RU2502259C1 - Method of obtaining water-soluble bactericidal preparation - Google Patents

Method of obtaining water-soluble bactericidal preparation Download PDF

Info

Publication number
RU2502259C1
RU2502259C1 RU2012123787/10A RU2012123787A RU2502259C1 RU 2502259 C1 RU2502259 C1 RU 2502259C1 RU 2012123787/10 A RU2012123787/10 A RU 2012123787/10A RU 2012123787 A RU2012123787 A RU 2012123787A RU 2502259 C1 RU2502259 C1 RU 2502259C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
minutes
lysozyme
silver
range
water
Prior art date
Application number
RU2012123787/10A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2012123787A (en
Inventor
Ольга Юрьевна Голубева
Ольга Валерьевна Шамова
Наталия Юрьевна Терновая
Дмитрий Сергеевич Орлов
Владимир Николаевич Кокряков
Владимир Ярославович Шевченко
Елена Андреевна Корнева
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Ордена Трудового Красного Знамени Институт химии силикатов им. И.В. Гребенщикова Российской академии наук (ИХС РАН)
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины "Северо-Западного отделения Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НИИЭМ" СЗО РАМН)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Ордена Трудового Красного Знамени Институт химии силикатов им. И.В. Гребенщикова Российской академии наук (ИХС РАН), Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины "Северо-Западного отделения Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НИИЭМ" СЗО РАМН) filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Ордена Трудового Красного Знамени Институт химии силикатов им. И.В. Гребенщикова Российской академии наук (ИХС РАН)
Priority to RU2012123787/10A priority Critical patent/RU2502259C1/en
Publication of RU2012123787A publication Critical patent/RU2012123787A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2502259C1 publication Critical patent/RU2502259C1/en

Links

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

FIELD: chemistry.
SUBSTANCE: invention relates to field of biotechnology, in particular to bactericidal preparations with lysozyme activity. Water solutions of silver nitrate and lysozyme are mixed in specified ratio with obtaining reduced metal silver. Reduced metal silver is stabilized by addition of water gelatin solution in specified ratio. Obtained mixture is subjected to UV-irradiation with continuous mixing for 25-30 minutes, in the range of short-wave radiation 254 nm, for 25-30 minutes in the range of long-wave radiation 365 nm, for 55-60 minutes in the range of short-wave radiation 254 nm. Dialysis of processed mixture is carried out for 24-30 hours with continuous mixing with application of bidistilled water with further drying under vacuum.
EFFECT: invention makes it possible to obtain preparation which is non-toxic and stable in sodium chloride solution.
2 tbl, 3 ex

Description

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к бактерицидным препаратам с лизоцимной активностью, содержащим ферменты животного происхождения, и к способу их получения. Препарат может быть использован в медицине и ветеринарии в качестве аппликаций наружного применения, при лечении гнойно-септических осложнений ран, язв, пролежней, ожогов, бактериальных поражений слизистой глаз и полости рта, а также грибковых заболеваний. Его важным свойством является проявление активности как в отношении грамположительных, так и грамотрицательных микроорганизмов.The invention relates to the field of biotechnology, in particular to bactericidal preparations with lysozyme activity containing enzymes of animal origin, and to a method for their preparation. The drug can be used in medicine and veterinary medicine as applications for external use, in the treatment of purulent-septic complications of wounds, ulcers, bedsores, burns, bacterial lesions of the mucous membranes of the eyes and oral cavity, as well as fungal diseases. Its important property is the manifestation of activity against both gram-positive and gram-negative microorganisms.

Для оценки новизны и технического уровня изобретения рассмотрим ряд известных заявителю технических средств аналогичного назначения, характеризуемых совокупностью сходных с изобретением признаков, известных из сведений, ставших общедоступными до даты приоритета изобретения.To assess the novelty and technical level of the invention, we consider a number of technical means known to the applicant for a similar purpose, characterized by a combination of features similar to the invention, known from information that has become generally available before the priority date of the invention.

Использование лизоцима яичного белка в качестве бактериолитического фермента известно в медицине, см. Подборнов В.М. Сравнительная характеристика лизоцимов разного происхождения. - Антибиотики и химиотерапия, 1990, т.35, N 8, с 22-25.The use of egg white lysozyme as a bacteriolytic enzyme is known in medicine, see V. Podbornov Comparative characteristics of lysozymes of different origin. - Antibiotics and chemotherapy, 1990, T. 35, N 8, p. 22-25.

К недостаткам использования лизоцима можно отнести узкий спектр его действия, так как он не оказывает литического действия на целый ряд микроорганизмов, в том числе и патогенных. В частности, он действует только против грамположительных бактерий.The disadvantages of using lysozyme include a narrow spectrum of its action, since it does not exert a lytic effect on a number of microorganisms, including pathogenic ones. In particular, it acts only against gram-positive bacteria.

Кроме того, антибиотическая активность природных антимикробных пептидов и белков, в том числе и лизоцима, в средах с повышенной концентрацией хлорида натрия снижается, что особенно неблагоприятно при использовании препаратов, в состав которых входят подобные полипептиды, при поражениях кожи, так как на поверхности кожи концентрация хлорида натрия на порядок превышает таковую в плазме крови.In addition, the antibiotic activity of natural antimicrobial peptides and proteins, including lysozyme, in environments with a high concentration of sodium chloride is reduced, which is especially unfavorable when using preparations containing these polypeptides in case of skin lesions, since the concentration on the skin surface sodium chloride is an order of magnitude higher than that in blood plasma.

Известен препарат для профилактики и лечения инфекционных болезней животных и человека (патент РФ №2169573), включающий лизоцим яичного белка и микробный лизоцим при соотношении ингредиентов 1:1-2 по активности.Known drug for the prevention and treatment of infectious diseases of animals and humans (RF patent No. 2169573), including egg white lysozyme and microbial lysozyme with a ratio of ingredients of 1: 1-2 in activity.

В известном препарате в качестве исходного продукта использован лизоцим яичного белка. Недостаток лизоцима яичного белка как исходного продукта для изготовления препарата для профилактики и лечения инфекционных болезней заключается в том, что его активность проявляется в отношении инфекций, вызываемых грамположительными бактериями. Кроме того, он не может быть использован для лечения гнойно-септических осложнений ран, язв, пролежней, ожогов, бактериальных поражений слизистой глаз и полости рта, а также грибковых заболеваний и инфекций, вызванных грамотрицательными бактериями.In the known preparation, egg white lysozyme is used as the starting product. The disadvantage of egg white lysozyme as a starting product for the manufacture of a drug for the prevention and treatment of infectious diseases is that its activity is manifested in relation to infections caused by gram-positive bacteria. In addition, it cannot be used to treat purulent-septic complications of wounds, ulcers, bedsores, burns, bacterial lesions of the mucous membranes of the eyes and oral cavity, as well as fungal diseases and infections caused by gram-negative bacteria.

Известен способ получения водорастворимой бактерицидной композиции (повиаргола), содержащей высокодисперсное металлическое серебро, стабилизированное защитным полимером. Композиция получена путем восстановления ионного серебра в водных растворах при нагревании с последующей сушкой. Восстановление ионного серебра ведут в атмосфере инертного газа при взаимодействии 0,025-29,73 мас. раствора нитрата серебра с 5,0-38,6 мас. водным раствором этилового спирта, содержащим 0,065-11,0 мас. поли-N-винилпирролидона-2, при этом реакцию проводят в темноте с нагреванием до 65-75°С (патент РФ №2088234).A known method of obtaining a water-soluble bactericidal composition (poviargol) containing highly dispersed metallic silver stabilized with a protective polymer. The composition was obtained by reducing ionic silver in aqueous solutions by heating, followed by drying. Reduction of ionic silver is carried out in an inert gas atmosphere with the interaction of 0.025-29.73 wt. silver nitrate solution with 5.0-38.6 wt. an aqueous solution of ethyl alcohol containing 0,065-11,0 wt. poly-N-vinylpyrrolidone-2, while the reaction is carried out in the dark with heating to 65-75 ° C (RF patent No. 2088234).

Этот способ выбран в качестве прототипа заявляемого технического решения. Недостатком прототипа является то, что он не обеспечивает полное восстановление ионного серебра. Наличие ионного серебра в полученной водорастворимой бактерицидной композиции определяет токсичность полученного препарата и нестабильность в растворе хлорида натрия.This method is selected as a prototype of the claimed technical solution. The disadvantage of the prototype is that it does not provide full recovery of ionic silver. The presence of ionic silver in the resulting water-soluble bactericidal composition determines the toxicity of the resulting preparation and the instability in the sodium chloride solution.

На практике стабильность антимикробных препаратов в присутствии хлорида натрия является необходимым условием их эффективности, поскольку в организме человека хлорид натрия присутствует в широком диапазоне концентраций в различных биологических жидкостях. Стабильность серебросодержащих препаратов при контакте с биологическими жидкостями также невысока. При их практическом применении в присутствии хлорида натрия происходит образование осадка, что не позволяет этим препаратам равномерно распределяться в жидкостях и тканях организма, что снижает их эффективность.In practice, the stability of antimicrobials in the presence of sodium chloride is a prerequisite for their effectiveness, since in the human body sodium chloride is present in a wide range of concentrations in various biological fluids. The stability of silver-containing preparations in contact with biological fluids is also low. With their practical use in the presence of sodium chloride, a precipitate forms, which does not allow these drugs to be evenly distributed in body fluids and tissues, which reduces their effectiveness.

Задачей изобретения является создание способа получения нетоксичного, стабильного в растворе хлорида натрия бактерицидного препарата с расширенным спектром действия за счет обеспечения его активности по отношению к грамотрицательным бактериям, обеспечивающим повышение эффективности лечения гнойно-септических осложнений ран, язв, пролежней, ожогов, бактериальных поражений слизистой глаз и полости рта.The objective of the invention is to provide a method for producing a non-toxic, stable in solution sodium chloride bactericidal drug with an extended spectrum of action by ensuring its activity against gram-negative bacteria, which increases the effectiveness of the treatment of purulent-septic complications of wounds, ulcers, bedsores, burns, bacterial lesions of the eye mucosa and the oral cavity.

Сущность изобретения как технического решения выражается в следующей совокупности существенных признаков, достаточной для достижения указанного выше обеспечиваемого изобретением технического результата.The invention as a technical solution is expressed in the following set of essential features, sufficient to achieve the above technical result provided by the invention.

Способ получения водорастворимого бактерицидного препарата, включающий смешение исходных компонентов, с последующей стабилизацией металлического серебра полимером путем восстановления ионного серебра в водных растворах с последующей сушкой, характеризуется тем, что восстановление ионного серебра в водном растворе ведут при взаимодействии нитрата серебра, лизоцима и желатина при следующем соотношении компонентов, мас.%: лизоцим 0,043-0,045, нитрат серебра - 0,073-0,085, желатин 0,071-0,080, вода - остальное, после чего полученную смесь подвергают чередующемуся воздействию УФ-облучения, затем проводят диализ и сушку под вакуумом.A method of obtaining a water-soluble bactericidal preparation, including mixing the starting components, followed by stabilization of metallic silver by polymer by reducing ionic silver in aqueous solutions, followed by drying, characterized in that the reduction of ionic silver in an aqueous solution is carried out by the interaction of silver nitrate, lysozyme and gelatin in the following ratio components, wt.%: lysozyme 0.043-0.045, silver nitrate - 0.073-0.085, gelatin 0.071-0.080, water - the rest, after which the resulting mixture is subjected to black blowing UV-irradiation, then dialyzed and drying under vacuum.

Заявленное техническое решение характеризуется также наличием ряда факультативных признаков, а именно:The claimed technical solution is also characterized by the presence of a number of optional features, namely:

- полученную смесь исходных компонентов подвергают УФ-облучению при непрерывном перемешивании в течение 25-30 минут, в диапазоне коротковолнового излучения 254 нм, затем в течение 25-30 минут в диапазоне длинноволнового излучения 365 нм и 55-60 минут в диапазоне коротковолнового излучения 254 нм, а диализ обработанной смеси проводят в течение 24-30 часов при непрерывном перемешивании.- the resulting mixture of the starting components is subjected to UV irradiation with continuous stirring for 25-30 minutes, in the range of short-wave radiation of 254 nm, then for 25-30 minutes in the range of long-wave radiation of 365 nm and 55-60 minutes in the range of short-wave radiation of 254 nm and dialysis of the treated mixture is carried out for 24-30 hours with continuous stirring.

Наличие наночастиц серебра позволяет усилить бактерицидную способность лизоцима и получить водорастворимый бактерицидный препарат, обладающий активностью по отношению к грамотрицательным бактериям. Введение желатина позволяет стабилизировать серебро в форме наночастиц и улучшить активность получаемого препарата в растворах NaCl.The presence of silver nanoparticles makes it possible to enhance the bactericidal ability of lysozyme and to obtain a water-soluble bactericidal preparation with activity against gram-negative bacteria. The introduction of gelatin makes it possible to stabilize silver in the form of nanoparticles and improve the activity of the resulting preparation in NaCl solutions.

В таблице 1 приведены примеры составов исходного продукта для получения водорастворимого бактерицидного препарата.Table 1 shows examples of the compositions of the starting product to obtain a water-soluble bactericidal preparation.

Таблица 1Table 1 Название компонентовComponent Name Составы исходного продукта для получения препарата, мас.%The composition of the starting product to obtain the drug, wt.% 1one 22 33 4four 55 лизоцимlysozyme 0.0430.043 0.0440.044 0.0430.043 0.0420.042 0.0460.046 желатинgelatin 0.0710.071 0.0730.073 0.0740.074 0.0710.071 0.0710.071 нитрат серебраsilver nitrate 0.0730.073 0.0790.079 0.080.08 0.0730.073 0.0730.073 водаwater 99.81399.813 99.80499.804 99.80399.803 99.81499.814 99.81099.810

Продолжение таблицы 1Continuation of table 1 Название компонентовComponent Name Составы исходного продукта для получения препарата, мас.%The composition of the starting product to obtain the drug, wt.% 66 77 88 99 1010 11eleven лизоцимlysozyme 0.0430.043 0.0430.043 0.0430.043 -- -- 0.20.2 желатинgelatin 0.0710.071 0.0710.071 0.0250.025 0.0260.026 -- -- нитрат серебраsilver nitrate 0.0720.072 0.0860.086 0.0730.073 0.0730.073 0.850.85 -- водаwater 99.81499.814 99.80399.803 99.81699.816 99.90499.904 99.1599.15 99.899.8

В таблице 1 составы 1-3 подтверждают качественное и количественное соответствие заявленных компонентов, составы 4-8 количественно выходят за рамки заявленного диапазона, в составах 9-11 приведены примеры с наличием или отсутствием компонентов заявленных составов.In table 1, formulations 1-3 confirm the qualitative and quantitative compliance of the claimed components, formulations 4-8 quantitatively go beyond the stated range, compositions 9-11 provide examples with the presence or absence of components of the claimed formulations.

В сравнительной таблице 2 приведены свойства водорастворимого бактерицидного препарата в соответствии с составами исходного продукта для его получения.Comparative table 2 shows the properties of a water-soluble bactericidal preparation in accordance with the compositions of the starting product for its preparation.

Таблица 2table 2 Замеряемые параметрыMeasured Parameters Примеры составов исходного продукта и их антимикробная активностьExamples of compositions of the starting product and their antimicrobial activity 1one 22 33 4four 55 Стабильность в NaCl (0.15М)Stability in NaCl (0.15M) ++++++ ++++++ ++++++ ++ -- Антимикробная активность (МИК), мкг/мл:Antimicrobial activity (MIC), μg / ml: Ecsherichia coli ML35pEcsherichia coli ML35p 3131 3131 3131 5555 18eighteen Acinetobacter baumannii (клиничекий изолят)Acinetobacter baumannii (clinical isolate) 88 88 88 -- -- Stahylococcus aureus SG511Stahylococcus aureus SG511 MRSA ATCC 33591MRSA ATCC 33591 3131 3131 3131 110110 18eighteen 6262 6262 6262 110110 3636 Токсичность для фибробластов человекаToxicity to human fibroblasts 1one 1one 1one 1one 1one для нейтрофилов человекаfor human neutrophils 1one 1one 1one 22 22

Продолжение таблицы 2Continuation of table 2 Замеряемые параметрыMeasured Parameters Примеры составов исходного продукта и их антимикробная активностьExamples of compositions of the starting product and their antimicrobial activity 66 77 88 99 1010 11eleven Стабильность в NaCl (0.15М)Stability in NaCl (0.15M) ++ -- -- ++ -- ++++++ Антимикробная активность (МИК), мкг/мл:Antimicrobial activity (MIC), μg / ml: Ecsherichia coli ML35pEcsherichia coli ML35p 6565 2424 3232 3131 66 21002100 Acinetobacter baumannii (клиничекий изолят)Acinetobacter baumannii (clinical isolate) -- -- -- 66 -- Stahylococcus aureus SG511Stahylococcus aureus SG511 6565 4848 3232 8080 66 6060 MRSA ATCC 33591MRSA ATCC 33591 не акт.not an act. 9696 6464 8080 66 21002100 Токсичность для фибробластов человекаToxicity to human fibroblasts 1one 22 22 1one 4four 00 для нейтрофилов человекаfor human neutrophils 22 22 22 22 4four 00

Результаты исследований составов исходного продукта для получения водорастворимого бактерицидного препарата, описанных выше, представлены следующими характеристиками: антимикробная активность, токсичность, стабильность в 150 мм растворе хлорида натрия NaCl.The results of studies of the compositions of the initial product to obtain a water-soluble bactericidal preparation described above are represented by the following characteristics: antimicrobial activity, toxicity, stability in a 150 mm sodium chloride NaCl solution.

Антимикробная активность представлена как минимальная ингибирующая рост микробов концентрация (МИК) препаратов, в мкг/мл. Антимикробную активность образцов, полученных по заявляемому способу, изучали методом серийных разведений в питательной среде. Антимикробную активность исследовали в отношении грамотрицательных бактерий - Escherichia coli ML35p, Acinetobacter baumannii, грамположительных бактерий Staphylococcus aureus SG511 и MRSA АТСС 33591.Antimicrobial activity is presented as the minimum microbial growth inhibiting concentration (MIC) of the preparations, in μg / ml. The antimicrobial activity of the samples obtained by the present method was studied by the method of serial dilutions in a nutrient medium. Antimicrobial activity was studied against gram-negative bacteria - Escherichia coli ML35p, Acinetobacter baumannii, gram-positive bacteria Staphylococcus aureus SG511 and MRSA ATCC 33591.

Также была исследована токсичность полученных образцов для фибробластов и нейтрофилов человека. Для оценки цитотоксичности препаратов для культивируемых клеток использовали следующую шкалу: 0 баллов - отсутствие цитотоксического действия; 1 балл - слабое токсическое действие (20-25% гибель клеток); 2 балла - мягкое токсическое действие (50% гибель клеток); 3 балла - умеренное токсическое действие (70-75% гибель клеток); 4 балла - тяжелое токсическое действие (100% гибель клеток) - при использовании препаратов в концентрациях, в 5 раз превышающих МИК.The toxicity of the obtained samples for human fibroblasts and neutrophils was also investigated. To assess the cytotoxicity of preparations for cultured cells, the following scale was used: 0 points — no cytotoxic effect; 1 point - weak toxic effect (20-25% cell death); 2 points - mild toxic effect (50% cell death); 3 points - moderate toxic effect (70-75% cell death); 4 points - severe toxic effect (100% cell death) - when using drugs in concentrations 5 times higher than MIC.

При проведении исследований были использованы следующие нормативные документы:During the research, the following regulatory documents were used:

“Оценка токсичности и опасности дезинфицирующих средств” Методические указания МУ 1.2.1105-02 (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 10 февраля 2002 г.).“Assessment of the toxicity and danger of disinfectants” Guidelines MU 1.2.1105-02 (approved by the Chief State Sanitary Doctor of the Russian Federation on February 10, 2002).

Методические указания по использованию культуры диплоидных клеток человека, рекомендуемых для токсиколого-гигиенических исследований. Утверждены МЗ СССР 18.09.91 №15-6/21. М., 1991. 20 с.Guidelines for the use of human diploid cell culture recommended for toxicological and hygienic studies. Approved by the Ministry of Health of the USSR 18.09.91 No. 15-6 / 21. M., 1991.20 s.

Образец удовлетворяет требованиям безопасности, если ни одна из опытных клеточных культур не имеет степень более 1.The sample meets the safety requirements if none of the experimental cell cultures has a degree of more than 1.

Стабильность известных ранее серебросодержащих препаратов при контакте с биологическими жидкостями также невысока. При их практическом применении в присутствии хлорида натрия NaCl происходит образование осадка, что не позволяет этим препаратам равномерно распределяться в жидкостях и тканях организма, что снижает их эффективность.The stability of previously known silver-containing preparations in contact with biological fluids is also low. With their practical application in the presence of sodium chloride NaCl, a precipitate forms, which does not allow these drugs to be evenly distributed in body fluids and tissues, which reduces their effectiveness.

Результаты проведенных исследований свидетельствуют, что составы №1-3, представляющие собой сочетание лизоцима, желатина и нитрата серебра в заявленных соотношениях, подтверждают возможность решения поставленных нами задач и достижения указанного технического результата, а именно получены образцы, стабильные в растворе хлорида натрия, они обладают антимикробной активностью широкого спектра действия и не являются токсичными. Заявленные составы исходного продукта для получения водорастворимого бактерицидного являются оптимальными и в сравнении с чистым лизоцимом (состав №11), раствором нитрата серебра (состав №10), а также с наночастицами серебра (состав №9), стабилизированными желатином.The results of the studies indicate that compositions No. 1-3, which are a combination of lysozyme, gelatin and silver nitrate in the stated ratios, confirm the possibility of solving our tasks and achieving the indicated technical result, namely, samples that are stable in sodium chloride solution were obtained, they have antimicrobial activity of a wide spectrum of action and are not toxic. The claimed compositions of the initial product to obtain a water-soluble bactericidal are optimal in comparison with pure lysozyme (composition No. 11), a solution of silver nitrate (composition No. 10), as well as silver nanoparticles (composition No. 9), stabilized with gelatin.

Состав №4, содержащий меньше лизоцима, чем составы №1-2-3, обладает меньшей антимикробной активностью. Увеличение содержания лизоцима (состав №5) приводит к нестабильности получаемого препарата в растворе NaCl. Снижение количества нитрата серебра (состав №6) приводит к снижению антимикробной активности препарата, увеличение же его содержания (состав №7) ведет к возникновению нестабильности в растворе NaCl. Уменьшение количества желатина ниже 0.071 мас.% (состав №8) приводит к снижению стабильности препарата в среде NaCl.Composition No. 4, containing less lysozyme than compounds No. 1-2-3, has less antimicrobial activity. The increase in lysozyme content (composition No. 5) leads to instability of the resulting drug in a solution of NaCl. A decrease in the amount of silver nitrate (composition No. 6) leads to a decrease in the antimicrobial activity of the drug, while an increase in its content (composition No. 7) leads to instability in the NaCl solution. A decrease in the amount of gelatin below 0.071 wt.% (Composition No. 8) leads to a decrease in the stability of the drug in NaCl.

Кроме того, были проведены дополнительные испытания (пример не включен в таблицу №1) с увеличением содержания желатина до величин, превышающих 0.8 мас.%, что приводит к нежелательному гелированию получаемой композиции, и как следствие, к снижению технологичности процесса.In addition, additional tests were carried out (the example is not included in table No. 1) with an increase in the gelatin content to values exceeding 0.8 wt.%, Which leads to undesirable gelation of the resulting composition, and as a result, to a decrease in the processability.

Таким образом, именно сочетание нитрата серебра, лизоцима и желатина в заявленных соотношениях, а именно, мас.%: лизоцим 0.043-0.045, нитрат серебра (AgNO3) 0.073-0.085, желатин 0.071-0.080, вода H2O - остальное - позволяет достигнуть требуемого технического результата - получение нетоксичного, стабильного в растворе хлорида натрия NaCl препарата, расширение спектра действия препарата за счет активности по отношению к грамотрицательным бактериям и повышение эффективности лечения гнойно-септических осложнений ран, язв, пролежней, ожогов, бактериальных поражений слизистой глаз и полости рта.Thus, it is the combination of silver nitrate, lysozyme and gelatin in the stated proportions, namely, wt.%: Lysozyme 0.043-0.045, silver nitrate (AgNO 3 ) 0.073-0.085, gelatin 0.071-0.080, water H 2 O - the rest - allows to achieve the desired technical result - obtaining a non-toxic drug stable in sodium chloride NaCl solution, expanding the spectrum of the drug due to activity against gram-negative bacteria and increasing the effectiveness of treatment of purulent-septic complications of wounds, ulcers, pressure sores, burns, bacterial lesions minutes to eyes and mouth.

Техническая сущность способа поясняется приведенными ниже примерами №1-3.The technical essence of the method is illustrated by the following examples No. 1-3.

Пример 1. Восстановление ионного серебра ведут при смешении 3 мл 0.073 мас.% водного раствора нитрата серебра и 3 мл 0.043 мас.% водного раствора лизоцима. Восстановленное металлическое серебро стабилизируют добавлением 1 мл 0.071 мас.% водного раствора желатина.Example 1. Reduction of ionic silver is carried out by mixing 3 ml of a 0.073 wt.% Aqueous solution of silver nitrate and 3 ml of a 0.043 wt.% Aqueous solution of lysozyme. The reduced metallic silver is stabilized by adding 1 ml of a 0.071 wt.% Aqueous solution of gelatin.

Полученную смесь подвергают УФ-облучению при непрерывном перемешивании в течение 25 минут, в диапазоне коротковолнового излучения 254 нм, затем 25 минут в диапазоне длинноволнового излучения 365 нм и 55 минут в диапазоне коротковолнового излучения 254 нм.The resulting mixture was subjected to UV irradiation with continuous stirring for 25 minutes, in the short-wavelength range of 254 nm, then 25 minutes in the long-wavelength range of 365 nm and 55 minutes in the short-wavelength range of 254 nm.

Затем проводят диализ полученного образца, для чего помещают в диализный мешок с микропорами 14000 Да в течение 24 часов при непрерывном перемешивании, с использованием бидистиллированной воды 1000 мл. Сушку проводят под вакуумом.Then, the obtained sample is dialyzed, for which it is placed in a dialysis bag with micropores of 14,000 Da for 24 hours with continuous stirring using 1000 ml bidistilled water. Drying is carried out under vacuum.

Пример 2. Восстановление ионного серебра ведут при смешении 3 мл 0.079 мас.% водного раствора нитрата серебра и 3 мл 0.044 мас.% водного раствора лизоцима. Восстановленное металлическое серебро стабилизируют добавлением 1 мл 0.073 мас.% водного раствора желатина.Example 2. Reduction of ionic silver is carried out by mixing 3 ml of a 0.079 wt.% Aqueous solution of silver nitrate and 3 ml of a 0.044 wt.% Aqueous solution of lysozyme. The reduced metallic silver is stabilized by adding 1 ml of a 0.073 wt.% Aqueous gelatin solution.

Полученную смесь подвергают УФ-облучению при непрерывном перемешивании: в течение 25 минут в диапазоне коротковолнового излучения 254 нм, затем 25 минут в диапазоне длинноволнового излучения 365 нм и 55 минут в диапазоне коротковолнового излучения 254 нм.The resulting mixture was subjected to UV irradiation with continuous stirring: for 25 minutes in the short-wavelength range of 254 nm, then 25 minutes in the long-wavelength range of 365 nm and 55 minutes in the short-wavelength range of 254 nm.

Затем проводят диализ полученного образца, для чего помещают в диализный мешок с микропорами 14000 Да в течение 28 часов при непрерывном перемешивании, с использованием бидистиллированной воды 1000 мл. Сушку проводят под вакуумом.Then, the obtained sample is dialyzed, for which it is placed in a dialysis bag with micropores of 14,000 Da for 28 hours with continuous stirring using 1000 ml bidistilled water. Drying is carried out under vacuum.

Пример 3. Восстановление ионного серебра ведут при смешении 3 мл 0.08 мас.% водного раствора нитрата серебра и 3 мл 0.043 мас.% водного раствора лизоцима. Восстановленное металлическое серебро стабилизируют добавлением 1 мл 0.074 мас.% водного раствора желатина.Example 3. Reduction of ionic silver is carried out by mixing 3 ml of a 0.08 wt.% Aqueous solution of silver nitrate and 3 ml of a 0.043 wt.% Aqueous solution of lysozyme. The reduced metallic silver is stabilized by adding 1 ml of a 0.074 wt.% Aqueous solution of gelatin.

Полученную смесь подвергают УФ-облучению при непрерывном перемешивании в течение 25 минут, в диапазоне коротковолнового излучения 254 нм, затем 25 минут в диапазоне длинноволнового излучения 365 нм и 55 минут в диапазоне коротковолнового излучения 254 нм.The resulting mixture was subjected to UV irradiation with continuous stirring for 25 minutes, in the short-wavelength range of 254 nm, then 25 minutes in the long-wavelength range of 365 nm and 55 minutes in the short-wavelength range of 254 nm.

Затем проводят диализ полученного образца, для чего помещают в диализный мешок с микропорами 14000 Да в течение 30 мин при непрерывном перемешивании, с использованием бидистиллированной воды 1000 мл, далее сушку вакуумом. Then, the obtained sample is dialyzed, for which it is placed in a dialysis bag with micropores of 14,000 Da for 30 minutes with continuous stirring using 1000 ml bidistilled water, then vacuum drying.

Результаты исследований полученных образцов в различных условиях показали, что с увеличением времени УФ-обработки выпадает осадок и наблюдается нестабильность полученных композиций в растворе хлорида натрия NaCl. Условия получения, описанные в примерах реализации способа 1-3, наиболее оптимальны для решения поставленной задачи и позволяют получить технический результат.The results of studies of the obtained samples under various conditions showed that with an increase in the UV treatment time, a precipitate precipitates and instability of the obtained compositions in a solution of sodium chloride NaCl is observed. The conditions for obtaining described in the examples of the implementation of method 1-3 are most optimal for solving the problem and allow to obtain a technical result.

Возможность промышленного применения заявленного технического решения подтверждается известными и описанными в заявке средствами и методами, с помощью которых возможно осуществление изобретения в том виде, как оно охарактеризовано в формуле изобретения.The possibility of industrial application of the claimed technical solution is confirmed by the known and described in the application means and methods by which it is possible to carry out the invention in the form described in the claims.

Claims (1)

Способ получения водорастворимого бактерицидного препарата, включающий смешивание исходных компонентов, с последующей стабилизацией металлического серебра полимером путем восстановления ионного серебра в водных растворах с последующей сушкой, отличающийся тем, что восстановление ионного серебра в водном растворе ведут при взаимодействии нитрата серебра, лизоцима и желатина при следующем соотношении компонентов, мас.%: лизоцим 0,043-0,045, нитрат серебра (AgNO3) 0,073-0,085, желатин 0,071-0,080, вода - остальное, полученную смесь исходных компонентов подвергают УФ-облучению при непрерывном перемешивании в течение 25-30 минут в диапазоне коротковолнового излучения 254 нм, затем в течение 25-30 минут в диапазоне длинноволнового излучения 365 нм и 55-60 минут в диапазоне коротковолнового излучения 254 нм, а диализ обработанной смеси проводят в течение 24-30 часов при непрерывном перемешивании. A method of obtaining a water-soluble bactericidal preparation, comprising mixing the starting components, followed by stabilization of metallic silver by polymer by reducing ionic silver in aqueous solutions, followed by drying, characterized in that the reduction of ionic silver in aqueous solution is carried out by the interaction of silver nitrate, lysozyme and gelatin in the following ratio components, wt.%: lysozyme 0,043-0,045, silver nitrate (AgNO 3 ) 0,073-0,085, gelatin 0,071-0,080, water - the rest, the resulting mixture of the starting components p subjected to UV irradiation with continuous stirring for 25-30 minutes in the range of short-wave radiation of 254 nm, then for 25-30 minutes in the range of long-wave radiation of 365 nm and 55-60 minutes in the range of short-wave radiation of 254 nm, and the dialysis of the treated mixture is carried out for 24-30 hours with continuous stirring.
RU2012123787/10A 2012-06-07 2012-06-07 Method of obtaining water-soluble bactericidal preparation RU2502259C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2012123787/10A RU2502259C1 (en) 2012-06-07 2012-06-07 Method of obtaining water-soluble bactericidal preparation

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2012123787/10A RU2502259C1 (en) 2012-06-07 2012-06-07 Method of obtaining water-soluble bactericidal preparation

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2012123787A RU2012123787A (en) 2013-12-20
RU2502259C1 true RU2502259C1 (en) 2013-12-27

Family

ID=49784437

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2012123787/10A RU2502259C1 (en) 2012-06-07 2012-06-07 Method of obtaining water-soluble bactericidal preparation

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2502259C1 (en)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111937903B (en) * 2020-08-25 2021-05-28 清华大学 Zymoprotein-nano silver antibacterial compound and preparation method and application thereof

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2088234C1 (en) * 1994-11-25 1997-08-27 Институт высокомолекулярных соединений РАН Water-soluble bactericidal composition and a method of its preparing
RU2140293C1 (en) * 1999-04-06 1999-10-27 Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная фирма "ФАИНА" Bactericide agent
RU2306774C2 (en) * 2001-07-13 2007-09-27 Даниско А/С Composition having bacteriostatic and antimicrobial activity against bacteria spores and vegetative cells, and method for treatment of food products using the same
RU2333773C1 (en) * 2007-06-29 2008-09-20 Автономная некоммерческая организация "Институт нанотехнологий Международного фонда конверсии" Biocide solution and method for obtaining same
RU2407289C1 (en) * 2009-05-13 2010-12-27 Закрытое акционерное общество "Институт прикладной нанотехнологии" Nanostructured biocide composition

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2088234C1 (en) * 1994-11-25 1997-08-27 Институт высокомолекулярных соединений РАН Water-soluble bactericidal composition and a method of its preparing
RU2140293C1 (en) * 1999-04-06 1999-10-27 Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная фирма "ФАИНА" Bactericide agent
RU2306774C2 (en) * 2001-07-13 2007-09-27 Даниско А/С Composition having bacteriostatic and antimicrobial activity against bacteria spores and vegetative cells, and method for treatment of food products using the same
RU2333773C1 (en) * 2007-06-29 2008-09-20 Автономная некоммерческая организация "Институт нанотехнологий Международного фонда конверсии" Biocide solution and method for obtaining same
RU2407289C1 (en) * 2009-05-13 2010-12-27 Закрытое акционерное общество "Институт прикладной нанотехнологии" Nanostructured biocide composition

Also Published As

Publication number Publication date
RU2012123787A (en) 2013-12-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP3098253B1 (en) Broad spectrum antimicrobial agent
US3930000A (en) Silver-zinc allantoinate compositions and method of killing bacteria and fungi therewith
CN105148253B (en) Skin and mucosa bactericidal composition
JP2006507378A (en) Composition having stabilized redox properties and method for stabilizing redox properties
KR20180054177A (en) Eco-friendly hand-disinfectant composition containing extracts of natural material
EP3740553A1 (en) Antimicrobial preservative compositions
TW201216859A (en) Disinfectant and antiseptic formulation having reduced iodine content
CN101543658B (en) Cervical cap for preventing and treating cervical erosion and preparation method thereof
US20100203088A1 (en) Silver Nanoparticle Dispersion Formulation
CN113440645A (en) Composite lysozyme liquid dressing for wound surface and preparation method thereof
RU2502259C1 (en) Method of obtaining water-soluble bactericidal preparation
RU2499600C1 (en) Formulation with stabilised oxidation-reduction potential
EP2170081B1 (en) Antimicrobial compositions
CN110227071A (en) Compound borneol antibacterial agent
Sudhakar et al. Gelatin stabilized silver nanoparticles for wound healing applications
CN111109272B (en) Bio-based antibacterial agent and application thereof
CN111328811B (en) Low-concentration alcohol sterilization disinfectant and application thereof
Anchana et al. Green synthesis of garlic oil-mediated selenium nanoparticles and its antimicrobial and cytotoxic activity.
US8673366B2 (en) Chemotherapeutic and prophylactic pharmaceutical compositions
RU2712056C1 (en) Antiseptic agent based on silver nanoparticles
CN117442778B (en) Gel composition for medical cosmetology
JP2018052891A (en) Liniment for controlling resident skin bacteria
KR100487103B1 (en) Pharmaceutical Preparation for Treatment of Dermatoses Containing Silver Compound as Effective Ingredient
JP4022432B2 (en) disinfectant
RU2623874C1 (en) Hydrophilic ointment for infected wounds treatment