RU2506926C1 - Способ диагностики дирофиляриоза у животных и человека - Google Patents
Способ диагностики дирофиляриоза у животных и человека Download PDFInfo
- Publication number
- RU2506926C1 RU2506926C1 RU2012130662/13A RU2012130662A RU2506926C1 RU 2506926 C1 RU2506926 C1 RU 2506926C1 RU 2012130662/13 A RU2012130662/13 A RU 2012130662/13A RU 2012130662 A RU2012130662 A RU 2012130662A RU 2506926 C1 RU2506926 C1 RU 2506926C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- distilled water
- table vinegar
- dirofilariasis
- supernatant
- animals
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к способу диагностики дирофиляриоза на основе исследования крови. Способ диагностики дирофиляриоза у животных и человека включает исследование крови, высушивание и микроскопирование. Кровь животных или человека смешивают с раствором разведенного столового уксуса из расчета 1:5, причем столовый уксус разводят в дистиллированной воде из расчета 345 мл дистиллированной воды и 4,75 мл столового уксуса, размешивают смесь с последующим ее отстаиванием в темном холодном месте, центрифугируют. Затем сливают надосадочную жидкость, добавляя 2-3 капли метиленового синего и вновь центрифугируют. Надосадочную жидкость сливают, а осадочную жидкость переносят на предметное стекло, готовят мазок, который после высушивания фиксируют над пламенем горелки и окрашивают одновременно растворами из метиленовой сини по Леффлеру и по Цилю в разведении в дистиллированной воде в соотношении 1:1:18, затем высушивают мазок при комнатной температуре. Микроскопируют под увеличением (x1000) с иммерсией с определением вида возбудителя. Использование заявленного изобретения позволит ускорить процесс диагностики, сократить финансовые затраты и повысить достоверность за счет детальной идентификации возбудителя. 2 з.п. ф-лы.
Description
Изобретение относится к области ветеринарии и в частности может быть использовано для диагностики личинок кровепаразитов у животных и человека.
Известен способ диагностики сыворотки крови, которую отстаивают и сразу же исследуют. При этом микроскопию крови производят под небольшим (х100) увеличением микроскопа. Кровь забирается у обследуемого животного [1, 2].
Основным существенным недостатком известного способа является невозможность обнаружения паразитов при низкой степени инвазии, кроме того невозможно осуществить видовую идентификацию паразита.
Наиболее близким аналогом заявляемого технического решения является Способ диагностики кровепаразитов, заключающийся в том, что берут 1 мл венозной крови обследуемого животного и 10 мл 1% раствора уксусной кислоты, смешивают кровь в такой пропорции и центрифугируют в течение 5 минут при 1500 об/мин. Надосадочную жидкость смешивают, а осадок переносят на предметное стекло, где готовят мазок, высушивают при комнатной температуре, фиксируют в смеси Никифорова, окрашивают краской Романовского в течение 20-60 мин, промывают под проточной водой, высушивают и микроскопируют сначала по малым увеличением (х100), а при подозрении на паразита - по большим (х400) [3].
Основным существенным недостатком известного способа является невозможность определения личинок кровепаразитов при микроскопии без окрашивания препарата.
Основной задачей, решаемой настоящим Способом, является ускорение процесса диагностики, сокращение финансовых затрат и повышение достоверности за счет детальной идентификации возбудителя на разных стадиях заболевания.
Поставленная задача решается в изобретении за счет того, что смешивают кровь животных или человека, разведенного в столовом уксусе из расчета 1:5, за счет разведении реагентов в дистиллированной воде (столовый уксус, разводят в дистиллированной воде из расчета 345 мл дистиллированной воды и 4,75 мл столового уксуса.), размешивают смесь с последующим ее отстаиванием в темном холодном месте, центрифугируют ее, а затем сливают надосадочную жидкость, добавляя несколько капель метиленового синего и вновь центрифугируют ее, надосадочную жидкость сливают, а осадок переносят на предметное стекло, готовят мазок, который после высушивания, фиксируют над пламенем горелки и окрашивают одновременно растворами из метиленовой сини по Леффлеру (исследуемый материал наносили на чистые обезжиренные предметные стекла, растирали на воздухе, а затем фиксировали над пламенем горелки в течение 1-2 мин. На фиксированный препарат наносили метиленовый синий по Леффлеру и проводили окраску в течение 3 мин) и по Цилю (наносили несколько капель основного фуксина Циля на фиксированный мазок и окрашивали препарат в течение 1-3 мин.), в разведении в дистиллированной воде в соотношении 1:1:18, а затем высушивают мазок при комнатной температуре и микроскопируют под увеличением с иммерсией (×1000) с определением вида возбудителя.
Кроме того поставленная Задача решается в изобретении за счет того, что после второго центрифугирования, окрашивание мазка производят в течение 3 минут, а фиксацию препарата проводят в течение 10 секунд над пламенем спиртовки.
Заявителю из проведенного патентно-информационного поиска, а также из практики аналогичной диагностики дирофиляриоза у животных или человека в ветеринарии не было известно о существовании способа, с идентичными существенными признаками. Исходя из приведенных выше доводов, предлагаемый Способ обладает критерием новизны для изобретения.
Указанные выше существенные признаки в совокупности решают одну задачу с получением технического эффекта - ускорение процесса диагностики при сокращении затрат на химический реагент и повышение достоверности диагностики за счет детальной идентификации возбудителя на различных стадиях заболевания. При этом каждый из существенных признаков предлагаемого решения необходим, а вместе взятые достаточны для реализации поставленной задачи.
При этом также между совокупностью существенных признаков и решаемой задачи существует причинно-следственная связь; существенные признаки являются причиной для следствия в виде решения задачи.
Все это подтверждает вывод о том, что заявляемое техническое решение соответствует критерию «Изобретательский уровень». Предлагаемое в качестве изобретения техническое решение может реализовываться с присущей ему совокупностью существенных признаков многократно с получением одного и того же технического результата, что подтверждает соответствие критерия «промышленная применимость».
Данное решение апробировано на малом инновационном предприятии - Общество с ограниченной ответственностью научно-производственное предприятие «Центр паразитологии».
Ниже приводятся результаты апробации:
Пример: В центрифужной пробирке смешивают кровь животных с раствором разведенного столового уксуса из расчета 1:5 (где 1-1 мл отобранной крови, а 5-5 мл водного раствора столовой уксусной кислоты). Полученную смесь размешивали стеклянной палочкой и отстаивали в темном холодном месте 30 минут. Затем производили центрифугирование в 2 этапа: сначала центрифугировали смесь в течение 3 мин, а затем после слива надосадочной жидкости, к осадку добавляли 2-3 капли метиленового синего, и центрифугировали еще раз осадок в течение 3 мин. Затем надосадочную жидкость сливали и переносили осадок на предметное стекло, где готовили влажный мазок. Мазок высушивали и фиксировали над пламенем горелки (спиртовки) в течение 10 секунд. После фиксации окрашивали мазок растворами из метиленовой сини по Леффлеру (исследуемый материал наносили на чистые обезжиренные предметные стекла, растирали на воздухе, а затем фиксировали над пламенем горелки в течение 1-2 мин. На фиксированный препарат наносили метиленовый синий по Леффлеру и проводили окраску в течение 3 мин) и по Цилю (наносили несколько капель основного фуксина Циля на фиксированный мазок и окрашивали препарат в течение 1-3 мин.) одновременно, разведенными в дистиллированной воде в соотношении 1:1:18, высушивали окрашенный мазок при комнатной температуре и подвергали микроскопии под большим увеличением с иммерсией (x1000), определяя вид возбудителя, приобретавшего бледно-голубой цвет с четкими контурами и внутренним содержимым.
Было обследовано 536 служебных собак, в т.ч. 67 собак оказались инвазированными. Экстенсивность инвазии составила 12,5±1,4%.
Основные преимущества заявляемого решения по сравнению с прототипом является: использование разведенного столового уксуса менее токсично для экспериментатора, менее дорогостояще и более быстрое при постановке диагноза.
Источники информации
1. Архипов И.А., Архипова Д.Р. Дирофиляриоз, М., 2004., 194 стр.
2. Новикова Т. Лабораторная диагностика эндопаразитов у собак и кошек, Москва, Аквариум, 2005, С.98.
3. Методические указания «Профилактика дирофиляриоза» МУ 3.2.1880-04, Москва, Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава РФ, 2004.
Claims (3)
1. Способ диагностики дирофиляриоза у животных и человека, включающий исследование крови, высушивание и микроскопирование, отличающийся тем, что смешивают кровь животных или человека с раствором разведенного столового уксуса из расчета 1:5, причем столовый уксус разводят в дистиллированной воде из расчета 345 мл дистиллированной воды и 4,75 мл столового уксуса, размешивают смесь с последующим ее отстаиванием в темном холодном месте, центрифугируют, а затем сливают надосадочную жидкость, добавляя 2-3 капли метиленового синего, и вновь центрифугируют, надосадочную жидкость сливают, а осадочную жидкость переносят на предметное стекло, готовят мазок, который после высушивания фиксируют над пламенем горелки и окрашивают одновременно растворами из метиленовой сини по Леффлеру и по Цилю в разведении в дистиллированной воде в соотношении 1:1:18, затем высушивают мазок при комнатной температуре и микроскопируют под увеличением с иммерсией (x1000) с определением вида возбудителя.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что после второго центрифугирования окрашивание мазка производят в течение 3 мин.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что фиксацию препарата проводят в течение 10 с над пламенем спиртовки.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012130662/13A RU2506926C1 (ru) | 2012-07-17 | 2012-07-17 | Способ диагностики дирофиляриоза у животных и человека |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012130662/13A RU2506926C1 (ru) | 2012-07-17 | 2012-07-17 | Способ диагностики дирофиляриоза у животных и человека |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2506926C1 true RU2506926C1 (ru) | 2014-02-20 |
Family
ID=50113179
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2012130662/13A RU2506926C1 (ru) | 2012-07-17 | 2012-07-17 | Способ диагностики дирофиляриоза у животных и человека |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2506926C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2773944C1 (ru) * | 2021-12-06 | 2022-06-14 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Ростовский научно-исследовательский институт микробиологии и паразитологии" | Способ выявления видов возбудителей дирофиляриоза Dirofilaria repens и Dirofilaria immitis с помощью ПЦР в режиме реального времени |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
UA64513A (en) * | 2003-06-19 | 2004-02-16 | Ivan Stepanovych Dakhno | Method for diagnosing canine dirofilariasis in live animals |
RU2371145C2 (ru) * | 2007-08-15 | 2009-10-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Астраханский государственный университет" (АГУ) | Способ определения зараженности собак dirofilaria immitis |
-
2012
- 2012-07-17 RU RU2012130662/13A patent/RU2506926C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
UA64513A (en) * | 2003-06-19 | 2004-02-16 | Ivan Stepanovych Dakhno | Method for diagnosing canine dirofilariasis in live animals |
RU2371145C2 (ru) * | 2007-08-15 | 2009-10-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Астраханский государственный университет" (АГУ) | Способ определения зараженности собак dirofilaria immitis |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
Алтухов Н.М., Афанасьев В.И., Башкиров Б.А. и др. Справочник ветеринарного врача, 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Колос, 1996, с.293. * |
Есаулова Н.В., Акбаев М.Ш., Давыдова О.Е. и др. Диагностика и лечебно-профилактические мероприятия при дирофиляриозах плотоядных животных. Методические рекомендации. - М., 2007. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2773944C1 (ru) * | 2021-12-06 | 2022-06-14 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Ростовский научно-исследовательский институт микробиологии и паразитологии" | Способ выявления видов возбудителей дирофиляриоза Dirofilaria repens и Dirofilaria immitis с помощью ПЦР в режиме реального времени |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US10677796B2 (en) | Method for the quantification of parasite eggs in feces | |
RU2506926C1 (ru) | Способ диагностики дирофиляриоза у животных и человека | |
RU2683324C2 (ru) | Набор для комплексной диагностики эндопаразитов животных методом копроскопии | |
JP6358942B2 (ja) | エンドトキシンの測定用試薬及びエンドトキシンの測定方法 | |
RU2362995C1 (ru) | Способ диагностики кровепаразитарных инфекций | |
RU2298791C2 (ru) | Метод иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок | |
RU2638810C1 (ru) | Способ определения цист лямблий и ооцист криптоспоридий в клиническом материале, смывах с объектов окружающей среды, в почве | |
Nevill | Diagnosis of nontraumatic blood loss in birds and reptiles | |
RU2218565C1 (ru) | Способ диагностики кровепаразитарных заболеваний | |
RU2702989C1 (ru) | Способ диагностики гельминтозов у человека и животных | |
RU2810589C1 (ru) | Способ постановки реакции иммунофлюоресценции для диагностики лейкоза крупного рогатого скота | |
RU2783710C1 (ru) | Способ обнаружения возбудителя псевдотуберкулеза | |
RU2736806C2 (ru) | Способ диагностики сосудистого бактериоза крестоцветных методом дот-иммуноанализа | |
Chandra et al. | Acridine Orange Staining Technique-A Quick Diagnostic for Babesia gibsoni Infection | |
Gunasekara et al. | Utility of a modified silver staining technique for detection of Leptospira | |
RU2803893C1 (ru) | Ускоренный способ послеубойной диагностики лейкоза крупного рогатого скота с применением иммуноферментного анализа | |
RU2287154C2 (ru) | Способ диагностики токсоплазмоза у собак и кошек | |
Yucesan et al. | Molecular Detectıon of Canine Leishmaniasis in Northern Anatolia, Turkiye | |
RU2367607C1 (ru) | Способ определения иммунных комплексов у белых мышей в условиях стресса | |
Charaya et al. | Comparison of parasitological, serological and molecular diagnostic tests for detection of subclinical Trypanosomosis in two organised dairy herds | |
HAMMED et al. | New and ModifiedStaining TechniquesforRapid Diagnosis of Hemoparasites in Blood Smears of Cows | |
RU2595883C1 (ru) | СПОСОБ СЕРОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ЙЕРСИНИОЗА ЛОСОСЕВЫХ РЫБ, ВЫЗЫВАЕМОГО Yersinia ruckeri, МЕТОДОМ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА И ДИАГНОСТИЧЕСКИЙ НАБОР ДЛЯ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ СПОСОБА | |
RU2708990C1 (ru) | Способ прижизненной дифференциальной диагностики метацеркарий описторхид | |
RU1791454C (ru) | Способ диагностики болезни Марека | |
RU2120628C1 (ru) | Способ определения видов слизи в испражнениях телят и поросят |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140718 |