RU2547593C2 - Способ размножения копеечника чайного (hedysarum theinum krasnob.) - Google Patents
Способ размножения копеечника чайного (hedysarum theinum krasnob.) Download PDFInfo
- Publication number
- RU2547593C2 RU2547593C2 RU2013138105/10A RU2013138105A RU2547593C2 RU 2547593 C2 RU2547593 C2 RU 2547593C2 RU 2013138105/10 A RU2013138105/10 A RU 2013138105/10A RU 2013138105 A RU2013138105 A RU 2013138105A RU 2547593 C2 RU2547593 C2 RU 2547593C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- tea
- trefoil
- tick
- bap
- reproduction
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Hydroponics (AREA)
Abstract
Изобретение относится к сельскохозяйственной биотехнологии. Изобретение представляет собой способ размножения копеечника чайного, где вызревшие простерилизованные семена копеечника чайного (Hedysarum theinum Krasnob.) высаживают на питательные среды Мурасиге-Скуга для введения в культуру ткани, через 20-30 суток развившиеся побеги пересаживают на среды размножения MS, затем образовавшиеся конгломераты микропобегов делят и пересаживают на среды, содержащие 1,0 БАП+L-глютамин и аденин сульфат 100 мг/л. Растения-регенеранты размножают, укореняют и адаптируют к нестерильным условиям. Изобретение позволяет повысить эффективность процесса, тиражируемости, адаптации в условиях гидропоники и получить стандартные саженцы копеечника чайного. 4 ил., 1 табл.
Description
Изобретение относится к сельскохозяйственной биотехнологии и может быть использовано для массового получения качественного посадочного материала лекарственного растения копеечника чайного.
Известны методы культивирования тканей in vitro (аналог) двух видов копеечника - копеечника забытого и копеечника альпийского (Ляпкова Н.С., Хадеева Н.В., Шаин С.С., Майсурян А.Н. Разработка методов культивирования тканей копеечника in vitro. Биотехнология, 1999, 1, С.55-61). Авторам удалось получить каллусные ткани листового, стеблевого и корневого происхождения, а также изолированные корни этих растений.
Культивирование недифференцированно растущих клеток растений не всегда гарантирует сохранение биосинтеза видоспецифичных соединений в условиях in vitro. Кроме того, выращивание клеточных культур, а также культивирование изолированных корней на питательной среде, содержащей фитогормоны, существенно ограничивает вероятность дальнейшего использования получаемой растительной массы и тем самым снижает ценность метода.
Наиболее близким к предлагаемому способу является «Культура корня Hed.th. (Hedysarum theinum Krasnob.) - продуцент изофлавонов» (Патент РФ №2360964 от 10.07.2009, Бюл. №19). Задача изобретения - получение культуры корня Hed.th., интенсивно растущей в условиях in vitro на безгормональных питательных средах, сохраняющей способность к синтезу изофлавонов, характерных для корней целого растения, и обладающей генетической и биохимической стабильностью, для контролируемого выращивания лекарственного сырья в любое время года.
Поставленная задача решалась созданием новой культуры корня Hedysarum theinum Krasnob., депонированной в Коллекции генетически трансформированных корней растений при Институте физиологии растений РАН - под обозначением Hed.th. - продуцента изофлавонов: ононина, гликозида тексазина, малонилононина, формононетина.
Недостатком данного метода является культивирование только корней, а наземная часть при этом отсутствует. Вегетативные органы также представляют лекарственную ценность и могут быть использованы.
Заявляемый способ размножения копеечника чайного методом культуры in vitro позволяет получить активно растущие растения-регенеранты с полноценными вегетативными органами и корневой системой.
Сущность способа размножения копеечника чайного (Hedysarum theinum Krasnob.) заключается в том, что используются вызревшие простерилизованные семена копеечника чайного, которые высаживают на питательные среды Мурасиге-Скуга (MS), не содержащие гормоны, через 20-30 суток развившиеся побеги пересаживают на среды размножения MS с добавлением 5 мкМ БАП (6-бензиламинопурина), 2,5 мкМ кинетина и 5 мкМ ГК, затем образовавшиеся конгломераты микропобегов делят и пересаживают на среды, содержащие 1,0 БАП+L-глютамин и аденин сульфат 100 мг/л. Микропобеги размножают и укореняют в последующих пассажах. После адаптации к нестерильным условиям получают стандартные саженцы копеечника чайного.
Способ реализуют следующим образом.
Перед стерилизацией семена копеечника чайного промывают под проточной водой в течение 15-25 минут. Стерилизацию проводят в условиях ламинар-бокса 0,1% раствором сулемы 10 минут. Затем трижды промывают стерильной дистиллированной водой. Этот способ стерилизации позволяет получить 70% эксплантов «стерильными» и жизнеспособными. Питательные среды для этапа введения в культуру ткани готовят по прописи Мурасиге-Скуга (MS), они не содержат гормоны, на них высаживают простерилизованные семена (Фиг.1. Побеги копеечника чайного на этапе введения в культуру ткани).
Через 20-30 суток развившиеся побеги пересаживают на среды размножения MS с добавлением 5 мкМ БАП (6-бензиламинопурина), 2,5 мкМ кинетина и 5 мкМ ГК (гибберелловой кислоты) (табл.1) для микроразмножения (Фиг.2. Микроразмножение копеечника чайного). Образовавшиеся конгломераты микропобегов легко делятся на одиночные, которые пересаживают на среды, содержащие 1,0 мкМ БАП+L-глютамин и аденин сульфат (100 мг/л). Для длительного получения активно пролиферирующей культуры необходимо использовать схему чередования сред с высоким и низким содержанием БАП через один пассаж. В результате чего получают стерильную культуру копеечника со стабильным коэффициентом размножения 3,3±0,4. Число побегов на один эксплант за один пассаж составляет от 2 до 15 штук. Укореняют побеги на среде Мурасиге-Скуга дополненной 3 мкМ НУК (α-нафтилуксусная кислота). Адаптацию растений-регенерантов копеечника чайного к нестерильным условиям проводят на гидропонной установке, используя ¼ минерального состава среды MS (Фиг.3.) Через 25-30 суток адаптации получают стандартные саженцы (Фиг.4. Растение-регенерант копеечника чайного после адаптации на гидропонной установке).
На основании теоретического расчета по формуле Bn=B1×G(n-1) (где n - количество месяцев культивирования, B1 - количество микропобегов, G - коэффициент размножения) от одного растения при данном способе культивирования можно получить за 12 месяцев до 159432 саженцев копеечника чайного, если коэффициент размножения равен 3,0.
Высокая эффективность процесса, тиражируемость, адаптация в условиях гидропоники определяют промышленную применимость предлагаемого способа.
| Таблица 1. | |||
| Влияние гормонального состава питательных сред и схемы культивирования на побегообразование у копеечника чайного | |||
| Гормональный состав питательной среды, мкМ, (№ среды) | Высота растений, мм | Коэффициент размножения | Примечание |
| 1,0 БАП+L-глютамин и аденин сульфат 100 мг/л (78) | 30,1±0,1 | 1,0 | рост в длину, гибель побегов 40% |
| 2,5 БАП (98) | 20,3±0,2 | 1,8±0,1 | гибель побегов 20% |
| 5 БАП+2,5 кинетина +5 ГК (204) | 30,7±0,2 | 2,5±0,5 | гибель побегов 20% |
| 5 БАП+1 НУК | 30±0,7 | 2,0±0,2 | гибели побегов 30% |
| Чередование сред 204 и 78 | 40,5±0,1 | 3,3±0,4. | стабильный рост и размножение |
Claims (1)
- Способ размножения копеечника чайного (Hedysarum theinum Krasnob.), включающий в себя культуру ткани, отличающийся тем, что используют семена копеечника чайного, которые высаживают на питательные среды Мурасиге-Скуга (MS), не содержащие гормоны, через 20-30 суток развившиеся побеги пересаживают на среды размножения MS с добавлением 5 мкМ БАП, 2,5 мкМ кинетина, 5 мкМ ГК (гибберелловой кислоты), образовавшиеся микропобеги делят и пересаживают на среды, содержащие 1,0 БАП+L-глютамин и аденин сульфат 100 мг/л, чередуют среды с высоким и низким содержанием БАП через один пассаж, укореняют побеги на среде MS, дополненной 3 мкМ НУК, адаптируют к нестерильным условиям на гидропонной установке с ¼ минерального состава среды MS.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013138105/10A RU2547593C2 (ru) | 2013-08-14 | 2013-08-14 | Способ размножения копеечника чайного (hedysarum theinum krasnob.) |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013138105/10A RU2547593C2 (ru) | 2013-08-14 | 2013-08-14 | Способ размножения копеечника чайного (hedysarum theinum krasnob.) |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2013138105A RU2013138105A (ru) | 2015-02-20 |
| RU2547593C2 true RU2547593C2 (ru) | 2015-04-10 |
Family
ID=53282102
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2013138105/10A RU2547593C2 (ru) | 2013-08-14 | 2013-08-14 | Способ размножения копеечника чайного (hedysarum theinum krasnob.) |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2547593C2 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107232056A (zh) * | 2017-06-19 | 2017-10-10 | 西北农林科技大学 | 一种茶树组培快繁体系的建立方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2360964C1 (ru) * | 2008-02-07 | 2009-07-10 | Институт Физиологии растений им. К.А. Тимирязева Российской Академии Наук | КУЛЬТУРА КОРНЯ Hed.th. (Hedysarum theinum Krasnob.) - ПРОДУЦЕНТ ИЗОФЛАВОНОВ |
-
2013
- 2013-08-14 RU RU2013138105/10A patent/RU2547593C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2360964C1 (ru) * | 2008-02-07 | 2009-07-10 | Институт Физиологии растений им. К.А. Тимирязева Российской Академии Наук | КУЛЬТУРА КОРНЯ Hed.th. (Hedysarum theinum Krasnob.) - ПРОДУЦЕНТ ИЗОФЛАВОНОВ |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ЛЯПКОВА Н.С., Разработка методов культивирования тканей копеечника in vitro, Биотехнология, N1, 1999, с.55-61. Новикова Т.И., Сохранение редких и полезных растений в коллекции in vitro Центрального Сибирского ботанического сада, Вестние ВОГиС, том 12, N4, 2008, с.564-572 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107232056A (zh) * | 2017-06-19 | 2017-10-10 | 西北农林科技大学 | 一种茶树组培快繁体系的建立方法 |
| CN107232056B (zh) * | 2017-06-19 | 2019-11-01 | 西北农林科技大学 | 一种茶树组培快繁体系的建立方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2013138105A (ru) | 2015-02-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Martínez-Estrada et al. | Temporary immersion improves in vitro multiplication and acclimatization of Anthurium andreanum Lind. | |
| Vijayakumar et al. | In vitro propagation of Bacopa monnieri L.-a multipurpose medicinal plant | |
| Batukaev et al. | Use of growth regulators in grapes grinding by in vitro method | |
| Xing et al. | Micropropagation of Rosa rugosa through axillary shoot proliferation | |
| KR100973839B1 (ko) | 노랑무늬붓꽃의 잎 절편을 이용한 캘러스의 대량증식방법및 노랑무늬붓꽃의 대량분화방법 | |
| CN102907326B (zh) | 德钦野生紫花苜蓿组培繁殖方法 | |
| CN101548646B (zh) | 一种通过体细胞胚及次生体细胞胚发生途径快繁龙牙楤木的方法 | |
| RU2547593C2 (ru) | Способ размножения копеечника чайного (hedysarum theinum krasnob.) | |
| CN102657098A (zh) | 樱桃砧木嫩茎段离体培养方法 | |
| David et al. | Preliminary results on the influence of growth hormones on the in vitro regeneration of Phalaenopsis flower stalks. | |
| Bist et al. | In vitro propagation of Aconitum balfourii Stapf: A rare medicinal herb of the alpine Himalayas | |
| Kapruwan et al. | Rapid in vitro propagation of the solid bamboo, Dendrocalamus strictus nees, through axillary shoot proliferation | |
| Radomir et al. | In vitro multiplication of Mentha piperita L. and comparative evaluation of some biochemical compounds in plants regenerated by micropropagation and conventional method | |
| JPS6258934A (ja) | 組織培養によるナガイモの大量増殖法 | |
| CN112931226A (zh) | 一种东方桤木组培快繁方法 | |
| RU2525676C2 (ru) | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛАПЧАТКИ БЕЛОЙ (Potentilla alba) | |
| CN105123522A (zh) | 一种广西美登木的组织培养快速繁殖方法 | |
| Singh et al. | Micro-propagation and bio-priming in pomegranate imperative for quality planting material | |
| Mishra et al. | Augmenting in vitro shoot multiplication by vipul (triacontanol) and adventitious rhizogenesis by rice bran extract in Dendrocalamus strictus | |
| Vaasa et al. | Preservation of the rare terrestrial orchids in vitro | |
| KR102653875B1 (ko) | 꼬리진달래의 액아를 이용한 기내 대량증식 배양 방법 | |
| Mahmoud et al. | In vitro micropropagation attempts of the high value spice saffron (Crocus sativus L.) | |
| Solangi et al. | Developing Micropropagation Protocols of Date Palm (Phoenix dactylifera L.) cv. Barhi Using Shoot Tip Explants | |
| RU2516341C2 (ru) | Способ получения растений-регенерантов земляники (in vitro) | |
| RU2815450C1 (ru) | Способ клонального микроразмножения секвойи вечнозеленой (Sequoia sempervirens L.) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180815 |