RU2506082C2

RU2506082C2 - Антигипотоническое средство

Info

Publication number: RU2506082C2
Application number: RU2011120567/15A
Authority: RU
Inventors: Андрей Александрович Мандругин; Татьяна Петровна Трофимова; Галина Сергеевна Борисова; Марина Владимировна Филимонова; Людмила Ивановна Шевченко; Виктория Михайловна Макарчук; Сергей Яковлевич Проскуряков
Priority date: 2011-05-24
Filing date: 2011-05-24
Publication date: 2014-02-10
Also published as: RU2011120567A

Abstract

Изобретение относится к антигипотоническим средствам солям 2-амино-5,6-дигидро-4Н-1,3-тиазина, которые могут быть использованы для создания лекарственных средств, предназначенных для лечения гипотензивных состояний, вызванных тяжелой кровопотерей. Предложены применение семи солей 2-амино-5,6-дигидро-4Н-1,3-тиазина общей формулы I

где НХ - HBr; 2-(АсО)С₆Н₄СООН; 2-(ОН)С₆Н₄СООН; СН₃(СН₂)₁₄СООН; 3,4-(ОМе)₂ С₆Н₃СН₂СООН; С₆Н₅СН₂СООН; НООССН₂СН₂СООН, в качестве антигипотонического средства, для лечения гипотензивного состояния, вызванного тяжелой кровопотерей, и фармакологическая композиция на ее основе того же назначения. Показано выраженное гипертензивное свойство у известного химического вещества в условиях тяжелой кровопотери. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 13 табл.

Description

Изобретение относится к новым лекарственным средствам, которые могут найти применение в медицинской практике при лечении хронических и острых гипотензивных состояний (кровотечение, травма, шок, отравление), особенно в скорой и неотложной медицинской помощи, так как оно может быть использовано для производства новых средств лечения хронической и острой гипотонии.

Изобретение направлено на удовлетворение жизненных потребностей человека - создание новых лекарственных средств, которые могут найти применение в химико-фармацевтической и медицинской промышленности.

В настоящее время в медицинской практике известны лекарственные средства гипертензивного действия, воздействующие либо непосредственно на гладкую мускулатуру сосудистой стенки, либо посредством стимуляции альфа-адренорецепторов. Обычно используют адреномиметики (адреналин, норадреналин, мезатон, эфедрин и др.) и препараты полипептидной природы (глюкагон, октапрессин, антиотенинамид и т.п.).

Главный недостаток препаратов с полипептидной структурой и большинства адреномиметиков заключается в короткой продолжительности их действия. Для пролонгирования действия препараты вводят в виде перфузии [I.M. Autkunson, S.I. Dusting, V.I. Rand, Aust. J. Exp. Biol. Med., V.50, p.847-859 (1972), "Acidosis induced by catecholamines in acidosis"].

По фармакологическим свойствам наиболее близким прототипом предлагаемым соединениям является известный лекарственный препарат мезатон.

Мезатон представляет собой гидрохлорид 1-(м-оксифенил)-2-метиламиноэтанола, Он селективно стимулирует альфагадренорецепторы, вызывая сужение артериол, повышает систолическое и диастолическое давление. Антигипотензивное действие мезатона длится около 20 минут после внутривенного введения (0.1-0.5 мл 1% раствора) [М.Д. Машковский. Лекарственные средства, 14-е изд., М.: Новая волна, 2000, часть 1, С.233; О.М. Авакян, Фармакологическая регуляция функции адренорецепторов, М., Медицина, 1988.С.8].

Мезатон и другие адреномиметики, имеют некоторые недостатки. Они действуют непродолжительно - всего лишь в пределах 20 минут, увеличивают потребление кислорода тканями, вызывают метаболический ацидоз, аритмии, возбуждение ЦНС. [О.М. Авакян. Фармакологическая регуляция функции адренорецепторов. М., Медицина, 1988, С.8; В.Г. Кулинский, А.Н. Ковалевский, Бюл. Эксперим. Биол. Мед., 1984, С.9 «Дуалистический контроль катехоламинами потребления кислорода организмом мышей»]. Для них характерно возникновение вторичной гипотензии. Кроме того, адреномиметики не корригируют артериальную гипотензию, вызванную адреноблокаторами и в условиях метаболического ацидоза имеют лишь слабый антигипотензивный эффект [C. Kortanje, V.I. Mathy, R. Chartdorp, Haunyn Gohinedeleg is Arh. Pharmakol., v.330, N 3, p.187, 1985, "Influence respiratory acidosis or alkalosis on response imediated by and alfa-adrenoreseptor in pithed normotensive rats", I.M. Autkunson, S.I. Dusting, V.I. Rand, Aust. J. ExpBiol. Med., v.50, p.847, 1972, "Acidjsis induced by catecholamines in acidosis"].

Ранее проведенные нами исследования по влиянию различных химических соединений на артериальное давление крови показали, что некоторые циклические изотиомочевины (производные тиазолина и тиазина) обладают способностью в той или иной мере повышать нормальное и пониженное артериальное давление, изменяемое в результате эндотоксического шока. Однако следует отметить, что они не обладают продолжительным гипертензивным действием и весьма токсичны. [С.Я. Проскуряков, Н.Г. Кучеренко, А.И. Тришкина и др., Бюл. Эксп. Биол и Мед., 2002, Т.134, №10, С.393-396, «NO-ингибирующая и вазотропная активность некоторых соединений, содержащих тиоамидиновую группу». С.Я. Проскуряков, М.В. Филимонова, Ю.Г. Верховский и др., Бюл. Эксп. Биол. и Мед., 2004, Т. 138, №10, С.446-449, «Влияние ингибитора NO-синтазы 2-АДТ на эндотоксининдуцированные изменения гемодинамики и дыхания крыс»].

Конечный результат предлагаемого изобретения заключается в увеличении длительности действия антигипотензивного средства и снижении его токсичности по сравнению с препаратами, применяющимися в медицинской практике для лечения гипотензивных состояний.

В результате проведенных нами исследований в этом направлении было обнаружено, что соли 2-амино-5,6-дигидро-4Н-1,3-тиазина формулы (I-VII) обладают выраженным антигипотоническим действием.

Сущность изобретения заключается в применении солей 2-амино-5,6-дигидро-4Н-1,3-тиазина формулы (Фиг.1) в качестве антигипотонического средства.

Перечень фигур

Фиг.1 - структурная формула:

где НХ=HBr; 2-(АсО)С₆Н₄СООН; 2-(ОН)С₆Н₄СООН; СН₃(СН₂)₁₄СООН; 3,4-(ОМе)₂ С₆Н₃СН₂СООН; С₆Н₅СН₂СООН; НООССН₂СН₂СООН;

Фармакологическая композиция для лечения гипотензивных состояний, содержащая действующее вещество и фармакологически приемлемый носитель, отличается тем, что в качестве действующего вещества она содержит фармакологически приемлемую соль 2-амино-5,6-дигидро-4Н-1,3-тиазина.

В частности, в качестве фармакологически приемлемой соли можно использовать гидробромид (I), салицилат (II), ацетилсалицилат (III), пальмитат (IV), 3,4-диметоксифенилацетат (V), фенилацетат (VI) и сукцинат (VII). Фармакологическая композиция, в частности, может быть предложена для лечения гипотензивного состояния, вызванного кровопотерей, травмой или шоком.

Найденные соединения менее токсичны, чем мезатон (ЛД₅₀ 191 мг/кг). Введение животным этих веществ не вызывает никаких видимых изменений со стороны частоты сердечных сокращений частоты дыхания на протяжении всего периода наблюдения. По длительности гипертензивного действия предлагаемые вещества превосходят мезатон и другие препараты, применяющиеся в медицинской практике для лечения гипотензивных состояний.

Выявленные эффекты показывают, что предлагаемые соединения отличаются от известных средств, которые применяются для повышения артериального давления. Использование их в медицинской практике создает новые возможности в лечении острых и, возможно, хронических артериальных гипотензий, а также в случаях неотложной и скорой помощи.

В доступной литературе эти соединения не описаны, что свидетельствует о том, что они получены нами впервые.

Синтез солей 2-амино-5,6-дигидро-4Н-1,3-тиазина.

Патентуются производные изотиомочевины, обладающие антигипотензивным действием, имеющие общую формулу

где НХ=HBr; 2-(АсО)С₆Н₄СООН; 2-(ОН)С₆Н₄СООН; 3,4-(ОМе)2С₆Н₃СН₂СООН; С₆Н₅СН₂СООН; СН₂(СН₂)₁₄СООН; НООССН₂СН₂СООН.

Спектры ЯМР ¹Н регистрировали на спектрометрах «Bruker CXP-200» с рабочей частотой 200.13 МГц и «Bruker CA-300» с рабочей частотой 400.13 МГц с использованием ТМС в качестве внутреннего стандарта. Температуру плавления определяли методом дифференциально-сканирующей калориметрии на приборе DSC-12E, фирмы Mettler Toledo, в интервале температур 50-300°С, при скорости нагрева V=10°С в минуту, навески образцов 3-5 мг. Контроль протекания реакций проводили с помощью тонкослойной хроматографии (ТСХ) на пластинах Silufol UV-254, хроматографическая система 1: бутанол-ацетон-муравьиная кислота (1:1:1), система 2: н-бутанол, насыщенный 12% бромистоводородной кислотой.

Пример 1. 2-Амино-5,6-дигидро-4H-1,3-тиазин гидробромид (I).

17.7 г (0,06 моль) дигидробромида S-(3-аминопропил)-изотиомочевины растворяют в 100 мл воды и кипятят в течении 30 часов, воду отгоняют и остаток перекристаллизовывают из бутанола-1. Получают 6.0 г (48%). Т пл. 134°С (Т пл. лит.134°С), Rf 0.33 (система 1), 0.37 (система 2). ¹Н ПМР (200 МГц, DMSO-d₆+CCl₄): 9.8 (ш.с, 1Н, NH⁺), 8.75 (ш.с, 2Н, NH₂), 3.5 (т, 2Н, CH₂-N, J=5.6), 3.25 (т, 2Н, CH₂-S, J=5.6), 2.16 (квинтет, 2Н, CH₂).

Для получения солей 2-амино-5,6-дигидро-4H-1,3-тиазина с другими кислотами проводят двухстадийный синтез. На первой стадии получают свободное основание 2-амино-5,6-дигидро-4H-1,3-тиазина, а затем в подходящих растворителях соли соответствующих кислот.

Пример 2. 2-амино-5.6-дигидро-4H-1.3-тиазин.

К раствору 0.493 г (2.5 ммоль) 2-амино-5,6-дигидро-1,3-тиазина гидробромида (I, 2-АДТ) в 6 мл дистиллированной воды и 10 мл хлороформа приливают раствор 0.1 г (2.5 ммоль) гидроксида натрия в 2 мл дистиллированной воды. Реакционная смесь перемешивается на магнитной мешалке 2 часа. Затем основание экстрагируют хлороформом (50-60 мл). Экстракт сушат сульфатом магния. Растворитель отгоняют на роторном испарителе. 2-Амино-5,6-дигидро-1,3-тиазин получают с выходом 70-80%. При использовании хлористого метилена в качестве растворителя выход не менее 6CH₂. 2-Амино-5,6-дигидро-1,3-тиазин сразу используют во второй стадии.

Пример 3. 2-Амино-5,6-дигидро-4H-1,3-тиазин салицилат (II).

К раствору 0.285 г (2.06 ммоль) салициловый кислоты в 20 мл этилового эфира при перемешивании на магнитной мешалке добавляют раствор 0.24 г (2.06 ммоль) 2-амино-5,66-дигидро-4H-1,3-тиазина в 20 мл эфира с добавлением 1 мл хлороформа. Образуется осадок, который перемешивают не менее 4 часов и оставили на 12 ч. Выпавшую в осадок соль отфильтровывают, промывая небольшим количеством эфира. Выход соли 0.48 г (91.4%). Т_пл.(DSC)=186.0°С (5 мг). ¹Н ПМР (400.13 МГц, DMSO-d₆): 9.5-10.5 (оч.ш.с, 3Н, NH₂, NH⁺); 14.1-14.7 (ш.с, 1Н, ОН); Ar: 6.68-6.73 (м, 2Н), 7.23 (т, 1Н), 7.71-7.74 (дд, 1Н); 3.4 (т, 2Н, CH₂-N), 3.2 (т, 2Н, CH₂-S), 2.03 (квинтет, 2Н, CH₂). C₁₁H₁₄N₂O₃S. Вычислено, %: С - 51.95; Н - 5.55; N -11.02. Найдено, %: С - 51.44; Н - 5.38; N - 10.92.

Пример 4. 2-Амино-5,6-дигидро-4H-1,3-тиазин ацетилсалицилат (III).

Соль ацетилсалициловой кислоты получают по методу, описанному в примере 3, исходя из 2.28 ммоль тиазина. Выход соли 0.44 г (65.2%). Т_пл.(DSC)=122.8°С (4 мг). ¹Н ПМР (200 МГц, DMSO-d₆+CCl₄): 9.5-11.5 (оч.ш.с.3Н, NH₂, NH⁺); Ar: 7.0 (д, 1Н), 7.2 (т, 1Н), 7.4 (т, 1Н), 7.9 (д, 1Н); 3.4 (т, 2Н, CH₂-N), 3.2 (т, 2Н, CH₂-S), 2.0 (квитет, 2Н, CH₂), 2.2 (с, 3Н, CH₂). C₁₃H₁₆N₂O₄S. Вычислено, %: С - 52.69; Н - 5.44; N - 9.45. Найдено, %: С - 52.05; Н - 4.95; N - 9.24.

Пример 5. 2-Амино-5,6-дигидро-4H-1,3-тиазин пальмитат (IV).

Соль пальмитиновой кислоты получают по методу, описанному в примере 3, исходя из 1.46 ммоль тиазина. Выход соли 0.3 г (55%). Т_пл.(DSC)=96.5°C (3 мг). ¹Н ПМР (200 МГц, DMSO-d₆+CCl₄): 8.9 (ш.с, 3Н, NH₂, NH₂), 3.4 (т, 2Н, CH₂-N), 3.1 (т, 2Н, CH₂-S), 2.03 (м, 4Н, CH₂-цикл, CH₂-СО₂Н), 1.5 (т, 2Н, CH₂), 1.3 (с, 24Н, (CH₂)₁₂), 0.9 (м, 3Н, CH₂). C₂₀H₄₀N₂O₂S. Вычислено, %: С - 64.46; Н - 10.82; N - 7.52. Найдено, %: С - 64.03, 64.25; Н - 11.03, 10.99; N - 7.37, 7.43.

Пример 6. 2-Амино-5,6-дигидро-4H-1,3-тиазин 3,4-диметоксифенилацетат (V).

Соль 3,4-диметоксифенилуксусной кислоты получают по методу описанному в примере 3, исходя из 4.0 ммоль тиазина. Выход соли 0.94 г (73%). Т_пл.(DSC)=165.1°С (3 мг). ¹Н ПМР (200 МГц, DMSO-d₆+CCl₄): 8.8-10.8 (оч.ш.с, 3Н, NH₂, NH₂); Ar: 6.82 (с, 1Н), 6.65-6.72 (д+д, 2Н); 3.80 (с, 3Н, OCH₂), 3.78 (с, 3Н, OCH₂), 3.38 (т, 2Н, CH₂-N), 3.12 (т, 2Н, CH₂-S), 2.0 (квинтет, 2Н, CH₂), 3.25 (с, 2Н, CH₂-Ar). C₁₄H₂₀N₂O₄S. Вычислено, %: С - 53.83; Н - 6.45; N - 8.97. Найдено, %: С - 54.10, 54.18; Н - 6.65, 6.70; N - 8.78, 8.81.

Пример 7. 2-Амино-5.6-дигидро-4H-1.3-тиазин фенилацетат (VI).

Соль фенилуксусной кислоты получают по методу, описанному в примере 3, исходя из 1.8 ммоль тиазина. Выход соли 0.38 г (83.3%). Т_пл.(DSC)=167.1°С (3 мг). ¹Н ПМР (200 МГц, DMSO-d₆+CCl₄): 8.3-10.3 (оч.ш.с, 3Н, NH₂, NH₂); Ar: 6.82 (с, 1Н), 6.65-6.72 (д+д, 2Н); 3.38 (т, 2Н, CH₂-N), 3.12 (т, 2Н, CH₂-S), 2.0 (квинтет, 2Н, CH₂), 3.25 (с, 2Н, CH₂-Ar). C₁₂H₁₆N₂O₂S. Вычислено, %: С - 57.12; Н - 6.38; N - 11.10. Найдено, %: С - 57.54, 57.46; Н - 6.58, 6.60; N - 11.09, 11.10.

Пример 8. 2-Амино-5,6-дигидро-4H-1.3-тиазин сукнинат (VII).

Соль янтарной кислоты получают по методу, описанному в примере 3, исходя из 2,75 ммоль тиазина. Выход соли 0.33 г (51.2%). Т_пл.(DSC)=161.0°C (4 мг). ¹H ПМР (200 МГц, DMSO-d₆+CCl₄): 8.5-6.7 (ш.с, 4Н, COOH, NH⁺, NH₂), 3.4 (т, 2Н, CH₂), 3.12 (т, 2Н, CH₂-S), 2.3 (с, 4Н, (-CH₂- CH₂-), 2.05 (квинтет, 2Н, CH₂). C₈H₁₄N₂O₄S. Вычислено, %: С - 41.01; Н - 6.02; N - 11.96. Найдено, %: С - 41.21, 41.06; Н - 6.20, 6.17; N - 11.87, 11.93.

Биологическое изучение свойств солей 2-амино-5,6-дигидро-4Н-1,3-тиазина

Опыты выполнены на 22 крысах - самцах Wistar массой 300-400 г (по 2-6 животных в группе). Каждую крысу наркотизировали тиопенталом натрия (60 мг/кг в/б) и регистрировали параметры частоты дыхательных движений (ЧДД), частоты сердечных сокращений (ЧСС), артериального давления в левой сонной артерии, систолического и диастолического (АДс и АДд), а также показатели электрокардиограммы в трех стандартных отведениях (ЭКГ).

Для создания гиповолемического шока из правой сонной артерии производили забор крови в объеме 2,5 мл на 100 г массы опытного животного. После стабилизации показателей повторяли регистрацию указанных параметров. Затем животному вводили внутрибрюшинно одно из исследуемых соединений производных изотиомочевины: I, II, III, IV или V в дозе 10, 20 или 30 мг/кг и продолжали наблюдение в течение 40 минут. Наблюдение за контрольными животными с кровопотерей и интактными животными (биологический контроль) продолжали в течение 120 минут.

Для мониторного контроля и обработки исследуемых физиологических параметров использовали прибор Polygraph RM-6000 (Nihon Kohden, Япония) и кардиограф (Nihon Kohden, Япония). Статистическую обработку результатов исследований (группы животных с кровопотерей без лечения и биологического контроля) проводили с использованием параметрических критериев: t - критерия Стьюдента и критерия Фишера и непараметрического U-критерия Манна - Уитни (прикладной пакет Statistica 5.5).

Примеры биологических экспериментов

Пример 9. Известно, что тяжелой (severe hemorrhage) считается кровопотеря 20-25 мл/кг или 1,5% от веса животного, умеренной (moderate hemorrhage) - 15 мг/кг или 0,7% [А.В.Саркисов, П.И.Ремезов. Воспроизведение болезней человека в эксперименте. / Под ред. А.А.Вишневского //М. - 1960. - 780 с. Feuerstein G., Mohamed А.В., Stull R., Goldstein D.S., Zerbe R.L., Ramwell P.W., Faden A.I. Effects of Nafazatrom on cardiovascular, sympathetic, and endocrine responses to hemorrhagic shock in conscious rats.// Circulatory Shock 17: 223-232 (1985). Tiniakov R., Osei-Owusu P., Scrogin K.E. The 5-HT1A receptor agonist? 8-OH-DPAT, increases cardiac output and renal perfusion in rats subject to hypovolemic shock // J Pharmacol Exp Ther November 2006: 1124-1135].

Использованная в работе экспериментальная модель (массивная и пролонгированная кровопотеря, 25 мл/кг) воспроизводит развитие крайне тяжелой степени геморрагического шока. Часть экспериментальных животных погибала на фоне замедления ЧСС и остановки дыхания уже во время кровопотери. Значительная часть животных гибнет после кровопотери в этой модели в течение первых двух часов. Так, в экспериментальной группе животных, не получавших лечения, к 120-й минуте наблюдения из 6 животных выжило только одно.

Очевидно, что течение столь тяжелого шока, а также степень эффективности его терапии существенно зависят от индивидуальных компенсаторных возможностей. Этим обстоятельством объясняются большие, в сравнении с исходными значениями и группой биологического контроля (табл.1, 2), величины разброса значений наблюдаемых параметров.

Массивная потеря крови (около 50% общего объема) и длительная гипотензия сопровождались развитием у животных уже к окончанию кровопотери глубоких гемодинамических нарушений. К этому моменту (табл.2) АД животных составляло не более 20% от исходного, ожидаемого компенсаторного повышения ЧСС у большинства животных не наблюдалось.

Внутрибрюшинное введение препарата V в дозах 10-30 мг/кг крысам (n=2-3) в состоянии глубокого геморрагического шока вызывало устойчивое и длительное повышение АДс и АДд (табл.3-5). Эффект развивался с первых минут после инъекции, мягко, без видимых изменений состояния животного. Через 20-30 минут значения АДс достигали 70-75%, АДд - 80-90% от исходных, в зависимости от дозы препарата. Частота пульса заметно увеличивалась. Частота и характер дыхания соответствовали физиологической норме. К 40 минуте после инъекции наблюдалась некоторая тенденция к снижению эффекта V.

Пример 10. Препарат IV в дозах 10 и 20 мг/кг в/б у крыс (n=1-2) в состоянии глубокого геморрагического шока вызывал устойчивое и длительное повышение АДс и АДд (табл.6-7), без видимых изменений состояния животного. К 20 - 30 минутам после введения препарата в дозе 20 мг/кг значения АДс достигали 70-85%, АДд - 90-10CH₂ от исходных. Частота пульса существенно увеличивалась. Частота и характер дыхания соответствовали физиологической норме. К 40 минуте после инъекции тенденции к снижению эффекта IV не наблюдалось.

Пример 11. Препарат III в дозе 10 мг/кг в/б у крыс (n=2) в состоянии глубокого геморрагического шока вызывал устойчивое и длительное повышение АДс и АДц (табл.8). Эффект развивался мягко, без видимых изменений состояния животного. Через 20-30 минут значения АДс достигали 70-75%, АДд - 85-90% от исходных. Частота пульса умеренно увеличивалась. Частота и характер дыхания соответствовали физиологической норме. К 40 минуте после инъекции тенденции к снижению эффекта III не наблюдалось.

Внутрибрюшинное введение III в дозе 30 мг/кг крысам (n=3) в состоянии глубокого геморрагического шока вызывало более выраженное и устойчивое увеличение показателей АДс и АДд (табл.9). Эффект развивался уже со 2 минуты после инъекции, без видимых изменений состояния животного. Показатели АДс у 2 животных из 3 в течение 5-20 минут практически соответствовали исходным, а показатели АДд у этих животных соответствовали исходным или превышали их после 5 минуты от инъекции и до окончания наблюдений. ЧСС животных постепенно увеличивалась и после 15 минут действия препарата III достигала исходных значений и даже превышала их. Дыхание крыс умеренно активизировалось без признаков одышки.

Пример 12. Препарат II в дозах 10 и 30 мг/кг в/б у крыс (n=2) в состоянии глубокого геморрагического шока вызывал умеренное устойчивое и длительное повышение АДс и АДц (табл.10-11), без видимых изменений состояния животного. К 20-30 минутам после введения препарата значения АД достигали 70-80% от исходных. Частота пульса существенно увеличивалась. Частота и характер дыхания соответствовали физиологической норме. К 40 минуте после инъекции тенденции к снижению эффекта II не наблюдалось.

Пример 13. Антигипотензивное действие препарата I, (10 мг/кг в/б, n=3) развивалось у крыс в состоянии геморрагического шока также через 1-2 минуты после инъекции (табл.12) без каких-либо внешних признаков проявления эффекта. Уже с 5 минуты действия 2-АДТ показатели АДс и АДд опытных животных значительно превышали показатели кровопотери. У 1 крысы из 3 показатели АДс к 10 минуте действия препарата соответствовали исходным, а показатели АДд оставались на уровне исходных данных с 5 минуты после инъекции и до окончания наблюдения. Частота пульса животных после введения I имела тенденцию к увеличению. Характер дыхания существенно не менялся. В целом после 10-15 минут действие препарата несколько ослабевало.

Введение животным в состоянии шока 30 мг/кг I (n=2) вызывало у них еще более выраженный антигиповолемический эффект (табл.13). Уже после 5 минут действия препарата показатели АД животных были в пределах физиологической нормы. После 30 минут антигиповолемический эффект I несколько ослабевал. Частота пульса обеих крыс под действием препарата умеренно увеличилась и оставалась на уровне 9CH₂ от исходных значений до окончания наблюдений. Частота и характер дыхания практически не менялись.

Доказательство достижения заявленного результата

В результате исследований производных изотиомочевины выявлены соединения, обладающие выраженной антигиповолемической активностью на модели геморрагического шока у крыс. Эффект развивался с первых минут после внутрибрюшинного введения (I, II, III, V), достигал 80-90% от исходных показателей АД к 7-10 минутам (I, II, III, V), либо к 15-20 минутам (IV) и продолжался не менее 40 минут (I) и более 40 минут (II, III, V)

Частота сердечных сокращений, сниженная в состоянии геморрагического шока, у большинства животных под действием указанных соединений имела устойчивую тенденцию к учащению.

Визуальных реакций у наркотизированных животных на введение исследованных соединений не наблюдалось, частота дыхания не изменялась Как видно из приведенных данных, антигипотоническое действие соединений (I, II, III, IV, V) в дозах 10-30 мг/кг продолжается не менее 40 мин, что значительно превосходит длительность действия мезатона и препаратов с полипептидной структурой.

Таким образом, установлено, что соединения I, II, III, IV, V обладают выраженным антигипотоническим действием и способны эффективно и достаточно длительно нивелировать критическое снижение артериального давления, вызванное тяжелой кровопотерей без возникновения вторичной гипотензии, что характерно для адреномиметиков, в том числе и для мезатона. Следует отметить, что эти соединения менее токсичны, чем мезатон.

Проведенные исследования достоверно свидетельствуют, что соединения I, II, III, IV, V могут применяться для лечения острых и хронических гипотензивных состояний.

По длительности гипертензивного действия предлагаемые вещества превосходят мезатон и другие препараты, применяющиеся в медицинской практике для лечения гипотонических состояний. Описана также фармацевтическая композиция на основе соединений I-V (Таблицы 1-13).

Таблица 1
Показатели гемодинамики и дыхания здоровых наркотизированных крыс (n=6)
Группы, время после введения Рецептуры	ЧСС (уд/мин)	АДс (мм рт.ст.)	АДд (мм рт.ст.)	ЧДД (мин)
Исходно	412.2±3.68	184.0+6.61	124.8+3.02	71.4±3.60
5 минут	422.8±4.65	182.6±7.62	125.0±3.80	73.8±3.29
10 минут	436.2±2.94	180.2±5.65	125.4±3.63	72.2±3.93
30 минут	438.8±6.64	177.4±4.95	125.2±3.44	74.4±3.19
60 минут	441.8±7.31	172.2±4.70	123.0±3.68	78.4±2.38
90 минут	448.6±9.77	168.4±4.42	119.4±3.98	81.6±1.91
120 минут	448.6±16.18	169.6±4.92	120.6±4.01	64.6±14.33
Примечание: n - количество животных

Таблица 2
Показатели гемодинамики и дыхания наркотизированных крыс после тяжелой кровопотери (n=6)
Группы, время после введения Рецептуры	ЧСС (уд/мин)	АДс (мм рт.ст.)	АДд (мм рт.ст.)	ЧДД (мин)
Исходно	395.0±8.51	179.3+3.90	130.2+3.38	60.3±4.07
После кровопотери
2 минуты	-	36.3±3,98*	21.8±2.44*	54.7±5.38
5 минут	335.3±19.85*	36.3±3.98*	21.8±2.44*	54.7±5.38
10 минут	346.7±9.66*	35.7±3.75*	20.0±2.89*	59.7±2.33
30 минут	325.2±17.42*	61.8±13.04*	28.0±9.01*	47.0±6.54
60 минут	343.2±11.96*	57.2±6.81*	33.8±4.53*	42.8±6.23*
90 минут	391.7±8.30	21.3±7.86*	7.3±3.28*	34.7±15.67
120 минут	405.0	26.0*	8.0	29.0
Примечание: * - достоверность различий с исходным значением по t-критерию Стьюдента (Р≤0,05); n - количество животных.

Таблица 3
Показатели гемодинамики и дыхания наркотизированных крыс после тяжелой кровопотери и введения препарата V в дозе 10 мг/кг (n=2)
Группы, время после введения рецептуры, мин	ЧСС (уд/мин)		АДс (мм рт.ст.)		АДд (мм рт.ст.)		ЧДД (мин)
Исходно	397.5±7.50		177.0+7.00		126.5+7. 50		62.0±2.00
После кровопотери
5	377.5±2.50		77.5±22.50		61.5±22.50		60.0±0.00
V, 10 мг/кг в/бр
2	-	97.0±49.00		77.0±47.00		-
5	342.5±42.50	127.5±76.50		98.0±64.00		59.0±7.00
10	348.5±51.50	123.0±76.00		95.0±68.00		55.5±9.50
20	390.0±10.00	164.0±23.00		137.5±20.50		60.0±0.00
30	376.5±23.50	111.0±46.00		87.0±50.00		49.0±9.00
40	417.5±17.50	137.0±6.00*		114.0±10.00		63.0±7.00
Примечание: n - количество животных,
*- достоверность различий с исходным значением по t-критерию Стьюдента р≤0,05

Таблица 4
Показатели гемодинамики и дыхания наркотизированных крыс после тяжелой кровопотери и введения препарата V в дозе 20 мг/кг (n=3)
Группы, время после введения рецептуры, мин	ЧСС (уд/мин)	АДс (мм рт.ст.)	АДд (мм рт.ст.)	ЧДД (мин)
Исходно	461.0±0.00	197.7+4.22	137.4+3.78	61.4±8.44
После кровопотери
5	326.4±6.89*	49.4±6.22*	31.7±4.44*	44.7±10.22
V, 20 мг/кг в/бр
2	-	92.67±16.89*	75.0±15.33*	-
5	374.4±27.56*	118.4±27.78*	97.4±20.44	48.7±11.11
10	437.4±15.78	147.0±17.33*	124.7±13.78	68.7±7.11
20	441.0±44.00	128.7±17.56*	109.7±15.56	43.4±9.78
30	458.5±41.50	107.7±28.44*	88.4±28.89	50.0±8.00
40	471.5±36.50	131.0±2.00*	112.5±1.50	62.5±0.50
Примечание: n - количество животных,
* - достоверность различий с исходным значением по t-критерию Стьюдента р≤0,05

Таблица 5
Показатели гемодинамики и дыхания наркотизированных крыс после тяжелой кровопотери и введения препарата V в дозе 30 мг/кг (n=2)
Группы, время после введения рецептуры, мин	ЧСС (уд/мин)	АДс (мм рт.ст.)		АДд (мм рт.ст.)	ЧДД (мин)
Исходно	435.0±0.00	207.0+3.00		144.0+7.00	78.0±0.00
После кровопотери
5	323.0±7.00*		64.0±4.00*	47.5±3.50*	72.0±4.00
V, 30 мг/кг в/бр
2	-		93.5±2.50*	77.0±1.00*	-
5	348.0±22.00		99.0±7.00*	81.5±4.50*	79.0±5.00
10	375.0±5.00*		133.5±3.50*	110.5±0.50*	66.0±14.00
20	378.0±12.00*		166.0±20.00	128.0±13.00	75.0±9.00
30	374.0±48.00		121.5±18.50*	100.0±14.00	61.0±15.00
40	435.0±0.00		162.5±11.50	128.5±7.50	62.5±14.50
Примечание: n - количество животных,
* - достоверность различий с исходным значением по t-критерию Стьюдента при р≤0,05

Таблица 6
Показатели гемодинамики и дыхания наркотизированных крыс после тяжелой кровопотери и введения препарата IV в дозе 10 мг/кг (n=1)
Группы, время после введения рецептуры, мин	ЧСС (уд/мин)	АДс (мм рт.ст.)	АДд (мм рт.ст.)	ЧДД (мин)
Исходно	429.0±0.00	192.0±0.00	130.0±0.00	65.0±0.00
После кровопотери
5	303.0±0.00	34.0±0.00	19.0±0.00	56.0±0.00
IV, 10 мг/кг в/бр
2	-	46.0±0.00	25.0±0.00
5	323.0±0.00	59.0±0.00	40.0±0.00	70.0±0.00
10	353.0±0.00	95.0±0.00	75.0±0.00	64.0±0.00
20	353.0±0.00	105.0±0.00	86.0±0.00	70.0±0.00
30	380.0±0.00	137.0±0.00	113.0±0.00	106.0±0.00
40	390.0±0.00	135.0±0.00	110.0±0.00	50.0±0.00
Примечание: n - количество животных

Таблица 7
Показатели гемодинамики и дыхания наркотизированных крыс после тяжелой кровопотери и введения препарата IV в дозе 20 мг/кг (n=2)
Группы, время после введения рецептуры, мин	ЧСС (уд/мин)	АДс (мм рт.ст.)	АДд (мм рт.ст.)		ЧДД (мин)
Исходно	476.5±7.50	193.0+0.00	131.0+6.00		67.0±7.00
После кровопотери
5	369.0±16.00*	49.5±8.50*	33.0±8.00*		61.0±9.00
IV, 20 мг/кг в/бр
2		100.0±27.00		79.5±24.50	-
5	375.0±4.00*	123.5±14.50*		100.0±10.00	53.5±11.50
10	434.5±49.50	174.0±4.00*		136.5±2.50	63.0±17.00
20	444.0±64.00	166.5±0.50*		135.0±6.00	64.0±14.00
30	454.0±54.00	157.0±4.00*		127.5±2.50	64.0±10.00
40	453.0±31.00	166.0±27.00		126.5±8.50	63.0±7.00
Примечание: n - количество животных
* - достоверность различий с исходным значением по t-критерию Стьюдента р≤0,05

Таблица 8
Показатели гемодинамики и дыхания наркотизированных крыс после тяжелой кровопотери и введения III в дозе 10 мг/кг в/б (n=2)
Группы, время после введения Рецептуры	ЧСС (уд/мин)	АДс (мм рт.ст.)	АДд (мм рт.ст.)		ЧДД (в минуту)
Исходно	422.0±0	169.5±19.50	108.5±15.50		52.0±2.00
После кровопотери
5 минут	350,0±11.0	42.5±2.50	26.0±5.00		58.0±4.00
III, 10 мг/кг в/бр
2 минуты		68.0±8.0		51.0±16.00
5 минут	337.5±11.50	68.0±4.0		51.5±1.50		64.0±6.00
10 минут	348.0±18.0	99.5±2.5		78.5±8.50		60.0±0
20 минут	356.0±19.0	124.0±4.0		93.5±13.50		57.0±1.00
30 минут	374.5±25.50	130.0±9.0		100.5±16.50		58.5±3.50
40 минут	385.5±19.50	133.5±10.5		104.0±18.00		58.0±3.00
Примечание: n - количество животных.

Таблица 9
Показатели гемодинамики и дыхания наркотизированных крыс после тяжелой кровопотери и введения III в дозе 30 мг/кг в/б (n=3)
Группы, время после введения рецептуры	ЧСС (уд/мин)	АДс (мм рт.ст.)	АДд (мм рт.ст.)	ЧДД (в минуту)
Исходно	429.7±19.80	171.0±20.00	120.7±13.60	62.7±8.50
После кровопотери
5 минут	387.0±16.00	45.0±4.00	27.7±3.60	75.7±16.20
III, 30 мг/кг в/бр
2 минуты	-	107.7±13.80	88.0±14.00	-
5 минут	380.0±0	132.0±26.7	105.0±22.00	77.4±13.80
10 минут	418.7±9.20	152.7±30.50	121.7±24.50	72.7±8.90
20 минут	426.7±9.60	147.4±26.30	119.7±24.50	75.0±16.70
30 минут	440.4±34.50	133.0±30.00	108.4±31.60	73.0±17.40
40 минут	433.7±38.90	130.4±47.6	104.7±43.20	72.0±13.40
Примечание: n - количество животных.

Таблица 10
Показатели гемодинамики и дыхания наркотизированных крыс после тяжелой кровопотери и введения препарата II в дозе 10 мг/кг (n=2)
Группы, время после введения рецептуры, мин		ЧСС (уд/мин)		АДс (мм рт.ст.)	АДд (мм рт.ст.)	ЧДД (мин)
Исходно		441.5±19.50		176.0+9.00	132.0+1.00	72.0±16.00
После кровопотери
5	331.5±5.50*		36.5±1.50*		21.0±2.00*	40.0±0.00
II, 10 мг/кг в/бр
2	-		69.5±22.50*		55.5±24.50
5	373.5±43.50		105.0±32.00		87.0±29.00	77.0±25.00
10	373.0±7.00		124.0±4.00*		97.0±4.00*	68.5±15.50
20	385.5±19.50		129.0±12.00		108.0±7.00	67.0±17.00
30	428.5±6.50		129.5±14.50		107.5±7.50	62.5±10.50
40	435.0±6.00		122.0±9.00		104.0±7.00	52.0±10.00
Примечание: n - количество животных
* - достоверность различий с исходным значением по t-критерию Стьюдента р≤0,05

Таблица 11
Показатели гемодинамики и дыхания наркотизированных крыс после тяжелой кровопотери и введения препарата II в дозе 30 мг/кг (n=2)
Группы, время после введения рецептуры, мин	ЧСС (уд/мин)		АДс (мм рт.ст.)		АДд (мм рт.ст.)		ЧДД (мин)
Исходно	402.5±32.50		197.5+6.50		128.5+3.50		71.0±5.00
После кровопотери
5	343.0±6.00	53.0±10.00*		34.5±13.50*		58.0±4.00
II, 30 мг/кг в/бр
2	-	95.5±16.50*		74.0±21.00		-
5	350.0±20.00	103.0±31.00		83.0±36.00		66.0±6.00
10	353.5±16.50	107.5±31.50		80.0±31.00		58.0±6.00
20	366.5±13.50	121.0±29.00		98.0±31.00		61.0±5.00
30	379.5±42.50	118.0±33.00		95.0±36.00		51.0±7.00
40	366.0±29.00	114.0±25.00		89.5±29.50		47.0±11.00
Примечание: n - количество животных
* - достоверность различий с исходным значением по t-критерию Стьюдента p≤0,05

Таблица 12
Показатели гемодинамики и дыхания наркотизированных крыс после тяжелой кровопотери и введения 2-АДТ, I, в дозе 10 мг/кг в/б (n=3)
Группы, время после введения рецептуры	ЧСС (уд/мин)	АДс (мм рт.ст.)		АДд (мм рт.ст.)	ЧДД (мин)
Исходно	397.0±26.70	191.7±19.20		131.3±5.78	66.0±4.00
После кровопотери
5 минут	381,7±24.50	42.0±5.40		27.7±2.22	58.7±7.11
I, 10 мг/кг в/бр
2 минуты	-		103.7±34.30	83.00±27.30
5 минут	366.3±22.50		126.4±23.80	101.0±20.67	58.7±7.55
10 минут	362.0±24.00		147.0±32.0	П3.0±17.33	52.7±3.11
20 минут	390.0±10.00		117.4±49.60	91.67±43.11	56.7±8.44
30 минут	396.4±21.80		122.0±45.40	97.00±37.33	57.7±9.11
40 минут	399.0±16.00		119.0±43.40	96.30±36.89	51.33±5.78
Примечание: n - количество животных.

Таблица 13
Показатели гемодинамики и дыхания наркотизированных крыс после тяжелой кровопотери и введения I в дозе 30 мг/кг в/б (n=2)
Группы, время после введения рецептуры	ЧСС (уд/мин)	АДс (мм рт.ст.)	АДд (мм рт.ст.)	ЧДД (мин)
Исходно	465.0±4.00	199.5±1.50	139.0±1.00	56.0±2.00
После кровопотери
5 минут	406.0±11.00	35.5±13.50	23.5±9.50	52.0±8.00
1,30 мг/кг в/бр
2 минуты	-	99.0±1.00	88.0±4.00	-
5 минут	366.0±0	130.0±11.00	114.5±12.50	52.0±4.00
10 минут	422.0±0	159.0±45.00	126.0±23.00	63.5±3.50
20 минут	422.0±0	153.0±29.00	126.0±16.00	56.0±6.00
30 минут	422.0±0	156.5±17.50	131.5±6.50	56.0±6.00
40 минут	422.0±0	140.5±9.50	118.0±1.00	57.0±5.00
Примечание: n - количество животных.

Claims

1. Применение соли 2-амино-5,6-дигидро-4Н-1,3-тиазина структурной формулы

где НХ-HBr (I); 2-(АсО)С₆Н₄СООН (II); 2-(ОН)С₆Н₄СООН (III); СН₃(СН₂)₁₄СООН (IV); 3,4-(ОМе)₂ С₆Н₃СН₂СООН (V); C₆H₅CH₂COOH (VI); HOOCCH₂CH₂COOH (VII) в качестве антигипотонического средства, для лечения гипотензивного состояния, вызванного тяжелой кровопотерей.

2. Фармакологическая композиция для лечения гипотензивных состояний, вызванных тяжелой кровопотерей, содержащая действующее вещество и фармакологически приемлемый носитель, отличающаяся тем, что в качестве действующего вещества она содержит фармакологически приемлемую соль 2-амино-5,6-дигадро-4Н-1,3-тиазина по п.1.

3. Фармакологическая композиция по п.2, отличающаяся тем, что в качестве фармакологически приемлемой соли она содержит гидробромид или ацетилсалицилат.