RU2601111C1 - Способ оценки гемостатической активности тромбоцитов - Google Patents
Способ оценки гемостатической активности тромбоцитов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2601111C1 RU2601111C1 RU2015114358/15A RU2015114358A RU2601111C1 RU 2601111 C1 RU2601111 C1 RU 2601111C1 RU 2015114358/15 A RU2015114358/15 A RU 2015114358/15A RU 2015114358 A RU2015114358 A RU 2015114358A RU 2601111 C1 RU2601111 C1 RU 2601111C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- sample
- platelet
- solution
- platelets
- result
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 37
- 230000002439 hemostatic effect Effects 0.000 title claims abstract description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 14
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims abstract description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- XTWYTFMLZFPYCI-KQYNXXCUSA-N 5'-adenylphosphoric acid Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O XTWYTFMLZFPYCI-KQYNXXCUSA-N 0.000 claims abstract 2
- XTWYTFMLZFPYCI-UHFFFAOYSA-N Adenosine diphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O XTWYTFMLZFPYCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 19
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 18
- 230000035602 clotting Effects 0.000 claims description 12
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 claims description 4
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 claims description 3
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 claims description 3
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 claims description 3
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 claims description 3
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 claims description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 abstract description 20
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 8
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 7
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 abstract description 5
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 abstract description 4
- 230000002744 anti-aggregatory effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 abstract 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 abstract 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 41
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 13
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 12
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 12
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 8
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 7
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 4
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 4
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 3
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 3
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 2
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- UCTWMZQNUQWSLP-UHFFFAOYSA-N adrenaline Chemical compound CNCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 description 2
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 2
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005552 B01AC04 - Clopidogrel Substances 0.000 description 1
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010081391 Ristocetin Proteins 0.000 description 1
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 229940127218 antiplatelet drug Drugs 0.000 description 1
- 238000013176 antiplatelet therapy Methods 0.000 description 1
- 239000002981 blocking agent Substances 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- BGTFCAQCKWKTRL-YDEUACAXSA-N chembl1095986 Chemical compound C1[C@@H](N)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]([C@H]1C(N[C@H](C2=CC(O)=CC(O[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)=C2C=2C(O)=CC=C(C=2)[C@@H](NC(=O)[C@@H]2NC(=O)[C@@H]3C=4C=C(C(=C(O)C=4)C)OC=4C(O)=CC=C(C=4)[C@@H](N)C(=O)N[C@@H](C(=O)N3)[C@H](O)C=3C=CC(O4)=CC=3)C(=O)N1)C(O)=O)=O)C(C=C1)=CC=C1OC1=C(O[C@@H]3[C@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO[C@@H]5[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O5)O)O3)O[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O[C@@H]3[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)C4=CC2=C1 BGTFCAQCKWKTRL-YDEUACAXSA-N 0.000 description 1
- GKTWGGQPFAXNFI-HNNXBMFYSA-N clopidogrel Chemical compound C1([C@H](N2CC=3C=CSC=3CC2)C(=O)OC)=CC=CC=C1Cl GKTWGGQPFAXNFI-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 1
- 239000000701 coagulant Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000011022 operating instruction Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000000106 platelet aggregation inhibitor Substances 0.000 description 1
- 210000004623 platelet-rich plasma Anatomy 0.000 description 1
- 229940020573 plavix Drugs 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000005096 rolling process Methods 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000003634 thrombocyte concentrate Substances 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/86—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood coagulating time or factors, or their receptors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
- A61B10/00—Instruments for taking body samples for diagnostic purposes; Other methods or instruments for diagnosis, e.g. for vaccination diagnosis, sex determination or ovulation-period determination; Throat striking implements
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Surgery (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области медицины, в частности к гемостазиологии, и может быть использовано в комплексе с другими тестами для исследования системы гемостаза с целью диагностики нарушений процессов свертывания крови и контроля эффективности проводимых лечебных мероприятий, а также в экспериментальной медицине при испытании новых антиагрегационных фармакологических препаратов. Способ включает: оценку гемостатической активности тромбоцитов путем сравнения двух параллельно получаемых тромбоэластограмм от двух одинаково подготовленных проб или разделения на две части одной подготовленной пробы; регистрацию показателей тромбоэластограммы; проведение сравнения одноименных данных в виде отношения, а именно результат в пробе с раствором кальция и раствором аденозиндифосфат к результату в пробе с раствором кальция, разведенным дистиллированной водой в соотношении 2:1. Способ позволяет объективизировать и повысить диагностическую значимость оценки функциональных свойств тромбоцитов в процессе свертывания крови и формирования сгустка на основании измерения количественных параметров тромбоэластограммы. 3 пр.
Description
Изобретение относится к области медицины, в частности к гемостазиологии. Способ позволяет объективизировать и повысить диагностическую значимость оценки функциональных свойств тромбоцитов в процессе свертывания крови и формирования сгустка. Изобретение относится к медицине, а точнее - к гемостазиологии, и предназначено для оценки функциональных свойств тромбоцитов и их вклада в процесс свертывания крови. Предложенное решение может быть использовано в комплексе с другими тестами для исследования системы гемостаза с целью диагностики нарушений процессов свертывания крови и контроля эффективности проводимых лечебных мероприятий, а также в экспериментальной медицине при испытании новых антиагрегационных фармакологических препаратов.
Известны способы оценки агрегационных свойств тромбоцитов. Наиболее простые из них - «ручные» методы: после добавления в пробирку с плазмой, содержащей тромбоциты, индуктора агрегации тромбоцитов (АДФ - аденозиндифосфат, тромбин, адреналин, коллаген, ристомицин и т.д.) включают секундомер и фиксируют время появления агрегатов тромбоцитов в виде мелкодисперсных хлопьев (Смоляницкий А.Я. Методы исследования системы гемостаза // Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник / Под ред. В.В. Меньшикова. - М.: Медицина, 1987, с. 152-154). Однако характер информации, получаемый этим способом, крайне недостаточен и не соответствует современным требованиям оценки агрегационных свойств тромбоцитов.
Другим способом является способ оценки агрегационных свойств кровяных пластинок с помощью анализатора агрегации тромбоцитов, оснащенного компьютером и соответствующим программным обеспечением (Анализатор агрегации тромбоцитов Биола. Инструкция по определению агрегационной активности тромбоцитов. - М., 2008). При этом процесс агрегации, сопровождающийся снижением оптической плотности анализируемого образца, непрерывно регистрируется, и получаемые результаты представляются в виде кривой агрегации тромбоцитов, характеризующей кинетику этого процесса. По окончании процедуры сканирования препарата на агрегатограмме фиксируется показатель степени агрегации тромбоцитов (%) и скорости агрегации кровяных пластинок за первые 30 с процесса агрегации клеток (%/мин). Агрегация проводится как минимум с двумя индукторами агрегации - АДФ (по характеру кривой судят о способности тромбоцитов к агрегации) и коллагеном (оценка секреторной функции тромбоцитов - «реакция высвобождения»). При этом для оценки агрегационной способности тромбоцитов последовательно используют растворы АДФ в двух или трех вариантах концентрации реагента - в низкой, средней и высокой дозе.
Наиболее близким к предлагаемому техническому решению является способ оценки агрегационных свойств кровяных пластинок с помощью метода тромбоэластографии (Инструкция по эксплуатации анализатора гемостаза TEG® 5000, ООО «МК»). При этом регистрируется ответ тромбоцитов на стимуляцию арахидоновой кислотой и АДФ, позволяя оценить эффективность терапии такими антиагрегантами, как аспирин, плавикс и тиклид. При выполнении этого анализа появляется возможность оценить не только агрегацию тромбоцитов между собой после стимуляции АДФ или арахидоновой кислотой, но и то, как в процессе терапии антиагрегантами изменяются свойства тромбоцитов по встраиванию в тромбоцитарно-фибриновый сгусток.
Однако метод имеет недостатки. Для выполнения анализа требуется постановка 3-х или 4-х тестов на двухканальном приборе TEG® 5000 (Haemoscopecopr.) или 4-канальная тромбоэластографическая установка из двух приборов, что малодостижимо. Поскольку запись единичной тромбоэластограммы требует не менее 40 минут, правильность результатов из 3-й и 4-й проб снижается под влиянием хранения.
К недостаткам способа-прототипа следует отнести большое число манипуляций с пробой, индукторами и блокаторами агрегации тромбоцитов, предлагаемых для данного исследования в коммерческом наборе Platelet Mapping (Haemoscopecopr.), что также способно негативно повлиять на точность конечного результата.
Кроме того, строгая зависимость результатов от компьютерной обработки данных исключают выбор иных индукторов агрегации тромбоцитов и жестко предопределяют использование тех или иных каналов прибора.
Задачей настоящего изобретения является создание простого и доступного метода для комплексной оценки гемостатических свойств тромбоцитов в режиме point-of-care, основанного на результатах измерения количественных параметров тромбоэластограммы, что позволит объективизировать и повысить диагностическую значимость способа для характеристики функциональных свойств кровяных пластинок у пациентов отделений реанимации и интенсивной терапии, хирургии, родовспоможения, в лабораториях экспресс-диагностики и централизованных лабораториях.
Эта задача решается за счет того, что результатом анализа является сравнение одноименных показателей тромбоэластограммы, характеризующих различные стадии образования сгустка, полученных в тестах без и со стимуляцией тромбоцитов различными индукторами. Результат для удобства может быть выражен в процентах. Различие результатов теста без стимуляции индуктором и результата, полученного вследствие стимуляции тромбоцитов индуктором агрегации, расценивают как диагностически значимое.
Поставленная задача решается тем, что способ оценки гемостатической активности тромбоцитов, включающий регистрацию методом тромбоэластографии процесса образования сгустка в тромбоцитсодержащих средах, в котором берут тромбоцитсодержащие образцы биологических жидкостей, имеющих в своем составе фибриноген или другие высокомолекулярные коагулируемые тромбином белки, включая кровь, ее производные или продукты на ее основе, и с учетом различий в пробоподготовке, но без последующих различий в последовательности записи тромбоэластограммы, при этом оценку гемостатической активности тромбоцитов ведут путем сравнения двух параллельно получаемых тромбоэластограмм от двух одинаково подготовленных проб или разделения на две части одной подготовленной пробы, регистрируют показатели тромбоэластограммы: R - время реакции, K - время образования сгустка, угол, кинетика образования сгустка, градусы, МА - максимальная амплитуда тромбоэластограммы, а затем производят сравнение одноименных данных в виде отношения, а именно результат в пробе с раствором кальция и раствором аденозиндифосфат к результату в пробе с раствором кальция, разведенным дистиллированной водой в соотношении 2:1.
Способ можно осуществить следующим образом.
В качестве примеров будет показано как использовать три вида образцов биологических жидкостей, имеющих в своем составе фибриноген или другие высокомолекулярные коагулируемые тромбином белки, например, таких как 1 - цельная кровь, 2 - богатая тромбоцитами плазма (БТП) или 3 - тромбоцитный концентрат (ТК).
ПРИМЕР 1
Отбор пробы венозной крови из периферической вены производят в пробирку, содержащую раствор натрия цитрата 3,2%. Соотношение «кровь: цитрат» должно составлять 9:1, поэтому рекомендуется использование стандартизованных вакуумных систем (например, производства «Сарштедт», Германия). Если проба крови отбирается из центрального катетера, необходимо исключить возможность попадания гепарина в пробирку.
Заполнение пробирки кровью происходит самотеком и в строго рассчитанном объеме, определенном производителем. После заполнения пробирки ее отсоединяют от иглы или канюли катетера. Содержимое (кровь и антикоагулянт) смешивают путем вращения пробирки между ладонями в течение 1-2 минут. Запрещается переворачивание пробирки и взбалтывание содержимого.
Не допускается анализ крови, имеющей сгустки и/или полученной более 2 ч назад.
Перед отбором пробы следует произвести повторное перемешивание содержимого путем вращения пробирки между ладонями в течение 1-2 минут. Пробу для исследования отбирают дозатором из середины столба крови, содержащегося в пробирке.
ПРИМЕР 2
БТП получают из цельной крови по стандартной методике, предполагающей центрифугирование цельной крови при 1500G при комнатной температуре в течение 7 мин. Пробу для исследования отбирают дозатором из верхней части надосадочной жидкости (плазмы), но не более половины из образовавшегося объема надосадочной жидкости.
ПРИМЕР 3
ТК специальной пробоподготовки не требует. Пробу для исследования отбирают дозатором из середины объема, содержащегося в пробирке.
Для постановки теста с любой из проб 1-3 используют следующие реагенты:
Раствор хлорида кальция 0,2М (например, производства «ТехнологияСтандарт», Россия; готов к использованию).
Приготовление раствора индуктора (на примере индуктора АДФ производства «Технология-Стандарт», Россия). В один флакон АДФ внести 2 мл растворителя для АДФ и развести содержимое при комнатной температуре (+18…+25°С) и легком покачивании в течение 2 мин. В результате получают раствор АДФ с конечной концентрацией 1 мг/мл, который хранят при температуре -6…-18°С до 1 мес и размораживают по мере необходимости (Инструкция по применению АДФ).
Все реагенты перед исследованием должны быть выдержаны при комнатной температуре не менее 15 минут.
Проведение анализа. Исследуемая проба разделяется на два образца, объемом 340 мкл каждый, для последующей одновременной записи тромбоэластограмм. Необходимо тщательно перемешать каждую пробу перед исследованием катанием пробирок между ладоней.
Постановка теста не имеет принципиальных отличий в порядке и правилах манипуляций, определенных «Инструкцией по эксплуатации анализатора гемостаза TEG® 5000 (ООО «МК»). В кювету, установленную на Канал 1 тромбоэластографа, внести 20 мкл раствора кальция хлорида (0.2М), воды дистиллированной 6,7 мкл и 340 мкл пробы. Запустить запись тромбоэластограммы, как это указано в «Инструкции» к прибору TEG®5000. В кювету, установленную на Канал 2 тромбоэластографа, внести 20 мкл раствора кальция хлорида (0.2М), раствор АДФ (концентрация 1 мг/мл) в количестве 6,7 мкл и 340 мкл пробы. Запустить запись тромбоэластограммы, как это указано в «Инструкции» к прибору TEG®5000.
В каждой пробе регистрируются стандартные показатели тромбоэластограммы: R - время реакции (мин), K - время образования сгустка (мин), Angle - угол, кинетика образования сгустка, градусы, МА - максимальная амплитуда тромбоэластограммы (мм). Затем производят сравнение одноименных данных в виде отношения «результат в пробе с раствором кальция и раствором АДФ к результату в пробе с раствором кальция, разведенным дистиллированной водой в соотношении 2:1».
Конечные результаты - ΔR, ΔK, ΔAngle и ΔМА - выражают в %.
Результаты исследования трактуют следующим образом. При этом значения менее 11,1% в сочетании с увеличением значений показателей ΔAngle и ΔМА более чем на 22,0% свидетельствует об общем повышении способности кровяных пластинок к агрегации, о возрастании способности тромбоцитов участвовать в «реакции высвобождения», и, следовательно, о высоких потенциальных способностях клеток высвобождать в окружающую среду специфическое содержимое гранул тромбоцитов. Удлинение величин показателей ΔR и ΔK более чем на 22,0% при том, что показатели ΔAngle и ΔМА либо увеличились не более чем на 11,1%, либо вообще демонстрируют уменьшение, свидетельствует о противоположном эффекте, т.е. об общем снижении способности кровяных пластинок к агрегации, участию в образовании сгустка и формировании специфических свойств последнего.
Также диагностическое значение имеют сравнительные изменения отдельных показателей. Так, удлинение/укорочение показателя ΔR отражает чувствительность тромбоцитов к стимуляции индуктором; удлинение/укорочение показателя ΔK - влияние активированных тромбоцитов на процесс тромбообразования; увеличение/уменьшение показателя ΔAngle свидетельствует о степени вовлечения тромбоцитов в процесс формирования сгустка, опосредованное, например, тромбоцитарной реакцией высвобождения; увеличение/уменьшение показателя ΔМА характеризует конечную степень участия только активированных тромбоцитов (из всего пула кровяных пластинок) в образовании сгустка.
Анализ, выполненный на материале 53 здоровых доноров (венозная кровь), 60 пациентов с онкогематологической патологией и 50 образцов тромбоконцентрата показал, что показатели ΔR, ΔK, ΔAngle и ΔМА варьируют в пределах от -68,9 до 161%. Параллельное тестирование тех же образцов методом лазерной агрегометрии (анализатор агрегации тромбоцитов Биола, оснащенный компьютером и соответствующим программном обеспечением. Инструкция по определению агрегационной активности тромбоцитов. - Москва, 2008) зафиксировал состояния гипо-, нормо- и гиперагрегации тромбоцитов. Это позволило установить, что
- для состояния гипоагрегации тромбоцитов значения показателей ΔR, ΔK, ΔAngle и ΔМА варьируют от отрицательных значений до +11,1%, но не превышают последнее;
- для состояния нормоагрегации тромбоцитов характерны значения показателей ΔR, ΔK, ΔAngle и ΔМА в диапазоне от +11,1% до 22,0%, но не превышают последнее;
- для состояния гиперагрегации тромбоцитов значения показателей ΔR, ΔK, ΔAngle и ΔМА превышают величину 22,0%
Выявленные диапазоны величин показателей ΔR, ΔK, ΔAngle и ΔМА, характерные для состояний гипо-, нормо- и гиперагрегации тромбоцитов, статистически значимо различались между собой (для всех сравнений: р<0,05).
Основываясь на данных, параллельно полученных предлагаемым методом и методом лазерной агрегометрии, можно предложить применение определения показателей ΔR, ΔK, ΔAngle и ΔМА в качестве диагностического теста для оценки гемостатической активности тромбоцитов со следующей трактовкой изменений отдельных показателей:
- удлинение/укорочение показателя ΔR отражает чувствительность тромбоцитов к стимуляции индуктором;
- удлинение/укорочение показателя ΔK отражает влияние активированных тромбоцитов на процесс тромбообразования;
- увеличение/уменьшение показателя ΔAngle свидетельствует степени вовлечения тромбоцитов в процесс формирования сгустка, опосредованное, например, тромбоцитарной реакцией высвобождения;
- увеличение/уменьшение показателя ΔМА характеризует конечную степень участия только активированных тромбоцитов (из всего пула кровяных пластинок) в образовании сгустка.
При этом значения менее 11,1% в сочетании с увеличением значений показателей ΔAngle и ΔМА более чем на 22,0% свидетельствует об общем повышении способности кровяных пластинок к агрегации, о возрастании способности тромбоцитов участвовать в «реакции высвобождения» и, следовательно, о высоких потенциальных способностях клеток высвобождать в окружающую среду специфическое содержимое гранул тромбоцитов.
Удлинение величин показателей ΔR и ΔK более чем на 22,0% при том, что показатели ΔAngle и ΔМА либо увеличились не более чем на 11,1%, либо вообще продемонстрировали уменьшение вплоть до отрицательных величин, свидетельствует о противоположном эффекте, т.е. об общем снижении способности кровяных пластинок к агрегации, участию в образовании сгустка и формировании специфических свойств последнего.
Claims (1)
- Способ оценки гемостатической активности тромбоцитов, включающий регистрацию методом тромбоэластографии процесса образования сгустка в тромбоцитсодержащих средах, в котором берут тромбоцитсодержащие образцы биологических жидкостей, имеющих в своем составе фибриноген или другие высокомолекулярные коагулируемые тромбином белки, включая кровь, ее производные или продукты на ее основе, и с учетом различий в пробоподготовке, но без последующих различий в последовательности записи тромбоэластограммы, отличающийся тем, что оценивают гемостатическую активность тромбоцитов путем сравнения двух параллельно получаемых тромбоэластограмм от двух одинаково подготовленных проб или разделения на две части одной подготовленной пробы, регистрируют показатели тромбоэластограммы: R - время реакции, K - время образования сгустка, угол, кинетика образования сгустка, градусы, МА - максимальная амплитуда тромбоэластограммы, а затем производят сравнение одноименных данных в виде отношения, а именно результат в пробе с раствором кальция и раствором аденозиндифосфат к результату в пробе с раствором кальция, разведенным дистиллированной водой в соотношении 2:1.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015114358/15A RU2601111C1 (ru) | 2015-04-17 | 2015-04-17 | Способ оценки гемостатической активности тромбоцитов |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015114358/15A RU2601111C1 (ru) | 2015-04-17 | 2015-04-17 | Способ оценки гемостатической активности тромбоцитов |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2601111C1 true RU2601111C1 (ru) | 2016-10-27 |
Family
ID=57216398
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015114358/15A RU2601111C1 (ru) | 2015-04-17 | 2015-04-17 | Способ оценки гемостатической активности тромбоцитов |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2601111C1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2666945C2 (ru) * | 2016-12-21 | 2018-09-13 | Общество с ограниченной ответственностью "Меднорд-Техника" (ООО "Меднорд-Т") | Способ оценки агрегационной активности тромбоцитов |
| RU2824478C1 (ru) * | 2023-12-20 | 2024-08-08 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Курский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ оценки динамики тромбообразования при использовании гемостатических средств |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2205411C2 (ru) * | 2001-05-24 | 2003-05-27 | Алтайский государственный медицинский университет | Способ диагностики тромбофилии, обусловленной резистентностью фактора v к активированному протеину с |
| RU2213976C2 (ru) * | 2001-02-20 | 2003-10-10 | Нижегородский государственный научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии | Способ оценки агрегационных свойств тромбоцитов |
| RU2263471C2 (ru) * | 2002-12-27 | 2005-11-10 | Старостин Павел Юрьевич | Способ определения функционального состояния системы гемостаза лиц пожилого и старческого возраста |
| RU2391665C1 (ru) * | 2008-12-29 | 2010-06-10 | Общество с ограниченной ответственностью "ВИНТЕЛ" | Способ определения агрегационной активности тромбоцитов и устройство для его осуществления |
-
2015
- 2015-04-17 RU RU2015114358/15A patent/RU2601111C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2213976C2 (ru) * | 2001-02-20 | 2003-10-10 | Нижегородский государственный научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии | Способ оценки агрегационных свойств тромбоцитов |
| RU2205411C2 (ru) * | 2001-05-24 | 2003-05-27 | Алтайский государственный медицинский университет | Способ диагностики тромбофилии, обусловленной резистентностью фактора v к активированному протеину с |
| RU2263471C2 (ru) * | 2002-12-27 | 2005-11-10 | Старостин Павел Юрьевич | Способ определения функционального состояния системы гемостаза лиц пожилого и старческого возраста |
| RU2391665C1 (ru) * | 2008-12-29 | 2010-06-10 | Общество с ограниченной ответственностью "ВИНТЕЛ" | Способ определения агрегационной активности тромбоцитов и устройство для его осуществления |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| CERUTTI E. et al. Thromboelastogram monitoring in the perioperative period of hepatectomy for adult living liver donation // Liver. Transpl. 2004. Vol. 10. P. 289-;294.. ФЕДОРЕНКО О.А. и др. Особенности состояния системы гемостаза у беременных с гиперандрогенией. Сибирский медицинский журнал, 2010, Том 25, N 4, Выпуск 2, с. 80-83. ПАК Н. Л. и др. Состояние системы гемостаза у больных ишемической болезнью сердца после операции реваскуляризации миокарда, выполненной в условиях искусственного кровообращения и на работающем сердце. Креативная кардиология, N 2, 2011, с. 60-70. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2666945C2 (ru) * | 2016-12-21 | 2018-09-13 | Общество с ограниченной ответственностью "Меднорд-Техника" (ООО "Меднорд-Т") | Способ оценки агрегационной активности тромбоцитов |
| RU2824478C1 (ru) * | 2023-12-20 | 2024-08-08 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Курский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ оценки динамики тромбообразования при использовании гемостатических средств |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Goggs et al. | Serial assessment of the coagulation status of dogs with immune-mediated haemolytic anaemia using thromboelastography | |
| Konstantinidi et al. | Clinical application of thromboelastography/thromboelastometry (TEG/TEM) in the neonatal population: a narrative review | |
| Lordkipanidzé | Platelet function tests | |
| Hvas et al. | Platelet function tests: preanalytical variables, clinical utility, advantages, and disadvantages | |
| JP2023072032A (ja) | 凝固分析を使用した抗凝固剤の検出および分類 | |
| JP6526717B2 (ja) | 線維素溶解及び線溶亢進を検出するための方法及び試薬 | |
| Hofer et al. | Point-of-care assessment of platelet aggregation in paediatric open heart surgery | |
| JP7192944B2 (ja) | 血液凝固系解析装置、血液凝固系解析システム、血液凝固系解析方法、及び血液凝固系解析用プログラム、並びに、出血量予測装置、出血量予測システム、出血量予測方法、及び出血量予測用プログラム | |
| DeNotta et al. | Coagulation assessment in the equine patient | |
| CN108603888B (zh) | 血小板聚集活性分析设备、分析系统、分析程序和分析方法 | |
| AU2018307799A1 (en) | Methods and devices for detection of anticoagulants in plasma and whole blood | |
| Haines et al. | In vitro and in vivo assessment of platelet function in healthy dogs during administration of a low-dose aspirin regimen | |
| Mason et al. | The current role of platelet function testing in clinical practice | |
| Fauziah et al. | Electrolytes levels (na, K, cl) in serum stored at 4 C temperature | |
| Gant et al. | Abnormal platelet activity in dogs and cats–impact and measurement | |
| RU2601111C1 (ru) | Способ оценки гемостатической активности тромбоцитов | |
| Dimeski et al. | Is the BD barricor tube the new standard for lithium heparin plasma | |
| RU2666945C2 (ru) | Способ оценки агрегационной активности тромбоцитов | |
| Fries et al. | Point-of-care testing in critically ill patients | |
| RU2213976C2 (ru) | Способ оценки агрегационных свойств тромбоцитов | |
| RU2061953C1 (ru) | Способ количественного определения общей коагуляционной активности тромбоцитов | |
| JP2019060887A (ja) | 血液状態解析装置、血液状態解析システム、血液状態解析方法、および該方法をコンピューターに実現させるための血液状態解析プログラム | |
| RU2336525C2 (ru) | Способ определения агрегации тромбоцитов в плазме крови и времени ее коагуляции | |
| JP6239603B2 (ja) | 血液凝固の検査方法および装置 | |
| KR20140023260A (ko) | Cartilage Acidic Protein 1 단백질에 의한 뇌경색의 검사 방법 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170418 |