, на раневую поверхность накладывают ватно-марлевый тампон, пропитанный гипериммунной сывороткой, и фиксируют его поддерживающей повязкой. Одновременно с наложением повязки каждому животному в круп вводят по 150 мл гипериммунной сыворотки.Before using hyperimmune serums, clearing and trimming of hooves, a toilet of the wound surface, and dead tissue are removed. A cotton-gauze swab impregnated with hyperimmune serum is placed on the wound surface for all animals receiving treatment and is fixed with a supporting dressing. Simultaneously with the application of a dressing, 150 ml of hyperimmune serum are introduced into the croup of each animal.

За подопытными животными установлено клиническое наблюдение с двукратным измерением температуры. Через 4-6 суток повязки с конечностей снимают и проводят осмотр раневой поверхности.Experimental animals were clinically monitored with a double temperature measurement. After 4-6 days, bandages from the extremities are removed and the wound surface is examined.

У животных первой и второй группы раны очистились от клеточного дейтрита, на отдельных участках появились очаги грануляционной ткани. У животных третьей группы была обнаружена грануляционная ткань, заполняющая всю раневую поверхность. В результате лечебных мероприятий в первой и второй группах были излечены 49 и 47 животных, соответственно. Эффективность лечения составляет 98 и 94%. В третьей группе были излечены только 32 животных. Эффективность лечения составляет 64%. У животных 3-й группы болезнь прогрессировала.In animals of the first and second groups, the wounds were cleansed of cellular deuteritis, foci of granulation tissue appeared in separate areas. In animals of the third group, granulation tissue was found that fills the entire wound surface. As a result of therapeutic measures in the first and second groups, 49 and 47 animals were cured, respectively. The effectiveness of treatment is 98 and 94%. In the third group, only 32 animals were cured. The cure rate is 64%. In animals of the 3rd group, the disease progressed.

Пример 4. Полученную по примерам 1-2 сыворотку применяют для клинического испытания в хозяйстве.Example 4. Obtained in examples 1-2 serum is used for a clinical trial on the farm.

В опыт берут 150 оленей со второй стадией заболевания, при которой патологический процесс увеличен, очаг с мягких тканей переходил на надкостницу, иногда возникал оссифицирующий периостит и остеоартрит копытного сустава. У животных установлена выраженная хромота, пораженная конечность горяча на ощупь и резко болезненна, в местах поражения возникала характерная язва с изрытыми краями. Эта группа была поделена на три группы по 50 животных. 1-я группа (опытная) подвергалась лечению гипериммунной сывороткой, полученной по примеру 1, 2-я группа (опытная) подвергалась лечению гипериммунной сывороткой, полученной по примеру 2, 3-я группа получила лечение гипериммунной сывороткой, полученной по известному техническому решению (прототипу).150 deer with the second stage of the disease, in which the pathological process is increased, the focus from the soft tissues to the periosteum, take sometimes ossifying periostitis and hoof joint osteoarthritis. In animals, severe lameness was established, the affected limb was hot to the touch and sharply painful, a characteristic ulcer with pitted edges appeared in the lesion sites. This group was divided into three groups of 50 animals. The 1st group (experimental) was treated with hyperimmune serum obtained in example 1, the 2nd group (experimental) was treated with hyperimmune serum obtained in example 2, the 3rd group was treated with hyperimmune serum obtained by a known technical solution (prototype )

Перед применением гипериммунных сывороток производят расчистку и обрезку копыт, туалет раневой поверхности, удаляют омертвевшие ткани. Всем животным, получающих лечение, на раневую поверхность накладывают ватно-марлевый тампон, пропитанный гипериммунной сывороткой, и фиксируют его поддерживающей повязкой. Одновременно с наложением повязки каждому животному в круп вводят по 150 мл гипериммунной сыворотки.Before using hyperimmune serums, clearing and trimming of hooves, a toilet of the wound surface, and dead tissue are removed. A cotton-gauze swab impregnated with hyperimmune serum is placed on the wound surface for all animals receiving treatment and is fixed with a supporting dressing. Simultaneously with the application of a dressing, 150 ml of hyperimmune serum are introduced into the croup of each animal.

За подопытными животными установлено клиническое наблюдение с двукратным измерением температуры. Через 14-16 суток повязки с конечностей снимают и проводят осмотр раневой поверхности.Experimental animals were clinically monitored with a double temperature measurement. After 14-16 days, bandages from the extremities are removed and the wound surface is examined.

У животных первой и второй группы раны очистились от клеточного дейтрита, на отдельных участках появились очаги грануляционной ткани. У животных третьей группы была обнаружена грануляционная ткань, заполняющая всю раневую поверхность. В результате лечебных мероприятий в первой и второй группах были излечены 48 и 46 животных. Эффективность лечения составляет 96 и 92%, соответственно. В третьей группе были излечены только 20 животных. Эффективность лечения составляет 40%. У животных 3-й группы болезнь прогрессировала.In animals of the first and second groups, the wounds were cleansed of cellular deuteritis, foci of granulation tissue appeared in separate areas. In animals of the third group, granulation tissue was found that fills the entire wound surface. As a result of therapeutic measures in the first and second groups, 48 and 46 animals were cured. The treatment efficacy is 96 and 92%, respectively. In the third group, only 20 animals were cured. The effectiveness of the treatment is 40%. In animals of the 3rd group, the disease progressed.

Таким образом, гипериммунная сыворотка против некробактериоза позволяет на 28-58% повысить эффективность лечения некробактериоза и может быть использована как специфическое лечебное средство с терапевтической и профилактической целью в неблагополучных по некробактериозу животноводческих и оленеводческих хозяйствах. Сыворотка может применяться сочетанно с вакцинацией животных, особенно в начальной стадии болезни.Thus, hyperimmune serum against necrobacteriosis can increase the effectiveness of the treatment of necrobacteriosis by 28-58% and can be used as a specific therapeutic agent for therapeutic and prophylactic purposes in livestock and reindeer husbandry that are unsuccessful for necrobacteriosis. Serum can be used in conjunction with vaccination of animals, especially in the initial stage of the disease.

Claims (1)

Способ получения гипериммунной сыворотки для лечения и профилактики некробактериоза сельскохозяйственных животных путем гипериммуннизации волов-продуцентов инактивированным формалином антигеном, выделенным из производственного штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ, отличающийся тем, что антиген получают культивированием производственного штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ, далее культуральную жидкость подвергают ультрафильтрации с размером пор 13-20 кДа, к ультрафильтрату добавляют 8-10% бактериальной массы штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ до содержания Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ 1,5-2,0 млрд клеток в 1 см3, добавляют натриевую соль сукцината хитозана, взятую в конечной весовой концентрации 0,5-1,5%, проводят инактивацию формалином, взятым в конечной концентрации 0,3-0,4%, в течение 12-14 суток при 37-38°С, затем полученный антиген сорбируют на 10-15% гидроокиси алюминия в гликолевом буфере с рН 8,4-8,6, взятой в конечной концентрации 1,8-2,0%, а гипериммунизацию волов-продуцентов проводят вначале вакциной для профилактики некробактериоза сельскохозяйственных животных в дозе 0,4-0,6 мл/животное, затем через 4-5 недель - антигеном, полученным способом, описанным выше, из расчета 1,5-2,0 мл антигена на 100 кг веса тела животного вначале однократно внутрикожно в предлопаточный паховый лимфоузел совместно с масляным адъювантом, взятым в весовом соотношении к антигену как 1:0,8-1,0, затем дважды с интервалом 5-7 дней внутрикожно вводят 0,5-0,6 мл антигена на 100 кг веса тела животного вначале в правый предлопаточный и левый паховый лимфоузлы, затем - в левый предлопаточный и правый паховый лимфоузлы.A method of producing hyperimmune serum for the treatment and prevention of necrobacteriosis of farm animals by hyperimmunization of oxen-producers with an inactivated formalin antigen isolated from the production strain Fusobacterium necrophorum "0-1" WIEV, characterized in that the antigen is obtained by culturing the production strain Fusobacterium necrophorum 1-1 , then the culture fluid is subjected to ultrafiltration with a pore size of 13-20 kDa, 8-10% of the bacterial mass of the strain Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV is added to the ultrafiltrate to contain Fusobacterium necrophorum "0-1" VIEV 1.5-2.0 billion cells in 1 cm 3 add sodium salt of chitosan succinate, taken in a final weight concentration of 0.5-1.5%, carry out inactivation with formalin taken in the final concentration of 0.3-0.4%, for 12-14 days at 37-38 ° C, then the resulting antigen is sorbed on 10-15% aluminum hydroxide in glycol buffer with a pH of 8.4-8.6, taken in the final concentrations of 1.8-2.0%, and hyperimmunization of producer oxides is carried out first with a vaccine for the prevention of necrobacteriosis of farm animals at a dose of 0.4-0.6 ml / animal, then after 4-5 weeks b - the antigen obtained by the method described above, at the rate of 1.5-2.0 ml of antigen per 100 kg of the animal’s body weight, first once intracutaneously into the prepopular inguinal lymph node together with an oil adjuvant taken in a weight ratio to the antigen as 1: 0, 8-1.0, then 0.5-0.6 ml of antigen per 100 kg of the animal’s body weight is injected intradermally twice at intervals of 5-7 days, first in the right pre-scapular and left inguinal lymph nodes, then in the left prepopular and right inguinal lymph nodes.
RU2015147811A 2015-11-09 2015-11-09 Method for hyperimmune serum preparation for farm animals necrobacillosis treatment and prevention RU2622746C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015147811A RU2622746C2 (en) 2015-11-09 2015-11-09 Method for hyperimmune serum preparation for farm animals necrobacillosis treatment and prevention

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015147811A RU2622746C2 (en) 2015-11-09 2015-11-09 Method for hyperimmune serum preparation for farm animals necrobacillosis treatment and prevention

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2015147811A RU2015147811A (en) 2017-05-15
RU2622746C2 true RU2622746C2 (en) 2017-06-19

Family

ID=58715211

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2015147811A RU2622746C2 (en) 2015-11-09 2015-11-09 Method for hyperimmune serum preparation for farm animals necrobacillosis treatment and prevention

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2622746C2 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2701376C1 (en) * 2018-11-19 2019-09-26 Федеральное казенное предприятие "Армавирская биологическая фабрика" Method for integrated treatment of cattle necrobacteriosis

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2109519C1 (en) * 1997-06-02 1998-04-27 Николай Васильевич Мельник Method of preparing vaccine for necrobacteriosis control in animals
RU2195318C1 (en) * 2001-11-19 2002-12-27 Караваев Юрий Дмитриевич Hyperimmune serum for treatment and prophylaxis of necrobacteriosis in animals
CN104878070A (en) * 2015-06-19 2015-09-02 候素君 Anaerobic culture medium for culturing fusobacterium necrophorum

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2109519C1 (en) * 1997-06-02 1998-04-27 Николай Васильевич Мельник Method of preparing vaccine for necrobacteriosis control in animals
RU2195318C1 (en) * 2001-11-19 2002-12-27 Караваев Юрий Дмитриевич Hyperimmune serum for treatment and prophylaxis of necrobacteriosis in animals
CN104878070A (en) * 2015-06-19 2015-09-02 候素君 Anaerobic culture medium for culturing fusobacterium necrophorum

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
БОСХОМДЖИЕВА Е.Д. Гипериммунная сыворотка против некробактериоза рогатого скота. Автореф. дисс. к.в.н. М. 1994. с.1-21. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2701376C1 (en) * 2018-11-19 2019-09-26 Федеральное казенное предприятие "Армавирская биологическая фабрика" Method for integrated treatment of cattle necrobacteriosis

Also Published As

Publication number Publication date
RU2015147811A (en) 2017-05-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JPS61502334A (en) Cell surface proteins and their production and use
RU2622746C2 (en) Method for hyperimmune serum preparation for farm animals necrobacillosis treatment and prevention
CN102397271A (en) Application of ozone oil to animal infectious disease
RU2629861C2 (en) Hyperimmune serum production method for treatment and prevetion of farm animals necrobacillosis
RU2195318C1 (en) Hyperimmune serum for treatment and prophylaxis of necrobacteriosis in animals
RU2504383C1 (en) Method of treating acute postpartum endometritis in cows
RU2602687C1 (en) Method for producing preparation for stimulation of non-specific body resistance, prevention of diseases of young farm animals
RU2475244C1 (en) Agent antiactinomycilline for treating actinomycosis and necrobacillosis in farm animals
RU2464037C1 (en) Combined method of treating subclinical mastitis in cows
RU2678132C2 (en) Canine health product containing antibodies against canine parvovirus type 2
RU2700081C1 (en) Preparation "berkana" for prevention and treatment of endometritis in cows and a method for production thereof
RU2605631C1 (en) Agent for prevention of mastitis in cattle
RU2651772C2 (en) Method of chemoprophylaxis of nodular dermatitis in bovine animals
CN1132631C (en) Veterinary medicine for treating infective serositis of duck and its preparing process
RU2538051C2 (en) Method of treating latent mastitis in cows
RU2701376C1 (en) Method for integrated treatment of cattle necrobacteriosis
RU2250112C2 (en) Method for treating wounds in animals under conditions of prolonged adaptation to hypokinesia
Alzamora Filho et al. Use of photodynamic antimicrobial therapy and laser therapy in the treatment of ovine infectious dermatitis.
RU2562585C1 (en) Method for increasing biocidal and therapeutic efficacy of staphylococcal anatoxin vaccine
RU2320350C1 (en) Method for preventing omphalophlebitis in neonatal calves
RU2301060C1 (en) Method for preventing omphalitis in calves
RU2105560C1 (en) Method of cow placenta extract preparing
RU2491069C1 (en) Preparation for treating mastitis in lactation cows
RU2489158C2 (en) Drug for prevention of endometritis in cows and method for using it
RU2233173C1 (en) Method for prophylaxis and treatment of dermatomycosis, vaccine "poliderm" for its realization and method for preparing such vaccine

Legal Events

Date Code Title Description
HC9A Changing information about author(s)