RU2425044C2

RU2425044C2 - Производные нитрофурана, обладающие антибактериальным действием

Info

Publication number: RU2425044C2
Application number: RU2009134915/04A
Authority: RU
Inventors: Татьяна Андреевна Кузьменко (RU); Татьяна Андреевна Кузьменко; Анатолий Савельевич Морковник (RU); Анатолий Савельевич Морковник; Александр Александрович Зубенко (RU); Александр Александрович Зубенко; Леонид Николаевич Фетисов (RU); Леонид Николаевич Фетисов
Priority date: 2009-09-17
Filing date: 2009-09-17
Publication date: 2011-07-27
Also published as: RU2009134915A

Abstract

Изобретение относится к производным 5-нитрофурана формулы I:

где R = пиперидино, пирролидино, диэтиламино, морфолино. Технический результат - получение новых биологически активных соединений, обладающих антимикробной активностью. 2 табл.

Description

Изобретение относится к медицинской химии и сельскому хозяйству, а именно к препаратам для борьбы с инфекционными заболеваниями людей, животных и растений.

Известны производные 4-хинолонов, обладающие антибактериальным действием и широко применяющиеся в медицинской и ветеринарной практике (Машковский М.Д. Лекарственные средства. Издание 14, М., 2002 г. - с.292).

Известны производные 5-нитрофурана, выбранные нами в качестве прототипа, обладающие широким спектром антибактериального действия, как, например, фурациллин, фурадонин, фуразолидон и другие (Мелентьева Г.А. Фармацевтическая химия, т.1, с.380, М., Медицина, 1976 год).

Многолетнее использование нитрофурановых препаратов приводит к появлению резистентных штаммов, что заставляет обновлять ассортимент применяемых лекарственных средств.

Цель данного изобретения - синтез новых соединений 5-нитрофуранового ряда с высокой антибактериальной активностью, в том числе и против резистентных штаммов микроорганизмов, а также расширение арсенала веществ, воздействующих на живой организм.

Поставленная цель достигается синтезом новых 5-нитрофуранов формулы I, обладающих противомикробным действием.

где R = пиперидино, пирролидино, диэтиламино, морфолино.

Соединения формулы I синтезируют в две стадии по следующей схеме:

R=a - пиперидино, б - пирролидино, в - диэтиламино, г - морфолино

На первой стадии 1-аминобензимидазолин-2-тион (Кузьменко В.В., Пожарский А.Ф., Кузьменко Т.А., Крышталюк О.В., ЖОрХ, 1993, т.29, вып.9, с.1896-1901) алкилируют диалкиламиноалкилхлоридами в щелочной среде и далее образующиеся амины II конденсируют с 5-нитрофурфуролом в ледяной уксусной кислоте.

Примеры синтезов

1-(5-Нитрофурфурилиденамино)-2-(2-пиперидиноэтил-меркапто)бензимидазола гидрохлорид (Ia).

Стадия 1. 1-Амино-2-(2-пиперидиноэтилмеркапто)бензимидазола гидрохлорид (IIa). К раствору 0.83 г (5 ммоль) 1-аминобензимидазолин-2-тиона и 0.60 г (10 ммоль) едкого кали в 20 мл спирта добавляют 0.92 г (5 ммоль) гидрохлорида β-пиперидиноэтилхлорида и кипятят 3 часа. Упаривают, остаток растворяют в 5 мл хлороформа и пропускают через колонку с Al₂O₃ (2×6) см, элюент хлороформ, отделяя фракцию с R_f 0.3. Полученную после испарения растворителя карамелеподобную массу растворяют в 15 мл ацетона, обрабатывают насыщенным раствором хлористого водорода в изопропаноле до pH 1 и выделяющийся осадок отфильтровывают. Выход 1.15 г (73%). Бесцветные кристаллы с т.пл. 183-184°C (разл., из спирта).

Найдено, %: C 53.85; H 6.68; Cl 11.12; N 17.62. C₁₄H₂₀N₄S·HCl.

Вычислено, %: C 53.76; H 6.72; Cl 11.36; N 17.92.

Стадия 2. Раствор гидрохлорида IIa 0.32 г (1 ммоль) и 0.14 г (1 ммоль) 5-нитрофурфурола в 3 мл ледяной уксусной кислоты кипятят 0.5 часа. Охлаждают, добавляют 5 мл эфира и выделяющийся при этом осадок отфильтровывают. Выход 0,37 г (85%). Желтые кристаллы с т.пл. 250-251°C (разл., из спирта), хорошо растворимые в воде.

Спектр ЯМР ¹H (300 МГц), δ, м.д., DMSO-d₆: 1.39-1.46 м (1H, γ-H пиперидина); 1.69-1.81 м (5H, γ- и β-H пиперидина); 2.96-3.00 м (2H, CH₂N); 3.48-3.57 м (4H, α-H пиперидина); 3.70 т (2H, SCH₂, J=6.5 Гц); 7.33-7.36 м (2H, H^5,6 бензимидазольной системы); 7.46 д (1H, H³ фурила, J=3.9 Гц); 7.63-7.66 м (1H, H⁴ бензимидазольной системы); 7.84 д (1H, H⁴ фурила, J=3.8 Гц); 8.13-8.16 м (1H, H⁷ бензимидазольной системы); 9.19 с (1H, N=CH); 10.25 с (1H, N⁺H).

Найдено, %: C 52.50; H 5.30; Cl 8.12; N 16.25. C₁₉H₂₁N₅O₃S·HCl.

Вычислено, %: C 52.35; H 5.05; Cl 8.15; N 16.07.

1-(5-Нитрофурилиденамино)-2-(2-пирролидиноэтилмеркапто)-бензимидазола гидрохлорид (Iб).

Стадия 1. 1-Амино-2-(2-пирролидиноэтилмеркапто)бензимидазола гидрохлорид (IIb). Синтезируют аналогично амину IIa из 0.5 г (3 ммоль) 1-аминобензимидазолин-2-тиона и 0.51 г (3 ммоль) гидрохлорида 2-пирролидиноэтилхлорида в 10 мл спирта в присутствии 0.35 г (6 ммоль) едкого кали. Выход 0.63 г (70%). Бесцветные кристаллы с т.пл. 169-170°C с разл. (из спирта).

Найдено, %: C 52.41; H 6.25; Cl 11.76; N 18.92. C₁₃H₁₈N₄S·HCl.

Вычислено, %: C 52.26; H 6.37; Cl 11.89; N 18.76.

Стадия 2. Соединение Iб получено из 0.6 г (2 ммоль) амина IIб и 0.28 г (2 ммоль) 5-нитрофурфурола (2 ммоль) в 6 мл ледяной уксусной кислоты аналогично азометину Iа с выходом 0.68 г (81%). Желтые кристаллы с т.пл. 234-235°C (из спирта), растворимые в воде. Спектр ЯМР ¹H (δ, м.д., DMSO-d₆): 1.90-1.96 м (4H,

пирролидинового цикла), 3.30-3.35 м (2H, CH₂N⁺), 3.52-3.76 м (6H,

пирролидинового цикла + SCH₂), 7.30-7.34 (2H, H^5,6), 7.43 д (1H, H³ фурила, J=3.9 Гц), 7.60-7.63 м (1H, H⁴), 7.82 (1H, H⁴ фурила, J=3.9 Гц), 8.15-8.18 м (1H, H⁷), 9.20 с (1H, CH=N), 10.63 уш. с. (1H, N⁺H).

Найдено, %: C 51.40; H 4.57; Cl 8.60; N 16.61. C₁₈H₁₉N₅O₃S·HCl.

Вычислено, %: C 51.25; H 4.74; Cl 8.42; N 16.61.

1-Амино-2-(2-диэтиламиноэтилмеркапто)-1-(5-нитрофурфурилиден-амино)бензимидазола гидрохлорид (Iв).

Стадия 1. 1-Амино-2-(2-диэтиламиноэтилмеркапто)бензимидазола гидрохлорид (IIв). Синтезируют аналогично соединению IIа из 0.83 г (5 ммоль) 1-амино-бензимидазолин-2-тиона и 0.86 г (5 ммоль) гидрохлорида β-диэтиламиноэтилхлорида в 20 мл спирта с выходом 1.1 г (72%). Бесцветные кристаллы с т.пл. 153-154°C (из изопропанола).

Найдено, %: C 51.60; H 6.82; Cl 11.57; N 18.41. C₁₃H₂₀N₄S·HCl.

Вычислено, %: C 51.91; H 6.99; Cl 11.81; N 18.64.

Стадия 2. Соединение Iв получают аналогично Iа из 0.45 г (1,5 ммоль) соли IIв и 0,21 г (1,5 моль) 5-нитрофурфурола в 4 мл ледяной уксусной кислоты с выходом 0,5 г (79%). Желтые кристаллы с т.пл. 214-215°C (из спирта), растворимые в воде. Спектр ЯМР ¹H, δ, м.д., DMSO-d₆: 1.43 т [6H, (CH₂ CH ₃)₂]; 3.25-3.27 м (2H, CH ₂N): 3.47 к [4H, (CH ₂CH₃)₂]; 3.67 т (2H, SCH ₂; 7.25-7.28 м (2H, H^5,6); 7.42 д (1H, H³ фурила, J=3.9 Гц); 7.53-7.56 м (1H, H⁴); 7.67 д (1H, H⁴ фурила, J=3.8 Гц); 8.07-8.10 м (1H, H⁷); 9.17 с (1H, N=CH); 11.66 с (1H, N⁺H).

Найдено, %: C 50.87; H 4.95; Cl 8.18; N 16.70. C₁₈H₂₁N₅O₃S·HCl.

Вычислено, %: C 51.00; H 5.20; Cl 8.38; N 16.53.

2-(2-Морфолиноэтилмеркапто)-1-(5-нитрофурфурилиден-амино)бензимидазола гидрохлорид (Iг).

Стадия 1. 1-Амино-2-(2-морфолиноэтилмеркапто)бензимидазола гидрохлорид (IIг). Синтезируют аналогично соединению IIа из 0.83 г (5 ммоль) 1-аминобензимидазолин-2-тиона и 0.93 г (5 ммоль) гидрохлорида β-морфолиноэтилхлорида в 20 мл спирта с выходом 1.2 г (76%). Бесцветные кристаллы с т.пл. 194-195°C (из спирта).

Найдено, %: C 49.82; H 5.87; Cl 11.49; N 17.52. C₁₃H₁₈N₄OS·HCl.

Вычислено, %: C 49.60; H 6.04; Cl 11.29; N 17.81.

Стадия 2. Соединение Iг получено аналогично азометину Iа из 0.63 г (2 ммоль) гидрохлорида IIг и 0.28 г (2 ммоль) 5-нитрофурфурола в 5 мл ледяной уксусной кислоты с выходом 0.71 г (81%). Желтые кристаллы с т.пл. 264-265°C (из спирта), растворимые в воде.

Спектр ЯМР ¹H, δ м.д., DMSO-d₆: 3.10-3.20 м (2H, H-морфолина); 3.50-3.84 группа мультиплетных сигналов (8H, 6H морфолина и CH₂N); 3.96 т (2H, SCH₂); 7.32-7.35 м (2H, Н^5,6); 7.46 д (1H, H³ фурила, J=3.9 Гц); 7.63-7.66 м (1H, Н⁴); 7.84 д (1H, Н4 фурила, J=3.8 Гц); 8.13-8.16 м (1H, Н⁷); 9.19 с (1H, N=CH); 10.95 с (1H, N⁺H).

Найдено, %: C 49.52; H 4.32; Cl 8.37; N 16.34. C₁₈H₁₉N₅O₄S·HCl.

Вычислено, %: C 49.37; H 4.57; Cl 8.11; N 16.00.

Примеры испытания антибактериальной активности предлагаемых соединений

Антимикробная активность предлагаемых соединений изучена в секторе синтеза ГНУ СКЗНИВИ. Ранее соединения нигде не применялись.

Изучение антимикробных свойств проводилось по методике С.Н.Миловановой (Методы экспериментальной химиотерапии. - М. - Медицина, 1971. - с.100-106) способом двукратных серийных разведений в жидкой питательной среде. Бактериальная нагрузка составляла 500 тысяч микробных клеток в 1 мл. Приготовленную взвесь бактерий объемом 2 мл добавляли в пробирки с различными концентрациями исследуемого вещества объемом 2 мл. Таким образом, учитываемая микробная нагрузка составляла 250 тысяч микробных тел в 1 мл. Пробирки инкубировали в термостате в течение 18 часов при 37°C. Контролем служили пробирки, содержащие 2 мл питательной среды, используемой для приготовления растворов веществ и 2 мл взвеси бактерий с концентрацией 500 тысяч микробных тел в 1 мл. В качестве тест-организмов использовали штаммы бактерий E.coli O78 (полевой штамм), St.aureus Р-209, Ps.aeruginosa (полевой штамм). В качестве препарата сравнения брали фуразолидон. Результаты испытаний представлены в таблице 1 и таблице 2.

Таблица 1
Бактериостатическая активность предлагаемых соединений
п/п	Номер соединения	Минимальная бактериостатическая концентрация, мкг/мл
п/п	Номер соединения	E.coli	St.aureus	Ps.aeruginosa
1	Iа	12,5	0,78	25,0
2	Iб	6,2	6,2	25,0
3	Iв	3,1	3,1	12,5
4	Iг	>100,0	>100,0	>100,0
5	Фуразолидон	12,5	3,1	>100,0

Из данных таблицы 1 видно, что предлагаемые соединения обладают высокой антибактериальной активностью, причем в отношении кишечной палочки активность соединения Iв выше в 4 раза, чем у фуразолидона, и, по крайней мере, в 8 раз выше в отношении Ps.aeruginosa.

Таблица 2
Сравнительная антибактериальная активность предлагаемых соединений, известных препаратов и некоторых антибиотиков
Препарат	Минимальная бактериостатическая концентрация, мкг/мл
Препарат	E.coli	St.aureus	Ps.aeruginosa
Iа	12.50	0.78	25.0
Iб	6.25	6.25	25.0
Iв	3,125	3,125	12,50
Iг	>100.0	>100.0	>100.0
Йодинол*	16,0	16-32	15-25
Раствор йода*	16-64	64,0	16-32
Канамицина сульфат	100,0	3-6	25,50
Полимиксин	0,19	100,0**	0,1-1,0**
Окситетрациклина гидрохлорид	100,0	1,6-100,0**	100,0**
Левомицетин	100,0	1,5-50,0**	100,0**
Фуразолидон	12,5	3,1	>100,0
* по данным Мохнача В.О. в кн.: «Йод и проблемы жизни». - Л., Наука. - 1974. - с.89-90 ** по данным справочника «Рациональная антибиотикотерапия». Навашин С.М., Фомина И.П., М., Медицина. - 1982. - 496 С.

Из данных таблицы 2 следует, что соединения Iа, Iб и Iв превосходят по активности в отношении E.coli йодинол, раствор йода в йодиде калия, канамицин, окситетрациклин и левомицетин; против стафилококка их активность выше, чем у йодинола, раствора йода, полимиксина; против синегнойной палочки их активность выше, чем у окситетрациклина, фуразолидона, левомицетина, и сравнима с активностью йодинола, раствора йода и канамицина.

«Острую» токсичность соединений изучали на белых крысах массой 180-200 г при внутрижелудочном введении суспензии препарата с помощью зонда. Испытан препарат Iв, как наиболее активный. Установлено, что ЛД₅₀ составляет 360 мг/кг массы тела, что позволяет отнести предлагаемые соединения к среднетоксичным.

Источники информации

1. Егоров Н.С. Основы учения об антибиотиках. - М. - Высшая школа. - 1979. - С.325-328.

2. Навашин С.М., Фомина И.П. Рациональная антибиотикотерапия. Справочник. - М. - Медицина. - 1982. - С.93-112.

3. Мохнач В.О. Йод и проблемы жизни. - Л. - Наука. - 1974. - С.89-90.

4. Машковский М.Д. Лекарственные средства. Издание 15, М., 2006, с.842.

5. Мелентьева Т.А. Фармацевтическая химия, т.1. - С.380. - М. - Медицина. - 1976.

6. Методы экспериментальной химиотерапии. Справочник под ред. Г.Н.Першина, М., «Медицина». 1971, с.100-106.

7. Кузьменко В.В., Пожарский А.Ф., Кузьменко Т.А., Крышталюк О.В. Прямое тиолирование N-бензилиденаминоазолов. Новый метод синтеза N-амино-1,2,4-триазолинтиолов и N-аминобензимидозолин-2-тионов. ЖОрХ, 1993, т.29, вып.9, с.1896-1901.

Claims

Производные 5-нитрофурана формулы I

где R - пиперидино, пирролидино, диэтиламино, морфолино, обладающие антимикробной активностью.