RU2549713C1 - ШТАММ АС25 ПОСТОЯННОЙ ГИБРИДОМНОЙ ЛИНИИ КЛЕТОК МЫШИ Mus. musculus-ПРОДУЦЕНТ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ К АНТИГЕНУ Н3 ВИРУСА ГРИППА ЛОШАДЕЙ - Google Patents
ШТАММ АС25 ПОСТОЯННОЙ ГИБРИДОМНОЙ ЛИНИИ КЛЕТОК МЫШИ Mus. musculus-ПРОДУЦЕНТ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ К АНТИГЕНУ Н3 ВИРУСА ГРИППА ЛОШАДЕЙ Download PDFInfo
- Publication number
- RU2549713C1 RU2549713C1 RU2013154660/10A RU2013154660A RU2549713C1 RU 2549713 C1 RU2549713 C1 RU 2549713C1 RU 2013154660/10 A RU2013154660/10 A RU 2013154660/10A RU 2013154660 A RU2013154660 A RU 2013154660A RU 2549713 C1 RU2549713 C1 RU 2549713C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- influenza virus
- strain
- monoclonal antibodies
- equine influenza
- antigen
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
- C12N5/12—Fused cells, e.g. hybridomas
- C12N5/16—Animal cells
- C12N5/163—Animal cells one of the fusion partners being a B or a T lymphocyte
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2510/00—Genetically modified cells
- C12N2510/02—Cells for production
Abstract
Данное изобретение относится к области ветеринарной биотехнологии. Предложен штамм постоянной гибридомной линии клеток мыши Mus.musculus. Продуцируемые штаммом моноклональные антитела специфичны к поверхностному гликопротеиду Н3 вируса гриппа лошадей H3N8 и не обладают кросс-реактивностью по отношению к антигенам вируса гриппа лошадей 1-го подтипа H7N7. Настоящее изобретение может найти применение в качестве "захватывающих" и детектирующих антител в иммуноферментном анализе при диагностике гриппа лошадей. 4 пр.
Description
Предлагаемое изобретение относится к области ветеринарной биотехнологии, в частности к гибридомной технологии, и касается получения моноклональных антител к антигену H3 вируса гриппа лошадей H3N8. Изобретение может быть использовано при создании диагностикумов и иммунохимических тест-систем для выявления поверхностных гликопротеидов (НА) вируса гриппа лошадей в биологических жидкостях.
Грипп лошадей - острое высококонтагиозное респираторное заболевание, характеризующееся поражением слизистых оболочек верхних дыхательных путей, лихорадкой, симптомами общей интоксикации, нарушением деятельности сердечно-сосудистой и нервной систем. Согласно классификации Международного комитета по таксономии вирусов вирус гриппа лошадей относится к семейству Orthomyxoviridae (от греч. orthos - прямой и греч. myxa - слизь), роду Influenzavirus А, виду Influenza A virus. Вирионы вируса гриппа представляют собой сферические частицы диаметром 80-120 нм, в центре находятся РНК-фрагменты, заключенные в липопротеидную оболочку, на поверхности которой имеются «шипы», состоящие из гемагглютинина (H или НА) и из нейраминидазы (N или NA). По антигенным вариантам поверхностных гликопротеидов H и N выделяют серотипы, два из которых H7N7 и H3N8 вызывают грипп лошадей. Однако в настоящее время эпизоотии гриппа лошадей обусловлены вирусом 2-го подтипа - H3N8, а вирус первого подтипа (H7N7) полностью элиминирован в популяции лошадей, либо эта инфекция протекает субклинически [1].
Гриппозная инфекция остается серьезной проблемой для коневодства, вызывая массовые вспышки респираторных заболеваний лошадей во всем мире. Заболевание наносит существенный ущерб коневодству вследствие снижения племенной и спортивной ценности переболевших животных, затрат на лечение, карантинных мероприятий, срыва планов спортивных соревнований и других экономически значимых причин.
Диагностика гриппа лошадей осуществляется по оценке наличия антител в сыворотках животных, при этом наиболее широко применяются серологические методы исследования, а именно реакция торможения гемагглютинации (РТГА) и одиночный радиальный гемолиз (ОРГ). С этой целью определения повышения уровня антител к вирусу гриппа лошадей исследуют парные пробные сыворотки крови, взятые у животных в первые дни болезни и спустя 2-3 недели. В настоящее время в серологической диагностике не используются методы, позволяющие выявлять возбудитель заболевания в начальный период инфекции до появления антител к вирусу гриппа лошадей, что снижает эффективность лечебных и профилактических мероприятий.
Для выявления антигенов вируса гриппа лошадей наибольшей чувствительностью и специфичностью обладают тест-системы, в основу которых положен принцип меченых антител - иммуноферментный анализ (ИФА). Использование моноклональных антител для приготовления конъюгатов антител с меткой позволяет повысить специфичность анализа, обеспечить большую достоверность и информативность анализа. Кроме того, методология постановки ИФА разработана для применения в массовых исследованиях.
В доступной нам литературе сведения о штаммах гибридомных культур клеток, продуцирующих моноклональные антитела к антигену Н3 вируса гриппа лошадей, не найдены.
В задачу наших исследований входило - получить штамм постоянной гибридомной линии клеток, обладающий in vitro высокой продукцией моноклональных антител к поверхностному гликопротеиду (Н3) вируса гриппа лошадей, которые можно использовать в качестве «захватывающих» и детектирующих антител в ИФА.
Способ получения предложенного штамма состоит в следующем.
Предлагаемый штамм гибридных клеток получен путем слияния клеток перевиваемой культуры миеломы мыши P3-X63-Ag-8. 653 с лимфоцитами селезенки мыши линии BALB/c, иммунизированной двукратным внутрибрюшинным и однократным внутривенным введением 100 мкг очищенного антигена вируса гриппа лошадей H3N8 штамма «А/лошадь 2/Битца/07».
На высоте иммунного ответа (через 3 дня после последней инъекции) провели слияние спленоцитов иммунизированных мышей с клетками мышиной миеломы линии P3-X63-Ag-8. 653.
Слияние клеток проводили по стандартной методике с использованием ПЭГ с м.м. 1500. Соотношение клеток миеломы и лимфоцитов составляло 1:4-1:10. Селекцию гибридом проводили на среде, содержащей гипоксантин, аминоптерин и тимидин. Гибридомы культивировали на 96-луночных панелях производства фирмы «Nunc» на среде RPMI-1640 с добавлением 10% сыворотки эмбрионов коров в атмосфере, содержащей 5% CO2.
Скрининг гибридом на продукцию специфических моноклональных антител проводили методом твердофазного ИФА с использованием аллантоисной жидкости, содержащей вирус гриппа лошадей двух подтипов: H7N7 и H3N8 («Equine 1/Prague» и «А/лошадь 2/Битца/07»). Клонирование и реклонирование клеточных культур проводили на 96-луночных панелях методом предельных разведений с использованием макрофагального фидерного слоя.
В результате был отобран и размножен клон клеток, продуцирующий моноклональные антитела к поверхностному гликопротеиду (Н3) вируса гриппа лошадей. Этот клон клеток был последовательно размножен в 96-, 24-луночных панелях, а затем в культуральных матрасах.
Культуральная жидкость была исследована на содержание специфических антител. Титр специфических антител в ИФА составлял 1:16-1:64. Препараты моноклональных антител получали трехкратным осаждением раствором сульфата аммония 50% насыщения с последующим диализом. Была определена видовая принадлежность и специфичность моноклональных антител методом ИФА.
Предложенный штамм обладает следующими свойствами.
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ПРИЗНАКИ. Клетки однородные, округлой формы с крупным овальным ядром, содержащим от 1 до 3, чаще 1-2 ядрышек. При посеве клетки равномерно распределяются на поверхности субстрата и в культуральной жидкости. Индекс пролиферации равен 5-6.
КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА. Клетки культивируют в среде RPMI-1640 с добавлением 10% сыворотки эмбрионов коров. Клетки размножаются в суспензии, частично прикрепляясь к поверхности пластикового культурального сосуда. Посевная концентрация 10000 клеток/см3 ростовой среды. Через 2-3 суток после образования суспензии, 80% культуральной жидкости удаляют вместе с находящимися в ней клетками. К оставшимся клеткам добавляют такой же объем свежей питательной среды, pH 7,2-7,4. Кратность рассева 1:5. Периодичность субкультивирования - 1 раз в 3-5 суток. При посевной концентрации 20000 клеток/см2 суспензия формируется через 2-3 суток. Индекс пролиферации равен 5-6.
КУЛЬТИВИРОВАНИЕ В ОРГАНИЗМЕ ЖИВОТНЫХ. Клетки вызывают образование асцитов у линейных мышей BALB/c, обработанных пристаном за 7-10 дней до внутрибрюшинного введения 2-10×106 клеток/мышь. Активность в ИФА асцитной жидкости составляет 1:1280-1:5120.
ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА. Штамм продуцирует моноклональные антитела к поверхностному гликопротеиду (HA) вируса гриппа лошадей H3, не имеющие перекрестной реактивности с поверхностным гликопротеидом (HA) вируса гриппа лошадей H7. Специфичность антител определяют в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) с использованием в качестве антигенов аллантоисной жидкости, содержащей вирус гриппа лошадей двух подтипов: H7N7 и H3N8 («Equine 1/Prague» и «А/лошадь 2/Битца/07»).
КОНТАМИНАЦИЯ. Контаминация простейшими, грибами, бактериями, микоплазмами, вирусами не выявлена.
ХРАНЕНИЕ КУЛЬТУР. Среда для замораживания: 70% среды RPMI-1640, 20% сыворотки эмбрионов коров, 10% диметилсульфоксида. Концентрация клеток в пластиковых криопробирках 1,5-2,0×106 клеток/см3 среды. Режим замораживания: до минус 70°C-1°/мин, далее - жидкий азот (минус 196°C). Восстановление после замораживания: быстрое размораживание при 37°C, центрифугирование при 1200 об/мин 10 мин, ресуспендирование в ростовой среде. Жизнеспособность после размораживания 70-80%.
Штамм используют при изготовлении диагностической тест-системы для выявления вируса гриппа лошадей H3N8 в биологических жидкостях.
Штамм гибридных клеток AC25 является постоянной линией клеток с неограниченным сроком жизни, пригодной для биотехнологии при наработке препаратов.
Свойства штамма и продуцируемых им моноклональных антител отражены в конкретных примерах.
Пример 1. Иммунологические свойства моноклональных антител. Специфичность антител определяют методом иммуноферментного анализа в планшетах, сенсибилизированных вирусом гриппа лошадей двух подтипов: H7N7 и H3N8 («Equine 1/Prague» и «А/лошадь 2/Битца/07»). В планшет вносят культуральную жидкость и инкубируют 1,5 часа при 37°C, вносят конъюгат антител против иммуноглобулина IgG мыши с пероксидазой (изготовленный предприятием по производству бакпрепаратов НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН), инкубируют в том же режиме и вносят субстратную смесь, содержащую перекись водорода и ТМБ. После развития окрашивания в течение 10 мин останавливают реакцию добавлением раствора серной кислоты и измеряют значения оптической плотности. Значения оптической плотности в лунках, сенсибилизированных вирусом гриппа лошадей 2-го подтипа «А/лошадь 2/Битца/07» и 1-го подтипа «Equine 1/Prague», составили соответственно 1,725 и 0,031. Отношение оптических плотностей, превышающее 55, свидетельствует о том, что моноклональные антитела взаимодействуют только с антигеном вируса гриппа лошадей 2-го подтипа (H3N8) и не обладают кросс-реактивностью по отношению к антигену вируса гриппа лошадей 1-го подтипа H7N7.
Пример 2. Культивирование штамма in vitro и количественная оценка продукции антител. Клетки штамма АС25 культивируют в стеклянных матрасах при температуре 37,0°C в питательной среде, состоящей из среды RPMI-1640 и 10% сыворотки крови эмбрионов коров, антибиотиков (пенициллина и стрептомицина по 500000 ЕД/дм3). Оптимальная плотность посадки 2×104 клеток на 1 см3 среды. Через 3-5 суток после образования суспензии культуральную жидкость частично удаляют и добавляют необходимое количество свежей питательной среды. Титр антител к антигену H3 вируса гриппа лошадей в культуральной жидкости в ИФА составил 1:64.
Пример 3. Культивирование в организме животных и количественная оценка продукции антител. Клетки штамма в дозе 2-10×106 клеток/мышь в 0,5 см3 фосфатно-солевого буфера вводили в брюшную полость линейных мышей BALB/c, которым предварительно за 7 суток ввели 0,3 см3 пристана. На 10-14 сутки получали асцитическую жидкость, титр специфических моноклональных антител к антигену Н3 вируса гриппа лошадей в которой составил в ИФА 1:2560.
Пример 4. Проведение иммуноферментного анализа с использованием моноклональных антител. Препараты моноклональных антител получали из асцитической жидкости трехкратным осаждением раствором сульфата аммония 50% насыщения с последующим диализом.
На первом этапе поверхность пластика панели для микротитрования сенсибилизировали за счет неспецифической адсорбции препаратом моноклональных антител к антигену H3 вируса гриппа лошадей, продуцируемых штаммом АС25, из раствора с концентрацией 10 мкг/см3 при pH 7,2-7,4. Инкубацию проводили в течение 16-20 часов при температуре 4°C.
Вносили контрольные и анализируемые образцы смывов из носовой полости и инкубировали в течение 1 час при температуре 37°C.
Избыток реагентов после каждой стадии сенсибилизации твердой фазы и проведения иммуноферментного анализа отмывали раствором детергента в фосфатно-солевом буферном растворе.
В качестве детектирующих антител использовали меченные пероксидазой глобулины петуха, иммунизированного вирусом гриппа лошадей 2-го подтипа. Связывание антител с пероксидазой из корней хрена проводили методом, разработанным Wilson, Nakane после активации фермента перйодатом натрия [2]. Инкубацию проводили в течение 1 часа при температуре 37°C.
Учет реакции проводили по изменению оптической плотности анализируемых образцов по сравнению с контрольными отрицательными образцами после добавления субстратной смеси, содержащей тетраметилбензидин (ТМВ) и перекись водорода H2O2. Положительными считали пробы, оптическая плотность которых в два и более раз превышала оптическую плотность отрицательного контроля.
При проведении исследования 25 проб смывов из носовой полости у животных в период инфицирования хозяйства установили, что вирус гриппа 2-го подтипа выявлен у 15 животных.
Предложенный штамм апробирован с положительным результатом в Государственном научном учреждении «Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени Я.Р.Коваленко Россельхозакадемии» (ГНУ ВИЭВ Россельхозакадемии) в 2013 году.
Технико-экономическое обоснование. Получен штамм АС25 гибридных клеток, продуцирующих моноклональные антитела к поверхностному гликопротеиду (НА) вируса гриппа лошадей H3N8, характеризующийся следующими полезными свойствами:
- является постоянной линией клеток с неограниченным сроком жизни, пригодной для биотехнологии при наработке препаратов;
- обладает высоким уровнем продукции моноклональных антител. Титры антител в нативной культуральной жидкости составляли 1:16-1:64, в асцитической жидкости 1:1280-1:5120 в иммуноферментном анализе;
- моноклональные антитела специфичны к поверхностному гликопротеиду (НА) вируса гриппа лошадей H3;
- моноклональные антитела не реагируют с поверхностным гликопротеидом (НА) вируса гриппа лошадей Н7;
- моноклональные антитела, фиксированные на твердой фазе, обеспечивают прочную фиксацию антигена вируса гриппа лошадей и специфичность иммуноферментного анализа при выявлении вируса гриппа лошадей H3N8 в биологическом материале;
Штамм АС25 депонирован в Специализированной Коллекции перевиваемых соматических клеточных культур сельскохозяйственных и промысловых животных РККК (СХЖ РАСХН) ВИЭВ под №86.
Штамм АС25-продуцент моноклональных антител к поверхностному гликопротеиду (НА) вируса гриппа лошадей H3N8 может найти применение при изготовлении иммуноферментной тест-системы для диагностики гриппа лошадей. Использование такой тест-системы позволит выявлять возбудитель заболевания в первые дни инфицирования до появления антител, что позволит повысить эффективность противоэпизоотических мероприятий, сократить сроки оздоровления коневодческих хозяйств, неблагополучных по гриппу лошадей.
Источники информации
1. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals. - 7th ed. Volumes 1 and 2, 2012. - xxxv + 1404p.
2. Книга "Immunofluorescence and related staining techniques" под ред. W. Knapp.- Elsevier: North-Holland Biomedical Press. - 1978. - P.215-221.
Claims (1)
- Штамм AC25 постоянной гибридомной линии клеток мыши Mus. musculus-продуцент моноклональных антител мыши к Н3 вируса гриппа лошадей, депонированный в Специализированной Коллекции перевиваемых соматических клеточных культур сельскохозяйственных и промысловых животных РККК (СХЖ РАСХН) ВИЭВ при Государственном научном учреждении «Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени Я.Р. Коваленко Россельхозакадемии» (ГНУ ВИЭВ Россельхозакадемии) г. Москвы под №86.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2013154660/10A RU2549713C1 (ru) | 2013-12-10 | 2013-12-10 | ШТАММ АС25 ПОСТОЯННОЙ ГИБРИДОМНОЙ ЛИНИИ КЛЕТОК МЫШИ Mus. musculus-ПРОДУЦЕНТ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ К АНТИГЕНУ Н3 ВИРУСА ГРИППА ЛОШАДЕЙ |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2013154660/10A RU2549713C1 (ru) | 2013-12-10 | 2013-12-10 | ШТАММ АС25 ПОСТОЯННОЙ ГИБРИДОМНОЙ ЛИНИИ КЛЕТОК МЫШИ Mus. musculus-ПРОДУЦЕНТ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ К АНТИГЕНУ Н3 ВИРУСА ГРИППА ЛОШАДЕЙ |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2549713C1 true RU2549713C1 (ru) | 2015-04-27 |
Family
ID=53289855
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2013154660/10A RU2549713C1 (ru) | 2013-12-10 | 2013-12-10 | ШТАММ АС25 ПОСТОЯННОЙ ГИБРИДОМНОЙ ЛИНИИ КЛЕТОК МЫШИ Mus. musculus-ПРОДУЦЕНТ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ К АНТИГЕНУ Н3 ВИРУСА ГРИППА ЛОШАДЕЙ |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2549713C1 (ru) |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101892200A (zh) * | 2010-03-18 | 2010-11-24 | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 | 抗h3n8亚型马流感病毒单克隆抗体及其用途 |
-
2013
- 2013-12-10 RU RU2013154660/10A patent/RU2549713C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101892200A (zh) * | 2010-03-18 | 2010-11-24 | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 | 抗h3n8亚型马流感病毒单克隆抗体及其用途 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
COOK R.F. et al., "Detection of influenza nucleoprotein antigen in nasal secretions from horses infected with A/equine influenza (H3N8) viruses." Journal of virological methods (1988); 20: 1-12. GANG LU et al., "Monoclonal Antibody 4F12 Against H3N8 Equine Influenza Virus", Monoclonal Antibodies in Immunodiagnosis and Immunotherapy (20 February 2013), 32(1): 70. * |
БАЙТУБАЕВ Н.Г., "Получение и применение моноклональных антител для диагностики гриппа лошадей", автореферат дис. на соиск. учен. степ. канд. вет. наук: 16.00.03 / Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени Я.Р. Коваленко (ВИЭВ) -М., 1992, 16с. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN103048459B (zh) | 检测呼吸道合胞病毒的免疫检测试剂 | |
CN102731615A (zh) | Prrsv的检测试剂和检测方法 | |
CN1286971C (zh) | 一种单克隆抗体,包含该单克隆抗体的检测试剂盒及应用 | |
CN113289027B (zh) | 一种通用型单克隆抗体耐热保护剂 | |
CN108103002B (zh) | Mdck细胞宿主残留蛋白的制备及其用途 | |
CN110724192B (zh) | 一株分泌蛇形菌素单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用 | |
CN102721812B (zh) | 检测嗜肾型鸡传染性支气管炎病毒及其抗体的间接elisa试剂盒 | |
CN101671655B (zh) | 一种艾滋病毒p24的单克隆抗体杂交瘤细胞及应用 | |
CN104744590B (zh) | 抗甲型h1n1猪流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体及双抗夹心elisa试剂盒 | |
CN104965083B (zh) | 一种检测h3n2亚型犬流感病毒的试剂盒 | |
RU2395576C1 (ru) | ШТАММ ГИБРИДНЫХ КЛЕТОК ЖИВОТНОГО Mus musculus L.1B2 - ПРОДУЦЕНТ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ НУКЛЕОПРОТЕИНА ВИРУСА ЭБОЛА, СУБТИП ЗАИР (ШТАММ Mainga) (ВАРИАНТЫ), МОНОКЛОНАЛЬНОЕ АНТИТЕЛО, ПРОДУЦИРУЕМОЕ ШТАММОМ (ВАРИАНТЫ), НАБОР ДЛЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОЙ ТЕСТ-СИСТЕМЫ ФОРМАТА "СЭНДВИЧ" ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ НУКЛЕОПРОТЕИНА ВИРУСА ЭБОЛА, СУБТИП ЗАИР (ШТАММ Mainga) | |
RU2549713C1 (ru) | ШТАММ АС25 ПОСТОЯННОЙ ГИБРИДОМНОЙ ЛИНИИ КЛЕТОК МЫШИ Mus. musculus-ПРОДУЦЕНТ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ К АНТИГЕНУ Н3 ВИРУСА ГРИППА ЛОШАДЕЙ | |
CN116338193A (zh) | 一种基于抗体捕获的非洲马瘟间接elisa抗体检测试剂盒及其应用 | |
RU2401300C1 (ru) | Клон гибридных клеток животных mus musculus l - продуцент моноклональных антител к холерному токсину | |
Krywienczyk et al. | Serological relationship of viruses from some lepidopterous insects | |
CN103508910B (zh) | β-兴奋剂类半抗原及其制备方法和应用 | |
RU2377299C1 (ru) | ШТАММ 5А10 ПОСТОЯННОЙ ГИБРИДОМНОЙ ЛИНИИ КЛЕТОК МЫШИ Mus. musculus - ПРОДУЦЕНТ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ К IgG КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА | |
TWI418786B (zh) | 抗禽流感h6n1亞型病毒血球凝集蛋白質之單株抗體及其製備與應用 | |
RU2535982C1 (ru) | Штамм культивируемых гибридных клеток животного mus musculus l. cchfv vd-1-продуцент моноклонального антитела 4g4/b6 к вирусу крым-конго геморрагической лихорадки | |
CN1311073C (zh) | 抗猪传染性胃肠炎重组n蛋白杂交瘤细胞株 | |
RU2528868C1 (ru) | ШТАММ КУЛЬТИВИРУЕМЫХ ГИБРИДНЫХ КЛЕТОК ЖИВОТНОГО MUS MUSCULUS L. CCHFV Vd-2-ПРОДУЦЕНТ МОНОКЛОНАЛЬНОГО АНТИТЕЛА 1E2/E5 К ВИРУСУ КРЫМ-КОНГО ГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ ЛИХОРАДКИ | |
RU2771288C1 (ru) | Штамм гибридных клеток животных Mus musculus 2E1B5 - продуцент моноклонального антитела к рецептор-связывающему домену белка S вируса SARS-CoV-2 | |
CN104804081B (zh) | 用于检测手足口病肠道病毒蛋白的单克隆抗体与试剂盒 | |
CN115975052B (zh) | 一种猪瘟病毒的融合蛋白及其应用 | |
RU2401303C1 (ru) | Клон гибридных клеток g10b6 животных mus musculus l - продуцент моноклональных антител к дифтерийному токсину |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20161211 |