RU2566561C1 - Способ определения в кондитерских изделиях микроорганизмов, вырабатывающих липазы - Google Patents
Способ определения в кондитерских изделиях микроорганизмов, вырабатывающих липазы Download PDFInfo
- Publication number
- RU2566561C1 RU2566561C1 RU2014130859/10A RU2014130859A RU2566561C1 RU 2566561 C1 RU2566561 C1 RU 2566561C1 RU 2014130859/10 A RU2014130859/10 A RU 2014130859/10A RU 2014130859 A RU2014130859 A RU 2014130859A RU 2566561 C1 RU2566561 C1 RU 2566561C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- microorganisms
- colonies
- producing microorganisms
- lipase
- confectionery
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано для определения микроорганизмов, вырабатывающих липазы в кондитерских изделиях. Способ определения в кондитерских изделиях микроорганизмов, вырабатывающих липазы, предусматривает отбор пробы, приготовление из пробы исходного разведения пробы и ряда десятикратных разведений с последующим высевом в две параллельные чашки Петри. Посевы заливают питательной средой, содержащей пептон, хлорид натрия, хлористый кальций, агар, жировую эмульсию и краситель спиртовой синий в заданных соотношениях компонентов и инкубируют при температуре 30±1°С в течение 48±3 ч в аэробных условиях. После инкубирования посевов производят подсчет колоний типичных микроорганизмов, вырабатывающих липолитические ферменты, к которым относят колонии, имеющие вокруг и/или под ними синее окрашивание, и/или белое помутнение среды. 1 ил.
Description
Изобретение относится к пищевой промышленности, а именно к кондитерской отрасли, в частности к способам определения микроорганизмов, вырабатывающих липапзы в кондитерских изделиях.
Известен способ определения количества липолитических микроорганизмов в пищевой промышленности, в частности в молочных продуктах по MP 2.3.2.2327-08 «Методические рекомендации по организации производственного микробиологического контроля на предприятиях молочной промышленности (с атласом значимых микроорганизмов)» и метод с использованием питательной среды - Агар с трибутерином фирмы Himedia.
В соответствии с MP 2.3.2.2327-08 метод определения общего количества микроорганизмов, обладающих липолитической активностью (липолитических микроорганизмов), основан на подсчете колоний микроорганизмов, вырастающих на плотной питательной среде КМАФАнМ (ГОСТ 10444.15), залитой в чашки Петри на тонкий слой застывшего жира при 20-23°C в течение 5-6 сут и дающих зоны просветления вокруг колоний в результате разложения жира под действием липолитических ферментов.
Агар с трибутерином фирмы Himedia состоит из основы агара для липолитических микроорганизмов и трибутирина. Эта среда используется для определения и подсчета липолитических микроорганизмов в пищевых продуктах и других материалах. Посевы инкубируют при температуре 35-38°C в течение 24-48 ч. После инкубирования посевов подсчитывают количество типичных колоний, выросших на чашках Петри. Рост типичных липолитических микроорганизмов наблюдается в виде колоний, имеющих вокруг них изменение цвета и прозрачности среды.
Однако до настоящего времени применение известных в пищевой промышленности методов определения липолитических микроорганизмов не позволяет с достаточной достоверностью и точностью определять микроорганизмы, вырабатывающие липазы в кондитерских изделиях, поскольку использование известных приемов, режимов культивирования и питательных сред не позволяет выявить все микроорганизмы, вырабатывающие липазы в кондитерских изделиях - большинство микроорганизмов - типичных представителей микрофлоры кондитерских изделий не проявляют признаков роста или не образуют типичных для липолитических микроорганизмов колоний.
Технической задачей заявленного изобретения является создание способа, позволяющего визуально определить общее количество микрооорганизмов, вырабатывающих липазы в кондитерских изделиях.
Технический результат, достигаемый предлагаемым способом, заключается в том, что способ позволяет наиболее объективно и достоверно выявить количество микроорганизмов, вырабатывающих липазы в кондитерских изделиях.
Для достижения поставленной задачи способ направлен на определение в кондитерских изделиях микроорганизмов, вырабатывающих липазы, путем культивирования проб в условиях, позволяющих визуально выделить из общего количества микроорганизмов, содержащихся в кондитерских изделий, микроорганизмы, вырабатывающие липазы. Способ включает отбор пробы, приготовление исходного и ряда десятикратных разведений, высев в две параллельные чашки Петри из каждого разведения по 1 см3 и заливку питательной средой, содержащей пептон, хлорид натрия, хлористый кальций, агар, жировую эмульсию и краситель спиртовой синий, последующую инкубацию посевов при температуре (30±1)°C в течение (48±3) ч в аэробных условиях и подсчет колоний типичных микроорганизмов, к которым относят колонии, имеющие вокруг и/или под ними синее окрашивание, и/или белое помутнение среды.
Результаты подсчета количества колоний пересчитывают на 1 г (см3) кондитерского изделия по ГОСТ 26670.
Количество микроорганизмов в 1 г (см3) кондитерского изделия M вычисляют по формуле M=N/m*C, где N - степень разведения навески; m - количество инокулята, внесенное на чашку Петри, см3; С - округленное среднеарифметическое значение числа колоний.
Рост микроорганизмов, вырабатывающих липазы, наблюдается в виде колоний, имеющих вокруг них и/или под ними, либо синее окрашивание, либо белое помутнение среды, вызываемое продуктами разложения жиров (рис. 1).
В результате проведенных исследований разработанный способ определения в кондитерских изделиях микроорганизмов, вырабатывающих липазы, основан на способности продуктов разложения жиров снижать прозрачность среды, вступая в реакцию с солями, и изменять окраску среды в присутствии красителя.
Инкубацию посевов ведут при температуре (30±1)°C в течение (48±3) ч в аэробных условиях. Такой температурный и временной режим установлен в результате специфики микрофлоры исследуемых образцов (кондитерские изделия). Питательная среда содержит пептон, хлорид натрия, хлористый кальций, агар, жировую эмульсию и краситель спиртовой синий, компоненты подобраны с учетом специфики микрофлоры кондитерских изделий. Количественное соотношение компонентов 10:5:0,1:20:500:0,06
Способ осуществляют следующим образом.
Проводят отбор пробы кондитерского изделия способом, согласно ГОСТ Ρ 54004-2010 «Продукты пищевые. Методы отбора проб для микробиологических испытаний». Затем 10 г пробы кондитерского изделия ассептически переносят в 100 мл стерильной воды, тщательно перемешивают и готовят исходное и ряд десятикратных разведений согласно ГОСТ 26669 так, чтобы можно было определить в продукте предполагаемое количество микроорганизмов. Из каждого соответствующего разведения по 1 см3 высевают в две параллельные чашки Петри. Посевы заливают трехкомпонентной агаризованной питательной средой, содержащей пептон, хлорид натрия, хлористый кальций, агар, жировую эмульсию и краситель спиртовой синий. Количественное соотношение компонентов 10:5:0,1:20:500:0,06. Посевы инкубируют при температуре (30±1)°C в течение (48±3) ч в аэробных условиях. После инкубирования посевов отбирают чашки Петри, на которых выросло от 15 до 300 колоний и подсчитывают количество типичных колоний, выросших на чашках Петри. Рост типичных микроорганизмов, вырабатывающих липолитические ферменты, наблюдается в виде колоний, имеющих вокруг них и/или под ними, либо синее окрашивание, либо белое помутнение среды, вызываемое продуктами разложения жиров.
Результаты подсчета количества колоний пересчитывают на 1 г (см3) кондитерского изделия. Количество микроорганизмов в 1 г (см3) кондитерского изделия Μ вычисляют по формуле M=N/m × С.
Claims (1)
- Способ определения в кондитерских изделиях микроорганизмов, вырабатывающих липазы, путем отбора пробы, приготовления исходного и ряда десятикратных разведений, высева в две параллельные чашки Петри из каждого разведения по 1 см3 и заливки питательной средой, содержащей пептон, хлорид натрия, хлористый кальций, агар, жировую эмульсию и краситель спиртовой синий, при соотношении компонентов 10:5:0,1:20:500:0,06 соответственно, последующей инкубацией посевов при температуре 30±1°C в течение 48±3 ч в аэробных условиях и подсчета колоний типичных микроорганизмов, к которым относят колонии, имеющие вокруг и/или под ними синее окрашивание, и/или белое помутнение среды.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014130859/10A RU2566561C1 (ru) | 2014-07-25 | 2014-07-25 | Способ определения в кондитерских изделиях микроорганизмов, вырабатывающих липазы |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014130859/10A RU2566561C1 (ru) | 2014-07-25 | 2014-07-25 | Способ определения в кондитерских изделиях микроорганизмов, вырабатывающих липазы |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2566561C1 true RU2566561C1 (ru) | 2015-10-27 |
Family
ID=54362314
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014130859/10A RU2566561C1 (ru) | 2014-07-25 | 2014-07-25 | Способ определения в кондитерских изделиях микроорганизмов, вырабатывающих липазы |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2566561C1 (ru) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2148645C1 (ru) * | 1997-03-12 | 2000-05-10 | Институт цитологии и генетики СО РАН | Штамм бактерий serratia marcescens-продуцент липазы |
| US6177012B1 (en) * | 1999-04-14 | 2001-01-23 | Roebic Laboratories, Inc. | Enzyme-producing strain of bacillus bacteria |
| RU2308485C1 (ru) * | 2006-03-13 | 2007-10-20 | Закрытое акционерное общество научно-производственное предприятие "Биомедхим" (ЗАО НПП "Биомедхим") | Штамм бактерий serratia species - продуцент липазы |
| RU2397247C1 (ru) * | 2008-12-29 | 2010-08-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Воронежская государственная технологическая академия" | Способ биосинтеза липазы |
-
2014
- 2014-07-25 RU RU2014130859/10A patent/RU2566561C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2148645C1 (ru) * | 1997-03-12 | 2000-05-10 | Институт цитологии и генетики СО РАН | Штамм бактерий serratia marcescens-продуцент липазы |
| US6177012B1 (en) * | 1999-04-14 | 2001-01-23 | Roebic Laboratories, Inc. | Enzyme-producing strain of bacillus bacteria |
| RU2308485C1 (ru) * | 2006-03-13 | 2007-10-20 | Закрытое акционерное общество научно-производственное предприятие "Биомедхим" (ЗАО НПП "Биомедхим") | Штамм бактерий serratia species - продуцент липазы |
| RU2397247C1 (ru) * | 2008-12-29 | 2010-08-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Воронежская государственная технологическая академия" | Способ биосинтеза липазы |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| МР- 2.3.2.23.27.-08. Методические рекомендации по организации производственного микробиологического контроля на предприятиях молочной промышленности (с атласом значимых микроорганизмов). * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2014111125A (ru) | Способ получения штамма бактериофага, специфических штаммов бактериофагов и их применение | |
| CN102864204B (zh) | 一种用于禽蛋中沙门氏菌检测的增菌培养液 | |
| Kosel et al. | Evaluating the xerophilic potential of moulds on selected egg tempera paints on glass and wooden supports using fluorescent microscopy | |
| RU2566561C1 (ru) | Способ определения в кондитерских изделиях микроорганизмов, вырабатывающих липазы | |
| Uzeh et al. | Incidence and survival of Escherichia coli O157: H7 and Listeria monocytogenes on salad vegetables | |
| CN106350571B (zh) | 一种快速筛选治疗奶牛乳房炎的敏感性抗生素的方法 | |
| CN110885754B (zh) | 一种利用表面活性剂防治微藻培养过程中生物污染的方法 | |
| RU2711914C1 (ru) | Питательная среда для выделения и идентификации парагемолитических вибрионов (варианты) и способ её получения (варианты) | |
| RU2542390C1 (ru) | ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИБИОТИКОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ Legionella pneumophila | |
| Tuynenburg Muys et al. | The detection and enumeration of lipolytic microorganisms by means of a modified Eykman-plate method | |
| RU2484141C1 (ru) | Элективно-дифференциальная питательная среда для выделения холерных вибрионов (варианты) | |
| CN203451536U (zh) | 一种分格平板培养基 | |
| RU2767782C1 (ru) | Питательная среда для получения биомассы листерий | |
| CN105733974B (zh) | 选择性肠球菌增菌培养基 | |
| Antonić et al. | Antimicrobial activity of natural soaps tested by Bioscreen methodology | |
| RU2350648C1 (ru) | Способ оценки антагонистической активности пробиотиков на основе лиофилизированной биомассы анаэробных бактерий по отношению к патогенным микобактериям | |
| Hamzah | Isolation of some bacterial contamination of egg shell and yolk in Najaf governante | |
| RU2473697C2 (ru) | Способ дифференциации штаммов vibrio cholerae 0139 серогруппы по алкилсульфатозной активности | |
| RU2684721C1 (ru) | Питательная среда для определения днказной активности у патогенных грамположительных бактерий | |
| RU2257415C1 (ru) | Способ дифференциации атоксигенных штаммов холерных вибрионов от токсигенных | |
| CN106119164A (zh) | 一种用合成培养基分离培养禽结核分枝杆菌的方法 | |
| UA120725C2 (uk) | Спосіб визначення антибактеріальної активності меду відносно klebsiella pneumoniae | |
| RU2549681C1 (ru) | Способ получения питательной среды для определения в кондитерских изделиях микроорганизмов, вырабатывающих липазы | |
| Morimatsu et al. | Effect of temperature fluctuation on biofilm formation with bacterial interaction between Salmonella enterica and Pseudomonas putida | |
| Manna et al. | A study of growth and physiological characteristics of Malassezia furfur on indigenously developed Coconut milk agar medium |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160726 |