RU2571081C1 - Способ определения кислотной устойчивости эритроцитов хладнокровных животных - Google Patents
Способ определения кислотной устойчивости эритроцитов хладнокровных животных Download PDFInfo
- Publication number
- RU2571081C1 RU2571081C1 RU2014136832/15A RU2014136832A RU2571081C1 RU 2571081 C1 RU2571081 C1 RU 2571081C1 RU 2014136832/15 A RU2014136832/15 A RU 2014136832/15A RU 2014136832 A RU2014136832 A RU 2014136832A RU 2571081 C1 RU2571081 C1 RU 2571081C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- resistance
- erythrocytes
- blood
- cold
- blooded animals
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для определения кислотной устойчивости эритроцитов. Способ заключается в том, что в пробирку с кровью добавляют антикоагулянт (трилон Б) из расчета 10 мкл на 2 мл крови. Проводят измерения при длине волны 0,450 нм. Используют физиологический раствор 0,65% NaCl. Затем после гемолиза рассчитывают эритрограмму резистентности и определяют процентное распределение эритроцитарных мембран по стойкости. Заявленный способ прост и эффективен для определения кислотной устойчивости эритроцитов. 1 ил., 1 табл., 1 пр.
Description
Изобретение относится к биологии и медицине, может применяться в экологической физиологии животных, ветеринарной и клинической экспресс-диагностике.
Известен способ определения функционального состояния организма по степени резистентности крови к кислотному гемолизу, патент №2179315 от 17.08.2000. Способ включает разведение пробы крови в 2001 раз изотоническим раствором хлорида натрия с рН 7,4, взятие двух равных частей разведенной пробы, одну инкубируют с добавкой пропранола, а другую фотометрируют, до и после добавления 0,1 н. раствора соляной кислоты в соотношении 1:20 к исходному объему части пробы, после чего аналогично дважды фотометрируют вторую часть пробы, регистрируя кинетику гемолиза по убыли оптической плотности, автоматически, с дискретностью 1/с, полученную информацию обрабатывают в компьютере с помощью программного обеспечения.
Наиболее близким по технической сущности является способ определения кислотной устойчивости эритроцитов, патент №2242760 от 27.01.2003, для оценки кислотности стойкости эритроцитов взвесь эритроцитов стандартизируют разведением эритроцитарной массы физиологическим раствором в отношении 1:3 и центрифугированием в течение 15 мин с последующим разведением 0,01 мл эритроцитарного осадка в 0,4 мл физиологического раствора. Добавляют кислотный гемолитик, в качестве которого используют 1% раствор уксусной кислоты. Определяют величину светопропускания, осуществляя параллельную запись изменения среднего размера эритроцитов и величины светопропускания с построением графиков, по которым определяют время регистрации максимального среднего размера эритроцитов и среднюю скорость гемолиза. Рассчитывают индекс кислотной стойкости эритроцитов.
Недостатками вышеуказанного способа являются трудоемкость, длительность и дороговизна.
Задача предлагаемого изобретения повышение эффективности, надежности и информативности анализа.
Поставленная задача достигается тем, что на основе метода кислотной устойчивости эритроцитов определяют динамику гемолитической стойкости эритроцитов.
Сущность предлагаемого изобретения заключается в том, что в пробирку с кровью добавляют антикоагулянт (трилон Б) из расчета 10 мкл на 2 мл крови, проводят измерения при длине волны 0,450 нм, используют физиологический раствор 0,65% NaCl, а затем после гемолиза рассчитывают эритрограмму резистентности и определяют процентное распределение эритроцитарных мембран по стойкости.
Пример
Авторами было проведено исследование кислотной устойчивости мембран эритроцитов. Анализ проводится на приборах КФК или СФ. Кровь брали из хвостовой артерии. Шприц для забора крови предварительно обработали антикоагулянтом (трилон Б). В пробирку, в которую собирается кровь, добавляется антикоагулянт из расчета 10 мкл на 2 мл крови. Для достоверного анализа необходимо 4-5 мл крови. Светофильтр настраивают на длину волны 0,450 нм. В 2 кварцевые кюветы толщиной стекла 10 наливают 4,5 мл 0,65% физиологического раствора NaCl (одна - контрольная, вторая - опытная). Затем в опытную кювету понемногу приливают кровь, пока оптическая плотность не достигнет 0,700. После этого из кюветы отбирают 2,3 мл физиологического раствора с эритроцитами, остальное сливают и тщательно просушивают кювету. 2,3 мл отобранного физиологического раствора с эритроцитами возвращают в кювету и к ней приливают 2,3 мл 0,004N HCl, который служит гемолитиком. После этого с интервалом каждые 15 секунд проводят измерения кинетики гемолиза до двух-трех повторяющихся значений. По завершении гемолиза рассчитывают в процентах популяций эритроцитов различных стойкостей и строят график зависимости популяций эритроцитов от времени гемолиза.
На рис. 1 представлен график кислотной эритрограммы сегоклеток карпа.
Заявленный способ имеет следующие преимущества.
1. Менее трудоемок, нет необходимости проводить стандартизацию взвеси эритроцитов путем разведения с физиологическим раствором, центрифугированием, отмыванием и повторным центрифугированием.
2. Занимает меньше времени.
3. Прост и доступен в применении, нет необходимости в применении дорогостоящих реактивов и приборов.
4. Нет необходимости поддерживать постоянство температуры в термостате.
Claims (1)
- Способ определения кислотной устойчивости эритроцитов хладнокровных животных, заключающийся в том, что в пробирку с кровью добавляют антикоагулянт (трилон Б) из расчета 10 мкл на 2 мл крови, проводят измерения при длине волны 0,450 нм, используют физиологический раствор 0,65% NaCl, а затем после гемолиза рассчитывают эритрограмму резистентности и определяют процентное распределение эритроцитарных мембран по стойкости.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014136832/15A RU2571081C1 (ru) | 2014-09-10 | 2014-09-10 | Способ определения кислотной устойчивости эритроцитов хладнокровных животных |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014136832/15A RU2571081C1 (ru) | 2014-09-10 | 2014-09-10 | Способ определения кислотной устойчивости эритроцитов хладнокровных животных |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2571081C1 true RU2571081C1 (ru) | 2015-12-20 |
Family
ID=54871245
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014136832/15A RU2571081C1 (ru) | 2014-09-10 | 2014-09-10 | Способ определения кислотной устойчивости эритроцитов хладнокровных животных |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2571081C1 (ru) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1097949A1 (ru) * | 1981-01-09 | 1984-06-15 | Институт проблем криобиологии и криомедицины АН УССР | Способ исследовани осмотической резистентности эритроцитов |
| RU2007192C1 (ru) * | 1991-02-28 | 1994-02-15 | Кательницкая Людмила Ивановна | Способ определения индивидуальной чувствительности к гемосорбции при ишемической болезни сердца |
| US6268167B1 (en) * | 1994-08-03 | 2001-07-31 | Roche Diagnostics Gmbh | Methods for determining an analyte in a plasma or serum sample which may be contaminated with interfering substances resulting from hemolysis |
| RU2179315C1 (ru) * | 2000-08-17 | 2002-02-10 | Кемеровский государственный университет | Способ определения функционального состояния организма по степени резистентности крови к кислотному гемолизу |
-
2014
- 2014-09-10 RU RU2014136832/15A patent/RU2571081C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1097949A1 (ru) * | 1981-01-09 | 1984-06-15 | Институт проблем криобиологии и криомедицины АН УССР | Способ исследовани осмотической резистентности эритроцитов |
| RU2007192C1 (ru) * | 1991-02-28 | 1994-02-15 | Кательницкая Людмила Ивановна | Способ определения индивидуальной чувствительности к гемосорбции при ишемической болезни сердца |
| US6268167B1 (en) * | 1994-08-03 | 2001-07-31 | Roche Diagnostics Gmbh | Methods for determining an analyte in a plasma or serum sample which may be contaminated with interfering substances resulting from hemolysis |
| RU2179315C1 (ru) * | 2000-08-17 | 2002-02-10 | Кемеровский государственный университет | Способ определения функционального состояния организма по степени резистентности крови к кислотному гемолизу |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Kumar et al. | Density-based separation in multiphase systems provides a simple method to identify sickle cell disease | |
| KR102149318B1 (ko) | 소량 응집 검정 | |
| Cuhadar | Preanalytical variables and factors that interfere with the biochemical parameters: a review | |
| CN103627638A (zh) | 一种用于裂解红细胞的组合物、红细胞裂解试剂及应用 | |
| Howanitz et al. | Practices for identifying and rejecting hemolyzed specimens are highly variable in clinical laboratories | |
| Wisanuvej et al. | Comparison between blood hemoglobin concentration determined by point-of-care device and complete blood count in adult patients with dengue | |
| JP2022120079A (ja) | 分析装置および分析方法 | |
| CN103940992A (zh) | C-反应蛋白检测试剂盒及其制备 | |
| RU2571081C1 (ru) | Способ определения кислотной устойчивости эритроцитов хладнокровных животных | |
| JP2023535254A (ja) | 全血の試料の血漿画分中の分析物の濃度を決定するための方法 | |
| RU2691413C1 (ru) | Способ определения бактериального эндотоксина в биологических жидкостях | |
| CN107121413B (zh) | 血液样品提供装置及其血小板聚集功能检测仪、检测方法 | |
| RU2605965C1 (ru) | Способ твердофазной экстракции красителя толуидинового синего | |
| CN110530824B (zh) | 一种红细胞渗透脆性测定方法及其试剂盒 | |
| Higuchi et al. | Novel blood typing method by discrimination of hemagglutination and rouleaux using an erythrocyte aggregometer | |
| Paul et al. | Effect of systemic inflammatory response syndrome on thrombocytogram, acute phase proteins, electrolytes, acid-base indices and cytokine expression in naturally canine parvovirus infected dogs | |
| Bosshart et al. | Two different hematocrit detection methods: Different methods, different results? | |
| JP2001296292A (ja) | 免疫測定方法 | |
| Metcalf et al. | A simple, accurate, and rapid method for the quantitative determination of dextran in blood and urine | |
| Cardoso et al. | Evaluation of automatic blood analyzer as screening method in fetomaternal hemorrhage | |
| RU2601111C1 (ru) | Способ оценки гемостатической активности тромбоцитов | |
| Abdollahi et al. | Diagnostic value of measurement specific gravity by refractometric and dipstick method in differentiation between transudate and exudate in pleural and peritoneal fluid | |
| RU2393475C1 (ru) | Способ оценки реологических свойств крови | |
| RU2580300C1 (ru) | Способ определения осмотической стойкости эритроцитов | |
| Schapkaitz et al. | Point-of-care estimation of haemoglobin concentration in all age groups in clinical practice |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180911 |